Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Влияние препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы головного мозга и сердца крыс после хирургической овариэктомии (экспериментальное исследование)
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.25
Автореферат диссертации по медицине на тему Влияние препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы головного мозга и сердца крыс после хирургической овариэктомии (экспериментальное исследование)
и1-""
На правах рукописи
ХАРЧИЛАВА ОКСАНА МАКСИМОВНА
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТОВ ЖЕНСКИХ ПОЛОВЫХ ГОРМОНОВ НА ДОФАМИНОВЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА И СЕРДЦА ПОСЛЕ ХИРУРГИЧЕСКОЙ ОВАРИЭКТОМИИ (экспериментальное исследование)
14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
О. Ш ГЛ
Уфа-2009
003460227
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию.
Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор
Валеева Лилия Аиваровна Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор
Зарудий Феликс Александрович доктор медицинских наук, профессор Ларионов Леонид Петрович
Ведущее учреждение: ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию.
Защита диссертации состоится « '2009 г. в /^часов на
заседании диссертационного совета Д 208. 006. 03. при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию по адресу: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
С диссертацией можно ознакомится в библиотеке ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию.
Автореферат разослан «
» АИ^Я/иЯ 200_£ г.
Ученый секретарь диссертационного совета, ^
Доктор медицинских наук, профессор Мирсаева Г.Х.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. В последние десятилетия внимание исследователей привлекают вопросы заместительной гормональной терапии в период менопаузы. Дефицит женских половых гормонов вызывает расстройства, среди которых преобладают психоэмоциональные, нейровегетативные, сердечнососудистые и двигательные нарушения (Караченцев А.П., 2004). При патологическом течении периода менопаузы, а также у женщин, перенесших хирургическую овариэктомию в молодом возрасте, возникает необходимость в назначении препаратов женских половых гормонов (Акунц К.Б., 2004; Вихляева Е.М., 1997). В настоящее время имеется большой выбор препаратов женских половых стероидов. Одним из современных препаратов для проведения заместительной гормонотерапии является фемостон-Ю («Solvay Pharma»), содержащий микронизированный 17Р-эстрадиол (2 мг) в комбинации с дидрогесте-роном (10 мг) (Звычайный М.А., 2004).
На фоне терапии фемостоном отмечается уменьшение количества тригли-церидов в крови и индекса атерогенности, не возникает активации свертывающей системы крови, улучшается эндотелийзависимая вазодилатация (Акунц К.Б., 2004, Подзолков В.И., 2004). Вместе с тем отмечены и отрицательные последствия гормонозаместительной терапии, такие как гиперплазия эндометрия, рак матки, мастопатии, гирсутизм, ожирение (Крыжановская И.О. с соавт., 2004, Эседова А.Э., 2006).
Молекулярные механизмы перечисленных эффектов препаратов женских половых гормонов недостаточно изучены. Установлено, что препараты женских половых стероидов, через внутриклеточные рецепторы эстрогенов и геста-генов способны воздействовать на экспрессию генов рецепторов нейромедиа-торов (Boose R. et al., 2001).
В нейрорегуляции мозга и сердца важную роль играют дофаминовые рецепторы. Располагаясь в сердце, в гладкой мускулатуре сосудов, в различных структурах головного мозга, они участвуют в регуляции психоэмоциональной сферы,
краткосрочной и пространственной памяти (Малинина Е.П., 2001), локомоторной активности (ЕуэБ, Т., 1999), социальных взаимоотношений (Могилевский Д.А., 2004). Их стимуляция вызывает сосудорасширяющий эффект, влияет на коронарный кровоток, число сердечных сокращений (Сергеев П.В. с соавт., 1998).
Роль дофаминовых рецепторов в патогенезе сердечно-сосудистых и психических заболеваний в период менопаузы исследована недостаточно. Изучение дофаминовых рецепторов сердца и мозга после хирургической овариэкто-мии представляется важным для понимания молекулярных механизмов патогенеза овариэктомического синдрома и для оптимизации заместительной гормональной терапии в период менопаузы в норме и при инфаркте миокарда.
Цель исследования. Определить характер действия препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы головного мозга и сердца крыс после хирургической овариэктомии и в динамике экспериментального инфаркта миокарда.
Задачи исследования:
1. Определить уровень специфического связывания [3Н]-спиперона с мембранной фракцией гомогената головного мозга (МФГМ) при вытеснении бло-катором дофаминовых рецепторов галоперидолом у крыс после ложной и истинной хирургической овариэктомии в сравнении.
2. Оценить влияние 17/3-эстрадиола, дидрогестерона и фемостона на уровень специфического связывания меченого лиганда с МФГМ овариэктомиро-ванных крыс.
3. Изучить динамику специфического связывания [3Н]-спиперона с дофаминовыми рецепторами головного мозга ложноовариэктомированных и овари-эктомированных крыс в разные сроки после экспериментального инфаркта миокарда и после введения препаратов женских половых гормонов.
4. Определить динамику уровня специфического связывания [3Н]-спиперона с мембранной фракцией гомогената сердца (МФГС) при вытеснении галоперидолом у самок крыс после ложной овариэктомии и истинной хирургической овариэктомии.
5. Изучить уровень специфического связывания [3Н]-спиперона с МФГС у овариэктомированных крыс на фоне заместительной терапии препаратами женских половых стероидов.
6. Определить количество сайтов связывания [3Н]-спиперона в сердце ложноовариэктомированных и овариэктомированных крыс в разные сроки экспериментального инфаркта миокарда после введения 17/3-эстрадиола, дидроге-стерона и фемостона.
Научная новизна. Впервые изучено специфическое связывание [3Н]-спиперона с МФГС и МФГМ при вытеснении лигандом дофаминовых рецепторов галоперидолом у крыс после ложной и истинной овариэктомии. Установлено, что ложная операция понижает количество сайтов связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ в сердце и мозге. Билатеральное хирургическое удаление яичников оказывает противоположное действие. Количество мест связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ в мозге и сердце овариэктомированных крыс повышается. Выявлено модулирующее действие фемостона на дофаминовые рецепторы мозга и сердца у овариэктомированных самок. Исследовано состояние дофаминергической системы головного мозга и сердца у ложнооперированных и овариэктомированных крыс в разные сроки инфаркта миокарда. Установлено модулирующее действие 17/3-эстрадиола, дидрогестерона и фемостона на Д2-рецепторы сердца и мозга у кастрированных животных после инфаркта миокарда.
Научно-практическая ценность. Получены новые сведения о влиянии истинной и ложной овариэктомии, экспериментального инфаркта миокарда на дофаминовые рецепторы сердца и головного мозга. Полученные данные расширяют представление о роли дофаминовых рецепторов в регуляции деятельности сердца и головного мозга в норме и патологии, обосновывают возможность применения средств, действующих на дофаминергические синапсы, для фармакологической регуляции деятельности сердца и мозга в период менопаузы.
Выявлено модулирующее действие препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы сердца и головного мозга после хирургической овариэктомии, экспериментального инфаркта миокарда на фоне хирургической менопаузы, что вносит вклад в теоретическую фармакологию, раскрывая неизвестные аспекты механизма их действия.
Полученные данные могут быть использованы для преподавания фармакологии, кардиологии и гинекологии.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. При ложной овариэктомии понижается специфическое связывание [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ с МФГМ и с МФГС при вытеснении га-лоперидолом. Хирургическая овариэктомия, напротив, способствует увеличению количества мест связывания [3Н]- спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ в мозге и сердце крыс.
2. Фемостон уменьшает количество дофаминовых рецепторов в головном мозге и сердце овариэктомированных крыс.
3. При экспериментальном инфаркте миокарда у крыс-самок изменяется уровень специфического связывания [3Н]-спиперона с МФГС и МФГМ. Динамика уровня связывания [3Н]-спиперона отличается у ложнооперированных и овариэктомированных крыс.
4. Препараты женских половых гормонов модулируют динамику уровня связывания [3Н]-спиперона с Д2-рецепторами сердца и мозга овариэктомированных крыс в течение инфаркта миокарда.
Внедрение результатов работы в практику. Полученные данные используются в учебном процессе на кафедрах фармакологии № 1 и № 2 Башкирского государственного медицинского университета. По результатам исследований получен патент РФ № 2326271 с приоритетом от 20.06.2008 г. «Средство для модуляции плотности Дг-рецепторов мозга при менопаузе».
Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ, в том числе 1 публикация в журнале рекомендуемом ВАК.
Апробацпя работы. Основные результаты работы доложены на XII Международной конференции «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии», Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 31 мая - 9 июня, 2004, 69-й республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины», Уфа, 2004, первой конференции Российиской Ассоциации психонейроэндокринологов, Санкт-Петербург, 24-26 сентября 2008 г.
Апробация работы состоялась на межкафедральном заседании кафедр фармакологии № 1 с курсом клинической фармакологии, фармакологии № 2, ЦНИЛ в декабре 2008 г.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 168 страницах компьютерного набора текста, состоит из введения, обзора литературы, глав отражающих результаты собственных исследований, обсуждения полученных результатов и выводов. Работа иллюстрирована 32 рисунками. Библиогафия представлена 35 отечественными и 268 иностранными источниками.
Материалы и методы исследования. Опыты поставлены на 500 беспородных крысах — самках массой 140-160 г, содержавшихся в условиях вивария.
Менопаузу вызывали путем хирургической овариэктомии по Киршенб-лат (1969). Ежедневно, в течение 3-х недель, у крыс брали влагалищные мазки для контроля за эффективностью кастрации. На протяжении всего периода наблюдения клеточный состав мазков не изменялся и соответствовал фазе межтечки. Контрольных животных оперировали аналогичным способом, но яичники не удаляли.
Препараты женских половых гормонов: 17р-эстрадиол в дозе 20 мкг/сутки, дидрогестерон - 100 мкг/сутки, фемостон - комбинация эстрадиола и дидроге-стерона в тех же дозах вводили крысам внутрь, с первого дня после овариэктомии, ежедневно, в течение двух недель. Контролем служили животные, подвергшиеся хирургической овариэктомии и получавшие плацебо. Через две не-
дели часть животных, получавших препараты женских половых гормонов, подвергали операции коронароокклюзии.
Экспериментальный инфаркт миокарда (ИМ) у крыс вызывали путем перевязки передней нисходящей ветви левой коронарной артерии на 1,5 мм ниже ушка левого предсердия под эфирным наркозом (Коган А.Х., 1979). Для подтверждения ИМ у животных снимали ЭКГ в трех стандартных отведениях при скорости движения бумажной ленты 50 мм/с, 1 мВ — 10 мм до начала экспериментов, сразу после воспроизведения ИМ и в динамике. Измеряли стандартные зубцы, интервалы ЭКГ и вычисляли систолический показатель QRST/RR* 100, величина которого косвенно отражает состояние сердечной мышцы. Измерение размеров зоны некроза миокарда после коронароокклюзии производили макро-гистохимически по методике А.Х. Коган (1984) с использованием НСТ-теста. Контрольных животных оперировали аналогичным способом, но коронарную артерию не перевязывали, а лишь подводили под нее лигатуру.
Животных забивали декапитацией, выделяли сердце и мозг, гомогенезиро-вали. Мембранную фракцию гомогенатов сердца и мозга получали методом дифференциального ультрацентрифугирования в гомогенной среде. Полученную фракцию гомогенатов1 сердца и мозга использовали для связывания [3Н]-спиперона (Lim D. К., 1989).
Для определения общего связывания мембранный препарат с конечным содержанием белка 0,3-1,0 мг/ мл инкубировали с [3Н]-спипероном (Amersham, UK, удельная радиоактивность 88 Ci/mmol) в концентрациях 0,5 и 2 нМ. Концентрация 0,5 нМ близка к Kd [3Н]-спиперона, а величина Kd лиганда характеризует его сродство или аффинность к рецепторам. При концентрации 2 нМ происходит насыщение мест связывания [3Н]-спиперона, и уровень связывания лиганда при этой концентрации может характеризовать количество дофаминовых рецепторов. Инкубацию проводили 40 мин. при 25°С в 50 мМ трис-HCl буфере, содержащем 5 мМ ЭДТА.
Неспецифическое связывание определяли точно также, но в присутствии 1000- кратного избытка немеченого галоперидола, блокатора рецепторов дофа-
мина. Реакция была остановлена путем фильтрации проб через фильтры GFC. Фильтры просушивали и помещали во флаконы с 5 мл сцинтилиционной жидкости на основе диоксана. Через 48 часов радиоактивность раствора была измерена на счетчике импульсов Бета-2.
Специфическое связывание вычисляли как разницу между общим и неспецифическим связыванием. Содержание мест связывания выражали в фемтомо-лях (10'15 М) лиганда, специфически связанного с мг белка (Ткачук В.А., 1983; Сергеев В.П., Шимановский Н.Л., 1987) и представляли в процентах.
Белок определяли по Лоури (Lowry et al, 1951).
Полученные результаты обрабатывали методом вариационной статистики с применением критерия Стьюдента (Беленький М.Л., 1963), с использованием программы Microsoft Excel 2000.
Результаты собственных исследований н их обсуждение. Проведение ложной овариэктомии оказало влияние на уровень специфического связывания [3Н]-спипероиа с МФГМ, что свидетельствует о действии ложной овариэктомии на дофаминовые рецепторы мозга.
Через 1 и 2 недели после операции отмечалось уменьшение уровня специфического связывания радиолиганда в концентрации 0,5 нМ с препаратами головного мозга (рис. 1). Так как концентрация 0,5 нМ близка к Kd спиперона, а величина IQ характеризует аффинность рецепторов, снижение уровня специфического связывания радиолиганда в данной концентрации может указывать на значительное и стойкое снижение аффинности Д2 рецепторов головного мозга после ложной овариэктомии.
Ложная овариэктомия также приводит к снижению уровня связывания [3Н] - спиперона в концентрации 2 нМ через 1 неделю наблюдения.
Так как концентрация [3Н]-спиперона 2 нМ близка к концентрации, при которой происходит насыщение дофаминовых рецепторов, уровень связывания радиолиганда в данной концентрации может характеризовать плотность дофаминовых рецепторов мозга. Поэтому можно считать, что ложная овариэктомия приводит к кратковременному снижению плотности дофаминовых рецепторов
мозга. Таким образом, хирургическое вмешательство вызывает стойкое и значительное снижение аффинности и кратковременное снижение плотности дофаминовых рецепторов мозга самок крыс.
Оинтактные Шложнаяовариэктомия £3хирургическая оваризктомия!
* достоверно по сравнению с интактными крысами (р< 0,05). Рис. 1. Уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ с МФГМ у крыс после ложной (2 недели) и хирургической овариэктомии (2 недели)
Билатеральное хирургическое удаление яичников у самок крыс привело к изменению уровня специфического связывания [3Н]-спиперона с мембранами мозга по сравнению с ложноовариэктомированными животными. Уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 0,5 нМ повысился в 3 раза по сравнению с контрольной группой, а в концентрации 2 нМ-возрос в 30 раз по сравнению с уровнем ложноовариэктомированных самок. Итак, у крыс-самок, подвергшихся двухстороннему удалению яичников, отмечается стойкое и резкое увеличение количества дофаминовых рецепторов мозга. При этом аффинность рецепторов повышается по сравнению с ложнооперирован-ными крысами.
Ежедневное двухнедельное пероральное введение 17/3-эстрадиола, дидро-гестерона и фемостона кастрированным самкам оказало существенное влияние на количество сайтов связывания [3Н]-спиперонав головном мозге.
Все изученные препараты повысили более чем в 2 раза уровень связывания радиолиганда в концентрации 0,5 нМ (рис. 2).
0,5 нМ 2нМ
□ плацебо Пэстрадиол □дидрогестерон Офемостои
• достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами, получавшими плацебо (р< 0,05).
Рис. 2. Изменение уровня специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ с МФГМ у овариэктомированных крыс под действием препаратов женских половых гормонов
Уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 2 нМ 17(3-эстрадиол и дидрогестерон повышают, а фемостон - уменьшает до уровня интактных крыс. Обобщая полученные данные можно утверждать, что 17-/3-эстрадиол и дидрогестерон увеличивают аффинность и плотность Д2 рецепторов в головном мозге. Фемостон, напротив, более чем в семь раз уменьшает плотность и лишь в 2 раза повышает аффинность дофаминовых рецепторов. Следовательно, лишь комбинированный препарат фемостон, оказывает модулирующее действие на рецепторы дофамина головного мозга.
После экспериментального инфаркта миокарда у крыс самок, подвергшихся ложной овариэктомии уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 0,5 нМ изменяется неоднозначно (рис. 3).
Характер изменений зависит от срока инфаркта миокарда. Повышение уровня связывания отмечается через 1 и 14 суток, а снижение - через 7 суток. Уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 2 нМ по-
вышается во все сроки наблюдения по сравнению с группой ложнооперирован-ных животных без инфаркта миокарда.
1 ~ — * —i--——;—
0,5 нМ 2 нМ
□ контроль О ИМ 1-е сутки [ЗИМ 3-й сутки ЕЭИМ 7-« сутки НИМ 14-е сутки
* 'достоверно по сравнению с ложноовариэктомированными крысами (р< 0,05).
Рис. 3. Влияние экспериментального инфаркта миокарда на уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 0,5 и 2 нМ с МФГМ у ложноовариэктомированных крыс в динамике
В результате коронароокклюзии у овариэктомированных животных уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 0,5 нМ с МФГМ резко повышается во все сроки наблюдения, что свидетельствует о повышении аффинности Д2-рецепторов мозга при инфаркте миокарда на фоне овариэктомии (рис. 4).
Максимальный скачок аффинности рецепторов отмечается через сутки после коронарооклюзии, затем - небольшой спад через 3 суток с последующим повышением через 7 и 14 суток. Уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 2 нМ с МФГМ повышается через 1, 3 и 7 суток и уменьшается через 14 суток. Следовательно, у кастрированных крыс с инфарктом миокарда изменяется не только аффинность, но и плотность Дг-рецепторов мозга.
Таким образом, при ИМ как у ложноовариэктомированных, так и кастрированных самок повышается плотность Дгрецепторов мозга.
0,5 нМ 2 нМ
Оконтроль В ИМ 1-е сутки ИИМ 3-й сутки ШИМ 7-е сутки И ИМ 14-е сутки
* достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами (р< 0,05).
Рис. 4. Динамика уровня специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ с МФГМ у овариэктомированных крыс в разные сроки после коронароокклюзии
Введение кастрированным самкам препаратов женских половых гормонов в течение двух недель до перевязки коронарной артерии оказало влияние на динамику экспериментального инфаркта миокарда. 17/?-эстрадиол снижает связывание [3Н]-спиперона в концентрации 0,5 нМ с МФГМ лишь через 7 суток после коронароокклюзии (рис. 5). Дидрогестерон уменьшает связывание ра-диолиганда через 3 и 7 суток после ИМ, а фемостон - во все сроки после ИМ, кроме 7 суток. Максимальный эффект препарата проявляется через 3 дня после коронароокклюзии.
Таким образом, все изученные препараты действуют однонаправлено, снижают аффинность дофаминовых рецепторов мозга. Наиболее выраженный эффект вызывает фемостон, приближая аффинность Д2-рецепторов кастрированных крыс с ИМ к уровню кастрированных крыс без ИМ.
Препараты женских половых гормонов изменяли и динамику связывания [3Н]-спиперона в концентрации 2 нМ с МФГМ (рис. 6).
эстрадиол дидрогестерон фемостон
| □ контроль а кНУ! 1 сут а ИМ 3 сут В ИМ 7 сут а ИМ 14 сут [
• достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами с ИМ, получавшими плацебо (р< 0,05). Рис. 5. Динамика уровня специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 0,5 нМ с МФГМ в разные сроки после коронароокклюзии у овариэктомированных крыс, получавших препараты женских половых стероидов
эстрадиол дидрогестерон фемостон
□ контроль ОИМ 1 сут ЕЗИМЗсут ОИМ7сут 0ИМ14сут
• достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами с ИМ,
получавшими плацебо (р< 0,05). Рис. 6. Динамика уровня специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 2 нМ с МФГМ в разные сроки после коронароокклюзии у овариэктомированных крыс, получавших препараты женских половых стероидов
17/3-эстрадиол увеличивает количество Д2 рецепторов через 14 суток. Дид-рогестерон уменьшает количество Д2-рецепторов через 3 и 7 суток после перевязки коронарной артерии и увеличивает через 1 и 14 суток. Таким образом, через 3, 7 и 14 суток после ИМ проявляется модулирующий эффект дидроге-стерона. Фемостон повышает связывание [3Н]-спиперона через 1 и 14 суток после коронароокклюзии и не влияет через 3 и 7 суток.
Итак, все изученные препараты увеличивают количество Д2-рецепторов в головном мозге крыс через 14 дней после ИМ. В целом женские половые гормоны оказывают модулирующее действие на аффинность и плотность дофаминовых рецепторов головного мозга кастрированных крыс с ИМ. Наиболее выраженный эффект вызывают фемостон и дидрогестерон.
Следующая серия опытов была посвящена изучению дофаминергической системы сердца у крыс.
Ложная хирургическая овариэктомия уменьшает уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ с МФГС более чем в 3 раза по сравнению с контролем, что свидетельствует о снижении аффинности и плотности Д2-рецепторов сердца после хирургического вмешательства (рис. 7).
0,5 нМ 2 нМ
□ интактные □ ложная овариэктомия хирургическая овариэктомия
* достоверно по сравнению с интактными крысами (р< 0,05). Рис. 7. Уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ с МФГС у крыс после ложной и хирургической овариэктомии
После удаления яичников уровень связывания радиолиганда в низкой концентрации повысился в 84 раза, а в высокой - в 5 раз по сравнению с ложно-оперированными крысами. Таким образом, хирургическая овариэктомия приводит к повышению аффинности и плотности дофаминовых рецепторов в сердце кастрированных самок.
Изучение влияния 17/3-эстрадиола, дидрогестерона и фемостона на дофаминовые рецепторы сердца у овариэктомированных самок показало следующее (рис. 8).
• достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами, получавшими плацебо (р< 0,05).
Рис. 8. Изменение уровня специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ с МФГС у овариэктомированных крыс под действием препаратов женских половых гормонов
Эстрадиол и дидрогестерон уменьшают уровень связывания меченого лиган-да в концентрации 0,5 нМ, а в концентрации 2 нМ - повышают в 4,6 и П раз. А фемостон, напротив, в низкой концентрации не оказывает влияния, а в высокой - значительно уменьшает. Таким образом, 17/3-эстрадиол и дидрогестерон уменьшают аффинность, но повышают плотность дофаминовых рецепторов сердца. При этом дидрогестерон оказывает наиболее сильное действие, которое проявляется уменьшением уровня специфического связывания [3Н]-спиперона в низкой концентрации до уровня ложнооперированных животных.
После перевязки передней нисходящей ветви левой коронарной артерии уровень специфического связывания [3Н]-спиперона с МФГС ложноовариэкто-мированных крыс претерпевал изменения (рис. 9). Уровень связывания радиоли-ганда в концентрации 0,5 нМ с мембранами сердца снижается через 1 сутки, и повышается через 3 и 7 суток после инфаркта миокарда. Уровень связывания меченого лиганда в высокой концентрации падает во все сроки наблюдения, что свидетельствует об уменьшении количества дофаминовых рецепторов в сердце.
| О контроль □ ИМ 1-е сутки РИМ 3-й сутки □ ИМ 7-е сутки ДИМ 14-е сутки j
* достоверно по сравнению с ложноовариэктомированными крысами (р< 0,05).
Рис. 9. Влияние экспериментального инфаркта миокарда на уровень специфического связывания [3Н]- спиперона в концентрации 0,5 и 2 нМ с МФГС у ложноовариэктомированных крыс в динамике
Исследуя специфическое связывание [3Н]-спиперона с МФГС кастрированных самок в разные сроки ИМ, мы установили, что уровень специфического связывания меченого лиганда в концентрации 0,5 нМ снижается во все сроки кроме 7 суток, а в концентрации 2 нМ - повышается, кроме 14 суток (рис. 10).
В целом у кастрированных крыс резко понижается аффинность дофаминовых рецепторов в сердце через 1, 3 и 14 суток после моделирования ИМ на фоне небольшого повышения плотности рецепторов через 1, 3 и 7 суток после ко-ронароокклюзии. Через 7 дней повышается аффинность и плотность Д2-рецепторов сердца.
* достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами (р< 0,05). Рис. 10. Динамика уровня специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ с МФГС у овариэктомированных крыс в разные сроки после коронароокклюзии
Предварительное, ежедневное, двухнедельное, пероральное введение препаратов женских половых гормонов овариэктомированным крысам изменяло динамику уровня связывания [3Н]-спиперона с МФГС при экспериментальном инфаркте миокарда (рис. 11).
Действие 17(3-эстрадиола, дидрогестерона и фемостона имеет сходный характер. Препараты повышают уровень связывания [3Н]-спиперона в концентрации 0,5 нМ в острейший, острый периоды и период формирования постинфарктного кардиосклероза, и снижают - в подострый период. Тем самым оказывают модулирующее действие на аффинность Д2-рецепторов сердца после ИМ.
Все исследованные препараты влияют на уровень специфического связывания в концентрации 2 нМ с МФГС кастрированных самок (рис. 12). Они оказывают однонаправленное действие, уменьшают количество сайтов связывания [3Н]-спиперона через 3 дня и увеличивают в некоторые сроки исследования. Наиболее выраженное действие на количество Д2-рецепторов сердца оказывает фемостон.
дидрогестерон
фемостон
□ контроль □ ИМ 1 сут □ ИМ 3 сут □ ИМ 7 сут э ИМ 14 сут
• достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами с ИМ,
получавшими плацебо (р< 0,05). Рис. 11 Динамика уровня специфического связывания [3Н]- спиперона в концентрации 0,5 нМ с МФГС в разные сроки после коронароокклюзии у овариэктомированных крыс, получавших препараты женских половых стероидов
эстрадиол
дидрогестерон
фемостон
□ контроль
О ИМ 1 сут
о ИМ 3 сут
□ ИМ 7 сут
а ИМ 14 сут
• достоверно по сравнению с овариэктомированными крысами с ИМ, получавшими плацебо (р< 0,05). Рис. 12 Динамика уровня специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрации 2 нМ с МФГС в разные сроки после коронароокклюзии у овариэктомированных крыс, получавших препараты женских половых стероидов
20
ВЫВОДЫ
1. Ложная овариэктомия приводит к стойкому снижению уровня специфического связывания [3Н]-спиперона с мембранной фракцией головного мозга в концентрации 0,5 нМ и кратковременному - в концентрации 2 нМ. Истинная хирургическая овариэктомия, напротив, повышает уровень связывания радио-лиганда в низкой и высокой концентрациях.
2. Препараты женских половых гормонов 17|3-эстрадиол, дидрогестерон увеличивают количество сайтов связывания [3Н]-спиперона в головном мозге кастрированных самок крыс в низкой и высокой концентрациях. Фемостон в 2 раза повышает уровень связывания радиолиганда в концентрации 0,5 нМ и в 7 раз уменьшает - в концентрации 2 нМ.
3. Перевязка левой коронарной артерии вызывает увеличение количества мест связывания [3Н]-спиперона в головном мозге крыс. У ложноовариэктоми-рованных самок повышается уровень связывания радиолиганда, больше в концентрации 2 нМ, а у овариэктомированных крыс - в концентрации 0,5 нМ. Фемостон оказывает модулирующее действие на дофаминовые рецепторы мозга кастрированных крыс с экспериментальным инфарктом миокарда.
4. В сердце крыс с ложной овариэктомией уменьшается уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ. После хирургической овариэктомии уровень связывания радиолиганда в низкой и высокой концентрациях повышается.
5. 17/3-эстрадиол и дидрогестерон оказывают однонаправленное действие на дофаминовые рецепторы сердца: в концентрации 0,5 нМ уменьшают, а в концентрации 2 нМ - увеличивают уровень специфического связывания радиолиганда с мембранной фракцией гомогената сердца. Фемостон не влияет на уровень связывания радиолиганда в низкой концентрации, но уменьшает в высокой.
6. При экспериментальном инфаркте миокарда в сердце ложноовариэкто-мированных крыс уровень связывания [3Н]-спиперона в концентрации 0,5 нМ понижается через 1 и 14 суток и повышается через 3 и 7 суток, а в концентра-
ции 2 нМ понижается во все сроки исследования. У кастрированных самок уровень связывания радиолиганда в низкой концентрации понижается через 1, 3 и 14 суток, повышается через 7 суток, а в высокой концентрации повышается во все сроки, кроме 14 суток. Препараты женских половых гормонов оказывают модулирующее действие на уровень связывания радиолиганда в низкой концентрации в сердце овариэктомированных крыс.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. После оперативного вмешательства, овариэктомии и на фоне инфаркта миокарда необходимо учитывать состояние дофаминергической системы сердца и мозга при назначении средств, действующих на дофаминовые рецепторы.
2. Характер действия препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы сердца и мозга необходимо учитывать при их совместном назначении с Д2-агонистами и антагонистами.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Валеева, JI.A, Влияние стероидных гормонов на дофаминовые рецепторы головного мозга / Л.А. Валеева, О.М. Харчилава // Фармация. - 2008. -№ 6. - С. 52-52.
2. Валеева Л.А. Влияние женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы мозга у крыс с овариэктомией. Материалы заочной международной конференции / Л.А. Валеева, О.М. Харчилава // Приоритеты фармацевтической науки и практики, Москва, 31 октября 2005 - 2006. - С. 339-342.
3. Харчилава О.М. Изменение плотности и аффинности дофаминовых рецепторов головного мозга на фоне хирургической овариэктомии и коррекция их женскими половыми гормонами / Л.А. Валеева, Ю.И. Кутуев, О.М. Харчилава // Медицинский вестник Башкортостана. 2006. - № 6. - С. 258-261.
4. Харчилава О.М. Изменение плотности и аффинности дофаминовых рецепторов сердца на фоне хирургической овариэктомии и коррекция их женски-
ми половыми гормонами / Л.А. Валеева, О.М. Харчилава // Медицинский вестник Башкортостана. 2006. - № 6. - С. 261-264.
5. Харчилава О.М. К молекулярному механизму действия препаратов женских половых гормонов / Л.А. Валеева, О.М. Харчилава И Научный прорыв -2007. - 2007. - С. 40-44.
7. Харчилава О.М. Влияние экспериментального инфаркта миокарда на дофаминовые рецепторы мозга у овариэктомированных крыс / Л.А. Валеева, О.М. Харчилава // Научный прорыв - 2007. - 2007. - С. 44-48.
8. Харчилава О.М. Роль дофаминовых рецепторов в патогенезе менопау-зального синдрома и в механизме действия женских половых гормонов / Л.А. Валеева, О.М. Харчилава // Медицинский вестник Башкортостана. 2007. -№ 1. — С.34-38.
9. Харчилава О.М. Действие женских половых стероидов на дофаминовые рецепторы головного мозга овариэктомированных самок крыс / Л.А. Валеева, О.М. Харчилава // Первая конференция Российиской Ассоциации психонейро-эндокринологов, Санкт-Петербург, 24-26 сентября 2008 г.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
МФГС - мембранная фракция гомогената сердца.
МФГМ - мембранная фракция гомогената мозга.
ИМ - инфаркт миокарда.
ХАРЧИЛАВА ОКСАНА МАКСИМОВНА
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТОВ ЖЕНСКИХ ПОЛОВЫХ ГОРМОНОВ НА ДОФАМИНОВЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА И СЕРДЦА ПОСЛЕ ХИРУРГИЧЕСКОЙ ОВАРИЭКТОМИИ (экспериментальное исследование)
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Издательская лицензия № 06788 от 01.11.2001 г. ООО «Издательство «Здравоохранение Башкортостана» 450000, РБ, г. Уфа, а/я 1293; тел. (347) 250-81-20, факс (347) 250-13-82.
Подписано в печать 30.12.2008 г. Формат 60x84/16. Гарнитура Times New Roman. Бумага офсетная. Отпечатано на ризографе. Усл. печ. л. 1,4. Уч.-изд. л. 1,5. Тираж 100. Заказ № 442.
Оглавление диссертации Харчилава, Оксана Максимовна :: 2009 :: Уфа
ГЛАВА 1. ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Препаративная часть
3.1.1. Моделирование экспериментальной менопаузы
3.1.2. Моделирование экспериментального инфаркта миокарда
3.1.3. Приготовление гомогенатов сердца и мозга
3.1.4. Выделение мембранной фракции гомогенатов сердца и мозга
3.1.5. Реагенты, препараты, аппаратура
3.2. Методы исследования
3.2.1. Определение уровня связывания лиганда с дофаминовыми, рецепторами —
3.2.2. Определение белка
3.2.3. Электронно-микроскопическое исследование
3.2.4. Статистические методы -3.3. Постановка экспериментов
3.3.1. Особенности определения уровня специфического связывания Н]-спиперона с МФГС и МФГМ крыс на фоне овариэктомии
3.3.2. Особенности определения уровня специфического связывания [ Н]-спиперона с МФГС и МФГМ у овариэктомированных крыс на фоне введения препаратов женских половых гормонов
3.3.3. Особенности определения уровня специфического связывания [3Н]-спиперона с МФГС и МФГМ у овариэктомированных крыс в разные сроки после инфаркта миокарда
3.3.4. Особенности определения уровня специфического связывания [3Н]-спиперона с дофаминовыми рецепторами у крыс, получавших препараты женских половых гормонов, в разные сроки после корона-роокклюзии
ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИИ
4.1. Действие препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы головного мозга самок крыс после хирургической овариэктомии
4.1.1. Влияние ложной овариэктомии на уровень специфического связывания [3Н]-спиперона с МФГМ
4.1.2. Действие хирургической овариэктмоии на количество сайтов специфического связывания [ Н]-спиперона с рецепторами дофамина в головном мозге
4.1.3. Уровень специфического связывания [ Н]-спиперона с МФРМ овариэктомированных крыс после введения препаратов женских половых гормонов
4.1.4. Уровень специфического связывания [ Н]-спиперона с МФГМ в разные сроки инфаркта миокарда у ложноовариэктомированных животных
4.1.5. Дофаминергическая система головного мозга кастрированных самок в разные сроки инфаркта миокарда
4.1.6. Действие препаратов женских половых гормонов на уровень специфического связывания [ Н]-спиперона с МФГМ кастрированных самок в разные сроки после инфаркта миокарда
4.2. Влияние препаратов женских половых стероидов на дофаминовые рецепторы сердца в период менопаузы
4.2.1. Влияние ложной овариэктомии на уровень специфического связывания [3Н]-спиперона с МФГС
4.2.2. Действие хирургической овариэктмоии на количество сайтов специфического связывания [3Н]-спиперона в сердце
4.2.3. Уровень специфического связывания [3Н]-спиперона с МФРС овариэктомированных крыс после введения препаратов женских половых гормонов
4.2.4. Уровень специфического связывания [ Н]-спиперона с МФГС в разные сроки инфаркта миокарда у ложноовариэктомированных животных
4.2.5. Влияние коронароокклюзии на уровень специфического связывания [ Н]-спиперона с дофаминовыми рецепторами сердца овариэк-томированных крыс
4.2.6. Влияние препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы сердца кастрированных самок в разные сроки инфаркта миокарда
ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ГЛАВА 6. ВЫВОДЫ 117 ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 119 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АД - артериальное давление
ЗГТ - заместительная гормонотерапия
ИБС - ишемическая болезнь сердца
ИМ - инфаркт миокарда
МАО - моноаминооксидаза
МФГМ - мембранная фракция гомогената мозга
МФГС - мембранная фракция гомогената сердца
ССС - сердечно- сосудистая система
ЦНС - центральная нервная система
ЧСС - частота сердечных сокращений
ЭКГ - электрокардиограмма
ЖПГ - женские половые гормоны
ГЛАВА 1. ВВЕДЕНИЕ
Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Харчилава, Оксана Максимовна, автореферат
При патологическом течение периода менопаузы, а также у женщин, перенесших хирургическую овариэктомию в молодом возрасте, возникает необходимость в назначении препаратов женских половых гормонов. В настоящее время имеется большой выбор препаратов женских половых стероидов. Одним из современных препаратов для проведения заместительной гормонотерапии является фемостон-10 («Solvay Pharma»), содержащий микронизированный 1713-эстрадиол (2 мг) в комбинации с дидрогестероном (10 мг). Микронизированный 1713-эстрадиол легко всасывается из желудочно-кишечного тракта, и после достижения равновесной концентрации его средний уровень при непрерывном приеме остается относительно постоянным. Дидрогестерон характеризуется метаболической стабильностью, избирательными прогестагенными свойствами и отсутствием эстрогенной, андрогенной и минералокортикоидной активности [14, 74].
На фоне терапии фемостоном наблюдается значительное снижение модифицированного менопаузального индекса. Нейровегетативные расстройства уменьшаются на 76%, обменно-эндокринные - на 62,5%, психоэмоциональные - на 63,7% [16, 23]. Отмечается уменьшение количества триглицеридов в крови и индекса атерогенности, не возникает активации свертывающей системы крови, улучшается эндотелийзависимая вазодилатация [31]. Вместе с тем отмечены и отрицательные последствия гормонозаместительной терапии, такие как гиперплазия эндометрия, рак матки, мастопатии, гирсутизм, ожирение.
Молекулярные механизмы перечисленных эффектов препаратов женских половых гормонов недостаточно изучены. Установлено, что препараты женских половых стероидов через внутриклеточные рецепторы эстрогенов и гес-тагенов способны воздействовать на экспрессию генов рецепторов нейроме-диаторов [59].
В нейрорегуляции мозга и сердца важную роль играют дофаминовые рецепторы. Д2-рецепторы находятся в мозге, сердце, гладкой мускулатуре сосудов. Располагаясь в различных структурах головного мозга, они участвуют в регуляции психоэмоциональной сферы [29], краткосрочной и пространственной памяти, локомоторной активности, социальных взаимоотношений [30, 106, 229]. Их стимуляция вызывает сосудорасширяющий эффект, влияет на коронарный кровоток, число сердечных сокращений [52, 205].
По данным ряда авторов, менопауза приводит к уменьшению активности дофаминергической системы. Так Босс, и Де Пауло выявили уменьшение количества Дх- и Д2-рецепторов в коре и стриатуме мозга крыс, подвергшихся овариэктомии, что по их мнению является фактором, предрасполагающим к возникновению шизофрении и дискинезии в период менопаузы [58, 59]. Косвенным доказательством причастности дофаминового дефицита к возникновению артериальной гипертензии у женщин в менопаузе является выявленное Ярником и соавторами антигипертензивное действие дофаминового агониста редергина [222].
По мнению авторов, эти изменения обусловлены дефицитом эстрогенов. Действительно, в опытах Босс и Де Пауло введение эстрадиола овариэктомиро-ванным крысам восстанавливало плотность дофаминовых рецепторов [58, 59].
Между тем, по данным Хафнера и соавторов, эстрадиол, напротив, уменьшает количество дофаминовых рецепторов в мозге и таким образом ослабляет каталепсию, вызванную галоперидолом, и стереотипию, вызванную апоморфином (лигандами дофаминовых рецепторов) [93].
Роль дофаминовых рецепторов в патогенезе сердечно-сосудистых и психических заболеваний в период менопаузы исследована недостаточно. Изучение дофаминовых рецепторов сердца и мозга после хирургической овариэкто-мии и введения ЖПГ представляется важным для понимания молекулярных механизмов патогенеза овариэктомического синдрома и оптимизации заместительной гормональной терапии в период менопаузы в норме и при инфаркте миокарда.
Цель исследования. Определить характер действия препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы головного мозга и сердца крыс после хирургической овариэктомии и в динамике экспериментального инфаркта миокарда.
Задачи исследования:
1. Определить уровень специфического связывания [ Н]-спиперона с мембранной фракцией гомогената головного мозга (МФГМ) при вытеснении блокатором дофаминовых рецепторов галоперидолом у крыс после ложной и истинной хирургической овариэктомии в сравнении.
2. Оценить влияние 17/?-эстрадиола, дидрогестерона и фемостона на уровень специфического связывания меченого лиганда с МФГМ овариэктомиро-ванных крыс.
3. Изучить динамику специфического связывания [3Н]-спиперона с дофаминовыми рецепторами головного мозга ложноовариэктомированных и овари-эктомированных крыс в разные сроки после экспериментального инфаркта миокарда и после введения препаратов женских половых гормонов.
4. Определить динамику уровня специфического связывания [3Н]-спиперона с МФГС при вытеснении его галоперидолом у самок крыс после ложной овариэктомии и истинной хирургической овариэктомий. о
5. Изучить уровень специфического связывания [ Н]-спиперона с МФГС у овариэктомированных крыс на фоне заместительной терапии препаратами женских половых стероидов.
6. Определить количество сайтов связывания [ Н]-спиперона в сердце ложноовариэктомированных и овариэктомированных крыс в разные сроки экспериментального инфаркта миокарда после введения 17|3-эстрадиола, дид-рогестерона и фемостона.
Научная новизна. Впервые изучено специфическое связывание [3Н]-спиперона с МФГС и МФГМ при вытеснении лигандом дофаминовых рецепторов галоперидолом у крыс после ложной и истинной овариэктомий. Установлено, что ложная операция понижает количество сайтов связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ в сердце и мозге. Билатеральное хирургическое удаление яичников оказывает противоположное действие. Количесто во мест связывания [ Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ в мозге и сердце овариэктомированных крыс повышается. Выявлено модулирующее действие фемостона на дофаминовые рецепторы мозга и сердца у овариэктомированных самок. Исследовано состояние дофаминергической системы головного мозга и сердца у ложнооперированных и овариэктомированных крыс в разные сроки инфаркта миокарда. Установлено модулирующее действие 17(3-эстрадиола, дидрогестерона и фемостона на Д2-рецепторы сердца и мозга у кастрированных животных после инфаркта миокарда.
Научно-практическая значимость. Получены новые сведения о влиянии истинной и ложной овариэктомий, экспериментального инфаркта миокарда на дофаминовые рецепторы сердца и головного мозга. Полученные данные расширяют представление о роли дофаминовых рецепторов в регуляции деятельности сердца и головного мозга в норме и при патологии, обосновывают возможность применения средств, действующих на дофаминергические синапсы, для фармакологической регуляции деятельности сердца и мозга в период менопаузы.
Выявлено модулирующее действие препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы сердца и головного мозга после хирургической овариэктомии и экспериментального инфаркта миокарда на фоне хирургической менопаузы, что вносит вклад в теоретическую фармакологию, раскрывая неизвестные аспекты механизма их действия.
Полученные данные могут быть использованы в преподавании фармакологии, кардиологии и гинекологии.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. При ложной овариэктомии понижается специфическое связывание [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ с МФГМ и с МФГС при вытеснении галоперидолом. Хирургическая овариэктомия, напротив, способствует увеличению количества мест связывания [ Н]-спиперона в мозге и сердце крыс в концентрациях 0,5 и 2 нМ.
2. Фемостон уменьшает количество дофаминовых рецепторов в головном мозге и сердце овариэктомированных крыс.
3. При экспериментальном инфаркте миокарда у самок крыс изменяется л уровень специфического связывания [ Н]-спиперона с МФГС и МФГМ. Динао мика уровня связывания [ Н]-спиперона отличается у ложнооперированных и овариэктомированных крыс.
4. Препараты женских половых гормонов модулируют динамику уровня связывания [ Н]-спиперона с Д2-рецепторами сердца и мозга овариэктомированных крыс в течение инфаркта миокарда.
Внедрение результатов работы в практику. Полученные данные используются в учебном процессе на кафедрах фармакологии № 1 и № 2 Башкирского государственного медицинского университета. По результатам исследований получен патент РФ № 2326271 с приоритетом от 20.06.2008 г. «Средство для модуляции плотности Д2-рецепторов мозга при менопаузе».
Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ, в том числе 1 публикация в журнале, рекомендуемом ВАК.
Апробация работы. Основные результаты работы доложены на: XII Международной конференции «Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии», Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 31 мая-9 июня 2004 г., 69-й республиканской итоговой научно- практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины», Уфа, 2004; первой конференции Российиской ассоциации психонейроэндокриноло-гов, Санкт-Петербург, 24-26 сентября 2008 г.
Апробация работы состоялась на межкафедральном заседании кафедр фармакологии № 1 с курсом клинической фармакологии, фармакологии № 2 и ЦНИЛ в декабре 2008 г.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 152 странице компьютерного набора текста, состоит из введения, обзора литературы, глав, отражающих результаты собственных исследований, обсуждения, полученных результатов и выводов. Работа иллюстрирована 32 рисунками. Библиогафия представлена 42 отечественными и 187 иностранными источниками.
Заключение диссертационного исследования на тему "Влияние препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы головного мозга и сердца крыс после хирургической овариэктомии (экспериментальное исследование)"
выводы
1. Ложная овариэктомия приводит к стойкому снижению уровня специфического связывания [JH]-cnnnepoHa с мембранной фракцией головного мозга в концентрации 0,5 нМ и кратковременному - в концентрации 2 нМ. Истинная хирургическая овариэктомия, напротив, повышает уровень связывания радиолиганда в низкой и высокой концентрациях.
1 2. Препараты женских половых гормонов 17р~эстрадиол и дидрогесте-рон увеличивают количество сайтов связывания [3Н]-спиперона в головном мозге кастрированных самок крыс в низкой и высокой концентрациях. Фемо-стон в 2 раза повышает уровень связывания радиолиганда в концентрации 0,5 нМ и в 7 раз уменьшает в концентрации 2 нМ.
3. Перевязка левой коронарной артерии вызывает увеличение количества 2 мест связывания [ Н]-спиперона в головном мозге крыс. У ложноовариэкто-мированных самок больше повышается уровень связывания радиолиганда, в концентрации 2 нМ, а у овариэктомированных крыс — в концентрации 0,5 нМ. Фемостон оказывает модулирующее действие на дофаминовые рецепторы мозга кастрированных крыс с экспериментальным инфарктом миокарда.
4. В сердце крыс с ложной овариэктомией уменьшается уровень специфического связывания [3Н]-спиперона в концентрациях 0,5 и 2 нМ. После хирургической овариэктомии уровень связывания радиолиганда в низкой и высокой концентрациях повышается.
5. 17р~эстрадиол и дидрогестерон оказывают однонаправленное действие на дофаминовые рецепторы сердца: в концентрации 0,5 нМ уменьшают, а в концентрации 2 нМ увеличивают уровень специфического связывания радиолиганда с мембранной фракцией гомогената сердца. Фемостон не влияет на уровень связывания радиолиганда в низкой концентрации, но уменьшает в высокой.
6. При экспериментальном инфаркте миокарда в сердце ложноовариэкэ томированных крыс уровень связывания [ Н]-спиперона в концентрации 0,5 нМ понижается через 1 и 14 суток и повышается через 3 и 7 суток, а в концентрации 2 нМ понижается во все сроки исследования. У кастрированных самок уровень связывания радиолиганда в низкой концентрации понижается через 1, 3 и 14 суток, повышается через 7 суток, а в высокой концентрации повышается во все сроки, кроме 14 суток. Препараты женских половых гормонов оказывают модулирующее действие на уровень связывания радиолиганда в низкой концентрации в сердце овариэктомированных крыс.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. После оперативного вмешательства овариэктомии и на фоне инфаркта миокарда необходимо учитывать состояние дофаминергической системы сердца и мозга при назначении средств, действующих на дофаминовые рецепторы.
2. Характер действия препаратов женских половых гормонов на дофаминовые рецепторы сердца и мозга необходимо учитывать при их совместном назначении с Дд-агонистами и антагонистами.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Харчилава, Оксана Максимовна
1. Авдонин, Б.В. Рецепторы и внутриклеточный кальций / Б.В. Авдонин, В .А. Ткачук М.: Наука, 1994. - 295 с.
2. Аккер, JI.B. Течение постовариэктомического синдрома в постме-нопаузальном периоде. Осбенности метаболичеких изменений и их коррекция гормональной терапией / J1.B. Аккер, А.И. Гальченко, Т.С. Таранина // Акушерство и гинекология. 2004. - №5. - С. 34-38.
3. Акунц, К.Б. Менопауза / К.Б. Акунц. М.: Триада- X, 2004. - 78 с.
4. Алиханова, З.М. Патофизиология системных изменений у женщин репродуктивного возраста после тотальной овариэктомии / З.М. Алиханова // Акушерство и гинекология. 1996. - № 7. - С. 11-14.
5. Беленький, M.J1. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / M.JI. Беленький. JL: Медгиз, 1963.
6. Белоусов, Ю.Б. Клинико-экономическая оценка заместительной гормональной терапии у женщин с естественной менопаузой / Ю.Б. Белоусов, О.И. Карпов, В.П. Сметник, Н.В. Торопцова // Качественная клиническая практика. 2002. - № 4. - С. 11-32.
7. Бернстон, М. Гистохимия ферментов / М. Бернстон. М.: Мир, 1965.-С. 387-388.
8. Вихляева, Е.М. Руководство по эндокринной гинекологии / Е.М Вихляева. М., 2000. - 248 с.
9. Волкова, О.В. Основы гистологии с гистологической техникой / О.В. Волкова, Ю.К. Елецкий. М.: Медицина. - 1982. - 304 с.
10. Гусель, В.А. Влияние дофамина на гемодинамику при гипо-динамической форме сердечной недостаточности у новорожденных детей / В.А. Гусель, А.К. Хаджидас, Э.К. Цибульский // Вопр. охраны материнства и детства.- 1990. № 1. — С. 17—20.
11. Девойно, JI.B. Вклад в иммуномодуляцию дофаминовых Д2-рецепторов дорсолатеральной зоны хвостатого ядра у крыс / Л.Д. Девойно, Е.Л. Альперина, М.М. Геворгян, М.А. Чейдо // Рос. физиол. журнал 2004. - Т. 90, № 4. - С. 420-427. - Рус.; рез. англ.
12. Доценко, Ю.В. Лечение ишемической болезни сердца у женщин в менопаузе / Ю.В. Доценко, В.Г. Наумов, А.А. Лякишев, М.Г. Болотина и др. // Кардиология. 2001. - № 3. - С. 64-70.
13. Звычайный, М.А. Заместительная гормональная терапия препаратом "Фемостон" у женщин с дефицитом половых гормонов / М.А. Звычайный, А.В. Воронцова // Акушерство и гинекология. — 2004.-№6.-С. 53-54.
14. Идова, Г.В. Иммуностимулирующий эффект селективного агониста Д1-дофаминовых рецепторов SKF-38393 / Г.В. Идова, Е.Л. Альперина. М.А. Чейдо, Е.Н. Жукова, М.М. Геворгян // Бюл. СО РАМН. 2003. - № 3. - С. 90-93. - Рус.; рез. англ.
15. Каменецкая, Г.Я. Терапия депрессивных нарушений при хирургической менопаузе / Г.Я. Каменецкая // Акушерство и гинекология. 2005. - № 3. - С. 37-40. - Рус.
16. Караченцев, А.Н. Эстрогены и инфаркт миокарда / А.Н. Караченцев, Г .Я. Шварц, В.Г. Кукес // Проблемы эндокринологии. -1998.-№6.-С. 49-53.
17. Караченцев, А.П. Заместительная эстрогенотерапия в постменопаузе и риск тромботических осложнений / А.П. Караченцев, И.В. Кузнецова // Акушерство и гинекология. 2004. - № 3. - С. 13-15.
18. Караченцев, А.Н. Выбор оптимального гестагена для комбинированной заместительной гормонотерапии в пери- и постменопаузе / А.Н. Караченцев, Г.А Мельниченко // Проблемы эндокринологии. 2006. - Т. 52, № 2. - С. 7-14.
19. Киршенблат, Я.Д. Практикум по эндокринологии / Я.Д. Киршенблат.-М., 1989.-С. 136-141.
20. Коган, А.Х. Хирургический метод моделирования коронаро-окклюзионного инфаркта и аневризмы сердца у крыс / А.Х. Коган // Пат. физиол. и эксперим. терапия. 1979. -№ 3. - С. 79—42.
21. Коган, А.Х. Изменение размеров зоны повреждения миокарда при постишемической реперфузии / А.Х. Коган, Н.И. Лосев, А.Н. Кудрин, Ф. Миеэгомбын // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1984. - Т. 98, № 3. -С. 271-273.
22. Крыжановская, И.О. Эффективность заместительной гормонотерапии у женщин с менопаузальным метаболическим синдромом / И.О. Крыжановская, Н.И. Волкова // Акушерство и гинекология. 2004. -№ 5.-С. 44-47.-Рус.
23. Лайда, 3. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы / 3. Лайда, Р. Госсрау, Т. Шиблер. М.: Мир, 1982. - С. 211-235.
24. Ларионов, В.П. Кардиопротекторное действие хлорпромази-на при реперфузии ишемизированного миокарда / Н.П. Ларионов,
25. В.Ф. Кулешов, Максимов и др. // Вопр. кардиологии: Тез. докладов 1 съезда кардиол. Казахстана. Алма-Ата, L991. - Т. 2. - С. 140.
26. Лебедев, А.А. Действие аналога меланостатина алаптида на дофаминзависимые формы поведения у крыс, выращенных в изоляции / А.А. Лебедев, Т.Н. Панченко, П.Д. Шабанов // Ж. высш. нерв, деят-сти. 2000. - Т. 50, № 4. с. 716-719. - Рус.; рез. англ.
27. Маколкин, В.И. Внутренние болезни: Учебник. -4-е изд., пе-рераб. и доп. / В.И. Маколкин, С.И. Овчаренко. -М.: Медицина, 1999. -592 с.
28. Могилевский, Д.А. Фармакологическая коррекция поведенческих и биохимических нарушений при синдроме социальной изоляции у крыс: Автореф. дис. канд. мед. наук / Д.А. Могилевский. -СПб., 2004. 24 с. : ил. - Рус.
29. Новичкова, Ю.Н. Влияние препарата фемостон на сердечнососудистую систему, липидный спектр крови и гемостаз у женщин впостменопаузе / Ю.Н. Новичкова, А.А. Кириченко, И.В. Виноградова и др. // Пробл. репродукции. 2003. - Т. 9, № 3. - С. 73-78. - Рус.
30. Подзолков, В.И. Заместительная гормональная терапия как средство профилактики сердечно- сосудистых заболеваний: опрометчивое «нет» или взвешенное "да" / Н.М. Подзолков, Л.Г. Можарова, Ю.В. Хомицкая и др. // Кардиология. 2004. - № 9. - С. 67-72.
31. Покровский, А.А. Лизосомы / А.А. Покровский, В.А Тутель-ян.-М., 1976.-382 с.
32. Растените, Д. Значимость пола для смертности в течение 28 дней от первого инфаркта миокарда в зависимости от наличия зубца Q / Д. Растените, Л. Янчайтите // Кардиология. 2006. - № 4. - С. 50-51.
33. Сергеев, П.В. Рецепторы / П.В. Сергеев, Н.Л. Шимановский. -М.: Наука, 1987.-369 с.
34. Сергеев, П.В. Рецепторы дофамина. Роль в регуляции деятельности сердца и сосудов / П.В. Сергеев, Л.А. Валеева, Н.Л. Шимановский // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1998. -Т 61, № 1.-С. 63-69.
35. Сергеева, Н.И. Влияние дефицита эстрогенов на функцию головного мозга в возрастном аспекте / Н.И. Сергеева, Л.К. Дзеранова, Е.И. Марова // Клиническая геронтология. 2002. - № 6. - С. 47-50.
36. Серов, В.Н. Гинекологическая эндокринология / В.Н. Серов, В.Н. Прилепская, Т.В. Овсянникова. М., 2006. - С. - 471 - 493.
37. Сметник, В.П. Медицина климактерия / В.П. Сметник. -Ярославль, 2006. С. 50-67.
38. Терещенко, С.Н. Особенности патогенеза и фармакотерапии хронической сердечной недостаточности / С.Н. Терещенко, Е.С. Ат-рощенко, И.В. Жиров // Кардиология. 2006. - № 10. - С. 30-33.
39. Abadic, С., Foucart S., Page P. et al. Modulation of noradrenaline release from isolated human atrial appendages / C. Abadic, S. Foucart, P. Page et al. // J. Auton. Nerv. Syst.- 1996.- V. 61, N 3.- P. 269- 276.
40. Abbot, W.M. Partial purification of dopamine D2-receptors using lectin diffinity columns / W.M. Abbot, P.G. Strange // Bioshci. Repts.-1995.-V. 5, N4.-P. 303- 308.
41. Appt, S.E. Low dose estrogens inhibit coronary artery atherosclerosis in postmenopausal monkeys / S.E. Appt, T.B. Clarkson, C.J. Lees, M.S. Anthony // Maturitas Maturitas. 2006. - Sep 20; Vol. 55 (2), pp. 187-94.
42. Ariano, M.A. Cellular distribution of the rat D4 dopamine receptor protein in the CNS using anti-receptor antisera / M.A. Ariano, J. Wang, K.L. Noblett et al // Brain. Res.- 1997.- V. 752, N 1- 2.- P. 26- 34.
43. Aretha, C.W. Dopamine autoreceptor reserve in vitro: possiblerole of dopamine D3-receptor / C.W. Aretha, M.P. Galloway // Eur. J. Pharmacol.- 1996,- V. 305, N 1- 3.- P.l 19- 122.
44. Auger, A.P. Oestradiol increases phosphorylation of a dopamine-and cyclic AMP-regulated phosphoprotein (DARPP-32) in female rat brain / A.P. Auger, J.M. Meredith, G.L. Snyder, J.D. Blaustein // J. Neuroendo-crinol. -2001. 13, № 9. - C. 761-768.-Англ.
45. Barilli, P. Age-dependent changes in the expression of dopamine receptor subtypes in human peripheral blood lymphocytes / P. Barilli, E. Bronzetti, L. Feliei et al. // J. Neuroimmunol.- 1996.- V. 71, N 1- 2.- P. 45- 50.
46. Bello, N. Epidemiology of Coronary Heart Disease in Women. Progress Cardiovasc Dis / N. Bello, L. Mosca // 2004; 46: 287-295.
47. Bergson, C. Characterization of subtype-specific antibodies to the human D5 dopamine receptor / C. Bergson, L. Mrzljak, M.S. Lidow et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1995.- V. 92, N 8.- P. 3468- 3472.
48. Blednov, Y. A., Stoffel M., Cooper R., Wallace D., Mane N., Harris R.A. / Hyperactivity and dopamine Di receptor activation in mice lacing girk2 channels / Y. A. Blednov, M. Stoffel, R. Cooper, D. Wallace,
49. N. Mane, R.A. Harris // Psychopharmacology КЭ. 2002. - 159, №4. -C. 370-378. - Англ.
50. Bondy, B. Identification of dopamine D4-receptor mRNA in circulating human lymphocytes using nested polymerase chain reaction / B. Bondy, S. De Jonge, S. Pander et al // J. Neuroimmunol.- 1996.- V. 71, N 1-2,-P. 139- 144.
51. Boose, R. The modulation of brain dopamine and GABAA receptors by estradiol: a clue for CNS changes occurring at menopause / R. Boose, T. Di Paolo // Cellular and molecular neurobiology. Cell Moll Neurobiol. 1996, Apr, Vol. 16 (2), pp. 199-212.
52. Boose, R. Neuromediaters / R. Boose, T. Di Paolo, M.Cyr // Neuroscience. 1998, Apr., V. 83 (3). - pp. 829-36.
53. Bowe, J. The hop phytoestrogen, 8- prenylnaringenin, reverses the ovariectomy- induced / J. Bowe, X.F. Li, J. Kinsey- Jones, A. Hey-erick, et al // The Journal of Endocrinology. 2006 Nov. - Vol. 191 (2). -pp. 399-405.
54. Bredberg, E. Effects of apomorphine on heart rate during simul-faneous administration of sulpiride: A challenge of the composed consentration effect model / E. Bredberg, L.K. Paalsow // J. Pharmacol, and Exp. Ther. 1991. -V. 258, N 3. - P. 1055- 1060.
55. Brown. Pharmacological responses to dopamine in isolated guinea-pig cardiovascular tissues. Mechanisms of action // Arch. Int. Pharmacodyn. et ther.- 1990.-V.308.- P. 47- 62.
56. Burkey, A.R. Dopamine reuptake inhibition in the rostral agranulasis insular cortex produceds antinociception. / Adam R. Burkey, Earl Carstens, Luc Jasmin // J. Neurosci. 1999. - 19, № 10. - C. 4169 -4179.-Англ.
57. Cai, G. Increased dopamine receptor signaling and dopamine re-ceptor-G protein coupling in denervated striatum / Gouping Cai, Hoau-Yan Wang, Eitan Friedman // J. Pharmacol, and Exp. Ther. 2002. - 302, №3.- C. 1105- 1112.-Англ.
58. Cantro, A.R. Voltage-dependent neuromodulation of Na+ chana-les Dl- like dopamine receptors in rat hippocampal neurons / A.R. Cantro, T. Scheuer, W.A. Catterall // J. Neursci. 1999.- - 19. - № 13. - C. 53015310. - Англ.
59. Chernak, J.M. Interaction of nuclear factors from young and old rat brain regions with regulatory sequences of the D2 dopamine receptor gene promoter / J.M. Chernak, P.W. Hoffman, T. Minowa et al // Mol. Brain Res.- 1997.-V. 44, N l.-P. 113-124.
60. Chocyk, A. Immunocytochemical study of dopamine D4 recepjLtors in the rat cortex: Pap. 8 Days Neuropsychopharmacol. «Decade Brain», Ustron-Zawodzie, May 24-26, 1999 / Chocyk Agnieszka, Czyrak
61. Anna, Mackowiak Marzena, Fijal Katarzyna, Wedzony Krzystof // Pol. J. Pharmacol. 1999. - 51, № 3. - C. 276. - Англ.
62. Civelli, O. Human dopamine receptor and uses: Пат. 6437114 США, МПК7 C12N 15/12 / О. Civelli, Н.-М. Van Tol Hubert // Oregon Health &Science Univ. № 09/378074; Заявл. 20.08.99; Опубл. 20.08.02; НПК 536/23.5.
63. Danchev, N.D. Effects of dotarizine administration in vivo on 3H.-spiperone binding in rat brain / N.D. Danchev, V.D. Petkov // Докл. Бълг. АН. 1998.-51, №5-6.-С. 111-113.-Англ.
64. De la Fuente-Fernandez, R. The biochemical bases for reward, Implications for the placedo effects / R. De la Fuente-Fernandez, A.J. Stoessl // Eval. And Health Prof. 2002. - 25, № 4. - C. 387-398. - Англ.
65. Dluzen, D. Estrogen decreases corpus striatal neurotoxity in response to 6-hydroxydopamine / D. Dluzen // Brain Res. 1997. - 767, № 2. - C. 340-344.-Англ.
66. Dong Zhaojun, wang Shili, Li Yunpeng // Di-san junyi daxue xuebao = Acta acad. med. mil. tertiae. -1999. 21, № 7. - C. 488-490. -Кит. рез. англ.
67. Fransis, G.S. Receptor systems involved in norepinephrine release in heart failure: locus on dopaminergic systems / G.S. Fransis // Clin. Cardiol.- 1995.-V. 18, Suppl., N 3.- P. 113-116.
68. Gao, X. Effects of dopaminergic agents on carrageenan hyperal-. gesia in rats / Gao Xiu, Zhang Yu-qiu, Wu Gen-cheng // Eur. J. Pharmacol. 2000. - 406, № 1 C. 53-58. - Англ.
69. Gattaz, W.F. Fortschritte der Neurology- Psychiatrie / W.F. Gat-taz, S. Behrens, J. De Vry, H. Hafner // Fortschr Neurol Rsychiatr. 1992, Jan., Vol. 60 (1), pp 8-16.
70. Gilliland, S.L. Pharmacology of quinpirole- stimulatedо с
71. SJGTPyS binding: Discrepancy with receptor binding profile / Sarah L.Gilliland, Richard H. Alper, Beth Levant // Eur. J. Pharmacol. 2000. -392, № 3. C. 125-128. - Англ.
72. Giros, B. Two D2 dopamine receptor isoforms generated via alternative mRNA splicing: regional distribution and effects of haloperidol treatments / B. Giros, P. Sokoloff, M.P. Martres et al // Eur. J. Pharmacol.-1990.-V. 183, N5.-P. 1619.
73. Gong, Y.S. Effect of 17 beta- oestradiol and gisenoside on osteoporosis in ovariectomized rats / Y.S. Gong, J. Chen, J.T. Zhang // Journal of Asian Natural Products research. 2006 Oct- Nov. - Vol. 8 (7). -pp. 649-656.
74. Gonzalez, A.M. 3H. 7-OH-DPAT is capable of labeling dopamine D2 as well as D3 receptor / A.M. Gonzalez, D.R. Sibley // Eur. J. Pharmacol.- 1995.- V. 272, N 1.- P. 1-3.
75. Grenader, A. A68930 is a potent, full agonist at dopaminei (Di) receptors in renal epithelial LLC-PK. cells / A. Grenader, D.P. Healy // Brit. J.Pharmacol.- 1992.- V. 106, N 2.- P. 229-230.
76. Hafner, H. European archives of psychiatry and clinical neurosci-ence / H. Hafner, S. Behrens, J. De Vry, W.F. Gattaz // Eur Arch Psychiatry ClinNeurosci. 1991, Vol. 241(1), pp. 65-8.
77. Hajos, K.E. 8-OH-DPAT -induced release of hippocampal noradrenaline in vivo: evidence for a role of both 5-HTiA and dopamine Di-receptors / E. Hajos Korcsok, T. Sharp // Eur. J. Pharmacol.- 1996.-V. 314, N3.-P. 285-291.
78. Hall, H. Autoradiographic localisation of D3 dopamine receptors in the human brain using the selective D3-dopamine receptor agonist (+)-3H.PD 128907 / H. Hall, C. Halldin, D. Dijkstra et al // Psychopharma-cology.- 1996.- V. 128, N 3.- P. 240- 247.
79. Hamilton, G.A. Recovery from acute myocardial infarction in women / G.A. Hamilton // Cardiology. 1990. - № 7, Suppl 7. C. 58-61.
80. Hauber, W. Blockade of subthalamic dopamine Di receptors elicits akinesia in rats / Hauber Wolfgang // heredity. 1999. - 82, № 2. -C. 4115-4118.-Англ.
81. Heijtz, R.D. Ontogeny of the motor inhibitory role of dopamine D3 receptor subtype in rats / Heij'tz Rochellys Diaz, Ogren Sven Ove, Fuxe Kjell // Eur. J. Pharmacol. 2000. - 392, № 1-2. - C. 35-39. - Англ.
82. Herve, D. Autoradiographic identification of Di-dopamine reоceptors labelled with H .-dopamine: distribution, regulation and relationship to coupling / D. Herve, F. Trovero, G. Blanc et al. // Neuroscience. — 1992. V. 46, N 3. - P. 687-700.
83. Hidaka, K. Hidaka K., Tada S., Matsumoto. M. et al. YM-50001: A novel, potent and selective dopamine D4-receptor antagonist / K. Hidaka, S. Tada, M. Matsumoto et al //Nero Report.- 1996.- V. 7, N 15- 17.-P. 2543-2546.
84. Hurst, R.S. Dopamine receptor agonists differ in their actions on cardiac ion channels / R.S. Hurst, N.R. Higdon, J.A. Lawson, M.A. Clark et al // Eur. J. |Pharmacol. ЭИ. 2003. - 482, № 1-3. - C. 31-37. - Англ.
85. Infante, С. Effects of bilateral ablation or 6-OHDA lesion of the frontal cortex upon the behaviors induced by apomorphine and amphetamine in adult cats. / C. Infante, M. Monari, E. Motles // Arch. ital. boil. -1998. 136, № 4. - C. - 2225-235. - Англ.
86. Jaworska-Feil, L. Effects of neurosteroids on dopamine uptake and release in the nucleus accumbens of the rat : Pap. 13 th Congr. Pol. Pharmacol. Soc., Katowise, Sept., 13-16, 1998 / L. Jaworska-Feil,
87. B. Budziszewska, M. Leskiewicz, W. Lason // Pol. J. Pharmacol. 1998. -50, Suppl. - C. 138-139. - Англ.
88. Johnson, E.A. Dopamine D2 synthesis-modulating receptors are present in the striatum of the guinea pig / E.A. Johson, C.E. Tsou, G. Harrison -Shahan et al //Neuropharmacol.- 1992.- V. 31, N 1,- P. 95-101.
89. Jonsson, E.G. Lack of evidence for allelic association between personality traits and the dopamine D4-receptor gene polymorphisms / E.G. Jonson, M.M. Nothen, J.P. Guctavsson et al // Am. J. Psychiatry.-1997.- V. 154, N 5.- P. 697- 699.
90. Kato, M. P-Phenylethylamine modulates acetylcholine release in the rat striatum: Involvement of a dopamine D2 receptor mechanism / M. Kato, I. Kota, C. Toichiro et al // Eur. J. Pharmacol. 2001. - 418, № 1-2. -C.- 65-71. -Англ.
91. Kimmel, H.L. Dopamine D1 and D2 receptors influence dopamine transporter synthesis and degradation in the rat / Kimmel Heather L., Joyce Andrew R., Carroll f.Ivy, Kuhar Michael J. // J. Pharmacol, and Exp. Ther.-2001.- 298, № l.-C. 129-140.-Англ.
92. Kollar, A. Dopamine induced aggravation of myocardial ischae-mia in the paced heart: cardiosurgical perspectives / A. Kollar, V. Kenesi, A. Jahasz -Nagy // Acta. Chir. Hing.- 1991.- V. 92, N 3,- P. 237- 244.
93. Koshikawa, N.M. Circadian studies of 5- HT2 receptors: Effects of clorgyline administration / N.M. Koshikawa, M.J. Durcan, G. Dunn et al. // Pharmacol. Biochem. Behav. 1988. - V. 30 (2). - P. 347- 350.
94. Kung, M.P. Characterization of a novel iodinated ligand, IPMPP, for human dopamine D4-receptors expressed in CHO cells / M.P. Kung, D.A. Stevenson, Z.P. Zhuang et al // Life. Sci.- 1997.- V. 60, N 2.- P. 91-100.
95. Kurata, K. Effects of Di and D2 antagonists on the transiet of dopamine release by dopamine agonists by means of brain dialysis / K. Kurata, K. Shibata//Neurosci. Zeft. 1991.- V. 133, N 1.- P. 77-80.
96. Kuzhikandathhil, E.V. Activation of human D3 dopamine receptor inhibits P/Q-type calcium chanals and secretory activity in AtT-20 cells / Kuzhikandathhil Eldo V., Oxford Gerry S. // J. Neurosci. 1999. - № 5. -C. 1698-1707.-Англ.
97. Kyriakides, Z.S. Estrogen descreases neointimal hyperplasia and improves re- endothelialization / Z.S. Kyriakides, E. Lymberopoulos, A. Papalois, S. Kyrzopoulos et al. // International Journal of Cardiology. — 2006, Oct 26. Vol. 113(1). - pp. 48-53.
98. Lahlou, S. Blunted pressor responsiveness to intravenous quinpi-role in conscious, chronic spinal cord-transected rats: Peripheral vs. spinal mechanisms / Lahlou Saad // Eur. J. Pharmacol. 2000. - 408, № 1. -C. 51-62.-Англ.
99. Lim, D.K. Comparative studies of muscarinic and dopamine receptors in three strains of rat / D.K. Lim et al. // Eur. J. of Pharmacol.-1989.- V.165.- P.279-289.
100. Liu, B. Increased dopamine release in vivo by estradiol benzoate from the central amygdaloid nucleus of Parkinsons disease model rats / B. Liu, J. Xie // J. Neurochem. 2004. - 90, № 3. - C. 654-658. - Англ.
101. Lokhandwala, M.F. Cardiovascular pharmacology of adrenergic and dopaminergic receptors: therapeutic significance in congestive heart failure / M.F. Lokhandwala, S.S. Hegde // Am. J. Med.- 1991.- V. 90, N 5 В.- P. 25- 95.
102. Lombardi, G. Cabergoline prevents necrotic neuronal death in an in vitro model of oxidative stress / G. Lombardi, F. Varsaldi, G. Miglio, M.G. Papini, A. Battaglia, P.L. Canonico // Eur. J. Pharmacol. КЭ. -2002. 457, № 2-3. - C. 95-98. - Англ.
103. Lowry, O.H. Protein measurement with Folin phenol reagent / O.H. Lowry, N.J. Rosenbrough, L. Farr, R.L. Randall // J. Biol. Chem. -1951.-V. 193, № l.-P. 265-275.
104. Luo, Y. Dopamine stimulates redox-tyrosine kinase signaling and p38 МАРК in activation of astrocytic C6-D2L cells / Y. Luo, G.C. Kokkonen, A.Hattori, F.J. Chrest, G.S. Roth // Brain Res. 1999. -850, № 1-2. - C. 21-38. - Англ.
105. Lyo, M. The detection of age-related decrease of dopamine DI, D2 and serotonin 5-HT2 receptors in living human brain / M. Lyo, T. Ya-masaki // Progr. Neuro-Psychopharmacol. and Biol. Psychiat.- 1993.-V. 17, N3.- P. 421-451.
106. Malmberg, A. Critical reevaluation of spiperone and benzamide binding to dopamine D2-receptors: evidence for identical binding sites / A. Malmberg, E. Jerning, N. Mohell // Eur. J. Pharmacol.- 1996.- V. 303, N 1-2,-P. 123- 128.
107. Marchese, G. Effect of the amisulpride isomers on rat prolactinemia / Giorgio Marchese, Stefania Ruiu, Paola Casti, Pierluigi Saba, Gian Luigi Gessa, Luca Pani // Eur. J. Pharmacol. КЭ. 2002. - 448, № 2-3. -C. 263-266. - Англ.
108. McDonell, D.P. Mining the complexities of estrogen signaling pathways for novel therapeutics / D.P. McDonell // Endocrinology. 2003. -Vol. 144, P. 4237-4240.
109. Merchant, K.M. Pharmacological characterization of U-l01387, a dopamine D4-receptor selective antagonist / K.M. Merchant, G.S Gill., D.W.Harris et al // J. pharmacol. Exp. Ther.- 1996.- V. 279, N 3, P. 1392- 1403.
110. Mukherjee, К. Renal Di-receptors, and not D2, are upregulated after aortic constriction and may be involved in cardiac hypertrophy / K. Mukherjee, A. Sahai, R.K. Ganduly // J. Auton Pharmacol.- 1994.-V. 14, N4.- P. 307-316.
111. Murata, M. Age related decrease in responsiveness to L-DOPA is not due to changes in dopamine receptor mRNAs or G protein mRNAs / M. Murata, Y. Alhara, H. Yamanouchi et al // J. Neural. Transm.- 1996.-V. 103, N3.- P. 343- 348.
112. Nagahama, S. Mechanism of the depressor action of LY 171555, a selective dopamine D2 receptor agonist, in the anesthetized rat / S. Nagahama, Y. -F. Chen, M.D. Lindeimer et al // J. Pharmacol, and Exp. Ther.- 1986.- V. 239, N 2.- P. 426- 432.
113. Neve, K.A. Regulation of dopamin D2 receptors by sodium and pH / K.A. Neve // Mol.Pharmacol. -1991. Vol. 36. -N3. - P.446-451.
114. Newton, K.M. Estrogen replacement therapy and prognosis after first myocardial infarction / K.M. Newton, A.Z. La Croix, B. McKnight et al. // Am J Epidemiol. 1997. 145, № 3. - P.269-277.
115. Nowak, P. Amphetamine vs. quinpirole sensitization of the central dopamine receptors: Biochemical studies / P. Nowak, A. Bortel, J. Dabrowska, L. Labus, R. Bris // Pol. J. Pharmacol. 2003. - 55, № 2. -C. 308.-Англ.
116. Ohnmacht, U. Dopaminrezeptor-Biundungsstudien mit3H. Pramipexol: Methodik und Anwendung: Дис. Dokt. Natuwiss. /
117. U. Ohnmacht // Friederich-Alexander-Univ. Erlangen-Nurnberg, erlngen. 2000.- 121 е.: ил.-Нем.
118. Ohuchi, J. The effect of sulfate dopamine conjugate on isolated perfused rat heart / J. Ohuchi, Y. Ishimino, K. Minakuchi et al // Abstr. 4 World Conf. Clin. Pharmacol, and Ther. Eur. J. Clin. Pharmacol.- 1989.-V. 36, Suppl.- P. 213.
119. Patel, S. Identification and pharmacological characterization of 125I.L-750,667, a novel radiologand for the dopamine D4-receptor /
120. Patel, B. Patel, R. Marwood et al // Mol. Pharmacol.- 1996.- V. 50, N6.- P. 1658- 1664.
121. Petralia, S.M. In the ventral tegmental area, G- proteins mediate progesterones actions at dopamine type 1 receptors for lordosis of rats and hamsters / S.M. Petralia, C.A. Frye // Psychopharmacology. 2006 Jun. -Vol. 186 (2).-pp. 133- 142.
122. Quysner, A. A dopamine antagonist blocks vaginocervical stimulation induced neuronal responses in the rat forebrain / A. Quysner, J.D. Blaustein//Brain Res.-2001.-921, № 1-2.-C. 173-182.-Англ.
123. Rivkees, A. Functional D. and D5 dopamine receptors are expressed in the suprachiasmatic, supraoptic and paraventricular muclei of primates / A. Rivkees, J.E. Lachowicz // Synapse.- 1997.- V. 26, N 1.-P. 1- 10.
124. Roberts, D.J. Investigation of the mechanism of agonist and inverse agonist action at D2 dopamine receptors / D J. Roberts, L. Hong, P.G. Strange // Biochem. Pharmacol. 2004. - 67, № 9. - C. 1657-1665. - Англ.
125. Rogoz, Z. Anxiolytic-like effects of preferential dopamine D3 receptor agonists in an animal model / Rogoz Zofla, Skuza Grazyna, Klodzinska Aleksandra // Pol. J. Pharmacol. 2003. - 55, № 3. - C. 449454. - Англ.
126. Rogoz, Z. Anxiolytic- and antidepressant- like effects of 7-OH-DPAT, preferential dopamine D3 receptor agonists, in rats // Z. Rogoz, G. Skuza, A. Klodzinska // Pol. J. Pharmacol. 2004. - 56, № 5. - C. 519526. - Англ.
127. Romanides, A.I. Glutamatergic and dopaminergic afferents to the prefrontal cortex regulate spatial working memory in rats / A.I. Romanides, P. Duffy, P.W. Kalivas //Neuroscience КЭ. 1999. - 92, № 1. -C. 97-106.-Англ.
128. Roquebert, J. Pharmacological characterization of dopamine receptors in parasympathetic innervation of rat heart / J. Roquebert, A. Moran, P. Demichel et al // Eur. J. Pharmacol.- 1991.- V. 200, N 1,-P.59- 63.
129. Ruskin, D.N. Multisecond oscillations in firing rate in the globus pallidus: Synergistic modulation by D1 and D2 dopamine receptors / D.N. Ruskin, D.A. Bergctrom, J.R. Walters // J. Pharmacol, and Exp. Ther. 1999.-290. №3.-C. 1493-1501. - Англ.
130. Sakamoto, Т. Attenuation of adenilate cyclase-indused increases in renal sodium excretion by the dopamine D2-receptor agonist SKF 89124 / Sakamoto Т., Chen C., Lokhandwala M.F. // J. Auton. Pharmacol. -1994.- V. 14, N4.- P. 295-306.
131. Sanchez, M.S. Effect of neuropeptide-EI on the binding of 3H.SCH 23390 to the dopamine Di receptor in rat striatal membranes / M.S. Sanchez, N.A. Salvatiera, G. Vettori, M.E. Celis //Neurochem. Res. -2001.-26, № 5. C. 533-537.-Англ.
132. Schetz, J.A. Tandem sulfur- containing amino acids are epicriti-cal determinants of dopamine D2 receptor pharmacology. / John A. Schetz, David R. Sibley // Eur. J. Pharmacol. 2000. - 388, № 2. -C. R5-R7. - Англ.
133. Schetz, J.A. Pharmacological characterization of mammalian DI and D2 dopamine receptors expressed in Drosophila Schneider-2 cells / J.A. Schetz, O.-J. Kim, D.R. Sibley // J. Receptor and Signal Transduc. -2003.-23, № l.-C. 99-109.-Англ.
134. Schneier, F.R. Low dopamine D2 receptor binding potencial in social phobia / Schneier Franklin R., Liebowitz Michael R., Abi-Dargham Anissa, Zea-Ponce Yolanda, Lin Shu-Hsing, Laruelle Marcs // Amer. J. Psychiat. 2000. - 157, № 3. - C. 457-459. - Англ.
135. Seeman, P. Dopamine D4-like receptor elevation in schizophrenia / P. Seeman, A.D. Van -Tol -Hh // J. Neurochem.- 1995.- V. 64, N 3.-P. 1413- 1415.
136. Semeraro, C. The role of dopaminergic agonists in congestive heart failure / C. Semeraro, F. Marchini, P. Ferlenga et al // Clin. Exp. Hy-pertens.- 1997.- V. 19, N 1- 2.- P. 201- 215.
137. Sethy, V.H. D2 and Di dopamineergic activity of 7-OH-DPAT / V.H. Sethy, B.R. Ellerbrock, G.J. Fici, H. Wu // Brain Res.- 1996.- V. 733, N 1.- P. 41-45.
138. Shashoua, V.E. Пат. 6407137 США, МПК7 A61K 3/18. Dopamine analog amide / Shashoua Victor E.: Protagra. Inc. № 09/901209: Заявл. 09.07.01: Опубл. 18.07.02: НПК 514/437.
139. Shin, Y.H. Cloning, expression and characterization of a human dopamine D4 2 receptor (CHO K1 cells) and various D4 2/D2 L chimeras
140. COS-7 cells) / Y.H. Shin, F.Z. Chung, T.A. Pugsley // Prog.: Neuropsy-chopharmacol. Biol. Psychiatry. 1997. - V. 21, N 1. - P. 153- 167.
141. Sidhu, A. Regulation and expression of D-l, but not D-5, dopamine receptors in human SK-N-MC neuroblastoma cells / A. Sidhu // J. Receptor and Signal Transduct. Res. 1997. - 17, № 5. - C. 777-784. - Англ.
142. SokolofF, P. Fonction et potentialities therapeutiques du recepteur D3 de la Dopamine / P. Sokoloff, J. Diaz, R. Bordet, N. Griffon et al // C. r. seances Soc. boil. 1998. - 192, № 6. - С. 1111-1125. - Фр.; рез. англ.
143. Sokoloff, Т. Le troisieme receptor de la dopamine une nouvelle cible daction des neuroleptiques / T. Sokoloff, B. Yicos, M.P. Martres et al // M/S: Med. Sci.- 1990.- V. 6, N 8.- P. 800- 802.
144. Srivastava, L.K. Ontogeny of dopamine D2-receptor mRNA in rat brain / L.K. Srivastava, M.A. Morency, R.K. Mishra // Eur. J. Pharmacol. Mol. Pharmacol. Sec. 1992. - V. 225, N2.-P. 143- 150.
145. Stuart, 1.0. Wake-promoting actions of dopamine D1 and D2 receptor stimulation // 1.0. Stuart, B.W. Craig // J. Pharmacol, and Exp. Ther. 2003. - 307, № 1. - C. 3 86-394. - Англ.
146. Sugamori, K.S. Dopamine DIB receptor chimeras reveal modulation of parietal agonist activity by carboxyl- terminal tail sequences. / K.S. Sugamori, M.A. Scheideler, P. Vernier, H.B. Niznik // J. Neurochem. 1998.-71, № 6. - C. 2593 - 2599. - Англ.
147. Suhara, T. Quantification and alteration of dopamine receptors in living human brain: Тез. 45 Anuual Meeting of the Japanese Societyfor Neurochemistry, Sapporo, July 17-19, 2002. / Suhara Tetsuya // Neurochem. Res. 2003. - 28, № 7. - C. 1071. - Англ.
148. Sunahara R.K., Guan H.C., Odowd B.F. et al // Nature.- 1991.-V. 350,N 6319.- P. 614-619.
149. Tahar, A.H. Antidyskinetic effect of JL-18, a clozapine analog, in parkinsonian monkeys / Tahar Abdallah Hadj, Belanger Nancy, Bangas-soro Evelyne, Gregoire Laurent, Bedard Paul J. // Eur. J. Pharmacol. -2000.-399, № 2-3. C. 183-186. - Англ.
150. Thomas, W.S. There is a limited critical period for dopamine's effects on D1 receptor expression in the developing rat neostriatum /
151. W.S. Thomas, B.S. Neal-Beliveau, J.N. Joyce // Dev. Brain Res. 1998. -111, № l.-C. 99-106.-Англ.1 fi
152. Van Woenkens, L.J. Evidence against a role for dopamine D. receptors in the myocardium of the pig / L.J. Van Woenkens, D.J Duncker, M.O. Den Boer et al //Br. J. Pharmacol.- 1991.- V. 104, N 1.- P. 246-250.
153. Volkow, N.D. Measuring age related changes in dopamine D2-receptors with 11C - raclopride and 18F-N-methylspiroperidol / N.D. Volkow, G.J. Wang, J.S. Fowler et al // Psychiatry. Res. - 1996. - V. 67, N l.-P. 11-16.
154. Voltherms, T.A. Sensitization of neuronal D2a adenosine receptors after persistent D2 dopamine receptor activation / T.A. Voltherms, V.J. Watts // J. Pharmacol. And Exp. Ther. 2004. - 308, № 1. - C. 221227. - Англ.
155. Walters, D.E. The Dj .agonist SKF 38393 increases dopamine release in the developing cat striatum / D.E. Walters, S.G. Howard // Eur. J. Pharmacol.- 1990.- V. 184, N 2- 3.- P. 257-264.
156. Wan, D.C. Treatment with haloperidol or clozapine causes changes in dopamine receptors but not adenylate cyclase or protein kinase С in the rat forebrain / D.C. Wan, B. Dean, G. Pavey, D.L. Copolov // Life. Sci.- 1996.- V. 59, N 23.- P. 2001-2008.
157. Wang, Hong-Shan Рецептор Неновый рецептор гистамина / Hong-Shan Wang, Nai-ping Wang. Hong-hao Zhou // Zhongguo yaolixue tongbao=Chin. Pharmacol. Bull. 2004. - 20, № 7. - C.731 -734.
158. Wang, N. Positive inotropic effects of apomorphine on guinea pig myocardium is mediated by dopamine DAI receptors / N. Wang, D.H. Zhao, B.H. Sheng // Chung. Kuo. Yao. Li. Hsuch. Pao. 1991.-V. 12, N3.- P. 207-211.
159. Gasior M. / // J. Pharvacol. and Exp. Ther. 2004.- 308, № 3. - C. 957964. - Англ.
160. Wulff, Birgitte S. Characteristics of recombilaty expressed rat and human histamine H3 receptors / Birgitte S. Wulff, Sven Hastru, Karin Rimvall // Eur. J. Pharmacol. 2002. - 453, № 1. - C. 33-41.
161. Yarnykh, E.V. Terapevticheski archive / E.V. Jarnykh, S.I. Chikovani, S.E. Ustinova, V.P. Masenko // Ter Arch. 2000, Vol. 72 (11), pp. 47-50.
162. Yilmaz, B. Modulatory effects of Aroclors 1221 and 1254 on bone turnover and vertebral histology in intact and ovariectomized rats /vp\ ^^
163. В. Yilmaz, A.D. Seyran, S. Sandal, M. Aydin et al. // Toxicology Letters. -2006, Oct 25. Vol. 166 (3). - pp. 276-84.
164. Young, K. Characterization of D2-receptors and dopamine levels in the thalamus of the rat / K. Young, R.E. Wilcox // Life sci.- 1991.-V. 48, N 19.-P. 1845- 1852.
165. Zarrindast, M.-R. Effects of dopaminergic agents on antinociception in formalin test / Mohammad-Reza Zarrindast, Shadi Nassiri-Rad, Marjan Pazouki // Gen. Pharmacol. 1999. - 32, № 4. - C. 517-522. - Англ.
166. Zhang, H. Transcription of dopamine DiA-receptor mRNAs in rat heart / H. Zhang, Z. Qiao, Y. Zhao, R. Zhao // Methods. Find. Exp. Clin. Pharmacol.- 1996.-V. 18, N3.-P. 183- 187.
167. Zhao He. Benzylpiperanizyl-indokinyethanones: Пат. 6355644 СШАб МПК7 A61K 31/496, C07D 403/06 / Zhao He, Thurkauf Andrew; Neurogen. Corp. № 09/ 594040; Заявл. 14.06.00; Опубл. 12.03.02; НПК 514/254.08.