Цереброваскулярные эффекты ГАМК-ергических веществ в условиях геморрагического и ишемического поражений мозга

Курдюмов, Илья Николаевич

Диссертации по медицине → Фармакология, клиническая фармакология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Цереброваскулярные эффекты ГАМК-ергических веществ в условиях геморрагического и ишемического поражений мозга

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Курдюмов, Илья Николаевич Москва 2009 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 14.00.25

Автореферат диссертации по медицине на тему Цереброваскулярные эффекты ГАМК-ергических веществ в условиях геморрагического и ишемического поражений мозга

На правах рукописи

0034835(1 КУРДЮМОВ ИЛЬЯ НИКОЛАЕВИЧ

ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНЫЕ ЭФФЕКТЫ ГАМК-ЕРГИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В УСЛОВИЯХ ГЕМОРРАГИЧЕСКОГО И ИШЕМИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЙ

МОЗГА

14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 9 НОЯ

Москва-2009

003483571

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте фармакологии имени В.В.Закусова РАМН

Научный руководитель: доктор биологических наук

Ганьшина Тамара Сергеевна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор Островская Рита Ушеровна

доктор биологических наук, профессор Кошелев Владимир Борисович

Ведущая организация: ГОУ ВПО Московский государственный

медико- стоматологический университет

Защита состоится «__»_2009 года в «_» час на заседании

диссертационного совета Д-001.024.01 при НИИ фармакологии имени В.В.Закусова РАМН по адресу: 125315, г. Москва, ул. Балтийская, д.8.

С диссертацией можно ознакомиться в Ученой части НИИ фармакологии имени В.В.Закусова РАМН по адресу: 125315, г. Москва, ул. Балтийская, д.8.

Автореферат разослан «___»_2009 года.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук Е.А.Вальдман

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы

Сосудистые заболевания головного мозга являются одной из важнейших медико-социальных проблем, так как занимают одно из ведущих мест среди заболеваемости и смертности населения. (Гусев Е.И. и соавт., 2001; 2003; Суслина З.А. и соавт., 2005; Суслина З.А., 2008). В мире ежегодно регистрируется около 6 млн. новых случаев инсульта, в России -более 450 тыс. При этом увеличивается заболеваемость лиц молодого работоспособного возраста. Согласно данным международных мультицентровых исследований, ишемический инсульт встречается в 5,3 -5,5 раз чаще геморрагического.

В многочисленных исследованиях установлено, что в реализации нейротоксичности, возникающей как при ишемическом (Olney J.W., 1971; Choi D.W., Rothman S.M., 1990; Siesjo B.K., 1992), так и при геморрагическом (Ardizzone T.D., et al., 2004; К. Tsura К., Nishio I., 2005) поражениях мозга, ведущая роль принадлежит возбуждающим нейромедиаторным аминокислотам, в частности, глутамату и нарушению обмена ионов кальция в нервной клетке (Kristian Т., Siesjo В.К, 1998; Lee J.-М. et al., 2000), в результате развивается дисбаланс между возбуждающими и тормозными процессами, протекающими в центральной нервной системе (Green A.R. et al., 2000; Schwartz-Bloom R.D., 2001; Сорокина Н.Д. и соавт., 2002). Известно также, что ГАМК играет важную роль в регуляции тонуса сосудов мозга, вызывая как непосредственное сосудорасширяющее влияние на сосуды мозга, так и депримирующее действие на центральную регуляцию мозгового кровообращения (Мирзоян С.А. и Акопян В.П., 1967; Мирзоян С .А. и соавт., 1970; 1974; Ганьшина Т.С.,1980; Krause D.N.,1980). Эти данные послужили основанием для создания цереброваскулярного препарата пикамилон, который широко применяется в неврологической практике (Закусов В.В. и соавт., 1980; Мирзоян Р.С., Ганьшина Т.С., 1989).

Ранее было показано, что селективный анксиолитик афобазол, разработанный в НИИ фармакологии имени В.В.Закусова под руководством академика РАМН С.Б.Середенина, а также комбинация пирролидона и пироглутаминовой кислоты обладают нейропротекторной активностью (Топчян А.В., 1998; Лунынина Е.В., 2003; Баласанян М.Г., 2003; Силкина И.В., 2004). Установлено, что цереброваскулярные эффекты как афобазола, так и комбинации пирролидона с пироглутаминовой кислотой реализуются через ГАМКд-рецепторы. Исходя из вышеизложенного, изучение цереброваскулярных эффектов новых агонистов ГАМК в условиях модели геморрагического инсульта представляется весьма важным.

Наряду с нарушениями гемодинамики, к основным патогенетическим факторам развития ишемического инсульта относится и повышение коагулологического потенциала крови. В соответствии с этим, изыскание и изучение новых производных полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) с целью выявления цереброваскулярных средств с противотромботическим действием является весьма актуальным. В лаборатории оксилипинов (зав. -проф. В. В. Безуглов) Института биоорганической химии им. Ю.А. Овчинникова и М.М. Шемякина РАН, в результате направленной модификации полиеновых кислот с введением в их молекулы различных биологически-активных радикалов синтезирован конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином, который целесообразно исследовать в условиях геморрагического и ишемического поражения мозга.

Цель исследования

Сравнительное изучение препаратов с нейропротекторной активностью - афобазола, лекарственной комбинации, содержащей пирролидон и пироглутаминовую кислоту, и вновь синтезированного конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на мозговое кровообращение в условиях моделей геморрагического и ишемического инсультов.

Задачи исследования

1. Изучить изменения локального мозгового кровотока в коре головного мозга крыс в условиях модели геморрагического инсульта по А.Н. Макаренко и соавт. (2002).

2. Изучить цереброваскулярную активность афобазола, лекарственной комбинации, содержащей пирролидон и пироглутаминовую кислоту, конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином и препарата сравнения - нимодипина на локальный мозговой кровоток в коре головного мозга крыс в условиях модели геморрагического инсульта.

3. Изучить влияние конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на кровоснабжение мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии по сравнению с кровоснабжением интактных животных.

4. Исследовать роль ГАМК в механизме цереброваскулярного эффекта конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином и афобазола в условиях моделей геморрагического и ишемического инсультов с помощью специфического блокатора ГАМКА-рецепторов-бикукуллина.

5. Изучить антиагрегационные свойства конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином и афобазола.

6. Исследовать влияние афобазола на синтез индуцибельной изоформы стресс-белка ШР70 и содержание фактора роста нервов (ЛОР) в структурах мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии мозга.

Научная новизна работы.

Впервые выявлено значительное и продолжительное понижение уровня мозгового кровотока как в ипсилатеральном, так и в контралатеральном полушариях коры головного мозга крыс при моделировании геморрагического инсульта путем кровоизлияния в область внутренней капсулы.

Впервые показано, что в этих условиях афобазол, лекарственная комбинация, содержащая пирролидон и пироглутаминовую кислоту, конъюгат ГАМК с докозагексаеношщофамином и нимодипин в различной степени и разной продолжительности восстанавливают локальный мозговой кровоток в коре головного мозга крыс.

Обнаружено, что конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином вызывает выраженное влияние на кровоснабжение мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии, не оказывая влияния на кровоснабжение мозга интактных животных. Этот эффект реализуется через бикукуллин чувствительные ГАМКд-рецепторы. Установлено, что в сосудорасширяющем эффекте афобазола в условиях модели геморрагического инсульта также принимают участие ГАМК-ергические механизмы.

Показано, что коньюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином и афобазол, наряду с цереброваскулярным действием, обладают антиагрегационной активностью, но эффект афобазола проявляется лишь при использовании высоких концентраций.

Выявлена способность афобазола ограничивать гиперэкспрессию стресс-белка Н8Р70 в стриатуме и гиппокампе и увеличивать содержание фактора роста нервов N0? в гиппокампе мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии.

Научно-практическое значение работы.

инсульта, а конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином - в условиях модели геморрагического и ишемического инсультов, указывает на перспективность поиска новых препаратов с нейропротекторной активностью среди агонистов ГАМК.

Данные, полученные при исследовании конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином, создают экспериментальную базу для разработки и внедрения нового комплексного подхода к фармакотерапии цереброваскулярных расстройств, основанного на сочетанном воздействии как на тонус мозговых сосудов, так и на агрегацию тромбоцитов.

Основные сведения об апробации работы.

Материалы диссертации доложены на Ш съезде фармакологов России, Санкт-Петербург (сентябрь, 2007), I Национальном Конгрессе «Кардионеврология» (декабрь, 2008), межлабораторной конференции НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН (2009), 1-ом Съезде нейрохирургов Республики Казахстан с международным участием, Астана (июль, 2009), VIII Национального научно-медицинского конгресса «Здоровье человека» под девизом «Армения-Россия-медицина без границ» Ереван- (октябрь, 2009) и межлабораторной конференции НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН (20.10.2009).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, из них 3 статьи в центральных журналах и 4 тезисов.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 127 страницах компьютерного текста и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, 5 глав результатов собственных исследований и их обсуждения, заключение, выводы, список литературы, включающий 67

отечественных и 198 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 14 таблицами и 12 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование выполнено на 239 белых беспородных крысах-самцах массой 250-400г, наркотизированных хлоралгидратом (350-400 мг/кг внутрибрюшинно). Использовалась также венозная кровь здоровых доноров (п=20).

Регистрацию локального мозгового кровотока в теменной области коры головного мозга крыс проводили с помощью лазерного допплеровского флоуметра ALF-21 фирмы "Transonic System Inc." (США). Для этой цели игольчатый датчик флоуметра диаметром 0,8 мм устанавливали на теменной области коры головного мозга с помощью микроманипулятора и коромысла. Одновременно регистрировали изменения уровня артериального давления в бедренной артерии. Запись показателей кровотока и артериального давления производили на полиграфе фирмы «ВГОРАК» (США), соединенным с персональным компьютером. Исследуемые вещества вводили через полиэтиленовый катетер в бедренную вену животных.

В работе была использована модель глобальной преходящей ишемии мозга. Глобальную преходящую ишемию у крыс вызывали окклюзией с помощью зажимов обеих общих сонных артерий в течение 10 минут. Одновременно методом кровопускания снижали уровень артериального давления до 40-50 мм рт. ст. Снижение артериального давления необходимо для нарушения функционирования вертебробазилярной системы, которая обеспечивает кровоснабжение жизненно важных центров, расположенных в стволовой области мозга. Спустя 10 минут удаляли зажимы и кровь реинфузировали. Вещества вводили через 40-45 минут после глобальной преходящей ишемии мозга.

Интрацеребральную геморрагию воспроизводили у наркотизированных крыс по А.Н. Макаренко и соавторов (2002). Зубным бором высверливали симметричные отверстия слева и справа в проекции внутренней капсулы:

Н=4 мм, L=3 мм, А= -1,3 мм ох брегмы). Потом прокалывали твердую мозговую оболочку с помощью заточенной иглы-канюли и погружали ее с помощью стереотаксического прибора до требуемой глубины (4 мм). Затем мандрен-ножом производили деструкцию мозговой ткани в области внутренней капсулы, с последующим (через 2-3 минуты) введением в место повреждения крови животного (0,1-0,2 мл), взятого из бедренной артерии. В большинстве случаев кровь распределяется в виде хорошо очерченной гематомы у конца инъекционной иглы с деформацией и разрушением подкорковых структур в области ядер таламуса, реже - в подкорковом белом веществе. В ипсилатеральном полушарии кровоток регистрировали в коре головного мозга крыс в 2 мм от повреждения, в контралатеральном полушарии - в точке, симметричной повреждению.

Эксперименты по изучению влияния фармакологических веществ на агрегационную активность тромбоцитов in vitro были выполнены совместно с канд. биол. наук Т.М. Васильевой в лаборатории патологии и фармакологии гемостаза Гематологического научного центра РАМН (зав. - проф. В.А.Макаров). Эксперименты были выполнены с использованием венозной крови здоровых доноров (п=20), которую получали путем пункции кубитальной вены и стабилизировали 3,8%-ым раствором цитрата натрия в соотношении 9:1. Для приготовления богатой тромбоцитами плазмы кровь центрифугировали в течение 10 минут при 1000 об/мин, после чего верхний слой плазмы переносили в другую пробирку, а остаток повторно центрифугировали в течение 20 минут при 3000 об/мин для получения плазмы, бедной тромбоцитами.

Агрегацию тромбоцитов исследовали на агрегометре фирмы "Chrono-Log Corporation" (США) по методу G. Born. О степени агрегации судили по максимальной величине падения оптической плотности после окончания реакции по сравнению с исходной величиной. Исследуемое вещество добавляли в кювету агрегометра, инкубировали в течение 5-ти минут при 37°С и затем индуцировали процесс тромбоцитарной агрегации. В качестве

контрольных образцов использовали плазму тех же доноров. В качестве проагрегантов в работе использовали АДФ (Boehringer Mannheim, Австрия) в конечной концентрации lxlO'5 М и арахидоновую кислоту в конечной концентрации 1 х 10"3 М. Конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином и докозагексаеноилдофамин были синтезированы в лаборатории оксилипинов (зав. - д.х.н. В.В.Безуглов) ИБХ РАН. Арахидоновая кислота (АК), свободная от продуктов окисления, также была предоставлена сотрудниками этой лаборатории. Афобазол был синтезирован в опытно-технологическом отделе НИИ фармакологии им. В.В.Закусова РАМН.

Исследования по изучению синтеза индуцибельной изоформы стресс-белка HSP70 и содержания фактора роста нервов NGF в стриатуме и гиппокампе крыс были выполнены совместно с канд. биол. наук Т.А. Антиповой в лаборатории фармакологии нейропротекции НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН. Содержание HSP70 и NGF в цитоплазматической фракции стриатума и пшпокампа мозга крыс оценивалось с помощью метода Вестерн-блот анализа. Электрофорез проводился согласно методу Laemmli в 10% полиакриламидном геле. Белки детектировались с помощью антител к индуцибельной форме HSP70 и NGF и вторыми антителами против мышиной сыворотки и кроличьей сыворотки, конъюгированных с пероксидазой хрена. Проявление вторых антител осуществляли в реакции с ECL-реагентами (Santa Cruz Biotechnology) на пленку фирмы Kodak. Денситометрию полученных изображений проводили с помощью программы «Adobe Photoshop» (Hayashi Т. et al, 2001).

Результаты исследования обрабатывали методом вариационной статистики с помощью дисперсионного анализа для повторных измерений и критерия множественных сравнений по Даннету, с помощью парного критерия Стьюдента с использованием программы Biostat.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Исследование было начато с изучения локального кровотока в теменной области коры головного мозга крыс в условиях геморрагического поражения мозга. Интрацеребральную геморрагию внутренней капсулы у крыс воспроизводили по А.Н. Макаренко и соавторов (2002), которые показали, что морфологические изменения, наблюдаемые у животных, характерны для геморрагического инсульта в клинике. Показано, что при данной модели геморрагического повреждения мозга в первые сутки погибает 30% животных, у оставшихся животных наблюдается неврологический дефицит, нарушение координации движений, ослабление процессов обучения и памяти (Гарибова Т.Л. и соавт., 2003; Середенин С.Б., Крайнева В.А., 2009). Однако изменения локального мозгового кровотока в коре головного мозга крыс в условиях этой модели изучены не были.

Проведенные опыты показали, что геморрагическое поражение области внутренней капсулы вызывает значительное снижение уровня мозгового кровотока в коре большого мозга крыс как в ипсилатеральном, так и в контралатеральном полушарии. Уровень локального мозгового кровотока снижается сразу же после геморрагического повреждения мозга и через 30 минут составляет в среднем 30±6,6% от исходного уровня (р<0,01, рис.2). Следует отметить, что при геморрагическом поражении мозга снижение локального мозгового кровотока в большинстве опытов наблюдалось в течение 1,5 -2 часов и к концу эксперимента составило в среднем -23±б,6%. После геморрагического поражения мозга уровень артериального давления в одних опытах снижался в среднем на 26±7,0% (5 из 10), в остальных -наблюдалось некоторое повышение давления или эффект отсутствовал.

Ранее было показано, что вещества с ГАМК-ергическим механизмом действия - афобазол, комбинация пирролидона и пироглутаминовой кислоты обладают нейропротекторной активностью и оказывают выраженное влияние на кровоснабжение мозга крыс в условиях ишемического поражения в

отличие от интактных животных (Баласанян М.Г., 2003; Луньшиной Е.В., 2003; Силкина И.В. и соавт., 2005). Представляло интерес изучить влияние этих веществ, а также вновь синтезированного производного ГАМК с докозагексаеноилдофамином на кровоснабжение мозга крыс в условиях модели геморрагического инсульта.

Исследуемые вещества вводили через 30 минут после проведения процедуры, вызываемой геморрагическое поражение мозга. Проведенное исследование показало, что афобазол в дозе 10 мг/кг при внутривенном введении вызывает увеличение локального мозгового кровотока, сниженного в коре головного мозга крыс в результате экспериментальной гематомы. Цереброваскулярный эффект препарата начинает развиваться сразу же после введения препарата, достоверное усиление кровотока наступает через 40 минут, к 60 минуте локальный мозговой кровоток увеличивается в среднем на 36±5,5% (п=10, рис.1,2) и это увеличение сохраняется до конца эксперимента (90-120 минут). Афобазол не оказывал однонаправленного влияния на уровень артериального давления, что указывает на непосредственное влияние препарата на тонус мозговых сосудов.

Лекарственная комбинация пирролидона и пироглутаминовой кислоты (по 20 мг/кг каждого из компонентов, внутривенно) в условиях геморрагического поражения мозга в большинстве опытов сразу же после введения вызывает увеличение локального мозгового кровотока, которое достигает максимальных величин к 10-15 минутам и составляет в среднем 30±8,9% (п=7). Затем локальный кровоток постепенно снижается, а к концу эксперимента - даже ниже исходного уровня (рис.2). Комбинация оказывала кратковременное и разнонаправленное влияние на уровень артериального давления.

Коньюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином при внутривенном введении в дозе 1мг/кг вызывает увеличение локального мозгового кровотока в коре головного мозга крыс, перенесших геморрагическое поражение, которое начинает развиваться через 20 минут после введения и достигает

достоверных значений к 30 минуте, а к 60-ой минуте составляет в среднем 34±4,5% (п=10). В течение 90 минут наблюдения после «геморрагического инсульта» уровень мозгового кровотока продолжает оставаться значительно выше исходного уровня (рис.2). Коньюгат ГАМК с докозагексаеноиддофамином практически не оказывает влияния на уровень артериального давления. Следовательно, увеличение мозгового кровотока под влиянием коньюгата ГАМК с докозагексаеноиддофамином обусловлено его воздействием на тонус сосудов мозга и не определяется изменениями перфузионного давления.

1—I (ян

ГН ШШш, 3» « »

8 МИН В.'В II Ь*М<Г

Рис.1. Влияние афобазола (10 мг/кг внутривенно) на локальный мозговой кровоток (ЛМК) в коре головного мозга и артериальное давление (АД) в бедренной артерии у крыс в условиях «геморрагического инсульта». Обозначения сверху вниз: локальный мозговой кровоток (ЛМК) в усл. ед., артериальное давление (АД) в мм рт.ст., отметка введения афобазола, отметка времени - мин.

В качестве препарата сравнения был выбран блокатор кальциевых каналов нимодипин, который используется у больных геморрагическим инсультом. Опыты показали, что нимодипин (0,03 мг/кг, внутривенно) увеличивает мозговой кровоток в коре поврежденного геморрагией

головного мозга крыс в среднем на 13±3,6% (п=7) сразу же после его введения и сохраняется в течение всего эксперимента - 60-90 минут, несмотря на гипотензивный эффект (рис.2).

Рис. 2. Влияние афобазола, противоишемической комбинации, нимодипина, и конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на локальный мозговой кровоток в коре головного мозга крыс в условиях модели геморрагического инсульта. Данные представлены в процентах к уровню локального мозгового кровотока через 30 минут после геморрагии.

Таким образом, моделирование геморрагического инсульта у крыс вызывает значительное и продолжительное ухудшение кровоснабжения как ипсилатерального, так и контралатерального полушарий большого мозга. В этих условиях афобазол, противоишемическая комбинация, содержащая пирролидон и пироглутаминовую кислоту, конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином и препарат сравнения нимодипин в разной степени и с неодинаковой продолжительностью увеличивают локальный

мозговой кровоток, значительно сниженный в результате геморрагического поражения.

В соответствии с тем, что конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином был исследован нами впервые, представлялось важным изучить его влияние на мозговое кровообращение в условиях и ишемического поражения мозга.

Опыты показали, что конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином в условиях глобальной преходящей ишемии головного мозга вызывает усиление локального мозгового кровотока в коре головного мозга крыс в среднем на 27±3,7% (п=10, рис.3), не оказывая при этом существенного влияния на уровень артериального давления. У интактных животных конъюгат ГАМК не вызывает изменений локального мозгового кровотока.

Сводные данные о цереброваскулярной активности конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином представлены на рис.4, из которого видно, что соединение оказывает выраженное влияние на кровоснабжение мозга крыс в условиях цереброваскулярной патологии мозга.

Для выяснения механизма цереброваскулярного эффекта конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином исследовалось его влияние на мозговое кровообращение после глобальной преходящей ишемии и блокады ГАМКА-рецепторов бикукуллином. Оказалось, что в этих условиях конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином не проявлял цереброваскулярного эффекта, что позволило сделать вывод о его ГАМК-ергическом механизме действия на сосуды мозга (рис. 5). Таким образом, конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином также, как и другие изученные нами ГАМК-ергические вещества проявляет свою цереброваскулярную активность в условиях патологического состояния мозга.

лм

А1

Вдах И

в мин

Рис. 3. Влияние конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином (1 мг/кг, внутривенно) на локальный мозговой кровоток в коре головного мозга (ЛМК) и артериальное давление (АД) крысы в условиях глобальной преходящей ишемии мозга. Обозначения сверху вниз: отметка времени, локальный мозговой кровоток в усл.ед., артериальное давление в мм рт.ст., время в мин. и введение коньюгата.

Ранее в экспериментах на интактных крысах было показано, что в условиях блокады ГАМК - рецепторов как с помощью бикукуллина, так и пикротоксина цереброваскулярный эффект афобазола существенно ослабляется (Силкина И.В., 2005). Представляло интерес изучить механизм цереброваскулярного эффекта афобазола в условиях модели геморрагического инсульта на фоне действия блокатора ГАМКд -рецепторов бикукуллина. Проведенные опыты показали, что афобазол, введенный через 25 минут после бикукуллина, практически не оказывает влияния на кровоснабжение мозга, нарушенного в результате геморрагического поражения. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что в реализации цереброваскулярного эффекта афобазола в условиях патологии мозга также принимают участие ГАМКд-рецепторы сосудов мозга (рис. 5).

интактные геморрагия ишемия

Рис. 4. Влияние конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином (1мг/кг в/в) на локальный мозговой кровоток в коре головного мозга интактных крыс и в условиях моделей геморрагического и ишемического инсультов.

@ йшамия+конъюгат а Ишемия+бикуккулин+конъюгат

в Геморрагия+афобазол ■ Геморрагия+бикуккулин+афобазоя

Рис. 5. Влияние конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином и афобазола на локальный мозговой кровоток в коре головного мозга крыс в условиях моделей экспериментального инсульта и на фоне блокады ГАМК-рецепторов бикукуллином.

Для препаратов, используемых для лечения больных с сосудистыми патологиями мозга, важное значение имеют их антиагрегационные свойства, поэтому в работе было изучено влияние афобазола и конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на агрегацию тромбоцитов. Оказалось, что коныогат ГАМК с докозагексаеноилдофамином обладает антиагрегационной активностью, но она менее выражена, чем у докозагексаеноилдофамина (табл.1). Антиагрегационные свойства афобазола проявляются лишь при использовании высоких концентраций препарата.

Таблица 1. Влияние коиьюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином и докозагексаеноилдофамина на агрегацию тромбоцитов человека in vitro (Ama„ %)

Контр Концентрация коиьюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином, шМ Концентрация докозагексаеноилдофамина, гпМ

1 03 0,1 0,01 0Д 0,02 0,002

АК (lxlO"3 М) 52,6±1,5 11,0±3,7* 163±4,0* 25,313,1* 29,9±2,3* 2±1* 19±8* 41±3

АДФ (1x10"® М) 63,9±23 50,6±2,6* 57,6±2,6 58,6±5,5 61,2±4,9 45±2* 45±2* 5Ш

* - достоверно по отношению к контролю (р<0,05)

В литературе широко обсуждается важная роль таких эндогенных нейропротекторов как стресс-белки HSP70 из семейства белков теплового шока, так и нейротрофина NGF при различных патологических состояниях мозга (Малышев Ю.И., Малышева Е.В., 1998; Giffard R.G. et al., 2004; Lee S.-H. 2001, 2004). Показано, что при ишемическом повреждении мозга HSP70 защищает от гибели нейроны и астроциты, содействует восстановлению поврежденных при стрессе синаптических белков и ГАМК- трансмиссии, а фактор роста нервов NGF играет важную роль в развитии и организации септо-гиппокампальной ГАМК-ергической системы, участвуя в экспрессии

альфа 4 субъединицы ГАМКл-рецепторов (Lauterbom I.C. et al., 1993; Rocamora N. et al., 1996; Zhou X., Smith S.S., 2007).

Поскольку нами ' было установлено, что в реализации цереброваскулярного эффекта афобазола в условиях патологии мозга принимают участие ГАМКд-рецепторы сосудов мозга, на следующем этапе изучалось влияние афобазола на синтез индуцибельной изоформы стресс-белка HSP70 и содержание фактора роста нервов NGF в гиппокампе и стриатуме мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии головного мозга. Через 24 часа после ишемического повреждения мозга уровень белка HSP70 в стриатуме был достоверно повышен в 2,6 раза по сравнению с контролем (р<0,05), а в гиппокампе - на 80% по сравнению с контролем, что, безусловно, свидетельствует о гиперэкспрессии данного белка. В условиях ишемии наблюдается достоверное снижение содержания фактора роста нервов NGF в гиппокампе мозга крыс, что соответствует литературным данным (Zeng J. et al., 2001; ffimeda Т. et al., 2007). Афобазол препятствует чрезмерному синтезу индуцибельной изоформы HSP70 в стриатуме и гиппокампе мозга крыс и увеличивает содержание фактора роста нервов NGF в гиппокампе (рис.6,7).

Полученные данные о способности афобазола ограничивать гиперэкспрессию HSP70 в стриатуме и гиппокампе и увеличивать содержание NGF в гиппокампе мозга крыс, сниженное после ишемии, указывают на один из механизмов нейропротекторного действия препарата.

веществ у больных с нарушениями мозгового кровообращения ишемической

и геморрагическои природы.

ШШЖШШШ1

НБР70

И шэм ия+Афобазол

Рис.6. Влияние афобазола на содержание НБР70 в стриатуме крыс после глобальной преходящей ишемии (оригинальный Вестерн-блот и девситометрия). О.Д.Е.- относительные денситометрические единицы. Дорожки: 1, 2, 3-контроль; 4, 5, 6- ишемия; 7, 8, 9- ишемия+афобазол; 10-тепловой шок.

1 23456739 10

Ишемия И шемия+Афобаэол

Рис.7. Влияние афобазола на содержание КОР в гиппокампе мозга крыс после глобальной преходящей ишемии (оригинальный Вестерн-блот и денситометрия). О.Д.Е.- относительные денситометрические единицы. Дорожки: 1, 2, 3-контроль; 4, 5, 6- ишемия; 7, 8, 9- ишемия+афобазол; 10-тепловой шок.

выводы

1.Геморрагическое поражение мозга сопровождается значительным и продолжительным снижением локального мозгового кровотока как в ипсилатеральном, так и в контралатеральном полушариях коры головного мозга крыс.

2. В условиях модели геморрагического инсульта афобазол, лекарственная комбинация, содержащая пирролидон и пироглутаминовую кислоту, конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином и нимодипин в различной степени и продолжительности улучшают кровоснабжение мозга, нарушенное вследствие его повреждения.

3. Конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином увеличивает локальный мозговой кровоток в коре головного мозга крыс после глобальной преходящей ишемии мозга в отличие от интактных животных, не оказывая при этом существенного влияния на уровень артериального давления.

4. Использование антагониста ГАМКА-рецепторов бикукуллина позволило установить, что в реализации цереброваскулярных эффектов афобазола и конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином, наблюдаемых у экспериментальных животных в условиях моделей геморрагического и ишемического инсультов, принимают участие ГАМК-ергичесгше механизмы.

5. Наряду с цереброваскулярным эффектом коньюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином обладает также и антиагрегационной активностью. Афобазол проявляет эти свойства лишь при использовании высоких концентраций препарата.

6. Афобазол в условиях глобальной преходящей ишемии ограничивает гиперэкспрессию НБР70 в стриатуме и гиппокампе и увеличивает содержание фактора роста нервов N0? в гиппокампе мозга крыс, сниженное в результате ишемического поражения.

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации.

1. Ганыпина, Т.С. Влияние производных ГАМК на кровоснабжение мозга крыс в условиях экспериментальных цереброваскулярных расстройств [Текст] / Т.С.Ганьшина, И.Н.Курдюмов, И.В.Силкина, Н.Р.Мирзоян, Н.М.Грецкая,

A.А.Дружинина // Фармакология-практическому здравоохранению / Материалы III съезда фармакологов России. Санкт-Петербург. - 2007.- т.7, ч.1.- с. 16521653.

2. Мирзоян, Н.Р. Влияние противоишемической комбинации и нимодипина на кровоснабжение мозга крыс в условиях модели геморрагического инсульта [Текст] / Н.Р .Мирзоян, Т.С.Ганыпина, И.Н.Курдюмов, Р.С.Беро.// Экспериментальная и клиническая фармакология - 2008.- т.71, № 2. - с.17-20.

3. Курдюмов, И.Н. Цереброваскулярные и антиагрегационные эффекты конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином [текст] / И.Н.Курдюмов, Т.С.Ганьшина, Н.Р.Мирзоян, Т.М.Васильева, В.А.Макаров, Г.Н.Петрухина,

B.В.Безуглов, Н.М.Грецкая, Г.Н.Зинченко, Р.С.Мирзоян. // Экспериментальная и клиническая фармакология - 2008.- т.71, № 4. -с.26-29.

4. Ганыпина, Т.С. Влияние агонистов ГАМК на кровоснабжение мозга крыс в условиях ишемического и геморрагического инсульта [текст] / Т.С.Ганыпина, И.Н.Курдюмов, Н.Р.Мирзоян. // Кардионеврология / Под ред. М.А.Пирадова, A.B. Фонякина. Труды I Национального Конгресса. Москва. - 2008. - с.368.

5. Антипова, Т.А. Влияние афобазола на содержание стресс-белка HSP70 в ткани мозга крыс при глобальной преходящей ишемии [текст] / Т.А.Антипова, И.О.Логвинов, И.Н.Курдюмов, Н.Р.Мирзоян, Т.С.Ганышша, А.И.Турилова, Р.СМирзоян, С.Б.Середенин.// - Экспериментальная и клиническая фармакология - 2009. - т.71, № 1. -с.'29-32.

6. Ганьшина, Т.С. Кровоснабжение мозга крыс в условиях экспериментального геморрагического инсульта и его коррекция агонистами ГАМК [текст] /Т.С.Ганьшина, И.Н.Курдюмов, Н.Р.Мирзоян, А.А.Горбунов II Журнал «Нейрохирургия и неврология Казахстана».- 2009. - №2, 3 (15,16)-с.204-205.

7. Мирзоян P.C. Коррекция мозгового кровообращения агонистами ГАМК в условиях модели геморрагического инсульта [текст]/ Р.С Мирзоян, Т.С. Ганьшина, И.Н.Курдюмов. // Материалы VIII Нац. научно-медицинского конгресса «Здоровье человека» под девизом «Армения-Россия-медицина без границ». Ереван- 2009.- с. 372-373.

Подписано в печать 02.11.2009 г.

Заказ № 19 Типография ООО "Медлайн-С" 125315, г. Москва, Ленинградский пр-т, д.78, к.5 Тел. (499)152-00-16 Тираж 100 шт.

Оглавление диссертации Курдюмов, Илья Николаевич :: 2009 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. О патогенезе ишемического и геморрагического поражений 11 мозга

1.2. ГАМК и ишемическое поражение мозга

1.3. Цереброваскулярные и нейропротекторные эффекты агонистов 30 ГАМК

1.3.1. Афобазол

1.3.2. Лекарственная комбинация, содержащая пирролидон и 35 пироглутаминовую кислоту

1.3.3. Нимодипин

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Оценка локального кровотока в коре головного мозга крыс с помощью лазерного допплеровского флоуметра.

2.2. Моделирование глобальной преходящей ишемии головного 41 мозга.

2.3. Моделирование геморрагического инсульта

2.4. Изучение функциональной активности тромбоцитов

2.5. Метод Вестерн-блот анализа синтеза стресс-белка Н8Р70 и 45 содержания фактора роста нервов (N0?) в стриатуме и гиппокампе мозга крыс

ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ ГАМК-ЕРГИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ НА 47 ЛОКАЛЬНЫЙ МОЗГОВОЙ КРОВОТОК В КОРЕ ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫС В УСЛОВИЯХ МОДЕЛИ ГЕМОРРАГИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА

3.1. Изменения кровоснабжения мозга крыс в условиях модели 48 геморрагического инсульта.

3.2. Афобазол

3.3. Лекарственная комбинация, содержащая пирролидон и 54 пироглутаминовую кислоту

3.4. Коньюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином

6.1. Коньюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином

3.5. Нимодипин

ГЛАВА 4. ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНЫЕ ЭФФЕКТЫ 63 КОНЪЮГАТА ГАМК С

ДОКОЗАГЕКСАЕНОИЛДОФАМИНОМ У КРЫС В УСЛОВИЯХ МОДЕЛИ ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА

4.1. Влияние конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на 63 локальный мозговой кровоток в коре мозга интактных крыс

4.2. Эффекты конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на 64 локальный мозговой кровоток в коре ишемизированного мозга крыс

ГЛАВА 5. ИЗУЧЕНИЕ ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНОГО 68 МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ АФОБАЗОЛА И КОНЪЮГАТА ГАМК С ДОКОЗАГЕКСАЕНОИЛДОФАМИНОМ В УСЛОВИЯХ ПАТОЛОГИИ МОЗГА

ГЛАВА 6. ВЛИЯНИЕ КОНЪЮГАТА ГАМК С

ДОКОЗАГЕКСАЕНОИЛДОФАМИНОМ И АФОБАЗОЛА НА АГРЕГАЦИЮ ТРОМБОЦИТОВ.

6.2. Афобазол

ГЛАВА 7. ИССЛЕДОВАНИЕ АФОБАЗОЛА НА СИНТЕЗ 79 ИНДУЦИБЕЛЬНОЙ ИЗОФОРМЫ СТРЕСС-БЕЛКА Н8Р70 И СОДЕРЖАНИЕ ФАКТОРА РОСТА НЕРВОВ (1ЧСР) В СТРИАТУМЕ И ГИППОКАМПЕ КРЫС ПОСЛЕ ГЛОБАЛЬНОЙ ПРЕХОДЯЩЕЙ ИШЕМИИ

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Курдюмов, Илья Николаевич, автореферат

Сосудистые заболевания головного мозга являются одной из важнейших медико-социальных проблем, так как занимают одно из ведущих мест среди заболеваемости и смертности населения. Инсульт - сосудистое поражение мозга, обусловленное недостаточным кровоснабжением, вызванным или тромбообразованием (ишемический инсульт) или кровоизлиянием в мозг (геморрагический инсульт).

Смертность в острой стадии всех видов инсульта составляет около 35%. Инвалидность вследствие инсульта занимает 1-ое место среди всех причин первичной инвалидности (Гусев Е.И. и соавт., 2001; 2003; Суслина З.А. и соавт., 2005, Суслина З.А., 2008). В мире ежегодно регистрируется около 6 млн. новых случаев инсульта, в России - более 450 тыс. При этом увеличивается заболеваемость лиц молодого работоспособного возраста.

Ишемическое поражение головного мозга относится к наиболее частым и тяжелым формам цереброваскулярных расстройств. Согласно данным международных мультицентровых исследований, ишемический инсульт встречается в 5,3 - 5,5 раз чаще геморрагического.

Геморрагические инсульты чаще возникают при заболеваниях, протекающих с повышенным артериальным давлением. Это обусловлено тем, что сосудистые кризы, характерные для гипертонической болезни и артериальной гипертонии, приводят к морфологическим изменениям стенок внутримозговых сосудов с нарушением их проницаемости - плазматическому пропитыванию, некрозам, образованию микроаневризм и их разрывам. Разрыв артериальных и артериовенозных аневризм может протекать на фоне и нормального кровяного давления. Ишемический инсульт характеризуется снижением мозгового кровотока и длительностью дореперфузионного периода, а при кровоизлиянии в мозг наблюдается генерализованное нарушение крвоснабжения мозга (Kobari М. et al.,1988; Mayer S.A. et al. 1998; Knight R. A. et al., 2008).

Следовательно, как при ишемическом, так и при геморрагическом сульте необходима фармакологическая коррекция, направленная на восстановление кровоснабжения, метаболизма и функционального состояния поврежденной области мозга.

В результате многочисленных исследований установлено, что в реализации нейротоксичности, возникающей как при ишемическом (Olney J.W., 1971; Choi D.W., Rothman S.M., 1992; Ekholm A., 1992), так и геморрагическом (Ardizzone T.D., et al., 2004; К. Tsuda К., Nishio I., 2005) поражении мозга, ведущая роль принадлежит возбуждающим нейромедиаторным аминокислотам и, в частности, глутамату. Установлена взаимосвязь между глутаматной нейротоксичностью и нарушением обмена ионов кальция в нервной клетке (Kristian Т., Siesjo В.К, 1998; Lee J.-M. et al., 2000). При этом наблюдается нарушение баланса между возбуждающими и тормозными процессами, протекающими в центральной нервной системе, вызванное значительным высвобождением глутамата, и пониженной функцией ГАМК-ергической системы (Green A.R. et al., 2000; Schwartz-Bloom R.D., 2001; Сорокина Н.Д. и соавт., 2002). В литературе имеются сведения о нейропротекторных свойствах антагонистов глутаматных рецепторов, которые получены у экспериментальных животных в условиях моделей ишемического и геморрагического инсультов (Ardizzone T.D. et al., 2004; Kazushi T, Faha I.N, 2005). Однако при клиническом изучении этих соединений были выявлены существенные побочные эффекты, вызванные их воздействием на центральную нервную систему. Поэтому к настоящему времени антагонисты глутаматных рецепторов, к сожалению, не получили широкого применения при расстройствах мозгового кровообращения. Известно, что ГАМК играет важную роль в регуляции тонуса сосудов мозга, вызывая как непосредственное сосудорасширяющее влияние на стенку сосудов мозга, так и оказывая депримирующее действие на центральную регуляцию мозгового кровообращения (Мирзоян С.А. и Акопян В.П 1967; Мирзоян С.А. и соавт., 1970; 1974; Ганынина Т.С.,1980; Мирзоян Р.С.,

Ганынина Т.С.,1989; Krause D.N., 1980). В результате систематического изучения производных ГАМК был разработан цереброваскулярный препарат пикамилон, который, наряду с непосредственным воздействием на сосуды мозга, оказывает тормозное влияние на центральные механизмы регуляции сосудистого тонуса (Закусов В.В. и соавт., 1988; Мирзоян P.C., Ганыиина Т.С., 1989). Показано также, что селективный агонист ГАМКд — рецепторов -мусцимол проявляет нейропротекторную активность как при ишемическом (Sternau L.L. at al., 1989; Shuaib A. et al., 1993; Lyden P.D. et al., 1997), так и при геморрагическом поражениях мозга (Lyden P.D. et al., 1997). Нейропротекторной активностью при ишемическом инсульте обладает также модулятор ГАМКд - рецепторного комплекса клометиазол (Green A.R., 1998; Green A.R. et al., 2000; Wahlgren N.G. et al., 1999). Следовательно, агонисты ГАМК, с одной стороны, понижают тонус сосудов мозга, улучшая кровоснабжение ишемизированной зоны, с другой — стимулируют тормозные системы, восстанавливая нарушенный ишемией баланс между возбуждающими и тормозными системами (Obrenovitch Т.Р., 2008). Поэтому одним из подходов фармакологической коррекции инсульта является поиск и изучение веществ, обладающих стимулирующим влиянием на систему ГАМК.

Ранее было показано, что селективный анксиолитик афобазол, разработанный в Институте фармакологии под руководством академика РАМН С.Б.Середенина, обладает нейропротекторной активностью, улучшает кровоснабжение мозга крыс в условиях локальной и глобальной преходящей ишемии (Баласанян М.Г., 2003;Силкина И.В., 2004). Показано, что комбинация пирролидона (циклическая форма ГАМК) и пироглутаминовой кислоты также улучшает кровоснабжение мозга в условиях локальной и глобальной преходящей ишемии мозга и защищает головной мозг от структурных, метаболических и функциональных нарушений, характерных для локального ишемического поражения (Топчян A.B., 1998; Луныиина Е.В., 2003). Следует отметить, что цереброваскулярные эффекты как афобазола, так и комбинации пирролидона с пироглутаминовой кислотой опосредуются через ГАМКА-рецепторы. Исходя из вышеизложенного, поиск нейропротекторов среди агонистов ГАМК является весьма перспективным для создания новых препаратов для лечения расстройств мозгового кровообращения.

Наряду с нарушениями гемодинамики, к основным патогенетическим факторам развития ишемического инсульта относится и повышение коагулологического потенциала крови. Это указывает на целесообразность разработки препаратов более широкого профиля, оказывающих влияние не только на сосуды мозга, но и на клеточный гемостаз. Известно, что полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК) обладают выраженной антиагрегационной активностью. В соответствии с этим, важным представляется изыскание и изучение новых производных ПНЖК с целью выявления более эффективных цереброваскулярных средств с противотромботическим действием. В лаборатории оксилипинов (зав. -д.х.н. В. В. Безуглов) Института биоорганической химии им. Ю.А. Овчинникова и М.М. Шемякина РАН проводилась направленная модификация полиеновых кислот с введением в их молекулы различных биологическиактивных радикалов. Систематические исследования антиагрегационной и цереброваскулярной активности этих производных показали, что докозагексаеноилдофамин обладает выраженной антиагрегационной и цереброваскулярной активностью (Васильева Т.М. и соавт., 2002). Поэтому представляется важным изучить новое соединение -конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином в условиях нарушения мозгового кровообращения.

Настоящая работа является дальнейшим развитием исследований, которые направлены на поиск и изучение средств лечения больных с цереброваскулярными расстройствами как ишемической, так и геморрагической природы.

Цель исследования

Сравнительное изучение влияния препаратов с нейропротекторной активностью - афобазола, лекарственной комбинации, содержащей пирролидон и пироглутаминовую кислоту, и вновь синтезированного конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на мозговое кровообращение в условиях моделей геморрагического и ишемического инсультов.

Задачи исследования

2. Изучить цереброваскулярную активность афобазола, лекарственной комбинации, содержащей пирролидон и пироглутаминовую кислоту, конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином и препарата сравнения - нимодипина в условиях модели геморрагического инсульта.

3. Изучить влияние конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на кровоснабжение мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии по сравнению с интактными животными.

5. Изучить антиагрегационные свойства конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином и афобазола.

6. Исследовать влияние афобазола на синтез индуцибельной изоформы стресс-белка НБР70 и содержание фактора роста нервов (КОБ) в структурах мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии мозга.

Научная новизна работы.

Впервые выявлено значительное и продолжительное снижение уровня мозгового кровотока как в ипсилатеральном, так и в контралатеральном полушарии коры головного мозга крыс при моделировании геморрагического инсульта путем кровоизлияния в область внутренней капсулы.

Впервые показано, что в этих условиях афобазол, лекарственная комбинация, содержащая пирролидон и пироглутаминовую кислоту, конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином и нимодипин в различной степени и разной продолжительности восстанавливают нарушенное кровоснабжение мозга.

Обнаружено, что конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином оказывает выраженное влияние на кровоснабжение мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии, не оказывая влияния на кровоснабжение мозга интактных животных. Этот эффект реализуется через бикукуллин чувствительные ГАМКА-рецепторы. Установлено, что в сосудорасширяющем эффекте афобазола в условиях модели геморрагического инсульта принимают участие ГАМК-ергические механизмы.

Выявлена способность афобазола ограничивать гиперэкспрессию стресс-белка Н8Р70 в стриатуме и гиппокампе и увеличивать содержание фактора роста нервов КвБ в гиппокампе мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии.

Научно-практическое значение работы.

Полученные в работе данные о влиянии веществ с ГАМК-ергическим компонентом действия на кровоснабжение мозга в условиях цереброваскулярных расстройств, свидетельствуют о характерной особенности указанных соединений проявлять цереброваскулярную активность в условиях экспериментальной сосудистой патологии мозга. Обнаруженная в работе способность афобазола, лекарственной комбинации, содержащей пирролидон и пироглутаминовую кислоту значительно улучшать кровоснабжение мозга лишь в условиях модели «геморрагического инсульта», а конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином - в условиях геморрагического и ишемического поражений мозга, указывает на перспективность поиска новых препаратов с нейропротекторной активностью среди агонистов ГАМК.

Заключение диссертационного исследования на тему "Цереброваскулярные эффекты ГАМК-ергических веществ в условиях геморрагического и ишемического поражений мозга"

ВЫВОДЫ

1 .Геморрагическое поражение мозга сопровождается значительным и продолжительным снижением локального мозгового кровотока как в ипсилатеральном, так и в контралатеральном полушариях коры головного мозга крыс.

5. Наряду с цереброваскулярным эффектом конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином обладает также и антиагрегационной активностью. Афобазол проявляет эти свойства лишь при использовании высоких концентраций препарата.

6. Афобазол в условиях глобальной преходящей ишемии ограничивает гиперэкспрессию Н8Р70 в стриатуме и гиппокампе и увеличивает содержание фактора роста нервов N0? в гиппокампе мозга крыс, сниженное в результате ишемического поражения.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Фармакотерапия цереброваскулярных расстройств относится к одной из наиболее важных проблем фармакологии и неврологии. Высокий процент заболеваемости сосудистой патологией мозга и инвалидизации населения свидетельствуют также о социальной значимости этой проблемы. Ишемический и геморрагический инсульты относятся к наиболее частым и тяжелым формам цереброваскулярных расстройств. Несмотря на то, что в основе патогенеза ишемического и геморрагического инсультов имеются существенные различия, они имеют и общие черты. Ишемический инсульт обусловлен снижением локального мозгового кровотока, а при геморрагическом инсульте в результате кровоизлияния в мозг наблюдается генерализованное снижение мозгового кровотока. Поэтому, если при ишемическом поражении мозга фармакологической мишенью является зона полутени (пенумбры), то при геморрагическом - вся сосудистая система мозга. В обоих случаях фармакологическая коррекция должна быть направлена на восстановление кровоснабжения, метаболизма и функционального состояния поврежденной области мозга.

В последние десятилетия произошел существенный прогресс в понимании патогенеза цереброваскулярных расстройств. Так, установлена важная роль возбуждающих нейромедиаторных аминокислот и, в особенности, глутамата в реализации нейротоксичности при ишемическом поражении мозга и выявлена взаимосвязь между глутаматной нейротоксичностью и нарушением обмена ионов кальция в нервной клетке. Как при ишемическом, так и геморрагическом поражениях мозга наблюдается усиление влияния возбуждающих систем и нарушение баланса между возбуждающими и тормозными процессами в центральной нервной системе. Способность неконкурентного антагониста NMDA-рецепторов МК-801 (дизоцилпин) и ряда других антагонистов глутаматных рецепторов оказывать нейропротекторное действие в эксперименте, к сожалению, ввиду существенных побочных эффектов не получили пока широкого применения в неврологической практике при расстройствах мозгового кровообращения.

Вместе с тем, учитывая современные представления о дисбалансе возбуждающих и тормозных систем при ишемическом поражении мозга, успешно разрабатывается другое направление фармакологии мозгового кровообращения - повышение активности тормозных процессов путем активации системы ГАМК. Этот путь оказался наиболее эффективным в соответствии с данными, указывающими на способность агонистов ГАМК не только стимулировать тормозные системы, восстанавливая нарушенный ишемией баланс между возбуждающими и тормозными системами, но и понижать тонус сосудов мозга, улучшая кровоснабжение ишемизированной зоны. Показано, что селективный агонист ГАМКа — рецепторов - мусцимол проявляет нейропротекторную активность как при ишемическом (Sternau L.L. at al., 1989; Shuaib A. et al., 1993; Lyden P.D. et al., 1997), так и при геморрагическом поражениях мозга (Lyden P.D. et al., 1997). Нейропротекторной активностью обладает также модулятор ГАМКа -рецепторного комплекса клометиазол (Green A.R., 1998; Green A.R. et al., 2000). Цереброваскулярный препарат пикамилон, который является производным ГАМК, широко применяется в неврологической практике (Закусов В.В. и соавт., 1988; Мирзоян P.C., Ганыиина Т.С., 1989).

Агонисты ГАМК, с одной стороны, понижают тонус сосудов мозга, улучшая кровоснабжение ишемизированной зоны, с другой - стимулируют тормозные системы, восстанавливая нарушенный ишемией баланс между возбуждающими и тормозными системами (Obrenovitch Т.Р., 2008), поэтому агонисты ГАМК являются весьма перспективными веществами для создания новых препаратов, защищающих мозг при расстройствах мозгового кровообращения. Учитывая вышеизложенное, представляло интерес провести изучение цереброваскулярной активности ГАМК-ергических веществ с нейропротекторной активностью в условиях модели геморрагического инсульта. Для этой цели были выбраны следующие соединения: селективный анксиолитик афобазол и комбинация пирролидона и пироглутаминовой кислоты, которые защищают головной мозг от структурных, метаболических и функциональных нарушений при локальной перманентной и глобальной преходящней ишемии мозга. Кроме того, было изучено влияние вновь синтезированного в лаборатории оксилипинов Института биоорганической химии им. Ю.А. Овчинникова и М.М. Шемякина РАН производного ГАМК - конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на кровоснабжение мозга у интактных животных и в условиях экспериментальных цереброваскулярных расстройств. В качестве эталонного препарата избран известный блокатор кальциевых каналов с цереброваскулярной активностью нимодипин.

В литературе широко обсуждаются модели геморрагического инсульта, а также изменения кровоснабжения и метаболизма мозга, сопровождающие его геморрагическое поражение. Однако данные имеют противоречивый характер, поэтому представляло интерес изучить изменения локального мзгового кровотока в коре головного мозга крыс в условиях модели геморрагического инсульта. Интрацеребральную геморрагию или «геморрагический инсульт» воспроизводили у наркотизированных крыс по методике А.Н. Макаренко и соавт. (2002).

У крыс в условиях геморрагического поражения внутренней капсулы мозга наблюдается значительное снижение уровня мозгового кровотока в коре головного мозга как в ипсилатеральном, так и в контралатеральном полушариях. После моделирования «геморрагического инсульта» уровень локального мозгового кровотока начинает снижаться с первых минут после геморрагического повреждения мозга и через 30 минут составляет в среднем 30±6,6% от исходного уровня. Интрацеребральная геморрагия сопровождается понижением уровня артериального давления в среднем на

22±4,7%, который либо частично восстанавливается, либо остается пониженным на протяжении всего эксперимента. Эти результаты согласуются с данными других исследователей, которые также показали уменьшение кровотока в коре мозга кошек при геморрагическом повреждении области левого базального ганглия (Kobari М. et al., 1988), на крысах при кровоизлиянии в каудальные ядра (Nath F.P. et al., 1987; Kehl F., 2002) и на мышах С57 BL/6 при кровоизлиянии в левый стриатум (Belayev L. et al., 2003).

В условиях модели геморрагического инсульта были изучены ГАМК-ергические вещества - афобазол и противоишемическая комбинация пирролидона и пироглутаминовой кислоты, которые обладают неропротекторной активностью и улучшают кровоснабжение мозга, сниженное в условиях его ишемического поражения. Исследуемые вещества вводили через 30 минут после проведения процедуры, вызываемой геморрагическое поражение мозга.

Изучение влияния афобазола на мозговое кровообращение в условиях модели геморрагического инсульта позволило выявить способность препарата значительно усиливать локальный мозговой кровоток, сниженный в результате поражения головного мозга. Цереброваскулярный эффект препарата начинает развиваться сразу же после его внутривенного введения и достигает достоверных значений через 40 минут после инъекции, а к 60 минуте составляет в среднем 36±5,5% и сохраняется до конца эксперимента. Анализ, проведенный с предварительным введением блокатора ГАМКа-рецепторов бикукуллина, показал, что цереброваскулярный эффект афобазола в условиях «геморрагического инсульта» не проявляется, что свидетельствует о ГАМК-ергичеком механизме цереброваскулярного действия препарата. Эти данные согласуется с результатми Силкиной И.В. и соавторов (2005), которые показали, что в цереброваскулярном эффекте афобазола у интактных животных также принимают участие ГАМК-ергические механизмы.

Лекарственная комбинация, содержащая пирролидон и пироглутаминовую кислоту (по 20 мг/кг каждого из компонентов), вызывает у большинства животных с геморрагическим поражением мозга увеличение локального мозгового кровотока в коре головного мозга сразу после введения, которое через 10-15 минут достигает максимальных величин (30±8,9%), а затем кровоток постепенно понижается. Эти результаты подтверждают данные, полученные Луныпиной Е.В. (2003) о том, что цереброваскулярный эффект комбинации проявляется у животных в большей степени в условиях патологии, а именно, при глобальной преходящей ишемии мозга, чем у интаткных крыс.

Препарат сравнения нимодипин (0,03 мг/кг, в/в), введенный через 30 минут после геморрагического поражения мозга, сразу же после введения вызывал увеличение локального мозгового кровотока в коре головного мозга крыс в среднем на 13±3,6% , которое сохраняется на протяжении всего опыта.

Следует отметить, что, несмотря на наличие гипотензивного эффекта у препарата, он оказывает длительное увеличение мозгового кровотока, хотя по силе эффекта уступает ГАМК-ергическим веществам.

Вновь синтезированное соединение - конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином с предполагаемым ГАМК-ергическим механизмом действия в большинстве опытов вызывает существенное увеличение локального мозгового кровотока у крыс, перенесших геморрагическое поражение головного мозга. Увеличение, кровотока в среднем составляет 34±4,5%. Цереброваскулярный эффект конъюгата ГАМК начинает развиваться через 20-30 минут после введения, достигает максимальных значений спустя 40-60 минут и продолжает оставаться значительно выше исходного уровня в течение 90 минут наблюдения, практически не оказывая влияния на уровень артериального давления.

Таким образом, исследованные препараты с ГАМК-егическим механизмом действия оказывают выраженное влияние на кровоснабжение мозга в условиях его геморрагического поражения. В этих условиях афобазол, комбинация, содержащая пирролидон и пироглутаминовую кислоту, конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином и препарат сравнения нимодипин в разной степени и с неодинаковой продолжительностью увеличивают мозговое кровообращение, нарушенное в результате геморрагического поражения мозга. Следовательно, агонисты ГАМК проявляет нейропротекторную активность не только при ишемическом поражении мозга, как показано ранее, но и в условиях модели геморрагического инсульта. Следует отметить, что полученные данные позволяют высказать мнение о том, что, несмотря на существенные различия в патогенезе ишемического и геморрагического инсультов, развитие нарушений, происходящих в мозге в результате резкого снижения кровотока, имеют сходный характер. Полученные нами данные о выраженной цереброваскулярной активности нимодипина при экспериментальном геморрагическом поражении мозга согласуются с клиническими наблюдениями, свидетельствующими об эффективности нимодипина при лечении больных с геморрагическим инсультом (Gelmers H.J., 1982; Скоромец A.A. и соавт., 2003; Супонева H.A., Пирадов М.А., 2003; Янишевский С.Н. и соавт., 2003). Нимодипин у больных с субарахноидальными кровоизлияниями при применении в течение трех месяцев существенно уменьшает проявления неврологического дефицита, характерного для данной группы пациентов (Feigin V.L. et al., 1998). Согласно данным Gaab M.R. (1997) нимодипин у этих больных вызывает более выраженное увеличение мозгового кровотока по сравнению с пациентами с ишемическим поражением мозга атеросклеротической природы.

Далее в работе было изучено влияние конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на кровоснабжение мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии. Оказалось, что соединение, также как и в условиях модели геморрагического инсульта вызывает увеличение локального мозгового кровотока у крыс в этих условиях в среднем на 27±3,7%, не оказывая существенного влияния на уровень артериального давления. Анализ, проведенный с помощью блокатора ГАМКл-рецепторов бикукуллина показал, что цереброваскулярный эффект конъюгата реализуется через ГАМКд-рецепторы. Следует отметить, что конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином не оказывет влияния на кровонабжение мозга интактных животных. Эти данные еще раз подтверждают тот факт, что вещества с ГАМК-ергическим механизмом действия проявляют свои церебровскулярные свойства в условиях патологии.

Проведенное исследование позволило установить, что конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином ингибирует АК-индуцированную агрегацию тромбоцитов во всем диапазоне исследованных концентраций. При этом в концентрации (1тМ) конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином снижает агрегацию в 4,8 раза по сравнению с контролем. Заметное антиагрегационное влияние конъюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином сохраняется и при его использовании в более низких концентрациях. При использовании в качестве индуктора агрегации АДФ конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином вызывает незначительное ингибирование тромбоцитарного взаимодействия (в 1,3 раза) только в максимально изученной концентрации 1тМ. Следовательно, конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином обладает антиагрегационной способностью, но в меньшей степени, чем докозагексаеноилдофамин.

При изучении антиагрегационной активности афобазола, оказалось, что препарат лишь в максимально исследованных концентрациях (0,5 мг/мл и 1 мг/мл) снижает АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов, а при АК-индуцированной агрегации в данных концентрациях полностью подавлет взаимодействие тромбоцитов. При инкубировании богатой тромбоцитами плазмы с более низкими концентрациями афобазола (0,25 мг/мл и 0,1 мг/мл) наблюдается уменьшение агрегации, индуцированной арахидоновой кислотой, в 3,3 раза и 2,4 раза, соответственно. Следовательно, афобазол проявляет антагрегационные свойства при его использовании только в высоких концентрациях.

Таким образом, проведенное исследование позволило установить, что конъюгат ГАМК с докозагексаеноилдофамином обладает заметной антиагрегационной активностью, но она менее выражена, чем у докозагексаеноилдофамина, а антиагрегационные свойства афобазола проявляются при использовании его лишь в высоких (значительно выше физиологических) концентрациях.

В литературе имеется достаточно много данных о нейропротекторной активности как эндогенных стресс-белков Н8Р70 из семейства белков теплового шока, так и нейротрофина ИОБ при различных патологических состояниях мозга (Малышев Ю.И., Малышева Е.В., 1998; С1£Гагс1 Кв. et а1., 2004). Показано, что при ишемическом повреждении мозга Н8Р70 защищает от гибели нейроны и астроциты, содействует восстановлению поврежденных при стрессе синаптических белков и ГАМК-трансмиссии, а фактор роста нервов ИОБ играет важную роль в развитии и организации септо-гиппокампальной ГАМК-ергической системы, участвуя в экспрессии альфа 4 субъединицы ГАМКА-рецепторов (ЬаШ:егЬогп 1.С. et а1., 1993; Ыосатога N. ег а1., 1996).

В следующей серии опытов было изучено влияние афобазола на синтез индуцибельной изоформы стресс-белка Н8Р70 и содержание фактора роста нервов N0? в гиппокампе и стриатуме мозга крыс в условиях глобальной преходящей ишемии головного мозга. Опыты показали, через 24 часа после ишемического повреждения мозга уровень белка Н8Р70 в стриатуме повышается в 2,6 раза по сравнению с контролем (р<0,05), а в гиппокампе -на 80% по сравнению с контролем, что, безусловно, свидетельствует о гиперэкспрессии данного белка. Известно, что стресс-белок Н5Р70 является АТФ-зависимым шапероном и для его синтеза и активности требуется большое количество энергии. Ишемия приводит к снижению содержания АТФ, а гиперэкспрессия Н8Р70 к еще большему снижению содержания макроэргов в ишемизированных нейронах. При содержании АТФ ниже, чем на 70% от нормального уровня, приводит к развитию некроза (ОеБтейге Т.е1 а1, 2001). Афобазол ограничивает гиперэкспрессию стресс-белка Н8Р70 в стриатуме и гиппокампе животных в условиях глобальной преходящей ишемии мозга и тем самым проявляет свои нейропротекторные свойства.

В условиях глобальной преходящей ишемии у крыс наблюдается достоверное снижение содержания фактора роста нервов N0? в гиппокампе, что соответствует литературным данным (Ьее е1 а1, 1998; Ъе,1. е1 а1, 2001; Штеёа Т. е1 а1, 2007). Афобазол, введенный крысам через 30 минут после ишемического повреждения, через 24 часа увеличивает содержание фактора роста нервов N0? в гиппокампе мозга крыс, сниженное после ишемии, что указывает на один из механизмов нейропротекторного действия препарата.

Таким образом, проведенное исследование показало, что вещества с ГАМК-ергическим компонентом действия оказывают существенное влияние на кровоснабжение мозга в условиях его патологии, оказывая воздействие как на тонус мозговых сосудов, так и на тормозные ГАМК-ергические процессы, нарушенные в результате как ишемического, так и геморрагического поражений мозга. Полученные данные позволяют сделать также вывод о том, что одним из механизмов нейропротекторного действия афобазола можно считать его способность увеличивать содержание N0? в гиппокампе мозга крыс, пониженное вследствие ишемии, а также ограничивать гиперэкспрессию Н8Р70, вызванную глобальной преходящей ишемией. Неодинаковое влияние афобазола и коньюгата ГАМК с докозагексаеноилдофамином на свертывающую систему крови следует учитывать при обсуждении возможного применения этих веществ у больных с нарушениями мозгового кровообращения ишемической и геморрагической природы.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Курдюмов, Илья Николаевич

1. Аведисова, A.C. Особенности психофармакотерапии больных с пограничными психическими расстройствами (клинико-фармакологическое изучение действия антидепрессантов, ноотропов, гипнотиков). Текст. / A.C. Аведисова//Докт. дисс. Москва. - 1999: 313с.

2. Акмаев, И.Г. Взаимодействие нервных, эндокринных и иммунных механизмов мозга. Текст. / И.Г. Акмаев // Журн. неврол. и психиатр. — 1998. -№3: с.54-56.

3. Акопян, В.П. О некоторых механизмах действия пирацетама на мозговое кровообращение. Текст. / В.П. Акопян, Л.С. Бадалян // Фармакол и токсикол. 1987. - № 1: с. 38-41.

4. Акопян, Н.С. Электрофизиологическое исследование деятельности мозга при гипоксии. Текст. / Н.С. Акопян // Ереван: Айастан. — 1987: -с.100 119.

5. Александровский, Ю.А. Психо-фармакотерапия пограничных психических расстройств. Текст. / Ю.А. Александровский, Л.М. Барденштейн, A.C. Аведисова // Москва. - 2000: с. 249.

6. Баласанян, М.Г. Анксиолитическая активность афобазола в условиях гипокинезии у крыс с высокой и низкой двигательной активностью. Текст. / М.Г. Баласанян // Мед. наука Армении / HAH Армении.- 2003: с. 15-21.

7. Баласанян, М.Г. Изучение роли оксида азота в механизмах нейропротекторного и анксиолитического действия афобазола всравнительном аспекте. Текст. / М.Г. Баласанян // Дис. докт.фарм. наук. — Ереван.-2003: с.22-32.

8. Беленький, M.JI. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. -2-е издание переработанное и дополненное. Текст. / M.JI. Беленький // Медгиз. — 1963: с. 152.

9. Васильева, Т. М. Влияние производных полиненасыщенных жирных кислот, антитромбоцитарных антител и гидролизата мономера фибрина, на агрегацию тромбоцитов. Текст. / Т. М. Васильева // Дис. канд. биол. наук. Москва. - 2002: с. 147.

10. Викторов, И.В. Роль оксида азота и других свободных радикалов в ишемической патологии мозга. Текст. / И.В. Викторов // Вестник РАМН. -2000. №4: с.3-10.

11. Виноградова, О.С. Нейронаука конца второго тысячелетия: смена парадигм. Текст. / О.С. Виноградова // Журнал высш. нервн. деятел. -2000. т.50: с.743-774.

12. Ганыпина, Т. С. ГАМК-ергические механизмы цереброваскулярных эффектов феназепама и диазепама Текст. / Т. С. Ганыпина // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1980.- №10: с.439-442.

13. Геварзиев, Ю.В. Механизмы регуляции активности синтезы окиси азота. Текст. / Ю.В. Геварзиев, H.H. Соколов // Вопр. мед. хим. — 1999. — т. 45. -№3: с.187-199.

14. Горбачев, В.И. Роль оксида азота в патогенезе поражений центральной нервной системы. Текст. / В.И. Горбачев, В.В. Ковалев // Журн. неврол. и психиатр, (прилож. Инсульт). — 2002. №7: с.9-16.

15. Гусев, Е.И. Ишемия головного мозга. Текст. / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова //. Медицина. 2001: с. 17-23.

16. Дунаев, В.В. Фармакологическая эффективность ряда метаболических средств при циркуляторной гипоксии головного мозга. Текст. / В.В. Дунаев, В.Р. Стец, И.Н. Башкин // Журнал неврологии и психотерапии. 1989. - №4: с.41-46.

17. Закусов, В.В. Вазоактивное и ноотропное средство «пикамилон». Текст. /В.В. Закусов, Н.В. Каверина, Э.А. Бендиков и др. // Авторское свидетельство №1393428 от 8 января 1988. Бюлл. Изобретения. -1988. -№17.

18. Зенина Т.А., Изучение нейропротекторных свойств афобазола в опытах in vivo. Текст. / Т.А Зенина, И.В.Гавриш, Д.С.Мелкумян, Т.С.Середенина, Середенин // Бюлл.экспер.биол.- 2005.- т.8: с.161-163.

19. Колик, Л.Г. Влияние афобазола на антиноцицептивные свойства морфина. Текст. / Л.Г. Колик, В.Н. Жуков, С.Б. Середенин // Эксперим. и клинич. фармакол. 2009. - т.72. - № 1: с.22-23.

20. Лунынина, Е.В. Нейропротекторные свойства пироглутаминовой кислоты в сочетании с пирролидоном. Текст. / Е.В. Лунынина, Т.С. Ганынина, Л.М. Макарова, В.Е. Погорелый, P.C. Мирзоян // Эксперим. и клин.фармакол. 2003. - т.66. - №1: с.20-22.

21. Лунынинва, Е.В.-Анализ цереброваскулярных и нейропротекторных эффектов лекарственной композиции, содержащей пирролидон и пироглутамиовую кислоту. Текст. / Е.В. Лунынинва // Дис. канд. мед. наук.-2003.

22. Малышев, И.Ю. Белки теплового шока и защита сердца. Текст. / И.Ю. Малышев, Е.В. Малышева // Бюлл. экспер. биол. 1998. - №12: с. 604-611.

23. Макаров, В.А. Гемостаз и реология крови. Текст. / В.А. Макаров, H.A. Горбунова. // Гемостаз и реология крови. — М.: «Триада-фарм», 2003. — 104 с.

24. Марков, Х.М. О биорегуляторной системе L-аргинин — окись азота. Текст. / Х.М. Марков // Пат. физиол. 1996. - №1: с.34-39.

25. Машковский, М.Д. Фармакологические основы антидепрессивной активности нового психотропного препарата пиразидола. Текст. / М.Д. Машковский, Н.И. Андреева // Журн. неврол. и психиатр. — 1975. -№ 3: с. 430-435.

26. Мирзоян Г.И. К вопросу влияния ГАМК принарушениях мозгового кровообращения. Текст. / Г.И. Мирзоян, Д.Т. Азарян, И.О. Нагапетян // Ж. экспер. и клин. мед. 1970. - т. 10. - №5: с. 45-51.

27. Мирзоян, P.C. Пути фармакологической регуляции мозгового кровообращения. Текст. / P.C. Мирзоян // Эксперим. и клин, фармкол. — 1995.-т. 58. №4: с. 3-7.

28. Мирзоян, P.C. Нейропротекторные и цереброваскулярные эффекты ГАМК-миметиков. Текст. / P.C. Мирзоян // Экспер. и клин, фармакол. -2003. -т.66. -№2: с.53-56.

29. Мирзоян, P.C. Новый цереброваскулярный препарат пикамилон. Текст. / P.C. Мирзоян, Т.С. Ганыпина // Фармакол. и токсикол. — 1989. -т.52.-№1:с. 23-26.

30. Мирзоян С.А. Влияние пироолидона-2 на мозговое кровообращение. Текст. / С.А. Мирзоян, М.Б. Ордян, М.Г. Баласанян // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1987. - т. 103. - №1: с. 64-65.

31. Мирзоян, С.А. Влияние у-аминомаслянной кислоты на мозговое кровообращение и кислородное напряжение в мозге. Текст. / С.А. Мирзоян, В.П. Акопян // Фармакол. и токсикол. 1967.- №5: с. 572-574.

32. Мирзоян, С.А. Декарбоксилазная активность глутаминовой кислоты в сосудах мозга. Текст. / С.А. Мирзоян, Б.А. Казарян, В.П. Акопян // Доклады АН СССР 1970. - т. 190. - № 5: с. 1241-1243.

33. Мирзоян, С.А. Содержание и некоторые превращения аминокислот в тканях стенок артерий мозга. Текст. / С.А. Мирзоян, Б.А. Казарян, В.П. Акопян // Доклады АН СССР 1974. - т. 214. - № 2: с. 465-468.

34. Офозу, Ф.А. Тромбоциты как модель регуляции свертывания крови на клеточных мембранах и ее значение. Текст. / Ф.А.Офозу // Дисс. докт. мед. наук. 2002.

35. Пастухов, Ю.Ф. Молекулярыне, клеточные и системные механизмы протективной функции белка теплового шока 70кДа. Текст. / Ю.Ф. Пастухов, И.В. Екимова // Нейронауки. 2005. - 2(2): с. 3-25.

36. Петелин, Л.С. Экстрапирамидные гиперкинезы. Текст. / Л.С. Петелин//Медицина. 1971.-т. 21: с. 15-32.

37. Рябов, Г.А. Роль оксида азота как регулятора клеточных процессов при формировании полиорганной недостаточности. Текст. / Г.А. Рябов, Ю.М. Азизов // Анест. и реаниматол. — 2001. №1: с.8-12.

38. Рожнова, С.А. Влияние новых производных никотиноил-ГАМК на кровообращение и некоторые показатели метаболизма мозга. Текст. / С.А. Рожнова // Пятигорск. Медицина. 1989. - т. 11: с. 47-51.

39. Саркисов, К.Г. Лазерная допплеровская флоуметрия как метод оценки состояния кровотока в микрососудах. Методология флоуметрии. Текст. / К.Г. Саркисов, Г.В. Дужак // Киев. Медицина. 1999. - т. 13: с. 9-14.

40. Семченко, В.В. Постаноксическая энцефалопатия. Текст. / В.В. Семченко, С.С. Степанов, Г.В. Алексеева // Омский медицинский вестник. -1999.-т. 43: с. 45-51.

41. Семьянов, А. В. Диффузная внесинаптическая нейропередача посредством глутамата и ГАМК. Текст. / А. В. Семьянов // Неврологический журнал: научно-практический журнал. — 2004. — т.8 -№5: с. 68-84.

42. Середенин, С.Б. Афобаол и тревожность, вызванная ишемическим поражением мозга. Текст. / С.Б. Середенин, В.П. Акопян, М.Г. Баласанян, A.B. Топчян // Эксперим и клин фармакол. 2006. - 69(2): с. 3-5.

43. Середенин, С. Б. Фармакологическая защита генома. Текст. / С. Б. Середенин, А. Д. Дурнев //. 1992. - Москва: с. 25-33.

44. Середенин, С.Б. Нейрорецепторные механизмы действия афобазола. Текст. / С.Б. Середенин, М.В. Воронин // Эксперим. и клинич. фармакол. -2009.-Т.72. № i; с.3-11.

45. Середенин, С.Б. Афобазол снижает двигательные расстройства, вызванные галоперидолом. Текст. / С.Б. Середенин, Т.Д. Гарибова, A.JI. Кузнецова, М.В. Воронин, М.Я. Яркова, Т.А. Воронина // Эксперим. и клинич. фармакол. 2009. - т.72. - № 1: с. 15-18.

46. Середенин, С.Б. Нейропротекторные свойства афбазола при экспериментальном моделировании геморргического инсульта. Текст. / С.Б. Середенин, В.А. Крайнева // Эксперим. и клинич. фармакол. 2009. -т.72. - №1: с. 24-28.

47. Середенин, С.Б. Доказательство нейропротекторных свойств афобазола на экспериментальной модели фокальной ишемии головногомозга. Текст. / С.Б. Середенин, О.В. Поварова, О.С. Медведев и др. // Эксперим и клин фармакол. 2006. - 69(4): с. 3-5.

48. Силкина, И.В. Анализ цереброваскулярных и нейропротекторных эффектов афобазола. Текст. / И.В. Силкина // Диссерт. канд биол. наук. — 2005: с. 55-68.

49. Силкина, И.В. Усиление кровоснабжения ишемизированного мозга под влиянием афобазола Текст. / И.В. Силкина, В.В. Александрии, Т.С. Ганьшина, С.Б. Середенин, P.C. Мирзоян // Экспер. и клин, фармакол. -2004.-t.67 : с.9-12 .

50. Силкина, И.В. ГАМК-ергический механизм цереброваскулярного и нейропротекторного эффектов афобазола и пикамилона Текст. / И.В. Силкина, Т.С. Ганьшина, С.Б. Середенин, P.C. Мирзоян // Экспер. и клин, фармакол. 2005. - т.68. - №1: с.20-24.

51. Скоромец, A.A. Спинальная ангионеврология. Руководство для врачей. Текст. / A.A. Скоромец // Медпресс. 2003: с. 608.

52. Скоромец, A.A. Пропедевтика клинической неврологии. Текст. / A.A. Скоромец, А.П. Скоромец, Т.А. Скоромец // Политехника. 2003: с. 51-61.

53. Сорокина, Н.Д. Нейробиологические аспекты ишемии мозга и постинсультной эпилепсии. Текст. / Н.Д. Сорокина, Г.В. Селицкий, Н.С. Косицын, М.М. Свинов // Журн. высш. нервн. деят. — 2002 — т.52. №6: с. 656-664.

54. Супонева H.A. Хроническая воспалительная демиелинизирующая полиневропатия с острым началом и дыхательной недостаточностью. Текст. / H.A. Супонева, М.А. Пирадов, С.С. Никитин, Д.М. Меркулова // Нервные болезни. 2003. - т. 12: с. 31-35.

55. Суслина, З.А. Ишемический инсульт: кровь, сосудистая стенка, антитромботическая терапия. Текст. / З.А. Суслина, М.М. Танашян, В.Г. Ионова // Москва. Медицинская книга. — 2005: с. 115-123.

56. Суслина, З.А. Сосудистые заболевания головного мозга в России: достижения и нерешенные вопросы. Текст. / З.А. Суслина // I Нац. конгресс «Кардионеврология». — Москва. 2008: с. 7-13.

57. Телушкин, П.К. Глутамат и пероксидное окисление в патогенезе заболеваний ЦНС. Текст. / П.К. Телушкин // Вопр. мед. химии. — 1998. —т. 44. № 6: с.520-526.

58. Топчян, A.B. Фармакологическая коррекция кровоснабжения и функционального состояния мозга при его локальном ишемическом поражении. Текст. / A.B. Топчян // Дисс. докт. мед. наук. 1998: с. 35-52.

59. Топчян, A.B. Локальная ишемия мозга крыс, вызванная перевязкой средней мозговой артерии. Текст. / A.B. Топчян, P.C. Мирзоян, М.Г. Баласанян // Эксперим. и клин, фармакол. — 1996. — т. 59. №5: с. 62-64.

60. Фишер, М. Обзор подходов к терапии острого инсульта: прошлое, настоящее и будущее. Текст. / М. Фишер, В. Шебитц // Журн. неврол. и психиатр, (прилож. Инсульт). 2001. - №1: с. 21-33.

61. Хайлов, H.A. Влияние докозагексаеноилдофамина на кровоснабжение мозга в условиях ишемического поражения мозга. Текст. / H.A. Хайлов // «Методология флоуметрии» выпуск 7. — 2003: с.107-114.

62. Abe, К. Ischemic delayed neuronal death, a mitochondrial hypothesis. Текст. / К. Abe, M. Aoki, J. Kawagoe et al. // Stroke. 1995. - V. 26. - P. 1478-1489.

63. Akinci, M.K. Widespread expression of. GABA(A) receptor subunits in peripheral tissues. Текст. / M.K. Akinci, P.R. Schofield. // Neuroscience Research. 1999. - V.35: P. 145-153.

64. Alberio, L. Flow cytometric analysis of platelet activation by different collagen types present in the vessel wall. Текст./ L. Alberio, G.L. Dale.// Br J Haematol. 1999. -V. 102: P. 1212-1221.

65. Alicke, B. Rapid down-regulation of GABAA receptors in the gerbil hippocampus following transient cerebral ischemia. Текст./ В. Alicke, R.D. Schwartz-Bloom.// J. Neurochem. 1995. - V.65: P. 2808-2811.

66. Anderson, KE. Stimulatory effect of brussels sprouts and cabbage Текст./ K.E. Anderson, A. Kappas, A.H. Conney. // Pharmacology. 1983. -V.43: P. 36^46.

67. Andrew. P.J. Enzymatic function of nitric oxide synthases Текст. / P.J. Andrew, B. Mayer// Cardiovasc. Res. 1999. -V. 43.: P. 521-531.

68. Arispe, N. Lipid interaction differentiates the constitutive and stress-induced heat shock proteins Hsc70 and Hsp70. Текст. / N. Arispe, M. Doh, A. De Maio.// Cell Stress Chaperones. 2002. - V.7: P. 330—338.

69. Banasiak, K.J. Mechanisms underlying hypoxia-induced neuronal apoptosis. Текст. / K.J Banasiak, Y. Xia, G.G. Haddad// Prog. Neurobiol. -2000.-V. 62: P. 215-249.

70. Bartkowski, H.M. Outcome from severe head injury in children and adolescents. Текст. / H.M Bartkowski // J. Neurosurg, 1988, - V.62: P. 194199.

71. Beer, H.M. Stress management — heat shock protein-70 and the regulation of apoptosis. Текст. / H.N.Beer, D.R.Green // Trends. Cell. Biol. -2001.-V.11:P.6-10.

72. Belayev, L. Experimental Intracerebral Hemorrhage in Mouse. Histological, Behavioral, and Hemodynamic Characterization of a Double-Injection Model. Текст. / L.Belayev, 1.1. Saul, К Curbelo, et al.// Stroke.-2003.-V.34: P.2221-2227.

73. Benveniste, H. Ischemic damage in hippocampal CA1 is dependent on glutamate release and intact innervation from САЗ. Текст. / H. Benveniste, M.B. Jorgensen, M. Samberg et al // J. Cereb. Blood flow metab. 1989. - V. 9: P. 629-639.

74. Bormann, J. GABA С receptors. Текст. / J. Bormann, A. Feigenspan // Trends Neurosci. 1995. - V. 18: P. 12-14.

75. Brandt, L. Survival and risk of leukaemia in polycythaemiavera and essential thrombocythaemia treated with oral radiophosphorus: are safer drugs available? Текст. / L. Brandt, H. Anderson // Eur J Haematol. 1995. - V.54: P. 21-26.

76. Brandt, L.I. Colonic ischemia Текст. / L.I. Brandt, S.J. Boley // Surg. CI. North Amer.-1991 V.72: P.203-229.

77. Buchan, A.M. A selective N-type Ca2+-channel blocker prevents CA1 injury 24 h following severe forebrain ischemia and reduces infarction following focal ischemia. Текст. / A.M. Buchan, S.Z. Gertler, H. Li, D. Xue,

78. Z-G Huang, K.E. Chaundy, K. Barnes, H.J. Lesiuk // J Cereb Blood Flow Metab. 1994. - V.14: P. 903-910.

79. Bunnel, O.S. Protective actions of the calcium antagonists, flunarizine and nimodipine on cerebral ischaemia. Текст. /O.S. Bunnel, T.M. Louis, R.L. Saldanha, et.al. //Med. Sci. Res. 1987 - V.15:P.1514.

80. Buresova, O. Piracetam induced facilitation of interhemispheric transfer of visual information in rats. Текст. / О. Buresova. & J. Bures// Psychopharmacol. 1976. - V.46: P. 93-102.

81. Burt D.K. GABA A receptor subtypes: from pharmacology to molecular biology. Текст. / D.K. Burt, G.L. Kamatchi // FASEB. J. 1991 - V.5: - P. 2916-2923.

82. Cano-Abad, M.F. Calcium entry through L-type calcium channels causes mitochondrial disruption and chromaffin cell death. Текст. / M.F. Cano-Abad, M. Villarroya, A.G. Garcia, N.H. Gabilan, M.G. Lopez // J Biol Chem 2001.-V.276: P. 39695-39704.

83. Castillio, J. Molecular signatures of brain injury after intracerebra hemorrhage. Текст. / J. Castillio, A. Davalos, J. Avarez-Sabin, J.M. Pumar, R. Leira, Y. Silva, J. Montaner, C.S. Kase // Neurology. 2002. - V.58: P. 624629.

84. Cauvin, C. Mechanisms of calcium antagonist-induced vasodilation. Текст. / С. Cauvin, R. Loutzenhiser, C. van Breemen // Ann. Rev Toxicol. -1983. V.23: P. 373-396.

85. Choi, D. Calcium: still center-stage in hipoxic ischemic neuronal death. Текст. / D. Choi // Trends neuroscience. - 1995. - V. 18: P. 58 - 60.

86. Choi, D.W. Glutamate neurotoxicity and diseases of the nervous system. Текст. / D.W. Choi // Neuron. 1988. - V. 1: P. 623-634.

87. Choi, D.W. The role of glutamate neurotoxicity in hypoxic-ischemic neuronal death. Текст. / D.W. Choi, S.M Rothman // Ann. Rev. Neurosci. -1992.-V. 13: P. 171-182.

88. Cross, AJ. Chlormethiazole antagonises seizures induced by N-methyl-DL-aspartate without interacting with the NMDA receptor complex. Текст. / A.J. Cross, M.F. Snape, A.R. Green // Psychopharmacology (Berl). 1993. -V.l 12 (4): P. 403-406.

89. Crumrine, R.C. Regional cerebral metabolites, blood flow, plasma volume, and mean transit time in total cerebral ischemia in the rat. Текст. / R.C. Crumrine, and J.C. Lamanna // Blood Flow Metab. 1991. - V.l 1: P. 272-282.

90. De Deyn P.P. Treatment of the acute ischemic stroke with piracetam. Текст. / P.P. De Deyn, J. De Reuck, W. Deberdt, R. Vlietinck, J.M. Orgogozo // Stroke. 1997. - V. 28: - P. 2347-2352.

91. Del Brutto, O.H. Stroke subtypes among Hispanics living in Guayaquil, Ecuador: results from the Luis Vernaza Hospital Stroke Registry. Текст. / O.H. Del Brutto, A. Mosquera, X. Sanchez, J. Santos, C.A. Noboa // Stroke. -1993 -V. 24: P.1833-1866.

92. Del Zoppo, G. Inflammation and stroke: putative role for cytokines, adhesion molecules and iNOS in brain response to ischemia. Текст. /G. Del Zoppo et al // Brain Pathol. 2000. - V. 10: P. 95-112.

93. Desmettre, T. Heat shock protein hyperexpresson on chorioretinal layers after transpupillary thermotherapy. Текст. / Т. Desmettre, C.A. Maurage, S. Mordon// Inves Ophthalmol Vis Sci. 2001. - V.42.-N12: P. 2976-80.

94. Dietrich, W.D. Effects of normothermic versus mild hyperthermic forebrain ischemia in rats. Текст. / W.D. Dietrich, R. Busto, I. Valdes and Y. Loor//Blood Flow Metab. 1987. -V. 7: P. 300-308.

95. Edvinsson, L. Pharmacological characterization of cerebral arteries in vitro. Текст. / L. Edvinsson, D.N. Krause // Brain Res. 1979. - V. 173: P. 89-97.

96. Ekholm, A. Perturbation of cellular energy state in complete ischemia: relationship to dissipative ion fluxes. Текст. / A. Ekholm, B. Asplund and B.K Siesjo // Brain Res. 1992. - V. 90: P. 47-53.

97. Eleff, S.M. Sodium, ATP and intracellular pH transients duringreversible compression ischemia of dog cerebrum. Текст. / S.M. Eleff, Y.

98. Maruki, L.H. Monsein, R.J. Traystman, R.N. Bryan and R.C. Koehler // Stroke. 1991. - V. 22: P. 233-241.

99. Feigin, V.L. Stroke incidence and 30-day case fatality rates in Novosibirsk, Russia. Текст. / V.L. Feigin, D.O. Wiebers, J.P. Whisnant, M. O'Fllaon // Stroke. 1998. -V. 26: P. 924-929.

100. Fergus, A. GAB Aergic regulation of resting tone in cerebral microvessels of the rat. Текст. / A. Fergus, K.S. Lee // Soc Neurosci. 1996. - Abstr. 22(Part 2): p.910.

101. Flaherty, M.L. Long-term mortality after intracerebral hemorrhage. Текст. / M.L. Flaherty, M. Haverbusch, P. Sekar, B. Kissela, D. Kleindorfer, C.J. Moomaw, L Sauerbeck, A. Schneider, J.P. Broderick, D. Woo // Neurology. 2006. - V.66: P. 1182-1186.

102. Fleckenstein,. A. Experimental basis of the long-term therapy of arterial hypertension with calcium antagonists. Текст. / A. Fleckenstein, M. Frey, J. Zorn, G. Fleckenstein-Griin //Am J Cardiol. 1985. - V.56.-№16: P.3H-14H.

103. Forster, C. Inducible nitric oxide synthase expression in human cerebral infarcts. Текст. / С. Forster, H.B. Clark, M.E. Ross, C. Iadecola // Acta Neuropathol. 1999. - V. 97: P. 215 - 220.1.l

104. Fox, P.T. Stimulus rate dependence of regional cerebral blood flow in human striate cortex, demonstrated by positron emission tomography. Текст. / P.T. Fox, M.E. Raichle // J. Neurophysiol. 1988. - V.51.-№5: P. 1109-1120.

105. Fox, P.T. Focal physiological uncoupling of cerebral blood flow and oxidative metabolism during somatosensory stimulation in human subjects. Текст. / P. T. Fox and M.E. Raichle // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. -V.83: P. 1140-1144.

106. Fujiwara, M. y-aminobutyric acid receptor on vascular smooth muscle of dog cerebral arteries. Текст. / M. Fujiwara, I. Muramatsu, S. Shibata // Brit. Pharmacol. 1975.-V. 55: P. 561-562.

107. Gaab, M.R. Acute effects of nimodipine on the cerebral blood flow and intracranial pressure. Текст. / M.R. Gaab, I. Haubitz, A. Brawanski, A. Kora, T. Czech// Cerebrovasc. Dis. 1997. - V.7: P. 205-213.

108. Galeffi, F. Diazepam promotes ATP recovery and prevents cytochrome с release in hippocampal slices after in vitro ischemia. Текст. / F. Galeffi, S. Sinnar, R.D. Schwartz-Bloom // J Neurochem. 2000. - V.75: P. 1242-1249.

109. Gelmers, H.J. Nimodipine, a new calcium antagonist, in the prophylactic treatmentof migraine. Текст. / H.J. Gelmers // Headache. 1982. -V. 23(3): P. 15-17.

110. Gelmers, H.J. The effect of nimodipine on the clinical course of patients with acute ischaemic stroke. Текст. / H.J. Gelmers // Acta Neurol. Scand.-1982.-V.69:P.232-239.

111. Germano, J.M. Suitability of amphibians and reptiles for translocation. Текст. / J.M. Germano, P.J. Bishop // Conserv Biol. 1986. -V. 23(1): P. 715.

112. Giffard, R. G. Chaperones, protein aggregation, and brain protection from hypoxic/ischemic injury. Текст. / R. G Giffard, L. Xu, H. Zhao, W. Carrico,et al. // J. Exp. Biol. -2004.- V.207: P.3213 3220.

113. Gijn, van J. Subarachnoid haemorrhage: diagnosis, causes and management. Текст. / J. vab Gijn and G. J. Rinkel // Brain. — 2008. — V.124: P. 210.

114. Gioia, A.E. Evaluation of the efficacy of intrathecal nimodipine in canine models of chronic cerebral vasospasm. Текст. / A.E. Gioia, R.P. White, B. Bakhtian et.al. //J. Neurosurg. 1985. -V. 62: P. 721-728.

115. Ginsberg, M.D. Rodent models of cerebral ischemia. Текст. / M.D. Ginsberg and R. Busto // Stroke. 1989. - V. 20: P.1627-1642.

116. Glossman, H. Assay for calcium channels. Текст. / H. Glossman, D.R. Ferry // Meth Enzymol. 1985. -V. 109: P. 513-549.

117. Glossman, H. Properties of angiotensin II receptors in the bovine and rat adrenal cortex. J. biol. Текст. / H. Glossman, A.J. Bankal, KJ. Gatt // Chem: Renal Physiol. 1985. - V.7: P. 344-348.

118. Green, A.R. Clomethiazole (Zendra) in acute ischemic stroke: basic pharmacology and biochemistry and clinical efficacy. Текст. / A.R. Green // Pharmacol. Ther. 1998. -V. 80: P.123-147.

119. Green, A.R. GABA potentiation: a logical pharmacological approach for the treatment of acute ischaemic stroke. Текст. / A.R. Green, A.H. Hainsworth and D.M. Jackson // Neuropharmacol. 2000. - V. 39: P. 1483-1494.

120. Greene, J.G. Bioenergetics and glutamate excitotoxicity. Текст. / J.G. Greene and J.T. Greenamyre // Progr. Neurobiol. 1996. - V. 48: P.613-634.

121. Guo, L.J. Effects of arterial blood pressure change on release of GABA in the posterior hypothalamus conscious of freely moving rats. Текст. / L.J. Guo, A. Philippu // Yao Xue Xue Bao. 1994. -V.29.-№6: P.401-405.

122. Gyenes, M. 'Run-down' of 7-aminobutyric acidA receptor function during whole-cell recording: a possible role for phosphorylation. Текст. / M. Gyenes, M. Farrant and D.H. Farb // Mol. Pharmacol. 1988. -V. 34: P. 719723.

123. Gyenes, M. H. Phosphorylation factors control neurotransmitter and neuromodulator actions at the 7-aminobutyric acid type A receptor. Текст. / M. Gyenes, Q. Wang, T.T. Gibbs and D.H. Farb // Mol. Pharmacol. 1994. - V. 46: P.542-549.

124. Hamel, E. A Neurotrophic Rationale for the Therapy of Neurodegenerative Disorders. Текст. / E. Hamel, A. Di Polo // Curr Alzheimer Res. -2009. V.12: P. 15-18.

125. Нага, H. Staurosporine, a novel protein kinase С inhibitor, prevents postischemic neuronal damage in the gerbil and rat. Текст. / H. Нага, H. Onodera, M. Yoshidomi, Y. Matsuda, and K. Kogure // J. Cereb. Blood Flow Metab. 1990. - V. 10: P. 646-653.

126. Harata, N. Run-down of the GABAA response under experimental ischaemia in acutely dissociated CA1 pyramidal neurones of the rat. Текст. / N. Harata, J. Wu, H. Ishibashi, K. Ono and N. Akaike // J. Physiol. 1997. - V. 500: P. 673-688.

127. Hayashi, T. Regulating ankyring dynamics: Roles of sigma-1 receptors. Текст. / Т. Hayashi, T.P Su Proc.Nat.Acad.Sci. 2001. - V. 98: P. 491-496.

128. Hendry, S.H. Intracortical connectivity of architectonic fields in the somatic sensory, motor and parietal cortex of monkeys. Текст. / S. H. Hendry, E.S. Jones, J. D. Coultar /Я.Сотр.Neurol. 1983. - V. 181- №3: P. 291-348.

129. Herman, J.P. Norepinephrine-gamma-aminobutyric acid (GABA) interaction in limbic stress circuits: effects of reboxetine on GABAergicneurons. Текст. / J.P. Herman, A. Renda, B. Bodie // Biol. Psychiatry 2004-V. 53: P. 166-174.

130. Himeda, Т., Postischemic alterations of BDNF, NGF, HSP 70 and ubiquitin immunoreactivity in the gerbil hippocampus: pharmacological approach. Текст. / Т. Himeda, H.Tounai, N.Hayakawa, T Araki // Cell. Mol.Neurobiol 2007. - V.27-N2: P.229-250.

131. Hui-Lin, Pan. Regulation of Synaptic Inputs to Paraventricular-Spinal Output Neurons by or2 Adrenergic Receptors. Текст. / Hui-Lin Pan, De-Pei Li, Lindsay M. Atnip, Shao-Rui Chen// J Neurophysiol. 2004. - V.93: P. 393402.

132. Iadecola, C. Marked induction of calcium-independent nitric oxide synthase activity after focal cerebral ischemia. Текст. / С Iadecola, X Xu, F Zhang, E.E. el-Fakahany, M.E. Ross // J. Cereb Blood Flow Metab. 1995. -V. 15(1): P. 52-59.

133. Inoue, M. Intracellular calcium ions decrease the affinity of the GABA receptor. Текст. / M. Inoue, Y. Oomura, T. Yakushiji and N. Akaike // Nature. 1986.-V. 324: P.156-158.

134. Jacewicz, M. Cerebral Sinus Thrombosis. Текст. / M. Jacewicz, F. Plum, K. Einhaupl, O. Kempski, and A. Baethmann // New York: Plenum Press. 1990.-P.157-170.

135. Johansen, F.F. Enhancement of GABA neurotransmission after cerebral ischemia in the rat reduces loss of hippocampal CA1 pyramidal cells. Текст. / F.F. Johansen, N.H. Diemer // Acta Neurologica Scandinavica. 1991. - V.84: P. 1-6.

136. Johansson, B. Environment influences functional outcome of cerebral infarction in rats. Текст. / В. Johansson // Stroke. 1989. - 26: P. 644—649.

137. Johnson, PC, Saidel GM. Thermal model for fast simulation during magnetic resonance imaging guidance of radio frequency tumor ablation. Текст. / P.C. Johnson, G.M. Saidel // Ann Biomed Eng. 1980. - V.30-N9: P.l 152-1161.

138. Kanter E.D. A dendritic GABAa mediated IPSP regulates facilitation of NMDA-mediated responses to burst stimulation of afferent fibers in piriform cortex. Текст. / E.D. Kanter, A. Kapur, L.B. Haberly // J. of Neuroscience. -1996.-V. 16:-P. 307-312.

139. Kass, I. R. Mechanisms involved in irreversible anoxic dam ge to the in vitro rat hippocampal slice. Текст. / I.R. Kass, P. Lipton // J. Physiol. — 1986. — Vol. 332: P. 459—472.

140. Kawai, K. Global cerebral ischemia associated with cardiac arrest in the rat. Dynamics of early neuronal changes. Текст. / К. Kawai, L. Nitecka, F. Joo, N. Saito and I. Klasto // Blood Flow Metab. 1992. - V. 12: P. 238-249.

141. Kazda, S. Effect of nifedipine on coronary capillary geometry in nor-motensive and hypertensive rats. Текст. / S. Kazda et al. // Hypertension. — 1982.—V. 24: P. 205-211.

142. Kazushi T. Glucose Metabolism, Noradrenaline Release, and MK-801 in Intracerebral Hemorrhage. Текст. / Т. Kazushi, I.N. Faha // Stroke. -2005. -V.36: P. 532.

143. Kelly, P.T. Active site-directed inhibition of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase type II by a bifunctional calmodulin-binding peptide. Текст. / P.T. Kelly, R.P. Weinberger, M.N. Waxham // Proc. Natl Acad Sci U S A. -1989. V.85(14): P.4991-4995.

144. Kelly, P.T. The effects of the GABAergic agonist muscimol upon the relationship between local cerebral blood flow and glucose. Текст. / P.T. Kelly, J. McCulloch // Respirology. 1983. - V.14.-№4: P.567-573.

145. Kevin S. GABAergic Regulation of Cerebral Microvascular Tone in the Rat. Текст. / S. Kevin //, J. Cereb. Blood Flow Metab. 1997. - V. 17. - №9: -P. 992-1003.

146. Kerr D.B. GABAb receptors. Текст. / D.B. Kerr, J. Ong // Pharmacol. Ther. 1995. - V. 67: - P. 187-246.

147. Kim-Han, J.S. Diringer MN-Perihematomal mitochondrial dysfunction after intracerebral hemorrhage. Текст. / J.S. Kim-Han, S.J. Kopp, L.L. Dugan // Stroke. 2006. - V.37: P.2457-2462.

148. Knight, R.A. Temporal MRI Assessment of Intracerebral Hemorrhage in Rats. Текст. / R.A. Knight, Y. Han, T.N. Nagaraja, P. Whitton, J. Ding, M. Chopp, D.M. Seyfried // Stroke. 2008. - V.39: P.2596.

149. Kobari, M. In: The cerebral veins. Текст. / M. Kobari, F. Gotoh, M. Tomita et al// New York, Wien, Springer. 1988. - P. 287-291.

150. Kobayashi, M. Application of the diffusion approximation for queueing networks. Текст. / M. Kobayashi // Journal of ACM. 1977. - V.21: P.316-328, 456-469.

151. Krause D.N. Specific cerebrovascular localization of GABA-related receptors and enzymes. Текст. / D.N. Krause, E. Roberts, E. Wong, P. Degener, K. Rogers //Brain Res. Bull. 1980. - V. 5: - P. 173-177.

152. Kristian T. Calcium in ischemic cell death. Текст. / Т. Kristian, B.K. Siesjo //Stroke.- 1998.-V. 29:-P. 705 718.

153. Lauterborn J.C. Nerve growth factor mRNA is expressed by GABAergic neurons in rat hippocampus. Текст. / J.C. Lauterborn, P.J. Isackson, C.M. Gall // Neuroreport. 1993. - V.5: P. 273-276.

154. Lee, J-M. Brain tissue responses to ischemia. Текст. / J-M. Lee, M.C. Grabb, G.J. Zipfel, D. Choi // J Clin Invest. 2000. -V. 106, № 6: P.723-731.

155. Lee, T.-H. Expression of nerve growth factor and trkA after transient focal cerebral ishmia in rats. Текст. / T.-H. Lee, K. Hiroyuki, S.-T. Chen et al. //Stroke. 1998. V.29: P. 1678-1697.

156. Lipton, S.A. Actions of redox-related congerens of nitric oxide at the NMDA-receptors. Текст. / S.A. Lipton, S.S. Stamler // Neuropharmacol. -1994.-V. 33. №11: P.1229-1233.

157. Ljunggren B. Changes in energy state and acid-base parameters of the rat brain during complete compression ischemia. Текст. / В. Ljunggren, H. Schutz, B.K. Siesjo // Brain Res. 1974. - V. 73: P. 277-289.

158. Lou, H.C. Parietal cortex and representation of the mental Self. Текст. / H.C. Lou, B. Luber, M. Crupain, J.P. Keenan, M. Nowak, T.W. Kjaer, H.A. Sackeim, S.H. Lisanby // Proceedings of National Academy of Sciences, USA. 1987. - V.101: P. 6827-6832.

159. Lowenstein, D.H. The stress protein response in cultured neurons: charakterization and evidence for a protective role in exitotoxicity. Текст. /

160. D.H. Lowenstein, P.H. Chan, M.F. Miles // Neuron. 1991. - V.7: P.1053-1060.

161. Lyden, P.D. GAB A and neuroprotection. Текст. / P.D. Lyden // Int. Rev. Neurobiol. 1997. -V. 40: P. 233-258.

162. Lyden, P.D. Combination therapy protects ischemic brain in rats. A glutamate antagonist plus a gammaaminobutyric acid agonist. Текст. /P.D. Lyden, L. Lonzo // Stroke. 1994. - V. 25: P. 189-196.

163. Lyden, P.D. Clomethiazole Acute Stroke Study in Ischemic Stroke (CLASS-I) Текст. / P.D Lyden, , A. Shuab, K.Levin et al.// Stroke.-2002.-V.33:P.122.

164. Lynch, D.R. Excitotoxicity: Perspectives Based on N-Methyl-D-Aspartate Receptor Subtypes. Текст. / D.R.Lynch, R.P. Guttmann // Stroke. -2002. Vol. 300. №3: P. 717-723.

165. Mannhold, R. Qualitative and quantitative structure-activity relationships of specific Ca-antagonists. Текст. / R. Mannhold, R. Rodenkirchen, R. Bayer // Prog. Pharmacol. Eur Neurol. 1984. - V. 25: P. 57-67.

166. Martin, R.L. The early events of oxygen and glucose deprivation: setting the scene for neuronal death. Текст. / R.L. Martin, H.G.E. Lloyd, A.I. Cowan // Trends Neurosci. 1994. - V. 17: P. 251-257.

167. Martina, M. The effect of intracellular Ca2+ on GABA-activated currents in cerebellar granule cells in culture. Текст. / M. Martina, G. Kilic, E. Cherubini // J. Membr. Biol. 1994. - V. 142: P. 209-216.

168. Mayer, S.A.-Perilesional Blood Flow and Edema Formation in Acute Intracerebral Hemorrhage. Текст. / S.A. Mayer, A. Lignelli, M.E. Fink, D.B. Kessler et al.// Stroke. 1998. - V.29: P.1791-1798.

169. Mehta, A.K. An update on GABAa receptors. Текст. / A.K. Mehta, M.K. Ticku // Brain Res. Brain Res. Rev. 1999. - V.29.N2-3: P. 196-217.

170. Mellander, S. Evidence of a role for endothelium-derived nitric oxide in the regulation of vascular tone during acute haemorrhage. Текст. / S. Mellander, U. Ekelund // Acta Physiol Scand. 1989. - V.154.-№3: P. 419-20.

171. Mileson В. E., Ehrmann M. L. and Schwartz R. D. Alterations in the GABA-gated chloride channel following transient forebrain ischemia in the gerbil. Текст. / B.E. Mileson, M.L. Ehrmann, R.D. Schwartz // J. Neurochem. 1992.-V. 58: P. 600-607.

172. Mintz, I.M. GABAB receptor inhibition of P-type Ca2+ channels in central neurons. Текст. / I.M. Mintz, B.P. Bean // Neuron. - 1993. - V.10.N5: P. 889-898.

173. Mohamed, A.H. Oxidative stress as a common mediator for apoptosis induced-cardiac damage in diabetic rats Open Cardiovasc. Текст. / A.H. Mohamed, A.E. Kelany // Med J. 1985. - V. 2: P.78.

174. Nakai, M. Synthesis azathia-macrocyclic compounds by remote photocyclization with a pair system of phthalimide and sulfide groups. Текст. / M. Nakai et al //Heterocycles. 1983. - V.20.N.1: P. 173.

175. Nakamura, N. Intracerebral hemorrhage in mise: model characterization and aplication for genetically modified mice. Текст. / N. Nakamura, G. Xi, Y. Hua, T. Schallert, J.T. Hoff, R.F. Keep // J.Cereb Blood Flow Metab. 2004. -V.24: P.487-494.

176. Nath, F.P. Early he-modynamic changes in experimental intracerebral hemorrhage. Текст. / F.P. Nath, A. Jenkins, A.D. Mendelow, D.I. Graham, G. Teasdale // J. Neurosurg. 1987. - V. 65: P. 697-703.

177. Narasimhan, P. Astrocyte survival and HSP70 heat shock protein induction following heat shock and acidosis. Текст. / P. Narasimhan, R.A. Swanson, S.M. Sagar, F.R. Sharp // Glia. 1996. - V.17: P.147-159.

178. Obrenovitch, T.P. Molecular Physiology of Preconditioning-Induced Brain Tolerance to Ischemia. Текст. / T.P. Obrenovitch // Physiol. Rev. — 2008.-V.88: P. 211-247.

179. Olney, J.W. Glutamate-induced neuronal necrosis in the infant mouse hypothalamus: an electron microscope study. Текст. / J.W. Olney // Exp. Neurol. 1971. - V.30: P.75-90.

180. Olney, J.W. Excitotoxic mechanisms of epileptic brain damage. Текст. / J.W. Olney, R.C. Collins, R.S. Sloviter // Adv. Neurol. 1986. - V. 44: P.857-877.

181. Orakciouglu, B. Evolution of early petihemorrhagic changes-ischemia vs edema MRI studi in rats. Текст. / В. Orakciouglu, J.B. Fiedbach, T. Steiner, R. Kollmar et al //Exp.Neurol. -2005. V.193: P.369-376.

182. Orrego, F. N-Methylaspartate-activated calcium channels in rat brain cortex slices: effects of calcium channel blockers and of inhibitory and depressant substances. Текст. / F. Orrego, N. Riveros // Neuroscience. — 1999. V.17: P. 541-546.

183. Papadopoulos, M.C. Overexpression of HSP-70 protects astrocytes from combined oxygen-glucose deprivation. Текст. / M.C. Papadopoulos, X.Y. Sun, J. Cao, N.F. Mivechi, R.G. Giffard //Neuroreport. 1996. - V. 7: P. 429-432.

184. Patel T.R. Comparison of cerebral blood flow and injury folloving intracerebral and subdural hematoma in the rat. Текст. / T.R. Patel, G.P. Schilke, J.T. Hoff, R.F. Keep, A. Lorris Betz // Brain Res. 1999. - V.2.N1-2: P.125-153.

185. Peroutka, Stephen J. Autoradiographic localization of 5HT2 receptors in rat brain using 125I.-DOI, a selective psychotomimetic radioligand. [Текст] / Stephen J. Peroutka // Prog. Neuropsychopharmacol. and Biol. Psychiatry. -1984. -V.13: P.573-581.

186. Phillis, J.W. The role of phospholipases, cyclooxygenases, and lipoxygenases in cerebral ischemic/traumatic injuries. Текст. / J.W. Phillis, M.H. O'Regan// Crit. Rev. Neurobiol. 2003. - V. 15: P. 61-90.

187. Pluta, R. Reassessment of a new model of complete cerebral ischemia in rats. Текст. / R. Pluta, A.S. Lossinsky, M.J. Mossakowski, L. Faso, H.M. Wisniewski // Acta Neuropathol. 1991. - V. 83: P. 1 -11.

188. Prunell, G.F. et al. Experimental subarachnoidal hemorrhage: Subarachnoid blood volume, mortality rate, neuronal death, cerebral blood flow, and perfusion pressure in three different rat models. Текст. // Neusergery .-2003 .-V. 165 :P.52.

189. Prunell, G.F. Experimental subarachnoidal hemorrhage: Cerebral blood flow and brain metabolism during the acute phase in three different models in the rat. Текст. /T.Mathiesen, N.A. Svendgaard // Neusergery-2004.-V.54: P.426.

190. Pulsinelli, W.A. A new model of bilateral hemispheric ischemia in the unanaesthetized rat. Текст. / W.A. Pulsinelli, J.B. Brierly // Stroke. 1979. -V. 10: P. 267-272.

191. Pulsinelli, W.A. The four-vessel occlusion rat model: method for complete occlusion of vertebral arteries and control of collateral circulation. Текст. / W.A. Pulsinelli, A.M. Buchan // Stroke. 1988. -V. 19: P. 913-914.

192. Rajdev, S. Mice overexpressing rat heat shock protein 70 are protected against cerebral infarction. Текст. / S. Rajdev, К. Hara, Y. Kokubo, R. Mestril,

193. W. Dillmann, P.R. Weinstein, F.R. Sharp // Ann. Neurol. 2000. - 47: P. 782791.

194. Randall, R.D. Glutamate — induced calcium transient triggers delayded calcium overload and neurotoxicity in rat hippocampal neurons. Текст. / R.D. Randall, S.A. Thayer//J. Neurosci. 1990. -V. 12: P.1882-1895.

195. Roda, J.M. New Goals in Ischemic Stroke Therapy: The Experimental Approach Harmonizing Science with Practice. Текст. / J.M. Roda // Cerebrovascular Diseases. -1995. - V.20.S.2: P.15-19.

196. Roos, Y.B. Antifibrinolytic therapy for aneurysmal subarachnoid haemorrhage. Текст. / Y.B. Roos, G.J. Rinkel, M. Vermeulen, A Algra, J. van Gijn // Cochrane Database Syst Rev. 2003. -V.2: P. 45-50.

197. Ropper, A.N. Cerebral blood flow after experimental basal ganglia hemorrhage. Текст. / A.N. Ropper, N.T. Zervas // Ann Neurol. — 1982. -V.11.N3: P.266-271.

198. Rosenberg, G.A. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats. Текст. / G.A. Rosenberg, S. Mun-Bryce, M. Wesley, M. Kornfeld // Stroke. -1990. V.21:P.801-807.

199. Rothman S.M. Exitotoxins: possible mechanisms of action. Текст. / S.M. Rothman // Ann. NY Acad. Sci. 1992. - V. 648: - P. 132-139.

200. Rothwell, N.J. Cytokines and the nervous system II: Actions and mechanisms of action. Текст. / N.J. Rothwell, S.J. Hopkins // Trends Neurosci.- 1995.-V. 18: P.130- 136.

201. Sah R. Modulation of the GABAA-gated chloride channel by reactive oxygen species. Текст. / R. Sah, R. Ahrens, F. Galeffi, G. Jordan, R. D. Schwartz-Bloom // Soc. Neurosci. 2001 - V. 28: - P. 1073.

202. Samochocki, M. Modulatory action of arachidonic acid on GABAA/chloride channel receptor function in adult and aged brain cortex membranes. Текст. / M. Samochocki, J. Strosznajder // Neurochem. Int. — 1993.-V. 23: P.261-267.

203. Schottler, F. The effects of repetitive low-frequency stimulation on control and "potentiated" synaptic responses in the hippocampus. Текст. / F. Schottler, G. Lynch // Life Sciences. 1996. - V. 27: P. 2385—2391.

204. Schwartz, R.D. Inhibition of GABA-gated chloride channel function by arachidonic acid. Текст. / R.D. Schwartz, X. Yu // Brain Res. — 1992. V.585: -P.405-410.

205. Schwartz, R.D. Post-ischemic diazepam is neuroprotective in the gerbil hippocampus. Текст. / R.D. Schwartz, R.A. Huff, X. Yu, M. Carter, M. Bishop//BrainRes. 1994.-V.647: P. 153-160.

206. Schwartz, R.D. Diazepam, given post-ischemia, protects selectively vulnerable neurons in rat striatum and hippocampus. Текст. / R.D. Schwartz, X. Yu, M.R. Katzman, D.M. Hayden-Hixson, J.M. Perry // J. Neurosci. 1995. -V. 15: P.529-539.

207. Schwartz-Bloom, R.D. Inhibition of GABA-gated chloride channels in brain by the arachidonic acid metabolite, thromboxane A2. Текст. / R.D. Schwartz-Bloom, T.A. Cook, X. Yu // Neuropharmacology. 1996. - V. 35: P.1347-1353.

208. Schwartz-Bloom, R.D. Y-Aminobutyric acidA neurotransmission and cerebral ischemia. Текст. / R.D. Schwartz-Bloom, R. Sah // J. Neurochem. -2001.-V. 77.-№2: P.353-371.

209. Scotti de Carolis A. Neuropharmacological investigations on muscimol, a psychotropic drug extracted from Amanita muscaria. Текст. / A. Scotti de

210. Carolis, F. Lipparini, V.G. Longo // Psychopharmacol. 1969. - V. 15. - №3: -P. 186-195.

211. Semkova, I. Selegelin enhances NGF synthesis and protects central nervous system neurons from excitotoxic and ischemic damage. Текст. / I. Semkova, P. Wolz, M.Schilling, J.Kreiglstein// Eur J.Pharmacol.-1996.-V.315:P.19-30.

212. Shigeno, T. Reduction of delayed neuronal death by inhibition of protein synthesis. Текст. / Т. Shigeno, Y. Yamasaki, G. Kato, K. Kusaka, T. Mima, K. Takakura, D.I. Graham, S. Furukawa // Neurosci Lett. 1990. - V.120: P.l 17119.

213. Shuaib, A. GAB A agonist 'muscimol' is neuroprotective in repetitive transient forebrain ischemia in gerbils. Текст. / A. Shuaib, R. Mazagri, S. Ijaz // Exp. Neurol. -1993. V. 123: P. 284-288.

214. Sieghart, W. Structure and pharmacology of gamma-aminobutyric acid A receptor subtypes. Текст. / W. Sieghart // Pharmacol. Rev. 1995. - Vol. 41: P.181-234.

215. Smith, M.-L. The density and distribution of ischemic brain injury in the rat following 2-10 min of forebrain ischaemia. Текст. / M.-L. Smith, R.N. Auer, B.K. Siessjo // Acta Neuropathol (Berl). 1984. - V.64: P.319-332.

216. Somnier C, Fahrner A, Kiessling M. 3H. Muscimol Binding to y-Aminobutyric AcidA Receptors Is Upregulated in CA1 Neurons of the Gerbil

217. Hippocampus in the Ischemia-Tolerant State. Текст. / С. Sommer, A. Fahrner, M. Kiessling//Stroke. -2002. -V.33.№6: P.1698-1705.

218. Stelzer, A. GABAA receptor function in hippocampal cells is maintained by phosphorylation factors. Текст. / A. Stelzer, A.R. Kay, R. K. S. Wong // Science 1988. -V. 241: P.339-341.

219. Sternau, L.L. Role of GAB A in selective vulnerability in gerbils. Текст. / L.L. Sternau, W. D. Lust, A. J. Ricci, R. Ratcheson // Stroke. 1989. - V. 20: P.281-287.

220. Stockmans, F. Inhibitory effect of piracetam on platelet rich thrombus formetion in an animal model. Текст. / F. Stockmans, W. Deberdt, A. Nystrom et al. // Thromb Haemostasis. 1998. - V.79: P.222-227.

221. Tanaka, K. Possible involvement of thromboxane in bronchoconstrictive and hypertensive effects of LTC4 and LTD4 in guinea pigs. Текст. / К. Tanaka, M. Katori // Int Arch Allergy Immunol. 1982. - V.79: P.38^4.

222. Tasuda, K.Glukose Metabolism, Noradrenaline Release, and MK-801 in Intracerebral Hemorrhage. Текст. / К. Tasuda, I. Nishio // Stroke. — 2005. -V.36: P.532.

223. Taya, K. Circadian rhythm in serum LH, FSH and prolactin levels in adult male rats. Текст. / К. Taya, M. Igarashi // Endocr. jap. 2000. - V.27: P.211-215.

224. Teasdale, G. Severe head injuries in three countries. Текст. / G. Teasdale, S. Galbraith et al //Pediatr Neurosurg. 1990-91. -V. 16: P.203-207.

225. Towart R. Effects of calcium antagonist nimodipine on isolated cerebral vessels. In Betz et.al. (Eds.) Nimodipine: pharmacological and clinical properties. Текст. / R. Towart, S. Kazda // Schattauer Verlag. -1985: P.147-161.

226. Tsuda, К. Glucose metabolism, noradrenaline release, and MK-801 in intracerebral hemorrhage. Текст. / К. Tsuda, I. Nishio // Stroke. 2005. -V.36.-№3: P. 532.

227. Verkuyl J.M. Chronic stress attenuates GABAergic inhibition and alters gene expression of parvocellular neurons in rat hypothalamus. Текст. / J.M. Verkuyl, S.E. Hemby, M. Joels // Eur. J. Neurosci. 2004. - V. 20. - №6: - P. 1665-1673.

228. Volby, B. Cerebrovascular reactivity in patients with ruptured intracranial aneurysms. Текст. / В. Volby, E.M. Enevoldson, F.T. Jensen // J.Neurosurg. 1984. - V.62: P.59- 67.

229. Voldby, B. Intracranial arterial aneurysms in children and adolescents. Текст. / В. Voldby // J. Neurosurg. 1984. - V.58: P.832-837.

230. Wagner, Kenneth R. Modeling Intracerebal Hemorrhage Glutamate, Nuclear Factor-B Signaling and Cytokines. Текст. / R. Wagner Kenneth // PhD.-2007: P. 15-32.

231. Wagner, P.G. cAMP modulates an S-type K+ channel coupled to GABAB receptors in mammalian respiratory neurons. Текст. / P.G. Wagner, M.S. Dekin // Neuroreport. 1997. -V. 8: P.1667-1670.

232. Wahlgren N.G. The Clomethiazole Acute Stroke Stady (GLASS): results of a randomized controlled trial of clomethiazole versus placebo in 1360 acute stroke patients. Текст./ K.W.Ranasinha, T.Rossolacci et al. // Stroke.-1999.-V.30:P.21-28.

233. Wellie, A. Cell death: the significance of apoptosis. Текст. / A. Wellie, J. Kerr, A. Currie // Int. Rev. Cytol. 1980. - V. 68: P.251-306.

234. Xie, J.Two closely linked but separable promoters for human neuronal nitric oxide synthase gene transcription. Текст. / J. Xie, P. Roddy, Т.К. File et al // Proc. Natl Acad Sci USA. 1995. - V.92: P. 1242-1246.

235. Zenina, T.A. Afobazol protects neurons against oxidative stress and glutamat toxicity in vitro. Текст. / T.A. Zenina, I.V. Gawrish, D.S. Melkumyan, T.S. Seredenina // Abstracts 8th European College of Neurupsychopharmacol. 2005: P. 246.

236. Zhang, D. Bicuculline-insensitive GABA receptors: Studies on the binding of (p)-baclofen to rat cerebullar membranes. Текст. / D. Zhang, Z.H. Pan, M. Awobuluyi, S.A. Lipton // Neurosci Lett. 2001. - V.52-N3: P. 317321.

237. Zhang, J. Nitric oxide in the nervous system. Текст. / J. Zhang, S.H. Snyder//Ann Rev Pharmakol Toxicol. 1995. - V.35: P.213-233.

238. Zeng, J. The change of nerve growth factor and brain derived neurotrophic factor in neurons of cerebral cortex of adult rat following local ischemia. Текст. / J Zeng, T.Wang, X.Zhang, L. //Gao Hua Xi Yi Ke Da Xue Bao. -2001.- V.32.-N2: P.216-218.

Автореферат диссертации по медицине на тему Цереброваскулярные эффекты ГАМК-ергических веществ в условиях геморрагического и ишемического поражений мозга

Оглавление диссертации Курдюмов, Илья Николаевич :: 2009 :: Москва

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Курдюмов, Илья Николаевич, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Курдюмов, Илья Николаевич

Похожие научные работы

Каталог диссертаций