Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Эпизоотология и специфическая профилактика сибирской язвы сельскохозяйственных животных в регионе Сибири и Дальнего Востока

-С I' - с-»

казанский ордена ленина зетеи1нлрн1й институт имени Н.Э.БАУМАНА

На правах рукописи

цндыпов виктор 11ыбанович

зпизоотологея и специфическая профилактика сиелрскоя язвы сельскохозяйственных животных в ряглогя сйрлк'1 и дальнего ВОСТОКА

16.00.03 - ветеринарная гдшроСлологлл, вирусология, эпизоотология, микология п иммунология

Автореферат

диссертации на соискание ученой стелет: доктора взтер::нурных наук

Казань 1592

Работа выполнена в Бурятском сельскохозяйствен!; ш институте

Официельные оппоненты: док.'ор ветеринарных наук, профессор Госыанов Р. Г.

доктор ветеринарных наук,

Ведущая организация: Всесоюзный государственный

заседании специализированного совета Д-120.22.01 при Каяанскоь ордена Ленина ветеринарной институте им.Н.Э.Баумана (420074, Казань-74, ветеринарный институт)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанского ветеринарного института

профессор Гаврил об Б. А.

доктор медицинских наук, профессор Хисамутдинов А. Г.

научно-контрольный институт

Защита состоится

(0?, 1992г. в 13 часов на

Автореферат разослан

Ученый секретарь специализированного совета

-•Л!" i f i

'' i ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

I

Актуальность темы. Вопросы краевой эпизоотологии и специфической профилактики сибирской язви особенно в регионах интенсивного развития производительных сил имеют особую актуаль-юсть. Это связано в первую очередь строительством крупных промышленных предприятий прямым образом влияющих на экологическую Остановку и опизоотологическуп ситуацию по инфекционным заболеваниям на конкретной территории. Не иснточениеы является регион Сибири и Дальнего Востока - зона озера Байкал, Бурятия и БАМ, где произведены небывалые по обьему земляные работы, которые создали предпосылки возможного поязления еновъ крупшх гспи-tisit особоопасной инфе..диц сибирской язвы. Поэтому изучение вопросов состояния эпизоотической ситуации и специфичен-ой профилактики в этой регионе требуют пристального внимания.

Технология современного ведения яивотцоводсгза на промыа-лениой основе включает применение ряда вакцинных препаратов, биостимуляторов, витаминов, микро- и макроэлементов, а также з-пользовзние антгелы.гантикоз и инсектицидов» Эти изролрилтия часто проводятся без учета взаимовлияния. препаратов на организм ::швотных при одновременном их применении. В последние годы наблюдается тенденция и увеличению количества кормовых добавок в рационы, являющихся отходами пищевой, фармацевтической и химической промышленности. Сведения о влиянии этих добавок на организм нивотных, и в особенности на иммунную реактивность, имеют большое практическое значение при продлении профилактических мероприятий против инфекционных болезней.

Вакцина CHI, предложенная Н.Н.Гинсбургои в 1942 году, считалась в последнее годы одной из наиболее стабильных и успешно применяемых в животноводстве. Пс тому изучение иммуногенеза на модели использования этого биопрепарата при казной рехиае и способах введения в организм янвоггаос с учетом сроков их обработки некоторыми инсектицидами, включения в рационы отходов фармацевтической промьгалепности, использования комплекса полпеолей микроэлементов представляет несомненный интерес.

Выявление закономерности иммуногенеза может послужить отцовой для более эффективного и рационального применения вакцинных

препаратов и при других инфекционных заболеваниях животных.

Цель и задачи исследований. Цель работы - изучение вбросов краевой эпизоотологии в отдельных регионах Сибири и Дальне го ?остока и научно-теоретическое обоснование применения вакци ны СТЙ при разном ре:и"'е и способах введения в организм живот-пых с учётом сроков их обработки некоторым! инсектицидами, а также ииыунного отзет* у макроорганизыа.

Задачи Исследований:

1..Дать оценку эпизоотической ситуации сибирской язвы в отдельных регионах Сибири и Дальнего Востогч

с. Изучить вопросы специфической профилактики сибирской язвы в экстремальных условиях Забайкалья при разных технологических пр'.'"чах применения вакцины СТИ, в свете критических оце нок к ней.

3. Определить влияние неспецифических стимуляторов (обле-пихового ирота и микроэлементов) на поствакцинальный сибиреязвенный ишуиитет.

Заявить злкяниз пестицидов (экологически неблагополучн факторов) на поствакцинальный сибиреязвенный иммунитет.

5. Разработать оптимальные условия получения чистой суспензии данонуклеаров и изучить Т- и В-лиыфоциты периферической крови организма кроликов и животных, привитых вакциной СТИ, в динамике.

■ 6. Конструировать вариант штампа СТИ, устойчивого к антибиотику бициллин-3, в целях имиуноантибиотикотерапии в условия вынужденных предохранительных прививок среди молодняка крупного рогатого скота.

Ксучная новизна. Все излог^нное ниже базируется на собственных исследованиях, проведенных'на лабораторных /белые ш-: :, иорокие свинки и кролики/ к на продуктивных сельскохозяйственных нивотных /овцы и крупный рогатый скот/, при неизменной обращении к допросам эпизоотологии, иммуногенеза и ишунок'орре ции.

Дана оценка эпизоотической ситуации по сибирской язве в зоне Байкала, Буря тской АССР и БАМ, обосновывается необходимость ревизии ранее проявивших активность почвенных очагов си-Опрской язвы.

Впервые выносится мысль использовать вакцинацию телят отив сибирской язви в селекции, з качестве тзста для вынвле-я нивотних с сильным иммунным ответом. Изучен иммунный ответ низотных, привитых против сибирской язви в экстремальных ус-виях Забайкалья. Затронуты малоизученные вопросы никунобиоло-ческих сдвигов организма г.ивотных, подвергнутых ревакцинации, двигаются вопросы имаунокорр^чдии постБак"".налыюго сибиреяз-1НКОГО иммунитета у рефрактерных и со слабый иммунным ответом ■дельных ЖИВОТНЫХ.

Проведена критическая оценка о иымуногеяности сибиреязвеи->Я вакцины 013-1.

Впервце установлена иммунокодулирущая функция пе чтцидов карбофоса и гиподермин-хлорофоса/ при формировании пс-?ва:с-:..ального сибиреязвенного иммунитета.

Выявлено повызекие резистентности и иммунологической реак-1вности организма кроликов и молодняка крупного рогатого еко-з, при подкормке облепихового 'лрота и микроэлементов в уело-лях вакцинации против сибирской язвы.

Проведена работа по конструирове- но варианта штамма СИ, зто."чивого к антибиотику бициллин-3.

Теоретическая и практическая значимость паботы. Анализ раевой эпизоотологии и специфической пройилзтешм сибирской звьг в регионе Сибири и Дальнего Востока позволяет подойти к • ей исходя из обцей стратегии и тактики борьбы с учётом спецн-ических особенностей региона.

Знание несовершенства иммунологической реактивности орга-изма телят приводит к мысли о практической нецелесообразности ммунпзации юс против сибирской язвы до 3 месячного возраста, озволя'т выявлять животных со слабым и сильны:; иммунными отве-:аш на иммунизацию.

Изучение иммунного фона у коров, содэря досся в различных >еяимах ухода и кормления, позволяет через 12 месяцев их ваяцк-шцки против сибирской яззи выявить животных, утративших - * ли сохранивших ии'унптэт и теоретически обосновывает необходимость гроведегмя ежегодной ревакцинации. При ежегодной реззлцпнзции глботнкх установлена закономерность, что у :г:гао' тых,"*леп'!',г:х вы-

. - 5 -

сокие иммунологические показатели перед ревакцинацией отмечается при ревакцинации слабый ммунный ответ, а у кивотьих, имеющих низкие иммунологические показатели- сильный иммунный от зт,что приводи? к практичес!>й целесообразности селективной ревакцинации.

Впервые изучены иммунобиологические сдвиги организма жи- . вотных при рев'акцингда повышенными дозами вакцины СТИ и признана их целесообразность для коррекции иммунного ответа организма животных при сибирской язве.

Ппактически важными являются сведения I. влиянии пестицидов,как техногенных факторов, на формирование поствакцинального сибиреязвенного иммутитета у кивотпых.

Апроби-уИя работы.Основние положения диссертационной работы обсуэдены и доложены на итоговых научна конференциях Бурятского сельскохозяйственного института (1976-19С?гг.) ДПрегио-нальной конференции молодых учёных института Экспериментальной ветеринарии Сибири и ДВ СО ВаСХШЛ( Новосибирск, 1982) .Всесоюзном Пленарном заседании межведомственной комиссии по борьбе с сибирской язвой (Воронеж,1986),11 региональной конференции молодых учёных Сибири и Дальнего Востока (Улан-Удэ), пленарном заседании межведомственной комиссии по борьбе с сибирской язвой (Ташкент,1990),На всесоюзной научной конференцш по актуальным вог..>осам токсикологии,гигиены применения пестицидов и.полимерных материалов в народном хозяйстве(Киев,1990),

Внедрение. I. Использованы ввиде дополнения к "Наставлению по применению вакцины против сибирской язви животных споровой лиофилкзированной из штамма 55 утв. ГУ В ГОСАГРОПРОЦА СССР-2^.12.1986г.

2. Пспольг ваны ввиде дополнений к "Наставлению по применению жидкой живой вакцины СТИ против сибирской язвы животных4 одобренного ГУВ ГОСАГРОПРОЫА СССР 28.05.87.

3. Вопли в монографию "Сибирская язва"под редакцией С.Г. Кодссова.М.,Колос,1975.

¿г. Включены в монографию И.И.Матафонова "Облепиха".Новосибирск,Наука,1933. . .

5. Использованы в монографии Н.Г.Ипатенко и др."Сибирская лзва сельскохозяйственных кивотных", Ы..Агропромиздат,1987г.

- б -

6. Лослуяили основой методических указаний "Лаборатор-я диагностика сибирской язвы" для курса повышения квалифи-ции ветеринарных врачей, работающих на мясокомбинатах, ут~ рздешшх методической комиссией и ученый Советом Восточно-бирского технологического института ( Улан-Удэ, IS87).

7. Основные положения и выводи диссертации попользуются учебной процессе на кафедрах эпизоотологии, микробиологии патофизиологии Бурятского сс ъскохозяйстр-шюго института.

Публикация по теме работы. По теме диссертации опубли-'заии 25 научных статей, поручены 2 автс_ зких свидетельства изобретение и 3 рационализаторских удостоверений.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на ■2 страницах машинописного текста и состоит из вводе!, л, об-ipa литературы, собственных исследований, обсуждения v энали-I полученных результатов, выводов, практических преклонений, [иска использованной литературы и приложения. Работа иялыс-шрована 42 таблицами, 9 рисунками и 5 фотографиями. Слисок иератури содержит 382 источника, в том числе I't2 зарубежных.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЦГ ВАШ

2.1. Материалы и методы исследований. Работа выполнена соответствии с планом ШР а период 1976-1988 гг на ио^одро жробиологии и вирусологии Бурятского сельскохозяКотктсго ¡статута и в лаборатории по изучении сибирской язв;,: YJ.ZA I Казань. В опытах использовали кивотных учебного хозяйства Зайпл" и колхозов "Знамя Ленина" и "коммунизм", а тагле загородных хозяйств г. Улан-Удэ.

Анализ эпизоотической ситуации по сибирской язве ь ¡¡craie Сибири и Дальнего Востока проводили на основании статис-1ческих отчетоз ветеринарного о ,ела Бурятской ССР и лагкчх эоударствзпиых архивов Бурятской ССР и Ирку-нсоа области с ^пользованием методики И.А.Бакуловз (I98'i).

Эксперименты выполнялись в ? этапах. На пергоп этане в сериях опытов изучали иммунологические показатели гумосэль-wo иммунного ответа при формировании постзпзщшлшыо са-лреиавенного иммунитета в возрастном аспекте (""ï.nivn и мо-

лодняк крупного рогатого окота) определяли иииунологичес.ую структуру коров через 6-12 мест .ев иммунизации и ревакцинации вакциной СТИ. На данном этапе исследования в опытах использовали 30 телят 2-2,5 месячного возраста, W головы молодняка крупного рогатого скота и 250 коров.

На второе этапе ваботы изучали иммунологические показате ли организма кроликов и крупного рогатого скота, подвергнутых ревакцинации иммунизирующей и повышенной (5-ти кратно) дозами вакцины С7Л, в различных интервалах времен' . Здс.сь же изучали вопрос влияния ревакцинации на степень сенсибилизации орх-аниз ыа нивотньк. Опыты проведены в 3 сериях экспериментов на 7 кр ликах и бг коровах.

Третий этап исследований посвящался вопросу разработки р акмов видолешш мононуклеаров из периферической крови и изучения Т- и В-лигфоцитов у животных, привитых вакциной СТИ. В опытах использовали 50 белых мышей, 5 морск..х свинок, 20 кроликов, 3 овцы и телят.

Вопросу изучения иммунобиологических показателей организ им жив^ных при оральном катоде иммунизации сибиреязвенной вакциной С1И был посвящен четвертый этап исследований. Эксперименты проведены с использованием 50 белых мышей, 6 кроликов 8 голов крупного ргатого скота и Л овцы.

На пятом этапе исследований изучали : трос иммуномодули-руюцей функции пестицидов (карбофоса и гиподерыин-хлорофоса) на иммунологические показатели организма кроликов и крупного рогатого скота, привитых вакциной СТК. Исследования данного этапа проводили в 3 сериях оиьпв на 177 белых ишах, 84 кроликах и 35 головах молодняка крупного рогатого скота.

Целью шестого этапа исследований было выяснение вопроса ' влияния подкормки облепихозого зома и микроэлементов на резис' тентность организма кроликов и молодняка крупного рогатого скота, имиунизирозанных вакциной СТИ. Опыты проведены на 10 кролика:: и 30 головах молодняка крупного рогатого скота.

На ездьшн этапе исследований проводили опыты по выделению варианта вакцинного итамма СТИ, устойчивого к антибиотику бициллин-3. В эксперименте использопны 50 белых мышей, 10 мо]

- G -

сих свинок и 6 кроликов.

При проведении опытов использовали реакцию непрямой гем-?глютинации (РИГА) по методике разработанной НИШ г. Казань утвержденной ГУВ ÎJCX СССР Й марта 1983 года, с применением иигенпого эритроцитарного диагнозтикуиа, изготовленного по эдифицированной методике НИШ г. Казань. Реакцию Уанье по ¿явлению сибиреязвенных преципиткпов ставили по В.Ц.Цидыкозу [975), превентивное свойство ;ьгвороток крг -и животных изучая по П.Н.Бургасову и Г.Н.Роккову (1972), антрзксиновугс пробу-э Э.Н.Иляхову (1964), показатель повреж^-шия нейтрофилов ППН) - по Фрадкину (1962) с окраской мазков по Лаппенгейку-рюкову, реакцию тормоксния миграции макрофагов (РТММ) - по уачену (1962).

Электрофорез в геле агарозы проводили согласно ре: женда-ии, разработанной В.М.Чекишевым (1978) и утверэдзниой ученым оветом института Экспериментальной ветеринарии Сибири и Даль-его Востока.

Выделение лимфоцитов из периферической крови кизотных роводили по Л.В.Адамчук и др. (1982) в нашей модификации, остановку Т—РОК осуществляли по Джо.^ал (1972), ЕАС-розетко-'бразезание - по Ь'евдео (1973). Определенна уровня комллеме.ч-'а в сыворотке крозг ¡.тавотных, гематологические и бактериоло-•ические исследования проводили по общепринятой методике.

Люминесцентную микроскопию проводили с меченой сибиреяз-юнной сывороткой, согласно наставления по зе применению.

. За период исследований проведены ""5 серий опитоз, в кото-)ых ..^пользованы 5СС белых майей, 4-5 морских свинок, 120 кро-шков, 31 овца и 380 голов крупного рогатого скота. Проведена 3520 серологи"<зскнх реакций и 2000 бактериологических иес-!Сдозз...)й. По реакции непрямой гемагглктинации (РИГА) пссле-{оззиы 30CÜ проб сывороток крови, по Уанье - 520. Презеютв-îoe свойство сывороток (ПСС) крови изучено у 120 проб, при зтон использована 500 белых мысе it.

Проведено 250 яейкоконцентрзций из периферической крови, юстэвлены 100 реакций по Е- и гАС-розетксобрззозаипи i: реакции повреждения нейтрофллоз (ППН) и 25 реакций тормо:.:е>:ия.

миграций макрофагов с фрах'мент/ии селезенки сенсибилиэир jan них сибиреязвенным микробом бе; ых мышей. Аллергизацию оргаки иэ швотных изучали на 114 кроликах, 31 овце и 200 головах крупного рогатого склад.

Расчет годового экономического эффекта проводили в соот ветствии с инструкцией 1.I0X СССР, БЛСХЮЛ, ВНИИ экономики сел: ского хозяйства (19о), по методике В.В.Носина (1971) u II.В. Никитина (1976, 1977).

Цифровой материал обрабатывали.метод"чи вариационной ст. тисчлки по Вснчикову А.И.(1963) и В.С.Асатиани (1964).

2.2. РЕЗУ ЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Эпизоотология сибирской я^вы в регионе Байкала, Бурятии и зоны БАМ Сибири и Дальнего Востока.

Большое внимание сегодня в регионе Сибири и Дальнего Boi тска привлекает нозоареал сибирской язвы ь зоне озера Байкал. Бурятии и БАМ.

Систематизированных сведений о сибирской язве на территории Бурятии до 1917 г не имеются. Однако б Иркутском государственном архиве хранятся материалы, свидетельствующие о и роком распространении этой болезни в прошлом среди животных на территории ны: .шней Бурятии. 1ю данным 11.А.Худякова, с IS25 по 1931 годы били зарегистрированы ^25 неблагополучных пунктов, в которых заболели I5II' кивотных, пали - 1158.

Наиболее полно эпизоотологический анализ заболеваемости анвотних сибирской яздюй в Бурятии проведен И.Л.Наймановым., По его дапнмм, за 3S лет (193 -1970 гг) антракс отмечали Б 15 адыкикстрг чшшх районах'из 19. Количество неблагополучие пунктов составило 616, забелели 4-5Ш л пали 3084 животных. Б структуре- заболеваемости на долю лошадей приходится неблагополучных пунктов, 80,22% заболевиих и 79,3% г.ав'чих животных; на долю крупного рогатого скота соответственно 25,43^, 16,07 и 16,7%; ко долю мелкого рогатого скота соответственно 6,7%, 2,52% и 3,11%. Минимальные показате-jiv преходятся ьа дола свиней. За рассматриваемый период ан-траг.с рсгг.с'хрироьали у лоиэдсН; з I , у крупного рогатого ско-"'1 в 13, у ог.ец в И и у ¿виней в 6 районах республики. За-Солов-чсмость животных хе>. указанных видов отмечена в Бэргу-

зинскоц, Двидинскоц, Кабанскоы, Цухоршибирскон и Тункинокои районах. Спорадические случаи возникновения болезни среди животных ц людей регистрировали ежегодно. Установлена в условиях Бурятии возможность активизации почвенных очагов инфекции чареэ 18, 22 и 36 лет поело последнего случая захоронения сибиреязвенного трупа.

В настоящее время эпизоотическая ситуация по сибирской язве в республике относительно благополучия". Последний случай заболевания людей отмечена в 1979 году.

Байкало-Амурская магистраль пересекс г 6 административных районов, которые числятся неблагополучными по сибирской язве. В Иркутской области таким районом является Усть-Кутский, в Бурятской ССР - Севаро-Байкальский, в Якутском - Алданский, в Аыурокой области - Зейский и Мезеновский, в "зба-риискон крае - Комсомольский. В этих районах известь- 25 неблагополучных пунктов, часть из них но существует (Ю.), хотя места нахождения некоторых были обнаружены в настоящее время.

Последний случай сибирской яззц в зоне строительства Байкало-Амурской магистрали был регистрирован более 10 ло* назад.

В настоящее время эпизоотическая ситуация по сибирской язве в регионе относительно благополучная.

Специфическая профилактика этой болезни в последние годы осуществляется сибиреязвенной вакциной СЗИ. В связи с ослаблением иммучогенной активности вакцины ИИ вакцинацию тавотных с 1982 года проводили повоеаест"о два раза л год, что было ¡вязано с увеличением материальных и трудовых затрат. Поэтому, начиная с 1989 года вакцинация нньотиых осуществляется новой сибиреязвенной вакциной из итанка 55. Иммунизацию проводг 1 однократно со .100% охватом поголовья крупного рогатого скота.

Таким образом, эпизоотическая ситуация о сибирской язве в данном регионе Сибири и Дальнего Востока характеризуется относительным благополучием, которое поддергивается интенсивной профилактической вакцинацией аивогных. Однако не исключена возможность активизации бывмих почвенных очагоз сибиреязвенной инфекции, связанное проведением небывалы, по оо'ьему земляных работ в данном регионе.

¿.3. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ В SK-. . . СГРЕЫАЛЬШХ УСЛОВИЯХ С 'ШРИ И ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА. 2.3.1. ОЦЕНКА ИМШНОГЕННОСЗИ ВАКЦИНЫ СТИ ПШ РАЗНОМ РЕ' ВШЕ И СПОСОБАХ ВВЕДЕН, 1 В ОРГАНИЗЫ ЖИВОТНЫХ.

Иммунобиологические показатели организма тел^т. привитых вакциной СИ.

Опыты проводили jia телятах 2-2,5 месячного возраста. Животных вакцинировали против сибирской язвы согласно инструкции по применению вакцины СИ!.

При атом было установлено, что в гематологических показателях кро"! подопытных телят в течение 4 месяцев поствакцинального периода но происходят каких-л"бо значительных изменений, кроме некоторой тенденции снижения количества эритроцитов от 7,.sí до 5,94 млн. клеток и повышения количества лейко-дитрв от 7,8 до 10,9 тыс. клеток. Показателе гемоглобина с незначительными колебаниями находился на уровне до вакцинального периода.

В шелковой картине крови подопытных животных с изменением их возраста отмечали тенденцию к увеличению общего и альбуминовой фракции белков, содержание которых соответственно составили 7,27 ± 0,15 vn/% и 3,72 * 0,С> иг/%. Общее содержание 'глобулиновой фракции белков равнялось 3,4f * 0,14 uv/%. При этой следует отметить, что иммунизация телят вакциной СИ не оказала заметного влияния па изменение его уровня,

. Динамика сибиреязвенных антител хррактеризовалась следующим образом. Через месяц иыыуш'чации положительные реакции по РИГА выявили j 60% телят. Среднеарифметический титр антител "чвнялоя 1:42 - 8, В основной преобладали животные о низкими титрами антител (1:30 - 1:60). Через 2 месяца полозителыше реакции по РИГА регистрировали у 77$ ¡швотнцх с средноарифио-тичаоким титром антител 1:43 * II. Через 4 месяца иммунизации положительные реакции по РНГА были выявлены у 55% телят, у большинство которых откачали низкие титры антител. Среднеарифметический титр антител составил 1:30 ± II (табл. 2.3.1 Л.).

Выявляются отдельный телята генетически предрасположенные к сильной!' иммунному ответу при вакцинации сибироязвенной вал-

Таблица 2.3.1.1.

Динамика сибиреязвенных аахагел в сыворотке крови телят, привитых лротзз сибирской язвы

Сроки исследования ¿мес.) ! Число [кивотных I 10тр. 1 " Показ ---Т - " 11:30 ! % ! « а т е "!--- 11:60 1 л и I % РИГА "!---Т 11:120 ! 1 1 % 1ц ± ! '1 ! Т 1 1

До вакцинации 24 19 79 5 21 1:8-1:16 - - - 1:3±1 - -

I 25 10 40 3 12 8 32 4 . 16 1:42-8 43,0 4,46.

г г? 5 23 10 46 3 13 4. 18 1:43*11 52,0 3,75

4'

II 5 3 27 2 18 I 10 1:30±Н 37,0 £¿38

циной СТИ. Однако в наших исследованиях у 40-45% телят, иг-у-низированных против сибирской я; вы в 2-2,5 месячном возрасте, иммунный ответ вообще отсутствоьал, что может быть обусловлено несовершенством иммунологической реактивности животных в этой возрасте. В связь о этим профилактическая иммунизация телят против сибирской язвы в возрасте 2-2,5 месяцев является, по наииы данный, нецелесообразной.

Иммунный фон у-коров. привитых вакциной СТО и ревакцинированных через 6 месяцев ионизации

Выявление иммунного фона проводили на дойных коровах ряда хозяйс: , расположенных в молочной зоне Бурятской ССР, через 12 месяцев после вакцинации и б мег.-цев ревакцинации сибиреязвенной вакциной СИ согласно ежегодного плана профилактических противосибиреязвенных мероприятий.

Через 12 месяцев иммунизации у коров колхоза "Гигант" выявляли группы животных о различными индивидуальными титрами антител. Так, в сыворотке крови 30% коров отсутствовали сибиреязвенные антитела. У 37,5% коров были самые низкие (1:30) и у 10% - клзкие (1:60) титры антител, при этом средние (1:120), высокие (1:240 - 1:480) и саше высокие (1:960) титры антител обнаруживали' соотв-тственно у 5%, и 7,57» животных. Среднеарифметический титр антител составил 1:131 1 34.

Несколько иным был иммунный 'фон у коров совхоза "Заветы Ильича" при их исследовании через 12 месяцев иммунизации.. Сибиреязвенные антитела отсутствоали в сыворотке крови 38% ни-ботных, у 48% коров выявляли го""кие и у 14% - высокие титры антител. Среднеарифметический титр антител равнялся 1:75 * 28.

Показатели иммунного фона у коров ОПХ "Иволгиисков" характеризовались следующими данными. Сибиреязвенные антитела втоутстзс&лм в сыворотке крови 25% животных, низкие и высокие титры антител отмечала соответственно в сыворотке крови 45% и 30% коров. Среднеарифметический титр антител равнялся 1:127 ± 34.

Через год иммунизации у коров колхоза им. Ленина в сыворотке крозк отсутствовали сибиреязвенные антитела у 40% животных, низкие показатели были у 30,2% и высокие - у 29,8%. Сред-

неарифметический титр антител равнялся 1:96 £ 20,

Иммунный фон у коров оовхоза "Орон'гойокий" был следующим. Сибиреязвенные антитела не выявлялись у 34,77?, низкие титры антител обнаруживали - у 30,5% и высокие - у 34,8?5 яи-вотных.

Резюмируя, вышеизложенные данные следует, что' иыыуноло--гическая структура у коров, подвергающихся екегодной ревакцинации в среднем по хозяйствам молочной зон: Бурятской ССР представляла следующим образом: через 12 месяцев иммунизации у 33,4% животных отсутствовали сибиреязве.шьге антитела, у

и 26,4% животных соответственно били низкие и високиз титры антител. Это обуславливает необходимость показания к ежегодной ревзкцннаци" яивотных к указанному времени иммунологическим показателям, в напих исследованиях у 73,животных.

По-видимому, выявленные неодинаковые показатели иммунного фона у коров хозяйств молочной зоны Бурятской ССР объясняются различным состоянием иммунобиологической реактивности организма хнвоишх, которое зависит от уровня кормления, уло-да, содержания и других факторов и ч.^ немаловажно зависит от качественно проведенной профилактической вакцинации животных против сибирской язвы.

Совершенно иная ситуация по показанию к повторной ревакцинации складывается у животных, которые подвергаются ревакцинации ежегодно с интервалом 6 месяцов. Б нашем опыте среди таких коров учхоза "Байкал" только у нивотньис били низ-

кие ; ^муиологические показатели по РИГА." 35,1?$ коров имел! высокие титры антител и у них отсутствовали показания к повторной иммунизации.

М: гереснымн являются данные по влиянию ревакцинации на" уровень титров сибиреязвенных антител, полученные нами у 14 коров. Здесь отмечали увеличение количества ..ивотних с низкими иммунологическими показателями. Так, у 7 коров отмечали снижение титров антител от 2 до 8 раз, у 4 животных они оставались на прежнем уровне, а у 3 - регистрировали увеличение их от 2 до 8 раз.

Следует отметить, что снижение титров сибиреязвенных ан-

тител отмечали у тех ответных, у которых перед проведен: м ревакцинации были высокие тигры. Увеличение же титров сибиреязвенных антител отмечали у коров, имевших перед ревакцинацией низкие показатели по РИГА.

Выпеполученные данные говор .т о необходимости дифференцированного подхода к животным, подлежащим к ревакцинации, и обосновывают необходимость проведения селективной ревакцинации.

Гуморальный поствЬкциналъний сибиреязглнный иммунитет у „роликов и крупного рогатого скота, подвергнутых реьлк-цинации вакциной СТИ.

Иммунобиологичоские показатели организма кроликов.

У кроликов, подвергнутых двукратной иммунизации против сибирской язвы вакциной СИ, изменения гематологических показателей крови характеризовались следующий образом: отмечали заметные изменения морфологического и функционального характера у эритроцитов. Регистрировались с неровными краями, измененной величины и особенно иного гипохрошше эритроциты. Содержание гемоглобина в крови кроликов несколько повышалось госле первой вакцинации, но после второй вакцинации его уровень опускался п. шерно до исходной величины. Количество лейкоцитов после первой вакцинации увеличивалось, после повторной иммунизации отмечали резкое'их уменьшение. Наблвдали нарастание процента зозинофилов и нейтрофилов, после повторной иммунизации значительно снижался. Количество моноцитов и лимфоцитов после ъакцинации енге; лось, а при повторной иммунизации увеличивалось.

В белковой картине сыворотки крови подопытных кивотных отмечали при повторной иммунизации увеличение общего белка со значительным изменением в сторону увеличения гамма-глобу-линовой фракции.

У повторно иммунизированных кроликов динамика антитело-образования характеризовалась постепенным повышением его уровня, который достигал к 45 дню титра антител до 1:89 ± 23. При повторной иммунизации усиливал"сь степень поствакцинальной сенсибилизации организма подопытных кивотных. Через 3 ме-

сяца повторной иммунизации у всех исследованных ¡яивотных ан-траксиновые пробы были положительными. Подтверждением этому явились положительные результаты, полученные при постановке теста показателя повреждения нейтрофилов (0,19 - 0,37), при отрицательном контроле (0,10 - 0,15).

Таким образом, повторная иммунизация кроликов вакциной CÏW обуславливает значительную иммунную перестройку организма животных.

Показатели титров сибиреязвенных антител у короп, повторно иммунизированных с интерьилом 10 и 30 дпай„

Проведенные нами опыты по оценке эффективности репмт'упг-зацпи коров с интервалом 10 и 30 дней пш.:унологическт. vero-дамп показали следующее. Через 2 ¿¡еепца релммуниэаци:; г интог-в^лон в 10 дней наблюдали снижение титров сибирепзве. аых аь'--тител в 2 слишним раза (до 1:168 £ 29) по сравнению с титрами антител животных, привитых однократно (1:384 * 45). Откачали ¿JOU0U0U ПОДОВЛСШШ уронш ïlispos си&рЕЗКШК

Подобное явление наблюдали н при реш.^ут:за»ш коров _ интервалов I месяц. Так, например, дс роиквуяизадии средне-ар::ф;:атичео1«ш титра антител у :шбоз:шх опытных и кспхроль-пых групп не икали достоверной разницы и равнялись 1:523 ïû и 1:480 £ 19 .соответственно. Через ?, месяца рзкммунизлшп наблюдали почти 6-ти кратное снижение средяеарг.^оточсского титра сибиреязвенных антител у кивотных, подвергнутых peHirey-низацип (до 1:90 í 22) и в дальнейшем fin л ¡иже по^зэтолеп. корог, привитых однократно (рис. I).

Это, по-видимому, объясняется нейтрализацией повторно введенного антигена антителами, образованными после первого г введенп вакцины.

При проведении реиммунизаци,. коров в интервале 10 дней пятикратно увеличенной дозой вакцины СИ был получены следующие результаты/ у животных, которые до реикауиизации имели очень высокие титры сибиреязвенных антител (1:480 - 1:960) через 2 месяца отмечали подавление титров этих антител в среднем от 1:560 ± 17 до 1:160 ± 31. В противоположность этому у коров, которые имели низкий уровень сибиреязвег :к антител, отмечено увеличение его в 2,5 раза.

Р^с. I. Динамика сибиреязвенных антител у опытны:: и контрольных клзотных

Это подтверждался высоким показателем npjBCHSHSuoP активности сывороток крови (ПСС)., который был в 2 раза зкио н равнялся В0% через 6 месяцев реиммунизации.

Вопросы коррекции иммунного ответа на вакцинации сегодня являются ванными задачами в проблема эффективности специфической профилактики инфекционных болезней. Это ас самсо от-• носится и к профилактике сибирской язвы.

Исходя из вышеизложенных лобрааений н"т были проведз-ны опыты по ревакцинации крупного рогатого скота с интервала1: 3 месяца повышенной дозой вакцины СТИ.

Через 1-2 месяца ревакцинации наблюдали значительное повышение уровня среднеарифметического титра сибиреязвенных тител в сыворотке кров- животных, ревайцинпрованных 5 увеличенной дозой вакцины СИ (I:36G ¿ Юб и 1:492 * II ) п его сохранение на высоком урозно в течение 6 месяцев ¿1:37?;

1 78) (рис. 2).

У животных, ревакцинировашшх первичной дозой, не отмечали значительного повышения уровня титра сибиреязвенных :.<;■•-•■ тител, хотя он бил вшо по сравнении с :::ивот:и"гл, правпшг/. ' однократно. Среднеарифметические титр:, антител равнялись по срокам исследований соответственно 1:240 - 39, 1:193 - 25, I:IS0 i 45, тогда ка" у однократно привитых яияотянх среднеарифметические титры антител были нп~е и равнялись соответственно 1:102..'* 19, 1:150 ± 21, 1:162 ± 43 и 1:126 ¿ 42.

Результату исследований превентивной активности сывороток крови показали, что у ревакципиров'чных коров ини были в

2 раза выше, чем у однократно привитых кизотных (80% и 40% соответственно).

В этом же оп"те наблюдали значительное повышение числа кивотнь... с высокими показателями титра антител по РИГА до . 90:5, которые снижались через б месяцев ревакцинации до 70%.

У однократно привитых в это время число животных о низкими показателями штра антител было 90%, с высокими - 10%.

При этом отмечали усиление активности поствакцинального клеточного иммунитета, подтверждаемый полонительной антракси-лозой пробой. У однократно привитых животных антрэксиновые лробы были отрицательными.

Таким образом, ревакцинация коров повышенной дозой ( 5

1:500

г 1:400

а.

¡5 1:300

1:200

1:100

/

/

/

/

\ 2 группа

1 группа 3 группа

ы 40

До ревакцинации 1

6 Сроки исследования (месяцы)

Рис. 2. динамика сибиреязвенных антител у коров, ревакцинированных разными дозами вакцины СБ'

кратно) и интервале времени 3 месяца может иметь практическое ¡значение в угрожаемых зонах по сибирской язве с целью коррекции иммунного ответа у привитых животных.

Кожно-аллергическая реакция у животных, ревакцинированных сибиреязвенной вакциной СИ.

Усиление интенсивности аллергических реакций на аптрак-син наблюдали у лабораторных и сельскохозяйственных кивопик, подвергнутых двукратной иммунизации вакциной СИ, в различных интервалах ьо времени и разных дозах,

У 7 кроликов, иммунизированных дважды вакциной СП! с интервалом 7 дней, при постановке антраксиновой пробы отвечали положительные реакции через 7 и 14 суток исследования с оценкой в + ++, через 3 месяца у 4 животных с оценкой в •-+ и у 3

- сомнительные реакции.

У 5 коров, реиммунизированных с интервалом I ыэсяц, при постановке антраксиновой пробы через 6 месяцев отмечали положительные аллергические реакции у 2 с оценкой у 2 -++t и у одной - в ++, тогда как у однократно привитых 5 коров положительная реакция на введение анграксина отсутствовала.

Аллергическое исследование антраксинои серии № 134 проводили на 20 коровах, ревакцинированных с интервалом 3 меся-, ца рекомендуемой и пятикратно увеличенной дозами вакцины СИ. При этом динамика проявления аллергической реакции характеризовалась следующим образом. У 10 ревзкцшшрованньг коров рекомендуемой дозой, через 24 часа положительные реакции были у 4 (40%). Толщина кожной складки равнялась от 10 до 16 мм, диаметр припухлости от 14 до 36 т, при исходной толщине кожной складки 5-7 lj.

Через 48 часов положительна реакция на антраксин сохранилась только у 2 коров (20%), толщина кожноч складки составляла 12 мы и диаметр припухлости - 11-15 ми.

Анграксиновая проба у W коров, ревакцинированных через 3 месяца пятикратно увеличенной дозой вакцины СИ, через 6 месяцев характеризовалась более интенсивной реакцией. Через 24 часа положительно реагировали 6 голов (60$), отрицательно

- 4 головы (4 05S). Через 48 часов положительно реагировали 2

(20%), отрицательно -.8 коров (8С »)• При этом толщина ко: ной складки была з пределах 9-14 мм г диаметр припухлости составлял 16-20 мм.

Аналогичные результаты получили при постановке антракси-новой пробы у коров, ревакцинированных вакциной СТИ через 6 месяцев. Спустя 4 месяца ревакцинации у всех исследованных животных отмечали поли^ительные реакции на антраксин.

Таким образом, ревакцинация коров вакциной СИ усиливает оенсибилизацию организма животных на продолжительное время, тог;, j как у однократно привитых животных сенсибилизация организма характеризуется меньшей степенью интенсивности и кратковременностью. При этом с.¿¡пень усиления сенсибилизации организма зависит от времени интервала ревакцинации и дозы вакцины ста.

Рекпи выделения лимфоцитов периферической крови гивотто: в смеси грздиента плотности поливинпло-н;" сп-.грт-верогрзфин и динамика Т- и В-лим:Т.они-тон -тоост кроликов, иммунизированных вакциной СШ

Одним из необходимым и первостепенным этаном в определении и оценки Т- и Б-систем иммунитета крови животных является получение чистой .звеси лимфоцитов.

Нами рекомендуется усовершенствованная технология выдело-n;:;i лимфоцитов из периферической' крови, используемая в медицинской практике для получения лимфоцитов из крови человека (Л.В.Адамчук и др., 1982), для использования в ветеринарной иммунологии.

Установлена опытным путем оптимальная удельная плотность, .'¡рп которой обеспечивалась удовлетворительная чистота лимфоци-Tapnoii взвеси, равняющаяся 1,090 г/см2. Оптимальными режимами центрифугирования являлись 1500 об/мин в течение 35 мин для крови телят и овзц, 10-12 мин - морских свинок, 10-15 мин -белых мышей.

При этом средний выход лимфоцитов составил у крупного рогатого скота 3,2хЮ9 кл/л, жизнеспособность 96%, примесь моноцитов 10-17%; у овец - 3,8хЮ9 клД, жизнеспособность 9655, примесь моноцитов 11%; у кроликов - соответственно 2,6x10 кл/л, 94%, и 10%; у морских свинок - соответственно 3,0x10 кл/л,

85%, 11%.

Динамика среднеарифметических показателей Т- и В-лимфоци-тов отрзжала общую тенденцию характерную для. всех привитых вак-цинойСТИ кивотных. До иммунизации средние .относительные показатели Т- и В-лимфоцитов равнялись соответственно 32% и 12%. К 8 дню иммунизации наблюдали повышение среднеарифметического показателя Т-ли!'5оцитов в противоположность которому увеличение показателя В-лимфоциюв (13%) не было. К 15 дп относительные показатели Т-лимфоцитов (25%) .юшаались, тогда как у В-лимфоцитов (26%) повышались в 2 раза.

Повторное повышение показателя Т-лимфоцитов (50%) отмечали па 30 день иммунизации. В то ле зрема регистрировали соответственно поименно показателя В-лимфоцитов (18%,. К 45 дг.и показатель Т-лнмфоцитов (40%) находился на уровне предыдущего срока исследования, а показатель В-ликфоцитов ч >%) значительно увеличился.

Таким образом, при фортлозаиип поствшсцштлыюго противо-

сп^'лрзязвеиного иг.'укигеза, з иммуногенезе, осуксстэлпского Ти В-лимфоцнтани, происходили, в на^ем опыте, обратно зависимые ч:.."С!ГЛ!,, V пов:г!йпяен сзпссшояьясго чг-сэзг^гя Т-лаг'^оиятоп сооисгетзсшю яои::::олск показатель 3~:гл:'1о,л,лгэ'з. Откгчпгп некоторую зависимость 'е:<ду откосителькш показателе'! В- т^оип-701! !1 урОКЧОН ТСхрОЗ ЗКТПСПЛ» " ГТП;:• ЕГ'ГСГ.1 ото-

сатольного пс:соз .теля ¡Кта^оцктоз соотзогста^пко угедхпиезлея титр сибиреязвенных оитаиел и наоборот.

Иммунологический показатели организма дигоття: при оральном метоле иммунизации вакциной СП!

Проведенные нами слиты по оценке орального метода нммун1"-злде» лао'ора-юрных и селгскахсзяИсгвешшх ьиьегних к^пуно.юги-иозтш методами позволили получить следусда данные.

У белых ипиеи, вакцинированных перорзльно в дозе 0,5 мл, иммунитет бил выявлен уг.е через 2 суток. При экспериментальном их заражении штанном II вакцины Ценковокого про-знт зацит составил 33. На 5 сутки иммунизации все взятые в опыт белые кипи ($) выдергивали заражек^е, при гибели всех контрольных.

При оральной иммунизации кроликов 100 кратной подкожной дозой вакцины С'Ш для озец не отмечали за весь срок '"тследова-

кия температурной реакции организма и заметных сдвигов в морфологической картине крови.

В ьеЛковой картине крови кроликов на 12 день оральной иммунизации отмечали в сыворотке крови увеличение общего белка и гамма-глобулиновой фракции. Удалось выовип'ь сибиреязвенные антитела по РИГА • титрах 1:10 и 1:40. Было выражено и превентивное свойство сывороток крови.

У крупного логатОТо скота, иммунизированного орально 100 кратной подкожной дозой, уже на 3 сут'ги выявили сибиреязвенные антитела, которые имели тенденцию роста до 3 месяцев. Было выражено и превентивное свойство сыворотки крови. Однако антрак-синоБые пробы у опытных коров были отрицательными.

У овец образование сибиреязвенных антител при иммунизации оральным методом 100 кратной 'подкожной дозо.; вакцины СТИ имели те *е тенденции роста, уже на 3 сутки титр сибиреязвенных антител ровнялся 1:40 * 17, который через 2 месяца составил 1:127 1 22 и был на уровне не меньше.чем при подкожном методе иммунизации. Сыворотка крови иммунизированных овец проявила ПСС 57%.

Таким образом, при оральном методе иммунизации против сибирской язвы животных стократно увеличенной дозой вакцины СТП наблюдали те же иммунологические сдвиги, регистрируемые иммунологическими методами, что и при подкожном способе иммунизации животных.

2.3.2. Влияние неспецифических стимуляторов на

поствакциналььый сибиреязвенный иммунитет

Влияние жома из плодов облепихи на резистентность организма кроликов до и после вакцинации против сибирской язвы

В Настоящее время придается бол! ое практическое значение веществам и средствам, обладающим иммуностимулирующим свойством и повышающий резистентность животных к инфекционным болезням. Проводимые в этом направлении исследования являются весь^ ыа актуальными и ценными. Исследованиями,проведенными И.И.На-тафоновым (1965-70 гг), на кроликах, телятах и ягнятах установлено стимулирующее влияние жома из плодов облепихи на организм животных.

Еом, как продукт отхода при производстве облепихового масла, содержит ценные питательные и биологически активные вещест-

ва.

Б наших опытах изучался вопрос влияния жома из плодов облепихи на резистентность организма кроликов, вакцинированных против сибирской язвы.

При проведении исследований были получены данные, указывающие о благоприятном влиянии жома из плодов облепихи на организм кроликов. При этом позышался один из показателей неспецифической резистентности организма - комплемент с 0,03 до 0,07 мл, не оказывал отрицательного влияния на тоствакцинальный сибиреязвенный иммунитет. Сибиреязвенные антитела выявлялись в титрах 1:16 - 1:128. Наблюдали усиление клеточного фактора сибиреязвенного иммунитета, выражающийся резким усилением лейкопозза в поатвакцинальный период и повышением степени се зибилизаг'и организма опытных кроликов по сравнению с животными контрольной группы.

У опытнцх крол-ков наблюдали положительные реакции 1 . ан-траксин, тогда как у контрольных положительные реакции отсутствовали.

Из вышеизложенного следует, что лом из плодов облепихи при дл)-тельном скармливании (не менее 2 месяцев) кроликам в дозе 10 гр на I кг живей массы может бы*ь использован как средство неопецифической стимуляции поствакцинального сибипепзвен-ного иммунитета.

Влияние макроэлементов на биохимические показатели крови и титр сибиреязвен"ых антител у телят

В настоящее время придается большое практическое значен-е выявлению факторов, способствующих неспецифической стимуляции иммунитета, к каковым относятся и микроэлементы (Н.К.Цусабиев и др., 1970, 1978; И.Г.Мухамедова, 1975).

Нами изучались содержание общего белка и его фракций, общих липидов, холестерина, кетоновых тел и динамика сибиреязвенных антител в разли;ные сроки поствакцинального периода в сыворотке крови телят, иммунизированных такциной С1И, при подкормке их комплексом солей из микроэлементов.

Опыты проводили нг 2 группах животных из 30 телят в экстремальных условиях Забайкалья, где телята одной из групп в

течение месяца ежедневно до и после вакцинации получали смесь ио солей микроэлементов, приготовленной на основе поваренной соли, в дозе 20 граммов на I голову.

Б периоды исследований после вакцинации против сибирской язвы содержание общего белка и его фракций незначительно увеличивалось, но достоверной разницы в их уровне у .елят опытной и контрольной групп не установили. С возрастом у животных у животных контрольной группы альбумино-глобулиновый коэффициент повышался и был бо^ыне единицы. Не отмечали достоверных изменений также в уровне общих липидов у телят о^еих групп, которые к концу срока исследований находились в пределах 160,7 - 166,3 иг/%. Аналогичное явление было отмечено и в показателях холестерина и кетоновых тел.

Следует отметить, что в уровне исслс„ор'чшых показателей крови достоверных различий между группами телят, получавших под1. рмку смеси из солей микроэлементов и не получавших, к КоСлвдали.

Исследование динамики сибиреязвенных антител у телят опытной и контрольной групп показало, что через I месяц после иммунизации у телят опытной группы антитела выявлялись у 60% животных, тогда как у контрольных - 40%. Среднеарифметический титр сибиреязвенных антител был достоверно выше (1:64 - 21), чем у контрольных животных (1:20 ± 5). Через 2 месяца иммунизации у животных опытной группы сибиреязвенные антитела выявляли у 80% телят и среднеарифметический титр находился на уровне предыдущего срока исследований. К концу срока исследований (5 месяцев) у 65% кивотных опытной группы выявлялись сибиреязвенные антитела со среднеарифметическим титром антител 1:44 1 10. В это же время у животных контрольной группы антитела выявлялись у 42,8% телят с низким среднеарифметическим тигром 1:16 * 5.

Таким образом, результаты полученных данных показывают, что проведенная подкормка комплексом солей из микроэлементов не оказала заметного влияния на повышение урогня изученных биохимических показателей крови подопытных животных. Вместе с тем отмечаегся более.высокий уровень образования сибиреязвенных антител у телят, получавших ежедневно подкормку смеси солей из микроэлементов по сравнение о уровнем антителообразования у те-

лят контрольной группы, что имев! немаловажное значение в экстремальных условиях Забайкалья в повышении имыуногенности сибиреязвенной вакцины ста.

2.3.3. Влияние экологически неблагополучных

факторов (пестицидов) на поствакшшаль-ный сибиреязвенный иммунитет у животных.

Влияние карбофоса и гиподермик хлорофоса на иммунологическую реактивность организма животных:.

В.связи со сложившейся в ветеринарной практике комплексным проведением профилактических, противоннфекциг пых и иип-зионных мероприятий, возникает необходимость изучения влияния противопарззитарных и инсектицидных препаратов "п формирование поствакцинального иммунитета у животны.

Б проведенных нами в 3 сериях опытах по влиянию карбофоса и гиподермин-хлорбфоса на поствакцинальный сибиреязвенный иммунитет выявили с;.-дующее: в первой серии опытов обнаружили, выра ненное '"чгибируюцее влияние карбофоса на образование сибиреязвенных антител. Так, например, у групп проликов, обработанных карбофосом за 2 и 7 дней до вакцинации, сибиреязвенные антитела выявлялись лишь на 15 день-иммунизации в титрах 1:2Ь и 1:37 соответственно, в остальные сроки исследования сиби, злзвенные антитела в сыворотке крови отсутствовали, в то же времш у группы кроликов, подвергнуты:: одной иищ изации, выявлялись они во все сроки исследования. Низкий уровень антителообразованиг отмечали и при одновременном проведении обработки карбофосом и вакцинации против сибирской язвы. Это явление торможения иммунного ответа подтверждалось и отсутствием превентивной ак тивности сывороток крови опытной группы кроликов.

Противоположная картина нами регистрировалась у кроликов, которых вакцинировали против сибирской язвы за 2 и 7 дней до их обработки карбофосом. В этом случае наблюдали усиление процесса антителообразовапия. В этих группах кролик.-в антитела выявлялись постоянно в высоких титрах (1:204 - 24 - 1:176 — (БО-1 и были гораздо вшзе по сравнению с титрами антител у кроликов, привитых одной вакциной СМ (рис. 3). Это же самое подтверждалось и показателем превентивной активности сывороток .)о?и,

--1 грунт

---- 2 группа

--- 3 группа

---- 4 группа

. ---- 5 группа

7 груша

Рис.

75 90

Дни исследования

3. Д!!вэлика спбиреяазе.чшЕ: ацтпгзл з крэянов^закцинировашшх гшотнз сибирской язва п сбработашгк кпрбайсо'л (I серия).

которые ииеспечивали высокий процент защиты белых иьиеИ (60% и 80% соответственно),

Таким образом, в этой серии опытов нами установлено двоякое влияние карбофоса на формирование поствакцинального сибиреязвенного иммунитета у животных. В одном случае торможение ан-тнтелообразования, если обработка животных карбофосом проведена за 2 и 7 днгй до или одновременно с иммунизацией. В другом случае усиление интенсивности стимулирования антителооОазованип под влиянием карбофоса в случае оо'раб^лш им животных через 2 и 7 дней после иммунизации вакциной СТИ.

Для выявления оптимальных сроков обработки карбофосом после иммунизации, при котором было бы наиболее выраженное явление стимулирования антителообразо^ания, провели вторую серию опытов. В этой серии опытов кролики были обработаны после их иммунизации в сроки 2, 7 и 12 дней. Эффекты ус... ¡нип антитело-образования, в наше.., опыте, наблюдались чорэз 60 дней 'ммунмза-ции. Но наиболее выраженный ¡-Мфект стимулирования антителообра-зования был у кроликов, подвергнутых обработке карбофосом через 7 дней после иммунизации вакциной СИ, среднеарифметический татр антител которых равнялся 1:330 (рис. 4). Это явле-

ние стш$м&,ояашт антлтелообразовашш подтверждалось высоким показателем правеют чого свойства сыворотки крови (ПС ) кроликов опытных группг которое било вше ПСС крови кроликов контрольной группы.

Таким образом, наиболее оптимальный гффект стимулирования зптителообразозания после ¡и. унизацпи животных против сибирской язвы можно достигнуть при обработке их карбофосом через 2-12 дней иммунизации.

В третьей серии опытов изучали влияние гкподершн-хлорофо-оа на поствакцинальный сибиреязвенный иммунитет у молодняка крупного рогатого скота при разных условиях обработки.

!Тп:1 обработке их за 2 дня до и одновременно с иммунизацией наблюдали угнетение антитолообрэзования! на 7, 15 и 30 дни исследования. Особенно это явление было в ражено в группе животных, где обработку гиподерьган-хлорофосом проводили за 2 дня иммунизации вакциной СТи. В г -ей группе наблюдали двукратное выраженное угнетение энтителлобразовагаш в периоды индуктивной и про-

е? о я я и и со

а

и

3 группа 2 группа 1 группа

4 группз

Дни исследования

Рпс. 4. Дила12и;з татроз слиирз.таснанх аититзл у кроджоз» цриитсс гготав сасйрскоЛ .тан и обработанных кпрбо'юоои (2 серая).

I

дуктивной фаз иммуногенеза.

В противоположить этому в группе животных, подвергнутых, обработке гиподермин-хлорофосйм через 2 дня иммунизации против сибирской язвы, отмечали некоторое усиление эффекта антителооб-разования, которое наиболее ярко проявилось на 60 день иммунизации. В этот период среднеарифметический титр сибиреязвенных антител равплся 1:330 * 107,5 и был в 2-3 раза выше показателя среднеарифметического титра антител других групп лвотных (рис. 5).

Характерных™ были и показатели превентивного свойства сывороток крови, изучение которых было проведено на 15 и 30 дни иммунийации. В группе животных, где обработку гиподермин-хлоро-фосом проводили через 2 дня после иммунизации пок^атель ПСО крови был выше чем у животных, обработанных гиподермин-хлоро-фосом за 2 дня до и одновременно с иммунизацией. Тагае был он выше и показателя крови животных, привитых только зкциной СЛ1 (контрольных). • ь

Следует несколько остановиться на динамике сибиреязвенных антител, выявляемых по реакции Уанье.

В периоды индуктивной и начала п э уктивной фаз иммуногенеза в ypoBi.j преципитинов опытных групп животных наблюдалась некоторая тенденция i повышению, хотя они в эти период,., были значительно ниже показателя преципитинов в крови животных, вакцинированных однс вакциной СТИ. Это явление наблюдали во все сроки исследования.

Явление выраженного инг-.Лрэвания гиподермин-хлорофосом уровня преципитинов наблюдали у кивотиых опытных групп на 60 день иммунизации. Оообенно, это явление было выражено в группе животных, у которых в этот срок исследования отмечали интенсивный рост титров антител, выявляемых з РИГА.

У нивотных опытных групп в динамике преципитинов наблюдали следующую тенденцию. При понижении титров сибиреязвенных ш-тител, выявляемых в гНГА, наблюдали повышенна уровня преципитинов, и в противоположность этому при пс.ышении т«тров сибиреязвенных антител, выявленных в РИГА, понижался уровень преципитинов. По-видимому, дейст" ie гиподермин-хлорофоса характеризуете* некоторым избирательный действием на различные клоны по функции

Рис. 5. даишка средаюлрп;;1.2тпчес2зг титре.; тятптел по РИГА ыолодияка крупного рогатого скота, пузатого прэпт слйхрсгсол яззы а обработанного пшодоисш-пгроГюсо:.-,

антителообразующих клеток. В данном случае ингибицией 0бра80-нин преципитинов и стимуляцией образования антител, выявленных в РИГА, в зависимости от разного способа обработки животных подлежащих к иммунизации против сибирской язвы.

Таким образом, при проведении обработки животных гиподер-шш-хлорофосом перед вакцинацией против сибирской язвы или одновременно наблюдали торможение иммунного ответа;

В то же время проведение в цачале иммунизации вгчциной СИ и, затем, через 2 дня обработки ги одермин-хлорофосом усиливает иммунный ответ, характеризующийся интенсивным антите-лообразованием у животных.

Поэтому при проведении массовых прививок у крупного рогатого скота о целью профилактики сибирской язвы нед.лустино проведение одновременной обработки животных гиподермин-хлоро-фосом против подкожного овода. В то же время ус.- човлеио наиболее допустимым обр 5отку животных гш^дермин-хлорофог ">м проводить через 2 дня и более поздние сроки поело иммунизации их против сибирской язвы.

К вопросу селекции варианта вакцинного штамма СШ, устойчивого к антиб! .ку бициллин-3

Вопросы предупреждения бациллносительства и бацилх выделения при сибирской язве являются важнейшей задачей, решаемость которой дол^ча обеспечиваться санацией животных рёкова-лесцентов или клинически здоровых носителей.

В связи с этим Х.Х.Абдул ин (19?о) считает весьма целесообразным создание антибиотикозавистгах дивых вакцин для оо-четанного применения с делыо санации организма.

Поэтому в данном разделе работы мы попытались, используя метод отпечатков, выделить вариант вакцинного штамма СШ, обладающего устойчивостью к антибиотику бициллин-3.

Объектом исследования служила микробная культура вакцинного штамма СИ! серг 22, из которой, используя метод отпечатков, но питательной среда с антибиотико' бициллии-З, после 7 кратного поресева с разними интервалами во времени удалось выделить отдельные колин"« сибиреязвенного микроба, которые проявляли устойчивоотх/« данному антибиотику и был условно обоз-

начен нами как вариант вакцинного штамма СТИ (СТИ').

Микробные клетки, полученного варианта вакцинного штамма СТИ, в отличие от микробных клеток исходного вакцинного штамма СТИ, были короче и толще, состояли в основном, из коротки цепочек, по Граыу крзсились положительно. На ЫЛА вырастали в виде небольших круглой формы колони», cl слабо выражен^-ной шероховатостью, и ровными краями, слизистой консистенции. Они обладали определенной иммуногенной активностью. В отличие от них микробны. клетки вак"чнного штамма CDI и II вакцины Ценковского на селективной питательна., среде, предложенной нами, не росли. Полученный вариант вакцинного штамма СПИ был подвержен к популяционному давлению. При введении в организм лабораторных животных он терял приобретенное свойство устойчивости к антибиотику бициллин-3 и при пос-огчных пересевах восстанавливал вновь это свойство. При одноврёменном введении с am биотиком бициллин-3 в организм лабораторных животных, пос-.е выделения его из организма, сохранял свойство устойчивости к данному антибиотику.

Полученный вариант вакцинного штамма СТИ при длительном хранении в условиях холодильника в 30% растворе глицерина в виде споровой суспензии не терял свое приобретенное свойство антибиотикоустойчивости.

Таким образом, используя антибиотик бициллин-3 в качестве индуктора и метод отпечатков, нам удалось выделить вариант вакцинного итамма СИ". , обладавшего выраженной устойчивостью к антибиотику бициллин-3 и хорошо растущего на конструированной нами питательной среде, содержащей данный антибиотик.

ВЫВОДЫ

I . Ло статистическим данным эш—оотическая ситуация по сибирской язве в зоне озера Байкал, Бурятии и БАМ характеризуется. в течение 1954 - 1972 гг крайней напряженностью. Ежегодно регистрировались крупные вспышки инфек:ми среди всех видов животных. В структуре вспышек преобладали, в основном, заболеваемость лошадей и крупного рогатого скота. Вместе с тек имеются районы (Окинский, Северо-Байкальский, Баунювский, Закамен-ский ), гдё сибирская пзв^ никогда не регистрировалась.

2. Эпизоотическая ситуация по сибирской нзвз в указанной зоне за последние десять лет /1980-1921гг/ характеризуется относительным благополучием, которое преимущественно обеспечивается интенсивной иммунизацией о I00% охватом всего восприимчивого поголовья. Однако наибольшая вероятность розник-новения этой инфекции сохраняется среди скота индивидуального сектора, ко™орые по тем или иным причинам остаются иногда но привитыми.

3. Проведение небывалых по объем, земляных работ в зоне озера Байкал и Бурятии при строительстве БАМа и нарастание вредных воздействии хозяйственной деятельности, ухудшающих экологическую обстановку в этом регионе, создали условия возможного проявления активности ранее выявленных по .¿енных оч_-гов сибирской язви. В связи с этим возникает необходимость усиления строгого эпизоотического и эпидемическог гэдзора и проведения ревизий эти очагов.

4. Сибиреязвенная вакцшо- СТИ в экстремальных условиях Забайкалья не обеспечивает необходимый уровань иммунитета у животных при однократной вакцинации и требует её двукратного примет. ..ня.

Трс .летнее наблюдение за эффективностью применения сибиреязвенной вакцин;- '13 штамма 55' при однократном испг ьзовании на крупном рогатом скоте показали сё целесообразность и экономически более ■•¡годным, чем вакцина СТИ в экстремальных условиях Забайкалья.

6. Определенно общего I мунного статуса животных, вакцинированных против сибирской язвы при напряженных эпизоотичес ких ситуациях, позволяет контролировать его состояние и проводить научно- обоснованную импулокоррекцию. Считается возмод-нш проведение иммунокоррекции путем ревакцинации в интервал, времени 3 и б месяцев иммунизирующей и повышенной /5 кратно/ дозами вакцины СИ.

7. Эксперимент льная разработка орального ..!&тода иммунизации против сибирской язвы создает н^ ^посылку практической реализации профилактики этой болезни в возникший природнчх очагах у диких нпдотных

8. Применение ¡«специфических стимуляторов /сблепихозый :::ом и микроэлементы/ при вакцинации против сибирской чзь_ но-

лодняка крупного рогатого окота усиливают антителообразование и клеточные факторы иммунного ответа в экстремальных условиях Забайкалья.

9. Пестицид- карбофос и инсектицид - гиподерыин - хлорофос, как экологически неблагополучные факторы, сказывают ингибирую-щее действие на формирование поствакцинальниго сибиреязвенного иммунитета у животных при проведении обработок за 10 дней до или одновременной вакцинации.

10. Используя метод отп чатков селекционирован вариант вакцинного штамма СТИ устойчивого к антибиотику бициллин-3.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ И РЕКОМЕНДАЦИИ

/

1. Одобрены и приняты к внедрению ГУБ Госагропрома СССР дополнения к " Наставлению по применению ги^й сибиреязвенной вакцины СГЛ" от б марта 1986 года и " Наставлению по применена закцины против сибирской язвы животных нивой споровой яио-

визированной из штамма 55" от 29 декабря 1986 года п.2.II, в которых определены оптимальные технологические рекимы соче-такного применения сибиреязвенных вакцин СТИ и из штамма 55 с инсектицидом гиподермпн-хлорофосом на крупном рогатом скоте.

2. Рекомендуется для создания устойчивого иммунитета у животных в стационарно неблагополучных пунктах по сибирской язве проводить вакцинацию два раза в течение года: первый раз согласно наставления, второй раз проводить ревакцинацию животных г.о истечении 3 ыесяцсв в дозах иммунизирующей и 5 кратной. При ртом перед ревак:, ¡нацией необходимо провести выявление отдельных животных с низкими показателями по РИГА для ■ последующего проведения селективной ревакцинации. Данный способ с успехом можно использовать не нарушая плана обцелро-филактичьских мероприятий, проводимы), при промышленном веде-, нии животноводства / Удостоверение на рационализаторское предложение ¡¿19 от 15 октября 1984 г ВНИВИ г. Казань/.

3. В целях предупреждения ингибирувдр^о влияния карбофоса на формирование поствакцинального сибиреязвенного иммунитета предлагается способ иммунизации кроликов против сибирской язвы /Авторское свидетельство te 1345399 от 5 июня 1987г/.

4. В целях предупрея,.зния ингибирующего влияния гипод^р-мин- хлорофоса на формирование по<_ ¿вакцинального сибиреязвенного иммунитета предлагается способ иммунизации крупного рогатого скота против сибирской язвы /Авторское свидетельство

1356288 от I августа 198? года/.

5. Рекомендуется питательная среда для культивирования и идентификации варианта вакцинного штамма СТй, устойчивого к антибиотику бициллк..-3 / Удостоверение на рационализаторское предложение Iii 07-86 от 19 июня 1986 года, выданное Бурятским сельскохозяйственным институтом/.

6. Предлагается усовершенствованная технология выделения лимфоцитов из периферической крови / Л.В. Адамчук и др.,1582/ для использования в ветеринарной иммунологии, применительно к получению лимфоцитов из периферической кроьи животных / Удостоверение на рационализаторское предложение К>20 от 15 октября 1984 года, выданное ВНИВИ г. Каьань/.

СПИССК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Цыдыпов В.Ц. Изучение корреляции между показателями РИГА у вакцинированных против сибирской язвы животных и их устойчивостью к заражении. Болезни сельскохозя :т знных кивотных

в Забайкалье и на Дальнем Востоке. Благовещенск, 1980, ст.30-42.

2. Цыдыпов В.".,Кобец U.C., Будаев B.I. Иимунологическиг реакции у вакцинированного и ревакцини. званного против сибирской павы вакциной СТЛ крупного рогатого скота. Болезни сельскохозяйственных кивотных и меры борьбы с ними в Забайкалье и на Дальнзк Востоке. Благовещенск, 1981, с. 9 12.

3. Цыбиккапоза Л.Д., Цыдыпов В.Ц. Иммунологические показа-Т"чи организма телят, привитых вакциной СТЛ. Болезни сельскохозяйственных кпзотных и меры борьбы с ними в Забайкалье и на Дальнем Востоке. Благовещенск, 1981, о. 13-16.

Цыдыпов В.Ц..Динамика титров сибиреязвенных антител молодняка крупного рогатого скота, привитого вакциной С Л. Болезни сельскохозяйственных животных и меры борьбы с ними в Забайкалье и на Дальнем. Востоке. Благовещенск, 1982, с.25.

Ь. Ахмороз Д.Ы,, Цыдыпов В.;., Цыбиккапова Л.Д. Иммунобиологические показатели организма кроликов, ревакциг'ровашшх вакциной СТЛ. Оздоровительные мероприятия в промышленных ¡¡сивот-новодческь: комплексах при инфекционнк заболеваниях. Казань. I98Î, с. 59-21.

6. Цыдыпов В.Ц. Селекция бициллин-3 устойчивого вакцинного штамма СТН. Эпизоотология и иммунопрофилактика болезной сельскохозяйственных кивотних. Новосибирск. 1933, с. 35-39.

7. Цыдыпов Б.Ц. Диффергчциация постинфекцнонноц и поствг -цинальной сенсибилизации организма -лвотних при сибирской язве антраксиновой пробой. Усовершенствование методов иммунной про-

филактики инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных. Казань, 1985, с.51-52.

8. Цыдыпов В.Ц. Показатели серо-аллергических реакций у экспериментально зараженных коров. Усовершенствование методов иммунной профилактики инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных. Казань, 1985, с.52-56. ч,

9. Цыдпов В.Ц. Способ выделения лимфоцитов из периферической крови животных. Свидетельство рационализаторе 'ого предложения № 20 НИВИ г.Казань. Казань, И 15.

10. Цыдыпов В.Ц. Способ коррекции иммунного ответа при формировании противоепбиреязвенного иммунитета у животных. Свидетельство рационализаторского предложения Ю 19 НИШ г.Казань. Казань, 1985.

11. Цыдыпов В.Ц., Арюткина Л.В. Вариант штамма СИ , устойчивый к бициллину-3. Материалы XII Пленарного зс едания научно-методической межведомственной комиссии по борьбе с скб-рской язвой при Госогропроме СССР «^Минздраве СССР. Воронеж, 1986.

12. Цыдыпов В.Ц. К-оценке эффективности сибиреязвенной вакцины СТИ иммунологическими методами при ревакцинации. Материалы XII Пленарного заседания научно-метод-«-цкой межведомственной комиссии по борьбе с сибирской язвой при Госагропроме СССР и Минздраве СССР. Воронеж 1986.

13. Жамсаронова С.Д., Цыдыпов В.Ц., Лебедева С.Н., Даииев Д.Д. Способ имиу тзации животных против сибирской язвы. Авторское свидетельство !,'; 1345399 от -15 ипня 1987

14. Цыдыпов В.Ц., Хамса.анова С.Д., Козулина З.Д., Даииев Д.Д. Способ иммунизации крупного рогатого скота против сибирской язвы. Авторское свидетельство № 1356288 от I августа 1987 г.'

15. Арюткина Л.В., Цыдыпов В.Ц. Популлционная изменчивость варианта вакцинного штамма СШ, устойчивого к антибиотику би-циллин-3 ин виво. Вклад молодых биологов в решение вопросов продовольственной программы и охраны окружающей среды. Тезисы докладов конференции. Улан-Удэ, 1987, с.124.

16.Галсанова Г.Д., Цыдыпов В.Ц., " элиуллий А.К., Тарнуева Е.Ю., Дагданова О.В, Я вопросу оральной иммунизации животных против сибирской язвы г-кциной СИ. Вклад молодых биологов в

решение вопросов продовольственной программы и охраны окружающей сродн, Тезисы докладов конференции. Улан-Удэ, 1987, с.125.

17. Цыдипов В.Ц., Яаысаранова С.Д., Атутова H.A. Математическая формализация результатов реакции Уанье. Информационный листок 69-87 ЦНТИ, УДК-619, Улан-Удэ, 1987.

18. Цндыпов В.Ц., Сперанский В.В., Дашиев Д.Д., Оленнико-ва И.И. Влияние карбофоса на формирование поствакцинального иммунитета. Проблемы жологии в ветеринарной медицине. Тезисы докладов конференции. Воронок. 1989.

19. Цндыпов В.Ц., Дашиев Д.Д., Сперанский В.В. О напряженности специфического иммунитета у коров в условиях дезинсекции. Методические рекомендации научно-производственной конференции "Достижения ветеринарной ьауки - произволе! у". Улан-Удэ, 1989.

20. Цндыпов В.Ц., Сперанский В.В., Олейникова И.И. Иммунный рг. зт у коров на вакцину СТИ на фоне предшествующей вакг"-нац л. Ж.Ветеринария 2, 1989, с.32.

21 . Цыдыпов В.Ц., Атутова H.A., Камсаранова С.Д. Математическая формализация результатов реакции Уанье. К.Ветеринария, 3, 1989, с.35.

22. Цкдыпоз В.Ц., Ццдылов В.Б. Эпизоотическая ситуация сибирской язвы в Бурятской АССР. Материалы ПИ Пленарное j заседания научно-методической межведомственной конференции по борьбе

с сибирской язвой. Тезисы докл.конф. в Ташкенте. Москва, 1990.

23. Ццдшоь В.Ц,, Будаев S.E, Влияние подкормки микроэлементами на титр сибиреязвенных а. гител у мололняка крупного ро-

•атого скота. Материалы XIII Пленарного заседания межведомственной комиссии по борьбе с сибирской язвой. Тезисы докл. конф. в ""ашкектз. Москва, 1990.

24. ЦцдиПоб В.Ц., Сперанский В.В. 3i лчение дозы вакцкш СТИ при ревакцинации коров. К.Ветеринария, К» Ю, 1990, с.27.

25. Сперанский В.В., Цндыпов В.Ц., Олейникова И.И. Влияние карбофоса на напряженность противоинфекционн^го иммунитета. Актуальные вопросы токсикологии, гигиены применения пестицидов и полимерных материалов в народном хозяйство. Тезисы докл. Воесоюз.

конф., Киев, I99C