Автореферат и диссертация по медицине (14.03.05) на тему:Установление наличия крови человека и простатоспецифического антигена в следах на вещественных доказательствах иммунохроматографическим методом
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.03.05
Автореферат диссертации по медицине на тему Установление наличия крови человека и простатоспецифического антигена в следах на вещественных доказательствах иммунохроматографическим методом
На правах рукописи
Михайлова Наталья Николаевна
УСТАНОВЛЕНИЕ НАЛИЧИЯ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА И ПРОСТАТОСПЕЦИФИЧЕСКОГО АНТИГЕНА В СЛЕДАХ НА ВЕЩЕСТВЕННЫХ ДОКАЗАТЕЛЬСТВАХ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
14.03.05 - Судебная медицина
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
1 2 И.-.?
Москва, 2012
005015230
Работа выполнена в ГБОУ ВПО «Тюменская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития РФ».
Научный руководитель:
Заслуженный врач РФ, доктор медицинских наук
Зороастров Олег Маркович
Официальные оппоненты:
Заслуженный врач РФ, доктор медицинских наук, профессор
Новоселов Владимир Павлович
доктор медицинских наук, профессор
Тучик Евгений Савельевич
Ведущая организация: ГБОУ ВПО «Омская Государственная медицинская академия Минздравсоцразвития РФ».
Защита диссертации состоится «7» марта 2012г. в 9.00 часов на заседании диссертационного совета ДМ 208.041.04 при ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет Минздравсоцразвития РФ» по адресу: 125006 г. Москва, Делегатская, д. 20, стр. 1 (4 этаж).
Почтовый адрес: 127473, Москва, ул. Делегатская, 20/1.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет Минздравсоцразвития РФ» (127206, Москва, ул. Вучетича, д. 10 а).
Автореферат разослан ^ » г.
Ученый секретарь диссертационного совета
к.м.н., доцент Т.Ю. Хохлова
Общая характеристика работы
Актуальность исследования
В уголовных преступлениях, особенно направленных против жизни и здоровья граждан (убийства, половые преступления и др.), возникает необходимость проведения судебно-медицинских экспертиз по исследованию вещественных доказательств, на которых имеются различные наложения, подозрительные на пятна крови и/или спермы. В этих случаях задачей судмедэксперта является установление наличия крови, спермы на предметах-носителях (одежда, постельное белье, бытовые предметы), их видовая и групповая принадлежности [Гуртовая C.B. с соавт., 1999; Барсегянц JI.O., Левченков Б.Д., 1978].
Практически все доказательные методы, с помощью которых решается вопрос о присутствии крови в пятнах на предметах-носителях, основаны на выявлении гемоглобина и его производных [Гуртовая C.B. с соавт., 1997]. Наиболее распространенным методом определения крови является метод тонкослойной хроматографии, который требует проведение второго этапа -установление вида найденной крови, на что затрачивается большое количество времени. Кроме того, при применении данного метода может быть получен отрицательный результат из-за воздействия на пятно различных химических и физических факторов. К тому же, при исследовании микроследов этим методом не остается достаточного количества материала для проведения дальнейших этапов исследования, а при необходимости и проведения повторной экспертизы [Барсегянц Л.О., 2005]. Поэтому возникает необходимость научного поиска диагностических методов установления наличия крови, исключающих возможность влияния на результаты исследования различных внешних факторов (физических, химических) и позволяющих определять наличие крови и ее вид одновременно, тем самым сокращая сроки экспертиз, а также экономить материал для дальнейших исследований.
Методы, позволяющие устанавливать наличие спермы в объектах, основаны на обнаружении сперматозоидов. Однако в ряде случаев резко снижается возможность обнаружения сперматозоидов на предметах-носителях, например, для сокрытия преступления (замытые пятна на одежде, гнилостные изменения биоматериала, влияние на пятна внешней среды, лизис сперматозоидов, отсутствие сперматозоидов, связанной с олиго- или аспермией лица, совершившего преступление [Гладких A.C., 1983]. Поэтому также возникает необходимость поиска доказательных диагностических методов, основанных не на морфологическом обнаружении сперматозоидов, а на компонентах спермальной жидкости.
В этой связи проведение данной работы является актуальным и своевременным, имеет важное значение для теории и экспертной практики.
Цель исследования
Оптимизировать диагностику наличия и видовой принадлежности крови и спермы человека в пятнах на вещественных доказательствах иммунохрома-тографическим методом с помощью прибора «Sera Quant».
Задачи исследования
1. Провести сравнительные исследования эффективности применения существующих традиционных методов установления наличия крови и спермы человека на предметах-носителях и иммунохроматографического метода.
2. Изучить возможности использования тест-систем при применении иммунохроматографического метода для обнаружения крови и спермы на вещественных доказательствах и определения их видовой принадлежности.
3. Обосновать медико-техническое условия применение прибора «Sera Quant» для целей экспертной оценки результатов иммунохроматографического метода исследования при определении крови и спермы человека.
Научная новизна исследования Впервые доказано преимущество применение иммунохроматографического метода и использования тест-систем для обнаружения крови и спермы
на вещественных доказательствах и определения их видовой принадлежности. И дано этому теоретическое подтверждение.
Впервые дано научное обоснование медико-техническим условиям применения прибора «Sera Quant» для выявления наличия крови и спермы человека на вещественных доказательствах, объективизации экспертных выводов.
Оптимизирована диагностика наличия и видовой принадлежности крови и спермы, и показана доказательность, достоверность и наглядность полученных результатов, что определило алгоритмы применения методов.
Практическая значимость работы
1. Показана возможность практического применения иммунохромато-графического метода с объективной его оценкой, с использованием прибора «Sera Quant», позволяющего одномоментно устанавливать наличие и вид крови, значительно сокращая технологический процесс исследования и сохраняя большую часть объекта для дальнейшего исследования.
2. Выявленные преимущественные характеристики примененного метода исследования позволяют рекомендовать его в экспертной практике, когда при установлении наличия крови и ее вида с использованием других методов получен отрицательный результат.
3. Полученные данные позволяют рекомендовать применение в экспертной практике иммунохроматографического метода с использованием прибора «Sera Quant» для обнаружения спермы, даже при отсутствии в ней сперматозоидов. Ввиду простоты его использования, экономичности во времени и высокой доказательности этот метод может рассматриваться, как метод экс-пересс-диагности и может быть применен в учреждениях судебно-медицинской экспертизы, медико-криминалистических лабораториях правоохранительных органов.
Основные положения, выносимые на защиту
1. Иммунохроматографический метод с использованием тест-систем и прибора «Sera Quant» обладает преимуществами перед другими (рутинными) методами исследования, заключающимися в возможности установления на-
линия и вида крови даже в минимальных по объему пятнах, причем одновременно. Применение его позволяет выявить кровь и сперму в пятнах в случае отрицательного результата при применении других методов исследования, обусловленного влиянием побочных факторов, а также значительно сократить время исследования, часть объекта, даже при небольшом его количестве, для дальнейшего исследования.
2. Используя тест-кассеты и прибор «Sera Quant» можно устанавливать наличие спермы без морфологического определения в ней сперматозоидов, что позволяет в отдельных случаях исключить отрицательный результат, полученный при применении других методов исследования.
3. Применение прибора «Sera Quant» для оценки результатов исследования позволяет повысить объективность и доказательность экспертных выводов при расследовании преступлений, связанных с противоправными действиями против жизни и здоровья граждан.
Внедрение результатов исследования
Результаты исследований внедрены в работу Тюменского областного бюро судебно-медицинской экспертизы, в учебный процесс на кафедре судебной медицины ГБОУ ВПО «Тюменская Государственная медицинская академия», а также в работу Новосибирского, Челябинского, Кировского областных бюро судебно-медицинской экспертизы и Ямало-ненецкого окружного бюро судебно-медицинской экспертизы.
Личное участие
Автором лично было проведено иммунохроматографическое исследование, часть цитологического исследования, частично установление наличия крови методом тонкослойной хроматографии и определение ее вида. В ходе сбора материала для диссертационной работы соискателем был освоен им-мунохроматографический метод и прибор «Sera Quant».
Апробация материалов работы
Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Межрегиональной научно-практической конференции с международным участием
«Актуальные вопросы судебно-медицинской теории и практики», посвященной 75-летию судебно-медицинской службы Кировской области, г. Киров, 27 мая 2010 г. На межрегиональной научно-практической конференции «Проблемы судебно-медицинской идентификации объектов, явлений, процессов», посвященная 90-летию кафедры судебной медицины самарского государственного медицинского университета Самара 9 июня 2011 г. На межкафедральном заседании ГБОУ ВПО «Тюменская Государственная медицинская академия» (протокол № 1 от 26 октября 2011 г), с участием кафедры судебной медицины, патологической анатомии, нормальной анатомии, гистологии, оперативной хирургии и топографической анатомии.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем диссертации
Работа изложена на 102 страницах машинописного текста, включает 12 таблиц, 48 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, изложения материала и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, 126 указателей литературы, включающих 64 источников на русском и 62 на иностранных языках.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы
Объектами исследования являлись вещественные доказательства, поступавшие для проведения судебно-медицинской экспертизы в судебно-биологическое отделение Тюменского областного бюро судебно-медицинской экспертизы.
Для исследования пятен крови на вещественных доказательствах, с целью установления наличия крови, был использован метод тонкослойной хроматографии на пластинках «Сорбфил». Для исследования было взято 81891 смыв, вытяжки и соскобы с вещественных доказательств. После уста-
новления крови в пятнах (кровь была найдена в 51680 случаях) производили установление ее вида крови методом иммуноэлетрофореза и методом по Оухтерлони в агаровом геле.
Для одномоментного установления вида и наличия крови иммунохрома-тографическим методом с помощью тест-кассет Seratec HemDirect, было проведено 1671 исследование.
Наличие спермы устанавливали цитологическим методом. Исследовано было 18596 объектов. На исследование брали мазки и тампоны из прямой кишки, влагалища и ротовой полости, пятна подозрительные на присутствие спермы, замытые и «старые» пятна, пятна подвергшиеся уничтожению. В случае наличия спермы при микроскопическом исследовании на предметных стеклах обнаружены сперматозоиды - 3135 случаев.
Для установления наличия PSA иммунохроматографическим методом с помощью тест-системы SERATEC® PSA Semiquant было проведено 1059 исследований.
Для реализации цели и поставленных задач, для сравнительной оценки примененных методов по установлению наличия и вида крови, наличия спермы проведено исследование иммунохроматографическим методом с использованием тест-кассет «Seratec HemDirect», «Seratec PSA» и прибора Sera Quant.
Тесты Seratec HemDirect и Seratec PSA Semiquant (тесты для иммуно-хроматографического одноэтапного определения гемоглобина человека и простатоспецифического антигена) - рис. 1.
Рисунок 1
Тест-кассета схема.
ВИЛСВКРХУ
ВИД В ft\3PE3E
Тесты имеют высокую специфичность, вероятность ложноположитель-ного ответа практически нулевая. Чувствительность, т.е. минимальная определяемая концентрация антигена, соответствуют международным значениям, характеризующим искомый показатель.
В работе был использован прибор БегаС^иаЩ — прибор для количественного анализа мембранных тестов и документации результатов - рис. 2.
Рисунок 2
Прибор 8егаС)иап1
Принцип работы прибора - вычисление концентрации исследуемого вещества на основе анализа интенсивности образующихся полос.
Автоматическое обнаружение полос и считывание данных из релевантных участков снимка, автоматическое распознавание участков поверхности, необходимых для вычисления (проявленных полос), предварительная интерполяция базисной кривой, полученной при съёмке пустой (белой) тест-кассеты, поиск максимума функций, заданных в файлах конфигурации, определение цветовой интенсивности: 50 оттенков серого цвета, суммирование пикселей со значениями интенсивности, результат в виде интеграла, автоматический контроль помех (так называемый Dust-Factor).
Иммунохроматографическим методом было проведено 1671 исследование для установления наличия гемоглобина человека.
Исследование объектов иммунохроматографическим методом проводили в трех случаях.
1. Выборочно иммунохроматографическим методом исследовали случаи с первоначальным отрицательным результатом при использовании метода тонкослойной хроматографии.
2. Вторая группа исследований методом иммунохроматографии проводилась выборочно из тех случаев, когда методом тонкослойной хроматографии выявляли кровь, но установить ее вид в агаровом геле и методом имму-ноэлектрофореза не удавалось.
3. Исследования в третьей группе методом иммунохроматографии проводилась в случаях, когда первоначально количество исследуемого материала на вещественных доказательствах было незначительным, и исследование начинали сразу с иммунохроматографического метода.
При работе с тестами применительно к следам спермы на вещественных доказательствах нами было поставлено большое число различных опытов.
Из отрицательных результатов при цитологическом исследовании, для дальнейшего исследования методом иммунохроматографии для установления наличия PSA было взято 1059 случаев. Это выборочно случаи по половым преступлениям, а также объекты, в которых под действием химических и физических факторов предположительно могло произойти разрушение сперматозоидов.
Математическая обработка материалов исследования включала методы описательной статистики с определением: доверительных интервалов удельного веса, предельной ошибки выборки с вероятностью 0,997. [Г.Ф. Лакин, 1990; С.Гланц, 1998].
Результаты собственных исследований
Этапы приведенных реакций исследования строились исходя из алгоритма судебно-медицинского исследования объектов, в которых предположительно имеется кровь. Этот алгоритм состоял из исследования для установления наличия крови. В тех объектах, где обнаружили кровь, определяли ее видовую принадлежность, а затем групповую характеристику.
Для установления наличия крови большинство пятен исследовали с помощью метода тонкослойной хроматографии (табл. 1, рис. 3).
Таблица 1
Общее число исследований методом тонкослойной хроматографии.
метод всего положит.результат отрицат.результат
тонкослойная хроматография 81891 51680 30211
Рисунок 3
Установление наличия крови методом тонкослойной хроматографии.
Установление наличия крови методом тонкослойной хроматографии
£3 положительный результат ш отрицательный результат
Таким образом, в 63 % случаев была найдена кровь, и в дальнейшем с этими пятнами была продолжена работа, по установлению вида крови и в последующем, если кровь принадлежала человеку, то ее группы.
Вид устанавливали методом иммуноэлектрофореза в агаровом геле и в бессолевом агаре по Оухтерлони.
Методом встречного иммуноэлектрофореза было исследовано 35736 вытяжек. Методом преципитации в агаре (по Оухтерлони) 15944 вытяжки (рис.4).
Рисунок 4
Количество исследований по установлению вида крови.
Количество исследований по опредеелнию вида крови
В результате определения вида в 45995 случаях была установлена человеческая кровь, в 4135 кровь животного и в 1530 случаях вид не был установлен.
Таким образом, использование метода тонкослойной хроматографии для установления наличия крови требует второго этапа исследования по установлению вида найденной крови.
Для сравнительной оценки примененных методов по установлению наличия и вида крови использовали метод иммунохроматографии с использованием тест-кассет 8ега1ес НетОцей. Метод иммунохроматографии позволяет одновременно определить наличие и видовую принадлежность крови.
Для проверки работы этого метода нами было поставлено порядка 200 различных опытов - кровь человека в разведениях до 1:1000; кровь животных (рогатый скот, собака), экстрагирующая среда, незапятнанные предметы-носители, смешанные следы крови человека и животного, выделения человека в различных разведениях, физиологический раствор. Полученные результаты четко и убедительно свидетельствовали о высокой чувствительности и строгой специфичности теста.
Из 30211 отрицательных результатов, при тонкослойной хроматографии выборочно иммунохроматографическим методом с оценкой результата с
помощью прибора «Sera Quant» исследовали 843 случая. Это были участки наиболее подозрительные на присутствие крови (орудия убийства, замытые следы, следы, возможно подвергшиеся уничтожению и воздействию химических и физических факторов). В результате исследования было получено 383 положительных и 460 отрицательных результата (рис. 5).
Рисунок 5
Иммунохроматографическое исследование (повторное исследование при отрицательном результате при проведении тонкослойной хроматографии).
Повторное исследование при первоначальном отрицательном результате
□ положительный
результат И отрицательный результат
Это позволило сделать вывод, что в исследуемых ранее объектах, где методом тонкослойной хроматографии кровь не была найдена, в 45 % случаях методом иммунохроматографии установлена кровь человека. Но в 55 % случаев (460 объектов) отрицательный при тонкослойной хроматографии результат подтвердился и методом иммунохроматографии. При этом 40,39% < р < 50,47%.
Таким образом, из 843 случаев при отрицательном первоначальном результате нами в 45 % доказано присутствие крови человека.
В некоторых случаях, когда методом тонкослойной хроматографии констатирован факт наличия крови в объекте, последующими методами иммуно-электрофореза и определения вида в бессолевом агаре вид не удавалось установить.
Таких случаев было 348 (табл. 2). В результате исследования методом иммунохроматографии с оценкой результата с помощью прибора «Sera Quant» в 28% вытяжек был сделан вывод о принадлежности найденной крови человеку (рис. 6). В остальных объектах (в 252) вид крови так и не был установлен - параллельно контрольной полосе полосы соответствующей положительному результату так и не появилось.
Таблица 2
Иммунохроматографическое исследование (установление вида крови
при невозможности определить вид рутинными методиками).
метод всего положительный результат отрицательный результат
иммунохроматография 348 96 252
Рисунок 6
Положительный результат с оценкой результата с помощью прибора «Sera Quant».
Параметр: Hb
Тип лест-кассеты: HemDIiect fresh after 10 minutes
Номер партии: 31191-fresh-lOniin
Срок годности: дек-2009
Производитель: SERATEC Ges. f. Biotechnologie mbH, Güttingen
Это показывает, что применение только метода тонкослойной хроматографии для исследования пятен на наличие крови не позволяет при положи-
тельном результате говорить о наличии крови человека, тогда как, при поло-
жительном результате иммунохроматографии доказывается присутствие именно крови человека.
С целью сохранения материала для дальнейшего установления в следах группы крови в микроследах было проведено иммунохроматографическое исследование с оценкой результатов с помощью прибора «Sera Quant». Таких исследований было 480 (рис. 7).
Рисунок 7
Иммунохроматографическое исследование в случае незначительного количества материала.
Иммунохроматографическое исследование в случае незначительного количества материала
260; 54%
220; 46%
□ положительный результат ■ отрицательный результат
Таким образом, в изначально небольшом количестве материала, а чаще всего в замытых и «старых» пятнах, участках на вещественных доказательствах, где визуально кровь не обнаруживалась, нами в 46% случаев выявлена кровь человека и одновременно установлено, что это кровь именно человека.
Для установления наличия спермы было проведено 18596 цитологических исследований. В результате исследования сперма была найдена в 3135 препаратах, в 15461 препарате сперматозоиды не были обнаружены (табл. 3).
Таблица 3
Результаты цитологического исследования по установлению наличия
сперматозоидов.
метод всего положительный результат отрицательный результат
цитологический 18596 3135 15461
Для сравнительной оценки применяемых методов было проведено им-мунохроматографическое исследование. Исследование проводили с использованием тест-кассет Seratec PSA Semiquant и прибора «Sera Quant».
Для проверки работы этого метода нами было поставлено порядка 240 экспериментальных опыта - разведения спермы до 1:500; слюна человека, кровь человека, смешанные пятна крови и спермы, физиологический раствор, сперма кошки и сперма собаки. Полученные результаты четко и убедительно свидетельствовали о высокой чувствительности и строгой специфичности теста.
При использовании для исследования тест-кассет о наличие спермы в объекте судят по определению простатоспецифического антигена, как компонента спермы.
Из 15461 отрицательного результата (при цитологическом исследовании) для дальнейшего исследования методом иммунохроматографии для установления наличия PSA было взято 1059 случаев. Это все случаи, где отрицательный результат мог быть связан с влиянием на пятно химических и физических факторов, разрушением сперматозоидов, олиго- и аспермией (табл. 4, рис.7).
Рисунок 7
Иммунохроматографическое исследование для установления наличия
PSA.
566; 53%
Наличие PSA
□ положительный результат
отрицательный результат
493; 47%
Таблица 4
Иммуиохроматографическое исследование (установление PSA при отрицательном результате при цитологическом исследовании)._
метод всего положительный результат отрицательный результат
иммунохроматография 1059 493 566
В итоге, при изначально отрицательном результате (при цитологическом исследовании) методом иммунохроматографии в 47% случаев было установлено присутствие спермы (за счет выявления простатоспецифического антигена), и только в 53% случаев первоначальный отрицательный результат повторился.
Особое внимание мы уделили обнаружению PSA с помощью прибора «Sera Quant» в прямой кишке трупов мужского пола. Для этого нами было исследовано 30 тампонов с содержимым прямой кишки трупов мужчин в возрасте от 15 до 60 лет. В результате проведенных исследований нами был сделан вывод, что в связи с тем, что прямая кишка и простата находятся в непосредственной близости друг от друга, и их стенки плотно соприкасаются между собой, у трупа происходит пропотевание сока семенной жидкости в прямую кишку, а сперматозоиды из-за своих значительных размеров не могут проникнуть в прямую кишку через ее стенку. Поэтому обнаружение PSA иммунохроматографическим методом с помощью прибора «Sera Quant» в содержимом прямой кишки трупов мужского пола не может служить доказательством наличия в ней спермы, без подтверждения этого цитологическим методом.
Выводы
1. Иммунохроматографический метод с использованием тест-систем Se-ratec HemDirect обладает, по сравнению с традиционными методами, высокой чувствительностью и специфичностью. Метод позволяет устанавливать наличие крови человека в пятнах, на различных предметах-носителях, подвергшихся влиянию физических или химических факторов.
2. Иммунохроматографический метод с использованием прибора «Sera Quant» позволяет дать количественную оценку результата определить содержание гемоглобина человека и простатоспецифического антигена, что повышает объективизацию полученных данных.
3. Применение иммунохроматографического метода с использованием тест-систем Seratec HemDirect позволяет устанавливать наличие крови в микроследах и дает возможность сохранить материал для дальнейшего исследования. Также определение наличия и принадлежности крови человеку происходит одномоментно, что значительно сокращает время проведения экспертизы.
4. Иммунохроматографический метод с использованием тест-систем Seratec PSA Semiquant и прибора «Sera Quant» позволяет устанавливать наличие спермы в пятнах, в которых при использовании морфологических методов был получен отрицательный результат.
Практические рекомендации
1. При отрицательном результате исследования на наличие крови с использованием метода тонкослойной хроматографии, когда такой результат может быть обусловлен влиянием на пятна различных физических и химических факторов можно применить иммунохроматографический метод с использованием тест-кассет Seratec HemDirect и прибора «Sera Quant», который позволяет устанавливать наличие крови и при таких обстоятельствах.
2. Применение иммунохроматографического метода исследования целесообразно при необходимости исследовать небольшое количество материала, так как метод позволяет одномоментно устанавливать наличие крови и устанавливать ее принадлежность человеку. Использование прибора «Sera Quant» повышает объективную оценку полученных результатов, из-за возможности количественного определения гемоглобина человека.
3. Иммунохроматографический метод исследования с помощью тест-кассет Seratec PSA Semiquant и прибора «Sera Quant» следует использовать в случае отрицательного результата при цитологическом исследовании на наличие спермы. Метод обладает высокой специфичностью и чувствительностью при установлении простатоспецифического антигена.
4. Так как иммунохроматографический метод позволяет обеспечить высокую наглядность полученных результатов исследования, то его можно использовать для оформления необходимых иллюстраций прилагаемых к заключению эксперта.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Михайлова H.H., Зороастров О.М. О перспективе применения прибора Sera Quant для количественного анализа мембранных тестов при исследовании судебно-биологических объектов // Актуальные вопросы судебной медицины и экспертной практики : межрегиональная ассоциация «Судебной медицины Сибири», Новосибирск, 2009. - Вып. 15. - С. 267-268.
2. Михайлова H.H., Зороастров О.М., Вдовина Н.Р. Практическое использование прибора SeraQuant для выявления гемоглобина человека при исследовании судебно-биологических объектов // Актуальные вопросы судебной медицины и экспертной практики : межрегиональная ассоциация «Судебной медицины Сибири», Новосибирск, 2009. - Вып. 15. - С. 269-271.
3. Михайлова H.H., Зороастров О.М.Определение гемоглобина человека на вещественных доказательствах с помощью тестов SERATEC® HemDirect и прибора SeraQuant // Медицинская наука и образование Урала, 2009. -№4.-С. 90-91.
4. Михайлова H.H., Зороастров О.М. Определение наличия простатоспецифического антигена на вещественных доказательствах с помощью тестов SERATEC® PSA Semiquant и прибора SeraQuant // Проблемы экспертизы в медицине, 2009. - Ижевск. - № 4. - С 40 - 42.
5. Михайлова H.H., Зороастров О.М. Обнаружение простатоспецифического антигена и результаты исследований с помощью тестов SERATEC®
PSA Semiquant и прибора SeraQuant // Актуальные вопросы судебно-медицинской науки и практики : материалы межрегиональной научно-практической конференции с международным участием, посвященной 75-летию судебно-медицинской службы Кировской области. - Киров, 2010. - С 404-409.
6. Михайлова H.H. Результаты исследования по определению наличия гемоглобина человека и простатоспецифического антигена в следах на вещественных доказательствах // Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной, клинической медицины и фармации : материалы 45-й Всероссийской научной конференции с международным участием студентов и молодых ученых. -Тюмень,2011.-С279.
7. Михайлова H.H., Зороастров О.М.Результаты исследования по определению наличия гемоглобина человека и простатоспецифического антигена в следах на вещественных доказательствах с помощью тестов SERATEC® HemDirect SERATEC® PSA и прибора SeraQuant // Медицинская экспертиза и право, 2011. - № 3. - С. 35-37.
8. Михайлова H.H., Зороастров О.М.Результаты определения наличия гемоглобина человека и простатоспецифического антигена на вещественных доказательствах с помощью тестов SERATEC® HemDirect, PSA SEMIQUANT и прибора SeraQuant // Медицинская наука и образование Урала, 2011. - № 3. - С. 40 - 42.
Подписано в печать с готового оригинала-макета 24.01.2012 г.
Формат А5. Бумага офсетная. Печать цифровая. Гарнитура «Times Nem Roman» Тираж 75 экз. Заказ №29579 Отпечатано «Onebook.ru» ООО «САМ Полиграфист» 127090, г. Москва, Протопоповский переулок, д.6 Телефон/факс: (495) 225-37-10 (многоканальный) Сайт: www.onebook.ru
Оглавление диссертации Михайлова, Наталья Николаевна :: 2012 :: Москва
ОГЛАВЛЕНИЕ.
СОКРАЩЕНИЯ, ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ В РАБОТЕ.
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Основные доказательные методы установления наличия крови на вещественных доказательствах.
1.2. Методы определения видовой принадлежности крови.
1.3. Доказательные методы установления наличия спермы.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Описание рутинных методик исследования.
2.1.1. Определение наличия и вида крови.
2.1.2. Установление наличия спермы.
2.2. Иммунохроматографический способ.
2.2.1. Описание прибора "Sera Quant".
2.2.2. Исследование крови.
2.2.3. Исследование спермы.
2.3. Статистическая обработка данных.
2.3.1. Данные по определению простатоспецифического антигена.
2.3.2. Данные по определению гемоглобина человека.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Результаты исследования крови.
3.2. Результаты исследования спермы
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.
Введение диссертации по теме "Судебная медицина", Михайлова, Наталья Николаевна, автореферат
В уголовных преступлениях, особенно направленных против личности значительное место занимает назначение и проведение судебно-медицинских экспертиз по исследованию вещественных доказательств, связанных с исследованием объектов в которых подозревается наличие крови, а при половых преступлениях с исследованием объектов подозрительных на присутствие спермы. Как правило, в объектах, в которых подозревается присутствие крови на предметах носителях (орудия преступления, одежда, мебель и другие различные предметы), следы бывают в виде пятен, помарок, затеков, отпечатков, брызг. Задачей судмедэксперта является установление наличия крови, определение ее вида и групповой принадлежности [Гуртовая C.B., Тучик JI.H., Курджиева О.Б., 1999]. В объектах подозрительных на присутствие спермы, в качестве объектов могут быть мазки, тампоны, пятна на предметах носителях (одежда, постельное белье, бытовые предметы). Задача эксперта при исследовании таких объектов установить наличие спермы и определить ее групповую принадлежность [Барсегянц JI.O., Левченков Б.Д., 1978].
Актуальность проблемы
Практически все доказательные методы, с помощью которых решается вопрос о присутствии крови, основаны на обнаружении в пятнах гемоглобина и его производных [Гуртовая C.B., Первушина Е.А., Первушина Ю.В., 1997].
На сегодняшний день наиболее распространенным методом определения крови (основанный на обнаружении производных гемоглобина) является метод тонкослойной хроматографии. Но применение этого метода требует проведение второго этапа для установления вида найденной крови. На проведение этих этапов требуется затрата значительного времени. Кроме того, при применении метода тонкослойной хроматографии может быть получен отрицательный результат при воздействии на пятно различных химических и физических факторов. При исследовании микроследов, при использовании метода тонкослойной хроматографии может не остаться материала для проведения дальнейших этапов исследования. Поэтому очень актуальным является найти методы для исследования крови, которые позволяют одномоментно определить наличие и ее вид крови, сохраняя материал для дальнейшего исследования, и позволяющие сократить время всего хода исследования. А также актуальным является, чтобы эти методы устанавливали наличие и вид крови независимо от влияния химических и физических факторов, экономить материал для дальнейшего исследования. Поэтому исследования направленные на решение этих задач являются актуальными.
В качестве метода, удовлетворяющим все вышеперечисленные условия может быть метод, который мы и применили в нашем исследовании. Это метод иммунохроматографии с использованием тест-кассет. А также актуальным при применении этого метода явилось изучение возможности иммуно-хроматографического метода для объективной оценки результатов и их количественной оценки с помощью прибора «Sera Quant».
Доказательными методами определения спермы, являются методы, основанные на обнаружении сперматозоидов. Поиск метода позволяющим доказать присутствие спермы без обнаружения сперматозоидов является на сегодняшний день также актуальным. При исследовании спермы встречаются ситуации, когда отсутствуют сперматозоиды (олиго-, аспермия). Поэтому методы, основанные не на морфологическом обнаружении сперматозоидов, а на компонентах спермальной жидкости являются актуальными.
Проблема с обнаружением следов спермы возникает в старых, замытых, подвергшихся уничтожению пятнах [Барсегянц JI.O., 2005]. Не всегда на вещественных доказательствах достаточное количество спермы для установления ее наличия методом концентрированного извлечения сперматозоидов
Гладких A.C., 1983]. В ряде случаев (недостаточное количество семенной жидкости, аспермия или олигоспермия, пятна, подвергшиеся изменениям (гнилостным, под воздействием внешней среды, лизис сперматозоидов в прямой кишке)) приводят к тому, что визуально обнаружить сперматозоиды не представляется возможным [Барсегянц JT.O., 2005]. Поэтому актуальным является поиск методик расширяющих возможности обнаружения спермы и при таких условиях. В этом случае уместно использование тест-кассет.
Таким образом, изучение возможности применения иммунохроматогра-фических тестов для судебно-медицинского анализа SERATEC HemDirect и PSA SEMIQUANT (иммунохроматографические тесты для судебно-медицинского анализа, определяющие гемоглобин человека (Hb) и проста-тоспецифический антиген (PSA)) является актуальным, тем более что тесты могут быть использованы непосредственно на месте преступления.
Достоверность, специфичность и объективность исследования в ничтожно малых или подвергшихся уничтожению следах является на сегодняшний день одной из актуальных проблем в судебной медицине.
Цель исследования
Оптимизировать диагностику наличия и видовой принадлежности крови и спермы человека в пятнах на вещественных доказательствах иммунохрома-тографическим методом с помощью прибора «Sera Quant».
Задачи исследования
1. Провести сравнительные исследования эффективности применения существующих традиционных методов установления наличия крови и спермы человека на предметах-носителях и иммунохроматографического метода.
2. Изучить возможности использования тест-систем при применении им-мунохроматографического метода для обнаружения крови и спермы на вещественных доказательствах и определения их видовой принадлежности.
3. Обосновать медико-техническое условия применение прибора «Sera Quant» для целей экспертной оценки результатов иммунохроматографиче-ского метода исследования при определении крови и спермы человека.
Научная новизна исследования
Впервые доказано преимущество применение иммунохроматографиче-ского метода и использования тест-систем для обнаружения крови и спермы на вещественных доказательствах и определения их видовой принадлежности. И дано этому теоретическое подтверждение.
Впервые дано научное обоснование медико-техническим условиям применения прибора «Sera Quant» для выявления наличия крови и спермы человека на вещественных доказательствах, объективизации экспертных выводов.
Оптимизирована диагностика наличия и видовой принадлежности крови и спермы, и показана доказательность, достоверность и наглядность полученных результатов, что определило алгоритмы применения методов.
Практическая значимость
1. Показана возможность практического применения иммунохромато-графического метода с объективной его оценкой, с использованием прибора «Sera Quant», позволяющего одномоментно устанавливать наличие и вид крови, значительно сокращая технологический процесс исследования и сохраняя большую часть объекта для дальнейшего исследования.
2. Выявленные преимущественные характеристики примененного метода исследования позволяют рекомендовать его в экспертной практике, когда при установлении наличия крови и ее вида с использованием других методов получен отрицательный результат.
3. Полученные данные позволяют рекомендовать применение в экспертной практике иммунохроматографического метода с использованием прибора «Sera Quant» для обнаружения спермы, даже при отсутствии в ней сперматозоидов. Ввиду простоты его использования, экономичности во времени и высокой доказательности этот метод может рассматриваться, как метод экс-пересс-диагности и может быть применен в учреждениях судебно-медицинской экспертизы, медико-криминалистических лабораториях правоохранительных органов.
Основные положения, выносимые на защиту
1. Иммунохроматографический метод с использованием тест-систем и прибора «Sera Quant» обладает преимуществами перед другими (рутинными) методами исследования, заключающимися в возможности установления наличия и вида крови даже в минимальных по объему пятнах, причем одновременно. Применение его позволяет выявить кровь и сперму в пятнах в случае отрицательного результата при применении других методов исследования, обусловленного влиянием побочных факторов, а также значительно сократить время исследования, часть объекта, даже при небольшом его количестве, для дальнейшего исследования.
2. Используя тест-кассеты и прибор «Sera Quant» можно устанавливать наличие спермы без морфологического определения в ней сперматозоидов, что позволяет в отдельных случаях исключить отрицательный результат, полученный при применении других методов исследования.
3. Применение прибора «Sera Quant» для оценки результатов исследования позволяет повысить объективность и доказательность экспертных выводов при расследовании преступлений, связанных с противоправными действиями против жизни и здоровья граждан.
Внедрение результатов работы
Результаты исследований внедрены в работу Тюменского областного бюро судебно-медицинской экспертизы, в учебный процесс на кафедре судебной медицины ГБОУ ВПО «Тюменская Государственная медицинская академия», а также в работу Новосибирского, Челябинского, Кировского областных бюро судебно-медицинской экспертизы и Ямало-ненецкого окружного бюро судебно-медицинской экспертизы.
Личное участие
Автором лично было проведено иммунохроматографическое исследование, часть цитологического исследования, частично установление наличия крови методом тонкослойной хроматографии и определение ее вида. В ходе сбора материала для диссертационной работы соискателем был освоен им-мунохроматографический метод и прибор «Sera Quant».
Апробация работы
Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Межрегиональной научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы судебно-медицинской теории и практики», посвященной 75-летию судебно-медицинской службы Кировской области, г. Киров, 27 мая 2010 г. На межрегиональной научно-практической конференции «Проблемы судебно-медицинской идентификации объектов, явлений, процессов», посвященная 90-летию кафедры судебной медицины самарского государственного медицинского университета Самара 9 июня 2011 г. На межкафедральном заседании ГБОУ ВПО «Тюменская Государственная медицинская академия» 26 октября 2011 г, с участием кафедры судебной медицины, патологической анатомии, гистологии, нормальной анатомии, оперативной хирургии и топографической анатомии.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем диссертации
Работа изложена на 102 страницах машинописного текста, включает 12 таблиц, 48 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, изложения материала и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, 126 указателей литературы, включающих 64 источников на русском и 62 на иностранных языках.
Заключение диссертационного исследования на тему "Установление наличия крови человека и простатоспецифического антигена в следах на вещественных доказательствах иммунохроматографическим методом"
ВЫВОДЫ
1. Иммунохроматографический метод є использованием тест-систем Se-ratec HemDirect обладает, по сравнению с традиционными методами, высокой чувствительностью и специфичностью. Метод позволяет устанавливать наличие крови человека в пятнах, на различных предметах-носителях, подвергшихся влиянию физических или химических факторов.
2. Иммунохроматографический метод с использованием прибора «Sera Quant» позволяет дать количественную оценку результата определить содержание гемоглобина человека и простатоспецифического антигена, что повышает объективизацию полученных данных.
3. Применение иммунохроматографического метода с использованием тест-систем Seratec HemDirect позволяет устанавливать наличие крови в микроследах и дает возможность сохранить материал для дальнейшего исследования. Также определение наличия и принадлежности крови человеку происходит одномоментно, что значительно сокращает время проведения экспертизы.
4. Иммунохроматографический метод с использованием тест-систем Seratec PSA Semiquant и прибора «Sera Quant» позволяет устанавливать наличие спермы в пятнах, в которых при использовании морфологических методов был получен отрицательный результат.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИЮ!
1. При отрицательном результате исследования на наличие крови с использованием метода тонкослойной хроматографии, когда такой результат может быть обусловлен влиянием на пятна различных физических и химических факторов можно применить иммунохроматографический метод с использованием тест-кассет Seratec HemDirect и прибора «Sera Quant», который позволяет устанавливать наличие крови и при таких обстоятельствах.
2. Применение иммунохроматографического метода исследования целесообразно при необходимости исследовать небольшое количество материала, так как метод позволяет одномоментно устанавливать наличие крови и устанавливать ее принадлежность человеку. Использование прибора «Sera Quant» повышает объективную оценку полученных результатов, из-за возможности количественного определения гемоглобина человека.
3. Иммунохроматографический метод исследования с помощью тест-кассет Seratec PSA Semiquant и прибора «Sera Quant» следует использовать в случае отрицательного результата при цитологическом исследовании на наличие спермы. Метод обладает высокой специфичностью и чувствительностью при установлении простатоспецифического антигена.
4. Так как иммунохроматографический метод позволяет обеспечить высокую наглядность полученных результатов исследования, то его можно использовать для оформления необходимых иллюстраций прилагаемых к заключению эксперта.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Михайлова, Наталья Николаевна
1. Александрова В. Ю. Иммунологические методики в комплексном анализе микрообъектов судебно-биологической экспертизы: Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2008. 18 с.
2. Барсегянц Л.О. Судебно-медицинское исследование вещественных доказательств (кровь, выделения, волосы): рук. для судеб, медиков / JI. О. Барсегянц. М., Медицина, 1999. - 271 с.
3. Барсегянц Л.О. Судебно-медицинское исследование вещественных доказательств. / М.: Медицина, 2005. 447 с.
4. Барсегянц JI.O. Современное состояние судебно-медицинского исследования вещественных доказательств и пути развития. // Судебно-медицинская экспертиза, 2004. № 5. - 25-27 с.
5. Барсегянц Л.О., Левченков Б.Д. Судебно-медицинская экспертиза выделений организма / Москва, 1978. С. 10.
6. Барсегянц Л.О., Крюков В.Н., Солохин A.A. и др. Судебная медицина.-М.: Медицина, 1997. -415 с.
7. Барсегянц Л.О. // Судебная медицина / Под ред. В.В. Томилина. М., 1997.-С. 241-278.
8. Бронникова, М. А. Диагностика групповой принадлежности выделений человека при "парадоксальном" выделительстве / М. А. Бронникова, М. С. Свирский, Т. В. Стегнова // Судеб.-мед. экспертиза. 1984. - №3. -С. 40-43.
9. Бронникова М. А. Особенности судебно-биологической экспертизы следов крови малой величины : метод, рек. / М. А. Бронникова, М. В. Кисин, Т. В. Стегнова ; ВНИИ МВД СССР М., 1988. - 78 с.
10. Бронникова М.А., Гаркави A.C. Методика и техника судебно-медицинской экспертизы вещественных доказательств. / М., Медгиз, 1963-С. 235.
11. Бронникова М.А., Кисин М.В., Стегнова Т.В. Особенности судебно-биологической экспертизы следов крови малой величины // ВНИИ МВД СССР -М., 1982 80 с.
12. Вопросы судебно-медицинской экспертизы и криминалистики: тезисы докладов к научно-практической конференции / подготовлен А.П. Загряд-ской; Чебоксары, Горький, 1980. - 98 с.
13. Гладких A.C. Перспективные направления судебно-медицинских исследований волос и следов спермы. // Судебно-медицинская экспертиза, 1983. N 4.-27-29 с.
14. Гланц С. Медико-биологическая статистика / Пер. с англ. М.: Практика, 1998.-459 с.
15. Гуртовая C.B., Тучик Л.Н., Курджиева О.Б. Некоторые новые возможности при работе с пятнами крови на вещественных доказательствах. // Сборник научных статей по судебной биологии, Москва, 1999. С. 34-37.
16. Гуртовая C.B. К вопросу о возможном влиянии различных моющих средств на определение видовой и групповой принадлежности крови // Сборник работ врачей судебно-медицинских экспертов биологов / подготовлен С. В. Гуртовой; РЦСМЭ МЗ РФ М., 2007. - С. 16-19.
17. Гуртовая C.B. // Сборник работ врачей судебно-медицинских экспертов биологов / подготовлен С. В. Гуртовой; РЦСМЭ МЗ РФ М., 2005. - 38 с.
18. Гуртовая С. В. Определение антигенов с помощью карточек «скангель» / С. В. Гуртовая, М. В. Маяцкая // Судеб.-мед. экспертиза. 2001. - №4. -С. 39-40.
19. Гуртовая С. В. Применение обти-теста для определения наличия и вида крови в пятнах / С. В. Гуртовая, JI. Н. Тучик, О. Б. Курджиева // Судеб. -мед. экспертиза. 1999. - №5. - С. 23-25.
20. Гуртовая C.B., Первушина Е.А., Первушина Ю.В. Определение наличия крови в следах на вещественных доказательствах при помощи диагностических полосок гемофан фирмы «Лахема» // Судеб.-мед. экспертиза. 1997. -№ 3. - С. 29.
21. Гуртовая С. В., Тылецкая Л.Н. Определение наличия крови в следах на вещественных доказательствах // Судеб.-мед. экспертиза. 1992. - №2. -С. 21-22.
22. Гуртовая С. В., Рябцева Э.Н. Тактика проведения некоторых экспертиз вещественных доказательств, связанных с половыми преступлениями // Судеб.-мед. экспертиза. 1981. - №4. - С. 18-20.
23. Джалалов Д. Д. Одномоментное обнаружение кислой фосфатазы, холина, спермина и аминокислот спермы в пятне хроматографией на бумаге // Суд.-мед. экспертиза.- 1974.-№ 2.- С. 38—41.
24. Джалалов Д. Д., Айдаркулов А.Ш. Определение видовой специфичности белков крови методом радиальной иммунодиффузии в геле // Судеб.-мед. экспертиза. 1982. - № 2. - С. 36-37.
25. Джалалов Д. Д., Абдулаев Б.С. Серийный способ установления наличия крови в следах методом непосредственной радиарной микрохроматографии на бумаге // Судеб.-мед. экспертиза. 1982. - № 1. - С. 39^41.
26. Дианова Т.Н. Выявление группового антигена А в пятнах выделений методами иммуноэлектрофореза / Т. Н. Дианова, О. В. Николенко // Судеб.-мед. экспертиза. 1987. - № 2. - С. 32-33.
27. Загрядская А.П., Асадчих Н.П., Ольховик В.П. Применение люминис-центной микроскопии при судебно-медицинском исследовании крови, спермы, клеток влагалищного эпителия, волос: метод. Рекомендации / Загрядская А.П. и др.. М. - 1982. - 8 с.
28. Иванов П. Л. Судебно-биологическая экспертиза реалии и перспективы / П.Л. Иванов, В.А Клевно // Судеб.-мед. экспертиза. - 2008. - №1. - С. 1924.
29. Колоколова, Г. П. Диагностика группы АВ8е системы АВО(Н) в следах слюны, спермы и секрета вдагалища с помощью реакции смешанной агглютинации / Г. П. Колоколова // Судеб.-мед. экспертиза. 2006. - №4. - С. 32-34.
30. Лабораторные исследования объектов судебно-медицинской экспертизы с диагностическими и идентификационными целями / сборник научных трудов, по ред. А.П. Загрядской; Горький. 1985. - 140 с.
31. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.
32. Лапенков М. И., Гуртовая С. В., Александрова В. Ю., Капинос Т. А. Комбинация методов реакции абсорбции-элюции и гель-фильтрации для установления групповой принадлежности пятен крови // Судеб.-мед. экспертиза,- 2009. №3. - С. 29-332.
33. Об использовании метода иммунофлюоресценции для установления групповой принадлежности (по системе ABO) крови и изолированных клеток в следах на вещественных доказательствах : метод, рек. / В.П. Ольхо-вик и др. М., 1988. - 14 с.
34. Ольховик В.П. Установление видовой принадлежности высохшей крови методом иммунофлюоресценции // Судебно-медицинская экспертиза. М., -1974. № 2. - С. 28-30.
35. Опарин И.А., Евгеньев Е.М. Выявление сперматозоидов методом непосредственной микроскопии пятен на предмете-носителе // Судебно-медицинская эксперт. 1961. - № 1. - С. 38—40.
36. Павлова А.З. Судебно-медицинское значение влияния микроорганизмов на сперму//Судебно-медицинская эксперт. 1974. - № 4. - С. 16—17.
37. Полищук И.А., Стрелец Н.И. К судебно-медицинской экспертизе пятен спермы // Судебно-медицинская экспертиза. 1964. - № 2. - С. 32—33.
38. Поливанов Р., Вылчанов В.Х. О динамике экспериментального иммунного спермофагоцитоза // Микробиология и эпидемиология. 1962. -№2.- С. 68—70.
39. Сборник работ судебно-медицинских экспертов-биологов (наблюдения из практики, предложения результаты научных разработок) / подготовлен С. В. Гуртовой; РЦСМЭ МЗ РФ. М., 2005. - 37 с.
40. Свирский М.С. Изучение методов абсорбции-элюции и смешанной агглютинации в судебно-медицинских целях : автореф. дисс. канд. мед. наук / М. С. Свирский. М., 1969. - 24 с.
41. Сидоров B.JI. Физико-химические и иммунологические аспекты исследования пятен крови и спермы на объектах носителях : автореф. дисс. . канд. биол. наук / Сидоров Владимир Леонидович СПб., 2000. - 22 с.
42. Сидоров В.Л., Заславский Г.И., Маяцкая М.В., Бабаханян Р.В., Попов
43. B.JL Люминесцентные методы исследования крови и спермы в пятнах на вещественных доказательствах // Библиотека судебно-медицинского эксперта. Выпуск 4. СПб.: Изд-во НИИХ СПбГУ, 2000. - С. 38.
44. Сидоров В.Л., Заславский Г.И., Маяцкая М.В., Попов В.Л. Цитологические и люминесцентные методы при судебно-медицинском исследовании вещественных доказательств. СПб., 2003. - 88 с.
45. Сидоров В.Л. Маяцкая М.В. Бабаханян Р.В. Заславский Г.И. Гуртовая
46. C.B. О новых возможностях определения наличия крови и спермы в следах на вещественных доказательствах на анализаторе жидкости "Флюорат-02-ЗМ"//Судебно-медицинская экспертиза. 2002. - № 3. - С. 27.
47. Сидоров В.Л., Маяцкая М.В., Любимов Ю.А., Бабаханян Р.В. Установление наличия спермы в пятнах на вещественных доказательствах с помощью реакции иммунофлюоресценции в количественной модификации // Судебно-медицинская экспертиза. 2000. - № 4. - С. 29.
48. Совершенствование организации и методик лабораторных исследований в судебной медицине / сборник научных трудов, по ред. Л.М. Бедриной и А.П. Загрядской; Ярославль. 1982. - 143 с.
49. Сосенкова Л.В., Сидоров В.Л., Маяцкая М.В., Курджиева О.Б., Гуртовая C.B. Определение групповой принадлежности изолированных сперматозоидов после отделения их от клеток плоского эпителия. // Судебно-медицинская экспертиза. 2004. - № 2. - С. 29-31.
50. Серопян А.К. Метод концентрированного извлечения сперматозоидов из пятна // Материалы 3-го Всесоюзного совещания судебных медиков. Рига, 1957. С. 112—114.
51. Сосенкова Л.В., Сидоров В.Л., Маяцкая М.В., Курджиева О.Б., Гуртовая C.B. Определение групповой принадлежности изолированных сперматозоидов после отделения их от клеток плоского эпителия // Судебно-медицинская экспертиза. 2004. - № 2. - С. 29-31.
52. Стегнова Т. В. Об исследовании гнилостно изменённых следов крови и выделений человека: информ. письмо / Т. В. Стегнова, И. О. Перепечина, Л. П. Уалерианова. М. : ЭКЦ МВД России, 1992. - 8 с.
53. Стегнова Т.В. Основы формирования заключения эксперта при производстве судебно-биологической экспертизы : метод, рек. М.: ЭКЦ МВД России, 1993.-24 с.
54. Твалчрелизде Ю.Г. Использование фазово-контрастного и фазово-темнопольного методов при судебно-медицинском исследовании спермы / Актуальные вопросы судебной медицины и криминалистики. Вып. 49. Л,- 1966. - С. 175.
55. Тишинова Л.А. Определение видовой принадлежности объектов биологического происхождения / Материалы второго всероссийского съезда судебных медиков. Москва-Иркутск, 1987 г. С. 264-266.
56. Томилин, В. В. Судебно-медицинское исследование вещественных доказательств / В. В. Томилин, Л. О. Барсегянц, А. С. Гладких М.: Медицина, 1989.-303 с.
57. Томилин В.В. Судебная медицина. Учебник / М.: Юридическая литература, 1987.-269 с.
58. Туманов А.К. Основы судебно-медицинской экспертизы вещественных доказательств / М., Медицина, 1975,- С. 408.
59. Установление наличия спермы по кислой фосфатазе методом электрофореза: информационное письмо Е.А. Ильина / МЗ РФ РЦСМЭ. М., 2003. -6 с.
60. Чарный В.И. Об ориентирующем значении количественной реакции на кислую фосфатазу при установлении наличия спермы в пятнах // Судебно-медицинская экспертиза. 1965. - № 2. - С. 18 - 22.
61. Чернов В. П. Иммунологический способ установления наличия и видовой принадлежности спермы в пятнах // Судебно-медицинская экспертиза. -1971,-№4.-С. 28- 30.
62. Экспертные методики исследования тканей и выделений человека : учеб. пособие. М.: ЭКЦ МВД России, 2006. - 72 с.
63. Berg S. Methoden zum Nachweis von Genitalspuren / Dtsch. Z. ges. gerichtl. -Med.- 1954,- 213 p.
64. Bernheim P. Diagnostic des taches de sperme par le microscope electronique // Ann. med. leg. 1966,- N46,- p. 130.
65. Beumer R, de Vries J, Rombouts F. Campylobacter jejuni non-culturable coccoid cells // Int J Food Microbiol. 1992. - N. 15 P. -63.
66. Bohne С., Dickmann I. Sur Methodik der Identifikation von Spermaflecken in Textilien / Dtsch. Z. ges. gerichtl. Medl. 1956. - 781 p.
67. Biwasaka, H. Detection of ABH blood group antigens from minute human hairs using polyvinylidene difluoride membrane with elution ELISA method / H. Biwasaka, N. Nakayashiki, Y. Aoki // Jpn. J. Legal. Med. - 1998. - Vol. 52, N l.-P. 37-41.
68. Blood grouping of mixed bloodstains using immunocytochemical methods / Y. Bunai et al. // J. Forensic. Sei. 1999. - Vol. 44, N 1. - P. 100-104.
69. Bosco PJ, Hapack B. Probable cause of a false positive reaction with ABA card test for p30 protein in semen//MAFS Newsletter. 2001. - N 1. - P. 21.
70. Breul J, Pickl U, Schaff J. Extraprostatic production of prostate specific antigen is under hormonal control//J Urol. 1997. - V. 157,- P. 212-213.
71. Chen J., Kobilinsky L., Wolosin D. et al. // J. Forensic. Sei. 1998. - Vol. 43, N l.-P. 114-118.
72. Comparison of presumptive blood test kits including Hexagon OBTI / E. Johnston et al. // J. Forensic. Sei. 2008. - Vol. 53, N 3. - P. 687-689.
73. Comparison of tube and gel techniques for antibody identification / M. C. Z. Novaretti et al. // Immunohematology. 2000. - Vol. 16, N 4. - P. 138-141.
74. Ebach SC, Ramsthaler F, Birngruber CG, Verhoff MA. Determining the postmortem interval of bone samples: a comparison of luminol chemiluminescence, Hexagon OBTI test, and Combur test // Arch Kriminol. 2010. Jul-Aug; 226(1-2). - P. 38-47.
75. Edwards S, Metheny N. Measurement of gastric residual volume: state of the science // MEDSURG Nursing. 2000. - N 9. - P. 8.
76. Eiji Nishi, Yuko Yamada, Takaaki Ono, Yoshito Tomisaka, Kenji Sakai and Mitsuaki Moriguchi. Influence of Bacterial Contamination on Judgement of Human Blood Identification. // Japanese Journal of Forensic Science and Technology, 2006. N 1. - C 9-18.
77. Eunprabhanth V. Finding of the spermatozoa in the vagina related to elapsed time of coitus // Ztschr. Rechtsmed. 1974. Bd 74. - C. 301—304.
78. Fan GY, Zhao GS, Mo YN. Advances in identification of semen stains // Zhonghua Nan Ke Xue. 2010 Aug. - Vol.735. - P.-40.
79. Frazer HA, Humphrey PA, Burchette JL, Paulson DF. Immunoreactive Prostatic specific antigen in male periurethral glands // J Urol. 1992. - P. 246248.
80. Fiori, A. Modifed Absorption-Elution Method of Siracusa for ABO and MN Grouping of Bloodstains / A. Fiori, M. Marigo, P. Benciolini // J. Forensic. Sci. -1963. Vol. 8, N 3. - P. 419-445.
81. Fiori A. Identificazione della spermina nelle macchie di sperma mediante cromatografia su carta//Boll. soc. ital. biol. sperim. 1955. - V.56.- p. 1558.
82. Fiori A. Metodi cromatografici su carta nella diagnosi medicolegal di macchie di sperma / Minerva med. leg. 1957.- V. 77. - P. 131— 143.
83. Forensic Examination of Hair / edited by James Robertson. London: Taylor and Francis, 1999. - 280 p.
84. Gartside B, Brewer K, Strong C. Estimation of prostate-specific antigen (PSA) extraction efficiency from forensic samples using the Seratec PSA semiquant semiquantitative membrane test // Forensic Sci Commun. 2003. - N 5. -http://www.fbi.gov.
85. Hara M, Inorre T, Fukuyama T. Some physico-chemical characteristics of gamma-seminoprotein, an antigenic component specific for human seminal plasma / Jap J Legal Med. 1971.- P. 322-326.
86. Hanson EK, Ballantyne J. A blue spectral shift of the hemoglobin soret band correlates with the age (time since deposition) of dried bloodstains // PLoS One. 2010 Sep.- №20. - P. 9.
87. Hochmeister M, Budowle B, Rudin O, Gehrig Ch, Porer U, Thali M, et al. Evaluation of prostate-specific antigen (PSA) membrane test assays for the forensic identification of seminal fluid//J Forensic Sci. 1999.- N44.- P. 60.
88. Hochmeister MN, Budowle B, Rudin O, Gehrig, UB, Thali M, Dirnhofer R. Evaluation of prostate-specific antigen (PSA) membrane test assays for the forensic identification of seminal fluid // J Forensic Sci. 1999. - N 44. - P. 1057-1060.
89. Iwasaki M., Kubo S., Ogata M., Nakasono I. // J. Forensic. Sci. 1989. - Vol. 34, N3,-P. 659-664.
90. Johnson M. Essential reproduction, 6th ed. / Hoboken, NJ: Blackwell Publishing. 2007. - 295 p.
91. Johnston E, Ames CE, Dagnall KE, Foster J, Daniel BE. Comparison of presumptive blood test kits including hexagon OBTI // J Forensic Sci. 2008 May. - P. 687-689.
92. Kiyoyuki, W. Highly Sensitive Method for Determination of ABO Blood Groups Using Absorption-Elution Test Combined with ELISA and Its Automation / W. Kiyoyuki // Jpn. J. Forensic Sci. Tech. 2002. - Vol. 7, N 1. - P. 6169.
93. Laux D, Custis A. Forensic detection of semen III. Detection of PSA using membrane based tests: sensitivity issues with regards to the presence of PSA in other body fluids, http://mafs.net/pdf/forensicdetectionsemen3.pdf
94. LeBeau M. Investigations of drug-facilitated sexual assaults. // Forensic Sci Commun. 1999.- N 1, http://www.fbi.gov.
95. Li T, Beling CG. Isolation and characterization of two specific antigens of human seminal plasma//Fertil Steril. 1973,- N24.- P. 134-144.
96. Liu F, Wang J, Yu LJ, Guo JZ, Gao JW, Jiao ZP, Tang H. Isolating sperm cells by laser capture microdissection technique from mixture sample // Fa Yi XueZaZhi. 2011 Feb. Vol 27 № 1. - P. 42.
97. Manunza P., Pappalardo G. G. Le techniche immunofluorescenti nella diagnosi die specie su maecluine di sanquej // Minerva medico leg. 1966. -N4.-P. 184.
98. Miki T., Hasebe H., Hasecura H., Aritome J., Susu-ki G. The fluorescent antibody technique applied the field of legal medicine / Acta criminol. med. leg. Jap. 1964. - p. 46.
99. Mudd, J.L. The detection of soluble ABH blood group substances in semen and saliva using monoclonal blood grouping reagents / J.L. Mudd, D.E. Adams // J. Forensic Sci. 1989. - Vol. 34, N 5. - P. 1082-1089.
100. Nadia Khaldi; Alain Mira.; Kojfi Botti; Larbi Benali and Sophie Gromb. Evaluation of Three Rapid Detection Methods for the Forensic Identification of Seminal Fluid in Rape Cases. // J Forensic Sci, July 2004, Vol. 49, No. 4
101. Otto S., Verzar R., Somogyi E. Increased Responsiveness of Electric Precipitation (Electrosynerese) by Means of a Chemical Method // Z. Rechtmedic. -1979. V. 83,2.- S. 101.
102. Papotti M, Paties C, Peveri V, Moscuzza L, Bussolati G. Immunocyto-chemical detection of prostate-specific antigen (PSA) in skin adnexal and breast tissues and tumors // Basic Appl Histochem. 1989. - V. 33. N 1. - P. 25.
103. Peschel O, Kunz SN, Rothschild MA, Miitzel E. Blood stain pattern analysis // Forensic Sci Med Pathol. 2010 Nov. - № 11. - P. 29.
104. Sato I, Yoshiike M, Yamasaki T, Yoshida K, Takano S, Mukai T. A dot-blot-immunoassay for semen identification using a polyclonal antibody against semenogelin, a powerful seminal marker. Forensic Sci Int 2001 Oct; 122(1) :27-34.
105. Sagisaka K., Tokiwa K., Sugisawa H., Suzuki K., Matsuo W. Detection of the MN Blood Group of Blood Stains by Means of the Elution Test in Combination with the Antiglobulin Test // Jap. J. leg. Med. 1971. - V. 25. - P. 100—113.
106. Sensabaugh G. Isolation and characterization of semen-specific protein from human seminal plasma: a potential new marker for semen identification // J Forensic Sci. 1978. - N 23. - P. 106.
107. Scott McWilliams, B.S. and Bill Gartside, M.F.S. Identification of Prostate-Specific Antigen and Spermatozoa from a Mixture of Semen and Simulated Gastric Juice // American Academy of Forensic Sciences, May 2009, Vol. 54, No. 3. -P. 610-611.
108. Schlesinger D. The frequency of Gc groups in the Polish population // Arch, immunol. ther. exp. 1963. - V 11. - P. 615.
109. Semen specific gamma-glutamyltransferase carries ABH antigens: a sandwich ELISA for simultaneous semen detection and its ABO blood typing / S. Abe et al. // Clin. Chim. Acta. 1999. - Vol. 283, N 1/2. - P. 183-194.
110. Simich JP, Morris SL, Klick RL, Rittenhouse-Diakun K. Validation of the use of a commercially available kit for the identification of prostate specific antigen (PSA) in semen stains//J Forens Sci. 1999.- N6.- P. 1229-1231.
111. Stefandou M., G. Alevisopoulos, Spiliopoulou C. Fundamental issues in forensic semen detection//West Indian Med J. 2010 Jun. - Vol.280.- P.-3.
112. Takatori, T. An ELISA Avidin-Biotin Complex for the Determination of ABH Group from Saliva / T. Takatori, Y. Tustsubushi // Forensic Sci. Int. -1986.-Vol. 31, N 1. P. 61-68.
113. The gel test : a new way to detect red cell antigen-antibody reactions / Y. Lapierre et al. // Transfusion. 1990. - Vol. 30. - P. 109-113.
114. The rapid measurement of ABO blood type by using surface-plasmon resonance sensor / K. Nanameki et al. // Jpn. J. Forensic Sci. Tech. 1999. - Vol. 48, N 7. - P. 669-672.
115. Unique and sensitive ELISA technique for typing ABH antigens in bloodstains using UEA-I lectin the removal of detergent with a Sephadex G-25 mini-column improves sensitivity / K. Matsubara et al. // J. Forensic Sci. - 1996. -Vol. 4, N 1. - P. 35-39.
116. Wheeler DC, Szymanski KM, Black A, Nelson DE. Applying strategies from libertarian paternalism to decision making for prostate specific antigen (PSA) screening // BMC Cancer. 2011. - N 4. - P. 148.
117. Yu H, Diamandis E.P., Sutherland DJA. Immunoreactive prostate-specific antigen levels in female and male breast tumors and it's association with steroid hormone receptors and patient age // Clin Biochem. 1994. - N. 27. - P. 7579.
118. Yuk H, Schneider K. Adaptation of Salmonella spp. in juice stored under refrigerated and room temperature enhances acid resistance to simulated gastric fluid / Food Microbiol. 2006. - P. 694-700.
119. Ziessman H, Bonta D, Goetze S, Ravich W. Experience with a simplified, standardized 4-hour gastric-emptying protocol // J Nuclear Med. 2007. - V. 48.-P. 72.