Автореферат и диссертация по медицине (14.00.29) на тему:Значение новых молекулярных маркеров в дифференциальной диагностике эритремии и вторичного эритроцитоза

Эритремия - хронический лейкоз с поражением на уровне клетки-предшественницы миелопоэза с характерной для опухоли неограниченной пролиферацией этой клетки, сохранившей способность дифференцироваться по всем росткам кроветворения, преимущественно по красному. Относится к группе хронических миелопролиферативных заболеваний, в которую также входят эссенциальная тромбоцитемия и идиопатический миелофиброз (Воробьев А.И. 1985г., Воробьев А.И. 2003г., Демидова А.В. 2002г.). До недавнего времени не было обнаружено специфических и чувствительных молекулярно-генетических маркеров эритремии. Это значительно затрудняло проведение диагностики, а также дифференциальной диагностики с вторичными эритроцитозами, атипичными вариантами течения заболевания, а также внутри группы хронических миелопролиферативных заболеваний.

Однако последние исследования выявили два новых маркера, присущих 90-95% пациентов с диагнозом эритремии: гиперэкспрессию гена РК\М и мутацию .]ак2У617Р. В дальнейшем, было установлено, что эти маркеры встречаются также при других заболеваниях, относящихся к группе хМПЗ, но в значительно меньшем проценте случаев и никогда у пациентов с диагнозом вторичного эритроцитоза или здоровых доноров. Полученные данные позволили предположить, что эти маркеры чувствительны и специфичны для дифференциальной диагностики между эритремией и вторичными эритроцитозами, но не внутри группы хМПЗ. На сегодня различными исследовательскими группами проводится изучение влияния цитостатической терапии на уровень экспрессии гена РИУ-1 с целью уточнить возможность контроля эффективности терапии на молекулярном уровне с помощью этого маркера. Кроме того, в процессе определения находится влияние новых маркеров на прогнозирование течения заболевания и развития возможных осложнений. Выше изложенные данные позволили сформулировать следующую цель исследования.

Цель исследования;

Оценить чувствительность и специфичность новых молекулярных маркеров гиперэкспрессии гена РЯ\М и мутации ,1ак2\'617Р для проведения дифференциальной диагностики между пациентами с диагнозом эритремии и вторичным эритроцитозом, а также внутри группы хронических миелопролиферативных заболеваний.

Задачи исследования:

1. Установить частоту выявления гиперэкспресии гена РЯ\М и мутации ,1ак2У617Р у пациентов, относящихся к группе хМПЗ, также пациентов с диагнозом вторичного эритроцитоза и здоровых доноров.

2. Исследовать в динамике уровень экспрессии гена РЛ\М на фоне проводившейся цитостатической терапии у пациентов с диагнозом эритремия.

3. Определить частоту совпадения гиперэкспрессии гена РИЛМ, мутации Jak2V617F с ростом эндогенных эритропоэтин-независимых колоний и низким уровнем эритропоэтина у пациентов с диагнозом эритремия.

Научная новизна:

• Определено значение новых молекулярных маркеров - гена РИЛМ и мутации .1ак2У617Р для проведения дифференциальной диагностики между эритремией и вторичньми эритроцитозами.

• Получены собственные данные о влиянии терапии различными циторедуктивными препаратами на уровень экспрессии РЛУ-1 и показано значение этого показателя для оценки эффективности проводимой терапии.

• Накоплены данные о совпадении различных молекулярных маркеров у пациентов, относящихся к группе хМПЗ, для дальнейшего прогнозирования течения заболевания и возможности развития осложнений.

Практическая ценность работы:

Полученные данные, возможно, позволят упростить проведение дифференциального диагноза, прежде всего между эритремией и вторичным эритроцитозом, мониторировагь эффективность терапии и выделить молекулярные маркеры, которые позволят разделить пациентов внутри уже обозначенной нозологии по степени риска развития возможных осложнений.

ВЫВОДЫ

1. Определение уровня экспрессии гена Р11У-1 является эффективным и чувствительным методом, позволяющим с высокой долей вероятности проводить дифференциальную диагностику между эритремией и вторичным эритроцитозом.

2. Новый молекулярный маркер - мутация ]ак2. эффективен в 100% случаев для проведения дифференциальной диагностики между эритремией и вторичными эритроцитозами.

3. Повышение уровня экспрессии гена РЯ\М не может быть использовано для проведения дифференциальной диагностики внутри группы хМЛЗ.

4 Выявлена линейная зависимость уровня экспрессии гена РЯУ-1 от длительности терапии интерфероном-альфа.

5. Не установлена зависимость уровня экспрессии гена РЯУ-1 у пациентов с диагнозом эритремии от длительности терапии и дозы гидроксимочевины.

6. Отсутствию ремиссии у пациентов с эритремией соответствует гиперэкспрессия гена РЯУ-1. Достижение частичной ремиссии в 50% случаев сопровождается нормализацией уровня экспрессии РЯУ-1. У 3 из 4 пациентов с полной клинико-гематологической ремиссией отмечается нормальный уровень экспрессии гена РЯУ-1.

7. Определена частота совпадения молекулярных маркеров эритремии Jak2/ РЯУ-1 в 86,4%, Зак2/ЭЭК в 86,4%, Зак2/ РЯУ-У ЭЭК/низкий уровень эритропоэтина в 45,5% случаев соответственно