Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.07) на тему:Эффективность иммуномодулятора "Баксин-вет" при лечении хронического эндометрита сук с кистой яичников



ОЫ-э

ФЕДОРОВИЧ Владимир Васильевич

/копией

Эффективность иммуномодулятора " Баксин-вет " при лечении хронического эндометрита сук с кистой яичников.

16.00.07. - ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

\ А 1ДМ

Москва-2009

003469900

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И Скрябина» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ).

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Петров Алексей Михайлович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,профессор

Порфирьев Иван Арсентьевич доктор ветеринарных наук,профессор, заслуженный деятель науки РФ Никитин Виктор Яковлевич Ведущая организация: ФГОУ ВПО Самарская государственная сельскохозяйственная академия.

ас

Защита состоится «_10_»_июня_2009 г. в «/^ » часов на

заседании диссертационного совета Д. 220.042.05 в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» по адресу: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23, тел. (495) 377-93-83.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» ^ -

Автореферат разослан « С -> » ^¿.ЦУ 2009 г.

Ученый секретарь /О , ВолчковаЛ.А.

диссертационного совета у ¿у^с^^/

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. По данным ряда авторов: В.А.Карпова, 1984., В.А. Лукьяновского, Ю.И. Филиппова, 1988., Э.Б. Мордашевой, 2002., Г.П. Дюльгера, 2002., Н.С.Саженевой, 2004., Г.Б. Чулковой, 2007., Н.С. Емельяновой, 2007., A.B. Шориной, 2007 болезни репродуктивной системы у мелких домашних животных составляют до 20% от общего числа различных заболеваний.Одним из наиболее часто встречающихся акушерско-гинекологических заболеваний у сук является эндометрит. Данное заболевание чаще всего рассматривают как системное заболевание, так как оно затрагивает функцию иммунной системы, центральной нервной и эндокринной систем, матки, яичников.

По данным Н.С. Емельяновой (2007) у 21,7% собак встречается сочетанная патология - эндометрит и киста яичников. Данная патология чаще всего приводит к полной потере репродуктивной функции у сук.Эта проблема также актуальна для специалистов, содержащих сук, активно использующихся в племенном разведении и, содержащихся в питомниках.Поэтому наиболее остро стоит вопрос о выборе рационального и эффективного метода лечения, позволяющего сохранить репродуктивную функцию животного.

Цель и задачи исследований. Целью наших исследований является изучение хронического эндометрита у сук осложненного кистой яичников и разработка эффективного метода лечения при данной патологии. Для достижения цели нами были поставлены следующие задачи:

1. Изучить этиологию данного заболевания основываясь на анамнезах, а также на особенностях гормональных и иммунологических показателей крови.

2. Выделить и идентифицировать микрофлору из вагинальной слизи у сук больных хроническим эндометритом.

3. Изучить концентрацию половых гормонов(прогестерона и эстрадиола) в крови здоровых сук и у больных хроническим эндометритом с кистой яичников.

4. Изучить параметры иммунитета и неспецифической защиты(резистентности) у здоровых сук и у больных хроническим эндометритом с кистой яичников.

5. Разработать эффективный комплексный метод лечения данного заболевания у сук с использованием гормональных, антимикробных, противогрибковых препаратов и иммуномодулятора «Баксин-вет».

6. Рассмотреть возможность принятия мер профилактики данного заболевания.

Научная новизна. Изучено распространение хронического эндометрита и кисты яичников у сук в условиях Московской области.

Определены основные микроорганизмы и их ассоциации, вызывающие хронический эндометрит у сук. Впервые проведено_определение основных параметров иммунитета и неспецифической защиты (резистентности) организма сук при использовании иммуномодулятора «Баксин-вет».

Определена концентрация половых гормонов (эстрадиол и прогестерон) в крови у сук в процессе болезни и после их выздоровления.

Теоретическая и практическая значимость. Изучены гормональные и иммунологические показатели крови у сук при хроническом эндометрите осложненном кистой яичников. Разработана и внедрена схема комплексного лечения хронического эндометрита с учетом дисфункции яичников с использованием иммуномодулятора «Баксин-вет».

При гиповолемии, детоксикации и для восстановления коллоидно-осматического состояния рекомендована многократная гидротационная терапия.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены обсуждены и одобрены на конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина (2006-2008); Международной научно-практической конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства и пути их решения» ГНУ «Всероссийский научно исследовательский институт животноводства (ВНИИЖ) , Дубровицы, 2008; Международной научной конференции посвященной 200-летию высшего ветеринарного образования и основания Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины на тему: « Новые аспекты биотехнологии репродукции животных» . Санкт-Петербург, 2008; На XVI Московском международном конгрессе по болезням мелких домашних животных (2008).

Публикации

По результатам собственных исследований с 2005-2008 гг. опубликовано 4 статьи , в том числе 4 статьи в изданиях рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 132 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных, обсуждение выводов, практических предложений и списка используемой литературы. Работа иллюстрирована 10 таблицами и 5 рисунками.

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту.

1. Результаты диагностики хронического эндометрита у сук с учетом дисфункции яичников.

2. Результаты исследования бактериальной Контаминации матки у сук при хроническом воспалении эндометрия.

3. Результаты определения эстрадиола и прогестерона в крови животных в процессе лечения и после их выздоровления.

4. Показатели основных параметров иммунитета и неспецифической защиты (резистентности) организма животных при хроническом эндометрите с использованием для лечения иммуномодулятора «Баксин-вет».

5. Результаты внедрения комплексного метода лечения хронического эндометрита и кисты яичников у сук с использованием антибиотиков, сульфаниламидных, антигрибковых препаратов, метронидазола , гормональных препаратов и иммуномодулятора «баксин-вет».

Собственные исследования

Материалы и методы

Исследования по теме диссертации проведены с 2006 по 2008гг. на кафедре акушерства, гинекологии и искусственного осеменения животных Федерального Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина».

Клинические исследования сук проводились в клинике «Дале» г.Королева и «Миф» г. Мытищи Московской области. Гормональные исследования прогестерона и эстрадиола -17р проводили радиоиммунологическими методами с помощью готовых французских наборов реагентов. Для экспериментальных исследований использованы 128 сук различных пород(восточноевропейская овчарка, немецкая овчарка, кавказская овчарка, доберман, боксер, шелти, ротвеллер, кокер-спаниель, беспородные и помесные собаки) в возрасте от 5 до 10 лет.

Диагноз на эндометрит устанавливали на основании сбора анамнеза, результатов клинических, лабораторных исследований, узи-диагностики.

При этом обращали особое внимание на животных с нарушением полового цикла, выделениями из влагалища, непродуктивными вязками. Клиническое исследование больных животных проводили по общепринятым методикам. Для ультразвуковой диагностики эндометрита и кисты яичников у

сук использовали аппарат узи-ЫБ-НСМОА 2000 с высокочастотным датчиком на 3,5-7МГц.

За период исследований прижизненный диагноз хронический эндометрит, осложненный кистой яичников, мы установили у 60 сук, тогда как острый эндометрит с обычными кистами яичников был выявлен у 68 сук. Установлено, что с 2006 по 2008 г.г. в г. Королеве количество сук, больных хроническим эндометритом постоянно возрастало. Так, если в 2006 году количество больных животных 22,1% то в 2007 году их было 23,6% , а в 2008 году соответственно 26,7%.

Количество сук больных хроническим эндометритом в г. Мытищи составило 23,8% , тогда как в 2007 году количество больных животных несколько снизилось и составило 23,3 %, а в 2008 году количество больных сук составило 25,5%.

Таким образом, количество сук больных хроническим эндометритом в городах Королев и Мытищи из года в год возрастает. Вероятно, причиной такого большого количества больных животных является несвоевременное обращение владельцев собак в ветеринарные клиники, или попытки самолечения больных животных.

Было отмечено, что заболевание сук хроническим эндометритом имеет определенную тенденцию. Так, с 5 до 10 летнего возраста животные наиболее подвержены данному заболеванию. Тогда как с 14 летнего возраста количество сук, больных хроническим эндометритом резко сокращается и к 16 летнему возрасту составляет 11,6% , тогда как в 10 летнем возрасте количество больных животных было 24,4 %.Мы предполагаем, что это связано со снижением репродуктивных способностей у сук в связи с их возрастом и снижением контактов с производителями.

Для определения эффективности комплексного метода терапии при хроническом эндометрите у сук осложненного кистой яичников находилось 60 сук, из которых по мере поступления в клинику были сформированы три подопытных группы.

1. Контрольная группа, здоровые суки - 20 гол. Лекарственные препараты животным данной группы не применялись.

2. II Опытная группа. 20 сук, больные хроническим эндометритом, осложненным кистой яичников. Для их лечения использовали:

- Рокситромицин ( антибиотик макролид), который назначали в дозе по 150мг (1 таблетка) 2раза в сутки внутрь с кормом.

- Ципрофлоксацин (антибиотик широкого спектра действия из группы фторхинолов, обладающий наименьшим иммунодепрессивным действием) вводили внутривенно но 0,3г в 25-30 мл 0,9% р-ра натрия хлорида 2раза в сутки.

Одновременно с антибиотиками внутрь назначали метронидазол (трихопол) по 0,2г 2раза в сутки, сульфаниламидный препарат- 10% р-р этазола натрия по 5мл 2раза в сутки внутривенно.

Для устранения грибковой микрофлоры применяли микомакс по 100мг внутрь с кормом один раз в течение 5-7 суток.

Из гормональных препаратов при фолликулярных кистах внутримышечно однократно вводили 5мкг Сурфагона, а при лютеиновых кистах яичников - магэстрофан также однократно внутримышечно в дозе по 0,2мл. Для устранения гиповолемии, интоксикации и коррекции нарушений коллоидно осмотического и водно - солевого баланса проводили гидратационную терапию. Для этого ежедневно внутривенно вводили до 150мл раствора реополиглюкина, 50 мл плазмы, 50 мл 10%ного раствора глюкозы, 50мл раствора Рингера. Общий объем инфузии за сутки составлял 250-300 мл.

Для усиления кровообращения матки и ускорения эвакуации экссудата назначали внутримышечно окситоцин 3-5 ЕД один раз в сутки в течение 5-7 суток.

На фоне медикаментозной терапии собакам назначали диету и ежедневно организовывали активный длительный моцион на свежем воздухе в течение 3-4 часов. Курс комплексной терапии составлял 10-14 суток. Животное считались клинически здоровым, если у него не было выявлено клинических и лабораторных признаков заболевания в течение 12-18 месяцев после выздоровления.

3. III Опытная группа. 20 сук, больные хроническим эндометритом, осложненным кистой яичников. Для их лечения, кроме вышеуказанных препаратов, применяемых во второй опытной группе, дополнительно использовали иммуномодулятор - «Баксин-вет». «Баксин-вет» задавали с кормом внутрь 1 раз в день по 2 капсулы в течение двух недель.

Контроль за состоянием репродуктивных органов у сук осуществляли методом узи-диагностики.

Эффективность лечения животных оценивали по клиническим признакам животных, данным лабораторных исследований, узи- и по результативным вязкам сук в первую охоту после выздоровления.

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием компьютерной программы Microsoft Excel, 2000

Материал для микробиологических исследований получали от сук различных пород репродуктивного возраста. Посев исследуемого материала производили на МПА в чашках Петри с последующим инкубированием в термостате при 37° С в течение 48ч. Затем подсчитывали количество колоний микроорганизмов, для их идентификации использовали «Определитель бактерий Берджи» (1997).

Радиоиммунологическое определение прогестерона в сыворотке крови проводили с помощью набора «Стерон-П-125Л».

Радиоиммунологическое определение эстрадиола 17 ß проводили с помощью набора «CEA-Ire-Sorin-ESTRK».

Исследования активности лизоцима в сыворотке крови проводили по (E.Osserman, D. Lawlor, 1996, в модификации О.Н. Грызловой , П.А. Емельяненко, Денисенко, 1980)

Определение фагоцитарной активности нейтрофилов (метод В.М.Бермена, Е. М. Славской. 1958).

Определение Т-лимфоцитов проводили методом спонтанного розеткообразования с эритрацитами барана (Е-РОК).

Определение B-лимфоцитов проводили методом розеткообразования с эритроцитами барана в системе ЕАС.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Распространение хронического эндометрита и кисты яичников у сук.

За период с 2006 по 2008гг. в клиниках «Дале» г.Королева и «Миф» г. Мытищи Московской области клиническому осмотру было подвергнуто 3657 собак, в связи с различными заболеваниями. В результате клинических и лабораторных исследований у 878 сук была выявлена патология репродуктивных органов(24%). У 128 сук был установлен диагноз хронический эндометрит (14,6%), у 60 сук хронический эндометрит был осложненный кистой яичников.

Данную патологию диагностировали в основном у нерожавших сук в возврасте от 5 до 10 лет преимущественно у боксеров, ротвейлеров, немецких и кавказских овчарок, спаниелей, беспородных и помесных собак.

Проведенный нами клинико-диагностический анализ больных сук указывает, что в 18,5% случаев мы выявляли в яичниках фолликулярные кисты диаметром от 0,3 до 1,6 см, а в 6,4% - лютеиновые кисты

Количество животных больных хроническим эндометритом осложненным фолликулярными кистами значительно больше, по сравнению с животными больными хроническим эндометритом осложненным лютеиновыми кистами. Причем количество больных животных из года в год заметно возрастает.

В большинстве случаев кисты яичников регистрировались совместно с хроническим эндометритом у сук.

При узи-диагностике в основном выявляли фолликулярные кисты, что достоверно подтверждалось высоким уровнем эстрогенов в крови у сук.

При фолликулярных кистах проэструс протекал без особенностей, хотя и значительно затягивался дольше. Через 3-4 недели от начала проэструса серозно-кровянистые выделения приобретали более густую дегтеобразную консистенцию.

Хронический эндометрит в основном, возникал в первые 6-7 недель метэструса. При вагинальной цитологии выявляли поверхностные ороговевшие клетки, причем степень ороговения не изменялась до конца проэструса.

Лютеиновые кисты встречались значительно реже. Диагноз устанавливали также с помощью ультразвукового исследования и на основании высокой концентрации прогестерона в крови у сук. Данная патология характеризуется существенно затянувшейся лютеиновой (диэструс) фазой и повышенной концентрацией прогестерона в крови животных.

При исследовании микрофлоры , выделенной из репродуктивных органов у сук, были выявлены кишечная палочка(27%), вульгарный протей(18%), стрептококки(23%), стафилококки(11%), ассоциации различной микрофлоры(19%), грибы рода аспергилиус и дрожжевые грибы (22%).

Для того, чтобы сохранить репродуктивные функции у особо ценных животных мы решили провести исследование параметров иммунной системы и неспецифической (естественной) резистентности защиты у сук и установить их взаимосвязь с гонадотропными гормонами с тем, что бы выработать эффективный метод лечения животных при данной патологии.

Таблица 1

Динамика содержания эстрадиола 17-1) в крови сук, при

хроническом эндометрите и фолликулярных кистах яичников (пг/мл).

Сроки исследования до лечения Группы животных

первая вторая Р третья Р

11,2±0,18 117,0±1,20 р < 0,05 123,1±2,01 р < 0,05

5-е сутки 10,8±0,80 94,3±1,13 р < 0,05 120,0±1,03 р < 0,05

10-е сутки 11,0±0,29 82,1 ±0,22 р < 0,05 87,3±0,26 р < 0,05

14-е сутки 10,3±0,72 51,3±0,63 р < 0,05 48,3±0,84 р < 0,05

30-е сутки 10,7±0,39 11,6±0,41 р > 0,05 10,9±0,38 р > 0,05

Из данных таблицы 1 видно, что у животных второй и третьей опытных групп содержание эстрадиола 17-В в крови до лечения было в 10, 5 и 11 раз выше, соответственно, чем у контрольных (здоровых) животных первой группы.

Это указывает на то что фолликулярные кисты яичников усиленно вырабатывают эстрогены, которые тормозят овуляцию. Тогда как у животных второй и третьей опытных групп различия в содержании эстрадиола в крови были менее существенны (всего в 1.1 раза р > 0,05).

На пятые сутки лечения содержание эстрадиола в крови животных второй опытной группы снизилось с данным показателем до лечения на 19,4%, а у животных третьей опытной группы данный показатель снизился соответственно 27,2%. Различия в показателях содержания эстрадиола у животных второй опытной группы по сравнению с животными контрольной группы были в 8,7 раза, у животных третьей опытной группы соответственно в 11, 1 раза.

На 14-е сутки лечения различия в содержании эстрадиола у животных второй опытной группы со здоровыми животными первой контрольной группы были в 5 раз, с животными третьей опытной группы соответственно в 4, 7 раза.

На 30-е сутки с начала лечения различия в показателях содержания эстрадиола у больных животных второй и третьей опытных групп по сравнению со здоровыми животными первой контрольной группы были недостоверны(р>0,05).

Таблица 2

Динамика содержания прогестерона в сыворотке крови сук при

хроническом эндометрите и лютеиновых кистах яичников.(нгУмл)

Сроки исследования Группы животных

первая вторая Р третья Р

До лечения 5,9±0,12 64,8± 1,13 р < 0,05 69,1± 1,74 р < 0,05

5-е сутки 5,4±0,20 43,4±1,06 р < 0,05 46,4±0,71 р < 0,05

10-е сутки 6,1±0,07 42,0±1,33 р < 0,05 46,4±0,71 р < 0,05

14-е сутки 6,0±0,17 24,3± 1,29 р < 0,05 20,3± 1,46 р < 0,05

30-е сутки 5,8±0,23 6,2±0,28 р > 0,05 6,1 ±0,09 р > 0,05

Из табл.2 видно, что содержание прогестерона в сыворотке крови животных второй опытной группы до лечения в 11 раз выше, чем у здоровых животных первой контрольной группы, а у животных третьей опытной группы данный показатель в 11,7 раза выше чем у животных первой контрольной группы.

На пятые сутки лечения содержание прогестерона в сыворотке крови у животных второй опытной группы была в 8 раз и у здоровых животных третьей опытной группы в 8, 6 раз выше соответственно по сравнению со здоровыми животными первой контрольной группы, тогда как различия между животными второй и третьей опытных групп были не существенны(р>0,05).

На тридцатые сутки с начала лечения животных концентрация прогестерона в сыворотке крови у сук второй опытной группы 6,2+-0,28 нг/мг, у животных третьей группы соответственно 6Л+-0, 09 нг/мг и у здоровых животных первой контрольной группы данный показатель был в пределах 5,8+-0,23нг/мл.

Следовательно, на 30е сутки лечения концентрация прогестерона в сыворотке крови у всех трех групп подобных животных была в пределах физиологического нормы, характерной для здоровых животных.

Таким образом, комплексный метод лечения сук больных хронического эндометрита осложненного кистой яичников позволяет на тридцатые сутки лечения концентрацию эстардиола 1713 и прогестерона довести до параметров характерных здоровым животным.

Динамика показателей иммунитета и неспецифической (естественной) резистентности при хроническом эндометрите и кистах

яичников у сук.

Таблица 3.

Динамика общего количества лимфоцитов в крови сук при хроническом __эндометрите и кистах яичника (тыс /мкл)_

Сроки исследования Группы животных

первая вторая Р третья Р

До лечения 2,16±0,05 3,20±0,01 р < 0,05 3,23±0,08 р < 0,05

5-е сутки 2,22±0,02 2,18±0,06 р < 0,05 2,20±0,03 р < 0,05

10-е сутки 2,12±0,07 2,10±0,03 р < 0,05 2,19±0,08 р < 0,05

14-е сутки 2,25±0,03 2,17±0,04 р < 0,05 2,20±0,01 р > 0,05

30-е сутки 2,20±0,09 2,13±0,03 р < 0,05 2,24±0,03 р > 0,05

Как можно видеть из табл. 3 общее количество лейкоцитов в крови сук всех 3х опытных групп в различные периодах лечения достоверных различий не имело.

Вероятно это свидетельствует о том, что при хроническом эндометрите воспалительный процесс в эндометрии матки носит скрытый характер и морфологическая характеристика клеток белой крови не имеет четко выраженных различий.

Таблица 4.

Динамика содержания Т-лимфоцитов в крови сук при хроническом

эндометрите и кистах яичников( тыс/мкл)

Сроки исследования Группы животных

первая вторая Р третья Р

До лечения 2,3±0,15 1,4±0,19 р < 0,05 1,43±0,09 р < 0,05

5-е сутки 2,3±0,21 1,3±0,17 р < 0,05 1,5±0,07 р < 0,05

10-е сутки 2,2±0,18 1,5±0,06 р < 0,05 1,7±0,23 р < 0,05

14-е сутки 2,3±0,23 1,7±0,08 р < 0,05 2,3±0,21 р > 0,05

30-е сутки 2,2±0,11 2,1±0,13 р > 0,05 2,4±0,26 р > 0,05

Из результатов исследования видно, что содержание т-лимфоцитов в крови больных животных достоверно ниже, по сравнению с данным показателем у здоровых животных I контрольной группы. Если у здоровых животных I контрольной группы содержание Т-лимфоцитов в их крови в различные возрастные периоды не имело существенных изменений, то у больных животных II и III опытных групп начиная с 10 дня с начала лечения содержание Т-лимфоцитов в их крови постепенно начинает возрастать.Также из данных табл. 4 видно, что у больных животных второй и третьей опытных групп содержание Т-лимфоцитов в крови до начала их лечения было на 39,1% и 37,8% - соответственно ниже, чем у здоровых животных первой контрольной группы. Очевидно, что это указывает на достоверное (р<0,05) снижении параметров клеточного иммунитета при данной патологии.

Таблица 5.

Динамика содержания Т-хелперов в крови сук при хроническом ___эндометрите и кистах яичников(%)._

Сроки исследования Группы животных

первая вторая Р третья Р

До лечения 22,4±1,03 15,2±1,05 р < 0,05 14,7±0,09 р < 0,05

5-е сутки 22,1 ±0,08 16,2±1,13 р < 0,05 16,4±0,10 р < 0,05

10-е сутки 22,8±0,19 17,2±0,06 р < 0,05 18,7±1,17 р < 0,05

14-е сутки 23,0± 1,21 17,8±1,27 р < 0,05 22,6±1,30 р > 0,05

30-е сутки 22,5± 1,24 17,5±1,32 р < 0,05 22,8± 1,14 р > 0,05

Содержание лимфоцитов т-хелперов (помощников) в крови здоровых животных I контрольной группы составляло 22,4±1,03%, тогда как у больных

животных II опытной группы их содержание составляло 15,2±1,05 % и у животных III опытной группы соответственно 14,7±0,09%.

Как можно видеть из результатов исследований, содержание Т-хелперов в крови у сук при хроническом эндометрите и кистах яичников было существенно ниже, чем у здоровых животных.

На тридцатые сутки с начала лечения больных животных третьей опытной группы, содержание Т-хелперов в крови достигло аналогичного показателя у здоровых животных. Вероятно, что доведение параметров Т-хелперов у больных животных третьей опытной группы до величин характерных здоровым животным первой контрольной группы является следствием благотворного воздействия иммуномодулятора баксина на иммунную систему больных животных.

Таблица 6.

Динамика содержания Т-супрессоров в крови сук при хроническом ___эндометрите и кистах яичника(%)._

Сроки Группы животных

исследования первая вторая Р третья Р

До лечения 11,3±1,2 19,7±0,6 р < 0,05 21,0±0,8 р < 0,05

5-е сутки 11,7±1,6 19,3±0,4 р < 0,05 18,2±0,03 р < 0,05

10-е сутки 12,4±1,1 18,6±0,01 р < 0,05 15,0±0,09 р < 0,05

14-е сутки 12,8±0,7 17,9±0,09 р < 0,05 12,6±0,01 Р>0,5

30-е сутки 12,5±1,1 16,8±0,02 р > 0,05 12,8±0,8 р > 0,05

Таким образом, из таблицы 6 видно, что содержание Т-супрессоров в крови сук второй и третьей опытных групп было достоверно выше(р<0,05), чем у здоровых животных первой контрольной группы. На четырнадцатые сутки с начала лечения,с использованием иммуномодулятора «Баксин-вет» удалось существенно снизить содержание Т-супрессоров в крови у сук, а значит и снизить иммунодепрессивное воздействия популяции лимфоцитов на организм больных животных.

Таблица 7

Динамика показателей содержания В-лимфоцитов в крови сук при хроническом эндометрите и кистах яичника (тыс. мкл)._

Сроки исследования Группы животных

первая вторая Р третья Р

До лечения 0,82±0,19 0,61±0,23 р < 0,05 0,64±1,17 р < 0,05

5-е сутки 0,86±0,14 0,63±0,17 р < 0,05 0,70±2,11 р < 0,05

10-е сутки 0,86±0,27 0,72±0,09 р < 0,05 0,84±0,17 р > 0,05

14-е сутки 0,90±2,15 0,88±0,23 р > 0,05 0,99±0,28 р > 0,05

30-е сутки 0,88±1,19 0,89±0,111 р > 0,05 0,92±0,22 р > 0,05

Из данных представленных в табл.7 можно видеть что содержание В-лимфоцитов в крови у сук больных хроническим эндометритом и кистой яичников до лечения было достоверно (р<0,05)ниже, чем у здоровых животных. Так, у сук второй опытной группы содержание В-лимфоцитов было на 25,6% ниже, а у животных третьей опытной группы на 21,9% ниже, чем у здоровых животных первой контрольной группы.

Данный факт указывает на то, что у больных животных второй и третьей опытных групп существенно снижен гуморальный иммунитет.

Таблица 8.

Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов крови(%).

Сроки исследовани; Группы животных

первая вторая Р третья Р

До лечения 64,3±0,15 68,3±0,08 р > 0,05 68,7±0,13 р > 0,05

5-е сутки 65,0±0,23 68,8±0,17 р > 0,05 66,3±0,08 р > 0,05

10-е сутки 66,1 ±0,17 67,4±0,20 р > 0,05 66,8±0,29 р > 0,05

14-е сутки 65,7± 1,43 64,2± 1,63 р > 0,05 65,9±0,77 р > 0,05

30-е сутки 65,9± 1,80 65,3±1,58 р > 0,05 66,0±1,24 р > 0,05

Из таблицы 8 видно, что фагоцитарная активность нейтрофилов крови у сук второй и третьей опытных групп больных хроническим эндометритом и кистой яичников до лечения животных была незначительно выше, чем у здоровых животных первой контрольной группы(р>0,05).

Таблица 9.

Динамика содержания лизоцима в сыворотке крови(мкг\мл).

Сроки Группы животных

исследования первая вторая Р третья Р

До лечения 32,4±1,26 48,2±1,13 р < 0,05 47,8±0,82 р < 0,05

5-е сутки 31,7±1,14 45,1±2,01 р < 0,05 42,7± 1,34 р < 0,05

10-е сутки 32,1±01,02 43,4±0,86 р < 0,05 32,4±0,23 р > 0,05

14-е сутки 32,8±0,73 31,9±1,17 р > 0,05 31,6±1,10 р > 0,05

30-е сутки 32,2±0,80 32,0± 1,16 р > 0,05 32,0±0,28 р > 0,05

Из таблицы 9 видно, что у сук второй и третьей опытных групп содержание лизоцима в сыворотке крови до начала лечения было на 48,8% и 47,5% выше соответственно, чем у здоровых сук первой контрольной группы(р<0,05).

По нашему мнению высокий уровень лизоцима в сыворотке крови больных животных указывает на наличие воспалительного процесса в организме животных. Вероятно, что высокая активность лизоцима в сыворотке крови больных животных играет существенную роль в подавлении воспалительного процесса в репродуктивных органах сук, так как лизоцим является одним из основных факторов неспецифической защиты организма животных.

На десятые сутки лечения животных концентрация лизоцима у здоровых животных первой контрольной группы и больных животных третьей опытной группы достоверных различий не имела(р>0,05).

Очевидно, что данный факт является следствием воздействия на иммунную систему больных животных иммуномодулятора «Баксин-вет», который за счет коррекции параметров иммунитета(Т- и В-лимфоцитов) и факторов естественной резистентности(фагоцитоз),лизоцим купировал воспалительный процесс в матке у сук, тем самым параметры иммунитета и резистентности нормализовались в связи с выздоровлением животных.

Таблица 10.

Сравнительная эффективность различных методов лечения хронического _эндометрита и кисты яичников у сук_

Показатели Группы животных

1-я группа 2-я группа 3-я группа

1.Количество животных, гол. 20 20 20

2.Выздоровело без рецидива кист, гол. - 16 (80%) 20(100%)

З.Число рецидивов кист. гол. - 4 -

4.Средняя продолжительность лечения, дн. - 14 10

5.Проведено лапаротомии,гол. - 4 -

Как можно видеть из табл. 10 из 20 сук второй опытной группы при традиционном методе лечения выздоровело 16 животных(80%), в третьей опытной группе из 20 животных выздоровело 20, т.е. 100%.

Таким образом, предложенный нами комплексный метод лечения хронического эндометрита у сук осложненного кистой яичников с использованием иммуномодулятора «Баксин-вет» позволяет восстановить иммунитет животных в течение 10 дней, вылечить животных без появления рецидивов заболевания, а также обеспечить у 12 сук проявление нормальной «пустовки» в течение ближайших 2-Зх месяцев, плодотворную вязку и получение потомства).

Мы предполагаем что состояние иммунодефицита в организме сук, больных хроническим эндометритом с кистой яичников, связана с высоким содержанием в их крови стероидных половых гормонов. Так, концентрация эстрадиола и прогестерона в крови больных животных до начала их лечения была в 10-11 раз больше, чем у здоровых животных. В то же время нами было установлено, что концентрация Т-лимфоцитов, в том числе Т-хелперов, в крови больных животных до начала их лечения была существенно ниже, чем у здоровых животных, а вот содержание лимфоцитов Т-супрессоров в крови

больных животных было многократно выше по сравнению с данным показателем у здоровых животных.

Использование при комплексном лечении больных животных иммуномодулятора «Баксин-вет» позволяет существенно снизить к четырнадцатому дню лечения животных содержание в их крови гормонов -эстрадиол и прогестерон. Также очевидно, что на четырнадцатый день лечения больных животных содержание в их крови В-лимфоцитов, а также лимфоцитов Т-хелперов и Т-супрессоров достигает параметров, характерных для здоровых животных.

Результаты проведенных нами исследований показывают, что при традиционном методе лечения больных животных с использованием антибиотиков, сульфаниламидных, антигрибковых и гормональных препаратов, параметры клеточного иммунитета(Т-лимфоциты) даже на тридцатый день с начала лечения не достигают величин характерных для здоровых животных. Тогда как параметры гуморального иммунитета(В-лимфоциты), а также факторы неспецифической резистентности(лизоцим) на четырнадцатые сутки с начала лечения больных животных второй опытной группы достигают нормы. Данный факт указывает на то, что при хроническом эндометрите и дисфункции яичников у сук больше всего угнетается клеточный иммунитет и несколько меньше гуморальный. Так как параметры клеточного иммунитета даже после тридцати дней с начала лечения не достигают нормы, тогда как параметры гуморального иммунитета на четырнадцатый день с начала лечения достигают величин характерных для здоровых животных.

Вероятно, что высокая концентрация эстрадиола 17|3 и прогестерона в крови больных животных более всего угнетает факторы клеточного иммунитета и меньше гуморального.

Использование при комплексном лечении больных животных иммуномодулятора «Баксин-вет»(третья опытная группа) позволяет к четырнадцатому дню с начала лечения устранить состояние иммунодефицита в их организме и значительно повысить эффективность их лечения.

ВЫВОДЫ

1. У 24% обследованных сук была установлена патология репродуктивных органов, в том числе у 14,6% сук из числа обследованных, был установлен диагноз - хронический эндометрит осложненный кистой яичников. В результате клинических и диагностических исследований было установлено, что у 18,5% сук хронический эндометрит сочетался с фолликулярными кистами, а у 6,4% - с лютеиновыми кистами.

2. При фолликулярных кистах отмечалась достоверно высокая концентрация эстрогенов в крови больных сук. Так, содержание эстрадиола

17р в крови больных животных достигало 123,1пг\мл, тогда как у здоровых животных содержание эстрадиола 17(3 в крови составляло - 11,7пг\мл. При этом фаза проэструс значительно удлинялась.

При лютеиновых кистах в крови больных животных отмечали высокую концентрацию прогестерона до 69,1 нг\мл, тогда как у здоровых животных содержание прогестерона в крови было на уровне 5,9 нг\мл.

При лютеиновых кистах у сук значительно удлинялась фаза диэструс.

3. При исследовании микрофлоры, выделенной из цервикальной слизи у сук были выявлены кишечная палочка(27%), вульгарный протей(18%), стрептококки(23%), стафилококки(11%), ассоциации различной микрофлоры( 19%), грибы(22%).

4. Установлено достоверное снижение в крови сук больных хроническим эндометритом и кистой яичников содержание Т-лимфоцитов - на 39,1%, лимфоцитов Т-хелперов на 34,4%, В-лимфоцитов - на 25,6%, фагоцитарной активности нейтрофилов крови на - 6,8%, что указывает на существенное снижение параметров иммунитета и неспецифической резистентности у больных животных, а повышение содержания лимфоцитов Т-супрессоров в крови больных животных на 85,8% указывает на состояние иммунодефицита.

5. Установлено,что содержание лизоцима в сыворотке крови здоровых сук составляет 32.4 мкг/мл.Содержание лизоцима в крови больных сук второй опытной группы 48,2 мкг/мл.,в третьей опытной группе 47,8 мкг/мл. При комплексном лечении с использованием иммуномодулятора «Баксин-вет»содержание лизоцима в крови больных животных достигает параметров, характерных для здоровых животных, в третьей опытной группе достигла к 10 дню, а во второй опытной группе к 30 дню с начала лечения.

6. Иммуносупрессивное воздействие половых гормонов эстрадиола и прогестерона приводит к сильному угнетению клеточных и гуморальных факторов иммунитета и неспецифической резистентности организма больных животных, что значительно затрудняет процесс их лечения.

7. Применение предложенной нами схемы лечения с использованием антибиотиков, сульфаниламидных, антигрибковых и гормональных препаратов в сочетании с водно-солевыми растворами способствовали выздоровлению больных животных 2-й опытной группы в течение 14-ти дней. Однако вышеуказанная терапия не способствовала устранению состояния иммунодефицита в Т-системе иммунитета.

8. Использование комплексного метода лечения больных животных с включением в схему их лечения иммуномодулятора «Баксин-вет» в дополнение к указанным препаратам способствовало выздоровлению животных третьей опытной группы в течение 10 дней. Вероятно, что это произошло за счет более ранней коррекции клеточного и гуморального иммунитета и усиления факторов неспецифической резистентности у больных животных данной группы за счет использования при лечении больных животных иммуномодулятора «Баксин-вет».

ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

1. Для профилактики хронического эндометрита и кисты яичников у сук необходимо проводить ежегодные плановые исследования животных с использованием узи-диагностики, клинических и лабораторных методов исследования с определением в их крови эстрадиола, прогестерона, а также основных показателей иммунитета и неспецифической(естественной) резистентности.

При клиническом исследовании животных обращать особое внимание на нарушения полового цикла, выделения из влагалища и непродуктивные вязки.

2. При лечении эндометрита осложненного кистой яичников использовать комплексный метод, направленный на повышение резинстентности организма животных, повышение сократительной способности матки. Удаление экссудата из её полости. Создание в ней асептических условий, индицирование овуляции или лютеинизацию кисты.

3. Собакам назначать антибиотики в максимальных дозах с учетом чувствительности выделенной из полости матки микрофлоры, наибольшую чувствительность выделенная микрофлора проявила к ципролету (ципрофлоксацин- антибиотик широкого спектра действия из групп фторхинолонов, обладающий нанаименьшим иммунодепресивным действием). В комплексе антибиотиков включать рокситромицин (антибиотик макролид), в дозе по 150 мг (1 таблетка) 2 раза в сутки внутрь вместе с кормом. Ципрофлоксацин вводить внутривенно по 0,3 г в 25-30 мл 0,9% р-ра натрия хлорида 2 раза в сутки.

Одновременно с антибиотиками внутрь назначать метронидазол (трихопол) по 0,2 г 2 раза в сутки, сульфаниламидный препарат - 10% р-р этазола натрия по 5 мл 2 раза в сутки внутривенно. Две капсулы иммуномодулятора Баксин один раз в день внутрь с кормом в течении 2х недель.

Для устранения грибковой микрофлоры применять микомакс по 100мг внутрь с кормом один раз в течении 5-7 дней .

Из гормональных препаратов при фолликулярных кистах внутримышечно однократно вводить 5 мкг Сурфагона, а при лютеиновых кистах яичников магоэстрофан также однократно внутримышечно в дозе по 0,2 мл.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

1. При сборе анамнеза учитывать возраст животного; характер питания, условия содержания; течение половых циклов; наличие или отсутствие родов; течение послеродового периода.

2. При проведение акушерско-гинекологической диспансеризации у сук, особое внимание обращать на: структуру влагалищных мазков; гормональные показатели (прогестерон и эстрадиол); параметры специфического иммунитета и не специфической (естественной) резистентности.

3. Результаты наших исследований подтверждают, что состояние иммунодефицита у сук больных хроническим эндометритом с кистой яичников, прежде всего связана с высоким содержанием в их крови этрадиола и прогестерона.

4. Применение комплексного метода лечения сук "больных хронического эндометрита осложненного кистой яичников с использованием: антимикробных, гормональных препаратов и имммуномодулятора «баксин-вет» способствуют: компенсации дефицита важнейших биологически активных веществ, которые в качестве неспецифических стимуляторов способны повышать параметры иммунитета и резистентности животных.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1.Федорович В.В. Возможность медикаментозного лечения эндометрита у сук, осложненного кистой яичников /В.В. Федорович// Международный вестник ветеринарии. Новые аспекты биотехнологии репродукции животных. Санкт-Петербург - 2008. - №3.- С. 39-41.

2. Федорович В.В. Влияние иммунологических факторов на возникновение после родовых эндометритов у животных / A.M. Петров, М.А. Петров, В.В. Федорович, Е.В. Путилова, Г.М. Удалов// Международный вестник ветеринарии. Новые аспекты биотехнологии репродукции животных. Санкт-Петербург - 2008. - №3.- С. 42-45.

3.Федорович B.B. Основные причины послеродовых заболеваний животных и современныхе методы их лечения. / A.M. Петров, М.А. Петров, В.В. Федорович, Е.В. Путилова, Г.М. Удалов, A.B. Панкратова// Материалы международной научно-практической конференции. Проблемы увеличения производив продуктов животноводства и пути их решения. Научные труды ВИЖа выпуск 64.Дубровицы - 2008. - с.428-431.

4.Федорович В.В. Этиология и терапия хронического эндометрита у сук , осложненного кистой яичников/ В.В. Федорович // Ветеринария и кормление -№1.-2009.-с. 18- 19.

Отпечатано в ООО «Компания Спутник+» ПД № 1-00007 от 25.09.2000 г. Подписано в печать 04.05.2009 Тираж 100 экз. Усл. п.л. 1,31 Печать авторефератов: 730-47-74,778-45-60

Актуальность темы. По данным ряда актов: В.А.Карпова, 1984., В.А. Лукьяновского, Ю.И. Филиппова, 1988., Э.Б. Мордашевой, 2002., Г.П. Дюльгера, 2002., Н.С.Саженевой, 2004., Г.Б. Чулковой, 2007., Н.С. Емельяновой, 2007., A.B. Шориной, 2007 болезни репродуктивной системы у мелких домашних животных составляют до 20% от общего числа различных заболеваний.

Одним из наиболее часто встречающихся акушерско-гинекологических заболеваний у сук является эндометрит. Восстановление слизистой оболочки матки чаще всего проявляется в виде симптомокомплекса : эндометрит, метрит, пиометра. В зарубежной литературе наряду с указанным симптомокомплексом был предложен термин метропатия, который указывает на тот факт, что данная патология имея различную этиологию, объединяется сходностью клинических признаков, методов диагностики, лечения и профилактики.

Данное заболевание чаще всего рассматривают как системное заболевание, так как оно затрагивает функцию иммунной системы, центральной нервной системы и эндокринной систем, матки яичников, молочных желез и приводит к нарушению обмена веществ в организме животных.

Следует отметить тот факт, что при развитии эндометрита, острая стадия заболевания, занимает небольшой период времени и даже может не проявляться клинически, поэтому в диссертационной работе мы рассматриваем только хроническую стадию заболевания. При проникновении микрофлоры в полость матки, развивается воспалительный процесс, в который, в первую очередь, вовлекается базальный слой эндометрия с последующим нарушением регенерации клеток с задержкой эпителизации слизистой оболочки. После поражения базального слоя воспалительный процесс распространяется в миометрии. Воспаление может захватывать слизистую и мышечную (эндометрит) или же все оболочки 4 матки (гангренозный; некротический метрит) и даже распространяться за её пределы (септический метрит) Э.Б. Мордашева, 2002., Г.П.Дюльгер, 2002.

По данным Н.С. Емельяновой (2007) у 21,7% собак встречается сочетанная патология - эндометрия и киста яичников.

Фолликулярные кисты яичников были обнаружены при проведении плановой овариоэктомии, а в остальных случаях при проведении овариогистероэктомии у сук с диагнозом хронический эндометрит и при проведении кесарева сечения у животных с патологическими родами, связанными с атонией и гипотонией матки.

Данная патология чаще всего приводит к полной потере репродуктивной функции у сук.

В настоящее время, несмотря на явную актуальность данного вопроса, как у нас в России, так и за рубежом до сих пор не разработан эффективный комплексный метод лечения животных при данной патологии.

Данная проблема также актуальна для специалистов, содержащих сук, активно использующихся в племенном разведении и, содержащихся в питомниках.

Поэтому наиболее остро стоит вопрос о ранней диагностике эндометрита и кисты яичников у сук и выборе рационального и эффективного метода лечения, позволяющего сохранить репродуктивную функцию животного. Содержание собак в квартирах, отсутствия активного моциона, влияние стрессовых и экологических факторов, режима жизни животного от хозяина, провоцируют возникновения ряда акушерско-гинекологических заболеваний у сук и в частности эндометрит и серьезно затрудняют процесс лечения животных.

Цель и задачи исследований.

Целью наших исследований является изучение хронического эндометрита у сук осложненного кистой яичников и разработка эффективного метода лечения при данной патологии. Для достижения цели нами были поставлены следующие задачи:

1. Изучить этиологию данного заболевания .основываясь на анамнезах, а также на особенностях гормональных и иммунологических показателей крови.

2. Выделить и идентифицировать микрофлору из вагинальной слизи у сук больных хроническим эндометритом.

3. Изучить концентрацию половых гормонов(прогестерона и эстрадиола) в крови здоровых сук и у больных хроническим эндометритом с кистой яичников.

4. Изучить параметры иммунитета и неснецифической защиты(резистентности) у здоровых сук и у больных хроническим эндометритом с кистой яичников.

5. Разработать эффективный комплексный метод лечения данного заболевания у сук с использованием гормональных, антимикробных, противогрибковых препаратов и иммуномодулятора «Баксин-вет».

6. Рассмотреть возможность принятия мер профилактики данного заболевания.

Научная новизна.

Изучено распространение хронического эндометрита и кисты яичников у сук в условиях Московской области. Определены основные микроорганизмы и их ассоциации, вызывающие хронический эндометрит у сук. Впервые проведеноопределение основных параметров иммунитета и неспецифической защиты (резистентности) организма сук при использовании иммуномодулятора «Баксин-вет».

Определена концентрация половых гормонов (эстрадиол и прогестерон) в крови у сук в процессе болезни и после их выздоровления.

Теоретическая и практическая значимость.

Изучены гормональные и иммунологические показатели крови у сук при хроническом эндометрите осложненном кистой яичников. Разработана и внедрена схема комплексного лечения хронического эндометрита с учетом дисфункции яичников с использованием иммуномодулятора «Баксин-вет».

При гиповолемии, детоксикации и для восстановления коллоидно-осматического состояния рекомендована многократная гидротационная терапия.

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту.

1. Результаты диагностики хронического эндометрита у сук с учетом дисфункции яичников.

2. Результаты исследования бактериальной Контаминации матки у сук при хроническом воспалении эндометрия.

3. Результаты определения эстрадиола и прогестерона в крови животных в процессе лечения и после их выздоровления.

4. Показатели основных параметров иммунитета и неспецифической защиты (резистентности) организма животных при хроническом эндометрите с использованием для лечения иммуномодулятора «Баксин-вет».

5. Результаты внедрения комплексного метода лечения хронического эндометрита и кисты яичников у сук с использованием антибиотиков, сульфаниламидных, антигрибковых препаратов, метронидазола , гормональных препаратов и иммуномодулятора «баксин-вет».

Апробация работы.

Основные результаты диссертационной работы доложены обсуждены и одобрены на конференциях профессорско-преподавательского состава , научных сотрудников и аспирантов Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина (2006-2008); Международной научно-практической конференции «Проблемы увеличения производства продуктов животноводства и пути их решения» ГНУ

Всероссийский научно исследовательский институт животноводства (ВНИИЖ) , Дубровицы, 2008; Международной научной конференции посвященного 200-летию высшего ветеринарного образования и основания Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины на тему: « Новые аспекты биотехнологии репродукции животных» . Санкт-Петербург, 2008; На XVI Московском международном конгрессе по болезням мелких домашних животных (2008).

Публикации

По результатам собственных исследований с 2005-2008 гг. опубликовано 4 статьи , в том числе 4 статьи в изданиях рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 132 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных, обсуждение выводов, практических предложений и списка используемой литературы. Работа иллюстрирована 10 таблицами и 5 рисунками.

ВЫВОДОВ

1. При сборе анамнеза учитывать возраст животного; характер питания, условия содержания; течение половых циклов; наличие или отсутствие родов; течение послеродового периода.

2. При проведение акушерско-гинекологической диспансеризации у сук, особое внимание обращать на: структуру влагалищных мазков; гормональные показатели (прогестерон и эстрадиол); параметры специфического иммунитета и не специфической (естественной) резистентности.

3. Результаты наших исследований подтверждают, что состояние иммунодефицита у сук больных хроническим эндометритом с кистой яичников, прежде всего связана с высоким содержанием в их крови этрадиола и прогестерона.

4. Применение комплексного метода лечения сук больных хронического эндометрита осложненного кистой яичников с использованием: антимикробных, гормональных препаратов и имммуномодулятора «баксин-вет» способствуют: компенсации дефицита важнейших биологически активных веществ, которые в качестве неспецифических стимуляторов способны повышать параметры иммунитета и резистентности животных.