Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Варианты реакции иммунной системы детей на острые респираторно-вирусные инфекции

рго

13

о л

ПИВ

На правах рукописи

Железншсова Галина Федоропиа

ВАРИАНТЫ РЕАКЦИИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ДЕТЕЙ НА ОСТРЫЕ РЕСПИРАТОРНО-ВИРУСНЫВ ИНФЕКЦИИ

14.00.36 - аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Санкт-Петербург 4996

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте детских инфекций Министерства здравоохранения РФ

Научный консультант: академик РАМН, профессор Б.Ф.Ссменов

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наух П.Г.Назаров

доктор медицинских наук В.С.Смирнов

доктор медицинских наук, профессор В.М.Шубик

Ведущее учреждение:

Научно-исследовательский инеппут гриппа РАМН

Защита состоится 1997 г. в 43" часов

на заседании диссертационного совета Д.001.23.02 по защите диссертаций, представленных на соискание ученой степени доктора наук при Научно-исследовательском институте экспериментальной медицины РАМН (197376, Санкт-Петербург, ул. акад. И.П.Павлова, 12)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИ ЭМ РАМН.

А ытореферат разосла н " 1996 г.

Ученый секрегарь диссертационного совета, докгор медшишекгъч тук

Д.А .Бурова

Актуальное!ь проблемы. Несмотря на значительные доо иженин последних лег » облаеж фундаментальной иммунологии, многие стороны иммунопатогенеза инфекционной) процесса остакнся нераскрытыми. И настоящее премн происходит переоценка биологического смысла взаимодействия инфекционного агента с микроорганизмом через его иммунную систему: иммунный отпет (ПО) направлен не на полную элиминацию ни руса из организма, а на ограничение его репликации и сохранение в безвредной для организма форме/Сохин A.A., 1988, Позлее» O.K., Рахматуллин И.М., 1989, Зуев В.А., 1994/.

В связи с этим требует переосмысления феномен "вирусинлуци-рованной" нммуиосупресснн как необходимый компонент ИО, ведущий к оптимизации взаимодействия микро- н макроорганизма /Фон-талин Л.Н., 1986/. Давно установлено, что неспецнфическая иммуио-супрессия (НИС), развивающаяся при многих вирусных (и невирусных) инфекциях,не препятствует формированию специфического ИО /Семенов Б.Ф. и соавт, 1982, Семенов Б.Ф., Варгин В.В., 1989/.

В свете современной концепции о гетерогенности популяции Т-хслперов (Тх) /Mossmah et at., 1986/ становится ясным, что проявления нммуйосупрессин органически присуши самому процессу иммуногенеза как результат взаимной негативной регуляции альтер нативныч клонов tx - 1-го И 2-го типа, контролирующих, соответственно, клеточные и гуморальные формы ИО. При этом супрессия может быть неспецифичной в отношении индуцирующего ИО антигена (АГ) из-за вовлечений й процесс некоммитированны* иммуно-компетеитНЫх клеток (ИКК).

Однако механизмы развития НИС многообразны; а патогенетическая роль ее конкретных проявлений требует уточнения, что делает актуальным Изучение этого феномена в рамках Исследования имму-нопатогенеза инфекционных заболеваний человека.

Хорошо известно сйоеОбразйе иммунных реакций организма в . раннем ностнатальмом онтогенезе, связанное с Незрелостью функций самих ИКК и регуяяторных механизмов ИО /Михайлова З.М., 1986, Вельтишев Ю.Е., 1990, Воронцов И.М., 1990/. Несовершенство механизмов протйвоинфекционной защиты является основной причиной тяжелого течения острых инфекций у детей, как и повышенной их. заболеваемости при инфицировании такими распространенными в природе агентами, как респираторные вирусы (РВ). В связи с лег-

коетью формирования у детей вторичных иммунодефнцитов вследствие перенесенных инфекционных заболеваний. именно в клинике детских инфекции особый ni порее приобретает изучение патогенетических механизмов 111 1С.

В методологическим отношении назрела необходимость иммунологического исследования, построенного по патогенетическому принципу с оценкой способности ИКК к активации. пролиферации, продукции цнтокинои н дифференцнроике /Ковальчук J1.В., Чередеев Л.П.. 1990, 1995/.

Для-Hinсгралыюй оценки реактивности ИКК н клинической иммунологии давно и с успехом применяется реакция бласпранс-формации лимфоцитом на фнтогемаплюгппнн (ФГА-РЬТЛ) /ЗареЦкая Ю.М.. 1983, Лесннцкнй Л.1!.. 1985. Гергсрт В.Я. и соавт.. 1995. Ляшен-ко В.Д.. 1996/. Высокая информативной ь ною теста, по-видимому, обусловлена тем. что в реакции.участвуют все коо иерируюШие в ПО популяции ИКК- макрофаги. Т- и П-лимфоцц:ы /Bloemeiia et al.. 1990/, а величина ФГЛ-РЫ Л коррелируе! со dio собност ью Т-лимфоцитов продуцирован, важнейший фактор регуляции их пролиферации и днфференцнровки - ИЛ-2 /Powrie. Mason. 1988/.

Одним из су mee i ценных проявлений II MC, сопровождающей вирусные инфекции (НИ), считают снижение реактивности ИКК п'ФГА-PBTJÍ /Ссменой Г>.Ф„ Варгин В.В.. 1989/.

Исходя из этих предпосылок Мы приняли лот тес i как базисный при изучении Иммунного статуса Переносящих OPÜ11 Детей.

В последние десятилетия постепенно развивается направление исследований, посвященное выявлению типов реакции иммунной системы человека на йозденствня in vivo или in vitro инфекционной и иейнфекцнонной природы /Иоффе 13.11.. 11оаниесян-'$веркоиа Б.П.. 1979, Кульберт А.Я.. (ар.чанова H.A.. 1984, L-ршов Ф.П.. Гоювцева Е.П.: 1986, Васильев II.В. и соавт., 1989, Калашникова H.A. и соавт., 1989, Стефани Д.В. и соавт., 1993/. Не вызывает сомнений актуальность подобного подхода при изучении нммуноиатогенеза конкретных инфекционных заболеваний у детей.

Цель исследования: выявить закономерные взаимосвязи между реактивностью ИКК в ФГА-Pül Л й уровнем продукции важнейших гуморальных факторов иммунной защиты и иммунорегуляции у детей разного возраста, переносящих ОРВИ.

Задячи шгокдрэяния;

1. Охарактеризовать вариант модуляции реактивности ИКК в ФГА-РБТЛ у детей двух возрастных категорий (первого года жизни и от I г до 7 л) в динамике болезни. Сопоставил» реактивность ИКК в двух функциональных тестах - ФГА-РБТЛ и антителозависимой цитотоксичносги лимфоцитов (АЗЦЛ).

2. Установить связь вариантов динамики ФГА-РБТЛ со специфическим антитепообразованием (АО) и клиническими проявлениями болезни.

3. Охарактеризоватьгуморалъный профиль каждого из выявленных вариантов (типов) ИО по уровню продукции иммуноглобулинов (ИГ) М, в, А н.Е, субклассов IgG, содержанию в хрови ЦИК и СЗ компонента комплемента.

4. Произвести сравнение уровня продукции важнейших цитоки-Нов - ннтерферонов (ИФ-а и у), интерлейкина-Г (ИЛ-1р), фактора Некроза опухолей (ФНО-а) при разных типах ИО.

5. Оц?нить информативность титра Р-бетсов как кригерия выраженного* острофазовой реакции иммунной системы при ОРВИ у детей.

6. Сравнить выраженность прессовой реакции при разных типах ИО по уровню секреции кортизола, пролактина и гормона роста. Оценить чувствительность ИКК к антипролиферативному действию ГК (преднизолона и дексаметаэона) при разных типах ИО.

7. Произвести анализ частоты встречаемости каждого из типов ИО у детей разного возраста.

8. Установить факторы, участвующие в формировании типов ИО.

Научная новизна работы. Впервые на основе различий динамики

модуляции реактивности ИКК в ФГА-РБТЛ при ОРВИ выявлены 4 варианта НО, принципиально сходные у детей первого года жизни и детей а возрасте от I г до 7 д. Установлена воспроизводимость феномена в каждой партии обследованных детей. Выявлены особенности специфического АО» присущие каждому из типов реагирования, что дало основание условно обозначить их как "типы ИО".

Обнаружены различия между тинами ИО по уровню продукции ИГ, СЗ, всех изученных цйтокиНов, кортизола, содержанию в крови ЦИК и Р-белков.

Составлен иммунологический "портрет" каждого из типов по всей совокупности Изученных параметров^

Установлена взаимосвязь между типами ИО и клиническиын проявлениями ОРВИ, обнаружены возрастные изменения этой взаимосвязи и частоты встречаемости отдельных типов ИО.

Выявлены возрастные, генетические (НЬА-фенотнп) и этио-«отческне факторы, шжяюшне на формирование типа ИО.

На основании полученных данных предложена гипотеза, объясняющая феномен 4-х типов ИО как проявление нарастающей ннтен-сннносп« реакции иммунной системы на внедрение РВ в условиях исходно неодинакового уровня резистентности к возбудителю инфекции. В рамках общей гипотезы предложена также расшифровка превалирующих механизмов ИО (клеточного шш гуморального) при разных его типах в острую фазу ОРВИ м в фазу выздоровления.

Теоретическая н Практическая. значимость, Материалы исследования, демонстрирующие неоднородность ИО при ОРВИ у детей, вносят определенный вклад в современное направление фундаментальной иммунологии, изучающее альтернативные пути Т-клеточной рнуляцни ИО. Оценка типов реакции иммунной системы на внедрение возбудителя инфекции, в значительной мере определяющих клинические проявления болезни, имеет несомненное теоретическое и Практическое значение.

Полученные результаты могут служить научным обоснованием необходимости нового подхода к лечению и иммунокоррекциМ переносящих острые инфекции дггей, дифференцированного в зависимости от типа реакций иммунной системы. В практическом отношении особенно важна диагностика Ш и IV типов ИО, сопряженных с развитием НИС 8 фазу клинического выздоровления. Замедленное восстановление иммунного гомеостаза у этих детей диктует необходимость назначения курса нммунореабнлнтацни с целью префнлактйкн повторных заболеваний в постиифекционном периоде.

Возможность выявления типов ИО у дггей с помощью широко применяемого функционального теста - ФГА-РБТЛ - убеждает в его высокой и до сих пор недостаточно оцененной иммунологической информативности. Полученные результат!.! позволяют нам рекомендовать этот тест в качестве методической основы при определении типов иммунореактивности детей и взрослых, переносящих острые инфекции. Данные исследования в целом подтверждают актуальность и информативность патогенетического подхода к оценке иммунного

статуса и всех использованных в исследовании показателей, характеризующих функциональную активность основных популяций ИКК: моноцитов-макрофагов, Т- и В-лимфоцитов.

Основные положения, выносимые на зашит/.

!. Модуляция неспецифической реактивности ИКК крови у детей, переносящих ОРВИ, развивается неодинаково и представлена следующими вариантами, различающимися наличием или отсутствием супрессии ФГА-РБТЛ в острую фазу болезни или в фазу реконва-лесценцин: I - высокая реактивность ИКК в обе фазы; II - угнетение ФГА-РБТЛ в острую фазу и нормализация к выздоровлению; III -высокая реактивность ИКК в острую фазу, но угнетение се в периоде выздоровления; IV - низкая реактивность ИКК в обе фазы болезни.

2. С выявленными вариантами динамики ФГА-РБТЛ ассоции- . рованы определенные особенности специфического АО, что дает основание обозначить их как "типы ИО": I тип - средний по интенсивности АО; II тип - ранний (к вирусу хрипла А) и высокий АО; III тип - низкий иии замедленный АО; IV тип - Низкий или средний АО к РВ у детей до I г, но интенсивный АО у детей старше 1 г.

3. Типы ИО различаются между собой по уровню продукции изученных цитокинов (ИФ-а и у, ФНО-а, ИЛ-1 ß), ИГ четырех классов, некоторых субклассов IgO (IgGl, IgG2, IgO 4), СЗ компонента комплемента.

4. Типы ИО представляют собой разные по интенсивности реакции иммунной системы на внедрение возбудителя ОРВИ, о чем свидетельствует увеличение секреции монокинов (ФНО-а и ШП-ß) и продукции IgM в острую фазу болезни (у детей старше 1 г), а также рост уровня ЦИК от I к IV типу. В этом же порядке возрастает выраженность нейроэндокринной прессовой реакции, что иллюстрирует увеличение секреции xoptmema от I к III-IV типам в острую фазу ОРВИ. С данной трактовкой согласуется снижение числа неоейожненных О РВИ от 1 к IV типу НО, отчетливо регистрируемое у Детей старше 1 г.

5. Комплексные иммунологические характеристики каждого из 4 типов ИО позволяли- предположить, что в их основе Лежат различий структуры ИО йотношении превалирования кгкточно-опосредованных или гуморальных механизмов защиты, Контролируемых, соответственно, Тх 1- или Тх2 - подобными клонами активированных Т-лнмфоцнггов.

6. В формировании типов ИО участвуют возрастные и генетические (НЬЛ - фенотип) факторы, то:да как этнология. ОРВИ имеет ограниченное значение.

Реализация результатов. По результатам исследования оформлены две заявки на изобретение: "Способ прогнозирования заболеваемости ОРВИ детей первого года жизнИ" № 5065439 от 01.07.92 г. (принято решение о выдаче патента) и "Способ определения типа нммуно-реакгипности у детей младшего возраста" № 93040848 от 11.08.93 г. (принято решение о выдаче патента). Составлены два информационных письма: "Критерии оценки данных иммунологического обследования детей при остром инфекционном процессе", С.-Петербург, 1993 и "Методические подходы к оценке иммунного статуса детей с целью прогноза течения и исхода острых инфекций". С.-Петербург, 1994, утверждены директором НИ ИДИ. Оформлены методические рекомендации "Методы определения нммунореактнпности детского организма", С.-Петербург, 1993, утверждены МЗ РФ.

Материалы исследования используются при иммунологическом обследовании детей в клиниках ПИИ детских инфекций, а также клинике ОРЗ у детей НИИ гриппа РАМН, С.-Петербург. Результаты работы используются при обучении ординаторов на базе НИИ детских инфекций.

Апробация работы. Основные' положения работы доложены на научно-практических конференциях НИИДИ в 1989, 1990, ¡991, 1992, 1993 н 1994 п ., на заседаниях ВНО инфекционистов в 1990, 1991 н 1993 гг., ВНО иммунологов в 1990 и 1996 гг.. на I Всесоюзном съезде иммунологов в 1989 г и 1 съезде иммунологов России в 1992 г, на Всероссийском съезде врачей-инфекционистов в г.Суздале, 1992 г, на снмп. с м/н участием "Нейронммунологня на пороге XXI века", С.-Петербург, 1993 г и на IV м/н конференции "Нейроиммунология, нейроинфекцни, нейронмидж", С .-Петербург, 1995 г, на респ. научно-практической конференции "Микст-инфекции", С.-Петербург, 1994 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 26 работ, из них 12 в центральной печати.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 239 страницах л состоит из введения, обзора литературы, 7 глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и практических рекомендаций. Список лшературы включает 200 отечественных и 182

зарубежных источников. Текст иллюстрирован 33 таблицами и 7 рисунками.

Работ выполнена в группе клинической иммуиолоши лаборатории функциональных методов диагностики Н1Ш детских инфекции в рамках тем НИР республиканской целевой программы "Иммунология, иммунопатология детского возраста" раздел IV по проблеме "Детские инфекций", "Иммунопатология, иммунопрофилактика, иммунотерапия" за 1985-1995 гг.

Материалы и методы исследования. Обследовано 449 детей, находящихся на лечении в стационаре НИИДИ с диагнозом ОРВИ, из них 239 в возрасте до 1 г и 210 - от ) г до 7 лет. Взятие крови производили дважды: при поступлении (острая фаза, 2-6-й день болезни) и перед выпиской (фаза выздоровления, 9- 14-й день болезни).

Контрольную группу составили 75 практически здоровых детей из детских домов г.Санкт-Петербурга или поступивших в клинику НИИДИ для проведения спсцпрофилактики (до прививки).

Неспецифическую реактивность ИКК крови оценивали в двух тестах: ФГА-РБТЛ и АЗЦЛ. РБТЛ ставили в культурах цельной крови с использованием радиометрического или морфологического метода учета результатов /Назаров П.Г., Пуринь В.И., 1975, Новиков Д.К., Новикова В.И., 1979/. Основным митогеном был ФГА (М) фирмы "Sigma" (США) в Дозе 5-10 мкг/мл. Супрессию пролиферативного ответа ИКК констатировали при величине индекса стимуляции (ИС) ниже 60 или числа бластных форм менее 60% (наименьшие значения РБТЛ на ФГА у здоровых детей). В части опытов параллельно с ФГА использовали антилимфоцитарный глобулин (АЛО производства Белорусского НИИВС (Минск), цельный или разведенный 1:5. АЗЦЛ определяли модифицированным нами микроскопическим методом, основанном на подсчете в камере Горяева оставшихся неповрежденными после 4-х часовой инкубации с мононуклеарами, лишенными прилипающих клеток, эритроцитов кур, сенсибилизированных субаг-глютинйрующИми дозами антисыворотки. ИГ и концентрацию СЗ определяли методом радиальной иммунодиффузин по Мгнчини, уровень общего IgE - в твердофазном иммуноферментном анализе (ИФА) с использованием тест-наборов Ставропольского НПО "Аллерген". ЦИК исследовали методом осаждения 3,5% раствором полиэтиленглюколя 6000.

Антитела (ЛТ) прошк РВ (гриппа А и В. парагриппа, респи-раторно-синци шального, аденовирусов, вируса lepneca простого и мнкопяазмы пневмонии) определяли в вирусологической лаборатории НИИДИ (зав.проф.Аксенов O.A.) методом PC К пли РИГА. Содержание ПФ в сыворотке крови или кулыуральнон жидкости определяли в той же лаборатории методом количественной гсмалсорбции в модификации /Аксенов O.A., 1981/. Индукцию ИФ вирусом болезни Ньюкасла (ВБН) и наличие у-ПФ в обшей активносш определяли по методических! рекомендациям /Ершов Ф.И. и соавт.. 1989/.

ФИО-ос в сыворотке кропи и 1 Ull-ß в надосадке культур ИКК крови измеряли в И ФА с помощью тс<~т-наборов ТОО "Протеиновый контур". С.-Петербург. Циркулирующие Р -белки (PK) определяли в РТГА с помощью anni-P-peaienra произвол ства НИНЭМ нм.Н.Ф. Гамалеи, по мегоднческим рекомендациям /Бартова Л.М. и соавт., 1989/. Концентрацию в кропи гормонов определяли на базе НИИ физиологии им.И.П.Павлова АН России (Н.А.Арутюнян) в ПФА с помощью тест-наборов "Amercard". Для оценки чувствительности ИКК к антипролнферативному эффекту глюкокортикоидов (ГК) в РБТЛ ввели пробы с добавлением одновременно с ФГА преднизолона или дексаметазона в конечных разведениях 1,5 п 0,2 мкг/мл соответственно. Результат выражали в индексах модуляции (ИМП и ИМД).

НЬА-феротипнрованнс производили в мнкролнмфоцитотоксиче-ском тесте с применением набора антисывороток НИИ гех«атологни и переливания крови, С.-Петербург (данные получены О.А.Дробаченко).

При статистической обработке результатов использовали критерии Стыодента для оценки достоверности различии средшьх и критерий "U" для оценки достоверности различии долен в сравниваемых выборках/Плохинский H.A. 1970/.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Варианты динамики ФГА-РБТЛ при ОРВИ у детей и их связь с особенностях»! антитслообразования. Анализируя данные ФГА-РБТЛ ' у больных ОРВИ детей, мы выделили 4 варианта динамики показателя: I - высокая реактивность ИКК в обе фазы болезни, II - супрессия ответа в острую фазу ("ранняя" НИС), III - супрессия ФГА-РБТЛ только в периоде выздоровления ("поздняя" НИС) и IV - супрессия реакции в обе-фазы болезни ("пролонг ированная" НИС).

Одни и те же варианты модуляции реактивности ИКК в ФГА-РБ'ГЛ (радиометрический метод учета) регистрировали в 4 партиях детей, обследованных в разные годы, что убеждает в хорошей воспроизводимости данного явления. Принципиально сходные варианты обнаруживали в двух возрастных категориях детей - первого года жизни и от 1 г до 7 л1.2Йетей были обследованы с применением морфологического метода учета реакции, при этом параллельно с ФГА использовали другой Т-мнтоген - АЛГ.

Установили, что и морфологический метод учета ФГА-РБТЛ выявляет те же 4 варианта ее модуляции, тогда как применение п качестве митогена АЛГ не дало таких четких результатов, особенно в отношении регистрации "поздней" НЙС III и IV вариантов. Следовательно, ФГА является более чувствительным индикатором гипореак-тивности ИКК в сравнении с АЛГ.

Учитывая ранее высказанную мысль о патогенетической взаимосвязи супрессии ФГА-РБТЛ с процессом специфического АО /Волга-рев А.П.,1984/, предположили, что выявленные нами варианты неспецифической иммуномодуяяции ассоциированы с неодинаковой интенсивностью продукции AT против РВ. Анализ данных АО у детей с разными вариантами динамики ФГА-РБТЛ подтвердил справедливость этого предположения (рис. 1.). В обеих возрастных группах И вариант оказался связанным с ранним (к вирусу гриппа А) и высоким АО, тогда как Ш - напротив, с относительно низким АО у детей до 1 г или замедленным - у детей старше 1 г. Дети первого года жизни отвечали относительно слабой продукцией AT и при IV варианте, тогда как у детей старше 1 г с этим вариантом ассоциирован высокий АО, Особенно к йегриппозпым РВ.

Обнаружение закономерных соотношений между неспецифической реактивностью ИКК и особенностями АО послужило основанием обозначить выделенные варианты динамики фГА-РБТЛ как типы И О, имея ввиду современное представление об И О как о совокуПностЙ взаимосвязанных специфических и неспецифических компонентов/Кетлинский С.А. с ейавт., 1992/.

У 139 детей одновременно с оценкой реактивности ИКК в ФГА-РБТЛ исследовали функциональную активность лимфоцитов в АЗЦЛ, осуществляемой гетерогенной субпопуляцией клеток ("К-клеткн"), несущих на поверхности Fc-рецептори /Манько 8.М., Хаитов P.M.,

1987/.

чо-

Дсти до I года

П>итА(1) фнпгЛС9 др.РВ(1)

Дета от 1 года до 7 лег

. Ap.PS»

грипаА(1) ГРИППА® ДВ.Рв(1> i ЙР-РВСО

Ptoc.l Уровень антител к вирусу-возбудителю О РВИ у детей с разными

вариантами модуляции ФГА-РБТЛ Символами отмечено достоверное отличие: • - от I тина, • - от III, х - от II, при р по крайней мере < 0.05, здесь и на других рисунках.

Обнаружили, что "ранняя" НИС II типа ИО и "поздняя" НИС III типа у детей старше 1 г проявляются не только в угнетении ФГА-РБТЛ, но и в достоверном снижении активности АТ-зависимых киллеров. Так, цитотоксический индекс (ЦИ) в острую фазу ОРВИ при II типе ИО составил 34,1+3,2% против 50,7+ 3% при I типе ИО, р<0,001. Аналогично этому в фазу выздоровления при III типе ИО ДИ составил 31,4+7,9% против 54+3,8% при I типе, р<0,05. В то же время "пролонгированная" НИС IV типа ИО не сопровождается значимым снижением АЗЦЛ, что ставит вопрос о различиях механизмов развития НИС при разных типах ИО.

Продукция иммуноглобулинов. СЗ компонента комплемента н формирование ЦИК при разных типах ИО. Сравнение концентрации в крови ИГ трех основных классов у детей, формирующих разные типы ИО (рнс.2), показало, что II тип уже на первом году жизни ассоциирован с повышенной продукцией IgM, IgA и IgG, тогда как в ассоциации с IV типом повышенный синтез ИГ регистрируется только у детей Старше 1 г. По-видимому, это свидетельствует об относительно большей функциональной зрелости механизмов АО у представителей

II типа ИО. III тип характеризуется слабой продукцией IgG и IgA: у детей первого года жизни на уровне I типа, а у детей старше 1 г достоверно более низкой. При этом в старшей возрастной группе концентрация IgA существенно Ниже значений у здоровых детей, что наводит на Мысль о селективной недостаточности продукции IgA-AT.

Считают) что необходимым этапом Первичного ИО на белковые АГ является синтез AT класса IgE, ä реакции гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ) могут участвовать в элиминации возбудителя любой природы посредством кооперации с другими механизмами иммунной защиты /Бережная Н.М., Ялкут С.И., 1983/. Неспецифические IgE также несут важную функциональную нагрузку в ИО, модулируя активность ИКК, несущих Fc-рецепторы этого ИГ. В

частности, Неспецифические IgE способны ограничивать локальные реакЦйН ГНТ, блокируя высокоаффинные рецепторы на тучных клетках /Беклемишей Н.Д., 1986А

Сравнение уровня продукции общего IgE у детей, формирующих разные типы ИО (см. prtc.2), показало, что в обеих возрастных группах Наблюдается значительное превышение его синтеза при И (особенно),

III и IV типах ИО относительно I типа.

Деги до 1 года

Дети старше I года

ИГА ИГА игм игм ига ИГО ИГЕ иге

(1) д (1) ® (1) ю я) а»

>100 шов

Рис,2 Продукция ИГ четырех классов при разных типах ИО на ОРВИ.

ОсобыЙ интерес представляег спектр IgO-отвега по субклассам I-4, так как AT разных lgO-нзотнпов различаются по функциональным свойствам, а переключение ответа на те или иные субклассы контролируется известными цитокинамн /Кетлинский С.А. и соавт., 1992/. Данные сравнения уровня продукции субклассов IgG при разных типах ИО представлены в таблице. Оказалось, что максимальная концентрация IgG 1 в обе фазы ОРВИ ассоциирована со Н типом ИО, тогда как содержание IgG2 в острую фазу болезни в равной степени повышено при II, Ш и IV типах относительно I. Достоверных различий содержания IgG3 не выявлено, а минимальная продукция IgGf наблюдается при Ш типе МО. Важно, что у всех дегей уже в остром периоде снижена продукция IgG3 в сравнении с уровнем у здоровых детей, что, По-видимому, свидетельствует о переключении отвега на другие субклассы в ходе данной инфекций и позволяет считать представленные данные отражением ИО* в toM числе вируссненнфи-ческого, на изучаемую ОРВИ. Наиболее интенси&ное переключение на синтез IgG2 происходит при IV типе ИО, что иллюсгрнруег минимальное значение индекса lgGl:IgG2. Известно, 4to продукцию IgG2 индуцирует жййоЙ вирус (в отличие от йнактнйированного) AValsh, 1994/. Это дает основание для Предположения» что более Интенсивная продукция IgG? (как и IgM) при II, III и IV типах ИО обусловлена более высоким уройнем виреМии в оетрую фазу инфекции й сравнении с I тииом.

Учитывай неодинаковую быраженность иолйклональной активации В-лИМфоЦИТоё, йредставлйет интерес сравйемие динамики содержания НесГтеиифиЧеСких ЦИК 8 крови детей, формирующих разные гИИы ИО. Важным фактором регуляции уровни ЦИК и ИО й целом яйЛйется СЗ KOMhoiicHT комплемента, участвушиШй как й классическом, так й в альтернативном пути его йкТИваЦнН /Кульберг А.Я., 1986/. Рисунок 3 иллюстрирует рецйпрокные соотношения Между содержанием в крови ЦИК й СЗ iipli pmiibix тинах ЙО у детей обеих возрастных групп: если концентрация ЦЙК растет оТ I к IV типу, то уровень СЗ компонента снижается в том же порядке. ВероятНо< накопление ЦИК, особенно интенсивное при IV типе ИО, связано с недосгаточностыо синтеза СЗ как важнейшею фактора их элимннании.

Различия я уровне продукции таких важных иммуноактивнык молекул, так ИГ и СЗ компонент комплемента, позволяют нредполо-

*

Продукция субклассов igG (г/л) при разных типах ИО на ОРВИ

Тип Число lgG1 lgG2 H)G3 I<3<34 Инлрлс ¡gG:lgG2

ИО детей

1 '2 1 2 1 2 1 2 1 2

X X X X X

I 12 5.25+0,31 5,75+0,48 1,87+0,07 2.01+0.09 0,37+0,06 0,41+0,07 0,11^0.02 0,0810,02 2,82+0,19 2,95+0,27

X X X X X

II 10 6.7С+0.34 7.61+0,44 2,29i0.10 2.41+0,13 0,49+0,09 0,51+0,10 0,11+0,03 0,05+0.02 2,93+0,14 3,19+0,23

X X X X X X X X X X

III 1.1 5,66+0,38 5,77+0,46 2,1810,12 2.20+0,13 0,41+0,04 0,41+0,04 0.05+0.01 0.04+0,01 2,51+0.11 2,68+0.20

X X X X X X

IV 7 5.60+0.65 6,42+О.ЗЭ 2,34+0.13 2,42+0,18 0.41+0,10 0,43+0,11 0.08+0.07: 0,08+0,02 2.40«0.24 2.67+0,25

* I-!! <0,01 <0.01 <0,01 <0.05

1-Ш <С,05 <0,05

р (-IV <0.01 <0,05

м-т <0,05 <0.01 <0,05

ll.iv <0,05

Здоровые 15 4,57+0,31 1,40^0,13 - 0.58+0,02 - ■ 0.14+0,03 - 3,57+0,37 . -

Примечание: Крестом отмечено достоверное отличие от данных у здоровых детей при Р по крайней мере <0,05. I и 2 - первое и второе обследование.

ЦИК(1)

Цикр)

СЗ(Пх10

СЗ<Д Г!0

РйсЗ. Содержание ЦИК н СЗ компонента комплемента при разини: типах И О на ОРВИ (дети от 1 года до 7 лет).

аИФЛО

уИФ/10 ФИО* До 1 ГОДЭ

11

ИЛЛЬ »издо

уН-Г/Ю <-1(0 * , ИП-1» Сг*рш* 1 гад»

Рнс.4 Уровень продукции шпгакиноп п осгрувд фату ОРВИ при разных

типах ЙО.

Ä»ri. своеобразие регуляции каждого из выявленных типов ИО в целом.

Сравнительная характеристика продукции важненших интокннов при разных типах ИО на ОРВН у детей. Ведущую роль в регуляции противовирусного ИО играют, по-видимому, интерфероны (ИФ), модулирующие практически все реакции иммунной защиты /Сморо-дшщев A.A. и соавт., 1987, Borecky, 1993/. Нами не обнаружено достоверных различий содержания tx/ß-ИФ в крови детей, формирующих разные типы ИО, в острую фазу ОРВИ. Значительные различия между типами ИО найдены по уровню продукций а-ИФ в культуре и содержанию в крови у-ИФ (рис. 4). Из рисунка видно, что H острую фазу болезни у детей обеих возрастных категорий способность ИКК к синтезу и секреции а-ИФ в Культуре снижается от 1 k IV типу ИО с достоверными различиями между ними. У детей старше 1 г с IV тйпом ИО угнетение продукции а-ИФ сохраняется Й в фазу выздоровления: 6,3+1,3 ME/мл против 13.6+2,7 МЁ/мл при I типе, р<0,05. Гипо-рсактипиость ИФ-продуЦеНтов развивается, по-видимому, вслед ствие мощного ИФ-отйета на вирус-возбудитель ОРВИ в Начальную фазу инфекции /ТаЗулахова Э.Б..Н соавт., 1994/ и в Наибольшей Méfie связана именно с IV типом ИО.

Особого вниманий заслуживает неодинаковый уровень у-ИФ как медйатора i йперчувствителыюстн замедленного тина (ГЗГ) /Issektitz et.al, 1988/ И фактора активации макрофагоЬ /ФрейдЛИН И.С., 1989, 1995, Ковальчук Л.В.* Чередссв А.И., 1991/ в кроЬн déreii с разными типами ИО. Как ЬндНо На рис.4, в острую фазу ОРВИ 11, 111 И IV типы НО в обеих возрастных груИпах характеризуются низким уровнем циркуляции у-ИФ по сравнению с I тйпом ИО. В группе детей старше I г минимальная продукция ЦПтокина ассоциирована со II типом, Тогда как различия между ¡11 и 1 или IV и 1 типами Не достигают достоверных значений. В динамике процесса происходит уснНенйс продукции у-ИФ в ассоциации со il (у детей старше 1 г) и, особенно, с IV Типом ИО. Так, у детей первого года жизни с IV типом ПО в фазу выздоровления содержание в крови у-ИФ составляет '3,4+3,7 МП/мл против 2,5+1,1 МЁ/мл в острую фазу, р<0,01. Аналогично этому у дегей старше Ire IV типом ИО у-ИФ в крови накапливается с 5,4+0,9 ME/мл в острую'фазу до 11,7+1,4 ME/мл в фазу выздоровления, р<0,01.

ФИО-«, MCIOMIIIIKOM КОЫрОГО яиляюн'я в ООИОНИОМ MUlUHUiü.l

макрофаги, откосится к наиболее ранним ппмжпнам но ьрсчени продукции и обладает широким спектром иммунорегул мторних свойств /Ковальчук Л.В., Чередеев Л.П., 1991, Кетлинский С.А, и соавт., 1992/. Индукторами ФНО-а могут быть не только линополн-сахарпды бактерий, но и ппрусы, в частности, вирус гриппа A /Gong <м al., 1991, Sprenger et al., 1994/.

При сравнении содержания ФНО-а в крови детей первого год» жизни, формирующих при ОРВИ разные типы НО, допонеркыч различий показателя не выявлено (см.рис.4). В то же время у леи ей старше 1 г проявляется отчетливая тенденция к увеличению секреции монокина в острую фазу ОРВИ от I к IV тину ИО: с 412¿_182 пг/мл при I до 2092+597 пг/мл при IV типе, р<0,05.

Другой из изученных нами монокинов - ИЛ-1|) - играет ключевую роль в регуляции локальных воспалительных реакций и ИО п целом /Ковальчук Л.В., Чередеев А.Н., 1991/. В синергизме с другими npoi'oc-палительиыми цитокинами, в частности, с ФНО-а, МЛ-1 вызывает системный острофазовый ответ: лихорадку, нентрофилию и синтез белков острой фазы /Кетлинский С.А. и соавт., 1992/. При острых инфекциях индукторами ИЛ-I могут служить не только копопепты клеточной стенки бактерий, но и вирусные А Г (гематтлютинии, двухннтевая РНК) /Чередеев А.Н., 1990/.

Соотношения уровней спонтанной секреции ИЛ-1 (5 в 24-часовых культурах ИКК крови при разных типах ИО оказались также неоднозначными в двух возрастных группах детей (см.рис.4). В острую фазу болезни у детей до I г максимальный уровень секреции монокина ассоциирован со II типом ИО (388+50 иг/мл против 176+56 пг/мл при I типе, р<0,05). У детей с IV типом ИО секреция монокннл ингибнрованп в сравнении со II типом (191+23 пг/мл против 388+50 пг/мл, р<0,01). В фазу выздоровления наиболее интенсивная спонтанная секреция ИЛ-1 ассоциирована не со II, как в острую фазу, а с III типом ИО (567+14 ! иг/мл против 179+55 пг/мл при I типе, р<0,05 и прошв 213+4° пг/мл при IV типе, р<0,05).

В то же время у детей старше 1 г наивысший уровень продукции ИЛ-1. как и ФНО-а, п острую фазу С/РВИ зарегистрирован при IV тине ИО (406+59 иг/мл против 169+64 щ /мл при 1 типе 110, р-^0,05), с сохранением тех же различий п фазу ямздоровлення (35N+3? иг/мч и 212+18 ni/мл при IV и ! тине соогпсппвснно, р<0.05).

- |Й-

Слслоиатедыю, одна и та же закономерность,,а именно, увеличение шпенеппнопи цшокиноиой реакции ИКК от I к IV тину МО в острую фн;у инфекции у детей старше ! г наблюдается и отношении оПоич мопокинов - Ф1 Юа и ИЛ-1. Сопоставление этих двух показателей у ! I детей, одновременно обследованных в двух тестах, показало высокую стелен:, прямой корреляции между содержанием ФНО-а в CMPopoiKC ьрони н ИЛ-Iß в надосадке культур ИКК (коэффициент ко;>ре шиш 0,9 при р<0,(И).

Следует отметить, что спонтанная секреция ИЛ-1 повышена относительно "контрольною" уровня (у здоровых детей) при всех чипах 1 fO.том числе в фазу выздоровления, что свидетельствует о длмгпьной лкгивации продуцентов данного цитокина при ОРВИ у д.с! ей. л чат верждая сообщение другого автора /Самаль Т.Н., 1988/.

Учитывая установленные нами возрастные различия цнтокнно-|фодукиин можно предположить, что усиление с возрастом синтеза ИГ у ;ичеп. формирующих IV тип ИО (см.рис.2),обусловлсно активацией макрофагал'.иыч функций в отношении синтеза и секреции двух осьош!1!\ монокинов - ФНО-а и ИЛ-1, известных как полнфунк-ционапьпые регуляторы активности клеток-эффекторов ИО, о том числе 13-;;нмфоинто» /Кетлинский С.А. и соавт., 1992/.

Гормоны и Р-бслки при разных типах ИО на ОРВИ у детей. В настоящее время не вызывает сомнении тесная интеграция иммунной и Иеремии спаем п НО, как и участие нсироэндокршшых факторов регуляции в процессах пролиферации и дифференцнровки ИКК /Абрамов В.В., 199]. Корнсва H.A. и соавт., 1993/. Основываясь на этих представлениях, мы сравнили содержание в крови двух гормонов i апофиза (пролактинл и гормона роста) и кортизола у детей,формирующих при ОРВИ разные типы ПО. Одновременно изучили изменения ■lyiu пипелыюсги ИКК к действию преднизолона и дексаметазона, OÜ,спиваемой по индексу модуляции ФГА-РБТЛ (ИМ,, и ИМЛ), и ходе

¡10 на ОРВИ.

Достоверпыл различий в содержании гормонов у детей первого годя жизни, реализующих разные типы И О, не обнаружено. У детей eiapine 1 г я ocipyio фазу ОРВИ четко проявилась тенденция к козрас-■ аник» средних концентраций кортизола (2U9-395-40äS-477 иМ/л) от I к IV типу ПО, с достоверными различиями м'ежду 11 и 1 типами: 395+00 иМ/л против 209+35 нМ/л соотвсчствснно, р<0,05. В фазе выздоровления уровень кортизона у детей со И типом ИО значительно снизился

(202+46 нМ/л прогни 395+66 нМ/л в острую фазу, р<0,05), юг:-а как у детей с 111 типом он достоверно препьниал значения ноклча¡сля i:p:t ! . типе ИО (297+44 нМ/л прошв 178 + 17 нМ/л, р<0,05). Отмечена та;.',-.с тенденция к росту секреции пролакпша в оегрую фазу болезни при 1!, III и IV типах ИО по сравнению с I. Различий в содержании гормона роста не выявлено.

Следовательно, представление о нарастании muetrauu-'v.-ni острофазовой реакции от I к IV типу подтверждается также увеличением в том же порядке секреции сгресс-ассоциироаанных юрмопер. -кортизола и пролактина - в острую фазу ОРВП у детей старше I г. При этом Н тип ИО характеризуется кратковременным выбросом a кровь кортизола, тогда как Ш - напротив, длительным, сохраняющимся а фазе выздоровления.

У детей старше 1 г чувствительность ИКК к антипролифе-ративному эффекту ГК оказалась самой высокой при 11 типе ПО, особенно в фазу выздоровления, с достоверными отличиями обоих ИМ от значении при I и IV типах (ИМ„ 0,57+0,05 против -0,77+0,06 и 1,21+0,56 соответственно; И Мд 0,14+0,02 против 0,25+0,05 п 0,40+0,1 соответственно). Различия между III и IV типами ИО по чувствительности ИКК к ГК рецинрокны в младшей и старшей возрастных группах: у детей грудного возраста III тип ассоциирован с достоверно более низкой по сравнению с IV типом чувствительностью (ИМп

1,06+0,12 против 0,51+0,13, р <0,01 - в фазу выздоровления), тогда как у детей старше 1 г самая низкая чувствительность ИКК к ГК ассоциирована в обе фазы болезни с IV типом ИО.

Эти возрастные различия могут быть связаны с неодинаковой экспрессией собственно иммунных факторов у детей разного возраста, формирующих IV тип ИО, например, ЙЛ-lß (см.рис.4), изменяющего, поданным литературы /Nakane et а!., 1990/,чувствительность ИКК ¡с действию ГК.

Интегральным показателем метаболизма мембранных структур ИКК может служить уровень циркулирующих Р-белков (РБ), представляющих собой продукты катяболигного распила клеточных репепго' ров /Кульберг А.Я., 1986/. Поскольку метаболические процессы регулируются центральными, н том числе иейрозцдокринпымп механизмами, концентрация РБ может отражать выраженность стрессовой реакции при воздействии па оргаимм раздражителя инфекционной

пли неиифекнионнои природы /Кульберг А.Я. к соавт., 1989, Михеева H I', ¡i сопвг., 1991/.

Учтивая положение об иммуномодулпрующпх свойствах РБ /КучьОерг Д.Я., 1991/, сопоставили их титры сданными ФГА-РБТЛ и копиейipamici't ИГ трех основных классов у переносящих ОРВИ детей дну* возрастных категорий. Установлен бнфазныи характер зависимости иммунологических показателей от уровня в крови РБ: угнетение ФГА-РБТЛ и/или продукции ИГ оказалось ассоциированным с мин.имн (2-4 тыс.) или высокими (64-128 тыс.) концентрациями РБ, условно обозначенными на этом основании как "иммуносуирессивныс" ¡пин п. тогда как средним концентрациям (8-32 тыс.) соответствовали высокие тначения как ФГА-РБТЛ, так и продукции ИГ- "иммуностимулирующий" ранг РБ.

Сравнение частоты встречаемости "нммуносупрессивпых" и "иммуностимулирующих" рангов РБ при разных типах ИО покатало, ■по I тин 110 i» острую фазу ОРВИ в 71,4% (дети до i г) и в 95,2% (дети старше ! г) случаен связан с циркуляцией РБ в средних, "иммуностимулирующих" титрах, чго соответствует высокой реактивности ИКК в ФГА-РБТЛ у них детей. В то же время у детей с супрессией ответ а на ФГА в острую фату (П п IV типы ИО) встречались не только крайние, "иммуносуирессивныс", по и средине титры РБ, чго можно объяснить вторичным связыванием РБ IgG /Кульберг А.Я.. 1986/. повышенная продукция коiорого свойственна этим двум "гуморальным" типам. Правомерность такого обьяснения подтверждается тем, что средние пиры РБ (8-32 тыс.) встретились у большинства представителей IV тина НО старше I г (в 61,6% случаев), но не у детей грудного возраста (только в 22,2% случаен), еще не способных к гниерпродукции ИГ (см. рис 2). Для 111 типа НО в острую фазу ОРВИ характерны сравни-тспьно жпкне концентрации РБ (2-8 тыс.) - у 66.6% дстей д>_. Ii и \ В7,5%детей старше 1 г.

Таким образом, только I н III типы ПО в острую фату ОРВИ ассоциированы с определенным диапазоном концентраций РБ: 8-32 п-к. и 2-8 гыс. соответственно. Полому указанные диапазоны титров РБ могу! быть использованы в качестве дополнителыюгодиато-сшчсского критерия :пих типов ПО, наиболее достоверного у дстей старше 1 i. 13 то же время для "гуморальных" Л и IV типов ПО характерен значшельный разброс ттров РБ, что можно объяснит), ¡"нимодействием !'Б с зффекторными молекулами ИО - ИГ или моду-

ляпнем мембранных процессии собственно иммунными факторами регуляции.

Из сказанного выше следуег, мю при интерпретации уровня РВ у переносящих ОРВН детей необходимо учитывать возраст ребенка и тип ПО.

Клинические формы ОРВН при разных типах ПО. Возникает принципиально важный вопрос о клинической значимости обнаруженного иммунологического феномена: представляют ли собой вымоленные типы IЮ лишь варианты сочетания механизмов иммунной зашиты, не имеющие патогенетического и клинического значения, или они непосредственно связаны с особенностями клинических проявлений- и тяжестью инфекционного процесса? Анализ частоты встречаемости разных клинических форм ОРВН в ассоциации с 4 типами ПО у детей двух возрастных гр\ни (до I г и старше 2 л) представлен на рис. 5. D переходной по возрасту группе от 1 г до 2 л достоверных связей между типом ПО и клиникой ОРВН не ni.(явлено. Число пеослож-ненных OPD11 превалирует при I типе ПО, что становится особенно отчетливым у детей старше 2 л: 45,9% случаев против 17,6% при IV типе, р<0,05. С возрастом у детей, реагирующих по I типу, достоверно снижается частота развития бронхитов (с 37% до 18,9%, р<0,05), но не пневмоний. У детей, реагирующих по И, III и IV типам, напротив, с возрастом частота развития бронхита увеличивается, составляя при III и IV типе более половины случаев (53,8% и 52,9% соответственно). О то же время проявляется на первый взгляд парадоксальная тенденция к снижению риска развития пневмонии у детей старшей группы, реагирующих по III или IV типу.

Возможно, этот факт связан с онтогенетическим созреванием альвеолярных макрофагов, обладающих повышенной способностью к цитокнно продукции и обеспечивающих резистентность легких при ОРВИ/Bilvk el al.. 1988, Strieter el al., I9S9, Sierra-Madero et al., 1994/.

В группе детей старше 2 л обнаруживается (см. рис. 5) постепенное усугубление тяжести болезни по числу осложненных форм ОРВН от I к IV типу ПО: 54,1%-68,4%-76,9%-82, 4% с достоверным различием между "крайними" типами (I и IV) при р<0,05. Такая же тенденция выявлена в отношении роста пнелегонных осложнении процесса, свидетельствующих о системном снижении протнноиифекцн-оипой резистенгносги: 0%-3,5%-7,7%-11,8% при I-II-III-IV типах, различие между I и IV достоверно при р<0,05.

Дети до 1 года Дета старше 2-х лет

I I! Ш IV | и . III . IV

гг*57 гг=55 ГР«7 ггЗТ п»5Г ГР13 п=1Г

Рпс.5 Частота разных клинических форм ОРВИ при 4-х типах ИО.

Вотбу- Факторы А»1М*н- Сигнал Тип ' Пдагхлапмшй преимущественный

шпепь рг5ШМ*ит- ныйсти- в ЦНС: иммунного механизм

'..иости мул ФНО, ИЛ-1 ответа

О

<|—[>-~о

:-<!—[>—о

ч<1—[>—о

клеточный Тх!

гуморальный Тх2

Ш-клеточный

ТхО-Тх 1

■ IV-гуморальный

Тк О-Тж 2

клеточный Тх»

клеточный Тх I

гуморальный Тх0-Тх2

гуиоралжъо« Тх О-Тх 2

Гнс.6 Птопгстичесхяя схема формирования типов иммунного ответа

I

п

Нарастание общей клинической тяжести инфекционного процесса от I к IV типу НО иллюстрируется также увеличением числа деш"| с общими проявлениями нейротоксикоза. характерными для тяжелых форм ОРВИ /Киселев О.И. и соавт., 1994/: в 33,3%, 31,6%, 42,9% и 66,7% случаев при I, II, Ш и IV типах у детей до I г и в 16,7%, 14,8%, 50,0% и 60,0% случаев у детей старше 1 г.

Представленные данные указывают на наличие определенных взаимосвязей между выявленными типами НО и клиническими проявлениями инфекционного процесса. Однако эти взаимосвязи неодинаково выражены в разные периоды детства, что. по-видимому, обусловлено постепенным созреванием в онтогенезе конкретных механизмов защиты, отвечающих за клиническое выздоровление при том или ином типе ИО.

Факторы, участвующие » формировании типов ИО. Мы предположили, что ключевым фактором формировать; типов ИО служит исходно неодинаковая резистентность к возбудителям ОРВИ. С целью проверки этого предположения сравнили число часто болеющих С1Ь) ОРВИ детей среди представителей разных типов ИО. Оказалось, что уже на первом году жизни ЧБ детей меньше всего среди формирующих I тип ИО и больше всего - IV: 23,1% против 55,5%, р<0,05 (данные анамнеза и катамнеза). Такие же соотношения сохраняются и у детей старше 1 г: 33,3% против 66,7% при I и IV типах, р<0,05. Среди формирующих III тип ИО в обеих возрастных группах 50% составляют ЧБ дети. Обращает на себя внимание увеличение с возрастом числа ЧБ детей среди реагирующих по II типу: с 29,2% на первом году жизни до 54,3% в старшей группе.

С целью выявления пре- и постнатальных фак торов, влияющих на иммунореактивность ребенка, были проанализированы данные анамнеза детей первою года жизни (и их матерей), в зависимости от типа ИО при ОРВИ. Оказалось, что тип ПО не связан с такими перинатальными факторамн,как токсикоз матери и недоношенность. Не обнаружено различий и по числу детей с перинатальной энцефалопатией. По-пндимому, это свидетельствует о физиологической природе изучаемою феномена.

Представляет интерес, что группа детей, формирующих II тин ИО. отличается от остальных редкой встречаемостью-тимомегалии (л 5,2% против 16,4% при III, р=0,05, 12,2% при I и IV), которую связывают с проявлениями эндокринного дисбаланса /Кряспопсроад

К.Н., 1986, Кузьменко .П.Г. и соавт., 1993/. Возможно, дети, формирующие па первом юлу жизни II тип НО, имеют относигельно зрелый эндокринный статус с активно функционирующей системой гипоталамус-! ипофиз-тнмус-надпочечлики.

Для. выяснения роли фактора ■ онтогенетического созревания иммунной системы в реализации того или иного типа ИО было проведено сравнение частоты встречаемости 4 типов ИО в разные периоды детства. Установлено постепенное нарастание частоты реагирования по И типу с 17,5% среди детей 1-3 мес. до 47,4% среди детей старше 5 лет (р<0,01). Такая динамика свидетельствует о необходимости онтогенетического созревания готовности иммунной системы ответить по 11 типу, что, по-видимому, связано усовершенствованием регуляции антителообразования. Напротив, встречаемость 111 типа ИО резко снижается с 15-25% до 4-5% после 4 лет жизни, что свидетельствует о траизнториом характере этого типа ответа, связанном с онтогенетической незрелостью определенных механизмов иммунной защиты (синтеза IgA?).

Закономерно встает вопрос о том, какую роль в индукции определенного тина ИО играет этиологический фактор в виде конк ретного вируса - возбудителя ОРВИ. Было проведено сравнение частоты выявления таких этиологических агентов, как вирус гриппа А и В, парагриппа, реснираторио-синцитиалыюго (PCB), аденовирусов, вируса герпеса простого и млкоплазмы пневмонии (данные вирусологической лаборатории НИИДИ, зав. проф. О.А.Аксенов) у детей, формирующих разные типы ИО. Примерно в половине случаев была диагностирована сочетанпая инфекция, однако достоверных различий числа моно- и сочстанных ОРВИ при разных типах ИО не выявлено.

Удалось установить статистически существенные различия между тинами ИО в отношении частоты встречаемости лишь двух возбудителей ОРВИ: вируса герпеса простого (ВГГ1) и миконлазмы пневмонии (МП). Оба агента с повышенной частотой обнаруживались у детей, отстающих по III или JV тину. Так, среди детей до 1 г BITI диагностирован в 39,4%. случаев при IV типе ИО против 16,7% при 1, р<0,05; МП установили в 21,2%) случаен при IY типе ИО против 5,0% при 1, 4,5% при II и 2,6% при 1U, р<0,05.

Сходные соотношения зарегистрированы в труппе детей старше 1 I: ВГП выявлен у 40% дегей с IV типом ИО против 11,9% - с 1, [><0,01 и 16,2% - со И, р<0,(!5; МП одинаково часто встретилась в ассоциации с

Ш и IV типом (в 13,3% и 12% случаев соответственно) и ни в одном случае у формирующих 1 или II тин ИО (р<0,05). Иммуносупресснвные эффекты этих микроорганизмов хорошо известны /Семенов Б.Ф., Варгин В.В., 1989, Науиагс! « а1„ 1993, Ро$ауа<1 е1 а!., 1993/. Возможно, особое значение имеют тронность ВГП к центральному органу иммунной системы - тимусу, показанная в эксперименте /Коломиец А.Г. и соавт., 1993/ и цитопатогенное действие компонентов мембран МП на ИКК /Горина Л.Г. и соавт., 1988/.

Однако в большинстве случаев при заражении обычными РВ в моноварианте или й их сочетании этиологический фактор, по-видимому, не имеет решающего значения. Из этого следует, что ведущую роль в формировании тйпа ИО играют свойства макро-сфганнзма: Исходная резистентность к возбудителю и способность к реализации быстрого и эффективного ИО.

Установлено участие главного комплекса гистосовместимости (НЬА - комплекса) в регуляции не только специфического ИО, но н неспеийфическнх реакций гоМеостатИческИх систем /Яздовский В.В., 1993/. В частности, Показана ассоциация определенных генов НЬА I и И классов с уровней секреции кортизола у детей и взрослых /ПрйлуцкнП А.С. И соавт., 1992/. Способность НЬА - антигенов представлять те или иные эннтопы вируса разным субпопуляЦням Т-лимфоцнтов лежит в основе развития конкретных механизмов ИО -клеточных или гуморальных /ОоЬеЛу 1992/.

БьЫо проведено сравнение часто+ы встречаемости в НЬА -фенотипе АГ I класса локусов А (9 аллелей), В (16 аллелей) И С (7 аДлелей) у детей, формирующих при ОРВИ разные типы ИО. Группами "контроля" служили Все больные ОРВИ (125 чел.) и здоро&Ые дети С.-Петербурга (111 чел., поданным Аввакумово/1 А.В., 1992).

Достоверные различия ме>кду типами ИО установлены в отношении частоты встречаемости следующих НЬА-АГ: А 3, А 10, В 5, В 12, В 13, В 21, СУ/2 и С\У4. Частота встречаемости некоторых из перечисленных аллелей была неодинаковой у детей первого Года Лизни и детей старше I г, формирующих один и тот же тип ИО, что согласуется с положением о постепенной реализации фенотипа иммунореак-тивности в постнатальном онтогенезе /Вельтнщев Ю.Е., 1989/.

АГ А 10 найден у 75% детей старше 1 г, формирующих II тип ИО (против 28,6% - III тип, р<0,05, 45,6% в группе "все больные", р<0,05 и 20,7% в популяции, р<0,001). Другой АГ этого локуса - А 3 встретился

у большинства детей, реагирующих по IV типу (в 55,6% случаев против 10,9% - I тип, 16,7% - И, 19,2% - HI, p(„i<0,05). Достоверные различия

выявления АГ В 5 отмечены только в группе детей до 1 г, формирующих П или Ш тип ИО (8,3% против 42,1% соответственно, р<0,05).

АГ В 12 оказался связанным с 1 типом ИО у детей старше 1 г: 29,4% против 0% при II и III типах ИО, р<0,01. Как и В 5, АГ В 13 по разному распределен у детей первого года жизни, реагирующих по II или III типу, однако различия реципрокны описанным для В 5: 33,3% против 5,3%, р<0,05.

Представляет интерес "накопление" АГ В 21 в группе детей, отвечающих но II типу: в 29,2% случаев против 4,3% среди отвечающих по 1,,р<0,01 я 0% среди отвечающих по IV типу, р<0,01.

Следовательно, фенотгпические различия между группами детей, формирующих при ОРВИ разные типы ИО, заключаются в разной представленности некоторых аллелей генов И LA - комплекса локусов А и В, с которыми, по данным литературы, ассоциированы особенности Iiейроэндокр.' 1 нной регуляции, цитокинопродукции и антитело-образования /Прнлуцкий A.C. и соавт., 1992, Джумагаев A.A. и соавт., 1993, Черницына Л.О. и соавт., 1994/.

Два АГ локуса С - CW2 и CW4 также были по-разному распределены среди детей, формирующих при ОРВИ 4 типа ИО. Аллель CW2 обнаруживалась примерно у половины представителей 1 и III типов ИО и вдвое реже - при II и IV типах. Различие между 1 и II типами статистически существенно: 51,5% против 23,5%, р<0,05. Факты указывают на связь этой молекулы с "защитой" от гиперпродукции IgE /Бережная U.M., Ялк)т С.И., 1983/. Все дети с IV типом ИО имели в HLA - фенотипе аллель CW4, что с высокой степенью достоверности отличало эту группу от всех остальных: с 1 типом - 42,4%, р<0,001, со II -58,8%, р<0,01,сШ- 42,9%, р<0,001.

Резюмируя анализ данных HLA - фенотипированИя можно заключить, чго некоторые гены комплекса HLA играют существенную роль в формирований типов ИО при ОРВИ, с учетом процесса онтогенетического развития механизмов генного контроля иммуноре-икпшносги.

Заключение. Представленные в данной работе материалы' демонстрируют существование четырех типов реакции иммунной системы детей на пнедре.иие РВ в дозе, вызывающей острый инфекционный процесс. Выделенные по характерной динамике

неспецнфнческой реактивности ИКК п ФГА-РБТЛ, Типы ИО оказались ассоциированными с неодинаковым уровнем продукции противовирусных AT, неспецифических ИГ четырех классов и Субклассов, важнейших цнтокинов (ос- и у-ИФ, ФНО-а, ИЛ-Iß), СЗ компонента комплемента и ЦИК, а также с разным содержанием кортизола и Р-белкоо в крови, наряду с неодинаковой чувствительностью ИКК к антипролиферативному эффекту ГК.

Возрастание частоты осложненных и тяжелых форм ОРВИ. а также числа ч.чсто болеющих ОРВИ детей от I к IV тину позволяет предположить, что критическим фактором формирования типов ИО является исходно неодинаковый уровень резистентности к РВ (естественной к приобретенной), снижающийся в том же порядке (от I к I V типу). Этому соответствует увеличение интенсивности острофазовой реакции иммунной системы, что проявляется в усилении продукции ФНО-а и ИЛ-Iß, увеличении секреции стресс-ассоции-рованных гормонов кортизола и пролактина, активации синтеза ИГ Некоторых изопшов (IgM, IgG2) и формирования ЦИК or I к IV типу, четко выраженных у детей старше 1 г.

Предполагаемая цепь событий, формирующих тип ИО: взаимодействие микроорганизма с факторами распознавания и резистентности - величина антигенного стимула - уровень сигнала нмуниой системы в ЦНС - тип стрессовой реакции - модуляция ИО. По нашей схеме, пусковым механизмом дифференциации типов ИО являются сигналы активации разной величины, адресованные иммунной системой в ЦНС, роль которых могут играть ФНО-а или ИЛ-lß. Это согласуется с современным представлением о макрофагах как клетках-посредниках между иммунной и нервной системами, а также с признанием за обоими монокинами роли мсжсистемных медиаторов /Ковальчук Л.В., Чередеев А.Н., 1991, Fong, Lowry, 1990/.

Комплексные характеристики каждого из типов ИО свидетельствуют о своеобразии функциональной активности основных популяций ИКК, кооперирующих в иммуногенезе: моноцитов-макрофагов, Ти В-лимфоцитов - в острую фазу болезни и в фазу выздоровления. Мы предлагаем гипотезу о качественных особенностях ИО,. присущих каждому из выяпленных его типов, основанную на современной концепции гетерогенности популяции Т-хелперов /Mossman et а!., 1986/. У экспериментальных животных и человека выделены три основных клона активированных АГ Т-хслперов, различающихся

спектром продуцируемых цитокинов к функциональной активностью: Тх1, Тх2, а также Тх0, являющихся, по-видимому, плюрипотентными

предшественниками двух первых высокоспецнализированных клонов /Powrie a. Mason, 1988, Haanen et al., 1991, Clerici a. Shearer, 1993, Carvalho et al., 1994, Gajewsky et al., 1994/.

Различия функциональной активности T- и В-лимфоцитов в острую фазу ОРВИ при 4 типах ИО позволяют предположить, что в основе последних лежит селективная активация одного из вышеперечисленных клонов Тх: Тх1-, Тх2- или Тх0 - подобных (рнс.6).

I тип ИО, Высокий уровень Продукции у-ИФ наряду с хорошей функциональной активностью макрофагов в отношении синтеза Цитокинов и СЗ, как и вспомогательной их функции в ФГА-РБТЛ, при слабо выраженной ноликлональной активации В-лимфоцитов и средней интенсивности АО позволяют предположить преимущественно Клеточную форму ИО, обусловленную генерацией ТХ1 - подобных

клонов, продуцирующих ИЛ-2 и у-ИФ и контролирующих реакции ГЗТ/Кетлинский С. А. и соавт., 1992/.

Мы не располагаем доказательствами наличия ГЗТ к АГ возбудителей ОРВИ у детей с 1 тяпоМ ИО, однако множество фактов указывают на существование прямой взаимосвязи между уровнем АГ-спецнфической ГЗТ и активностью ИКК в Ф1~А-РБТЛ /Зарецкая Ю.М., 1982, Авербах М.М. И соавт., 1085, ЛесШщкиЙ А.И., 1985, Гергерт В .Я. и соавт., 1995, ЛяШеНКо B.A.j 1096, Lieiv, 1989, PoWrie a. Mason, 1988/. НаШи собственнике данные, поЛуЧенНые При изучении коревого вакцинального ripoUfecca у детей < Подтверждают наличие такой взаимосвязи: на 14-е сутки после нммунйзацнй уровень ГЗТ к вирусу кори НряМо коррелирует с величиной ФГА-РБТЛ /ЖслсЗникова Г.Ф. и соавт., 1994/.

Высокая реакТИВносТь ЙКК в ФГА-РБТЛ в обе фазы болезни позволяет прЬдположить сохранение "клеточного" профиля ИО при 1 его типе И в фазу Выздоровления от ОРВЙ.

II тип ИО. Профиль П типа ИО онпозитен 1 в отношении уровня продукции у-ИФ и И Г. Активная продукция уже в острую фазу болёзнй IgNl, IgA, IgGI, IgE косвенно свидеГельствуют о выраженном синтезе таких Т-клеточиых цитокинов, как ШМ, ИЛ-5 и ИЛ-6, обеспечивающих в синергизме друг с друюм полноценный АО к АГ возбудителя и являющихся типичными продуктами- Тх2-нодобных

клонов /Кетлинский С.А. и соавт., 1992/. Ранний и высокий АО подтверждает справедливость опенки II типа МО как преимущественно гуморального, в котором ведущие механизмы протняо-внрусноГг-зашиты опосредованы антителами.

Увеличение к 5 годам числа Детей, отвечающих по II типу, вероятно, отражает созревание в онтогенезе Тх АО, которые у ново: рожденных фенотнпнчески и функционально неполноценны /Lee et al., 1990. You Wuet al., 1994/.

Нормализация нролиферативного ответа Т-лимфоцитов в фазу выздоровления позволяет Предположить накопление в циркуляции Т-клеток-продуцеитов 11.1-2 и возможную смену ведущего профиля II типа ИО с Гуморального на клеточный.

III тип ИО. Высокая реактивность Т-лимфоаитов в ФГА-РБТЛ при выраженной продукции IgM, IgG2 и IgE позволяет предположить смешанный фейотип превалирующих клонов Тх, продуцирующих как

ИЛ-2, так tt небольшие количества ИЛ-4, достаточнее для инициации, сойместно с ГК /Jabara.et di., 1993/, синтеза IgE; Возможно, эти клоны дефектны в отношении продукции ИЛ-5, контролирующего переключение синтеза ИГ с IgM на IgA /Кетлинский С.А., 1992/: у детей старше I г с III типом ИО обнаруживается дефицит синтеза IgA, что, вероятно, и служит причинным фактором Повышенной чувствительности к РВ этих Детей.

В фазу выздоровления при IÍI тине ИО развивается "поздняя" гиНореакТййНосгь Т-лимфоцитов й ФГА-РБТЛ при усилении продукции ИГ с накоплением ЦИК и формйройанием ''позднего" АО к АГ РВ. Вероятно, эТо свидетельствует о переключении фенотипа Тх с Тх0 на близкий к Тх2. С учетом пролонгированной секреции кортизода при III типе ИО можно предположить участие ГК в этом переключении и в активации синтеза ИГ четырех классов, как это показано в опытах in vitro /Levo et al., 1985/.

При IV тине И О в острую фазу ОРВИ Т-лиМфоциты слабо реагируют на ФГА и секреТнруЮт небольшие количества у-ИФ, .однако осуществляют эффективную помощь в АО (у детей старше 1 г), что позволяет предположить генерацию Тх2 - подобных клонов и прй

данном тине ИО. Однако они, по-видимому, не- достигают такой степени дифференцнровки, как при II типе ИО. В фазу выздоровления

ФГА-РБТЛ по-прежнему ингибпровнна, циркуляция И К достигает максимального в условиях ОРВИ уровня, однако в крови появляются значительные количества у-ИФ, что дает основание предположить тенденцию к постепенному переключению профиля ИО с преимущественно гуморального на клеточный.

Считают, что клеточно-опосредованные механизмы ИО наиболее эффективны не только в выздоровлении от ОРВИ, но и в приобретении иммунитета к повторному инфицированию /Graham et al., 1993, Terada et al., 1994, Walsh, .1994, Welliver et al., 1994/. С этой точкой зрения согласуется ряд выявленных нами фактов. Так, с I ("клеточным") типом ИО ассоциировано прогрессивное увеличение с возрастом числа неоеложеннных форм ОРВИ, тогда как со II ("гуморальным"), напротив, связано повышение риска развития бронхита. По-видимому, накопление факторов резистентности бронхиального дерева при внедрении РВ происходит более результативно при 1 типе ИО по сравнению со II, Кроме того, среди отвечающих по II типу детей с возрастом увеличивается число часто болеющих (с 29 до 54%), что свидетельствует о малой эффективности "гуморальной" формы ИО в приобретении общей резистентности к РВ, "Клеточный" ответ по III типу, очевидно, неполноценен, что сближает его по клиническим проявлениям с IV ("гуморальным").

Сравнение выявленных типов ИО показывает, что НИС ассоциирована с относительно нйзкИм уровнем исходной резистентности к РВ и усугубляется в своих проявлениях от II к IV типу, связанному с наименьшим арсеналом готовых факторов резистентности. Так, при li типе И О регистрируется лишь кратковременная гипореактивность ИКК в ФГА-РБТЛ и АЗЦЛ, тогда как при IV типе НИС имеет пролонгированный характер и выражается не только в ингибиции пролиферативного ответа Т-лимфоцитов, но и в супрессии фагоцитарных функций макрофагов, а именно, их способности осуществлять клиренс ЦИК м восполнять СЗ компонент комплемента в ходе его потребления. Кроме того, При IV типе ИО ИКК типо реактивны в отношении индукции а-ЙФ в культуре, причем в обе фазы ОРВИ.

Типы ИО, связанные с проявлениями ИЙС в ФГА-РБТЛ (II, III и IV), отлйчаюТся от I уровнем поликлональной активации В-лимфо-Цитов -с повышенным синтезом IgM, IgG2, lgE и Интенсивным формированием ЦИК. Возможная критическая роль Неспецифических или специфических ИК в развитии НЙС при острых инфекциях

многократно обсуждалась в литературе /Семенов Б.Ф., Варгнн В.В.„ 1989, Joncas, 1985/. И К могут воздействовать на ИКК через Fc- или СЗ-

реиепторы, негативно регулируя их функциональную активность и ИО и Нелом /Кульберг А.Я., 1986, Di Ñola, 1988, Heyman, 1990, Kuhnert et al., 1990, Laifer et al., 1992/. В экспериментально-теоретической модели ауторегуляции ИО постулируется решающая регуляторная роль специфических AT с определенным уровнем аффинитета к АГ возбудителя/Вопцеховский Б.Л., 1991/,

Основываясь на закономерной взаимосвяз!! между реактивностью Т-кЛеток в ФГА-РБ'ГЛ и уровнем специфического АО (II тип - ранний и высокий АО и "ранняя" НИС, III тип - поздний АО и "поздняя" НИ С) мы предположили, что супрессия ответа на ФГА обусловлена функционированием Тх2-подобных клонов и продукцией высокоаффинных противовирусных AT. Иными словами, особенности динамики ФГА-РБТЛ связаны с временными и качественными характеристиками специфического АО, присущими каждому из типов ИО. Согласно этой гипотезе, один из механизмов развития "ранней" НИС 11 типа ИО - воздействие на ИКК IgOl-содержащих ИК, обладающих повышенной способностью индуцировать супрессию ФГА-РБТЛ/Луганская Е.Л., и соавт., 1990/.

Косвенным доказательством реализаций супрессорного механизма через Рс-реЦепторы служит обнаруженная нами одновременно с

угнетением ФГА-РБТЛ ингнбицня АЗЦЛ: в острую фазу при II и в фазу реконвалесценцйи при Ш Time ИО. Известно, что ИК являются основным фактором регуляции функциональной активности К-клеток /Манько В.М., Хаитов P.M., 1987, ЮгаЙ М.М., Каральник Б.В., 1992!/.

В этом отношении исключение составляет "пролонгированная" НИС IV типа ИО, которая проявляется в угнетении ФГА-РБТЛ, но Не АЗЦЛ. Это позволяет предположить превалирование других механизмов супрессии при данном типе ответа.

Тх2-поДобные клоны активированных Т-лимфоцитов могут

индуцировать НИС не.только через эффекторные молекулы - ИГ, но и путем секреции противовоспалительных цитокинов, таких, как ИЛ-4, ИЛ-10 и ИЛ-13 /De Waal et al., 1993, Gajewsky et al., 1994/. Так, ранняя секреция ИЛ-10 показана при экспериментальной гриппозной инфекции /Sarawar a. Doherty, 1994/.

Такое толкование механизмов угнетения реактивности ИКК в ФГД-РБТЛ предполагает, что данный феномен органически присущ самому процессу иммуногенеза и свидетельствует о переключении на преимущественно гуморальную форму ИО. Вероятно, патогенетически более значимо сочетание механизмов супрессии, направленных не только на ограничение Т-клеточных реакций типа ГЗТ, но и активности фагоцитирующих клеток. Подобная ситуация воспроизво дится при IV типе ИО, сопряженном с наибольшим числом ослож нений ОРВИ.

Неодинаковые иммунологические механизмы выздоровления детей, обладающих разным исходным уровнем резистентности к возбудителю и формирующих ИО с преобладанием клеточных или гуморальных реакций, ставят вопрос о необходимости нового подхода к лечению и профилактике инфекционных заболеваний у детей, днфференци рованного в зависимости от типа иммунореактивности. Феномен типов ИО, по-видимому, имеет общебиологическое значение, Так как сходные варианты иммуногенеза выявлены при коревом вакцинальном процессе и локализованной форме дифтерии у детей /Железникова Г.Ф. и соавт., 1994 и 1995 гг/.

Практические рекомендации.

1. РБТЛ на ФГА может быть использована как базисный метод Для диагностики типа ИО при любой инфекционной нозологии у детей и взрослых. Мы рекомендуем постановку этоЬ) теста в культуре цельной крови без добавления гетерологичНой сыворотки, что . Максимально приближает культуральный опыт к условиям ln vivo и значительно повышает клиническую информативность реакции. Для диагностики типа ИО можно применять как радиометрический, так и более доступный морфологический Метод учета результатов реакции. Регистрация ИС менее 60 в радиометрическом варианте или менее 60% бластных форм - в морфологическом является основанием длй заключения о г иНореактнвНбста И КК.

2. С целью ускоренной диагностики типа ИО по первому обследованию следует подключить дополнительные иммунологические методы: определение концентрации IgM, IgG, IgA, IgE, некоторых субклассов IgG {IgGl, lgG2 и IgG4), СЗ компонента комплемента и ЦИК. При вирусных инфекциях информативна также интерфероно-ваяреакция лейкоцитов на стандартный вирусный индуктор (ВБН).

ПовышенныЙ в сравнении с возрастной "нормой" уровень IgM, Ig Е и ЦИК при низком содержании в крови IgA, IgG4 и СЗ могут быть показателями дифференцировки III типа от I (высокая реактивность ИКК в ФГА-РБТЛ в острую фазу), тогда как низкое содержание СЗ и гипореактивность ИКК при индукции а-ИФ в культуре - показателями дифференцировки IV типа от II (супрессия ФГА-РБТЛ в острую фазу).

3. При диагностике типа ИО необходимо учитывать возраст больного. Так, при ОРВИ у детей первого года жизни в острую фазу болезни более информативен уровень ЦИК (повышенный при II, III и IV типах ИО относительно I) и менее - концентрация Ig трех основных классов. Одинаково информативны уровни IgE, СЗ, ИФ-генеза в культуре.

4. Заключение о III или IV типе ИО, для которых характерна манифестация НИС в фазу выздоровления, может служить основанием для назначения курса йммунореабилитации с целью профилактики повторных заболеваний в постстационарном периоде.

5.При интерпретации данных определения yj овня Р-белков у переносящих острые инфекции детей мы рекомендуем учитывать клиническую форму и тяжесть болезни, возраст ребенка, фазу процесса и тип ИО.

ВЫВОДЫ

1. Иммунный ответ при ОРВИ у детей осуществляется неодинаково и Представлен четырьмя типами, выявляемыми по характерной динамике реактивности ИКК крови в ФГА-РБТЛ: I - высокая реактивность ИКК как в острую фазу, так и при выздоровлении; II - угнетение реактивности ИКК а острую фазу и нормализация к выздоровлению; III -высокая реактивность ИКК в острую фазу, но угнетение в периоде выздоровления; IV - низкая реактивность ИКК в обе фазы болезни. Угнетение реактивности ИКК в ФГА-РБТЛ сочетается со снижением АЗЦЛ: в острую фазу болезни при II типе ИО и в фазу выздоровления - при III.

2. Типы ИО различаются между собой интенсивностью специфического АО: I тип - средний АО; II - ранний (к вирусу гриппа А) и высокий АО; III тип - низкий или замедленный АО; IV - низкий или средний АО у детей первого года жизни, но высокий - у детей старше I г.

3. Установлены различия уровня продукции несПецифнческих гуморальных факторов иммунной защиты при 4 типах ИО: а-ИФ и у-ИФ; монокннов ФНО-а и ИЛ-tß, Ig четырех классов, субклассов IgG, СЗ компонента комплемента, интенсивности накопления ЦИК. I тип ИО характеризуется самым высоким содержанием в крови у-ИФ в острую фазу болезни, но наименее йнггеНсивНой продукцией IgM, IgB, IgOl, IgG2 и минимальным накоплением ЦИК при наиболее выраженной активации синтеза СЗ. Для II типа характерно низкое содержание в крови у-ИФ. в острую фазу болезни, но высокая продукция IgM, IgA, IgÖ и

IgE с максимальным уровнем синтеза IgGl. Ill тип характеризуется повышенной (относительно I типа) продукцией IgE и IgG2 при минимальном уровне ситеза IgA и IgG4. IV тип у детей грудного возраста сопряжен с повышенной продукцией только IgE, тогда как у детей старше 2 лет - Ig всех четырех классов. Ассоциирован с самым высоким уровнем накопления ЦИК, дефицитом СЗ и гипореактивностью ИКК при индукции а-ИФ в культуре.

4. Выявленные типы ИО представляют собой острофазовые реакции иммунной системы нарастающей интенсивности, о чем свидетельствует увеличение секреции монокинов ФНО-а и ИЛ-lp, IgM, формирования ЦИК, параллельно с усугублением'дефицита СЗ компонента комплемента, от I к IV типу. Нарастание продукции собственно иммунных факторов защиты сопровождается повышенной секрецией кортизона и тенденцией к увеличению секреции пролактнна в острую фазу ОРВИ при И, III и IV типах ИО в сравнении с I.

5. Обнаружена связь ьммуноактивации (по реактивности ИКК в ФГА-РБТЛ и продукции Ig) со средними (8-32 тыс.) титрами Р-белков н, напротив, иммуносупрессин ♦ с низкими (менее 8 тыс.) или высокими (выше 32 тыс.) значениями показателя. Только два типа ИО - I и III - в острую фазу ОРВИ ассоциированы с определенным диапазоном Концентраций Р-белков (8-32 тыс, и 2-8 тыс. соответственно), тоща как при II и IV типах наблюдается значительный разброс показателя.

6. У детей старше 2 лет проявляется четкая взаимосвязь между типом ИО и клинической формой ОРВИ: число неосложненных ОРВИ: снижается с 45,9% при I типе до 17,6% при IV. В то же время число осложненных форм увеличивается в том же порядке за счет бронхитов (18,9% при I типе, против 53,8% н 52,9% при III и IV типах соответственно) и внелегочных осложнений (0% при 1 типе против 11,8% при IV). Нарастание общей клинической тяжести инфекционного процесса от 1 к IV типу ИО у детей обеих возрастных категорий проявляется также в увеличении числа случаев с синдромом нейротоксикоза: с 33,3% до 66,7% (дети до !г) н с 16,7% до 60%(дети старше 1г).

7. В формировании типов НО существенную роль играет возрастной фактор. Хотя принципиально сходные 4 типа И О обнаружены как у детей первого года жизни, так и у детей от 1г до 7 лет, частота формирования двух из них - И и III - в разных по возрасту группах детей неодинакова. В интервале 1-3 мес. - 5 лет растет число детей, отвечающих при ОРВЧ по II типу - с 17,5% до 47,4%, Напротив, частота ответа no III типу после 4 лег снижается с 15-25% до единичных случаев, Некоторые иммунологические характеристики типов ИО (уровень синтеза моиокинов ФНО-а и ИЛ-lp, Ig, противовирусных AT, чувств»-

тсльность ИКК к антнпролифсративному эффекту Г"К) имеют свои особенности у детей первого года жизни, что в наибольшей мере проявляется в ассоциации с IV типом ИО.

8. В формировании типов ИО участвуют генетические факторы, о чем свидетельствуют достоверные различия между группами детей, реализующих разные типы ИО при ОРВИ, по частоте встречаемости в НЬА-фенонше целого ряда АГ I класса: А 3, А 10, В 5, В 12, В 13, В 21, С\\' 2 и С\У 4.

9. В качестве возбудителя ОРВИ у детей обеих возрастных категорий доминирует вирус гриппа А, который диагностируется в 34-48% случаев, (обычно в сочетании с друшми РВ), без достоверных различий частоты выявления в группах детей, формирующих разные типы ИО. Другие широко распространенные РВ - аденовирусы, вирус парагриппа, вирус гриппа В и РСВ - также выявляются в качестве этиологических агентов ОРВИ примерно с равной частотой при 4 типах ИО. Только два возбудителя - вирус герпеса простого И микоплазма пневмешш -достоверно ассоциированы с IV (у детей грудного бозраста) или с III и IV (у детей от I г до 7 лет) типами ИО. Вирус герпеса простого выявляется у 39-40% детей обеих возрастных категорий, отвечающих по IV типу (против 12-18% детей с I типом И О), преимущественно в сочетании с другими РВ. Микоплазма пневмонии диагностируется у 21,2% детей первого года жизни с IV типом ИО (против 2,6-5% в ассоциации с другими типами), а в старшей возрастной группе - исключительно у дг-тей с III или IV типом ИО (в 13,3% и 12% случаев соответственно).

10. На основании совокупности полученных данных предложена гипотеза, объясняющая формирование типов ИО как результат преимущественной активации клонов Тх, различающихся спектром продуцируемых цитокинов: Тх1-, Тх2- и ТхО-подобных. Вследствие этого формируемые типы ИО различаются мехдзу собой соотношением двух форм ИО - клеточно-опосредованной и гуморальноГ( - в острую фазу болезни и в периоде выздоровления. В острую фазу инфекционного процесса I и Ш типы ассоциированы с превалированием клеточных, а II и IV - гуморальных механизмов ИО. Неодинаковые иммунологические механизмы выздоровления ставят вопрос о необходимости нового .подхода к лечению и нммунокоррекцин, дифференцированного в зависимости от развивающегося типа ИО.

11. Анализ представленного материала позволяет заключить, что величина пролиферативного ответа Т-лимфоцитов в ФГА-РБТЛ характеризует фенотип основного циркулирующего пула активированных в ходе иммуногенеза 7х, поэтому тест ФГА-РБТЛ может быть рекомендован для оценки типа иммунной реактивности детей и взрослых при остром инфекционном процессе любой этиологии.

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1. Иванова В.В., Железникова Г.Ф., Благословенскнй Г.С., Курбатова Г.П., Аксенов O.A., Гнилевская ЗУ., Брук• Г.Я. Функциональная активность 'Г-лимфоцитов при ОРВИ у детей И Иммунология. - 1987.-№ 2. - С.52-55.

2. Железникова Г.Ф., Гнилевская З.У. Метод определения антите-лозависимой цитотоксичностн лимфоцитов человека // Лаб. дело. 1988. - № 1. - С.33-35.

3. Железникова Г.Ф., Благословенскнй Г.С., Гнилевская З.У. Метод изучения исходной регуляторной активности клеток крови в реакции бласттрансформации лимфоцитов// Лаб. дело. - 1989. - № 10. -С.56-59.

" 4. Железникова Г.Ф., Благословенскнй Г.С., Гнилевская З.У. Пролнферативная активность лимфоцитов при острых вирусных инфекциях у детей. Сообщение I. Острые респираторно-вирусные инфекции // Сб. "Детские инфекции" - Л., НИИ детских инфекций, вып. I, 1989.-С.38-41.

5. Иванова В.В., Железникова Г.Ф., Благословенскнй Г.С., Лакоткина Е.А. Особенности функциональной перестройки лимфоид-ной системы при коревом вакцинальном процессе и ОРВИ у детей // Тез. докл. 1 Всесоюзного съезда иммунологов. - М., 1989. - Т. I. - С.216.

6. Железникова Г.Ф., Иванова В.В., Курбатова Г.П., Благо-словенский Г.С., Гнилевская З.У., Аксенов O.A. Функциональная активность Т-лимфоцитов при ОРВИ у детей первого года жизни II Иммунология. - 1990. - ЛЬ 4. - С.54-57.

7. Железникова Г.Ф., Благословенскнй Г.С., Гнилевская З.У. Эффект преинкубации культур цельной крови в реакции бласттрансформации лимфоцитов // Депонир. ВИНИТИ, № 571-В от 5.02.91. Реф. Лаб. Дело. 1991 № 10.-С.79.

8. Железникова Г.Ф., Благословенскнй Г.С., Гнилевская З.У., Курбатова Г.П. Взаимосвязи между показателями иммунного статуса детей первого года жизни при ОРВИ // В сб. "ОРВИ у детей", НИИ гриппа, Л., 1991. - С.38-45-

9. Железникова Г.Ф., Иванова В.В., Аксенов O.A., Гнилевская З.У., Монахова Н.Е., ДробаченкоО.А., Мурнна Е,А., Курбатова Г.П. ' Регуляторные осно&ы вариабельности иммунного ответа при ОРВИ у детей // Тез. докл. I съезда иммунологов России, Новосибирск, 1992. -С.162.

10. Иванова В.В.. Железникова Г'.Ф.', Курбатова ГЛ., Благо-слопенскнн Г.С., Гнилевская Ч.У. Возрастные и типологические особенности иммуноиатоюнеза ОРВИ у детей // Съезд врачей-инфекционистов в г.Суздале. М. - Киров. 1992. - Т. II. - С.14-15.

11. ^Келезникова Г.Ф. Варианты противовирусного иммунного огвсга уличен //Акчуд тьные проблемы инфекционной патологии. Часть 3. Иммунология и биотехнология. С.-Петербург, 1993. - С.28.

12. Желез»школа Г.Ф.. Иванова В.В., Аксенов O.A., Гнилевская ГУ.. Мурннл Г.А.. Курбатова Г.П. Регуляторная активность нмму-нокомпстентных клеток крови в реакции бласттрансформации лимфоцитов у детей при OPBII // Иммунология. Дспонир. в ГЦМБ № Д-22949 о» 10.12.92.

13. Железникова Г.Ф., Росин Ю.А., Иванова В.В., Гнилевская ГУ.. Монахова П.Г., Курбатова Г.П. Иммуносуирессия и электрическая амнвность головного мозга детей при ОРЬ. I (! Мат. снмп. с м/н участием "Нейронммунолошя на пороге XXI века", С.-Петербург, 1493. - С .33-39.

14. Железникова Г.Ф. Mero;u.i определения иммунореактнвности детскою организма (методические рекомендации). С.-Петербург, 1993.

15. Железникова Г.Ф.. Иванова В.В.. Гнилевская З.У., Монахова Н.Г.. Циркулирующие Р-белки и иммунный статус у детей, переносящих ОРВИ // Иммуио.тсмия. - 1993. - № 3. - С.35-37.

16. Железникова Г.Ф., Дробаченко O.A., Иванова В.В. Роль 1снетическНх факторов в формировании вариантов иммунного ответа на ОРВИ у детей И Сб. "Бактериально-вирусные инфекции (пато-морфоло»ия, патогенез, клиника, лечение)", Саратов, 1993. - Часть II. -С.47-52.

17. Железникова Г.Ф. Патогенетическая и иммунорегуляторная роль антител при вирусных инфекциях у детей (гипотеза) // Сб. "Детские инфекции", Вып. 4, НИИ детских инфекций, С.-Петербург, 1994. - C.I2-I4.

18. Железникова Г.Ф.. Иванова В.В., Монахова Н.Е., Гнилевская ' ГУ.. Аксенов O.A., Курбатова Г.П. Гуморальное факторы защиты при разных вариантах иммунного ответа на ОРВИ у детей // Сб. "Детские инфекции". Вып. 4, НИ ИДИ, С.-Петербург, 1994. - С, 35-40.

19. Железникова Г.Ф. Регуляция противовирусного иммунного ответа у детей антителами или комплексами антиген-антитело II Иммунология. - 1994. - №6. - С.61-63.

20. Железникова Г.Ф. Типы стресс-реакции иммунной системы на острый инфекционный процесс у детей // Мат. IV м/н конф. "Нейроиммунологня, нейроинфекции, нейроимидж", С.-Петербург, 1995. - С.26-28.

21. Железникова Г.Ф., Иванова В.В., Мельникова А .В., Аксенов ОА., Монахова Н.Е., Гнилевская Э.У. Типы иммунореактивности при инфекционных заболеваниях у детей // Мат. науЧНо-практ. межрегион, конф. "Микст-инфекции у детей4', С.-Псгербург, 1994 (НИИДИ). - М., 1995. - Часть I. - С.47-57.

22. Железникова Г.Ф. О механизме развития неспецифической иммуносупрессии при вирусных инфекциях //Ж. микробнол. - 1995. - № 5.-С. 122-124.

23. Железникова Г.Ф. Иммунитет против респираторно-вйрусных инфекций у детей (обзор литературы) // Педиатрия. -1995. - № 5. - С.89-93.

24.Железникова Г.Ф., Иванова В.В., Аксенов ОЛ. и др. Экспрессия гуморальных факторов защиты при разных типах иммунного ответа на ОРВИ у детей II Иммунология. - 1996. -МЬ5.- С.48-51.

25. ЖелезЙикова Г.Ф., Иванова В.В., Курбатова Г.П. и др. Новый патогенетический подход к назначению нммунореабилитации реконва-лесЦентаМ 0стрь1Х Инфекций II 1тёгпа1.Х оп 1ттипогеаЬПнаиоп. - 1996. ->Ь2. Р.169.

26. Железникова Г.Ф. Новый аспект применения реакции бласт-трансформацни лимфоцитов, стимулированных фитогемагглютинином (ФГА-РБТЛ) II Тез, докл. Вирусоя. конф. "Гомеостаз и инфекционный процесс". - Саратов, 1996.

Тип. ЬНии$о,зак-зОк пу/т п/цЦо