Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Этиология и профилактика полисерозита свиней

АВТОРЕФЕРАТ
Этиология и профилактика полисерозита свиней - тема автореферата по ветеринарии
Толяронок, Геннадий Ефимович Минск 1998 г.
Ученая степень
кандидата ветеринарных наук
ВАК РФ
16.00.03
 
 

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Этиология и профилактика полисерозита свиней

АКАДЕМИЯ АГРАРНЫХ НАУК РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

БЕЛОРУССКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ им. С. Н. ВЫШЕЛЕСКОГО

/Г и ОД. - О СЕН

УДК 619:616.98.579.843.94:636-084

Толяропок Геннадий Ефимович

ЭТИОЛОГИЯ И ПРОФИЛАКТИКА ПОЛИСЕРОЗИТА СВИНЕЙ

16.00.03 - Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология.

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

МИНСК - 1998

Работа выполнена в Белорусском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Выщелеескога

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук, профессор, академик ААН Республики Беларусь Н.Н.АндросИк

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Максимович В.Й.

доктор биологических наук, профессор Ерощов А.И.

Оппонирующая организация-

Белорусская сельскохозяйственная академия

Защита состоится » -¿/1998 года в ¿¿часов на заседании

Совета по защите диссертаций Д 05.16.01 в Белорусском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Вышелесского по адресу: 223020, г. Минск, Кунцевщина, БелНИИЭВ им. С.Н.Вышелесского

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белорусского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Вышелесского

Автореферат разослан « Р»оЛш-СХр 1998 года

Ученый секретарь Совета но

защите диссертаций, доктор ("О,

ветеринарных наук, Профессор " -Л$.Я.Лшшик

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы диссертации. В настоящее время под влиянием массовой вакцинации животных, Применения химиопрепаратов, антибиотиков и других веществ, приведших к нарушению биоценоза, существенно изменилась не только Этиологическая структура инфекционных заболеваний,' но и роль различных серовариантов и серогрупп в их возникновении и развитии. В результате все более широкое распространение получают условно-патогенные микроорганизмы, болезнетворное .действие которых ранее игнорировалось или рассматривалось как зксвизитное явление. Среди этих болезней определенное место занимает гемофилезный полисерозит (болезнь Глессера), который регистрируется в основном у поросят отъемного возраста.

Полисерозиты имеют широкое распространение во многих странах с развитым свиноводством и наносят отрасли значительный экономический ущерб (M.Berned, J.L.FIatla, 1954; J.F.Dachier et al„ 1974; R.Nielsen, V.Danielsen, 1975; T.Abe et al., 1982; M.Heidt, 1982; J.F.Infante et al„ 1985; P.Kielstein, 1985; N.L. Smart eta!., 1988).

Большинство исследователей их возникновение связывают с Haemophilus parasuis (М.А.Сидоров, Д.И.Скородумов, Ю.К.Гумбатов, 1977, 1978; P.Janetschke et al., 1977; F.Guizzardi et al., 1982; S.Rosendal et al., 1985), другие авторы считают, что они могут быть обусловлены микоплазмами (W.P.Switzer, 1953; A.H.Quin, 1955; E.D.Roberts et а!., 1963; R.S.Ross, W.P.Switzer, J.K.Duncan, 1971; J.K.Duncan, R.S.Ross, 1973; M.Resende et al., 1976; Г.Ф.Коромыслов с соавт., 1987). По мнению некоторых исследователейпричиной полисерозитов быг-агат стрептококки (S.H.King, 1968; А.Н.Панин, Е.В.Малйк, 1991; C.Pijoan, 1989) и кишечная палочка (S.H.King, 1968; R.Nielsen, V.banielsen, 1975). О наличии полисерозитов в свиноводческих хозяйствах Республики Беларусь имеются единичные сообщения (Н.Н.Аидросик., 1982). Однако такие вопросы 'как степень распространения этой болезни, особенности развития, проявления и течения эпизоотического процесса, этиология и серовариантный состав возбудителя полисерозита остаются не выясненными. Требуют неотложного решения вопросы профилактики и мер борьбы с этой болезнью.

Ряд исследователей сообщили о положительных результатах испытания вакцины против гемофилезного полисерозита свиней из местных эпизоотических штаммов (HJ.Riising, 1979, 1981;. R.Nielsen, 1979; H.WoIf et al., 1990; P.Kielstein et al., 1990). Однако эти препараты не всегда позволяли достичь положительного эффекта в связи с Недостаточной иммуногенностыо и не возможностью обоснованного применения в других регионах (J.F.Baehler et al., 1974; P.Kielstein, 1985). Поэтому M.А.Сидоров, Т.А.Лосева (1979), D.Schimmei et al. (1992) предложили конструировать вакцину на основании серовариантов возбудителя этой болезни, преобладающих в большинстве регионов.

Вакцины приготовленные на основе инактивации формалином, грубо действующего на антигенные детерминанты бактерий и вирусов, обладают недостаточным профилактическим эффектом (С.А.Бесова, 1976). Поэтому одним из путей совершенствования средств специфической профилактики является использование щадящих способов инактивации антигена, позволяющих максимально сохранить их протективные свойства (А.С.Расчинкина, 1971; Ю.М.Беньминов, 1972; Н.И.Шапиро, Г.Н.Карпухин, 1976; Г.И.Костина, 1981; N.Nisser, R.Moortmeyer, 1982; С.Г.Соколов, 1987, 1988).

Выращиванию гемофил в жидкой питательной среде с использованием реакторов-ферментеров, отработке оптимальных режимов культивирования бактерий в условиях биофабрики посвящены лишь единичные работы (Л.Г.Жданова с соавт., 1980; C.B. Санеблидзе; М.А.Сидоров, 1984; T.O'Reily, D.F.Niven, 1986; В.В.Субботин, 1987; K.-H.Kludos, B.Stache, 1988; В.М.Поляченко с соавт., 1989; Р.И.Антонова с соавт., 1991; А.В.Букин, 1996). Это не позволяет окончательно подготовить и внедрить технологические схемы производства вакцин.

Исходя из вышеизложенного, изучение этиологической структуры возбудителя полисерозита свиней и разработка эффективных средств профилактики этого заболевания являются актуальными.

Связь работы с крупными научными программами, темами. Выполненная работа являлась разделом плановой государственной тематики Белорусского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Вышелесского, задание 04.02 н 02. Номера Госрегистрации 085141 1993136.

Цель и задачи исследовании. Целью исследований было разработать средства специфической профилактики полисерозита свиней.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить эпизоотическую ситуацию и клинико-морфологнческне особенности проявления полисерозита свиней в хозяйствах Республики Беларусь.

2. Провести исследования по выделению возбудителя этой болезни, изучить его культуралыш-морфологические, биохимические, серологические и патогенные свойства.

3. Подобрать эффективные средства инактивации возбудителя гемофилез-ного полисерозита свиней.

4. Приготовить вакцину против гемофилезного полисерозита свиней и изучить ее безвредность, реактогенность и иммуногенное гь.

5. Отработать оптимальные режимы культивирования гемофил в условиях реактора лабораторного и промышленного тина, приготовить опытно-промышленную партию вакцины и испытать ее эффективность.

Объект н предмет исследований. Объектом исследований были поросята съемного возраста и супоросные свиноматки из свиноводческих хозяйств и змплексов Республики" Беларусь. В опытах использовали 10555 поросят, 276 шиоматок, 246 белых мышей, 280 морских свинок, 26 кроликов, 2 вакцинных ¡тамма H.parasuis (À73 и С82), 4 референтных (А183, В184, С185, D230) и 78 тизоотических культур возбудителя гемофилезного полисерозита, культуры ас. subtilis, Е. coil, Staphylococcus aureus.

Предметом исследований служили ветеринарная отчетность свиновод-ескнх хозяйств неблагополучных по гемофилезному полисерозиту, данные шзоотического, клинического и патологоаил(омического проявления этой нфекции, натматериал от 315 поросят, 78 эпизоотических культур возбудима гемофилезного полисерозита, 515 проб сывороток крови поросят, кро-иков и морских свинок. Выполнено более 600 бактериологических, 2000

грологических, 3100 иммунологических исследований.

«

Гипотеза. В условиях Республики Беларусь широкое распространение поучило заболевание у поросят в возрас!е 1-3 месяцев, проявляющееся серозно-шбринозным воспалением серозных оболочек грудной и брюшной полости, пе-икарда, артритами, менингитом и пневмонией. Фибринозный акцент воспали-ельного процесса, выраженный тропизм к серозным оболочкам н легочной тка-и, эффект от применения антибиотиков позволил нам выдвинуть гипотезу о ом, что эта болезнь вызывается гемофильными бактериями. После проведения актериологических исследовании, заражения лабораторных животных и поро-ят выделенными культурами Haemophilus parasuis были получены доказатель-тва этиологической'роли возбудителя гемофилезного полисерозита в этой па-ологии. В связи с этим нами была выдвинута вторая часть гипотезы о возмож-гости разработки и необходимости использования средств специфической профилактики на основе выделенных и изученных нами штаммов гемофнл.

Методология я методы проведенных исследований.

Работа выполнялась в течение 1988-1997 годов в лаборатории бактери-шьных инфекций, виварии Белорусского научно-исследовательского института (ксперименталыюй ветеринарии им.С.Н.Вышелесского и свиноводческих хо-яйствах Минской, Витебской и Брестской областей.

Для решения поставленных задач использовали эпизоотологнческий, кли-шческйй, патологоалатомический, бактериологический, серологический, иммунологический методы исследований.

В основу обследования эпизоотической ситуации в хозяйствах были по-гожены Методические указания nô эпизоотояогическому йсследованиго И.А.Бакулов с соавт., 1982). Изучение клинических признаков и патологоана-гомических изменений при полисерозитах у животных проводили по общепри-

к

пятой методике. Выделение и идентификацию гемофильных бактерий от 6oj иых полисерозитом поросят осуществляли по схеме, предложен!! М.А.Сидоровым с соавт. (1986). Культуры Haemophilus parasuis выращивали шоколадном агаре и сывороточно-дрожжевом агаре и бульоне. Патогенш свойства эпизоотических штаммов гемофильных бактерий определяли путем ' ражения поросят и лабораторных животных. Серологическую идентификаш выделенных гемофил проводили в реакции агглютинации с помощью гипери мунных сывороток, полученных на кроликах по схеме, предложеши М.А.Сидоровым с соавт. (1980). Референтные штаммы Haemophilus parasuis п лучены из Германии, Польши и России, любезно предоставленные профессор ми Х.Пфютцнером, З.Пейсак и М.А.Сидоровым.

При конструировании вакцины против гемофилезного полисерозита пор сят инактивацию гемофильных бактерий осуществляли формалином и солян кислым гидроксиламином. Определение реактогенных и иммуногенных свойс вакцины проводили на белых мышах, морских свинках, кроликах, поросятах супоросных свиноматках. Об антигенных и защитных свойствах полученнь образцов вакцины судили по титрам специфических антител в сыворотке кро! подопытных животных и сохранности их после внутрибрюшинного введет суточной агаровой культуры H.parasuis в доле ЛДШо-

В опытах на поросятах оценку состояния поствакцинального иммуннте проводили путем определения количества Т- и В- лимфоцитов - методом спо: тайного розеткообразовання с эритроцитами барана по Д.К.Новикову В.И.Новиковон (1979), фагоцитарной активности иейтрофилов - по метода) Н.С.Кисляк и Р.В.Ленской (1978), бактерицидной активности сыворотки крови нефелометрнческим методом но О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой (1968), кол: чества общего белка - с помощью рефрактометра РПА-2 (Н.М.Беляков, J97S количества иммуноглобулинов - в реакции с сульфатом цинка,

Эпизоотологическую и иммунологическую эффективность вакцины пр. тнв гемофилезного полисерозита проверяли комиссионно в пяти сшшоводч скнх хозяйствах, неблагополучных по этому заболеванию на 10555 поросятах.

Биометрическую обработку цифрового материала проводили i Р.Б.Стрелкову (1966) И П.Ф.Рокицко.му (1967).

При определении экономической эффективности применения вакцины и пользовали «Методические указания по внедрению достижений науки, техник и передового опыта в сельскохозяйственное производство» (1962) и «Методш определения экономической эффективности ветеринарных мероирнятш (1982).

Научная новизна и значимость Полученных результатов. Впервые у. таиовлены этнология li серотиповой состав возбудителя гемофилезного полис рознго свиней в свиноводческих хозяйствах республики Беларусь. Предложен

жимы ннактнвации и сорбции гемофилезных бактерий, обеспечивающие поучение иммуногенного препарата. Сконструирована вакцина против гемофи-5зного полисерозита свиней, обладающая высокой иммунологической и проти-»пизоотпческой эффективностью.

Предложены режимы культивирования Haemophilus parasuis на сыворо->чно-дрожжевом бульоне в лабораторном реакторе «Фермус-ЗМ» и реакторах итебской биофабрики, обеспечивающие осуществление серийного выпуска нсцнны в промышленных условиях.

Установлено преимущественное значение ILparasuis ссротнпов А и С в иологии полисерозита. При испытании иммунной активности вакцины против ¡мофилезиого полисерозита в качестве лабораторной модели наряду с морски-н свинками предлагаем использовать белых мышей.

Практическая ценность. Установлены распространение гемофилезного олисерозита свиней в свиноводческих хозяйствах республики и этиологическая эль H.parasuis в возникновении этого заболевания у свиней, выявлены эпизо-гические и клшшко-морфологические особенности проявления болезни Глес-;ра, установлен серотиповой состав возбудителя гемофилезного полисерозита, гработаны оптимальные режимы культивирования, инактивации и адсорбции ттмгенов.

Подготовлены методические рекомендации «Диагностика, профилактика меры борьбы с гемофилезами свиней», которые одобрены Ученым советом елПИИЭВ им.С.Н.Вышелесского (протокол № 3 от 3 мая 1990 года) и утвер-дены ГУБ Госагропрома БССР 14 августа J 990 года. Предложена тканевая гкцина против гемофилезного полисерозита свиней, на производство которой азработана нормативно-техническая документация (технические условия, вре-енная инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по рнменешгю) на производство тканевой вакцины для профилактики гемофилез-ого полисерозита свиней (утверждена Госсельхозпродом БССР 21.11.1990). редложека вакцина против гемофилезного полисерозита, на производство ко-эрой разработана нормативно-техническая документация (технические условия У РБ 00028493.080-95, временная инструкция по изготовлению и контролю, ременное наставление по применению), которая одобрена Ученым советом елНИИЭВ нм.С.Н.Вышелесского (протокол № 4 от И мая 1995 года), Ветбио-армкомиссиеп ( протокол № 7 от 15 сентября 1995 года) н утверждена ГУВ 1инсельхозпрода РБ 22 ноября 1996 года. На основании этих материалов на ба-; Витебской биофабрики изготовлено 300 литров опытного образца вакцины, оторая с положительным эффектом внедрена в ряде свиноводческих хозяйств еспублики.

Экономическая значимость полученных результатов. Разработанная

нами вакцина против гемофилезного полисерозита свиней обеспечивает сохр; ность 90,8% иммунизированных животных. Экономический эффект от ее П] менения составлял 69,1 рубля на 1 рубль затрат.

Основные положения цыиосцмые № защиту.

- Этиология и антигенная структура возбудителя полисерозита, поз; лающие аргументировано доказать роль гемофнльных бактерий в заболевай поросят полисерозитом и научно обосновать использование эпизоотнчес» культур Haemophilus parasuis серотипов А и С в качестве вакпшшых штаммов

- Режимы культивирования гемофил в реакторах лабораторного и П| мышленного типов, способы инактивации и сорбции, позволяющие сохраш протективные свойства антигена и приготовить вакцину против гемофилезш полисерозита свиней.

-Иммунологическая, эпизооюяогическая и экономическая эффективно! разработанной вакцины позволяет снизить отход поросят от этого заболеваг и повысить прирост живой массы.

Личный вклад соискателя. Исследования по изучению эпизоотическ ситуации, клинико-морфологического проявления гемофилезного полисерози бактериологической и серологической идентификации возбудителя болез Глессера, отработка оптимальных режимов культивирования гемофнльных б: терий в реакторах, конструирование и испытание иммунологической эффект! ности опытных образцов препарата выполнены лично автором.

Апробации результатов диссертации. Основные положения диссерган доложены на Ученом совете БелНИИЭВ им.С.НЛЗышелесского (1988-1997), Республиканских научно-производственных конференциях: «Профилактика меры борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных животнь: (г.Витебск, 1990), «Технология получения и выращивания здорового молоди: сельскохозяйственных животных и рыбоносадочного материал (г.Минск,1993).

Опублнкованпость результат и исследований. Основные положег диссертации опубликованы в 13 научных работах, в том числе в 7 статья) сборниках научных трудов БелНИИЭВ, 6 тезисах докладов, 2 информационн листках. Общее количество опубликованных материалов - 59 страниц.

Струюура и объем диссертации. Диссертация изложена на 129 стра! цах машинописного текста и состоит из оглавления, введения, общей характе] стики работы, основной части, выводов, практических предложений и прило> пня. Работа иллюстрирована 19 таблицами, 12 рисунками. Список литерагу

включает 200 источников. В приложении на 20 страницах приводятся документы и акты испытаний, подтверждающие результаты отдельных работ, их научную и практическую значимость.

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Эпизоотическая ситуация по гемофилсзному полисерозиту в свиноводческих хозяйствах Беларуси.

Анализ ветеринарной отчетности отдельных свиноводческих комплексов и наблюдения, проведенные нами, показывают, что полисерозиты свиней имеют широкое распространение в Республике Беларусь. Так, в совхозе-комбинате «Борисовский» Борисовского района за период с 1984 по 1995 год заболеваемость свиней полисерозитами возросла с 1,26 до 14,72% , а смертность - с 0,09% до 12,27%. Периодически, в 1992-1993 годах, а также в 1995 году отход поросят снижался и был в пределах 4,68 - 8,04%. По межхозяйственному предприятию «Южное» Пи некого района этот показатель за период с 1984 по 1995 год возрос с 1,32% по 16,78%. За 12 лет среднеарифметическая смертность составила 7,76%. В совхозе-комбинате «Северный» Городокского района этот показатель равен 7,16%. Математический анализ данных ветотчетности указывает на неблагоприятный прогноз по полисерозитам в этих хозяйствах, так как прослеживается тенденция к повышению смертности поросят от этого заболевания.

При изучении сезонной динамики смертности свиней от полисерозитов выявлено, что характерной чертой является неравномерное распределение отхода поросят в течение года с повышением уровня смертности в сентябре-декабре. На эти месяцы года приходится в среднем от 41,4 до 49,1% всех случаев падежа. Эта болезнь обычно имела характер энзоотии. Периоды спада заболеваемости и падежа сменялись фазой ухудшения эпизоотической ситуации, при которой удельный вес полисерозита на вскрытии достигал до 69,1-83,3%. Интервал между такими пиками составлял в среднем 2,5-3,5 года.

Клинические и патологоянатомические особенности проявления полисерозита.

Как правило эту болезнь у поросят регистрировали в послеотъемнь. ; период в возрасте 38 - 84 дней, которая проявлялась в острой, подострой и хронической формах. В 77% случаев полисерозит свиней протекал в подострой и хронической формах, в острой - в 23% Случаев. Болезнь сопровождалась гипертермией, одышкой, кашлем, болезненностью стенок брюшной и грудной полости, животные поднимались с трудом. У одной трети поросят при подострой и хронической формах болезни обнаруживали артриты конечностей. Реже наблюдали признаки поражения центральной нервной системы. ,

У животных в грудной и брюшной полости отмечали массивные наложения желто-серого фибрина на серозных оболочках и большое количества мутно-

го, желтого экссудата. Легкие и сердце были покрыты сплошным слоем фибрина и срастались с серозными покровами. Кишечник напоминал клубок сросшихся тяжей. Полость капсулы пораженных суставов была заполнена незначительным количеством соломенно-желтого синовия с примесью фибрина. По результатам вскрытия поросят-отъемышей поражение перитонеума, плевры, перикарда, головного мозга и суставов обнаружены соответственно в 76,6%, 94,3%, 100%, 17,7% и 29,2% случаев.

Выделение гемофильных бактерий и их культурально-морфоло-гическне, биохимические н серологические свойства.

При бактериологических исследованиях патматериала от 315 поросят с признаками полисерозита из 8 свиноводческих комплексов и хозяйств выделено 128 культур, которые в 82% случаев давали феномен сателлитного роста в виде мелких росиичатых колоний с двух сторон от полоски роста Bac.subtilis на расстоянии не далее 1-1,5 см. При микроскопии выдетенные культуры, окрашенные по Граму и Гинсу, представляли собой мелкие грамотрицательные коккобакте-рии окруженные зоной просветления (капсула), сходные с гемофплами. - ' Частота выделения культур из исследуемого патматериала в хозяйствах в среднем составляла 40,6%. Добавление олеата натрия в питательные среды в количестве 0,5% не способствовало повышению этого показателя. В то же время использование селективных питательных сред с добавлением линкомицина в дозах 0,75-1,0 мкг/мл среды оказывало ингибнрующее действие на стрептококки и стафилококки и тйм самым повышало выделяемость гемофил на 15-20%.

Изучение культурально-морфологических свойств выделенных микроорганизмов показало, что они хорошо росли в условиях доступа кислорода при температуре 37-38°С на средах (рН 7,0-7,6) с добавлением крови, сыворотки и дрожжевого экстракта. При исследовании биохимических свойств изучаемых штаммов установлено, что они-не продуцировали уреазу, не гемолизировапи эритроциты барана, не образовывали сероводород и индол, продуцировали ка-талазу, редуцировали нитраты в нитриты, ферментировали глюкозу, сахарозу, мальтозу, галактозу, маннозу с образованием кислоты без газа, не разлагали ара-бинозу, треадозу, лактозу, машшт. Из выделенных культур 54,7% были инертны к сахарам и многоатомным спиртам.

Результаты проведенных исследований дали основание отнести выделенные культуры к виду Haemophilus parasuis, являющемуся возбудителем гемофи-лезного полисерозита. Присеротипизации 78 эпизоотических культур Н.parasuis в РЛ с гнперпммунными кроличьими сыворотками полученным к эталонным штаммам, 28 из них (35,9%) были отнесены к серотнпу А, 10 (12,8%) - к серотнпу В, 15 (19,2%).- к серотнпу С и 3 - к серотипу Д (3,8%). 22 полевых изолята (28.2%) перекресшых реакций ни с одной из имеющихся сывороток не дали.

Результаты эгах исследований свидетельствуют о том, что в свиноводческих хозяйствах Белоруссии от поросят больных полисерозитом выделяются

ИаеторЬПш рагазШБ в основном серотиповА и С.

Патогсиность вылеленныл гемофил для лабораторных жннотиых н поросят.

При изучении патогенных' свойств выделенных культур гемофильных бактерии для морских свинок было установлено, что при алиментарном, внутримышечном и подкожном инфицировании их в дозе 0,5-4,5 млрд, м.к. на голову клинических признаков свойственных для полисерозита не отмечалось. Конъ-гонктивалыюе заражение (по методу Шерсня) морских свинок не сопровождалось признаками конъюнктивита и кератита. После интраперитонеального заражения морских свинок весом 220-300 г культурой Н.рагаэшз в дозе 5-6 млрд. м.к. на голову и более происходила гибель животных в течение 1-21 дня. Кролики независимо от способа и дозы инфицирующего материала оказались устойчивыми к инфицированию. Интраперитонеальное'заражение белых мышеи в дозе 0,25-0,4 млрд. м.к. и более приводило к гибели животных в течение 1-10 дней. После внутривенного введения суточной бульонной культуры гемофил белым мышам в дозе 0,5-1,0 млрд. м.к. гибель наступала в течение 1-5 минут.

Результаты опытов по экспериментальному заражению поросят 55-60-ти дневного возраста показали, что интраперитонеальное введение им агаровой культуры в дозе 12 млрд. м.к. и выше на поросенка вызывало гибель животных в течение 20 дней (срок наблюдения). У павших животных были обнаружены признаки серозно-фибринозного перитонита и перикардита. При бактериологическом исследовании патматериала от павших животных в 83,3% случаев была реизолирована исходная культура.

Таким образом, результаты опытов по экспериментальному заражению лабораторных животных и поросят показали, что наиболее чувствительными к инфицированию оказались морские свинки, белые мыши при внутрибрюшин-ном введении культур гемофильных бактерий. Способность изучаемых микроорганизмов вызывать у поросят признаки свойственные для полисерозита, дает основание заключить, что они являются одной из причин этой болезни.

Специфическая профилактика гемофнлезного полисерозита

Влияние солянокислого гидроксиламина .и формалина на жизнеспособность и антигенные свойства гемофильных_бактсрий.

Результаты опытов показали, что полная инактивация агаровых культур гемофил наступает уже через 8 часов при дозах гидроксиламина 0,1-0,6 мг/млрд. м.к. Этот препарат вызывает инактивацию бульонных культур гемофильных бактерий через 8 часов в дозе 0,5-1,0 мг/млрд. м.к. Возбудитель гемофнлезного полисерозита в смеси бульонной и агаровой культ.ур (10 млрд. м.к./мл) погибает под действием гидроксиламина в дозах 1,0-2,0 мг/млрд. м.к. через 8 часов, а в дозе 0,25-0,5 мг/млрд. м.к. - через 16 часов. Более низкие концентрации инакти-ванта не вызывали гибели культур в течение 48 часов. •

При определении ¡«{активирующего действия формалина на Н.рагззш ус-

тановилн, что он обезвреживает эти микроорганизмы в смеси бульонной и агаровой культур в конечной концентрации 0,25-0,5% через 8-12 часов.

Для сравнения иммуногенных свойств шести препаратов, полученных путем инактивации гемофильных бактерий формалином и гидроксиламином был поставлен опыт на 35 морских свинках. При этом установлено, что наиболее высокий средний титр антител был в группах животных, которым вводили смесь бульонной и агаровой культур инактивированных солянокислым гидроксиламином (6,25 logz) и агаровую культуру возбудителя подвергнутую воздействию формалином (5,8 log2). Данные серологических исследований были подтверждены результатами экспериментального заражения морских свинок культурой H.parasuis. Наибольшая сохранность подопытных животных также была в группах, которым вводили смесь агаровых и бульонных культур гемофил, инактивированных солянокислым гидроксиламином (50%), а также препарат из агаровой культуры, инактивированной формалином (28,6%).

Безвредность, рсактогенность и иммуногенность опытных образцов вакцины против гемофилезного полисерозита свиней.

» • Изучение трех экспериментальных образцов сконструированной гемофи-лезной вакцины проводили на 16 кроликах, 4 из которых служили контролем. Результаты исследований показали, что приготовленные препараты оказались безвредными,' слабореактогенными и достаточно нммуногенными. Наивысший титр специфических антител к H.parasuis во всех опытных группах наблюдался на 21-й день после начала иммунизации. -Однако у кроликов привитых гидро-ксиламинвакцинами, интенсивность антителообразования была более высокой. Титр антител составил 4,5-5,0 log2 против 3,75 log2 в группе животных, иммунизированной формолвакциной. К концу 5-й недели у кроликов привитых вакциной, полученной с помощью солянокислого гидроксиламина в дозе 2 мг/млрд. м.к., он продолжал оставаться более высоким (3,5 log2) по сравнению с этим показателем других опытных групп (3,0 log2).

Безвредность, рсактогенность, иммуногенность и дозу применения гидро-ксиламннвакцины изучали на поросятах 45-дневного возраста. Поросятам 1 группы ввели препарат двукратно п дозах 1 и 2 мл, 2 группы - в дозах 2 и 3 мл с интервалом 14 дней. 3 группа не привитых животных служила контролем.

При исследовании количества общего белка, иммуноглобулинов и морфологического состава крови, отклонений от нормы не выявили и лишь у вакцинированных поросят на 14 ч, 22-й и 30-й день отмечено уменьшение сегменюя-дерных нентрофнлов на 14,8-16,6% и увеличение лимфоцитов на 11,4-13,2%. Это позволяет характеризовать препарат как умеренно реактогенный. IIa 7-й и 14-н день отмечено достоверное уменьшение бактерицидной активности сыворотки крови у иммунизированных поросят на 27-43% и увеличение фагоцитарной активности нейтрофилов в первые 22 дня после вакцинации на 17-22%. В эти же сроки выявлено снижение относительного и абсолютного содержания В-

и

лимфоцитов с последующим их увеличением и ростом числа Т-лимфоцитов.

При исследовании сыворотки крови опытных поросят в реакции микро-агглютинаиии с гемофилезными антигенами входящими в вакцину, установили, что на 14-й день опыта средний титр антител в 1 и 2 опытной группах увеличился до 3,25-3,75 1о§2, а к 30-му дню он достиг до 4,3-4,5 1оц2 и был выше показателя контрольных животных на 2,5-2,7 Самый высокий уровень антител был выявлен на 42-й день исследований и составил у опытных поросят соответственно 1:30 и 1:32 при среднем титре антител в контроле (1:3,5).

Полученные материалы свидетельствуют о высокой активности антигенов в вакцине и одинаковой интенсивности процессов антнтелообразования в опытных группах при указанных дозировках вакцины .

После заражения всех подопытных животных на 49-й день смесью агаровых культур, входящих в вакцину, в дозе ЛД5о установлено, что из 4-х контрольных поросят пало две головы с признаками серозно-фибринозного перитонита, перикардита и катаральной пневмонии, а у двух других было выявлено общее повышение температуры тела после инфицирования. У животных опытных групп отмечали лишь кратковременную температурную реакцию, однако гибели поросят и признаков поражения серозных покровов и пневмонии при после-убойном осмотре не отмечалось.

Эпнзоотологнческая и экономическая эффективность применения вшсцкпы.

Эпнзоотологнческая и иммунологическая эффективность вакцины против гемофилезного полисерозита свиней изучалась в совхозе-комбинате «Борисовский» Борисовского района Минской области на 633 поросятах, из которых 339 голов иммунизированных тканевой формолвакциной служили контролем (базовым вариантом).

При исследовании морфологических показателей крови, количества белка и иммуноглобулинов в сыворотке крови подопытных животных достоверных изменений не выявлено по сравнению с аналогичными показателями контрольных поросят и они были в пределах физиологической нормы.

Данные по определению интенсивности антнтелообразования к антигенам входящим в вакцину показали, что на 20-й день средний титр антител в опытной группе составил 3,7 К 50-му и 60-му дню исследований он достиг соответственно 5,7-5,8 1о§2. Средний тигр антител в контрольной группе в этот период практически не изменялся и был в пределах 2,4-2,5 1о§2.

За время содержания поросят на участке доращивания в опытной группе заболело и пало 45 голов (15,3%), а в контрольной - 85 ( 25,1%), в т.ч. с признаками полисерозита в опытной группе пало 5 голов (1,7%), в контрольной - 38 голов (11,2%). Среднесуточный прирост живой массы у поросят опытной группы составил 365 г и был на 38 г выше, чем в контрольной. Применение разработанной вакцины позволило увеличить сохранность поросят по сравнению с кон-

трольной группой на 9,5%.

Экономический эффект от применения вакцины составил 38 рублей на 1 рубль затрат (в ценах 1989 года).

Результаты отработки режимов производства и испытания опытного образца вакцины против гемофилезного полисерозита свиней.

Отработка оптимальных режимов культивирования Н.рагаашБ в условиях лабораторного реактора «Фермус-ЗМ». Выращивание гемофнльных бактерий проводили в лабораторном реакторе «Фермус-ЗМ» в сывороточно-дрожжевом бульоне (рН 7,4-7,6) с добавлением 0,25-0,5% глюкозы (по сухому веществу). В качестве посевного материала использовали 18-20 часовую бульонную культуру гемофил. Всего было проведено 5 серий опытов. В каждой из серий менялся только один из показателей: в 1-й - объем расплодки, во 2-й - скорость вращения мешалки, в 3-й - объем подаваемого воздуха, в 4-й - время культивирования, в 5-й - режим аэрации. В 4-х сериях опытов наибольший выход отмечался при следующих параметрах культивирования: температура (Т) - 37°С , количество расплодки К объему питательной среды в реакторе - не менее 10%, скорость вращения мешалки (М) - 400 об/мин, подача стерильного воздуха (В) - 0,1 л/л среды, время культивирования - 8-12 часов. Культуры выращенные в условиях реактора в течение 8-10 часов не отличались по своим культурально-морфологическим и биохимическим свойствам от культур выращенных на плотных питательных средах в течение 16-20 часов. При этом отмечено, что избыточная аэрация отрицательно влияет на рост гемофил, особенно в первые часы культивирования. Поэтому в 5 серии опытов при объеме расплодки 15,5 % и скорости вращения мешалки 65-75 об/мин. .и выращивании гемофнльных бактерий в течении 8 часов апробировали два варианта аэрации: в первом - воздух подавался в постоянном объеме (0,35л/ среды в минуту), во втором - объем подаваемого воздуха увеличивался от 0,1 до 0,5 л/л питательной среды в минуту по мере прироста гемофил. Режим аэрации во втором варианте оказался более оптимальным и позволял довести выход биомассы гемофил до 8 млрд. м.к., что на 1 млрд. м.к. больше по сравнению с первым вариантом.

Таким образом, методом активной аэрации в реакторах на основе бульонной среды были получены культуры возбудителя гемофилезного полисерозита с концентрацией биомассы в пределах 5-8 млрд. м.к./мл. Из них было получено несколько серий вакцин, которые в дальнейшем испытывались в свиноводческих хозяйствах.

Комиссионные и производственные испытания образцов гидроксиламин-вакцин, изготовленных в лаборатории бактериальных инфекций Бел НИИ экспериментальной ветеринарии, проводились в 3-х свиноводческих хозяйствах республик», неблагополучных по данному заболеванию на 2246 привитых поро-сятах-отьемышах. Контролем (базовым вариантом) служили 1879 животных, иммунизированных тканевой формолвакциной против гемофилезного полисеро-

УЗ

зита. За период доращивания по опытной группе пало от полисерозитов 50 (2,0%). Среднесуточный прирост живой массы в опытных группах поросят-отьемышей составил 276-342 г, что на 23-89 г больше, чем в контроле. Профилактическая эффективность препарата в этих хозяйствах в среднем составила 87,9%, а экономический эффект от применения препарата в хозяйствах был в среднем 82,9 рубля на 1 рубль затрат.

Производство опытного образца вакцины в условиях Витебской биофабрики. На основе подготовленной нормативно-технической документации на Витебской бнофабрике проводилась отработка параметров культивирования двух вакцинных штаммов Н-рагаБшв серотипов А и С. В реакторы с сывороточно-дрожжевым бульоном добавили расплодку в количестве 35% и 25%. Аэрация бульонной культуры осуществлялась при скорости вращения мешалки (65-70 об/мин) и возрастающей подаче стерильного воздуха при давлении его в пределах 0,1-0,5 атм. После 8,5 часов выращивания концентрация биомассы гемо-фильных бактерий составила соответственно 12 и 8 млрд. м.к./мл. После их инактивации и смешивания содержимого обоих'реакторов в равных соотношениях проводили адсорбцию антигенов алюмокалиевыми квасцами (из расчета 0,4% сухого вещества).

Опытная серия вакцины оказалась стерильной и безвредной. В посевах на питательных средах роста бактериальной и грибковой микрофлоры не отмечалось. Иммунизированные белые мыши были живыми После заражения культурой гемофильных бактерий в дозе ЛДШо в течение 10-ти дневного срока наблюдения. Иммунная активность вакцины проверялась на морских свинках и составила 62,5%, что соответствовало требованиям технических условий препарата.

В результате на базе Витебской биофабрики было наработано 100 тысяч доз вакцины против гемофилезного полисерозита свиней.

Широкие производственные испытания ее проводились в межхозяйственном предприятии «Южное» Пинского района на 2512 поросятах-сосунах. Базовым вариантом (контролем) служили 1007 поросят-отъемышей привитые тканевой формолвакциной против гемофилезного полисерозита свиней. За период доращивания в'опытной группе пало от полисерозитов 50 поросят (2,0%). Среднесуточный прирост живой массы у опытных поросят был на 36 г выше, чем п контроле и составил 246 г. Профилактическая эффективность препарата в данном хозяйстве составила 91%, а экономический эффект - 51 рубль на 1 рубль за-1рат.

ВЫВОДЫ

1. Заболеваемость полисерозитами свиней в хозяйствах Республики Беларусь составляет 14,7-21,4%, а смертность достигает 12,3-16,8%. Болезнь регистрируется в течение всего года с незначительным увеличением отхода поросят-

w

отъемышей в марте-апреле и сентябре-декабре и характеризуются серозно-фибринозным воспалением серозных оболочек, пневмонией, реже артритами и менингитами.

2. Ог поросят с признаками полисерозита в 40,6% случаев выделены микроорганизмы, которые по своим культурально-морфологическим, биохимическим, патогенным и серологическим свойствам отнесены к Haemophilus parasuis, в т.ч. 35,9% выделенных культур отнесены к серотипу А, 12,8% - к В, 19,2% - к С и 3,8% - к серотипу Д. Добавление линкомидина в питательные среды в дозах 0,75-1,0 мкг/мл оказывает ингибирующее действие на стрептококки и стафилококки и тем самым повышает выделяемость гемофил на 15-20%.

3. Инактивация возбудителя гемофилезного полисерозита наступает под воздействием формалина в концентрации 0,5% и солянокислого гидроксиламина в дозе 0,5 мг/млрд. м.к. в течение соответственно 12 и 16 часов. Однако антигенные и иммуногенные свойства у гидроксиламинвакцины были выше, чем у формолвакцины.

4. Оптимальными параметрами культивирования гемофильных бактерий, позволяющими получить выход полноценной биомассы в условиях реакторов не менее 5 млрд. м.к./мл среды являются: температура - 37°С , количество рас-плодки к объему питательной среды - не менее 10%, время выращивания - 8-10 часов, режим увеличивающейся аэрации от 0,1 до 0,5 л/л питательной среды, обеспечивающей ее насыщение кислородом в пределах 15-30%.

5. Сконструированная вакцина гемофилезного полисерозита свиней является безвредным, слабо реактогенным и достаточно иммуногенным препаратом. Введение ее поросятам в дозе 1 и 2 мл с интервалом 10-12 дней стимулирует систему Т- и B-лимфоцитов и синтез специфических антител. После экспериментального заражения поросят ее иммунологическая эффективность составила 93,7-99,9%.

6. Применение вакцины против гемофилезного полисерозита свиней, полученных в условиях реакторов лабораторного и промышленного типов в неблагополучных по этой болезни хозяйствах поросятам в возрасте 18 и 25 дней в дозе 1 и 2 мл позволяет повысить сохранность вакцинированных животных от этого заболевания до 90,8%. Экономический эффект от применения вакцины составляет 69,1 рубля на 1 рубль затрат.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Методические рекомендации ((Диагностика, профилактика и меры борьбы с гемофилезами свиней» (утверждены ГУВ Госагропрома БССР 14 августа 1990 года).

2. Тканевая вакцина для профилактики гемофилезного полисерозита свиней, на производство которой разработана 'нормативно-техническая документа-

ция (технические условия , временная инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по применению) на производство тканевой вакцины для профилактики гемофилезного полисерозита свиней (утверждена Госсельхозпро-дом БССР 21.11.1990).

3. Вакцина для профилактики гемофилезного полисерозита свиней, на производство которой разработана нормативно-техническая документация (технические условия ТУ РБ 00028493.080-9S, временная инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по применению) (утверждена ГУВ Минсельхозпрода РБ 22 ноября 1996 года).

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Андросик H.H., Геведзе В.И.", Толяронок Г.Е. Опыт профилактики ге-мофилезов у свиней /У Информационный листок БФ ВНИИТЭИагропром, 1989. -№412.-4 с.

2. Толяронок Г.Е. Об этиологии полисерозитов у поросят на промышленных комплексах, - Ветеринарная наука - производству: Сб. науч. трудов Бел-НИИЭВ. - Вып. 28. - Мн.: Ураджай, 1990. - С. 90-95.

3. Бутовский Н.В., Толяронок Г.Е. Иммуногенность опытных образцов вакцин против гемофилезного полисерозита свиней // Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка с.-х. животных: Тез. докл. респ. конф. - Витебск, 1990. - С. 96-97.

4.Андросик H.H., Бутовский Н.В., Толяронок Г.Е. Этиология и профилактика полисерозитов свиней на комплексах Белоруссии // Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка с.-х. животных: Тез. докл. респ. конф. - Витебск, 1990.-С. 98-99.

5. Бутовский Н.В., Толяронок Г.Е. Специфическая чувствительность эриг-роцитарных диапюстнкумоа гемофилезного полисерозита поросят // Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка с.-х. животных: Тез. докл. респ. конф. - Витебск, 1990. - С. 99-100.

6. Андросик H.H., Бутовский Н.В., Толяронок Г.Е. Эпизоотологическая эффективность инактивированной вакнииы против гемофилезного полисерозита // Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняку с.-х. животных: Тез. докл. респ. конф. - Витебск,1990. - С. 100-101.

7. Андросик.H.H., Бутовский Н.В., Толяронок Г.Е. Диагностика, профилактика и меры борьбы с гемофилезами свиней. Методические рекомендации. -Мн., 1990.- 20 с.

8. Толяронок 1\П. Влияние солянокислого гидроксиламина на жизнеспособность гемофильных бактерий и микоплазм. // Ветеринарная наука - производству: Сб. Науч. трудов БелНИИЭВ. - Вып. 29. - Мн.: Ураджай, 1991. - С. 7982.

9. Андросик H.H., Букин A.B., Толяронок Г.Е. Эффективность специфиче-

i6

ской профилактики гемофилезного полисерозита и актинобациллярной плевропневмонии у свиней. - Информационный листок БФ ВНИИТЭИагропром, 1992. - № 049. - 4 с.

10. Толяронок Г.Е., Бутовский Н.В., Скотников Э.С. Свойства гемофиль-ных бактерий, выделенных от поросят больных полисерозитом // Ветеринарная наука - производству: Сб. науч. трудов БелНИИЭВ.- Вып. 31. - Мн.: Ураджай, 1993.-С. 41-44.

11. Андросик H.H., Бутовский Н.В. Толяронок Г.Е. Эффективность гидро-ксиламинвакцины против гемофилезного полисерозита свиней // Технология получения и выращивания здорового молодняка с.-х. животных и рыбопоса-дочного материала: Тез. докл. конф. - Мн., 1993. - С. 126-127.

12. Бутовский Н.В., Толяронок Г.Е., Андросик H.H., Курлович Д.В. Приготовление вакцины против гемофилезного полисерозита свиней // Технология ■ получения и выращивания здорового молодняка с.-х. животных и рыбопоса-дочного"Материала: Тез. докл. конф. - Мн., 1993. - С. 127-128.

13. Андросик H.H., Захарик Н.В., Насонов И.В., Панковец Е.А., Толяронок Г.Е. Чувствительность возбудителей бактериальных инфекций свиней и птиц к антибиотикам фирмы «Санофи». - Ветеринарная газета. - 1998. - № 6. - 5 с.

/7

РЭЗЮМЕ

■Таляронак Генадзь Яф1мав1ч Этыялогш 1 прафшактыка пол!серазггу св!ней

Ключавыя словы: полкераз1т свиней, этыялопя, гемафшьныя бактерьп, пажыунае асяроддзе, культываванне, ¡нактывант, ад'ювант, вакцына,' пра-фшактыка, эффектыунасць.

Аб'ектам даследаванняу з'яулялкя свшш, марск'ш свшм, белыя мышы, трусы, культуры узбуджальшка гемафшезнага пол(серазггу. Прадметам даследаванняу служьпн ветсправаздачнасць, праяуленне гэтай шфекцьи, патматэрыял ад парасят, культуры гемафш, пробы крьш жывел.

Мэта даследаванняу - распрацаваць сродю спецыф!чнай прафшактык! по-лкераз^ту «иней у гаспадарках Рэспублш Беларусь.

У працы выкарыстаны этзааталапчны, клиичны, патолагаанатам1чны, бактерыялапчны, сералапчны 1 ¡ммуналапчны' метады даследванняу. Выканана больш 600 бактэрыялапчных, 2000 сералагтчных, 3100 ¡ммуналапчных даследванняу. Навукова-практычныя выпрабаванш эфектыунасд: вакцыны праведзены на 10555 парасятах.

Навуковая навпна заключаецца у тым, што упершыню устаноулс'на этыялопя полюеразггу евшей у Рэспублщы Беларусь, прапанаваны сродк! шактывацьн 1 сорбцьй гемафш, зканструявана вакцына супраць гемафьтезпага пол1сераз1ту евшей, адпрацапаны рэжымы культыиавання гемафщ у реактарах лабараторнага и прамысловага тыпу, пры вызначэнн! ¡муннай актыупасш вакцыны у якает лабараторнай мадэл! прапанаваны белыя мЫшы.

На падставе вын1кау даследаванняу прапанаваны метадычныя рэкаменда-цьн па дыягностыцы, прафшактыцы 1 мерам барацьбы з гемафшезам1 евшей 1 вакцына супраць гемафшезнага полкеразггу. У адпаведнасц! з распрацааанан нам! НТД выраблена вопытна-ирамысловая серыя вакцыны, якая са станоучым эффектам выпрабавана у шэрагу свшагадоучых гаспадарак рэспублЫ.

и

РЕЗЮМЕ Толяронок Геннадий Ефимович Этиология и профилактика полисерозита свиней

Ключевые слова: полисерозит свиней, этиология, гемофильные бактерии, питательная среда, культивирование, инактивант, адъювант, вакцина, профилактика, эффективность.

Объектом исследования являлись свиньи, морские свинки, белые мыши, кролики, культуры возбудителя гемофилезного полисерозита. Предметом исследований служили ветотчетность, проявление этой инфекции, патматериал от поросят, культуры гемофил, пробы крови животных.

Цель исследований - разработать средства специфической профилактики полисерозита свиней в хозяйствах Республики Беларусь.

При работе использованы эпйзоотологический, клинический, патолого-анатомический, бактериологический, серологический и иммунологический методы исследований. Выполнено более 600 бактериологических, 2000 серологических, 3100 иммунологических исследований. Научно-производственные испытания эффективности вакцины Проведены на 10555 поросятах.

Научная новизна заключается в том, что впервые установлена этиология полисерозита свиней в Республике Беларусь, предложены средства инактивации и сорбции гемофил, сконструирована вакцина против гемофилезного полисерозита свиней, отработаны режимы культивирования гемофил в реакторах лабораторного и промышленного типов, для определения иммунной активности вакцины в качестве лабораторной модели предложены белые мыши.

На основании результатов исследований предложены методические рекомендации по диагностике* профилактике и мерам борьбы с гемофилезами свиней и вакцина против гемофилезного полисерозита. Согласно разработанной нами НТД изготовлена опытно-промышленная серия вакцины, которая с положительным эффектом испытана в ряде свиноводческих хозяйств республики.

79 SUMMARY

Gennady Yefimovich Tolyaronok Etiology and Prophylaxis of Swine Polyserositis

Key words: swine polyserositis, etiology, haemophilus bacteria, nutrient media, cultivation, inactivant, adjuvant, vaccine, prophylaxis, efficiency..

The research subject were swine, guinea pigs, rabbits, white mice, cultures of haemophileus polyserositis agent; veterinary accounts, manifestation of infection, pathological material from piglets, animal blood samples.

The research object was to work out means for specific prophylaxis of swine polyserositis in swine farms the Republic of Belarus.'

During the work epizootological, clinical, pathological and anatomical, bacteriological, serological and immunological research methods used. Over 600 bacteriological, 2000 serological, 3100 immunological tests were carried out. Scientific and production tests on studying of vaccine efficiency were conducted on 10555 piglets.

The scientific novelty of the work consists in' the fact, that for the first time in the Republic of Belarus etyology of swine polyserositis has been established and means of inactivation and sorbtion of Haemophilus parasuis have been proposed; a vaccine against haemophileus polyserositis of swine was devveloped, cultivation for Haemophilus spp. were mastered in reactors of laboratory and production types and white mice were proposed as a laboratory model for determination of immune activity of vaccine.

On the basic of research data methodical recommendations on diagnostics, prophylaxis and control measures against swine haemophiloses and vaccine against hae-mophilous polyserositis were proposed. In accordance with scientific-technical documents worked out by us a trial and production series of the vaccine was produced that was successfully introduced in practice in a number of swine farms of the republic.