Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Влияние комплексного применения роспидина и спиробромина с иммуномодуляторами на иммунологическую реактивность организма в эксперименте

' Министерство здравоохранения РСФСР ’

Казанский ордена Трудового Красного Знамени государственный медицинский институт им.С.В.Курадава

Ка правах рукописи

Налылова Марина Игорьевна

ВЛИЯНИЕ КСМШЕКСНОГО ПРИМЕНЕНИЯ ПРОСПЩЩА И СШРОБРСШНА. С ШШШЩЦУЛЯТОРАМИ НА ‘ ИЖШОЛОГШЕСЮТ РЕАКТИВНОСТЬ ОРГАНИЗМА В .

- ЭКСПЕРИМЕНТЕ

14.00.25 - фармакология .

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Казань, 1992

Работа выполнена б Нижегородском медицинском институте имени С.М.Кирова .

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор В.Ф.Давидов '

Официальные оипонвиты:

доктор медицинских наук, процесор и.А, Ступениова ^еслуаенный деятель наукн, доктор медицинских наук, профессор Д.Н. Лазорева

Ведущее учреждение - II Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова

на заседании специализированного Совета / Д 084. 29.03/ при Казанском Государственном медицинском институте им.С.В.Мурашова до адресу: 420012, г.Казань, ул.Бутлерова, 49. .

С авторефератом можно ознакомится в научной библиотеке института (ул.Бутлерова, 49Б)

Защита состоится "

часов

Автореферат разослан "

(I

1992г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат медицинских наук

Р.Х.Лхмедаянов

Актуальность теш. ' ■

В настоящее время в экспериментальной и клинической ОНКОЛОГИИ широко используются химиотерапевтические препараты различного механизма действия на опухолевые мотки, в том числе и алкнлирувдзе соединения. К последним относятся производные диспиротрипиперази-ния - проспидин и спиробромин. Их отличительной чертой является ’ большая широта терапевтического действия,сочетающаяся с относительно небольшими побочными явлениями на кроветворение, по сравнению с другими цитостатикамя алкилврущего типа действия /Н.И.Переводчикова и соавт.,1983; С.С.Либер?ап и Т.А.Гуськова,

1984; Р.А.Насыбуллин и В.А.Чернов, 1983, В.А.Чернов и соавт.,1973/4 Вместе с тем, данные о влиянии препаратов на иммунлогическув реактивность организма в литературе представлены неоднозначно /Н.С.Богомолова и соавт., 1984; Е.Д.Голъдберг и соавт., 1984/. Известно, что курсовое введение проспядина вызывает достоверное снижение показателей клеточного и гуморального иммунитета /Е.В. Бененсон и соавт., 1986-1987/. Курсовое яе применение спироброыи-на приводит к снижению г..ассы первичных и вторичных органов иммунной’системы, что ведет к нарушению способности лимфоидной ткани к формированию полноценного иммунного ответа /Е.Д.Гольдберг и соавт.,1984; В.А.Чернов и соавт.,1984/. Поэтому возникает проблема уменьшения икмунодепрессивного действия алкилирувдих агентов и в ходе лечения и в отдаленные сроки после него.

В последние года появились сообщения и положительные результаты о сочетанном применении цитостатиков и иммуностимуляторов /С.М.Фридман и соавт.,1980; З.Г.Кадагидзе, 1986; Д.Н.Лазарева,

Е.К.Алехин, 1985; А.В.Максимов, Б.Н.Софронов, 1986; Л.А.Рябчия-ская, 1986; С.В.Сибиряк и соавт., 1988; & *$ри£со е£ а£. Д985/. Авторы пришли в выводу, что иммуностимуляторы должны не просто стимулировать, а коррегировать иммунный ответ, приводя в норму соотношение иммунорегуляторных клеток. Это служит теоретическим обоснованием для разработки рациональных комбинаций препаратов о иммунодепрессивной и иммуностимулирующей активностью с цалыэ одновременного или последовательного выключения одних механизмов . иммунитета и активации других. Имеющиеся данные о комплексном применении иммуностимуляторов с противоопухолевыми агентами, в том числе и алкилирующего типа действия, недостаточны и трудно сопоставимы из-за особенностей проведения экспериментов. Кроме того, в литературе не найдено данных по сочетанному применению

проспидина и спиробромина с иммуномодуляторами. Поэтому, изучение, противоопухолевых препаратов производных дисшаротрипиперазиния в срав нительном плане в сочетании с различными иммуностимуляторами является актуальной проблемой.

Нами для исследования были выбраны наиболее широко применяемые стимуляторы иммунитета-представители трех различных групп: ведество природного происхоздения /продигиозан/ и.препарат синтетического происхождения /левамизол/ и новое антиацидотическое средство с имму-номодуяирующими свойствами - димефосфон. .

Цели и задачи исследования .

Способность противоопухолевых препаратов вызывать изменение активности иммунной.системы, недостаточность литературных сведений о характере влияния комплексного применения цитостатиков и иммуномодуляторов при практической необходимости учета их в клинической онкологий и поставило основную цель настоящего исследования - изучение влияния комплексного применения производных диспиротригшпераЗИНИЯ /проспидина и спиробромина/ с иммуномодулятораш на иммунологическую реактивность организма в динамике длительного наблюдения. Одновременно преследовалась и другая цель - разработка в эксперименте рациональной схемы сочетания данных цитостатиков с иммуномодуляторами продигиозаном, левамизолом и димефосфоном для достижения высокой эффективности комплексной химиотерапии дрк минимальной иммунодепрессии.

В связи с поставленной целью-предполагалось решить следующие задачи:

I. Изучить влияние курсового введения проспидина и спиробромина на иммунологическую реактивность у интактных животных в динамике эксперимента. ... •

2. Исследовать динамику изменений некоторых показателей гумо- -рального и клеточного звеньев иммунитета при курсовом применении иммуномодул§тора димефосфона у интактных животных.

3. Определить рациональную комбинацию по динамике изменений

первичного иммунного ответа при различных схемах введения иммуномодуляторов цродигиозана, левамизола и димефосфона на фоне курсового введения цитостатиков проспидина и спиробромина. ■

4. Выяснить изменения динамики некоторых показателей гуморального и клеточного иммунитета при комплексном назначении проспидина И спиробромина с продигиозаном, левамизолом и днмефосфоном.

Научная новизна.

Впервые проведено исследование характера и динамики изменений гммунологической реактивности при курсовом применении производных даспиротрипиперазиния /проспидина и спиробромвна/ в отдаленные сро-ш наблюдения/ до 2-х месяцев/ у интактных животных.

Впервые выявлена Динамика изменений некоторых показателей гумо-)ального и клеточного иммунитета при курсовом введении димефосфона щтактным животным в ранние ц отдаленные сроки наблюдения.

Впервые определена динамика изменений некоторых показателей гуморального и клеточного иммунитета при комплексном-применении про-:пидина и спиро бромшш с продигиозаном, левамизолом и дшефосфоном.

Научно-практическая значимость.'

Теоретическое значение работы заключается в расширении представ-! гения о характере и динамике действия проспидина и спиробромина на ! гммунную систему при их курсовом введении в сочетаний с тмуноыоду- ’ шторами продигиозаном, левамизолом и димефосфоном.

Полученные данные позволили установить в эксперименте оптикаль-сый вариант сочетанного применения проспидина и спироброшна с им-1уномодулЯторами продигиоЗаном, левамизолом и димефосфояом, при ко-•орой сохраняется назначение элективных по противоопухолевому дей-:твию доз цитостатиков, но сопровождается минимальным угнетением • гммунологической реактивности организма. •

Использование в практической онкологии экспериментальных дан-шх об особенностях действия цитостатиков при сочетании их с имму-юмодуляторами позволит избежать или резко снизить выраженность по-гачных эффектов, связанных с имыунодепрессивнш действием противо-щухолевых средств, и даст возможность использовать полученные схе-ы комплексной химиотерапий для лечения опухолевых заболеваний.

Положения. выноЬише на защиту.

1. Курсовое введение интактным животным проспидина и спиробро-ина вызывает снижение показателей первичного иммунного ответа, исленности иммунокомпетентных клеток, содержания Т- и В-лтфщитов I тканях органов лимфатической системы. В отдаленные ером опыта тмечается выракенная тенденция к их нормализации, но имеются раз-нчия по характеру и срокам ее проявления для каждого цитостатика. '

2, Курсовое введение интактным животным димефосфона вызывает начительное увеличение исследуемых показателе!; гуморального и кле-

точного иммунитета б ранние сроки каблэдения, В отдаленные сроки о га отмечается тенденция к их нормализации. '

3. Исследование первичного иммунного ответа у интактных ниво

ншс после различных схем введения ищуномодуляторов продигиозана, девашзода и димефосфона на фоне применения цитостатиков проспиди и спиробромина показало, что наиболее рациональной является однов; ».2Шоа назначение этих противоопухолевых агентов с данными стимул, торами иммунитета. .

4. При исследовании некоторых показателей клеточного и гуморального иммунитета при одновременном назначении цитостатиков и ш муномодуляторов обнаружено, что применение димефосфона на фоне ку] сового введения проспидина полностью снимает ивдунодецрессив от І5ВЗДОНИЯ зтого цитостатика и даже отмечено достоверное увеличение исследуемых величин на протяжении всего опыта. Тогда как сочеташк димефосфона со спиробромином приводит к повышению исследуемых покг эателей лишь в ранние сроки набладения, которое может смениться д: ка ишунодепрессией в отдаленные сроки опыта. Сочетания проспидиш и спиробромина с продигиозаном и левамизолом по разному отра&аеты на иэменение динамики показателей иммунитета.

Апробация работе ■

Материалы диссертация доложены и.обсуждены на заседании проблемной комиссии "Злокачественные новообразования" /Горький, 1989г. на 49-й объединенной итоговой научно-практической конференции моле дата ученых, специалистов и студентов Дагестана по медицине /Махачкала, 1987г./; на 1-й иколе-семинаре "Регуляция тканевого гомеосте за", "Нетоксическая профилактика и терапия хронических патологий" /Кобулети, 1387г./; на Ш Всесоюзном Совещаний' "Актуальные проблей экспериментальной химиотерапии опухолей" /Черноголовка, 1987г./; на УІ Всесоюзном съезде фармакологов "Фармакология и научно-технический прогресс" /Ташкент, 1988г./; на IX и X Мехшнститутских научных ’конференциях "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях" /Челябинск, 1988г., 1990г./; на XI съезде фармакологов Укр.ССР /Харьков 1990г./; на научных конференциях молодых ученых Волго-Вятского региона /Горький, 1985, 1986, 1987, 1988, 1989гг./.

. - Публикации. Но теме диссертации опубликовано 13 работ.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 167 страницах эшиноплсиого текста. Состоит из Введення, Обзора литературы, главн гіатериалн и метода исследования’', 3-х глав результатов собственных '.следований, "Обсуждения" и выводов, Содержит 22 таблицы и 19 ри-гнков. Указатель литературы включает 210 источников на русском п )Э источников на иностранном языке.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДІ ИССЛЕД01ШШ

Эксперименты лроводились на 1830 белых не^пнейных интактнюс ысах-самцах, массой 100-120 граммов, полученных из Московского пн-шика /ст.Планерная/, содергнідиеся з одинаковых условиях вивария ститута. •

Проспидин вводился внутрибршшшо, ежедневно в течение 7 дней ' вдзе 100 мг/кг веса, наиболее часто используемой в экспериментадь-і практике /Р.А.Насыбуллш, В.А.Чернов, 1973г.; Н.С.Богомолова,

V.Чернов, 1973/, Спиробромин вводили I раз в день екедневно в те-іие 5 суток в дозе 52 мг/кг, которая, по данным С.С.Либермаи в 1ВТ./1984/, не вызывает глубоких токсических изменений у крыс при іторном введенії!!, соэтаняя противоопухолевув активность в отноше-многих перевиваемых опухолей (В.А.Чернов, С.М.Минакова, 1984).- .. Иммунологические показатели определяли на 1-е, 10-е, 20-е, ЗО-о 0-е сутки после последнего дня курсового введения цитостатиков: -ую яе схему наблюдений ш использовали и при изучении сочетаний остатиков с кшуноглодулятораш. ■ ’

Для того, чтобы снизить отрицательное влияние цитостатиков ка рнологическую реактивность организма наш был использован метод ючетанного применения с Емг,іуиомодуяяторама разной химической гктуры и различного прет,существенного действия на гуморальный и 'очный имцунитет. С этой цельо бшп взяты два наиболее известных тгомодулятора - продигиозан и левамвзол. Кроме того, в комплексе тостатиками было изучено новое антиацидотнческоэ средство с номодулнрущимп свойствами - димефосфон.

В наших экспериментах продигиозан вводился внутрабршанно а

0,05 мг/кг через день (всего 3 инъекции), т.е. по схеме, часто льзуемой в экспериментальной практике (Е.К.Алехин, 1985; А.В. япцев, 1988; Д.Н.Лазарева, Е.К.Алехин,- 1985; Л.А.Рябчпнская,

). При изучении левамизола /декариса/ в наших исследованиях 6и~ шользованы 2 дозы и 2 режима введения этого препарата: ,

Укг внутрь енедевно в течение 10 дней и 25 мг/кг через день в ше 10 дней, что било' связано с отсутствием в литературных ис-

- б -

точниках сло&ишеііся схемы введения препарата. В контрольных опыт, нами было установлено, что при назначении левашзола в дозе 10 да, курсом 10 дней число АОК на 10-20-е сутки опыта увеличивается в 1,6 раза по сравнению с исходными данными. Тогда как применение е; в дозе 25 мг/кг 5 дней, количество АОК возросло в 2,2-2,3 раза. Поетому, в дальнейшем, мы использовали последний вариант введення препарата. • *

Димефосфон применялся внутрь в дозе 200 мг/кг ежедневно в те чение 8 дней: такой режим введения в основном используется больши етзом исследователей (Л.И,Аничкова, 1988; И.А.Студекцова и соавт. 1988; А.У.Зигагашн и соавт. 1988; Н.А;Скоромный и соавт.,1990). Иімунологические показатели исследовали на 10-е, 20-е, 30-е и 60-сутки после последнего введения димефосфона.

Иммуномодуляторы продигиозан, левамизол и димефосфон назнача лись до, одновременно, с середины и после курса введения цитостат ков.

При анализе результатов опытов по изменению 'динамики первичного к мунного ответа было сделано предположение о том, что наиболее опз мальннм является одновременное введение цитостатика и дамуномоду; тора. Поэтому, в дальнейшем, мы и Использовали этот вариант сочеі нкя препаратов, ■ '

Иммунологическую реактивность организма оценивали по числу Т- и В-лт/фаціїтов, количеству ядросодержащих клеток в I мг ткани тимуса, селезенки, подчелюстных и парааортальных лимфатических у: лов. Величину первичного иммунного ответа организма определяли ш числу антителообразувдих клеток в селезенке. Суспензии диьфоидны: клеток готовили по общепринятому методу (Р.В.Петров, Ю.М.2арецка( 1970; Р.В.Петров и соавт,1977).

Число Т-лиьфоцитов определяли в комплементозависимом ЦИТ0Т1 ксическом тесте с использованием кроличьей сыворотки против тиму зависимы^ лимфоцитов крыс. Работа проводилась по методике, описа: ной для лшшей и шаптированной для экспериментов но ірисах ^

1971). Число В-лньфоцитов, несущих на поверхности рецепторы для мплемэятв, определяли методом розеткообразования с эритроцитами рана и комплементом мшзей по метолу, описанному £ 0 Исч£ еі а£, {2973), Количество АОК определяли с помощью метода, предлояеяног Я.ХК.Упкл А.А.лінАіп, (1963) в модификации Сиатп^.ит.

Л. (1965). В качестве антигена для иммунизации крыс

использовали еритроцити бараки. Для оценки иммунного ответа нрои водилк расчет количества АОи яя І0С харлецитов селезенки.

Статистическая обработка результатов исследования {заполнена с помощью пакета прикладных программ МЕДСТ на курсе информатики Нижегородского медицинского института на ЕШ См-4. Каздая выборка была проведена' на близость к нормальному распределению с помощью критерия иГ . В зависимости от результатов проверки дальнейшая обработка, проводилась с помощью параметрических (критерий Фишера и критерий Стьвдента) или непараметрических (критерий Вилкоксона-Манна-Уитни) методов статистики. ■ , ' '

Результаты исследования и юс обсуждение. '

В результате проведенного исследования установлено, что курсовое введение производных диспиротриштеразвнйя (проспидина и спиро-брошша) ингактным животным вызывает снижение величины первичного иммунного ответа (по числу АОК) в ранние сроки наблйдения (до Юх суток), более резко выраженное при введений проспидина (на 75%). Восстановление данного показателя после введения’происходит гораздо быстрее - уже к 20-м суткам. Тогда как, после применения спиробро- ' мина нормализация величины первичного иммушюго ответа происходит гораздо медленнее - ч 60-мсуткам опыта.

, Более длительное угнетение первичного иммунного ответа при курсовом введении спйробромина, выразившееся в стойком снижении количества АОК в ткани селезенкй животных* по-йидимому, связано с более выраженными кумулятивными свойствами спиробрсмина, по сравнению с проспидином (В.А.Чернов, С.М.Минакова, 1984; В.Л.Чернов и соавт., 1984, В.Ф.Федоров и соавт.,(1987). С этим согласуются и Данные '

3.Д.Гольдберга и соавт. /1984/, которые отмечали способность даяе эднократного введения препарата на длительный срок /до 1,5 месяцев/ трушать способность лимфоидной ткани к формировании полноценного шцунного ответа. . ■ ' ' . •

Проведенное исследование влияний препаратов на динамику измене-шй числа иммунокомпетентних клеток в тканях органов лимфатической шстемы выявило, что наибольшее снижение количества ядросодержащих слеток в тканях органов иммунной системы /ткмусе, селезенке, лимфа-:ических узлах/ после курсового-применения производных диспиротрипи-[еразиния отмечалось в ранние1 сроки наблюдения. Однако, после назначения проспидина восстановление показатели во всех.исследуемых 'рганах происходило уже к 20-м суткам. Тогда как при введении спи-оброшна.наблюдалось стойкое снижение численности клеток в.тимусе стойкая депрессия этого показателя в селезенке и парааорталышх лир.узлах, что может говорить о прямом повреждающем действии пре-

, парата на ткани органов лимфатической системы. Это подтверждается резальтатами исследований С.С.Либерман и соавт. /1904/. Е.Д.Гольд-берга и соавт. /1984/. '

Исследование динамики изменения содержания Т-'и В-лимфоцитов в селезенке и лимфатически* узлах практически совпадают с полученными данными по изменению динамики количества иммунокомпетентных клеток и величины первичного.иммунного ответа.

. Причем, оно не одинаково в различных лимфоидных органах. Так, при применении спиробромина численность Т-лимфоцитов в селезенке оказалась выше, чем в контроле на протяжении всего эксперимента.

4’ Это, возможно, связано с тем, что, по мнению М.В. Мокул еЬ £,Я)хпу.

, (1987), под влиянием цитостатиков может ослабляться угнетающее дей ствие Т-супрессоров и несколько повышается активность Т-хеллеров, Результирующий аффект монет носить характер иммуностимулирующего.

. Но это отчетливо проявляется при использовании небольших доз препа

■ рата. А вот количество В-лимфоцитов в этом-лимфоидном органе в наш эксперименте всегда оказывалось сниженным вплоть до 30-х суток они та. Вероятно, его общее свойство алкшшрунцих соединении. Так, ана логичные результаты были получены Г.Г.Братусь и соавт. /1987/.

Клинические наблюдения и экспериментальные данные свидетельсг иуат о том, что алкилирувдие соединения не являются полными и абсолютными иммушдепрессорами, а по разному действуют на различные звенья иммунного процесса. Это и создает теоретические предпосылки для бозмовшх комбинаций их с ищуномодуляторами. Последнее может

■ послукить основой для коррегирования иммунитета, снияенного введением проспидина и спиробромина. Это позволит уменьшить вероятность присоединения вторичной инфекции и, в конечном итоге, повысит эффективность сёмой химиотерапии.

С целью снижения, имуунодепрессивного действия после дрименени шшеуказанных цитостатиков нами была использованы иммуномодуляторь разных групп: препарат природного происхождения - дродигиозан (З.В.Ермольева, Г.Е.Вайсберг, /1974/, препарат синтетического про-нсходдения - левамизол /А.Пар, 1980; £ Непоих «Ь Ж. йенсих. Д977

■ а новое внтяацидотическое средство с иммуномодулирупцими свойствам

- димефосфон (Й.В.Баикошшкова н соавт., 1985, Р.А.Студевдова и ооавт., 1986, 198а). •

В наших исследованиях показано, что курсовое введение димефос Фона вызывает стойкое увеличение виличшш первичного иммунного ответа у кнтактных животннх на протяжении всего эксперимента /т.е.

э 60-х суток наблюдения/. Это косвенно согласутеся с данными О.Б. вяткиной и соавт./1989/ о стойкой коррекции ищунитета димефосфоном больных с выраженным синдромом ацидоза, в частности, у лиц, стра-звдих атопической бронхиальной астмой. В определенной мере ото мой-э прогнозировать и для больных со слоиачественннми новообразовани-1ли, у которых этот синдром развивается довольно рано и прогресси-ует по мере развития процесса (З.Г.Кадагидзе, 1985).

Изучение динамики изменений численности иммунокомптентных кле-, эк после курсового введения, димефосфона показало, что в селезенке лимфатических узлах первоначальшй резкий рост'этого показателя з 10-е сутки опыта сменяется кратковременной нормализацией. Однако, го состояние не стабильно и в отдалешше сроки наблвдения /30-э -3-е сутки/ обнаруживается новое увеличение числа ядросодергазщих леток. Это, возможно, связано с перераспределением клеток из тканей энтральных органов иммунной системы на периферия. Последнее под-верадается данными об изменении числа клеток в тикусе: количество ялунокпмпетентных клеток снижается в отдалешше срокл наблвденил. .двухэтапное повышение численности клеток в селезенке и лит»ф.узлах эжет быть связано с двухфазностыо действия биологически активных эществ (К.П.Балицкий, И.Г.Векслер, 1975; Х.Фримель, Й.Брок, 1986). экое заключение подтверждают и результаты исследования А.Б.Матвеева соавт. /1981/. л

Исследование изменений количества Т- и В-лим$оцитов у интакт-крыс после курсового применения димефосфона выявило длительное величение численности Т- и В-лим£оцитов в тканях органов лим£ати-зской системы. Причем, число В-лим|юцитов в селезенке к 30-м суткам зсколько понижалось, но вновь восстанавливалось к концу исследова-т. Тогда как количество Т-лим|оцитов оказалось постепенно пови-зннда на протяжении всего эксперимента. Выявленный характер дей-гвия подтверждается данными И.Н.Зернова и Н.В.Володиной /1988/, .Б.Святкшгой и соавт. /1989/ и др-., установивших преимущественное эйствие димефосфона на Т-клеточное звено иммунитета. -

Таким образом, результатами наших исследований можно подтвер-А1ъ наличие у димефосфона иммуномодулирующей активности. Действие шефосфона на клеточный иммунитет совпадает с такой не активностью звамизола. А значительное и стойкое повышение первичного иммунного гвета в ответ на введение димефосфона, по-видимому, связано с ги-зрпродукциеГ, под влиянием препарата Т-лимфоцитов-хелперов, явля»-1хся непосродственшзл: регуляторами гуморального иммунитета

З.Д.Брондз, И'оС). -

' В предварительных наблюдениях по изучению комплексного примен ния иммуномодуляторов относительно срока проведения курса проспиди и спиробромина,наш! было установлено, что только одновременное вве

' •дениё спиробромина и левамиэола, спиробромина и димефосфона, просп: дина и димефосфойа вызывает стабильное увеличение численности АОК.

■ ‘ Это, по-видимому, связано с тем, что изучаемые цитостатики оказыва-‘ ют выраженное угнетающее действие на иммунитет в ранние сроки иссл<

дованйя (Ё.Д.Голвдберг и соавт., 1984; В.А.Адо и соавт., 1973).

' При курсовом же введении лммун омодуля торов максимальный рост количества АОК так же отмечался в ранние сроки эксперимента. Поэтому-тс возможно и результирующей аффект может выражаться в восстановлении и даже увеличении величины первичного ии-’.оашого ответа. Подобного рода эффекты описаны в литературе, когда имеет место комплексное не значение цитостатиков и витаминов (К.П.Балицкий, И.Г.Векслер, 1975, Б.И.Переводчикова, 1986), цитостатиков и общетонизирушцих средств (Б.Т.Билинскйй, Я.В.Шпа^ик, 1986).

Полученные результаты показали, что наибольшее увеличение вели чины первичного иммунного ответа отмечалось при одновременном приме нении проспидина и димефосфона. Это, по-видимому, связано с тем, чт явления физиологического антагонизма в большей степени выражены при таком сочетании: так как, возмолшо, действуя па одни и те же участк

■ мембраны клеток, Что и проспидин, димефосфон проявляет к ним большее сродство, что выражается, в конечном итоге,, в ликвидации явлений иымуиодепрессии от введенного цитостатика. Кроме того, было установлено, что димефосфон более выраженно увеличивает число ЛОК

■ /в 2,5 раза по сравнению с контролем/, чем лева),га зол и продигиозан в 1,6 раза по сравнению с контролем/ Стабл.1).

. При совместном назначении другого производного диспиротрйпипе-разиния спиробромина с йммуномодуляторами так же отмечается стойкое повышение величины первичного иммунного ответа, особенно при сочетании с димефосфоном и левамизолом. Однако, выраженность этого дейст-вил гораздо меньше /максимальное увеличение на 20-е сутки опыта на . 12555 и 168$ соответственно против 631$ при сочетании с проспидином/. При изучений динймики изменений Численности ядросодеряащих клеток в тканям органов лимфатической системы было установлено, что на

■ фоле введения производиих диспиротришшеразшшя продигиозан лишь в

• ранние сроки эксперимента снимает явления т.кунодепрессии от примененных цитостатиков, что ио-вшишалу, кожет говорить о неиродолжи-; тельности действия ипкунемояулягора на иммунитет. Изучение сочетания

інемение велячиыы парвиміміго «.жуйного ответа (гкэ числу ЛОК на 10 «сариэддотсэ селезенке) у крмс после ормнзрєиеммрго сэсДЕния проспиаина и июіуноияяуяяторпз

о и і*-

\

І ч

ч їй)* 14 <3 и і

ІЛ СЭ ІЛ * <г ^ о **

-» »> ■ 4< *

43 0* О N N V N

ІЛ N ' О и

'О О О N «З’ V

о

¥1 М3 ІЛ *

<0 о о м » І* ►

О О О N о* \/

_ о

О ІЛ «Г Ю

с

с є а о» ц н

•ч ІЛ 10 &•

о«юп

га. « о N. са V И

^ «0 10 £ о ь> о о

(Ч о о сч

N V

О <£ ІЛ N

О МО И #»*►*»

400М Ьї V

о

*4

О N ¥ «* Ш N «*

л

мйіоо М п О' « »• » ' І* » N00^

о» V

N

М П> \п Гч

іч сэ о о . ► № *• *

N О О N И V

о

ІЛ Є* ІЛ о е'РЮ'И

О о О N

О- V

^ о г 9. п N «І-► » «* о

ІЛ

ЕайІ

«*

ГЧ *0 ІЛ *"

сч ^ о гч V <? о* гГ

N • V

43 Р* ю іп *>*».*

Ш N О N N V

ІЛ ш

о п

N о о N

&* . V

о

О *■’

N К>

?а о» і н

вышеуказанных цитостатиков с левамизолс.,1 выявило, что число иммуно-компетентных клеток при совместном назначении этого иммуномодулятор с проспидином начинает снижаться в поздние сроки наблюдения /начина с 30-х суток/ почти во всех исследуемых органах. Тогда как, одновре менное введение спиробромина и левамизола приветило, наоборот, к повышению этого показателя Ь поздние сроки исследования.

, Наш дашше подтверждают известное по литературе положение о

> том, что левамизол оказывает выраженное действие на снижение показа тели клеточного иммунитета /М.В.Галкина и соавт., 1982; Д.Н.Лазаре-ва, Е.К.Алехин, 1985, ЛС К. Лтепу , 1978/.

Разница же В динамике изменений этого показателя между сочетанием проспидина с левамизолом и спиробромина с левамизолом подтверждает полученные нами результаты и литературные данные /С.С.Либерман и . соавт., 1984/ о непродолжительном депрессивном влиянии проспидина на некоторые показатели иммунитета и гораздо более длительном действии спиробромина на иммуногенез.

: При одновременном назначении изучаемых цитостатиков с димефос-

фоном отмечалось стойкое повышение количества клеток в тимусе и селезенке /особенно выраженное в тимусе/ с тенденцией к нормализации к концу опыта. Это подтверждает мнение ряда авторов /И.В.Законнико-ва, 1985, Л.И.Аничкова, 1988, О.Б.Святкина и соавт., 1989, И.В.Горбунова и соавт., 1991/, об активном стимулирующем действии препарата в условиях сниженной иммунологической реактивности. А выраженное увеличение численности клеток в тимусе, вероятно, связано с преимущественным действием димефосфона. на Т-лиьфоциты. В парааортальных лимф.узлах димефосфон повышает число иммунокомпетентных клеток только1 в случае сочетания его с цроспиданом, да и то, начиная с 30-х суток. В подчелюстных лим£.узлах /при сочетании проспидина и диме-фосфона/ наблюдается, наоборот, раннее увеличение клеточности. По-видимому, миграция клеток из первичного органа иммунной системы /тимуса/, происходит сначала в подчелюстные лимф.узлы, - там и наблюдается ранний рост этого показателя. В случае сочетания димефосфона со спиробромином тенденции к нормализации в лимфатических уз-•лах выявляется лишь к концу исследования /то есть к 60-м суткам/.

. Что может свидетельствовать о том, что спнробромин более существеннее повреждает ткани иммунокомпетентных органов и восстановление , иммунных механизмов, в том числе и количества ядросодеряащих клеток в лимфатических узлах, происходит после 30-40 суток опыта /Е.Д. Гольдберг и соавт., 1984/ (табл.2).

A

К&даздэ ч5*сяснносго к-г^уноодтатштг&х ernes Iru сал«£ству «^исеаафЖё^и cams: 1 * 10 /кг т&вд cpr&a) у ингзгттех х^£ пх*а о»^Соу5^ога ?\до&Н5&я ^TtnaTwcc* м ^&^с^ана

Проагчйж U00 иг/кг * 7) ♦ £-*£$к?з< (2СО п7сг & 5) ? Сг*^з5ра*ет Q иг/кг 5) ♦ дкг$Х£М (20Э нг/сг Ї 6)

Tvwyc 1 сtjsaiawa ! л«$атжеазя уш * ттоус I сгзгзаа» ! л*5$ат*неаэв уиы

» ♦ ■- ,, .,_ .......................... . .....t ♦ ........................................ ....................,.

\ ! пгразсртаяш® ? пагчеіксп&г ! f ‘ rcsp«GpTiA«a ! лодчгшгг>а*е

! «я. ! спя ! неї. ! отыт ! неї. ! опит ка. ! oar ! HCS. вит ! ист. ! ОТЫТ і ю. ! (sut ! id* ! агат ! 1

10 ! X ! 0,43 ! 1,43 ! 0,43 ! 0,42 ї ! 0,002! 0,110 ! 0,0341 0,010! ! И КО, 01 ! !<0,С1 • 0,57 ! 0,011! » 0,57 0,021 >0,05 0,4J ! 1,51 ! 0,«5 0,007f 0,171 ! 0,012 ! <0,01 ! 1,72 ! 0,090 ! <0,01 ! 0,96 ! 0,011! t ООО 0,85 ! 0,010! i 0,50 » 0,010 і <0,05- ! о о ..і® 0,50 ! 0,007 ! <0,05 ! *-■ Ш 1

! Ij! 1,43 ! 2,22 ! 1,43 ! 1,77 ! 1,77 ! 1,74 ! 1,1» ! 2,1? ! 1,43 2,а ! 1.S3 ! 1,70 ! 1,93 ! 1,70 ! 1,94 ! 1,70 !

23 ! К » 0,73 ! 1,3 ! 0,» ! 0,Е» ! 0,5» ! 0,53 ! 0,52 ! 0,3 ! 0,72 1,07 < 0,45 ! 0,54 ! 0,32 ! 0,42 ! 0,37 ! 0,44 !

!і» • 0,010! 0,019 ! 0,010! 0,004! 0,00?! 0,020 • 0,CC3* 0,023 ! 0,002 0,410 ! 0,007! 0,007! 0,011! 0,009 ! 0,020! 0,010 !

! р ! !<0,С1 ! '<0,01 < ! >0,03 ! ! >0,05 і <0,01 ! ! <0,05 ! t <0,03 ! ! <0,05 !

! lq! 1,ВІ ! 2,10 ! 1,73 ! 1,1» ! 1,73 ! 1,74 ! 1*72 ! 1,72 ! 1,34 2,03 ! 1,43 > 1,73 ! 1,72 ! 1,42 ! 1,74 ! 1,44 !

• М ! Л ! 0,54 ! 1,15 ! 0,41 ! 0,82 ! 0,52 ! 1,0 ! 0,54 * 0,46 ! 0,31 0,65 ! 0,34 ! 0,51 ! 0,53 ! 0,54 ! 0,05 ! 0,53 !

■ІЗ і 0,004! 0,020 ! 0,004! 0,012! 0,009* 0,012 ! 0,011! 0,012 ! 0,020 0,010 ! 0,010! 0,007! 0,011! 0,010! 0,0131 0,008 •

! р ! !<0,01 ! !<0,01 ! « <0,01 » ! <0,05 і <0,05 ! 1 <0,03 ! і >0,05 ! ! <0,05 !

! Ід! 1,73 ! 2,04 ! 1,» • 1,91 ! 1,73! 2,0 ! 1,73 ! 1,SZ ! 1,49 1,81 ! 1,53 ! 1,70 ! 1,74 ! 1,75 ! 1,93 ! 1,72 !

* *а * Я * 0,47 ! 1,03 ! 0,71 ! 0,73 ! 0,48 ! 0,70 ! 0,53 ! 0,59 ! 0,43 0,8) ! 0,59 ! 0,75 ! 0,33 ! 0,28 ! 0,49 ! 0,54 !

! 0,00»! 0,011 ! 0,002! 0,007! 0,009! 0,004 ! 0,004! 0,004 ! 0,007 0,003 ! 0,010! 0,003! 0,010! 0,004 ! 0,011! 0,005 >

! !,р ! !<0,01 ! '<0,05 ! ! <0,01 t і <0,05 t <0,01 ! і <0,03 ! і < ,05 ! ! <0,05 !

! ! lq! 1,0 ! 2,01 ! 1,83 ! 1,87 ! 1,43 ! 1,0 і 1,72! 1,77 ! 1,В0 1,90 ! 1,77 ! 1,23 ! 1,52 ! 1,45 ! 1,70 ! 1,73 !•

-за-

при изучении динамики изменений количества Т-лймфоцитов в ис следуемых органах при сочетании проспидина и продигиозана обнаруя ны небольшие колебания, укладывающиеся в границах контроля, тогда как число В-лим£оцитов в ранние сроки опыта повышается. Небольшой рост этого показателя иаблвдается только на 20-30-е сутки исследо вания и в дальнейшем бистро приходит к контрольным величинам. Это монет подтверждать уже известные данные /С.М.Фридман и соавт.,190 Е.К.Алехин; 1982; Д.Н.Лазарева и соавг. 1987/ о преимущественном стимулирующем влиянии продигиозана на В-клеточное звено иммунитет* особенно в условиях иэднодепрессии. Одновременное назначение спи; брокина с прожигиозаном выявило, что на 20-е - 30-е сутки наблюдения отмечается отчетливое увеличение количества Т-лимфоцитов в ис-следуекшх органах, особенно выраженное «селезенке /на 62%/. Числс же '.р-лимфоцитов в ранние сроки опыта /до 30-х суток/ повышается гс раздо больше, чем у контрольной группы животных /в 2,1 - 3,5 раза/ Что, по-видимому, связано с кратковременным подключением Т-хеллерс под влиянием обоих препаратов /БД.Брондз, 1980; Д.Н.Лазарева и Е.К.Алехин, 1385} М.В.Мокуч, £• ЯНад , 1987/, поэтому-то и может возникать существенный рост этого показателя.

Сочетанное применение проспидина и левамизола приводит к уве'л чению количества Т-лимфоцитов на протяжении всего эксперимента с максимальным значением этого показателя на 10-е сутки опыта. В это же бремя оно сопровождается и небольшим повышением числа В-лимфоци-тов в селезенке с последующим поношением численности В-илеток в отдаленные сроки наблюдения. Полученные наш данные согласуется с результатами исследований многих авторов /Й.Е.Ковалев, 1970; Д.Н.Лазг ; рева, Е.К.Алехин, 1985, М.М.Чумакова, 1987/, которые обнаружили пр(

' имущественное влияние декариса на Т-систему иммунитета. Совместное же введение спиробромина с левамизолом выявило увеличение-числа Т-лимфсщитов лишь до 20-х суток наблядешя, которое затем сменяется небольшой депрессией этого -показателя. Такая же динамика наблвдаяас и при определении численности В-лиьфоцитов на протяжении всего опы-

• та. Повышение количества I- и В-лимроцитов в данном случае меньше выражено, чем при одновременном введении левамизола и проспидина. Что, вероятно, связано с более активным угнетением клеточности в тимусе и селезенке при курсовом применении спиробромина, как об атом свидетельствуют и литературные'данные /С.С.Либерман и соавт., 1984/, что и проявляются при'сочетании его с декарисом. Да и сам левамизол может в некоторой степени стимулировать выработку Т-суп-

прессоров /М.М.Чумакова, 1987/, что, в конечном итоге, может приводить к недостатку общего числа Т- и В-клеток.

При одновременном введении проспидина и димефосфона отмечается стойкий рост численности Т-лнмфоцитов практически во всех органах . на протяжении всего эксперимента, особенно выраженный в ранние сроки исследования /до 30-х суток/. Что подтверждает мнейзе ряда авторов /И.В.Заиконникова, 1985; О.Б.Святкина, 1989; И.В.Горбуйова и соавт., 1991/ о наиболее существенном влиянии димефосфона на Т-клеточное звено иммунитета. Число В-лимфоцитов при сочетании проспидина с ди-мефосфоном также повышается, но только в ранние сроки опыта и не столь значительно. Совместное же назначение спироброшша с димефос-фоном приводит к увеличению количества Т-яим|оцитов,наиболее выраженное до 20-х суток эксперимента и постепенное снижение этого показателя до исходного уровня к концу исследования. Изучение динамики изменения численности В-лимфоцитов установило сходную картину. ' Однако, повышение числа В-лим$оцитов в селезенке в ратае сроки опыта сменялось понижением этого показателя более интенсивно, а на 60-е сутки исследования численность В-лимфоцитов оказалась даже значительно ниже исходного уровня. Вероятно, активно действуя в условиях сниженного количества Т- И В-ЛИМФОЦИТОВ, ЧТО имеет место после введения цитостатиков, особенно в ранние сроки экспериментов, ди-ыефосфон снимает депрессию этих показателей. Вероятно, это связано с тем, что в ранних сроках набдкщеняй соотношение Т супр./ Т хелп. сдвигается а сторону увеличения Т-хелперов, поэтому и повышается общее содержание Г- и В-лимфоцитов (табл.30.

Результаты напшх наблюдений по комплексному применению производных диспиротритшеразиния проспидина и спиробромина с иммуномо-дулятораш ггродигиозаном, левамизолом и димефоофоном позволили придти к заключению о том, что наиболее эффективной в эксперименте является комбинация цитостатиков с димефосфоном. Это, вероятно, связано с более активным его влиянием, по сравнению с продигиозаном и левамизолом, в условиях иммунодепрессии от примененных ЦИТОСТвТИКОВ на иг,мунологическую реактивность организма. Это выражалось в увеличении практических всех исследованных нами показателей миунитета. Результаты этих исследований являются достаточным основанием для изучения влияния комбинаций цитостатика и иыкуномодуляторов на иммунологическую реактивность в условиях химиотерапии бпухолеЛ с по- • | следующей рекомендацией наиболее перспективных сочетаний для клинической апробации.. -

Изменение? -процентного соягрязния Т— и В—лимфоцитов (по числу * pose-rose* на 1С0 кглето»с> о лимфоидных органа» крыс лосло одновременного применения проепидина ( 100 мгЛсп' #■ 7 ) и димефоефона < 200 мг/кг * 8 ) • - '

! Дни T - ЛИМ Ф о и и т fat ♦ В - л И М <р о и и т. Ы t

• ►'lU.UJ'W .

? давания ? селезенка ! лимфатические узла ? сел«эеик:а лимфатические узлы ?

? парааортальные ? ПОДЧСЛИСТМУ© ? парааортальиые t подчелюстные? t

иск. ? опыт * иск. ? опыт ? исх. ! опят ? иск. * опыт иск- ! опыт » иск. ? опыт ?

! 10 ! M ! 30,В ? 29,7 * 38,3 ? 54,7 ? 37,0 ! 62,7 ? 29,7 ? 31,2 22,3 ! 27,3 • 23,7 • 22>, В •

у » +m ! 0,60* 1,20* 0,33* 0,99 0,26? 0,83? 0,56? 0,40 ? 0,31 ? 0,61 f 0,21? 0,60!

• ? P # >0,05! t <0,01 ! » <0,01? t >0,05 ♦ <0,05 t f >0,05*

* 20 ! M f 31,0 ! 45, В * 43,8 * 60,7 ? 44,0 ! 62,7 ? 22,0 ! 35,0 22,9 ? 30,0 ♦ 22,8 ? 32-, 5 f

» f im ! 0,45? 0,4В? 0,31? 0,99 ! 0,45? 0,.99? 0,45? 0,36 о,4а? 0,58 » 0,31? 0,71*

? t P * 1 <0,01? ♦ <0,01 ? 1 <0,01? 1 <0,01 ♦ <0,01 i t <0,01!

? 30 Г M ! 43,0 ? 37,2 ! 49,8 ? 56,2 ? 52,0 * 63,5 * 35,3 ? 27,8 24,7 ! 30,0 t 29,8 t 30,8 *

i t +m ? 0,361 0,40» 0,63? 0,31 ! 1 у 26? 0,43? 0,49? 0,31 - 0,49? о,2г> i .0,49? 0,31?

♦ » P ? ? <0,05! ♦ <0,01 ! t <0,01 f ♦ <0,05 ♦ <0,05 ♦ ♦ >0,05!

t 60 ! M ♦ 26,2 ! 31,5 ? 44,0 ? 45,2 ? 44,0 * 50,5 ? 23,0 ? 24,7 24,7 ? 25, В < 23, a ■? 2S,2 *

♦ t ±m ? 0, 48? 0,43? 0,26! 0,31 * 0,50* 0,22* 0,68? 0,76 0,45? 0,54 t 0,36? 0,48!

t * P ? * <0,05! » >0,05 ! ♦ <0,05* ♦ >0,05 ♦ >0,05 ♦ ♦ >0,05*

в и В О д ы

1. Курсовое введение интактных нивотным проепидина и спиробро-

глина вызывает снииекие величины первичного иммунного ответа, числа ГОЗЛуНОКОМПеТвИТНЫХ клеток в тимусе и селезенке, уменьшение содержания Т- и В-лмфцигов в тканях лимфатических органов в ранние сроки исследования, более резкое и непродолжительное при введении -просгш-дина. ' '

2. Курсовое назначение интакткнм ядвотшш димефосфона в терапевтической дозе приводит к увеличению величины перЕИЧНОГО икт,данного ответа, числа ишунокомпетентных меток, содержания Т- и В-лям-$оцитов в тканях органов лимфатической системы.

3. Комплексное введение проепидина и спиробромина с продигиоза-ном, левамнзолом и димефосфоном уменьшает'иммунодепрессивное дейст--вие цитостатиков. Этот оффокт наблздается только при одновременном применении противоопухолевых Препаратов и иммуномодуляторов, -

4. Продигиозан уменьшает иммунодепресивное действие проепидина

а спиробромина, что выражается в повышении величины первичного им-(лункого ответа в ранние сроки наблюдения, более' выраженное при со- , зетанин продигиозана с проспидином. Одновременно отмотается рост мсленности ядросодержащих клеток и В-лимфоцитов в селезенке, более резкий при сочетании продигиозана со спиробромином, и небольшое снижение этих показателей в лимф.уздах, при колебании числа Т-лим$о-датов в пределах исходного уровня. , .

5. Левамизол снижает ишунодепрессивное'действие проепидина и :пиробромина, что выражается в повышении величины первичного иммун-юго ответа в ранние сроки опыта, более выраженное при сочетании швамизола с проспидином. Одновременно отмечается рост численности вдросодернащих клеток в тимусе и селезенке, более выраяеннлй при ючетании левамизола со спиробромином и небольшой и кратковременный юдъем числа Т- и В-лимфоцитов в тканях органов иммунной системы.

6. Димефосфон снижает иммунодепрессивное действие проепидина ; спиробромина, что выраяается в стойком увеличении величины перечного иммунного ответа, более выраженное при сочетании дпмефосфо-:а с проспидином. Одновременно отмечается рост числеиности ивдуно-юмпетентных клеток на протяжении всего опыта в тканях органов им-унноП системы в случае сочетания димефоофона с проспидином и более озднее восстановление этого показателя в селезенке и лимф.узлах

ри сочетании дпглс'1 ос;она со спиробромином. Число Т- и В-лш.т£оцитов воличивалось лииь в ра.-яше срокт опыта. .

. список

работ, опубликованных по Лме диссертации

1. Напылова М.И.,-Монахов А.А., Кузин В.Б. Изучение действия левамизола, проепидина й димефосфона на иммунологическую реактивное! в эксперименте /Рукопись принята к депонированию 17.12.86. -15 8676-Д--86. '

2. Состояние иммунологической реактивности организма при воздействии на опухоль локальной микроволновой гипертермии /А.А.Монахов, М.И.Напылова, В.Б.Кузин, В.Ф.Давыдов, С.И.Ютанов/ /Тез.докл.

У1 науч.конф. молодых ученых Волго-Вятского региона. - Горький, 1986,- С.29.

3. Локальная гипертермия, индуцированная рочетанным применением ферромагнетиков с микроволновым, излучение!,Р/Э.Б.Кузин, В.Ф.Пугачев, С.Н.Цыбусов, М.И.Напылова, Н.И.Краузе/ /У1 науч.конф. молодых ученых Волго-Вятского региона: Тех.докл. - Горький, 1986. - С.26-27.

4. Влияние сочетанного применения производных спирополипипера-зиния с локальной гипертермией на первичный ищунный ответ в эксперименте /А.А.Монахов, В.Ф.Давыдов, В.Ф.Пугачев, ■ М.И.Напылова, В.Б. Кузин, С.И.Ютанов/ Тез.докл. на 1-й школе-семинаре. Регуляция тканевого гомеостаза. Нетоксическая профилактика и терапия хронических патологий. - Кобулети, 22-27 декабря 1987г. Тбилиси, 1987. -

С.119-122.

5. Влияние комплексного применения спиробромина с некоторыми

иммуностимуляторами на состояние В-системы иммунитета /М.И.Напылова, В.Ф.Давыдов, В.Б.Кузин, А.А.Монахов// Актуальные проблемы экспериментальной химиотерапии опухолей: Материалы Ш Всёсоюз. Совещания. .Черниголовка, 1987. - Т.2. - С.213-214. ■ ,

6. Напылова М.И., Кузин В.Б., Монахов А.А. Динамика иммунного ответа при комбинированном применении проепидина и димефосфона в эксперименте // Тез.докл. УШ науч.-практ. конф. молодых ученых Волго-Вятского региона. - Горький, 24 мая 1988. - С.172-173.

7. Влияние.сочетанного применения производных спиропояипипера-зиния с локальной микроволновой гипертермией' на первичный имщунный ответ в эксперименте /А.А.Монахов, В.Ф.Давыдов, В.Б.Кузин, В.Ф.Пугачев, М.И.Напылова, Н.И.Краузе// Тез.докл. У1 Всесоюз.съезда фармакологов: "Фармакология и научно-технический прогресс. - Ташкент, 1988, 2?-27 октября,- С.258-259.

8. Влияние дшлефосфона на иммунодепрессию, вызванную произволен спирополипиперазиния /М.И.Напылова, В.Ф.Давыдов, В.Б.Кузин,

А.Монахов, Р.Л.Береснева// Там же.- С.267.

9. Динамика иммунного ответа при курсовом применении производ-х спирополипиперазиния и иммуностимулятора дамефосфона //Факторы еточного и гуморального иммунитета при различных физиологических патологических состояниях: Тез.доКл. IX Мешшститутской науч.конф. лябинск, 1988. - С.171-172.

10. Динамика первичного иммунного ответа при комплексном воз-йствии цитостатиков и локальной гипертермии /А.А.Монахов, В.Ф.Да-дов, В.Ф.Пугачев, М.И.Напылова, В.Б.Кузин// Там же, С.170-171.

11. К вопросу сочетанного применения локальной гипертермии и оизводных спирополипиперазиния /В.Б.Кузин, А.А.Монахов, В.Ф.Пуга-

в, М.И.Напылова// Тез.докл. IX науч.конф. молодых ученых Волго-тского региона, г.Горький, 1989, - 4.1.- С.242.

12. Напилова М.И. Первичный иммунный ответ при комбинированном

вменении проспидина и спиробромина с продигиозаном// Факторы гу-рального и клеточного иммунитета при различных физиологических и гологических состояниях: Тез.докл. X науч.конф., Челябинск, 1990.199. .

13. Напылова М.И., Давыдов В.Ф., Кузин В.Б. Коррекция димефос-юм иммунодепрессии, вызванной применением производных диспиро-шипераэиния// Фармакология: состояние и перспективы исследования:

з.докл. Л съезда фармакологов УССР. - Харьков, 1990.-С.215-216.