Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.06) на тему:Биологические свойства нового иммуностимулятора ПС-2 и его влияние на неспецифическую резистентность и иммуногенез крупного рогатого скота

На правах рукописи

ПЕТРОВА ОКСАНА ЮРЬЕВНА

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НОВОГО ИММУНОСТИМУЛЯТОРА Г1С-2 И ЕГО ВЛИЯНИЕ НА НЕСПЕЦИФИЧЕСКУЮ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ И ИММУНОГЕНЕЗ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

16.00.06 - ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Чебоксары - 2008

003448582

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия».

Научный руководитель - доктор ветеринарных наук, профессор ПЕТРЯНКИН ФЕДОР ПЕТРОВИЧ

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

АЛЕКСЕЕВ ГЕННАДИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ

кандидат ветеринарный наук, доцент КУЗНЕЦОВА ЕЛЕНА ЛЕОНИДОВНА

Ведущая организация - ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» (г. Казань)

Защита состоится « 5 » ноября 2008 года в 12 45 часов на заседании диссертационного совета Д 220.070.02 при ФГОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» (428003, г. Чебоксары, ул. К. Маркса, 29)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия».

Автореферат разослан «.</-9 года

Ученый секретарь диссертационного совета,

профессор

Семенов В.Г.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Сельское хозяйство и производство сельскохозяйственных продуктов является одной из важных задач национального проекта, принятого Правительством Российской Федерации. Одним из направлений сельского хозяйства в национальном проекте является развитие ведущей его отрасли - животноводства. Во многом эффективность животноводства зависит от состояния здоровья животных и взаимосвязанного с ним продуктивности их, что в первую очередь зависит от направленного выращивания молодняка, сочетающего высокую продуктивность с устойчивостью организма к заболеваниям. Научными исследованиями установлено, что здоровье животных является динамичным показателем и определяется как генетическими особенностями организма, так и воздействием различных факторов внешней среды. Эти обстоятельства позволяют направленно влиять на формирование и проявление защитных сил организма. К ним относятся обеспечение животным соответствующих условий содержания и кормления, способствующих более быстрому формированию и лучшему проявлению их защитных сил. А это предусматривает Совершенствование технологии производства продуктов животноводства, исключающих неблагоприятные воздействия внешней среды на организм животных (Ф.П. Петрянкин, 1998; Г.К. Волков, 2003; А.Г. Шахов, 2003; Н.К. Кириллов и соавт., 2006).

Факторы неспецифической резистентности и иммунологической реактивности обеспечивают устойчивость организма животных к воздействиям неблагоприятных условий внешней среды, а их тестирование позволяет распознать защитные свойства организма. • ' •

Особенно чувствителен организм к воздействиям неблагоприятных экологических влияний в первый и последние месяцы внутриутробного развития и первые три месяца новорожденное™. Физиологический статус материнского организма отражается на внутриутробном и постнатальном развитии плода и новорожденного. В результате воздействия неблагоприятных условий чаще всего рождается молодняк со слабыми защитными свойствами, у него развивается иммунодефицитное состояние (И.М. Карпуть, 1998), он более предрасположен к различным заболеваниям, плохо развивается и растет (Ю.Н. Федоров, 2005).

Снижение показателей неспецифической резистентности организма при выращивании молодняка в условиях интенсивных технологий отягощает проявление иммунодефицита.

Различные фармакологические препараты, применяемые для профилактики и лечения болезней животных, не всегда дают желаемые результаты, а ряд антибиотиков обладают иммуносупрессивным действием. Поэтому создание и

применение иммуностимуляторов, в том числе неспецифических, действие которых направлено на повышение общей резистентности организма животных, заслуживает особого внимания.

Механизм действия неспецифических иммунокорректоров существенно шире, чем принято считать, они повышают эффективность традиционной профилактики и терапии многих болезней (В.М. Земсков, 1997).

С учетом изложенного, весьма актуальным является повышение иммунобиологических факторов естественной резистентности организма животных и их коррекция иммуностимуляторами.

Цель исследований - изучить биологические свойства нового иммуностимулятора ПС-2 и особенности формирования неспецифической резистентности и иммунологической реактивности организма коров и телят при использовании иммуностимуляторов нового поколения.

Для решения намеченной цели были поставлены следующие задачи:

1. Провести анализ технологии содержания, условий получения и выращивания телят в ФГУП УОХ «Приволжское» ЧГСХА;

2. Изучить биологические свойства (острую, хроническую токсичность и кумулятивные свойства) нового иммуностимулятора ПС-2 (иммуноксан);

3. Определить оптимальную терапевтическую дозу и изучить влияние иммуностимулятора ПС-2 на физиологический статус телят;

4. Оценить влияние иммуностимуляторов ПС-1 и ПС-2 на неспецифическую резистентность и адаптивный иммунитет на фоне иммунизации животных;

5. Определить экономическую эффективность использования иммуностимулятора ПС-2.

Научная новизна заключается в том, что разработан иммуностимулирующий препарат ПС-2, изучены его биологические свойства и определена оптимальная терапевтическая доза. Проведен анализ клинического состояния, заболеваемости и роста телят в постнатальном онтогенезе при применении препарата ПС-2. Отмечено положительное влияние иммуностимулятора ПС-2 на неспецифическую резистентность телят в раннем постнатальном онтогенезе. Установлено, что препарат стимулирует как клеточные факторы резистентности, так и повышает активность гуморальных факторов защиты организма. Испытуемый препарат при применении глубокостельным коровам на фоне иммунизации против сальмонеллеза способствует улучшению клеточных и гуморальных факторов резистентности, иммунного статуса коров, повышает качество молозива, что в конечном итоге улучшает антенатальное и постнатальное развитие телят, их неспецифическую резистентность и иммунологическую реактивность.

Практическая ценность работы. Результаты экспериментов и производственных опытов открывают перспективы для широкого практического использования разработанного иммуностимулирующего препарата ПС-2. Применение данного препарата обеспечивает прирост живой массы и сохранность телят, повышение их неспецифической резистентности. Использование препарата при вакцинации коров в последний период стельности повышает неспецифическую резистентность и иммунологическую реактивность, что является основой повышения устойчивости новорожденных телят к антигенному прессингу в первые дни жизни.

Получен патент № 2332214 «Способ получения препарата для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза животных», зарегистрированный в государственном реестре изобретений РФ 27.08 2008г.

Реализация результатов исследований. Данные, полученные при выполнении диссертационной работы, используются ветеринарными специалистами ФГУП УОХ «Приволжское» ЧГСХА, в учебном процессе факультетов ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» и ФГОУ ВПО «Казанская академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана».

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и получили положительную оценку на научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов «Молодые ученые в решении актуальных проблем современной науки» (Чебоксары, 2005), межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов «Молодые ученые в решении актуальных проблем современной науки» (Чебоксары, 2006), научно-практической конференции, посвященной 75-летию со дня открытия Чувашской государственной сельскохозяйственной академии (Чебоксары, 2006), Ш научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов «Роль молодых ученых в реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (Чебоксары, 2007), всероссийской научно-практической конференции «Роль ученых в реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (Чебоксары, 2007), расширенном заседании кафедры патологической анатомии и инфекционных болезней факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» (Чебоксары, 2008).

На защиту выносятся следующие положения:

- биологические свойства нового иммуностимулятора ПС-2;

- влияние иммуностимулятора на физиологический статус телят в постна-тальном онтогенезе;

- влияние иммуностимулятора на неспецифическую резистентность и иммуногенез коров на фоне вакцинации против острых кишечных инфекций.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ в материалах всероссийских, межрегиональных, республиканской конференций, в научных трудах ФГОУ ВПО «Чувашская ГСХА», в журналах «Ветеринарный консультант», «Ветеринарный врач» и «Ветеринарная патология».

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 164 страницах компьютерного исполнения и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследования, выводов, предложений производству, списка использованной литературы, включающего 188 источника, в том числе 26 иностранных, приложений. В диссертационной работе содержится 33 таблиц и 9 рисунков.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Научно-исследовательская работа выполнена в 2005-2008 гг. на кафедре патологической анатомии и инфекционных болезней, в ФГУП УОХ «Приволжское» ЧГСХА и ГУ «Чувашская республиканская ветеринарная лаборатория» Государственной ветеринарной службы Чувашской Республики.

Объектами исследований при изучении биологических свойств нового иммуностимулятора ПС-2 служили лабораторные животные (белые мыши и крысы); при определении оптимальной терапевтической дозы препарата - телята 3-5-суточного возраста; изучении неспецифической резистентности и иммуногенеза животных при применении иммуностимуляторов на фоне вакцинации против сальмонеллеза - коровы за 60 суток до отела и телята, полученные от них. Все животные, подобранные для опыта, являлись аналогами, их содержали в условиях традиционной технологии.

В качестве иммуностимуляторов использовали препараты ПС-1 и ПС-2.

Препарат ПС-1 представляет собой 0,5%-ую водную суспензию полиса-харидного комплекса дрожжевых клеток, иммобилизированных в агаровом геле с добавлением биологически активного вещества - поливинилпирролидона. Препарат одобрен Ветфармбиосоветом Департамента ветеринарии Минсельхо-за России (протокол № 4 от 03.10.00 г.) 001187-ОП, утвержден Департаментом Ветеринарии Минсельхоза России 15.02.01 г. № 13-4-03/0009.

Препарат ПС-2 (иммуноксан) состоит из производного бензимидазола (2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-(2,1,- Р)-тиазола гидрохлорид) и полисаха-ридного комплекса дрожжевых клеток, иммобилизированных в агаровом геле (получен патент № 2332214, зарегистрированный в государственном реестре изобретений РФ 27.08 2008г).

Изучение биологических свойств иммуностимулятора ПС-2 и его влняние _на неспецнфическую резистентность и иммуногенез животных_

2. Влняние ПС-2 на физиологическое состояние телят

опытная, с применением ПС-2 в дозах

2 мл на животное в 2- и 7-суточном _возрасте (п=10)_

контрольная, Ьез применения иммуностимулятора (п=10)

Изучение клинического состояния, заболеваемости, роста и развития, гематологических, биохимических и иммунобиологических показателей

3. Влияние иммуностимуляторов на неспецифическую резистентность и адаптивный иммунитет на фоне иммунизации животных

Иммунологическая реактивность коров при применении иммуностимуляторов на фоне вакцинации против сальмонеллеза

1 опытная (п=10) вакцина ОКЗ + ПС-2 в дозе 10 мл на животное

11 опытная (п=10) вакцина ОКЗ + ПС-1 в дозе 10 мл на животное

контрольная

(п=10) вакцина ОКЗ

Изучение гематологических, биохимических, иммунобиологических показателей, определение титра сальмонеллезных антител

Неспецифическая резистентность телят при применении иммуно-стимуляторв| на фоне вакцинации коров против сальмонеллеза_

1 опытная ПС-2 в дозах и 7-8-суточном возрасте

; 2 мл в 2-3-

11 опытная (п=10) ПС-1 в дозах 2 мл в 2-3-и 7-8-суточном возрасте

I

контрольная (п=10) без применения иммуностимулятора

X

Изучение гематологических, биохимических, иммунобиологических показателей, определение титра сальмонеллезных антител

Рис. 1. Схема проведения исследований

Содержание всех исследуемых групп лабораторных животных, коров и телят было одинаковое, предусмотренное технологическими процессами, принятыми в лаборатории и в хозяйстве. Рационы коров и телят были сбалансированы по основным питательным веществам согласно нормам кормления.

Были проведены 3 серии научно-хозяйственных опытов (рис.1) на лабораторных животных (белые мыши и крысы), коровах и телятах, полученных от них. При проведении опытов животных подбирали по принципу аналогов с учетом происхождения, возраста, живой массы, сроков отела и физиологического состояния.

В первой серии опытов для изучения биологических свойств нового иммуностимулятора ПС-2 при определении острой токсичности были использованы белые мыши в возрасте 2-2,5 месяцев живой массой 18-22 г и крысы в возрасте 2-2,5 месяцев живой массой 90-100 г одного пола. На предварительном этапе белых мышей разделили на 4 группы по 5 голов. Каждой группе животных препарат вводили в количествах 0,5, 1,5, 3,0 и 4,0 мл на кг живой массы. При повторном определении острой токсичности создали пять групп мышей по 10 голов. Опытным группам животных вводили препарат в количествах 1,5, 2,0, 2,5 и 3,0 мл на кг живой массы. Животным контрольной группы вводили стерильный физиологический раствор. При окончательном определении острой токсичности создали семь групп белых мышей и крыс по 10 голов. Опытным группам животным вводили препарат в количествах 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9 и 3,0 мл на кг живой массы. Животным контрольной группы вводили стерильный физиологический раствор.

Изучение хронической токсичности и кумулятивных свойств препарата проводили на белых крысах, разделенных на две группы. Крысам опытных групп в первые 4 сутки вводили 0,1 часть препарата от ранее установленной ЛД50; с 5 по 8 сутки - 0,2 части; с 9 по 12 сутки - 0,4 части; с 13 по 16 сутки -0,8 частей; с 17 по 20 сутки - 1,0 часть от ЛД50. Крысам контрольной группы вводили стерильный физиологический раствор в соответствующих количествах.

Определение оптимальной дозы применения препарата ПС-2 проводили на 4 группах телят по 5 голов в каждой в возрасте 3-5 суток. Предполагаемая терапевтическая доза равнялась 0,1 мл на кг живой массы. Первой опытной группе животных вводили препарат в дозе 0,5 частей от предполагаемой терапевтической дозы, т.е. 0,05 мл/кг, второй опытной группе - 1,0 частей, т.е 0,1 мл/кг, третьей опытной группе - 1,5 частей, т.е 0,15 мл/кг, контрольной группе - 1 мл физиологического раствора на I голову. При этом изучали морфологический состав крови и показатели неспецифической резистентности телят.

Во второй серии опытов проводили изучение влияния иммуностимулятора ПС-2 на физиологическое состояние организма на двух группах новорож-

денных телят по 10 голов в каждой. Опытной группе телят в 2- и 7-суточном возрасте вводили иммуностимулятор по 2 мл на животное, контрольной группе - физиологический раствор в соответствующей дозе. Проводили изучение клинического состояния, заболеваемости и роста телят в постнатальном онтогенезе, а также гематологических, биохимических и иммунобиологических показателей животных.

С целью изучения влияния препарата ПС-2 на неспецифическую резистентность и иммуногенез на фоне иммунизации животных проведена третья серия научно-хозяйственных опытов. Для этого по принципу пар-аналогов были подобраны три группы стельных коров за 60 суток до отела по 10 голов в каждой. Животных всех групп за 60-55 суток до отела иммунизировали вакциной ОКЗ двукратно с интервалом 10-14 суток. Одновременно коровам 1-й опытной группы вводили иммуностимулятор ПС-2 в дозе 10 мл на животное, 2-й опытной - ПС-1 в дозе 10 мл, животным 3-й группы иммуностимулятор не применяли. Телят, полученных от этих коров, разделили на соответствующие группы. В 2-3- и 7-8-суточном возрасте телятам 1-й опытной группы вводили препарат ПС-2, 2-й опытной - препарат ПС-1 в дозе 2 мл на животное. Телятам 3-й опытной группы иммуностимуляторы не использовали. Гематологические, биохимические и иммунологические исследования крови и определение титра сальмонеллезных антител в сыворотке крови коров проводили за 35-30, 15-10 суток до отела и на 2-4-е сутки после отела. Исследование этих же показателей у телят проводили на 2-4, 28-30 и 58-60-е сутки жизни.

Научные исследования проводили с применением следующих методов: клинико-физиологические - определение температуры тела, частоты пульса и дыхания (общепринятыми в ветеринарии методами);

зоогигаснические - измерение в животноводческих помещениях температуры и относительной влажности воздуха - аспирационным психрометром МВ-4М, скорости движения воздуха - шаровым кататермометром, концентрации аммиака и сероводорода - универсальным газоанализатором УГ-2;

гематологические - изучение уровня гемоглобина - гемометром Сали, количества эритроцитов и лейкоцитов - в камере Горяева (A.A. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева, 1973), выведение лейкограммы путем подсчета лейкоцитов разных видов, окрашенных по Романовскому-Гимза с вычислением процентного содержания;

биохимические — исследование уровня общего белка в сыворотке крови ререфрактометром ИРФ-22 (A.M. Ахмедов, 1968), белковых фракций - турби-диметрическим (С.А. Карпюк, 1962), резервной щелочности крови - диффузионным с помощью сдвоенных колб по И.П. Коидрахину, уровня глюкозы в безбелковом фильтрате крови - по цветной реакции с ортотолуидином, общего кальция в сыворотке крови - комплексомстрическим по Уилкинсону, неорганического фос-

фора в безбелковом фильтрате крови - с ванадат-молибденовым реактивом по Ивановскому и каротина в сыворотке крови по В.Е. Чумаченко и соавт., 1990;

иммунологические - определение лизоцимной активности сыворотки крови (В.Г. Дорофейчук, 1968) с использованием суточной агаровой культуры Micrococcus lysodecticus (штамм МЛ-43-29-1), фагоцитарной активности лейкоцитов с расчетом фагоцитарного индекса с использованием культур Staphylococcus aureus (Ю.Н. Одинцов, 1970), бактерицидной активности сыворотки крови с использованием культуры Е. coli (O.B. Смирнова, Т. А. Кузьмина, 1966), уровня иммуноглобулинов (А.Д. Мак-Эвен и соавт., 1970), титров саль-монеллезных антител - реакцией агглютинации с использованием антигена S. dublin.

токсикологические - определение острой токсичности на белых мышах и крысах (Кербер, 1931), субхронической токсичности (Лим и сотр., 1961) и кумулятивных свойств (Ю.С. Каган, В.В. Станкевич, 1946) на белых крысах.

зоотехнические - определение живой массы и среднесуточного прироста молодняка - ежемесячным взвешиванием.

экономические - определение эффективности использования иммуностимуляторов молодняку крупного рогатого скота (И.Н. Никитин, В.Ф. Воскобойник, 1999).

Лечебно-профилактическую эффективность применения биологических стимуляторов определяли путем ежемесячного учета количества заболевших (с учетом диагноза и продолжительности болезни), выбракованных и павших животных.

Определение коэффициента Мелленберга проводили по формуле:

КМ = (Кб * Рб / Ко * Ро) * 100 , где Кб - количество заболевших животных, Рб - продолжительность болезни, Ко - количество животных в опыте; Ро -продолжительность опыта.

Цифровой материал экспериментальных данных обрабатывали методом вариационной статистики на достоверность различия сравниваемых данных результатов исследований по порогам вероятности (Р<0,05; Р<0,01; Р<0,001) с использованием авторской программы А. Гунина (В.И. Лупандин, 1997), программного комплекса Microsoft Exel ХР и ПК Pentium IV.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Краткая характеристика технологии содержания крупного рогатого скота в ФГУП УОХ «Приволжское» ЧГСХА

Система содержания скота в хозяйстве стойлово-выгульная. Коров содержат в типовых помещениях, оборудованных доильными установками, водопроводом и механизмами для удаления навоза. Микроклимат в помещениях

поддерживается приточно-вытяжной вентиляцией, своевременной уборкой и удалением навоза. Коров после запуска содержат в цехе сухостоя, отелы проходят в родильном отделении в индивидуальных боксах. Корову с теленком содержат в боксе в течение 24-48 часов после отела, в последующем телят переводят в индивидуальные клетки профилактория, где их содержат до 20-суточного возраста. Далее их содержат в телятнике в групповых станках.

Кормление сухостойных коров проводят в зависимости от физиологического состояния и сухостойного периода. Основным кормом для новорожденных телят является молозиво, которое вскармливают в первые два дня четыре раза по 1,5 литра. С 3-суточного возраста телятам вместе с молозивом начинают выпаивать ЗЦМ «Провимилк Юни», с 2-недельного возраста начинают скармливать комбикорм "Стартер".

Параметры микроклимата в профилактории и телятнике соответствовали зоогигиеническим нормам (табл. 1).

1. Состояние микроклимата в профилактории и телятнике

Показатель Микроклимат профилактория Микроклимат телятника

Зимний период летний период зимний период летний период

Температура воздуха, °С 15,6±0,15 20,0±0,25 13,5±0,12 17,4±0,21

Относительная влажность, % 64,6±0,93 60,1±0,52 75,7±0,64 73,4±0,59

Скорость движения воздуха, м/с 0,1 0,1 0,1 0,1

Содержание аммиака, мг/м"1 8,7±0,61 7,9±0,49 14,3±0,96 12,6±0,65

Углекислого газа, % 0,16±0,01 0,08±0,01 0,20±0,01 0,10±0,01

Анализом результатов диспансеризации животных отмечен повышенный уровень заболеваемости молодняка болезнями органов пищеварения. При этом смертность новорожденных телят в 2006 году составила 10%, в 2007 году -

12%.

2. Сведения о рождаемости, заболеваемости и падеже новорожденных телят

Показатель 2006 г. 2007 г

Количество коров 350 350

Получено телят 317 348

в т.ч. живых 317 348

Заболело ЖКЗ 62 61

Пало, вынужденно убито 16 21

Смертность, % 5 6

Летальность, % 25,8 34,4

ЖКЗ - желудочно-кишечные заболевания

Основным этиологическим фактором заболеваемости и смертности телят является нарушение обмена веществ у сухостойных коров, особенно снижение

11

уровня витаминов и минеральных веществ в крови животных. На этой почве у коров в период стельности развивается вторичное иммунодефицитное состояние, происходит внутриутробное недоразвитие плода и рождение слабых телят, которые заболевают в первые дни жизни болезнями органов пищеварения.

3.2. Изучение биологических свойств иммуностимулятора ПС-2

Изучением острой токсичности препарата установлено, что средняя летальная доза препарата равна 2,75 мл/кг живой массы, что в 27,5 раза превышает предполагаемую терапевтическую дозу. При этом коэффициент кумуляции составил 10,0, а степень кумуляции - 0. Эти показатели свидетельствуют, что препарат не обладает кумулятивными свойствами и относится к 4 классу не кумулятивных препаратов.

Определение оптимальной дозы иммуностимулятора ПС-2 проводили на телятах (табл. 3).

3. Гематологические показатели телят

Группы телят Эритроциты. 1012/л Лейкоциты, Ю'/л Нейтрофилы, % Лимфоциты, %

папочкоя-дерные сегмен-тоядерные

до введения препарата

1 опытная 2 опытная 3 опытная контрольная 6,53±0,31 6,79±0,33 6,74±0,35 6,63±0,29 7,71±0,34 7,83±0,33 8,19±0,29 8,11±0,32 42,0±2,15 42,6±2Д5 40,4±2,11 41,6±2,34 17,2±0,58 16,0±0,45 14,0±1,22 17,0±0,71 37,5±2,66 38,2±2,03 40,8±2,15 38,0±2,43

на 7-е сутки опыта

1 опытная 2 опытная 3 опытная контрольная 6,68±0,33 6,94±0,32 6,96±0,30 6,52±0,25 8,73±0,34 9,46±0,35* 10,22±0,40* 8,13±0,29 27,0± 1,26 19,0±1,18 19,0±1,22 31,0±1,73 18,0±1,30 19,4±1,29 19,0±1,22 18,0±1,14 52,0±1,87 59,8±2,41** 62,0±2,77** 48,0±0,40

на 14-е сутки опыта

1 опытная 2 опытная 3 опытная контрольная 6,35±0,28 6,67±0,29* 6,75±0,31* 5,87±0,24 9,0±0,22 9,66±0,34** 10,47±0,55* 8,42±0,30 13,2±0,58 10,0±0,45 12,2±0,58 20,0± 1,00 21,6±1,21 22,0±1,26 22,б± 1,20 19,0±1,05 64,0± 1,92* 67,0±2,88* 62,0±2,70 5 7,0± 1,87

на 28-е сутки опыта

1 опытная 2 опытная 3 опытная контрольная 7,24±0,28 7,84±0,32* 7,93±0,33* 6,73±0,28 8,87±0,29 9,72±0,35* 9,34±0,36 8,05±0,28 15,0±0,72 13,0±0,71 13,6±0,81 19,8±0,97 26,0± 1,26 27,0±1,14 28,6± 1,25 25,6±1,21 57,0±2,37 58,6±2,16* 54,6±1,94 50,2±1,77

Примечание * Р<0,05, ** Р<0,01 - по сравнению с контролем

Положительное влияние препарата наблюдали во всех группах телят, которым вводили 0,5, 1,0 и 1,5 части предполагаемой терапевтической дозы. Но следует отметить, что во второй группе телят, которым использовали препарат в дозе 0,1 мл/кг живой массы, происходят более оптимальные изменения в картине крови. Достоверно нормализуется содержание эритроцитов и лейкоцитов в пределах физиологической нормы для данного возраста телят. Анализом лейко-граммы установлено, что содержание сегментоядерных нейтрофилов уже к 28-м суткам исследований стабилизируется на высоком уровне, что подтверждает более быстрое физиологическое созревание иммунной системы. Нарастание количества лимфоцитов у телят этой группы после применения иммуностимулятора происходит без резких колебаний. Об этом свидетельствует высокий уровень лимфоцитов в крови телят второй группы на 28-е сутки исследований, а в остальных группах происходит некоторое их снижение. Изучение показателей неспецифической резистентности (ФА, ЛА, БА) свидетельствуют о благоприятном влиянии иммуностимулятора ПС-2 на становление защитных свойств организма телят.

3.3. Влияние иммуностимулятора ПС-2 на клинический статус, заболеваемость и физиологическое состояние телят

Было изучено влияние препарата на клиническое состояние и заболеваемость телят в постнатальном онтогенезе. Установлено, что из 10 телят опытной группы, обработанных иммуностимулятором в первые дни жизни, заболели легкой формой диареи 5 животных, при продолжительности болезни 4,4±0,5 сутки и коэффициенте Мелленберга - 3,67. В контрольной группе телят, не обработанных препаратом, заболели 9 животных токсической формой диспепсии при продолжительности болезни - 8,5±0,7 суток и коэффициенте Мелленберга - 12,75, 2 теленка из них пали. Профилактическая эффективность препарата составила 40%. Отмечена некоторая ростостимулирующая эффективность препарата. Прирост живой массы телят опытной группы в течение первых трех месяцев жизни был выше на 3,9-4,1% (Р<0,05) по сравнению с контролем.

При анализе динамики изменений содержания эритроцитов, гемоглобина и лейкоцитов прослеживается общая закономерность - повышение их содержания у телят опытной группы, получавших иммуностимулятор в постнатальном онтогенезе, что свидетельствует об улучшении у этих животных гемопоэза, стимуляции активности клеточных факторов защиты организма.

Повышение количества лейкоцитов происходит за счет увеличения лимфоцитов. При этом на 15-е и 30-е сутки исследований соотношение лимфоцитов и нейтрофилов в контрольной группе составило 1,36 и 1,15, а в опытной группе - 2,01 и 1,64 соответственно.

Примечание:

1 - до введения препарата,

2 - в 15-суточном возрасте,

3 - в 30-суточном возрасте

Рис. 2. Динамика содержания лимфоцитов, %

Повышение соотношения лимфоциты/нейтрофилы является одним из показателей состояния иммунологической реактивности организма животных, повышения его защитных свойств. Физиологический лейкоцитоз, умеренная ней-тропения с ядерным сдвигом вправо и лимфоцитоз характеризуют повышение активности клеточных факторов резистентности и адаптационных способностей организма до реакции повышенной активности.

Исследованием показателей белкового обмена при применении иммуностимулятора ПС-2 отмечено повышение общего белка в сыворотке крови телят опытной группы в 15-суточном возрасте - на 10,8% (Р<0,05), в 30-суточном возрасте - на 12,2% (Р<0,05) по сравнению с телятами контрольных групп. Увеличение общего белка в сыворотке крови телят происходит за счет альбуминов и глобулинов, и в большей степени за счет гамма-глобулинов. В течение всего периода исследований содержание гамма-глобулинов в сыворотке крови телят опытной группы было выше контрольных, в 15-суточном возрасте - на 35,8% (Р<0,001), в 30-суточном возрасте - на 26,4% (Р<0,001).

Данные по оценке уровня фагоцитарной активности лейкоцитов у новорожденных телят отражают динамическое становление клеточных факторов неспецифической резистентности организма в течение первого месяца их жизни. Процент фагоцитоза, фагоцитарный индекс у телят, получавших иммуностимулятор ПС-2, были достоверно выше в возрасте 15 суток на 19,4 и 17,1%(Р<0,01) и 30 суток на 45,6 (Р<0,001) и 14,7% (Р<0,05), по сравнению с телятами контрольной группы.

Примечание: 1 - до введения препарата, 2 - в 15-суточком возрасте, 3 - в 30-суточном возрасте

Рис. 3. Фагоцитарная активность, % Рис. 4. Фагоцитарный индекс

Отмечено улучшение гуморальных факторов резистентности телят при применении иммуностимулятора ПС-2. У телят опытной группы лизоцимная активность сыворотки крови была достоверно выше, чем в контрольной группе в 15-суточном возрасте на 37,4% (Р<0,01), в 30-суточном возрасте - на 32,6% (Р<0,01), бактерицидная активность - в 15-суточном возрасте - на 19,3% (Р<0,01), в 30-суточном возрасте - на 15,0% (Р<0,05).

3.4. Влияние иммуностимуляторов на неспецифическую резистентность и специфический иммунитет на фоне вакцинации животных

3.4.1. Иммунологическая реактивность коров при применении иммуностимуляторов на фоне вакцинации

Изучением неспецифической резистентности и иммунологической реактивности коров с применением различных иммуностимуляторов на фоне вакцинации против острых кишечных заболеваний было установлено, что иммуностимуляторы способствуют увеличению содержания в крови гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов и улучшению качественного состава лейкоцитов в крови опытных животных. Так, содержание лейкоцитов в крови у коров опытных групп было выше, чем у коров контрольной группы за 35-30 суток до отела - на 11,1-15,5% (Р<0,05), за 15-10 суток до отела - на 8,9-13,5% (Р<0,05), на 2-4-е сутки после отела - на 7,1-9,9%. Отмечено некоторое снижение уровня лим-фоидных клеток в крови коров контрольной группы ближе к отелу. Однако применение иммуностимуляторов способствовало удержанию их уровня в пределах физиологической нормы.

Биохимическими исследованиями сыворотки крови животных установлено, что за 15-10 суток до отела наблюдается снижение содержания общего белка в сыворотке крови всех групп животных, в 1-й группе - на 5,9%, во 2-й - на 3,8%, в контрольной группе - на 8,6%, что, по нашему мнению, связано с повышением выделения белка на образование молозива. Нами отмечено, что применение иммуностимуляторов способствовало улучшению уровня альбуминовой и глобулиновой фракций белка, особенно гамма-глобулинов (рис.5). Так, в сыворотке крови коров опытных групп количество гамма-глобулинов по сравнению с контрольной группой за 35-30 суток до отела увеличилось - на 9,411,5% (Р<0,05), за 15-10 суток до отела - на 11,4-14,4% (Р<0,01), на 2-4-е сутки после отела- на 12,1-15,7% (Р<0,01). На основании проведенных исследований следует, что использование иммуностимулятора ПС-2 оказало более выраженное стимулирующее действие на белковый обмен в организме коров 1-й опытной группы, особенно на выработку гамма-глобулинов.

Примечание:

1 - за 30-35 суток до отела,

2 - за 10-15 суток до отела,

3 - на 2-4-е сутки после отела

Рис, 5. Содержание у-глобулинов в сыворотке крови коров, г/л

Применение иммуностимуляторов способствовало повышению показателей неспецифической резистентности у коров опытных групп. Установлено повышение фагоцитарной активности нейтрофилов в крови коров 1-й опытной группы по сравнению с контрольной группой за 35-30 суток до отела - на 7,3%, фагоцитарного индекса - на 3,9%, лизоцимной активности - на 19,2% (Р<0,01), бактерицидной активности - на 5,0%, иммуноглобулинов - на 17,8%, за 15-10 суток до отела- на 11,5%, 12,5, 26,7, 21,7, 21,0% (Р<0,05-0,001) соответственно, на 2-4-е сутки после отела - на 13,3%, 42,6, 38,2, 25,3, 18,9% (Р<0,05-0,001) соответственно. Аналогичные улучшения показателей неспецифической резистентности наблюдаются и у коров 2-й опытной группы.

Таким образом, использование иммуностимуляторов при вакцинации повышает уровень неспецифической резистентности животных, наиболее достоверные изменения наблюдаются в 1-й опытной группе коров при применении иммуностимулятора ПС-2.

Примечание:

1 - за 30-35 суток до отела,

2 - за Ю-15 суток до отела,

3 — на 2-4-е сутки после отела

Рис. 6. Динамика титра сальмонеллезных антител в сыворотке крови

коров, log 2

Анализ динамики накопления сальмонеллезных антител в сыворотке крови коров показал (рис.6), что их уровень через 15 суток после повторной вакцинации (за 35-30 суток до отела) был наивысшим у животных всех подопытных групп. В последующем, происходит постепенное снижение титра сальмонеллезных агглютининов, и, у коров на 2-4-е сутки после отела, их титр составил 2,5±0,18 - 4,0±0,34 log2. Отмечено, что применение иммуностимуляторов сти-

16

контрольная

контрольная Н-опытная i-опьггная

мулирует выработку напряженного иммунитета. Титр сальмонеллезных агглютининов у коров опытной группы был выше на 30,0-60,0% (Р<0,05-0,01).

По накоплению сальмонеллезных антител в сыворотке крови коров можно судить о положительном влиянии препаратов ПС-1 и ПС-2 на иммунологическую реактивность коров при вакцинации против острых кишечных заболеваний. В крови коров опытных групп на протяжении всего опыта содержание сальмонеллезных антител было выше, чем в крови коров контрольной группы.

Нами также установлено, что использование иммуностимуляторов способствует улучшению качества молозива. Так, содержание общего белка в молозиве коров 1-й опытной группы составило 14,5±0,92% (Р<0,001), иммуноглобулинов — 52,4±2,6 мг/мл (Р<0,001), титр сальмонеллезных антител - 8,4±0,73 log2 (Р<0,001), что выше контрольной группы на 44,0%, 1,91 и 2,0 раза соответственно, у коров 2-й опытной группы соответственно - 12,3±0,82% (Р<0,01), 50,8±3,3 мг/мл (Р<0,001), 6,5±0,50 log2 (Р<0,01), что выше контрольной группы на 34,0%, 1,86 и 1,54 раза соответственно. При исследовании иммуноглобулинов в молозиве и сыворотке крови новотельных коров установлено, что их уровень в молозиве был выше в 2,57 раза, чем в сыворотке крови.

Формирование полноценного колострального иммунитета зависит от качества, количества и времени получения теленком молозива в первые сутки после рождения. Концентрация иммуноглобулинов в сыворотке крови телят, родившихся от коров опытной группы, повышается после приема молозива с 0,14±0,08 до 17,45±0,85 мг/мл в односуточном и до 20,1±1,2 мг/мл в двухсуточном возрасте.

Таким образом, применение иммуностимуляторов на фоне иммунизации коров перед отелом способствовало повышению неспецифической резистентности и иммунологической реактивности, а также улучшению качества молозива у опытных животных почти в 2 раза.

3.4.2. Неспецифическая резистентность телят при применении иммуностимуляторов на фоне вакцинации коров против салъмонеллеза

При анализе физиологического состояния телят, полученных от соответствующих групп коров, отмечено, что у телят контрольной группы показатели неспецифической резистентности находились около нижней границы или ниже физиологической нормы. В то же время у телят опытных групп они соответствовали физиологическим нормам. Так, содержание гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов до 60-суточного возраста у телят 1-й опытной группы было выше этих же показателей контрольной группы в пределах 4,0-5,7%, 12,9-19,4 и 17,324,5% (Р<0,05-0,01) соответственно, аналогичные улучшения этих показателей наблюдаются и у телят 2-й опытной группы - на 4,4-5,7%, 13,5-16,5 и 16,7-

24,1% (Р<0,05-0,01) соответственно. Определением лейкоцитарной формулы крови в 2-4-суточном возрасте у телят всех групп выявлено наличие эозинопе-нии, нейтрофилеза со сдвигом ядра влево и лимфопении, что характерно для врожденного иммунодефицита. Такое состояние у телят контрольной группы сохраняется до 28-30-суточного возраста. А у телят опытных групп происходит более раннее становление структуры нейтрофилов и улучшение соотношения лимфоцитов и нейтрофилов. Так, в крови телят 1-й опытной группы он составил 1,91 и 2-й опытной группы — 1,77, что свидетельствует о повышении активности клеточных факторов резистентности.

В опытных группах телят наблюдается повышенное содержание в сыворотке крови общего белка и гамма-глобулинов. Уровень общего белка в сыворотке крови телят 1-й и 2-й опытных групп в 2-4-суточном возрасте был выше контрольных животных - на 19,2 и 19,6% (Р<0,001), а гамма-глобулинов - на 52,4 и 51,0% (Р<0,001), с возрастом эта разница снижается и в 58-60-суточном возрасте данные показатели были выше - на 5,8 и 5,5% (Р<0,01), 14,8 и 16,7% (Р<0,01) соответственно.

Отмечен высокий уровень клеточных факторов резистентности у телят опытных групп. Так, если фагоцитарная активность нейтрофилов у телят контрольной группы в 2-4-суточном возрасте составила 18,9±1,1%, то у телят опытных групп она была на уровне 29,4±1,2 и 27,6±1,3% (Р<0,001) соответственно. Одновременно отмечается низкий уровень гуморальных факторов защиты. Так, лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови и содержание иммуноглобулинов у телят в этом возрасте находились на относительно низком уровне. Однако у телят опытных групп эти показатели были выше, чем у телят контрольной группы- лизоцимная активность - на 25,4% и 17,5%, бактерицидная активность - на 19,3% (Р<0,05) и 7,6%, уровень иммуноглобулинов - на 23,1% (Р<0,05) и 17,9%. В возрасте 28-30 суток у телят происходит становление клеточных, частично гуморальных факторов резистентности. Но у телят опытных групп наблюдается более повышенный уровень показателей неспецифической резистентности. В возрасте 58-60 суток наряду со становлением клеточных факторов защиты происходит становление и гуморального иммунитета. При этом у телят опытных групп они достигают уровня взрослых животных в более ранние сроки, чем у телят контрольной группы.

Было установлено, что в сыворотке крови телят опытных групп в 2-4-суточном возрасте содержание сальмонеллезных антител было выше контрольной группы - на 60,1 и 49,4% (Р<0,001), а к 28-30-суточному возрасту их количество значительно снижается, но при этом у телят опытных групп уровень сальмонеллезных антител остается достоверно выше контрольных - на 44,0 и 37,5% (Р<0,05) (рис.7).

контрольная

Примечание:

1 - на 2-4-е сутки жизни,

2 - на 28-30-е сутки жизни

Рис. 7. Динамика титра сальмонеллезных антител в сыворотке крови

у телят, 1о%2

Повышение иммунного статуса сухостойных коров при иммунизации их инактивированной вакциной против сальмонеллеза, колибактериоза, клебсиел-леза и протейной инфекции (вакцина ОКЗ) в сочетании с препаратами ПС-2 и ПС-1, обладающими иммуномодулирующими свойствами, а также применение этих препаратов телятам в первые сутки после рождения способствует формированию более высокого уровня специфического и неспецифического иммунитета, что является основой повышения их устойчивости к антигенному прессингу в первые дни жизни. При применении иммуностимулятора ПС-2 происходят более интенсивные изменения, чем при применении препарата ПС-1.

3.5. Экономическая эффективность проведенных исследований

Экономическая эффективность профилактических мероприятий при применении препарата ПС-2 определяли согласно методических указаний (И.Н. Никитин, В.ф. Воскобойник, 1999).

В научно-хозяйственном опыте из 10 телят контрольной группы заболели 9, из которых 2 пали при продолжительности болезни 8,5±0,7 суток, в опытной группе заболели 5 голов при продолжительности болезни 4,4±0,5 суток. Среднесуточный прирост за весь период наблюдений составил в контрольной группе - 0,59±0,01 кг, в опытной-0,61±0,01кг.

На проведение ветеринарных мероприятий в исследуемых группах было потрачено по 410 рублей.

Расчет экономической эффективности мероприятий при общепринятой схеме лечения телят:

- предотвращенный ущерб:

Пу = Мо* Кз * Кп * Ц - У = 10 * 0,46 * 20,9 * 42 - 2620,38 = 1066,38 руб, где Мо - поголовье восприимчивых животных; Кз - коэффициент возможной заболеваемости животных, Кп - удельная величина потерь основной продукции в расчете на одно заболевшее животное, кг/т, Ц - средняя цена единицы продукции, руб; У - фактический экономический ущерб, руб.

Экономическая эффективность на 1 рубль затрат составил 1,60 рубля.

Расчет экономической эффективности профилактических мероприятий при применении ПС-2:

- предотвращенный ущерб:

Пу = Мо * Кз * Кп * Ц - У = 10 * 0,46 * 20,9 * 42 - 18,42 = 4019,46 рублей.

Экономическая эффективность на 1 рубль затрат составил 8,80 рубля.

Таким образом, при применении иммуностимулятора ПС-2 экономическая эффективность на 1 рубль затрат составила 8,80 рубля, а при общепринятой схеме лечения 1,60 рубля

4. Результаты определения экономической эффективности профилактических мероприятий

Показатели Базовый вариант ПС-2

Количество телят 10 10

Заболело телят 9 5

Продолжительность болезни, сутки 3,5 4,4

Среднесуточный прирост, кг 0,59 0,61

Цена реализации единицы продукции, руб 42 42

Затраты на проведение ветеринарных мероприятий, руб 410 410

Экономический ущерб от падежа телят, руб 2570,4 -

Экономический ущерб от снижения прироста, руб 49,98 18,42

Предотвращенный экономический ущерб, руб 1066,38 4019,46

Экономический эффект, руб 656,38 3609,46

Экономическая эффективность на 1 рубль затрат, руб 1,60 8,80

4. ВЫВОДЫ

1. Изучением условий содержания животных в ФГУП УОХ «Приволжское» ЧГСХА установлено, что зоогигиенические параметры соответствуют ве-теринарно-санитарным требованиям. Температура в профилактории в зимний период была на уровне 15,6±0,15°С, в летний период - 20,0±0,25°С, относительная влажность - в зимний период - 64,6±0,93%, в летний период -60,1 ±0,52%, содержание аммиака - в зимний период - 8,7±0,61 мг/м3, летний период - 7,9±0,49 мг/м3.

2. Определением острой токсичности препарата ПС-2 установлена средняя летальная доза (ЛД50), равная 2,75 мл/кг живой массы, что в 27,5 раза превышает предполагаемую терапевтическую дозу. Исследованием хронической токсичности установлено, что препарат ПС-2 не обладает кумулятивными свойствами и откосится к IV классу безопасности (некумулятивных препаратов). Оптимальная терапевтическая доза препарата ПС-2 равна 0,1 мл/кг живой массы.

3. Изучением влияния препарата ПС-2 на клинический статус и заболеваемость телят в постнатальном онтогенезе установлено, что он обладает профилактической и терапевтической эффективностью при болезнях органов пищеварения у новорожденных телят. Профилактическая эффективность составила 40%. При этом сокращается продолжительность болезни до 4,4±0,5 суток, при 8,5±0,7 суток в контроле. Коэффициент Мелленберга в группе опытных телят в 3,47 раза меньше, чем в контрольной группе. Препарат обладает некоторым ростостимулирующим эффектом.

4. Препарат ПС-2 способствует повышению активности клеточных и гуморальных факторов защиты организма, о чем свидетельствуют повышение количества лейкоцитов на 23,3-61,7% (Р<0,01-0,001) за счет увеличения содержания лимфоцитов, улучшение соотношения лимфоциты/нейтрофилы. Отмечено улучшения фагоцитарной активности нейтрофилов и фагоцитарного индекса, содержания общего белка и гамма-глобулинов.

5. Использование иммуностимуляторов стельным коровам на фоне иммунизации против острых кишечных заболеваний способствовало улучшению гематологических, биохимических и иммунологических показателей, повышению титра сальмонеллезных агглютининов на 30,0-60,0%, а также качества молозива - содержание в нем общего белка, иммуноглобулинов и титра сальмонеллезных антител соответственно на 44,0%, 91,0% и 2,27 раза больше, чем в контроле.

6. Исследованием иммуноглобулинов в молозиве и сыворотке крови новотельных коров установлено, что их уровень в молозиве в 2,57 раза выше, чем в сыворотке крови. Концентрация иммуноглобулинов в сыворотке крови телят, полученных от этих коров, увеличивается после приема молозива с

0,14±0,08 до 17,45±0,85 мг/мл в суточном возрасте и до 20,1±1,2мг/мл в двухсуточном возрасте.

7. Повышение иммунного статуса сухостойных коров путем вакцинации и использования иммуностимуляторов, а также применение этих препаратов телятам в первые сутки после рождения способствует формированию более высокого уровня неспецифической резистентности и специфического иммунитета и является основой повышения их устойчивости к антигенному прессингу в первые дни жизни. Установлено повышение колостральных антител в сыворотке крови телят на 60,0%.

8. Экономическая эффективность при применении иммуностимулятора ПС-2 составила 8,80 рубля на 1 рубль затрат, а при общепринятой схеме лечения -1,60 рубля.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для повышения неспецифической резистентности и сохранности молодняка рекомендуем использовать иммуностимуляторы ПС-1 и ПС-2 (имму-ноксан) в дозе 0,1 мл на 1 кг живой массы на 1-2 и 7-8 сутки жизни, внутримышечно.

2. Для повышения напряженности иммунитета при вакцинации стельных коров против эшерихиоза, сальмонеллеза использовать иммуностимуляторы ПС-1 и ПС-2 в дозе 0,1 мл на 1 кг живой массы одновременно с вакциной.

3. Получен патент № 2332214 «Способ получения препарата для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза животных», зарегистрированный в государственном реестре изобретений РФ 27.08.2008 г.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Петрова, О.Ю. Пути повышения естественной резистентности сельскохозяйственных животных / О.Ю. Петрова // Молодые ученые сельскому хозяйству Чувашской Республики: мат. науч.-практ. конф. молодых ученых и специалистов «Чувашская ГСХА». - Чебоксары, 2005. - С. 156-160.

2. Петрова, О.Ю. Исследование кумулятивных свойств препарата «Имму-ноксан» / О.Ю. Петрова // Молодые ученые в решении актуальных проблем современной науки: сб. науч тр. межрег. науч.-практ. конф. молодых ученых., аспирантов и студентов. - Чебоксары, 2006. - С. 119-120.

3. Петрова, О.Ю. Определение оптимальной терапевтической дозы препарата иммуноксан / О.Ю Петрова // Мат. всерос. науч. практ. конф., посвящ. 75-летию со дня открытия Чувашской государственной сельскохозяйственной академии. - Чебоксары, 2006. - С. 186-187.

4. Петрова, О.Ю. Определение острой токсичности препарата «Иммуноксан» /О.Ю. Петрова // Молодые ученые в решении актуальных проблем современной науки: сб. науч. тр. межрег. науч.-практ. конф. молодых ученых, аспирантов и студентов - Чебоксары, 2006. - С 118-119.

5. Петрова, О.Ю. Образование специфических антител у крупного рогатого скота при вакцинации против ИРТ на фоне применения иммуностимуляторов / О.Ю. Петрова // Роль молодых ученых в реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК»: мат. III науч.-практ. конф. молодых ученых, аспирантов и студентов. - Чебоксары, 2007. - С. 39-40.

6. Петрова, О.Ю. Влияние иммуностимулятора ПС-2 на уровень общего белка и белковых фракций в сыворотке крови телят / ФП. Петрянкин, О.Ю. Петрова // Роль молодых ученых в реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК»: мат. науч.-практ. конф. - Чебоксары, 2007. - Т. 1. - С. 151-156.

7. Петрова, О.Ю. Динамика накопления антител при вакцинации сухостойных коров и телят против сальмонеллеза / Ф.П. Петрянкин, О.Ю. Петрова // Роль ученых в реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК»: мат. науч.-практ. конф. Чебоксары, 2007. - Т. 1. - С. 157-164.

8. Петрова О.Ю. Использование иммуностимуляторов для повышения физиологического статуса молодняка / Ф.П. Петрянкин, О.Ю. Петрова // Ветеринарный консультант. - 2007. - №20. - С 18-20.

9. Петрова О.Ю. Влияние иммуностимуляторов на неспецифическую резистентность и иммуногенез животных на фоне иммунизации / Ф.П. Петрянкин, О.Ю. Петрова // Ветеринарный врач. - 2008. - №3. - С. 22-25.

10. Петрова О.Ю. Применение нового иммуностимулятора ПС-2 для повышения резистентности телят/Ф.П. Петрянкин, О.Ю. Петрова // Ветеринарная патология. - 2008. - №1. - С. 70-72.

ПЕТРОВА ОКСАНА ЮРЬЕВНА

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НОВОГО ИММУНОСТИМУЛЯТОРА ПС-2 И ЕГО ВЛИЯНИЕ ПА НЕСПЕЦИФИЧЕСКУЮ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ И ИММУНОГЕНЕЗ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Подписано в печать 25.09.2008 г. Формат 60x84/16. Бумага офсетная. Уел печ. л. 1,0 Тираж 100 экз. Заказ № 248

Полиграфический отдел ФГОУ ВПО ЧГСХА 428003, г. Чебоксары, ул. К Маркса, 29

Актуальность темы. Сельское хозяйство и производство сельскохозяйственных продуктов является одной из важных задач национального проекта, принятого Правительством Российской Федерации. Одним из направлений сельского хозяйства в национальном проекте является развитие ведущей его отрасли - животноводства, которое неизбежно сопровождается вмешательством человека в эволюционно сложившиеся цепи обитания, питания, биологические циклы животных, что значительно снижает неспецифическую резистентность и иммунологическую реактивность организма.

Во многом эффективность животноводства зависит от состояния здоровья животных и взаимосвязанной с ним продуктивности их, что в первую очередь зависит от направленного выращивания молодняка, сочетающего высокую продуктивность с устойчивостью организма к заболеваниям. Научными исследованиями установлено, что здоровье животных является динамичным показателем и определяется как генетическими особенностями организма, так и воздействием различных факторов внешней среды. Эти обстоятельства позволяют направленно влиять на формирование и проявление защитных сил организма. К ним относятся обеспечение животным соответствующих условий содержания и кормления, способствующих более быстрому формированию и лучшему проявлению их защитных сил. А это предусматривает совершенствование технологии производства продуктов животноводства, исключающих неблагоприятные воздействия внешней среды на организм животных (Ф.П. Петрянкин, 1998; Г.К. Волков, 2003; А.Г. Шахов, 2003; Н.К. Кириллов и соавт., 2006).

Факторы неспецифической резистентности и иммунологической реактивности обеспечивают устойчивость организма животных к воздействиям неблагоприятных условий внешней среды, а их тестирование позволяет распознать защитные свойства организма.

Особенно чувствителен организм к воздействиям неблагоприятных экологических влияний в первый и последние месяцы внутриутробного развития и первые три месяца новорожденное™. Физиологический статус материнского организма отражается на внутриутробном и постнатальном развитии плода и новорожденного. В результате воздействия неблагоприятных условий чаще всего рождается молодняк со слабыми защитными свойствами, у него развивается иммунодефицитное состояние (И.М. Карпуть, 1998), он более предрасположен к различным заболеваниям, плохо развивается и растет (Ю.Н. Федоров, 2005).

Снижение показателей неспецифической резистентности организма при выращивании молодняка в условиях интенсивных технологий отягощает проявление иммунодефицита.

Различные фармакологические препараты, применяемые для профилактики и лечения болезней животных, не всегда дают желаемые результаты, а ряд антибиотиков обладают иммуносупрессивным действием. Поэтому создание и применение иммуностимуляторов, в том числе неспецифических, действие которых направлено на повышение общей резистентности организма животных, заслуживает особого внимания.

Механизм действия неспецифических иммунокорректоров существенно шире, чем принято считать, они повышают эффективность традиционной профилактики и терапии многих болезней (В.М. Земсков, 1997).

С учетом изложенного, весьма актуальным является повышение иммунобиологических факторов естественной резистентности организма животных и их коррекция иммуностимуляторами.

Цель исследований - изучить биологические свойства нового иммуностимулятора ПС-2 и особенности формирования неспецифической резистентности и иммунологической реактивности организма коров и телят при использовании иммуностимуляторов нового поколения.

Для решения намеченной цели были поставлены следующие задачи: 1. Провести анализ технологии содержания, условий получения и выращивания телят в ФГУП УОХ «Приволжское» ЧГСХА;

2. Изучить биологические свойства (острую, хроническую токсичность и кумулятивные свойства) нового иммуностимулятора ПС-2 (иммуноксан);

3. Определить оптимальную терапевтическую дозу и изучить влияние иммуностимулятора ПС-2 на физиологический статус телят;

4. Оценить влияние иммуностимуляторов ПС-1 и ПС-2 на неспецифическую резистентность и адаптивный иммунитет на фоне иммунизации животных;

5. Определить экономическую эффективность использования иммуностимулятора ПС-2.

Научная новизна заключается в том, что разработан новый иммуностимулирующий препарат ПС-2, изучены его биологические свойства и определена оптимальная терапевтическая доза. Проведен анализ клинического состояния, заболеваемости и роста телят в постнатальном онтогенезе при применении препарата ПС-2. Отмечено положительное влияние иммуностимулятора ПС-2 на неспецифическую резистентность телят в раннем постнатальном онтогенезе. Установлено, что препарат стимулирует как клеточные факторы резистентности, так и повышает активность гуморальных факторов защиты организма. Испытуемый препарат при применении глубокостельным коровам на фоне иммунизации против сальмонеллеза способствует улучшению клеточных и гуморальных факторов резистентности, иммунного статуса коров, повышает качество молозива, что в конечном итоге улучшает антенатальное и постнатальное развитие телят, их неспецифическую резистентность и иммунологическую реактивность.

Практическая ценность работы. Результаты экспериментов и производственных опытов открывают перспективы для широкого практического использования разработанного иммуностимулирующего препарата ПС-2. Применение данного препарата обеспечивает прирост живой массы и сохранность телят, повышение их неспецифической резистентности. Использование препарата при вакцинации коров в последний период стельности повышает неспецифическую резистентность и иммунологическую реактивность, что является основой повышения устойчивости новорожденных телят к антигенному прессингу в первые дни жизни.

Получен патент №2332214, «Способ получения препарата для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза животных», зарегистрированный в государственном реестре изобретений РФ 27.08.2008г.

Реализация результатов исследований. Данные, полученные при выполнении диссертационной работы, используются ветеринарными специалистами ФГУП УОХ «Приволжское» ЧГСХА, в учебном процессе факультетов ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Чувашская ГСХА» и ФГОУ ВПО «Казанская ГАВМ».

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и получили положительную оценку на научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов «Молодые ученые в решении актуальных проблем современной науки» (Чебоксары, 2005), межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов «Молодые ученые в решении актуальных проблем современной науки» (Чебоксары, 2006), научно-практической конференции, посвященной 75-летию со дня открытия Чувашской государственной сельскохозяйственной академии (Чебоксары, 2006), III научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов «Роль молодых ученых в реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (Чебоксары, 2007), всероссийской научно-практической конференции «Роль ученых в реализации приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (Чебоксары, 2007), расширенном заседании кафедры патологической анатомии и инфекционных болезней факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия» (Чебоксары, 2008).

На защиту выносятся следующие положения:

- биологические свойства иммуностимулятора ПС-2;

- влияние иммуностимулятора на физиологический статус телят в по-стнатальном онтогенезе;

- влияние иммуностимулятора на неспецифическую резистентность и иммуногенез на фоне вакцинации коров против острых кишечных инфекций.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ в материалах всероссийских, межрегиональных, республиканской конференций, в научных трудах ФГОУ ВПО «Чувашская ГСХА», в журналах «Ветеринарный консультант», «Ветеринарный врач» и «Ветеринарная патология».

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 164 страницах компьютерного исполнения и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследования, выводов, предложений производству, списка использованной литературы, включающего 188 источника, в том числе 26 иностранных, приложений. В диссертационной работе содержится 34 таблицы и 10 рисунков.

4. ВЫВОДЫ

1. Изучением условий содержания животных в ФГУП УОХ «Приволжское» ЧГСХА установлено, что зоогигиенические параметры соответствуют ветеринарно-санитарным требованиям. Температура в профилактории в зимний период был на уровне 15,6±0,15°С, в летний период - 20,0±0,25°С, относительная влажность - в зимний период — 64,6±0,93%, в летний период — л

60,1±0,52%, содержание аммиака — в зимний период — 8,7±0,61 мг/м , летний период - 7,9±0,49 мг/м3.

2. Определением острой токсичности препарата ПС-2 установлена средняя летальная доза (ЛД50), равная 2,75 мл/кг живой массы, что в 27,5 раза превышает предполагаемую терапевтическую дозу. Исследованием хронической токсичности установлено, что препарат ПС-2. не обладает кумулятивными свойствами и относится к IV классу безопасности (некумулятивных препаратов). Оптимальная терапевтическая доза препарата ПС-2 равна 0,1 мл/кг живой массы.

3. Изучением влияния препарата ПС-2 на клинический статус и заболеваемость телят в постнатальном онтогенезе установлено, что он обладает профилактической и терапевтической эффективностью при болезнях органов пищеварения у новорожденных телят. Профилактическая эффективность составила 40%. При этом сокращается продолжительность болезни до 4,4±0,5 суток, при 8,5±0,7 суток в контроле. Коэффициент Мелленберга в группе опытных телят в 3,47 раза меньше, чем в контрольной группе. Препарат обладает некоторым ростостимулирующим эффектом.

4. Препарат ПС-2 способствует повышению активности клеточных и гуморальных факторов защиты организма, о чем свидетельствуют повышение количества лейкоцитов на 23,3-61,7% (Р<0,01-0,001) за счет увеличения содержания лимфоцитов, улучшение соотношения лимфоциты/нейтрофилы. Возросли также фагоцитарная активность нейтрофилов и фагоцитарный индекс, содержание общего белка и гамма-глобулинов.

5. Использование иммуностимуляторов стельным коровам на фоне иммунизации против острых кишечных заболеваний способствовало улучшению гематологических, биохимических и иммунологических показателей, повышению титра сальмонеллезных агглютининов на 30,0-60,0%, а также качества молозива - содержание в нем общего белка, иммуноглобулинов и титра сальмонеллезных антител соответственно на 44,0%, 91,0% и 2,27 раза больше, чем в контроле. 6. При исследовании иммуноглобулинов в молозиве и сыворотке крови новотельных коров установлено, что их уровень в молозиве в 2,57 раза выше, чем в сыворотке крови. Концентрация иммуноглобулинов в сыворотке крови телят, полученных от этих коров, увеличивается после приема молозива с 0,14±0,08 до 17,45±0,85 мг/мл в 1-суточном возрасте и до 20,1±1,2мг/мл в 2-суточном возрасте.

7. Повышение иммунного статуса сухостойных коров путем вакцинации и использования иммуностимуляторов, а также применение этих препаратов телятам в первые сутки после рождения способствует формированию более высокого уровня неспецифической резистентности и специфического иммунитета и является основой повышения их устойчивости к антигенному прессингу в первые дни жизни. Установлено повышение колост-ральных антител в сыворотке крови телят на 60,0%.

8. Экономическая эффективность при применении иммуностимулятора ПС-2 составила 8,80 рубля на 1 рубль затрат, а при общепринятой схеме лечения - 1,60 рубля.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для повышения неспецифической резистентности и сохранности молодняка рекомендуем использовать иммуностимуляторы ПС-1 и ПС-2 (им-муноксан) в дозе 0,1 мл на 1 кг живой массы на 1-2 и 7-8 сутки жизни, внутримышечно.

2. Для повышения напряженности иммунитета при вакцинации стельных коров против эшерихиоза, сальмонеллеза рекомендуем использовать иммуностимуляторы ПС-1 и ПС-2 в дозе 0,1 мл на 1 кг живой массы одновременно с вакциной.

3. Получен патент № 2332214 «Способ получения препарата для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза животных», зарегистрированный в государственном реестре изобретений РФ 27.08 2008г.