Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Антигенактивные Т-лимфоциты в крови крупного рогатого скота, привитого против бруцеллеза по разным схемам

' О ,

-*—"•* ' •> < г

СТЕГСТВО СЗЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА - КЛУШКИ-КАЗАХСТАН

ядзь-аг.-йки:! орд:нл трулоюго красного знамени

3ООЬаТдгнйлг ><и^Г.ПУГ

АпГЛГЯНРЗАХтВНЬН Т-ЛИМФОЦИТи В КРОВИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА,ПРИВИТОГО ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА ПО РАЗНЫМ СХЕМАМ

16.00.03 - Вэтзрияаряая микробиология,вирусология, эпизоотология,микология и иииувология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидате ветеринарных наук'

С 9 чипа л вти но к - 1993.

Работа выполнена в лаборатории кафедры патологической физиологии Семипалатинского зоотехническо-ветеринарного' института.

Научный руководитель: В.С.СТ5ПИН - доктор ветеринарных

наук,профессор.

Официальные оппоненты:

Т.С.САЙДУЛДИН - доктор ветеринарных наук,член-коррвспондэнг КазАСХН,профессор

Щ.Ж.ТУГСУНКУЛОВ - кандидат ветеринарных наук.

Ведущая организация:

Казахский институт эпидемиологии,иикробиологии и инфекционных болезней. / . .

Защита состоится "76 " ¿/¿¿УП9Э'{ года а <7 О, £1-0 часов на заседании специализированного совета Д.120.'41.02 при Алма-Атинской ордена Трудового Красного Знааени зооветеринарном- институте

(480013, г.Алма-Ата, пр.Абая,28," Зооветеринарный институт)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Алма-Атинского зооветеринарного института.

Автореферат-разослан п/Уп Сг£/?А 1993 г.

Ученый секретарь специализированного совета, доктор ветеринарных наук

К.Б.БШШЗ

£ак?эра.-н; СВ."«»Пэк?э;вока12 и sp., i97S)),::o:opü3 ua пзотоядзз spa» аа ¡¿зла язучзаа по сравна ana с руаерэдъпал проявязнаиа.

Нгдсзсаточлаз зная;!я :слз?эчаого каазааям пра о'руцзляззз .jpyaaoro рогатого окота ixe поэголя::; ;:о.;э г.сполъзоззгь зго для эцэакг иаиуаогзаззо а, з часгзоз?;;, здз:.: приузлзавя гз:циа.

Цепь сззаги: опрадзаить зозио^лзсть сцзакзась аааудаи;; этвгз я о га« аза аз втаггзоз Зруцолла обо ргуз 1Э ц с.1 по аа коала паю бру-ц-2лг.а арзахтигаих 1-х лз ток 2 крозп крупного рогатого окота.

Я а л ач'.! а с с - з g o'j а: i я n: 1) изучить азхочлзаао ^руцзлпаарзактиг-ais.í Т-ла^оцагоз з ::роза крупного рогзтэго о;:з;з,прзг;:гого зэк-циизаа аз агашоз 12 а 82 з полай--: дозах,

2) г.зуч;',т:> даазиакз ?~кдзток а'руцзллиаргаг^шого глаза з крозн крупного эогзюго окота, ргзохдззироэаалого гакциазаа аа атзиаоз а 12,

3) изучмь динамик? бруцаллиар-зслгазаого алоаа Т-хгзма пр.: экспернпаатальнс-* бруцвллзаэ у крулаого рогатого с;;ота аатазтнз-го и призитого по сазнаи схзази проти.3 оруцзллзаз.

Неучаса аазвзаз г.-оЗота. Впзрзиз нзучзаа гшашш брудзллаа-рзактизнаго клоаз Т-л::а:;оцигоз з 1;раза крупяэго рогатого скога, приззтого протез (5руцэлзэза заацаазца аз итзимсз 82 и 19 по раз-* аыу сгэиаа.

Дааа сразнатзлънгл хараитграотака алзточаого а гуморального тшуяного отзэтз на рззныэ закцнаи,

'Лзучзаа дааааика бруцзллинроаэтиваых Т-лшфоцитов в крови при зкапэракзнтзльнои бруцзллззэ крупного рогатого скота ннгактного a npaisuíoro по разный охзмза. 7с2ааозаэао,чхо особи,иззЕди-де¡шиз амзат слабуэ ала запсздалуэ клзточау;з рзакциз да пагогзааы-Л 2 та и у бруцэдл.

íl п я к i' ич зо коз а аач п а >:з н с опз а с у "i 'i'', ¿ckoí: юавэ Огуцзллаасс'/:.-•."азаого клоаа Т-кпэ2о:: з к роз a i:¡yuao?o роганогэ ззсм otcl-^íu".:

развитие и угасаянз иицузяого отвзтэ яа бруцеллц а уозсз? использоваться для хзракхгрисгаии.йыиуногенэза авралу о оврояогичаски-----------

и;: и озкгзовоаогачзскаки гзсгзда.

Оценка схэи приизяэния противобруцвллэгнкх гэкцип стоков 83 и IS по клеточному икиуяитзту показала их сравнимость и оправданность дзльзгйлой производственной.проверка.

Клеточная рз акция в отззт на полную доз;; гакци.цы кз ¡лтаиаа 82 в парзиз звдэлв развивается энэргичяза.чэц нв нал^к» лряу ».ичы и? 29. Это 7532:2253 ;:з аасбходкаость изучения ораз-

¡штзльной эффективности этих препаратов в услозппх, когда кэла-тзльяо быстро восстановить иммунитет.

На защиту выносятся: I) результаты изучения клона бруцеллин-рэактивных Т-лиифоцитов у крупного рогатого скота, привитого вакцинами из штаммов 82 и 19 в различных сочетаниях, 2) результаты

•¡oro pjr'G^ji'j n?i: за чср;;: re;

¿ппобациг, роботы. !¿2tзрпели диссертации долобекы не кэучиэ»: конференции профессорско-преподавательского состава СЗВИ Cr.Cs-иипалатинс-к, 1990), на межвузовской научно-практической конференции полодых ученых и специалистов в г.Орунза (1990)« se Всесоюзной. научной конференции, посвященной 140-летйю Харьковского зооветеринарного института иы.Н.М.Борисенко (г.Харьков,1991), аа республиканской научио-прантичэской конференции молодых учеяых и специалистов в г.Сзииполатияскз (1991), на кокферэяции,посвященной 40-дотио Семипалатинского аоовагзриварвого института (1992).

Публикации. По теыз диссертация опубликовано 3 научныг рабох.

Обьем и структура работы. Диссертация изложена на 167 страницах иашинописи (в тон числе прилолэние - 30 страниц), приво-

дится 76 таблиц,' 8 рисуняов. Работа состоит из введения, обзора литературы,результатов собственных исследований, заключения, выводов, предложений, списка использованной литературы. Указатель литературы содержат 251 источник (213 отечественных и 38 зарубэа-иых авторов)»

2. СОБСТВШЫЗ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материал я ызтоды исслэцоваанй

Работа выполнялась в лаборатории кафедра патофизиологии Семипалатинского зооветарвнспного института, в ссшхозэ "Семипалатинский" ¿ваасанеЦского района, в лаборатории эпизоотологии, диагностики а про^адактиаи бруцеллеза Казахского научно-всслздова -тздьского ветеринарного института s период 1990-1932 годов.

Исследования проводились на крупней рогатой скота (КРС) из бдагоподучаих со бруцеддззу хозяйств. В опытах испэльзовазо 25 голоз оиаизнтадьаной породы и 20 голов гологзйскоз породы.

Имиунаыа ответ на ввэдениз роз пых ванциз изучался пз гзлках, которые а возрасте 5-S гаищза бала.приваты а за 2-3 каепца парад случкой рзввнцизаровавы со раашм ехэкац.

Схэш ииауявзациа крупного рогатого скота прэтав бруцеллеза

Группы ; аивотных: Вакцинация Доза : Рззакци-: нация • Д 332 9

I 19 атаиы ЕО илрд.и.к. 13 ига на 4 млрд. ц.к.

2 19 итаиа 60 ыдрд.а.к S2 итааа 100 алрд.и.к.

3 82 птаыи 100 ИЛрД.-.й. 82 зтаиа 10ц идрд. и. к.

Перед вакцинацазй вез а^зда отрицэхзльинз сероазгачз:

реакции з РА и Р£СК на бруцзлзгз. Иммунизация ыивотнох. В рабогэ вгпозьзозвлЕСЬ сухав и наш zj цины против бруцеллеза из атеишв 82 и 12. Ида йацуаазацет до

J"." ".'Ц i: Z¿ZH'¿ '"IS-riS . h. Д. ИСиОЛЬЬО-

¿úíkímú ¡i'jidu уаааеАоааа ОАЯОЦ ДОЗЫ ВЭКЦККЫ р 80 M ff

lÎMMVKKHft ПГИД? вчшгатгм

О Т f Т IT ч> г> л

Из годы исследования. Для суждения об цццунэгэназз исполмпия-

ЛН из A JJ1.H ïlrtJtWKU'Hill 1/П»<Т1ГМГ 41 ..

wiikjj U fut ГI ^'•v'Li^

количество лейкоцитов, ликуоцвгоз и и s популяций,аатигзарзактй!!-зы2 кзон Т-лии^аамз. Гуморадьяоз звено имиунитзтв вывзляаи по цакоплзаии бруцеллезных аататзл в РА и РЕК.

Экспериментальный бруцеллзз был воспроизведен по научному плану лаборатории эпизоотологии, диагностики и профилактики бру-

ганной водой плотностыэ 1,077 (Л.З.Хэйфзц, З.А.Абалкин, 1973;

«HH^Hiua рйЭВВДЗЯИП pQCT3OD0?¿ XSÜKCD

С

доводили до концентрации 2 •I0J лимфоцитов в X un.

Un ПП Л 2 M И Ч nrt'IÛPn У П Tí ИТ» О Г» Г»Т> П 1»IH»mA ,»-•».

Опрэддлзаиз В-лик5оци?оп. Количество Б-ликфоцитоз определяли

иатодои комплементарного розеткообразования (ЗАС-РО) (¿'/У/З/иШ, г1 а£ ,1974; В.А.Яблонский, В.В.Притара,1983,1984). В качестве индикаторной систеш при постановке ЙАС-РО использовали эритроциты быка, сенсибилизированные биофзбричныи гемолиз иной а комплеизнтои (В.Л.Солодовников,1963).

Определение относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов и бруцалпияреактушных Т-клеток. Тииусзависимыэ лицфоциты и клон бруцеллинреактивных Т-лиифоцатов (БРТ) определяли пето -дои спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (0.6 Х.аа££исд , 1964; В.М.Суровас,1978).

Т-лин$оциты определяли параллельно с антигеяреактивныиа Т-нлзткаии в двух пробирках.в которые вносили по 0,2 ил взвеси лимфоцитов (2 '10е в I ыл). Обе пробы с лимфоцитаци в течение одного часа инкубировали в термостате при З?1^. Перед инкубацией в опытную пробу вносили 0,01 ил бруцеллина.в контрольную про бирку добавляли равный обьеи раствора Хенкса вшсто бруцеллина. За процент Т-лиыфоцитов принимали количество розэткообразуючих клеток, полученных в контрольной пробе. При этом, полагались на исследования Л.И.Проскуриной (1986), в которых не отмечено глия ние на РО прэинкуо'ации лиьфэцитов в термостате. Процент БРТ определяли как разницу роззткообразующих клеток иекду опытной и контрольной пробаий.

Мето^индикация бруцеллезных антител. Бруцеллезные агглютинины и коиплекеатсвязыващие антитела з сыворотке крови определяли по методике, общепринятой в ветеринарной лабораторной пра* тике.

Стзтпсткческая обработав зкспэопкен.тпльных данных. Цифровой иатэрвал обрабатывали на ЕВМ - ЫК 59 ненодох вычисления стенда 3с„- гсыбкв и достоверности интервалов средних ара^твчосках г г.",. .- таблицы (?.Б.Стрздков, 153С)•

йнтегрзл вероятности определяли путем примзне ния формулы Стьэдектз. Зазчзяия средних титров аятктзл,а так;::з их относительную точность, определяли по.Сайдулдияу-Т.С.-(1992)._______

пь илп;с корреляционно;"; сряь с устаяагяйзпди с поассьо 3'S.Y-ЛВК 3, используя программу Stzaz.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ¡АССЛВаШ'.'.Й

2.2.1. Па гзпч ¡'^nvmmi: о?*ег на, пта;/!.'с I?

Под наблюдением было 15 телочек,поитатых в зозпастэ 5-в из-

Число бруцеллияреактквяых Т-лииЬсцитов к их относительное количество (таблица I) нарастали параллельно. При этом ira к синельный уровень их приходился на 30-й дзнь. Б последующие сроки шало место снижение уровня БРТ, но их абсолютное и относительное количество оставалось выаз исходного уровня во все сроки исследо-

' • " : : г г

r.î:x:r,',r.'j с гуцс ::::нпз скт .-.в к и г. 7-Л21:*оцктов к о»: клок пзрмчно!-! 0^3'. о ?;з r;;Ki;;:<;v кг>

- 7 Т

:•).:'.: а

Оз ccT'iiJ-j

; v y ¡; л о

¿0 4,0t±0,4 43^0,25

После вакцинации

'il дг:;> ,7 10о-

I месяц

3 Ш 'оНЦВ

') о п.

39-4,7 413-96

— — à

У, - i ' О

¿o~4,ô

'с-4,3 379-

305-

"13,

6,0% "~13,7£

•'.53

Т«-,

+11? о о-С Л- - iU.o

__->G»

—- ô 1 û/w

' 5

Примечание : Достоверные результаты выделены чертой.

Татр актаток достиг ааксииука чорзс три издали. Затаи титр агглютининов рззко упал чзрзз два азсяца,з спад титра антител по Р2ЮК наблюдался к трза нзояцои. Чарзз пзоть узсяцзз половитзль-аыз пробы по РА обнаружены у одяо„,в но »Я! К у особо;; из II.

Таким образои.первичний вииуи:-:-.;, огъз: -'а иодцуо дезу гашиш из зтацва 19 пронзался отчзтлизьа аакопла:и:оа SV£ а аатитзл. цак-с.!"ум клеток и оягагзв »эбяядояся ч-зрзз 2-1 аздзлп. Чзрзз цзсть иасяцзз сохранялся зисокий уроволь £РТ, тогда как в диагностическом титрз антитзла обнаруживалась у отдзльных озооз1.;.

Корреляционная связь и а аду процзнтои Б PI и титрои антител з РА и PSJK нз достигла достоверности аи з один срок поело вакцинации.

2.2.2. Вторичный имвдтшй птбзт на чалую дозу вакцины из ктаиц.а 19

Под наблядэниаи было восемь телок,которыз в возраста 5~6 иэ-епцзз били привиты полной дозой вакцины из итаыма 19. Лля ревакцинации использована малая доза (0,05 полной дозы) закцины.Рэвак-цинеция осуществлена за 2-3 ызсяца до'опучки.

Число и процэнт БРТ (таблица 2) находились на болза высоком 3ровна по сравнзниа с исходным з точзнка шзсти «зенцэв. Максимум числа этих клеток наблюдался чзрзз два месяце,а пик процэнтаого содержания БРТ опрадэлялся чорзз 1-3 изсяца.

Динамика актитзл б РА и P2GK характэразозалась круты« подхз-глои з пзрвыз нздели. Затаи уровень антител падал,но зце чзрзз изоть цзсяцзв псслэ ревакцинация оставался у двух из сама особзй на да агностической значэаии по РА. PiGK чарзз G цзсяцзв у зсэх аивотных была отрицательной.

Слздоватзльао, клеточная рзакцип по сравнению с гуморальной з болзо создниз сроки достигала иакошуио а длитзлъаэз удэрнизалас

ns высоко:; уроваз.

; PA -1; Fir.K ! - пптячятччваи ч» vnTSumm^nn

ч O UiAUIoUlU

кования • процент • vue;.

PA

VTT.V

зсгд

1D,

:7~II 244-4? I85z

„+29,25

E.Gi

T *

70"I7,6Ï

22,6ft

' ПГ-'! * Г. ' - Г. "Mnrif'iVTfinf'^iu:!' -л т^л: " т- tr ^

!рг; етэъ-чнзд oti-j'ís v.: зло яээцгяг

И

?Г о';л!; по зксчс

LU.J А Н^О»^ ^'.Wl-'-O «.í

»••эсяцп !.

Ликэиика а уровень титров антител з РА и Р£СК тоадстзэаиы поелз Еекц».яецка и рзвакцштцка, гспо^з огдзльяих сроков вторичного ответа (15 и 60 даек), когда т»:гр илтлтзл в Р*СК яггз (Р<. 0,01» Р4.0,001), чей при первично:.; ответе. Р/.СК стала отраца -тзльног. у рзвакцикарованяк; вагосжк рэньгз (чэрэз сесть аесяцез), чей 5 пзраичпо прквнтых. 7 псзлзд:::-; ¡с э этот срок три сзоби из II имели полоьатзльнуз РЛЗК.

Сдздэзагэльцо,цздзл доза вакцнли хахп и вызывает маунный ответ,близкий по сип» первичному на поллу» дозу,но развитие его запаздывает,а $гаеак;:з наступает раньше.

2.2.3. Втооичзий имцуянцй отвэт на вакцин:? "а птагаа 8% по со¡п вакцины из аташа 19

Под лаблодзийза было 8 гэлон, которые в возрасте 5-5 месяцев была приваты вакциной из итациа 19 а за два-три иэсяцв перед

случкой ревакцинировакы вакциной из атаима 82- Первичный ответ

>

на вакцину из птзиыз 19 аписаа ранее в раздела 2.2.I.

Число и процент БРТ (таблица 3) параллельно круто нарастадп через 15 дней и находились па врзокса урозяэ 2 течение трех ¡¡Закаев. Чэрэз шесть иосяцез 'показатели.с,ч!:зались,но осталась выпе исходных значений. Через.10 месяцев число и процент БРТ ярпблизи-яась к уровню,отмеченному перед ревакцинацией.

Динамика антител характеризовалась максй&апъвыа накоплением их через дзз недели. К 30 дню наблюдался рззккй спад титра аята-тел как по РА, так я по Р&К. Через два а тра гзсяцз в диагностически титре по РА были три проба из дзгята и две пробы из семи соответственно. К паств ьзспдсу РЛ а РЯСЕ у аззх озсбзй была от-ркцатэлькыии.

Такай образ са, вторичная иаиу с::отнзт .сткмэпа ров а нный вакциной из птгмз из (по фону вакцин и з^-иа 19), характеризовал-

»«цС. обхзй ЬрОиОкОдИл«. опаке яка. уровня -СНТИТЭЯ- до отпипя«??-

ЧЗННРГ/Г ипп ТТЯ П П ПОТТО я ФЯ ТСПТ1

йН.ЧБЬ'ИКа бО\'ЦеЛЛИНПеа1:?ИМ1!>Г Т—ЛИМГ^птт«"РП-п и янгч«г,отг "РН — -С ~ Сг и^ихи па аопинпи !'*--( ПТНММ7Н

по '\f.-iv вакцины вз птенца 19

I, роки I: с с :13 ;;о>:ан ия

Обпатни? ТИТР;

процент : число

РА

Р£СК

Перед ревак- .+п „ т,+ т . ЦИИВЦИЭЙ 4 0,8 12 1,4

Ппотто рд-пптмт I» иаин ^

I ИЗ 8 П0Л0ЕИТ.

.-доолцал

и

<5Э~0, ±

Иошгзчанпз: дзстовзогше показатели виделени чертой.

НЬ!Х. ответ 01' ПО СХТ'-'^ Т9+Ч?в Гттп-пттгмл г»ттт|««мг» Т0С1П1""

Так, через 15 диен число БРТ возросло более чей в 20 раз, а процент угзлпчплея десятикратно. Эти показатели при первичном от-

ветз возросли соответственно б 2,5 и 5 раз. В посладуюдзм уровзнь клзточной реакции был в одни сроки насколько вызз при первичном, в другие - при вторичной отвзтэ.

Основное'отлична серологических реакций (РА и РДЗК) при вторичном иммунном ответе заключалась в том,что они принимали отрицательные показания раньше Счзрзз шесть мзсяцзв), чзм при первичном ответе на вакцину из штамма 19 (через 10 изсяцзв).

Уровень антител во все сроки был несколько никэ при вторичном отвэтэ.

2.2.4. Первичный иммунный ответ па вакцину из-штамма 82

В опыте использовано 10 телок 5-6 месячного возраста.

Динамика абсолютного и относительного количества БРТ (таблица 4) аналогичная. Максимум числа БРТ и их процента наблюдался на 30-2 день (40S-I00, 39*7,7 %). В последующие сроки клон БРТ уменьшился,ао к шести мзсяцам процент БРТ оставался еще повышенным (Р<0,05), когда абсолютное число БРТ нэ отличалось'от исходного значения, вслэдствие уменьшения популяции Т-клэток.

Содержание антител наиболее высоким было на 21-30 дни посла введения вакцины. Агглютинины'резко causaлись на 30-й день и через два месяца все животные имели отрицательную РА. Титр компла-мзатсвязываюадх антител начал уменьшаться черзз два мзсяца, но еде чзозз три и шесть изсяцзв выявлялась положительная Р2СК, соот b9tqteshh0 в ДВуХ из ДЗВЯТИ И В ДВуХИЗ с9МИ Проб.

При провадании корреляционного анализа-из^ду процентом бруцал-лиареактавных Т-лимфоцятов и титром антитзл в PA и РД1К на удалось выявить достоварной зависимости ни в один срок после вакцинации.

Таблица 4

'¡а1 зруцзяллзрзйгг::;?.!^ Г-з;ч;.1>.ыго2 ллгл';^: ппа- пэавачаом- ианувяон-охвата., аа^вйца.-^. «з

; л:

'"с ло

иаузд вапДл-

с ^ ъъТп о

( тта ах.

1 нэсяц

2 кэсяца

3 нзсяца

иНиДа яаяЦйпЬЦип

Г> ГИ— I.» ЮЦ-. лМ

39-7,7 403-100

26-3,5 132-28 <50

22^4,8 7^16 <50

Ь я -

.„+33,3£?

л.¿о, Ь:

зо-5Т Г

2 из 3 пооб аолояитз ль я.

¿разечааазг дестэзэраыэ асказатздй вндзязяа чэого.-. .2.5. Згооачзый аагтгякЯ отвз? во мки-ил-ва

Г!0 ГОНОЛОГИЧЧЭ''."'

наследована кровь восьми телок, озиаиу низ зраз вн ни:: з- 2-'. ояца до случки вакциной из штамма 82. ...

'!•;•; ю а пргцзлг яяэаа бруцзллааэззкг.!*:!!.'* Г-у.:гтз:: ч :.:-ца 5)'во взсь период наблидзаия, кроме• ода-ого срона чЮ была достовзрао виня исходного уровня,при ыакоиыумэ БРТ чзязз 4 ^ О ЧЗПЗЗ ТО "ЗСПЦО^^ТОЗЛ'? ИЯгЗ!! МЧ пнг}Т]0 Ц ППОГЗ^Т*

Лг'Г ':оибЯйз'1л«с& я 1:с:со4нэ^7 70025-3.

'с;;'.¡утл аггдзгэзляоз ппилйлллол а а I"-"] л-: , •;: у:..'.у г-

спияэниэ титра антитэл по РА и РЛСК. Чэрзз на мзсяцз.у 202:: озо-

о-?;: по РА били висе диегнос ткческик, тогда как РЕК стада

згрлаагедьаой во гоех пробах чэрзо пзоть месяцев.

Та::,.:.: зораз о:/., при одаоврзценнои иаксвкальнои нарастании клз-¡1 антител,антитела ьсчезли из крови раньше (чзрзз два-изсть чаи БРТ, число и процент которых снизились до исходного уровня только к 10 изспцвц.

Коррзявцйонная связь изкду проценте^ бруце ллиерзвктивиык Т-лви-»эдлтаг и твтрза антител в РА и ?ДЗК не усгоновлввг ни в один сзок позле ревакцинации.

. Таблица 5

^инаг.ша бруцелланреактивных Т-лаифоцитов и антител поп вторичной отезтз не вакцину из штацца 82

Сомь иссле- : Б Р Т : Обоаткые тиши .

дования :процент • число : РА | РЮК

Нзпзд рэвек-ц и над и 5 г. 4-0,78 23±£,8 0 0

П ос I :з рзвакцп нации

ДЕЗ;: 46-6,6 о гч " н* л ч-¡¿£0-0± 215~15,9% .,¿18,95 гЬп15,9 %

I 0 Г:Ц 37-9,8 209^34 ос+21,4% „„+33,8% 25,2%

2 иесяда 22-3,6 '93-11 450 3 из 8 проб поладите лье.

Б 1ЙСЕЦЕ 36-6 135-Й7 ¿50

6 месяцев 18-4,4 " 97-22 450 0

:о ьзсяцег 7-0,9 41-14 0 0

Л римеч ьниз: доз тоге пшй рз з.упьтати вид зле ни чертой.

СпЬЬЬИ'ГгЛ ь.чак характер ;,стика п епЕИчнэго и х'тэр.'.чнзго ш.м'унно-

отгзтэ на гакаг.ь^ иг штамма 82 . Клоп БРТ за:.: етно нарвптвл и

4 1?» Л СС5В0СХ одстео .тад ;: ■ С ¿С Э Д 1» У пэьнеи с 15 дне ¡: до иести из сп-

цоз каз при порзичио.ч,гак и при вгэсичяом ответах. G¡г.!-:еанг :-;л;-

•ÍJ а чип чауао хо Aau.ijd иуи t¿G мг и ч п u.-i — '-¡r'j'j-;

Яняо я-гачпгпгнкто я ни:» (Р/П.0Т).ичм ппч попяиинлч о^-я-т?? ричяои отззтах суцестззяяых отличии нз имзло.

üm по глиг\ о 44 v ииспг.о oniri iíi.i н u«i uiunn 4.1 uní *i о 1ииичпа*1 i. ез ¿ n.».

тоадаотзэааа. Дяагясбтичзский титр аятател в РА обнаруживался з тачзааз одного изсяца. В поолздуо-дк-з сроки т;:то зататзл з Р/. пита диагаостачзского. Пологптзльная сохранялась болзз „летально: до езстй ^зояцзз при пэрзичаоа и до тсзх мзсяцзз пол згз-р;'л:гс1 отззтз;с,

Осталыгаз зпгэ^зиз за одза год до з apa zas;: я была гз

СЛЗчО—ЗЛ'Л AU У1 UUVJJIU зоуал^зинл 4ayu¿> -lm rj

Сразлзлиз nr.ivvíüioro отззта разнес групп крупного рогатопо тп m «а.^оштм« лмячят.зтп ппппчнф пкг ПППОСТЗЛ в цзовиз 1:

"ISrls iS.Z.r.

I r:oar.3 4yrjj;:i 15 даэ;: уроьзнь относительного колачзсгве БРТ у .зсз,: групп.

гйь-.л^чнал зекоаоизрйозть наблюдалась п.в огносзшш &5сола2.~ азлачзоп.£ LPi'. ч..з;:з у гсупп рзвакцанкоогалиых. стахао;: .-ц юаразтаио до 80J-II50 2 пгрваз 15 днз:;. Зто насколько вше, у -.¡нтакгаьк еивотнмс (750). Саиоз цианоз число БРТ (270) гзстз у озгекцвавровачайх пало;; дозой взкцпни из -I'. :•:ы: отизчзио к ь отнэззвг.и отнозатзлькзго количества БРТ. j; п-о.1зду*д.:з 15 дкзГ. часлз БРТ саа-..алось в г-ипазкаволосъ у ¿;й-зсзх гоупп.

даалг'.з клеточной реакции аз оруцелла патогзааого £ та!■:•.: с иокг-з:; .ч л'э у озоозг, йззодйдзнйвх от патогенного ствако бруцглх от-:лзчзн& слсоая кг» запоздалая i::e точная рзащая.

Ъ зоклйчзкпз следует ст1:отить,что кзучзниз клзточно:; роакц.-Hi . а ••.руцзлли показало нзкзтоозз прзкмудество вакцины аз зтааиа 19 :.rv. изрВ1;чк0к бгздэнип й кок ф0н8 при ВТОрИЧНСи отгзтз н8 вэкцй-;:у аг аг&ых

Пр.. скзпзп.'.^зат2льноа бруцеллезе у осой'зй,океззгаихся нзза;к-u.3rni;:«i: наоллдаатся слооая ахк запоздалая клеточная реакция. Е сь;п' с ат;::.: «о-но япзполагать,что запоздалая клеточная озакция

..а :.:ааа;: дозу .а-. la.aai.-.a 19 при рзвакцинаци1.: указигаа: не

..; ..J'J1'г о ose гак пакт» иимун^тэта. йоь?о:.7 &кзпг;:ч-

-. ia. а; aa-aa.at: ¡з а о-.а;;::, ¿за;. а:-:::.: ни аа ^'аз!" а с':; г: н;. "а: ;ааа:а аааа; ...а а: а:.аа. .

:;-:;..!;jaa.,-j:i. з а'-аааача аэ а;а: а..аа: г.ааааа аа

гзкзаеацэааао ярокььодспзайо;' проьзрки.

3, 3 H 3 оды

axauua саи^аэтса до отрицательно.; зэггздвй -ю^з ,;ьа .

Р23Х 'J отдельных зиготных остается положительно;; через 3 изслцзв • а 2 10 иослцаа стапозатоя отрнцзтольпой у зсех особей.

зи з проз и клоаа бруцзляинреэктизних т-лии^оцитил. чг.или я и.^-дза пика: на 15-й a SO-il дни. «эрзэазчадьнога j розня яэяозатзли

ЛпгпяпттинпЭЯКТИЗгШХ Т~ДШФОЦйТО£ ДОСТИРсЙТ ЧЗрЗЗ IG

-------- -- .....^..^.■лг.л Siiorii оптапугании ПРГЛЮТ.ШИНОВ H KUl.ii.ií —

!.',а IS, отличается болзз высокий титрои и болэе длите."ьнии :пс пси

- 1В -

йттзтбизв по сравнению с аналогичными показателям для гоыоло-гкллогс предшественника.

ь. Бторнчниг. ¡шиуншл: отезт на малую дозу вакцины из шташа проявляется достоверная в печениэ вести.шсяцзв нарастаниеи з коов;; клона бруцеллинреактивных Т-л:ш;'Оцитов. При этой ывлая доза вакцины из птаим8 19 стимулирует накопление бруцзллнярзак-т;:вяэго клона Т-лимфоцитов в крови телок л такой гз количестве как и первичная полная доза. Однако, иаиуаный отвзт да палую дозу проявляется издленньш развитие и реакции со стороны клона бру-цзллиярэвктивных Т-ликфоцитов.

С. Изучение иммунного ответа на иалую дозу вакцина из штаицз И по накоплении в крови клона бруцеллкнреактквных Т-лиифоцитов ЕвЯЕЛгвг особенности иммуногенеза, которые остаются скрытый» при тесткровааии зго только серологическими реакциями.

Ьолзз позднее развитие клеточкой рзвкцвв нв калув дозу вакцины из штамма 19,по срввнзнию с отвзтои на полную дозу вакцина из ьГсЬл'.а 82, порождает вопрос об изучении сравнительной эффективности этих схем в пзреыз нздзли послз иииунизациа телок.

7. Титры антител в РА и РД1К при вторичной отЕетз на введение иалоЛ дозы вакцины из атаиаа 19 сникавтся у тзлок за пределы ди-ьгностических значений через шесть месяцев.

6. Экспериментальный бруцеллез у крупного рогатого скота,привитого по схемам 82+-Й2, 19+19 «.д., 19+82, проявляется нзкопле-аиз1' е грови в течение одного месяца (срок исследования) клона от.целлпнреактпвяых Т-клеток, каксииуи которых отиечавтея на 13-й дзнъ.

Клон бр\'целлкнрзш:тивних Т-лиифоцитоь достигает болзе високо-го у г огня у пппь'.тах по схсааа 82+82 и 15+82, а у ииг.унизпрован-по схзш 15+19 к.д. он ц8лочислзнпзе. У двух осоой!. По 10, привитых по схеиви 82+82 и 19+19 ¡л.Д-,

- IS -

OKcr.'i'CL.-iiXM нззс якцззнь^и » утя гочазя ç^^izx'.^ s:;: и аь'лз сл:оо ги-> С : " э .юг, n \: : vo г-о ■;-.-

. ЛЗ C.1J «u J ЛДи HuuaJ о fi роли ni'j п îia —

a.oii -гwipe но гд накапливаются только у отдельных эсос;зй (.у двух

ыо wu / t u xm^rib uuaauvaticaaxbrt v uiuihii^w uhiî'i'vi м vi wriviu - .

10. Изучение иммуногенеза по накоплению о'руцзллингзеактивныл Т-ии$оцитоз позволяет выявлять закономерности,которые 2 основной совпадают с проявлениями иммунного ответа, тестируемого оз-рологичеокиия реакциями. Кроме того,по изучению бруцеллинрзактяг-ного клона Т-лиыфоцатов выявляются особенности,которые не улавли-

ЗГ-ыурпа .. Г, ч .Л H 1,1 V.C4 Т.пдуим ^

' j : * ' ù Г.'-J .-„'.-ji.;} Л ЛЗО bv. хгк;,-..: Cj ::yu:.'i;r,'Г Г:

■ ~ }г:т".с. д.-.л о

I. Синденин о накоплении ируцвллинрзактиЕного к,юна х-лш.ши-

чении иымуноганзза вакцинного п инфекционного процессов наряду о сзрологичзскаыв и б а кто рводог нчсскиц« тзста»;;.

7пга окота клопа опчпеллиновактивяш: х-кимооаиюв поп оазккх us.j-

могу" бигь л с по льг; ов а :î:i з учебной процесса nos ТТ,у-Ц:Гл:, ■.,..■ ■ а ? логлл, ла-слл ллологл':.. "лппо^о^ллл

у:: ■

i opr..,o

по специальности 3106 - ветеринарка.

а. преимущество клеточной реакции,обусловленное вакциной из 82 по сравнению с малой дозой вакцины из итаиав 13 в пер-вцз недели после ревакцинации, предполагай! необходимость производственного и лабораторного изучения сравнительной эффективности зтих СХ51: в условиях, когда необходимо быстрое восстановление вкцукнтете.

5. РЗШЗАЦ'ЛЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ Дэнние по накоплении бруцеллинреактивного клона Т-лицфоцитов I нроЕК при экспериментальной бруцеллезе,а такае в ответ на вакцины иг аташгов Ьруцелла збортус 19 и 82, привзнязццх в различ -ных схемах для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота, используются кафедрами патологической физиолог;»;, микробиологии и эпизоотологии Семипалатинского зооветинститута, Воронежского государственного агроуннверситета, Орзнбургского СХИ, Санкт-Петербургского ветеринарного института, Московской ветеринарном екалевки кивни К.И.Скрябина.

Б. СПИСОК ОПУ£ЛИКОЗАННЫХ РАБОТ

I. Проскурина Л.И., Бланк Т.Н. Аллергическая альтерация к к в/.тро клеток крови крупного рогатого скота, больного бруцеллезов // Вклад колодих ученых и специалистов'в научпо-техническин ппогпзсс е сельскохозяйственной производстве / Тезису докладов педвуз опекой научно-практической конференции.- Фрунзе, 1990. -С. 122—-

¿. Ьле»'.!: Т.Н., Степан Б.С. Бруцеллинрзактивпиз клетки ъ крон;: I.ручного рогатого скогь, привитого вакцинами из второе Ь'руцелла аззптус 15 и 8Ь // Материалы итоговой научно!; конференции учз-ныл. института за 1990 г.- Семипалатинск, 1291. - С.£5.

З1. Блей а Т.Н., Степин Б.С, Выявление аазггзирзакт;:гзьк ï ?

Тс з крови крупного рогатого окога /7 • r-.iu »!?"/:з:-::/-

а:л кзд^зрзнцап учеин.: зз г.- ; :.г... IE9I.-

С. со •

4. Проскзрзаа. Л.11., Блз»1а ТЛ., UsaaasК..',, 2 B.J. J/7í'.jллпнрезктквнйз кязгха з к^олл о.../'. -цьрогаайого бруцеялаыи чзрзэ разоыа ирокь ¡¡¿еле paihrüúncu«.; /•'

OÍQJ. aùïiajiâ siAÓiTóijiJ» liu.T-iitWn il^iiwkjÙuùuMU .у-»*"***^ w С 1С ь С

год.- Сэаиаалатинск, 1331.- C.c-i.

5. Блэйы Т.Н., Стапаа З.С. Содэраанае бруцэллиаоэактпвяах кяз-ток и антатзл а крова крупного рогатого скоте,праватого захцйнсь/ йз игааиов Бруцзллз абортус 1Э и 82 // Научные достижения пололи.: учеаых а специалистов - зиватаозодству.- Семипалатинск, ISSI.-С.7.

" — •• ~ о <"» япп г*« пч ~ "3 i Y « ("Tiiii -.J ы о V-Л/Т. i —

■ V • • • ! • # • » , ..... •.>.. .....— - .. . . . • - • .. -V-.. ......

нага. Часть I. - Семипалатинск,ISS2—С.БВ-22.

яу из зтзииа Бруцзлла абортус ]Е // Цовшлзяаз продукти^аиига u¿u=-скохозя.»ста эязах аиюгаах а йоазаззаааЕогааад изр борьбы о золзг-

сгзвааах гиготаых я созаргааствовзаиа аэр 6o>yj;¡ с Чеать I. - Семипалатинск, 1ЭЭ2.- С.£3-87.