Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота в реакции длительного связывания конглютинирующего комплекса

АЛМА-АТИНСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ЗООВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

САПАРГАЛИЕВ Серик Кинаятович

ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В РЕАКЦИИ ДЛИТЕЛЬНОГО СВЯЗЫВАНИЯ КОНГЛЮТИНИРУЮЩЕГО КОМПЛЕКСА

16.00.03 — Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Авторе ферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

АЛМА-АТА 1992

;/

Работа выполнена на кафедре эпизоотологии Алма-Атинского ордена Г рудового Красного Знамени зооветеринарного института.

Научный руководитель — член-корреспондент Казахской екаделіии сельскохозяйственных наук, доктор ветеринарных наук, профессор Т, С. Сайдулдин.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор С. А. Амиреев, кандидат ветеринарных наук Б. П, Суюмбаева.

Ведущая организация — Казахский нпучно-исследова-тельский ветеринарный институт.

Защита состоится « » 1992 г.

г, « » часов на заседании специализированного Совета

Д 120.11.02 при Алма-Атинском ордена Трудового Красного Знамени зооветеринарном институте (48001!!, г. Алма-Ата, пр. Абая, 28).

С диссертацией можно ознакомиться з библиотеке Алма-Атинского ордена Трудового Красного Знамени зоозета-ринарного института.

Автореферат разослан « » 1992 г.

Ученый секретарь специализированного Совета, кандидат ветеринарных; наук,

доцент К. В. БИЯШЕВ

л І ОБЩАЯ ХАРАЯГЕРІЕГШ РАБОТ У

Актуальность теин» ЯаисЗольшеа раопро<яр?иеіпп ту<1зр*удёза крупного рогатого скота в Казахстане отмечается и Северных :г Цситрсл ьягх областях республики,где соередогочено 1о>'кюе количество неблагополучи"* по этой тіїо::ц:г.і хозяйств.

Основыш методом диагностики лвля'Угол виутрикожная туберкулиновая проба.Ат гзр-.чпопкас псс.тедоя.ткгв невсвгда обеспечпзчїт полнот в^я-лэпнс больных живо'гцих.так как проявление реакции и их интенсииность зависят от характера инфекционного процесса я реактивности организма,определяемой возрастом, ^ізиодогическпі состоянием,уровнем коршіения и содержания иивотних (Л.В.Дзегдз,0.К.Апинич,19ОД{ О.ВЛартма,К.К.Тахняс,1978 и др.). В дтитилчю неб.пагополучннх спадах,особого у стармх я болыг-’х короп, чогут на Податься анергия' к туберкулину ,а в благополучних хозяйствах воз'ло:ли прояв.'існ:і;і у ::.:шотнчх неспеци;.:ічес:их и параалдсргических реакції Л. - -

длл длі^р'-иіцлац.і'.і спізцгі Г'ічсскїіх ті нсспзцинических реакций использует комал'пссіїмЛ аллерген ¡із атлптш.’іх шікобастзрнД.птичіпІ туберкулин їли сеясит:іиіі,од-іако последние весьма дорогие п их показания невсегда цэстолоргг'. “* • ■ .

■* * '

Тактгм образом,гаобходимость изыскания вспомогательных к аллергичес-соП диагностике методов,поззолясщях распознавать различные ¡орми нн£зк-1ИИ у роггнрущих шзотдах,очевидна.Поэтому предприняты попытки даагнос-’:;роиать туберкулёз при поиовд серологических методов,В настоящее время !спчт;'заотся а разних вариантах несколько серологических реакций: РСК с нтнгеноц УНИИЭВ.РСК.с антигеном ПнбНИВИ,РПГА,РГ,МА и т.д.С этой яе ;ель<о Т .С.Сайрулдиннм (1981) предложена реакция длительного связнвания сиглютннирущего комплекса (РЛСІСІ0 .Испнтаняе её дало обнадёлипащив езультати,одаахо многие вопроси по виясненню диагностического значения того метода при туберкулёзе крупного рогатого скота остаются все ещё ¿изученными. ' . ' •

Цинь и ray чи itctu'cдоданні!. Цельв на отоліт нсследозакий пилпится ■ j!::icH0iiiin диагностического значении РД5КК щмі тубсркуАііай крупного рогатого скота,длп чего ставили следуэде задачи: ■'

1. уточнить огдпдьппе параметри методики постановки ГЛСКК при исс^доі'-акни зішороток країн крупного рогатого скоти it а тубпрг.улііз.

2. Испмтгть ¡і к:.честье мітигєіш ь ГД5КК туберкулин ППД я актигек

Сії6Ц11ВИ.- . ' ■

■ 3. Лро~2сти српі-ілітелш.в исслйдочгііліі .тя а гиості'мр.c!:ot* а^”г:гтиа-

iiocvii тубеїжулиноаоі! пробч н РДСКЧ.

4« Уточнить дшиоэ ич ту'Vр>:у."• :і, у « а к он л й ч ш їй по РХСІХпут-'ііі контрольного убол кивогнгх с ¡«ослеяуіпим ироиьденнвп патологоонатоми-чеокчх и бактериологических исследовании.

Научная «ог.ипна. Ойзсиогопі: сгд.елшие параметр" .пітоликч постшіоі ц учета результатов РДЗЮС дли'даагчостикч тубвркудйаа крупного рогатої скота .Дана сравнительная оцапка з^.згликиостн антигена Си'іКІШИ и тусів] куліїна ПІЦ, ь пазвакиоИ серологической реакции,испитгліо дшгносткческої значение ГД5ЮС при туберкулезе крупного рогатого скота.

Пряктичзокпл ценность работ», РДЗКК двляетсч ю>стїпи»м лад автор • ' ■’ . варнсй диагностической «аМоратории ивто>р»,по^олг.лзг.ги <зу:п отпито

повысить эК'Зктивцость. протіиотуберкулсзт'х 08Д0Т)0ПП?ЄЛІ.НІ!Х перо при чт

Разработана "Методическая рекомендация по поемно ?:з и учЗ«'у реакции

длительного связвдпннл хопглютиніїрутіого кемшівкса (PJflKTC) при доагне

тике туберкулеза крупного рогатого скота",утаор^дчнная ректором длиа-

Атігнского зоозетеріпіарного института и прэдставлстшп на рассмотрен!!«

Главного управления ветеринарии іщ республика Гйяахотрн.

Внедрение разуль^атої; исследовании. Метод диагностики туЛеркулй iqjytmoro рогатого икота в РДЗКК внедрЭя .в колхозе им.Чапаява Туркеот .:ого района Шимкеитской области.Проиэнодотаониое «спнтаїшз идтояі пр ;пцд.-в услоаиях 7.хозяйств ц областей.республик.! Казахстан.

‘Апообгіш ті а бэты. Цитаріїйль1. л:ог;ертащіи до«охопи па реопублихаї

І'ОуЧРО-ГТрО'ГЗГОДСТІіеИНОЙ KOI! ¿СрРИЦИП «ОЛОД.'Х уЧІЛІ'/Х JJ СПОГЛГ.ГМ СТОВ (г.сс"ипрлстинск ,1591) ,1X1 р-іспуЗлшсансхой ;іг.учііо-практ'лчоско<і коп^ергп циі? молодих учопнх ii ппепиялнсхов (і'.Алпе-Ата,І99І).

ПрО..ЄД5!ІО ИСШ’ТГИІіе ЛИЯГЧОСТІ'Чесі:0ГО РПГІЗ'НЯ PPJVi при туберкулйз кпупяого рогатого скота кО’!ііссиоЙ,созгс?;!:ой пр?тт?ззом ректорі* Адиа-Атняс кого тотхітврянгрного снстлтута Л4 от Ю ііж;і 199Іг.,а тскге хо"ітсспй^ Г"г його упгаіисіг.пі ьст':р;шар;:!; !iCX республіки Кгпгхстгп от б нолбрг І°0ТГ'. І—Т7 /І. ‘

На ьнос;:тся:

X# постг!'я учсіт^ р^З’ч^ьтс?оі. ГЛС!СТС Дг.'і ¿’c^rrooTun

Фуг-спрігу-гр крупного рогатого сг'ста.

?. Топу."іігт". иппі’тг.гчт ;"сгност;п:^гл-.ого зпг.чєччп РДСТСК прч тубер-::у"п? .г'упного rors.moro crro^c.

j|0 ;.;пттгт!слаі.!- лістртсг;т!і опугіліїхоааіпі 2 работі’.олгпа р печать І отгтьл.

С^-."",П?"7Г.ТУ^0 ^"бст". ДчсС'їрТЗДИЯ кзлопеїге ІГ” X53 стрскгтцзх мйїїйнзппспого т'іг.стє г l-rnr^arsгБ^.оя'їтії’з.C'tacp лятератур’!,Мгтеря8Д п мртодо,Со бстуятгі:м? гпслв доьсг:*;і,Sa:c.Tг'ісгггтс ,В?’ьодг;,ПрзА^О'гапггп ?ля п"-;ггтг.:ч,Сп:'оо:: лчт,;ратур^,т!р*ілог£пче .Т^ота ітл.гсстр,трог.гч? 77 табдица-UÜ.B CtUCKO .’lüTüpu'i’ii-Ііз ІІСТ04HflKOIl,Іі тон чиеле 40 якостр?нннх.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДУ _.

Г-'v-OTi. ироьодис.сь ка і:сАодре опазсотслогга Ак'Р-Атітского зоозе-тер'шерпого :піституса,в ьітерішарних лабораторних її хозяГствсх Шнмкегт-пі;с^,Всстсчііо-;Сааахсхаііской,Кустанаиской,Алиа-Атшіской,Дтаг.:бульской, Уртьс':ой областей. ’

Уг;т0р:;гди дія после доганий лолученн от крупного рогатого скота из "'^'•і.гліс.іучппх по туосркулсзу• хозяіісгв пр:і убоз ШБОТннх іір 'тясокопби— •;гт''.;,а пуп;:тах цроивкаой яерегеркюі бального тубйркулезом скОта.Всего

било исследовано на туберкулЗз аллергически и в РДЗТСК 6074 крупного .• рогатого скота,в т.ч. из неблагополучных по туберкулёзу хоянЯсті. -3611,из пункта г.рсиишіОП пера лир.. к:і - 2?0,і!3 Лл л оцолучіг.'х хозяйоти -2 :ІЗ.Произаеден »^гностически убоі! ЦС крупно ю лога-огс скотп.Хчя постановки биологической проби б::лл нспольос^ан:; 92 ¡.юрсіаїх скіпок. '

/исл'ностччяские исследования на іу&ркулйз: алл-ірглческуп рс-акцни. с туберкули: он ЇІТІЛ Удя млекопнтгчш'.сіх.скиульт; пнуи пробу с туберкулине;' ІЩЦ №■ илвкопатргмгх и сухіш очі; да! ¡"и ¡:о:иие:<ол~:і г.ллергоь о.-.: мико-ЙактариЙ (КА'0,^:'.:г^р:,.о:'ОгІічвс,,ііе июдадг.ъсиг.ь'. согласно

Иаста^лвиио по диагностике туберкулёза чи»оти<їх ,у'.-¿арпдлшо:;у ГУЗ Госагропрона СССР от 23 ^¿ираля Х5БС годе*.Для вндаенм культур возбудителя но пол із опали средм ЛелцнитеШіа-Изнсепа.Гегьбгфга .Патологический материал (лим^стнческпе узли,кусочки паранхимагоэнмх органов) от убіпч коров обрабатывали по ыетоду Аликаекой.Гона и Гопа-ЛеленгатеПна-Сушошг ' При бактериологической исследовании проводили обычную бактериоскопии цазков.окраиеннкх по Цилью-Нильсену.

Перед заражением морских слинок проверяли туберкули но» ПГЩ дія млекопитающих на туберкулёз .{Зараженных яивотннх содвркглк до 3 иесяцеї и результати биопроби уигизалн по общепринятой »¡етоглке.

Статистическую обработку результатов серологических исс/едосаний проведали по методике Т.С.Сайдулдииа (1981). .

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАН ЇПІ

• Разработка основных параметров иетодтки постанопні и учёта РДЗКК дня диагностики туберкулеза-

Взяв за основу опубликованную методику (Т.С.Саіідулдан,І98І) ,ми уточняли отдельные параметры постановки этой реакции для обнаружения туберкулёзных антител в сыворотках крови крупного роимого скота, "

' Ажглютиш'руючув сиворотку в РСКГС титровали в присутствии антигеї СийНИВИ туберкулина ППД для млекопитающих в разных концентрації а и

без rnix по схеме,указанной в таблице I.

Учёт реакции прочодилн го степени копгляинации в адсстлх: шшус - отсутстике кояглмшгации, эритроциты образуют гомогенную взвесь;

jUiio сьободн"х эритроцитоп без просветлсппя дкости;

2 хрестг. -• частичная конглггшаиип. с заш:тн.:ми хлопьями на фоне с jo ¡оди’х :!:-:[троц!гтов,незн£.'1:[тслм!ое проезетленпе ?т:гдг:ости;

? згл:. - по :''-и конглотинац'.ш с sauoj-iti'un хлопьями ка ;оке еле г.-¡г-;: ило-Юди;:х эритроцито-’..мшчитетыюл проп.атлешю тлдкости;

■ 4 iqccra - полм:.:?’ коигт.т:шацт1 эритроцитов н нидс крупнпх

х."оп5сп,о::о?1оди«х эритроцитов кет,полное просветленно ntдкости * Зз.тнтр ;:опг.::’тг!п1.';г!уо!;-с!; с?'поропс;г принимали её иг имение о кол ич т ст:, о, т 'з1 ’! .;i i:u'.e о полную конглгтапс’згп эритроцитов (з креста и

I крое? - запетная конглютинацин з видз слпбоЦ зернистости на

Таблица I

Схзыа тнтрешглпл конглятлнируодзй сыворотки

Рид !

Номсря пробирок

Компонент»

1 РС;'

! I ! 2 ! 3 ! it ! 5 ! 6 !‘ 7

Коиглотшшрунчак

с'торотка.ш:

Ь.:з'1Х.о;’ичос1и1Й р;- цт;/ор,!.л

Лнтяган л раЗочзц титре,ш ■

I 0,10 С,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40

И 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40

I 0,6 5 0,6 0 0,55 0,50 0,45 0,40 0,33’

II 0,40 0,35 0,30 0,25 0,20 0,15 0,10

I _ _ _ - - - -

II 0,25 0,25 0,25 С,25‘ 0,2:1 0,25^ С,25

Вода кап баня 37 °С 30: минут'

Индикаторная с летома,мл

I 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25' 0,25 И 0,25 0,25 0,25■ 0,25> 0,25 0,25 0,25

Воля тая баня 37 Ъ: 1.ч«с.

Учёт результатов.,

При постановке РЛСКК конглюгинирушцув сиворотку брали в дозе,] 50# большз еі'О титра в РСЮС.

В РДСКК испытали два антигена: туберкулёзный ьнтиген СлбНИВД і туберкулин ППД.Опыт проводили на ЗО сиворотках крови от больных туї куяёзоц кивотнчх.Рабочие титры антиі'енов определяли методой шахмат: титрования,лугом смешивания кавдого раэ^зденми сыворотки со всеми ] ведениями антигека-Смесь аитигсна.инактивировышой тубьркулЗзной сиворо'гк,і,конглютинирую!цей сиюротки в рабочем разаидгк::н ві: аз р.. лід. в холодллы.ч::^ в течение 16-18 часов,ыюс!...;; .п:д!п:1.горнук) гістсму з оттитроваїшоїї дозі» и видзр\и.»али и ¿.сдмоГі <1:;не при тсимерпт^ре 37* в точен на І ч-са.Рсі’ультат» оцицпиали по зидрр..:к<! коалит;: і:ац:ін и крестах поело I часа пидергнтшпт при комнатной тошшритур-:.

Получзицпе результати суиліровани. и таблиці 2.

■ . Таблица 2

Результати гихиатного титрования ¡.нтцгаии СнбНШІ "

. с ЗО туберкулознями сшороткаиа ■

Разведение Г.ІЇТИ !Чкс."о ! »сиворо- Титри • сииорогок 1 і . . I ! " ' і СремигЯ титр

гена 5 Т01>' \ 1:5 ,1:10, ,1:20 ! ® ! ,1:80 , 1

1:150 30 12 9 7 2 - 1:10 (+9,3#; -С,5.

1:200 30 12 8 8 2 - 1:10 (+9,Эй -8,5;

1:250 30 12 8 9 .1 - 1:10 (+9.3& -8,5‘<

1:300 30 12 9 8 I - 1:10 (+9,3$; -8,5:

1:350 30 . I* 9 6 - - 1:8 (+5,7 Ц,\ -3,45

С разведением антигена 1:150 тубзркулёзннв антитела обнаруиекы

12 сиворотках в титре 1:5,а давити - І:Ю',в йзыи - 1:20,а в двух - 1 р разведениями антигена 1:200,1:250,1:300 папучэиы точно такие же средою титры антител .С антигеном 1:350 средний титр сивороток сості 1:8 (+5,7'*; -5,4^).Разница между титрами антител,полученными с разис

,зиями антигена 1*150 - 1:300 и 1:330,оказалась Ътатг сіическі в ня -кой степени достоверной (Г=0,05).

Таким образом,дія обнаругзния туберкулёзных антитгл л сиворотках крови крупного рогатого скота антиген СибНИВИ обладает высокой активностью в разведениях до 1:300,поэтому ото репг.едение било приипто КЕМИ в качестве рабочего титра препарата в РЛСІСС.

ЩЗи исследовании в-РДСКК тех ие 30 снг.ороток с туберкулином ППД

із разъеданиях 1:8 - 1:10 получен сродаий титр пятител 1:8 (+9 ,3%\

-8,5,о) .С раявпдепиеч туберкулина ППД 1:15 гголучен среляий титр антител 1:6 (+9 ,3-;.-8,5.'ч).Разница чвяду этим» показателями оказалось в високої! степени достоверной (Р¿.0,01) .Следовательно,туберкулин ППД до разведения 1:10 обладает наибольшей активностьв,а в раззеденлях 1:15,1:20 и т.д. происходит снижение титра испытуемых обороток. Анализируя полученные даннне,ми учбрсли разведеяпе 1:10 туберкулина ППЛ в качсстпе его рабочего титра ь РДЗКК.

Лая определения оптим^льиоП температурі! чнактивацяи сывороток геров!т при постановке.РДСКТС с цсл*>о обпаругения туберкул‘'ізні’х антител бил проведен-еледуввдЕ опут.ЗО ту^еркулозлих сивороток после сорггтюго раз"ЄД5нігг7 иггглстгсгг^оззги в водчноП бане в течение 30 ;:’'ну' в рсяннх томчарптурнгх реглтмах в пределах от 19® до бб^С.Нагревание сиворотки при бі1-1 _ 6Д°С полностью цпактизирупт содержащийся а ней комплотект п кэ лд2т ссшозодерггху реакции в контрольной пробирке без гнтигепа Ли зкбрглн в качестве оптимальной 63^ - бЛ,исходя из того что г::;" :.:;.ссо./'л тсс :е дог алиях о тот температурний ре"Г!\і ппкктивацггя сивороток де-Зт более достогеряне результати. . ’ . .

. . Шдякаториуч систему' приготовили путем СМЄИИВГ.ПЯЯ 2&-Н0." взвеси

орятроцятов барачг.'я крольчего гемолизина в утроенном.геыодитячвеком титре .Праг/плтоеть пригоїоілепия2&-П0Й- вавзеи ‘ эротрсцитов определял ^т-::: -^отоь-еуряроьппчя/па ^отоэлектроколортшетре,используя кривую показателя оптической глоткостм гйыолизировапннх эритроцитов,предкаг пуя) Е.Ч.Кс.сі'мові!м (И>90).

ип'.г’іГі i.vícimü ¡.оценкой при постановки реакции лтишстся 'гіітронаивд ¡шдтс/п'йгщоИ iricTfîii'.ocodoiino, вн'і.ор оптимального ьреийи» учвта результате і •іМітг.оіиіічтя.Дял одоедалсадяд ьреі*,;ям учэти реаудьтагоц татроьаввд м;. лю#мш оппчг- с 20 ииаороїхами крупного рогатого скити .реагирующий’.!

і іо „і.ісл;.; і-,л:«іґіашіо, отрицатоАЬНС' б РДЗІЗС ьи тубэрпулКз.Сиссі, гип ,'і ы,:> і; ¡íüiiivi^.iiturywutütt cunopotKií »іід^ркіій&ііі » твнешю ІбтІОі час-» Ou и Ь ч.,о ;и,л I.IIUI.U .ДОойіУїНЛИ КЮТКиГОрку« GKÜÍttUJT В üOùfttCTaW^X дозах .а ОДО 1-у 0,'jj ил а ишгирдедси по O.Uli «jjî.Сыссь дсщрлкшлк і водаго^

• ¡ і ,<tLС і. у ї'ігмм! I часа ъ імаульчау учитывали ofioy їх пасло

■ Ч. ¡‘ '! .. ^! 3 íiaíl^i .il p ;V U'áll ;Dl іфл ¿\Ol.miVTUGL - Ol.HU| UY J p'.l «

'< i , ди:іі. i;.i дігкн горкаГ, 1.1/ci tuijjbb ¡piiiKiie драл у ки.чорьа 5 и 10 шіиут .¡•‘..іч iiü lu, uïui.a lia tíajiu ü Наталко a ü.Oli «д/юпитіайли и РДОіІК . 4 j h-iXjM'-j .ifc *-йзу.'іла,гіш aí. ¿ огіигоіЗ,ми іцідші, к ышоду,*»о y-iiiií -иї^ольі.'Ші .шді;і:'йїорі;оЛ. í-.üu'i'cun как с uuvií l'en о»

..л и с іу(';о;.луд:іиоіі ііГІД целсоооСрал,о прологи*» чориз ÿ иииут после ¡»ішипі luïii'ruiia »а Сит.Гн тктр инмкаториой сиотеїЛ*. прш w.ur её lü.iiou.Jii.áífíü і;а,іічестізо,обуслі;іш[.ішю[цзо цолцую коішіотіпшціш арптроццтглі,

і. рчбоччи дона - ira І интервал (0,05ил) ценьшо,

■ ДЛІ1 Охмеленій! оптимального иреизші У_ЧЄ.Т,ІІ Г.езуіЬТКїОл Г-ШВіїCiU

ип„та ГДСКК проиьдено следующее исс.іедолинне,Ц порвоГ, '¿азе реакцій; імись пііактшчіроііаяііой сииорото,антигена и конглотішируищсЛІ сыворотки B4„t;p,i.¡b ал и и хододаьцзке ири теиперагурв ъ тесание ЇС-Х8 часов. Поело отого дой-дуяли « к дякагорнуи'оиствцу в рабочей доои к смесь іівдир'аіиали ч цеданой боно при тзмпоратуро 37% в течение I часа.

После волдіїоіі. dü.nií. во иромн мы^ркшшщ при к сына пг ой температуре íit,ouücc конглшшации ь некоторых пробирках ііродолкаетоя,Поэтому • ^охрпбоклось псолодать'специяльлне опити дан того .чтоби уотоноьахь время учёта реакции после выдаивания при комнатной темпоратуре.О ¿0 тубзркулВэииии сиворотками кровг о.рамоіч»нми'титраии от (її 5 до 1:^0у и с 5 нермрльнмми.сиворотками от здоровых животных ставили ВДЖК і і"лтлгансіі ОибНКйИ и туберкулином ПГЩ.Учет, проводили сразу л«

'после выеики штатива из бани и через каядме ЗО минут.Установлено,что

наиболее оптимальный является видеуишьния. реакции после бмт при

комнатной температуря в точение I часа. -

. В цэлэи дня й'с следования сывороток крови крупного рогатого сгота

па туберкулёз предложена схема постановки ГЮКС.прнведеинги в таблице і

Учёт результамов ре'а'кіф.и проводится по 5 (Зальной система по слеяу-

ьщей ш:але: • •

минус - полная конгл'игйнацил эритроцитов в ішдо крупних хлопьев,

свободное эритроцитов нот^іаблодаотол полнот просветленно .чил^остм;

' I крест - частичная конгл ютцЛ&ЦМ 6 паметпг.ин хлопмшн но *оня

свободах аритроцитов в незначительном количестве .значительное ііросве-

тление г::дкооти; . •

2 креста - частичная конгл отинпция с загетниии хчепыши но цюие

свободаых эритроцитов,незначительное просветление лшдкост/г;

' 3 креста - ело заметная коиглклшацил в виде слабой зернистости

на фоцо СВОЙОИШХ эритроцитов без просветлепип З.ЛІДіСОС’І’ІІ; , .

Ц креста - отсутствие конглитннацніі.эритроциты образуют гомогенну

взвесь. ■ '

\ ' Таблица 3

. Схема- постановки РДЙКТС при диагностики

туберкулёза крупного рогатого скота .

' ,г1ри кассовом Г Для повторного нсследова

Компоненти реакции "исследовании | кия в 3-х проЗіфках

,в I про Лир ко, |-J-----1-----------2— ,-3-

Испытуемая аиворстка,ні Физиологический раствор,мл

Антиген в рабочем титре,ил

Конглюткшфуюцая. сыворотка в рабочем раг>ведении,мл

. 0,05 0,05 0,05 0,025

0,2 0,45 0*2 0,223

Инактивация в водяной бане при ' 63-64РС - 30 минут

0,23 . - 0^3 0^3

. 0,23 . 0^3 ' 0,25 0,25

Хслодалышк при 15—16 чпеозз

Индикаторная система в рабочей дозе Водяная баня при ?7-38°С X чай и при

комнатной температуре - х час '

У'.от результатоз реакции по степени задерЬси колглэтинацгн. в крестах-

- Дія сравнительного изучения в РДСІОС Д'ух препаратов,выпускаемых проьиііиілпіос'П.и.мітчі’вна СибНИЗЙ и туборку.Ш£ 1 ЧЧ проъедйн опит нь сиюротках кроьй 40 коров,явно больпі’х туґ>врку.:ез ы,л 210 кивотных и:, пеблагополучних по туберкулёзу хозяйств. .

Срздаиа ТИТрН сывороток кроли .ЙОЛЫШХ J.Яіі0їві:х■ составили с туберкули ноц ППД 1:7 (+7 ,2$', -6,75?),а с антигеном СибНИВИ - Х:ІІ (+10,2$; —9,3.Разница панду зтішк показателями статистически достоверна (P¿0,01) .Из 210 коров в РІСИС реагировало с антигеном СибНИВИ - 27, с туберкулином ППД - 25.Taicm¡ образом,РДО!СК с антигеном Си^НШИ даёт более высокий результаты,чей ту.’ирк*л:ш ПЦЬ . .

Несмотря на то,что туберкулин ППД несколько уступает ца алтцвиости антигену СибНИЗИ,*! ¡и&льі:аІішіх опатьх ясиильзовали только этот препарат, ученная его стандартность и доступность. _

Испытайте PJJCKK да даегиостика туберкулезе крупного рогатого скота .

Исходя из вииеприасденных данных,послуйивиих обоснованней отдельных параизтряв иитодпси постановки РДСКК.иы изучили дагиостическсс значение этого теста аАж туберкулёза icpyuloro роп^ого охота.В цглпх решения поставленной задачи потребовплось провести сравнительное исследование по РВДКК и аллергически кивотанх.нцчвдих различное иммунобиологическое состояние из неблагополучных и благополучних по этой _ болезни хозяйртв.Проведен убой,патолого^натоцичвокие,бактериологичесі;-ие исследования положительно реагирующих по РДЛСК кивотннх.Определена гаккв дшаиика гыягдекия йс ".ъа'^л нивоа-ных по испнтуеиому тесту при

' V - - ' .

проведении систематических исследований, в оздоравливавыых хозяйствах.

Сравнение диагностической эффективности ГД5КК и аллергичесгой про0и с туберкулином ППД в 8 неблагополучных хозяйствах,из которых в четі', ех туберкулёз ими л широкое распространение о заболеваемостью болиа 23/,л в четырех болезнь ииэла ограниченное распространение с

заболегаецостьв иєнве 25&Псяучеянне результати приведены в таблице ч.

Для сравнительной оценки д;;. гностического злачецйя отдг'ышх иетодоп ми реагируиэдх н'і^отаі-гх разделил!! на 3 группы:

порвал группг - реагкруацяе-бллвгл-ччески прн отрифтельках результатах РДСКК; .

вторая группа - рїагирувдю огловрелгнне- а.тлергнчссгл и по РД31СС; трзтья группа - реал;руп!у:е по РДСКК прн 'хгсутспт гляерглчеег.сй реакция.. ’ ’

8а суя'зрнг*; покьзетидя аллергической а серологической реакция яряиікіалл оЗщсо число жіЕСтнкх.ргагяругяух хотя би по эддоку кз этях 'иетодоз.

В сопхззе’"ПртгтобальсхиЙ" яз 624 нязотнзх яря сш ¡зъпшо-л илдерпічоскоа кссле^о^ашм! с туййр::ул:нэа ГОШ дія шехопзтга^лх и сухдц очлцвшія:* коцплзкси^н аллерітего-j атягаиякт мякобяктесаЯ (КШ) всего реагировало 60 (Э,б£) злзотглйс.в т.ч. туберпудта ПП?. -7 (І.іФ КАЛ - 38 (б,7i2) »одновременно па o-Ja иизргена - 15 (2,5;*). .

Энутрнкокннц цетодоц при отрицательна^ PICKS тубервулаз установлен в 44 (7,0:2) случаях»парчлдіяиіо аллергичеокя н в РДСКК - в 15 (2,5;?), только з РДС?£С — і} 81 (1Э,0!з)*По сулгаряки показателям двух тестов всего діагноз установлен у Т4І (22,5?) зшвртасго.

В совхозе "ГСск-хаЯпарскяП" одновременно с серологический проведено аллергическое исследование путем двукратного введення туберкулина ШЩ. Ил 577 животных при учете реаххпш через 72 часа посла первого введгнпя аллергена реагировало б тціво,.них,а при уч*тэ через 24 чьса после повторного введения аллергена дополнительно заявлено епе б короз.Игого по аллергаческону цетоду видалено 12 (2,4!ч) тзшотяих.зэ них в 5 (41,6^) случаях дгагног п&дггйргдзп серологачеью! з РДВКК«Доподнігге.іьно к алларгкч~скоиу .методу туберкулёз дталюстпрозан з РДСКК у 23 (4,2 ?). Всего реггяровало спрологпческк я аллергически 34 '6,3^ гівг^ннх.В с стах оз з -"Галгарегсін" серологическое й'содгдованяе проводилось ; эсле '»г-еллррвапид и убоя вч х реагирующих на туйерзулск :точ,.£.Щр пт о-і цэ

Таблица 4

Сравнительные результаты РДСКК и аллергического метода при диагностике туберкулёза крупного рогатого скота • ,

Наименование V ■ ■■‘I (Число ис I - группа ! '■' 11 - группа ! 111 - группа t Всего

¡следован, •ных животных ! ! цксло ! ] _% ! ! ЧИСЛО ) ! • • • % ( число t ! ! ■■% . ! числа , - at /о-

С-з "Дрнтобольский" 6^4 44- 7,0 ~IS * 2,5 81 13.fi 141 . ; <с£,5

С-з "Кок-кайнарсккй" 537 6 1,1 •о' • . 0,9 >23 ' - .4,2 '34' 6,3

С-? "Талгарский” 180 ■ - - 21 11,6 • 21 ;; 11,6

ОЛХ "Заречное" 316 О 0,9 - - г / Об' 17,7, 59 ■ . ; I3.fi

К-з им Чапаева ISI4 16 1,0 22 •1,3- -■ -44 ; ■- 2,7 ■' 82 : • • 5,0

С-з "БысокогорсккЯ" 301 • Ю . 3,3 13' ' • 4,3 •/ • 18 • -я.э ; - 41 13,5

Ушоз нм Гагарина 1 33 17 51,5 ‘Ю ’ 48,5' .33 100,0

С-з”Майкольский" 6 ‘ 5 ,63,3 Л ; 16,5 ‘ '■ ■ - 6 100,0'

Итого 36IX 101 ■ 2.7 73 2,0 243 6,7 , ■ 417 11,4

РДСКК ;і(ігдчіоз устшюъ-тси у 2Г (II,б ',і) ІІИЬОТНОГО,

В ОПХ "Яарочноо" исхивдонаио 3£6 ;іраг5 сивороток кроці Д'.Нннх корол,пиралпидіно проьодои Е.'дг;ргичвокоп іірслн;;о'ішние .Тугіеркупііз Д'іагііооткроі.аіг її РДОІСК у 59 (18,6$) ,аллзрг:пі*с:<.ч у З (О.Р'.'О. '

В колхоз».'.ш.Чап£йга и течение 1990 года с интервал он 40-45 даей проведено восшткратпое серологическое и аллергическое нсследоишип іт їуберг;>.т/5з .Тубэркуя^п .бич даалгосшррвьч по ;.ллоргичеспоцу лот илу при отрицательной РЭДКК - у 16 (1,0,1) (однолрвшипо по.РЇОКК и аллергически у 22 (1,3>),по ГДЛСС пр!і отсутствии аллергической реакции - у 44 (2,7^ :,>ссго гю д>уы тестам - у 32 (!5,0,Ь) эдьотшш. '

Ц совхоза "Ві.'поі-огоропіЯ" исследоьено 301 ыыотное ,ии н.іх риаги-рсиало аллергически ігри отрицательной'РДСКК - 10 (3,3$),ш> РДСКК при отрицательной ал.ирг.ііі - Ю (5,^,з) ¿даьгноа пидхьериден пс аоиим иитоде.м одіоьрсионго - у 13 (4,3л),ьсиго г:о рааулі/тии обе;« реакцій в совокупности - у 41 (13.5;.'). ■

Из 33 тубс^судипополояительних цсрол учхоза нм.Гагьріша а ШЗ.’ л спзц:ц.ичс-ок1.'и антитела обнаружены а 16 (48,5&) случаях,ы в XV■ (51,5^) получит1 оїрицйїіиьнис: результати , ■ ' ' •

3 сыиорот1;«х. крови С тубвркулиноподоыггвльш х. г.ороь ич совхоза "МаИколъикли" в РДОКГС тубергуліізкие антитела выявлены лныь а одаоы йдучий, " , '

В группе хозк!1ств,гдо туберкулез ин'бйт широкое ра о пр ост рьіН е ни г с при после доьвшш 16Я яшвотпих ззиделено обоими иетодыи 2:53 йольиьх, что составляет 15,3/^,« в гру'цце хоияйста с ограниченным раснросграш.и-(¡« болезни из 19 ¿4 шгЕО'лшх.рвах’ироасло 162 (8,2,^).

• В целом число '¡¿иізотних'.реагпруивді; только ро РДСКК (/г ютья группа),» 2,4 раза прзііоскодот реагирующих только на туберкулин (первая группа) .Езего по РД01Г' реагировало 31.6 ыитних.иу них диагноз додавер* адеи аллергически у73,что составляет 23,2,

. Дииашк/ выявлении больных шр^тіпі* в РДСЮС .изучали ир.і п^олвдечий

- , • ' . У * ’ < ’ * '

оздоровительных ыкр0|тр11)ггий в колхозе ;;ц.Чаш.',ев{! Туруев+'Ьчс. М'Л

- т/| -

районі; Шым::ентской области .Всего пропзденс пос.’йикратное исследование. В первой ИЗ НПХ ЗНЯЕЛ8Н0 ЗС С№0 КИБОТКЫХ.ИЗ которых 15 (7 I 4/0 реагировали по РДЗКК,9 - по аллергии,6 (2,9#) - одновременно

по обогл ’зстогзм.При повторном исследовании виявлено 32 (1б,Оіо) ,пріі третьем 14 (6,7/Ё) ,и при четвертой еце в (2,Фч) ппютнчх. После этого получено подряд 2 раза отрицательный результат и хозяйство поставлене іш контроль.Цва контрольних исследования г. интервалом 3 месяца дали отрицательный результат и хозяйство признако оздоровлении«. .

При исследовании в пяти благополучних хозл!їстб;:х по РДЗКК в ... единичных случаях виявлеки реагкрующіе мшзотиіа .3 частности в колхозе "Родина" кз 1022 лівотикх реагировало 4 -Титрі- еитит^л во всех случаях составили 1;5,в одаом случае в два кргста.в трех случаях в три креста В совхозе "Амангедьдо" из 573' пивотнкх лишь одао имело титр 1:5 в три креста*а в остальных трех хозяйствах во всех случаях получены отрица-тельнь'е результаты; ' •

Диагностическому убой были подзериіутк і»б коров,которые по тому лли иноііу нетоду дали полопггелыше результаты на туберкулёз.

Результаты паталогоаяатомяческих,бактериологических исследовании

огранены в таблице 5. - . . ’ . .

і . . 1 - • - ’

В совхозе "Цритобсыьский" проведен»бактериологическое лсследовпп патологического материала от 5 коров,положительно реагировавши в РДСКК и аллергически .Диагноз, установленный прижизненно,подтвержден бактериологически в 4 случаях. ■•••-: ■ -

‘ В совхозо ,,Кок-каіінарс:сгйи йсдвергпугы ¿-бою Р. кс’у.оп" ,""2151,7713 рзапіроБавшно -только по нллсргяи,5 корови ¿1Г2ІВ2 и 2Г76,давшие положи тельный результат только но РДіСКК,и. I корова г912б реагировавшая но РЯСКК и. аллергически .При б актеря ол огнче с г.оы исследовании получен пологителышй результат с патологический матеркглои от корон ’5152151, 9125*2182'.* ;

Цослеубойноиу осцотру туи к ВНутр01Ш!Х органов подворгнуто 12 укоров,положительно реагировавиих аллергически .Сиворотки кррви этих

Таблица 5'

Ргзудыаты паї' олсгосл::.? cirn-::: ciuo: к CLicr е р cä о;-::чjсxüx ::сзхєдов2Гпй ■ на туберкулёз убэть-х хсроь

!Ч:тсго!Па?- ‘IfiezsHO Еаї::ленсзгн:те глізот гн£т0іпс.тц'£се;:: ír^v.u , БиргтрсЗз с • си ■ ГгГ-^ггр;;^ і B-rt—Э20, КУ-Ь'.'УР1. 07 ! ::зг.г.;*3х кзггсог: - £¿s.r¡

ХСЗЛ’.ІСіТВ і НИХ і *> ! . ! "TT'r уі ! &rt4 i! Члсіо ас- еле дозпг - He;: о._тг ; ■ ! Tí С 3 Ч.гсдо :;cbífc ! дозанил іп'ло-сгг. ! !^С2уЛЬТ£.ї 1 •:::aio ito-lnw.;^5. • : • Iwííh; . Д5Н

С-з "ПрИТОбОЛЬСКИЙ" 5 » — -* 5 . 4 ■ 5 • . it •

С-з "Хск-кайнгрскиа" ' 5 . - • 5 3 . - - - ■3

С-з "Таггарскій" ІЗ ІЗ 7 ІЗ о - : - с

опх "З&речноэ" 3 - - 3 2 3 2 . 2

К-з га.Чапаева S 2 6 - - - • 6

С-« "&ІСОГ.ОГОрСЇ£КЙи 2 2 - - ■ - - 2

Учхсз ии.Гагарина 10 - - . - 19 S ‘ IG & S

ñroro 46 4. 24 14 ЗІ ги IP .. 15 35

животных били исследованы в РДЗКК.Из 5 коров,отрицательно роагироззв-.1лх в РДЗКК-,Диагноз подгверяден бактериологически только у одной-.

'J остальных 7 нивотних.реагировавших положительно по РДЗКК,даагноэ подевервдеи бактерлологически.Убита таг.;;ю .одаа корова по кличко 'Хтква" с отрицательной аляергизй И пол)::кте.1Ы1оЗ РДЗКК .В органах ...?p;i::Topiii!x туберкулЗзг.их цзионеипП цс обнаружено,но едзлопп г.уль-гурл пикобактери:!. '

В ОПХ ,!3ароч::оопри 1сслздо22;п:; гатолэгяче« ;;r:> от

¡р2х короз,пояокятельпо реагировавших- по PjLCIÜC i) №у’: <; у:-;;:: бг :;тер:гологаческя подучен полекятелыш”- ¡^зульт: т.

В колхозе im «Чапаева проьо;;;! патодигепкгтомич'За.:оо коелздхи.-ан:.".:

О г.ороБ.г.оторяе реагировали по РДСЖ np:i отрицательно!* а;лчрг,!:: - 2; по РДЗКХ к аллергически - 3; по аптергп'-.вс-.оП пробо - З.Из ¿jyx ‘ ¡;оров .рза'гяровавклх в РДЗКК,у о'диой обнг.рукои'-: хсрактптчп« ддг тубвркулбза изменения,у другой при посо:-з патернгла па средах Лг^ен-сттеПиа-Иенсена на 43-50 дан наблюдали характерней дяя михсб.-л-.'зер'!* туберкулёза рост.При- бактериологическом исслсдовсняя пстолсгичес:::и'о материала от трех коров,реагировавших положительно по обоим тестгм, выделена культура микобактерий тубэркулзза ,а у трех ливотннх реагировавших только по аллергия,при вскрытия ойнару;;ены у одюП хергтеторнге туберкулёзные ■ изменения,у дзух при проведения •''тктэряологическсго исследования получен отрицателышй результат.

В совхозе "BUcor.oi’cpciaíS1'- при лскрктин дсух коро:>,реа^яроьт.пгигч положительно в РДСКК я аллергически,длапюз подтверпдо:: и'.-.тологоапз-т oían зеки.

. В учхозе им.Гагарина патологический материал от 9 корон,пологш-тельяо реагировавших в РДСКК и аллергически,от одной коровы,рсагчро-иаттзП Щ’.'внутрнкопсую туберкулинпзацип.У всех девяти коров дясгног, 9стсночлсне1-5 серологячссхя и аллергическт, по.т.тлергдеч mirra бпктерко-.■¡эгпг)с::ии '•отодоп.П.л бактерчолслтческом исо-те довели ч патологического (...‘'-'■■.i'..-,'-, ст -лорс"«,рог,г".рог.глпеЯ только г’ллергичеекя ,гп сроягх •

ЛеиенштеПг'і-Язнсенгі получен о^инімП рост культури на *»-5 день тося# П0сег>8 рОТІІЙСенКТІЙ ЧСТі.ерТОІІ Гі;уПП'3 ПО РіНІ ОІіу. ■

. Таки;: образом,при бактериологической исследовании патологического патериала от ЗО коров,репги'ропа'ЗЕИх еллергическя и в РДЗКК,получен полопітельннй результат в 28 случаях,у 5 гдеотннх реагировавши толъкс по РДСКК,дапгноз пол'иерпдзн «Зактериодогическя в 4 случаях,что составляет 80$. У II реагировавших гллергичесхк в 3 случаях получена культура мікобактерії? ту«5ер'<уліізгі,иг них в І случао атипнчние ііикойакторка.

вигоди

ЬЭксперементзльно обоснованы отдельные йара;..з^ры постановки и учета результатов РДСКК Ма обнарушікя'туберкул" га .антител в снг эротке крови крупного рогатого скота. •

2. Дія обнаружения туберкулёзных антител в с'-’воротке крови крупного рогатого скота в РДСКК в качестве антигена шшю использовать туберкулёэннй антрген ОНбНИВИ гля РСІС и туберкулин ПІЩ»1

3. Туберкулезный антиген СибНИВИ для РСК является более акгивнш в РДСІСК по сравнению с ’туберкулином ППД.Одяоко,учитывая стандартность п доступность дія практики,и качество антигена дія РДСКК ыо>;з:о рекомендовать ПЩ. . • • ■ '

. В неблагополучных по туберкулёзу стадах по РДСКК реагируют значительно больше животных по сравнению с аллергической пробой, .

"5ч Хотя РДСКК является более чувствительной по сравнению с туберкулиновой пробой,этот серологический тест не выявляет значительное количество яивбтных.реагирующих на аллерген»

6. РДСКК является специфическим методом диагностики туберкулёза.

Её положительные результаты удерживаются более постоянно по сравнению о аналогичным показанием 'туберкулиновой реакции.Диагноз, установленный по РДСИС' ігри отрицательной туберкулиновой любе,в 80,(7^ случаев подтверждается бактериологическим исследованием. .

7. Ч благополучных хозяйствах результаты РДСК’< бывай кг к правило отрицательными Лишь в единичных случаях по этоЯ реакции обнаруживаются антитела в низких титрах. ■

ПРШОІІШИК ДЛЯ ПРАКТИКИ

Для диагностики туберкулёза крупного рогатего скота в условиях ! производственной ветеринарной лаборатории предлагается РДСКК ' с использованием в качестве антигена туберкулина ЩЩ.

список -

pertor,опубликоззчнях по «ьтвриг.лау діссертац: л

1. Сапаргаливи С.К. Срглиитзльнце результаты РДЗКК и туберкулиновой проби при juiri'hoctiikü туберкудіїзг крупного рогатого окота /Аоэ.докл.рвопуйяикаио.чоЯ игучко-првкгнчеояоЛ коц терпи ції:* иояод:х учёних « специалистов. - "Научные достнгопия молодых учёигх и спецяалио'гоа. - і/лгоцшлодалу'’С»!:ипйлптішся,199іг«і0.53-5|и

2. Сенаргал:’?:; С.К. Метоупа постановки реакция мит «л того с;л глетчя ко!!гл--ітик»іпу^г>і>го комплекса при гиэгчостпке туЛеркул'йза крупного рогатого с::;?а. /Дез«докл. III РвспуЯ*якенской ноучно-пргигтеской коте rpottг^іті mohojjix "чі;с”.ч « специалистов. - Алма-Ата, і99іг.,о.бі-вг. .

3. Саяні'ллл» ї ,С..Сапоргп.і!Иел С.К. Диргяостико гуйеркулйэа • крупного рогатого с::отгі ь реакции дпительцого связывания ::онглкти-иируюцвге комплекса.//Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана. - Алма-Ата, 1991г.,(в печати).