Цитокинопосредованная дисфункция локомоторной активности фагоцитов и ее коррекция у детей с травматической болезнью

Злакоманова, Ольга Николаевна

Диссертации по медицине → Аллергология и иммулология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Цитокинопосредованная дисфункция локомоторной активности фагоцитов и ее коррекция у детей с травматической болезнью

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Злакоманова, Ольга Николаевна Челябинск 2008 г.

Ученая степень: доктора медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.36

Автореферат диссертации по медицине на тему Цитокинопосредованная дисфункция локомоторной активности фагоцитов и ее коррекция у детей с травматической болезнью

На правах рукописи

003451914

Злакоманова Ольга Николаевна

ЦИТОКИНОПОСРЕДОВАННАЯ ДИСФУНКЦИЯ ЛОКОМОТОРНОЙ АКТИВНОСТИ ФАГОЦИТОВ И ЕЕ КОРРЕКЦИЯ У ДЕТЕЙ С ТРАВМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ

14.00.36-аллергология и иммунология 14.00.35 - детская хирургия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

О 6 ноя®

Челябинск, 2008

003451914

Работа выполнена в лаборатории диагностики иммунодефицитных состояний Научно-исследовательского института иммунологии и на кафедре хирургии, травматологии и ортопедии детского возраста Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Научные консультанты: Заслуженный деятель науки РФ, член-корреспочдент РАМН,

доктор медицинских наук, профессор Долгушин Илья Ильич

доктор медицинских наук,

профессор Чукичев Александр Викторович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук,

профессор Симбирцев Андрей Семенович

доктор медицинских наук,

профессор Ярилин Александр Александрович

доктор медицинских наук,

профессор Рудакова Эмилия Акиндиновна

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный университет Росздрава» (г. Москва)

Защита состоится «25» ноября 2008 г. в_час. на заседании диссертационного совета Д. 208.117.03. при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу 454092, г. Челябинск, ул. Воровского, д. 64.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию». Автореферат разослан «_»_2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор

Л.Ф. Телешева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

В последние десятилетия отмечается устойчивая тенденция к росту травматизма, что определяет актуальность данной медицинской проблемы. Около 25% пациентов с травмой составляют дети, у которых механические повреждения выступают на первое место как причина заболеваемости, инвалидности и смертности. Посттравматические состояния, приводящие к инвалидности, наблюдаются у 4,5 %, а длительные функциональные расстройства, затрудняющие учебу-у 38 % детей (Кузнечихин Е.А , Немсадзе В.П., 1999; Баиров Г.А., 2000).

Закономерным следствием травмы являются изменения со стороны иммунной системы. Несмотря на непрерывное совершенствование антибактериальной терапии и хирургической техники, инфекционные осложнения, являющиеся одним из основных клинических проявлений иммунной недостаточности, остаются главной причиной смерти у пациентов, особенно детей, с серьезными повреждениями (Баиров Г.А., 2000; Деллинджер Э.П., 2001; Белобородое В.Б., Митрохин С.Д., 2003; ПхакадзеТ.Я. и соавт, 2003; Калинина Н.М. с соавт., 2005; Страчунский Л.С. и соавт., 2007).

После воздействия повреждающего фактора в ткани развивается острое экссудативно-деструктивное воспаление, основными эффекторами которого являются фагоциты. Результативность формирующейся фагоцитарной реакции во многом определяется характером и интенсивностью ее начального этапа - хемотаксиса.

Способность к направленной миграции составляет основу функциональной пластичности фагоцитов, но из-за своей сложности хемотаксис является одной из наиболее уязвимых форм реактивности нейтрофилов и моноцитов. Поэтому многие дисфункции фагоцитов и других иммуноцитов связаны с патологией движения клетки. Снижение двигательной активности фагоцитов может быть результатом не только их повреждения, но и хемотаксиской деактивации, развивающейся после контакта с различными хемоаттракгантами и приводящей к угнетению хемотаксиса.

Известно, что механическая травма вызывает индуцированную форму вторичного иммунодефицитного состояния, характеризующуюся количественными и функциональными изменениями различных гуморальных факторов, активности иммунокомпетентных клеток и приводит к расстройству их цито-киновой регуляции (Хаитов P.M., 2000; Долгушин И.И., Бухарин О.В., 2001; Фрейдлин И.С. и соавт., 2002; Симбирцев A.C., 2004; Малыш И.Р., Козлов В.К , Згржебловская Л.В., 2005). Поэтому было логично предположить, что

аномалии миграции клеток наряду с дефектами цитокиновой регуляторной сети, развивающимися после механической травмы, могут являться одной из главных причин развития гнойного воспаления и нарушения репаратив-ных процессов в поврежденной ткани.

Изучение роли фагоцитов и секретируемых ими медиаторов воспаления в патогенезе травматической болезни и процессах репаративной регенерации костной ткани является весьма актуальной проблемой, еще далекой от окончательного разрешения. Её дальнейшее исследование позволить разработать новые подходы кдиагностике и лечению иммунодефицитного состояния при травматических повреждениях, а также определить возможность коррекции нарушенных звеньев гомеостаза.

Цель исследования

Целью настоящей работы является исследование роли нарушений двигательных функций фагоцитов (нейтрофилов и моноцитов) в патогенезе травматической болезни у детей, взаимосвязи таких изменений с уровнем цито-кинов, активностью репаративной костной регенерации, возникновением гной-но-воспапительных осложнений, а также разработка патогенетически обоснованных подходов к коррекции выявленных нарушений.

Задачи работы

1. Оценить функциональное состояние (фагоцитарная, лизосомальная, НСТ-редуцирующая, секреторная активность) нейтрофилов и моноцитов и показатели гуморального иммунитета при деструкции костной ткани в различные периоды травматической болезни у детей с неосложненным и осложненным еетечением.

2. Изучить базальную и индуцированную митогенами (ЛПС и ФГА) продукцию ИЛ-1р, ИЛ-10, ИЛ-8, ИЛ-4 и ИНФ-а клетками периферической крови здоровых и травмированных детей.

3. Исследовать хемотаксическую и миграционную активности нейтрофилов и моноцитов периферической крови в ответ на различные хемоаттрак-танты у здоровых и травмированных детей и установить взаимосвязь между степенью изменения кинетической функции фагоцитов и уровнем цитокинов.

4. Определить уровни биохимических маркеров костного ремоделиро-вания (кальцитонина, остеокальцина и С-телопептидов коллагена I типа СгозэЬарз) у здоровых и травмированных детей и их взаимосвязь со степенью нарушения цитокин-продукгивной и локомоторной функций клеток периферической крови у пациентов с механической травмой.

5. Изучить хемотаксические свойства и способность индуцировать "хемотаксическую деактивацию" нейтрофилов у возбудителей, наиболее часто вызывающих развитие посттравматических гнойно-воспалительных ослож-

нений у детей (Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa).

6. Исследовать хемотаксические свойства и способность вызывать "хе-мотаксическую деактивацию" нейтрофилов у антибиотиков, применяемых при лечении посттравматических гнойно-воспалительных осложнений у детей (амоксиклав, гентамицин, линкомицин, цефотаксим).

7. Выяснить влияние антибактериальных препаратов (амоксиклав, гентамицин, линкомицин, цефотаксим) на спонтанную и индуцированную ЛПС продукцию цитокинов-ИЛ-Iß, ИЛ-4, ИЛ-8, ИЛ-10, ИНФ-аклетками периферической крови при травматической болезни у детей.

8. Изучить действие иммунотропных препаратов (метилурацил, нуклеи-нат натрия и АТФ) на подвижность фагоцитов in vitro у здоровых детей и у травмированных пациентов - до и после лечения, и на основе этого разработать патогенетически обоснованные подходы к коррекции выявленных нарушений фагоцитарных функций у детей с травматической болезнью.

Научная новизна

В работе впервые установлено, что у детей в процессе развития травматической болезни происходит изменение секреции медиаторов воспаления, проявляющееся в гиперпродукции провоспалительных индукторов и приводящее кдисбалансу в цитокиновой сети регуляции, в большей степени в системе хемокиновых интерлейкинов.

Установлена взаимосвязь между уровнями продукции цитокинов и нарушениями локомоторных функций фагоцитов у детей с травматической болезнью, свидетельствующая о роли дефекта миграции клеток в развитии дисбаланса постоянства внутренней среды организма после травмы.

Представлены новые сведения об участии фагоцитарных реакций в восстановлении костной ткани при травматических повреждениях опорно-двигательной системы. Установлена существенная роль фагоцитов в резорбции костной ткани. Определена динамика маркеров костного метаболизма в зависимости от периодов травматической болезни у детей.

Впервые показано, что антибиотики, используемые в лечении гнойно-воспалительных осложнений при травматической болезни у детей, выступают как модуляторы воспалительной реакции, изменяющие цитокин-продук-тивную активность фагоцитов. Определены хемотаксические и хемокинети-котропные эффекты амоксиклава, гентамицина, линкомицина, цефотаксима in vitro в норме и при лечении детей с гнойно-воспалительными осложнениями травматической болезни. Обнаружено, что они усугубляют двигательные дисфункции фагоцитов и опосредованно способствуют замедлению процессов репарации костной ткани.

Разработан оригинальный подход к подбору индивидуальной дозы нук-леината натрия, метилурацила и АТФ на основе оценки их влияния на хемотаксис нейтрофилов и моноцитов in vitro, что позволяет не только снизить уровень интоксикации, но и восстановить у травмированных детей кинетическую функцию фагоцитов, предотвращая развитие посттравматических гнойно-воспалительных осложнений.

Практическая значимость работы

Доказано, что в раннем посттравматическом периоде происходит изменение продукции цитокинов, которое приводит к дисбалансу в системе про- и противовоспалительных цитокинов, наиболее выраженному в хемокиновом звене. Дисбаланс системы цитокинов является одной из причин локомоторных дисфункций фагоцитов и нарушения процессов репаративной регенерации костной ткани.

Исследованы хемокинетикотропные эффекты антибактериальных препаратов, применяемых при лечении хирургических инфекций. Выявлено, что антибиотики усугубляют двигательные дисфункции фагоцитов и опосредованно способствуют замедлению процессов репарации костной ткани.

Разработан метод коррекции нарушений локомоторной функции фагоцитов у детей с травматической болезнью, основанный на изучении хемотаксиса фагоцитов под воздействием различных концентраций препаратов на клетки in vitro, позволяющий эффективно применять лекарственный препарат через 4-5 часов с момента начала исследования и оптимизировать процесс лечения больных с повреждением опорно-двигательного аппарата, снижая риск развития гнойно-воспалительных осложнений.

На основании полученных данных разработаны "Способ изучения хемо-кинеза нейтрофилов под воздействием биологических веществ", "Способ индивидуального подбора дозы АТФ" и "Способ прогнозирования эффективности нуклеината натрия у детей с травматической болезнью" (рационализаторские предложения: № 149 от20.03.2000, № 183 от 14.03.2002 года, № 184 от 14.03.2002).

Положения, выносимые на защиту

1. Клетки периферической крови здоровых детей обладают выраженной цитокин-продуктивной активностью. Стандартные митогены индуцируют продукцию цитокинов, амплитуда и направленность которой имеют феноменологическое сходство у оппозитных пулов цитокинов, что свидетельствует о состоятельности регуляторных и эффекторных функций цитокиновой системы в норме.

2. Нейтрофилы и моноциты периферической крови здоровых детей про-

являют хемотаксическую активность к регуляторам иммунного воспаления: ИЛ-1р, ИЛ-2, ИЛ-8, ГМ-КСФ, смесь ИНФсс2(с)а2(с1), лейкинферон, А5-фрак-ция пептидосодержащих секреторных продуктов нейтрофилов, активированных латексом, к живым суточным культурам бактерий, наиболее часто вызывающих хирургическую инфекцию, к антибактериальным препаратам-амок-сиклаву, гентамицину, линкомицину, цефотаксиму. Непосредственный контакт in vitro биорегуляторов, микроорганизмов и антибактериальных препаратов вызывает двигательную рефрактерность данных клеток.

3. Одним из проявлений развивающегося иммунодефицитного состояния у детей при травматической болезни является гиперпродукция провос-палительных цитокинов с дисбалансом в цитокиновой регуляторной сети, преимущественно в системе хемокиновых интерлейкинов.

4. Дефекты цитокиновой регуляторной сети детерминируют развитие мобилизационной блокады фагоцитов, наиболее выраженной в остром периоде травматической болезни и при развитии гнойно-воспалительных осложнений. Кинезия нейтрофилов и моноцитов взаимосвязана с уровнем остеорепарации. Локомоторная дисфункция фагоцитов влияет на интенсивность резорбтивных процессов и может приводить к замедленному сращению перелома.

5. Антибактериальные препараты, применяемые в качестве средств эти-отропной терапии при лечении гнойно-воспалительных осложнений травматической болезни, выступают как модуляторы цитокин-продуктивной активности фагоцитов и, в целом, воспалительной реакции, что усугубляет двигательные дисфункции данных клеток.

6. Метилурацил, нуклеинат натрия и АТФ обладают выраженным стимулирующим влиянием на угнетенную кинетическую функцию фагоцитов детей с механической травмой. Максимальная эффективность кинетикостимулиру-ющего действия этих препаратов достигается подбором индивидуальной дозы, основанным на оценке хемотаксиса клеток к стандартному хемоаттрак-танту под действием различных концентраций препаратов in vitro.

Внедрение результатов исследования

Разработанный методический подход внедрен в практику работы детского городского ортопедотравматологического отделения МУЗ ГП№1 г. Челябинска и ортопедотравматологического отделения ГМЛПУЗ «Челябинская областная клиническая больница» и в лаборатории диагностики иммуноде-фицитныхсостояний НИИ иммунологии ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Результаты исследований используются в учебном процессе на кафед-

pax хирургии, ортопедии и травматологии детского возраста и микробиологии, вирусологи, иммунологии ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Апробация работы

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на постер-ной сессии конкурса молодых ученых VI конгресса педиатров России (Москва, 2000); на I научно-практической конференции "Вклад молодых ученых и специалистов в развитие науки и культуры г. Челябинска. Состояние. Проблемы. Перспективы" (Челябинск, 2000); на XIV Российской научной конференции "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях" (Челябинск, 2000); на конференции, посвященной 20-летию ЦНИЛ Челябинской государственной медицинской академии "Современные технологии в биологии и медицине" (Челябинск, 2000); на III Российской межрегиональной конференции, посвященной 60-летнему юбилею Челябинской государственной медицинской академии «Новые технологии и фундаментальные исследования в медицине» (Челябинск, 2002); на межрегиональной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья "Биохимия: от исследования молекулярных механизмов до внедрения в клиническую практику и производство" (Оренбург, 2003); на Российской научно-практической конференции "Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии в педиатрии" (Оренбург, 2003); на VII Всероссийском научном Форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2003); на Первой Международной Конференции "Проблемы популяционного здоровья" (Челябинск-Монреаль, 2003); на III конференции иммунологов Урала (Челябинск, 2003); на научной сессии, посвященной 60-летию Челябинской государственной медицинской академии «Актуальные проблемы медицинской науки и практического здравоохранения» (Челябинск, 2004); на конференции, посвященной 10-летию НПЦ диагностики, лечения и профилактики дис-бактериозов НИИ иммунологии ЧелГМА и 60-летию ГОУ ВПО "Челябинская государственная медицинская академия МЗ РФ" "Современные проблемы диагностики и лечения дисбактериозов" (Челябинск, 2004); на VIII Всероссийском научном Форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе Дни иммунологии в Санкт-Петербурге. «Молекулярные основы имму-норегуляции, иммунодиагностики и иммунотерапии» (Санкт-Петербург, 2004); на Объединенном Иммунологическом Форуме (Екатеринбург, 2004); на IV конференции иммунологов Урала (Уфа, 2005).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 28 научных работ Издана монография.

Структура и объем диссертации

Работа изложена на 314 страницах текста, набранного на компьютере в текстовом редакторе Microsoft Word, иллюстрирована 44 таблицами, 45 рисунками и 4 фотографиями, состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материалов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, содержащего 370 источников, в том числе 245 отечественных и 125 зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования

Нами проведено клинико-иммунологическое обследование 235 детей с механической травмой в различные периоды травматической болезни, находившихся на лечении в детских травматологоортопедическом и хирургическом отделениях Челябинской областной клинической больницы. Преимущественно это были мальчики -172 (73,19 %). Средний возраст детей составил 9,5 лет. 109 (46,38%) пострадавших поступили в первые 24 часа после травмы. У165 (70,21 %) больных были выявлены изолированные, у 52 (22,12%) -множественные и у 12 (7,67%) - сочетанные повреждения. У 222 (94,46%) пациентов травма носила закрытый характер. У 27 % детей при множественной и сочетанной травме были повреждены одновременно 2 и 3 сегмента. Ведущим было повреждение трубчатых костей скелета. Из 293 переломов 72% приходились на сегменты верхней конечности. Переломы плечевой кости - в 35,15% (103) случаях, переломы костей предплечья - в 31,3% (92) эпизодах. Повреждения костей нижней конечности диагностированы у 81 (27,65%) ребенка. Переломы бедра выявлены в 13% (38) случаях, а переломы костей голени - в 14,68% (43) наблюдений.

Исследование показателей общей реактивности организма проводились в различные сроки после травмы: 1-2, 3-7, 8-14, 15-21 сутки, что соответствовало периодам течения травматической болезни: острый период, период развернутой клинической картины болезни и период реабилитации [по классификации Ю.Г. Шапошникова и соавт. (1989)]. В острый период травматической болезни нами были обследованы 109 детей, в катаболическую и анаболическую фазы периода развернутой клинической картины - соответственно

103 и 85 пострадавших и к моменту выздоровления - 85 детей. Группу контроля составил 41 здоровый ребенок. При анализе результатов обследования детей с переломами трубчатых костей нами было установлено, что у 88,1 % из них травматическая болезнь протекала в целом благоприятно, а у 27 больных (12 %) развились гнойно-воспалительные осложнения, среди которых наиболее часто встречались нагноения ран. Возбудитель был идентифицирован только у 9 пациентов и представлен золотистым стафилококком.

Большинство (211 детей-89,8 %) обследованных детей с травмой поступали в клинику в удовлетворительном и средней степени тяжести состоянии. Все они были беспокойны и жаловались на боли различной интенсивности в зоне повреждения. У 65,1% пострадавших болевой синдром был значительно выражен. У всех детей отмечено повышение местной температуры в области поражения, которое сопровождалось умеренной гиперемией кожных покровов. Выраженный отек области перелома с распространением на соседние участки выявлен у 65,11%, кровоизлияние в ткани в месте перелома-у 23,25% пострадавших. Видимая деформация повреиеденного сегмента наблюдалась у 79 % пациентов, ограничение функции - у 82,36% детей. Патологическая подвижность и крепитация наблюдались у 13,95% больных.

Общая температурная реакция характеризовалась кратковременным повышением температуры чаще до субфебрильных цифр.

О развитии острофазовой воспалительной реакции мы судили по уровню гаптоглобина, а^-антитрипсина, а2-макроглобулина, трансферрина, ¿-реактивного белка, который определяли иммунонефелометрическим методом на аппарате '"ARRAY" фирмы "Beckman" (USA).

Состояние гуморального звена иммунитета оценивали по уровню сывороточных иммуноглобулинов классов A, G и М, а также по содержанию СЗ-и С4-фрагментов комплемента, изучаемых с помощью иммунонефелометри-ческого метода на аппарате '"ARRAY" фирмы "Beckman" (USA).

О характере изменений фагоцитарной системы судили по количеству циркулирующего пула поли- и мононуклеарных фагоцитов периферической крови и их функциональной способности.

Эффекторную функцию фагоцитов оценивали по спонтанной миграции, хемокинезу и хемотаксису (Nelson R.D. etal., 1975; Эберт Л.Я. и соавт., 1985), способности поглощать частицы полистирольного латекса (Эберт Л.Я. и соавт., 1985), по восстановлению нитросинеготетразолия в частицы дифармо-зана (Маянский А.Н., Виксман М.Е., 1979; Segal A.W., 1974) и по уровню суммарного свечения л изосом в цитоплазме клеток (Хейфец Л .Б., Абалакин В.А., 1973; Фрейдлин И.С. и соавт., 1977; Gordon S., 1973). Нейтрофилы и

моноциты из периферической крови получали методом, предложенным L. Wong, R.D. Wilson (1975).

Цитокиновый профиль оценивали по спонтанной и индуцированной продукции стандартными митогенами - липополисахаридом (ЛПС) Е. coli и ФГА цитокинов: ИЛ-1Ь, ИЛ-4, ИЛ-8, ИЛ-10 и ИНФ-а в супернатантах клеток периферической крови. Для этого были использованы соответствующие тест-системы для ИФА, произведенные ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург). В наборах применен "сандвич"- вариант твердофазного ИФА. Результат анализа вычисляли по калибровочному графику после измерения оптической плотности с помощью микропланшетного ридера "ANTHOS 2020" при длине волны 492 нм.

Определение уровня маркеров костного метаболизма производили ИФА-методом на иммуноферементном анализаторе Personal Lab (Италия) с использованием тест-систем Calcitonin ELISA (США), N-MID Osteocalcin ELISA (США), Serum Cross-Laps ELISA (США).

Статистическая обработка результатов проведена с использованием компьютерной программы «STÄTISTICA» (StatSoft, USA), компьютер на базе процессора Intel® Pentium© (ОС Microsoft® Windows® ХР Professional). Оценку полученных результатов проводили методами стандартной вариационной статистики. Для проверки гипотезы о нормальности распределения использовали критерии Колмогорова-Смирнова и х2(Боровиков В.П., 2001) Сравнивали дисперсии изучаемых выборок, применяя F-критерий Фишера (Зайцев В.М., ссоавт., 2003). Оценку достоверности различий между средними при нормальном распределении проводили с использованием t-критерия Стью-дента с поправкой Бонферрони (Гланц С., 1998). Для оценки зависимости локомоторной функции фагоцитов от уровня цитокинов определяли коэффициент ранговой корреляции Спирмена (rs), р<0,01. Проверку статистической значимости новой технологии проводили с использованием двухстороннего t-критерияСтьюдента, t : 2,00-2,06, прир<0,05 (ЗайцевВ.М., ссоавт.,2003).

Обследование выполнено после одобрения этическим комитетом ЧелГ-МА протокола клинико-экспериментального исследования на соответствие предлагаемой работы требованиям Хельсинской декларации всемирной медицинской ассоциации.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Динамика травматической болезни в значительной степени определяется ее тяжестью, которая, в свою очередь, является результирующей от степени нарушения функционирования различных органов и систем, интенсивности "реакции защиты" в отдельных ее периодах и фазах.

Существенную роль в формировании устойчивости при травме играют белки и их фракции, белки острой фазы, а также гуморальные факторы естественного иммунитета, в число которых входит система комплемента, иммуноглобулины, провоспапительные цитокины.

При динамическом наблюдении за содержанием общего белка в сыворотке крови установлено, что развитие острого периода, а в последующем и катаболической фазы периода развернутой клиники, сопровождалось умеренной, но достоверной гипопротеинемией. Снижение уровня общего белка сопровождалось диспротеинемией, которая характеризовалась падением концентрации альбумина и количественным перераспределением белков гло-булиновой фракции. При сохраняющемся нормальном уровне глобулиновой фракции в целом, концентрация с^-, а2-, р-глобулинов достоверно повышалась, а содержание у-глобулинов падало. Изменение величины альбуминового индекса было обусловлено снижением в сыворотке крови только количества альбумина. В реабилитационном периоде отмечалась тенденция восстановления уровня общего белка, его фракций и их соотношения.

Уровень гаптоглобина во все изучаемые периоды травматической болезни превышал норму, достигая максимальных значений в период развернутой клиники. Концентрация С-реактивного белка возрастала во втором периоде болезни, достигая максимума в анаболическую фазу. Содержание антитрипсина, одного из главных ингибиторов протеиназ (Lauer D., 2001), хотя и повышалось, но не достигало достоверно значимого различия в сравнении с нормой. Уровни а2-макроглобулина и трансферрина оставались в пределах нормы.

Развитие травматической болезни у детей сопровождалось активацией системы комплемента и характеризовалось достоверным повышением С3- и С4-компоненты комплемента в острый период и период развернутой клинической картины и постепенной нормализацией их уровня в периоде реабилитации.

В ранний посттравматический период концентрация lg G в сыворотке крови детей достоверно снижалась, а содержание lg М до периода реабилитации оставалось неизменным. Установленная отрицательная корреляционная связь (г= -0,67, р<0,05) между уровнями С3-компонента комплемента и lg G позволяет предположить, что снижение концентрации lg G при травме может быть связано с era интенсивным потреблением в реакциях активации системы комплемента (Калинина Н.М. и соавт., 2005; Ertel W. etal., 1989).

Содержание сывороточного lg А, играющего важную роль в формировании местного иммунитета, достоверно возрастало лишь в катаболическую фазу периода развернутой клинической картины, что, по мнению К. Buttenschoen et al. (2000), может быть связано с эндотоксемией, развивающейся у пациентов с множественными повреждениями в течение первых суток.

Количественные и качественные изменения со стороны клеточных пулов периферической крови при повреждениях ткани на ранних этапах посттравматического периода во многом отражают развитие "защитной" воспалительной реакции. Достоверное снижение количества эритроцитов и падение уровня гемоглобина в них мы регистрировали во все исследуемые периоды после травмы, наиболее выраженным оно было у детей с осложнениями. СОЭ у детей с осложненным течением болезни в остром периоде возрастала в среднем в 3,9 раза как по сравнению с нормой, так и в сравнении с группой пациентов с неосложненной травмой.

Реакция белой крови в острый период характеризовалась лейкоцитозом, который был менее выражен у детей с осложненным течением травматичес-койболезни, чем у пациентов без осложнений (р<0,01). Максимальное повышение количества нейтрофилов наблюдалось у детей с неосложненной травмой в острый период (в 2,32 раза) и достоверно меньше - при развитии осложнений (в 2,08 раза). Увеличение общего количества лейкоцитов обусловлено нейтрофилезом. Схожая картина отмечена и в период развернутой клиники болезни. Нейтрофилез при травме сопровождался относительной моно- и лим-фоцитопенией. Абсолютное же количество лимфоцитов у детей с неосложненной травмой не только не уменьшалось, а наоборот, увеличивалось по сравнению с нормой (р<0,05). Рост числа лимфоцитов был характерен для всех исследуемых периодов. При развитии гнойно-воспалительных осложнений травмы, напротив, этот показатель у детей имел тенденцию к снижению. Аналогичные изменения наблюдались и со стороны популяции моноцитов.

Лейкоинтоксикационный индекс, отражающий состояние иммунной системы в целом, достоверно повышался во все изучаемые периоды травматической болезни, что свидетельствовало о продолжающейся мобилизации лейкоцитарного пула.

При благоприятно протекающей травме кинетическая подвижность фагоцитов достоверно снижалась только в острый и период развернутой клинической картины. При развитии гнойного осложнения угнетение спонтанного движения нейтрофилов и моноцитов оставалось практически без динамики.

В процессе развития травматической болезни направленное движение, как нейтрофилов, так и моноцитов к стандартному хемоаттрактанту - С5а-компоненту комплемента, достоверно снижалось. При этом наиболее выраженное угнетение хемотаксиса нейтрофилов выявлено в первом, а моноцитов - во втором изучаемом периоде болезни. Развитие гнойно-воспалительных осложнений травмы характеризовалось стойким угнетением целенаправленной локомоторной реакции фагоцитов на протяжении всех периодов травматической болезни.

Изменения двигательной активности фагоцитов сопровождались и резким нарушением их поглотительной способности, особенно у детей с развившимися гнойно-воспалительными осложнениями. Вострый период травматической болезни достоверно угнетались как активность, так и интенсивность нейтрофильного и моноцитарного фагоцитоза. В период развернутой клиники у детей выявлена лишь тенденция к восстановлению изучаемых показателей до нормального уровня.

Лизосомапьная активность фагоцитов при благоприятном течение травматической болезни изменялась мало, тогда как при развитии осложнений количество лизосом в цитоплазме клеток возрастало почти в 1,5 раза.

Активность и интенсивность спонтанного преобразования нитросинего тетразолия в дифармозан нейтрофилами в остром периоде при неосложнен-ном течении травматической болезни достоверно возрастали, а в период развернутой клинической картины, наоборот, снижались. При осложненной травме эти показатели были резко повышены и имели почти одинаковый уровень, как в остром периоде, так и в периоде развернутой клинической картины. Активность и интенсивность спонтанной НСТ-реакции моноцитов оставались практически без динамики во все исследуемые периоды при неослож-ненном течении травматической болезни и достоверно угнетались в периоде развернутой клинической картины у пациентов с развившимися гнойно-воспалительными осложнениями.

Таким образом, в ответ на механическое повреждение в организме развивалась воспалительная реакция, которая характеризовалась не только изменением уровня острофазовых белков, диспротеинемией, уменьшением продукции сывороточного 1д в, но рядом существенных изменений нейтрофильного и моноцитарного звена защиты. Последние были наиболее выражены у детей с гнойно-воспалительными осложнениями.

Нейтрофилы и моноциты, обеспечивая первую линию противоинфекци-онной защиты, относительно легко активируются и под влиянием микроорганизмов и их продуктов вырабатывают цитокины, инициирующие функциональную перестройку клеток-эффекторов, клеток-регуляторов и межклеточные коммуникации при воспалении, что в конечном итоге определяет характер воспалительной реакции по амплитуде и продолжительности.

Для выявления нарушений цитокин-продукгивной активности фагоцитов в процессе развития «защитной» реакции организма при травматической болезни нами проведено исследование спонтанной и индуцированной продукции цитокинов в супернатантах цельной периферической крови и рассчитаны коэффициенты соотношения их продукции в различные периоды болезни у детей. Исследования проведены у 2 групп обследуемых: 1) здоровые дети

(15 детей), в возрасте от 6 до 14 лет, 2) дети с неосложненной механической травмой скелета (15 пациентов).

Исследование спонтанной и стимулированной продукции цитокинов клетками периферической крови здоровых детей выявило следующие закономерности (табл. 1):

Таблица 1.

Показатели спонтанной и митоген-индуцированной продукции цитокинов in vitro клетками периферической крови здоровых детей

Ци-токи-ны Уровень цитокинов (М±т), пкг/мл, (п=15)

Без митоге-на (контроль) ЛПС ИС лпс ФГА ИС фга

ИЛ-1 57,1 ±8,2 . 1380,5±23,5* 24,18±2,8 226,8+5,61* 3,97±0,1**

HTM 15,5±1,9 39,4±2,45* 2,54±0,13 22,78±1,45* 1,47±0,15**

ИЛ-8 337,0 ±10,1 2143,8±38,2* 6,36±0,2 1013,4±27,6* 3,01±0,01**

ИЛ-10 4,9810,51 197,5±37,9* 39,65±1,4 43,12±4,23* 8,66±0,56**

ИНФа 53,1 ±2,56 1393,4+25,1* 26,241 ±1,9 3957,9±59,4* 73,5412,9**

Примечание: * - достоверные различия с контролем при уровне значимости р<0,02, ** -достоверные различия ЛПС и ФГА-индуцированной продукции при уровне значимости р<0,001.

-клетки периферической крови здоровых детей обладают цитокин-про-дуктивной активностью;

-стандартные митогены индуцируют эффективную стимуляцию цитоки-новой продукции, амплитуда и направленность которой имеют феноменологическое сходство у оппозитных цитокинов (ИЛ-1 и ИЛ-10; ИЛ-8 и ИЛ-4), что может быть интерпретировано как состояние баланса провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в норме;

-более мощным стимулятором цитокиновой продукции для интерлейки-нов является «бактериальный» митоген-ЛПС, при этом профиль стимуляции, каклипополисахаридом, так и фитогемаллютинином аналогичен у оппозитных цитокинов;

- стандартные митогены активно стимулируют выработку ИНФ-а клетками периферической крови здоровых детей, с преобладанием ФГА-индуцированной продукции.

Эти закономерности свидетельствуют, с одной стороны, о полноценности интегративных механизмов эндогенной системы цитокинов и способности к саморегуляции, а с другой стороны, о высоком активационном потенциале клеток здоровых детей к синтезу и секреции цитокинов.

Патогенетическая неоднородность или стадийность заболевания соче-

тается с неодинаковыми реакциями в цитокиновой сети, и по-разному от них зависят. Это подтверждается результатами исследования спонтанной и ми-тоген-индуцированной продукции цитокинов ИЛ-1, ИЛ 10, ИЛ-8, ИЛ-4 и ИНФ-у у детей с травматической болезнью в различные стадии процесса (табл. 2). Уже в дебюте травматической болезни резко увеличивалась спонтанная продукция как про-, так и противовоспалительных цитокинов, с максимальной концентрацией ИЛ-8. При этом спонтанная продукция ИЛ-1 в остром периоде травмы превосходила таковую у здоровых детей почти в 7 раз, в то же время продукция амбивалентного цитокина ИЛ-10 возрастала - в 15 раз. Нестиму-лированная выработка ИЛ-8 достоверно увеличивалась в остром периоде травматической болезни по сравнению с нормой в 4,5 раз, в то время как синтез ИЛ-4, который подавляет продукцию хемокина (Ковальчук Л .В,, Сай-гитов Р.Т., 2000; Фрейдлин И.С. и соавт., 2002), возрастал только в 3 раза, одновременно с этим концентрация ИЛ-8 превосходила концентрацию ИЛ-4 почти в 30 раз.

5 ?

О о

35 30 25 20 15 10 5

■ Щ : : ■МН

шт Ш

—I—

5 * ЙНИ

ОИЛ-1/ИЛ-10 ВИЛ-в/ИЛ-4

Норма

Острый период

Период развернутой клиники

Примечание: * - достоверные различия с нормой при уровне значимости р<0,05

Рисунок 1. Динамика соотношения оппозитных цитокинов в норме и при травматической болезни.

В период развернутой клиники клетки периферической крови травмированных детей (табл. 2) продолжали активно секретировать весь исследуемый спектр цитокинов даже в режиме спонтанного культивирования. Наиболее высокий уровень продукции демонстрировал ИЛ-10 и оппозитныйостро-фазозый цитокин - ИЛ-1. Выработка ИЛ-8 в 2,6 раза была выше, чем показатели у здоровых детей, а ИЛ-4 лишь в 1,6 раза. Несмотря на относительно высокие параметры базальной продукции тестируемых медиаторов в данный период травматической болезни, нами отмечена относительная стабили-

Таблица 2.

Показатели продукции цитокинов in vitro клетками периферической крови здоровых детей и пациентов с травматической болезнью

Показатели продукции цитокинов Статистические показатели Уровень продукции цитокина, пг/мл

Здоровые дети (п=15) Острый период (п=15) Период развернутой клиники (п=15)

ИЛ-1 спонт, пг/мл М±т 57,1 ±8,2 393,13±10,58* 185,67±7,45*#

ИЛ-1+ЛПС, пг/мл ИС, усл. ед М±т 1380,8±23,54 24,18±2,8 612,38±8,51* 1,56±0,02* 554,33±6,56*# 2,98±0,03*#

ИЛ-1+ФГА, пг/мл ИС, усл. ед М±т 226,8±5,61 3,Э7±0,1 514,13±9,09* 1,31±0,15* 569,33±6,98*# 3,06±0,08*#

ИЛ-4 спонт., пг/мл М±т 15,5±1,9 50,25±3,03* 25,33±1,84*#

ИЛ-4+ЛПС, пг/мл И С, усл. ед М±т 39,4±2,45 2,54±0,13 31,13±1,92* 0,62±0,03* 14,39±1,33*# 0,57±0,004*

ИЛ-4+ФГА, пг/мл ИС, усл. ед М±т 22,78±1,45 1,47±0,15 51,13±3,42* 1,02±0,08* 48,00±3.0* 1,89±0,02*#

ИЛ-8 спонт., пг/мп М±т 337,0±10,1 1503,25±19,35* 867,33±11,36*#

ИЛ-8+ЛПС, пг/мл ИС, усл. ед М±т 2143.78±38,2 6,36±0,2 1845,58±14,38* 1,23±0,04* 1909,0±20,93*# 2,2±0,01*#

ИЛ-8+ФГА, пг/мл ИС, усл. ед М±т 1013,45±27,62 3,01±0,01 1846,25±18,13* 1,23±0,1* 1607,67±18,43* # 1,85±0,006*#

ИЛ-10 спонт., пг/мл М±т 4,Э8±0,51 76,25±4,36* 33,67±3,84*#

ИЛ-10+ЛПС, пг/мл ИС, усл. ед М±т 197,48±37,92 39,65±1,4 42,63±5,80* 0,55±0,03* 63,0±9,43* 1,87±0,01*#

ИЛ-10+ФГА. пг/мл ИС, усл. ед М±т 43,12±4,23 8,66±0,56 280,88±24,47* 3,68±0,2* 144,67±18,64 *# 4,3±0,003*#

ИНФ-а спонт., пг/мл М±т 53,1+2,56 21,05±1,75* 16,45±0,57*#

ИНФ-а+ЛПС. пг/мл ИС, усл. ед М±т 1393,38+25,15 26,24+1,9 15,86±0,39* 0,75±0,01* 16,17±0,41* 0,98±0,001*#

ИНФ-а+ФГА. пг/мл ИС, усл. ед М±т 3957,92±59,4 73,54±2,9 22,24±2,03* 1,06±0,05* 16.08±0,3*# 0,98±0,002*

Примечание: * - достоверные различия с нормой при уровне значимости р<0,02, # -достоверные различия с острым периодом при уровне значимости р<0,05

зация повышенного уровня цитокинов, проявляющаяся в снижении секреции исследуемых цитокинов в среднем в 2 раза по сравнению с острым периодом, что возможно связано с активацией механизмов ауто- и паракрин-ной регуляции секреции цитокинов (Козлов В.А., 2002).

Об относительности стабилизации и патогенетической незавершенности травматического процесса свидетельствуют и показатели соотношения оп-позитных цитокинов (рис. 1). Если соотношение уровня ИЛ-1/ИЛ-10 на фоне их активной продукции не меняется, то соотношение продукции ИЛ-8 к ИЛ-4 прогрессивно растет, что еще больше усугубляет цитокиновый дисбаланс в период развернутой клиники уже развившийся в более раннем посттравматическом периоде. При этом нарушения цитокиновой сети касаются преимущественно ее хемокинового звена, а именно снижение продукции ИЛ-4, как регулятора (ингибитора) избыточной продукции хемокинов, на фоне активной секреции ИЛ-8.

Уровень ИНФ-у в раннем посттравматическом периоде достоверно уменьшался почти в 2,5 раза в сравнении с нормой и продолжал прогрессивно падать в период развернутой клинической картины болезни.

Особенности функционирования цитокиновой сети, как в норме, так и при патологических состояниях наиболее ярко проявляются в условиях активации иммунокомпетентных клеток. Нами установлено, что в раннем посттравматическом периоде ЛПС инициировал разнонаправленные эффекты цитокин-продуктивной активности клеток периферической крови. Эндотоксин и ФГАлишь умеренно стимулировали продукцию ИЛ-1. Индекс стимуляции (ИС) был в 15 раз ниже для ЛПС и в 3 раза - для ФГА. Динамика секреции ИЛ-10 в присутствии бактериального митогена была противоположной. Клетки периферической крови травмированных детей отвечали на ЛПС не усилением продукции ИЛ-10, а наоборот, ее угнетением, при этом индекс стимуляции был более чем в 70 раз ниже, чем у здоровых детей. ФГА, напротив, вызывал стимуляцию продукции ИЛ-10. В период развернутой клиники бактериальный митоген реализовывал свой стимулирующий эффект в большей степени, увеличивая секрецию ИЛ-1 в 3 раза и ИЛ-10 в 1,8 раза, что может свидетельствовать о частичном восстановлении регуляторного потенциала цитокиновой системы.

Уровни секреции оппозитных цитокинов ИЛ-1 и ИЛ-10, как и уровни ИЛ-8 и ИЛ-4, продуцируемых ex vivo, в ответ на стимуляцию эндотоксином и ФГА отличались и в раннем посттравматическом, и в более позднем, периодах болезни. Их профиль не имел такого феноменологического сходства, как у здоровых детей и характеризовался асинхронностью ответа на индуктор.

Таким образом, патологическая активация фагоцитов и других иммуно-

цитов, проявляющаяся, в частности, в повышенной продукции острофазовых цитокинов - ИЛ-1, ИЛ-8, наиболее выраженной в ранний период посттравматической деструкции, направлена скорее на эффекторное обеспечение повреждающих, нежели репарирующих механизмов иммунного ответа. По нашему мнению, именно высокие уровни продукции цитокинов, в частности, ИЛ-8 определяют развитие мобилизационной блокады фагоцитов, подвижных продуцентов и носителей регуляторов воспаления. Поскольку эти клетки приходят в очаг воспаления или повреждения главным образом из других мест и являются необходимыми элементами процесса, то наряду с вопросами о природе медиаторов, их секреции и механизмах активации, возникает вопрос о том, как изменяется и регулируется их миграционная активность?

Локомоторная функция Нф и Мн исследовалась у 235 детей с переломами костей скелета. Контрольную группу составил 41 здоровый ребенок. В качестве хемоаттракгантов нами были использованы известные регуляторы иммунного воспаления (ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-8, ГМ-КСФ, смесь ИНФ-а2(с)а2(с1), лейкинферон (естественный цитокиновый комплекс), А5-пептидосодержащее вещество, выделенное из супернатантов активированных нейтрофилов). Контролем служил стандартный хемоаттрактант-С5а-фрагмент комплемента.

ил-2

гм-ксф

1 Норма а Острый период

Ш Норма ЯОстрый период

Индекс хемотаксиса нейтрофилов, усл. ед. Индекс хемотаксиса моноцитов, усл. ед.

Рисунок2. Хемотаксис фагоцитов периферической крови здоровых детей (п=41) и пациентов с ТБ (п=109) вострый период к биологически активным веществам различной природы.

Установлено, что изучаемые регуляторы иммунного воспаления обладают выраженными хемокинетикотропными свойствами как по отношению к нейтрофилам, так и к моноцитам здоровых детей (рис. 2).

После травмы происходит снижение целенаправленного движения ней-трофилов и моноцитов ко всем изучаемым хемоаттрактантам (рис. 2). Такая "функциональная рефрактерность" к хемоаттрактантам развивается после контакта с раздражителем и носит системный характер, не связанный с локализацией очага воспаления. В её основе лежит сокращение числа рецепторов, доступных для взаимодействия с новыми порциями лиганда. Негативный эффект потенцируется, если за связыванием следует эндоцитоз, ведущий к структурной изоляции рецептора (Маянский А.Н., Пикуза О.И,, 1993).

Сравнение результатов исследования влияния регуляторов цитокино-вой сети на хемокинетическую функцию фагоцитов здоровых и травмированных детей, показало, что характер изменений хемокинеза Нф и Мн, наблюдаемый после травмы и у здоровых детей, индуцируемых исследуемыми цито-кинами, почти полностью совпадает (рис. 3). По сути дела при непосредственном воздействии данными веществами на фагоциты здоровых детей in vitro мы фактически моделировали состояние этих клеток, схожее с тем, которое развивается после тканевой деструкции.

1,5

1 ел

го Е

О.

2,5-

2 2

2 1,5

■е-

ч о к а. а> п * « -9* * 1 ■е- £ о X г X 1

>s Ъ У X о 7 0 2 01 0,5

о S та 5 ё I < 0

рЬ -±г Г±1

* су * <=? вО ^ * * *

<=Г S с; х 5 1— Л S •е- ю <

Примечание: * - достоверность различий с нормой при р<0,01.

Рисунок 3. Спонтанная миграция и хемокинез нейтрофилов периферической крови здоровых детей (п=41) и пациентов с ТБ (п=211) под действием биологически активных веществ различной природы.

Далее предстояло выяснить, насколько изменения локомоторной функции Нф и Мн удетей с травматической болезнью играют отрицательную роль

в плане развития гнойно-воспалительных осложнении. Для этого нами были обследованы 27 детей, у которых в посттравматическом периоде развились гнойно-воспалительные осложнения.

Осложненное течение травматической болезни характеризовалось еще более выраженным угнетением целенаправленной подвижности фагоцитов уже в остром периоде. Почти ко всем изучаемым регуляторным факторам отмечалось снижение направленной миграции как Нф, так и Мн. При этом Нф I становились наиболее рефрактерны к ИЛ-1 и еще менее чувствительны к I ИЛ-8 и ГМ-КСФ. Повышением чувствительности Нф отвечали только на смесь I ИНФа2(с)ос2(с1).

I Таким образом, развитие гнойно-воспалительных осложнений у травми-

рованных детей сопровождается еще более выраженным угнетением как хемокинетической, так и хемотаксической функции фагоцитов. Запоздалая миграция фагоцитов в очаг тканевой деструкции не позволяет данным клеткам эффективно реализовать элиминационный потенциал, а также участвовать в процессах репаративной регенерации костной ткани. I Далее необходимо было выяснить, как изменяется соотношение про-

цессов формирования и резорбции костной ткани в условиях мобилизационной блокады нейтрофилов и моноцитов.

Индикаторами костного метаболизма являются маркеры костного ремо-делирования - продукты костного матрикса и клеток кости.

Концентрация кальцитонина, пг/мл

Примечание: * - достоверность различий с нормой при р<0,001.

Рисунок 4. Уровень кальцитонина в сыворотке крови здоровых детей (п=15) и пациентов с травматической болезнью в острый период (п=15) и катабо-лическую фазу (п=15) периода развернутой клинической картины.

Нами были исследованы три маркера метаболизма костной ткани каль-цитонин (специфический гормональный ингибитор паратгормона), остеокапь-цин (костный глутаминовый белок- В6Р - биохимический маркер формирования кости, характеризующий функцию остеобластов) и С-телопептиды коллагена I типа (СгоэзЬарэ) (маркер костной резорбции, характеризующий функцию остеокластов).

Содержание сывороточного кальцитонина у здоровых детей, составило 2,13±0,03 пг/мл. В раннем посттравматическом периоде отмечалась лишь тенденция к его повышению (3,06±0,18 пг/мл) в пределах возрастной нормы (рис. 4). В катаболическую фазу второго периода нами было зафиксировано достоверное повышение сывороточной концентрации кальцитонина более чем в 35 раз в сравнении со здоровыми детьми.

У здоровых детей содержание остеокальцина составило 95,97±4,87 пг/ мл, а С-телопептидов коллагена I типа (СгозвЬарз) — 0,59±0,01 нг/мл (рис. 5). При травматическом повреждении костной ткани в острый период уровень остеокальцина колебался в пределах возрастной нормы. В то время как концентрация маркера остеогенной деструкции достоверно увеличивалась почти в 2,5 раза, что свидетельствует об усилении в первые часы после травмы только резорбтивных процессов.

□ Норма

ИОП

ШКФ

Уровень остекальцина

Ш Норма ИОП ЕКФ

Уровень СгозвЦарв

Примечание: * - достоверность различий с нормой при р<0,01.

Рисунок 5. Уровни остеокальцина и С-телопептидов коллагена I типа (Сго£51_арз) в сыворотке крови здоровых детей (п=15) и пациентов с травматической болезнью в острый период (п=15) и катаболическую фазу (п=15) периода развернутой клинической картины.

Концентрация остеокальцина сыворотки крови в катаболическую фазу снижалась как по отношению к норме более чем в 3 раза и в сравнении с острым периодом - на 60%. Концентрация же маркера остеогенной резорбции продолжала увеличиваться и в катаболическую стадию процесса.

Итак, механическое повреждение костной ткани уже в первые часы после травмы индуцирует резорбтивные процессы, приводя к дисбалансу осте-огенеза и резорбции, интенсивность которой коррелирует со степенью нарушения локомоторной активности фагоцитов.

Учитывая, что риск перехода «физиологического» воспаления в инфекционный процесс во многом будет зависеть от функционального кинетического резерва фагоцитов важно было установить насколько эти клетки способны в условиях посттравматического воспаления отвечать на дополнительную хемотаксическую нагрузку бактериями и их дериватами.

St aureus Е. coli

Хемотаксис нейтрофилов к живым суточным культурам бактерий

ЕЙ®

St. aureus Е. coli pr. wlgaris

Хемотаксис нейтрофилов к супернатантам нейтрофилов доноров, активированных живыми _______баетериями___ ___

Примечание: * - достоверность различий с контролем при р<0,01.

Рисунок 6. Хемотаксиса нейтрофилов здоровых детей (п=41) к живым суточным культурам бактерий и к супернатантам нейтрофилов доноров, полученных после инкубации с различными видами живых суточных

культур бактерий.

С этой целью мы исследовали локомоторную функцию Нф у 134 детей с неосложненной и у 27 пациентов с осложненной механической травмой скелета. Контрольную группу составил 41 здоровый ребенок. В качестве хемо-аттрактантов использовали вещества как бактериального, так и небактериального происхождения. Живые суточные бактериальные культуры Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Proteus vulgaris, Pseudomonas

aeruginosa, а также супернатанты нейтрофилов, полученные после инкубации с данными микроорганизмами (САН).

Изучаемые суточные культуры живых бактерий обладали выраженной хемотаксической активностью. Индекс хемотаксиса нейтрофилов здоровых детей к бактериям достоверно превышал уровень их спонтанного радиального движения. Аналогичные изменения хемотаксиса нейтрофилов здоровых детей нами зарегистрированы и к САН (рис. 6).

Е. coii Pf. vulgaris Ps.

aerginosa

Хемотаксис нейтрофилов здоровых детей, инкубированных с Е, coli

2,5 2 1,5 1

0,5 0

* Из

St. aureus Е. coli Pr, vulgaris Ps.

aerginosa

Хемотаксис нейтрофилов здоровых детей, инкубированных с Ps, aeruginosa

Примечание; * - достоверность различий с контролем при р<0,01.

Рисунок 7. Индекс хемотаксиса нейтрофилов периферической крови здоровых детей (п=41), инкубированных с различными видами бактерий, к живым суточным культурам бактерий.

St.aureus Е. coli Pr. Ps.

vulgaris aerginosa

Хемотаксис нейтрофилов здоровых детей, инкубированных со St. aureus

St. aureus Е coli pr. vulgaris Ps.

aertjinosa

Хемотаксис нейтрофилов здоровых детей, _инкубированных с Pr. vulgaris_

После часовой инкубации нейтрофилов с живыми бактериями они утрачивали двигательную активность к бактериям того вида, которые они фагоцитировали, но при этом сохраняли способность целенаправленного движения в сторону других микроорганизмов (рис. 7). Напротив, САН, полученные при активации бактериями, вызывали выраженный положительный хемотаксис интактных нейтрофилов.

Наблюдаемые нами эффекты действия секреторных продуктов нейтрофилов на хемотаксическую реакцию донорских клеток, свидетельствуют с одной стороны, о том, что "запредельная бактериальная инвитровая нагрузка" приводит к блокаде рецепторов и развитию двигательного "паралича" именно к конкретному возбудителю - бактерии, а с другой - к секреции продуктов с кинетикотропной активностью именно к тому "микробу-контактеру"

В процессе фагоцитоза бактерий происходит изменение хемотаксичес-кой активности нейтрофилов не только здоровых детей, но и пациентов с травматической болезнью, в том числе при развитии гнойно-воспалительных осложнений. При этом характер хемотаксической реакции клеток и к живым бактериям, и к САН, полученным при стимуляции бактериями, является однотипным.

САН с кинетикотропным действием являются элементом саногенеза в патогенезе травматической болезни. Они, усиливая избирательно локомоторную функцию фагоцитов в отношении этиологического фактора, вызвавшего гнойно-воспапительный процесс, эффективно противостоят антифагоцитарному эффекту бактерий. Именно поэтому, течение травматической болезни, как правило, благоприятное (по нашим данным в 88,08% случаев) Тем не менее, у части пациентов (12% случаев) гнойно-воспалительные осложнения все же развиваются Одной из вероятных причин, по нашим данным, является подавление способности фагоцитов к продукции как неспецифических (ци-токины), так и специфических (секреторные продукты нейтрофилов) регуляторов воспаления под действием дополнительных индукторов (бактерий и их дериватов). Неспособность фагоцитов отвечать на дополнительную стимуляцию, в особенности, бактериальную, связана стем, что гиперпродукция ци-токинов, гормонов и других индукторов воспаления, уже в раннем посттравматическом периоде приводит к острейшему энергетическому и пластическому дефициту. При этом многократно угнетается способность клеток секре-тировать необходимые в данных условиях и в данной ситуации факторы, эффективно регулирующие функциональную активность участников воспалительной реакции, потенцируя дефекты цитокиновой сети, которые сказываются на эффективности противомикробной защиты организма.

Коррекция таких дефектов, очевидно, может способствовать повыше-

нию эффективности профилактических и лечебных мер.

Традиционно в лечении хирургических инфекций основную ставку, помимо вскрытия и дренирования гнойного очага, делают на антимикробную терапию, в частности на антибиотики. Антибактериальные препараты (АБП), при явном приоритете этиотропной направленности своего действия, согласно полученных нами данных также влияют на продукцию цитокинов.

Исследуя влияние амоксиклава, гентамицина, линкомицина и цефотак-сима в соответствующих концентрациях (0,15 мг/мл, 0,05 мг/мл, 0,1 мг/мл и 0,5 мг/мл) на продукцию цитокинов клетками периферической крови у детей в острый период травматической болезни, нами установлены их неоднозначные эффекты.

Примечание: # - достоверные различия с нормой при уровне значимости р<0,001, * -достоверные различия с продукцией без АБП при уровне значимости р<0,01.

Рисунок 8. Показатели спонтанной и ЛПС-стимулированной продукции ИЛ-1 клетками периферической крови здоровых (п=15) и травмированных детей (п=15) под действием антибактериальных препаратов.

На фоне гиперпродукции ИЛ-1 амоксикпав, гентамицин и линкомицин индуцировали дальнейший рост спонтанной выработки ИЛ-1 (рис. 8). Наиболее выраженную стимуляцию продукции данного цитокина вызывал гентамицин. Аналогичные результаты были получены при оценке влияния антибиотиков и на Л ПС-стимул ированную продукцию ИЛ-1. Добавление амоксиклава, гентамицина и линкомицина к культуре клеток достоверно увеличивало ЛПС-секре-циюИЛ-1. Исключение составил цефотаксим, под действием которого снижалась как спонтанная, так и ЛПС-стимулированная продукция ИЛ-1.

i i

Примечание: # - достоверные различия с нормой при уровне значимости р<0,01, * -достоверные различия с продукцией без АБП при уровне значимости р<0,05.

Рисунок. 9. Показатели спонтанной и ЛПС-стимулированной продукции ИЛ-10 клетками периферической крови здоровых (п=15) и травмированных детей (п=15) под действием антибактериальных препаратов.

I Все антибиотики на фоне гиперпродукции ИЛ-10 в большей или мень-

i шей степени стимулировали его спонтанную секрецию (рис. 9). Максимум ' стимуляции инициировал цефотаксим. ЛПС-стимулированная секреция ИЛ-1 10 под действием всех АБП также достоверно увеличивалась, i Уровень спонтанной и ЛПС-продукции ИЛ-8 под влиянием практически

¡ всех изучаемых антибиотиков незначительно изменялся (рис. 10). Искпюче-I ние составили гентамицин и линкомицин. Первый, из них, достоверно стимулировал спонтанный синтез цитокина, а второй - угнетал его ЛПС-продук-цию. Подобная толерантность клеток кдействию антибиотиков в отношении секреции ИЛ-8, на наш взгляд, обусловлена достаточно высоким уровнем его базальной и ЛПС-стимулированной продукции, уже в раннем посттравматическом периоде, что свидетельствует о «хемокиновой» гиперактивации i ¡n vivo.

! Несколько иное влияние АБП оказывали на продукцию ИЛ-4 (рис. 11).

i Амоксиклав, гентамицин, линкомицин и цефотаксим угнетали его спонтанную и ЛПС-стимулированную продукцию. Исключение составил лишь линко-' мицин, который инициировал увеличение Л ПС-секреции ИЛ-4, восстанавливая ее до нормального уровня.

Продукция ИНФ-а под действием антибактериальных препаратов прак-

100 80 во

20 0

СП

Норма

СП#

Острый период

Спонтанная продукция ИЛ-10 под влиянием АБ

150

лпс#

норма

Острый период

ЛГЧС-продукция ИЛ-10 под влиянием АБ

сп#

Норма

Острый период

Спонтанная продукция ИЛ-8 под влиянием АБ

2600

500

■5] т^Х, -V

* Щ * >

щ 1 1

Щ< лпс # 1о Мж : 1 ё 1

Норма Острый период

ЛПС-продукция ИЛ-8 под влиянием АБ

Примечание: # - достоверные различия с нормой при уровне значимости р<0,001, * -достоверные различия с продукцией без АБП при уровне значимости р<0,05.

Рисунок 10. Показатели спонтанной и ЛПС-стимулированной продукции ИЛ-8 клетками периферической крови здоровых (п=15) и травмированных детей (п=15) под действием антибактериальных препаратов.

5 50

$ 40

г го

- 10 - —

сп#

Норма Острый период

Спонтанная продукция ИЛ-4 под влиянием АБ

40 35 30 25 20 15 10 5 0

Норма Острый период

ЛПС-продукция ИЛ-4 под влиянием АБ

Примечание: # - достоверные различия с нормой при уровне значимости р<0,02, * -достоверные различия с продукцией без АБП при уровне значимости р<0,05.

Рисунок 11. Показатели спонтанной и ЛПС-стимулированной продукции ИЛ-4 клетками периферической крови здоровых (п=15) и травмированных детей (п=15) под действием антибактериальных препаратов.

тически не менялась.

Таким образом, изучаемые антибиотики являются модуляторами цито-кин-продукгивной активности клеток, в первую очередь, фагоцитов, участвующих в формировании посттравматической воспалительной реакции. Амплитуда и направленность этой модуляции, безусловно, детерминирует и состояние эффекторного звена иммунитета, т. е. тех факторов, которые определяют устойчивость организма и непосредственно участвуют в элиминации патогена. В этой связи важно было определить возможность оценки функционального состояния фагоцитарного звена, в целом, и хемотаксиса в частности, в качестве интегрального критерия оценки эффективности этиотропной терапии. Для этой цели мы изучили влияние АБП на хемотаксис нейтрофи-лов периферической крови детей с травматической болезнью к живым суточным бактериальным культурам и изучаемым АПБ.

Установлено, что АБП инициируют положительную хемотаксическую реакцию нейтрофилов периферической крови здоровых детей и пациентов с неосложненной механической травмой, которая совпадает с таковой к живым суточным культурам бактерий, наиболее часто вызывающих хирургическую инфекции. Феноменологическое сходство целенаправленной двигательной активности нейтрофилов к бактериям и антибактериальным препаратам, на наш взгляд, обусловлено происхождением антибиотиков.

Интересные данные были получены при изучении влияния антибактериальных препаратов на двигательную активность нейтрофилов в условиях непосредственного контакта (табл. 3). Все исследуемые АБП достоверно угнетали целенаправленную двигательную активность нейтрофилов здоровых детей к ИЛ-1, ИЛ-8 и лейкинферону Максимальный эффект оказывал амок-сиклав.

Хемотаксис нейтрофилов к С5а-компоненту комплемента также угнетался под действием амоксиклава и линкомицина, только с меньшей амплитудой. Гентамицин и линкомицин не вызывали достоверных изменений хемо-таксической реакции нейтрофилов к С5а.

Хемотаксический ответ нейтрофилов периферической крови здоровых детей на бактерии под влиянием антибиотиков отличался разнонаправленно-стью. Антибактериальные препараты в той и или иной степени вызывали угнетение хемотаксиса Нф к взвеси суточных культур стафилококка, протея и синегнойной палочки, при этом линкомицин максимально тормозил хемотаксис к стафилококку и синегнойной палочке, а цефотаксим - к протею. Противоположный эффект антибиотики оказывали на хемотаксический ответ Нф к взвеси суточной культуры В. coli. В отличие от грамположительных и других гра-мотрицательных бактерий, целенаправленная двигательная активность к ней

е> ■ S а

п а. о

а- о ь

s t га

ц sc га а.

ю л ю га с

н ЬЙ о

о.

"Ч-II X

>s л

в> q

ь га

а> s

Ч а.

X о

л 5

Q га

О VO

а. s

о н

d т X га

s 2

ш о

о S

а. ш

^ н

о б)

о ч

® et

у о

s с

а.

ш 5

•fr <0 н

s X

а>

m га а.

ц f«

■fr о а. h- о г Ф X

>S 1

X 3

га X

о S о (в ц га s а

ь ш

о Ь

5 X (в

Ф Ю

X О

о X

ш S

Ч 5

X о;

Индекс хемотаксиса нейтрофилов под действием АБП, усл. ед. Цефотаксим * СП о о" •н ю см оо т- * ■<f о" ■н со « о" -н т- т— о" -н 5 т— * СП о о" -н со со * о" ■н со т— т- * со о о h-см о о" +1 со о т-

X 5 zr s 5 о X X S с; TJ- о" ■н ю со V- см" * от о о -н от СО СО * СП о о +1 о ■ч- 1Г> « •с— о ¿0 со т— * т— о" ■и СП Т— р> о о н 1- ео Tf г- V- о" +1 00 т— * т— о о от т— см \—

X S п S 2 52 X £ 1— о •н CNI СП * см о" +1 СП CD ю * Г--о о" Tf ТГ « о -н ю CD CD (N о" ■н СП со т— « см о" +1 со о т- * Т— о •н ю 00 см т— * 04 о о" +1 о со п

ш га S о i: О < * ю о о" +( ■ч-ю ♦ ю о о' ■н СП СМ (О о о" +1 о СП со * т— о см ю * оо о о" •н о о * о о -н т-СП 1Л г- * СО то" +1 ю о СО см о о" +1 т— 03 см —

Индекс хемотаксиса Нф без АБП (контроль), усл. ед., о +1 0) сч т— т— о •н CSI со счГ со о о" •н СМ СП о> о о -н со т~ N т— о о ■н т— ь- СП т- со о о" £ tn со_ т— о о о S СП lO т- т— со о о" 2 со Ti

Статистические показатели Е чч S S -н 2 Е •н S Е •н S Е •н 2 § 2 Е -н S Е -н S

Хемоаттрактанты СП 2 о ^ с 2 о го ю о 1 S со с S I о зг -в- X м ф с; У) 3 ф 3 го W 1 ш СП го D) 3 > Ü 0. го « о с О) 3 к_ ф го (П CL

нейтрофилов под действием всех исследуемых антибиотиков увеличивалась. Достоверно более высокий уровень хемотак-сической реакции к Е. coli инициировал цефотаксим.

Итак, антибиотики инициируют положительную хемотакси-ческую реакцию нейтрофилов периферической крови здоровых детей, которая совпадает стако-g вой кживым суточным культурам 9 бактерий, являющихся, как пра-^ вило, возбудителями хирургичес-k кой инфекции. При непосред-| ственном контакте с нейтрофила-| ми периферической крови здоро-2 вых детей антибактериальные 5 препараты оказывают бпокирую-I; щеедействиенацеленаправлен-§_ ную двигательную активность

1 данных клеток. Подобный фено-с мен, по нашему мнению, связан §■ стем, что, антибиотики конкури-| руют с бактериями и другими хе-о моаггтракгантами за общие рецеп-§ торы нейтрофилов, количество с, которых на покоящихся клетках | невелико, вызывая тем самым

2 рецепторную блокаду и ослабпе-5. ние хемотаксической реакции g нейтрофилов.

§ Локомоторная активность f нейтрофилов периферической крови пациентов изменялась и | после применения антибиотиков ™ по поводу гнойно-воспапитель-| ных осложнений травматической болезни. Антибактериальные пре-

паратов усугубляли развивающиеся после механического повреждения нарушения локомоторной функции нейтрофилов (табл. 4). Нами зарегистрировано достоверное снижение хемотаксической реакции кС5а, ИЛ-1, ИЛ-8 и лейкинфе-рону, а также кживым суточным культурам стафилококка, протея и синегнойной палочки. Динамика уровня хемотаксиса нейтрофилов к кишечной палочке характеризовалась лишь тенденцией к повышению.

Таблица 4.

Хемотаксис нейтрофилов периферической крови здоровых детей и пациентов с осложненным течением травматической болезни, получавших антибактериальные препараты

Хемоаттр актанты Статистические показатели Здоровые дети, (n=41) Индекс хемотаксиса нейтрофилов пациентов с осложненной травмой (п=27), усл.ед.

До приема АБП (контроль) После приема АБП

С5а-компоненг комплемента Mim 2,19+0,1 1,25±0,03* 1,12±0,001*#

ИЛ-1 M±m 2,32+0,11 1,68±0,01* 1,21+0,05* #

ИЛ-8 Mim 1,92±0,08 1,34±0,004* 1,08+0,01* #

Лейкинферон Mim 2,13+0,09 1,51±0,005* 1,17±0,001*#

Staphylococcus aureus Mim 1,971±0,017 1,856±0,09 1 ^SiO.OOl*

Escherichia cdi M±m 1,356±0,031 1,425±0,02 1,466±0,04

Proteus vulgaris M±m 1,590±0,038 1,425±0,005* 1,30±0,001*#

Pseudomonas aeruginosa Mim 1,430±0,031 1,555±0,07 1,236±0,001*#

Примечание: * - достоверные различия с нормой при уровне значимости р<0,001, # -достоверные различия с контролем при уровне значимости р<0,001.

Таким образом, фагоциты, являющиеся универсальным эффектор гоме-остаза, в условиях инфекционного воспаления при травме становятся еще и мишенью для негативного воздействия антибактериальных препаратов, что еще раз подтверждает необходимость коррекции функции этих клеток, в том числе и их двигательных нарушений при травматической болезни.

Эти обстоятельства и определили следующую задачу нашего исследования - определить возможность индивидуального подбора ряда иммуноте-рапевтических препаратов для коррекции нарушений миграционной способности фагоцитов у детей с травмой на основе результатов влияния их различных доз на хемотаксис клеток in vitro.

Исследования проведены у 30 здоровых детей и 91 ребенка с травматической болезнью, которые были разделены на 4 группы: I группа - 30 детей -контрольная (страдиционным лечением), II группа- 30 пациентов получали на фоне традиционного лечения метилурацил (М), III группа-15 детей, получавших нуклеинат натрия (НН) и IV группа -25 детей, получавших АТФ.

Подбор больных в группы осуществлялся методом сплошной выборки. Группы сравнения были идентичны по возрасту, папу, характеру и течению травмы, по виду хирургического лечения (х2>3,841). Выбор препаратов для иммунокорригиру-ющей терапии был обусловлен их доступностью и низкой стоимостью препаратов, широким применением в клинической практике и отсутствием побочных эффектов.

Для оценки кинетикотропного эффекта препаратов in vitro использовали следующие концентрации: метилурацила-2,0,1,5,1,0,0,5 мг/мл; нуклеина-та натрия-0,3, 0,23, 0,15, 0,03 мг/мл, АТФ- 1,0, 0,75, 0,5, 0,1 мг/мл среды 199. После 3-х (18-ти) часовой инкубации нейтрофилов и моноцитов с препаратом определялась его иммунотропная эффективность по отношению уровня показателя хемотаксиса до и после инкубации клеток с препаратом.

Прежде чем приступить к изучению влияния М, НН и АТФ на кинетическую функцию нейтрофилов и моноцитов периферической крови травмированных пациентов, мы исследовали действие препаратов in vitro на фагоциты здоровых детей.

Почти все исследуемые препараты у здоровых детей вызывали in vitro достоверное угнетение целенаправленной двигательной активности нейтрофилов.

Таблица 5.

Степень нарушения локомоторной функции фагоцитов и степень тяжести эндотоксикоза в исследуемых группах пациентов

Группы пациентов Нейтрофилы Моноциты ЛИИ, усл. ед.

Индекс хемотаксиса, усл. ед Степень нарушения функции, Индекс хемотаксиса, усл. ед Степень нарушения функции,

Здоровые дети (контроль), п=41 2,19±0,10 - 2,20+0,1 - 1,23±0,13

I (п=30) 1,31 ±0,01* 40,18+1,09 0,91 ±0,001* 58,64±3,56 4,39+1,08*

II (п=30) 1,25±0,003* 42,91±2,07 1,2±0,003* 45,45±1,78 3,15+0,38*

III (п=15) 1,2+0,001* 42,92±3,36 1,16+0,001* 46,95±3,16 3,01±0,37*

IV (п=25) 1,27±0,008* 42,15+2,58 1,0+0,001* 54,54+2,28 4,32±0,7*

Примечание: * - достоверные различия с контролем при р<0,01. 32

Далее мы сопоставили степень нарушения кинетической функции нейт-рофилов и моноцитов во всех исследуемых группах (показатель больного/ показатель нормы -1) 100%) с тяжестью посттравматического эндотоксико-за, оцениваемой по уровню лейкоцитарного индекса интоксикации, являющегося интегральным показателем, отражающим состояние иммунной системы в цепом (табл. 5). Степень нарушения локомоторной функции нейтрофи-лов и моноцитов превышала 40%, что соответствовало второму уровню изменения данного параметра и позволяло отнести пациентов всех исследуемых групп к иммунологически комлроментированным и нуждающимся в назначении иммунокорректоров. Все наблюдаемые нами пациенты имели тяжелую степень эндотоксикоза (ЛИИ превышал 3,0 усл. ед.). При оценке корреляционных взаимоотношений выявлена прямая связь (г= + 0,86, р<0,01) между хемотаксической функцией нейтрофилов и интоксикацией и обратная связь между интоксикацией и хемотаксисом моноцитов (г= - 0,95, р<0,01). Высокий уровень ЛИИ является дополнительным маркером посттравматической иммунодепрессии и подтверждает необходимость назначения корректоров сдетоксицирующими свойствами.

Изучение влияния различных концентраций метилурацила, нуклеината натрия и АТФ на кинетическую функцию нейтрофилов и моноцитов периферической крови проводили у детей в острый период травматической болезни.

У всех 30 детей с травматической болезнью, у которых в последующем был применен метилурацил (табл. 6), вострый период обнаружено достоверное (р<0,001) снижение исходного уровня хемотаксиса нейтрофилов к стандартному хемоаттрактанту (С5а-компоненту комплемента) в 1,67 раза (степень изменения показателя - 42,9%), а моноцитов - в 1,86 раза (степень изменения показателя-45,5%) в сравнении со здоровыми детьми. Лейкоцитарный индекс интоксикации - 3,15 усл. ед.

Таблица 6.

Индекс стимуляции хемотаксической функции фагоцитов различными концентрациями метилурацила in vitro (n=30)

Фагоциты Индекс стимуляции хемотаксиса фагоцитов (усл. ед.) под действием различных концентраций метилурацила

Концентрация п зепарата, мг/мл

2,0 1.5 1,0 0,5

Нейтрофилы 1,154±0,08* 1,173±0,08* 1,092±0,1* 1,581+0,1

Моноциты 1,097±0,07* 1,069±0,08* 1,266±0,13 1,568+0,09

Примечание: * - достоверные различия минимальной концентрации препарата с более высокими, при уровне значимости р<0,01.

Максимальным стимулирующим эффектом на сниженную локомоторную функцию, как нейтрофилов, так и моноцитов, обладала минимальная концентрация метилурацила - 0,5 мг/мл, которая эффективно стимулировала угнетенный хемотаксис в 21 наблюдений на модели нейтрофилов и у 19 пациентов - на модели моноцитов. Из них у 9 пациентов кинетическая активность ПМЯЛ и у 5 - моноцитов усиливалась и под влиянием более высоких концентраций метилурацила. Однако, ее уровень не достигал величины показателей хемотаксиса, индуцированного минимальной дозой препарата.

Таблица 7.

Индекс стимуляции хемотаксической функции фагоцитов различными концентрациями нуклеината натрия in vitro

Фагоциты Индекс стимуляции хемотаксиса фагоцитов (усл. ед.) под действием различных концентраций нуклеината натрия

Концентрация п репарата, мг/мл

0,3 0,23 0,15 0,03

Нейтрофилы 1,161+0,12* 1,143± 0,11* 1,154±0,13* 1,73±0,13

Моноциты 1,143+0,21* 1,25±0,08* 1,251±0,19 1,75±0,18

У всех 15 пациентов, которые впоследствии получали НН (табл. 7), в остром периоде после травмы мы также регистрировали достоверное (р<0,001) снижение исходного уровня хемотаксиса нейтрофилов к стандартному хемо-аттрактанту в 1,75 раза (степень изменения показателя -42,9%), а моноцитов- в 2,02 раза (степень изменения показателя - 47%) в сравнении со здоровыми детьми и высокий ЛИИ - 3,01 усл. ед.

Таблица 8.

Индекс стимуляции хемотаксической функции фагоцитов различными концентрациями АТФ in vitro

Фагоциты Индекс стимуляции хемотаксиса фагоцитов (усл. ед.) под действием различных концентраций АТФ

Концентрация п репарата, мг/мл

1,0 0,75 0,5 0,1

Нейтрофилы 1,42±0,11* 1,17± 0,07* 1,23±0,09* 2,13+0,08

Моноциты 1,43±0,13* 1,48±0,13* 1,5±0,23* 2,5±0,18

Максимальный стимулирующий эффект на угнетенную двигательную функцию нейтрофилов и моноцитов НН оказывал в минимальной концентрации - 0,03 мг/мл. У 6 пострадавших кинетическую функцию усиливали и более высокие концентрации препарата. Однако, ее уровень не достигал показателей целенаправленной миграции, индуцированной минимальной дозой препарата.

У пациентов IV наблюдаемой группы с механической травмой (табл. 8), получавших АТФ, в остром периоде выявлено достоверное (р<0,001) снижение направленной миграции нейтрофилов в 1,58 раза (степень нарушения хемотаксиса -42,2%), а моноцитов - в 2,32 раза (степень нарушения функции - 54,5%) и высокий лейкоцитарный индекс интоксикации - 4,32 усл. ед.

Максимальную стимуляцию угнетенной кинетической функции нейтрофилов в 22 наблюдениях и моноцитов - в 21 случаях вызывала минимальная концентрация АТФ -0,1 мг/мл.

Восстановление хемотаксиса фагоцитов периферической крови под действием той или иной концентрации метилурацила, нуклеината натрия и АТФ in vitro мы расценивали как критерий, отражающий положительное действие этого препарата в указанной дозе. Поэтому в выборе дозы для лечения пациентов мы ориентировались на максимальный уровень инвитровой стимуляции хе-мотаксической функции нейтрофилов. Как правило, это были низкие концентрации препарата (метилурацил - в 93% случаев, нуклеинат натрия - в 95% наблюдений, АТФ - в 96% случаев).

Для расчета лечебной дозы использовалась концентрация препарата, которая in vitro вызывала максимальную инициацию двигательной активности, как нейтрофилов, так и моноцитов. Расчет индивидуальной дозы препарата осуществляли по формуле1 (Чукичев А.В., 1984):

0,075xH(M)4C4m4V

D= -, где

10s

D - доза препарата (мг); 75 - объем крови на 1 кг массы тела в (мл/кг); m - масса тела (кг); С - концентрация исследуемого препарата в качестве хемокина (мг/мл); Н(М) - количество клеток в 1 мл крови (клеток/мл); 10® - количество клеток в лунке; V- объем лунки (0,02 мл).

Индивидуальные подобранные дозы метилурацила и нуклеината натрия назначали per os трехкратно в течение 10 дней, АТФ-в/мышечно, однократно в течение 10 дней.

Максимально высокий процент совпадений действия индивидуально подобранных доз in vitro и in vivo отмечен у метилурацила и АТФ на модели «препарат + нейтрофилы» (табл 9).

Таблица 9.

Результаты применения индивидуально подобранных доз препаратов и собственного эффекта иммунокорректора

Груп па Препа рат % совпадения действия индивидуальной подобранных доз препаратов iv vitro и in vivo на модели: Собственный эффект иммунокорректора по абсолютным значениям показателей (%):

нейтрофил ов моноцитов хемотаксис а нейтрофил ов хемотаксиса моноцитов ЛИИ

II М 96,67 93,33 91 43 -41

III НН 93,33 93,33 91 65 - 33,5

IV АТФ 96 92 139 65 -86

Оценку собственно эффекта иммунокоррекгоров по абсолютным значениям показателей локомоторной функции фагоцитов и ЛИИ проводили по формуле - [(Рис- PJ: Рис] - [(Рис - Рм): Рис]х100%, (Земсков A.M., 2006), где Р ис - значение параметра в абсолютных величинах до начала лечения, Р т-тоже после традиционной терапии, Рм-тоже, после проведения традиционного лечения с модулятором.

Наибольший вклад в восстановление хемотаксиса данных клеток и нормализацию лейкоцитарного индекса интоксикации отмечен у АТФ, при этом более активно на коррекцию реагировало нейтрофильное звено, что опосредованно приводило к нормализации ЛИИ. Эффект метилурацила и нуклеина-та натрия был аналогичен АТФ по направленности, но отличался меньшей амплитудой.

Для сравнительной оценки эффективности традиционного лечения и предлагаемой технологии с использованием способа подбора индивидуальных доз иммунотропных препаратов мы изучали: лабораторные критерии - показатели кинетической функции фагоцитов, лейкоцитарный индекс интоксикации; эффективность профилактического действия препаратов, с вычислением показателя защищенности = (1 - Р/Р2) х 100%, где Р, - количество пациентов с осложнениями (в %) в опытной группе, Р2- количество пациентов с осложнениями (в %) в контрольной группе (СемененкоТ.Н., 1987); безопасность применения препаратов, о которой судили по отсутствию побочных реакций (аллергические проявления, зуд, жжение, недомогание, головная боль, отрицательная динамика гематологических параметров).

Таблица 10.

Показатели кинетической функции фагоцитов и ЛИИ у пациентов с травматической болезнью, получавших различные кинетикотропные препараты

Показатели Группы пациентов

I (п=30) (традиционное лечение) контроль II (П=30) (традиционное лечение + М) III (п=15) (традиционное лечение + НН) IV (п=25) (традиционное лечение + АТФ)

Индекс хемотаксиса нейтрофилов до лечения, усл.ед. 1,31 ±0,01 1,25±0,003 1,2±0,001 1,27±0,008

Индекс хемотаксиса нейтрофилов после лечения, уел ед 1,57±0,004# 2,71±0,13*# 2,65±0,17*# 3,33±0,16*#

ИС хемотаксиса нейтрофилов in vitro (min доза препарата), усл. ед - 1,58±0,1 1,73±0,13 2,13±0,08

ИС хемотаксиса нейтрофилов in vivo (инд. доза препарата), усл. ед. 0,89±0,05 2,21±0,13*# 2,34±0,21*# 2,68±0,13*#

Индекс хемотаксиса моноцитов до лечения, усл.ед. 0,91±0,001 1,2±0,003 1,16±0,06 1,0±0,005

Индекс хемотаксиса моноцитов после лечения, усл.ед. 1,75+0,05# 2,27±0,08*# 2,5+0,21*# 2,4±0,1*#

ИС хемотаксиса моноцитов in vitro (min доза препарата), усл. ед. - 1,57±0,0Э 1,75±0,18 2,5±0,19

ИС хемотаксиса моноцитов in vivo (инд, доза препарата), усл. ед. 1,4±0,12 1,91±0,1*# 2,0±0,20* 2,6±0,21*

ЛИИ до лечения, усл.ед. 4,39±1,08 3,15+0,38 3,01±0,37 4,32±0,7

ЛИИ после лечения, усл. ед. 3,23±0,43 1,93±0,17*# 2,07±0,15*# 1,81±0,26*#

Показатель защищенности, % - 100 100 70

Примечание: * - достоверные различия с контролем при р<0,05, # - достоверные различия средних исследуемых величин с аналогичными показателями до коррекции при р<0,05

Исследования показали (табл. 10), что при традиционном способе лечения (без корректоров) происходило достоверное усиление хемотаксиса, как нейтрофилов, так и моноцитов, однако показатели локомоторной реакции данных клеток не восстанавливались до уровня здоровых детей. При этом уровень эндотоксикоза оставался значительным.

Применение в схеме традиционной терапии травматической болезни индивидуально подобранных доз иммунокорректоров способствовало не только восстановлению, но и стимуляции хемотаксической функции фагоцитов и нормализации показателя эндотоксикоза. Максимальный эффект стимуляции хемотаксиса фагоцитов и нормализации ЛИИ отмечен под влиянием АТФ. При этом индекс стимуляции хемотаксиса фагоцитов in vivo (индивидуальная доза) почти во всех наблюдениях превосходил аналогичный in vitro. Более высокий показатель защищенности демонстрировали метилурацил и нуклеи-нат натрия.

Ни в одном случае применения метилурацила, нуклеината натрия и АТФ в индивидуально подобранных дозах не было отмечено ни местных, ни общих побочных реакций, не зарегистрировано также отрицательной динамики гематологических параметров. После 10-дневного курса корригирующей терапии пациенты находились под наблюдением в течение месяца.

ВЫВОДЫ

1. В процессе развития травматической болезни у детей формируется иммунодефицитное состояние, хараетеризующееся изменением клеточного и гуморального звеньев иммунной системы, наиболее выраженном в остром периоде болезни и при развитии гнойно-воспалительных осложнений.

2. Клетки периферической крови здоровых детей обладают цитокин-про-дуцирующей активностью. Стандартные митогены стимулируют продукцию цитокинов, амплитуда и направленность которой имеют феноменологическое сходство у оппозитных пулов цитокинов, что свидетельствует о состоятельности регуляторных и эффекторных функций цитокиновой системы в норме. Механическое повреждение костной ткани индуцирует гиперпродукцию про-воспалительных цитокинов и развитие дисбаланса в цитокиновой регулятор-ной сети, преимущественно в системе хемокиновых интерлейкинов.

ным препаратам -амоксиклаву, гентамицину, линкомицину, цефотаксиму. Непосредственный контакт биорегуляторов, микроорганизмов и антибактериальных препаратов вызывает двигательную деактивацию данных клеток.

4. Механическая деструкция костной ткани приводит к угнетению хемотаксиса и хемокинеза нейтрофилов и моноцитов как к стандартному хемоат-трактанту, так и к изучаемым провоспалительным цитокинам, наиболее выраженному в остром периоде травматической болезни и при развитии гнойно-воспалительных осложнений. Развивающаяся системная мобилизационная блокада фагоцитов детерминирована гиперпродукцией провоспалительных цитокинов, в частности, хемокинов.

5. Увеличение концентрации кальцитонина и С-телопептидов коллагена I типа и снижение уровня остеокальцина в сыворотке крови детей с травматической болезнью свидетельствуют об усилении процессов костной резорбции и угнетении способности костеобразованию с максимальной выраженностью в катаболическую фазу посттравматического периода.

6. Локомоторные дисфункции фагоцитов, развивающиеся в посттравматическом периоде удетей, обусловливают интенсивность резорбтивных процессов, которая коррелирует с уровнем продукции провоспалительных цитокинов.

7. В условиях контакта с микроорганизмами, вызывающими двигательный "паралич" нейтрофилов, данные клетки секретируют продукты, избирательно усиливающие их локомоторную функцию в отношении этиологического фактора, вызвавшего гнойно-воспалительный процесс в поврежденной ткани.

8. Антибактериальные препараты, применяемые в качестве средств эти-отропной терапии при лечении гнойно-воспалительных осложнений травматической болезни у детей, приводят к изменению цитокин-продуктивной активности фагоцитов, что усугубляет двигательные дисфункции данных клеток.

9. Препараты с иммунотропной активностью (метилурацил, нуклеинат натрия и АТФ) вызывают снижение целенаправленной двигательной активности нейтрофилов и моноцитов in vitro у здоровых детей и обладают выраженным кинетикостимулирующим действием на фагоциты детей с травматической болезнью.

10. Максимальная эффективность кинетикостимулирующего действия метилурацила, нуклеината натрия и АТФ достигается подбором индивидуальной дозы, основанном на оценке хемотаксиса фагоцитов к стандартному хемоаттрактанту под действием его различных концентраций in vitro, что позволяет оптимизировать процесс лечения больных с повреждением опорно-

двигательного аппарата.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для комплексной оценки иммунных дисфункций при травматической болезни у детей мы рекомендуем исследование цитокинового профиля, который обязательно должен включать хемокиновые интерлейкины (ИЛ-8, ИЛ-4 и др.).

2. Для оценки репаративных процессов и выраженности остеогенной резорбции при механической травме необходимо исследование маркеров костного ремоделирования и резорбции в динамике болезни.

3. С целью своевременной диагностики дефектов целенаправленной миграции фагоцитов при травме и проведении патогенетически обоснованного лечения рекомендуется проводить исследование хемотаксической активности (спонтанной миграции, хемокинеза и хемотаксиса) нейтрофилов и моноцитов в острый период болезни.

4. При обнаружении в раннем посттравматическом периоде нарушений хемотаксической активности фагоцитов необходимо назначение препаратов скинетикотропной свойствами. При выборе таких препаратов целесообразно ориентироваться на действие их различных концентраций на хемотаксичес-кую активность фагоцитов in vitro. При клиническом применении препарата целесообразно использовать концентрацию препарата, оказывающую максимальный кинетикотропный эффект. Лечебная доза определяется с обязательным учетом этой концентрации, абсолютного количества нейтрофилов (моноцитов) крови, ОЦК и массы тела по предлагаемой формуле:

0,075xH(M)xCxmxV

Э - доза препарата (мг), 0,075 - объем крови на 1 кг массы тела в л/кг,

т - масса тела (кг); С - концентрация исследуемого препарата (мг/мл); Н(М) - количество клеток в 1 мл крови (клеток/мл); 108 - количество клеток в лун-

ке; V - объем лунки (0,02 мл).

5. При развитии гнойно-воспалительных осложнений травматической бо-

лезни и назначении антибактериальных препаратов необходимо в схему тра-

диционной терапии включать препараты с кинетикотропной активностью.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Злакоманова, О.Н. Влияние травмы на спонтанную миграцию фагоцитов / О.Н. Злакоманова // Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях: тез. докл. XIV Рос. науч. конф. - Челябинск, 2000. - 40 с.

2. Студеникина, Ю.Н. Локомоторные реакции нейтрофилов в ответ на бактериальные хемоаттрактанты / Ю.Н. Студеникина, О.Н. Злакоманова, А В. Чукичев, A.B. Зурочка, А.Н. Котляров//Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях: тез. докл. XIV Рос. науч. конф. - Челябинск, 2000. -113 с.

3. Студеникина, Ю.Н. Исследование специфического реагирования нейтрофилов в ответ на бактериальные хемоаттрактанты как метод идентификации возбудителя хирургической инфекции / Ю.Н. Студеникина, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка, О.Н. Злакоманова//Актуальные проблемы медицинской науки и профессионального образования: тр. науч. сессии ЧелГМА. - Челябинск, 2000.-С. 20-22.

4. Чукичев, A.B. Прогнозирование эффективности нуклеината натрия у детей с травматической болезнью / A.B. Чукичев, О.Н Злакоманова II Современные технологии в биологии и медицине: материалы конф., посвяиц 20-летию ЦНИЛ ЧелГМА / под ред. В.В. Турыгина, A.B. Зурочки, A.B. Чуки-чева. - Челябинск, 2000. - С. 93-95.

5. Злакоманова, О.Н. Стимуляция хемотаксической активности фагоцитов у детей с переломами трубчатых костей препаратом АТФ / О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, А В. Зурочка // Новые технологии и фундаментальные исследования в медицине: материалы III Рос. межрегион, конф., посвященной 60-летнему юбилею ЧелГМА-Челябинск, 2002.-С. 87-88.

6. Злакоманова, О.Н. Хемокинетикотропные свойства АТФ/О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, А,В. Зурочка // Гомеостаз и инфекционный процесс: Тез. докл. Ill Общерос. конф. с междунар. участием. - Сочи, 2002.-42 с.

7. Злакоманова, О.Н. Подбор индивидуальной дозы препаратов для коррекции дефектов хемотаксиса у детей с травматической болезнью / О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка //Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии в педиатрии. Материалы Российской научно-практической конференции. - Оренбург, 2003. - С. 73-74.

8. Зурочка, A.B. Цитокиновая регуляция миграционной активности фагоцитов при травматической болезни у детей / A.B. Зурочка, A.B. Чукичев, О.Н. Злакоманова//Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии в педиатрии: Материалы Рос науч.-практ. конф. - Оренбург, 2003. - С. 95-97.

9. Злакоманова, О.Н. Подбор индивидуальной дозы иммунопрепаратов для коррекции дефектов хемотаксиса у детей с травматической болезнью / О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка // Биохимия: от исследования молекулярных механизмов - до внедрения в клиническую практику и производство: материалы межрегион, конф.биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья / под ред. В.П. Твердохлиба. Оренбург, Юж. Урал, 2003. -С. 489-491.

10. Злакоманова, О.Н. Посттравматические дефекты кинетических функций фагоцитов/О.Н. Злакоманова// Мед. иммунология. -2003. -Т.5, № 34. - 398.

11. Злакоманова, О.Н. Коррекция нарушений миграционной функции фагоцитов у детей с травматической болезнью препаратом АТФ / О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка II Мед. иммунология. -2003. -Т.5, № 3-4. - 399 с.

12. Злакоманова, О.Н. Двигательные нарушения фагоцитов у детей с травмой / О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка // Проблемы попу-ляционного здоровья: материалы 1-й междунар. конф. - Челябинск; Монреаль, 2003.-С. 110-112.

13. Чукичев, A.B. Исследование локомоторной функции фагоцитов-перспективный путь оптимизации диагностики и лечения заболеваний /A.B. Чукичев, О.Н. Злакоманова, A.B. Зурочка//Актуальные проблемы медицинской науки и практического здравоохранения: тр. науч.-практ. конф. -. Трех-горный, 2003. - С. 53-55.

14. Злакоманова, О.Н. Двигательные дисфункции фагоцитов у детей с травматической болезнью и их коррекция метилурацилом и АТФ / О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка//Материалы III конференции иммунологов Урала. - Челябинск, 2003. - № 1(3). - 89 с.

15. Злакоманова, О.Н. Использование хемотаксического метода исследования для подбора дозы и оценки эффективности иммунотропных препаратов у детей с травматической болезнью / О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка// Вестн. Акад. Рос. энциклопедий. -2003. - № 4(10). - С. 57-59.

16. Злакоманова, О.Н. Влияние цитокинов на хемотаксис фагоцитов при травме/О.Н. Злакоманова// Объединенный Иммунологический Форум: тез. докл. - Екатеринбург, 2004. - С. 58.

17. Злакоманова, О.Н. Обоснование применения АТФ в лечении детей с травматической болезнью / О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка / / Современные проблемы диагностики и лечения дисбактериозов: материалы конф., посвящ. 10-летию НПЦ диагностики, лечения и профилактики дисбак-

териозов НИИ иммунологии ЧелГМА и 60-летию ГОУ ВПО "Челябинская государственная медицинская академия МЗ РФ". - Челябинск, 2004. - С. 7173

18. Злакоманова, О.Н. Влияние антибиотиков на хемотаксическую функцию нейтрофилов / О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка, Е А. Ели-зарьева // Мед. иммунология. - 2004. - Т.6, № 3-5. - С. 230-231.

19. Злакоманова, О.Н. Хемокинетикотропные эффекты антибиотиков/О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка, Е.А. Елизарьева И Актуальные проблемы медицинской науки и практического здравоохранения: тр. науч. сессии, посвящ. 60-летию ЧелГМА. - Челябинск, 2004. - С. 141-144.

20. Злакоманова, О.Н. Хемотаксический ответ нейтрофилов, инкубированных с антибиотиками / О.Н. Злакоманова, A.B. Зурочка, A.B. Чукичев, Т.В. Журавлева, П П. Городечный // Материалы IV конференции иммунологов Урала. - Уфа, 2005. - № 1(4). - С. 130-131.

21. Злакоманова, О.Н. Регуляторные эффекты цитокинов при исследовании двигательных функций фагоцитов у детей с травматической болезнью /О.Н. Злакоманова, A.B. Чукичев, A.B. Зурочка//Цитокины и воспаление.-2006. - Т. 5, № 2. - С. 30-36.

22. Долгушин, И.И. Хемотаксис фагоцитов: клиническое значение/И.И. Долгушин, A.B. Зурочка, A.B. Чукичев, О.Н. Злакоманова. - Челябинск: Изд-во ЧелГМА, 2006.-183 с.

23. Злакоманова, О.Н. Хемотаксис фагоцитов, значение в подборе индивидуальной дозы лекарственного препарата для коррекции локомоторных дисфункций фагоцитов у детей стравмой/О.Н. Злакоманова, A.B. Зурочка, А В. Чукичев // Мед. иммунология. - 2007. - Т. 9, № 4-5. - С. 479-493.

24. Злакоманова, О.Н. Подбор индивидуальной дозы и оценка эффективности иммунотропных препаратов у детей с травматической болезнью с использованием хемотаксического метода исследования / О.Н. Злакоманова // Дет. хирургия. - 2007. - № 6. - С. 6-9.

25. Чукичев, A.B. Дисбаланс цитокинов и состояние маркеров костного метаболизма в посттравматическом периоде у детей / A.B. Чукичев, И И. Долгушин, О.Н. Злакоманова, Ю.И. Чепуров // Дет. хирургия. - 2007. - № 6. -С. 9-13.

26. Злакоманова, О.Н. Оценка хемокинетикотропной активности антибиотиков в норме и при гнойно-воспалительных осложнениях травматической болезни у детей / О.Н. Злакоманова// Вестн. новых мед. технологий. -2008. -№1-3.-С. 112-116.

27. Злакоманова, О.Н. Исследование цитокинового профиля у детей с травматической болезнью под действием антибактериальных препаратов/

О.Н. Злакоманова // Вестн. новых мед. технологий. -2008. - № 4-6. - С. 108110.

28. Злакоманова, О.Н. Состояние системы цитокинов у детей с травматической болезнью / О.Н. Злакоманова // Травматология и ортопедия России. - 2008. - № 4-6. - С. 65-71.

29. Злакоманова, О.Н. Модулирующее действие антибактериальных препаратов на продукцию цитокинов при травматической болезни у детей / О.Н. Злакоманова, И.И. Долгушин, A.B. Чукичев //Дет. хирургия. -2008. - № 5. -С. 38-42.

На правах рукописи

Злакоманова Ольга Николаевна

14.00.36-аллергология и иммунология 14.00.35-детская хирургия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Челябинск, 2008

Отпечатано в полиграфическом отделе ООО "Институт медико-социальных исследований". Подписанов в печать 17.10.2008 г. Формат 60x84 Vis Бумага офсетная. Гарнитура Arial Суг. Усл. п.л. 2,0. Печать на ризографе. Тираж 100.

Оглавление диссертации Злакоманова, Ольга Николаевна :: 2008 :: Челябинск

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Физиология и морфология хемотаксиса фагоцитов.

1.1. Механизмы движения фагоцита.

2. Травматическая болезнь: эффекторная и регуляторная функции фагоцитов.

3. Антибиотики и цитокины.

4. Антибиотики и фагоциты - продуценты цитокинов.

ГЛАВА И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1.1. Иммунологические методы исследования.

2.1.1.1. Получение нейтрофилов и моноцитов периферической крови

2.1.1.2. Определение локомоторной функции фагоцитов.

2.1.1.3. Определение фагоцитарной, лизосомальной и НСТ-активности фагоцитов.

2.1.1.4. Методы получения секреторных продуктов нейтрофилов (су-пернатантов интактных и активированных клеток).

2.1.1.5. Исследование локомоторной функции нейтрофилов в условиях опосредованного контакта с живыми бактериями.

2.1.1.6. Изучение локомоторной функции нейтрофилов в условиях опосредованного и прямого контакта с супернатантами нейтрофилов, активированных бактериями.

2.1.1.7. Определение спонтанной и митоген-индуцированной продукции цитокинов ИЛ-1(3, ИЛ-8, ИЛ-4, ИЛ-10, ИНФ-а методом иммуноферментного анализа.

2.1.1.8. Определение спонтанной и митоген-индуцированной продукции цитокинов ИЛ-1(3, ИЛ-8, ИЛ-4, ИЛ-10, ИНФ-а под действием антибактериальных препаратов.

2.1.1.9. Определение маркеров костного метаболизма.

2.1.1.10. Изучение локомоторной активности фагоцитов под воздействием антибактериальных препаратов.

2.1.1.11. Изучение локомоторной активности фагоцитов под воздействием иммунотропных препаратов с целью прогнозирования их хемокинетикотропной активности.

2.2. Статистические методы анализа.

ГЛАВА III. КЛИНИЧЕСКАЯ И ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕТЕЙ С ТРАВМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ

3.1. Клинические и иммунологические особенности течения травматической болезни у детей.

3.1.1. Клинические особенности травматической болезни у детей

3.1.2. Лечение травматической болезни у детей.

3.1.3. Осложнения травматической болезни у детей.

3.1.4. Воспалительные и иммунологические реакции при травмати- 96 ческой болезни у детей.

ГЛАВА IV. ЦИТОКИНОВАЯ РЕГУЛЯТОРНАЯ СЕТЬ ПРИ

ТРАВМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ У ДЕТЕЙ.

4.1. Цитокиновый статус здоровых детей и пациентов с механической травмой.

4.1.1. Цитокиновый статус здоровых детей.

4.1.2. Цитокиновая продукция при травматической болезни у детей

4.2. Локомоторные реакции фагоцитов здоровых детей и пациентов с механической травмой.

4.2.1. Хемотаксическая и хемокинетическая функция фагоцитов здоровых детей.

4.2.2. Хемотаксическая функция фагоцитов детей с неосложненной механической травмой.

4.2.3. Хемокинез фагоцитов у детей с неосложненной механической травмой.

4.2.4. Хемотаксис и хемокинез фагоцитов детей с осложненным течением травматической болезни.

4.3. Взаимосвязь изменений цитокинового профиля и кинетической функции фагоцитов с процессами репаративной регенерации костной ткани при переломах у детей.

ГЛАВА V. ОСОБЕННОСТИ ЛОКОМОТОРНЫХ РЕАКЦИЙ

НЕЙТРОФИЛОВ НА БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ХЕМОАТТРАКТАНТЫ

У ДЕТЕЙ В НОРМЕ И ПРИ ТРАВМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ.

5.1. Хемотаксические реакции нейтрофилов здоровых детей на бактерии и их дериваты.

5.2. Хемотаксические реакции нейтрофилов детей с неосложненной механической травмой на бактерии и их дериваты.

5.3. Хемотаксические реакции нейтрофилов детей с осложненной механической травмой на бактерии и их дериваты.

ГЛАВА VI. ВЛИЯНИЕ АНТИБИОТИКОВ НА ПРОДУКЦИЮ ЦИ

ТОКИНОВ И ХЕМОТАКСИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ НЕЙТРОФИЛОВ У ДЕТЕЙ В НОРМЕ И ПРИ ТРАВМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ

6.1. Модулирующее действие антибиотиков на цитокиновую сеть при травматической болезни у детей.

6.2. Антибиотики и хемотаксическая функция нейтрофилов.

ГЛАВА VII. ПОДБОР ДОЗЫ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ

ДВИГАТЕЛЬНЫХ НАРУШЕНИЙ ФАГОЦИТОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ХЕМОТАКСИЧЕСКОГО МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЯ

7.1. Иммунокорригирующие препараты.

7.2. Подбор дозы препаратов для коррекции двигательных нарушений фагоцитов у детей с травматической болезнью с использованием хемотаксического метода исследования.

7.2.1. Кинетикотропная активность препаратов in vitro.

7.2.2. Исследование влияния метилурацила, нуклеината натрия и АТФ на хемотаксическую функцию фагоцитов.

7.2.3. Результаты клинического применения индивидуально подобранных доз лекарственных препаратов у пациентов с травматической болезнью.

Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Злакоманова, Ольга Николаевна, автореферат

АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

В последние десятилетия отмечается устойчивая тенденция к росту травматизма, что определяет актуальность данной медицинской проблемы. Около 25% пациентов с травмой составляют дети, у которых механические повреждения выступают на первое место как причина заболеваемости, инвалидности и смертности. Посттравматические состояния, приводящие к инвалидности, наблюдаются у 4,5 %, а длительные функциональные расстройства, затрудняющие учебу — у 38 % детей (Кузнечихин Е.А., Немсадзе В.П., 1999; Баиров Г.А., 2000).

Современное понятие травматической болезни трактуется как совокупность местных и общих изменений гомеостаза, обусловленных механической травмой, определяющих жизнедеятельность и адаптивные возможности организма (Александров В.Н., 1982; Ельский В.Н. и соавт., 1988; Лыткин М.И., Петленко В.И., 1988; Долгушин И.И., Эберт Л.Я., Лифшиц Р.И., 1989; Бонда-ренко Н.С., 1990; Беловолова Р.А., 1992; Гембицкий Е.В. и соавт., 1994; Ерю-хин И.А., 1995; Баиров Г.А., 2000; Котельников Г.П., Чеснокова И.Г., 2002; Калинина Н.М. и соавт., 2005; Котельников Г.П., Миронов С.П., 2008). Тяжесть общего состояния, течение посттравматического периода, возникновение гнойных осложнений, процессы тканевой репарации и окончательный исход травматической болезни во многом зависят от характера и амплитуды изменений в гомеостазе, в частности, в его иммунном звене (Долгушин И.И., Эберт Л.Я., Лифшиц Р.И., 1989; Кожевников B.C., 1994; Краснов А.Ф., Котельников Г.П., Чеснокова И.Г., 1996; Чукичев А.В., 1996; Яковенко В.А., 1999; Селиванова Т.А., 2002; Селезнев С.А. и соавт., 2004; Малыш И.Р., Козлов В.К., Згржебловская Л.В., 2005; Котельников Г.П., Миронов С.П., 2008).

Закономерным следствием травмы являются изменения со стороны иммунной системы. Несмотря на непрерывное совершенствование антибактериальной терапии и хирургической техники, инфекционные осложнения, являющиеся одним из основных клинических проявлений иммунной недостаточности, остаются главной причиной смерти у пациентов, особенно детей, с серьезными повреждениями (Киселев В.П., Самойлович Э.Ф., 1985; Кузне-чихин Е.А., Немсадзе В.П., 1999; Баиров Г.А., 2000; Страчунский JI.C., Белоусов Ю.Б., Козлов Ю.Б., 2000; Деллинджер Э.П., 2001; Белобородов В.Б., Митрохин С.Д., 2003; Пхакадзе Т.Я., Вабищевич Н.К., Окропиридзе Г.Г., 2003; Калинина Н.М. и соавт., 2005).

После воздействия повреждающего фактора в ткани развивается острое экссудативно-деструктивное воспаление, основными эффекторами которого являются нейтрофилы и моноциты. От реактивности этих клеток во многом зависит развитие и исход воспалительного процесса (Пальцев М.А., Иванов А.А., 1995; Чукичев А.В., 1996; Яковенко В.А., 1999; Долгушин И.И., Бухарин О.В., 2001; Селиванова Т.А., 2002; Заславская М.И., Маянский А.Н., 2006). В этой связи становится понятным выражение «профессиональные фагоциты», подразумевая, что эндоцитоз клеток Мечникова предназначен не для самообеспечения их жизненных потребностей, а отражает гомеостатиче-ский потенциал в масштабе организма (Маянский А.Н., Пикуза О.И., 1993).

Развитие воспалительной реакции сопровождается привлечением фагоцитирующих клеток и, в первую очередь, нейтрофилов, где они, во-первых, разрушают и удаляют вызвавшие воспаление агенты и поврежденные ткани, а, во-вторых, регулируют поведение клеток, участвующих в воспалительном процессе (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1991; Пауков B.C., Серов В.В., 1995; Долгушин И.И. и соавт., 1998; Смирнов B.C., Фрейдлин И.С., 2000; Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 2000; Долгушин И.И., Бухарин О.В., 2001; Козлов В.А., 2002; Калинина Н.М. с соавт., 2005). Эффективность формирующейся фагоцитарной реакции во многом определяется характером и интенсивностью ее начального этапа — хемотаксиса.

Способность к направленной миграции составляет основу функциональной пластичности фагоцитов, но из-за своей сложности хемотаксис является одной из наиболее уязвимых форм реактивности нейтрофилов и моноцитов. Поэтому многие дисфункции фагоцитов и других иммуноцитов связаны с патологией движения клетки. Снижение двигательной активности фагоцитов может быть результатом не только их повреждения, но и хемотаксиче-ской деактивации, развивающейся после контакта с различными хемоаттрак-тантами и приводящей к угнетению хемотаксиса.

Известно, что механическая травма, вызывает индуцированную форму вторичного иммунодефицитного состояния, характеризующуюся количественными и функциональными изменениями различных гуморальных факторов, активности иммунокомпетентных клеток и приводит к расстройству их цитокиновой регуляции (Александров В.И., 1982; Долгушин И.И., Эберт Л.Я., Лифшиц Р.И., 1989; Зурочка А.В., 1991; Чукичев А.В., 1996; Пинегин В.В. и соавт., 1998; Ярилин А.А., 1999; Смирнов B.C., Фрейдлин И.С., 2000; Студеникина Ю.Н., 2000; Хаитов P.M., 2000; Фрейдлин И.С. и соавт., 2002; Симбирцев А.С., 2004; Сибиряк С.В. и соавт., 2006). Поэтому было бы логично предположить, что аномалии целенаправленной миграции наряду с дефектами цитокиновой регуляторной сети, развивающимися после механической травмы, могут являться одной из главных причин развития гнойного воспаления и нарушения репаративных процессов в поврежденной ткани.

Изучение роли фагоцитов и секретируемых ими медиаторов воспаления в патогенезе травматической болезни и процессах репаративной регенерации костной ткани является весьма актуальной проблемой, еще далекой от окончательного разрешения. Её дальнейшее исследование позволить разработать новые подходы к диагностике и лечению иммунодефицитного состояния при травматических повреждениях, а также определить возможность коррекции нарушенных звеньев гомеостаза.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Целью настоящей работы является исследование роли нарушений двигательных функций фагоцитов (нейтрофилов и моноцитов) в патогенезе травматической болезни у детей, взаимосвязи таких изменений с уровнем цито-кинов, активностью репаративной костной регенерации, возникновением гнойно-воспалительных осложнений, а также разработка патогенетически обоснованных подходов к коррекции выявленных нарушений.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. Изучить базальную и индуцированную митогенами (ЛПС и ФГА) продукцию ИЛ-1(3, ИЛ-10, ИЛ-8, ИЛ-4 и ИНФ-а клетками периферической крови здоровых и травмированных детей.

3. Исследовать хемотаксическую и миграционную активности нейтрофилов и моноцитов периферической крови в ответ на различные хемоаттрак-танты (интерлейкины 1, 2, 8, ГМ-КСФ, лейкинферон, смесь ИНФа2(с)а2(с1), А5 пептид нейтрофилов) у здоровых и травмированных детей и установить взаимосвязь между степенью изменения кинетической функции фагоцитов и уровнем цитокинов.

4. Определить уровни биохимических маркеров костного ремоделиро-вания (кальцитонина, остеокальцина и С-телопептидов коллагена I типа CrossLaps) у здоровых и травмированных детей и их взаимосвязь со степенью нарушения цитокинпродуктивной и локомоторной функций клеток периферической крови у пациентов с механической травмой.

6. Исследовать хемотаксические свойства и способность вызывать "хемотаксическую деактивацию" нейтрофилов у антибиотиков, применяемых при лечении посттравматических гнойно-воспалительных осложнений у детей (амоксиклав, гентамицин, линкомицин, цефотаксим).

7. Выяснить влияние антибактериальных препаратов (амоксиклав, гентамицин, линкомицин, цефотаксим) на спонтанную и индуцированную ЛПС продукцию цитокинов - ИЛ-1(3, ИЛ-4, ИЛ-8, ИЛ-10, ИНФа клетками периферической крови при травматической болезни у детей.

8. Изучить действие иммунотропных препаратов (метилурацил, нук-леинат натрия и АТФ) на подвижность фагоцитов in vitro у здоровых детей и у травмированных пациентов до и после лечения, и на основе этого разработать патогенетически обоснованные подходы к коррекции выявленных нарушений фагоцитарных функций у детей с травматической болезнью.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

В работе впервые установлено, что в процессе развития травматической болезни происходит изменение секреции медиаторов воспаления, проявляющееся в гиперпродукции провоспалительных индукторов и" приводящее к дисбалансу в цитокиновой сети регуляции, большей степени в системе хемокиновых интерлейкинов.

Впервые показано, что антибиотики, используемые в лечении гнойно-воспалительных осложнений при травматической болезни у детей, выступают как модуляторы воспалительной реакции, изменяющие цитокинпродуктивную активность фагоцитов. Определены хемотаксические и хемо-кинетикотропные эффекты амоксиклава, гентамицина, линкомицина, цефо-таксима in vitro в норме и при лечении детей с гнойно-воспалительными осложнениями травматической болезни. Обнаружено, что они усугубляют двигательные дисфункции фагоцитов и опосредованно способствуют замедлению процессов репарации костной ткани.

Разработан оригинальный подход к подбору индивидуальной дозы нуклеината натрия, метилурацила и АТФ на основе оценки их влияния на хемотаксис нейтрофилов и моноцитов in vitro, что позволяет не только снизить уровень интоксикации, но и восстановить у травмированных детей кинетическую функцию фагоцитов, предотвращая развитие посттравматических гнойно-воспалительных осложнений.

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ РАБОТЫ

Настоящим исследованием показано, что фагоциты обеспечивают ба-зальный уровень структурного гомеостаза. Фагоцитарная защита реализуется за счет реакций, которые имеют эффекторную и регуляторную ориентированность и составляют общую систему гуморально-клеточных взаимодействий, направленную на стабилизацию внутренней среды организма. Регуляторную функцию нейтрофилы и моноциты осуществляют посредством секреции биологически активных продуктов, оказывающих модулирующее влияние на систему иммунокомпетентных клеток и органов, процессы репа-ративной регенерации и устойчивость организма к стрессу и инфекциям. Изменение секреции данных факторов, в частности, гиперпродукция провоспа-лительных индукторов и дисбаланс оппозитных цитокинов является одной из причин развития вторичного посттравматического иммунодефицита, характеризующегося локомоторными дисфункциями фагоцитов, которые могут явиться причиной инфекционного осложнения в течение травматической болезни и способствовать нарушению процессов репаративной регенерации костной ткани.

Полученные данные расширяют представление о фагоцитах, в способности которых к поглощению и уничтожению чужеродного материала, раскрывается гомеостатический потенциал в масштабе всего организма.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ И ВНЕДРЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

Разработан метод коррекции нарушений локомоторной функции фагоцитов у детей с травматической болезнью, основанный на изучении хемотаксиса фагоцитов под воздействием различных концентраций препаратов на клетки in .vitro, позволяющий эффективно применять лекарственный препарат через 4—5 часов с момента начала исследования и оптимизировать процесс лечения больных с повреждением опорно-двигательного аппарата, снижая риск развития гнойно-воспалительных осложнений.

На основании полученных данных разработаны "Способ изучения хе-мокинеза нейтрофилов под воздействием биологических веществ", "Способ индивидуального подбора дозы АТФ" и "Способ прогнозирования эффективности нуклеината натрия у детей с травматической болезнью" (рационализаторские предложения: № 149 от 20.03.2000, № 183 от 14.03.2002 года, № 184 от 14.03.2002).

Разработанный методический подход внедрен в практику работы детского городского ортопедотравматологического отделения МУЗ ГП№1 г. Челябинска и ортопедотравматологического отделения ГМЛПУЗ «Челябинская областная клиническая больница» и в лаборатории диагностики иммуноде-фицитных состояний НИИ иммунологии ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Результаты исследований используются в учебном процессе на кафедрах хирургии, ортопедии и травматологии детского возраста и микробиологии, вирусологи, иммунологии ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

2. Нейтрофилы и моноциты периферической крови здоровых детей проявляют хемотаксическую активность к регуляторам иммунного воспаления: ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-8, ГМ-КСФ, смесь ИНФа2(с)а2(с1), лейкинферон, А5-фракция пептидосодержащих секреторных продуктов нейтрофилов, активированных латексом, к живым суточным культурам бактерий, наиболее часто вызывающих хирургическую инфекцию, к антибактериальным препаратам -амоксиклаву, гентамицину, линкомицину, цефотаксиму. Непосредственный контакт in vitro биорегуляторов, микроорганизмов и антибактериальных препаратов вызывает двигательную рефрактерность данных клеток.

3. Одним из проявлений развивающегося иммунодефицитного состояния у детей при травматической болезни является гиперпродукция провоспали-тельных цитокинов с дисбалансом в цитокиновой регуляторной сети, преимущественно в системе хемокиновых интерлейкинов.

4. Дефекты цитокиновой регуляторной сети детерминируют развитие мобилизационной блокады фагоцитов, наиболее выраженной в остром периоде травматической болезни и при развитии гнойно-воспалительных осложнений. Кинезия нейтрофилов и моноцитов взаимосвязана с уровнем остеорепа-рации. Локомоторная дисфункция фагоцитов влияет на интенсивность резор-бтивных процессов и может приводить к замедленному сращению перелома.

5. Антибактериальные препараты, применяемые в качестве средств этио-тропной терапии при лечении гнойно-воспалительных осложнений травматической болезни, выступают как модуляторы цитокин-продуктивной активности фагоцитов и, в целом, воспалительной реакции, что усугубляет двигательные дисфункции данных клеток.

6. Метилурацил, нуклеинат натрия и АТФ обладают выраженным стимулирующим влиянием на угнетенную кинетическую функцию фагоцитов детей с механической травмой. Максимальная эффективность кинетикостиму-лирующего действия этих препаратов достигается подбором индивидуальной дозы, основанным на оценке хемотаксиса клеток к стандартному хемоаттрак-танту под действием различных концентраций препаратов in vitro.

ПУБЛИКАЦИИ

По теме диссертации опубликовано 29 научных работ. Издана монография.

АПРОБАЦИЯ ДИССЕРТАЦИОННОГО МАТЕРИАЛА

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на постер-ной сессии конкурса молодых ученых VI конгресса педиатров России (Москва, 2000); на I научно-практической конференции "Вклад молодых ученых и специалистов в развитие науки и культуры г. Челябинска. Состояние. Проблемы. Перспективы." (Челябинск, 2000); на XIV Российской научной конференции "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях." (Челябинск, 2000); на конференции, посвященной 20-летию ЦНИЛ Челябинской государственной медицинской академии "Современные технологии в биологии и медицине." (Челябинск, 2000); на III Российской межрегиональной конференции, посвященной 60-летнему юбилею Челябинской государственной медицинской академии «Новые технологии и фундаментальные исследования в медицине» (Челябинск, 2002); на межрегиональной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья "Биохимия: от исследования молекулярных механизмов до внедрения в клиническую практику и производство." (Оренбург, 2003); на Российской научно-практической конференции "Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии в педиатрии." (Оренбург, 2003); на У1Г Всероссийском научном Форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге.» (Санкт-Петербург, 2003); на Первой Международной Конференции "Проблемы по-пуляционного здоровья." (Челябинск-Монреаль, 2003); на III конференции иммунологов Урала (Челябинск, 2003); на научной сессии, посвященной 60-летию Челябинской государственной медицинской академии «Актуальные проблемы медицинской науки и практического здравоохранения» (Челябинск, 2004); на конференции, посвященной 10-летию НПЦ диагностики, лечения и профилактики дисбактериозов НИИ иммунологии ЧелГМА и 60-летию ГОУ ВПО "Челябинская государственная медицинская академия МЗ РФ" "Современные проблемы диагностики и лечения дисбактериозов." (Челябинск, 2004); на VIII Всероссийском научном Форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе Дни иммунологии в Санкт-Петербурге. «Молекулярные основы иммунорегуляции, иммунодиагностики и иммунотерапии» (Санкт-Петербург, 2004); на Объединенном Иммунологическом Форуме (Екатеринбург, 2004); на IV конференции иммунологов Урала (Уфа, 2005).

Заключение диссертационного исследования на тему "Цитокинопосредованная дисфункция локомоторной активности фагоцитов и ее коррекция у детей с травматической болезнью"

273 ВЫВОДЫ

1. В процессе развития травматической болезни у детей формируется им-мунодефицитное состояние, характеризующееся изменением клеточного и гуморального звеньев иммунной системы, наиболее выраженном в остром периоде болезни и при развитии гнойно-воспалительных осложнений.

2. Клетки периферической крови здоровых детей обладают цитокин-продуцирующей активностью. Стандартные митогены стимулируют продукцию цитокинов, амплитуда и направленность которой имеют феноменологическое сходство у оппозитных пулов цитокинов, что свидетельствует о состоятельности регуляторных и эффекторных функций цитокиновой системы в норме. Механическое повреждение костной ткани индуцирует гиперпродукцию провоспалительных цитокинов и развитие дисбаланса в цитокиновой регуляторной сети, преимущественно в системе хемокиновых интерлейки-нов.

3. Нейтрофилы и моноциты периферической крови здоровых детей проявляют выраженную хемотаксическую активность к таким регуляторам иммунного воспаления как ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-8, ГМ-КСФ, смесь ИНФа2(с)а2(с1), лейкинферон, А5-фракция пептидосодержащих секреторных продуктов нейтрофилов, активированных латексом, к живым суточным культурам бактерий, наиболее часто вызывающих хирургическую инфекцию, к антибактериальным препаратам - амоксиклаву, гентамицину, линкомицину, цефотакси-му. Непосредственный контакт биорегуляторов, микроорганизмов и антибактериальных препаратов вызывает двигательную деактивацию данных клеток.

5. Увеличение концентрации кальцитонина и С-телопептидов коллагена I типа и снижение уровня остеокальцина в сыворотке крови детей с травматической болезнью свидетельствуют об усилении процессов костной резорбции и угнетении способности к остеобразованию с максимальной выраженностью в катаболическую фазу посттравматического периода.

6. Локомоторные дисфункции фагоцитов, развивающиеся в посттравматическом периоде у детей, обусловливают интенсивность резорбтивных процессов, которая коррелирует с уровнем продукции провоспалительных цитокинов.

7. В условиях контакта с микроорганизмами, вызывающими двигательный «паралич» нейтрофилов, данные клетки секретируют продукты, избирательно усиливающие их локомоторную функцию в отношении этиологического фактора, вызвавшего гнойно-воспалительный процесс в поврежденной ткани.

8. Антибактериальные препараты, применяемые в качестве средств этио-тропной терапии при лечении гнойно-воспалительных осложнений травматической болезни у детей, приводят к изменению цитокин-продуктивной активности фагоцитов, что усугубляет двигательные дисфункции данных клеток.

10.Максимальная эффективность кинетикостимулирующего действия метилурацила, нуклеината натрия и АТФ достигается подбором индивидуальной дозы, основанном на оценке хемотаксиса фагоцитов к стандартному хе-моаттрактанту под действием его различных концентраций in vitro, что позволяет оптимизировать процесс лечения больных с повреждением опорно-двигательного аппарата.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

4. При обнаружении в раннем посттравматическом периоде нарушений хемотаксической активности фагоцитов необходимо назначение препаратов с кинетикотропной свойствами. При выборе таких препаратов целесообразно ориентироваться на действие их различных концентраций на хемотаксическую активность фагоцитов in vitro. При клиническом применении препарата целесообразно использовать концентрацию препарата, оказывающую максимальный кинетикотропный эффект. Лечебная доза определяется с обязательным учетом этой концентрации, абсолютного количества нейтрофилов (моноцитов) крови, ОЦК и массы тела по предлагаемой формуле:

0,075xH(M)xCxmxV

D =---, где

108

D - доза препарата (мг), 0,075 - объем крови на 1 кг массы тела в л/кг; m - масса тела (кг); С - концентрация исследуемого препарата (мг/мл); Н(М) — количество клеток в 1 мл крови (клеток/мл); 108 - количество клеток в лунке; V - объем лунки (0,02 мл).

5. При развитии гнойно-воспалительных осложнений травматической болезни и назначении антибактериальных препаратов необходимо в схему традиционной терапии включать препараты с кинетикотропной активностью.

В заключение считаю своим приятным долгом выразить искреннюю благодарность моим научным консультантам Заслуженному деятелю науки РФ, члену-корреспонденту РАМН, профессору Илье Ильичу Долгушину и профессору Александру Викторовичу Чукичеву за постоянное внимание и помощь на всех этапах работы.

От всей души благодарю коллективы Научно-исследовательского института иммунологии, кафедр хирургии, ортопедии и травматологии детского возраста и оперативной хирургии и топографической анатомии Челябинской государственной медицинской академии, коллективы детских траматологоортопедического и хирургического отделений Челябинской областной клинической больницы, коллектив «Консультативно-диагностического центра Челябинской государственной медицинской академии».

278

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2008 года, Злакоманова, Ольга Николаевна

1. Абдрашитов, Н.Ф. Влияние антибиотиков на систему генерации нейтрофилами крови активных форм кислорода / Н.Ф. Абдрашитов, Ю.А. Романов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 2001. № 12. — С. 641643.

2. Абрикосов, А.И. Основы общей патологической анатомии / А.И. Абрикосов. М. : Медгиз, 1949. - 499 с.

3. Адарченко, А.А. Возбудители хирургической инфекции у детей: устойчивость к антибиотикам и ее динамика / А.А. Адарченко, Ю.К. Абаев, Е.И. Гудкова и др. // Дет. хирургия. 2006. - № 1. - С. 21-24.

4. Александров, В.Н. Патология иммунной системы при травме / В.Н. Александров // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1982. - № 6. - С. 45-47.

5. Александров, В.Н. Функция иммунной системы в остром периоде травматической болезни (экспериментально-клиническое исследование) : ав-тореф. дис. . д-ра мед. наук / В.Н. Александров. Л., 1989. - 32 с.

6. Александрова, Е.Н. Высокочувствительные методы определения С-реактивного белка : обзор лит. / Е.Н. Александрова, А.А. Новиков, Е.Л. Насонова // Клинич. лаб. диагностика. 2004. - № 11. - С. 16-18.

7. Андрианов, В.Л. Лечение открытых переломов костей и их последствий / В.Л. Андрианов, Н.Ф. Сыса. М. : Медицина, 1985. - 259 с.

8. Анохин, П.К. Узловые вопросы теории функциональной системы / П.К. Анохин. -М. : Наука, 1980. 198 с.

9. Антибактериальная терапия : практ. руководство / под ред. Л.С. Страчунского и др. М., 2000. - 191 с.

10. Арцимович, Н.Г. Новые подходы к выбору и применению имму-нокоррекции / Н.Г. Арцимович, Т.А. Фаддева, Т.С. Галушина // Int. J. Immu-norehabilitation. 1997. - № 6. - P. 70-72.

11. Ашкрафт, К.У. Детская хирургия / К.У. Ашкрафт, Т.М. Холдер ; пер. с англ. Т.К. Немиловой. СПб. : Хартфорд, 1996. - Т. 1. - 384 с.

12. Баиров, Г.А. Срочная хирургия у детей : руководство для врачей / Г.А. Баиров. СПб. : Питер, 1997. - 464 с.

13. Баиров, Г.А. Детская травматология / Г.А. Баиров. СПб. : Питер, 2000.-384 с.

14. Бакуев, М.М. К вопросу о реактивности циркулирующих нейтрофилов периферической крови человека / М.М. Бакуев // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1992. - Т. 144, № 11. - С. 542-544.

15. Балабанова, P.M. Система интерферона и ее биологическая роль / P.M. Балабанова, О.Н. Егорова // Вестн. новых мед. технологий. 2005. — Т. 12. -№ 1. - С. 35-37.

16. Баранова, И.Н. Иммунодиагностика и принципы иммунокоррек-ции у больных с гнойно-септическими заболеваниями органов брюшной полости / И.Н. Баранова, Н.М. Федоровский, П.А. Федотов // Вестн. интенсив, терапии. 2000. - № 3. - С. 29-32.

17. Беклемешев, Н.Д. Лейкотриены / Н.Д. Беклемешев // Иммунология. 1985. — № 5. - С. 11-17.

18. Белобородов, В.Б. Стафилококковые инфекции / В.Б. Белобородов, С.Д. Митрохин // Инфекции и антимикроб, терапия 2003. - Т. 1, № 5. - С. 12-18.

19. Беловолова, Р.А. Посттравматические нарушения механизмов неспецифической резистентности, клеточных и гуморальных факторов иммунитета и их коррекция : автореф. дис. . д-ра мед. наук / Р.А. Беловолова. — М., 1992.-36 с.

20. Белокуров, Ю.Н. Сепсис / Ю.Н. Белокуров, А.Б. Граменицкий, В.М. Молодкин. Киев, 1983. - 128 с.

21. Беляков, В.Д. Госпитальная инфекция / В.Д. Беляков, А.П. Коле-сов, П.Б. Остроумов и др. Л. : Медицина, 1976. - 232 с.

22. Беляков, И.М. Изменение функциональной активности макрофагов при ожогах и ее коррекция нуклеинатом натрия / И.М. Беляков, В.М. Земсков // Иммунология. 1992. - № 5. - С. 33-35.

23. Бережная, Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз / Н.М. Бережная. Киев : Наук. Думка, 1988. - 192 с.

24. Бондаренко, Н.С. Открытые переломы у детей, их лечение и исходы / Н.С. Бондаренко // Ортопедия и травматология. 1990. - № 1. - С. 49-56.

25. Боровиков, В.П. Искусство анализа данных на компьютере / В.П. Боровиков — СПб. : Питер, 2001. 656 с.

26. Бурденко, Н.Н. Обозрение современных способов лечения ран / Н.Н. Бурденко // Бурденко, Н.Н. Собрание сочинений / Н.Н. Бурденко. М. : Изд.-во АН СССР, 1952. - Т. 2. - С. 206-210.

27. Бурденко, Н.Н. Сочинения / Н.Н. Бурденко М. : Изд-во АМН СССР, 1951.-Т. 1.-235 с.

28. Вагнер, Е.А. Иммунологические методы в прогнозировании гнойных осложнений при закрытой травме груди / Е.А. Вагнер, Н.А. Шилова // Тезисы докладов I Съезда иммунологов России. Новосибирск, 1992. — С. 67-69.

29. Васильева, Г.И. Кооперативное взаимодействие моно- и полинук-леарных фагоцитов, опосредованное моно- и нейтрофилокинами / Г.И. Васильева, И.А. Иванова, С.Ю. Тюкавкина // Иммунология. 2000. - № 5. - С. 11-17.

30. Винницкий, Л.И. Иммунная терапия сепсиса — миф или реальность / Л.И. Винницкий, И.М. Витвицкая, О.Ю. Попов // Анестезиология и реаниматология. 1997. - № 3. - С. 89-95.

31. Винницкий, Л.И. Отечественные иммунокорректоры в комплексном лечении гнойно-септических осложнений у хирургических больных /

32. Л.И. Винницкий // Успехи клинической иммунологии и аллергологии / под ред. А.В. Караулова. М., 2002. - С. 301-316.

33. Власов, А.В. Секреторная функция нейтрофилов при гнойной инфекции : дис. канд. мед. наук / А.В. Власов. Челябинск, 1989. - 220 с.

34. Веремеенко, К.Н. Протеолиз в норме и при патологии / К.Н. Вере-меенко, О.П. Голобородько, А.И. Кизим. Киев, 1988. - 278 с.

35. Волков, М.В. Лечение закрытых переломов костей у детей / М.В. Волков, Э.Ф. Самойлович, В.П. Киселев // Хирургия. 1995. - № 4. - С. 3236.

36. Вольский, Н.Н. Иммунная система как орган адаптогенеза / Н.Н. Вольский // Методологические аспекты современной иммунологии / АМН СССР СО ; Ин-т клин, иммунологии. — Новосибирск, 1991. — С. 36-45.

37. Воробьев, А.А. Клеточная теория иммунитета И.И. Мечникова и концепция антиинфекционной резистентности / А.А. Воробьев, Н.В. Меду-ницин // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1995. -№ 3. - С. 36-42.

38. Высоцкая, А.Т. Иммунокорригирующая терапия в комплексном лечении больных с острыми гнойными заболеваниями мягких тканей : авто-реф. дис. . канд. мед. наук / А.Т. Высоцкая. Челябинск, 1990. - 21 с.

39. Гланц, С. Медико-биологическая статистика : пер. с англ. / С. Гланц. М. : Практика, 1998. - 459 с.

40. Гембицкий, Е.В. Патология внутренних органов при травме / Е.В. Гембицкий, Л.М. Клячкин, М.М. Кириллов. -М. : Медицина, 1994. 255 с.

41. Гомеостаз / под ред. П.Д. Горизонтова. — М. : Медицина, 1981.575 с.

42. Горизонтов, П.Д. Стресс и система крови / П.Д. Горизонтов, О.И. Белоусова, М.И. Федотова. М. : Медицина, 1983. — 240 с.

43. Гусев, Е.Ю. Системное воспаление с позиции типового патологического процесса / Е.Ю. Гусев, В.А. Черешнев, J1.H. Юрченко // Цитокины и воспаление. 2007. - Т. 6, № 4. - С. 9-21.

44. Гусель, В.А. Справочник педиатра по клинической фармакологии / В.А. Гусель, И.В. Маркова. JI. : Медицина. Ленингр. отд-ние, 1989. - 320 с.

45. Давыдовский, И.В. Огнестрельная рана человека. Морфологический и общепатологический анализ / И.В. Давыдовский. М., 1952. - Т. 1. -358 с.

46. Делинджер, Э.П. Длительность антибиотикотерапии у хирургических пациентов / Э.П. Делинджер // Клинич. микробиология и антимикроб, терапия. 2000. - Т. 2, № 3. - С. 63-67.

47. Делинджер, Э.П. Профилактическое применение антибиотиков в хирургии / Э.П. Делинджер // Клинич. микробиология и антимикроб, терапия. 2001. - Т. 3, № 3. - С. 260-265.

48. Диковская, Е.С. Характеристика первичного очага при гнойной инфекции / Е.С. Диковская, Т.Н. Лукоянова, Л.О, Шкроб и др. // 1 Всесоюзный иммунологический съезд, г. Сочи, 15-17 ноября 1989 : тез. секц. и стенд. сообщ.-М., 1989.-Т. 1.-С. 213.

49. Долгушин, И.И. Иммунный ответ и пути его коррекции при экспериментальных травмах : дис. д-ра мед. наук / И.И. Долгушин. Челябинск, 1980.-417 с.

50. Долгушин, И.И. Специфическое реагирование нейтрофилов на бактериальные хемоаттрактанты / И.И. Долгушин, А.В. Зурочка // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1988. № 3. - С. 69-79.

51. Долгушин, И.И. Иммунология травмы / И.И. Долгушин, Л.Я. Эберт, Р.И. Лифшиц. Свердловск, 1989. - 221 с.

52. Долгушин, И.И. Нейтрофилокины — новые биологически активные продукты / И.И. Долгушин, А.В. Зурочка, А.В. Чукичев // Факторы гуморального и клеточного иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях. — Челябинск, 1990. — С. 41-42.

53. Долгушин, И.И. Участие нейтрофилов в регуляции воспалительно-репаративной реакции поврежденной ткани / И.И. Долгушин, А.В. Зурочка, А.В. Чукичев // Иммунология. 1998. - № 1. - С. 64-66.

54. Долгушин, И.И. Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, О.В. Бухарин. Екатеринбург : Изд-во УроРАН, 2001. — 277 с.

55. Дорофейков, В.В. Белок-белковые взаимодействия альфа-2-макроглобулина человека и их функциональные последствия : автореф. дис. д-ра мед. наук / В.В. Дорофейков. СПб., 2000. - 36 с.

56. Елисеева, Л.С. АТФ и серотонин в иммуномодуляции / Л.С. Елисеева // Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 1993. — № 4. С. 389-391.

57. Елисеева, Л.С. Пути реализации иммуномодулирующих эффектов медиаторов / Л.С. Елисеева // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1992. -№4.-С. 401-404.

58. Ельский, В.Н. Травматическая болезнь: некоторые спорные и нерешенные вопросы / В.Н. Ельский, С.Е. Золотухин, А.Т. Денисов и др. // Ортопедия, травматология и протезирование. 1988. - №2.~ С. 55-58.

59. Ермолович, Е.Ю. Цитокин-опосредованные механизмы развития посттравматических иммунодефицитов : автореф. дис. канд. мед. наук / Е.Ю. Ермолович. Новосибирск, 1993. - 25 с.

60. Ершов, Ф.И. Интерферон и его индукторы / Ф.И. Ершов, А.С. Новохватский. — М. : Медицина, 1980. 176 с.

61. Ершов, Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии / Ф.И. Ершов. -М. : Медицина. 1996. 140 с.

62. Ершов, Ф.И. Медицинская значимость интерферонов и их индукторов / Ф.И. Ершов // Вестн. РАМН. 2004. - № 2. - С. 9-13.

63. Ерюхин, И.А. Концепция «функциональных профилей» в методологии прогнозирования последствия экстремального состояния организма / И.А. Ерюхин // Клинич. медицина и патофизиология. 1995. - № 2. - С. 1217.

64. Зайцев, В.М. Прикладная медицинская статистика. СПб.: ООО «Издательство ФОЛИАНТ», 2003. - 423 с.

65. Заславская, М.И. Нейтрофилзависимое воспаление на фоне дестабилизации внутрисосудистого гомеостаза / М.И. Заславская, А.Н. Маянский // Цитокины и воспаление. 2006. - Т. 5, № 1. - С. 50-52.

66. Земсков, A.M. Иммуномодулирующие, детоксицирующие и рост-стимулирующие свойства нуклеината натрия : автореф. дис. . д-ра мед. наук / A.M. Земсков. Л., 1984. - 31 с.

67. Земсков, В.М. Неспецифические иммуностимуляторы : сообщ. 1 / В.М. Земсков // Успехи соврем, биологии. 1991. - Т. 111, Вып. 3 - С. 444459.

68. Земсков, A.M. Комбинированная иммунокоррекция / A.M. Земсков, А.В. Караулов, В.М. Земсков. М. : Наука, 1994. - 260 с.

69. Злакоманова, О.Н. Двигательные нарушения у детей с травмой / О.Н. Злакоманова, А.В. Чукичев, А.В. Зурочка // Материалы Первой Международной Конференции «Проблемы популяционного здоровья». Челябинск; Монреаль, 2003.-С. 110-112.

70. Змызгова, А.В. Интерферонотерапия вирусных гепатитов : пособие для врачей / А.В. Змызгова. Новосибирск, 2002. - 109 с.

71. Зорин, Н.А. Универсальный регулятор а2-макроглобулин : обзор лит. / Н.А. Зорин, В.Н. Зорина, P.M. Зорина и др. // Клинич. лаб. диагностика. - 2004. - № 11.-С. 18-22.

72. Зурочка, А.В. Влияние нейтрофилокинов на реакции фагоцитов / А.В. Зурочка, А.В. Власов, С.И. Марачев // Моделирование и клиническая характеристика фагоцитарных реакций / под ред. А.Н. Маянского. Горький, 1989.-С. 81-85.

73. Зурочка, А.В. Иммунобиологические свойства секреторных продуктов нейтрофилов (нейтрофилокинов) : дис.д-ра мед. наук / А.В. Зурочка.-СПб., 1991.-231 с.

74. Иванов, К.П. Изменение микроциркуляции при лейкоцитозе / К.П. Иванов, Ю.И. Левкович, С.В. Московская // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1992. - Т. 78, № 6. - С. 86-90.

75. Исаков, Ю.Ф. Инфузионная терапия и парентеральное питание в детской хирургии / Ю.Ф. Исаков, В.А. Михельсон, М.К. Штатнов ; АМН СССР. М. : Медицина, 1985.-288 с.

76. Исхакова, Х.И. Аэробные и факультативно-анаэробные бактерии, выделенные от больных с хирургической инфекцией / Х.И. Исхакова, А.С. Суюмова, Н.Г. Шабанова // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1983. - № 4. - С. 45-50.

77. Калинина, Н.М. Травма: воспаление и иммунитет / Н.М. Калинина, А.Е. Сосюкин, Д.А. Вологжанин и др. // Цитокины и воспаление. — 2005. — Т. 4, № 1. С. 28-35.

78. Канторова, В.И. Возможные источники остеогенеза при регенерации костей свода черепа у взрослых млекопитающих / В.И. Канторова // Ци-тогенетические механизмы гистогенезов. М., 1979. - С. 227-229.

79. Карелин, А.А. Стимулированное ИЛ-2 образование АТФ препаратами обогащенных плазматическими мембранами частиц из Т-клеток / А.А.

80. Карелин, B.C. Демидова, А.Г. Глоба и др. // Вопр. мед. химии 1989. - Т. 35, №3.-С. 120-124.

81. Кассирский, И.А. Клиническая гематология / И.А. Кассирский, Г.А. Алексеев. М., 1970. - 356 с.

82. Катанаев, B.JI. Внутриклеточная передача сигнала при хемотаксисе нейтрофилов : обзор / В.П. Катанаев // Биохимия. 2001. - Т. 66, № 4. - С. 437-456.

83. Кауфман, А.В. Лейкоциты, базофилы и эозинофильные гранулоци-ты / А.В. Кауфман // Воспаление : руководство для врачей / под ред. В.В. Серова, B.C. Паукова. -М., 1995. С. 137-150.

84. Кабуша, Э.А. Функциональное состояние системы нейтрофил-моноцит при генерализованной форме менингококковой инфекции у детей / Э.А. Кабуша, Т.Р. Дроздова, И.Ю. Юшкова и др. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1994. - № 6. — С. 84-86.

85. Кетлинский, С.А. Иммунология для врача / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина. СПб. : Гиппократ, 1998. - 156 с.

86. Киселев, В.П. Множественные и сочетанные травмы у детей / В.П. Киселев, Э.Ф. Самойлович. Л. : Медицина, 1985. - 232 с.

87. Клиническая иммунология : руководство для врачей / под ред. Е.И. Соколова. М. : Медицина, 1998. - 272 с.

88. Клиническая иммунология : учебное пособие / под ред. A.M. Зем-скова. -М : ГЭОТАР-Медиа, 2006. 320 с.

89. Клюева, Г.Ф. Регуляция восстановительных процессов в костной ткани животных различными препаратами костной РНК / Г.Ф. Клюева, О.П. Тимошенко, Л.А. Кладченко и др. // Ортопедия, травматология и протезирование. 1977. -№ 7. - С. 19-23.

90. Ключевский, В.В. Скелетное вытяжение / В.В. Ключевский. Л. : Медицина, 1991. - 160 с.

91. Кнорринг, Г.Ю. Цитокиновая сеть как мишень системной энзимо-терапии / Г.Ю. Кнорринг // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 4. - С. 45-49.

92. Ковальчук, JI.B. Хемокины новое семейство цитокинов, регулирующих миграцию лейкоцитов / JI.B. Ковальчук, Р.Т. Сайгитов // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 2000. — № 1. - С. 90-94.

93. Ковальчук, JI.B. Антигенные маркеры клеток иммунной системы человека CD : метод, рекомендации / JI.B. Ковальчук. М., 2003. - 76 с.

94. Коен, С. Механизмы иммунопатологии : пер. с англ. / С. Коен, П. А. У орд, Р.Т. Мак-Класки. М. : Медицина, 1983. - 400 с.

95. Кожевников, B.C. Патогенетическая гетерогенность посттравматических иммунодефицитов, диагностика и коррекция : автореф. дис. . д-ра мед. наук. Новосибирск, 1994. - 58 с.

96. Козлов, В.А. Некоторые аспекты проблемы цитокинов / В.А. Козлов // Цитокины и воспаление. 2002. - Т. 1, № 1. - С. 5-8.

97. Козлов, И.Г. Рецепторы контактного взаимодействия / И.Г. Козлов, Н.К. Горлина, А.Н. Чередеев // Иммунология. 1995. - № 4. - С. 14-24.

98. Коленчукова, О.А. Дозозависимое влияние пенициллина на активность метаболических ферментов штаммов Staphylococcus epidermidis / О.А. Коленчукова, А.А. Савченко // Антибиотики и химиотерапия. 2005. - Т. 50, № 4. - С. 3-6.

99. Конусова, В.Г. Влияние рекомбинантного интерлейкина-ЦЗ на хемотаксическую активность нейтрофильных лейкоцитов / В.Г. Конусова, А.С. Симбирцев, С.А. Кетлинский // Вестн. РАМН. 1993. - № 2. - С. 27-29.

100. Конусова, В.Г. Изучение особенностей миграции нейтрофилов человека к интерлейкину-8 / В.Г. Конусова, А.Ю. Котов, А.С. Симбирцев // Иммунология. 1998. - № 6. - С. 30.

101. Корнилов, Н.В. Травматология: Краткое руководство для практических врачей / Н. В. Корнилов, Э.Г. Грязнухин, В.И. Осташко. СПб. : Гиппократ, 1999.-240 с.

102. Корнилов, Н.В. Адаптационные процессы в органах скелета / Н.В. Корнилов, А.С. Аврунин; Рос. НИИ травматологии и ортопедии им. P.P. Вре-дена. СПб. : Морсар АВ, 2001. - 296 с.

103. Короткова, Т.Н. Провоспалительные иммунные факторы при ато-пии и пищевой непереносимости у детей раннего возраста с атопическим дерматитом / Т.Н. Короткова, Т.Б. Сенцова, С.Н. Денисова и др. // Рос. педиатр. журн. 2007. - № 2. - С. 27-32.

104. Костюченко, A.JI. Иммунный ответ организма на хирургическую инфекцию / A.JI. Костюченко // Хирургические инфекции : руководство / под ред. И.А. Ерюхина, Б.Р. Гельфанда, С.А. Шляпникова. СПб. : Питер, 2003. — С. 114-130.

105. Котельников, Г.П. Травматология : учебник для пред- и постдиплом. подготовки и студентов старших курсов / Г.П. Котельников. 2-е изд., перераб. и доп. - Самара : Самар. Дом печати, 2001. - 480 с.

106. Котельников, Г.П. Медикаментозная и физиотерапевтическая коррекция репаративных процессов при переломах длинных трубчатых костей : учеб. пособие / Г.П. Котельников, А.В. Яшков. Самара, 2002. - 36 с.

107. Котельников, Г.П. Травматическая болезнь : монография / Г.П. Котельников, И.Г. Чеснокова. М. : Медицина, 2002. — 154 с.

108. Котельников, Г.П. Травматология и ортопедия : учебник / Г.П. Котельников, С.П. Миронов, В.Ф. Мирошниченко. М. : ГЭОТАР-Медиа, 2006. -400 с.

109. Краснов, А.Ф. Новые аспекты травматической болезни / А.Ф. Краснов, Г.П. Котельников, И.Г. Чеснокова // Int. J. Immimorehabilitation. -1996.-№2.-P. 133.

110. Кудрявцев, И.В. Эволюция каскада комплемента: ранние этапы / И.В. Кудрявцев, А.В. Полевщиков // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 1.-С. 11-21.

111. Кузнецов, В.П. Интерфероны как средство иммуномодуляции / В .П. Кузнецов // Иммунология. 1987. - № 4. - С. 30-34.

112. Кузнечихин, Е.А. Множественная и сочетанная травма опорно-двигательной системы у детей / Е.А. Кузнечихин, В.П. Немсадзе. М. : Медицина, 1999. -336 с.

113. Кулагин, В.К. Патологическая физиология травмы и шока / В.К. Кулагин. JI. : Медицина, 1978. - 237 с.

114. Курбангалиев, С.М. Гнойная инфекция в хирургии. Принципы и методы лечения / С.М. Курбангалиев. М. : Медицина, 1985. - 272 с.

115. Лебедев, В.Ф. Иммунотерапия рекомбинантным интерлейкином-2 тяжелых ранений и травм / В.Ф. Лебедев, В.К. Козлов, С.В. Гаврилин и др. — СПб. : Изд-во СПб. ун-та, 2001. 72 с.

116. Лебедев, К.А. Иммунная недостаточность / К.А. Лебедев, И.Д. По-някина. М. : Мед. кн. ; Н. Новгород : Изд-во НГМА, 2003. - 443 с.

117. Лебедева, Т.Н. Циркулирующие иммунные комплексы в диагностике аллергической реакции иммунокомплексного типа / Т.Н. Лебедева,

118. A.В. Соболев, Минина С.В. и др. // Клинич. лаб. диагностика. 2004. - № 11. -С. 11-13.

119. Левандер, Г. Некоторые аспекты способности лейкоцитов к тканевой индукции / Г. Левандер // Метаплазия тканей. М., 1970. - С. 8-12.

120. Лифшиц, В.М. Биохимические анализы в клинике : справочник /

121. B.М. Лифшиц, В .И. Сидельникова. М. : МИА, 1998. - 303 с.

122. Лихолетов, С.М. Хемотаксис фагоцитов биологические аспекты и методы его определения / С.М. Лихолетов, Н.Г. Бакулина // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1983. - № 12. - С. 10-15.

123. Лысикова, М. Механизмы воспалительной реакции и воздействие на них с помощью протеолитических энзимов / М. Лысикова, М. Вальд, 3. Масиновски // Цитокины и воспаление. 2004. - Т. 3, № 3. - С. 48-53.

124. Лыткин, М.И. Методологические аспекты учения о травматической болезни / М.И. Лыткин, В.И. Петленко // Вестн. хирургии им. И.И. Грекова. 1988. - № 8. - С. 3-8.

125. Ляшев, Ю.Д. Влияние опиоидных пептидов на фагоцитарную активность нейтрофильных гранулоцитов крови при травме / Ю.Д. Ляшев // Иммунология. 2000. - № 6. - С. 22-24.

126. Мазинг, Ю.А. Нейтрофильные гранулоциты и системы защиты организма / Ю.А. Мазинг //Арх. патологии. 1991. - Т. 53, № 9. - С. 70-73.

127. Макаров, В.К. Особенности содержания иммуноглобулинов в сыворотке крови у бессимптомных носителей HBsAg, больных алкоголизмом / В.К. Макаров // Клинич. лаб. диагностика. 2004. - № 11. - С. 13-16.

128. Малыш, И.Р. Профиль цитокинов в динамике посттравматического периода у пострадавших с тяжелой политравмой / И.Р. Малыш, В.К. Козлов, Л.В. Згржебловская // Укр. журн. экстремальн. медицины. 2005. - Т. 6, № 3. -С. 66-77.

129. Маркелова, Е.В. Система цитокинов у больных с острыми повреждениями легких и клинико-иммунологическое обоснование терапии лейкин-фероном : дис. . д-ра мед. наук / Е.В. Маркелова. Владивосток, 2000. - 295 с.

130. Маркелова, Е.В. Состояние системы цитокинов при нозокомиаль-ных пневмониях / Е.В. Маркелова, Б.И. Гельцер, И.В. Корявченкова // Цитокины и воспаление.-2003.-Т. 2,№1.-С. 14-19.

131. Маянский, А.Н. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия: метод. рекомендации / А.Н. Маянский, М.К. Виксман. — Казань, 1979. 11 с.

132. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Новосибирск : Наука, 1983. - 264 с.

133. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск : Наука. Сиб. отд-ние, 1989. - 344 с.

134. Маянский, Д.Н. Хроническое воспаление / Д.Н. Маянский. М. : Медицина, 1991.-272 с.

135. Маянский, А.Н. Клинические аспекты фагоцитоза / А.Н. Маянский, О.И. Пикуза. Казань : Магариф, 1993. - 192 с.

136. Маянский, А.Н. Современная эволюция идеи И.И. Мечникова о внутрисосудистом воспалении / А.Н. Маянский // Иммунология. 1995. - № 4.-С. 8-14.

137. Маянский, Д.Н. Фагоцитарные реакции в патологии / Д.Н. Маянский Д.Д. Цырендоржиев, А.А. Зубахина и др. // Первый Российский конгресс по патофизиологии. М., 1996. — С. 269.

138. Медуницин, Н.В. Медиаторы иммунного ответа / Н.В. Медуницин // Russ. J. Immunol. 1999. - Vol. 4, Suppl. 1. - P. 79-84.

139. Мечников, И.И. Разные статьи по вопросам воспаления и иммунитета / И.И. Мечников // Мечников, И.И. Полное собрание трудов / И.И. Мечников,. М. : Медгиз, 1952-1964. - Т. 5-Т. 7.

140. Мирошник, О.А. Иммуномодуляторы в России : справочник / О.А. Мирошник, Ю.В. Редькин. Омск : Полиграф, центр, 2004. - 342 с.

141. Навашин, C.M. Рациональная антибиотикотерапия: справочник. — 4-е изд., перераб. и доп. / С.М. Навашин, И.П. Фомина. М. : Медицина, 1982.-496 с.

142. Назаров, П.Г. С-реактивный белок в системе иммунорегуляции / П.Г. Назаров, Б.Н. Софронов // Иммунология. 1986. - № 4. - С. 12-18.

143. Назаров, П.Г. Реактанты острой фазы воспаления / П.Г. Назаров. — СПб. : Наука, 2001.-423 с.

144. Нельсон, Дж. Д. Антимикробная терапия в педиатрии. 1996-1997 : справочник / Дж. Д. Нельсон / пер. с англ. А.А. Шура ; под . ред. Ю.Н. Дер-кача. Витебск : Белмедкшга, 1997. - 128 с.

145. Нестерова, И.В. Цитокиновая регуляция и функционирующая система нейтрофильных гранулоцитов / И.В. Нестерова, Н.В. Колесникова // Гематология и трансфузиология. 1999. - № 2. - С. 43-47.

146. Нестерова, И.В. Иммунотропные препараты и современная иммунотерапия в клинической иммунологии и медицине / И.В. Нестерова, Р.И. Сепиашвили // Аллергология и иммунология. — 2000. Т. 1. - С. 18-28.

147. Нестерова, И.В. Физиологическая роль нейтрофильных гранулоцитов в поддержании иммунного гомеостаза / И.В. Нестерова // Russ. J. Immunol. 2004. - Vol. 9, Suppl. 1. - P. 17.

148. Никитин, А.В. Методические подходы к изучению действия антибиотиков на иммунную систему / А.В. Никитин // Антибиотики и химиотерапия. 1990. - Т. 35, № 8. - С. 45-48.

149. Новиков, B.C. Иммунофизиология экстремальных состояний / B.C. Новиков, B.C. Смирнов. СПб. : Наука, 1995. - 172 с.

150. Пхакадзе, Т.Я. Микробиологическая характеристика инфекционных осложнений в травматологии и ортопедии. Современные проблемы антимикробной химиотерапии : тез. V Рос. конф. / Т.Я. Пхакадзе, Н.К. Вабище-вич, Г.Г. Окропиридзе. — М., 2003. С. 13.

151. Пальцев, М.А. Межклеточное взаимодействие / М.А. Пальцев, А.А. Иванов. М. : Медицина, 1995. - 224 с.

152. Пивоварова, Л.П. Функциональная активность лейкоцитов при травматической болезни : автореф. дис. . канд. мед. наук / Л.П. Пивоварова. -Л., 1988.-20 с.

153. Пивоварова, Л.П. Оценка эффективности иммунотерапии у пострадавших с тяжелой механической травмой / Л.П. Пивоварова, О.Б. Ари-скина, Н.А. Кладухина и др. // Иммунология. 1998. — № 6. - С. 41-42.

154. Пигаревский, В.Е. О секреторной активности полиморфноядерных лейкоцитов / В.Е. Пигаревский // Арх. патологии. 1982. - Т. 44, № 5. - С. 312.

155. Пинегин Б.В. Иммунодиагностика и иммунотерапия хирургических инфекций / Б.В. Пинегин, Т.М. Андронова, Т.И. Юдина // Int. J. Immu-norehabilitation. 1998. - № 10. - С. 86-99.

156. Полежаев, Л.В. Метаплазия и индукция по Левандеру / Л.В. Полежаев // Метаплазия тканей. М., 1970. — С. 45-69.

157. Попов, С.Д. Иммунологическая реактивность организма и инфекционные осложнения травм. Иммунотерапия и иммунокоррекция / С.Д Попов, В.Х. Хавинсон, К.Я. Гуревич и др. // Вестн. хирургии им. И.И. Грекова. -1986.-№7. -С. 141-143.

158. Потапнев, М.П. Влияние цитокинов воспаления на фагоцитоз и бактерицидную активность нейтрофилов человека / М.П. Потапнев, Д.В. Печковский // Иммунология. 1992. - № 3. - С. 34-36.

159. Печковский, Д.Н. Усиление бактерицидности, но не фагоцитарной активности нейтрофилов человека под действием интерлейкина-6 / Д.Н. Печковский, М.И. Потапнев, А.В. Вознюк // Иммунология. 1993. — № 6. - С. 2930.

160. Полевщиков, А.В. Влияние С-реактивного белка и нейтрофилов на митогениндуцированную бластрансформацию лимфоцитов человека / А.В. Полевщиков, П.Г. Назаров // Иммунология. — 1992. № 6. - С. 37-38.

161. Полевщиков, А.В. С-реактивный белок модулирует адгезивность и биоцидность нейтрофилов / А.В. Полевщиков, П.Г. Назаров, JI.K. Берестовая // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1994. - № 1. — С. 69-72.

162. Потапнев, М.П. Иммунорегуляция антимикробной активности нейтрофилов / М.П. Потапнев, Д.В. Печковский // Иммунология. 1994. - № 5.-С. 4-5.

163. Потапнев, М.П. Цитокиновая сеть нейтрофилов при воспалении / М.П. Потапнев // Иммунология. 1995. - № 4. - С. 34-40.

164. Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии / под ред. JI.C. Страчунского, Ю.Б. Белоусова, С.Н. Козлова. Смоленск : МАКМАХ, 2007. - 464 с.

165. Раны и раневая инфекция : руководство для врачей / под ред. М.И. Кузина, Б.М. Костюченок. 2-е изд., перераб. и доп. - М. : Медицина, 1990. -592 с.

166. Рафальский, В.В. Клиническое применение препаратов интерферона / В.В. Рафальский. Смоленск : Русич Принт, 1997. - 234 с.

167. Ревелл, П.А. Патология кости : пер. с англ. / П.А. Ревелл. М. : Медицина, 1993. - 368 с.

168. Редькин, Ю.В. Анализ взаимосвязей показателей системы иммунитета в динамике травматической болезни / Ю.В. Редькин, Т.Ф. Соколова // Патол. физиология и эксперим. терапия. — 1988. № 5. - С. 8-12.

169. Розинов, В.М. Изолированные и сочетанные механические травмы / В.М. Розинов, Р.А. Кашишян. Пермь, 1999. - С. 104-107.

170. Ройт, А. Основы иммунологии : пер. с англ. / А. Ройт. М. : Мир, 1991.-327 с.

171. Русаков, А.Б. Классификация множественных повреждений опорно-двигательного аппарата / А.Б. Русаков // Ортопедия, травматология и протезирование. 1981.-№ 11.-С. 38-39.

172. Рыбакина, Е.Г. Трансдукция сигнала интерлейкина-1 в процессах взаимодействия нервной и иммунной систем организма / Е.Г. Рыбакина, Е.А. Корнева // Вестн. РАМН. 2005. - № 7. - С. 3-8.

173. Савицкая, К.И. Тиенам (имипенем/циластатин) как средство эмпирической антибиотикотерапии / К.И. Савицкая, В.Н. Насонов, А.Г. Нехоро-шева и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1993. - Т. 38, № 12. - С. 29-33.

174. Саркисов, JI.C. Синтез РНК в полиморфноядерных лейкоцитах гнойной раны / Л.С. Саркисов, А.А. Пальцын, Е.Г. Колокольчикова и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1984. — № 10. - С. 499-502.

175. Селиванова, Т.А. Влияние энтеросорбции на функции фагоцитирующих клеток у детей с травматической болезнью : дис. . канд. мед. наук / Т.А. Селиванова. Челябинск, 2002. - 210 с.

176. Семененко, Т.А. Эпидемиологическая эффективность неспецифической профилактики острых респираторных инфекций в организованных коллективах / Т.А. Семененко // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1988. - № 11. - С. 71-75.

177. Семененко, Т.А. Эпидемиологические аспекты неспецифической профилактики инфекционных заболеваний / Т.А. Семененко // Вестник РАМН. 2001. - № 11. - С. 25-29.

178. Сепиашвили, Р.И. Естественные киллеры и биогенные амины: па-ракринная регуляция в иммунной системе / Р.И. Сепиашвили, И.П. Балмасо-ва // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 2005. - Т. 91, № 8. - С. 927-941.

179. Серов, В.В. Иммунологические и иммунопатологические аспекты воспаления / В.В. Серов // Воспаление : руководство для врачей / под ред. В.В. Серова, B.C. Паукова. М. : Медицина, 1995. - С. 219-240.

180. Сибиряк, С.В. Цитокиновая регуляция биотрансформации ксенобиотиков и эндогенных соединений / С.В. Сибиряк, В.А. Черешнев, А.С. Симбирцев и др. Екатеринбург : Изд-во УрО РАН, 2006. - 162 с.

181. Симбирцев, А.С. Сравнительная характеристика пирогенного и лимфоцитактивирующего действия ИЛ-1 кролика / А.С. Симбирцев, А.С. Рыбакина, Н.Д. Перумов и др. // Иммунология. 1987. - № 4. - С. 79-82.

182. Симбирцев, А.С. Биология семейства интерлейкина-1 человека / А.С. Симбирцев // Иммунология. 1998. - № 3. - С. 9-16.

183. Симбирцев, А.С. Сравнение цитокинов по способности влиять на уровень секреции интерлейкина-8 эндотелиальными клетками / А.С. Симбирцев // Иммунология. 2002. - Т. 23, № 1. - С. 32-37.

184. Симбирцев, А.С. Цитокины новая система регуляции защитных реакций организма / А.С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. - 2002. - № 1.-С. 9-16.

185. Симбирцев, А.С. Цитокины: классификация и биологические функции / А.С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2004. - Т. 3, № 2. - С. 16-23.

186. Системная энзимотерапия / под ред. В.И. Мазурова, A.M. Лилы, Ю.И. Стернина 2-е изд., перераб. и доп. - СПб. : Моби Дик, 1997. - 160 с.

187. Системная энзимотерапия. Теоретические основы, опыт клинического применения / под ред. К.Н. Веремеенко, В.Н. Коваленко Киев : Морион, 2000. - 320 с.

188. Смирнов, B.C. Состояние иммунной системы при механической и термической травме / B.C. Смирнов // Иммунодефицитные состояния / под ред. B.C. Смирнова, И.С. Фрейдлин. СПб. : Фолиант, 2000. - С. 369-392.

189. Соков, C.JI. Информационное моделирование адаптационных синдромов травматических стресс ситуаций / C.JI. Соков, Л.П. Соков // Вест. РУДН. Сер. Медицина. 1999. -№ 1. - С. 91-99.

190. Справочник по лабораторным методам исследования / под ред. Л.А. Даниловой. СПб. : Питер, 2003. - 727 с.

191. Стандарты антибактериальной терапии : справочник : пер. с англ. / ВОЗ. М. : Мед. лит., 2005. - 288 с.

192. Стефании, Д.В. Клиническая иммунология и иммунопатология детского возраста: руководство для врачей / Д.В. Стефании, Ю.Е. Вельтищев.- М. : Медицина, 1996. 384 с.

193. Стручков, В.И. Руководство по гнойной хирургии / В.И. Стручков, В.К. Гостищев, Ю.В. Стручков. М. : Медицина, 1984. - 512 с.

194. СтуДеникина, Ю.Н. Значение исследованния локомоторной функции нейтрофилов в определении вида возбудителя : дис. . канд. мед. наук / Ю.Н. Студеникина. — Челябинск, 2000. 215 с.

195. Сягайло П.Т. Стимуляция роста длинных трубчатых костей мети-лурацилом / П.Т. Сягайло, Л.Н. Бондарюк, С.Д. Величко и др. // Вестн. хирургии им. И.И. Грекова. 1989. - № 9. - С. 98-98.

196. Тартаковский, И.С. Механизмы внутрифагоцитарного паразитизма легионелл и других бактерий / И.С. Тартаковский, Ю.Ф. Белый, С.В. Прозоровский // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 1989.12.-С. 93-100.

197. Терновой, Н.К. Стимуляция репаративного остеогенеза интерфе-роногеном Poly I : Poly С / Н.К. Терновой, Э.В. Биняшевский, Л.А. Носкин и др. // Ортопедия, травматология и протезирование. 1977. - № 7. - С. 23-27.

198. Титов, В.Н. С-реактивный белок: физико-химические свойства, методы определения и диагностическое значение / В.Н. Титов, О.П. Близню-ков // Клинич. лаб. диагностика. 2004. - № 4. - С. 3-9.

199. Ткаченко, С.С. О терминологии в травматологии / С.С. Ткаченко // Вестн. хирургии им. И.И. Грекова. 1992. - № 6. - С. 352-354.

200. Тотолян, А.А. Клетки иммунной системы / А.А. Тотолян, И.С. Фрейдлин. СПб. : Наука, 2000. - 231 с.

201. Травматизм и лечение травм у детей : сб. научн. тр. НИДОИ им. Г.И. Турнера / под ред. B.JI. Андрианова. Л., 1987. — 174 с.

202. Травматическая болезнь / под ред. И.И. Дерябина, О.С. Насонкина. М. : Медицина, 1987. - 350 с.

203. Травматическая болезнь и ее осложнения / под ред. С.А. Селезнева и др. СПб. : Политехника, 2004. - 414 с.

204. Травматология и ортопедия : руководство для врачей : в 3 т. / под ред. Ю.Г. Шапошникова. М. : Медицина, 1997. - Т. 1. - 655 с.

205. Травматология и ортопедия : учебник / под ред. В.М. Шаповалова и др. СПб. : Фолиант, 2004. - 544 с.

206. Травматология : национальное руководство / под ред. Г.П. Котель-никова, С.П. Миронова. М. : ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 808 с. - (Сер. «Национальные руководства»).

207. Усмонхонов, О.А. Особенности иммунного статуса в реабилитационном периоде при сочетанной травме / О.А. Усмонхонов, П.С. Джалилов, У. Ибрагимов // Паллиатив, медицина и реабилитация. 2000. - № 1-2. - С. 86.

208. Ухов, А.Я. Иммунологические сдвиги в организме больных при множественных и сочетанных травмах / А.Я. Ухов, И.М. Федченко, О.М. На-репеха и др. // Клинич. хирургия. 1990. — № 4. — С. 8-9.

209. Фил ев, Л.В. Особенности резерва грануломонопоэза при различных видах травм / Л.В. Филев, В.А. Шелухин // Клинико-иммунологические аспекты травматической болезни. Л., 1984. - С. 109-116.

210. Фрейдлин, И.С. Ключевая позиция макрофагов в цитокиновой сети / И.С. Фрейдлин // Иммунология. 1995. - № 3. - С. 44-48.

211. Фрейдлин, И.С. Дефекты цитокиновой сети и принципы их коррекции / И.С. Фрейдлин // Иммунология. 1998. — № 6. - С. 23-25.

212. Фрейдлин, И.С. Иммунная система и ее дефекты / И.С. Фрейдлин.- СПб. : Полисен, 1998. 111 с.

213. Фрейдлин, И.С. Цитокины в клинике // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. М., 1998.-С. 104-112.

214. Фрейдлин, И.С. Иммунные комплексы и цитокины / И.С. Фрейдлин, С.А. Кузнецова // Мед. иммунология. 1999. - Т. 1, № 1-2. - С. 27-36.

215. Фрейдлин, И.С. Регуляторные функции провоспалительных цитокинов и острофазных белков / И.С. Фрейдлин, П.Г. Назаров // Вестн. РАМН.- 1999. -№ 5. -С. 28-32.

216. Фрейдлин, И.С. Клетки иммунной системы / И.С. Фрейдлин, А.А. Тотолян. СПб.: Наука, 2001. - 390 с.

217. Фрейдлин, И.С. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии : учеб. пособие для студентов мед. вузов / И.С. Фрейдлин, В.В. Тец, Л.Б. Борисов и др. М. : Медицина, 2002. - 351 с.

218. Хаитов, P.M., Некоторые избранные проблемы функциональной активности макрофагов / P.M. Хаитов, В.М. Земсков // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1995. - № 3. - С. 27-32.

219. Хаитов, P.M. Оценка иммунной системы человека: современное состояние вопроса, сложности и достижения / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин,

220. A.Н. Чередеев // Иммунология. 1998. - № 6. - С. 8-10.

221. Хаитов, P.M. Современные представления о защите организма от инфекции / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2000. - № 1. — С. 61-64.

222. Хейфец, Л.Б. Разделение форменных элементов крови человека в градиенте плотности верографин-фиколл / Л.Б. Хейфец, В.А. Абалакина // Лаб. дело. 1973.- № 10.-С. 579-581.

223. Цыбулькин, Э.К. Шок у детей / Э.К. Цыбулькин // Баиров, Г.И. Детская травматология / Г.И. Баиров. СПб. : Питер, 2000. - С. 10-18.

224. Шапошников, Ю.Г. Концепция травматической болезни на современном этапе / Ю.Г. Шапошников, Г.И. Назаренко, Н.П. Миронов // Ортопедия, травматология и протезирование. 1989. — № 9. - С. 65-70.

225. Шилова, Н.А. Оценка различных звеньев иммунной системы при закрытой травме грудной клетки : автореф. дис. канд. мед. наук / Н.А. Шилова. Пермь, 1995. - 23 с.

226. Шиффман, Ф.Дж. Патофизиология крови : пер. с англ. / Ф. Дж. Шиффман. М. : Бином ; СПб. : Невский Диалект, 2000. - 448 с.

227. Черешнев, В.А. Иммунофизиология / В.А. Черешнев, Б.Г. Юшков,

228. B.Г. Климин и др. Екатеринбург : Изд-во УрО РАН, 2002. - 259 с.

229. Чеснокова, И.Г. Изменения в иммунной системе при травматической болезни (клинико-патогенетическое, прогностическое значение, коррекция) / И.Г. Чеснокова // Иммунология. 2000. - № 6. - С. 39-42.

230. Чижик-Полейко, А.В. Актуальные вопросы детской травматологии-ортопедии / А.В. Чижик-Полейко. СПб., 1993. - 216 с.

231. A.В. Чукичев. Челябинск, 1984. - 276 с.

232. Чукичев, А.В. Иммунобиологическая активность нейтрофилов при травматической болезни : дис. . д-ра мед. наук / А.В. Чукичев. — Челябинск, 1996.-325 с.

233. Эберт, Л.Я. Модификация метода изучения функциональной активности моноцитов периферической крови, культивируемых in vitro / Л.Я. Эберт, С.И. Марачев, А.В. Чукичев // Лаб. дело. 1983. - № 2. - С. 26-29.

234. Эберт, Л.Я. Способ определения вида бактериальной инфекции : а.с. 1156644 / Л.Я. Эберт, А.В. Чукичев, А.В. Зурочка, С.И. Марачев, Л.Б. Но-вокрещенов (СССР) ; Челяб. мед. ин-т. № 3520102/28-13 ; заявл. 10.12.82 ; опубл. 1 05.85, Бюл. № 19. - С. 9-13.

235. Эберт, Л.Я. Способ диагностики вида бактериальной инфекции / Л.Я. Эберт, А.В. Зурочка, А.В. Чукичев // Лаб. дело. 1988. - № 6. - С. 18-20.

236. Яковенко, В.А. Кооперация "нейтрофил-моноцит" при операционной травме и роль ее дефектов в прогнозировании гнойно-воспалительных осложнений у детей : дис. . канд. мед. наук / В.А. Яковенко. Челябинск, 1999.- 193 с.

237. Яковлев, Г.М. Резистентность, стресс, регуляция / Г.М. Яковлев,

238. B.C. Новиков, В.Х. Хавинсон. Л. : Наука, 1990. - 238 с.

239. Ярилин, А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии / А.А. Ярилин // Иммунология. 1997. — № 5. —1. C. 7-14.

240. Ярилин, А.А. Основы иммунологии : учебник / А.А. Ярилин. М. : Медицина, 1999. - 608 с.

241. Ярцев, М.Н. Контолируемые рандомизированные клинические испытания иммуномодуляторов диуцифона и нуклеината натрия у детей с рецидивирующими гнойными инфекциями / М.Н. Ярцев, Г.И. Комель, Л.А. Гомес // Педиатрия. 1991. -№ 3. - С. 55-59.

242. Ястребов, А.П. Система крови и регенерация костной ткани / А.П. Ястребов, А.В. Осипенко. Свердловск : Изд-во Урал, ун-та, 1990. - 124 с.

243. Abbas, A. Cellular and molecular immunology / A. Abbas, A. Licht-man, J. Rober. New York : W.B. Saunder Company, 1991. - 420 p.

244. Adams, D.H. Chemokines: leucocyte recruitment and activation cytokines / D.H. Adams, A.R. Lloyd // Lancet. 1997. - Vol. 349. - P. 490-495.

245. Armstrong, P.B. a2-macroglobulin: an evolutionarily conserved arm of the innate immune system / P.B. Armstrong, J.P. Quigley // Dev. Сотр. Immunol. 1999. - Vol. 23. - P. 375-390.

246. Bauer, A.R. The depression of T-lymphocyte after trauma / A.R. Bauer, C. McNeil, E. Trentelman et al. // Am. J. Surg. 1978. - Vol. 136. - P. 674-680.

247. Bazan, J. A new class of membrane-bound chemokine with a CX 3C motif / J. Bazan, K. Bacon, G. Hardiman et al. // Nature. 1997. - Vol. 385. - P. 640-644.

248. Beckner, S.K. Inhibition of adenylate cyclase by IL2 in human T lymphocytes is mediated by protein kinase С / S.K. Beckner, W.L. Farrar // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1987. - Vol. 145, № 1. - P. 176-182.

249. Bendizen, K. Cytokines and natural of cytokines / K. Bendizen // Immunol. Let.- 1994.-Vol. 43, № 1/2.-P. 111-113.

250. Bjerum, O.W. p2-Microglobulin in neutrophils: An intragranular protein / O.W. Bjerum, O.J. Bjerum, N.B. Borregaard // J. Immunol. 1987. - Vol. 11.-P. 47-58.

251. Bjorkstein, B. Early immune responses to allergens / B. Bjorkstein // Int. Arch. Allergy. Immunol. 1997. - Vol. 113, № 1-3. - P. 80-82.

252. Bodo, M. Effects of interleukin-1 on the deoxyribonucleic acid and collagen synthesis in human osteoblastic cells in vitro / M. Bodo, F. Pezzetti, G. Veni et al. // Basic and Appl. Histochem. 1991. - Vol. 35, Suppl. 3. - P. 20.

253. Buttenschoen, K. Association of endotoxemia and production of antibodies against endotoxins after multiple injuries / K. Buttenschoen, D. Berger, W. Strecker et al. // J. Trauma. 2000. - Vol. 48, № 5. - P. 918-923.

254. Camussi G. The role of platelet-activating factor in inflammation / G. Camussi, C. Tetta, C. Baglioni // Clin. Immunol. Immunopaph. 1990. - Vol. 57. -P. 333-338.

255. Cavaillon, J.M. Interleukines et inflammation / J.M. Cavaillon // Pathol. Biol. 1990. - Vol. 38. - P. 36-42.

256. Carp, H. Mitochondrial N-formil methionil proteins as chemoattractants for neutrophils / H. Carp // J. Exp. Med. 1982. - Vol. 155, № 3. - P. 284.

257. Childs, C. Patterns of Staphylococcus aureus colonization, toxin production, immunity and illness in burned children / C. Childs, J.V. Edwards, D.M. Heathcote et al. // Burns. 1994. - Vol. 20, № 6. - P. 514-521.

258. Choudhry, M.A. Enteral nutritional supplementation prevents mesenteric lymph node T-cell suppression in burn injury / M.A. Choudhry, F. Haque, M. Khan et al. // Crit. Care Med. 2003. - Vol. 31, № 6. - P. 1764-1770.

259. Clark, R.A. Chemotactic factors trigger their own oxidative inactivation by human neutrophils / R.A. Clark // J. Immunol. 1982. - Vol. 129. - P. 2725.

260. Clark, R.S. Neutrophil accumylation after traumatic brain injury in rats: comparison of weight drop and controlled cortical impact models / R.S. Clark, J. Schiding, S.L. Kaczorowski et al. // J. Neurotrauma. 1994. - Vol. 11, № 5. - P. 499-506.

261. Clow, L.A. Expression of SpC3 the sea urchin complement component, in response to lipopolysaccharide / L.A. Clow, P.S. Gross, Shin C.S. et al. // Immunogenics. 2000. - Vol. 51.-P. 1012-1033.

262. Cocks, R.A. Increased plasma free cyclic-AMP levels following major trauma and their immune respons / R.A. Cocks, Т.Н. Rainer, T.Y. Chan et al. // Resuscitation. 2000. - Vol. 45, № 2. - H. 105-109.

263. Coenjaerts F.E. Potent inhibition of neutrophil migration by cryptococ-cal mannoprotein-4-induced desensitization / F.E. Coenjaerts, A.M. Walenkamp, P.N. Mwinzi et al. // J. Immunol. 2001. - Vol. 167, № 7. - P. 3988-3995.

264. Collins, D.H. The pathology of bone / D.H. Collins. London : Butter-worths, 1966.

265. Cuschieri J. Modulation of endotoxin-induced endothelial activiti by microtubule depolymerization / J. Cuschieri, D. Gourlay, I. Garcia et al. // Trauma. -2003.-Vol. 54, № i.p. 104-112.

266. De Maeyer, E. Interferons and other regulatory cytokines / E. De Maeyer, J. De Maeyer-Guignard. New York : Wiley, 1988. - 611 p.

267. Densen, P. Phagocyte strategy vs. microbial tactics / P. Densen, G. Mandell //Rev. Inf. Dis. 1980. - Vol. 2. - P. 817-838.

268. Densen, P. Granulocytic phagocytes / P. Densen, W.R. Clark, W.M. Nauseff// Infection Diseases. 5th ed. - New York, 1995. - P. 78-101.

269. Desser, L. Proteolytic enzymes and induce cytokine production in human peripheral blood mononuclear cells in vitro / L. Desser, A. Rehberger, W. Paukovits // Cancer Biother. 1994. - Vol. 9, № 3. - P. 253-263.

270. Eisenhauer, P.B. Purification and antimicrobial properties of three de-fensins from rat neutrophils / P.B. Eisenhauer, S.S.L. Harwing, D. Szklarek et al. // Infec. Immun. 1989. - Vol. 57, № 7. - P. 2021-2027.

271. Ertel, W. Dynamics of immunoglobulin synthesis after major trauma. Influence of recombinant lymphokines / W. Ertel, E. Faist, C. Nestle et al. // Arch. Surg.- 1989.-Vol. 124, №12.-P. 1437-1441.

272. Ertel, W. Granulocyte colony-stimulating factor inhibits neutrophil apoptosis at the local site after severe head and thoracic injury / W. Ertel, M. Keel, U. Buergi et al. // J. Trauma. 1999. - Vol. 46, № 5. - P. 784-792.

273. Imai, T. Identification and molecular characterization of fractalkine receptor CX3CR1, which mediates both leukocyte migration and adhesion / T. Imai, K. Hieshima, Ch. Haskell et al. // Cell. 1997. - Vol. 91. - P. 521-530.

274. Faist, E. Alteration of monocyte function following major injury / E. Faist, A. Mewes, T. Strasser et al. // Arch. Surg. 1988. - Vol. 123, № 3. - P. 287292.

275. Faist, E. Terminal B-cell maturation and immunoglobulin (Ig) synthesis in vitro in patients with major injury / E. Faist, W. Ertel, C.C. Baker et al. // J. Trauma . 1989. - Vol. 29, № 1. - P. 2-9.

276. Fearon, D.T. The instructive role of immunity in the acquired immune response / D.T. Fearon, R.M. Locksley // Science. 1996. - Vol. 272, № 5258. -P. 50-54.

277. Feuerstein, G.Z. Cytokines, inflammation, and brain injury: role of tumor necrosis factor-alpha / G.Z. Feuerstein, T. Liu, F.C. Barone // Cerebrovasc. Brain Metab. Rev. 1994. - Vol. 6, № 4. - P. 341-360.

278. Foex, B.A. Early cytokine response to multiple injury / B.A. Foex, W.R. Lamb, Т.Е. Roberts et al. // Injury. 1993. - Vol. 24, № 6. - P. 373-376.

279. Fontes, B. The role of the polymorphonuclear neutrophils in the failure of multiple organ and systems / B. Fontes, R. Sergio-Poggetti // Rev. Hosp. Clin. Fac. Med. Sao-Paulo. 1996.-Vol. 51. -№ 1. -P. 21-25.

280. Fosse, E. Alterations in T-helper and T-suppressor lymphocyte after multiple injuries /E. Fosse, J.H. Trumpy, A. Skulberg // Injury. 1987. - Vol. 18, № 3. - P. 199-202.

281. Frank, M.M. The role of complement in inflammation and phagocytosis / M.M. Frank, L.F. Fries // Immunol. Today. 1991. - Vol. 12, № 9. - P. 322-326.

282. Fricchione, G. Surgical anticipatory stress manifests itself in immuno-cyte desensitization: evidens for autoimmunoregulatory invelopment / G. Fricchione, T.V. Bilfinger et al. // Int. J. Cardiol. 1996. - Vol. 26-53, Suppl. - P. 654-73.

283. Gebhard, F. Is interleukin 6 an early marker of injury severity following major trauma in human / F. Gebhard, H. Pfetsch, G. Steinbach et al. // Arch. Surg. -2000.-Vol. 135, №3.-P. 291-295.

284. Glinz, W. Immunologic changes and infection in severely injured patients / W. Glinz, P.J. Grob, W. Fierz et al. // Schweiz. Med. Wochenschr. 1989. -Bd. 119, № 11.-P. 354-360.

285. Goldman, D.W. Selective transduction of human polymorphonuclear leukocyte function by subsets of receptors for leukotriene B4 / D.W. Goldman, E.J. Goetzl // J. Allergy Clin. Immunol. 1984. - Vol. 74, № 3, Pt 2. - P. 373-376.

286. Gordon, S. The macrophage / S. Gordon, Z.A. Cohn // Int. Rev. Cytol. 1973. - Vol. 36. - P. 171-214.

287. Goto, K. Generation of interleukin-l-like lymphocyte-stimulating factor at polymorphonuclear leukocytes / K. Goto, S. Nakamura, F. Goto, M. Yochinaga //Br. J. Exp. Pathol. 1984. - Vol. 65, № 5. - P. 521-532.

288. Grollman A. A conjecture about the prevalence of essential hypertension and its high incidence in the black / A. Grollman // Tex. Rep. Biol. Med. -1978.-Vol. 36.-P. 25-32.

289. Heersche, J.N.M. Mechanism of osteoclastic bone resorption: a new hypothesis / J.N.M. Heersche // Calcif. Tissue Res. 1978. - Vol. 26. - P. 81-84.

290. Hoch, R.C. Effects of accidental trauma on cytokine and endotoxin production / R.C. Hoch, R. Rodriguez, T. Manning et al. // Crit. Care Med. 1993. -Vol. 21, №6.-P. 839-845.

291. Holch, M. Simple references of the differential blood picture in assessing the immune status of immunologically compromised severely injured patients / M. Holch, P.J. Grob, W. Glinz // Helv. Chir. Acta. 1990. - Vol. 56, № 6. - P. 947-950.

292. James, K. Interactions between cytokines and alfha-2-macroglobulin / K. James//Immunol. Today. 1990. - Vol. 11, № 5. - P. 163-166.

293. Janeway, Ch. Immunobiology: the immune system in health and disease / Ch. Janeway, P. Travers, M. Walport et al. 4th ed. - Current Biology Ltd. -1999.-740 p.

294. Kabisch, S. Lumphocytes subpopulations in patients at risk of sepsis in a surgical intensive care unit / S. Kabisch, K. Gemar, W. Krumholz et al. // An-aestesist. 1990. - Vol. 39, № 9. - P. 439-444.

295. Kantorova, I. Hladiny cytokinu u pacientu s polytraumaty / I. Kan-torova, P. Svoboda, J. Ochmann // Cas. Lek. Cesk. 1995. - Vol. 18, № 134(2). -P. 49-52.

296. Koller, M. Decreased leukotriene release from neutrophils after severe trauma: role of immature cells / M. Koller, M. Wick, G. Muhr // Inflammation. -2001.-Vol. 25, № l.-P. 53-59.

297. Koller, M. Liberation of interleukin 12 (IL12) after trauma and polytrauma / M. Koller, A. David, M.P. Hahn et al. // Langenbecks Arch. Chir. Suppl. Kongressbd. 1998. - Vol. 115, Suppl. l.-P. 453-456.

298. Koller, M. Major injury induces increased production of interleukin-10 in human granulocyte fractions / M. Koller, B. Clasbrummel, E. Kollig et al. // Langenbecks Arch. Surg. 1998. - Vol. 383, № 6. - P. 460-465.

299. Кораек, P. Characterization of an a2-macroglobulin-like glucoprotein isolated from the plasma of soft tick Ornithodoros moubata / P. Kopaek, C. Weise, T. Saravanan et al. // Eur. J. Biochem. 2000. - Vol. 267. - P. 465-475.

300. Kowanko, I.C. Stimulation of neutrophil respiratory burst and lysosomal enzyme release by human interferon-gamma / I.C. Kowanko, A. Ferrante //Immunology. 1987. - Vol. 62, № 1. - P. 149-151.

301. Lauer, D. Modulation of growth factor binding properties of alfha-2-macroglobulin by enzyme therapy / D. Lauer, R. Muller, C. Cott et al. // Cancer Chemother. Pharmacol. 2001. - Vol. 47, Suppl. - S. 4-9.

302. Levy, E.M. Changes in mitogen responsiveness lymphocyte subsets after traumatic injury relation to development of sepsis / E.M. Levy, S.A. Alharbi, G. Grindlinger et al. // Clin. Immunol. Immunopathol. 1984. - Vol. 32, № 2. -P.224-233.

303. Livingston, D.H. Depressed interferon gamma production and monocyte HLA-DR expression after severe injury / D.H. Livingston, S.H. Appel, S.R. Wellhausen et al. //Arch. Surg. 1988. - Vol. 123, № 11. - P. 1309-1312.

304. Loetscher, P. CCR5 is characteristic of Thl lymphocytes / P. Loetscher, M. Uguccioni, L. Bordoli et al. // Nature. 1998. - Vol. 391. - P. 344-345.

305. Lyons, A. Major injury induces increased production of interleukin-10 by cells of immune system with a negative impact on resistance to infection / A. Lyons, J.L. Kelly, M.L. Rodrick et al. // Ann. Surg. 1997. - Vol. 226, № 4. - P. 450-458.

306. Maderazo E.F. Polimorphnonuclear leukocyte abnormalities and their significance in seriously traumatized patients / E.F. Maderazo, S.D. Albano, C.L. Woronick et al. // Ann. Surg. 1983. - Vol. 198. - P. 736-738.

307. Martin, C. Patterns of cytokine evolution (tumor necrosis factor-alpha and interleukin-6) after septic shock, hemorrhagic shock, and severe trauma / C. Martin, C. Boisson, M. Haccoun et al. // Crit. Care Med. 1997. - Vol. 25, №11. -P. 1813-1819.

308. Meakins, J.I. Delayed hypersensitivity and neutrophil chemotaxis: effect of trauma / J.I. Meakins, A.P. McLean, R. Kelly et al. // J. Trauma. 1978. -Vol. 18.-P. 240-242.

309. Menges, T. Changes in blood lymphocyte populations after multiple trauma: association with posttraumatic complications / T. Menges, J. Engel, I. Welters et al. // Crit. Care Med. 1999. - Vol. 27, № 4. - P. 733-740.

310. Merry C. Defective neutrophil active polirisation and chemotaxis in stressed newborns / C. Merry, P. Puri, D.J. Reen // J. Pediatr. Surg. 1996. - Vol. 31, №4.-P. 481-485.

311. Miller-Graziano, C.L. Mechanisms of altered monocyte prostaglandin E2 production in severely injured patients / C.L. Miller-Graziano, M. Fink, J.Y. Wu et al. // Arch. Surg. 1988. - Vol. 123, № 3. - P. 293-299.

312. Mitsuyama К. IL-8 as an important chemoattractant for neutrophils in ulcerative colitis and Crohn's disease / K. Mitsuyama, A. Toyonaga, E. Sasaki et al. // Clin. Exp. Immunol. 1994. - Vol. 96, № 3. - P. 432-436.

313. Muehlsteds, S.G. Sistemic and pylmonary effector cell function after injury / S.G. Muehlsteds, C.J. Richardson, M. Lyte // Crit. Care Med. 2002. -Vol. 30, №6.-P. 1322-1326.

314. Murphy, T. Use of intracellular cytokine staining and bacterial superan-tigen to document suppression of the adaptive immune system in injured patients / T. Murphy, H. Paterson, S. Rogers et al. // Ann. Surg. 2003. - Vol. 238, № 3. -P. 401-410.

315. Nast-Kolb, D. Indicators of the posttraumatic inflammatory response correlate with organ failure in patients with multiple injuries / D. Nast-Kolb, C. Waydhas, C. Gipper-Steppert et al. // J. Trauma. 1997. - Vol. 42, № 3. - P. 446454.

316. Novaka, M. Evolution of the complement system / M. Novaka // Current Opinion in Immunology. 2001. - Vol. 13. - P. 69-73.

317. Oberholzer, A. Severe trauma leads to damaged signal transduction with inhibited secretion of citokines / A. Oberholzer, U. Steckholzer, O. Trentz et al. // Langenbecks Arch. Chir. Suppl. Kongressbd. 1998. - Vol. 115, Suppl. 1. -P. 39-41.

318. Olah, T. Opposite effect of serotonin and interferon-alpha on the membrane potential and function of human natural killer cells / T. Olah, I. Ocsovszki, Y. Mandi et al. // In Vitro Cell Dev. Biol. Anim. 2005. - Vol. 41. - P. 165-170.

319. O'Nuallain, E.M. Induction of interleukin-1 receptor antagonist (IL-1 ra) followihg surgery is associated with major trauma / E.M. O'Nuallain, P. Puri,

320. К. Mealy et al. // Clin. Immunol. Immunopathol. 1995. - Vol. 76, Pt. 1. - P. 96101.

321. Oppenheim, J. Cytokine Reference / ed. by J. Oppenheim, M. Feldman. — London : Academic Press, 2000. 2000 p.

322. Pallua, N. Pathogenic role of interleukin-6 in the development of sepsis. Part I: Study in standardized contact burn murine model / N. Pallua, D. von Heim-burg // Crit. Care Med. 2003. - Vol. 31, № 5. - P. 1490-1494.

323. Porteu F. Chemokines and chemokine receptors / F. Porteu, C. Hieblot // J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269, № 4. - P. 2834-2840.

324. Rabin D.L. Sarcoidosis severity and socioeconomic status / D.L. Rabin, M.S.A. Richardson, S.R. Stein et al. // Eur. Respir. J. 2001. - Vol. 18. - P. 499506.

325. Radi, Z.A. Cell abhesion molecules, leukocyte trafficking, and strategies to reduce leukocyte infiltration / Z.A. Radi, M.E. Kehrli, M.R. Ackermann // J. Vet. Intern. Med. 2001. - Vol. 15, № 6. - P. 1360-1366.

326. Ringel, E.W. Localization of histominase to the specific granule of the neutrophil / E.W. Ringel, N.A. Soter, K.F. Austen // Immunology. 1984. - Vol. 52, №4.-P. 649-658.

327. Rodrick, M.L. Mechanisms of immunosuppression associated with severe nonthemal traumatic injuries in man: production of interleukin 1 and 2 / M.L. Rodrick, J.J. Wood, J.B. O'Mahoni et al. // Clin. Immunol. 1986. - Vol. 6, № 4. -P. 310-318.

328. Rollins В. Human cytokine : пат. 5278287 : МКИ C07K 3/00, c07K 15/00 / В. Rollins, С. Stiles, G.G. Wong (США). опубл. 11.01.94. - НКИ 530/351.

329. Rose, S. Altered calcium regulation and function of human neutrophils during multiple trauma / S. Rose, M. Illerhaus, A. Wiercinski et al. // Shock. -2000. Vol. 13, № 2. - P. 92-99.

330. Roumen, R.M. Inflammatory mediatos in relation to the development of multiple organ failure in patients after severe blunt trauma / R.M. Roumen, H. Redl, G. Schlag et al. // Crit. Care Med. 1995. - Vol. 23, № 3. - P. 474-480.

331. Rothstein, G. Preleukemia / G. Rothstein, M.M. Wintrobe // Adv. Intern. Med. 1975. - Vol. 20. - P. 363-378.

332. Savelkoul, H. Role of IL-4 in persistent IgE formation / H. Savelkoul, R. van Ornmen // Eur. Respir. J. 1996. - Vol. 22. - P. 67-71.

333. Segal, A.W. Nitroblue tetrasolium test / A.W. Segal // Lancet. 1974. -№2.-P. 1248-1258.

334. Sevitt, B. Reflactions on Pathology in Trauma / B. Sevitt // Injury. -1983.-Vol. 14, №4.-P. 297-311.

335. Schwartz, R.S. Jumping genes and the immunoglobulin V gene system / R.S. Schwartz //New Engl. J. Med. 1995.-Vol. 85, № 10.-P. 2654-2670.

336. Sherry, R.M. Interleukin-10 is associated with the development of sepsis in trauma patients / R.M. Sherry, J.I. Cue, J.K. Goddard et al. // J. Trauma. -1996.-Vol. 40, №4.-P. 613-616.

337. Shih, H. Alternations of surface antigens on leukocytes after severe injury: correlation with infectious complications / H. Shih, C.H. Su, C.H. Lee // Intensive Care Med. 1998. - Vol. 24, № 2. - P. 152-156.

338. Smith, L.C. Coelomocytes express SpBf, a homologue of factor B, the second component in the sea urchin complement system / L.C. Smith, C.S. Shin, S.G. Dachenhausen//J. Immunol. 1998. - Vol. 161. - P. 6784-6793.

339. Snelle, M.-C. Interstitial and free lung cells in acute inflammation in the guinea-pig / M.-C. Snelle, T. Venaille, P. Holt, R. Rylander // Agents and Action. 1987. - Vol. 22. - P. 261-269.

340. Snyderman, R. Molecular and cellular mechanisms of leukocyte chemotacsis / R. Snyderman, E.J. Goetzl // Sciens. 1981. - Vol. 231. - P. 830.

341. Sorensen, В Complement activation in model of chronic fatigue syndrome / B. Sorensen, J.E. Streib, M. Strand et al. // J. Allergy Clin. Immunol. — 2003. Vol. 112. - P. 397-403.

342. Svoboda, P. Dynamics of interleukin 1,2 and tumor necrosis factor alpha in multiple trauma patients / P. Svoboda, I. Kantorova, J. Ochmann // J. Trauma. 1994. - Vol. 36, № 3. - P. 336-340.

343. Tanaka, H. Changes in granulocyte colony-stimulating factor concentration in patients with trauma and sepsis / H. Tanaka, K. Ishikawa, M. Nichino et al. // J. Trauma. 1996.-Vol. 40, № 5.-P. 718-725.

344. Tavassoli, M. Structural alteration of marrow during inflammation / M. Tavassoli//Blood Cells.- 1987.-Vol. 13, № 1-2.-P. 251-261.

345. Thomson, A. (ed.) The Cytokine Handbook / ed. by A. Thomson. -London : Acad., 1992.-418 p.

346. Van den Broek, P.J. Antimicrobial therapy for lower respiratory tract infection / P.J. Van den Broek // Pharm. Weekbl. Sci. 1989. - Vol. 11, № 4. - P. 118-120.

347. Walport, M.J. Complement. First of two parts / M.J. Walport //N. Engl. J. Med.-2001.-Vol. 344.-P. 1058-1066.

348. Wakefield, C.H. Surgery and realease of a neutrophil Fc gamma receptor / C.H. Wakefield, P.D. Carey, S. Founds et al. // Am. J. Surg. 1995. - Vol. 170, №3.-P. 277-284.

349. Wenblatt, V.V.E. Проблема ревматоидного артрита (PA) / M.M.E. Wenblatt, E.M. Gravallese // Рус. мед. журн. 1997. - Т. 5, № 13. - С. 820-828.

350. Wick, М. Does liberation of interleukin-12 correlate with the clinical course of polytraumatized patients? / M. Wick, E. Kollig, M. Walz et al. // Chirurg. -2000.-Vol. 71, №9.-P. 1126-1131.

351. Wick, M. The potential pattern of circulating lymphocytes TH1/TH2 is not altered after multiple injuries / M. Wick, E. Kollig, G. Muhr et al. // Arch. Surg. 2000. - Vol. 135, № 11.-P. 1309-1314.

352. Williams, M.A. Chemokine regulation of neutrophil function in surgical inflammation / M.A. Williams, C.M. Cave, G. Quard et al. // Arch. Surg. -1999.-Vol. 134, № 12.-P. 1360-1366.

353. Wong, L. The identification of Fc and C3 receptors on human neutrof-pils / L. Wong, R.D. Wilson // J. Immunol. Meth. 1975. - Vol. 7. - P. 69-76.

354. Xythalis, D. Inhibition of IL-8-mediated МАРК activation in neutrophils by human neutrophils by beta 1 integrin ligands / D. Xythalis, M.B. Frewin, P.W. Gudewicz // Inflammation. 2002. - Vol. 26, № 2. - P. 83-88.

355. Yilmaz, H.L. The levels of serum interleukins in the children with trauma / H.L. Yilmaz, M. Dokyr, S. Cetiner et al. // Ulis Travma Derg. 2002. -Vol. 8, №4.-P. 224-228.

356. Zahorec, R. Ratio of neutrophil to lumphocyte counts-rapid and simple parameter of systemic inflammation and stress in critically ill / R. Zahorec // Bra-tisl. Lek. Listy.-2001.-Vol. 102, № 1.-P. 5-14.

357. Zallen, G. Circulating postijury neutrophils are primed for realease of proinflammatory cytocines / G. Zallen, E. Moore, J. Johnson et al. // J. Trauma. -1999.-Vol. 46.-P. 42-48.

358. Zarcadis, I.K. Phylogenetic aspect of the complement system / I.K. Zar-cadis, D. Mastellos, J.D. Lambris // Dev. Сотр. Immunol. 2001. - Vol. 25. - P. 745-762.

359. Zelder, S. T-cell reactivity and its predictive role in immunosuppression after burns / S. Zelder, R.C. Bone, A.E. Baue et al. // Crit. Care Med. 1999. -Vol. 27, № l.-p. 66-72.

360. Zimmerman, G.A. Endothelial cell interactions with granulocytes: tethering and signaling molecules / G.A. Zimmerman, S.M. Prescott, T.M. Mclnture // Immunol. Today. 1992. - Vol. 13. - P. 93-99.

361. Zissel, G. Anti-inflammatory cytokine release by alveolar macrophages in pulmonary sarcoidosis / G. Zissel, J. Homolka, J. Schlaak et al. // Am. J. Crit. Care Med. 1996. - Vol. 154. - P. 713-719.

Автореферат диссертации по медицине на тему Цитокинопосредованная дисфункция локомоторной активности фагоцитов и ее коррекция у детей с травматической болезнью

Оглавление диссертации Злакоманова, Ольга Николаевна :: 2008 :: Челябинск

Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Злакоманова, Ольга Николаевна, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2008 года, Злакоманова, Ольга Николаевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций