Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Динамика морфофункциональных показателей и разработка оперативного лечения при перитоните у мелких домашних животных

На правах рукописи

Слинько Вадим Владимирович

ДИНАМИКА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ

И РАЗРАБОТКА ОПЕРАТИВНОГО ЛЕЧЕНИЯ ПРИ ПЕРИТОНИТЕ У МЕЛКИХ ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ

16.00.02 — патология, онкология и морфология животных 16.00.05 — ветеринарная хирургия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ставрополь — 2006

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет»

Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент

Квочко Андрей Николаевич

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Боташева Валентина Салиховна

доктор ветеринарных наук, доцент Тарасенко Павел Александрович

Ведущая организация: Северо-Кавказский зональный

научно-исследовательский ветеринарный институт

Защита диссертации состоится « » (Хы/Л'^-? 2006 г. в 1000 часов на заседании диссертационного ¿овета Д220.062.02 при ФГОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет» (355017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический, 12).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет»

Автореферат разослан «/3 » 2006 г.

Ученый секретарь ^ /у/*)

диссертационного совета Л^г —^ Квочко А. Н.

/роб А

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Перитонит является одной из актуальных проблем современной ветеринарной хирургии. Заболеваемость, в равной мере, как и летальность при нем, и в наши дни не имеют тенденции к снижению. Более того, в последние десятилетия наблюдается заметный рост этих показателей (В. Я. Глумов, А. В. Пермяков, Н. А. Кирьянов, 1987; В. И. Бондарев, JI. Д. Тара-ненко, П. Ф. Головня, Н. В. Свиридов, 1990; А. В. Стифуткин, Г. С. Федотов, О. П. Иванов, К. А. Апарцин, 1997; S. M. Willatts, D. С. Speller, R. J. Winter, 1994; и др.).

Острый разлитой перитонит по клиническим проявлениям, пато- и морфогенезу, а также прогнозу заболевания существенно отличается от других форм ограниченного гнойного воспаления органов (А. И. Струкова, В. Н. Петрова, В. С. Паукова, 1987).

Патоморфологическими исследованиями при перитоните занимались как отечественные, так и зарубежные ученые (H.H. Ха-чатрян, 1988; Р. А. Григорян, 1990; Г. С. Иванова, 1990; В. С. Пауков, Е. В. Орехова, 1990; B.C. Савельев, Б. Р. Гельфанд, 1990; П. А. Манохин, 1993; M. М. Мамакеев и соавт., 1994; В. А. Хаки-мов, 1995; Е. Г. Григорьева, А. С. Коган, 1996; Н. Denn, Е. Yetkin, at al., 1987; Y. Takesue, 1987; R. Fukushima, L. Gianotti, J. W. Alexander, 1994; S. I. Vas, 1994; J. A. Burger, et al., 1995 и др.).

Вопросы его лечения в течение всех последних лет остаются чрезвычайно важными для хирургов в связи с увеличением объема оперативных вмешательств, снижением общей реактивности больных животных, возрастанием количества резистентных к антибиотикам штаммов микробов (В. Ф. Медведев, 1975; М. Ю. Белокуров, В. И. Мозенков, А. А. Жуков, 1984; Б. Р. Гельфанд и соавт., 1996; H. Abacioglu, et al., 1993; S. Bhakdi, 1994; S. M. Willatts, 1994; R. G. Holzheimer, at al., 1995; C.A. Jacobi, et al., 1997; C. Ohmann, at al., 1997; H. van Goor, 1997 и др.).

Несмотря на обширность литературных данных вопросы морфологии, клиники и разработка новых схем терапии при перитоните остаются актуальными в настоящее время и требуют уточнения.

1.2. Цель и задачи исследований. Основной целью исследования является изучение динамики морфологических и функциональных показателей у мелких непродуктивных жидохАЫ_х на разных

РОС НАЦИОНАЛЬНАЯ I ,

j библиотека I J

} С. Петербург о// J

стадиях и при различных схемах лечения перитонита. В соответствии с этим перед нами поставлены следующие задачи:

— Определить морфофункциональные показатели в организме мелких непродуктивных животных на разных стадиях перитонита, а также при различных схемах его лечения.

— Проследить динамику качественного состава клеток и количества высеваемых колоний из брюшной полости при перитоните и при использовании различных схем его лечения.

— Изучить патоморфологические изменения в тканях и органах в зависимости от стадии развития перитониального процесса и при различных схемах его лечения.

— Испытать различные схемы диализа при лечении перитонита и определить их экономическую эффективность.

1.3. Научная новизна. Уточнены и представлены новые данные о динамике гематологических и биохимических показателей крови при перитоните и при различных схемах его лечения. Изучен качественный состав клеток перитониальной жидкости и представлены сведения о динамике количества высеваемых колоний микробных клеток из брюшной полости на разных стадиях и при различных схемах лечения перитонита. Описаны морфологические изменения в тканях и органах крыс и собак в динамике перитонита и при применении различных схем его лечения. Испытаны традиционные и предложена новая эффективная схема лечения перитонита с применением в диализирующем растворе амоксиклава.

1.4. Теоретическая и практическая ценность работы. Выявлена динамика в морфофункциональных показателях крови, качественном составе перитониальной жидкости и клинико-морфологичес-ком проявлении перитонита в эксперименте у крыс и при лечении собак, что может использоваться в ветеринарной медицине при оценке здоровья, а также дает основание для прогнозирования патологии брюшины. Экспериментально доказан высокий лечебный эффект использования в перитониальном диализе антибиотика амоксиклав, по сравнению с применением только диа-лизирующего раствора и при добавлении в него пенициллина и стрептомицина.

1.5. Реализация результатов исследований. Основные результаты научных исследований вошли в отчеты по научно-исследовательской работе ФГОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет» за 2003—2006 гг.

Материалы исследований используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий, научных исследований в Ставропольском, Воронежском, Донском, Кубанском и Орловском ГАУ, в Ижевской, Ивановской и Брянской ГСХА, в Ставропольском и Брянском ГУ, в Смоленской ГМА. Внедрены в лечебной и исследовательской работе ветеринарных клиник городов Ставрополя и Таганрога.

1.6. Апробация работы. Основные положения диссертации доложены, обсуждены и получили положительную оценку на двух научных конференциях профессорско-преподавательского состава ФГОУ ВПО «Ставропольский ГАУ» (2004, 2005гг.), на научно-практических конференциях Вятской ГСХА (2004), Уральской ГАВМ (2005).

1.7. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 научных статей.

1.8. Основные положения, выносимые на защиту:

- Применение в диализирующем растворе амоксиклава при различных фазах перитониального процесса ускоряет процесс выздоровления.

— Деструктивные процессы в органах и тканях обусловлены фазами перитониального процесса.

1.9. Объем и структура работы. Диссертация изложена на 187 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследования, выводов, практических предложений, списка литературы. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 60 рисунками. Список литературы содержит 232 источника, в том числе 46 зарубежных.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

Исследования проведены с 2003 по 2005 год в клинике кафедры физиологии и хирургии ФГОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет», клинической лаборатории Ставропольской краевой больницы.

Объектом исследования служили лабораторные крысы линии «ВИСТАР» (п=117) и беспородные собаки (п=12), поступающие в клинику с признаками перитонита.

Исследования по выполнению экспериментальной части работы проводили в четырех группах крыс (п=117). Контролем явля-

лись 9 крыс, у которых в день эксперимента отбирали пробы крови. В оставшихся четырех экспериментальных группах было по 27 животных.

С целью моделирования перитониального процесса крысам всех групп в брюшную полость вводили 2,5% каловую взвесь в объеме 1,5—2,0 мл по методике С. С. Ременника (1965).

В первой группе изучали динамику перитониального процесса. Во второй — эффективность лечения зараженных крыс только диализирующим раствором (смесь: гемодез + 0,9% раствор NaCl + 40% раствор глюкозы). В третьей экспериментальной группе применяли диализирующий раствор с добавлением пенициллина (10000 ЕД/кг) и стрептомицина (10 мг/кг), а животным четвертой группы использовали диализирующий раствор с добавлением антибиотика — амоксиклава (40 мг/кг). Диализирующий раствор в брюшную полость вводили каждые 8 часов через дренажную систему, которую подшивали к вентральной брюшной стенке. Раствор в брюшной полости оставляли на 15 минут, а затем удаляли путем аспирации шприцем.

Для изучения гематологических и биохимических показателей крови мелких непродуктивных животных в норме и при перитоните нами были отобраны пробы. Кровь брали в две пробирки, у собак из Vena Safena, а у крыс путем декапитации. В качестве стабилизатора, для гематологического исследования использовался гепарин, который добавляли в одну из пробирок, из расчета на 1 мл крови 5 ЕД гепарина. Из другого образца крови получали сыворотку для биохимических исследований.

Количество эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов и их морфологический состав, а также уровень гематокрита и гемоглобина определяли на гематологическом анализаторе (CD 1700), фирмы ABBOT (США, Япония).

При биохимическом исследовании в сыворотке крови определяли показатели, характеризующие обмен белков, азотистых веществ, углеводов, некоторых минеральных веществ (кальций, натрий, калий), а также активность отдельных ферментов.

Так, при изучении белкового и азотистого обменов нами было определено количество общего белка сыворотки крови, содержание мочевины и креатинина.

О состоянии углеводного обмена судили по содержанию в сыворотке крови глюкозы.

Для оценки состояния минерального обмена исследовали содержание в сыворотке крови общего кальция, калия и натрия.

В сыворотке крови нами определена активность аспартатами-нотрансферазы (АсАТ, К.Ф.2.6.1.1.), аланинаминотрансфера-зы (АлАТ, К.Ф.2.6.1.2.), гаммаглутамилтрансферазы (ГГТ, К.Ф.2.З.2.1.), щелочной фосфатазы (ЩФ, К.Ф.З.1.З.1.), и а-ами-лазы (амилаза, К.Ф.З.2.1.1.).

Все биохимические исследования проводили на автоматическом биохимическом анализаторе ARCHITECT (с 8000) фирмы ABBOT (США, Япония), с помощью биотестов системы AEROSET.

Нами также была прослежена динамика и выяснен качественный состав клеток, а также подсчитано количество высеваемых колоний из смывов брюшной полости при экспериментальном перитоните и при использовании различных схем лечения этого процесса.

При микробиологическом исследовании у животных первой группы смывы из брюшной полости (стерильным теплым (t=37 °С) 0,9% раствором NaCl) отбирали в первый, третий, шестой и девятый день. У животных второй, третьей и четвертой группы смывы отбирали на третьи, шестые и девятые сутки патологического процесса. Это связано с тем, что животных заражали за день до оперативного вмешательства, и в результате эксперимента полученные данные на первые сутки перитониального процесса во всех опытных группах различий не имели.

Для разведений смывов использовали стерильный 0,9% физиологический раствор NaCl рН 7,2. Затем готовили стерильными пипетками возрастающие десятикратные разведения от 10~' до Ю-7. Из разведений Ю-7 и 10~6 проводили высев (по 0,1 м3) на поверхность МПА в чашки Петри. Каждое разведение высевали на две чашки с МПА и инкубировали при температуре 37—38 °С в течении 18—20 часов, при этом чашки переворачивали дном вверх. По истечении срока культивирования подсчитывали колонии.

Для определения качественного состава клеток из смывов брюшной полости были сделаны мазки, которые фиксировали метиловым спиртом и окрашивали по методу Романовского-Гимза.

С целью изучения динамики обменных процессов, проходящих на органном, тканевом и клеточном уровнях у крыс с признаками гнойного перитонита, мы проводили гистологические и гистохимические исследования. Для этого отбирали кусочки брю-

шины, сердца, печени, почек, легких, поджелудочной железы, селезенки, а также тонкого и толстого отдела кишечника.

Отобранный материал фиксировали 10,0% водным раствором нейтрального формалина. Фиксированную ткань разрезали на небольшие кусочки, проводили через спирты возрастающей крепости. После проводки кусочки заливали в парафин.

После заливки кусочки органов и тканей фиксировали на деревянные блоки, а затем делали гистосрезы на микротоме толщиной 5-7 мкм.

Для обзорных целей гистосрезы окрашивали гематоксилин-эозином и по способу Ван Гизон, тучные клетки выявляли основным коричневым по методу Шубича, изложенным в руководствах по гистохимии (Э. Пирс, 1962; Д. Кисели, 1962; Ю. Т. Техвер, 1977).

Экономическую эффективность лечебных мероприятий рассчитывали по методике, предложенной И. Н. Никитиным и соавт. (1995).

Полученные данные анализировали, а числовые показатели обрабатывали методом Ньюмена-Кейлса, двустороннего критерия Стьюдента в программе Primer of Biostatistics 4.03 для Windows-95, на IBM-совместимом компьютере. Достоверными считали различия при р<0,05.

2.2. Результаты исследований

2.2.1. Гематологические показатели и клиническое проявление при экспериментальном перитоните у крыс и при различных схемах его лечения

Клиническая картина острого разлитого перитонита проявляется по истечении 10-12 часов и характеризуется отказом от корма и воды, шаткостью походки, сильной болезненностью брюшной стенки, гипертермией, тахикардией и полипноэ.

В результате исследования выявлено, что использование диа-лизирующего раствора с добавлением амоксиклава нормализует клинические показатели после третьего дня лечения, а применение только диализирующего раствора или добавление к нему пенициллина и стрептомицина удлиняет этот период до девяти дней.

Установлено (табл. 1.), что острый перитонит характеризуется высокими значениями гематокрита (выше на 21,1%, р<0,05), лейкоцитозом (выше в 2,6 раза), гранулоцитозом (выше в 5,1 раза) и тромбоцитозом (выше в 2,5 раза), которые прогрессируют до девятого дня болезни. Наблюдаемые эритроцитоз (выше на 19,34%,

р<0,05), гиперхромемия (выше на 21,11%, р<0,05) и лимфоцитоз (выше на 17,24%) до шестого дня патологического процесса к девятому дню сменяются эритроцитопенией (ниже на 5,9%), олигох-ромемией (ниже на 32,1 %, р<0,05) и лимфопенией (ниже на 23,1 %), что указывает на угнетение гемопоэза и иммунной системы.

Таблица 1.

Гематологические показатели у крыс при экспериментальном перитоните

№ п/п Показатель М±ш Дни течения перитониального процесса Здоровые животные

1 сутки 3 сутки 6 сутки 9 сутки

1. Гематокрит, % 27,07±0,63 34,30+1,02 35,97±0,09 31,17±1,01 29,7±1,0

2. Эритроциты, 1012/л 5,66±0,10 6,43±0Д5 6,91±0,02 5,45±0,11 5,79±0,42

3. Гемоглобин, г/л 104,0±0,60 124,3+1,80 132,7±0,70 79,0±9,00 116,3±0,30

4. Лейкоциты, 1СР/л 10,53±0,34 4,53±0,67 5,80+0,25 5,90±0,95 4,03±0,94

5. Гранулоциты, 109/л 1,53±0,27 0,40+0,058 1Д0±0,058 2,33+0,81 0,30+0,00

6. Лимфоциты, 10% 6,37+0,19 3,7±0,06 3,40±0,21 2,23±0,09 2,90+0,60

7. Тромбоциты, 10% 627,0±9,30 457,0±20,03 616,0+5,13 604,7±10,84 255,7±30,75

Примечание: достоверность различий указана по тексту (р<0,05).

Испытание различных схем диализа показало, что применение амоксиклава позволяет снизить воспалительную реакцию в организме животных, начиная с третьего дня лечения гнойного перитонита, что подтверждается снижением в крови лейкоцитов и отдельных их форм (гранулоцитов и лимфоцитов) к значениям здоровых животных. В то время, как при применении только диализирующего раствора или с добавлением в него пенициллина и стрептомицина лейкоцитоз наблюдается до девятого дня лечения.

2.2.2. Обмен веществ у крыс при экспериментальном перитоните и при различных схемах его лечения

Биохимические показатели сыворотки крови крыс находятся в тесной зависимости от стадии перитониального процесса и ха-

растеризуются высокими значениями общего белка в первые сутки (выше на 12,6%, р<0,05), последующим его снижением к третьему дню на 9,8%, а затем увеличением на 14,8% (р<0,05) (табл. 2.).

Таблица 2.

Динамика обмена веществ у крыс при экспериментальном перитоните

№ п/п Показатель М±т Дни течения перитониального процесса Здоровые животные

1 сутки 3 сутки 6 сутки 9 сутки

1. Общий белок, г/л 68,7 ±4,1 55,0±0,6 70,0±0,6 73,0±0,6 61,0+1,2

2. Креатинин, мкмоль/л 49,3±1,9 37,3±1,5 49,0±0,6 37,7±0,6 41,7±0,9

3. Мочевина, ммоль/л 6,8±0,5 4,6±0,1 6,9±0,5 6,0±0,1 3,1±0,3

4. Глюкоза, ммоль/л 4,7±0,3 5,8±0,1 5,3±0,1 5,9±0,2 4,8±0,1

5. АлАТ, мккат/л 57,3±2,6 76,0±2,1 62,3±1,5 35,7±5,0 39,7±1,8

6. АсАТ, мккат/л 506,7+33,2 266,0±2,1 435,0±39,1 268,3±1,7 193,7±6,4

7. ГТТ, мккат/л 7,5±0,3 8,7±0,3 10,2±0,5 31,0±3,8 3,1±0,2

8. ЩФ, мккат/л 200,0±5,8 315,3±12,7 422,0±51,5 435,7±2,1 83,3±7,3

9. Амилаза, ед. 1303,0±93,8 860,0±16,9 1505,0+33,7 1096,0±90,6 867,0±10,8

10. Кальций, ммоль/л 0,7±0,09 1,9±0,01 2,0+0,07 2,2±0,04 0,6±0,03

11. Натрий, ммоль/л 146,0±4,20 123,7±4,20 150,0±3,00 146,7+2,20 133,0+3,60

12. Калий, ммоль/л 8,1 ±0,60 7,8±0,10 9,2±1,06 7,1 ±0,20 6,3±0,30

Примечание' достоверность различий указана по тексту (р<0,05).

В первый день болезни уровень креатинина и мочевины повышается на 18,2% (р<0,05) и в 2,2 раза. К третьим суткам он снижается на 24,3% и 32,4%, а затем вновь увеличивается до значений первого дня, что обусловлено, на наш взгляд, циркулятор-ной недостаточностью почек.

Уровень глюкозы к третьему дню патпроцесса увеличивается на 20,8% (р<0,05) с сохранением этих значений до девятых су-

ток, что, на наш взгляд, связано с усиленным распадом гликогена в различных органах и тканях в результате развития стресса и поражением поджелудочной железы, что было подтверждено нами при морфологическом исследовании.

До шестого дня патологического процесса в сыворотке крови отмечается высокая активность АлАТ (выше на 91,4%), в то время как высокая активность АсАТ (выше в 2,2 раза), амилазы (выше на 73,6%), ЩФ (выше в 5,2 раза) и ГГТ (выше в 10 раз) сохраняется вплоть до девятого дня болезни, что, на наш взгляд, обусловлено значительными повреждениями клеток органов и тканей.

Содержание кальция постепенно увеличивается к девятому дню (в 3,7 раза), а уровень натрия и калия меняется волнообразно и к девятому дню болезни выше, чем у здоровых на 10,3% (р<0,05) и 11,6%.

При лечении перитонита только диализирующим раствором или при добавлении в него пенициллина и стрептомицина выявлено, что к девятому дню остаются стабильно высокими значения уровня общего белка, креатинина, мочевины, щелочной фосфатазы, ГГТ, кальция и калия.

Использование в диализирующим растворе амоксиклава показало, что уже с третьего дня лечения этого патологического процесса стабилизируется биохимический профиль сыворотки крови, что позволяет рекомендовать эту схему для лечения распространенного перитонита.

2.2.3. Цитологические и бактериологические показатели перито-ниалыгого содержимого при гнойном перитоните

Изучение мазков, полученных из смывов брюшной полости, показало, что развитие воспалительного процесса в брюшине, вплоть до девятого дня эксперимента, сопровождается усиленной миграцией в очаг воспаления всех форм лейкоцитов (преимущественно сегментоядерных нейтрофилов).

В мазках из смывов брюшной полости, при использовании первой и второй схем диализа, вплоть до девятого дня присутствовали сегментоядерные нейтрофилы и моноциты, что указывает на затяжное течение процесса и свидетельствует о недостаточной эффективности данных схем.

При лечении гнойного перитонита диализирующим раствором с добавлением амоксиклава в мазках перитониальных смывов выявлена положительная динамика уже с третьего дня патологи-

ческого процесса, а к девятым суткам в них регистрировались только очень мелкие и разрушенные крупные лимфоциты, что указывает на фазу выздоровления.

Наименьшее количество высеваемых колоний также наблюдалось при лечении экспериментального перитонита с добавлением в диализирующий раствор амоксиклава (табл.3.), что, несомненно, указывает на высокую лечебную эффективность данной схемы.

Таблица 3.

Количество колоний, высеваемых из брюшной полости, при перитоните в динамике и при применении различных схем диализа

№ Схема лечения Дни течения патологического процесса

п/п 1 сутки 3 сутки 6 сутки 9 сути

1. Без лечения сплошной сплошной сплошной сплошной

рост рост рост рост

2. Диализирующий раствор сплошной рост сплошной рост 33,0±1,2 27,0±1,7

3. Диализирующий раствор+пеници-ллин и стрептомицин сплошной рост 24,0±1,5 14,0±1,6 5,0±1,6

4. Диализирующий раствор+амокси-клав сплошной рост 6,3±0,9 2,7±0,7 о,з±о,з

Прослеженная нами положительная динамика в гематологических, биохимических, цитологических и бактериологических показателях при лечении перитонита у крыс, с применением ди-ализирующего раствора с амоксиклавом, дала основание к испытанию его у собак.

2.2.4. Динамика гематологических и биохимических показателей у собак при лечении распространенного перитонита диализирующим раствором с добавлением амоксиклава.

В результате гематологического и биохимического исследования крови собак установлено (табл. 4.), что при лечении перитонита диализирующим раствором с применением амоксиклава к девятому дню снижается воспалительная реакция, что подтверждается уменьшением содержания лейкоцитов, гранулоцитов и тромбоцитов. В то время как количество эритроцитов (на 22,03%, р<0,05), уровень гемоглобина (на 50%, р<0,05) и гематокритное

число (на 19,9%, р<0,05) остаются даже на девятые сутки ниже значений здоровых собак, что указывает на угнетенный гемопоэз.

Таблица 4.

Гематологические и биохимические показатели у собак (п=12) при лечении перитонита анализирующим раствором с добавлением амоксиклава

№ п/п Показатель М±т Дни течения перитониального процесса Здоровые животные

1 сутки 3 сутки 6 сутки 9 сутки

1. Гематокрит, % 40,7±1,1 27,3+1,3 24,5±0,4 30,6±0,3 38,2±0,7

2. Эритроциты, 1012/л 6,9±0,3 4,2±0,2 3,8±0,1 4,6±0,2 5,9+0,7

3. Гемоглобин, г/л 154,0±8,0 119,0±7,0 83,0±3,0 71,0±2,0 142,0±19,0

4. Лейкоциты, 109/л 15,9+0,5 15,2±0,2 13,8±0,2 12,9±0,7 12,1 ±0,6

5. Гранулоциты, 109/л 1,4+0,1 1,3±0,1 1,1±0,1 0,9±0,1 0,7+0,1

6. Лимфоциты, 109/л 4,7±0,4 7,4±0,2 9,7±0,9 7,2±0,1 4,5±0,1

7. Тромбоциты, тыс. 214,7±12,9 235,3±14,9 326,7±2,0 336,0 ±1,2 328,3±1,7

8. Общий белок, г/л 55,3±2,7 49,7±2,3 40,3±2,1 43,7+1,2 69,7±3,2

9. Креатинин, мкмоль/л 46,0±1,2 78,0+1,7 92,0±1,5 80,7±1,2 64,0±5,9

10. Мочевина, ммоль/л 3,1+0,1 1,7±0,1 2,5+0,1 3,6+0,1 4,3±0,5

11. Глюкоза, ммоль/л 3,1±0,2 4,5±0,2 2,7+0,1 2,4±0,1 2,9±0,3

12. АлАТ, мккат/л 36,7+1,9 20,0±0,6 17,7±0,9 25,7±0,3 24,0±0,6

13. АсАТ, мккат/л 80,7+1,2 38,0+1,5 41,3+1,5 37,3±0,3 35,7±0,3

14. ГГТ, мккат/л 8,3±0,3 4,8±0,3 6,3±0,2 7,0+0,2 6,7±0,9

15. ЩФ, мккат/л 155,7±5,2 124,3±8,7 85,7±4,3 58,3+5,5 44,7±1,9

16. Амилаза, ед. 289,0±18,8 905,3±12,2 596,0±22,1 681,3+13,9 499,3±47,7

17. Кальций, ммоль/л 2,2±0,1 2,3±0,1 1,7+0,1 2,2±0,1 2,1±0,1

18. Натрий, ммоль/л 142,7±3,8 106,3+1,8 112,7+1,8 121,0+2,3 105,7±4,3

19. Калий, ммоль/л 4,2±0,3 2,8±0,2 3,3±0,1 3,6±0,1 3,3±0,1

Примечание: достоверность различий указана по тексту (р<0,05).

Применение в лечении перитонита у собак схемы с добавлением в диализирующий раствор амоксиклава характеризуется к девятому дню положительной динамикой в уровне мочевины, глюкозы, активности АлАТ, АсАТ и ГГТ, а также содержании кальция и калия. Такие показатели, как содержание общего белка (ниже нормы на 37,3%, р<0,05), креатинина (выше нормы на 26,1%, р<0,05), активности ЩФ (выше нормы на 30,4%) и амилазы (выше нормы на 36,5%, р<0,05), а также уровень натрия (выше нормы на 14,5%, р<0,05) даже к девятому дню не приходят к величинам здоровых животных, что свидетельствует о еще ' недостаточном восстановлении организма.

2.2.5. Патоморфологические изменения при перитоните

При использовании только диализирующего раствора к концу эксперимента выжило 14 крыс. Применение диализирующего раствора с добавлением пенициллина и стрептомицина показало, что в живых осталось 9 животных. При лечении диализирующим раствором с добавлением амоксиклава выжило 22 крысы, а у собак гибели не наблюдалось.

В динамике экспериментального перитонита у крыс при гистологическом исследовании фрагментов париетальной брюшины обнаружен ряд характерных изменений.

На первые сутки отмечаются дистрофические изменения и набухание клеток мезотелия. В подлежащей соединительнотканной основе регистрируется отек, разрыхление соединительнотканных волокон и полнокровие сосудов.

При окраске основным коричневым в брюшине обнаружено увеличение количества тучных клеток (тканевых лаброцитов), цитоплазма которых заполнена множеством гранул.

На третьи сутки отмечается десквамация мезотелия на значи- »

тельном протяжении с участками изъязвления. Соединительнотканная основа брюшины отечная и инфильтрирована полиморф-ноядерными лейкоцитами и примесью лимфоцитов, плазматических клеток и единичных макрофагов, а также обнаружены дегранулированные тучные клетки, окруженные собственными гранулами в виде кольца.

На шестые сутки отложения фибрина с большим количеством полиморфноядерных лейкоцитов. В соединительнотканной основе нарастает отек и интенсивность воспалительной инфильтрации, которая приобретает диффузный характер. При

окраске пикрофуксином по Ван Гизон определяются набухание и гомогенизация коллагеновых волокон, фрагментация их на отдельные сегменты. Наблюдаются признаки дезорганизации соединительной ткани по типу фибриноидного набухания. Воспалительная реакция переходит на жировую и поперечно-полосатую мышечную ткань передней брюшной стенки. В мышечной ткани наблюдается диффузный отек с разрыхлением соединительнотканных прослоек, дисциркуляторные нарушения (полнокровие сосудов, стазы, диапедезные кровоизлияния), дистрофические изменения ткани мышц (гидропическая дистрофия, плазмолиз). В брюшине также встречаются тучные клетки в большом количестве, но значительная часть из них в стадии дегрануляции.

На девятые сутки в париетальной брюшине выявлены некротические изменения почти на всем протяжении с глубокими изъязвлениями, в которых наблюдается разрастание грануляционной ткани. Отмечается отек грануляционной ткани и обширные кровоизлияния. Соединительнотканная основа брюшины отечная с густой и диффузной лейкоцитарной инфильтрацией, в которой много распадающихся нейтрофильных лейкоцитов. Происходит набухание и распад основного вещества соединительной ткани с очагами фибриноидного некроза. В мышечной ткани передней брюшной стенки отмечается полное исчезновение поперечной ис-черченности, тяжелые дистрофические изменения мышечных волокон, местами переходящие в некробиоз. В жировой ткани нарастают сосудистые нарушения, а также интенсивность и распространенность воспалительной инфильтрации.

От первого к шестому дню болезни, несмотря на лечение перитонита только диализирующим раствором, воспалительные изменения в брюшине сохраняются. Однако на её поверхности отложения фибрина незначительные по сравнению с контрольной группой. К девятым суткам продолжают нарастать дистрофические и деструктивные изменения, а также интенсивность воспалительной реакции.

При лечении патологического процесса только диализирующим раствором или с добавлением в него пенициллина и стрептомицина установлено, что к первому дню в брюшине развиваются идентичные изменения, выявленные нами при изучении срезов по динамике гнойного перитонита.

К третьим суткам отмечается распространение отека на всю брюшину, усиление интенсивности сосудистых нарушений (полнокровие, стазы). В соединительнотканной основе брюшины выявляется умеренно выраженная воспалительная инфильтрация.

На шестые сутки воспалительная инфильтрация в брюшине сохраняется. Патологический процесс распространяется на подкожно-жировую клетчатку и мышцы передней брюшной стенки.

К девятому дню воспалительная инфильтрация охватывает все слои брюшины. Количество тучных клеток в брюшине увеличено, расположены они преимущественно вокруг сосудов. Однако среди них преобладают дегранулированные формы.

При лечении перитонита диализирующим раствором с добавлением амоксиклава установлено, что изменения в брюшине в третий день патпроцесса аналогичны гистологической картине первой, второй и третьей экспериментальных групп животных. Отличие заключается лишь в меньшей интенсивности отека и сосудистых нарушений.

На шестые сутки от начала лечения наблюдается истончение фибринозной пленки и частичное отторжение ее от поверхности брюшины. В соединительнотканной основе брюшины наблюдается умеренно выраженный диффузный отек. Сосудистые изменения незначительные. Воспалительная инфильтрация соединительнотканной основы брюшины умеренно выражена, носит диффузный характер. Инфильтраты состоят в основном из лимфоцитов с небольшой примесью плазматических клеток и макрофагов. В предбрюшинной клетчатке и поперечно-полосатой мышечной ткани воспалительная инфильтрация отсутствует, имеется лишь небольшой отек. На фоне диализа с амоксиклавом на 6-е сутки развивается серозно-фибринозный перитонит без вовлечения в патологический процесс подлежащей ткани.

На девятый день от начала лечения отмечается полное очищение поверхности брюшины от фибринозной пленки. На поверхности брюшины наблюдается разрастание юной грануляционной ткани с большим количеством сосудов капиллярного и синусоидно-го типа. Между сосудами располагаются многочисленные клеточные элементы: фибробласты, фиброциты, макрофаги, лимфоциты, единичные полинуклеары.

л

При лечении перитонита амоксиклавом начиная с третьих суток количество тучных клеток в брюшине постепенно уменьшается, среди них преобладают дегранулированные формы.

Таким образом, перечисленные морфологические изменения брюшины при различных схемах диализа позволяют сделать вывод о том, что наиболее высоким терапевтическим эффектом обладает схема с применением амоксиклава.

В своей работе мы также представили морфологические изменения внутренних органов при перитоните в динамике, а также после лечения данной патологии диализирующим раствором с добавлением амоксиклава, так как данная схема лечения оказалась наиболее эффективной.

При перитоните в сердце развиваются тяжелые дистрофические изменения по типу миокардиодистрофии, очагового миокардита и перикардита.

После проведенного лечения амоксиклавом воспалительных и деструктивных изменений в миокарде не обнаружено, сосудистые нарушения купированы, отек стромы исчез. В части наблюдений после лечения определяются мелкие очажки разрастания соединительной ткани.

В печени имеют место выраженные дистрофические изменения гепатоцитов (гидропическая и баллонная дистрофия), воспалительная инфильтрация портальной и внутридольковой стромы.

После лечения перитонита диализирующим раствором с добавлением амоксиклава происходит восстановление структуры печени, уменьшение степени дистрофических изменений, купирование отека и сосудистых нарушений, значительное уменьшение и полное исчезновение воспалительной инфильтрации.

При перитоните в почках наблюдаются дистрофические изменения эпителия канальцев, сосудистые нарушения особенно в мозговом слое, умеренный интерстициальный отек и воспалительная инфильтрация. Описанные морфологические изменения характерны для пиелонефрита.

После проведенного лечения амоксиклавом в почках значительно уменьшается или полностью исчезает отек, купируются сосудистые нарушения, исчезает воспалительная инфильтрация. Лишь местами видны мелкие скопления лимфоцитов. В эпителии

канальцев в местах бывшего некроза видны островки регенерирующих светлых эпителиальных клеток.

Наблюдаются нарушения и воспалительные изменения в паренхиме и строме легких. Развивается очаговая пневмония, с выраженным интерстициальным компонентом и перифокальная эмфизема. На девятый день в легких развивается гнойная пневмония. У подопытных животных, павших от перитонита, в легких обнаружена тяжелая гнойно-деструктивная пневмония с абсцеди-рованием.

После проведения лечения амоксиклавом экссудат в альвеолах постепенно рассасывается, исчезает отек, купируются сосудистые нарушения. Уменьшается воспалительно-клеточная инфильтрация межальвеолярных перегородок, происходит регенерация альвеолярного эпителия.

При развитии гнойного перитонита в поджелудочной железе развивается картина интерстициального панкреатита.

При лечении патологического процесса амоксиклавом экссу-дативная реакция в поджелудочной железе значительно уменьшается: исчезают отек и сосудистые нарушения, снижается интенсивность воспалительной инфильтрации, отмечается регенерация экзокриноцитов.

В селезенке развиваются гиперплазия лимфоидной ткани и ре-тикуломакрофагальная трансформация клеток.

После лечения амоксиклавом гиперпластическая реакция значительно уменьшается, исчезает отек стромы.

В тонкой кишке при динамике распространенного перитонита развивается картина острого катарального энтерита, который переходит в гнойный энтерит с развитием гнойно-фибринозного периэнтерита и даже микроабсцессов.

После проведенного лечения амоксиклавом в стенке тонкой кишки исчезает отек, нормализуется сосудистая реакция, восстанавливается целостность эпителиального покрова, исчезает воспалительно-клеточная инфильтрация стенки.

При развитии перитонита в первые сутки слизистая оболочка толстой кишки гиперемирована, отечная. Наблюдается дистрофия, некробиоз, а местами некроз эпителия с последующей десквама-цией поверхностных слоев. Отмечается гиперсекреция желез. Собственная пластинка слизистой оболочки диффузно инфильтрирована лимфоцитами, гистиоцитами с наличием плазматических

s

1

клеток и макрофагов. В дальнейшем воспалительный процесс распространяется на подлежащие слои.

К концу эксперимента вся стенка толстой кишки вовлечена в патологический процесс. На серозной оболочке определяются отложения фибрина с большим количеством распадающихся нейт-рофилов.

Воспалительный процесс распространяется на брыжейку толстой кишки. Отмечается диффузный отек брыжейки, полнокровие сосудов и инфильтрация лейкоцитами.

В патологический процесс, при перитоните вовлекается и толстый отдел кишечника. Развивается острый катаральный колит, который переходит в гнойный, с присоединением периколита и мезентериолита.

После проведенного лечения диализирующим раствором с добавлением амоксиклава происходит восстановление целости слизистой оболочки толстой кишки, исчезновение отека и воспалительно-клеточной инфильтрации.

Морфологические исследования позволяют сделать заключение о том, что в воспалительный процесс при перитоните вовлекается не только брюшина, но и все органы и системы организма, а степень морфологического проявления напрямую зависит от применяемых схем лечения.

2.2.6. Экономическая эффективность лечебных мероприятий при экспериментальном перитоните у крыс

Расчет экономической эффективности показал, что при лечении перитонита только диализирующим раствором или с добавлением в него пенициллина и стрептомицина коэффициент летальности составил 0,48 и 0,67, предотвращенный ущерб — 700 и 450 рублей, затраты на ветеринарные мероприятия — 167,67 и 225,99 рублей, экономическая эффективность — 532,33 и 224,01 рублей, экономический эффект на 1 рубль затрат - 3,17 и 0,99 рублей.

Несмотря на большие затраты (685,26 руб.), которые были при третьей схеме лечения, оказалось, что при её применении самым низким из всех схем диализа был коэффициент летальности (0,19) и самый высокий предотвращенный ущерб (1110 руб.). Поскольку для владельцев животных жизнь их питомцев является бесценной, то применение амоксиклава при данной патологии будет наиболее оправданным.

3. выводы

1. Клиническая картина острого разлитого перитонита у крыс проявляется через 10—12 часов и характеризуется отказом от корма и воды, шаткостью походки, сильной болезненностью брюшной стенки, гипертермией, тахикардией и полипноэ. Использование диализирующего раствора с добавлением амоксиклава нормализует клинические показатели после третьего дня лечения, а применение только диализирующего раствора или добавление к нему пенициллина и стрептомицина удлиняет этот период до девяти дней.

2. Острый перитонит характеризуется высокими значениями гематокрита, лейкоцитозом, гранулоцитозом и тромбоцитозом, которые прогрессируют до девятого дня болезни. Наблюдаемые до шестого дня патологического процесса эритроцитоз, гиперхроме-мия и лимфоцитоз к девятому дню сменяются эритроцитопенией (ниже на 5,9%), олигохромемией (ниже на 32,1%, р<0,05) и лим-фопенией (ниже на 23,1%), что указывает на угнетение гемопоэза и иммунной системы.

3. Динамика гематологических показателей зависит от применяемой схемы перитониального диализа. Использование диализирующего раствора с добавлением амоксиклава к третьему дню лечения нормализует гемопоэз, уменьшает воспалительную реакцию. В то время как при других применяемых схемах это происходит гораздо позже или приводит к гибели животных.

4. Биохимические показатели сыворотки крови характеризуются значительными изменениями и находятся в тесной зависимости от периода развития болезни. Так, содержание общего белка снижается на третий день на 9,8%, с последующим повышением до 14,8%. Уровень креатинина и мочевины в первый день возрастают на 18,5% и 2,2 раза, соответственно, снижаясь к третьим суткам и увеличиваясь к концу исследований до значений первого дня. Содержание глюкозы остается повышенным в период с третьих до девятых суток на 20,8%. Активность АлАТ, АсАТ и амилазы возрастает на 91,4%, в 2,2 раза, 73,6%, соответственно к шестому дню, а ЩФ и ГГТ повышаются в 5,2 и 10,0 раз вплоть до девятого дня перитониального процесса. Содержание кальция увеличивается к девятому дню в 3,7 раза, а уровень натрия и калия меняется волнообразно и девятому дню болезни выше, чем у здоровых животных на 10,3% и 11,6%.

и

I »

5. Использование в диализирующем растворе амоксиклава стабилизирует биохимический профиль сыворотки крови уже с третьего дня перитониального процесса, а к девятому дню он приближается к значениям здоровых животных.

6. В мазках из смывов брюшной полости, при применении в лечении только диализирующего раствора или с добавлением в него пенициллина со стрептомицином, к девятому дню болезни обнаруживаются в основном сегментоядерные нейтрофилы и моноциты, что указывает на затяжное течение процесса. При использовании в диализе амоксиклава, с третьего к девятому дню в основном регистрируются мелкие и разрушенные крупные лимфоциты, что свидетельствует о фазе выздоровления. Наименьшее количество колоний микроорганизмов, высеваемых из смывов брюшной полости, наблюдается при лечении перитонита с добавлением в диализирующий раствор амоксиклава.

7. При гистологическом исследовании брюшины обнаружен ряд изменений: — на первые сутки отмечаются дистрофические изменения и набухание клеток мезотелия, в подлежащей соединительнотканной основе регистрируется отек, разрыхление волокон, полнокровие сосудов, увеличение количества тучных клеток; — на третьи сутки наблюдается десквамация мезотелия, соединительнотканная основа брюшины отечная и инфильтрирована полимор-фноядерными лейкоцитами и примесью лимфоцитов, плазматических клеток и единичных макрофагов, тучные клетки деграну-лированные; — на шестые сутки регистрируются признаки дезорганизации соединительной ткани по типу фибриноидного набухания, а воспалительный процесс переходит на жировую и поперечно-полосатую мышечную ткань брюшной стенки; — на девятые сутки в париетальной брюшине выявлены некротические изменения почти на всем её протяжении с глубокими изъязвлениями и диффузной лейкоцитарной инфильтрацией, полное исчезновение поперечной исчерченности мышечной ткани.

8. При перитоните обнаружены повреждения различной степени тяжести в почках, печени, сердце, легких, селезенке, поджелудочной железе, тонком и толстом отделах кишечника, которые напрямую зависят от стадии патологического процесса и применяемых схем лечения. Использование в диализирующем растворе амоксиклава уже с третьего дня лечения купирует в органах и тканях воспалительные и дистрофические процессы.

9. Применение амоксиклава в детализирующем растворе обеспечивает самый низкий коэффициент летальности и самый высокий предотвращенный ущерб, что позволяет рекомендовать эту схему для лечения распространенного перитонита.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Динамика морфофункциональных показателей крови и качественного состава перитониальной жидкости могут использоваться в ветеринарной медицине для оценки состояния и прогнозирования течения перитонита у собак.

2. Для лечения перитонита у собак рекомендуется применять перитониальный диализ с добавлением в диализирующий раствор амоксиклава.

3. Данные по динамике морфофункциональных показателей крови, клинико-морфологическому проявлению и патоморфоло-гии тканей и органов при перитоните могут быть использованы в научных целях и при составлении руководств, учебных и справочных пособий по морфологии, биохимии, клинической диагностике, патофизиологии, патоморфологии и хирургии мелких непродуктивных животных.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Слинько, В.В. К методике изучения перитониального процесса у мелких домашних животных / В.В. Слинько // Актуальные проблемы современной науки : сб. научн. тр. — Ставрополь : Изд-во СтГАУ «АГРУС», 2004. - С. 161-164.

2. Квочко, А.Н. Активность аминотрансфераз (АлАТ и АсАТ) в сыворотке крови у крыс при экспериментальном перитоните / А.Н. Квочко, В.В. Слинько //Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины мелких домашних животных: материалы международной научно-практической конференции, посвященной 75-летию УГАВМ. - Троицк, 2005. — С. 42-44.

3. Квочко, А.Н. Гематологические показатели у крыс при экспериментальном перитоните / А.Н. Квочко, В.В. Слинько // Повышение эффективности лечения и профилактики акушерско-гинекологических заболеваний и биотехники размножения животных : материалы Международной научно-практической конференции. — Киров : Вятская ГСХА, 2005. — С. 62-64.

4. Слинько, В.В. Минеральный обмен при экспериментальном перитоните у крыс / В.В. Слинько, А.Н. Квочко // Ветеринарный вестник Дона. — 2006. — №11. — С. 6-7.

5. Слинько, В.В. Патоморфология брюшины при экспериментальном перитоните / В.В. Слинько // «Управление функциональными системами организма» : материалы Международной научно-практической Интернет-конференции, посвященной 75-летию кафедры физиологии и 60-летию кафедры хирургии. — Ставрополь : Изд-во СтГАУ «АГРУС», 2006. - С. 126-128.

6. Слинько, В.В. Динамика гематологических показателей при экспериментальном перитоните у крыс / В.В. Слинько // Ветеринарный вестник Дона. — 2006. — № 12. — С. 5—6.

Подписано в печать 13.03.2006. Формат 60x84'/|6. Бумага офсетная. Гарнитура «Times». Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,4. Тираж 150 экз. Заказ №145.

Отпечатано в типографии издательско-полиграфического комплекса СтГАУ «АГРУС», г. Ставрополь, ул. Мира, 302.

¿Q0_M

»-7775

¡

\

Актуальность темы. Гнойный перитонит является одной из актуальных проблем современной ветеринарной хирургии. Заболеваемость, в равной мере, как и летальность при нем, и в наши дни не имеют тенденции к снижению. Более того, в последние десятилетия наблюдается заметный рост этих показателей (В.Я. Глумов, A.B. Пермяков, H.A. Кирьянов, 1987; В.И. Бондарев, Л.Д. Тараненко, П.Ф. Головня, Н.В. Свиридов, 1990; A.B. Стифуткин, Г.С. Федотов, О.П. Иванов, К.А. Апарцин, 1997; S.M. Willatts, D.C. Speller, R.J. Winter, 1994; и др.).

Острый разлитой перитонит по клиническим проявлениям, пато- и морфогенезу, а также прогнозу заболевания существенно отличается от других форм ограниченного гнойного воспаления органов (А.И. Струкова,

B.Н. Петрова, B.C. Паукова, 1987.).

Патоморфологическими исследованиями при перитоните занимались как отечественные, так и зарубежные ученные (H.H. Хачатрян, 1988; P.A. .1

Григорян, 1990; Г.С. Иванова, 1990; B.C. Пауков, Е.В. Орехова, 1990; B.C. Савельев, Б.Р. Гельфанд, 1990; П.А. Манохин, 1993; М.М. Мамакеев и соавт., 1994; В.А. Хакимов,-1995; Е.Г. Григорьева, A.C. Коган, 1996; H. Derin, Е. Yetkin at al., 1987; Y. Takesue, 1987; R. Fukushima, L. Gianotti, J.W. Alexander, 1994; S.I. Vas, 1994; J.A. Burger, et al., 1995; и др.).

Вопросы его лечения в течение всех последних лет остаются чрезвычайно важными для хирургов в связи с увеличением объема оперативных вмешательств, снижением общей реактивности больных животных, возрастанием количества резистентных к антибиотикам штаммов микробов (В.Ф. Медведев, 1975; М.Ю. Белокуров, В.И. Мозенков A.A. Жуков, 1984; Б.Р. Гельфанд и соавт., 1996; H. Abacioglu, et al., 1993 S. Bhakdi, 1994; $.M. Willatts, 1994; R.G. Holzheimer, at al., 1995; C.A. Jacobi, et al., 1997;

C. Ohmann, at al., 1997; H. van Goor, 1997; и др.).

Несмотря на обширность литературных данных вопросы морфологии, клиники и разработка новых схем терапии при гнойном перитоните остаются актуальными в настоящее время и требуют уточнения.

Цель и задачи. Основной целью исследования является изучение динамики морфологических и функциональных показателей у мелких непродуктивных животных на разных стадиях и при различных схемах лечения разлитого перитонита. В соответствии с этим перед нами поставлены следующие задачи: .

- Определить морфофункциональные показатели в организме мелких непродуктивных животных на разных стадиях перитонита, а также при различных схемах его лечения.

- Проследить динамику качественного состава клеток и количества высеваемых колоний из смывов брюшной полости при перитоните и при использовании различных схем его лечения.

- Изучить патоморфологические изменения в тканях и органах в зависимости от стадии развития перитониального процесса и при различных схемах его лечения. ' •

- Испытать различные схемы диализа при лечении перитонита и определить их экономическую эффективность.

Научная новизна. Уточнены и представлены новые данные о динамике гематологических и биохимических показателей крови при перитоните и при различных схемах его лечения. Изучен качественный состав клеток перитониальной жидкости и представлены сведения о динамике количества высеваемых колоний микробных клеток из брюшной полости на разных стадиях и при различных схемах лечения перитонита. Описаны морфологические изменения в тканях и органах крыс и собак в динамике перитонита и при применении различных схем его лечения. Испытаны традиционные и предложена новая эффективная схема лечения перитонита с применением в диализирующем растворе амоксиклава.

Теоретическая и практическая ценность работы. Выявлена динамика в морфофункциональных показателях крови, качественном составе перитониальной жидкости и клинико-морфологическом проявлении перитонита в эксперименте у крыс и при лечении собак, что может использоваться в ветеринарной медицине при оценке здоровья, а также дает основание для прогнозирования патологии брюшины. Экспериментально доказан высокий лечебный эффект использования в перитониальном диализе антибиотика амоксэдслав, по , сравнению с применением только диализирующего раствора и при добавлении в него пенициллина и стрептомицина.

Реализация результатов исследований. Основные результаты научных исследований вошли в отчеты по научно-исследовательской работе Ставропольского государственного аграрного университета за 2003-2006 гг.

Материалы исследований используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий, научных исследований в Ставропольском, Воронежском, Донском, Кубанском, Орловском ГАУ, в Ижевской, Ивановски, Брянской Г|СХА, в Ставропольском и Брянском ГУ, в Смоленской ГМА. Внедрены в лечебную и исследовательскую работу ветеринарных клиник города Ставрополя и Таганрога.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены, обсуждены и получили положительную оценку на двух научных конференциях профессорско-преподавательского состава ФГОУ ВПО «Ставропольский ГАУ» (2004, 2005гг.), на научно-практических конференциях Вятской ГСХА (2004), Уральской ГАВМ (2005).

Публикация. По материалам диссертации опубликовано 6 научных статей. ,,

Основные положения, выносимые на защиту:

- Применение в диализирующем растворе амоксиклава при различных фазах перитониального процесса ускоряет процесс выздоровления;

- Деструктивные процессы' в органах и тканях обусловлены фазами перитониального процесса.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 187 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы,

4. ВЫВОДЫ

1. Клиническая картина острого разлитого перитонита у крыс проявляется через 10-12 часов и характеризуется отказом от корма и воды, шаткостью походки, сильной болезненностью брюшной стенки, гипертермией, тахикардией и полипноэ. Использование диализирующего раствора с добавлением амоксиклава нормализует клинические показатели после третьего дня лечения, а применение только диализирующего раствора или добавление к нему пенициллина и стрептомицина удлиняет этот период до девяти дней. . .

2. Острый перитонит характеризуется высокими значениями гематокрита, лейкоцитозом, гранулоцитозом и тромбоцитозом, которые прогрессируют до девятого дня болезни. Наблюдаемые до шестого дня патологического процесса эритроцитоз, гиперхромемия и лимфоцитоз к девятому дню сменяются эритроцитопенией (ниже на 5,9%), олигохромемией (ниже на 32,1%, р<0,05) и лимфопёнией (ниже на 23,1%), что указывает на угнетение гемопоэза и иммунной системы.

3. Динамика гематологических показателей зависит от применяемой схемы перитониального диализа. Использование диализирующего раствора с добавлением амоксиклава, к третьему дню лечения нормализует гемопоэз, уменьшает воспалительную реакцию. В то время, как при других применяемых схемах это происходит гораздо позже или приводит к гибели животных.

4. Биохимические показатели сыворотки крови характеризуются значительными изменениями и находятся в тесной зависимости от периода развития болезни. Так, содержание общего белка снижается на третий день на 9,8%, с последующим повышением до 14,8%. Уровень креатинина и мочевины в первый .день возрастают на 18,5% и 2,2. раза, соответственно, снижаясь к трем суткам и увеличиваясь к концу исследований до значений первого дня. Содержание глюкозы остается повышенным в период с третьих до девятых суток на 20,8%. Активность АлАТ, АсАТ и амилазы возрастает на 91,4%, в 2,2 раза, 73,6%, соответственно к шестому дню, а ЩФ и ГГТ повышаются в 5,2 и 10,0 раз вплоть до девятого дня перитониального процесса. Содержание, кальция увеличивается к девятому дню в 3,7 раза, а уровень натрия и калия меняется волнообразно и девятому дню болезни выше, чем у здоровых животных на 10,3% и 11,6%.

5. Использование в диализирующем растворе амоксиклава стабилизирует биохимический профиль сыворотки крови уже с третьего дня перитониального процесса, а к девятому дню он приближается к значениям здоровых животных.

6. В мазках из смывов брюшной полости, при применении в лечении только диализирующего раствора или с добавлением в него пенициллина со стрептомицином, к девятому дню болезни обнаруживаются в основном сегментоядерные нейтрофилы и моноциты, что указывает на затяжное течение процесса. При использовании в диализе амоксиклава, с третьего к девятому дню в основном регистрируются мелкие и разрушенные крупные лимфоциты, что свидетельствует о фазе выздоровления. Наименьшее количество колоний микроорганизмов, высеваемых из смывов брюшной полости, наблюдается при лечении перитонита с добавлением в диализирующий раствор амоксиклава.

7. При гистологическом исследовании брюшины обнаружен ряд изменений: - на перйые сутки отмечаются дистрофические изменения и набухание клеток мезотелия, в подлежащей соединительнотканной основе регистрируется отек, разрыхление волокон, полнокровие сосудов, увеличение количества тучных клеток; - на третьи сутки наблюдается десквамация мезотелия, соединительнотканная основа брюшины отечная и инфильтрирована полиморфноядерными лейкоцитами и примесью лимфоцитов, плазматических клеток и единичных макрофагов, тучные клетки дегранулированные; - на шестые сутки регистрируются признаки дезорганизации соединительной ткани по типу фибриноидного набухания, а воспалительный процесс переходит на жировую и поперечно - полосатую мышечную ткань брюшной стенки; - на девятые сутки в париетальной брюшине выявлены некротические изменения почти на всем её протяжении с глубокими изъязвлениями и диффузной лейкоцитарной инфильтрацией, полное исчезновение поперечной исчерченности мышечной ткани.

8. При перитоните обнаружены повреждения различной степени тяжести в почках, печени, сердце, легких, селезенке, поджелудочной железе, тонком и толстом отделах кишечника, которые напрямую зависят от стадии патологического процесса и применяемых схем лечения. Использование в диализирующем растворе амоксиклава уже с третьего дня лечения купирует в органах и тканях воспалительные и дистрофические процессы.

9. Применение амоксиклава в диализирующем растворе обеспечивает самый низкий коэффициент летальности и самый высокий предотвращенный ущерб, что позволяет рекомендовать эту схему для лечения распространенного перитонита.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Динамика морфофункциональных показателей крови и качественного состава перитониальной жидкости могут использоваться в ветеринарной медицине для оценки состояния и прогнозирования течения перитонита у собак.

2. Для лечения перитонита у собак рекомендуется применять перитониальный диализ с добавлением в диализирующий раствор амоксиклава.

3. Данные по динамике морфофункциональных показателей крови, клинико-морфологическому проявлению и патоморфологии тканей и органов при гнойном перитоните могут быть использованы в научных целях и при составлении руководств, учебных и справочных пособий по морфологии, биохимии, клинической диагностике, патофизиологии, патоморфологии и хирургии мелких непродуктивных животных.