Автореферат и диссертация по медицине (14.00.53) на тему:Возрастные изменения гормональных функций эпифиза и поджелудочной железы у обезьян и их коррекция пептидными препаратами эпифиза

На правах рукописи

ВЕНГЕРИН Арсен Арсенович

ВОЗРАСТНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ГОРМОНАЛЬНЫХ ФУНКЦИЙ ЭПИФИЗА И ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ У ОБЕЗЬЯН И ИХ КОРРЕКЦИЯ ПЕПТИДНЫМИ ПРЕПАРАТАМИ ЭПИФИЗА

14. 00. 53 -геронтология и гериатрия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург - 2005

Работа выполнена в ГУ НИИ медицинской приматологии РАМН (г. Сочи)

Научный руководитель:

доктор биологических наук Гончарова Надежда Дмитриевна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук Кветная Татьяна Викторовна

доктор биологических наук Ордян Наталья Эдуардовна

Ведущая организация:

ГУ НИИ онкологии им. H.H. Петрова Минздравсоцразвития РФ (Санкт-Петербург)

Защита состоится «_»__2005 года в «_» часов на

заседании Диссертационного совета Д601.001.01 при Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН (197110, Санкт- Петербург, пр. Динамо, 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН

Автореферат разослан «___»___2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

Козина Л. С.

JJD/fO

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Выраженные демографические изменения в структуре общества большинства развитых стран с резким увеличением доли лиц пожилого и старческого возраста определяют актуальность исследований фундаментального и прикладного характера, направленных на решение проблем данной категории населения. В частности, чрезвычайно важны исследования, направленные на решение проблем профилактики и лечения ряда широко распространенных возрастных заболеваний (инсомния, депрессии, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, гипертоническая болезнь, инфаркт миокарда, цереброваскулярные нарушения, остеопороз, сахарный диабет II типа и др.), а также предупреждения процессов преждевременного и/или ускоренного старения. Особый интерес в этой связи представляют исследования возрастных нарушений функции эндокринных желез и возможных путей их коррекции. Последнее объясняется важным значением эндокринных дисфункций в нарушении процессов жизнедеятельности и этиопетогенезе широкого спектра патологических состояний.

Установлено, что при старении у человека закономерно выявляются нарушения в функциях стероидпродуцирукнцих желез [Гончарова Н. Д. с соавт, 1986, 1997,2002; Дильман В. М., 1983; Touitou Y., Haus E., 2000; Ferrari Е. et al., 2001; Pederson W. A. et al., 2001; Rainey W. E. et al., 2002; Goncharova N. D., Lapin B. A., 2000, 2002, 20041, гипофиза [Touitou Y., Haus E., 2000; Ferrari E. et al., 2001], островкового аппарата поджелудочной железы [Touitou Y., Haus E., 2000; Barbieri M. et al., 2002; Bellino F. L., Wise P. M., 2003], эпифиза [Кветная T В. с соавт., 2005; Touitou Y., Haus E., 2000; Ferrari E. et al., 2000; Duffy J. F. et al., 2002; Reiter R. J. et al., 2002], щитовидной и паращитовидных желез [Touitou Y., Haus E., 2000; Chiovato L. et al-, 2004]. В последние годы значительно интенсифицировались исследования в области физиологии и патофизиологии эпифиза, приведшие к установлению важной роли возрастного понижения секреции мелатонина в патогенезе многих широко распространенных возрастных заболеваний (болезни Альцгеймера и Паркинсона, расстройств сна и памяти, депрессий, гипертонической болезни и др.) [Reiter R. J. et al., 2002; Benitez-King G. et al., 2003]. Установлена эффективность применения мелатонина для лечения такого рода расстройств [Малышева О. А., 1999; Rohr U. D., Herold L, 2002; Savaskan E., 2002; Skene D. J., Swaab D. F., 2003; Zhdanova I., 2005]. В эксперименте на животных было выявлено также геропротекгорное действие мелатонина [Анисимов В. Н., 2003; Pierpaoli W., Bulian D., 2001; Manda К., Bhatia A. L., 2003]. Однако хроническое применение мелатонина в ряде случаев сопровождалось возникновением злокачественных опухолей [Khavinson V. Kh. et al., 2000], в частности лейкозов [Rohr U. D., Herold J., 2002]. В этой связи существенный интерес представляет поиск стимуляторов эндогенной продукции мелатонина.

Ile менее интенсивно проводятся исследования и в области физиологии и патофизиологии островкового аппарата поджелудочной железы В настоящее время доказана ведущая роль возрастных нарушений чувствительности периферических тканей к инсулину и ß-клеток поджелудочной железы к глюкозе в развитии инсулиннезависимого сахарного диабета (ИНСД) [Аметов А. С., 2003; Kahn S. E., Porte D. Jr., 1990; Barbieri M. et al., 2002; Bellino F. L., Wise P. M., 2003; Berstein L. M., 2005]. Заболеваемость ИНСД в последние годы возрастает и является одной из причин преждевременной инвалидности и смертности лиц пожилого и старческого возраста. Однако, до сих пор остаются не ' ределяющие

чувствительность периферических тканей к инсулину и ß-клеток островков Лангерганса к глюкозе. Не разработаны также эффективные и безопасные средства их нормализации при старении. Основными препаратами в лечении ИНСД до сих пор остаются производные сульфанилмочевины (сульфаниламиды), в основе гипогликемического действия которых лежит главным образом стимуляция секреции инсулина. Однако, как свидетельствуют литературные данные [Зефирова Г. С., 1996], продолжительное лечение сульфаниламидами вызывает понижение чувствительности к ним и ослабление активности ß-клеток поджелудочной железы почти у трети больных. В этой связи весьма актуальны как исследования эндогенных и экзогенных причин возрастного понижения толерантности к глюкозе, так и поиски эффективных и нетоксичных средств повышения чувствительности периферических тканей к инсулину и ß-клеток островкового аппарата поджелудочной железы к глюкозе.

Анализ литературных данных по существующим в настоящее время подходам к коррекции возрастных нарушений гормональной функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы заставил обратить наше внимание на физиологически активные препараты эпифиза - эпиталамин и эпиталон [Кузник Б. И. с соавт. 1999; Khavinson V. Kh., 2002]. Эпиталамин представляет собой комплекс пептидов, выделенных из эпифиза животных, а теграпептид эпиталон (Ala-Glu-Asp-Gly) синтезирован на основе анализа аминокислотного состава эпиталамина в лаборатории химии пептидов Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН. Ранее было показано стимулирующее влияние эпиталамина на пинеальную секрецию мелатонина у стареющих грызунов [Бондаренко J1. А., Анисимов В. Н., 1992; Anisimov V. N. et al., 1992], а также нормализующие эффекты этого препарата на базальные уровни глюкозы в крови и чувствительность периферических тканей к инсулину у больных с ИНСД [Бондаренко Л. А., Анисимов В. Н., 1992; Кузник Б. И. с соавт., 1999; Anisimov V. N. et al., 1992; Khavinson V. Kh., 2002]. Был выявлен также стимулирующий эффект эпиталона на уровень мелатонина в плазме периферической крови в вечернее время у старых обезьян [Гончарова Н. Д. с соавт., 2001; Khavinson V. Kh. et al., 2001] В связи с вышеизложенным, оценка возможного корригирующего влияния эпиталамина, а также эпиталона на возрастные нарушения функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы представляет существенный интерес.

Не менее актуальным является выбор экспериментальной модели для проведения подобного рода исследований. Подавляющее количество работ но изучению возрастных особенностей функционирования эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы было выполнено на грызунах [Reiter R. J. et al., 1980; Mazera R. C. et al., 2000; Sanchez-Campos S. et al., 2001; Pierpaoli W., Bulian D., 2001; Cano P. et al, 2002]. В то же время известно, что грызуны, в отличие от человека, являются ночными животными. Поэтому, хотя у грызунов, как и у человека, мелатонин секретируется главным образом в ночное время, биологическая значимость этого явления у человека и грызунов может бьггь различной. В отличие от человека, грызуны не болеют и спонтанным ИНСД. Кроме того, для различных звеньев эндокринной системы характерны выраженные видовые различия [Анциферова Н. Д., 1997; Гончаров Н. П. с соавт., Г977; Гончарова Н. Д., Гончаров Н. П., 1989; Гончарова Н. Д., 1997; Гончарова Н. Д., Лапин Б. А., 2005; Weinbauer G. F., Nieschlag Е., 1999; Hornsby P. J., 1995; Barrou Z. et al., 1997; Miller В. A., 1999; Parker S. A. et al., 2000; Goncharova N. D., Lapin B. A., 2000, 2001]. Наиболее перспективной

моделью для проведения обсуждаемых исследований, по-видимому, являются

лабораторные приматы, по физиологии и биохимии эндокринных процессов, а также спектру патологических процессов весьма сходные с человеком [Анциферова Н. Д., 1997; Гончаров Н. П. с соавт., 1977, 1987; Гончарова Н. Д., 1997; Гончарова Н. Д., Лапин Б. А., 2005; Lapin В. A. et al., 1979; Weinbauer G. F., Nieschlag E., 1999; Goncharova N. D., Lapin В. А., 2000, 2001]. В частности, у обезьян, макак резусов, был отмечен спонтанный гиперинсулинемический сахарный диабет, по клинике и патогенезу сходный с ИНСД человека [Bodkin N. L. et al., 1991 ; Huang Ze et al., 1994].

Цель работы - изучение характера изменений функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы в процессе старения у лабораторных приматов и оценка возможности использования пептидных препаратов эпифиза (эпиталамина и эпиталона) для коррекции возрастных нарушений функций этих желез.

Основные задачи исследования

1. Изучение характера функционирования эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы при старении у самок макак резусов.

2. Изучение влияния пептидов эпифиза эпитал амина и эшггалона на гормональную функцию эпифиза и поджелудочной железы у самок макак резусов.

3. Оценка перспективности использования макак резусов в качестве экспериментальной модели при изучении характера и механизмов возрастных нарушений функции эпифиза и поджелудочной железы и их коррекции пептидными препаратами эпифиза.

Основные положения, выносимые на защиту

1. При старении у обезьян происходит снижение пинеальной продукции мелатонина в вечернее и ночное время.

2. В процессе старения у обезьян формируются выраженные нарушения в гормональной функции поджелудочной железы: понижается чувствительность периферических тканей к инсулину и ß-клеток островкового аппарата к глюкозе, повышается продукция инсулина.

3. Пептидные препараты эпифиза (эпиталамин и эпиталон) восстанавливают вечернюю и ночную продукцию мелатонина, базальные уровни глюкозы и инсулина, а также чувствительность периферических тканей к инсулину и ß-клеток островкового аппарата к глюкозе у старых обезьян

4 Макаки резусы - перспективная модель для изучения проблем старения эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы, а также средств коррекции возрастных нарушений их функций.

Научная новизна работы. Установлено, что концентрация мелатонина в плазме периферической крови у самок макак резусов, независимо от возраста, подвергается выраженному циркадианному ритму, сходному с циркадиагагоым ритмом секреции мелатонина у человека (минимальный уровень - в 16.00, максимальный-в 22.00 и 3.00).

Сравнительное изучение циркадианного ритма концентрации мелатонина в плазме периферической крови у макак резусов разного возраста позволило выявить, что при старении у обезьян, подобно человеку, резко снижается продукция мелатонина в ночные часы (21.00; 22.00; 3.00; 4.00).

Впервые продемонстрирован стимулирующий эффект эпиталамина (внутримышечно в дозе 5 мг/животное/сулси в течение 10 дней) на пинеальную продукцию мелатонина у старых обезьян в ночное время. У молодых животных эпиталамин не оказывал влияния на уровень мелатонина в крови.

Показано, что 10-дневное внутримышечное введение эпиталона в дозе 10 мкг/животное/сутки приводит к увеличению концентрации мелатонина в крови у старых обезьян в ночное время и пе оказывает влияния на уровень мелатонина у молодых животных.

Получены данные о существовании взаимосвязи между нарушениями гормональной функции поджелудочной железы и возрастными изменениями ряда антропометрических показателей у обезьян. В частности, установлено, что базальные уровни глюкозы и инсулина в крови положительно коррелируют с массой тела животных и окружностью тела в абдоминальной области. В то же время у старых обезьян масса тела и окружность в области живота достоверно выше, чем у молодых животных.

Впервые установлена способность эпиталона и эпиталамина к восстановлению у старых обезьян нарушенной толерантности к глюкозе, а также чувствительности р-клегок осгровкового аппарата поджелудочной железы к глюкозе. Выявлено, что восстанавливающий эффект 10-дневного введения чрезвычайно низких доз эпиталона (10 мкг/животное/сутки) на гормональную функцию поджелудочной железы частично сохраняется в течение 1-2 мес. после отмены препарата.

Теоретическое и практическое значение работы. Результат исследования вносят существенный вклад в понимание основных закономерностей нарушений функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы при старении и роли этих нарушений в формировании возрастных инволют ивных процессов, а также развития возрастной патологии

Обосновано использование макак резусов в качестве адекватной биологической модели для изучения проблем физиологического старения человека и возрастной патологии.

Теоретический и практический интерес представляют данные о восстанавливающих эффектах эпиталона и эпталамина на нарушающиеся с возрастом функции пинеальной железы и островкового аппарата поджелудочной железы. Теоретическое значение обусловлено важностью этих данных как для понимания биологической значимости пептидов эпифиза и возрастных особенностей их продукции, так и существующих функциональных взаимосвязей между пинеальной железой и островковым аппаратом поджелудочной железы. Практическое значение обусловлено перспективностью клинического применения эпиталона и эпиталамина для коррекции возрастных нарушений функции эпифиза и осгровкового аппарата поджелудочной железы.

Как практический, так и теоретический интерес представляют выявленные у животных корреляции между показателями функциональной активности островкового аппарата поджелудочной железы и такими антропометрическими показателями как масса тела и окружность тела в абдоминальной области. Увеличение массы тела и окружности живота указывают на повышение вероятности повреждения толерантности к глюкозе и повышения базальных уровней глюкозы и инсулина в периферической крови.

Результаты работы используются в лекционном курсе по эндокринологии и физиологии для студентов биологического факультета Сочинского филиала Российского университета дружбы народов и факультета физической культуры Сочинского государственного университета туризма и курортного дела.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на V Международном симпозиуме «Биологические механизмы старения» (Харьков, 2002), VT Европейском конгрессе по клинической геронтологии (Москва, 2002), Научно-практической конференции «Медицина будущего» (Краснодар-Сочи, 2002), III Европейском кошрессе по биогеронтологии (Италия, 2002), Международном экологическом форуме «Окружающая среда и здоровье человека» (Санкт-Петербург, 2003), Всероссийской конференции по нейроэндокринологии (Санкт-Петербург, 2003), Третьем Российском конгрессе по патофизиологии (Москва, 2004), Международной конференции «Стареющий народ» (Италия, 2004), XIX Съезде физиологического общества им. И. П. Павлова (Екатеринбург, 2004). По материалам диссертации опубликовано 15 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 112 страницах, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов и 2-х глав собственных исследований. Список цитированной литературы включает 42 отечественных и 183 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 15 рисунками и 15 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования Общая характеристика экспериментальных животных

Объектом исследования явились 66 клинически здоровых самок макак резусов (Macaca mulatto), с массой тела 4 - 6 кг, содержащихся в питомнике ГУ ПИИ медицинской приматолоши РАМИ (г. Сочи-Адлер). В зависимости от возраста животные были распределены в две фуппы. 1-ю группу составили 32 животных в возрасте 6-8 лет (молодые половозрелые), 2-ю группу - 34 животных в возрасте 20 -27 лет (старые животные).

Все эксперименты проходили в летне-осеннее время (июнь-сентябрь) в период с 2002 по 2003 г включительно. Животные обычно содержались в вольерах или клетках с групповым содержанием, а на время эксперимента были отсажены в индивидуальные метаболические клетки в изолированную комнату с контролируемым освещением (с 7.00 ч до 19.00 ч). Температура воздуха в комнате колебалась от 20 до 25°С. Животные получали сбалансированное питание в виде брикетированного корма, изготавливаемого по технологии западногерманской фирмы Altromin (Германия), а также дополнительно свежие овощи, фрукты и воду в неограниченном количестве. До проведения экспериментов животные проходили курс адаптации к условиям пребывания в метаболических клетках и процедуре взятия крови, по крайней мере, в течение 4-х недель.

Описание экспериментов

Изучение возрастных изменений гормональной функции эпифиза и влияния пептидных препаратов эпифиза на пинеальную продукцию мелатонина

Для изучения возрастных изменений гормональной функции эпифиза и влияния пептидных препаратов эпифиза на пинеальную продукцию мелатонина были проведены эксперименты 1 и 2.

Эксперимент 1. В эксперименте проводилась оценка возрастных изменений гормональной функции эпифиза. В опытах было использовано 26 самок макак резусов двух возрастных групп 6-8 лет (13 животных) и 20 - 26 лет (13 животных). После адаптационного периода у всех животных определяли базальные уровни мелатонина с учетом циркадианного ритма его секреции. У 12 обследуемых обезьян (6 старых и 6 молодых животных) взятие образцов крови проводили 5 раз в сутки через каждые 6 часов, начиная с 10.00 утра (10.00; 16.00; 22.00; 4.00 и 10.00 следующих суток). У остальных 14 обезьян (7 молодых и 7 старых животных) взятие образцов крови проводили 5 раз в сутки через каждые 6 часов, начиная с 9.00 утра, то есть в 9.00; 21.00; 3.00 и 9.00 следующих суток.

Эксперимент 2. В эксперименте изучали влияние пептидов эпифиза (эпиталона и эпиталамина) на пинеальную продукцию мелатонина. Фармакопейный препарат эпиталамин представляет собой комплекс пептидов, полученных методом уксуснокислой эстракции из пинеальных желез крупного рогатого скота, разработан в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН (рег.№ Р 90.250.6) [Кузник Б И с соавт, 1998; КЬаутчоп V. КЬ., 2002]. Эпиталон -тетрапептид А1а-СЛи-А$р-01у, синтезированный на основе анализа аминокислотного состава эпиталамина в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН [Кузник Б. И с соавт.998; КЬаУЮБоп V. КЬ, 2002].

Для изучения влияния эпиталона на функцию эпифиза в опытах использовали 9 молодых и 9 старых самок макак резусов После адаптационного периода у всех животных определяли базальные уровни мелатонина. Для этого взятие образцов крови проводили в 10.00; 16.00; 22 00; 4 00 и 10 00 следующих суток. Через 2 недели

6 молодым и 6 старым животным в течение 10 последовательных дней вводили эпиталон в дозе 10 мкг/животное в сутки. Параллельно контрольным животным (3 молодым и 3 старым) вводили плацебо (0,9% раствор хлористого натрия в воде) Взятие образцов крови проводилось 2 раза в сутки (10.00 и 22 00) на 7-й и 10-й дни после начала введения эпиталона либо плацебо.

Для изучения влияния эпиталамина на функцию эпифиза в опытах использовали

7 молодых и 7 старых обезьян После адаптационного периода у всех животных определяли базальные уровни мелатонина, для чего взятие образцов крови проводили в 9.00; 21.00; 3.00 и 9 00 следующих суток. Через 2 недели 4-м молодым и 4-м старым животным в течение 10 последовательных дней вводили эпиталамин в дозе 5 мг/животное в 1 сутки. Контрольным животным (3 молодым и 3 старым) вводили плацебо (0,9% раствор хлористого натрия). Взятие образцов крови проводилось на 10-й день введения эпиталамина либо плацебо в различное время суток (9.00; 21.00; 3.00 и 9.00 следующих суток).

Изучение возрастных изменений гормональной функции поджелудочной железы и влияния пинеальных пептидов (эпиталона и эпиталамина) на функцию островкового аппарата поджелудочной железы Для изучения возрастных изменений гормональной функции поджелудочной железы и влияния пептидов эпифиза (эпиталона и эпиталамина) на функцию островкового аппарата поджелудочной железы были проведены эксперименты 3 и 4

Эксперимент 3. В данном эксперименте проводилась оценка возрастных изменений гормональной функции поджелудочной железы С этой целью было использовано 28 животных (14 молодых и 14 старых). У всех животных взятие образцов крови проводили натощак в 9.00 - 9 30 ч. утра для последующей оценки

базальных уровней глюкозы и инсулина. Кроме этого у 7 молодых и 7 старых животных проводили глюкозотолерантный тест, для чего всем животным натощак в 9 00 - 9.30 ч. утра внутривенно вводили 40% расгвор глюкозы из расчета 300 мг/кг массы тела. Взятие образцов крови проводили до введения глюкозы (0) и через 5, 15, 30, 60 и 90 мин. после ее введения. Четырнадцать других животных (7 самок в возрасте 6-8 лет и 7 самок в возрасте 20-27 лет) использовали для проведения инсулинотолеран гного теста. Тест проводили по Цлафу (Цюхно З.И. с соавт., 1981.). Для этого инсулин короткого действия ("Актрапид" фирмы "Ново Нордиск", Дания) вводили обезьянам внутривенно в дозе 0,1 ЕД/кг массы чела в 1 мл физиологического раствора в 9.00 ч. утра. Взятие образцов крови проводили до введения инсулина (0) и через 30,90 и 120 мин. после его введения.

Эксперимент 4. В эксперименте изучалось влияние пептидов эпифиза (эпиталона и эпиталамина) на гормональную функцию поджелудочной железы у макаков резусов разного возраста. Все животные, у которых проводился глюкозотолерантный тест в базальных условиях, были использованы для изучения влияния эпиталона на гормональную функцию поджелудочной железы. Животные, у которых в базальных условиях проводился инсулинотодерантный тест, были использованы для изучения влияния эпиталамина на гормональную функцию поджелудочной железы.

Для изучения влияния эпиталона на гормональную функцию поджелудочной железы использовали 7 молодых и 7 старых обезьян. У всех животных проводили глюкозотолерантный тест по выптеуказанной схеме (см. эксперимент 3) 4 раза на протяжении эксперимента: до введения эпиталона, на 9-й день введения, а также через 1 мес. и 2 мес. после его отмены.

Для изучения влияния эпиталамина на эндокринную функцию поджелудочной железы в опытах использовали 7 молодых и 7 старых обезьян. Эпиталамин вводили 4-м молодым и 4-м старым животным в дозе 5 мг в 1 сутки на одно животное в течение 10-ти последовательных дней. Параллельно контрольным животным (3 молодым и 3 старым) вводили плацебо (0,9% раствор хлористого нагрия). Инсулинотолерантный тест проводили по указанной выше схеме (см. эксперимент 3) 2 раза в течение эксперимента: за 1 мес. до начала введения эпиталамина или плацебо и на 10-й день введения эпиталамина или плацебо.

Определение концентрации гормонов и глюкозы в плазме периферической крови

Взятие всех образцов крови проводили из локтевой или бедренной вены с использованием гепарина или ЭДТА в качестве антикоагулянтов. После забора кровь центрифугировали при 2000g и температуре 4°С. Плазму отделяли и хранили при температуре -70°С до проведения анализа.

Определение уровня мелатонина и инсулина в плазме проводили не позже, чем через 1 мес. после забора образцов крови. Концентрацию мелатонина определяли иммуноферментным методом, включающим предварительную очистку гормона на хроматографических колонках, с помощью наборов реактивов «Melatonin-ELISA» (IBL, ФРГ) Концентрацию инсулина измеряли иммуноферментным методом с использованием коммерческих наборов (DSL, США). Коэффициент вариации значений мелатонина в пределах одной и разных реакций не превышал 15%. Коэффициент вариации значений инсулина в пределах одной и разных реакций не превышал соответственно 10 и 12%. Для оценки циркадианного ритма концентрации

мелатонина в плазме периферической крови рассчитывали среднесуточную концентрацию мелатонина (пг/мл) и амплитуду циркадиатшого ритма. Амплитуда циркадианного ритма мелатонина рассчитывалась как разность между его максимальным уровнем (в 22.00) и минимальным (в 16.00) в пг/мл. Дополнительно, амплитуда циркадианного ритма мелатонина рассчитывалась в процентах от его среднесуточной концентрации.

Наряду с мелатонином и инсулином в ряде образцов плазмы крови проводилось определение уровня эстрадиола, дегидроэпиандростерона (ДГА), дегидроэпиандростерона сульфата (ДГАС) и максимальной связывающей способности секс-стероидсвязывающего глобулина (SHBG). Концентрацию эстрадиола, ДГА и ДГАС определяли иммуноферментными методами с использованием коммерческих наборов (DSL, США), a SHBG - методом конкурентного связывания [Гончарова Н. Д. с соавт., 1986].

Концентрацию глюкозы в плазме 1фови определяли ппокозооксидантным методом. Для оценки толерантности к глюкозе рассчитывали показатель скорости «исчезновения» глюкозы из циркуляции в течение первых 15 мин. после внутривенного введения стандартной дозы глюкозы (300 мг/кг массы тела). Скорость «исчезновения» глюкозы рассчитывали, исходя из данных, что объем циркулирующей крови приблизительно составляет 7% от массы тела [Лапин Б А с соавт., 1987]. Поскольку масса тела обследуемых самок макак резусов составляла в среднем 5 кг., то рассчитанный объем крови составлял приблизительно 650 мл. Скорость «исчезновения» глюкозы рассчитывали в процентах от исходного общего уровня глюкозы в 1 мин.

Статистическую обработку результатов экспериментов проводили общепринятыми статистическими методами с использованием t-кригерия Стьюдента, корреляционного и регрессионного анализа.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Гормональная функция эпифиза при старении.

Анализ уровня мелатонина в плазме периферической крови у самок макак резусов двух возрастных групп (6-8 лет - молодые половозрелые и 20-27 лет - старые животные) позволил установить, что концентрация мелагонина у обезьян любого возраста подвергается выраженному циркадианному ритму с максимальными значениями в ночное время (22 00 - 4.00) и минимальными значениями в 16.00. Так, концентрация мелатонина в 22 00 составляла 87,6±6,9 пг/мл у молодых животных и 56,8±4,6 пг/мл у старых животных, а в 16 00 - соответственно 9,00±2,0 пг/мл у молодых и 9,6±1,0 пг/мл у старых животных (рис 1).

I—■—6-8 лет

[--■»--20-27 лег

О

10 16 22 4 10 Время, часы

Рис. 1. Концентрация мелатонина в плазме периферической крови в различное время суток у самок макак резусов разного возраста (М+т, пг/мл). *Р<0,01, **Р< 0,001- по отношению к соответствующим показателям у старых обезьян

Уровни мелатонина в ночное время у старых обезьян были статистически ниже по сравнению с соответствующими значениями у молодых животных (рис 1). Среднесуточная концентрация мелатонина у старых животных была также ниже по сравнению с молодыми животными: 30,0±2,5 пг/мл и 44,2±4,0 пг/мл, соответственно (Р<0,01). Выраженным изменениям в процессе старения подвергалась и амплитуда циркадианного ритма уровня мелатонина в крови, как в абсолютных, так и относительных единицах. Так, абсолютные значения амплитуды циркадианного ритма у молодых животных составляли 78,6±7,0 пг/мл в сравнении с 47,2±5,0 пг/мл у старых животных (Р<0,001), а относительные (в процентах от среднесуточной концентрации мелатонина) - соответственно, 77,8±6,0 % у молодых и 57,3±3,0% у старых животных (Р<0,01). Таким образом, при старении животных наблюдается тенденция к сглаживанию циркадианных ритмов концентрации мелатонина.

Аналогичные данные были ранее получены для человека [Touitou Y. et al., 1981; Touitou Y., Haus E., 2000; Ferrari E. at al., 1996, 2001; Reiter R. J. et al., 2002] и грызунов [Greenberg L. H., Weiss В., 1978; Reiter R J. et al., 2002]. Возрастные изменения в пинеальной секреции мелатонина могли быть обусловлены как нарушением чувствительности супрахиазматического ядра гипоталамуса (СХЯ) и/или сетчатки глаза к стимулам, так и, возможно, адренергической регуляции секреции мелатонина. В пользу 1-го предположения указывают данные о развитии при старении в СХЯ и сетчатке человека и животных струкгурных и функциональных изменений [Watanabe А. et al., 1995; Asai М. et al., 2001]. Второе предположение поддерживается данными о выраженном понижении уровня норадреналина в различных отделах головного мозга у старых макак резусов [Beal М. F., 1993], а также о понижении плотности бета-адренорецепторов на пинеалоцитах у старых крыс [Greenberg L. Н., Weiss В., 1978].

Таким образом, полученные экспериментальные данные указывают как на принципиальное сходство циркадианных ритмов концентрации мелатонина в крови, так и характера возрастных изменений секреции мелатонина у человека и обезьян. Это дало нам основание для использования макак резусов в качестве

экспериментальной модели для изучения эффектов эпиталона и эпигаламина на пинеальную секрецию мелатонина.

Эффекты эпиталона и эпиталамина на уровень мелатонина в плазме крови у самок макак резусов разного возраста.

Введение эниталона не оказывало влияния на уровень мелатонина в плазме крови у молодых обезьян (табл. 1). В то же время, у старых животных отмечалось выраженное повышение уровня мелатонина (в 1,7-1,8 раза) в 22.00 ч на 7-й и 10-й дни введения эпиталона по сравнению как с исходным уровнем, так и с соответствующими значениями мелатонина в контрольной группе При этом концентрация мелатонина у старых животных на 7-й и 10-й дни введения эпиталона достигала уровней мелатонина у молодых животных (табл. 1).

Таблица 1

Динамика концентрации мелатонина в ответ на введение эпиталона (10 мкг/жнвотное/сутки в течение 10 суток, внутримышечно) или плацебо у самок макак резусов разного возраста

(МЛ-ш, щ /мл)

Возраст, лет До введения эпиталона На 7-й день введения эпиталона На 10-Й день введения эпиталона

Время суток, час

10.00 22.00 10.00 22.00 10 00 22.00

6-8 (п-6) 13,9±4,1 86,0±7,2 14,0±0,9 84,0±4,1 12,8x1,5 89,6*7,0

20-27(п=6) 10,3±0,9 44,8±8,0 15,8=3,8 75,5±8,9*"ь 20,0±6,5 80,7±9,0"-ь

До введения плацебо На 7-й день введения плацебо На 10-И день введения плацебо

6-8 (п=3) 15,<Ш,2 78,6±6,0 15,0±1,9 80,0±4,0 13,8±1,1 79,6±6,0

20-27 (п=3) 12,3±0,9 40,8±6,0 14,8±2,5 39,5±4,9 15,0±2,5 41,1±б,0

аР<0,05 - по отношению к значениям мелатонина до введения эпиталона; Р^0,01 по отношению к значениям мелатонина у контрольных животных, п - количество животных

Введение плацебо не оказывало влияния на уровни мелатонина в плазме крови, как молодых, так и старых животных.

Введение эпиталамина, так же как и эпиталона, практически не оказывало влияния на концентрацию мелатонина в крови у молодых обезьян. В то же время, у старых обезьян на 10-й день введения эпиталамина отмечалось статистически достоверное повышение уровня мелатонина в плазме крови в 21 00 ч и 03.00 ч. по сравнению с исходным уровнем (соответственно, 77*9 пг/мл и 71 ±6 иг/мл против 43+6 пг/мл и 53±6 пг/мл до начала введения эпиталамина, Р<0,05).

Выявленное стимулирующее влияние эпиталона и эпиталамина на концентрацию мелатонина в плазме крови у старых обезьян хорошо соитсуется с результатами работ, показавших аналогичный эффект эпиталамина у крыс [Бондаренко Л. А., Анисимов В. Н., 1992; Ашзшюу V. N. et а1., 1992], и стимулирующий эффект эпиталона у обезьян в 21.00 ч. [Гончарова Н Д с соавт., 2001; КЬауцкоп V. КЪ. й а1., 2001]. В основе стимулирующего влияния пептидов эпифиза может лежать как повышение снижающейся с возрастом чувствительности сетчатки глаза и СХЯ к стимулам, так и восстановление катехоламинергической регуляции функции эпифиза. Было показано, что введение эпиталамина нормализует уровни нейромедиаторов в гипоталамусе у старых мышей [Лабунец И. Ф. с соавт., 2003].

Таким образом, результаты проведенного исследования указывают на выраженное ослабление с возрастом функциональной активности эпифиза.

Десятидневное внутримышечное введение низких доз пептидов эпифиза эпиталамина и эпиталона приводило к восстановлению нарушенной секреции мелатонина у старых обезьян и не оказывало влияния на пинеальную функцию у молодых животных. Можно предположить, что данные препараты являются перспективными средствами коррекции возрастных нарушений функции эпифиза.

Гормональная функция островкового аппарата поджелудочной железы при

старении

Базальные уровни глюкозы в плазме крови и уровни шюкозы в различные интервалы времени после введения стандартной дозы глюкозы (5, 15, 30 и 60 мин.) выше у старых животных по сравнению с молодыми (табл. 2). Базальные уровни инсулина и уровни инсулина через 30 и 60 мин после введения глюкозы также были выше по сравнению с молодыми животными (рис. 2). Однако, в противоположность повышению уровня глюкозы, концентрация инсулина через 5 мин после введения глюкозы у старых животных была ниже по сравнению с молодыми животными (рис. 2).

Площади под кривыми изменений уровня глюкозы в крови в ответ на введение стандартной дозы глюкозы у старых животных в базальных условиях были выше по сравнению с молодыми животными - 479,6±38,0 ммоль/л*мин против 294,9±9,3 ммоль/лхмин, Р<0,001 (табл. 2) Скорость «исчезновения» глюкозы у старых животных была статистически значимо ниже по сравнению с молодыми животными (4,3±0,1 % в 1 мин. против 5,3±0,05 % в 1 мин., Р<0,001).

Таблтща 2

Динамика уровня глюкозы и площадь под кривой ответа концентрации глюкозы на введение стандартной дозы глюкозы (300 мг/кг м. т. в/в) у самок макак резусов разных возрастных групп до введения эпи галона, па фоне введения эпиталона в через 1 я 2 месяца после его отмены

(М±т, ммоль /л)

Возраст животных, лет Время после введения глюкозы, мин Площадь ответа, ммоль/лхмин

0 | 5 | 15 | 30 | 60 | 90

Концентрация глюкозы, мчочь/л

До введения эпиталона

6-8 лет 3,8±0,1 9,2+0,4 5,6±0,2 3,94=0,4 3,4+0,1 ,3,5-1-0,2 I 294,9+9,3

20 - 27 лет 4,0±0,4 ¡2,0+0,5 Р<0,05 9,8±0,6 Р<0,001 7,8±0,9 Р<Я,001 5,0+0,4 Р<0,001 4,1+0,5 479,6±38,0 Р<0,001

11а фоне введения эпиталона

6-8 лет 3,6±0,3 8,9±0,7 6,1 ±0,6 3,9*0,6 3,8±0,3 3,7+0,5 343,3±48,2

20 - 27 лет 3,8+0,4 8,4±0,6 Р'<0,001 6,8+0,8 Р'<0,01 5,7+0,9 3,9±0,4 Р'<0.05 3,1±0,2 388,9+43,6

Через 1 месяц после отмены эпиталона

6-8 лет 3,8+0,2 8,2+0,3 7,2±0,6 4,9+0,5 3,4±0,1 4,1±0,1 | 353,0+19,9

20-27 лет 4,1 ±0,3 9,5±0,7 ^<0,001 8,4+0,8 7,7±0,6 Р<0,01 5,2+0,5 Р<0,01 4,5+0,7 | 480,0+55,0 | Р<0,05

Через 2 месяца после отмены эпиталона

6-8 лет 3,7+0,3 8,4±1,1 5,9+0,5 4,1±0,56 3,2±0,17 3,1±0,1 293,2±25,0

20 - 27 лет 4,2±0,4 8,6+0,7 Р'<0,05 8,1 ±0,6 Р<0,01 Р'<0,05 7,4±1,0 Р<0,01 5,3+0,9 Р<0,05 4,1-1-0,6 451,0+46,0 Р<0,01

Р - достоверность различий по отношению к соответствующим значениям у молодых животных, Р' - достоверность различий по отношению к соответствующим значениям до введения эпитаяона

В ответ на введение инсулина у старых животных уровень глюкозы через 15 и 30 мин снижался по сравнению с молодыми животными, и его восстановление происходило медленнее, чем у молодых животных. Так, если у молодых животных концентрация глюкозы возвращалась к исходным значениям через 120 мин после введения инсулина, то у старых животных в этот промежуток времени она составляла лишь 61,8±2,6% от исходного уровня.

Представленные данные указывают на то, что вопреки отсутствию значимых различий в базальных уровнях инсулина выраженные возрастные нарушения гормональной функции поджелудочной железы выявляются в условиях активации островкового аппарата поджелудочной железы. По-видимому, речь идет о понижении чувствительности периферических гканей к инсулину. Это подтверждается данными о понижении скорости «исчезновения» экзогенной глюкозы у старых животных по сравнению с молодыми, а также результатами инсулинотолерантного теста.

г

£ X

4 &

X

5

140

120 i 100 80 -60 -40 ■ 20 -0

5 15 30 60 Время, мнн

Рис. 2. Динамика уровня инсулина в плазме периферической крови у самок макак резус разного возраста в ответ на введение стандартной дозы глюкозы (300 мг/кг массы тела, внутривенно) (М±т, мМЕ/л).

* /'< 0,05 по отношению к соответствующим значениям у молодых животных

Однако, параллельно снижению чувствительности периферических тканей к инсулину у старых животных, по-видимому, имеет место понижение чувствительности ß-клеток островкового аппарата поджелудочной железы к глюкозе Это подтверждается установленным фактом, что концентрации глюкозы и инсулина у старых животных изменяются в противоположных направлениях через 5 мин. после введения глюкозы. Аналогичные изменения в функции островкового аппарата поджелудочной железы при старении у обезьян и человека были отмечены и другими исследователями [Аметов А С., 2002; Roth G S et al., 2001; Bellino F. L., Wise P. M., 2003; Gresl Т. A. et al., 2003].

Следует отметить, что в работе была выявлена положительная корреляция между базальными значениями концентрации глюкозы в крови и массой тела (г-10,525), базальной концентрацией глюкозы и окружностью в области живота (г=+0,706), базальными уровнями инсулина в крови и массой тела (г=+0,665), а также базальными уровнями инсулина и окружностью живота животных (г=+0,764). Эти

корреляции наиболее четко прослеживались в группе старых обезьян. Они указывают на существующую ассоциацию возрастных нарушений функции островкового аппарата поджелудочной железы с возрастными изменениями ряда антропометрических показателей (массы тела, окружности тела в абдоминальной области). Таким образом, полученные экспериментальные данные указывают на принципиальное сходство возрастных изменений функции р-клеток островкового аппарата поджелудочной железы у человека и макак резусов. Это дало нам основание для использования макак резусов в качестве экспериментальной модели для изучения эффектов пептидов эпифиза на эндокринную функцию поджелудочной железы.

Эффекты эпиталона и эпнталамина на функцию островкового аппарата поджелудочной железы у самок макак резусов разного возраста.

В ответ на введение эпиталона у старых животных выявлена тенденция к понижению базальных уровней глюкозы (3,8±0,4 ммоль/л против 4,0±0,4 ммоль/л до введения эпиталона) и изменения в динамике уровня глюкозы (табл. 2). На фоне введения эпиталона уровень глюкозы у старых животных понижался через 5, 15 и 60 мин. после введения стандартной дозы глюкозы. В ш же время, у молодых животных на фоне введения эпиталона не отмечалось выраженных изменений ни в базальном уровне глюкозы, ни в динамике уровня глюкозы в ответ на введение стандартной дозы глюкозы.

Площадь под кривыми изменений уровня глюкозы в крови в ответ на введение стандартной дозы глюкозы у старых животных, получавших эпиталон, слегка понижалась (388,9±43,6 ммоль/лхмин против 479,6x38,0 ммоль/лхмин до введения эпиталона), приводя к сглаживанию выраженных возрастных различий в площадях под кривыми изменений уровня глюкозы, выявленных у этих же животных в базальных условиях (габл. 2). Введение эпиталона приводило также к статистически значимому повышению скорости «исчезновения» глюкозы у старых животных (5,0+0,2% в 1 мин против 4,3*0,1% в 1 мин до введения эпиталона, Р<0,01) и не вызывало изменений в случае молодых животных (5,2+0,2% в 1 мин против 5,3±0,05% в 1 мин, Р>0,05).

Через 1 и 2 мес. после отмены эпиталона базальные уровни глюкозы, уровни глюкозы, измеренные через 30, 60 и 90 мин. после введения стандартной дозы глюкозы, а также площадь под кривой ответа уровня глюкозы в крови возвращались к исходным значениям (табл. 2). Однако пониженные в результате введения эпиталона уровни глюкозы через 5 и 15 мин после введения стандартной дозы глюкозы не возвращались к исходным значениям (табл. 2). Тенденцию к повышению выявляла и скорость «исчезновения» экзогенной глюкозы (4,7±0,3% в 1 мин через 1 месяц после отмены эпиталона и 4,96±0,20% в 1 мин через 2 мес после отмены эпиталона против 4,3±0,1% в 1 мин в базальных условиях).

Базальные уровни инсулина после введения эпиталона снижались, а динамика уровней инсулина в ответ на введение стандартной дозы глюкозы у старых животных была сравнима с таковой у молодых животных. Следует однако отметить, что относительное увеличение концентрации инсулина у старых животных через 5 мин. после введения глюкозы резко увеличивалось (320±29% против 198±40% до введения эпиталона, Р<0,05), а через 60 мин статистически значимо понижалось (69±8% против 117±20% до введения эпиталона, Р<0,05). Повышение концентрации инсулина у

старых животных через 5 мин после введения глюкозы при одновременном понижении содержания глюкозы указывает на восстанавливающее влияние эпиталона, прежде всего, на первую фазу секреции инсулина, связанную с пулом инсулина быстрого реагирования. По-видимому, эпиталон повышает чувствительность р-клеток островков Лангерганса к высоким концентрациям глюкозы. Наряду с восстанавливающим эффектом эпиталона на раннюю фазу секреции инсулина, эпиталон оказывает также влияние и на 2-ю фазу секреции инсулина, делая ее более пластичной. Так, достоверное понижение уровней инсулина отмечалось у старых животных через 30 и 60 мин после нагрузки глюкозой по сравнению с соответствующими значениями у тех же животных до введения эпиталона (рис. 3). Восстановление уровней инсулина через 30 и 60 мин, по-видимому, обусловлено повышением чувствительности периферических тканей к инсулину. Об этом свидетельствуют данные об одновременном понижении у старых животных уровней инсулина и глюкозы в эти промежутки времени, полученные при проведении глюкозшолерантного теста на фоне введения эпиталона (рис. 3, табл. 2). Повышение толерантности к глюкозе у старых животных частично сохранялось через 1 мес и даже 2 мес после отмены эпиталона.

О 5 15 30 60

Время, мив

Рис. 3. Динамика уровня инсулина в плазме периферической крови у самок макак резусов разного возраста в ответ на введение стандартной дозы глюкозы (300 мг/кг массы тела, внутривенно) на 9-й день введения эпшаяона (М + т, мМЕ/л).

1)*Р<0,05, 1)***Р<0,001 - по отношению к соответствующим мочениям до введения эпиталона.

Эксперименты с изучением влияния эпиталамина на функцию островкового аппарата поджелудочной железы позволили выявить частично восстанавливающий эффект этого препарата на чувствительность периферических тканей к инсулину у старых животных и отсутствие влияния на чувствительность последних к инсулину у молодых животных. Так, у старых животных в результате применения эпиталамина отмечалась тенденция к понижению базальных уровней глюкозы (3,8+0,7 ммоль/л на 10-й день введения эпиталамина против 4,4±0,3 ммоль/л до введения эпиталамина) и значимое понижение концентрации глюкозы через 30 мин после введения стандартной дозы инсулина (1,2±0,2 ммоль/л против 1,8+0,2 ммоль л в контрольной группе, Р<0,05).

Восстанавливающий эффект пептидов эпифиза на функцию поджелудочной железы может быть обусловлен их стимулирующим влиянием на секрецию мелатонина. Действительно, в поджелудочной железе обнаружены специфические рецепторы к мелатонину [Peschke Е et al., 2000; Kemp D M. et al., 2002]. Введение мелатонина здоровым крысам среднею возраста вызывало понижение у них базального уровня инсулина до значений, регистрируемых у молодых животных [Rasmussen D. D., et al. 1999]. Введение мелатонина пинеалэкгомировашшм крысам вызывало более значительное повышение уровня инсулина в крови в ответ на прием пищи [la Fleur S. Е. et al., 2001]. Имеются также доказательства возможности прямою ингибирующего влияния мелатонина на функциональную активность (3-клеток островкового аппарата поджелудочной железы [РеьсЫсс Е. et al., 1997].

Восстанавливающий эффект мелатонина на функцию островкового аппарата поджелудочной железы может быть обусловлен стимуляцией секреции гормона роста и соматомединов. Действительно, рядом авторов было показано, что мелатонин усиливал индуцированную физической нагрузкой секрецию соматотропного гормона и соматомедина С у здоровых мужчин [Meeking et al, 1999]. Кроме того, известно, что при старении резко снижаются в крови уровни как соматотропного гормона, так и соматомедина С [Ferrari et а), 2000; Touitou Y. Haus E., 2000; Khan at al., 2002]. Можно предположить также, что пептиды эпифиза восстанавливают функцию островкового аппарата поджелудочной железы путем нормализации тонуса симпатических и парасимпатических нервных путей, участвующих в ее регуляции, в частности путем нормализации синтеза соответствующих нейромедиаторов и/или модулирования активности их рецепторов В этой связи следует отметить, что старение обезьян сопровождается нарушением уровня ряда нейромедиаторов в тканях мозга, в том числе норадреналина и ацетилхолина [Beal M. F , 1993; Birthelmer A. et al. 2003], a эпиталамин способен частично восстанавливать дисбаланс нейромедиаторов в моз1е [Лабунец И Ф с соавт., 2003]. В любом случае эпиталон и эпиталамин могут быть перспективными средствами для коррекции возрастных эндокринных дисфункций у приматов.

ВЫВОДЫ

1. При старении у обезьян снижаются содержание мелатонина в вечерние и в ночные часы, среднесуточная концентрация мелатонина и амплитуда циркадианного ритма уровней мелатонина в периферической крови.

2. Функция островкового аппарата поджелудочной железы у обезьян подвергается выраженным изменениям в процессе старения: понижается чувствительность периферических тканей к инсулину и (5-клеток островкового аппарата к глюкозе, повышаются базальные уровни инсулина и глюкозы в периферической крови.

3. При сгарении увеличиваются масса тела животных и окружность тела в абдоминальной области, что положительно коррелирует с повышением базальных уровней инсулина и глюкозы в крови, а также понижением толерантности к глюкозе.

4. Пептидный препарат эпифиза эпиталон восстанавливает нарушенную при старении у обезьян вечернюю и ночную продукцию мелатонина, базальные уровни глюкозы и инсулина в крови, а также чувствительность периферических тканей к инсулину и р-клеток островкового аппарата к глюкозе.

5. Пептидный препарат эпифиза эпиталамин восстанавливает нарушенные при старении у обезьян уровни мелатонина в плазме периферической крови в вечерние и ночные часы, концентрацию глюкозы, а также чувствительность периферических тканей к инсулину.

6. Макаки резусы - перспективная модель для изучения проблем старения эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы, а также средств коррекции возрастных нарушений их функций.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Эпиталон и эпиталамин перспективны для коррекции возрастных нарушений функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы.

2. Установленные нормативные значения уровней мелатонина, глюкозы и инсулина в крови, а также параметры глюкозо- и инсулинотолерантного гестов у самок макак резусов рекомендуется использовать как при проведении экспериментальных работ с обезьянами, так и для выявления животных с нарушенной толерантностью к ппокозе и больных сахарным диабетом.

3 Выявленные у животных корреляции между уровнями инсулина и глюкозы в крови, с одной стороны, и массой тела и окружностью тела в абдоминальной области, с другой стороны, следует использовать ветеринарным врачам при практической работе с макаками резусами.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Возрастные изменения юрмональной функции поджелудочной железы и регутяции уровня глюкозы в крови у обезьян / Н. Д. Гончарова, А. А. Венгерин. Т. Э. Oí апян, Б А Jlamra // Бюлл. эксп. биологии и медицины - 2004. - Т. 137, № 3. - С. 317-320

2 Возрастные изменения регуляции уровня глюкозы в крови у обезьян / Л. А. Венгерин, Н. Д. Гончарова, С А Смелкова, Б. А Лапин // Альманах «Геронтология и гериатрия» -2004. - Вып. 3. - С. 66 - 69.

3. Пептидная коррекция возрастных нарушений гормональной функции поджелудочной железы у обезьян / Н. Д. Гончарова, А. А. Венгерин, В. X. Хавинсон, Б. А. Лапин // Бюлл эксперим. биологии и медицины - 2004 - Т. 137, № 7. - С. 94 -97.

4. Пептидная коррекция возрастных нарушений функции эпифиза у обезьян / Н. Д. Гончарова А. А. Веш ерин, А В. Шмалий, В. X. Хавинсон // Успехи геронтологии - 2003 - Т И, Вып. 12.-С. 121-128.

5. Функция пгпоталамо-гипофизарно-адреналовой системы в процессе старения у приматов / Н. Д. Гончарова, Т Э Оганян, А А Венгерин, Б А Лалин // Альманах «Геронтология и гериатрия» - 2003. - Вып. 2. - С. 66-70.

6 Эндокринные дисфункции при старении / Н. Д. Гончарова, Т. Э. Оганян, А А. Венгерин, Б. А Лапин//Клиническая геронтология - 2003 -Т 9 - С 161-162.

7. Возрастные нарушения функции эпифиза и возможные пути их коррекции / Н. Д. Гончарова, Т. Э. Оганян, А. А. Венгерин, В. X. Хавинсон // Материалы Всероссийской конф «Нейроэндокринология» Санкт-Петербург - 2003. - С. 61.

8. Возрастные нарушения эндокринных функций и перспективы их коррекции / Н. Д. Гончарова, Т. Э. Оганян, А. А. Веш ерин, Б. А. Лапин, В X. Хавинсон // V Международный симпозиум «Биологические механизмы старения» Тезисы Харьков. - 2002. - С. 28.

9. Гончарова Н. Д. Нарушения эндокринных функций эпифиза и поджелудочной железы в процессе старения. Возможные пути коррекции / H Д Гончарова, А А Венгерин, Б А. Лапин // Третий Российский конгресс по патофизиологии. Дизрегуляциопная патология органов и систем (эксперименгальная и клиническая патофи шология). Тезисы докладов Москва - 2004.9-12 ноября. - С 97

10. Гончарова H Д Эндокринные функции эпифиза и поджелудочной железы при старении. Исследования на обезьянах / H Д Гончарова, А А Венгерин, Б А Лапин // Российский физиологический журнал им И M Сеченова - 2004 - Т 90, № 8. - С. 86.

11. Характер эндокринных дисфункций при старении / H Д Гончарова, Т Э. Оганян, А. А. Венгерин, А. В. Шмалий // Сборник материалов научно-практической конференции «Медицина будущего» Краснодар-Сочи - 2002. - С. 88

12. Pineal peptides restore the age-related disturbances m hormonal function of hormonal functions of the pineal gland and the pancreas / N D Goncharova, A. A. Vengcnn, V. Kh. Khavinson, B. A. Lapin // Experimental Gerontology - 200S. - Vol. 40, - P. 51-57.

13 Age disorders of the endoenne functions and perspectives of their corrections / N. D. Goncharova, B. A. Lapin, T. E. Oganian, A. A. Vengerin, V. Kh. Khavinson II Тезисы Vl,h European Congress of Clinical Gerontology Moskow - 2002 - Jun 18-20 Клиническая геронтология - 2002. - T. 8, № 5 - С. 59.

14 Age-related changes of pineal function and possible ways of their overcoming / N D. Goncharova, T. E. Oganian, A A Vengerin, В A. Lapin V Kh Khavinson // In- Works of Int. Ecologie Forum "Environment and Human Health." St. Peterburg - 2003 - P. 512.

15. Aging of the endocrine system in primates / N. D. Goncharova, T. E Oganian, A A Vengerin, B. A. Lapin // Международный экологический форум «Окружающая среда и здоровье человека» Санкт-Петербург. - 2003. - С. 78.

$

t

ВЕНГЕРИН A.A. Возрастные изменения функций эпифиза и поджелудочной железы у обезьян и их коррекция пептидными препаратами // Автореф. дис. канд. биол. наук-14.00.53 - СПб., 2005. - 20 с.___

Формат 60x84 1/8 Объем 1,0 усл. н.л. Тираж 100 экз Заказ 03-08. Бесплатно

Подписано к печати 17 10 2005 Отпечатано с готового оригинал-макета Издательство «Система»

I i í

! i

i

i

21151

РНБ Русский фонд

2006-4 20890

Актуальность проблемы. Выраженные демографические изменения; в структуре общества большинства развитых стран с резким: увеличением; доли лиц пожилого и старческого возраста определяют актуальность исследований^ фундаментального и прикладного характера, направленных на решение проблем данной категории; населения. В частности, чрезвычайно важны, исследования, направленные на решение проблем профилактики и лечения ряда широко распространенных возрастных заболеваний; (инсомния, депрессии-болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, гипертоническая болезнь, инфаркт миокарда; цереброваскулярные нарушения, остеопороз, сахарный; диабет II типа и др.), а также предупреждения? процессов преждевременного и/или ускоренного старения. Особый интерес в этой связи представляют исследования возрастных нарушений? функции- эндокринных желез m возможных путей; их коррекции. Последнее объясняется? важным значением? эндокринных дисфункций Bt нарушении процессов жизнедеятельности; и этиопатогенезе широкого спектра патологических состояний.

Установлено, что при старении; у человека закономерно выявляются; нарушениям в функциях стероидпродуцирующих желез [Гончарова- Н. Д;. с соавт., 1986, 1997, 2002; Дильман ВШ., 1983; Touitou Y., Haus Е., 2000; Ferrari Е. et al., 2001; Pederson W. A. et al., 2001; Rainey W. E. et al., 2002; GoncharovaN. D., Lapin B. A., 2000, 2002, 2004], гипофиза [Touitou Y., Haus E., 2000; Ferrari E. et al., 2001], островкового аппарата поджелудочной железы [Touitou Y., Haus E., 2000; Barbieri M. et al., 2002; Bellino F. L., Wise P. M., 2003], эпифиза [Кветная Т. В: с соавт., 2005; Touitou Y., Haus Е., 2000; Ferrari Е. et al., 2000; Duffy J. F. et al., 2002; Reiter R. J. et al., 2002], щитовидной и паращитовидных желез [Touitou Y., Haus E., 2000; Chiovato L. et al., 2004]. В последние годы значительно интенсифицировались исследования; в области физиологии и патофизиологии эпифиза, приведшие к: установлению важной' роли возрастного понижения! секреции мелатонина в патогенезе многих широко распространенных возрастных заболеваний (болезни:Альцгеймера и Паркинсона; расстройств сна и памяти, депрессий, гипертонической болезни и др.) [Reiter R: J. et al.,.2002; Benitez-King G. et al., 2003]. Установлена эффективность применения мелатонина для лечения такого рода расстройств [Малышева О. A:, 1999; Rohr U. D., Herold J., 2002; Savaskan Е., 2002; Skene D. J., Swaab D. F., 2003; Zhdanova I., 2005]; В эксперименте на животных было выявлено также геропротекторное действие мелатонина [Анисимов В. Н., 2003; Pierpaoli W., Bulian D., 2001; Manda К.,. Bhatia A. L.,. 2003]. Однако хроническое применение' мелатонина в ряде: случаев сопровождалось возникновением с злокачественных опухолей [Khavinson V. Kh. et al., 2000]; в частности лейкозов [Rohr U. Di, Herold; J., 2002]. В этой связи существенный! интерес представляет поиск стимуляторов эндогенной продукции мелатонина.

Не менее интенсивно проводятся: исследования ив области физиологии и патофизиологии островкового аппарата поджелудочной железы. В настоящее время доказана ведущая роль возрастных нарушений чувствительности периферических тканей к инсулину и р-клеток поджелудочной железы» к глюкозе в развитии инсулиннезависимого сахарного диабета (ИНСД) [Аметов А. С., 2003; Kahn S. Е., Porte D. Jr., 1990; Barbieri М. et al., 2002; Bellino F. L., Wise P. M., 2003; Berstein L. Mi, 2005]. Заболеваемость ИНСД в последние годы, возрастает и является одной из причин преждевременной инвалидности и смертности лиц пожилого и старческого возраста. Однако, до сих пор остаются не. изученными: факторы, определяющие: чувствительность, периферических тканей к инсулину и Р-клеток островков Лангерганса к глюкозе. Не разработаны:также эффективные и безопасные средства их нормализации при старении. Основными препаратами в лечении ИНСД до сих пор остаются; производные сульфанилмочевины (сульфаниламиды),. в основе гипогликемического действия которых лежит главным образом стимуляция секреции инсулина. Однако, как свидетельствуют литературные данные [Зефирова Г. С., 1996],.продолжительное лечение сульфаниламидами вызывает понижение чувствительности к ним и ослабление активности Р-клеток поджелудочной железы. почти у трети больных. В этой связи весьма актуальны как исследования эндогенных и экзогенных причин: возрастного понижения толерантности к; глюкозе, так и поиски эффективных и нетоксичных средств повышения^ чувствительности периферических тканей к инсулину и Р-клеток островкового аппарата поджелудочной железы к глюкозе;

Анализ; литературных данных по - существующим; в настоящее время подходам к коррекции возрастных нарушений гормональной функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы заставил: обратить, наше внимание на физиологически; активные препараты эпифиза: - эпиталамин и эпиталон: [Кузник Б. И. с соавт. 1999; Khavinson V. КН.,. 2002]. Эпиталамин представляет собой комплекс пептидов, выделенных из эпифиза^ животных, а тетрапептид эпиталон (Ala-Glu-Asp-Gly) синтезирован? на основе: анализа аминокислотного состава эпиталамина в лаборатории химии пептидов Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии G30 РАМН: Ранее было показано стимулирующее влияние эпиталамина на пинеальную секрецию1 мелатонина у стареющих грызунов; [Бондаренко Л. А., Анисимов В. Н., 1992; Anisimov V. N. et al., 1992], а также нормализующие эффекты этого препарата на базальные уровни глюкозы в крови и чувствительность периферических тканей к инсулину у больных с ИНСД [Бондаренко JI: А., Анисимов В. Н.,1992; Кузник Б. И. с соавт., 1999; Anisimov V. N. et al., 1992; Khavinson V. Kh., 2002]. Был выявлен также стимулирующий эффект эпиталона на уровень мелатонина в плазме периферической крови в вечернее время у старых обезьян [Гончарова Н. Д: с соавт., 2001; Khavinson V. Kh. et al., 2001]. В связи с вышеизложенным, оценка возможного корригирующего влияния эпиталамина, а также эпиталона на возрастные нарушения функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы представляет существенный интерес.

Не менее актуальным является выбор экспериментальной модели для проведения подобного рода исследований. Подавляющее количество работ по изучению возрастных особенностей функционирования эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы было выполнено на грызунах [Reiter R. J. et al., 1980; MazeraR: С. etal., 2000; Sanchez-Campos S. et al., 2001; Pierpaoli W., Bulian D., 2001; Cano P. et al., 2002]. В то же время известно, что грызуны, в отличие от человека, являются ночными животными. Поэтому, хотя у грызунов, как и у человека, мелатонин секретируется главным образом в ночное время, биологическая значимость этого явления у человека и грызунов может быть различной; В отличие от человека, грызуны не болеют и спонтанным ИНСД. Кроме того, для различных звеньев эндокринной системы характерны выраженные видовые различия [Анциферова Н. Д., 1997; Гончаров Н. П. с соавт., 1977; Гончарова Н. Д., Гончаров Н. П., 1989; Гончарова Н. Д., 1997; Гончарова Н. Д., Лапин Б. А., 2005; Weinbauer G. F., Nieschlag Е., 1999; Hornsby P. J., 1995; Barrou Z. et al., 1997; Miller B. A., 1999; Parker S. A. et al., 2000; Goncharova N. D., Lapin B. A., 2000, 2001]. Наиболее перспективной моделью для проведения обсуждаемых исследований, по-видимому, являются лабораторные приматы, по физиологии и биохимии эндокринных процессов, а также спектру патологических процессов весьма сходные с человеком [Анциферова Н. Д., 1997; Гончаров Н. П. с соавт., 1977, 1987; Гончарова Н. Д., 1997; Гончарова Н. Д:, Лапин Б. А., 2005; Lapin В! A. et al., 1979; Weinbauer G. F., Nieschlag E., 1999; Goncharova N. D., Lapin B. A., 2000, 2001]. В частности, у обезьян, макак резусов, был отмечен: спонтанный гиперинсулинемический сахарный диабет, по клинике и патогенезу сходный с ИНСД человека [Bodkin N. L. et al., 1991; Huang Ze et al., 1994].

Цель работы - изучение характера изменений функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы в процессе старения у лабораторных приматов и оценка возможности использования пептидных препаратов эпифиза (эпиталамина и эпиталона) для коррекции возрастных нарушений функций этих желез.

Основные задачи исследования

1. Изучение характера функционирования эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы при старении у самок макак резусов.

2. Изучение влияния пептидов эпифиза эпиталамина и эпиталона на гормональную функцию эпифиза; и поджелудочной железы у самок макак резусов.

3. Оценка перспективности использования макак резусов в качестве экспериментальной модели при изучении характера и механизмов возрастных нарушений функции эпифиза и поджелудочной железы и их коррекции пептидными препаратами эпифиза.

Основные положения, выносимые на защиту

1. При старении у обезьян происходит снижение пинеальной продукции мелатонина в вечернее и ночное время.

2. В процессе старения у обезьян формируются выраженные нарушения- в гормональной функции поджелудочной железы: понижается чувствительность периферических тканей; к инсулину и Р-клеток островкового аппарата к. глюкозе, повышается продукция инсулина.

3. Пептидные препараты эпифиза (эпиталамин и эпиталон) восстанавливают вечернюю и ночную продукцию мелатонина, базальные уровни глюкозы и инсулина, а также чувствительность. периферических тканей к инсулину и (3-клеток островкового аппарата к глюкозе у старых обезьян.

4. Макаки; резусы - перспективная модель для изучения проблем старения эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы, а также: средств коррекции возрастных нарушений их функций.

Научная новизна работы. Установлено, что концентрация мелатонина в плазме периферической крови у самок макак резусов, независимо от возраста, подвергается выраженному циркадианному ритму, сходному с циркадианнным ритмом секреции мелатонина у человека (минимальный уровень - в 16.00, максимальный - в 22.00 и 3.00).

Сравнительное изучение циркадианного ритма концентрации мелатонина в плазме периферической крови у макак резусов разного возраста позволило выявить, что при старении у обезьян, подобно человеку, резко-снижается продукция мелатонина в ночные часы (21.00; 22.00; 3.00; 4.00).

Впервые продемонстрирован стимулирующий эффект эпиталамина (внутримышечно в дозе 5 мг/животное/сутки в течение Ю дней) на пинеальную продукцию мелатонина у старых обезьян в ночное время; .У молодых животных эпиталамин не оказывал влияния на уровень мелатонина в крови.

Показано, что 10-дневное внутримышечное введение эпиталона в дозе 10 мкг/животное/сутки приводит к. увеличению концентрации; мелатонина в крови; у старых обезьян в ночное время и не оказывает влияния на уровень мелатонина у молодых животных.

Получены данные о существовании» взаимосвязи между нарушениями гормональной функции поджелудочной железы; и возрастными/ изменениями ряда антропометрических показателей у обезьян. В частности, установлено, что базальные уровни глюкозы и инсулина в крови положительно коррелируют с мае сой тела животных и > окружностью тела в абдоминальной; области. В то же время у старых обезьян масса тела и окружность в области живота достоверно* выше; чем у молодых животных.

Впервые: установлена способность эпиталона и эпиталамина к, восстановлению у старых обезьян: нарушенной толерантности: к глюкозе, а также чувствительности Р-клеток островкового аппарата поджелудочной-железы к глюкозе. Выявлено, что восстанавливающий: эффект 10-дневного введения чрезвычайно низких доз эпиталона (10 мкг/животное/сутки) на гормональную функцию поджелудочной железы частично сохраняется в. течение 1-2 мес. после отмены препарата.

Теоретическое и= практическое значение работы. Результаты исследования вносят существенный вклад в понимание основных закономерностей нарушений функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы при старении и роли этих нарушений в формировании возрастных инволютивных процессов, а также развития возрастной патологии.

Обосновано» использование макак резусов в качестве адекватной биологической модели для; изучения проблем: физиологического старения человека и возрастной патологии.

Теоретический и практический интерес представляют данные о восстанавливающих эффектах эпиталона и; эпиталамина на нарушающиеся; с возрастом функции пинеальной железы; и островкового аппарата поджелудочной железы. Теоретическое значение обусловлено важностью этих данных как для понимания? биологической значимости пептидов; эпифиза и возрастных особенностей их продукции, так и существующих функциональных взаимосвязей между пинеальной железой и островковым аппаратом! поджелудочной железы. Практическое значение обусловлено перспективностью клинического применения? эпиталона и эпиталамина для; коррекции возрастных нарушений; функции эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы.

Как; практический, так и теоретический интерес: представляют выявленные у животных корреляции; между показателями функциональной активности островкового аппарата поджелудочной железы и такими антропометрическими; показателями как масса; тела и окружность тела; в абдоминальной; области. Увеличение массы тела и окружности живота; указывают на повышение вероятности повреждения толерантности к глюкозе и повышения базальных уровней глюкозы и инсулина в периферической крови.

Результаты работы используются в лекционном курсе по эндокринологии и физиологии для; студентов биологического факультета Сочинского филиала Российского университета дружбы народов и факультета физической культуры Сочинского государственного университета туризма и курортного дела.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на V Международном симпозиуме «Биологические механизмы старения» (Харьков,

2002), VI Европейском конгрессе по клинической геронтологии (Москва, 2002), Научно-практической конференции «Медицина будущего» (Краснодар-Сочи, 2002), III Европейском конгрессе по биогеронтологии (Италия, 2002), Международном экологическом форуме «Окружающая среда и здоровье человека» (Санкт-Петербург, 2003), Всероссийской конференции по нейроэндокринологии (Санкт-Петербург, 2003), Третьем Российском конгрессе по патофизиологии (Москва, 2004), Международной конференции «Стареющий народ» (Италия, 2004), XIX Съезде физиологического общества им. И. П. Павлова (Екатеринбург, 2004). По материалам диссертации опубликовано 15 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 111 страницах, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов и 2-х глав собственных исследований. Список цитированной литературы включает 44 отечественных и 183 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 15 рисунками и 15 таблицами.

ВЫВОДЫ

1. При старении у обезьян снижаются содержание мелатонина в вечерние и в ночные часы, ■ среднесуточная концентрация мелатонина и амплитуда циркадианного ритма уровней мелатонина в периферической крови.

2. Функция островкового аппарата поджелудочной железы у обезьян подвергается выраженным изменениям в процессе старения: понижается чувствительность периферических тканей к инсулину и р-клеток островкового аппарата к глюкозе, повышаются базальные уровни инсулина и глюкозы в периферической крови.

3. При старении увеличиваются масса тела животных и окружность тела в абдоминальной области, что положительно коррелирует с повышением базальных уровней инсулина и глюкозы в крови, а также понижением толерантности к глюкозе.

4. Пептидный препарат эпифиза эпиталон восстанавливает нарушенную при старении у обезьян вечернюю и ночную продукцию мелатонина, базальные уровни глюкозы и инсулина в крови, а также чувствительность периферических тканей к инсулину и р-клеток островкового аппарата к глюкозе.

5. Пептидный препарат эпифиза эпиталамин восстанавливает нарушенные при старении у обезьян уровни мелатонина в плазме периферической крови в вечерние и ночные часы, концентрацию глюкозы, а также чувствительность периферических тканей к инсулину.

6. Макаки резусы - перспективная модель для изучения проблем старения эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы, а также средств коррекции возрастных нарушений их функций.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проведенного исследования выявлено наличие у самок макак резусов циркадной ритмичности в функционировании эпифиза, что проявляется в существовании стойких суточных ритмов уровня мелатонина в плазме периферической крови. В темное время суток (21.00; 22.00; 3.00; 4.00) концентрация мелатонина в 3-10 раз выше, чем в дневное время (9.00; 10.00; 16.00). Минимальные значения концентрации мелатонина регистрируются в 16.00 час. При старении у обезьян, понижаются уровень мелатонина в плазме периферической крови в вечерние и ночные часы, среднесуточная концентрация мелатонина и амплитуда циркадного ритма мелатонина. Выявленные у макак резусов циркадный ритм функциональной активности эпифиза и характер его возрастных изменений носят сходный характер с аналогичными закономерностями, доложенными в литературе для человека. Возрастные изменения в пинеальной секреции мелатонина могут быть обусловлены как нарушением адренергической регуляции пинеальной секреции мелатонина, так и чувствительности СХЯ гипоталамуса и/или сетчатки глаза к стимулам.

Непродолжительное (в течение 10 дней) введение самкам макакам резусам небольших доз пинеальных пептидов - эпиталона (10 мкг/животное/сутки) и эпиталамина (5 мг/животное/сутки) - приводило к нормализации у старых животных уровня мелатонина в плазме периферической крови в вечерние и ночные часы, а также амплитуды циркадного ритма концентрации мелатонина. В то же время не было выявлено практически никакого влияния пинеальных пептидов на уровень мелатонина у молодых животных. Восстанавливающий эффект пинеальных пептидов на концентрацию мелатонина в периферической крови может быть обусловлен восстановлением как катехоламинергической регуляции эпифиза, так и чувствительности СХЯ гипоталамуса и/или сетчатки глаза к изменениям освещенности окружающей среды.

В результате проведенных исследований было обнаружено также, что в процессе старения у обезьян формируются выраженные нарушения в гормональной функции поджелудочной железы. Эти выводы были сделаны на основании выявленного повышения у старых животных базальных уровней глюкозы и инсулина, а также результатов глюкозотолерантного и инсулинотолерантного тестов. У старых животных повышение уровней глюкозы и инсулина в периферической крови в ответ на введение стандартной дозы глюкозы было выше по сравнению с молодыми животными для большинства исследуемых интервалов времени и носило пролонгированный характер. Это свидетельствует о понижении у старых животных толерантности к глюкозе, обусловленной нарушением чувствительности периферических тканей к инсулину. Этот вывод подтверждают и данные о понижении скорости «исчезновения» экзогенной глюкозы у старых животных, а также результаты инсулинотолерантного теста, продемонстрировавшего меньшую степень понижения уровня глюкозы в крови у старых животных в ответ на введение стандартной дозы инсулина короткого действия.

Наряду с понижением чувствительности периферических тканей к инсулину в условиях физиологического старения у обезьян, по-видимому, имеет место и понижение чувствительности Р-клеток островков Лангерганса поджелудочной железы к глюкозе. На возможность последнего указывает противоположный характер изменений концентрации глюкозы и инсулина у старых животных через 5 мин после введения стандартной дозы глюкозы.

Установлено, что выраженность нарушения гормональной функции поджелудочной железы в определенной степени коррелирует с изменениями в ряде антропометрических показателей, таких как масса тела и окружность тела в абдоминальной области. С увеличением этих показателей растет вероятность нарушения толерантности к глюкозе и инсулину. .

Выявленные возрастные нарушения в функционировании поджелудочной железы у обезьян хорошо согласуется с характером возрастных изменений функции островкового аппарата поджелудочной железы, отмеченных в литературе для человека.

10-дневный курс пинеальных пептидов (эпиталона в дозе 10 мкг/животное/сутки и эпиталамина 5 мг/животное/сутки) приводил к восстановлению у старых животных нарушенной толерантности к глюкозе и инсулину, а-также функции Р-клеток островкового аппарата поджелудочной железы. Это выражалось в тенденции к снижению базальных уровней глюкозы и инсулина у старых обезьян, нормализации динамики уровней глюкозы и инсулина в ответ на введение стандартной дозы глюкозы и скорости «исчезновения» экзогенной глюкозы. Восстанавливающий эффект эпиталона на гормональную функцию поджелудочной железы частично сохранялся в течение 1 - 2 мес после отмены препарата. Восстанавливающий эффект пептидных препаратов эпифиза на функцию поджелудочной железы может быть обусловлен как их стимулирующим влиянием на секрецию мелатонина, так и, возможно, путем нормализации тонуса симпатических и парасимпатических нервных путей, участвующих в ее регуляции. В любом случае, результаты данной работы указывают о перспективности данных препаратов для коррекции эндокринных дисфункций эпифиза и островкового аппарата поджелудочной железы у приматов.