Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Экспериментальная химиотерапия казеозного лимфаденита овец

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

р г г л П ОМСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ rl D UM ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНИ

_ К PCf'

- Э / ¡-и

tv, I

На правах рукописи

МАСЛОВСКИЙ КОНСТАНТИН ПЕТРОВИЧ

УДК 619:616—002.71:030.3

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ХИМИОТЕРАПИЯ КАЗЕОЗНОГО ЛИМФАДЕНИТА ОВЕЦ

16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

ОМСК 1994

Работа выполнена на кафедре ветеринарной микробиологии, вирусологии и иммунологии Омского государственного инотитута * ветеринарной медицины в 1991-1994 гг.

Научный' руководитель - Заслуженный деятель науки РФ,' доктор ветеринарных наук, академик Н.М .КОЛЫЧЕВ

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор В.Ф.МАРТЫНОВ., доктор ветеринарных наук, . профессор П.Н.СМИРНОВ

Ведущая организация: Казанский ордена Ленина ветеринарный институт им. Н.Э.Баумана

Зашита диссертации состоится " " 1994 г.

в_часов на заседании специализированного срвета

К 120.48.01 при Омском государственной институте ветеринарной медицины С644007, Оыок, уд. Октябрьская,92)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке . института -

Автореферат разослан * " 1994 г.

Ученый секретарь ' ' " .

специализированного ^ •

оогета, доцент

ОБЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОШ

Актуальность темы. Овцеводство - вакная отрасль в структуре лшЕотноводства России и поэтому профилактика и борьба с инфекционными болезшши имеет первостепенное народнохозяйственное значение

К числу таких заболеваний относится казеозный лимфаденит (псевдотуберкулез). Ежегодный экономический уиерб от' этой инфекции только по Ог/.ской области составляет I млн. 307 тыс. рублей (в ценах 1383 г.), что обуславливает необходимость более глубогого изучения болезни.

В настоящее время изучены некоторые вопросы эпизоотологии, этиологии, течения и клинического проявления болезни, разработаны катоды диагностики.

Особенно мало изучены вопросы хшиопрофилактики и химиотерапии данного заболевания. Ь отечественной и зарубежной литературе сведения о хшиотерапевтичеоких веществах, активных в отношении

(чувствительность, лвчение)надосгаточны и противоречивы.

Исходя из этого изыокание хиьшотерапевтачеокшс препаратов,, которые бы обеспечивали лечение казеозного лимфаденита овец, имеет большую актуальность.

Цель работы. Изучать чувствительность коринебактарпй

г"

казеозного лимфаденита к химиотералевтичеоким вешвотвам и разработать методы лечения на экспериментально зарааенных животных.

Задача исследования:

' I, Екяоить з опнтах^2 ¿гТ/^г? чувствительность

коринебактерий к хтлпотерапевтическим Ееиествам разных групп: антибиотикам (канаглидану, рифаыпицину,. бензшшенщиллину), ПАСК, втошио, производным никотиновой, параоксибензойной кислоты И ОКСИХИНОЛИНОВ.

2. Изучить влияние химиоте рапе втич еских соединений на ультраструктуру коринебактерий.

3. Изучить химиотерапевтическую активность препаратов в опытах на лабораторных яивотных. •

4. Изучить лечебную эффективность антибиотиков при экспериментальном казеозном лимфадените овец.

5. Изучить действие наиболее перспективных препаратов на клинические, гематологические, биохимические показатели,

а также на состояние неопецифаческой резистентности организма.

Научная новизна. Изучено бактериостатическое действие хиыиогералевтических препаратов разных групп на штампы коринебактерий. Изучена ультраструктурная характеристика коринебактерий пооле воздействия бензилпешщиллнна и рифаъшищша. Установлено,' что лечение рифашшшшом, бензшшеншцшшном и канешщином оказывает благоприятное влияние на клинико-гемато-логичеокий отатуо и биохимические показатели организма овец, стимулирует неспецифачеокую резштенткоогь. Определена лечебная эффективность втих препаратов при экспериментальном казеозном лимфадените овец.

Практическая ценнооть. На основании проведенных иооле-дованиii.in.Utl4> ИЫЫМР определены лекарственные препараты, проявляющие бактериоотатическое и бштедадцное Действие на возбудителя казеозного лимфаденита. Разработаны схемы лечения овец зараженных , о применением каиа-

1.'.1одша,рп£акпищша и бекзилпенвдшшша.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы ■ доложена на внуггдшузбвских конференциях преподавателей и аспирантов Омского института ветеринарной медицины в 1993, 1994 гг.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано четыре статьи.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 148 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, вывода, практические предложения, список литературы и приложение. Диссертация иллюстрирована 18 таблицами, рисунками. Список используемой литературы включает 95 источников, из них 70 иностранных.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. материалы по определению чувствительности корине-бактеркИ к хшлиотералевтическш веществам.

2. Материалы по изучению лечебной эффективности антибиотиков в опытах на овцах и лабораторных яшзотных при экспериментальном казеозном лимфадените.

3. Действие бензилпенициллина и рифамщщина на суб- -микроскопические структуры коринебактерий.

СОБСТВЕНШВ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы а методы исследований , Исследования проводили с 1091 по 1994 год в лабораториях 1:аТ«др глкробиологии, эпизоотологии и патологической

анатомии Омского института ветеринарной медицины. Биохимический анализ сыворотки крови проводили н областной ветеринарной лаборатории и межотраслевой биохимической лаборатории ОГИШ. Изучение активности хишотерапевтических препаратов на овцах, наблюдение за клиническим состоянием кивотншс, отбор проб сыворотки крови и цельной крови проводили на базе учебного хозяйства "Камышловское" Любинского района Ог/.скоГ: области.

Объектом для исследований служили лабораторные глвот-нке (69 белых мышей и 30 морских свинок), Z6 баранов 1992 г. рождения породы Советский'меринос.

Материалом исследования служили штаммы и культуры С.pseudrtufeAeué'mL в/1,3\5-формах: И 70-/?, 74-/?, 209Л, 146-5", депонированные в ЕЛКИ í.i.B. Заболотных, Н.М. Колычевым и И.Г. Трофимовым в 1991 году, а также 1Ш 37-У, 220-Я, 61-R, 70/33-/?, выделенные от больных казвозным лимфаденитом овец в хозяйствах Омской области (И.Г. Трофимов, IS84, М.В. Заболотных, 1989). '

При выполнении работы использовали следующие метода: ' клинический, аллергический, бактериологический, биологнчеоквП» патологоанатомичвский.

Культивирование коринебактерий осуществляли на шоо-пептонном агаре (ША), кровяном теллу&моао» агара (КТА), сывороточном теллуритовом агаре (OTA), шоо-пвптонном бульоне (tiДБ) и сывороточном мясо-пептонном бульоне о 10$ нормальной лоишдшшой сыворотки, РН сред 7»2-7,6.

Инкубирование пооевов проводила 8 обычном тевшочаге при температура 37°С в течение 2-5 дней. , '

Для изучения активности коринебактерий к химиотерапевти-ческим веществам применяли метод серийных разведений в ',ШБ о добавлением 10% нормальной лоиадшшой сыворотки и без нее.

Для исследований нами были отобраны следующие химиотера-певтяческие соединения:

1. Производные никотиновой кислоты - изониазид, альдозон.

2. Производные оксихинолинов - бромоксин.

3. Производные параоксибензойной кислоты, ее эфиры: метиловый г нипагнн в прошдавый - нипазол.

4. Четвертичные ш.юниавые основания, детергенты - этоний. б. Парашинооадтаиювая киолота (ПАСК),

5. Антибиотика - канашэди, ряфшшщин, бензилпевшшши

Изучение активности антибактериальных препаратов продолжит на лабораторных mbqxwcc а овцах.

Возбудителем казеозаого лшфадшшта заражали 45 белых мышей, Вавеоь готовила на физаодогичаоком раотверв из двухсуточной культуры, наращенной на МПА. Культуру из. штамма № 70 ввод?5да внутриорщшшо а дозе 500 ,ш. микробных тел. Еивотных разделала на девять групп по пять в каждой. В первой, четвертой а оадьмоЛ олнкш группах белых шлей лечили рифампициноы пер-ерадьнЗ в доза SO мг/нг, бензялленяцаляином внутримышечно в доза 10 мг/кг (четвертая группа) д канамицином внутримышечно в доза 10 1йг/кг (о еды/ля гр. ) о третьего дня ггаола заражения. Лабораторным «азотным второй, пятой и восьмой ОПнпяк груш эти препарата аводощ о седьмого дня пасла заражения в течение 21-го дня ежедневно один шэ а день, Тратья, иаатая я даштая группы слузала конзролышыа - в них лечения яе проводили, „ iiQpwx. сшш в количеств 30-тн разделила на ивоть

групп по пять в каздоС. Первые три группы" заразили штаммом коринебактерий й 70, четвертую, пятую и шестую заразили штаммом № 37 подкожно в области иеи в дозах 250 и 500 млн. микробных тел. В первой и четвертой опытных группах животные получали рифамлицин перорально в дозе 20 мг/кг и канаыицин внутримышечно в дозе 10 ыг/кг (четвертая гр. ) с первого дня заражения. Лабораторных животных второй и пятой групп лечили этими антибиотиками с седьмого дня после заражения в течение 21-го дня ежедневно один раз в день. Третья и шестая группы - контрольные," • где лечения не проводили.

Лабораторных кивотных, павших по ходу опыта, вскрывали. При макроскопическом осмотре обращали внимание на наличие, спе-' цпфическнх поражений в органах и тканях (воспалительные явления, гнойно-незротическпе очаги), делали из них мазки-отпечатки й • посевы на питательные средн. После окончания опыта всех белых -. мышей и морских свинок убивали и проводили такие ке исследования.

Для аллергической диагностики применяли аллерген "прейсц-нокащин Е", который вводили в дозе 0,2 мл в подхвостовую складку при помощи беэигольного инъектора БИ - 7 типа "Шмель". Учет реакции проводили через 24 часа.

После проведения аллергического исследования из. 36-ти • баранов сформировали три опытные группы - по девять животных в каждой, в свою очередь каждую опытную группу делили на три под- 1 группы - по три барана в каждой и контрольную четвертую группу-дешть животных, так же разделили на три подгруппы» Для удобства эти группы и подгруппы обозначили цифрами, например опытная группа три, подгруппа один - 3.1. и т.д. (рис. I).

Всех баранов заразили штаммом коринебактерий JS 70:

Рисунок I

Скена опыта на оЬиах

36 баранчиков

животных первой опытной группы и контрольной подгруппы 4.1. зараяали в дозе 500 млн, второй опытной и контрольной подгруппы 4.2. заразали в дозе I млрд., третьей опытной и контрольной подгруппы 4.3, зараяали е дозе 2 млрд. микробных тел.

Овцам опытных подгрупп I.I., 2.1., 3.1. со дня заражения вводи/л бенаилпенициллш внутримышечно в дозе 20 юг/кг, рифам-пицин пероралыю в дозе 15 мг/кг (по^гр. 2.1.), канамицин внутримышечно в дозе 20 кг/кг (подгр. 3.1.) ежедневно в течение 14-ти дней, животным опытных пидгрупп 1.2., 2.2., 3.2. препараты начинали вводить с седьмого дня после заражения в течение 21-го ' дня: бензилпаншишшн и канамицин (подгр. 1.2. и 3.2.) в дозе 15 мг/кг, рифатщин (подгр. 2.2.) в дозе 10 мг/кг зшзого веса. Баранов подгрупп 1.3., 2.3., 3.3. лечили с 30-го дня после заражения в течение 21-го дня: бензилпенициллин и канамицин (подгр. 1.3. и 3.3.) инокулировали в дозе 15 мг/кг, рифампицин (подгр. 2.3.) в дозе 10 мг/кг живого веса.

. Антибиотики животным опытных групп вводили ежедневно диа раза, в контрольной четвертой группе лечение не проводили.

7 всех опытных и контрольных баранов за девять дней до начала опыта и на 12-й, 23-й, 52-й дни после заражения в цельной крови и сыворотке определяли содержание гемоглобина, лейкоцитов, эритроцитов, кальция, фосфора, общего белка, альбуминов, альфа-, бета-, гамма-глобулинов, кислотную емкость и бактерицидную активность сыворотки крови.

Для электронномикроскояического исследования действия антибиотиков на субмикросколичзокие элементы бактериальной клетки были взяты коринебактерии-штамма Л 70. .

Статистическую обработку результатов исследований проводи ли на персональном компьютеръ1ВНР&/АТ процессор 286/287,

о применением программ "ЗШдРа^Яш ", '¿#>¿£#1-2-3".

Набот материалов осуществляли по програна принтер ьЯШ^/гг- 1050.

Установили, что наиболее сильным антимикробным действием к штаммам кор;шебактерий, из десяти химиопреларатов, обладали: бензилпенициллин, бромоксин, рифампицин и канамицин, ш: минимальная подавляющая концентрация СЖК) составила соответственно 1,37±0,75,' 2,9±1,7', 5,48+4,02,* 7,16+3,34 мкг/мл. Чувствительность коринебактерий к остальным химиотерапевтическим соединениям была нем (Р<0,05-0,001). Чувствительность штаммов коринебактерий к исаледуемнм препаратам приведена в таблице I»

Наши исследования показали, что бактериостатичеокая активность препаратов в питательной среде с добавлением сыворотки крови снижалась в 2,6 раза по сравнению со средой без добавления сыворотки. Кроме этого, антимикробная активность хншшрепа-ратов зависши от формы диссоциации штампа коринебактерий. Так, минимальная подавляющая концентрация/¿-форм в среднем составила 19,99 мкг/мл,О -формы 21,44 мкг/мл, 5-фошы 55,9 мкг/мл, следовательно Д и 7формы коринебактерий болае чувствительны я антимикробным препаратам, чем^"формы.

РЕЗУЛЬТАТ ИССЛЕДОВАНИЙ

Изучение чувствительности к химиотерапевтическим преп_

Действие бензилденициллина и рифаышышна на субмикроскопические отруктуры штамма № 70 коринебактерий через 4-48 часов экспозиции

Пэоле воздействия бензшшенициллина в минимальной

Таблица ±

Чувствительность ксринебактерий к хиыиотерапевткческим веществам {ыкг/ып) в У.ПЕ. _с добавлением 10% нср>лалькой сьпсротки и баз нее_

N IN штамма Препараты

п/п ! и его Рифам пицин Ез кзиппен ицкпл'Л н НИН Зромоксии Н13ПЙГИН

форы а М+т Р< М+т Р< М+т Р«; Ы+т ■ Р< :л+т Р<

1 70-Я 0.03+0.012 • - 0.83+0,23 0.01 0.34+0.11 0.01 2.18+0.23 0.001 50+0 0.05

0.0064-0.001 X 0.015+0.0034 X 0.047+0.015 ч* г* 0.77+0.18 X 25+10.20 X

2 7/-Й " 0.0081 +0.011 • - 1.04+0.45 0.01 5.62+3.6 0.С5 0.77+0.13 0.05 43.75+7.21 0.01

0.017+0.005 X 0.58+0.12 X 7.31+1.8 X 0.04+0.11 X 18.75+4.16 X

3 70/33—В 0.0037+0.002 0.С5 3.90+0.9 0.01 7.31+1.50 ' — 1.09+0.13 0.01 75+16.55 0.05

0.016+0.004 X 1.36+0.22 X 4.63+1.04 X 0.18+0.046 X 31.25+7.21 X

4 0.012+0.002 0.001 0.77+0.81 0.05 1.56+0.36 0.01 1.87+0.41 0.01 75+1663 0.01

0.0043+0.001 X 0.048+0.019 X 0.46+0.1 X 0.54+0.09 X 25+0 X

5 язе-я 0.087+0.02 0.05 156+0.22 0.01 9.37+2.03 0.001 о.т+о.21 005 87.5+14.43 0.001

0.035+0.001 X 0.68+0.11 X 1.87+0.41 X 0.31+0.14 X 31.55+7.21 %

в 37-1.'. 0.54+0.092 0.001 0.28+0.056 0.001 5+0 0.001 2.18+0.36 0.01 87.5+14.43 0.01

• 0.062+0 X. 0.066+0.021 X 1.87+0.44 X 0.77+0.31 X 37.5+8.33 X

7 61 -п 31.25+7.21 - 4.68+1.04 0.05 43.75+7.21 - 87.5+14.4 0.01 175+28.86 0.01

15.62+3.60 X 2.33+0.51 X 25+10.2 X 13.75+8.33 X 87.5+14.43 X

в . 145-8 62.5+14.43 0.05 15.5+3.65 0.05 21.87+3.60 - 10.93+1.8 0.001 250+57.73 -

28.12+9.8 X 5.95+0.36 X 15.62+3.63 X 9.37+2.08 X 125+28,86 X

Прииск киа: в числителе МПХ с сывороткой

в знаменателе МПК без сыворотки

Продолжение табпщы 2 Чувствительность коринебахтеркй к химкотерзпевтичгскии веществам (мкг/мл) а МПБ __с добавлением 10% нормальной сь;зсротхи и без нее _

N N штамма Препараты

п/г . и «го Ни па зол ПАСК Агжсэон Тубоэил Этоний

форма М+т Р< М+т Р< ?Л+т Р< М+т Р< М+т Р<

1 70-И 150+33дз 0.001 175+23.88 0.01 62.5+14.43 0.01 250+57.73 0.01 9.Э7+2.СЗ 0.05

31.25+7.21 X 87.5+14.43 X 8.75+4.18 X 75+16.63 X з.ео+о.£о X

2 74-Я 62.5+14.43 0.01 87.0+14.43 0.01 23+9.03 0.С5 225+72.64 - 62.5+14.43 -

18.62+425 X 50+0 X 9.37+2.03 X 100+40.82 X 31.25+7.21 X

3 70/22-Я 62.5+14.43 0.001 75+16.68 0.01 43.75+7,21 0-С01 125+23.88 - 75+16.65 0.001

4.82+1 X 31.25+7.21 X 12.5+5.1 X 62.5+14.43 X 18.75+4.16 X

4 Ж-Н 75+18.68 0.01 150+33ЛЗ 0.01 62.5+14.43 - 150+33.33 0.05 87.5+14.43 -

21.37+3.60 X 30+0 X 31.25+7.21 X 75+1&6 X 50+20.41 X

5 203-1* 75+16.88 0.01 125+28.88 0.05 "Я .75+7.21 0.01 125+23.33 0.05 13.75+4.16 0.01

18.75+4.18 X 52.25+18.16 X 14.06+454 X 62.5+14.43 X в. 25+0 X

в 37-1 65.5+14.43 0.01 125+28.88 0.01 75+1®. 63 0.05 125+23.86 - 14.06+4.54 -

18.75+4.18 X 43.75+7.21 X 31.25+7.21 X 75+16.66 X 5.45+0.9 X

7 61-й 250+57.73 0.01 125+28.88 — 112.5+38.32 —. 225+72.64 - 150+33.33 0.05

87.5+14.43 X 62.5+14.43 X 58.25+13.16 X 100+0 X 75+16.63 X

8 143-8 175+28.88 0.01 150+33.33 0.05 112.5+36.32 0.05 300+63.63 0.05 200+81.64 -

75+18.88 X 82.5+14.43 X 37.5+8:33 X 125+28.83 X 75+1абЗ X

Пр имечакаа: в числителе МПК с сывороткой

в знаменателе МПК без сыворотки'

подавляющей концентрации в течение 4-12 чаоов наблвдали следующие чзменения: разрыхление клеточной стенки, париплазматичеокое пространство сужается, происходит разрыхление цитоплазмы - в части клеток ока имеет вид грубых хлопьев, нуклеоид смещается к периферии, атипичное деление приводит к образованию мелких клеток у которых полностью отсутствует клеточная стенка. Двадцатичетырехчасовая экспозиция возбудителя с антибиотиком усиливает описанные выше изменения и вовлекает в патологический процесс все большее количество клеток. Увеличивается количество раздутых с разраженной цитоплазмой бактерий и появляются лизированные формы. Хотя и редко, но можно наблвдать клетки неправильной формы о расглавле:ш!е.'.и ■ и слипшимися клеточными стенками, что характерно для процесса^- трансформации при образовании зернистых тел. После 48-ми часового воздействия преобладают разрушенные и лизированные формы.

Рифамдицин начинал воздействовать на коринебактерии после вдоьмичасовой экспозиции. В части клеток можно было наблюдать локальные разрывы клеточной отенки. В дальнейшем усиливалась деструкция клеточной стенки и ее разрыхление» увеличивалось количество клеток с разреженной цитоплазмой и хлопьевидным материалом в ней. Образуются большие полости о остатками нитей ДНК в центральной части бактерий и видны лизированные формы.

Таким образом, сравнительное изучение в динамике ультраструктурных изменений коринебактерий после воздействия бензил-пенициллина и рифампищша показало, что ведущим является изменение ядепйсгэ аппарата клеток, приводящее к разрушению ТЗелок--синтезирующих оистем, атипичному делению иЛ - трансформации.

Изучение активности хккиогерздевтичеоких препаратов на лабораторных животных

У животных опытных групп отмечали воспаление брюшины в месте заражения, увеличение подколенных лимфатических узлов и семенников. Исходную культуру изолировали от семи белых мышей опытных групп, из них пять пали до начала лечения.

При вскрытии и убое белых мышей из контрольных групп наблюдали преимущественно поражения очагового характера. Гнойно- • некротические очаги выявляли- в месте инъекции культуры, в легких, средостенных лимфатических узлах, печени, селезенке. В третьей контрольной группе таких очагов обнаружили 45, в шестой 41 и в девятой 56. Исходную культуру изолировали от всех яивотных контрольных групп.

У морских свинок опытных групп отмечали гкойно-некроти-ческие очаги размерами от просяного зерна до горошины в подкожной клетчатке места заражения, ледени,.селезенке. В первой опытной группе выявили гнойно-нбкротическизс очагов 8, во .второй 4, в четверной 0 и в пятой 6.Ретрокультуру изолировали от пяти лабораторных яивотных, три из которых паля до начала лечения.

В контрольных группах отмечали более интенсивный характер очаговых поражений; в третьей.грухдае..обнаружила-гнойно-некроти- " ческях очагов - 71^ »-шестой т 76. От всех морских овшкж кон-. трольных групп изолировали исходную культуру.

На основании пато.югоан атомических и бактериологических ' исследований можно'заключить, что бензилпенициллин, рифампицин. ■ и 'канамицин оказывают химиотерадевтичеокий эффект при экспериментальном заражении белых мшвй и морских свинок, возбудителем казеозного лимфаденита овец. ■ . ' , •

Изучение хшу.иог'ерадевтпческог-о действия рафашпщтаа, каншыиша и беизалпенвцшшма при казсозногл лимфадените овец При клиническом осмотре овец на десятый день после заражения установили увеличение поверхностных шейных ллмфати-

• чеоких узлов у всех ¿ивотннх контрольной группы ).' 4. В подгруппе 4.2. у баранчика к 36 отмерили увеличение правого лимфатического узла коленной склад: и до размеров голубинного я гад. При пункции этого лимфатического узла выделили исходную культуру.

В опытных подгруппах 1.2., 1.3,, 2.2., 2.3., 3.3. так ке наблюдали увеличение поверхностных шейных лимфатических узлов, но а указанных подгруппах лечение на этот период елга не проводилось или было только начато.

Ьаражение овец с последующим лечением сопровождалось достоверным (Р<0,05-0,001) увеличением в сыворотке крови содержания общего. белка у животных опытной группы К 3 по сравнению .о-контрольной подгруппой 4.2. (рио. I). В опытных подгруппах 1.3, и 2.2. отметили достоверное (Р<0,05-0,001) снижение пока" зателя альбуминов на 26-й и 52-й дни после заражения. Содержание в сыворотке крови альфа-глобулинов у овец опытных подгрупп 1.3., 2.1., 2.3. достоверно уве.ктвалооь (Р^,05-0,001). . В опитных подгруппах 1.1. и 1.3., где животных лечили бензил-пенициллином, отмечали достоверное снижение .бета-глобулинов (Р<0,001). На 52-й день после заражения в опытной группе !>■ 2 ' установили достоверное (Р<0,05-0,001) снижение содержания гамма-глобулинов. Бактерицидная активность сыворотки крови у

• ^ овец опытных групп, по оравнешю с контрольными, достоверно

•повышалась в зависимости от начала лечения (рис. 2).,

Бактерицидная активность сыворотки

крови у севц до и пасла «аражени*

РИеуиок 2

ЦЗф

1.2т

•.1грТк)

« дни с о 2.1 гр + 2Ар • 2Эгр а 4Лгр ¡Ю

12 Дни .о 8.1ф * Ддо • Э.ЭГр '*■ «ЛгрСО

Достоверное увеличение (Р<0,ОД, Q,Q5, 0,01) содержания в крови гемоглобина происходило у овец в опытных подгруппах I.I. и 1.2. на 26-Е и 52-2 дни. Гсмоглобгш так ;:;е достоверно \РО ,05-0,001) увеличивался, по сравнении с контролем, в опытной грущю № 2 на 12-й, -26-й и 52-й дни после заражения.

Перед убоем положительные аллергические реакции выявили у всех животных контрольной группы Л 4. В опытных группах положительно реагировали три овцу (19$).

Убой всех животных произвели через два месяца после начала опыта. Среди овец, леченных бензшшвнициллином, специфи- • ческие изменения наблвдали в опытной подгруппе 1,3, - два гнойно-некротических очага,из которых изолировали походную культуру.

У животных контрольной подгруппы 4,1, иоходную культуру вцделили от всех овец. Гнойно-некроротичеокие очаги отмечали, . в подкожной клетчатке, в поверхностных шейных лимфатических узлах и внутренние органах, всего десять очагов до подгруппа.

• Во второй опытной группе, где животных лечили рифампщи-■ . ном, отмечали воспаление' и увеличение рагионаршк лимфатически;:

узлов и гнойно-некротические очаги во внутренних органах. ' ' Исходную культуру выделили в одном олучав.

Органы и ткани контрольных овец подгруппы 4,2. шала

• более'интенсивные очаговые поражения - 29, в опытной QQoraoTOï-венно 4 гнойно-некротических очага. Радоку.муру изолировали бт всех животных. - 1

У овец третьей опытной группы макроокопичеоких лэменонай, - свойственных казеозному лимфадениту, ми на нашли, что подтвер-

• дпди бактериологические исследования.

В контрольной подгруппе 4.3. специфических очагов отмс- . тили 28, при выделении исходной культуры от всех контрольных овец.

Проведенные нами исследования показали, что бензилпени-циллин и рифампицин эффективны при экспериментальное казеозном лимфадените с первого.и седьмого дня после заражения. Канвмицин оказывал наибольший лечебный эффект. Он воздействовал на возбудителя болезни с 30-го дня после заражения.

ВЫВОДЫ

г _

1. Наиболее активнша хишотералевтическиии препарата- . ми 'в отношении ^^Неи-^и&хи/а!^ являются: бензилпеницил-лин - Ь'ШК 0,015-5,95,' рифампицин —• 1ЛПК 0,0043-20,12,' канаыицин-ШЖ 0,047-15,62,* бромоксин - ЫПК 0,18-9,37; этоний - МПК 3,9- . 75 мкг/мл. Менее выраженной бактериостатической активностью обладают: нипазол - 1ЛК 4,62-75; нипагин -МПК 18,75-125,' ^ ПАСК - МПК 30-87,5альдозон - МПК 8,75-56,25,' изониазид -

;.51К 6,25-125 кнг/ил.

2. Я и 3 формы коринебактерий более чувствительны к . антимикробным препаратам, чем ьГ формы. Химиотерапевтичеок'ая активность антимикробных препаратов в присутствии сыворотки . Крови жиеотных достоверно снижается. .

3. При воздействии бензилпенициллина и рифаыпицина в М-шшльяой подавляющей концентрации" на бактериальную клетку разрушается клеточная отенка, происходит разрыхление цитоплаз-

;мы, поражается нуклеоид и образуютоя лизированные фориы.

Кроме этого, бензилпенициллин вызывает атипичное делание клеток» образование форм с измененной клеточной стбнкой, ню ярдаЪгся' признаком Ь - трансформирующего действия препарата.

4. При экспериментальном заразешш возбудителем казеоз-ного лимфаденита белых мышей и морских свинок лечебный эффект . достигается от рифгшпицина, бензилпенициллина и канашцина, •при условии их введения в течение 14-ти или 21-го дня. I

5. Лечение овец бензиллешщиллином, рлфампицином и кана-ыицином приводит к- снижению температуры тала, предупреадаег развитие клинического проявления (увеличение поверогностщцс * лимфатических узлов) казеозного лимфаденита.

6. У экспериментально зараженных овец в результате лечения кинамицином, бензилпенициллином и рифампицином происходит увеличение общего белка, изменяется в крови соотношение альбуминов и глобулинов, нормализуется содержание гемоглобина и эритроцитов, усиливается бактерицидная активность Сыворотки крови, что в конечном итоге принудит к повышению еотесствснной резистентности организма.

1. В опытах на лабораторных аивотных и овцах зараженных , наибольший терапевтический" эффект проявил канамшщн при внутримышечном его введении в дозах 10 мг/кг и 15 ыг/кг живого веса.

8. Лечение экспериментально зараяенных кивот них. о применением канамицина, бензшшвнициллина и рифаышщина через 1-^30 дней пооле заражения, предупреждает развитие у 81$ овёц слергп-чеокого состояния,' у 19$ происходит специфическая сенсибилизация организма, выявляемая внутрикожной аллергической пробой.

. . 9, Канашщсн и бензилпенициллин инокулировшшые животным

внутримышечно в дозе 15 гаг/кг живого веоа обладают по отношению к бактерицидным действием.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПЕЕДЯСКЕНИЯ

I. Для лечения овец, зараженных ¿.^¿шЬ^и&Уи¿^¿-д, нужно применять канаиидин в дозе 15 мг/кг кивого веса при . двукратной его введении в течение 14-ти иле 21-го дня.

2» Определение чувствительности возбудителя казеозного лимфаденита к хшиотералевтнческим веществах/, следует проводите в питательной среде о добавлением белка сыворотки крови. .

3. Данине об субкикроокопических изменениях бектериаль-ной клетки после воздействия бензшшенидиллина и рифампицина рекомендуем использовать в работе научно-асследойательских лабораторий.

4. Результаты исследований по хшпотералки- казеозного ■ лимфаденита примештатся в курсах микробиологии и чаотной эпизоотологии Омского государственного института ветеринарной медицины и гекомендуютоя для использования в других, зооветеринарных учреждениях.

С1ШССК ОЩБЛЖОВАНШХ РАБОТ

1. Ошепков В .Г., Масловский К.П., Будзинский А.Н. О вариабельности свойотв коринебактерий, отнооимых к виду

// Эпизоотология, диагностика, лечение и профилактика инфекционных и инвазионных болезней животных: Сб. науч. трудов/ОмСХИ. - Омск, 1991. С. 9-14. ,

2. Масловский К.П. Изучение активности некоторых. химМо-терапбвтических веществ к £в опытах Йс

Депонирована в ВИНИТИ 02.09.93, 1* 2377 - Б93.

3, Ошедков В .Г,, Масловский К.П., Груденя В.Н., Вальков A.B. Некоторые вопросы эпизоотологии и диагностики казеозного лимфаденита овец // Распространение, лечение и профилактика инфекционных и инвазионных болезней яивотных: Сб. науч. трудов / ОмСХИ. - Омск, 1993. С. 19-23.

4. Масловский К,П. Изучение активности некоторых хешю-тералавтических веществ в опытах на лабораторных животных при каэеозноы лшфаденитв // Тез. Воерос. науч.-производст. конф. Гигиена, ветсанитария и экология зивотноводства / Чебокоарц, 1994. С. 27S-277.

Сдано в печать 10.11.94. Формат 60x04/16. Бум. тип. J» 3. Печать о^етная. Пач.л. I.0Q. Типаж 100. Заказ 40в.

Карголитография ОмГАУ, Омск-8, Сибаковская, 4