Значение онкомаркеров, факторов роста, ангиогенеза и апоптоза в диагностике поверхностного рака мочевого пузыря

Шахпазян, Николай Константинович

Диссертации по медицине → Клиническая лабораторная диагностика

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.10) на тему:Значение онкомаркеров, факторов роста, ангиогенеза и апоптоза в диагностике поверхностного рака мочевого пузыря

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Шахпазян, Николай Константинович Саратов 2010 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.03.10

Автореферат диссертации по медицине на тему Значение онкомаркеров, факторов роста, ангиогенеза и апоптоза в диагностике поверхностного рака мочевого пузыря

На правах рукописи

084601210

ШАХПАЗЯН Николай Константинович

ЗНАЧЕНИЕ ОНКОМАРКЕРОВ, ФАКТОРОВ РОСТА, АНГИОГЕНЕЗА И АПОИТОЗА В ДИАГНОСТИКЕ ПОВЕРХНОСТНОГО РАКА МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ

14.03.10 - клиническая лабораторная диагностика 14.01.23-урология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 3 ММ»

Саратов-2010

004601210

Работа выполнена в Г осударственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет имени В.И. Разумовского Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Научные руководители:

член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

ГЛЫБОЧКО Пётр Витальевич;

ЗАХАРОВА Наталия Борисовна.

ЛУЦЕВИЧ Игорь Николаевич;

КАРЯКИН

Олег Борисович.

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Защита диссертации состоится «19» мая 2010 г. на заседании диссертационного совета Д 208.094.04 при ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава» по адресу: 410012, г. Саратов, ул. Большая Казачья, д. 112.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава».

Автореферат разослан

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор

Бородулин В.Б.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Рак мочевого пузыря (РМП) - распространенная опухоль мочеполовой системы, заболеваемость которой растет с каждым годом [Чиссов В.И., Старинский В.В., Петрова Г.В., 2008]. В Российской Федерации на долю поверхностного (немышечно-инвазивиого) рака мочевого пузыря приходится только 51,9%, а в развитых европейских странах - около 70—80%. Это свидетельствует о низкой выявляемое™ поверхностного рака мочевого пузыря, поздней обращаемости пациентов и, как следствие, увеличении числа органоуносящих операций со снижением качества жизни больных [Лопаткин H.A., Даренков С.П., Чернышев И.В. и соавт., 2004].

Показано, что при ранней постановке диагноза и своевременном лечении жизнь пациентов можно было бы продлить в среднем на 14 лет.

Самым распространенным скрининговым методом для выявления рака мочевого пузыря является цитологическое исследование мочи. Этот метод прост, доступен для массового скрининга; специфичность метода достигает 95%. Общепризнано, что цитологическое исследование мочи - недостаточно чувствительный и субъективный метод [Матвеев Б.П., Фигурин K.M., Карякин O.E., 2001].

В настоящий момент актуальной проблемой является поиск новых маркеров ранней диагностики, определения стадии процесса и прогноза течения РМГ1. К таким маркерам могут быть отнесены молекулы, характеризующие биологическую агрессивность первичной опухоли. Современные достижения молекулярной биологии позволили разработать и предложить для определения в моче и крови десятки различных веществ, специфичных для рака мочевого пузыря.

К перспективным маркерам злокачественного роста при раке мочевого пузыря отнесены: опухолевые антигены, онкогены и продукты их экспрессии, регуляторы клеточного цикла, маркеры пролиферации и ангиогенеза, молекулы клеточной адгезии, протеазы внеклеточного матрикса и базальной мембраны, пептидные факторы роста и их рецепторы, маркеры апоптоза и др. [Корнеев И. А., 1996; АльШукри С.Х., Корнеев И.А., 2003].

Вместе с тем исследований диагностического и прогностического значения широкого спектра биомаркеров, отражающих различные проявления биологической агрессивности поверхностного рака мочевого пузыря недостаточно. Не определен спектр молекулярных маркеров для выбора оптимальной тактики хирургического и. патогенетического лечения поверхностного рака мочевого пузыря.

Разработка алгоритмов диагностики с использованием новых лабораторных показателей открывает перспективы в улучшении результатов лечения поверхностного рака мочевого пузыря.

Цель работы: разработать комплекс лабораторных показателей для диагностики поверхностного рака мочевого пузыря.

Задачи работы

1. Изучить характер изменений содержания в крови и моче онкоассоциированных маркеров, факторов роста, ангионенеза, апоптоза у больных хроническими циститами и поверхностным РМП.

2. Провести сравнительный анализ изменения содержания в крови и моче онкоассоциированных маркеров, факторов роста, ангиогенеза, апоптоза и результатов цитологического исследования у больных хроническими циститами и поверхностным РМГ1.

3. Установить чувствительность и специфичность факторов ангиогенеза, роста и апоптоза в диаг ностике поверхностного РМП.

4. Определить пороговый уровень значимых молекулярно-биологических маркеров для диагностики поверхностного РМП.

5. Установить диагностическое значение комплекса молекулярно-би'ологических маркеров для выявления начальных стадий РМП.

Научная новизна

1. Выявлены особенности изменения в сыворотке крови (ТРА, TPS, ФРЭС, ТФРа, ФРФ), в плазменной взвеси мононуклеаров (ИЛ-12, Fas-рецептор и Fas-лиганд), в моче (UBC) комплекса молекулярно-биологических маркеров у больных с поверхностным РМП.

2. Установлена панель молекулярных маркеров для диагностики поверхностного РМП - в моче UBC, в сыворотке крови ТРА, TPS, ФРЭС, во взвеси мононуклеаров крови Fas, FasL.

3. Проведен расчет уровня молекулярных маркеров для дифференциальной и уточняющей диагностики поверхностного РМП.

4. Разработан алгоритм использования молекулярно-биологических показателей в диагностике ранних стадий РМП.

Практическая значимость

1. С целью повышения качества диагностики поверхностного РМП показано определение комплекса молекулярно-биологических показателей: в сыворотке крови (ТРА, TPS, ФРЭС, ТФРа, ФРФ), в плазменной взвеси мононуклеаров (ИЛ 12, Fas-рецептор и Fas-лиганд), в моче (UBC).

2. Исследование содержания ТРА, TPS в сыворотке крови и уровня UBC в моче целесообразно использовать при проведении дифференциальной диагностики между хроническими воспалительными заболеваниями мочевого пузыря и уротелиальным раком.

3. Показано, что исследования цитокератинов ТРА, TPS в сыворотке крови, UBC в моче, факторов ангиогенеза и апоптоза ФРЭС в сыворотке крови, Fas, FasL в плазменной взвеси мононуклеаров могут повысить эффективность диагностики ранних стадий РМП.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Одновременное определение уровня онкомаркеров-цитокератинов ТРА, TPS в сыворотке крови и UBC в моче позволяет осуществлять

уточняющую и дифференциальную диагностику поверхностного РМП, и при сравнении с результатами цитологического исследования осадка мочи они имеют более высокую диагностическую чувствительность.

2. Высокая эффективность при дифференциальной и уточняющей диагностике (специфичность - 80%) поверхностного РМП для онкомаркеров-цитокератинов наблюдается при уровнях: ТРА в сыворотке крови выше 1,52 нг/мл; TPS в сыворотке крови выше 82,6 Ед/л (чувствительность - 85,2%, специфичность - 47,4 - 93,8%); UBC в моче выше 50,1 мкг/мл (чувствительность - 86,7%, специфичность - 48,7 - 87,5%). Диапазоны уровней TPS 61,5 - 82,6 Ед/л, ТРА 1,05 - 1,52 нг/мл в сыворотке крови, UBC 22,55 - 50,1 мкг/мл в моче, являются диагностической «серой зоной». Нижняя граница «серой зоны» обладает высоким потенциалом для скрининга поверхностного РМП (чувствительность - 80%).

3. Наибольшая диагностическая эффективность при поверхностном РМП для факторов ангиогенеза и апоптоза лимфоцитов выявлена при уровнях: ФРЭС в сыворотке крови - 203,72 пг/мл (чувствительность - 73,1%, специфичность - 62,5 - 92%); Fas во взвеси мононуклеаров крови - 346,7 пг/106 (чувствительность - 50%, специфичность 66,7 - 96%); FasL во взвеси мононуклеаров крови - 0,08 пг/10й (чувствительность - 75%, специфичность -56-92%).

4. Исследование TPS, ТРА сыворотки крови и UBC мочи целесообразно включить в алгоритм диагностики на начальных этапах обследования больных поверхностным РМП; исследование ФРЭС сыворотки крови, Fas и FasL во взвеси мононуклеаров может быть рекомендовано при выборе тактики лечения.

Внедрение результатов

Разработанные методы диагностики используются в урологическом отделении Клинической больницы №3 ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава»; материалы диссертационного исследования преподаются на кафедрах клинической лабораторной диагностики и онкологии ФПК ППС ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава».

Степень личного вклада автора в результаты исследования

Автор принимал непосредственное участие в лабораторном обследовании всех пациентов. Собран материал для проведения исследования факторов роста и ангиогенеза, факторов апоптоза и онкомаркеров; им было выполнено определение уровня исследуемых лабораторных показателей методом иммуноферментного анализа. Проанализированы истории болезней, клипико-лабораторное обследование пациентов, дополнительные исследования, выполненные с помощью ИФА, осуществлена статистическая обработка полученных результатов.

Апробация работы

Основные результаты и положения диссертационной работы доложены и обсуждены на: межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых учёных с международным участием «Молодёжь и наука: итоги и перспективы» (Саратов, 2007); научно-практическом симпозиуме «Лабораторная медицина: инновационные технологии в аналитике, диагностике, образовании, организации» (Москва, 2008); межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых учёных с международным участием «Молодёжь и наука: итоги и перспективы» (Саратов, 2008), по итогам доклада присуждён диплом II степени; расширенном заседании кафедр клинической лабораторной диагностики, урологии, патологической анатомии, ЦНИЛ ГОУ ВГ10 «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава», лаборатории физиологии и патофизиологии отдела лабораторной и функциональной диагностики ФГУ «СарНИИТО Росмедтехнологий» (Саратов, 2009).

Публикация результатов исследования

По материалам диссертации опубликовано 8 работ, из них 3 в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ.

Объем и структура работы.

Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста, состоит из введения, шести глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, в котором приведены 242 источника, в том числе 27 - на русском языке и 215 - на иностранных языках. Работа иллюстрирована 26 таблицами, 22 рисунками, 3 схемами.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

Материал и методы исследования

Материалом настоящей работы являются результаты исследований, проведенных в период с 2007 по 2009 г. в центральной научно-исследовательской лаборатории, являющейся подразделением НИИ фундаментальной и клинической уронефрологии ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского».

В исследование вошли пациенты, поступившие в этот период времени в НИИ уронефрологии с уротелиальным РМП стадий ТаЫоМо и Т^оМо (п=54). Возраст обследованных больных в среднем - 60±10 лет; большую часть пациентов (п=37) составляли мужчины, что объясняется более высокой частотой встречаемости РМП среди мужчин.

В качестве группы сравнения в исследование включены 24 пациента с доброкачественными заболеваниями мочевого пузыря (22 - с хроническим циститом, 2-е папилломами мочевого пузыря); средний возраст 63±11 года, 20 мужчин, 4 женщины.

В контрольную группу (п=25) вошли практически здоровые мужчины в возрасте 23±2 года.

Все больные с РМП подвергнуты комплексному обследованию, которое помимо общепринятых клинических методов обследования включало:

1. Лабораторные исследования : OAK, ОАМ, содержание мочевины, креатинина в сыворотке крови.

2. Инструментальные методы: УЗИ ночек, мочевого пузыря (в том числе ТРУЗИ, ТВУЗИ), предстательной железы, неченн, регионарных лимфоузлов; обзорная и экскреторная урографня, нисходящая цистография; рентгенография лёгких; МРТ (или KT) органов малого таза (выполнена у 20% пациентов); цистоскопия.

3. Цитологическое исследование мазков-отпечагков, полученных в ходе цистоскопии; морфологическое исследование бионсийного материала.

Для оценки информативности цитологического исследования было проведено цитологическое исследование осадка мочи у 31 больного с поверхностным (15) и мышечно-инвазивным (16) РМП и у 12 больных с хроническим циститом.

Для проведения цитологического исследования осадка мочи брали утреннюю порцию мочи, которую срочно доставляли в цитологическую лабораторию ири клинической больнице №3 (заведующая к.м.н., врач высшей категории O.A. Жмылёва). Приготовленные по стандартной методике из осадка мочи мазки окрашивались азур-эозином по методике Романовского-Гимзы.

Специальные лабораторные методы обследования включали в себя определение уровня молекулярно-биологических маркеров поверхностного РМП. Всем обследованным пациентам проведено исследование содержания онкомаркеров-цитокератинов 8, 18 ТРА, TPS, фактора роста эндотелия сосудов (ФРЭС), трансформирующего фактора роста опухоли альфа (ТФРа), основного фактора роста фибробластов (ФРФ) в сыворотке крови; антиангиогенного интерлейкина 12 (ИЛ12), факторов апоптоза Fas (клеточный рецептор апоптоза) и FasL (лиганд Fas) во взвези мононуклеаров в стабилизированной цитратом плазме крови; онкомаркера UBC (фрагменты цитокератинов 8 и 18) в моче.

Весь биоматериал (кровь, моча) собирали у больных до начала специфического для РМП лечения и инвазивного обследования.

Для сбора, транспортировки крови и получения сыворотки и взвеси мононуклеаров (моноциты и лимфоциты) в плазме крови использовались пробирки Vacutainer с соответствующим наполнителем. Концентрация мононуклеаров полученной взвеси определялось на гематологическом анализаторе Hemolux 19.

Исследование уровня молекулярных маркеров проводилось методом твердофазного иммуноферментного анализа. Использовались наборы реакгивов «UBC II ELISA» фирмы IDL Biotech АВ (Швеция), «ТРАсук EI.ISA» фирмы IDL Biotech АВ (Швеция), «TPS ELISA» фирмы JDL Biotech АВ (Швеция) для определения содержания онкомаркеров UBC, ТРА, TPS соответственно; «Human VEGF» фирмы Biosource (Бельгия), «Human FGF basic» фирмы Biosource (Бельгия), «Human TGF-a» фирмы R&D Systems (США) для определения уровня ФРЭС, ФРФ, ТФРа соответственно; «Human IL-12 +р40» фирмы Biosource (Бельгия), «Human sAPO-1/Fas» фирмы Bender MedSystems (Австрия), «Human sFas Ligand» фирмы Bender MedSystems (Австрия), для определения ИЛ12, Fas, FasL соответственно.

Производился перерасчёт содержания ИЛ 12, Fas, FasL в 1мл на количество мононуклеаров в данном объёме взвеси, и результат выражался в пикограммах (ИЛ 12, Fas) и нанограммах (FasL) на миллион мононуклеаров (пг/10б).

В ходе иммуноферментного анализа использовали оборудование (ридер, вошер) фирмы Stat Fax (США).

.Для математического и статистического анализов полученных результатов использовали пакеты компьютерных программ Statistica v6.0 (StatSoft Inc.), SPSS 13.0 for Windows (SPSS Inc.), Microsoft Office Excel 2007.

На первом этапе работы закономерности изменения содержания молекулярных маркеров в биоматериале исследовали методами описательной статистики (непараметрическая статистика с расчётом медианы, квартильного размаха, уровня достоверности различия между группами обследованных по критерию Манна-Уитни).

Эффективность диагностики поверхностного РМП по анализу спектра чувствительности и специфичности в диапазоне исследованных значений оценивали с помощью построения характеристической кривой (ROC-анализ).

Диагностические уровни маркеров определялись, исходя из максимальной суммы чувствительности и специфичности; диапазоны «серых зон» включали интервалы от 80% чувствительности до 80% специфичности.

Результаты исследования и их обсуждение

Анализ уровней онкомаркеров-цитокератинов показал статистически достоверный (р<0,05) рост содержания ТРА, TPS в сыворотке крови и UBC в моче больных поверхностным РМП по сравнению с больными доброкачественными заболеваниями и контрольной группой (рис. 1, 2, 3). Цитокератины - белки клеточных микрофиламентов, которые при злокачественном росте в повышенных количествах выделяются из опухолевых клеток в окружающую их среду. Это дает основание считать, что вышеуказанные белки могут быть рассмотрены в качестве перспективных маркеров РМП.

Рис. 1. Содержание ТРА в сыворотке крови у больных поверхностным РМП.

Рис. 2. Содержание TPS в сыворотке крови у больных поверхностным РМП.

СП

Рис. 3. Содержание UBC в моче у больных поверхностным РМП.

<р<иос>ный РМП

Рис. 5. Содержание Fas во взвеси мононуклеаров крови у больных поверхностным РМП.

Рис. 4. Содержание ФРЭС в сыворотке крови у больных поверхностным РМП.

IZ5Z1

Рис. 6. Содержание FasL во взвеси мононуклеаров крови у больных поверхностным РМП.

Анализ изменения уровней проангиогенных факторов (ФРЭС, ТФРа, ФРФ) в сыворотке крови и антиангиогенного цитокина ИЛ12 во взвеси мононуклеаров подтвердил, что у больных поверхностным РМП рост всех перечисленных молекулярных маркеров связан с активацией ангиогенеза (рис. 4).

При этом у больных поверхностным РМП увеличение интенсивности васкуляризации опухолевой ткани сопровождается прежде всего нарастанием содержания в сыворотке крови ФРЭС, являющегося одним из основных факторов ангиогенеза. По результатам исследования можно считать, что ФРЭС, по-видимому, представляет собой ключевой медиатор опухолевого ангиогенеза при раке уротелия, стимулирует рост новых кровеносных сосудов из близлежащих капилляров, обеспечивая трофику опухоли и её метастазирование.

В качестве показателей интенсивности апоптоза исследовано содержание во взвеси мононуклеаров крови рецептора апоптоза Fas и его лиганда FasL, относящегося к семейству фактора некроза опухолей. Анализ полученных результатов показал, что наибольшие значения содержания Fas и FasL отмечаются в группе больных поверхностным РМП. Однако уровень факторов апоптоза увеличивается как в группе с циститом, так и в группе больных с поверхностным РМП (рис. 5, 6). По данным статистического анализа, выраженного различия по уровню Fas между группой больных циститом и поверхностным РМП не найдено, но обнаружено значимое увеличение содержания FasL (р<0,05) между данными группами. Можно считать, что у больных РМП иммуносупрессия является следствием активации апоптоза лимфоцитов и способствует росту и метастазированию опухолевых клеток. Эта апоптоз-опосредованная иммуносупрессия, по-видимому, является одним из прогностических факторов и свидетельствует о неблагоприятном прогнозе течения заболевания.

Следующим этапом работы была оценка диагностической ценности молекулярных маркеров методом ROC-анализа. ROC-анализ представляет собой построение характеристических кривых. Ось Y отражает чувствительность показателя, ось X - (100% минус специфичность). Основная характеристика ROC-кривой - это площадь под ней (AUC). Диагностический маркер рассматривается как эффективный при нижней границе доверительного интервала площади >0,5, значения достоверности р<0,05. ROC-анализ может дать представление об интегральной диагностической эффективности, позволяя отобрать наиболее эффективные маркеры и отсеять малоинформативные; кроме того, на ROC-кривой можно выбрать точку с уровнем маркера, соответствующим максимальной чувствительности и специфичности.

ROC-анализ диагностической ценности цитокератинов показал, что все три исследованных цитокератина эффективны в качестве маркеров поверхностного РМП (рис. 7; табл. 1).

0% 20°/i ¿0% 60% 80% 100%

1UU% M-tHyc специфичность

Рис.7. Чувствительность и специфичность цитокератинов для диагностики поверхностного РМП относительно контрольной группы.

Таблица 1. Характеристики 1ЮС-кривых цитокератинов для диагностики поверхностного РМП относительно контрольной группы

Показатель Площадь (AUC) Р 95% дов. интервал

ТРА 0,924±0,036 0,001 0,854-0,995

TPS 0,962±0,022 0,001 0,919-1,005

иве 0,949±0,038 0,001 0,875-1,023

При сравнении методом ROC-анализа уровней цитокератинов при поверхностном РМП и у больных с доброкачественными заболеваниями мочевого пузыря выявлено, что определение содержания TPA, TPS в сыворотке крови и UBC в моче может помочь провести дифференциальную диагностику (рис. 8, табл.2).

Рис. 8. Чувствительность и специфичность цитокератинов для диагностики поверхностного РМП относительно группы сравнения.

Таблица 2. Характеристики ROC-кривых цитокератинов для диагностики

поверхностного РМП относительно группы сравнения

Показатель Площадь (AUC) Р 95% дов. интервал

ТРА 0,767±0,061 0,001 0,647-0,887

TPS 0,8±0,059 0,001 0,684-0,916

иве 0,704±0,071 0,011 0,565-0,842

Поверхностные формы РМП обладают наиболее благоприятным прогнозом и предоставляют большой выбор возможностей органосохраняющего лечения. Выявлению РМП на ранних стадиях могут помочь маркеры ТРА, TPS и UBC, уровень которых нарастает в сыворотке крови и моче на ранних стадиях роста.

Анализ диагностической эффективности факторов ангиогенеза показал, что достоверно выявить активацию ангиогенеза у больных поверхностным РМП способны из исследованных маркеров только ФРЭС и ИЛ 12 (рис. 9, табл. 3). Можно предположить, что экспрессия ФРФ и ТФРа увеличивается на более поздних стадиях заболевания, но при поверхностном РМП эти факторы роста не показали себя в качестве эффективных диагностических маркеров.

-ФРЭС -ТФРа

- ФРФ

- ИЛ12 -х-у

0% 20% 40% 60% 80 'А 100% 100% минус специфичность

Рис.9. Чувствительность и специфичность факторов роста и ангиогенеза для диагностики поверхностного РМП относительно контрольной группы.

Таблица 3. Характеристики ЯОС-кривых факторов роста и ангиогенеза для диагностики поверхностного РМП относительно контрольной группы.

Показатель Площадь (AUC) Р 95% Дов. интервал

ФРЭС 0,845±0,049 0,001 0,749-0,941

ТФРа 0,676±0,066 0,040 0,546-0,807

ФРФ 0,522±0,079 0,232 0,422-0,766

ИЛ12 0,929±0,032 0,001 0,866-0,993

При сравнении концентраций факторов ангиогенеза поверхностного РМП и группы больных с доброкачественными заболеваниями не выявлено диагностически-эффективных маркеров, которые позволили бы провести дифференциальную диагностику между данными заболеваниями (рис. 10, табл. 4). Наиболее близкими показателями к эффективному маркеру обладает главный фактор ангиогенеза - ФРЭС (АиС=0,639±0,074, р=0,086). Полученные результаты подтверждают тот факт, что ангиогенез не является специфическим для злокачественного роста процессом, и уровень факторов ангиогенеза, при раннем раке РМП сравним с таковым при воспалительных процессах.

0% 20% 40УС 60% £0% 100% 100%м/шус спедифичьссть

Рис.10. Чувствительность и специфичность факторов роста и ангиогенеза для диагностики поверхностного РМП относительно группы сравнения.

Таблица 4. Характеристики ЯОС-кривых факторов роста и ангиогенеза для диагностики поверхностного РМП относительно контрольной группы._

Показатель Площадь (AUC) Р 95% дов. интервал

ФРЭС 0,639±0,074 0,086 0,493-0,785

ТФРа 0,617±0,070 0,124 0,480-0,754

ФРФ 0,588±0,087 0,280 0,417-0,759

ИЛ12 0,618±0,086 0,142 0,449-0,788

Оба фактора апоптоза обладают приблизительно одинаковыми параметрами диагностической значимости в отношении выявления поверхностного РМП как среди здорового контингента, так и среди лиц, больных воспалительными заболеваниями мочевыводящего тракта. Несколько лучшими диагностическими показателями выявления РМП среди относительно здоровых лиц обладает Fas (рис.11, табл.5), а при выявлении РМП среди больных с циститами более диагностически-эффективным является FasL (рис.12, табл. 6).

Полученные данные говорят, что исследование содержания Раз-рецептора и Баз-лиганда во взвеси мононуклеаров не позволяет провести дифференциальную диагностику поверхностного РМП от доброкачественных заболеваний. Наиболее близкими к диагностически-эффективному маркеру являются результаты ЛОС-анализа РавЬ (АиС=0,63 5±0,069, р=0,054).

Рис.11. Чувствительность и специфичность факторов апоптоза для диагностики поверхностного РМП относительно контрольной группы.

Таблица 5. Характеристики ЯОС-кривых факторов роста и

ангиогенеза для диагностики поверхностного РМП относительно контрольной группы___

Показатель Площадь (А11С) Р 95% дов. интервал

Рае 0,907±0,040 0,001 0,828-0,986

РаэЬ 0,890±0,042 0,001 0,807-0,973

Рис.12. Чувствительность и специфичность факторов апоптоза для диагностики поверхностного РМП относительно группы сравнения.

Таблица 6. Характеристики ЯОС-кривых факторов апоптоза для диагностики поверхностного РМП относительно группы сравнения

Показатель Площадь (AUC) Р 95% дов. интервал

Fas 0,639±0,095 0,220 0,452-0,826

FasL 0,635±0,069 0,054 0,499-0,770

Таким образом, внутри каждой из групп исследованных показателей выбраны наиболее диагностически эффективные маркеры поверхностного РМП. Все три цитокератина, по данным ROC - анализа, являются диагностически-значимыми, в том числе для дифференциальной диагностики поверхностного РМП от доброкачественных заболеваний. Наиболее активный фактор ангиогенеза ФРЭС и комплекс факторов апоптоза - Fas-рецептор и FasL-лиганд в случае поверхностного РМП имеют, по-видимому, прогностическое значение. Кроме того, исходя из полученных данных, исключение у пациента воспалительных заболеваний мочевыводящего тракта существенно повышает эффективность использования молекулярных маркеров.

Построение характеристической кривой позволяет выбрать диагностический порог (точку отсечения, cut off), который соответствует максимально возможной чувствительности и специфичности.

В таблице 7 приведены выбранные диагностические уровни молекулярных маркеров с указанием соответствующих им показателей диагностической значимости (чувствительность и специфичность в отношении групп контроля и сравнения).

Таблица 7. Диагностический порог, чувствительность специфичность молекулярных маркеров поверхностного РМП._

Название показателя

Величина cut off

Чувствительность

Специфичность*

Онкомаркеры-цитокератины

TPS

Выше 55,98 Ед/л 85,2%

47,4 - 93,8

ТРА

Выше 1,21 нг/мл

72,3%

73,9 - 85%

UBC

Выше 21,1 мкг/мл

86,7%

48,7-91,3%

Фактор ангиогенеза

ФРЭС

Выше 203,72 пг/мл 73,1%

62,5 - 92%

Факторы апоптоза

Fas

Выше 346,7 пг/10

50%

66,7-96%

FasL

Выше 0,08 пг/10

75%

56-92%

* минимальная специфичность - при выявлении РМП среди больных циститами; максимальная - при выявлении РМП среди контингента практически здоровых лиц.

Следует обратить внимание на то, что диагностический порог выбирается в соответствии с наиболее актуальными клиническими требованиями. В данном случае за критерий выбора порога принят уровень маркера с максимальной суммой чувствительности и специфичности.

Все онкомаркеры, кроме идеальных, имеют диапазон концентраций, попадание в который не позволяет с достаточной степенью уверенности провести дифференциальную диагностику между доброкачественными и злокачественными заболеваниями, то есть так называемые «серые зоны» (как наиболее известный пример - маркер рака простаты ПСА).

Поскольку в ходе исследования выделены три онкомаркера, способные помочь в дифференциальной диагностике поверхностного РМП от доброкачественных заболеваний, целесообразно произвести расчёт «серых зон» для них. Результаты расчёта «серых зон представлены в табл. 8. Уровень онкомаркера до «серой зоны» с высокой степенью вероятности позволяет исключить диагноз поверхностного РМП. Внутри «серой зоны» - пограничный результат, требующий тщательной дифференциальной диагностики с целью исключить поверхностный РМП. За верхней границей зоны лежит область значений онкомаркеров с достаточно высокой вероятностью наличия РМП.

Таблица 8. «Серые зоны» онкомаркеров-цитокератинов

Онкомаркер Величина cut off с чувствительностью 80% «Серая зона» Величина cut off со специфичностью* 80%

TPS 61,5 Ед/л 61,5-82,6 Ед/л 82,6 Ед/л

ТРА 1,05 нг/мл 1,05-1,52 нг/мл 1,52 нг/мл

иве 22,55 мкг/мл 22,55-50,1мкг/мл 50,1 мкг/мл

Специфичность относительно доброкачественных заболеваний

Анализ литературных данных и результаты исследования диагностической значимости цитологического анализа осадка мочи показали, что чувствительность метода при поверхностном РМП составляет 6,7%. В 20% случаев поверхностного РМП цитологическая картина маскируется под воспалительный процесс (табл.9).

Таблица 9. Информативность цитологического метода исследования мочи при диагностике РМП___

Стадия РМП Поверхностный РМП Инвазивный РМП Всего РМП

Число исследований 15 16 31

Положительных на АК 1 4 5

Признаки воспаления 3 2 5

Чувствительность 6,7% 25% 16,1%

То есть, результаты цитологического исследования клеточного осадка мочи отличает низкая эффективность при дифференциальной диагностике РМП и воспалительных заболеваниях мочевого пузыря.

На основании проведённого исследования предложен алгоритм диагностики поверхностного РМП с использованием молекулярных маркеров. У пациента с подозрением на рак мочевого пузыря производится забор биоматериала для исследования уровня онкомаркеров ТРА и TPS в сыворотке, UBC в моче, цитологического исследования мочи. В случае, если

уровень онкомаркеров не превышает следующих величин: TPS - 61,5 Ед/л; ТРА - 1,05 нг/мл; UBC - 22,55 мкг/мл, с достаточной долей вероятности можно считать, что имеется доброкачественное заболевание мочевого пузыря. В случае, если результаты исследования содержания онкомаркеров в сыворотке и моче приходятся на так называемую «серую зону», требуются дополнительное обследование и динамическое исследование онкомаркеров. В случае превышения уровней онкомаркеров: TPS - 82,6 Ед/л; ТРА - 1,52 нг/мл; UBC - 50,1 мкг/мл, и/или обнаружения атипичных клеток в моче, с высокой долей вероятности констатируется диагноз РМП, проводится установление стадии с помощью инструментальных методов, морфологически подтверждается и онкоконсилиумом принимается решение о характере и объёме лечения. Превышение уровня ФРЭС 203,72 пг/мл, Fas 346,7 пг/106 и FasL 0,08 пг/106 может быть показанием к расширению объёма лечения (см. алгоритм).

Алгоритм диагностики поверхностного РМП

Гематурия, дизурия

выводы

1. У больных поверхностным РМП по сравнению с пациентами, страдающими хроническими циститами, выявлено увеличение содержания молекулярных маркеров опухолевого роста: в сыворотке крови - ТРА, TPS, ФРЭС, ТФРа, ФРФ; во взвеси мононуклеаров - ИЛ 12 и Fas, FasL; в моче -UBC.

2. Установлен пороговый уровень значимых молекулярно-биологических маркеров в диагностике поверхностного РМП: ТРА в сыворотке крови выше 1,52 нг/мл; TPS в сыворотке крови выше 82,6 Ед/л (чувствительность - 85,2%, специфичность - 47,4 - 93,8%); UBC в моче выше 50,1 мкг/мл (чувствительность - 86,7%, специфичность - 48,7 - 87,5%). Диапазоны уровней TPS 61,5 - 82,6 Ед/л, ТРА 1,05 - 1,52 нг/мл в сыворотке крови, UBC 22,55 - 50,1 мкг/мл в моче являются диагностической «серой зоной». Нижняя граница «серой зоны» обладает высоким потенциалом для скрининга поверхностного РМП (чувствительность - 80%).

3. Для факторов ангиогенеза, роста и апоптоза пороговый уровень в диагностике поверхностного РМП равен: ФРЭС в сыворотке крови выше 203,72 пг/мл (чувствительность - 73,1%, специфичность - 62,5 - 92%); Fas во взвеси мононуклеаров крови выше 346,7 пг/106 (чувствительность - 50%, специфичность - 66,7 - 96%); FasL во взвеси мононуклеаров крови выше 0,08 пг/106 (чувствительность - 75%, специфичность - 56 - 92%).

4. Выявленная высокая чувствительность исследования содержания в сыворотке крови и моче ТРА, TPS, UBC по отношению к пациентам с хроническими циститами позволяет рекомендовать данные молекулярные маркеры в дифференциальной диагностике при заболеваниях мочевого пузыря.

5. Исследование TPS, ТРА сыворотки крови и UBC мочи целесообразно включить в алгоритм диагностики на начальных этапах обследования больных поверхностным РМП; исследование ФРЭС сыворотки крови, Fas и FasL во взвеси мононуклеаров может быть рекомендовано при выборе тактики лечения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для ранней диагностики PMII целесообразно исследовать уровень UBC в моче, ТРА и TPS в сыворотке крови.

2. Для дифференциальной диагностики поверхностного РМП и воспалительных заболеваний мочевого пузыря рекомендуется учитывать уровни онкомаркеров: ТРА в сыворотке крови выше 1,52 нг/мл, TPS сыворотки крови выше 82,6 Ед/л и UBC мочи выше 50,1 мкг/мл.

3. При попадании уровня онкомаркеров в «серую зону» рекомендуется проводить уточняющую диагностику с целью подтверждения развития уротелиального рака. Предлагаемые «серые зоны» для онкомаркеров: TPS 61,5 - 82,6 Ед/л, ТРА 1,05 - 1,52 нг/мл, UBC 22,55 - 50,1 мкг/мл.

4. При выборе метода лечения больных с поверхностным раком мочевого пузыря целесообразно учитывать результаты исследования

содержания фактора роста эндотелия сосудов в сыворотке крови и факторов апоптоза Fas и FasL во взвеси мононуклеаров крови.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Цитокиновый профиль мононуклеаров плазмы крови как маркер стадии рака мочевого пузыря / I1.B. Глыбочко, А.Н. Понукалин, Н.Б. Захарова, Н.К. Шахпазян // Диагностика и лечение местно-распространенных и распространенных опухолей почек, мочевого пузыря, предстательной железы: материалы II конгресса Российского общества онкоурологов. - М., 2007. - С.76-77.

2. Значение изменений цитокинового состава мононуклеаров плазмы крови для оценки стадии рака мочевого пузыря / П.В. Глыбочко, А.Н. Понукалин, Н.Б. Захарова, Н.К. Шахпазян // Актуальные вопросы современной биохимии: материалы всероссийской научно-практической конференции биохимиков и специалистов по лабораторной медицине, посвященной 20-летию Кировской государственной медицинской академии. - Киров, 2007. - С.65-70.

3. Шахпазян, Н.К. Цитокиновый профиль мононуклеаров плазмы крови при раке мочевого пузыря / Н.К. Шахпазян, О.В. Слюзова // Молодежь и наука: итоги и перспективы: материалы научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием. - Саратов, 2007. -С.172-173.

4. Шахпазян, Н.К. Перспективы исследования онкоассоциированных маркеров прн раке мочевого пузыря / Н.К. Шахпазян // Молодые учёные -здравоохранению региона: материалы научно-практической конференции студентов и молодых ученых Саратовского государственного медицинского университета. - Саратов, 2008. - С.397-398.

5. Значение провоспалительного цитокинового профиля мононуклеаров крови в диагностике поверхностного и инвазивного рака мочевого пузыря (РМП) / П.В. Глыбочко, А.Н. Понукалин, Н.Б. Захарова, Н.К. Шахпазян // Российский иммунологический журнал. - Т.2 (11). - №2-3. - 2008. - С.307.

6. Цитокиновый профиль мононуклеаров и онкоассоциированные маркеры крови у больных на ранних стадиях рака мочевого пузыря / П.В. Глыбочко, А.Н. Понукалин, Н.Б. Захарова, Н.К. Шахпазян // Медицинский альманах (Спецвыпуск). - 2008. - С.124-125.

7. Диагностические панели молекулярных маркеров уротелиалыюго рака / П.В. Глыбочко, А.Н. Понукалин, Н.Б. Захарова, Н.К. Шахпазян // Клиническая лабораторная диагностика. - 2008. - №9. - С.36.

8. Значение маркеров опухолевого роста и ангиогенеза в диагностике рака мочевого пузыря / П.В. Глыбочко, А.Н. Понукалин, Н.Б. Захарова, Н.К. Шахапазян // Онкоурология. - 2009. - №2. - С.56-60.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АК - атипичные клетки

ИЛ 12 - интерлейкин 12 (1L-12)

KT - компьютерная томография

МП - мочевой пузырь

МРТ - магнитно-резонансная томография

PMÍI - рак мочевого пузыря

ТВУЗИ - трансвагинальное ультразвуковое исследование ТРУЗИ - трансректальное ультразвуковое исследование ТУР - трансуретральная резекция ТФРа - трансформирующий фактор роста альфа (TGF-a) ФРФ - основной фактор роста фибробластов (bFGF) ФРЭС - фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) AUC - (Area Under Curve) - площадь под ROC - кривой Fas - клеточный рецептор апоптоза (Fas/APO-1, CD-95) FasL - лиганд Fas - рецептора (растворимый Fas) ТРА - тканевой полипептидный антиген TPS - тканевой полипептидный антиген специфический UBC - (Urine Bladder Cytokeratin) мочевой маркер рака мочевого пузыря -цитокератин

Подписано в печать 26.03.10 Объём --1 псч. л.

_Тираж 100. Заказ № 572._

Отпечатано в типографии ООО «Правильный вывод», 410071, Саратов, ул. Шелковичная, 186. Тел.: 56-32-42, 60-07-07.

Оглавление диссертации Шахпазян, Николай Константинович :: 2010 :: Саратов

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Распространённость, структура заболеваемости раком мочевого пузыря. Проблемы лабораторной диагностики уротелиального рака.

1.2. Молекулярные маркеры рака мочевого пузыря. Онкомаркеры рака мочевого пузыря, применяемые в клинической практике.

1.3. Перспективные молекулярные маркеры рака мочевого пузыря.

1.4. Цитокератины как перспективные диагностические и прогностические маркеры рака мочевого пузыря.

1.5. Факторы ангиогенеза как перспективные диагностические и прогностические маркеры рака мочевого пузыря.

1.6. Факторы апоптоза как перспективные диагностические и прогностические маркеры рака мочевого пузыря.

Введение диссертации по теме "Клиническая лабораторная диагностика", Шахпазян, Николай Константинович, автореферат

Рак мочевого пузыря (РМП) - распространенная опухоль мочеполовой системы, заболеваемость которой растет с каждым годом. В структуре онкологических заболеваний населения России рак мочевого пузыря (РМП) занимает 8-е место среди мужчин и 18-е среди женщин, встречаясь примерно в 2-5% всех новообразований и занимая одно из лидирующих мест среди урологических опухолей вместе с раком почки и предстательной железы [9].

Клинические проявления РМП неспецифичны и могут соответствовать воспалительным заболеваниям мочеполовой системы, поэтому ведущая роль в диагностике РМП принадлежит специальным (инструментальным и лабораторным) методам исследования.

Как и при других видах онкологических заболеваний, определяющим фактором успешности лечения и выживания больных является стадия рака и наличие метастазов. Рак мочевого пузыря начинается с поверхностной опухоли, которая не вовлекает мышечный слой органа (TjS, Та, Т\ — поверхностный или мышечнонеинвазивный РМП). В дальнейшем опухоль прорастает в стенку мочевого пузыря и распространяется на мышечный слой мочевого пузыря. В этом случае рак мочевого пузыря становится инвазивным. Подход к лечению поверхностного и инвазивного рака мочевого пузыря различен. В ходе радикального лечения поверхностного рака, в отличие от мышечно-инвазивного, часто удаётся сохранить мочевой пузырь, обеспечив больным высокое качество жизни. Кроме того, выживаемость больных напрямую зависит от стадии заболевания, что показывает важность диагностики РМП на ранних стадиях [15; 26] .

Самым распространенным скрининговым методом для выявления рака мочевого пузыря является цитологическое исследование мочи. Этот метод прост, доступен для массового скрининга, специфичность метода достигает 95%. Однако цитология мочи - относительно малочувствительный и субъективный метод [17].

Современные достижения молекулярной генетики позволили разработать и предложить для определения в моче и крови десятки различных веществ, специфичных для рака мочевого пузыря. Ведется поиск чувствительного маркера, который бы позволил определить наличие РМП на ранних стадиях и оценить прогноз течения болезни. Кроме того, ведётся активный поиск дополнительных прогностических критериев, которые могли бы позволить выявлять больных с высоким и низким рисками опухолевой прогрессии и рецидивирования при раке мочевого пузыря. Некоторые из маркеров уже нашли свое клиническое применение. Например, предложены для диагностики РМП такие тесты, как ВТА (определение антигена опухоли мочевого пузыря в моче) и CYFRA 21-1 (определение фрагмента цитокератина 19 в моче или крови) [47; 101].

Кроме того, в последние годы найдены дополнительные прогностические факторы, позволяющие отличать опухоли мочевого пузыря с высоким риском прогрессии и рецидивирования от менее опасных новообразований, и новые схемы лечения заболевания.

К маркерам злокачественного роста при раке мочевого пузыря отнесены: опухолевые антигены, онкогены и продукты их экспрессии, регуляторы клеточного цикла, маркеры пролиферации и ангиогенеза, молекулы клеточной адгезии, протеазы внеклеточного матрикса и базальной мембраны, пептидные факторы роста и их рецепторы, маркеры апоптоза и др. [13; 22].

Для решения вопроса о диагностической значимости молекулярных маркеров рака мочевого пузыря в клинической практике наиболее целесообразным является изучение:

- степени патогномоничности изменения величины лабораторных показателей предлагаемых для диагностики поверхностной стадии рака мочевого пузыря применимо к дифференциации злокачественного процесса от неонкологических заболеваний мочевого пузыря;

- диагностической специфичности и чувствительности лабораторных тестов, предлагаемых для диагностики ранних стадий рака мочевого пузыря.

Несмотря на прогресс в поиске новых маркеров РМП, проблемы диагностической значимости перспективных маркеров рака мочевого пузыря, таких как факторы ангиогенеза, факторы роста, апоптоза, опухолевой пролиферации, до сих пор не решены и требуют дополнительных исследований в этой области. Разработка алгоритмов диагностики с использованием новых лабораторных показателей открывает перспективы в улучшении результатов лечения рака мочевого пузыря.

Цель работы:

Разработать комплекс лабораторных показателей для диагностики поверхностного рака мочевого пузыря.

Задачи работы:

1. Изучить характер изменений содержания в крови и моче онкоассоциированных маркеров, факторов роста, ангиогенеза, апоптоза у больных поверхностным РМП.

2. Провести сравнительный анализ изменения содержания в крови и моче онкоассоциированных маркеров, факторов роста, ангионенеза, апоптоза и результатов цитологического исследования у больных хроническими циститами и поверхностным РМП.

5. Установить диагностическое значение комплекса молекулярно-биологических маркеров для выявления начальных стадий РМП.

Научная новизна:

1. Выявлены особенности изменения в сыворотке крови (TPA, TPS, ФРЭС, ТФРа, ФРФ), в плазменной взвеси мононуклеаров (ИЛ-12, Fasрецептор и Fas-лиганд), в моче (UBC) комплекса молекулярно-биологических маркеров у больных с поверхностным РМП.

2. Установлена панель молекулярных маркеров для диагностики поверхностного РМП - в моче UBC, в сыворотке крови TP A, TPS, ФРЭС, во взвеси мононуклеаров крови Fas, FasL.

Практическая значимость:

3. Показано, что исследования цитокератинов ТРА, TPS в сыворотке крови, UBC в моче, факторов ангиогенеза и апоптоза ФРЭС в сыворотке крови, Fas, FasL в плазменной взвеси мононуклеаров может повысить эффективность диагностики ранних стадий РМП.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Одновременное определение уровня онкомаркеров-цитокератинов ТРА, TPS в сыворотке крови и UBC в моче позволяет осуществлять уточняющую и дифференциальную диагностику поверхностного РМП, и при сравнении с результатами цитологического исследования осадка мочи имеют более высокую диагностическую чувствительность.

2. Высокая эффективность при дифференциальной и уточняющей диагностике (специфичность 80%) поверхностного РМП для онкомаркеров-цитокератинов наблюдается при уровнях: ТРА в сыворотке крови выше 1,52 нг/мл; TPS в сыворотке крови выше 82,6 Ед/л (чувствительность 85,2% специфичность 47,4 - 93,8%); UBC в моче выше 50,1 мкг/мл (чувствительность 86,7% специфичность 48,7 — 87,5%). Диапазоны уровней TPS 61,5 - 82,6 Ед/л, ТРА 1,05 - 1,52 нг/мл в сыворотке крови, UBC 22,55 -50,1 мкг/мл в моче, являются диагностической «серой зоной». Нижняя граница «серой зоны» обладает высоким потенциалом для скрининга поверхностного РМП (чувствительность 80%).

3. Наибольшая диагностическая эффективность при поверхностном РМП для факторов ангиогенеза и апоптоза лимфоцитов выявлена при уровнях: ФРЭС в сыворотке крови - 203,72 пг/мл (чувствительность'73,1% специфичность 62,5 - 92%); Fas во взвеси мононуклеаров крови - 346,7 пг/106 (чувствительность 50% специфичность 66,7 - 96%); FasL во взвеси мононуклеаров крови - 0,08 пг/106 (чувствительность 75% специфичность 56 - 92%).

4. Исследование TPS, ТРА сыворотки крови и UBC мочи целесообразно включить в алгоритм диагностики на начальных этапах обследования больных поверхностным РМП, исследование ФРЭС сыворотки крови, Fas и FasL во взвеси мононуклеаров может быть рекомендовано при выборе тактики лечения.

Внедрение результатов:

Разработанные методы диагностики используются в клинике урологии Клинической больницы им. С.Р. Миротворцева СГМУ, материалы исследований используются в учебном процессе на кафедре клинической лабораторной диагностики ФПК ППС и кафедре онкологии ФПК ППС ГОУ ВПО «Саратовского ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава».

Степень личного вклада автора в результаты исследования.

Автор принимал непосредственное участие в лабораторном обследовании всех пациентов. Собран материал для проведения исследования факторов роста и ангиогенеза, факторов апоптоза и онкомаркеров. Автором было выполнено определение уровня исследуемых лабораторных показателей методом иммуноферментного анализа: Проанализированы клинико-лабораторное обследование пациентов, дополнительные исследования, выполненные с помощью ИФА, выполнена статистическая обработка полученных результатов.

Автор лично принимал участие в организации обследования больных поверхностным раком мочевого пузыря на базе клиники урологии Клинической больницы имени С.Р. Миротворцева СГМУ, лабораторные исследования с использованием метода иммуноферментного анализа освоены автором и выполнялись им лично в ЦНИЛ СГМУ. Кроме того, автором проведён анализ историй болезней и обработка полученных данных. Статистическая обработка материала проведена лично автором.

Апробация работы.

Основные результаты и положения диссертационной работы доложены и обсуждены:

1. На научно-практическом симпозиуме «Лабораторная медицина: инновационные технологии в аналитике, диагностике, образовании, организации» (Москва, 07-09 октября 2008 г.);

2. На межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых учёных с международным участием «Молодёжь и наука: итоги и перспективы» (Саратов, 21-23 ноября 2007 г.).

3. На межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых учёных с международным участием «Молодёжь и наука: итоги и перспективы» (Саратов, 19-21 ноября 2008 г.), по итогам доклада присуждён диплом II степени.

4. На расширенном заседании кафедр клинической лабораторной диагностики, урологии, патологической анатомии, ЦНИЛ ГОУ ВПО «Саратовского ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава», лаборатории физиологии и патофизиологии отдела лабораторной и функциональной диагностики ФГУ «СарНИИТО Росмедтехнологий».

Публикация результатов исследования.

По материалам диссертации опубликовано 8 работ, из них 3 в журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура работы.

Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста, состоит из введения, шести глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, в котором приведено 242 источника, в том числе 27 источников на русском языке и 215 - на иностранных языках. Работа иллюстрирована 26 таблицами, 22 рисунками 3 схемами.

Заключение диссертационного исследования на тему "Значение онкомаркеров, факторов роста, ангиогенеза и апоптоза в диагностике поверхностного рака мочевого пузыря"

ВЫВОДЫ

2. Установлен пороговый уровень значимых молекулярно-биологических маркеров в диагностике поверхностного РМП: ТРА в сыворотке крови выше 1,52 нг/мл (чувствительность 72,3%; специфичность 73,9 - 85%); TPS в сыворотке крови выше 82,6 Ед/л (чувствительность 85,2%; специфичность 47,4 - 93,8%); UBC в моче выше 50,1 мкг/мл (чувствительность 86,7%; специфичность 48,7 - 87,5%). Диапазоны уровней TPS 61,5 - 82,6 Ед/л, ТРА 1,05 - 1,52 нг/мл в сыворотке крови, UBC 22,55 -50,1 мкг/мл в моче, являются диагностической «серой зоной». Нижняя граница «серой зоны» обладает высоким потенциалом для скрининга поверхностного РМП (чувствительность 80%).

3. Для факторов ангиогенеза, роста и апоптоза пороговый уровень в диагностике поверхностного РМП равен: ФРЭС в сыворотке крови выше 203,72 пг/мл (чувствительность 73,1% специфичность 62,5 — 92%); Fas во взвеси мононуклеаров крови выше 346,7 пг/106 (чувствительность 50% специфичность 66,7 - 96%); FasL во взвеси мононуклеаров крови выше 0,08 пг/106 (чувствительность 75% специфичность 56 — 92%).

5. Исследование TPS, ТРА сыворотки крови и UBC мочи целесообразно включить в алгоритм диагностики на начальных этапах обследования больных поверхностным РМП, исследование ФРЭС сыворотки крови, Fas и FasL во взвеси мононуклеаров может быть рекомендовано при выборе тактики лечения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для ранней диагностики РМП целесообразно исследовать уровень UBC в моче, ТРА и TPS в сыворотке крови.

4. При выборе метода лечения больных с поверхностным раком мочевого пузыря целесообразно учитывать результаты исследования содержания фактора роста эндотелия сосудов в сыворотке крови и факторов апоптоза Fas и FasL во взвеси мононуклеаров крови.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Шахпазян, Николай Константинович

1. Аббасова С. Г. Растворимый Fas при онкологических заболеваниях : автореф. дис. . д-ра. биол. наук/ С. Г. Аббасова. М., 2009. - 51 с.

2. Абелев Г. И. Механизмы дифференцировки и опухолевый рост / Г. И. Абелев // Биохимия. 2000. - №1. - С. 127-138.

3. АльШукри С. X. Общие принципы лечения больных раком мочевого пузыря. Значение клинических, гистологических и биологических факторов прогноза для выбора метода лечения / С. X. АльШукри, И. А. Корнеев // Практическая Онкология. 2003. - Т. 4. - С. 204-213.

4. Аль-Шукри С. X. Опухоли мочеполовых органов : руководство для врачей / С. X. Аль-Шукри, В. Н. Ткачук. СПб. : Питер, 2000. - 309 с.

5. Андреева Ю. Ю. Классификация эпителиальных опухолей мочевого пузыря / Ю. Ю. Андреева, Л. Э. Завалишина, Г. А. Франк // Архив патологии. -2006. Т. 68, № 5. - С. 31.

6. Богова В. В. Клиническая значимость некоторых сывороточных и тканевых маркеров при раке молочной железы : автореф. дис. . канд. мед. наук / В. В. Богова. М., 2008. - 23 с.

7. Власов В. В. Эффективность диагностических исследований / В. В. Власов. М.: Медицина, 1988. - 246 с.

8. Давыдов М. И. Заболеваемость злокачественными новообразованиями и смертность от них в странах СНГ в 2005 г / М. И. Давыдов, Е. М. Аксель // Вестник Российской академии медицинских наук. 2007. - № 11. - С. 45-49.

9. Давыдов М. И. Статистика злокачественных новообразования в России и странах СНГ в 2005 году / М. И. Давыдов, Е. М. Аксель // Вестник российского онкологического научного центра имени Н. Н. Блохина РАМН. 2007. - № 2. - Т. 18. - Прил. 1. - С. 34-36.

10. Калинина Е. П. Регуляторные механизмы иммунного ответа при внебольничной пневмонии и хронической обструктивной болезнилегких у мужчин : автореф. дис. . докт. мед. наук. / Е. П. Калинина. -Владивосток, 2009. — 35 с.

11. Карякин О. Б. Органосохранная тактика при инвазивном раке мочевого пузыря: «за» и «против» / О. Б. Карякин // Практическая онкология.2003. -№ 4.-С. 252-255.

12. Клиническая онкоурология / сост.: Б. П. Матвеев и др.. М. : Вердана,2004.-718 с.

13. Корнеев И. А. Оценка факторов риска у больных раком мочевого пузыря : автореф. дис. . канд. мед. наук. / И. А. Корнеев. СПб., 1996. - 21 с.

14. Лопаткин Н. А. Диагностика и лечение рака мочевого пузыря / Н. А. Лопаткин, С. П. Даренков, И. В. Чернышев // Урология. 2004. - № 1. -С. 12-17.

15. Мартов А. П. Ранняя повторная цистоскопия и биопсия в диагностике рака мочевого пузыря / А. П. Мартов, Б. Л. Гущин, А. П. Гнатюк // Урология. 2004. - № 3. - С. 54-58.

16. Матвеев Б. П. Рак мочевого пузыря / Б. П. Матвеев, К. М. Фигурин, О. Б. Карякин. М. : Вердана, 2001. - 243 с.

17. Молекулярно-генетические маркеры как факторы прогноза течения поверхностного рака мочевого пузыря / А. Ю. Бабаян и др. // Онкоурология. 2009. - № 3. - С. 19-24.

18. Переверзев А.С. Опухоли мочевого пузыря / А. С. Переверзев, С. Б. Петров. Харьков : Факт, 2002. - 301 с.

19. Петрова А. С. Цитологическая диагностика опухолей и предопухолевых процессов / А. С. Петрова. М. : Медицина, 1985. - 304 с.

20. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных / О. Ю. Реброва. М.: Медиа сфера, 2002. - 312 с.

21. Сафват С. А. М. Клинико-морфологическая диагностика рака мочевого пузыря с использованием опухолевых маркеров : автореф. дис. . канд. мед. наук. / С. А. М. Сафват. Киев, 1991. - 22 с.

22. Степанова Е. В. Оценка Ангиогенеза Опухолей Человека / Е. В. Степанова, А. Ю. Барышников, М. Р. Личиницер // Успехи современной биологии. -2000. Т. 120, - № 6. - С. 599-604.

23. Цитологическое исследование в диагностике и мониторинге рака мочевого пузыря : методические рекомендации / сост.: М. И. Коган и др.. Ростов н/Д. : Изд-во Рост. Мед. Ун-та. 2002. - 40 с.

24. Чиссов В. И. Злокачественные новообразования в России в 2006 году (Заболеваемость и смертность) : статистический ежегодный сборник / В. И. Чиссов, В. В. Старинский, Г. В. Петрова. Москва: Изд-во ГУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН, 2008. - 228 с.

25. Шелепова В. М. Клиническое значение определения растворимого фрагмента цитокератина 19 Cyfra 21-1 / В. М. Шелепова // Лаборатория. - 2004. - №2. - С. 3 - 6.

26. A clinicopathological study of the expression of extracellular matrix components in urothelial carcinoma / E. Ioachim et al. // BJU International. 2005. - Vol. 95 (4). - P. 655-659.

27. A panel of angiogenic factors for early bladder cancer detection: enzyme immunoassay and Western blot / S. Eissa et al. // The Journal of Urology. -2009.-Vol. 181 (3).-P. 1353-1360.

28. A side by side comparison of cytology and biomarkers for bladder cancer detection / G. L. Schroeder et al. // The Journal of Urology. 2004. - Vol. 172 (3).-P. 1123-1126.

29. A six-nucleotide insertion-deletion polymorphism in the CASP8 promoter associated with risk and progression of bladder cancer / M. Wang et al. // Clin. Cancer Res. 2009. - Vol. 15 (7). - P. 2567-2572.

30. Ahirwar D. Interleukin-10 G-1082A and C-819T polymorphisms as possible molecular markers of urothelial bladder cancer / D. Ahirwar, A. Mandhani, R.D. Mittal // Arch. Med. Res. 2009. - Vol.40 (2). - P. 97-102.

31. Alonso A. Staining patterns of keratins in the human urinary tract / A. Alonso, U. Ikinger, J. Kartenbeck // Histol. Histopathol. 2009. - T. 24 (11). - P. 1425-1437.

32. Alteration of proliferation and apoptotic markers in normal and premalignant tissue associated with prostate cancer / V. Ananthanarayanan et al. // BMC Cancer. 2006. - Vol. 17. - P. 73.

33. Alteration of the vascular endothelial growth factor and angiopoietins-1 and -2 pathways in transitional cell carcinomas of the urinary bladder associated with tumor progression / T. Quentin et al. // Anticancer Res. — 2004. — V. 24 (5A). P. 2745-2756.

34. An endogenous inhibitor of angiogenesis derived from a transitional cell carcinoma: clipped beta2-glycoprotein-I / W. D. Beecken et al. // Ann. Surg. Oncol.-2006.-Vol. 13 (9).-P. 1241-1251.

35. Antiproliferative effects of mistletoe (Viscum album L.) extract in urinary bladder carcinoma cell lines / K. Urech et al. // Anticancer Res. 2006. -Vol. 26 (4B).-P. 3049-3055.

36. Antitumor effect of simultaneous transfer of interleukin-12 and interleukin-18 genes and its mechanism in a mouse bladder cancer model / S. Hikosaka et al. // Int. J. Urol. 2004. - Vol. 11 (8). - P. 647-652.

37. Apoptosis-inducing effects of curcumin derivatives in human bladder cancer cells / Q. S Tong et al.j // Anticancer Drugs. 2006. - Vol. 17 (3). - P. 279287.

38. Arima J. Expression of thymidine phosphorylase as an indicator of poor prognosis for patients with transitional cell carcinoma of the bladder / J. Arima // Cancer. 2000. - Vol. 88. - P. 1131-1138.

39. Ashkenasi A. Death Receptors: Signaling and Modulation / A. Ashkenasi, V.M. Dixit // Science. 1998. - Vol. 281. - P. 1305-1308.

40. Associations between selected biomarkers and prognosis in a population-based pancreatic cancer tissue microarray / M. Takikita et al. // Cancer Res. 2009. - Vol. 69 (7). - P. 2950-2955.

41. Bakkar A. A. FGFR3 and TP53 gene mutations define two distinct pathways in urothelial cell carcinoma of the bladder / A. A. Bakkar // Cancer Res. -2003.-Vol. 63.-P. 8108-8112

42. BCL-2, TP53 and BAX protein expression in superficial urothelial bladder carcinoma / R. Gonzalez-Campora et al. // Cancer Lett. 2007. - Vol. 250 (2).-P. 292-299.

43. Bergers G. Tumorigenesis and the angiogenic switch / G. Bergers, L. E. Benjamin //Nat. Rev. Cancer. 2003. - Vol. 3. - P. 401-410

44. Bemardini S. Serum levels of vascular endothelial growth factor as a prognostic factor in bladder cancer / S. Bernardini // J. Urol. 2001. - Vol. 166.-P. 1275-1279

45. Bian W. Combined assay of CYFRA21-1, telomerase and vascular endothelial growth factor in the detection of bladder transitional cell carcinoma / W. Bian, Z. Xu // Int. J. Urol. 2007. - Vol. 14 (2). - P. 108-111.

46. Bicknell R. Novel angiogenic signaling pathways and vascular targets / R. Bicknell, A. L. Hams // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2004. - Vol. 44. -P. 219-238

47. Biomarkers of apoptosis / Т. H. Ward et al. // Br. J. Cancer. 2008. - Vol. 99 (6).-P. 841-846.

48. Black P.С. Growth factors and receptors as prognostic markers in urothelial carcinoma / P. C. Black, C. P. Dinney // Current Urology Reports. 2008. -Vol. 9(1).-P. 55-61.

49. Bladder tumor markers: a review of the literature / A. Volpe et al. // The International Journal of Biological Markers. 2008. - Vol. 23 (4). - P. 249261.

50. Body mass index (BMI) and mutations of tumor suppressor gene p53 (TP53) in patients with urinary bladder cancer / Т. H. Ecke et al. // Urol. Oncol. -2008. Vol. 26 (5). - P. 470-473.

51. Boman H. Urine tissue-polypeptide-specific antigen (TPS) as a marker for bladder cancer / H. Boman, H. Hedelin, S. Holmang // Scand. J. Urol. Nephrol. 2001. - Vol. 35 (4). - P. 270-274.

52. Broders A. C. Epithelioma of genitourinary organs / A. C. Broders // Ann. Surg. 1922.-Vol. 75.-P. 574.

53. Brown F. M. Urine cytology. Is it still the gold standard for screening? / F. M. Brown// Urol. Clin. North. Am. 2000. - Vol. 27. - P 25-37.

54. Brown N.S. Thymidine phosphorylase, 2-deoxy-D-ribose and angiogenesis / N. S. Brown, R. Bicknell // Biochem. J. 1998. - Vol. 334 (1). - P. 1-8

55. Cancer procoagulant and cathepsin D activity in blood serum in patients with bladder cancer / S. D. Szajda et al. // Polsky Merkuriusz Lekarski. 2005. -Vol. 18 (108).-P. 651-653.

56. Cancer statistics, 2008 / A. Jemal et al. II CA Cancer J. Clin. 2008. - Vol. 58 (2).-P. 71-96.

57. Carmeliet P. Angiogenesis in cancer and other diseases / P. Carmeliet, R. K. Jain // Nature. 2000. - Vol. 407. - P. 249-257.

58. Cdx2, cytokeratin 20, thyroid transcription factor 1, and prostate-specific antigen expression in unusual subtypes of prostate cancer / K. R. Leite et al. // Ann. Diagn. Pathol. 2008. - Vol. 12 (4). - P. 260-266.

59. Chakraborty A. Granulocyte colony-stimulating receptor promotes betal-integrin-mediated adhesion and invasion of bladder cancer cells / A. Chakraborty, S. M. White, S. Guha // Urology. 2006. - Vol. 68 (1). - P. 208-213.

60. Challenges of using mass spectrometry as a bladder cancer biomarker discovery platform / E. Schiffer, H. Mischak, D. Theodorescu, A. Vlahou // World Journal of Urology. 2008. - Vol. 26 (1). - P. 67-74.

61. Charlesworth J.S. Mechanisms of disease: angiogenesis in urologic malignancies / J. S. Charlesworth, L. Harris // Nature Clinical Practice Urology-2006.-Vol.3.-P. 157-169.

62. Chronic arsenic exposure increases TGFalpha concentration in bladder urothelial cells of Mexican populations environmentally exposed to inorganic arsenic / O. L. Valenzuela et al. // Toxicol Appl Pharmacol. 2007. - Vol. 222 (3).-P. 264-270.

63. Clinical value of combined detection with urinary bladder cancer antigen, hyaluronic acid and cytokeratin 20 in diagnosis of bladder cancer / X. Y. Pu et al. // Ai Zheng. 2008. - Vol. 27 (9). - P. 970-973.

64. Clinical value of combined determination of serum and pleural effusion level of CEA,CYFRA21 -1, TPS in the diagnosis of lung cancer / F. Huang, X. L. Wang, L. Yang et al. // Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi. 2008. -Vol. 24 (4).-P. 370-372.

65. Comparative diagnostic value of urine cytology, UBC-ELISA, and fluorescence in situ hybridization for detection of transitional cell carcinoma of urinary bladder in routine clinical practice / M. May et al. // Urology. -2007. Vol. 70 (3). - P. 449-453.

66. Comparison of CD44 and cytokeratin 20 mRNA in voided urine samples as diagnostic tools for bladder cancer / S. Eissa et al. // Clin. Biochem. 2008. -Vol.41 (16-17).-P. 1335-1341.

67. Comparison of screening methods in the detection of bladder cancer / S. Ramakumar, J. Bhuiyan, J. A. Besse, S. Roberts // J. Urol. 1999. - Vol. 161 (2).-P. 388-394.

68. Contribution of cell cycle and DNA content study by flow cytometry in the prognosis of superficial bladder cancer: Tunisian experience / A. Bounemra-Benghanem et al. // Annales de Biologie Clinique (Paris). 2007. - Vol. 65 (1).-P. 41-49.

69. Cordon-Cardo C. Molecular alterations associated with bladder cancer initiation and progression / C. Cordon-Cardo // Scandinavian Journal of Urology and Nephrology. -2008. Vol. 218. - P. 154-165.

70. Crew J. P. Vascular endothelial growth factor is a predictor of relapse and stage progression in superficial bladder cancer / J. P. Crew // Cancer Res. -1997. Vol. 57. - P. 5281-5285

71. Crew J.P. Urinary vascular endothelial growth factor and its correlation with bladder cancer recurrence rates / J.P. Crew // J. Urol. 1999. - Vol. 161. - P. 799-804.

72. Croft M. The role of TNF superfamily members in T-cell function and diseases /М. Croft // Nat. Rev. Immunol. 2009. - Vol. 9 (4). - P. 271-285.

73. Current concepts in biomarker technology for bladder cancers / M. Burchardt et al. // Clin.Chem. 2000. - Vol. 46. - P. 595-605.

74. Dameron K.M. Control of angiogenesis in fibroblasts by p53 regulation of thrombospondin-1 / K.M. Dameron // Science. 1994. - Vol. 265. - P. 15821584.

75. Decreased expression of Bax-interacting factor-1 (Bif-1) in invasive urinary bladder and gallbladder cancers / S. Y. Kim et al. // Pathology. 2008. -Vol. 40 (6).-P. 553-557.

76. Detection of methylated apoptosis-associated genes in urine sediments of bladder cancer patients / M. G. Friedrich et al.// Clinical Cancer Research. -2004. Vol. 10 (22). - P. 7457-7465.

77. Dey P. Urinary markers of bladder carcinoma / P. Dey // Clin. Chim. Acta. -2004.-Vol. 340.-P. 57-65.

78. Diagnostic value of cytokeratin-18 as a tumor marker in bladder cancer / M. Ramazan Sekeroglu et al. // Clin. Biochem. 2002. - Vol. 35 (4). - P. 327331.

79. Discrimination between nontumor bladder tissue and tumor by Raman spectroscopy /B.W. de Jong et al. // Analytical Chemistry. 2006. - Vol. 78 (22).-P. 7761-7769.

80. Distinctive expression pattern of ErbB family receptors signifies an aggressive variant of bladder cancer / W. Kassouf, P. et al. // The Journal of Urology. -2008. Vol. 179 (1). - P. 353-358.

81. Downregulation of survivin is associated with reductions in TNF receptors' mRNA and protein and alterations in nuclear factor kappa В signaling in urothelial cancer cells / В. T. Takizawa et al. // Cancer Invest. 2007. -Vol. 25 (8).-P. 678-684.

82. Droller M. J. Current concepts of tumor markers in bladder cancer / M. J. Droller // Urol. Clin. North Am. 2002. - Vol. 29. - P. 229-234.

83. Durkan G.C. Alteration in urinary matrix metalloproteinase-9 to tissue inhibitor of metalloproteinase-1 ratio predicts recurrence in nonmuscleinvasive bladder cancer / G.C. Durkan // Clin. Cancer. Res. 2003. - Vol. 9. -P. 2576-2582.

84. Durr E. Direct proteomic mapping of the lung microvascular endothelial cell surface in vivo and in cell culture / Durr E. // Nat. Biotechnol. 2004. - Vol. 22.-P. 985-992

85. Early RB94-produced cytotoxicity in cancer cells is independent of caspase activation or 50 kb DNA fragmentation // J. Zhou et al. // Cancer Gene Ther. 2009. - Vol. 16 (1). - P. 13-19.

86. E-cadherin tissue expression and urinary soluble forms of E-cadherin in patients with bladder transitional cell carcinoma / B. Shi et al. // Urologia Internationalis. 2008. - Vol. 81 (3). - P. 320-324.

87. Ecke Т. H. Focus on urinary bladder cancer markers: a review / Т.Н. Ecke // Minerva Urol. Nefrol. 2008. - Vol. 60 (4). - P. 237-246.

88. Ehdaie B. Predicting tumor outcomes in urothelial bladder carcinoma: turning pathways into clinical biomarkers of prognosis /В. Ehdaie, D. Theodorescu // Expert Review of Anticancer Therapy. 2008. - Vol. 8 (7). - P. 1103-1110.

89. Elfiky A. A. Targeting angiogenesis in bladder cancer / A. A. Elfiky, J. E. Rosenberg // Current Oncology Reports. 2009. - Vol. 11 (3). - P. 244-249.

90. El-Salahy E. M. Evaluation of cytokeratin-19 & cytokeratin-20 and interleukin-6 in Egyptian bladder cancer patients / E. M. El-Salahy // Clin. Biochem. 2002. - Vol. 35 (8). - P. 607-613.

91. Erythrocyte and platelet phospholipid fatty acids as markers of advanced non-small cell lung cancer: comparison with serum levels of sialic acid, TPS and Cyfra 21-1 / J. de Castro et al. // Cancer Invest. 2008. - Vol. 26 (4). - P. 407-418.

92. Evaluation of cytotoxic effects induced by bcl-2 and bcl-xL antisense-oligodeoxynucleotides in normal urothelium and transitional cell carcinoma / U. Gabriel et al. // Oncol. Rep. 2008. - Vol. 20 (6). - P. 1419-1423.

93. Evaluation of hypoxia-mediated growth factors in a novel bladder cancer animal model / G. Fechner et al. // Anticancer Res. 2007. - Vol. 27 (6B). -P. 4225-4231.

94. Evaluation of p21WAFl/CIPl and cyclin D1 expression in the progression of superficial bladder cancer / T. Liukkonen et al. // Finbladder Group Urol. Res. 2000. - Vol. 28. - P. 285-292.

95. Evaluation of the Bard BTA-test in the diagnosis of upper urinary tract tumours / M. Jovanovic, J. Hadzi-Djokic, Z. Dzamic, M. Acimovic // Acta Chirurgica Iugoslavica. 2007. - Vol. 54 (4). - P. 19-24.

96. Evaluation of urine CYFRA 21-1 for the detection of primary and recurrent bladder carcinoma / B. Nisman et al. // Cancer. 2002. - Vol. 94 (11). - P. 2914-2922.

97. Evaluation of urine tumor-associated trypsin inhibitor, CYFRA 21-1, and urinary bladder cancer antigen for detection of high-grade bladder carcinoma. I. Gkialas et al. // Urology. 2008. - Vol. 72 (5). - P. 1159-1163.

98. Evans C. P. Identification of molecular targets in urologic oncology / C. P. Evans // World J. Urol. 2009. - Vol. 27 (1). - P. 3-8.

99. Expression of angiogenesis inhibitors in human bladder cancer may explain rapid metastatic progression after radical cystectomy / W. D. Beecken, T. Engl, D Jonas, R. A. Blaheta // Int. J. Mol. Med. 2009. - Vol. 23 (2). - P. 261-266.

100. Expression of angiogenesis-related genes regulates different steps in the process of tumor growth and metastasis in human urothelial cell carcinoma of the urinary bladder /М. Chikazawa et al. // Pathobiology. 2008. - Vol. 75 (6).-P. 335-345.

101. Expression of cathepsin D in bladder carcinoma: correlation with pathological features and serum cystatin С levels / C. Tokyol et al. // Tumori. 2006. -Vol. 92 (3).-P. 230-235.

102. Expression of CK20 mRNA in the peripheral blood around postoperative chemotherapy in patients with gastric cancer and its clinical significance / J. L. Qiao et al. // Zhonghua Wei Chang Wai Ke Za Zhi. 2009. - Vol. 12 (1). -P. 32-35.

103. Expression of cytokeratin 20 in urine cytology smears: a potential marker for the detection of urothelial carcinoma / A. Bhatia et al. // Cytopathology. -2007.-Vol. 18 (2).-P. 84-86.

104. Expression of the alpha6 beta4 integrin provides prognostic information in bladder cancer / H. B. Grossman, C. Lee, J. Bromberg, M. Liebert // Oncol. Rep. 2000. - Vol. 7. - P. 13-16.

105. Expression of vascular endothelial growth inhibitor (VEGI) in human urothelial cancer of the bladder and its effects on the adhesion and migration of bladder cancer cells in vitro / N. Zhang et al. // Anticancer Res. 2010. — Т. l.-P. 87-95.

106. False-positive results of the NMP22 test due to hematuria / N. Atsu et al. // J.Urol. 2002. - Vol. 167. - P. 555-558.

107. Folberg R. Vasculogenic mimicry / R. Folberg, A. J. Maniotis // APMIS. -2004. Vol. 112. - P. 508-525.

108. Folkman J. Endogenous angiogenesis inhibitors / J. Folkman // APMIS. -2004. Vol. 112. - P. 496-507

109. Four tumour markers for urinary bladder cancer—tissue polypeptide antigen (TPA), HER-2/neu (ERB B2), urokinase-type plasminogen activator receptor (uPAR) and TP53 mutation / Т. H. Ecke et al. // Anticancer Res. 2005. -Vol. 25 (IB).-P. 635-641.

110. Frixione E. Recurring views on the structure and function of the cytoskeleton: a 300-year epic / E. Frixione // Cell motility and the cytoskeleton. 2000. -Vol. 46 (2).-P. 73-94.

111. Grade-dependent effects on cell cycle progression and apoptosis in response to doxorubicin in human bladder cancer cell lines / D. J. Stravopodis et al. // Int. J. Oncol. 2009. - Vol. 34 (1). - P. 137-160.

112. Guan K.P. Serum levels of endostatin and matrix metalloproteinase-9 associated with high stage and grade primary transitional cell carcinoma of the bladder. / K.P. Guan // Urology 2003. - Vol. 61. - P. 719-723.

113. Harris A. L. Hypoxia a key regulatory factor in tumour growth / A. L. Harris // Nat. Rev. Cancer. - 2002. - Vol. 2. - P. 38^17.

114. Immunohistochemical positive stained p53 protein in bladder transitional cell carcinoma / M. Halimi, A. Salehi, H. Baybordi, N. Nezami // Indian J. Pathol. Microbiol. 2009. - Vol. 52 (2).-P. 155-158.

115. In vivo upregulation of CD95 and CD95L causes synergistic inhibition of angiogenesis by TSP1 peptide and metronomic doxorubicin treatment / A. J. Quesada et al. // Cell Death Differ. 2005. - Vol. 12 (6). - P. 649-658.

116. Inactivation of p53 and Pten promotes invasive bladder cancer / A. M. Puzio-Kuter et al. // Genes Dev. 2009. - Vol. 23 (6). - P. 675-680.

117. Inoue K. The prognostic value of angiogenesis factor expression for predicting recurrence and metastasis of bladder cancer after neoadjuvant chemotherapy and radical cystectomy / K. Inoue // Clin. Cancer Res. 2000. -Vol. 6. -P. 4866-4873.

118. Intravesical interleukin-12 gene therapy in an orthotopic bladder cancer model /М. Horinaga et al. // Urology. 2005. - Vol. 66 (2). - P. 461-466.

119. Karashima Т. Nuclear factor-kappaB mediates angiogenesis and metastasis of human bladder cancer through the regulation of interleukin-8 / T. Karashima // Clin. Cancer Res. 2003. - Vol. 9. - P. 2786-2797.

120. Kausch I. Molecular aspects of bladder cancer II — molecular diagnosis of bladder cancer / I. Kausch, A. Bohle // Europ. Urol. 2001. - Vol. 17. - P. 152.

121. Khwaja F. Inhibition of cell-cycle effectors of proliferation in bladder tumor epithelial cells by the p75NTR tumor suppressor / F. Khwaja, D. Djakiew // Mol. Carcinog. -2003. Vol. 36 (3). - P. 153-160.

122. Konety B. R. Urine based markers of urological malignancy / B. R. Konety, R. H. Getzenberg//J.Urol.-2001.-Vol. 165.-P. 600-611.

123. Konety B. Urothelial bladder cancer: biomarkers for detection and screening / B. Konety, Y. Lotan // BJU International. 2008. - Vol. 102 (9 Pt B). - P. 1234-1241.

124. Large-scale analysis of cell cycle regulators in urothelial bladder cancer identifies pl6 and p27 as potentially useful prognostic markers / A. Brunner et al. // Pathobiology. 2008. - Vol. 75 (1). - P. 25-33.

125. Li J. Caspases in apoptosis and beyond / J. Li, J. Yuan // Oncogene. 2008. -Vol. 27 (48).-P. 6194-6206.

126. Lipponen P.K. Nucleolar organiser regions (AgNORs) as predictors in transitional cell bladder cancer / P. K. Lipponen, M. J. Eskelinen, S. Nordling // Brit. J. Cancer. 1991. - Vol. 64 (6). - P. 1139-1144.

127. Lorenzo Gomez M.F. El papel de los marcadores tumorales en la consulta de urologia para el screening, diagnostico у seguimento del cancer de vejiga / M. F. Lorenzo Gomez // Actas Urol. Esp. 2003. - Vol. 27. - P. 110-116.

128. Loskog A. Dendritic cells engineered to express CD40L continuously produce IL12 and resist negative signals from Trl/Th3 dominated tumors / A. Loskog, C. Ninalga, Т. H. Totterman // Cancer Immunol Immunother. 2006. - Vol. 55 (5).-P. 588-597.

129. Loss of p21Wafl expression is a strong predictor of reduced survival inprimary superficial bladder cancers / M. Migaldi et al. // Clin. Cancer Res. -2000.-Vol. 6.-P. 3131-3138.

130. Low utility of CYFRA 21-1 serum levels for diagnosis and follow-up in bladder cancer patients / D. Fatela-Cantillo et al. // Journal of Clinical Laboratory Analisis. 2005. - Vol. 19 (4). - P. 167-171.

131. Mady E. A. Cytokeratins as serum markers in egyptian bladder cancer. A comparison of CYFRA 21-1, TP A and TPS / E. A. Mady // Int. J. Biol. Markers.-2001.-Vol. 16 (2).-P. 130-135.

132. Maeda K. Angiogenin expression in superficial bladder cancer / K. Maeda // Hinyokika Kiyo. 2001. - Vol. 47. - P. 547-552.

133. Methylation of tumour suppressor genes APAF-1 and DAPK-1 and in vitro effects of demethylating agents in bladder and kidney cancer / F. Christoph et al. //Br. J. Cancer. 2006. - Vol. 95 (12).-P. 1701-1707.

134. Methylation patterns of Rbl and Casp-8 promoters and their impact on their expression in bladder cancer / K. Malekzadeh et al. // Cancer Investigation. 2009. - Vol. 27 (1). - P. 70-80.

135. Molecular genetics of bladder cancer: targets for diagnosis and therapy / R. Baffa et al. // Journal of Experimental and Clinical Cancer Reserch. 2006. -Vol. 25 (2).-P. 145-160.

136. Molecular profiling of bladder cancer: involvement of the TGF-beta pathway in bladder cancer progression / Т. T. Hung et al. // Cancer Letters. 2008. -Vol. 265 (1).-P. 27-38.

137. Multitarget siRNA inhibition of antiapoptotic genes (XIAP, BCL2, BCL-X(L)) in bladder cancer cells / D. Kunze et al. // Anticancer Res. 2008. -Vol. 28 (4B). - P. 2259-2263.

138. Muscle-invasive urothelial carcinoma of the bladder. Detection and topography of micrometastases in lymph nodes / M. Autenrieth et al. // Urologe A. 2008. - Vol. 47 (9). - P. 1157-1161.

139. Neal D. E. The epidermal growth factor receptor and the prognosis of bladder cancer /D.E.Neal// Cancer. 1990. -Vol. 65.-P. 1619-1625.

140. Nishiyama H. p53 and chemosensitivity in bladder cancer / H. Nishiyama, J. Watanabe, O. Ogawa // Int. J. Clin. Oncol. 2008. - Vol.13 (4). - P. 282-286.

141. No inhibition of urinary bladder carcinogenesis in rats with intravesical instillation of alpha-galactosylceramide /М. Mitsuhashi et al. // Asian Рас. J. Cancer Prev. 2003. - Vol. 4(1).- P. 45-50.

142. Ohyama C. Glycosylation in bladder cancer / C. Ohyama // International Journal of Clinical Oncology. 2008. - Vol. 13 (4). - P. 308-313.

143. Overexpression of p27kip 1 in urinary bladder urothelial carcinoma / T. Y. Fu, M. S. Tu, H. H. Tseng, J. S. Wang // International Journal of Urology. 2007. -Vol. 14 (12).-P. 1084-1087.

144. P53 as a prognostic marker for bladder cancer: a meta-analysis and review / N. Malats et al. // Lancet Oncol. 2005. - Vol. 6. - P. 678-686.

145. P53 expression predicts progression and poor survival in T1 bladder tumors / J. Llopis et al. // Europ. Urol. 2000. - Vol. 37. - P. 644-653.

146. Pre and postoperative quantitative detection of fragments of cytokeratins 8 and 18 (UBC IRMA) as markers of early recurrence of superficial bladder tumor /М. Gacci et al. // Arch. Ital. Urol. Androl. 2006. - Vol. 78 (1). - P. 5-10.

147. Prediction of breast cancer and lymph node metastatic status with tumour markers using logistic regression models / H. L. Hwa et al. // J. Eval. Clin. Pract. 2008. - Vol. 14 (2). - P. 275-280.

148. Proapoptotic genes В AX and CD40L are predictors of survival in transitional cell carcinoma of the bladder / S. A. Hussain et al. // Br. J. Cancer. 2003. -Vol. 88 (4).-P. 586-592.

149. Prognostic impact of FAS/CD95/APO-1 in urothelial cancers: decreased expression of Fas is associated with disease progression / K. Yamana et al. // Br. J. Cancer.-2005. Vol. 93 (5). - P. 544-551.

150. Prognostic relevance of methylation markers' in patients with non-muscle invasive bladder carcinoma / M. G. Friedrich et al. // Eur. J. Cancer. 2005. -Vol. 41 (17). - P. 2769-2778.

151. Prognostic significance of a combination of soluble Fas and soluble Fas ligand in the serum of patients with Та bladder cancer / Y. Mizutani et al. // Cancer Biother.Radiopharm. 2002. - Vol. 17. - P. 563-567.

152. Prognostic significance of serum osteoprotegerin levels in patients with bladder carcinoma/ Y. Mizutani et al. // Cancer. 2004. - Vol. 101. - P. 1794-1802.

153. Prognostic value of cytology, nuclear matrix protein 22 (NMP22) test, and urinary bladder cancer II (UBC II) test in early recurrent transitional cellcarcinoma of the bladder / Y. Kibar et al. // Ann. Clin. Lab. Sci. 2006. -Vol. 36(1).-P. 31-38.

154. Prognostic value of tissue-polypeptide specific antigen (TPS) in bladder cancer / V. Menendez et al. // Anticancer Res. 2002. - Vol. 22 (6B). - P. 3713-3716.

155. Proteome characterization of a human urothelial cell line resistant to the bladder carcinogen 4-aminobiphenyl / R. Pastorelli et al. // Proteome Sci. -2007. Vol. - Vol. 3. - P. 5-6.

156. Pruthi R. S. Cyclooxygenase-2 as a potential target in the prevention and treatment of genitourinary tumors: a review / R. S. Pruthi // J. Urol. 2003. -Vol. 169.-P. 2352-2359

157. Qhiu L. The expression and clinical significance of keratin 19, 20 mRNA in different tumor cell lines and tumor tissues / L. Qhiu, X. Cong, L. Ja // Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 2000. - Vol. 22 (1). - P. 32-35.

158. Qualitative and quantitative assessment of urinary cytokeratin 8 and 18 fragments compared with voided urine cytology in diagnosis of bladder carcinoma / O.W. Hakenberg et al. // Urology. 2004. - Vol. 64 (6). - P. 1121-1126.

159. Quantitative molecular grading of bladder tumours: a tool for objective assessment of the biological potential of urothelial neoplasias / D. Bollmann et al. // Oncology Reports. 2009. - Vol. 21 (1). - P. 39-47.

160. Quantitative RT-PCR detection of tumor cells in sentinel lymph nodes isolated from colon cancer patients with an ex vivo approach / O. Nordgard et al. // Ann. Surg. 2009. - Vol. 249 (4). - P. 602-607.

161. Rapamycin inhibits in vitro growth and release of angiogenetic factors in human bladder cancer / G. Fechner et al. // Urology. 2009. - Vol. 73 (3). -P. 665-668

162. Ravi R. Regulation of tumor angiogenesis by p53-induced degradation of hypoxia-inducible factor 1 alpha / R. Ravi // Genes Dev. 2000. - Vol. 14. -P. 34^14

163. Real F.X. Bladder cancer and apoptosis: matters of life and death / F.X. Real, N. Malats // Lancet Oncol. 2007. - Vol. 8 (2). - P. 91-92.

164. Regulation of the IL-23 and IL-12 balance by Stat3 signaling in the tumor microenvironment / M. Kortylewski et al. // Cancer Cell. 2009. - Vol. 15 (2).-P. 114-123.

165. Relevance of urine telomerase in the diagnosis of bladder cancer / M. A. Sanchini et al. // JAMA The journal of the American Medical Association. - 2005. - Vol. 294 (16). - P. 2052-2056.

166. Response of bladder carcinoma cells to TRAIL and antisense oligonucleotide, Bcl-2 or clusterin treatments / B. Sun et al. // J. Urol. 2009. - Vol. 181 (3). -P. 1361-1371.

167. Role of cytokeratins, nuclear matrix proteins, Lewis antigen and epidermal growth factor receptor in human bladder tumors / A. Di Carlo et al. // Int. J. Oncol. -2003. Vol. 23 (3). - P. 757-762.

168. Role of the betal-integrin subunit in the adhesion, extravasation and migration of T24 human bladder carcinoma cells / C. Heyder et al. // Clin. Exp. Metastasis. 2005. - Vol. 22 (2). - P. 99-106.

169. Ross J. S. Detecting recurrent bladder cancer: new methods and biomarkers / J. S. Ross, M. B. Cohen // Expert. Rev. Mol. Diagn. 2001. - Vol. 1. - P. 3952.

170. Rundhaug J. E. Matrix metalloproteinases and angiogenesis / J. E. Rundhaug // J. Cell. Mol. Med. 2005. - Vol. 9. - P. 267-285.

171. Ruoslahti E. Vascular zip codes in angiogenesis and metastasis / E. Ruoslahti // Biochem. Soc. Trans. 2004. - Vol. 32. - P. 397^102.

172. Sanchez-Carbayo M. Recent advances in bladder cancer diagnostics / M. Sanchez-Carbayo // Clinical Biochemistry. 2004. - Vol. 37 (7). - P. 562571.

173. Sandblom G. TPS, CA 19-9, VEGF-A, and CEA as diagnostic and prognostic factors in patients with mass lesions in the pancreatic head / G. Sandblom, S. Granroth, I. C. Rasmussen // Ups. J. Med. Sci. 2008. - Vol. 113 (1). - P. 5764.

174. Selective cytotoxicity of squamocin on T24 bladder cancer cells at the S-phase via a Bax-, Bad-, and caspase-3-related pathways / S. S. Yuan et al. // Life Sci. 2006. - Vol. 78 (8). - P. 869-874.

175. Serum CYFRA 21-1 in patients with invasive bladder cancer and its relevance as a tumor marker during chemotherapy / C. Andreadis et al. // J. Urol. -2005.- Vol. 174 (5).-P. 1771-1775.

176. Serum levels of keratin-18 fragments tissue polypeptide-specific antigen (TPS). are correlated with hepatocyte apoptosis in alcoholic hepatitis / A. Gonzalez-Quintela [et al.] // Dig. Dis. Sci. 2009. - Vol. 54 (3). - P. 648653.

177. Sherif Z. A. Downmodulation of bFGF-binding protein expression following restoration of p53 function / Z. A. Sherif //Cancer. Gene. Ther. 2001. - Vol. 8.-P. 771-782.

178. Shikonin-induced apoptosis involves caspase-3 activity in a human bladder cancer cell line (T24) / С. C. Yeh et al. // In Vivo. 2007. - Vol. 21 (6). - P. 1011-1019.

179. Shirodkar S. P. Bladder tumor markers: from hematuria to molecular diagnostics where do we stand? / S. P. Shirodkar, V. B. Lokeshwar // Expert Review of Anticancer Therapy. - 2008. - Vol. 8 (7). - P. 1111-1123.

180. Silibinin causes cell cycle arrest and apoptosis in human bladder transitional cell carcinoma cells by regulating CDKI-CDK-cyclin cascade, and caspase 3 and PARP cleavages / A. Tyagi et al. // Carcinogenesis. 2004. - Vol. 25 (9).-P. 1711-1720.

181. Soluble Fas a promising novel urinary marker for the detection of recurrent superficial bladder cancer / R. S. Svatek et al. // Cancer. - 2006. - Vol. 106 (8).-P. 1701-1707.

182. Sugiyama Y. Tissue polypeptide antigen (TPA) / Y. Sugiyama, Y. Kawaguchi // Nippon Rinsho. 2005. - Vol. 63 (8). -P. 705-707.

183. Superantigen-activated mononuclear cells induce apoptosis in transitional cell carcinoma / F. G. Perabo et al. // Anticancer Res. 2005. - Vol. 25 (5). - P. 3565-3573.

184. Sylvester R. J. Combining a molecular profile with a clinical and pathological profile: biostatistical considerations / R. J. Sylvester // Scandinavian Journal of Urology and Nephrology Supplementum. 2008. - Vol. 218. - P. 185-190.

185. Synthesis and biological evaluation of heteroaryldiamides and heteroaryldiamines as cytotoxic agents, apoptosis inducers and caspase-3 activators /М. Echeverria et al. // Arch. Pharm. (Weinheim). 2006. - Vol. 339 (4).-P. 182-192.

186. Talks K. L. The expression and distribution of the hypoxia-inducible factors HIF-la and FHF-2a in normal human tissues, cancers, and tumor-associated macrophages / K. L. Talks // Am. J. Pathol. 2000. - Vol. 157. - P. 411— 421.

187. Targeting death receptors in bladder, prostate and renal cancer /Н. F. O'Kane et al. // J. Urol. 2006. - Vol. 175 (2). - P. 432-438.

188. T-cell coregulatory molecule expression in urothelial cell carcinoma: clinicopathologic correlations and association with survival / S. A. Boorjian et al. // Clin. Cancer Res. 2008. - Vol. 14 (15). - P. 4800-4808.

189. TGFB1 and TGFBR1 polymorphic variants in relationship to bladder cancer risk and prognosis / A. Castillejo et al. // Int. J. Cancer. 2009. - Vol. 124 (3).-P. 608-613.

190. The early detection and diagnosis of bladder cancer: a critical review of the options / A. Saad et al. // Urol. 2001. - Vol. 39. - P. 600-633.

191. The Follow-up of Patients with Non-muscle-invasive Bladder Cancer by Urine Cytology, Abdominal Ultrasound and Urine CYFRA 21-1: A Pilot Study /В. Nisman et al. //Anticancer Res. 2009. - Vol. 29 (10). - P. 42814285.

192. The role of TGF-beta-1 protein and TGF-beta-R-1 receptor in immune escape mechanism in bladder cancer / A. Helmy, O. A. Hammam, T. R. El Lithy, M.M. El Deen Wishahi // MedGenMed. 2007. - Vol. 9 (4). - P. 34.

193. The value of combined use of survivin, cytokeratin 20 and mucin 7 mRNA for bladder cancer detection in voided urine /X. Y. Pu et al. // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2008. - Vol. 134 (6). - P. 659-665.

194. Theodoropoulos ,V. E. Evaluation of hypoxia-inducible factor 1 alpha overexpression as a predictor of tumour recurrence and progression in superficial urothelial bladder carcinoma / V. E. Theodoropoulos // BJU Int. -2005.-Vol. 95. P. 425-431.

195. Thrombospondin-1 expression in urothelial carcinoma: prognostic significance and association with p53 alterations, tumour angiogenesis and extracellular matrix components / E. Ioachim et al. // BMC Cancer. 2006. -Vol. 6.-P. 140.

196. Tiguert R. New diagnostic and prognostic tools in bladder cancer / R. Tiguert, Y. Fradet // Curr.Opin.Urol. 2002. - Vol. 12. - P. 239-243.

197. Tinzl M. Urinary markers for detecting bladder cancer / M. Tinzl, M. Marberger // EAU Update Series. 2003. - Vol. 1.- P. 64-70.

198. Tissue polypeptide antigen (TPA) in comparison with mutations of tumour suppressor gene P53 (TP53) in patients with bladder cancer / Т. H. Ecke, S. V. Lenk, H. H. Schlechte, S. A. Loening// Anticancer Res. 2003. - Vol. 23 (2A). - P. 957-962.

199. Tumor markers in the diagnosis of primary bladder cancer. A systematic review / A. S. Glas et al. // J. Urol. 2003. - Vol. 169. - P. 1975-1982.

200. Tumor-associated antigens as prognostic factors for recurrence in 382 patients with primary transitional cell carcinoma of the bladder / P. Allard, Y. Fradet, B. Tetu, P. Bernard // Clinical Cancer Research. 1995. - Vol. 1(10). - P. 1195-1202.

201. Tumor-specific urinary matrix metalloproteinase fingerprinting: identification of high molecular weight urinary matrix metalloproteinase species / R. Roy et al. // Clinical Cancer Research. 2008. - Vol. 14 (20). - P. 6610-6617.

202. Upregulation of Bcl-2 is associated with cisplatin-resistance via inhibition of Bax translocation in human bladder cancer cells / H. J. Cho et al. // Cancer Lett. 2006. - Vol. 237 (1). - P. 56-66.

203. Urinary concentrations of the soluble adhesion molecule Ecadherin and total protein in protein in patients with bladder cancer / A. S. Protheroe et al. // Brit. J. Cancer. 1999. - Vol. 80. - P. 273-278.

204. Urinary CYFRA 21.1 is not a useful marker for the detection of recurrences in the follow-up of superficial bladder cancer / J. Fernandez-Gomez et al. // Eur. Urol.-2007.-Vol. 51 (5).-P. 1267-1274.

205. Urinary cytology and quantitative BTA and UBC tests in surveillance of patients with pTapTl bladder urothelial carcinoma / M. Babjuk et al. // Urology. -2008. Vol. 71 (4). - P. 718-22.

206. Urinary gelatinase activities (matrix metalloproteinases 2 and 9) in human bladder tumors / A. Di Carlo, D. Terracciano, A. Mariano, V. Macchia // Oncol. Rep. 2006. - Vol. 15 (5).-P. 1321-1326.

207. Urine telomerase: an important marker in the diagnosis of bladder cancer / M. A. Sanchini et al. // Neoplasia (New York, N.Y.). 2004. - Vol. 6 (3). - P. 234-239.

208. Urine-based cytological diagnosis against the background of the new histopathological classification / S. Tschirdewahn et al. // Urologe A. — 2009.-Vol. 48 (6).-P. 615-618.

209. Use of combined apoptosis biomarkers for prediction of bladder cancer recurrence and mortality after radical cystectomy / J. A. Karam et al. // Lancet Oncol. 2007. - Vol. 8 (2). - P. 128-136.

210. Usefulness of tissue polypeptide antigen in the follow-up of bladder cancer / V. Menendez Lopez et al. // Urology. 2003. - Vol. 62 (2). - P. 243-248.

211. Utility of a comprehensive immunohistochemical panel in the differential diagnosis of spindle cell lesions of the urinary bladder / D. E Westfall et al. // Am. J. Surg. Pathol. 2009. - Vol. 33 (1). - P. 99-105.

212. Vasala К. Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) immunoreactive protein in urinary bladder cancer: a marker of favorable prognosis / K. Vasala, P. Paakko, T. Turpeenniemi-Hujanen // Anticancer Res. 2008. - Vol. 28 (3B). -P. 1757-1761.

213. Vaux D. L. Cell death in development / D. L. Vaux, S.J. Korsmeyer // Cell. -1999. Vol. 96. - P. 245-254.

214. Wykoff С. C. Hypoxia-inducible expression of tumor-associated carbonic anhydrases / С. C. Wykoff// Cancer Res. 2000. - Vol. 60. - P. 7075-7083.

215. Yamanaka M. Analysis of the gene expression of SPARC and its prognostic value for bladder cancer / M. Yamanaka //J. Urol. 2001. - Vol. 166. - P. 2495-2499

216. Yoshimura R. Expression of cyclooxygenase-2 in patients with bladder carcinoma/R. Yoshimura//J. Urol. -2001. Vol. 165. -P. 1468-1472.

217. Zaher A. Tumor markers in the detection of recurrent transitional cell carcinoma of the bladder: a brief review / A. Zaher, T. Sheridan // Acta Cytol. -2001.-Vol. 45.-P. 575-581.

218. Zargar M. Comparative evaluation of urinary bladder cancer antigen and urine cytology in the diagnosis of bladder cancer / M. Zargar, M. Soleimani, M. Moslemi // Urol. J. 2005. - Vol. 2 (3). - P. 137-140.

219. Zhang L. Wild-type p53 suppresses angiogenesis in human leiomyosarcoma and synovial sarcoma by transcriptional suppression of vascular endothelial growth factor expression / L. Zhang // Cancer Res. 2000. - Vol. 60. - P. 3655-3661.

220. Zwarthoff E. C. Detection of tumours of the urinary tract in voided urine / E. C. Zwarthoff// Scand. J. Urol. Nephrol. Suppl. 2008. - Vol. 218. - P. 147153.

221. Zweig M. H. ROC Plots: A fundamental evaluation tool in clinical medicine / M. H. Zweig, G. Campbell // Clinical Chemistry. 1993. - Vol. 39 (4). - P. 127-132.

Автореферат диссертации по медицине на тему Значение онкомаркеров, факторов роста, ангиогенеза и апоптоза в диагностике поверхностного рака мочевого пузыря

Оглавление диссертации Шахпазян, Николай Константинович :: 2010 :: Саратов

Введение диссертации по теме "Клиническая лабораторная диагностика", Шахпазян, Николай Константинович, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Шахпазян, Николай Константинович

Похожие научные работы

Каталог диссертаций