Автореферат диссертации по медицине на тему Влияние воздействия гальванического тока на нитактный и инфарцированный миокард в эксперименте
!2;5 0 5. 3,1
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ БЕЛОРУССКИЙ НАУЧНО-НССЛЕЛОВАТЕЛЬСКИЯ ИНСТИТУТ КАРДИОЛОГИИ
На правах рукописи УМ 616.127-005.8*612.1721.001.6:616.813
АДЗЕРЮСО ИГОРЬ ЭДУАРДОВИЧ
ВЛИЯНИЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ГАЛЬВАНИЧЕСКОГО ТОКА НА ННТАКТНиЯ И ИН»ЛРГШР0ВАШ1Ш ИИОКАРД В ЭКСПЕРНЙЕИТЕ
М .00 .06 —Кардиология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание учено* степени кандидата медицинских наук
ЙИНСК 1992
Работа выполнена в Белорусском государственной институте усовершенствования врачей
Научный руководитель—доктор иедишшскм наук, профессор А. Г. Црочек
Официальные оппоненты:
Доктор биологических наук А. Б. Чевввик
Доктор медицинских наук, профессор В. А. Лоллини
Веду вузе учреждение—Каунасская медицинская академия
^дита диссертации состоится "<2Ь " 1992 г. в
" " час. на заседании специализированного совета Д.077.02.01
в Белорусском научно-исследовательском институте кардиологии по адресу: 220036, г. Шнек, ул. Розы Люксембург, 110.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белорусского научно-исследовательского института кардиологии.
Автореферат разослан " ■ €¿/¿/^¿¿1 1992 г.
Учений секретарь специализированного совета,
кандидат мед. наук л.Г.ГЕШ:
Сокраиения, принятие в автореферате:
•/-ГБДГ —альфа-гидроксибутиратдегидрогеназа
ГТ —гальванический ток
ИЗ —инфарктная зона ИИ —инфаркт миокарда КФК —креатинфосфокииаза ЛЖ —левый желудочек НЗ —неинфарктная зона
ЭКГ —электрокардиография
'''"l ООвдя характеристика работы
Актуальность теиы.Высокая заболейаемость и частота ос лощений, приводящих к инвалидизации и ранней смертности от ииемической болезни сердца, определяют актуальность изыскания способов борьбы с грозным недугом (Тарасов А.Н. и др., 1Э86, Рябинин В.А., Голиков А.П.ДЭЭО, Каппе 1 V.В. ,193S, Hampton J..1989)
В последние годи расширились представления о механизмах стрес-сорного и исемического повреждения при развивавшемся инфаркте миокарда (ИМ) (Виноградов А.В.,1990, Шерсон Ф.З. ,1990, Сычева И.Ii. И др.,1990). Раскрыта роль таких факторов патогенеза, как активация перекксного окисления липидов (ПОЛ), изменение кальциевых каналов мембран клеток. Всё это указывает на большое значение функционального состояния клеточных мембран в развитии ИМ (Вартанян Л.С. и др.,1985, Жаров Е.И. и др.,1991). Детальнее экспериментальные и клинические исследования методов лечения, направленных на сохранность клеточных мембран, доказывают положительное воздействие на зону иземического повреждения, а тэкеэ подтверждает их профилактическое влияние на осложнения ИМ (Голиков А.П. и др.,1990,Zannad F. et al.,1985).
При поиске эффективных методов лечения острого ИМ было обращено внимание на важность взаимосвязи между трансмембракным электрическим полем и структурно-функциональным состоянием мембраны (При-гоеин И.,Стенгерс И.,1986, Zierler К.,1985).
Использование гальванического тока (ГТ) в качестве источника электрического поля, которое в случае потери трансмембранной неравновесности потенциал-индуцируемых ионов в миокардиальной клетке (ишемия) может привести к восстановлении функциональной активности мембраны, представляется достаточно обоснованным. Накопление знаний о высокой физиологической активности ГТ вследствие активации трофо-энергетических и компенсаторно-заяитнкх реакций организма способствовало укреплению этого предположения (Улакгос B.C.,1976, 1981).
Однако,несмотря на сирокое применение ГТ в медицинской практике , анализ доступной нам литературы свидетельствует о недостаточной изученности его влияния на интактный и кнфариированный миокард.
Цельа настоящего исследования было изучение влияния однократной гальванизации прекардиальной области крыс на интактный и инфарцированный миокард.
Для достижения поставленной цели били определены следующие
Основные задачи исследования:
1. Изучить влияние воздействия гальванического тока силой 2,
4 и 8 мА на интактный миокард крысы в зависимости от продолжительности гальванизации.
2. ИсследоЕать влияние действия П различной силы и экспозиции на содержание 2п2+,Ре2+,Си2+,М82',",Ма+,К+,Са2+ в интактном миокарде сразу после воздействия и через 24 часа после него.
3. Проследить влияние гальванизации током силой 2, 4 и 8мА (экспозиция 15, 30 и 45 минут) на активность ферментов (КФК и
о(—ГБДГ) в сыворотке крови интактных крыс сразу после воздействия и через 24 часа после него.
4. Изучить влияние гальванизации прекардиальной области крыс с экспериментальным ИМ током силой 2,4 и 8мА продолжительностью 15, 30 н 45 минут на величину очага некроза.
5. Исследовать влияние действия ГТ на содержание 2п2*,Ре2+, Си2+,м82*,к+, Иа+,Са2* в инфарктной и неинфарктной зонах пораженного миокарда.
Научная новизна работы:
- Установлено,что гальванизация прекардиальной области крыс оказывает повреждающее действие на интактный миокард; наименьшее повреждение вызывает ГТ силой 2мА.
- Показано, что после гальванизации прекардиальной области содержание ионов в интактном миокарде уменьшается и остаётся таковым на следующие сутки после воздействия.
- Выявлено, что активность ферментов (КФК и и—ГБДГ) в сыворотке крови после гальванизации прекардиальной области крыс с ин-тактным миокардом повышается и возвращается к исходно контрольному уровню на следующие сутки после воздействия.
-Показано, что при воздействи ГТ на экспериментальный ИМ размеры очага некроза уменьшаются.
- Выявлено, что гальванизация прекардиальной области крыс с экспериментальным ИМ ведёт к частичному восстановлению содержания основных неорганических ионов как в области развившегося некроза, так и вне её.
Теоретическое и практическое значение работы заключается в в том, что показано различное действие гальванического тока на интактный и инфарцированный миокард.Выявлено, что гальванизация оказывает кардиопротекторный эффект в инфарцированном миокарде. Доказана роль гальванизации как фактора, повышающего резистентность
сердца к повреждающему действию ияемии.
Полохення.пыносниые на зацяту:
1. Однократная гальванизация прекардиальной области крас приводит к развитию клеточно-тканевых повреждении в интактном миокарде левого гелудочка. Поврездаюцее действие тем сильнее, чем болъ-пе сила тока и продолжительность воздействия.
2. Однократная гальванизация прекардиальной области крыс с экспериментальным ИИ обуславливает уменьшение инфарцироваиной юс-си миокарда левого желудочка.
3. Гальванизация прекардиальной области вызывает в кнфэрцяро-ванном миокарде кардиопротекторкый эффект,сопровоздаюкийся частичным восстановлением содержания основных неорганических ионов как в в области развившегося некроза, так и вне еб.
Апробация работы. Материалы исследования дологекы на 2-ой конференции молодых ученых "Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры " (Ленинград, 1990), совместном заседании кафедры кардиологии Белорусского государственного института усовершенствования врачей, 1ШИЛ БелГИУВ, врачей 1-й клинической больницы г.Минска, а такге слушателей цикла специализации по кардиологии БелГИУВ (1992).
Структура и обьёи диссертация.Диссертация состоит из введения, обзора литературы,характеристики материала и методов исследований, двух глав результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы (137 отечественных и 89 иностранных источников). Работа иллюстрирована 44 таблицами, 28 рисунками, 6 фотографиями. Обьём работы без указателя литературы, таблиц и рисунков) составляет 110 страниц машинописи.
ИАТЕРИАЛЫ I! ЕЕТОЯЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В эксперименте использовано 1020 белых беспородных крыс—самцов, весом 250-300 г какдый, содергавпихся иа обычном рационе вивария.
Для ревения поставленных в рзботе задач нами было проведено 2 серии опытов. В первой серии изучалось влияние гальванизации прекардиальной области на интактный миокард в зависимости от силы тока и продолжительности воздействия (см.табл.1). Били использованы величины силы тока 2, 4 и 8мА. Действие гальванизации продолжалось 15, 30 и 45 минут.
Гальванизация прекардиальной области производилась аппаратом
Характеристика экспериментальных групп крыс
N группы Характеристика группы Число животных Методы исследования
1 2 3 4
1 Иьс.юбилизация без наркоза на 15 минут 10 Радионуклидные исследоЕшния
2 Иммобилизация без наркоза на 30 минут 10 Радионуклидные исследования
3 Иммобилизация без наркоза на 45 минут 10 Радионуклидные исследования Радионуклидные исследования
4 Гексеналовый наркоз 30 Определение активности ферментов в сыворотке крови Определение содержания ионов в миокарде Радионуклидные исследования
5 , Наркоз с последующей гальванизацией током силой 2мА в течение 15 минут 40 Определение активности ферментов в сыворотке крови Определение содержания ионов в миокарде
е 7 30 минут 45 минут 40 40 Морфологическое исследование миокарда
Наркоз с последующей гальванизацией током силой 4мА в течение
Радионуклидные исследования
Определение активности «{ер-ментов в сыворотке крови
Определение содержания ионов
8 Э 10
15 минут 30 МИНут 45 нинут
40 в миокарде
40 Морфологическое
исследование 40 ь-люкарда
11 12 13
Наркоз с последув'зй гальванизацией током с'лг.ой 8мА в течеипэ
15 >.::■: к ут 30 »Я!нут 45 минут
40 40 40
Радконуклидние нсслэдозштя
Определение акткзности ферментов в сыворотке крови
Определение С0Дер23!ШЯ ионов в !.с:окардэ
Шрфологкческое
исследование
миокарда
14
15
Вскрытие грудной клетки без перевязки коронарной артерии
ю
Инфаркт миокарда без последушей гальванизации
60
Радионуклидшгэ исследования
Радионуклидные исследования
Измерение массы пораЕен-ного ЛЗ
Определение активности ферментов в сыворотке крови
Определение содержания ионов в миокарде
Морфологическое
исследование
миокарда
Снятие ЗаГ после перевязки коронарной артерии через
15 минут 30 минут 45 минут
16
17
18
Инфаркт миокарда с последующей гальванизацией током силой 2мА в течение 15 минут 30 минут 45 минут
60 60 60
Радионуклидные исследования
Определение активности ферментов в сыворотке крови
Определение содержания ионов в миокарде
Морфологическое
исследование
миокарда
ЭКГ
19
20 21
Инфаркт миокарда с последующей гальванизацией током силой 4мА в течение
15 минут 30 минут 45 минут
60 60 60
Радионуклидные исследования
Определение активности ферментов в сыворотке крови
Определение содержания ионов в миокарде
Мэрфологическое
исследование
миокарда
ЭКГ
Инфаркт миокарда с последующей гальва-
Радионуклидные исследования
Определение активности ферментов в сыво-
1
2
з
4
2
4
22
23
24
низацией током силой 8мА в течение
15 минут 30 минут 45 минут
60 60 60
ротке кровн
Определение содерханкя конов в миокарде
Морфологическое
исследование
миокарда
ЭКГ
1
"Поток-1". После сбривания шерстя в местах расположения электродов крысы фиксировались. Электроды из алюминиевой фольги (А-6.Г0СТ-64) площадью 4 см^ накладывали билатерально, на грудь и на спину, соответственно расположению сердца. Для предупреждения повреждающего действия продуктов электролиза на ткани между телом крысы и электродом помещалась гидрофильная прокладка из обезжиренной кипячением марли, которую перед употреблением скачивали в бидистнллирован-ной воде.
Крыс наркотизировали гексеналои из расчета 7-8мг на 100г веса , внутрибрваинно.
0 характере изменений, наступающих в интактном миокарде Л5 под влиянием ГТ, судили по данным гаммахронометрии, содержания ионов, гистологического исследования, активности ферментов в сыворотке крови.
Животным внутрибрювпнно вводился 99° Тс пирфотех из расчета 700 кбк на 100г веса. Через 40 минут после введения препарата гн-вотных декапитировали и извлекали сердце из грудной клетки. Проводили его дозиметрию, а затем взвевивали на торсионных весах.Гам-махронометрию накопленной радиоктивности проводили на одиокаиаль-ной селективной по энергии радиодиагностической колодезной установке НК-150 "Саша" / Венгрия /.
Для изучения содержания ионов в интактном миокарде сразу после завершения воздействия ГТ и спустя 24 часа после него животным вскрывали грудную клетку и извлекали сердце. Выделенное на аутопсии сердце отмывали от крови. В устье аорты вводили канюлю.
которую присоединяли к перфузируемой системе.Перфузию осуществляли бидистиллированной водой при комнатной температуре под гидростатическим давлением 120 мм рт.ст. в течение 30 минут.Содержание ионов Zn2+, Cu2+, Fez+, Mg2+, Ca2+, K+, Na+ определяли с использованием плазменного спектрофотометра фирмы "Spectro Analytical Instruments" (ФРГ). Измерения производились в растворах. Для этого выделенный левый желудочек (ЛЖ) подвергнут гадкому озолению по методу Дз. Вайнфордкера(1979). Содержание ионов рассчитывалось в относительных единицах:
% _ (конц.иона в р.р.и.) х (Y пробы в ml) х ^qq (вес ЛЖ в гр) х 10ь
Сразу после воздействия и спустя 24 часа после него исследовали также активность креатинфосфокиназы (КФК) и альфа-гидрокси-бутиратдегидрогеназы (j-ГБДГ) в сыворотке крови. Активность ферментов определяли с помоцью коммерческих наборов фирмы "Labsystems,. (Финляндия) на биохимическом анализаторе той же фирмы.
Проведение гистологического исследования миокарда ЛХ включало изучение обпей морфологии с окраской гематоксилин-эозином и содержания гликогена с окраской по Шабодашу.
Группу контроля при радионуклидных исследованиях составили интактные животные,которым проводилась иммобилизация на 15,30 и 45 минут без наркоза и без гальванизации (гр.1-3, см.табл.1). При определении активности КФК и ¿-ГБДГ в сыворотке крови и содержания ионов в интактном миокарде ЛЖ в неё входили наркотизированные гек-сеналом интактные зивотные (гр.4).
Во второй серии опытов изучалось влияние гальванизации пре-кардиэльной области на размер некротического очага при экспериментальном ИМ. Исследования проводились на девяти группах крыс, соответственно изучаемым значениям силы тока: 2,4,8мА, и продолжительности воздействия: 15,30 и 45 минут ( гр.16-24, см. табл.1).
Экспериментальный ИМ воспроизводили по методу Selye Н.с соавт. (1S60) в модификации Афанасьевой Т.Н.(1968).
О развитии острого ИМ судили по данным электрокардиографии (Э!СГ), запись которой производили на электрокардиографе "ЭК 2Т-02" при скорости движения бумаги 100 мм/сек. Наличие ишемического пов-рездания оценивалась по степени смесения сегмента ST, появлению зубца Q и изменению величины зубца R в стандартном отведении 2.
Для измерения массы миокарда ЛЖ, пораженного инфарктом, через 24 часа после'перевязки коронарной артерии сердце извлекали из
грудной клетки. Выделяли ЛЕ и разрезали его на блоки толсиной 0,5 см. Затем, срезы окрашивали нитросиним тетразолем по методу Когана А.Х. с соавт. (1984). Инфарцированный миокард оставался неокрашенным. Массу инфарцированной зоны ЛЖ пересчитывали в процентах к обией массе ЛЕ и таким образом получали относительную массу зоны кнфзркта.
В качестве критерия оценки размера острого ИМ использована данные активности КЖ и cí-ГБДГ в сыворотке крови, а таксе интенсивность накопления 99® Тс пирфотеха в миокарде.
В инфарцированной и непнфарцированной зонах миокарда М изучая! содержание ионов 2n2+,Fe2+,Cu2+,Mg2+,Ca2',',Na+,K+ по методике, описанной виге.
Кроме этого, изучалась обдая морфология инфарцированного миокарда и содергание в нбм гликогена.
Контрольные группы при радионуклидных исследованиях составили
интактные животные.которым проводили наркотизацию (гр.4) и наркотизации с последующей гальванизацией током силой 2,4 и 8мА продолжительностью 15,30 и 45 минут (гр.5-13). Сюда re входили животные с моделированным ИН,но без последующей гальванизации (гр.15) и животные, у которых осуществлялся доступ к сердцу без перевязки коронарной артерии (гр.14). При определении активности ферментов в сыворотке крови, содергания ионов в миокарде JE контролем служили наркотизированные интактные животные (гр.4) н животные с острым ИМ (гр.15), а при измерения кассы инфаракрованного миокарда ЛЕ в группу контроля входили животные с моделированным КМ без посдедушей гальванизации (гр.15). Красы с контрольным ИМ,у которых исследовалось изменение ЭКГ показателей через 15,30 и 45 »¿и-нут после перевязки коронарной артерии, составил! группу контроля при изучении данных электрокардиографии (гр.15).
Все результаты обработаны методом вариационной статистики с использованием параметрических н непараызтрическпх критериев ( Лэ-кин Г.Ф.,1980). Достоверными считались различия при вероятности р<0.05. Для оценки влияния ГТ на результаты кастояеего исследования был применен »иогофакторный дисперспонний аиалнз. Bes расчеты произведены на ПЭВМ IBM PC/AT с использованием программ статистической обработки данных "Statgraflcs" п графического их изображения "Foxgraf".
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОЙ ГАЛЬВАНИЗАЦИИ ЦА ИНТАКТНЫЯ МИОКАРД КРЫС ПО ДАННЫМ ГАММАХРОНОМЕТРИИ.Влияние гальванизации на миокард оценивалась нами по накоплению 99т Тс пирфотеха. Воздействие ГТ силой 2мА различной экспозиции не влияло на накопление миокардом изотопа. В то же время, накопление 9Эт Тс пирфотеха при силе тока 4мА после 15-минутной гальванизации достоверно меньше, чем в контроле (р<0.001), а после 30-минутной и 45-минутной гальванизации— достоверно больше (р<0.001, р<0.05). После воздействия ГТ силой 8мА экспозиции 15,30,45 минут накопление препарата в сердечной мышце достоверно меньше,чем в контроле (р<0.001). Многофакторный дисперсионный анализ показал, что изменение накопления 99° Тс пирфотеха в миокарде определяется силой ГТ (р<0.001), его экспозицией (р<0.001) и совместным действием силы тока и его экспозиции (р<0.001).
ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОЙ ГАЛЬВАНИЗАЦИИ НА СОДЕРЖАНИЕ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ В ИНТАКТНОМ МИОКАРДЕ ЛЯ. Измерение содержания микроэлементов проводилось после гальванизации и через 24 часа после него.Воздействие ГТ силой 2мА различной продолжительности вызывало достоверное уменьшение по отношению к контролю содержания ионов Ре2*,Си2+. Ме2+,К+,Ыа+,Са2+. Достоверных изменений содержания ионов Ъх?* по отношению к контролю не выявлено. Через 24 часа после воздействия ГТ силой 2мА уменьшение по отношению к контролю количества ионов 2п2+,Ре2+ и Са2+ определялось выбором экспозиции тока. Содержание ионов Си^.Ме^.К"''.*^ достоверно снижено при всех экспозициях тока.Степень, данного изменения не зависела от продолжительности гальванизации.
При воздействии током силой 4мА степень уменьшения содержания ионов Ре2+, На+, Са2+ в миокарде по отношению к контролю определялась продолжительностью гальванизации. Вместе с тем, количество ионов Си2+,И82'*',К+ не изменялось при разной экспозиции тока.Достоверных изменений содержания ионов Тт?* по отношению к контролю не выявлено. Через 24 часа после воздействия ГТ силой 4мА различной продолжительности содержание ионов 2п2+, Си2 *, М^2 +, Са2 , К*, Иа+ по отношению к контролю достоверно снижено.Причем,наиболее значительное уменьшение количества ионов 2п2+ ,На+ ,Са2+ наблюдалось при длительности гальванизации 15 минут. При этой же экспозиции достоверно снижено по отношению к контролю и содержание ионов Си2*.
При воздействии током силой 8мА продолжительности 15, 30 и 45 минут содержание ионов Те2"*,Си^Ме2*,«'''.^ достоверно уменьша-
- гг -
лось по отношению к контролю. Степень изменения количества ионов Бе2+,,К+,На+ не зависела от экспозиции тока, а наиболее значительное снижение содержания ионов Си2+ наблюдалось при продолжи-
2*
тельности гальванизации 30 минут. Количество ионов 2п и Са не изменялось. Через 24 часа после воздействия ГТ силой 8мА различной экспозиции содержание ионов Си2+,М82+,К*,На+ достоверно снижено по отношению к контролю, в тоже время, достоверность уменьшения количества ионов Хп2* ,Ре2+,Са2+ определялась выбором продолжительности гальванизации. Проведенный многофакторный дисперсионный анализ показал,что значимость различных факторов, влияющих на изменение содержания ионов в миокарде ЛЖ при воздействии ГТ и через 24 часа после него, неоднозначна.
ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОЙ ГАЛЬВАНИЗАЦИИ ПРЕКАРДИАЛЬНОЙ ОБЛАСТИ НА АКТИВНОСТЬ КАРДИОСПЕЦИФИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ. Изучение активности ферментов проводилось после гальванизации и через 24 часа после неё. Отмечено,что после воздействия током силой 2,4,8мА в течение 15,30 и 45 минут достоверного изменения активности КФК не
происходило. В то же время, активность ¿-ГБДГ определялась выбором силы ГТ и его продолжительности. При воздействии током силой 2мА активность ¿-ГБДГ достоверно увеличивалась по отношению к контролю при продолжительности гальванизации 45 минут (р<0.02), при силе тока 4мА— 30 минут (р<0.05) и 45 минут (р<0.001). А. при силе тока 8мА. увеличение активности ¡¿-ГБДГ происходило при всех использованных экспозициях.На следующие сутки после гальванизации активность КФК и о(-ГБДГ в опытных группах не имела достоверных различий с контролем (р>0.05). Результаты многофакторного дисперсионного анализа свидетельствуют о том, что значимость влияния ГТ на изменение активности ферментов в сыворотке крови после гальванизации и через 24 часа после неё различна.
При ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ ИНТАКТНОГО МИОКАРДА ЛЖ обнаружено, что гальванизация прекардиальной области крыс приводит к развитию альтеративных процессов в миокарде ЛЗ.Это находило отражение в развитии мезшышечного отёка, контрактур и фрагментации мы-иечных волокон, уменьшении содержания гликогена в миоцитах. Еыра-женность и распространённость указанных изменений возрастает с увеличением силы'тока и времени действия.
ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОЙ ГАЛЬВАНИЗАЦИИ ПРЕКАРДИАЛЬНОЙ ОБЛАСТИ КРЫС С ИМ НА ОБЬЕМ ИНФАРЦИРОВАННОЙ МАССЫ ЛХ {%) ПО ДАННЫМ ГРАВИМЕТРИИ. -Изучение однократной гальванизации на экспериментальный ИМ прово-
Таблица 2
Влияние воздействия различным по силе и экспозиции ГТ на экспериментальный инфаркт миокарда у крысы по данным гравиметрии (X - Бх).
N п/п Экспериментальные группы s инфарии|эованного
1 контроль(инфаркт) П = 10 60.2 - 2,16
ИМ с последующим воздействием ГТ силой 2мА в течение
2 15 минут (п=10) 52.03 - 3.11
3 30 минут (п=10) 31.6 - 2.36
4 45 минут (п=Ю) 38.2 - 5.05
ИМ с последующим воздействием ГТ силой 4мА в течение
5 15 минут (п=10) 38.5 - 3.7
6 30 минут (п=10) 48.7 - 4.02
7 45 минут (п=10) Л 47.8 - 3.7
ИМ с последующи -воздействием ГТ силой 8иА в течение
8 15 минут (п=10) 54.3 - 2.7
Э 10
30 минут (п=10) 45 кинут (п=10)
59.5 * 3.2
36.6 - 3.3
Р2 - к Р1 < 0.05 Р2 - Р3
Р3 - Р1 < 0.001 Р3 - Р4
Р4 - Р1 < 0.001 Р2 - Р4
Р5 - Р1 < 0.001 Р5 - Р6
Р6 - Р1 < 0.03 Р6 - Р7
*7 - Р1 < 0.02 Р5 - Р7
Р8 — Р1 >0.05 Р8 - Р9
Р9 - Р1 >0.05 Р9 — Р10
*10 - < 0.001 Р8 — Р10
> 0.05 < 0.03
> 0.05
> 0.05
> 0.05
> 0.05
Р2 - Р5 < 0.02
Р5 - Рв < 0.01
Р2 - РВ > 0.05
рз - Р6 < 0.01
- Р9 > 0.05
Р3 - Р9 < 0.001
Р4 - Р7 > 0.05
Р7 — Р10 < 0.05
Р4 - Р10 > 0.05
дили во второй серии опытов. Воздействие ГТ силой 2мА экспозицией 15,30,45 минут приводило к достоверному уменьшению объёма инфаран-рованной массы ЛЯ по отноиению к контролю (см.табл.2).Наиболее значительно снижался процент поражения ЛЗ при 30- (р<0.001) и 45-минутной гальванизации (pO.QOl).При воздействии ГТ силой 4мА различной экспозиции обьбм инфарцированной касса ЛЗ такге значительно уменьшался. Достоверных изменений, связанных с продолжительностью гальванизации не выявлено. 15- и 30-минутное действие тока силой 8мА практически не изменяло процент инфарцирования миокарда.В то se время, при 45-минутной гальванизации обьём поранения ЛЗ значительно снижался по отношению к контролю (р<0.001). Как свидетельствуют результаты многофакторного дисперсионного анализа,уменьсение объема инфарцированной массы ЛЖ при воздействии на неё ГТ определяется силой и экспозицией тока (р<0.00001).
ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ГТ НА ЗКСПГОПЕНТАЛЫМ И.Н ПО ДАННЫМ ГАММАХРОНОМЕТРИИ. Воздействие ГТ силой 2мА различной-продолжительности на экспериментальный ИИ приводило к достоверному уменьшению способности инфарцированного миокарда к накопления 99^Тс
пирфэтеха (р'0.001). Самое значительное снижение концентрации препарата в миокарде наблюдалось при длительности воздействия 15 минут. При этом, 15-минутная гальванизация током силой 4мА не изменяла накопительную способность инфарцированного миокарда,а 30-и 45-минутная— достоверно её уменьшала (р<0.001). Уменьшение накопления 9ЭШ Тс пирфэтеха в инферцированном миокарде наблюдалось и при воздействии на него ГТ силой 8мА различной продолжительности. Наибольшее снижение концентрации препарата вызывала 20-минутная гальванизация (р<0.001), наименьшее—45-минутная (р<0.01). Результаты многофакторного дисперсионного анализа свидетельствуют о том, что изменежге накопления 99® Тс пирфоте.ха в инфарцированном миокаде определяется силой ГТ (pO.OOOOl), продолжительность» воздействия (р<0.007), а также совместным действием сада и экспозиции гт (po.oaooi).
ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ГТ НА АКТИВНОСТЬ КАРДИОСПЕ-ЦИ'ШЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ КРНС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ИМ. При гальванизации крыс с ИМ током силой 2мА различной продолжительности наблюдалось достоверное снижение активности КФК и d-ГБДГ по по отноиению к уровня их при ИМ (см.рис.1). Наиболее значительно активность КФК уменьшалась при 30- (р<0.001) и 45-минутной гальванизации (р<0.001), а активность ¿-ГБДГ— при 30-шнутноы действии
Рис. I Активность ферментов в сыворотке крови □осле воздействия ГТ силой 2 иА различной экспозиции на инфарцированный миокард у крас.
4МА
Рис. 2 -Активность ферментов в сыворотке крови после воздействия ГТ силой 4 мА различной экспозиции на инфарцированный миокард укрыс.
Рис.3. Активность ферментов в сыворотке крова после воздействия ГТ силой 8 мА различной экспозиции на инфарцированный миокард у крыс.
ГТ (р<0.001). Уменьшение активности КЖ и J-ГБДГ наблюдалось и при воздействии ГТ силой 4мА экспозиции 15, 30, 45 минут (см. рис.2). Удалось установить, что наиболее выражено снижение активности ферментов после 15-минутной экспозиции тока (р<0.001).Увеличение силы ГТ до 8мА приводило также к достоверному уменьшению активности фер ментов по отношению к их уровню при ИМ (см.рис.З). Минимальные изменения претерпевали ферменты при 30-минутной экспозиции тока, максимальные при 45-минутном действии тока. Проведенный мнгогофак-торный дисперсионный анализ показывает, что изменение активности КЖ определяется силой ГТ (р<0.0006) н совместным действием силы и экспозиции ГТ (р<0.00001), а активности oi-ГБДГ— силой ГТ (р<0.0002), экспозицией тока (р<0.05) и совместным действием силы и экспозиции (р<0.002).
ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОЙ ГАЛЬВАНИЗАЦИИ НА СЕРДЕЧНЫЙ РИТМ И РАЗМЕР ПОРАЖЕНИЯ ЛЖ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ИМ [ГО ДАННЫМ ЭКГ..Гальванизация крыс с ИМ не влияла на частоту сердечных сокраиений. При анализе изменений электрокардиографических показателей было отмечено, что амплитуда зубца Q остается практически неизменной независимо от используемой силы тока и его экспозиции (р>0.05). При воздействии ГТ силой 2мА достоверное увеличение амплитуды зубца R наблюдалось
при 30-минутной (р<0.001) и 45-минутной экспозициях тока (р<0.02). При этих же экспозициях происходило уменьшение депрессии сегмента БТ. Воздействие ГТ силой 4мА в течение 15 к 30 минут, а такае воздействие ГГ силой 8мА в течение 45 минут приводило к достоверному увеличению амплитуды зубца н и уменьшению депрессии сегмента ЭТ.
ВЛИЯНИЕ ОДНОКРАТНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ГТ НА СОДЕРЖАНИЕ ШКРОЗЛЕ-МЕКТОВ (%) В ИНФАРЦИРОВАННОМ МИОКАРДЕ ЛЯ КРЫСЫ. Содержание ИОНОВ 2т?*,¥е2*,М£>2+,К+,Иа+, Са2+ определяли в инфзрцированной и неинфар-цированной зонах миокарда ЛЖ. После перевязки коронарной артерии наблюдалось достоверное увеличение количества ионов 2п2+,Ре2+,Са2+, На+ в миокарде, степень которого для 2п2+и Ге2+ оказалась больке в некнфарцироЕанной зоне.Достоверных различий б содержании конов На+ и Са2"'не обнаружено.Количество ионов К* значительно снижено в обеих зонах (р<0.001), а умэнькение ионов более вырагсоно в зоне инфаркта (р<0.001). Содержание конов Си2+ снижено в обеих зонах, причем в неинфарктной—в большей степени (р<0.001).
После гальванизации током, силой 2мА наиболее значительное уменьненке 2п2+ в зоне инфаркта наблюдается при длительности воздействия 15 минут (Р<0.01) И 30 минут (Р<0.01 )), Са2+- 15 минут
(Р<0.05),а наиболее значительное увеличение К "^—30 минут (Р<0.02), Ме2+—45 минут (Р<о.001). Содержание Ре2+ в инфарктной зоне (ИЗ) при действии тока различной продолжительности не изменяется (Р>0.05) Количество Ка+ достоверно увеличивается при длительности воздействия 30 минут (Р<0.05) и ке изменяется при длительности воздействия 15 и 45 минут (Р>0.05). При продолжительности гальванизации 30 и 45 минут содержание Си 2+ в обеих зонах достоверно снижено. При продолжительности же воздействия 15 минут оно остается неизменным.
В неинфарктной зоне (НЗ) самое "значительное снижение количества 2п2+происходит при длительности воздействия 15 минут (Р<0.001) и
30 минут (Р<0.001 ),Са2+-15 минут (Р<0.04),Ре2+-15 минут (Р<0 .05 )
и 30 минут (Р<о .02), а саше значительное увеличение К+—зо кинут (Р<0.001).Изменение содержания Не2* и На+ в НЗ при действии ГТ силой 2кА не обнаружено (Р>0.05).
Воздействие тока силой 4мА не вызывает в ИЗ достоверных изменений содержания 2п2*,Ре2+,Са2+, Количество К* и Чд2* наиболее значительно увеличивается при длительности воздействия 15 минут (Р<0.001;Р<0.01). При этой же экспозиции тока достоверно увеличивается и содержание На* (Р<0.01),в то время как при 30- и 45-минутной гальванизации его количество не изменяется (Р>о.05).Уменьшение содержания Си2+ достоверно лишь при длительности воздействия тока
30 минут (Р<0.001).
В ИЗ гальванизация током силой 4мА приводит к достоверному уменьшению количества гп2+ и Ге2+ при длительности воздействия 15 минут (Р'-0.01;Р*о.01) и 45 минут (Р<0.001;Р<0.05 );Са2+—зо минут (Р'-О .05) .Количество К+ наиболее значительно увеличивается при действии тока в течение 15 минут (Р<0.01) и 30 минут (Р<0.01). Галь-
+ *■
ванизация не вызывает достоверных изменений содержания На и Мд" . Количество Си2* значительно снюгено при длительности воздействия 45 минут.
Достоверных изменений содер»ания Ре2+,Ма+,Са2+ в ИЗ при гальванизация током силой 8мА не обнаружено.Значительное увеличение .достоверно при 15-минутной (Р<0.001) и 45-минутной (Р-0.001) экспозиции тока. 15-минутное воздействие ГТ приводит к увеличению (Р^о.001) и снижению количества Си2+ (Р<о.005).Содержание К+ в ИЗ достоверно увеличено при длительности воздействия 15 жнут (Р<0.05) И 45 минут (Р<0.05).
В НЗ наиболее значительное уменьшение Ре 2* возникает при продолжительности гальванизации 30 минут (Р<0.01), Са2+— 45 минут (Р'О.05).Количество достоверно увеличено при длительности воздействия 15 минут (Р<о.05).Достоверных различий в содержании Си 2Т Мз2+,Ма"' при действии ГТ в течение 15, 30 и 45 минут не выявлено. Количество К+ значительно увеличено при гальванизации в течение 45 минут (Р-0.02).
Проведенный многофакторный дисперсионный анализ показал значимость влияния силы и экспозиции ГТ на изменение содержания ионов в инфарктной и неинфарктной зонах. Оказалось, что в ИЗ силой тока определяется содержание гп2+ (Р'-О.ОЗ), К+ (Р<0.02), Иа* (Р<0.007); совместным действием силы и экспозиции тока-— Ре2"*" (Р<0.001), Иа* (Р'0.01); а в НЗ силой тока определяется количество (Р<0.01),
Си (Р'0.04), На (Р<о.оооз); совместным действием силы и экспозиции тока—Ре2+ (Р<0.001), Си2+ (Р<0.003), К"" (Р<0.01). Что хв касается оценки влияния ГТ на изменение содержания других ионов в ИЗ и НЗ, то, как показал анализ,оно не определяется ни силой тока, ни его продолжительностью,а в основном,не учтенными наш факторами.
ГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ИНФАРЦИРОВАННОГО МИОКАРДА пока-казало: в группах животных, у которых однократное воздействие ГГ приводило к уменьшению инфарцированиой массы Л2, наблюдалось нали-личие немногочисленных, мелких очагов мелкозернистого распада мио-плазмы миоцитов с пикнозом или лизисом ядер при относительной сохранности общей структуры мышечных волокон. Наряду с миоцитамя,
лишбнними гликогена, имелось достаточное их количество с умеренным его содержанием.
выводы
1. Однократная гальванизация лрекардиальной области крыс приводит к развитию альтеративных процессов в интактном миокарде ЛЖ. Повреждающее действие тем сильнее, чем больше сила тока и продолжительность гальванизации.
2. Обуславливая повреждение плазматической мембраны,однократная гальванизация прекардиальной области вызывает достоверное уменьшение содержания основных неорганических ионов в интактном миокарде, сохраняющееся на следующие сутки после воздействия гальваническим током. .
3. Воздействие ГТ на прекардиальную область крыс приводит к нарушению целостности клеточной мембраны и, как следствие этого,
к увеличению активности ферментов (КФК и ¡1 -ГБДГ) в сыворотке крови, зависящее от силы тока и продолжительности гальванизации. Наиболее значительные изменения их наблюдаются при силе тока 8мА.
л. Изменение активности ферментов в сыворотке крови, наблюдаемое после гальванизации прекардиальной области крыс с интактным миокардом, нормализуется в течение суток.
5. Однократная гальванизация прекардиальной области крыс с инфарктом миокарда обеспечивает уменьшение размера некроза.
6. Наблюдаемый в инфарцированном миокарде кардиопротекторный эффект гальванического тока сопровождается частичным восстановлением содержания основных неорганических ионов как в области развившегося некроза, так и вне её.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Установленный в эксперименте факт, свидетельствующий о кардиопротекторном эффекте гальванического тока в ипфарцированном миокарде,способствует более детальному изучению механизмов воздействия ГТ в эксперименте л создает предпосылки к использованию данной методики в клинике у больных с острим ИМ.
2. Полученные в работе данные о развитии повреждений в миокарде под влиянием гальванического тока большой силы и продолжительности, напоминающих явления миокардиодистрофии, позволяют предложить данную методику для экспериментального моделирования миокардиодистрофии с целью последующей отработки тактики лечебных манипуляций.
з. Материалы исследования могут быть дополнительным обоснованием уточнения санитарно-гигиенических норм для лиц, работающих с постоянным током.
Список работ, опубликованных по тене диссертации
1. Влияние постоянного тока на экспериментальный инфаркт миокарда у крыс. // Тезисы докладов 2 конференции молодых учёных "Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры". —Ленинград, 1990.—с.4
2. Использование ультразвука и электрофизиологических процедур на этапах реабилитации больных инфарктом миокарда // В кн.: "Научно—профилактические аспекты реабилитации инвалидов". Тезисы докладов конференции (семинара).— Минск, 23-24 апреля 1991,— с. 95 (соавт.: Мрочек А.Г., Сытый В.П., Булгак А.Г., Фалевич Л".Л., Захаревский М.А.).
3. Использование гаммахронометрии для оценки влияния физических факторов на миокард в эксперименте. //Тезисы докл. Всесоюзного симпозиума "Радионуклидные исследования в кардиологии".— Москва, 1991.—с.41 (соавт. Булгак А.Г.).
Подписано к печати АТ N Формат 60x84/16
Обьём 1,0 п.л. Тир. 100 экз. Заказ
Отпечатано на ротапринте БелГИУВ. г.Шнек, ул. П.Бровки,3