Автореферат и диссертация по медицине (14.00.51) на тему:Влияние физических нагрузок на концентрацию ростовых факторов человека
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 14.00.51
Оглавление диссертации Сахаров, Дмитрий Андреевич Андреевич :: 2009 :: Москва
Список используемых сокращений.- 3
Введение.- 4
Глава I. Ростовые факторы и гены раннего ответа (Обзор литературы).- 8
Глава II. Материалы и методы исследования.- 43
Глава III. Антитела против гормона роста, аффинные сорбенты и конъюгаты антител.- 52
Глава VI. Нагрузочное тестирование и концентрация ростовых факторов.- 97
Глава VII. Гены раннего ответа.- 106
Глава VIII. Заключение.-116
Выводы.- 123
Введение диссертации по теме "Восстановительная медицина, спортивная медицина, курортология и физиотерапия", Сахаров, Дмитрий Андреевич Андреевич, автореферат
Физические нагрузки являются одним из основных стимулов активации системы гормон роста (ГР) - инсулиноподобный фактор роста 1 (ИФР1) (Gibney J., 2007; Nindl B.C., 2007), играющей важную роль в процессах клеточного роста и развития. В крови присутствуют несколько сплайс-изоформ гормона роста и инсулиноподобного фактора роста (Baumann G., 1991а). Сплайсинг их пре-мРНК осуществляется в ядре клетки при участии сплайсосомы - мегадальтонного комплекса между РНК и белками. Известно, что различные стрессорные факторы оказывают влияние на функционирование сплайсосомы и могут приводить к изменению ее активности или нарушениям сплайсинга. Таким образом, исследование влияния физического стресса на процесс сплайсинга гормона роста, соотношение его изоформ в крови, а также на систему ростовых факторов в целом, является современной задачей восстановительной и спортивной медицины.
Известно, что физические нагрузки разной интенсивности приводят к запуску большого количества биохимических, молекулярных и генетических механизмов, лежащих в основе адаптационных реакций организма на физиологический стресс (Coffey V.G., 2007а). Процессы адаптации организма к кратковременным высокоинтенсивным физическим нагрузкам связаны как с появлением изоформ ростовых факторов, так и с активацией системы генов раннего ответа (ГРО), и привлекают все больше внимания исследователей (Buttner Р., 2007; Connolly Р.Н., 2004).
Начальными активаторами ГРО являются стрессорные факторы, связанные с физической нагрузкой (гипотермия, ишемия, метаболический стресс, изменение электролитного баланса и т.п.), которые могут воздействовать на экспрессию ГРО как напрямую, так и опосредованно -через гуморальную систему и ЦНС (Simon Р., 2006).
Результатом работы сигнальных каскадов ГРО является активация транскрипции большого количества генов; она является пусковым звеном в механизмах белкового неосинтеза, а также активации т.н. «поздних генов», формирующих специфический фенотипический ответ организма на стресс.
Процессы активации системы ростовых факторов и генов раннего ответа, протекающие в организме спортсмена в первые минуты интенсивной физической нагрузки, в литературе не описаны, и их изучение весьма актуально и проводится впервые.
Гипотеза:
Предполагается, что работа максимальной аэробной мощности проводит к запуску процессов срочной адаптации организма: происходят изменения концентраций ростовых факторов в крови и увеличивается экспрессия генов раннего ответа. Мониторинг концентраций ростовых факторов и экспрессии мРНК генов раннего ответа в условиях физиологических тестирований различной интенсивности представляет собой новую диагностическую технологию оценки функциональных резервов организма.
Цель исследования:
Оценка влияния работы максимальной аэробной мощности на систему ростовых факторов человека: гормона роста и инсулиноподобного фактора роста 1, а также на экспрессию мРНК генов раннего ответа.
Задачи исследования:
1. Получение моно- и поликлональных антител против рекомбинантного гормона роста человека и разработка иммуноферментной (ИФА) тест-системы определения его концентрации в сыворотке крови человека;
2. Разработка методов и подходов к определению соотношения изоформ гормона роста в сыворотке крови человека;
-63. Определение изменений концентраций гормона роста и его изоформ, инсулиноподобного фактора роста 1 и инсулиноподобного фактора роста связывающего белка 3 (ИФРСБЗ) после нагрузок максимальной аэробной мощности; 4. Анализ экспрессии мРНК генов раннего ответа в лейкоцитах крови спортсменов до и после работы максимальной аэробной мощности.
Научная новизна:
Впервые проведено комплексное исследование влияния работы максимальной аэробной мощности на систему ростовых факторов и генов раннего ответа человека.
Разработана иммуноаффинная методика определения изоформ гормона роста в сыворотке крови, а также ИФА тест-система определения его суммарной концентрации с использованием полученных в работе моно- и поликлональных антител против рекомбинантного гормона роста (рГР).
Проанализированы образцы сывороток спортсменов после работы максимальной аэробной мощности и впервые показано, что концентрация ГР значительно увеличивается после нагрузки, а соотношение изоформ ГР остается неизменным. Концентрация ИФР1 в сыворотке выше у более подготовленных спортсменов; также наблюдается тенденция к увеличению общего содержания ИФР1 и ИФРСБЗ после нагрузки.
Впервые проведено исследование экспрессии на мРНК-чипах всех генов человека до и после нагрузки максимальной аэробной мощности и определены группы генов, вовлеченных в ранний ответ организма на физический стресс.
Теоретическая значимость:
Работа направлена на решение фундаментальных проблем адаптации организма спортсмена к нагрузкам максимальной аэробной мощности.
Изучены процессы ответа организма на стресс, а также запуск механизмов активации генов ранней экспрессии. Разработанные методики определения концентраций и соотношений изоформ гормонов открывают возможности для детального изучения влияния физиологического стресса на систему ростовых факторов, что важно для мониторинга утомления и восстановления в современной восстановительной медицине.
Практическая значимость:
Разработанные методики определения ростовых факторов могут быть использованы для оценки подготовленности спортсменов к нагрузкам различной интенсивности и применяться в диагностике нарушений и патологий.
Используемые подходы к детектированию изоформ гормона роста могут быть применены в анализе биологических образцов на присутствие экзогенных субстанций, при допинг-контроле сложных полипептидных субстанций.
Методики оценки экспрессии мРНК генов раннего ответа необходимы при разработке новых подходов к мониторингу физического состояния спортсменов, процессов тренировки и восстановления; при проведении анализа воздействия нагрузок на организм и оценке его функциональных резервов. Результаты исследования внедрены в работу кафедры спортивной медицины ФГУ РГУФКСиТ и кафедры физического воспитания и спорта МГУ имени М.В. Ломоносова, что подтверждено актами о внедрении. Перспективным является также внедрение результатов настоящей работы в диагностических и лечебно-профилактических медицинских учреждениях.
Результаты работы опубликованы в 4 статьях.
Заключение диссертационного исследования на тему "Влияние физических нагрузок на концентрацию ростовых факторов человека"
Выводы
1. Получены высокоактивные моноклональные мышиные антитела и поликлональные аффинно очищенные антитела кролика против рекомбинантного гормона роста человека, которые можно использовать в ИФА и иммуноблоттинге.
2. Разработана ИФА тест-система определения гормона роста. Чувствительность и селективность данной тест-системы позволяют использовать ее в определении концентрации гормона роста в сыворотке крови человека для мониторинга функционального состояния спортсмена на различных этапах тренировочной и соревновательной деятельности.
3. Разработан метод определения изоформ гормона роста в сыворотке крови, основанный на аффинном выделении гормона роста и анализе полученного образца с использованием двумерного электрофореза и иммуноблоттинга. Метод позволяет детектировать 22 и 20 кДа изоформы гормона для выявления нарушений сплайсинга.
4. Показано, что после нагрузок максимальной аэробной мощности абсолютное увеличение концентрации гормона роста и базальный уровень инсулиноподобного фактора роста 1 больше у спортсменов с более высоким максимальным потреблением кислорода. Доказано, что концентрация ростовых факторов до и после нагрузочного тестирования максимальной аэробной мощности может быть маркером оценки подготовленности спортсменов.
5. Выявлена группа генов, экспрессия которых в лейкоцитах периферической крови у спортсменов в результате нагрузки максимальной аэробной мощности в кратковременном периоде увеличивается. В данную группу входят гены, участвующие в передаче клеточного сигнала: киназы и фосфатазы. Анализ экспрессии мРНК данных генов способствует в дальнейшем разработке новых методик мониторинга утомления и восстановления спортсмена.
Практические рекомендации
1. Для оценки специальной работоспособности спортсменов к нагрузкам максимальной аэробной мощности необходимо комплексное исследование концентраций ростовых факторов в сыворотке крови.
2. Для стимуляции системы ростовых факторов следует применять упражнения максимальной аэробной мощности.
3. При применении метода оценки экспрессии генов раннего ответа для мониторинга процессов срочной адаптации организма следует учитывать, что время нагрузки не должно превышать 30 мин.
4. При подготовке к соревнованиям следует учитывать, что базальный уровень ростовых факторов в крови и увеличение их концентрации после нагрузочного тестирования являются маркерами физиологического состояния спортсмена.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Сахаров, Дмитрий Андреевич Андреевич
1. Давыдов Я.И. и Тоневицкий А.Г. Предсказание линейных В-клеточных эпитопов // Молекулярная биология. 2009. -Vol. 43.-N1.- С. 166-174
2. Меерсон Ф.З. и Пшенникова М.Г. Адаптация к стрессовым ситуациям и физическим нагрузкам. М.: Медицина, 1988.- С. 30-51
3. Сахаров Д. А., Тевис М., Тоневицкий А.Г. Анализ основных изоформ гормона роста человека до и после интенсивных физических нагрузок // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2008 - Т. 146. -№10 - С.446-450.
4. Шкурников М.Ю., Сахаров Д. А., Акимов Е.Б., Тоневицкий А.Г. Свободный тестостерон как маркер адаптации к нагрузкам средней интенсивности // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -2008 Т.146. - №9 - С.330-332.
5. Abdel-Meguid S.S., Shieh H.S., Smith W.W. et al. Three-dimensional structure of a genetically engineered variant of porcine growth hormone // Proc Natl Acad Sci USA.- 1987. -Vol. 84.-N18.- P. 6434-7.
6. Adlercreutz H., Harkonen M., Kuoppasalmi K. et al. Effect of training on plasma anabolic and catabolic steroid hormones and their response during physical exercise // Int J Sports Med. 1986. - Vol. 7 Suppl 1. - P. 27-8.
7. Barkan A.L. Defining normalcy of the somatotropic axis: an attainable goal? // Pituitary. 2007. - Vol. 10. - N2.- P. 135-9.
8. Baumann G. Growth hormone heterogeneity: genes, isohormones, variants, and binding proteins // Endocr Rev. -1991a. Vol. 12. - N4.- P. 424-49.
9. Baumann G. Metabolism of growth hormone (GH) and different molecular forms of GH in biological fluids // Horm Res. 1991b. - Vol. 36 Suppl 1. - P. 5-10.
10. Baumann G. Growth hormone heterogeneity in human pituitary and plasma // Horm Res. 1999. - Vol. 51 Suppl 1. -P. 2-6.
11. Bazan J.F. Structural design and molecular evolution of a cytokine receptor superfamily // Proc Natl Acad Sci US A.-1990. Vol. 87. - N18.- P. 6934-8.
12. Benjamin D.C., Berzofsky J.A., East I.J. et al. The antigenic structure of proteins: a reappraisal // Annu Rev Immunol. -1984.-Vol. 2.-P. 67-101.
13. Bidlingmaier M., Suhr J., Ernst A. et al. High-sensitivity chemiluminescence immunoassays for detection of growth hormone doping in sports // Clin Chem. 2009. - Vol. 55. -N3.-P. 445-53.
14. Bigbee A.J., Gosselink K.L., Roy R.R. et al. Bioassayable growth hormone release in rats in response to a single bout of treadmill exercise // J Appl Physiol. 2000. - Vol. 89. - N6.- P. 2174-8.
15. Bikle D.D., Harris J., Halloran B.P. et al. The molecular response of bone to growth hormone during skeletal unloading: regional differences // Endocrinology. 1995. -Vol. 136.-N5.-P. 2099-109.
16. Buttner P., Mosig S., Lechtermann A. et al. Exercise affects the gene expression profiles of human white blood cells // J Appl Physiol. 2007. - Vol. 102. - N1.- P. 26-36.
17. Charles C.H., Sun H., Lau L.F. et al. The growth factor-inducible immediate-early gene 3CHI34 encodes a protein-tyrosine-phosphatase // Proc Natl Acad Sei USA.- 1993. -Vol. 90.-Nil.-P. 5292-6.
18. Chi H., Barry S.P., Roth R.J. et al. Dynamic regulation of pro-and anti-inflammatory cytokines by MAPK phosphatase 1 (MKP-1) in innate immune responses // Proc Natl Acad Sei U S A. 2006. - Vol. 103. - N7.- P. 2274-9.
19. Christensen S.E., Jorgensen O.L., Moller N. et al. Characterization of growth hormone release in response to external heating. Comparison to exercise induced release // Acta Endocrinol (Copenh). 1984. - Vol. 107. - N3.- P. 295301.
20. Clackson T., Ultsch M.H., Wells J.A. et al. Structural and functional analysis of the 1:1 growth hormone:receptor complex reveals the molecular basis for receptor affinity // J Mol Biol. 1998. - Vol. 277. - N5.- P. 1111-28.
21. Clamp M., Cuff J., Searle S.M. et al. The Jalview Java alignment editor // Bioinformatics. 2004. - Vol. 20. - N3.- P. 426-7.
22. Clemmons D.R., Busby W.H., Arai T. et al. Role of insulinlike growth factor binding proteins in the control of IGF actions // Prog Growth Factor Res. 1995. - Vol. 6. - N2-4.- P. 357-66.
23. Connolly P.H., Caiozzo V.J., Zaldivar F. et al. Effects of exercise on gene expression in human peripheral blood mononuclear cells // J Appl Physiol. 2004. - Vol. 97. - N4.-P. 1461-9.
24. Copeland J.L. and Tremblay M.S. Effect of HRT on hormone responses to resistance exercise in post-menopausal women // Maturitas. 2004. - Vol. 48. - N4.- P. 360-71.
25. Cuneo R.C., Salomon F., Wiles C.M. et al. Growth hormone treatment in growth hormone-deficient adults. II. Effects on exercise performance // J Appl Physiol. 1991. - Vol. 70. -N2.- P. 695-700.
26. Cunningham B.C., Ultsch M., De Vos A.M. et al. Dimerization of the extracellular domain of the human growth hormone receptor by a single hormone molecule // Science. -1991. Vol. 254. - N5033,- P. 821-5.
27. Davidson R.L. and Gerald P.S. Induction of mammalian somatic cell hybridization by polyethylene glycol // Methods Cell Biol. 1977. - Vol. 15. - P. 325-38.
28. De Palo E.F., De Filippis V., Gatti R. et al. Growth hormone isoforms and segments/fragments: molecular structure and laboratory measurement // Clin Chim Acta. 2006a. - Vol. 364.-N1-2.-P. 67-76.
29. Dong C., Davis R.J. and Flavell R.A. MAP kinases in the immune response // Annu Rev Immunol. 2002. - Vol. 20. - P. 55-72.
30. Esteban C., Audi L., Carrascosa A. et al. Human growth hormone (GH1) gene polymorphism map in a normal-statured adult population // Clin Endocrinol (Oxf). 2007. - Vol. 66. -N2.- P. 258-68.
31. Farrell P.A., Garthwaite T.L. and Gustafson A.B. Plasma adrenocorticotropin and Cortisol responses to submaximal and exhaustive exercise // J Appl Physiol. 1983. - Vol. 55. - N5.-P. 1441-4.
32. Felsing N.E., Brasel J.A. and Cooper D.M. Effect of low and high intensity exercise on circulating growth hormone in men //J Clin Endocrinol Metab. 1992. - Vol. 75. - N1,- P. 157-62.
33. Fitzgerald L. Exercise and the immune system // Immunol Today. 1988. - Vol. 9. - N11,- P. 337-9.
34. Gibney J., Healy M.L. and Sonksen P.H. The growth hormone/insulin-like growth factor-I axis in exercise and sport // Endocr Rev. 2007. - Vol. 28. - N6.- P. 603-24.
35. Giustina A. and Veldhuis J.D. Pathophysiology of the neuroregulation of growth hormone secretion in experimental animals and the human // Endocr Rev. 1998. - Vol. 19. - N6.-P. 717-97.
36. Golde D.W., Bersch N., Chopra I J. et al. Thyroid hormones stimulate erythropoiesis in vitro // Br J Haematol. 1977. -Vol. 37. -N2.-P. 173-7.
37. Grigorian A.L., Bustamante J.J., Hernandez P. et al. Extraordinarily stable disulfide-linked homodimer of human growth hormone // Protein Sci. 2005. - Vol. 14. - N4.- P. 90213.
38. Grumont R.J., Rasko J.E., Strasser A. et al. Activation of the mitogen-activated protein kinase pathway induces transcription of the PAC-1 phosphatase gene // Mol Cell Biol. 1996. - Vol. 16. - N6.- P. 2913-21.
39. Hepner F., Cszasar E., Roitinger E. et al. Mass spectrometrical analysis of recombinant human growth hormone (Genotropin(R)) reveals amino acid substitutions in 2% of the expressed protein // Proteome Sci. 2005. - Vol. 3. - N1.- P. 1.
40. Hettiarachchi M., Watkinson A., Leung K.C. et al. Human growth hormone fragment (hGH44-91) produces insulin resistance and hyperinsulinemia but is less potent than 22 kDa hGH in the rat // Endocrine. 1997. - Vol. 6. - N1.- P. 47-52.
41. Holt R.I. and Sonksen P.H. Growth hormone, IGF-I and insulin and their abuse in sport // Br J Pharmacol. 2008. -Vol. 154.-N3.-P. 542-56.
42. Holt R.I., Webb E., Pentecost C. et al. Aging and physical fitness are more important than obesity in determining exercise-induced generation of GH // J Clin Endocrinol Metab. 2001. - Vol. 86. - N12.- P. 5715-20.
43. Hunter W.M., Fonseka C.C. and Passmore R. Growth hormone: important role in muscular exercise in adults // Science. 1965a. - Vol. 150. - N699.- P. 1051-3.
44. Hunter W.M., Fonseka C.C. and Passmore R. The role of growth hormone in the mobilization of fuel for muscular exercise // Q J Exp Physiol Cogn Med Sci. 1965b. - Vol. 50. -N4.-P. 406-16.
45. Hymer W.C., Kraemer W.J., Nindl B.C. et al. Characteristics of circulating growth hormone in women after acute heavyresistance exercise // Am J Physiol Endocrinol Metab. 2001. -Vol. 281.-N4.-P. E878-87.
46. Irizarry R.A., Bolstad B.M., Collin F. et al. Summaries of Affymetrix GeneChip probe level data // Nucleic Acids Res. -2003a.-Vol. 31.-N4.-P. el5.
47. Irizarry R.A., Hobbs B., Collin F. et al. Exploration, normalization, and summaries of high density oligonucleotide array probe level data // Biostatistics. 2003b. - Vol. 4. - N2.-P. 249-64.
48. Jeffrey K.L., Brummer T., Rolph M.S. et al. Positive regulation of immune cell function and inflammatory responses by phosphatase PAC-1 // Nat Immunol. 2006. -Vol. 7. - N3.- P. 274-83.
49. Jones J.I. and Clemmons D.R. Insulin-like growth factors and their binding proteins: biological actions // Endocr Rev. -1995.-Vol. 16.-NL-P. 3-34.
50. Kanaley J.A., Weatherup-Dentes M.M., Jaynes E.B. et al. Obesity attenuates the growth hormone response to exercise // J Clin Endocrinol Metab. 1999. - Vol. 84. - N9.- P. 3156-61.
51. Kanaley J.A., Weltman J.Y., Pieper K.S. et al. Cortisol and growth hormone responses to exercise at different times of day // J Clin Endocrinol Metab. 2001. - Vol. 86. - N6.- P. 2881-9.
52. Kohler M., Puschel K., Sakharov D. et al. Detection of recombinant growth hormone in human plasma by a 2-D PAGE method // Electrophoresis. 2008. - Vol. 29. - N22.- P. 4495-502.
53. Kooijman R., Gerlo S., Coppens A. et al. Growth hormone and prolactin expression in the immune system // Ann N Y Acad Sci. 2000. - Vol. 917. - P. 534-40.
54. Kraemer W.J., Fleck S.J. and Evans W.J. Strength and power training: physiological mechanisms of adaptation // Exerc Sport Sci Rev. 1996. - Vol. 24. - P. 363-97.
55. Kraemer W.J., Fragala M.S., Watson G. et al. Hormonal responses to a 160-km race across frozen Alaska // Br J Sports Med. 2008. - Vol. 42. - N2.- P. 116-20; discussion 120.
56. Kraemer W.J., Marchitelli L., Gordon S.E. et al. Hormonal and growth factor responses to heavy resistance exercise protocols // J Appl Physiol. 1990. - Vol. 69. - N4.- P. 1442-50.
57. Kraemer W.J., Rubin M.R., Hakkinen K. et al. Influence of muscle strength and total work on exercise-induced plasma growth hormone isoforms in women // J Sci Med Sport. -2003. Vol. 6. - N3.- P. 295-306.
58. Kugler S., Schuller S. and Goebel W. Involvement of MAP-kinases and -phosphatases in uptake and intracellular replication of Listeria monocytogenes in J774 macrophage cells // FEMS Microbiol Lett. 1997. - Vol. 157. - N1.- P. 1316.
59. Lewis UJ. Growth Hormone What is it and what does it do? // Trends Endocrinol Metab. 1992. - Vol. 3. - N4.- P. 117-21.
60. Lewis U.J., Lewis L.J., Salem M.A. et al. A recombinant-DNA-derived modification of human growth hormone (hGH44-191) with enhanced diabetogenic activity // Mol Cell Endocrinol. 1991. - Vol. 78. - N1-2.- P. 45-54.
61. Lopez-Guajardo C.C., Armstrong L.S., Jordan L. et al. Generation, characterization and utilization of anti-human growth hormone 1-43, (hGHl-43), monoclonal antibodies in an ELISA // J Immunol Methods. 1998. - Vol. 215. - N1-2.-P. 179-85.
62. Luger A., Watschinger B., Deuster P. et al. Plasma growth hormone and prolactin responses to graded levels of acute exercise and to a lactate infusion // Neuroendocrinology. -1992. -Vol. 56. -Nl.- P. 112-7.
63. Nindl B.C. Exercise modulation of growth hormone isoforms: current knowledge and future directions for the exercise endocrinologist // Br J Sports Med. 2007. - Vol. 41. - N6.- P. 346-8; discussion 348.
64. Nindl B.C., Hymer W.C., Deaver D.R. et al. Growth hormone pulsatility profile characteristics following acute heavy resistance exercise // J Appl Physiol. 2001. - Vol. 91. - N1.-P. 163-72.
65. Nindl B.C., Kraemer W.J., Marx J.O. et al. Growth hormone molecular heterogeneity and exercise // Exerc Sport Sci Rev. -2003.-Vol. 31.-N4.- P. 161-6.
66. Northoff H., Symons S., Zieker D. et al. Gender- and menstrual phase dependent regulation of inflammatory gene expression in response to aerobic exercise // Exerc Immunol Rev. 2008. - Vol. 14. -.- P. 86-103.
67. Pritzlaff C.J., Wideman L., Weltman J.Y. et al. Impact of acute exercise intensity on pulsatile growth hormone release in men // J Appl Physiol. 1999. - Vol. 87. - N2.- P. 498-504.
68. Rajaram S., Baylink D.J. and Mohan S. Insulin-like growth factor-binding proteins in serum and other biological fluids: regulation and functions // Endocr Rev. 1997. - Vol. 18. -N6.-P. 801-31.
69. Ranke M.B., Orskov H., Bristow A.F. et al. Consensus on how to measure growth hormone in serum // Horm Res. 1999. -Vol. 51 Suppl 1.-P. 27-9.
70. Raynaud J., Drouet L., Martineaud J.P. et al. Time course of plasma growth hormone during exercise in humans at altitude //J Appl Physiol. 1981. - Vol. 50. - N2.- P. 229-33.
71. Roberts B. and Katznelson L. Approach to the evaluation of the GH/IGF-axis in patients with pituitary disease: which test to order // Pituitary. 2007. - Vol. 10. - N2.- P. 205-11.
72. Roth J., Glick S.M., Yalow R.S. et al. Secretion of human growth hormone: physiologic and experimental modification // Metabolism. 1963. - Vol. 12. - P. 577-9.
73. Rubin M.R., Kraemer W.J., Kraemer R.R. et al. Responses of growth hormone aggregates to different intermittent exercise intensities // Eur J Appl Physiol. 2003. - Vol. 89. - N2.- P. 166-70.
74. Scacchi M., Pincelli A.I. and Cavagnini F. Growth hormone in obesity // Int J Obes Relat Metab Disord. 1999. - Vol. 23. -N3.-P. 260-71.
75. Scanlon M.F., Issa B.G. and Dieguez C. Regulation of growth hormone secretion // Horm Res. 1996. - Vol. 46. - N4-5.- P. 149-54.
76. Seta K.A., Kim R., Kim H.W. et al. Hypoxia-induced regulation of MAPK phosphatase-1 as identified by subtractive suppression hybridization and cDNA microarray analysis // J Biol Chem. 2001. - Vol. 276. - N48.- P. 44405-12.
77. Sherlock M. and Toogood A.A. Aging and the growth hormone/insulin like growth factor-I axis // Pituitary. 2007. -Vol. 10. -N2.-P. 189-203.
78. Simon P., Fehrenbach E. and Niess A.M. Regulation of immediate early gene expression by exercise: short cuts for the adaptation of immune function // Exerc Immunol Rev. 2006. -Vol. 12.-P. 112-31.
79. Sinha Y.N. and Jacobsen B.P. Human growth hormone (hGH)-(44-191), a reportedly diabetogenic fragment of hGH, circulates in human blood: measurement by radioimmunoassay // J Clin Endocrinol Metab. 1994. - Vol. 78. - N6.- P. 1411-8.
80. Smyth G.K. Linear models and empirical bayes methods for assessing differential expression in microarray experiments // Stat Appl Genet Mol Biol. 2004. - Vol. 3. - P. Article3.
81. Snyder G., Hymer W.C. and Snyder J. Functional heterogeneity in somatotrophs isolated from the rat anterior pituitary // Endocrinology. 1977. - Vol. 101. - N3.- P. 78899.
82. Stenner E., Gianoli E., Piccinini C. et al. Hormonal responses to a long duration exploration in a cave of 700 m depth // Eur J Appl Physiol. 2007. - Vol. 100. - N1.- P. 71-8.
83. Strasburger C.J., Wu Z., Pflaum C.D. et al. Immunofunctional assay of human growth hormone (hGH) in serum: a possible consensus for quantitative hGH measurement // J Clin Endocrinol Metab. 1996. - Vol. 81. - N7.- P. 2613-20.
84. Sundstrom M., Lundqvist T., Rodin J. et al. Crystal structure of an antagonist mutant of human growth hormone, G120R, in complex with its receptor at 2.9 A resolution // J Biol Chem. -1996. Vol. 271. - N50.- P. 32197-203.
85. Surya S., Symons K., Rothman E. et al. Complex rhythmicity of growth hormone secretion in humans // Pituitary. 2006. -Vol. 9. -N2.-P. 121-5.
86. Sutton J.R., Jones N.L. and Toews C.J. Growth hormone secretion in acid-base alterations at rest and during exercise // Clin Sci Mol Med. 1976. - Vol. 50. - N4.- P. 241-7.
87. Tremblay M.S., Copeland J.L. and Van Helder W. Effect of training status and exercise mode on endogenous steroid hormones in men // J Appl Physiol. 2004. - Vol. 96. - N2.- P. 531-9.
88. Ultsch M.H., Somers W., Kossiakoff A.A. et al. The ciystal structure of affinity-matured human growth hormone at 2 A resolution // J Mol Biol. 1994. - Vol. 236. - N1.- P. 286-99.
89. Veldhuis J.D., Keenan D.M. and Pincus S.M. Motivations and methods for analyzing pulsatile hormone secretion // Endocr Rev. 2008. - Vol. 29. - N7.- P. 823-64.
90. Vestergaard E.T., Dali R., Lange K.H. et al. The ghrelin response to exercise before and after growth hormoneadministration // J Clin Endocrinol Metab. 2007. - Vol. 92. -Nl.-P. 297-303.
91. Viru A., Karelson K. and Smirnova T. Stability and variability in hormonal responses to prolonged exercise // Int J Sports Med. 1992. - Vol. 13. - N3.- P. 230-5.
92. Wagner K., Hemminki K., Grzybowska E. et al. Polymorphisms in the growth hormone receptor: a case-control study in breast cancer // Int J Cancer. 2006. - Vol. 118. -N11.-P. 2903-6.
93. Wallace J.D., Cuneo R.C., Bidlingmaier M. et al. The response of molecular isoforms of growth hormone to acute exercise in trained adult males // J Clin Endocrinol Metab. 2001b. - Vol. 86.-Nl.-P. 200-6.
94. Weigent D.A. and Blalock J.E. Expression of growth hormone by lymphocytes // Int Rev Immunol. 1989. - Vol. 4. - N3.- P. 193-211.
95. Wettenhall J.M. and Smyth G.K. limmaGUI: a graphical user interface for linear modeling of microarray data // Bioinformatics. 2004. - Vol. 20. - N18.- P. 3705-6.
96. Wolfe R.R. Isotopic measurement of glucose and lactate kinetics // Ann Med. 1990. - Vol. 22. - N3.- P. 163-70.
97. Wong H.R., Dunsmore K.E., Page K. et al. Heat shock-mediated regulation of MKP-1 // Am J Physiol Cell Physiol. -2005. Vol. 289. - N5.- P. CI 152-8.
98. Wood T.J., Sliva D., Lobie P.E. et al. Mediation of growth hormone-dependent transcriptional activation by mammary gland factor/Stat 5 // J Biol Chem. 1995. - Vol. 270. - N16.-P. 9448-53.
99. Woodhouse L.J., Mukherjee A., Shalet S.M. et al. The influence of growth hormone status on physical impairments, functional limitations, and health-related quality of life in adults // Endocr Rev. 2006. - Vol. 27. - N3.- P. 287-317.
100. Wu H., Devi R. and Malarkey W.B. Localization of growth hormone messenger ribonucleic acid in the human immune system—a Clinical Research Center study // J Clin Endocrinol Metab. 1996. - Vol. 81. - N3.- P. 1278-82.
101. Wu Z., Bidlingmaier M., Dali R. et al. Detection of doping with human growth hormone // Lancet. 1999. - Vol. 353. -N9156.-P. 895.
102. Zaccaria M., Varnier M., Piazza P. et al. Blunted growth hormone response to maximal exercise in middle-aged versus young subjects and no effect of endurance training // J Clin Endocrinol Metab. 1999. - Vol. 84. - N7.- P. 2303-7.
103. Zhan X., Giorgianni F. and Desiderio D.M. Proteomics analysis of growth hormone isoforms in the human pituitary // Proteomics. 2005. - Vol. 5. - N5.- P. 1228-41.
104. Zhang Y., Blattman J.N., Kennedy N.J. et al. Regulation of innate and adaptive immune responses by MAP kinase phosphatase 5 // Nature. 2004. - Vol. 430. - N7001.- P. 7937.
105. Zieker D., Fehrenbach E., Dietzsch J. et al. cDNA microarray analysis reveals novel candidate genes expressed in human peripheral blood following exhaustive exercise // Physiol Genomics. 2005. - Vol. 23. - N3.- P. 287-94.- 144-Акт
106. Внедрения результатов научно-исследовательской работыuCcíSPt?200 2 г.
107. Объект внедрения: Методика оценки физического состояния человека по концентрации инсулиноподобного фактора роста и гормона роста в сыворотке крови.
108. Место внедрения: Кафедра физического воспитания и спорта Московского Государственного университета им. М.В. Ломоносова
109. Эффект внедрения: Разработанные методики определения концентраций гормона роста и инсулиноподобного фактора роста до и после нагрузочного тестирования, позволяют оценивать функциональное состояние организма
110. Преподаватель кафедры физического воспитания и спорта МГУ
111. Зам. Заведующего кафедрой физического воспитания и спорта МГУ145. ^1. Акт
112. Внедрения результатов научно-исследовательской работы200 § г.
113. Объект внедрения: Методика определения концешрации гормона роста и инсулиноподобного фактора роста в сыворотке крови
114. Место внедрения: Кафедра физиологии Федеральною государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Российский Государственный университет физической культуры спорта и туризма
115. Эффект внедрения: Разработанные методики определения концентраций гормона роста и инсулиноподобного фактора роста позволяют оценивать физиологический стресс, вызванный физическими упражнениями
116. Заведующий кафедрой физиолоши РГУФКСиТ, доктор биологических наук, профессор