Оглавление диссертации Туманова, Александра Сергеевна :: 2005 :: Москва
Список сокращений
Введение
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Биокомпозиционные материалы
1.2. Роль микробного фактора в развитии патологии пародонта. Использование антибактериальных средств в лечении пародонтита.
1.3. Ферменты слюны. Активность ферментов слюны при воспалении пародонта.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материал исследования.
2.2. Методы исследования.
2.2.1. Клинические методы исследования.
2.2.2. Рентгенологические методы исследования.
2.2.3. Биохимические методы исследования.
2.2.4. Микробиологические методы исследования.
2.2.5. Статистическая обработка результатов.
3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Клиническая характеристика больных и показатели смешанной слюны у больных пародонтитом.
3.2. Результаты лечения пациентов.
3.2.1. Состояние пародонта и показатели смешанной слюны у пациентов, которым при лечении пародонтита не использовался «КоллапАн».
3.2.2. Состояние пародонта и показатели смешанной слюны у больных, которым в комплексном лечении использовали препарат «КоллапАн-Л».
3.2.3. Состояние пародонта и показатели смешанной слюны у больных, которым в комплексном лечении использовали препарат «КоллапАн-М».
3.2.4. Состояние пародонта и показатели смешанной слюны у больных, которым в комплексном лечении использовали препарат «КоллапАн-Л+М».
3.2.5. Состояние пародонта и показатели смешанной слюны у больных, которым в комплексном лечении использовали препарат «КоллапАн-Д».
3.3. Результаты микробиологических исследований in vitro. Ill
3.3.1. Результаты качественной оценки антибактериальной активности лекарственных форм на основе «КоллапАна» методом диффузии в агаре.
3.3.2. Результаты сравнительного изучения МПК антибактериальных компонентов лекарственных форм на основе «КоллапАна».
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 116 Выводы 132 Практические рекомендации 134 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Список сокращений
АЛТ Аланинаминотрансфераза
АСТ Аспартатаминотрансфераза
ДТТ Дитиотрийтол
КП Кислые протеиназы лдг Лактатдегидрогеназа мик Минимальная ингибирующая активность сс Смешанная слюна ткси Термокислотостабильные ингибиторы протеиназ
ЩФ Щелочная фосфатаза
Введение диссертации по теме "Стоматология", Туманова, Александра Сергеевна, автореферат
Актуальность темы.
Проблема лечения заболеваний пародонта остается одной из самых актуальных в современной стоматологии. По данным ВОЗ (1984), около 80% населения земного шара страдает заболеваниями пародонта, являющимися основной причиной утраты зубов у людей после 30 лет. Наличие очагов хронической инфекции при пародонтите приводит к снижению резистентности макроорганизма, его микробной сенсибилизации и другим нарушениям (Иванов B.C., 2001; Никитина Т.В., 1982). Лечение заболеваний пародонта всегда носит комплексный характер, задачей которого является: исключить наиболее вероятные патологические факторы; устранить местные раздражающие факторы в полости рта; ликвидировать воспаление тканей пародонта; приостановить дистрофический процесс; восстановить нарушенную функцию тканей пародонта; стимулировать процесс регенерации; сохранить зубной ряд, как единую функциональную динамическую систему. В связи с изменением взглядов на репаративные возможности альвеолярной кости все чаще при проведении лоскутных операций применяются средства, стимулирующие регенерацию. Для усиления остеогенетических процессов в костных карманах их после кюретажа начали заполнять разнообразными трансплантатами.
В последние годы создаются новые биокомпозиционные материалы, способствующие направленной регенерации тканей (гапкол, колапол, остим-100, коллаост, аллокостен и другие).
Препарат «КоллапАн» отечественного производства (фирма «Интермедапатит») состоит из особо чистого гидроксиапатита, коллагена и антибиотика, обладает высокой биосовместимостью с тканями рецепиента, не вызывает отторжения, нагноения и аллергических реакций. Выявлены отсутствие воспаления в послеоперационном периоде, уменьшение глубины пародонтальных карманов, патологической подвижности зубов и стабилизация рентгенологической картины заболевания в течение З-х-4-х лет (Модина Т.Н., 1997).
Изучение этиологии и патогенеза пародонтита выявило совокупность метаболических изменений, касающихся как тканей пародонта, так и смешанной слюны, десневой жидкости, микрофлоры, лейкоцитов полости рта (Веремеенко К.Н. и соавт., 1976; Хоменко J1.A., 1979; Барабаш Р.Д., 1981; Барер Г.М. и соавт., 1986; Петрович Ю.А. и соавт., 1988; Вавилова Т.П., 1991). Биохимические исследования позволяют оценить состояние биологических структур на молекулярном уровне, механизмы взаимодействия всех тканей и жидкостей полости рта, симбиоз микроорганизмов человека.
При использовании «КоллапАна-JI» исследовали состояние перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты в слизисто-надкостничном лоскуте и плазме крови (Хышов В.Б. и соавт., 1997). В то же время, представляет большой интерес исследование показателей смешанной слюны, которые могут дать информацию о состоянии полости рта не только при постановке диагноза, но и в процессе лечения пародонтита.
Накоплено большое количество данных, свидетельствующих о большой роли специфической микрофлоры в развитии пародонтита (Rateitshak, 1986; Genko, 1989; Zistgarfen, 1995; Newman, 1955; Page, 1997). H. Ьоё и соавт. (1965) в экспериментах установили прямую зависимость между формированием зубной бляшки и развитием гингивита у лиц со здоровой десной. На состояние тканей пародонта оказывают влияние продукты жизнедеятельности микробов. Экзотоксины, производимые грамположительной микрофлорой, являются обычными для полости рта и не имеют выраженного патогенетического потенциала. Эндотоксины — производные грамотрицательной микрофлоры -устойчивы к температурным воздействиям, проявляют агрессивное действие в месте бактериальной аппликации, стимулируют формирование антител, вызывают вазомоторные расстройства, нарушают клеточный обмен, сопровождающийся гипергликемией с последующей гипогликемией, приводят к геморрагическому некрозу (Иванов B.C., 1998). Для каждого пациента характерно наличие индивидуального микробного сообщества. Вместе с тем, в условиях амбулаторного приема не всегда возможно провести бактериологическое исследование и подбор адекватной антимикробной терапии. Это создает предпосылки для использования «КоллапАна» с различными антибактериальными включениями или его комбинаций.
Цель исследования.
Повышение эффективности комплексного лечения пародонтита путем использования препарата «КоллапАн», содержащего в своем составе различные антибактериальные включения.
Задачи исследования:
1. Изучить активность щелочной фосфатазы (ЩФ), аспартатаминотрансферазы (ACT), аланинаминотрансферазы (АЛТ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), а-амилазы, протеиназ и содержание белка, альбуминов и мочевины в смешанной слюне человека до лечения и в различные сроки после оперативного лечения пародонтита с использованием биокомпозиционного препарата «КоллапАн».
2. Исследовать in vitro влияние «КоллапАна», содержащего линкомицин, метронидазол, диоксидин и сочетания линкомицина с метронидазолом на микрофлору полости рта больных с пародонтитом.
3. Оценить влияние препарата «КоллапАн», содержащего различные антибактериальные включения, на состояние тканей пародонта у больных с хроническим пародонтитом средней и тяжелой степеней в ближайшие и отдаленные сроки после комплексного оперативного лечения.
4. Разработать показания и методику выбора препарата «КоллапАн», содержащего различные антибактериальные включения, в комплексном лечении хронического пародонтита.
Научная новизна.
Впервые в пародонтальной хирургии использовался «КоллапАн», содержащий метронидазол, диоксидин и комбинацию линкомицина с метронидазолом в соотношении 1:1.
Доказано влияние примененных лекарственных средств на показатели смешанной слюны, о чем свидетельствует изменение соотношения активности ферментов в процессе лечения. Выявлена высокая активность ЛДГ в слюне при использовании «КоллапАна-Л», что свидетельствует об активации процессов анаэробного гликолиза в полости рта.
Впервые in vitro исследовано влияние линкомицина, метронидазола, диоксидина и комбинации линкомицина с метронидазолом на микрофлору полости рта.
Практическая значимость.
Внедрены методы дополнительного обследования пациентов, позволяющие наряду с клиническими, оценить состояние пародонта и состав смешанной слюны.
Обоснована эффективность включения в комплексное лечение хронического пародонтита средней и тяжелой степеней препарата «КоллапАн» с метронидазолом или в сочетании линкомицина и метронидазола. Рекомендуется применение «КоллапАна» с диоксидином в случаях локализованного неоднократно леченного пародонтита. При генерализованной форме пародонтита оперативные вмешательства с введением «КоллапАна-Д» необходимо проводить минимум в 6 этапов (малыми фрагментами). Разработаны показания к использованию «КоллапАна-Д».
Основные положения, выносимые на защиту.
1. Диагностическая информативность показателей активности ферментов смешанной слюны у пациентов с развившимися формами пародонтита, подтвержденная клиническими и микробиологическими методами.
2. Разработаны показания и методика выбора «КоллапАна», содержащего метронидазол, диоксидин и комбинации линкомицина с метронидазолом в комплексном лечении хронического пародонтита средней и тяжелой степеней.
Внедрение результатов диссертации в практику.
Основные результаты работы внедрены в Центральной стоматологической поликлинике ФСБ России. Материал диссертации используется при обучении студентов стоматологического факультета МГМСУ на кафедре биохимии.
Публикации по теме диссертации.
По теме диссертации опубликовано 7 научных работ:
Доклады:
1. Вавилова Т.П., Туманова A.C., Резниченко А.Ф., Ефстафьева O.JI. «Изменение активности ферментов смешанной слюны у лиц пожилого возраста с воспалительными заболеваниями тканей пародонта» на V Международной конференции «Пожилой больной. Качество жизни», М., 28.09.2000
2. Туманова A.C., Дунаев М.В., Бочкарева Н.С., Башкатова Т.Д. «Использование разновидностей биокомпозиционного препарата «КоллапАн» в лечении воспалительных заболеваний тканей пародонта» Научно-практическая конференция «Центральной стоматологической поликлинике ФСБ России - 10 лет», М. 31.03.2000.
3. Дунаев М.В., Вавилова Т.П., Туманова A.C. «Использование биокомпозиционного препарата «КоллапАн» в амбулаторной хирургической практике» на V Международной конференции челюстно-лицевых хирургов и стоматологов, С.Пб, 23.06.2000.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. /. Биокомпозиционные материалы,
В хирургической стоматологической практике врачи часто встречаются с заболеваниями, в результате развития или лечения которых образуются дефекты костной ткани: радикулярная киста, фолликулярная киста, ретенированные и дистопированные зубы, состояния после сложного удаления зубов, посттравматические состояния, остеомиелит, пародонтит и другие. Для лечения этой патологии врачи используют препараты, которые ускоряют восстановление костной ткани, снижают риск послеоперационных осложнений.
Костные трансплантаты - это любые имплантируемые материалы, которые сами по себе или в комбинации с другими материалами способствуют формированию кости, обеспечивая локальную остеогенную, кондуктивную или остеоиндуктивную активность. Остеогенные материалы (аутотрансплантаты) содержат живые клетки, способные дифференцироваться в остеобласты. Остеокондуктивные материалы содействуют аппозиционарному формированию кости на их поверхности, то есть играют роль матрицы, на которой формируется кость (Берченко Г.Н., 2001).
Трансплантаты подразделяют на: аутотрансплантаты, аллотрансплантаты, ксимплантаты, синтетические материалы и их комбинации. Биологическое воздействие между имплантированным костным трансплантатом и ложем рецепиента, в конечном счете, должно приводить к формированию новой кости и восстановлению механических свойств поврежденной кости (Берченко Г.Н., 2001).
В современной практике стоматолога-хирурга все больше внимания уделяется не только устранению патологического процесса, но и элементам пластической хирургии, направленной на восстановление целостности костной ткани (Александрова Л.А. и соавт., 2001).
По многочисленным сообщениям, хирургические методы с использованием остеопластических материалов являются наиболее эффективным способом лечения развившихся стадий пародонтита (Грудянов А.И.и соавт., 1997; Модина Т.Н., 1997, Невров А.Н. и соавт., 1997). В настоящее время имеется большое количество публикаций о применении синтетических композициоииых материалов при хирургическом лечении воспалительных заболеваний тканей пародонта. Исследователями использовались: порошок гидроксиапатита (ГА), Остим-ЮО, комплексы ГА с коллагеном (Гапкол, Колапол), комплекс коллагена с деминерализованной аллокостью (Коллаост), комплекс коллагена с формалинизированной аллокостью (Аллокостен) фирмы «Полистом» ( Грудянов А.И. и соавт., 1997); Комбиплант (Мирсаева Ф.З. и соавт. 1997), КоллапАн (Модина Т.Н., 1997; Невров А.Н. и соавт, 1997.)
КоллапАн» производится фирмой «Интермедапатит» (Москва). В основе материала - высокоочищенные гидроксиапатит (ГА) и коллаген, по структуре наиболее близкие к биологическим, а также антибиотики. Искусственный гидроксиапатит по химическому составу идентичен основной минеральной составляющей костной ткани - биологическому гидроксиапатиту (Иорданишвшш А.К. и соавт.,2002). Химическая формула гидроксиапатита Саю(Р04)б(0Н)2, а кристаллы его субмикронного размера (2*102 мкм) образуют в готовой форме препарата агломераты ~ 20мкм.
Коллаген — биополимер, способный оптимизировать рспаративные процессы в тканях и образовывать достаточно прочные комплексы с фармакологическими препаратами. В «КоллапАне» коллаген является активным носителем, протектором и пролонгатором действия антибиотиков. Берченко Г.Н. и соавт. (2001) рассматривают «КоллапАн» как систему доставки антибиотиков. При этом срок активного выделения антибиотиков по экспериментальным данным составляет 18-20 дней. По данным Берченко Г.Н. (2001) комплексный препарат «КоллапАн» является твердой и биосовместимой, постепенно лизируемой, матрицей, на поверхности которой в условиях инфицированных костных дефектов интрамембранным путем формируется новообразованная кость. В отличие от полиметилметакр штатных носителей антибиотиков, система «КоллапАн» отличается значительно более высокой биосовместимостью с окружающими тканями, более длительным периодом выведения антибиотиков в окружающую среду и биодеградацией материала, что исключает необходимость повторной операции по поводу удаления имплантата.
Исследования Берченко Г.Н. и соавт. (1999) показали, что имплантированный в условно асептические и инфицированные дефекты костной ткани «КоллапАн» постепенно разрушается с одновременным замещением новообразованной костью. На первых этапах происходит врастание в «КоллапАн» сосудистых элементов с последующим отложением остеоидного матрикса вокруг частиц ГА. Уже к 45-60 суткам можно видеть относительно выраженный слой остеоидного матрикса вокруг элементов ГА и немногочисленные остеобласты. Наблюдается интрамембранная оссификация, характеризующаяся образованием кости без стадии образования хряща, с постепенным формированием зрелой пластинчатой кости, в которой на ранних этапах после имплантации «КоллапАна» определяются остатки лизируемых частиц ГА. Разрушение частиц ГА не сопровождается увеличением содержания в костном дефекте числа макрофагов, гигантские многоядерные клетки инородных тел, а также остеокласты не обнаруживаются. Новообразованная кость в костных дефектах формируется лишь в участках имплантированного «КоллапАна» и непосредственно на поверхности его элементов. Между имплантированным материалом и новообразованной костью прослоек рыхлой соединительной ткани никогда не образуется. В длительно инфицированных ранах в участках имплантации «КоллапАна» процессы остеогенеза сочетаются с формированием элементов кроветворного костного мозга, тогда как проявления хронического воспаления отсутствуют.
Таким образом, по сообщениям Берченко Г.Н. и соавт. (1999) комплексный материал «КоллапАн» является твердой, постепенно резорбируемой матрицей, па поверхности которой в условиях условно асептических и инфицированных костных дефектов формируется новообразованная кость. Препарат «КоллапАн» обладает антимикробными, остеокондуктивными и остеоиндуктивными свойствами, то есть относится к биологически активным материалам. Входящие в состав «КоллапАна» коллаген и ГА способствуют ангиогенезу, миграции и прикреплению к их поверхности стромальных стволовых клеток костного мозга, их дифференцировке в остеобласты и последующему репаративному остеогенезу. Минерализация остеоидного матрикса происходит, по-видимому, как путем физико-химической репреципитации высвобождаемого из имплантированного материала кальция и фосфора, так за счет функциональной активности остеобластов.
Таким образом, биоактивная и биодеградируемая система доставки антибиотиков (препарат «КоллапАн») может с успехом применяться в хирургической практике с целью предупреждения развития и подавления инфекционного процесса, активизации репаративного остеогенеза.
Широкое применение «КоллапАн» нашел в ортопедии и травматологии для стимуляции остеогенеза при лечении хронического остеомиелита длинных костей (Уразгильдеев З.И. и соавт., 1999); при стабилизирующих операциях на шейном отделе позвоночника (Германов В.Г., 1999); при лечении несросшегося перелома длинных костей, осложненного инфекцией (Бушуев О.М., 2002). В челюстно-лицевой хирургии «КоллапАн» использовался для замещения костных дефектов, образующихся в ходе операций на челюстях после удаления обширных кист и новообразований челюстей, при хроническом деструктивном остеомиелите, после секвестрэктомии, после удаления эктопированных и дистопированных зубов, при многооскольчатых переломах нижней челюсти (Труханов Е.Ф. и соавт., 2002).
Кроме того, описано использование «КоллапАна» для хирургического лечения парадонтита средней и тяжелой степеней, а также раннего и быстропрогрессирующего пародонтита (Модина Т.Н., 1999; Труханов Е.Ф. и соавт., 2002).
Заключение диссертационного исследования на тему "Влияние биокомпозиционного препарата "КоллапАн", используемого в комплексном лечении пародонтита, на показатели смешанной слюны"
Выводы:
1. Исследованные разновидности препарата «КоллапАн» (содержащие линкомицин, метронидазол, диоксидин) являются удобными в применении, эффективными средствами в комплексном лечении пародонтита. Внесение гранул «КоллапАна» в операционную рану приводит к благополучному течению послеоперационного периода, быстрому заживлению операционной раны первичным натяжением (6-7 дней), восстановлению работоспособности пациента в короткие сроки (от 3 до 5 дней).
2. При индивидуальном подборе разновидности лекарственных средств, включенных в состав «КоллапАна», необходимо учитывать клиническую картину и продолжительность заболевания и биохимические показатели смешанной слюны.
3. Исследование в смешанной слюне ферментов и метаболитов в течение 24 часов после оперативного вмешательства показало изменения исследованных показателей уже через 3—6 часов после внесения препаратов «КоллапАна» в операционную рану, что указывает на воздействие антибактериального средства, вымываемого из препарата на метаболические процессы в полости рта.
4. Внесение «КоллапАна-JI» в операционную рану сопровождалось повышением активности ЛДГ в СС уже в первые сутки после операции. Через 1 месяц и в отдаленные сроки после вмешательства оставалась повышеной активность ЛДГ, ACT, АЛТ, КП и ЩП, что свидетельствует о сохранении предпосылок к обострению процесса.
5. Применение «КоллапАна-М» в хирургическом лечении пародонтита оказывает благоприятное воздействие на течение послеоперационного периода, о чем свидетльствует снижение активности ЩФ, ACT, АЛТ, ЛДГ, КП и ЩП в СС, сохраняющееся в течение года. Препарат in vitro подавляет рост P. melaninogenicum, F. nucleatum и может быть рекомендован для использования в комплексном лечении пародонтита
6. При сочетанном применении гранул «КоллапАна-Л+М», который in vitro подавляет рост S. aureus, Str. Sanguis, P. melaninogenicum, F. nucleatum наблюдается гладкое течение послеоперационного периода, снижение активности ЩФ, трансаминаз, протеиназ, при некотором повышении активности ЛДГ. В отдаленные сроки отсутствуют клинические признаки воспаления пародонта и биохимические показатели слюны приближаются к норме, что свидетельствует о стабилизации процесса.
7. Применение «КоллапАна-Д» в послеоперационный период характеризуется ярко выраженной местной токсической реакцией в виде значительного отека, гиперемии, болезненности, повышении температуры тела и достоверным снижением активности всех определяемых ферментов в СС во все сроки исследования. Диоксидин в составе «КоллапАна-Д» m vitro подавляет рост не только аэробов и анаэробов, но и Candida albicans.
8. Для объективной оценки эффективности применения и прогнозирования развития заболевания в отдаленные сроки, помимо клинико-рентгенологических методов, необходимо исследовать активность ЛДГ, ACT, ЩФ, КП в смешанной слюне сразу после лечения и в отдаленные сроки.
Практические рекомендации
1. Комплексное лечение пародонтита с применением биокомпозиционного препарата «КоллапАн» позволяет добиться снижения сроков нетрудоспособности, быстрого заживления раны первичным натяжением, длительной стабилизации процесса и, в ряде случаев, восстановления дефекта костной ткани. Благодаря воздействию антибактериальных компонентов «КоллапАна» на окружающие ткани больные не нуждаются в назначении антибиотиков в послеоперационном периоде.
2. Для объективной оценки эффективности действия препаратов в разные сроки после лечения следует определять в смешанной слюне активность лактатдегидрогеназы и трансаминаз.
3. Применение «КоллапАна-Л» приводит к резкому увеличению активности таких ферментов смешанной слюны, как ЛДГ и трансаминазы. Это увеличение активности сохраняется и в отдаленные сроки, поэтому несмотря на благополучный послеоперационный период в ближайшие сроки использование гранул только «КоллапАна-Л» при лоскутных операциях нежелательно, из-за сохранения риска обострений.
4. Согласно клиническим методам обследования и исследованиям активности ферментов и метаболитов в смешанной слюне применение «КоллапАна-М» в проведении лоскутных операций дает хорошие отдаленные результаты и, таким образом, обеспечивает благоприятный прогноз. «КоллапАн-М» рекомендуется для использования на хирургическом этапе комплексного лечения пародонтита средней степени.
5. Результаты клинических наблюдений, подтвержденные данными биохимических и микробиологических исследований, позволяют рекомендовать гранулы КоллапАна-Л+М», содержащие линкомицин и метранидазол для проведения оперативного лечения пародонтита средней и тяжелой степеней.
6. Использование «КоллапАна-Д», содержащего диоксидин, рекомендуется для лечения пародонтита тяжелой и средней степени, устойчивых к антибиотикам, с частыми рецидивами. Операции должны проводиться в 5-6 этапов, малыми фрагментами, включающими 3-4 зуба, а также для лечения тяжелых локализованных процессов.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Туманова, Александра Сергеевна
1. Балашов А.Н. Применение фтора в комплексном лечении заболеваний пародонта. -Москва.-1982.-11с.
2. Барабаш Р.Д., Левицкий А.П., Варава Г.Н., Коновец В.М. Активность ферментов смешанной слюны человека при пародонтозе.// Стоматология.-1976.-№4.-С.22-27.
3. Берченко Г.Н. Биотрансформация костных трансплантатов.// В сб. Биоимплантология на пороге XXI века: материалы Симпозиума по проблемам тканевых банков с международным участием.- М.-2001.-с.39-40.
4. Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта.//М «Медицина». -1991 -304с.
5. Вавилова Т.П. Ферментные системы жидкостей и тканей полости рта при пародонтите II Автореферат докт. дисс.- М.-1990.
6. Вавилова Т.П., Петрович Ю.А., Ларионова Н.И. Ингибиторы трипсиноподобных протеиназ слюны.// Вопросы медицинской химии.-1989.-№2-С.74-77.
7. Варес Э., Оншцук Ф. Пародонтоз. Морфогенетическое объяснение. Эффективное устранение воспалительных процессов.- Льв1в.-1999.-75с.
8. Веремеенко К.Н., Хоменко Л.А., Кизим А.И. Ферменты слюны и их исследование в клинике.//Лабораторное дело.-1976.-№7.-С.393-397.
9. Вольвач С.И./ История повторяется. Новые тенденции в познании великой тайны стоматологий// Новое в стоматологии 2002.-№8.-с.2-2.
10. Воложин В.А., Филатова Е.С., Петрович Ю.А., Ильин В.К., Фомина O.A. Оценка состояния пародонта по химическому составу сред полости рта.// Стоматология. -2000.-№ 1 .-С. 13 -16.
11. Зибаров A.C. Удаление зубного налета в профилактике заболеваний пародонта.// Стоматология.-1993.-№2.-С.22-23.
12. Иванюшко Т.П., Ганковская Л.В., Ковальчук Л.В., Тер-Асатуров Г.П., Кассин В.Ю. Буданова Е.В. Комплексное изучение механизмов развития хронического воспаления при пародонтите.// Стоматология- 2000.-№4.- с.13-16.
13. Иорданшпвили А.К., Гололобов В.Г., Басченко Ю.В., Сахарова Н.В. «Коллапан» современный оптимизатор репаративного остеогенеза. Амбулаторная хирургия. Стационарозамещающие технологии. №2(6), 2002. с. 6-8.
14. Каминский Л.С.// Статистическая обработка лабораторных и клинических данных. Применение статистики в научной и практической работе врача. М,-1964.
15. Каргальцева М.Н. Ротовая полость важный биотоп организма человека.// ж. Институт стоматологии.-М.-2001.-№1(10).-С. 18-21.
16. Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., Меньшиков В.В.// Биохимические исследования в клинике.-Элиста-1998.-250с.
17. Кузьмина Э.М. Профилактика: сегодня и завтра.// В кн. Избранные доклады и лекции по стоматологии. М.-2000.-С.56-64.
18. Кучумова Е.Д., Прохорова О.В., Ермаева С.С., Носова Е.Б. Опыт изучения содержания некоторых металлов в слюне больных пародонтитом.// ж. Пародонтология. -1997. -№2(4)-с. 13-14.
19. Левицкий А.П., Коновец В.М., Марченко А.И. Володкина В.В. Активность щелочной и кислой фосфатаз в слюне при пародонтозе.// Вопросы мед. химии.-1973.-т. 19.-В2, -С. 218-222.
20. Леонтьев В.К., Сунцов В.Г. Влияние суточных ритмов на амилолитическую и фосфатазную активность смешанной слюны в здоровой полости рта.// Вопр. пародонтологии.-1974.-№ 115 -С.63-66.
21. Леонтьев В.К., Сунцов В.Г.// Изучение слюны в стоматологии (методические рекомендации).-Omck.-1974.-16c.
22. Леонтьев В.К., Петрович Ю.А.// Биохимические методы исследования в клинической и экспериментальной патологии.-Омск.-1976.-93с.
23. Леонтьев В.К., Петрович Ю.А., Расулов М.М. Концепция патогенеза пародонтита при изменении локальной функциональной нагрузки.// В сб. научных трудов к 90-летию В.Ю. Курляндского. Актуальные вопросы стоматологии М. -1998-С. 120-122.
24. Jleyc П.А., Любко С.С. Эффективность профессиональной гигиены полости рта в профилактике болезней пародонта.// Клиническая стоматология-1997-№3.-С.70-72.
25. Малышкина Л.Т. Ферменты и ультраструктура наддесневого зубного камня.// Автореф канд. дисс. М. -1979.
26. Модина Т.Н., Баранникова И.А. Ближайшие и отдаленные результаты комплексного лечения быстро прогрессирующего пародонтита.// Стоматология.-1993.-№2.-С.23-29.
27. Модина Т.Н. Применение Коллапана в пародонтальной хирургии.// В сб. Применение биокомпозиционных материалов в челюстно-лицевой хирургии и стоматологии: материалы 1-й Всероссийской научной конференции.- М.-1997.-c.39.
28. Окушко В.Р., Подорец А.П. Функциональная резистентность зуба и ее нервная регуляция.// Патологическая физиология.- 1980.-№2.-С.61-66.
29. Окушко В.Р. Системная концепция пародонтита.// Новое в стоматологии. -2002.-№8.-с.14-19.
30. Олейник И.И., Робустова Т.Г. Состав микрофлоры гнойного очага при острых одонтогенных воспалительных процессах.// Стоматология. -М.-1986.-№3.-с.39-40.
31. Пахомов Г.Н./ О прошлом, настоящем и будущем стоматологии// Новое в стоматологии. 2002.- №6.- с.5-8.
32. Подорожная Р.П. Возрастные особенности биохимии смешанной слюны, обызвествленных тканей и транспорта в слюнных железах в условиях физиологии и стоматологической патологии. Автореф. дис. . Докт.- 1974.-45с.
33. Пузин М.Н., Петрович Ю.А., Трофимов В В./ Адаптационно-компенсаторные реакции эндокринной системы и пути их коррекции при генерализованном пародонтите// Методическое пособие для врачей-М.-2000.-11с.
34. Рузуддинов С. Влияние протезных материалов на активность ферментов смешанной слюны. — Автореф. дисс. канд. -М,-1974.-19с.
35. Румянцев В.А. Водородный показатель слюны, зубного и язычного налета: нарушение, регуляция^ клиническое значение: Автореф. дисс. .кацд. мед. наук,- Калинин.-1989.-22с.
36. Сухова Т.В./ Особенности свободнорадикального окисления, антиоксидантной защиты и состояния нервной системы у больных хроническим генерализованным пародо!ггитом// Автореф. Канд. дис.-М.-2000.
37. Улитовский С.Б. Индивидуальная гигиена полости рта в профилактике стоматологических заболеваний.// ж. Мир Медицины. С. -Петербург. -2001.-№3-4.-С. 14-15.
38. Цепов Л.М., Морозов В.Г., Николаев А.И., Петрова Е.В., Левченкова Н.С. Новые способы оценки состояния организма и пародонтального статуса у больных с патологией пародонта.// ж. Пародонтология.- С.-Петербург.-1997 -№2(4).с.3-6.
39. Шайдуллина Х.М. Активность лгоосомальных протеиназ в слюне, слизистой оболочке десен и зубном налете при различных состояниях пародонта// Автореф. Канд.дис.-М.-1984.
40. Широбокова В.Г., Леонтьев В.К. Сравнительная характеристика состава и свойств отдельных компонентов смешанной слюны.// Стоматология.-1975.-№3.-С.22-25.
41. Aquirre A., Zevine M.S., Cohen R.E., Tabak H.A. Immunochemical quantitation of a-amylase and secretory IgA in parotid saliva from people of various ages // Arch. Oral Biol.-1987. -001.32 №4.-p.297-301.
42. Asikainen S., Jousimies-Somer H.,Kanervo A., Saxen L. The immediate efficacy of adjunctive doxycycline in treatment of localized juvenile periodontitis. Archs Oral Biol, 1990, 35,231s-234s.
43. Балчева E., Тузлукова Л., Попов Пл/ Върку някои изменения на алкалната фосфатаза в слюнката при пародонтоза// Научни трудове на научноизследователския стоматологичен институт.-1959.-кн.6.-С. 17-21.
44. BanksP.A., Richmond S. Enamel sealants: a clinical evaluation on theie value during fixed appliance therapy. / Eur. J. Orthod.-1994.-vol. 16.-№1.-p. 19-25.
45. Begg P.R. Orthodontic Theory and Technigue, Philadelphia-London: W.B. Saunders Company, 1965.-228p.
46. Begg P.R., Kesling P.C. Begg Orthodontic theory and technigue.-Fhiladelphia.-W.B. Saunders Company.-1971/
47. Ben-Aryeh H., Fisher M., Szargel R., Zaufer D. / Composition of whole unstimulated saliva of healthy children: changes with age.//Arch. Oral Biol.-1990.-vol.35 №ll.-p.929-931.
48. BereS M., 6urovi£ E., Hugec P., Hugecova А. Методы, способствующие излечению пародонтита.// Новое в стоматологии 2002 - №8 - с. 45-51.
49. Brambilla Е., Toselli A., Pariset P., Strohmengerer L./ Test salivari е indici nella selezione dei gruppi a rischio di carie: revisione critica della letteratura.// Stomatol.- Mediterr.-1989.-voI.9.- №NI.-p.5-II.
50. Brudevold F., Tehrani A., Bakhos Y. Intraoral mineralization of abraded dental enamei // J.DentRes. -1982. -vol.65.-p.456-459.
51. Buchmann R./ Факторы риска в пародонтологии. Комплексная терапия заболеваний пародонта у пациентов, входящих в группу риска// Новое в стоматологии. — 2002.-№8- с. 10-13.
52. Carey С.М., Vogel G.L., Chow L.C. Permselectivity of sound and carious human dental enamel as measured by membrane potential. // J. Dental Res.-1991.-vol.70.-№ 12.-p.1479-1481.
53. Ciancio S.G., Mather M.L., McMullen M.L.; An evaluation of minocycline in patients with periodontal disease. J. Periodontol, 1980, 51, p. 530-534.
54. Ciancio S.G., Genco R.J. The use of antibiotics in periodontal diseases. Int. J Periodont Res Dent., 1983, 3, p. 55-69.
55. Corinish C. J., Rosen S. / Human salivary alkaline phosphatase // Clin. Chim. Acta, -1968.-vol.20.-p.387-391.
56. Cruz It, Ng'ang'a P.M, Ogaard В., Valderhaud S. / Seaud. S. Dent Res.-1993. -vol.101.-:№l-p.5-8.
57. Dahlen G., Wennstrdm J.L., Grtindahl K., Heijil I. Microbiological observations at periodic sybgingival antimicrobial irrigation of periodontal pockets. J Dent Res, 1989, 68,1714-1715.
58. Dzink J.L., Tanner ACR., Haffajee A.D., Socransky S.S. Gram negative speciec associated with active destructive periodontal lesions. J. Clin Periodontol, 1985, 12, p. 648-659.
59. Dzinc J.L., Socransky S.S., Haffajee A.D. The predominant cultivable microbiota of active and inactive lesions of destructive periodontal diseases. J. Clin Periodontol, 1988,15, p. 316-323.
60. Egerberg J. Диета и питание в профилактике болезней пародонта (БПу/Квинтессенция. -199L-t.1.- №5/6.-с.397-409.
61. Fincham A.G., Moradian-Oldak J., Dickwisch Т.G., Zyaun D.M., Wright J.T., Bringas PJr. et aL Evidence of amelogenin «nano spheres» as functional components of secretory -stage //J.Struct.Biol. -1995. -vol.H5.-p.50-59.
62. Fox Ph.C. Salivary monitoring in oral diseases//Saliva as a diagnostic Fluid -New York. -1993. -p.234-237.
63. Frochlich D.A., Pangborn R.M. Induction of human-parotid salivary Alpha-amylase secretion by oral-stimulation // Chem.Senses. -1986. -vol.11.- №4.-p.602-602.
64. George L. Postoperative pseudomembranous enterocolitis In; Wilson S. et al. (ed) Intraabdominal infection McGraw-Hill Book Co., New York, 1982, p. 282.
65. Goodson JM^ Offenbacher S., Farr D.H., Hogan P.E. Periodontal disease treatment by local drug delivery. J Periodontal, 1985, 56, p. 265-272.
66. Goodson J.M. Pharmacokinetic principles controlling efficacy of oral therapy. J. Dent Res, 1989,68. 1625-1632.
67. Gordon J.M., Walker C.B., Goodson J.M., Socransky S.S.: Sensitive assay for measuring tetracycline levels in gingival crevice fluid. Antimicrobial Agents and and Chemotherapy. 1980. 17.193-198.
68. Gordon J.M., Walker C.B., Murphy J.C., Goodson JJVt, Socransky S.S„ Tetracycline: Levels achievable in gingival crevice fluid and in vitro effect on subgingival organisms. J. Periodontol. 1982; 52, p. 609-616.
69. Gordon J.M., Waiker C.B., Hovliaras C., Socransky S.S. Efficacy of clindamycin hydrochloride in refractory periodontitis; 24-month results. J Periodontol, 1990, 61, p. 686-691.
70. Gusberti F.A., Syed S.A., Lang N.P. The combined antibiotic (metronidazole) and mechanical treatment effects on the subgingival bacterial flora of sites with recurrent periodontal disease. J. Clin Periodontol, 1988, 15, p. 353-359.
71. Haffajee A.D., Socransky S.S., Ebersole J.L., Smith D.J. Clinical, microbiological and immunological features associated with the treatment of active periodontosis lesions. J. Clin Periodontol, 1984,11, p. 600-818.
72. Haffajee A.D., Socransky S.S., Smith D.J., Dibart S. Relation of baseline microbial parameters to future periodontal attachment loss. J. Clin Periodontol 1991, 18, p; 744-750.
73. Hartmann F., Jeromin R., De Lacoby L.F. Untersuching über den parodontalen, den zustand jugendllicher Trages fessitzender kieferorthopadisches Ger ate (klinishe Studic)//Dtsch zahn arztl. Z.- 1982.- №7.-p.585-589.
74. Higashi K., Seike M., Mitani Y., Morisaki K., Hayashi S., Kitamura M.< Fujimoto N., Kimura S., Ebisu S., Okada H. Concentration of ofloxacin in human gingival crevicular fluid after oral administration of Tarivid. J Periodontal, 1989, 24, p. 409411.
75. Hope R.M., Mayo 0. / Ralationship of human salivary AP with ABO blood group and secretor status // Austr. J. Exp. Biol. Med. Sci.-1969.-vol.47.-p.235-242.
76. Hu C.C., Fukae M., Uchida T., Qian Q, Zhang GH., Ryu O.H. et al. Sheathlin: cloning, c DNA /polypeptides sequences, and immunolocalization of porcine enamel sheath proteins //J. Dent Res. -1997.-vol.76.-p.648-657.
77. Ikemoto S., Tsuchuda S., Hinohara H., Nishimi E. et al. Further evidence for phenotype and gene frequencies of nine salivary polymorphisms in Japanese population//Forensic Sei. Int -1987.-vol.35.-p.l 19-123.
78. Imamura T., Potempa J., Pike R.j The role of bacterid proteinases in the development of periodontal disease// J. cell Biochem suppl.,18B.-1994-p. 128-128.
79. Ito K.,Okada Y., Ishida K., Minamiura N./Human salivary endo-beta-N-acetilglucosaminidase HS specific for comlex type sugar chains of glucoproteins // J. Biol. Chem.-l 993.-vol .268.- №21 .-p.16074-16081.
80. Jenzano J.W., Brown C.K., Mauriello S.M. Temporal variations of glandular Kalli Krein protein and amylase in mixed human saliva//Arch. Oral Biol.-1987.-vol.32.-№10.-p.757-769.
81. Kam R.C., Schulkin J.D., Merritt A.D., Newell R.C./Evidence for post-translational modification of human salivary amylase (amyl) isozymes // Biochem. Genet. -1973. -vol. 10.-p.341-350.
82. Kauffman D.L., Lager N.I., Cohen E., Keller P.J./The isozymes of human parotide amylase //Arch. Biochem. Biophys. -1970. -vol.137.-p.325-329.
83. Keller RJ., Kauffinan D.L., Allan BJ., Williams B.L. Further studies on the structural differences between the isozimes of human parotide a-amylase // Biochem. -1971. -vol.l0.-p.4867-4874.
84. Kornman K.S. Controlled release local delivery antimicrobials in periodontics. Prospects for the fixture. J. Periodontal., 64,1993, p.782-791.
85. Kulkarni G.V., Lee W.K., Aitken S, Birek P, McClloch С.Л. A randomized, placebo-controlled trial of doxycycline : Effect on the microflora of recurrent periodontitis lesions in high risk patients. J. Periodontal, 1991,62. p. 197-202.
86. Kuroiwa M., Kodaka Т., Kuroiwa M., Abe M. /Acid resistance of human enamel by brushing with and without abrasive detifrice // J. Biol. Buccale.-1992.-vol.-20.-№3.-p.l75-180.
87. Lange D.E. Прогноз при лечении заболеваний пародонта // Квинтэссенция. -1991 .-т. 1.- М5/6.-С.411-415.
88. Larsen M.G., Fejerski О. Chemical and structural challenges in remineralization of dental enamel lesions // Scand. J. Dent. Res. -1989.-voL97.-p.285-296.
89. Larsen M.G., Jensen S.J. The hydroxyapatite solubility product of human dental enamel as a function of pH in the range 4,6-7,6 at 20 degrees С // Arch. Oral. Biol. -1989. -vol.34.- №12.-P.957-961.
90. Larsen T. In vitro release of doxycycline from bioabsorbable materials and acrylic strips. J Periodontal, 1990, 61, p. 30-34.
91. Levine M.J. Salivary macromolecules: a structure function synopsis. Saliva as a diagnostic fluid // New York. -1993. -p.l 1-16.
92. Listgarten M.A., Lindhe J., Hellden L. Effect of tetracycline and/or scaling on human periodontal disease. Clinical microbiological and histopathological observations. J. Clin Periodontal 1978,5, p.246-271.
93. Loesche W.J., Giordano J., Soehren S., Hutchinson R., Rau C.F., Walsh L., Schork A., Arbor A., Mich D. Nonsurgical treatment of patients with periodontal disease. Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Endod. 81,1996, p. 533-543.
94. Maglis G. Verdugo H. Wiesher C., Cavajal E., Rossi E. Determinación de pH salival en portadores de enfermedad periodontal y grupo control // Rev. Dent. Chile, -1989.-vol.-80.- №2.-p.70-72.
95. Manson J. Eley B. The prevention of periodontal disease // Dental Update.-1989.-p. 189-195.
96. Makinen K.K. Studies of oral enzymes IV fractionation and characterization of various hydrolytic enzymes in human saliva // Acta odont. Scand. -1966.-vol.24.-p.709-721.
97. McLeod A.D., Tolentino L., Tozer T.N. Glucocorticoid-dextan conjugates as potential prodrugs for colon-specific delivery: steady-state pharmacokinetics in the rat. Biopharm. Drug Disposition, 15, 1994, p. 151-161.
98. HI. Michel H./ О проблемах определения риска возникновения пародонгита.Факторы риска, критерии оценки и необходимость привлечения специалистов в других областях медицины.// Новое в стоматологии,- 2002.-№8.-с. 6-9.
99. Minabe M., Takeuchi K., Nishimura Т., Hori Т., Umemoto T. Therapeutic effects of combined treatment using immobilized collagen film and root planning in periodontal furcation pockets. J Clin Periodontol, 1991,18,287-290.
100. Milller H-P., Lange D.E., MüUer R.F. Short-term effects of comprehensive therapy on Actinobacullus actinomycetemcomitans (Aa)-associated periodontitis. J. Dent Res., 1991, 70:770, Abstr.244.
101. Nagamine Y., Omichi K., Ikenaka T. A comparison of the modes of actions of human salivary and pancreatic a-amylases on modified maltoligosaccharides // S. Biochem. -1988. -vol.104.- №4.-p.667-670.
102. Navazesh M. Methods for collecting saliva. Saliva as a diagnostic fluid // New York. -1993. -p.72-77.
103. Needleman L.G. Controlled drug release in periodontics. A review of new therapies. Br. Dent. J., 170,1991, p.405-408.
104. Neurath H./ Proteolytic enzymes past and present the second colden EPA// Y. cell. Biochem. Suppl, 18B.- 1994- p. 128-128.
105. Newbrun E. Current regulation and recommendation concerning water fluoridation, fluoride supplements, and topical fluoride agents // J. Dent. Res.-1992. -vol.71.-№5.-p. 1255-1265.
106. Nishide E., Emi M., Nakumura Y., Matsubara K. Corrected sequences of DNAs for human salivary and pancreatic a-amylases // Gene, -1986.-vol.50.-p.371-372.
107. Pieper K., Huttmann G., Evers W., Gehring F. Ein bedarfsorientiertes profhylaxeprogramm fur Grundschuler // Dtsch-Zahnarztl-Z. -1989. -vol.44.- №2 -p. 130-132.
108. Puchalsky C.S., Greenway D., Grossi S., Lyon-Bottonfield E., Huber L., Christersson L.A. Topical application of tetracycline- HCI in humun periodontitis. J. Dent Res., 1988,67.208, Abstr.766.
109. Purucker Peter Микробиология пародонгита. Антибактериальная терапия пародонтита.// Квинтэссенция.- М.- 1993. с. 14-23.
110. Radlanski R.J., Jager A., Schwestka R.,Bertzbach F. Plaque accumulations caused by interdental stripping // Amer. J. Orthod. -1988.-vol.94.-p.416-420.
111. Radlanski R. Morphology of interdentally stripped enamel one year after treatment. //J. clin. Othod. -1989. -vol.23.-p.748-750.
112. Saxen L., Asikainen S., Kanervo A., Kari K., Jousimines-Somer H. The long-term efficacy of systemic doxycycline medication in the treatment of localized juvenile periodontitis. Archs Oral Biol., 1990, 35,227s-229s.
113. Saxer UJ\ Medikamente: Bestandteil der Parodontitistherapie? Schweiz Monatsschr Zahnheilk., 1987,97, p. 87-95.
114. Scannapieco F.A., Bhandary K., Ramasuublu N., Levine M.J. Structural relationship between the enzymatic and streptococcal binding sites of human salivary alpha-amylase. // Biochem. Biophys. Res. CommuiL -1990.-vol.-173.-№3.-p. 1109-1115.
115. Scannapieco F.A., Torres G., Levine M.J. Salivary alpha-amylase: role in dental plaque and caries formation. // Crit. Rew. Oral BioL Med.-1993.-voL-4(3-4).-p.301-307.
116. Schwach-Abdellaoui, Vivien-Castioni N., Gurny R. Local delivery of antimicrobial agents for the treatment of periodontal diseases. J of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 50, 2000, p. 83-99.
117. Slots J, Emerich LJ., Genco RJ.,Rosling B.G. Relationship between subgingival bacteria and periodontal pocket depth and gain or loss of attachment after treatment of adult periodontitis. J. Clin Periodontal, 1985,12, p. 540-552.
118. Slots J., Bragd L., WikstrOm M., Dahlen G. The occurrence of Actinobacillus actinomycetemcomitans, Bacteroides gingivalis and Bacteroides intermedius in destructive periodontal disease in adult. J. Clin Periodontal, 1986, 13, p. 570-577.
119. Slots J., Ramas T.E., Listgarten M.A. Yeasts, enteric rods and preudomonads in the subgingival flora of severe adalt periodontitis. Oral Microbiol ImmunoL, 1988, 3, p. 47-52.
120. Slots J., Rams TE: Antibiotics in periodontal therapy: advantages and disadvantage. J. Clin Periodontal. 1990.17, p.479-493.
121. Soderling E., Pienikkinen K., Alanen M.L., Hietaoja M. et al. Salivary flow rate, buffer effect, sodium and amylase in adolescents: a longitudinal study.// Scand. J. Dent. Res.-1993. -vol.l01.-№2.-p.98-102.
122. Soyman M., Stack M.V. Effects of fluoride and/or trace elements on enamel solubility. //Proc. Finn. Dent. -Soc.-1989/-vol.85№3. -p. 167-175.
123. Sreenby L.M. et.al. Слюна: Ее значение для сохранения здоровья и роль при заболеваниях- Int. Dental.J. -1992. -vol.42.-p.291-304.(перевод с английского).
124. Strake М./ Пародонтология 2000. часть IV.- Деструкция тканей пародонта// Новое в стоматологии 2002 - №8 - с. 20-28.
125. Strake М./ Пародонтология 2000. часть IV.- Пародонтит и остеопороз// Новое в стоматологии 2002 - №8 - с. 29-31.
126. Steinberg D., Friedman М., Soskolne A., Sela MN. A new degradable controlled release device for treatment of periodontal disease. In vitro release study. J Periodontol, 61,1990, p. 393-398.
127. Stockfisch H. Rationalle kieferorthopadie. // Berlin: Quintessenz Verlg.-1985.
128. Tanner A., Bouldin H.D., Miden MFJ. Newly delineated periodontal pathogens with special reference to Selenomonas species. Infection 1989,17, p. 182-187.
129. Tricoli J. V., Shows T.B. Regional assignment of human amylase (amy) to p22-p21 of chromosome 1. //Som. cell. mol. genet.-1984.-vol. 10.-p.205-210.
130. Van Winkel E.G., de Graaff J. Metronidazole plus amoxycicllin in the treatment of Actionobacillus actinomycetemocomitans associated periodontitis. J. Clin Periodontol, 1989,16, p. 128-131.
131. Walker C.B., Gordon J.M The effect of clindamycin on the microbiota associated with refractory periodontitis. J Periodontol, 1990, 61, p. 692-698.
132. White L.W. Keep'em Flying // Clinical Impressions. -1996. -voL5. -№4.-p. 15-24.
133. White S.N., Zuo W., Paine M.L., Fong H., Sarikaya M., Snead M.L. Biological organization of hudroxyapatite crystallites into a Fibrous Continuum Toughens andcontrols anisotropy in human enamel. II J. Dent Res. -2001.-vol.80.-№l.-p.3zi-326.
134. Zambon J.J., Christersson I.A., Genco R.J. Diagnosis and treatment of localized juvenile periodontitis. JADA, 1986, 113, p. 295-299.