Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Закономерности и механизмы нарушений иммунологической реактивности у детей, больных бронхиальной астмой и атопическим дерматитом, пути коррекции этих нарушений

ОД

На правах рукописи 1 (] ■"] '¡'>37

Кирдей Лариса Евгеньевна

ЗАКОНОМЕРНОСТИ И МЕХАНИЗМЫ НАРУШЕНИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ У ДЕТЕЙ, БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ И АТОМИЧЕСКИМ ДЕРМАТИТОМ, ПУТИ КОРРЕКЦИИ ЭТИХ НАРУШЕНИЙ

14.00.16 - патологическая физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук.

Иркутск 2002

Работа выполнена в Иркутском государственном медицинском университете и ГУЗ Иркутском областном диагностическом центре.

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Официальные оппоненты':

Доктор медицинских наук Бодиенкова Г.М. Кандидат медицинских наук Дмитриева Л.А.

Ведущее учреждение:

Сибирский государственный медицинский университет

Защита состоится «_»_2002 г.

в __часов на заседании диссертационного совета

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ «Восточно-Сибирский научный центр Сибирского отделения РАМН» по адресу г.Иркутск, ул. Темиря-зева, 16

Автореферат разослан «_» _2002 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета

кандидат медицинских наук Шолохов Л.Ф.

Скворцова Р.Г.

Список используемых сокращений:

АД - атопический дерматит АФП - а-фетопротеин БА - бронхиальная астма

Е-РОК - розеткообразующие клетки с эритроцитами барана

ЕМ-РОК - розеткобразующие клетки с мышиными эритроцитами

ИЛ - интерлейкин

ИФ - интерферон

ИФА - иммуноферментный анализ

МА - моноклональные антитела

РФ - ревматоидный фактор

ФНО - фактор пекроза опухоли

ЦИК - циркулирующие иммунпые комплексы

ds-DNA - двуспиральная ДНК

^ (Иг) - иммуноглобулины

КК - естественные киллеры

ТЬ - Т-хелперы

Те - И-супрессоры

Тк - Т-киллеры

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Среди различных аллергических заболеваний бронхиальная астма (БА) и атопический дерматит (АД) в наибольшей степени имеют в своем патогенезе механизмы воспаления (Балаболкин И.И. 1998; Romag-nani S., 2001). Клинические проявления этих заболеваний во многом связаны с поражением соответствующих органов и тканей в силу развития в них воспалительных реакций (Leung Donald Y.M., Spahn Joseph D., Szefler Stanley J., 1999). В настоящее время не вызывает сомнений ведущая роль иммунологических механизмов в развитии воспаления, а переход острого воспаления в хроническое в значительной степени обусловлен нарушениями деятельности иммунной системы организма (Майборода A.A., Кирдей Е.Г., Цибель Б.Н. и др, 1995).

Изменения иммунологической реактивности, которые лежат в основе развития воспаления при различных заболеваниях, в частности - при АД и БА, скорее всего, однотипны, но не достаточно изучены для эффективной иммуно-коррекции.

Выявление при аллергических заболеваниях воспалительного характера иммунологической недостаточности или гиперактивации в различных звеньях иммунной системы, а также возможность сочетания этих состояний, с одной стороны, позволяет уточнить патогенетические механизмы их развития, выявить возможную общность этих механизмов, а с другой стороны, разработать методы фармакологической иммунокоррекции, которые по направленности могут носить универсальный для аллергических заболеваний характер.

Цель исследования. Выявить общие закономерности изменений иммунологической реактивности организма детей, больных БА и АД и разработать на этой основе эффективные методы иммунокоррекции.

Задачи исследования:

1. Провести сравнительную оценку иммунного статуса у здоровых детей и больных БА и АД.

2. Изучить продукцию провоспалительных иммуноцитокинов у здоровых детей и больных БА и АД.

3. Изучить аутоиммунные реакции у детей, больных БАи АД.

4. Разработать методы фармакологической иммунокоррекции у детей, больных БА и АД и изучить их эффективность.

Научная новизна. Впервые показано наличие общих по характеру изменений иммунного статуса у детей, больных БА и АД, выражающихся в недостаточности клеточного иммунитета, опосредуемого Т-клетками и NK-клетками, развитии клеточной недостаточности и нарушении продукции иммуноглобулинов в гуморальном иммунитете, дефектности нейтрофилыюго фагоцитоза. Эти изменения служат патогенетической основой хронизации процессов воспаления при указанных заболеваниях.

У детей, больных БА и АД выявлено неизвестное ранее состояние моно-нуклеарных фагоцитов, характеризующееся усиленной продукцией провоспа-

лительных иммунощггокинов при отсутствии усиления продукции интерферо-на-а (ИФ-а).

У детей, больных АД, впервые выявлено нарушение толерантности к ауто-антигенам, то есть наличие аутоиммунных реакций.

В сыворотке крови детей, больных БА впервые выявлено увеличение уровня неопгерина, как интегрального показателя интенсивности продукции иммунощгтокинов, и снижение уровня а-фетопротеина (АФП), обладающего иммуносупрессивными свойствами.

Впервые выявлен положительный иммунокорригирующий эффект в результате применения комплекса препаратов, направленных на нормализацию интерферонового статуса, активацию Т-звена клеточного иммунитета и фагоцитоза.

Научная п практическая ценность. На основе выявленных универсальных механизмов нарушений иммунологической реактивности у детей, больных БА и АД предложен высокоэффективный комплексный метод иммунокоррек-ции в лечении таких больных. Схема иммунокоррекции включала препараты ИФ (лейкинферон или виферон), препараты тимомиметического действия (гро-преносин), препараты, активирующие фагоциты (ликопид).

Результаты проведенных исследований внедрены в практику работы Иркутской областной детской клинической больницы и ГУЗ Иркутского областного диагностического центра.

Основные положения работы используются в педагогической, научной и ингнической деятельности кафедр патологической физиологии и иммунологии ; аллергологией, педиатрии №1, педиатрии №2 ИГМУ.

Положения, выносимые на защиту:

[. Изменения иммунорегуляции у больных БА и АД носят общий характер и выражаются в развитии многофакторной гипосупрессии, предрасполагающей к гиперактивации процессов воспален™. !. Недостаточность в Т-звене иммунной системы, В-лимфопения с нарушениями процессов антителопродукции, дефектность фагоцитоза являются общими механизмами нарушения иммунологической реактивности у детей, больных БА и АД.

. Увеличение продукции провоспалительных медиаторов (ФНО-а и ИЛ-1), свидетельствующее об активации мононуклеарных фагоцитов, и отсутствие при этом увеличения продукции ИФ-а представляют собой общие изменения иммуноцитокинового статуса в механизмах иммунологической реактивности у детей, больных БА и АД. . Сочетание иммунологической недостаточности и гиперактивации в механизмах иммунологической реактивности организма детей, больных БА и АД, служит базовой основой для хронизации процессов воспаления при указанных заболеваниях. . Комплексный метод иммунокоррекции обладает необходимой эффективностью и способствует нормализации иммунного статуса у детей, больных БА и АД.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на итоговой научной конференции ИГМУ (2001), на III съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Сочи, 2000), на Европейском конгрессе по астме (Москва, 2001), на 9 международном медицинском симпозиуме Японско-Российской ассоциации медицинского обмена (Канадзава, 2001). По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ и 1 направлена в печать.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста Microsoft Word и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав описания собственных исследований, заключения и выводов. Диссертация иллюстрирована 31 таблицами и 9 рисунками. Указатель литературы включает 159 наименований работ отечественных и 77 наименований работ зарубежных авторов.

КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ БОЛЬНЫХ, МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИММУНОКОРРЕКЦИИ

1. Клиническая характеристика обследованных больных

В основу работы положены результаты комплексного обследования 337 детей с Б А и 125 детей с АД в возрасте от 1 до 16 лет со среднетяжелым и тяжелым течением заболеваний. Дети с сочетанием БА и АД в обследованные группы не входили. У всех детей, больных БА к началу обследования были установлены атопический вариант и фаза обострения заболевания с дыхательной недостаточностью 0-1. 63% детей с АД имели поражение кожи в виде эксуда-тивно-сквамозной с лихенификациями и 37% - в виде лихеноидной форм заболевания. Постановка диагноза у таких детей основывалась на результатах комплексного обследования детей, которое состояло из общеклинических, аллерго-логических и иммунологических методов.

Все они являлись пациентами пульмонологического отделения Иркутской областной детской клинической больницы.

Ко1ггрольную группу составили 72 практически здоровых ребенка в возрасте от 1 до 16 лет. Основную часть лабораторно-клинических исследований проводили на базе ГУЗ Иркутского областного диагностического центра.

2.Материалы и методы исследования

Оценку клеточного иммунитета осуществляли методом проточной цитоф-люоримегрии на цитофлюориметре - сортере «Coulter Epics Elite ESP» фирмы «Beckman- Coulter» (США). Методом двойной флюоресцентной метки (ФИТЦ, родамин-1 или фикоэритрин) оценивали количественное содержание в периферической крови Т-лимфоцитов (CD2+CD19-, CD3+CD56-, CD3+ HLA-DR-), их субпопуляций: Т-хелперов (CD4+CD8-) и Т-супрессоров/киллеров (CD8+CD4-), B-лимфоцитов (CD19+CD2-), естественных клеток киллеров (CD56KJD3-). Кроме того, с помощью проточной цитофлюориметрии определяли число активированных Т-клеток (HLA-Dr+CD3+), общее количество активированных лимфоцитов (HLA-Dr+CD3-), а также лейкоцитов, несущих рецепторы (CR1) к СЗ-компоненту комплемента (CD35+) и рецепторы к Ил-2 (CD122+). Одновременно из этих же образцов крови определяли лейкоцитарную формулу с помо-

щыо гематологического анализатора «Gen' S» фирмы «Beckman-Coulter» (США).

Оценку клеточного иммунитета до начала работы проточного цитофлюо-риметра проводили .методом розеткообразования. Определение количества Т-лимфоцитов, NK-клеток проводили методом розеткообразования с эритроцитами барана и с эритроцитами мыши - для определения числа В-лимфоцитов (Фролов А.Ф., Марков И.С., 1984). Для определения субпопуляций Т-лимфоцитов делали нагрузочный тест с теофиллином.

Концентрации сывороточных иммуноглобулинов классов IgA, IgM, IgG определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле, по Манчини и методом нефелометрии на биохимическом анализаторе «Array» фирмы «Beckman-Coulter», (США). На этом же анализаторе проводили оценку системы комплемента по концентрации компонентов СЗ, С4.

Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли в сыворотке крови фотометрическим методом на биохимическом анализаторе "Photometer 5010" (Boehringer Mannheim).

Фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови определяли по их способности поглощать частицы латекса и одпосуточную культуру Staphilococcus aureus (209 штамм), инактивированного высокой температурой. Микроскопирование осуществляли в иммерсионной системе светового микроскопа «Olympus СН2».

Метаболическую активность нейтрофильных гранулоцитов оценивали в реакции хемилюминисценции в спонтанном и индуцированном вариантах с помощью хемилюминометра «Bio-Orbit» фирмы «Pribiri-Oy» (Финляндия).

Методом иммуноферментного анализа оценивали показатели иммуноци-токшювого статуса: интерлейкина-lß (ИЛ-lß), интерлейкина-4 (ИЛ-4), фактора некроза опухоли-a (ФНО-а), интерферона-а (ИФ-а), a так же концентрацию маркеров аутоиммунной патологии: ревматоидного фактора (РФ), антител к антигену Sm-RNP, антител к двуспиралыюй ДНК, маркера активности клеточного иммунитета неоптерина с помощью биоапалитического робота «Biomek-2000» фирмы «Beckman-Coulter»(CHIA), полностью исключающего вариабельность ручного труда. Для идентификации провоспалительных цитокинов использовали наборы тест-систем фирмы «Ргосоп» (Россия). Для идентификации маркеров аутоимунной патологии использовали наборы фирм «Sigma» (США), «Ргосоп» (Россия), для неоптерина - «IBL» (Германия).

Концентрацию в сыворотке крови опухолеассоциированного антигена а-фетопротеина (АФП) определяли методом электрохемилюминисценции с помощью прибора "Elecsys-2010" ф1фмы "Hitachi, Ltd. Boehringer-Mannheim" (Япония).

Использовали стандартные наборы реактивов фирмы «Roche» (Швейцария), представляющие собой моноклоналыше антитела, направленные к различным эпитопам исследуемого биологического субстрата. В основе реакции лежал двухцентровой биотин-стрептовидиновьш метод. В качестве метки использовали комплекс рутений-трнс.

Все используемые для работы тест-системы имели регистрационные удостоверения МЗ РФ.

3. Методы иммунокоррекции

Иммунокоррекцшо (мононммунотераишо) при АД проводили с применением препарата виферон-2 («Ферон», Россия) по известной схеме, а комплексная иммунокоррекщш на основе результатов анализа иммуннологического обследования включала препараты виферон-2, гроприносин («Polfa», Польша) и ликопид («Пептск», Россия) по схеме, описанной в диссертации.

При БА общепринятую моноиммунотерапию проводили ингаляцией лей-кинферона («Интекор», Россия). Для комплексной терапии была разработана схема, включающая лейкинферон, гроприносин, ликопид.

4. Методы статистической обработки данных

Полученные данные были подвергнуты статистической обработке с использованием программы «Microsoft Ехсе1-97», включающей вычисление средних арифметических (М), средних квадратичных ошибок средних арифметических (ш) и стандартных отклонений (I), поскольку распределение средних частот при иммунологических исследованиях носит преимущественно нормальный характер (Пьяцца А., 1981).-Степень различий между средними арифметическими определяли с помощью критерия Стьюдента (С.Гланц, 1999). Во всех экспериментах различия между показателями считали достоверными, если степень их была не ниже 95% (р < 0,05).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Исследование иммунного, иммуноцитокинового и аутоиммунного статусов. Как известно, клеточные механизмы иммунного ответа включают деятельность Т-клеток различной субпопуляционной принадлежности, а также естественных клеток-киллеров, осуществляющих свою деятельность без гуморальных посредников в виде антител. Поэтому производили количественное определение этих клеток с помощью проточной цитофлюориметрии, а также в реакции розеткообразования с ксеногенными эритроцитами.

Данные по изменению клеточного иммунитета у детей разных возрастных групп при АД и БА были оцененны разными методами (метод проточной ци-тофлю-ориметрии и розеткообразования с ксеногенными эритроцитами.

Характерно то, что в обоих случаях отмечается снижение числа Т-лимфоцитов и одинаковая тенденция к гипосупрессии при БА, которая развива-егся за счет снижения количества Т-супрессоров, и соответственно изменения ИРИ. Использование дополнительных маркеров лимфоцитов, таких как CD56+CD2- (NK-клеток), HLA-Dr+CD3+ (активированных Т-клеток), дало дополнительную информацию для оценки клеточного иммунитета детей с БА (рис. 1). В обоих вариантах обследования у детей при Б А не отмечено достоверных различий по количеству клеток с маркерами CD 35 (CRl-рецепторы к СЗ-компоненту комплемента) и CD 122 (рецепторы к Ил-2). Отсутствие достоверного изменения числа клеток с этими маркерами у детей, больных БА, подтверждается тем, что у этих детей нет и обычного для стандартного воспалительного процесса повышения уровня лейкоцитов в крови. Во всех случаях

БЛ имеется тенденция к снижению числа лейкоцитов и лимфоцитов в крови детей обоих анализируемых возрастных групп.

При оценке иммутюго статуса при АД было установлено, что для этого заболевания, так же как и для БА характерна гипосупрессия, но в отличие от БА она в основном связана не с количественным уменьшением Т-супрессоров, а с увеличением ИРИ.

Исследование показателей клеточного иммунитета двумя параллельными методами дает дополнительную информацию об активности этого звена иммунной системы. Рецепторы к эритроцитам барана представляют собой молекулы иА-2, ассоциированные с функциями лейкоцитов, представленные преимущественно на Т-лимфоцитах и ЫК-клетках. Эти молекулы с одной стороны являются относительными маркерами Т-лимфоцитов, а с другой стороны экспрессия этих молекул характеризует функциональную активность указанных клеток в клеточной кооперации при иммунном ответе и при их взаимодействии с клетками-мишенями в цитотоксических реакциях. Снижение числа розетко-образующих лимфоцитов может быть связано с дефектностью указанных молекул межклеточной адгезии, то есть функциональной недостаточностью клеток.

В связи с этим, разнонаправленные изменения в количестве клеток, несущих рецепторы для эритроцитов барана и СБ-маркеры Т-лимфоцитов, подтверждают наличие сочетанных нарушений в деятельности Т-звена иммунной системы как в отношение числа Т-лимфоцитов, так и их функциональной активности в иммунном ответе при БА и АД. Одновременно, результаты изучения субпопуляций Т-лимфоцитов с помощью метода розеткообразования подтверждают данные цитофилюориметрических исследований о наличии выраженной шпосупрессии в Т-клеточном звене иммунитета у детей различного возраста, больных БА и АД .

Таким образом, течение БА и АД у детей и подростков характеризовалось общими и достаточно обширными изменениями клеточного звена иммунной системы: недостаточность Т-клеточного звена иммунной системы (количественная и функциональная при БА, функциональная при АД), шпосупрессорное состояние в Т-клеточном звене иммунорегуляции, угнетение естественной кле-точноопосредованной цитотоксичности при АД и БА.

Следует подчеркнуть, что выявленные изменения деятельности Т-звена иммунной системы носят однотипный характер у детей больных БА и АД без существенных возрастных особенностей.

Показано, что у детей младшей и старшей возрастной группы, больных БА, наблюдалось достоверное снижение числа С019+С02- В-лимфоцитов (относительное и абсолютное). У детей 1 группы относительное количество было снижено до 32,3%, абсолютное - до 20,0% от уровня здоровых детей, во 2 группе соответственно до 51,8% и до 55,0 %.

Определение тех же показателей с помощью реакции розеткообразования показало, что у детей, больных БА и АД, имело место достоверное снижение числа ЕМ-РОК во всех возрастных группах. В частности у детей, больных БА в различных возрастных группах снижение числа В-лимфоцитов происходило на 56.9% (абс.) - 75,3 % (отн.) в сравнении с контролем. У больных АД во всех

возрастных группах это снижение происходило на 58,1 - 65,6 %, соответственно.

Таким образом, течение БА и АД у детей сопровождалось наличием В-лимфопении, то есть - признаками иммунологической недостаточности в В-звене иммунной системы.

При изучении содержания в организме сывороточных иммуноглобулинов методом радиальной иммунодиффузии было установлено, что у детей в возрасте до 3 лет показатели содержания в организме сывороточных иммуноглобулинов преимущественно не отличались от контроля, за исключением концентрации у больных АД, которая была увеличена на 88,0 %.

У детей, больных БА и АД, средней возрастной группы наблюдалось достоверное увеличение концентрации IgA на 76,6% и на 84,4 % соответственно. У детей этой возрастной группы, больных БА, одновременно наблюдали снижение концентрации ^О на 32,3 %, а у больных АД - увеличение концентрации

на 58,7%. В старшей возрастной группе у детей, больных БА наблюдали достоверное снижение концентрации иммуноглобулинов всех исследовавшихся классов: ^А - до 78,6%, ^М - до 73,3% и - до 72,5%, в то время как у больных АД эти показатели не отличались от нормальных.

При изучении содержания сывороточных иммуноглобулинов методом нефелометрии в организме у детей, больных БА, младшей возрастной группы отмечали достоверное увеличение концентрации IgA на 74,5 % от контрольных значений. Изменения уровня остальных иммуноглобулинов в данной группе и иммуноглобулинов в старшей возрастной группе носили недостоверный характер. Не удалось выявить достоверных изменений иммуноглобулинов основных классов при использовании нефелометрии и у детей, больных АД.

Таким образом, содержание иммуноглобулинов у детей больных БА характеризовалось дисиммуноглобулинемией. Уровень иммуноглобулинов у больных АД преимущественно находился в нормальных пределах, либо увеличивался в сравнении с контролем.

Установлено, что у детей младшей возрастной группы, больных БА наблюдалось достоверное снижение числа клеток, обладающих фагоцитарной активностью (на 61,1%) и их поглотительной способности (на 76%). Снижение обоих показателей фагоцитоза было выявлено и у детей больных АД младшей возрастной группы (на 31,3% и на 60,6%).

В средней возрастной группе у детей больных БА и АД сохранялось подавление фагоцитарной активности. В частности, у больных БА было снижено число активных фагоцитов на 47,7% и их поглотительная способность на 67,6%, при АД - соответственно на 45,3% и на 70,3 %.

У детей старшей возрастной группы наблюдали аналогичные изменения фагоцитарной активности нейтрофилов при БА на 47,7% (количество активных фагоцитов), на 65,1% (поглотительная способность) и при АД - на 39,4% и на 56,2%, соответственно.

Следует отметить, что дефектность фагоцитоза в этих исследованиях была одинаково выражена независимо от формы патологии и возраста дегей.

При изучении фагоцитарной активности нейтрофилов по отношению к стафилококку у детей, больных БА различных групп также наблюдали досто-

и

верное и выраженное снижение числа активных фагоцитов на 36,3-42,6% и их поглотительной способности на 37,2-44,7%. У детей, больных АД, в этом случае наблюдали достоверное снижение только числа активных фагоцитов на 20,6%.

В процессе оценки иммуноцитокинового статуса организма было установлено, что у здоровых детей содержание иммуноцитокинов было одинаковым в различных возрастных группах.

При БА уровень ФНО-а был повышен в 8 раз, при АД - в 3,4 раза. Концентрация ИЛ-1 в сыворотке крови детей, больных БА и АД была повышена более чем в 20-30 раз, в то же время показатели больных разных исследуемых групп статистически не различались.

При изучении концентрации ИЛ-4 были обнаружены значительные различия этого показателя у здоровых детей. Можно было полагать, что эти различия обусловлены высоким уровнем распространенности латентных аллергических состояний у детей в настоящее время, которые обеспечивают высокий уровень ИЛ-4 в сыворотке крови многих детей. Поэтому, обнаруженное увеличение концентрации этого иммуноцитокина у детей больных БА и АД оказалось статистически недостоверным в сравнении с контролем.

Уровень неоптерина у больных БА был- выше на 31,4 % по сравнению с контрольной группой.

В процессе изучения особенностей аутоиммунного статуса у здоровых и больных детей было установлено, что содержание различных аутоантител у здоровых детей не имело возрастных различий. Следует особо подчеркнуть, что содержание различных аутоантител у здоровых и больных детей находилось ниже критического уровня, характеризующего наличие системной аутоиммунной патологии. Поэтому такие показатели содержания различных аутоантител выражали в единицах оптической плотности фотометра и использовали их только для сравнения между собой с целью выявления возможных тенденций в развитии аутоиммунных реакций при БА и АД.

Было установлено, что уровень суммарного РФ был достоверно увеличен у больных АД на 26,4 %, в то время как у детей, больных БА, этот показатель не отличался от контрольной группы.

Уровень аутоантител к 8т1ШР у детей, больных АД был достоверно увеличен в 2,4 раза по сравнению с уровнем здоровых детей, аналогичное увеличение у больных БА было статистически недостоверным.

Уровень аутоантител к (ЬОИА у больных БА и АД также имел тенденцию к увеличению, которое, тем не менее оказалось статистически недостоверным.

При изучении концентрации ЦИК у здоровых детей не было выявлено возрастных отличий в содержании этих комплексов. Тем не менее, учитывая возрастные особенности в содержании иммуноглобулинов у детей, концентрацию ЦИК у больных детей определяли в разных возрастных группах. Как показали результаты этих исследований у детей больных БА и АД показатели концентрации ЦИК находились в пределах нормы.

Дефектнос^ьгумо^

го '^"З'й;"" ■: I" с

Количество Иг А, М, б

Количество В-пимфоцитов

ЭД^огсгфакторнант иио»

г

Хронизация воспаления

■ Фагоцит арнай актииноегь нейтрон

•'.'филов' - ч ""

МКЛ. ' ■

г

Ревматоидный фактор, вт-МЧР (АД) t

АФП (БА) X

ФНО-а х

Ил-1 Т

ИФ-а X

Рис. 1 Концептуальная схема включения механизмов нарушения иммунологической реактивности и обоснование их роли в реакции хронического воспаления при БА и АД у детей.

ю

При изучении содержания АФП у детей, больных БА младшей возрастной группы отмечалось выраженное снижение этого показателя по сравнению со здоровыми детьми в. 4,8 раза, у детей старшей возрастной группы эти показатели не отличались от контроля.

Таким образом, у детей больных БА и АД наблюдалась усиленная продукция провоспалительных иммуноцитокинов - ФНО-а и ИЛ-1, причем усиление продукции ФНО-а было более выражено у больных БА. Следовательно, у больных БА и АД имела место активация мононуклеарных фагоцитов, которые являются основными продуцентами таких иммуноцитокинов, что, в свою очередь, является фактором индукции воспаления. В то же время, у больных БА и АД отсутствовало увеличение продукции ИФ-а, как следствия такой активации моноцитов и макрофагов. Учитывая антипролиферативные и иммуномодули-рующие свойства ИФ-а, можно полагать, что отсутствие увеличения его продукции на фоне увеличения продукции провоспалительных иммуноцитокинов вносит дополнительный вклад в создание состояния иммунологической гипосу-прессии при БА и АД у детей.

Наличие активации провоспалительных механизмов при изучавшихся заболеваниях подтверждалось тенденцией к увеличению содержания ИЛ-4 и увеличением концентрации неоптерина у больных БА..

Как уже указывалось, наличие пшосупрессии в системе иммунорегуляции служит фактором риска в отношении развития аутоиммунных реакций в организме. Результаты проведенных исследований показали вероятность присутствия аутоиммунного компонента в изменении иммунологической реактивности организма у детей, больных АД, в виде усиления продукции аутоантител к иммуноглобулинам и нуклеопротеидам. Снижение концентрации АФП у детей, больных БА, свидетельствует о наличии дополнительного фактора пшосупрессии при этом заболевании в виде снижения продукции белка с иммуносупрес-сивными свойствами.

Концептуальные положения, вытекающие из результатов оценки иммунного статуса детей, больных Б А и АД представлены на рисунке 1.

Результаты иммунокоррекции при бронхиальной астме (см. рис. 2). Им-мунокоррекцию проводили у 24 детей в старшей возрастной группе (7-16 лет), больных БА среднетяжелого и тяжелого течения. Комплексную иммунокоррек-цию проводили в группе из 12 человек с одновременным применением раствора лейкинферона (по 10000 МЕ ингаляционно, ежедневно в течение 10 дней), таблеток гроприиосина (по 500 мг внутрь, ежедневно в течение 5 дней), таблеток ликопида (по 1 мг внутрь, ежедневно в течение 10 дней). В контрольной группе (12 человек) в качестве иммунокоррекции применяли монотерапию с помощью ингаляций лейкинферона. Перед проведением иммунокоррекции и после ее окончания у всех больных определяли показатели иммунного, иммуноцитоки-нового и аутоиммунного статуса, а также содержание в сыворотке крови АФП.

1 - С04+С08- ; 2 - С056+С03-; 3 - ША0К+С03+ ; 4 - С0122+ ; 5 - 1дМ ; 6 - 1дА ; 7 - 1дв ; 8 - АФ; 9 - ХЛ индуцир.; 10 - ХЛ индекс стимул.; 11 - С4

Рис.2. Изменения иммунного статуса у больных БА после комплексной иммунокоррекции.

В результате моноиммунотерапии наблюдалось достоверное снижение числа активированных Т-лимфоцитов (НЬА В11+ С 1)3+) до 57,22%, а после комплексной иммунотерапии происходило достоверное увел1гчение числа таких Т- клеток до 316,88% в сравнении с исходным уровнем.

В то же время, в обеих группах не наблюдалось изменений числа активированных клеток иммунной системы - не Т-лимфоцитов (НЬА ОК+ СБЗ-).

Под действием отдельно применявшегося для иммунокоррекции лейкин-ферона достоверно снижалось число Т-лимфоцитов, несущих ЬБА-2 до 79,72%. В процессе комплексной иммунокоррекции изменений этого показателя не наблюдали.

В результате проведения моноиммунотерапии и комплексной иммунотерапии происходило увеличение числа Т-хелперов (С134IСП8-) и Т-супрессоров/киллеров (СБ8+С04-). Однако, статистическую достоверность имело лишь увеличение числа Т-хелпсров под действием комплексной иммунотерапии (на 42%) . При этом, иммунорегуляторные индексы в обеих группах находилсь в нормосупрессорных пределах.

Проведение моноиммунотерапии не оказывало влияния на естественные клетки-киллеры (СБ56+ СВЗ-), в то время как в результате комплексной иммунотерапии число этих клеток достоверно увеличивалось на 71,1%. В процессе иммунокоррекции с применением только лейкинферона не происходило достоверных изменений экспрессии СЗ-рецепторов к комплементу на клетках иммунной системы (СВ35+) и рецепторов к ИЛ-2 (СБ122+). Комплексное применение иммунокорректантов не оказывало влияния на экспрессию СЗ-рецепторов, но существенно увеличивало число клеток, несущих рецепторы к ИЛ-2 (до 272,22%).

В результате применения моноиммунотерапии у больных БА происходило достоверное снижение концентрации IgA до 79,42%. Концентрация и ^М в процессе применения лейкинферона достоверным изменениям не подвергались. Не оказывала влияния моноиммунотерапия и на число В-лимфоцитов в периферической крови больных БА.

В процессе комплексной иммунотерапии у детей, больных БА наблюдали достоверное увеличение числа В-лимфоцитов (СВ19+СБ2-) до 114,89% по сравнению с исходным уровнем. Применение лейкинферона в комплексе и гро-приносином и ликопидом приводило к достоверному увеличению у больных БА концентрации IgA до 130,55% по сравнению с исходным уровнем и к снижению концентрации до 68,22%.

В процессе моноиммунотерапии у детей, больных БА, не наблюдалось достоверных изменений числа активно фагоцитирующих нейтрофилов. В результате комплексного применения иммунокорректантов происходило достоверное увеличение активности фагоцитоза до 159,62% по сравнению с исходным уровнем. Поглотительная способность фагоцитов в процессе моноиммунотерапии достоверно снижалась до 75,35%, а применение комплексной иммунотерапии не оказывало влияния на эту способность фагоцитов.

Способность фагоцитов продуцировать активные формы кислорода и кислородные радикалы, определяемая у больных БА с помощью хемилюминес-ценции, под действием моноиммунотерапии и комплексной иммунотерапии в

спонтанном варианте теста не изменялась. В индуцированном варианте указанного теста под действием моноиммунотерапии у больных БА происходило достоверное снижение кислородпродуцирующей способности фагоцитов до 53,68%. Под действием же комплексной иммунотерапии у больных БА наблюдали достоверное увеличение изучавшегося показателя до 145,3% по сравнению с исходным уровнем.

В процессе моноиммунотерапии у больных БА наблюдали отсутствие изменений в содержании СЗ-компонента комплемента в сыворотке крови и достоверное увеличение показателя содержания С4-компонента до 123,58%. Под действием комплексной иммунокоррекции у больных БА происходило достоверное увеличение концентрации СЗ и С4 компонентов комплемента до 106,62% и 120,4% соответственно по сравнению с исходным уровнем.

Применение моноиммунотерапии у больных БА не оказывало влияния на содержание ИФ-а в сыворотке крови, в то время как комплексная иммунотерапия достоверно увеличивала уровень этого иммуноцитокина в сыворотке крови больных БА более чем в 4 раза. В процессе моноиммунотерапии происходило увеличение концентрации ИЛ-4, но это увеличение не было статистически достоверным. Комплексное применение иммунокорректантов в лечении больных БА приводило к достоверному снижению уровня ИЛ-4 в сыворотке крови до 72,4%. Моноиммунотерапия у указанных больных не оказывала влияния на уровень неоптерина в сыворотке крови, в то время как под действием комплексной иммунотерапии происходило достоверное увеличение этого показателя до 180,3%.

Таким образом, применение лейкинферона с целью иммунокоррекции в лечении детей, больных БА, практически не оказывало положительного эффекта. Комплексная иммунотерапия оказывала выраженное положительное воздействие на различные звенья иммунологической реактивности организма, патологически измененные у больных БА.

Результаты иммунокоррекции при атопическом дерматите (см. рис. 3). Иммунокоррекцию проводили у 24 ребенка старшей возрастной группы (716 лет), больных АД. Моноиммунотерапию проводили с помощью препарата -виферон (по 500000 ME, ректально, ежедневно, 5 дней) у 12 детей. Комплексную иммунотерапию проводили у 12 детей путем одновременного применения следующих препаратов: виферон (по 500000 ME, ректально, ежедневно, 5 дней), таблеток гроприносина (по 500 мг внутрь, ежедневно в течение 5 дней), таблеток ликопида (по 1 мг внутрь, ежедневно в течение 10 дней). Перед проведением иммунокоррекции и после нее у детей, больных АД, производили определение показателей иммунологической реактивности организма.

В результате проведения комплексной иммунокоррекции в отличие от мо-ноиммунотерашш происходило достоверное увеличение числа Т-хелперов (CD4+ CD8-) на фоне нормального иммунорегуляторного индекса.

Применение виферона у детей, больных АД, не оказывало воздействия на число активированных Т-лимфоцитов (HLA DR+ CD3+). В результате комплексной иммунотерапии происходило достоверное увеличение числа активированных Т-лимфоцитов более чем в 2 раза.

04+С08-; 2 - СЭ2+С019-; 3 - С019+С02-; 4 - С056+СЭЗ-; 5 - HLADR+CDЗ+ ; □35+ ; 7 - 1дМ ; 8 - 1дв ; 9 - АФ ; 10 - ФЧ ; 11 - ХЛ спонт.; 12 - индекс стимул. В ХЛ

3. Изменения иммунного статуса у больных АД после комплексной унокоррекции.

В результате проведения моноиммунотерапии не наблюдалось изменений со стороны числа естественных клеток-киллеров (СВ56+ СБЗ-). Применение же виферона в комплексе с гроприноснном и ликопидом приводило к увеличению числа этих клеток у детей, больных АД, более чем в 2 раза по сравнению с исходным уровнем.

В процессе моноиммунотерапии у больных АД наблюдали снижение числа Т-клеток и ЕКК, несущих молекулы межклеточной адгезии ЬГ; А-2(С1)2+ СО 19-) до 86,8% по сравнению с исходным уровнем. Аналогичное снижение (до 81,4%) происходило в процессе комплексной иммунотерапии. Под действием виферона у больных АД происходило достоверное снижение числа активированных клеток - не Т-лимфоцитов (НЬА СЕ>3-) до 69,04%. Комплексное же применение препаратов не приводило к изменениям числа таких клеток.

Проведение моноиммунотерапии не влияло на показатели числа клеток, несущих рецепторы к СЗ-компоненту комплемента (СВ35+) и рецепторы к ИЛ-2 (С0122+). В процессе комплексной иммунотерапии у больных АД наблюдалось увеличение более чем в 2 раза числа клеток, экспрессирующих СЗ-рецепторы, однако не происходили изменения со стороны числа клеток с рецепторами для ИЛ-2.

Применение виферона не оказывало воздействия на число В-лимфоцитов (СО 19+ СБ2-) в крови детей, больных АД. Комплексное же применение виферона с гроприносином и ликопидом приводило к достоверному увеличению числа В-лимфоцитов у больных АД более чем в 2,5 раза в сравнении с исходным уровнем.

Проведение моноиммунотерапии у больных АД не вызывало изменений концентрации изучавшихся сывороточных иммуноглобулинов. В результате комплексной иммунокоррекции у детей, больных АД, происходило достоверное снижение концентрации до 82,58% и ^О - до 89,73%.

Изолированное применение виферона у детей, больных АД, не оказывало влияния на число нсйтрофильный гранулоцитов, обладающих фагоцитарной активностью. Комплексное же применение виферона с гроприносином и ликопидом приводило к достоверному увеличению активности фагоцитоза до 148,33% у детей, больных АД, в сравнении с исходным уровнем. Проведение моноиммунотерапии вызывало достоверное увеличение поглотительной способности у детей, больных АД до 192,4%. Результатом проведения комплексной иммунотерапии. явилось аналогичное увеличение до 125,53%.

В процессе моноиммунотерапии у детей, больных АД, не наблюдалось достоверных изменений показателей хемшноминесценции. Применение же комплексной иммунотерапии приводило к достоверному снижению показателя хемилюминесценции в спонтанном варианте до 45,73% у детей, больных АД. Одновременно в этой группе больных наблюдалось увеличение индекса стимуляции в тесте хемилюминесценции до 156,58%.

В результате моноиммунотерапии у больных АД происходило достоверное увеличение содержаши С4-компонента комплемента в 2,5 раза и не наблюдалось изменений в содержании СЗ-компонента. Комплексная иммунотерапия у детей, больных АД, не оказывала влияния на продукцию изучавшихся компонентов комплемента.

Применение виферона у детей, больных АД, не оказывало воздействия на показатели содержания изучавшихся иммуноцитокинов (ИФ-а, ИЛ-1, ИЛ-4) а также на показатель концентрации неоптерина. В процессе применения виферона в комплексе с гроприносином и ликопидом у детей, больных АД происходило статистически достоверное увеличение концентрации ИФ-а более чем в 6 раз и ИЛ-1 - до 146% по сравнению с исходным уровнем. В то же время, комплексная иммунокоррекция не оказывала влияние на уровень иеоптерина в сыворотке крови больных АД. В результате применения комплексной иммунокор-рекции у больных АД происходило достоверное снижение концентрации ИЛ-4 более чем в 2 раза с исходным уровнем.

Таким образом, применение виферона в лечении детей, больных АД, не оказывало существенного иммунокорригирующего действия. Комплексная иммунотерапия оказывала выраженное иммунокорригиругощее действие у детей, больных АД.

Подводя итоги по результатам данных иммунокоррекции, следует подчеркнуть, что они убедительно свидетельствуют о малой эффективности при БА и АД в случае проведения её с помощью отдельных иммунокорректантов. Наличие комбинированной дефектности иммунологической реактивности у детей, больных БА и АД, обусловливает необходимость применения комплексной иммунокоррекции с воздействием на все дефектные звенья иммунной системы, эффективность которой подтверждается результатами представленных исследований.

Заключение. Таким образом, нарушения деятельности иммунной системы у детей, больных БА и АД, имеют сходный характер и в целом включают наличие иммунодефицита по Т-клеткам и ИК-клеткам, клеточную недостаточность и нарушения в производстве иммуноглобулинов в гуморальном иммунитете, дефектность нейтрофильного фагоцитоза. Одновременно имеет место многофакторное развитие состояния гипосупрессии в системе иммунорегуляции.

Можно полагать, что иммунологическая гипосупрессия наряду с тем, что является известным патогенетическим фактором развития аллергии, способствует возникновению своеобразного состояния мононуклеарных фагоцитов у больных БА и АД, характеризующегося усиленной продукцией провоспали-тельных иммуноцитокинов и недостаточностью продукции интерферонов, ограничивающих развитие воспаления. Одновременно, состояние гипосупрессии служит патогенетической основой для развития аутоиммунных реакций, которые, в свою очередь, выполняют роль фактора индукции воспаления.

В итоге, усиленная продукция провоспалительных иммуноцитокинов и развитие аутоиммунных реакций на фоне иммунологической гипосупрессии индуцируют развитие воспаления гиперергического характера при БА и АД, с выраженным повреждением соответствующих тканей. В то же время, комбинированная иммунологическая недостаточность в различных звеньях иммунной системы наряду с усиленным клеточным и тканевым повреждением в очагах воспаления, по-видимому, способствуют трансформации острого воспаления в хроническое, что, очевидно, во многом определяет затяжной, хронический характер течения БА и АД (рис. 4).

В связи с этим возникает насущная необходимость разработки эффективных методов иммунокоррекции, направленных на оптимизацию воспаления, усиления физиологической иммуносупрессии, устранения аутоиммунных реакций, иммунологической недостаточности у больных БА и АД.

Выявленная нами комбинированность иммунопатологических состояний при данных заболеваниях, свидетельствует о целесообразности применения комплексной иммунокоррекции с использованием препаратов, корригирующих все звенья иммунной системы, в которых обнаружено наличие иммунологической недостаточности или гиперактивации, а также обладающих противовоспалительным действием.

Комплексная иммунотерапия с использованием лейкинферона, гроприно-сина, ликопида приводила к достоверному увеличению числа Т-хелперов при сохранении иммунорегуляторного индекса в пределах нормосупрессии, увеличивалось количество активированных Т-лимфоцитов, что должно было оптимизировать развитие гуморального и клеточного иммунного ответа при изучаемой патологии. Увеличивалось число естественных клеток-киллеров, выполняющих важную роль в клеточных механизмах противоопухолевой и противоинфекци-онной резистентности организма.

Комплексная иммунотерапия способствовала увеличению числа В-лимфоцитов и концентрации иммуноглобулинов А, связывающих и нейтрализующих аллергены в местах проникновения последних в организм.

В процессе комплексного применения иммунокорректантов увеличивалась фагоцитарная активность нейтрофилов с повышением их антигенперерабаты-ващих свойств, увеличивались резервные свойства фагоцитов в отношении переработки антигенов. Увеличение содержания в организме основных компонентов комплемента в процессе комплексной иммунотерапии свидетельствовало о повышении уровня неспецифических защитных реакций иммунной системы.

Важным результатом иммунокоррекции при БА в виде комплексной иммунотерапии является выраженное увеличение уровня интерферона в организме, который ограничивает иммунный ответ и воспаление в физиологических пределах необходимой достаточности и обладает противовирусным действием. Свидетельством усиления продукции у-шггерферона в организме является увеличение уровня неоптерина, которое происходило под действием комплексной иммунотерапии у больных БА при том, что увеличение концентрации неоптерина свидетельствует об активации Т-лимфоцитов.

Не менее важным результатом иммунокоррекции является снижение уровня интерлейкина-4, фактора активации В-лимфоцитов и продукции аллергических антител, а также существенного провоспалительного фактора.

Комплексная иммунотерапия у больных АД увеличивала число Т-хелперов на фоне нормального индекса иммунорегуляции, следствием чего может являться повышение прогивоинфекционной резистентности организма, стимуляция гуморального и клеточного иммунного ответа, оптимизация течения воспаления при атоническом дерматите. Одновременное увеличение числа активированных Т-лимфоцитов и числа естественных клеток-киллеров стимулирует

процессы распознавания антигенов и эффекторные реакции гуморального и клетчного иммунитета у таких больных.

Увеличение числа клеток, экспрессирующих СЗ -рецептор для комплемента в результате проведения комплексной иммунокоррекции усиливает опсони-зированный фагоцитоз, элиминацию иммунных комплексов из организма, и антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность, направленную против различных чужеродных для организма клеток.

Комплексная иммунотерапия у детей, больных АД, устраняет клеточную дефектность В-звена иммунной системы, умеренно снижает уровень иммуноглобулинов.

Увеличение под действием комплексной иммунотерапии числа активно фагоцитирующих клеток и их поглотительной способности повышает противо-инфекционную резистентность организма и усиливает процессы элиминации иммунных комплексов. Проведение комплексной иммунотерапии снижает продукцию активных форм кислорода интактными фагоцитами, что свидетельствовало о противовоспалительном действии комплекса использовавшихся препаратов. В то же время увеличиваются резервные потенции этих клеток в отношении переработки антигенов.

Увеличение уровня а-ИФ в крови детей, больных АД, под действием комплексной иммунотерапии, должно ограничивать гуморальный и клеточный иммунный ответ в физиологических пределах в силу его антипролиферативного действия, то есть - оптимизировать процесс воспаления в организме. Умеренное увеличение при этом уровня ИЛ-1 свидетельствует о стимулирующем влиянии использовавшихся иммунокорректантов на мононуклеарные фагоциты. Способность этого медиатора запускать гуморальный и клеточный иммунный ответа имеет важное значение в формировании противоинфекционной резистентности организма, а присутствие в высоких концентрациях ИФ-а должно нейтрализовать дополнительное провоспалительное действие ИЛ-1.

В процессе комплексной иммунотерапии у детей, больных АД, происходит снижение концентрации ИЛ-4, медиатора немедленной анафилактической аллергии и провоспалительного иммуноцитокина. Этот факт еще с одной стороны характеризует противовоспалительное действие комплексной иммунотерапии у детей, больных АД.

Суммируя результаты проведенных исследований, можно заключить, что иммунный статус детей больных БА и АД характеризуется нарушениями деятельности всех звеньев иммунной системы, что служит фактором перехода острого воспаления при данных заболеваниях в хроническое, фактором затяжного и рецидивирующего течения патологического процесса. Иммунокоррекция при БА и АД с помощью отдельных иммунокорректантов, даже таких активно действующих препаратов, как природные и рекомбинантные интерфероны, не дает положительного эффекта. Применение комплексной иммунокоррекции с целенаправленным воздействием на все звенья иммунной системы представляется более перспективным направлением в иммунологическом лечении указанных заболеваний, конечной целью которого является оптимизация процесса воспаления и достижение клинического терапевтического эффекта.

ВЫВОДЫ

1. У детей, больных БА и АД, имеет место универсальное многофакторное развитие состояния гипосупрессии в системе иммунорегуляции.

2. Недостаточность клеточного иммунитета, опосредуемого Т-лимфоцитами и ЫК-клетками; клеточная недостаточность, снижение или увеличение продукции иммуноглобулинов различных изотипов в гуморальном иммунитете; дефектность нейтрофильных фагоцитов представляют собой общие изменения иммунного статуса в механизмах нарушения иммунологической реактивности организма у детей, больных БА и АД.

3. Усиление продукции ФНО-а, ИЛ-1, обладающих провоспалительным действием и отсутствие увеличения продукции ИФ-а, обладающего антипроли-феративным действием, являются общими изменениями функциональной активности мононуклеарных фагоцитов в механизмах нарушения иммунологической реактивности у детей, больных БА и АД.

4. У детей, больных АД, выявлено наличие аутоиммунных реакций при аллергических заболеваниях, выполняющих роль одного из провоспалительных факторов в механизмах патогенеза заболевания.

5. Использование в лечении БА и АД у детей комплекса препаратов, оказывающих воздействие на все звенья иммунной системы и обладающих противовоспалительным действием, дает выражешшй иммунокорригирующий эффект.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. У детей, больных БА и АД, необходимо проводить комплексное иммунологическое обследование, включающее оценку иммунного, иммуноцитокино-вого, аутоиммунного статуса, результаты которого должны служить показаниями для назначения иммунокоррекции.

2. Основаниями для назначения иммунокоррекциия являются недостаточность в Т-звене иммунной системы, сочетание недостаточности и признаков гиперактивации в В-звене иммунной системы, в системе фаготцитирующих лейкоцитов.

3. В лечении детей, больных Б А и АД, нецелесообразно применять методы моноиммунотерапии, а необходимо проведение комплексной иммунокоррекции с использованием одного из препаратов интсрферонов, препаратов ти-момиметического действия и препаратов, стимулирующих фагоцитоз.

4. Проведение комплексной иммунокоррекции у детей с БА и АД следует проводить под контролем иммуномониторинга, включающего оценку состояния всех звеньев иммунной системы.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Механизмы развития аутоиммунной патологии // Сиб. Мед. Журн. 1998.-№4.-С.50-54

2. Сравнительная характеристика особенностей иммунного статуса детей больных бронхиальной астмой и атопическим дерматитом (сообщение 1) // Сиб. Мед. журн.- 2000.-№3.-с.36-40 (Соавт. Пономарева A.A., Артамонова Г.А., Дмитриева Л.А и др.)

3. Сравнительная характеристика особенностей иммунного статуса детей больных бронхиальной астмой и атопическим дерматитом (сообщение 2) // Сиб. Мед. журн.- 2000.-№4.-с.40-44 ( Соавт. Пономарева A.A., Артамонова Г.А., Дмитриева Л.А и др.)

4. .Особенности иммуноцитокинового и аутоиммунного статуса при некоторых заболеваниях воспалительного характера // Аллергология и иммунология.-2000.-т.1.-№2.- с. 132 (Тез.докл. III съезда иммунол. и аллергол. СНГ, Сочи, 2000)

5. Особенности иммунного статуса детей, больных бронхиальной астмой // Иркутский государственный медицинский университет, 2001.- Деп. в ВИНИТИ 19.04.01.- № 1019-В2001 (Соавт. Кирдей Е.Г., Скворцова Р.Г., Шин. карева В.М.)

6. í Особенности иммунного статуса детей, больных атопическим дерматитом // • Иркутский государственный медицинский университет, 2001,- Деп. в ВИ-

: НИТИ 19.04.01,- № 1020-В2001

7.; Peculiarities of immune status of children with bronchial asthma and atopic dermatitis // The Ninth Int. Symp. of the Japan-Russia Med. Exchange. Abstract.-Kanazava, 2001.- v.2 (suppl.).- p. 151 (Соавт. Maiboroda A.A., Kirdey E.G.)

8. Нарушения клеточного и гуморального иммунитета у детей, больных атопическим дерматитом.- Сиб. мед.журн..- 2002 (в печати)

Среди различных аллергических заболеваний бронхиальная астма (БА) и атопи-ческий дерматит (АД) в наибольшей степени имеют в своем патогенезе механизмы воспаления. Клинические проявления этих заболеваний во многом связаны с поражением соответствующих органов и тканей в силу развития в них воспалительных реакций. В настоящее время не вызывает сомнений ведущая роль иммунологических механизмов в развитии воспаления, а переход острого воспаления в хроническое в значительной степени обусловлен нарушениями деятельности иммунной системы организма.

Переход острого воспаления в хроническое прежде всего возникает в условиях иммунологической недостаточности в одном или нескольких звеньях иммунной системы, которая лежит в основе врожденных и приобретенных иммунодефицитных состояний. С другой стороны, массивное повреждение органов и тканей в процессе воспаления связано с состоянием гиперактивации одного или нескольких звеньев иммунной системы.

В частности, гиперактивация фагоцитов приводит к их усиленной дегрануляции и выбросу в ткани большого количества протеолитических ферментов, кислородных радикалов, обладающих тканеповреждающим действием, а также провоспалительных иммуноцитокинов, что придает процессу воспаления сверхвыраженный характер. Гиперактивация Т-звена иммунной системы приводит к образованию аутоцитотоксиче-ских Т-лимфоцитов, разрушающих клетки и ткани собственного организма. Состояние гиперактивации В-звена иммунной системы служит основой для продукции аутоанти-тел, обладающих цитотоксическим и тканеповреждающим действием.

Выявление иммунологической недостаточности или гиперактивации в различных звеньях иммунной системы, а также возможного сочетания этих состояний с одной стороны позволяет установить, уточнить патогенетические механизмы их развития, а с другой стороны - разработать методы целенаправленной иммунокоррекции. Включение необходимой коррекции иммунологической недостаточности или супрессивных воздействий на гиперактивированные звенья иммунной системы в комплекс лечебных мероприятий позволит, в свою очередь, оптимизировать, ограничить процессы воспаления при соответствующих заболеваниях и тем самым - добиться терапевтического эффекта.

Эти исследования представляются наиболее актуальными у детей, поскольку детский организм наиболее подвержен развитию нарушений деятельности иммунной системы, в том числе - при БА и АД.

Поэтому установление иммунологических механизмов развития воспалительных реакций при БА и АД у детей и разработка на этой основе целенаправленной иммуно-коррекции представляются достаточно актуальным.

Цель исследования: Выявить общие закономерности изменений иммунологической реактивности организма детей, больных БА и АД и разработать на этой основе эффективные методы иммунокоррекции.

Задачи исследования:

1. Провести сравнительную оценку иммунного статуса у здоровых детей и больных БАи АД.

2. Изучить продукцию провоспапительных иммуноцитокинов у здоровых детей и больных БА и АД.

3. Изучить аутоиммунные реакции у детей, больных БА и АД.

4. Разработать методы фармакологической иммунокоррекции у детей, больных БА и АД и изучить их эффективность.

Научная новизна. Впервые показано наличие общих по характеру изменений иммунного статуса у детей, больных БА и АД, выражающихся в недостаточности клеточного иммунитета, опосредуемого Т-клетками и NK-клетками, развитии клеточной недостаточности и нарушении продукции иммуноглобулинов в гуморальном иммунитете, дефектности нейтрофильного фагоцитоза. Эти изменения служат патогенетической основой хронизации процессов воспаления при указанных заболеваниях.

У детей, больных БА и АД выявлено неизвестное ранее состояние мононуклеар-ных фагоцитов, характеризующееся усиленной продукцией провоспапительных иммуноцитокинов при отсутствии усиления продукции интерферона-а (ИФ- а).

У детей, больных АД, впервые выявлено нарушение толерантности к аутоанти-генам, то есть развитие аутоиммунных реакций организма. В сыворотке крови детей, больных БА впервые выявлено увеличение уровня неоптерина, как интегрального показателя интенсивности продукции иммуноцитокинов, и снижение уровня а-фетопротеина (АФП), обладающего иммуносупрессивными свойствами.

Впервые выявлен положительный иммунокорригирующий эффект в результате действия комплекса препаратов, направленного на нормализацию интерферонового статуса, активности клеточного и гуморального звеньев иммунитета и фагоцитоза.

Теоретическая и практическая значимость.

Сравнение методов исследования иммунного статуса и отработка на этом материале новых подходов к эффективному использованию принципов доказательной медицины, позволило объединить результаты объективного анализа и синтез медицинской информации для принятия оптимальных решений при выборе того или иного лечения.

На основе выявленных универсальных механизмов нарушений иммунологической реактивности у детей, больных БА и АД предложен высокоэффективный комплексный метод иммунокоррекции в лечении таких больных. Схема иммунокоррекции включала препараты ИФ (лейкинферон или виферон), препараты тимомиметического действия (гропреносин), препараты, активирующие фагоциты (ликопид).

Результаты проведенных исследований внедрены в практику работы Иркутской областной детской клинической больницы и ГУЗ Иркутского областного диагностического центра.

Основные положения работы используются в педагогической, научной и клинической деятельности кафедр патологической физиологии и иммунологии с аллергологией, педиатрии №1, педиатрии №2 ИГМУ.

Положения, выносимые на защиту:

1. Изменения иммунорегуляции у больных БА и АД носят общий характер и выражаются в развитии многофакторной гипосупрессии, предрасполагающей к гиперактивации процессов воспаления.

2. Недостаточность в Т-звене иммунной системы, В-лимфопения с нарушениями процессов антителопродукции, дефектность фагоцитоза являются общими механизмами нарушения иммунологической реактивности у детей, больных БА и АД.

3. Увеличение продукции провоспалительных медиаторов - фактора некроза опухо-ли-а (ФНО-а) и интерлейкина-1 (ИЛ-1), свидетельствующее об активации моно-нуклеарных фагоцитов, и отсутствие при этом увеличения продукции ИФ-а представляют собой общие изменения иммуноцитокинового статуса в механизмах иммунологической реактивности у детей, больных БА и АД.

4. Сочетание иммунологической недостаточности и гиперактивации в механизмах иммунологической реактивности организма детей, больных БА и АД, служит базовой основой для хронизации процессов воспаления при указанных заболеваниях.

5. Комплексный метод иммунокоррекции в лечении дегей, больных БА и АД, обладает необходимой эффективностью по сравнению с моноиммунотерапией.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на итоговой научной конференции ИГМУ (2001), на III съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Сочи, 2000), на Европейском конгрессе по астме (Москва, 2001), на 9 международном медицинском симпозиуме Японско-Российской ассоциации медицинского обмена (Канадзава, 2001). По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, 1 отправлена в печать.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста Microsoft Word и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав описания собственных исследований, заключения и выводов. Диссертация иллюстрирована 31 таблицами и 9 рисунками. Указатель литературы включает 159 наименований работ отечественных и 77 наименований работ зарубежных авторов.

ВЫВОДЫ

1. У детей, больных БА и АД, имеет место универсальное многофакторное развитие состояния гипосупрессии в системе иммунорегуляции.

2. Недостаточность клеточного иммунитета, опосредуемого Т-лимфоцитами и NK-клетками; клеточная недостаточность, снижение или увеличение продукции иммуноглобулинов различных изотипов в гуморальном иммунитете; дефектность ней-трофильных фагоцитов представляют собой общие изменения иммунного статуса в механизмах нарушения иммунологической реактивности организма у детей, больных БА и АД.

3. Усиление продукции ФНО-а, ИЛ-1, обладающих провоспалительным действием и отсутствие увеличения продукции ИФ-а, обладающего антипролиферативным действием, являются общими изменениями функциональной активности мононук-леарных фагоцитов в механизмах нарушения иммунологической реактивности у детей, больных БА и АД.

4. У детей, больных АД, выявлено наличие аутоиммунных реакций при аллергических заболеваниях, выполняющих роль одного из провоспалительных факторов в механизмах патогенеза заболевания.

5. Использование в лечении БА и АД у детей комплекса препаратов, оказывающих воздействие на все звенья иммунной системы и обладающих противовоспалительным действием, дает выраженный иммунокорригирующий эффект.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. У детей, больных БА и АД, необходимо проводить комплексное иммунологическое обследование, включающее оценку иммунного, иммуноцитокинового, аутоиммунного статуса, результаты которого должны служить показаниями для назначения иммунокоррекцни.

2. Основаниями для назначения иммунокоррекциия являются недостаточность в Т-звене иммунной системы, сочетание недостаточности и признаков гиперактивации в В-звене иммунной системы, в системе фаготцитирующих лейкоцитов.

3. В лечении детей, больных БА и АД, нецелесообразно применять методы моноиммунотерапии, а необходимо проведение комплексной иммунокоррекцни с использованием одного из препаратов интерферонов, препаратов тимомиметического действия и препаратов, стимулирующих фагоцитоз.

Проведение комплексной иммунокоррекции у детей с БА и АД следует проводить под контролем иммуномониторинга, включающего оценку состояния всех звеньев иммунной системы.