Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Церебропротекторное действие лантана ацетата при экспериментальной ишемии головного мозга

ДИССЕРТАЦИЯ
Церебропротекторное действие лантана ацетата при экспериментальной ишемии головного мозга - диссертация, тема по медицине
АВТОРЕФЕРАТ
Церебропротекторное действие лантана ацетата при экспериментальной ишемии головного мозга - тема автореферата по медицине
Гуляев, Сергей Миронович Улан-Удэ 2004 г.
Ученая степень
кандидата медицинских наук
ВАК РФ
14.00.25
 
 

Автореферат диссертации по медицине на тему Церебропротекторное действие лантана ацетата при экспериментальной ишемии головного мозга

На правах рукописи

ГУЛЯЕВ

ЦЕРЕБРОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ЛАНТАНА АЦЕТАТА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИШЕМИИ ГОЛОВНОГО

МОЗГА

14.00.25- фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Улан-Удэ - 2004

Рабога выполнена в Институте общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской Академии наук.

Научный руководитель:

д.б.н., проф. Убашеев Иннокентий Оширович

Официальные оппоненты:

д.м.н., проф. Цыренжапова Октябрина Даши-Дондобовна к.м.н. Бартанов Алексей Иосифович

Ведущая организация: Бурятский государственный университет

Защита состоится «_£_» 2004г. в «А7 » часов на заседании

Диссертационного совета К 003.028.01 при Институте общей и экспериментальной биологии СО РАН по адресу: 670047, г. Улан-Удэ, ул. СахьяновойД

С диссертацией можно ознакомиться в центральной научной библиотеке Бурятского научного центра СО РАН.

Автореферат разослан « » г 7

Ученый секретарь Диссертационного совета кандидат биологических наук

В.Б. Хобракова

(4S66

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность гемы. Сосудистые заболевания головного мозга остаются одной из актуальных проблем современной медицины. Это обусловлено высокой частотой ишемических нарушений мозгового кровообращения, которые часто заканчиваются летально или приводят к инвалидизации больных. Проблема инсульта приобретает все большую медико-социальную значимость. Это связано с увеличением среди населения лиц пожилого и старческого возраста, а также' йарастающим негативным влиянием факторов урбанизации в экономически' развитых странах (Б.С. Виленский, 1995). Инсульт в большинстве стран занимает 2-3 место в структуре общей смертности населения, в России - второе, уступая лишь кардиоваскулярной патологии. Согласно международным эпидемиологическим исследованиям, в мире от инсульта ежегодно умирают 4,7 млн. человек (Е.И. Гусев, 2001). В течение ближайшего месяца с момента начала заболевания в России умирают около 30%, а в течение года примерно 50% больных, т.е. каждый второй заболевший [Б.С. Виленский, 1995, ЕВ. Гусев, 2001.]. Инсульт является основной причиной инвалидизации населения. Из переживших инсульт к трудовой деятельности возвращаются не более 10-12%; а 25-30% остаются до конца жизни инвалидами (Б.С. Виленский, 1995). ' ' ' „«'

Среди всех видов инсульта преобладает ишемический инсульт. По данным международных мультицентровых исследований ишемический инсульт в среднем составляет 80-85 %, геморрагический - 15-20% (Гусев Е.И., 2001). Главными причинами и факторами сосудистой окклюзии и острой церебральной ишемии являются тромботические осложнения атеросклероза, связанные с повышенным тромбообразованием и отложением тромбов на относительно молодых атеросклеротических бляшках, наиболее подверженных повреждениям и разрывам. Ишемический инсульт приводит к последовательным < патологическим изменениям в нервной ткани: накоплению кальция в клетках и избыточному выбросу возбуждающих нейромедиаторов (глутамат-кальциевый каскад), усилению перекисного окисления липидов (ПОЛ), изменениям в системе гемостаза и нарушению микроциркуляции. Внутриклеточное накопление кальция является одним из ключевых механизмов деструктивных процессов, лежащих в основе некротической гибели нейрона (B.K. Siesjo, 1986). В этой связи изысканий фармакологических средств, способных предотвращать кальциевое повреждение клеток и оказывать комплексное регулирующее влияние на каскад патологических реакций, остается важной задачей современной фармакологии и фармакотерапии ишемических заболеваний головного Мозга.

В настоящее время в экспериментальной медицине доказана эффективность применения

f'J

И др.) при острых нарушениях мозгового кровообращения, а в клинической практике не получило должного резонанса из-за побочных эффектов.

Известно, что лантаноиды являются антагонистами кальция. Иоиы лантана в биологических системах замещают ионы кальция, блокируют их поступление в клетку, подавляют активность кальций - зависимых ферментов, проявляют антикоагулянтные свойства (TJ. Haley, 1965, СН Evans, 1983). В экспериментальной фармакологии накоплен большой материал о взаимодействии лантана с рецепторами нейронов: лантан блокирует кальциевые каналы в NMDA рецепторах, активируемых возбуждающим нейромедиатором - глутаматом, увеличивает активность ГАМКдрецепторов (D.B. Reichling. М. Yan, Т. Narahashi, 1991). Указанные факты позволяют предполагать о возможности и способности лантана подавлять развитие глутамат-кальциевого каскада при ишемии головного мозга.

Роль лантана в церебропротекторном действии при ишемии головного мозга еще не изучена. Учитывая, что ключевыми механизмами в патогенезе ишемического инсульта являются глутамат-кальциевый каскад и нарушение микроциркуляции, изучение церебропротекторной активности соединений лантана представляет большой интерес.

Цель и задачи исследования. Цель настоящего исследования: выявить особенности церебропротекторного действия лантана ацетата при ишемии головного мозга у белых крыс.

Для достижения указанной цели были сформулированы следующие задачи:

изучить церебропротекторную активность лантана ацетата и определить его оптимальную дозу на модели острой неполной ишемии головного мозга;

оценить степень выраженности церебропротекторного влияния лантана ацетата при острой, транзиторной и хронической ишемии головного мозга в сравнении с циннаризином на основе изучения морфофункциональных изменений структур мозговой ткани;

определить нейропротекторную активность лантана ацетата на модели полной глобальной ишемии головного мозга;

изучить влияние лантана ацетата на структуру микроциркуляторного русла при ишемии головного мозга;

изучить влияние лантана ацетата на состояние гемостаза при ишемии головного мозга.

Научная новизна. В работе впервые выявлена церебропротекгорная активность лантана ацетата при экспериментальной ишемии головного мозга. Изучена степень выраженности церебропротекторного влияния лантана ацетата при острой, транзиторной и хронической ишемии головною мозга в сравнении с действием циннаризина. Установлено, что в основе цсреброиротектррцп^о действия лангана ацетата лежат нейропрогекторный, цереброваскулярны0^артгико£(^улянтный эффекты. ' г; 4

= *<■ т «о

Практическая значимость работы. Экспериментально доказана фармакотерапевтическая эффективность применения лантана ацетата при ишемии головного мозга. Результаты полученных исследований могут служить основанием для дальнейшего изучения и разработки на их основе лекарственных препаратов для профилактики и лечения ишемических заболеваний головного мозга. Данные, полученные в этой работе, могут быть использованы в учебном процессе и служить иллюстрацией для объяснения механизмов церебропротекторного действия лекарственных веществ при лечении сосудистых заболеваний головного мозга.

Положения, выносимые на защиту: 1. Лантана ацетат обладает церебропротекторной активностью при ишемии головного мозга.

2 Церебропротекгорное действие лантана ацетата при ишемии головного мозга реализуется через нейропротекторный эффект.

3. Лантана ацетат проявляет цереброваскулярный эффект при ишемии головного мозга

4. Лантана ацетат оказывает антикоагулянтный эффект при ишемии головного мозга.

Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на:

Всероссийской научной конференции «Актуальные проблемы адекватного питания в эндемичных регионах» (Улан-Удэ, 2002);

X Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2003);

Международной научной конференции «Возрастная физиология и патология сельскохозяйственных животных» (Улан-Удэ, 2003);

Научно-практической конференции «Биологически активные добавки в профилактической и клинической медицине» (Улан-Удэ, 2003);

Научно-практической конференции «Наука, образование, новые технологии» (Улан-Удэ, 2004);

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 156 страницах компьютерного текста и состоит из введения, 6 глав, выводов, списка литературы, включающего 290 источников из которых 77 на иностранных языках. Работа иллюстрирована 17 таблицами, 31 рисунками, 3 схемами.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты были выполнены на 434 крысах обоего пола линии \Vistar массой 150-180 г и на 74 мышах линии СВА массой 18-20г.

В работе использовали органическую соль редкоземельного элемента -лантана ацетат Ьа(СНчСООН)т в виде водного раствора. Лантана ацетат

вводили внутрижелудочно в экспериментальной дозе 3 мг/кг массы крысы Для определения дозозависимого эффекта лантан'а ацетата использовали дозы- 0.3; 3; 30 и 150 мг/ю массы животного

Церебропротекторную активность лантана ацетата определяли на модели неполной ишемии головного мозга, заключающейся в полной окклюзии обеих общих сонных артерий под наркозом (тиопентал-натрия, 50 мг/кг, внутрибрюшинно), по выживаемости животных через 24 часа и динамике неврологического дефицита, оцениваемого по шкале Мс Grow [Мс Grow, 1975].

На основе вышеуказанной модели в экспериментах применяли различные варианты ишемического воздействия на головной мозг:

- острая ишемия головного мозга в течение 24 часов;

- острая ишемия головного мозга в течение 40 минут в сочетании с контролируемым кровопусканием;

- острая ишемия головного мозга в течение 10 минут с реперфузией и последующим постишемическим периодом - 5 суток (транзиторная ишемия головного мозга);

-хроническая ишемия головного мозга в течение 5 суток [М.Б. Плотников, 1994].

Перечисленный ряд методик позволяет воспроизвести различные по остроте и степени тяжесiи ишемические повреждения мозговой ткани, а изучение выраженности пагоморфологических изменений структур головного мозга - достаточно полно оценить степень церебропротекторного влияния лантана ацетата.

Для изучения морфофункционального состояния головного мозга животных кусочки головного мозга фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина, заливали в парафин. На санном микротоме из парафиновых блоков готовили сагиттальные или фронтальные срезы на уровне передних теменных областей толщиной 3-5 мкм. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином, по Нисслю.

Для оценки степени церебропротекторного влияния лантана ацетата при ишемии головного мозга использовали морфометрические методы, которые заключались в подсчете нейронов с классическими изменениями в виде гиперхроматоза, очагового или тотального хроматолиза, клеток-теней на 100 клеток (в %) с использованием сетки Автандилова [Г.Г. Ав)андилов, 1990].

Для оценки влияния лантана ацетата на энергетический обмен головного мозга при ишемии использовали в работе гистохимические методы исследования. Ферментативную активность сукцинатдегидрогеназы определяли на свежезамороженных срезах толщиной 20-25 мкм по методу Нахласа, лактатдегидрогеназы - по методу Пирса [Гистохимия, 1976].

Для оценки нейропротекторной активности лантана ацетата использовали модель полной ишемии головного мозга [Araki Н., 1988]

Показателем нейропротекторной активности испыгуемого средства являлась продолжительность гаспинга (атонального дыхания).

Исследования по оценке влияния лантана ацетата на микроциркуляторное русло проводили на модели транзиторной ишемии головного мозга. Цереброваскулярный эффект лантана ацетата оценивали морфометрическим способом - измерением диаметров капилляров в теменной коре головного мозга крыс, выявляемых гистохимическим методом Гомори - Такаматчу. Морфометрические исследования выполнены на немецком микроскопе «Motic» с помощью программного обеспечения «Motic Jmages, 2000».

Острую токсичность испытуемого средства определяли по методу Кербера [1998]. Класс токсичности определяли по классификации К.К. Сидорова [1973].

Мембраностабилизирующую активность его определяли in vitro по степени гемолиза эритроцитов человека [Е.И. Ковалев и др., 1986].

Нейротропную активность лантана ацетата определяли по продолжительности тиопенталового сна [В.В. Гацура, 1977].

Антикоагулянтную активность лантана ацегата в условиях ишемии головного мозга в течение 3 часов определяли на автоматическом коагулографе ВСТ по следующим показателям гемостаза: агрегация тромбоцитов, АПТВ, протромбиновое время, тромбиновое время, содержание фибриногена.

Противосудорожную активность его изучали по методу В.В.Гацура [1971].

Для оценки состояния перекисного окисления липидов в гомогенатах ткани мозга определяли содержание малонового диальдегида (МДА) по методике" [И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили, 1977], уровень активности каталазы - по методике [М.А. Королюк и др., 1988].

Спазмолитическую активность лантана ацетата оценивали по величине реакции мускулатуры тонкой кишки крыс на введение карбохолина и адреналина [R.F. Furchott, 1967].

Диуретические свойства лантана ацетата определяли по количеству мочи, выделенной животными через 3 часа после водной нагрузки объемом 2,5% от массы тела крысы в сравнении с контролем.

При статистической обработке данных использовали критерий Стьюдента (t) и достоверность различий (Р). Различия считали достоверными при вероятности 95% (Р<0.05) [М.Л. Беленький, 1967]. Для статистического анализа показателей динамики неврологического дефицита использовали дисперсионный факторный анализ Фишера [Г.Ф. Лакин, 1990]

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Изучение церебропротекторной активности лантана ацетата

Для определения церебропротекторной активности и дозозависимого эффекта лангана aneiaia использовали следующие экспериментально-терапевтические дозы- 0,3; 3,0; 30; 150 мг/кг массы крысы.

Результаты иследований показали, что через 24 часа после двусторонней окклюзии общих сонных артерий выживаемость животных, получавших лантана ацетат в дозе 0,3 мг/кг, была минимальной и составила 20 %, а выживаемость животных, получавших лантана ацетат в дозах 3; 30; 150 мг/кг составила соответственно - 50 %, 75 % и 80 %. Церебропротекторная активность лантана ацетата была выражена в дозах 3-150 мг/ki, причем с увеличением дозы свыше 30 мг/кг прирост эффекта являлся незначительным.

Церебропротекторную активность лантана ацетата в сравнении с циннаризином оценивали по выживаемости животных через 24 часа после необратимой окклюзии общих сонных артерий. В контрольной группе выживаемость животных составила 20 %, а при введении лантана ацетата и циннаризина выживаемость увеличилась до 55% и 54% соответственно.

При оценке динамики выживаемости животных за весь период наблюдения медиана выживаемости крыс контрольной группы составила 7 часов, тогда как у животных, получавших лантана ацетат, не было зарегистрировано ни одного летального случая за данный промежуток времени, а в группе животных, получавших циннаризин, зарегистрирован 1 летальный случай в 6 часов.

Выживаемость,%

ш --------------------------------------------------------------

0 -

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

Часы

яашт Контроль тшшт Лантана ацетат

Циннаризин

■ i 1

Рис. 1 Влияние лантана ацетата на динамику выживаемости крыс при ишемии головного мозга в течение 24 часов.

Средняя продолжительность жизни животных в контрольной группе составила - 7,9 ±1,8 часов, с применением лантана ацетата и циннаризина соответственно -14,6±2,6 и 10,2±1,9 часов.

При оценке неврологического дефицита выявлено, что в группе животных получавших лантана ацетат и циннаризин, средний балл по шкале Мс Grow был, соответственно ниже на 35% и 30,6% 'по сравнению с контролем. В группе животных, получавших ланга'на ацетат, достоверные различия неврологического дефицита от контроля отмечейы'6 12, 16 и 20 часов (табл.1). Показатели неврологического состоянйя с применением лантана ацетата были сопоставимы с таковыми циннаризина.

Таблица 1

Влияние лантана ацетата на неврологический статус животных при острой ишемии головного мозга (М±ш)

Группа Неврологический дефицит в баллах

4 часа 8 12 16 20 24

Кон фоль (п=10) 6,4+1,1 8,5±1,4 12,2+1,8 12,3+1,4 13,5±1,5 13,5+1,1

Лантана ацетат, 1 мг/кг (п=9) 4,0+0,6 5,8+1,2 7,1 ±1,3* 7,7-4,2* 8,5±1,7* ' 10,0+2,3

Циннаризин, 50 мг/кг (п=11) 4,8+0,9 6,5±0,7 7,3+1,2* 8,5-П,5 9,3±1,8 9,7±1,9

Примечание. * - различия достоверны при р<0,05 по сравнению с контролем.

Морфологическое исследование церебропротекторного влияния лантана ацетата при ишемии головного мозга

Через 24 часа после окклюзии обеих обших сонных артерий у животных вынимали головной мозг для проведения морфологических исследований после нейрогистологической обработал. При гистологическом исследовании фронтальных срезов на уровне передней темен;ю|5 области (РАб) коры большого мозга у крыс контрольной группы отмечали распространенные выраженные изменения нервных клеток, периваскулярный и незначительный перицеллюлярный отеки. Просвет артериол и венул вледствие периваскулярного отека, отечных астроцитов и набухших клеток эндотелия сосудов был частично или полностью закрыт. Отмечали в большом

количестве клетки с гиперхромной, интенсивно окрашенной цитоплазмой чернильного цвета, в которых не определялось ядро и базофильное вещество Этот вид измененных нейронов, по типу гиперхроматоза, в большом количестве отмечали во II-III слоях коры больших полушарий Тела гиперхромных нейронов имели угловатую форму нередко с извитым отростком (сморщенные, гиперхромные нейроны). Наряду с гиперхроматозом встречали на срезах ткани мозга нервные клетки с вытянутой угловатой формой и бледной гомогенной цитоплазмой (ишемические изменения нейронов по Шпильмейеру). Ядра клеток выглядели сморщенными, неправильной формы, окрашенными в темно-фиолетовый цвет с метахромазией, иногда в них можно было различать эксцентрично расположенные ядрышки. Также наблюдали набухшие клетки с зернистой цитоплазмой или с вакуолями, с диффузно окрашенным или гиперхромным ядром, чаще неправильной формы. Указанный выше тип повреждений клеток можно отнести к тяжелым изменениям, поскольку глубокие изменения наблюдали как со стороны цитоплазмы, так и ядра. Образование вакуолей, колечков, пустот различной величины по периферии цитоплазмы, возможно, являлись признаками активации лизосомальных ферментов и расплавления цитоплазмы. В нижних слоях коры больших полушарий обнаруживали большое количество клеток с побледнением тела и ядра, характерные для цитолиза (хроматолиза).

У крыс в контрольной группе отмечали преимущественно необратимые изменения клеток коры головного мозга, обусловленные некрозом. Нейроны II-III слоев были подвергнуты коагуляционнму некрозу. Нейроны IV-V слоев в основном были представлены «тяжелыми» изменениями, обусловленными лизисом цитоплазмы и ядра, которые характерны при колликвационном некрозе.

На микропрепаратах головного мозга крыс, получавших лантана ацетаг и циннаризин, ведущими изменениями нейронов были обратимые изменения в виде острого набухания и гипохромии нейронов (IV-V слои). По сравнению с контролем в меньшем количестве обнаруживали клетки с признаками некроза: гиперхроматоз и гомогенизирующие изменения (II-III слои) А также отмечено заметное уменьшение доли клеток с явлениями расплавления цитоплазмы, цитолиза, причем указанное различие было -значительно выраженнее при применении лантана ацетата, чем циннаризина.

Лантана ацетат и циннаризин оказывали защитное влияние на' клетки головного мозга, которое сводилось к уменьшению доли нейронов с необратимыми изменениями (гиперхроматоз и «тяжелые» изменения по Нисслю) за счет увеличения доли нейронов с обратимыми изменениями (острое набухание, гипохроматоз), в отличие от контроля.

Для оценки степени выраженности церебропротекторного влияния лантана ацетата в условиях острой ишемии мозга в сочетании с контролируемым кровопусканием мы применили морфометрические методы

исследования, которые заключались в подсчете нейронов с необратимыми изменениями в различных областях головного мозга. В группу необратимых острых изменений нервных клеток включали выраженный',гиперхрома10з цитоплазмы нейронов, ишемическое и гомогенизирующее изменения клеток, являющиеся признаками коагуляционного некроза (Ю.М Жаботинский, 1965).

Расчитывали соотношение количества погибших нейронов к общему количеству нейронов, видимых в поле зрения. Расчетные данные приведены в таблице 2.

В контроле количество погибших клеток во II-III слоях коры головного мозга составило 77,75±6,90%, в IV-V слоях - 61,62±6,01 %, в гиппокампе -39,75±2,37 %. Число погибших клеток в мозге животных опытной группы было достоверно ниже контрольных показателей: во II-III слоях коры полушарий ниже на 36 % , в IV-V - на 35,3 %, в гиппокампе - на 41,8 %. При введении циннаризина также отмечали достоверно меньшее количество регрессивных форм клеток Во II-III слоях коры больших полушарий - на 20,7%, в IV-Услоях - на 26,5 % и в гиппокампе - на 36,7 % соответственно ниже, чем в контроле.

Таблица 2

Доля поврежденных клеток в различных областях головного мозга крыс при ишемии (40 минут) (М±т, п=6)

Область головного мозга Количество погибших клеток, в % на 100 клеток

Контроль Лантана ацетат (Змг/кг) Циннаризин (50мг/кг)

Кора полушарий II-III слои IV-V слои 77,75+6,90 61,62±4,01 49,75±6,48* 39,87+5,40* 61,21± 3,15 45,26±1,51*

Гиппокамп (SA|) 39,75±2,37 23,12±1,29* 25,15+1,82*

Примечание *- различия достоверны при р< 0,05 по сравнению с контролем, п-количество животных в каждой группе

Для оценки церебропротекторной активности лантана ацетата при транзиторной ишемии головного мозга проводили морфометрические исследования, которые заключались в подсчете нейронов с необратимыми изменениями - гиперхромных клеток и «клеток-теней» в коре головного мозга (табл.3) На препаратах мозга животных, получавших лантана ацетат, содержание гиперхромных клеток было на 26 %, достоверно ниже, чем в контроле.

1аблица 3

Результаты морфометрического анализа нейронов коры полушарий при транзиторной ишемии головно! о мозга крыс (М±т)

Условия опыта Число выборок (по 100 клеток) Количество гиперхромных нейронов,% Количество клеток-теней, %

Контроль (диет, вода), п=10 10 41,0312,50 27,32+1,93

Лантана ацетат (3 мг/кг), п=10 10 30,32±3,80* 21,75±2,18

Циннаризин (50 мг/кг), п=10 10 31,21+3,23* 25,12±3,89

Примечание: *- различия достоверны при р < 0,05 по сравнению с

контролем.

Содержание клеток-теней было на 20% меньше по сравнению с контролем. На препаратах мозга животных, получавших циннаризин, содержание гиперхромных клеток было ниже на 22%, а содержание клеток-теней было на уровне контрольныхдааяений, ■ ■

Для оценки церебропротекторной активности лантана ацетата на модели хронической ишемии головного мозга проводили подсчет нейронов с различными морфологическими изменениями в IV, V слоях (на 100 нервных клеток). В качестве нейроморфологических критериев использовали классические изменения нейронов: очаговый хроматолиз, гиперхромия без сморщивания или со сморщиванием, клетки-тени [Ю.М. Жаботинский, 1965].

На 5-е сутки ишемии головного мозга крыс в коре отмечали достоверное увеличение количества нейронов с очаговым хроматолизом до 8,04±0,30% в правом и до 12,48±0,49% в левом полушариях Увеличивалось содержание гиперхромных клеток. Доля указанных нейронов в левом полушарии увеличилась в 7,5 раза по сравнению с показателями интактных крыс и составила 40,51 %. В правом полушарии содержание таких клеток возросло до 28,78±0,47 %. Увеличился процент «клеток-теней» в правом до 9,71 ±0,37 % и в левом полушарии - до 14,70±1,70%. Из анализа проведенных морфологических исследований выявлено, что ишемическое повреждение нейронов коры головного мозга со стороны полной окклюзии левой сонной артерии были большими, чем со стороны правой сонной артерии с частично сохраненным кровотоком (табл.4).

При курсовом введении лантана ацетата отмечали меньшую степень повреждения мозговой ткани по сравнению с контролем. Доля клеток с хроматолизом в правом и левом полушариях составила, соответственно.

7,3+0,60% и 4,15±0,32%, что было соответственно ниже на 41% и 48% , чем в контроле Количество гиперхромных клеток в левом и правом полушариях было соответственно на 31% и 45% меньше по сравнению с контролем. Также содержание клеток-теней в левом и правом полушариях было снижено, соответственно, на 18% и 43% по сравнению с контролем

Таблица 4

Влияние лантана ацетата на морфологические изменения нейронов при хронической ишемии головного мозга у крыс (М±ш, п=10)

нейроны Интакт Ишемия

Контроль Лантана ацетаг, 3 мг/кг Циннаризин. 50 мг/кг

ЛП ПП ЛП , ПП ЛП IUI ЛП ПП

1 | '2' 3 '4 5 6 7 8 9

Нормохро мные 89,65+ 1,32 85,43± 2,26 32,31± 3,12' 53,47+ 12,3" 52,54+ 3,45" 74,45± 2,37" 50,32± 4,16" 67,54± 5,02"

С хромагол том 4,15+ 0,28 4,8± 0,74 12,48+ 0,49' 8,04± 0,30* 7,30± 0,60" 4,15± 0,32* 8,24± 0,81" 3,19± 0,2 Г

Гиперхро мные 5,38± 0,48 6,70+ 0,75 40,51 + 0.91* 28,78± 0,47* 28,12+ 0,90" 15,84+ 0,39" 27,29± 3,12" 18,53± 0,98*"

Клечки-тени 1,47+ 0,27 3,07+ 0,56 14,70+ 1,70' 9,71 + 0,37* 12,04± 0,64* 5,56± 0,75" 14,15+ 1,82" 10,74± 1,87*

Примечание: - достоверные различия по сравнению с интактным контролем при р< 0,05; * - достоверные различия - по сравнению с контролем ЛП-левое полушарие, Я/7- правое полушарие, п- количество животных в каждой группе.

Содержание патологически измененных нейронов в коре головного мозга крыс, получавших циннаризин, достоверно было ниже контрольных показателей и незначительно отличалось от показателей крыс опытной группы Количество «клеток-теней» достоверно было выше показателей опытной группы и было на уровне контрольных значений.

Механизмы, определяющие церебропротекторную активность лантана ацетата при ишемии головного мозга

В спектре церебропротекторного влияния испытуемого средства при ишемии головного мозга могут лежать нейропротекторный механизм. Модель полной глобальной ишемии позволяет оценить нейропротекторный эффект испытуемого средства, исключая другие механизмы его церебропротекторного влияния Для оценки нейропротекторного эффекта лантана ацетата проводили исследования на модели полной глобальной

ишемии головного мо5га с гипоксическим прекондиционированием (ГГ1) с регистрацией продолжительности гаспинга животных в сравнении с действием глицина (200 м!/кг массы животного).

Результаты исследований показали, что продолжительность гаспинга в контроле составила 16,25+1,03с. Продолжительность гаспиша при ГП увеличилась на 42% по сравнению с контролем и составила 23,12±1,61с. ГП на фоне введения животным лантана ацетата увеличивало' продолжительность гаспинга по сравнению с контролем на 105% и составило 33,25±1,30 с, причем продолжительность гаспинга животных с ГП+ лантана ацетат была выше на 43%, чем таковой показатель у животных с ГП. Глицин увеличивал продолжительность гаспинга по сравнению с контролем и ГП соответственно на 115 и 51 %.

Согласно полученным данным, можно сделать вывод о том, что'ГП приводит к стимуляции адаптационных механизмов, возможно, за счет увеличения содержания в нервной ткани ГАМК. ГП увеличивает толерантность нейронов дыхательного центра к ишемии, а под влиянием лантана ацетата эти механизмы усиливаются. Таким образом, полученные результаты исследований свидетельствуют о нейропротекторной активности лантана ацетата, не уступающей по величине активности глицина.

Таблица 5

Влияние лантана ацетата на продолжительность гаспинга (М±ш, п=8)

Показатель Контроль ГП ГП+Лантана ацетат, Змг/кг ГП+Глицин 200 мг/к!

Продолжите льность гаспинга, в с 16,25±1,03 23,12±1.61* 33,25±1.30** 35,01±1,66**

Пределы колебаний 10-20 18-30 28-38 27-40

Примечание. ГП - Гипоьсическое прекондиционирование, *- различия достоверны при р <0,05 по сравнению с интакт.**- различия достоверны при р< 0,05 по сравнению с контролем, п-количество животных в каждой группе.

Нарушение микроциркуляции является ведущим звеном патогенеза ишемии головного мозга. Учитывая, что величина просвета капилляров определяет уровень мозгового кровотока нами проведено исследование микроциркуляторного русла коры головного мозга крыс.

При изучении капилляров головного мозга применяли метод Гомори-Такаматчу с целью выявления активности щелочной фосфатазы. Для сравнительной характеристики использованы количественные соотношения кагШлляров различных диаметров у нескольких групп животных: интактная,

контрольная; опытная; препарат сравнения. Получены следующие результаты у ингактных животных доля капилляров диаметром 4 мкм составила 43%, 6 мкм-40%, 8 мкм - 15%, 10 мкм-5%, 2 мкм- 4%. Нарушение мозгового кровообращения, вызванное постоянной окклюзией (24 часа) общих сонных артерий приводило к значительном) изменению соотношений капилляров различных диаметров.

Снижение мозгового кровообращения, вызванное перевязкой общих сонных артерий в течение 30 минут и реперфузией мозга в течение 15 минуг приводило к изменению соотношений капилляров различных диаметров в коре больших полушарий У крыс контрольной группы выявлено достоверное снижение среднегф диаметра капилляров до 3,9+0,08 мкм. Отмечено значительное повышение доли нефункционирующих, резко суженных капилляров диаметром 2 мкм до 39,3± 1,42 %. Число капилляров диаметром 4 мкм снизилось до 39,16±2,12 %. Количество капилляров диаметром 6 мкм снизилось до 13,16 ±1,80 %, а диаметром 10 мкм - до 3,16±0,65% (рис.2).

При курсовом введении лантана ацетата отмечено менее выраженое изменение в соотношении капилляров различного диаметра. Отмечали значительно меньшее число нефункционирующих капилляров диаметром 2 мкм, доля которых составила 27,5%, что было достоверно ниже на 30% контрольных цифр. На уровне показателей интактной группы оставалась доля капилляров диаметром 4 мкм. Количество капилляров диаметром 6, 8 и 10 мкм было выше контрольных показателей соответственно на 23,8 %, 26,8% и 29%. Средний диаметр капилляров составил 4,8±0,34 мкм, что было достоверно выше, чем в контрольной группе (рис. 2).

Исследование сосудов микроциркуляторного русла показало, что курсовое введение лантана ацетата приводило к уменьшению , числа нефункционирующих капилляров и меньшим изменениям в соотношении капилляров различного диаметра, чем в контроле при ишемии.

Распределение капилляров по диаметру в группе крыс, получавших циннаризин, мало отличалось от показателей крыс опытной группы, средний диаметр капилляров составил 4,7±0,23 мкм. По этим показателям лантана ацетат не уступал препарату сравнения.

Увеличение среднего диаметра капилляров мозга крыс опытной группы свидетельствует о более высоком уровне мозгового кровотока по сравнению с контролем. Из полученных результатов можно счелать вывод о том, что курсовое введение лантана ацетата препятствовало развитию постишемической гипоперфузии, снижению числа резкосуженных капилляров в теменной коре и способстовало увеличению среднего диаметра капилляров. По величине цереброваскулярной активности лантана ацетат не уступал подобной активности препарата сравнения циннаризина.

интактные контроль лантана ацетат циннаризин

Прмечание: * - различия достоверны по сравнению с интактом;"-различия достоверны по сравнению с контролем при р ¿0,05.

Рис. 2. Влияние лантана ацетата на распределение капилляров по

,, диаметру

Ишемия головного мозга в течение 3 часов приводила к повышению скорости агрегации тромбоцитов. По сравнению с показателями крови интактных животных скорость агрегации тромбоцитов в контроле возрастала в 2 раза. Курсовое введение лантана ацетата предупреждало агрегацию тромбоцитов и снижало скорость агрегации тромбоцитов в два раза по сравнению сконтролем. Циннаризин также оказывал подавляющее влияние на скорость агрегации тромбоцитов в 1,6 раз (табл.6).

Таблица 6

Влияние лантана ацетата на агрегацию тромбоцитов при ишемии

головного мозга (М±т)

Условия опыта АДФ (сек.) УИА (сек.)

Интактные, п~6 11,3±0,4 12,0±0,3

Ложнооперированные, п=6 9,8+0,3 11,3±0,7

Контроль, п=6 4,5+0,3* 5,0±0,3*

Лантана! ацетат (3 мг/кг), п=6 8,5±0,9" 9,0±1,8**

Циннаризин (50 мг/кг), п=6 7,3±0,3** 7,5±0,4"

Примечание УИА-унивесальный индуктор агрегации тромбоцитов, различия достоверны по сравнению с интактом; - различия достоверны по сравнению с контролем прир <0,05.

Ишемия головного мозга сопровождается нарушением свертываемости крови. В контроле отмечали достоверное укорочение АПТВ на 32,8%, тромбинового времени на 13,6% и повышение содержания фибриногена на

23% по сравнению с показателями крови интактных крыс Покаители прогромбинового времени оставались на уровне показателей интактных (табл 6) Лантана ацетат подавлял > актив&цию плазменных факторов коагуляции. Отмечали достоверное удлинение АПТВ на 74,4 %, тромбинового времени на 47,9 % по сравнению с контролем. Содержание фибриногена крови животных опытной группы было ниже почти в два раза по сравнению с контролем (табл.7).

Таблица 7

Влияние лантана ацетата на показатели гемостаза при острой ишемии _головного мозга (Mim) __

Условия опыта АПТВ Протромб иновое время Тромбино вое время Фибрино ген, г/л

Интактные животные, ц—6 12,8±0,6 10,6±0,2 37,4±1,5 6,5+0,5

Л ожнооперирванные, п=6 12,5+0,8 10,2±0,12 36,9±0,2 6,1+0,2

Контроль, п=6 8,6±0,5* 10,2±0,3* 32,3±2,1* 8,0+0,4*

Лантана ацетат (3 мг/кг), п=6 15,0±0,8" 11,4±1,2** 47,8±4,9** 4,2±0,3**

Циннаризин (50 мг/кг), п=6 12,4±0,9" 11,7±1,0 39,9±0,7" 6,3±0,8

Прмечание. * - различия достоверны по сравнению с интакточ;' -различия достоверны по сравнению с контролем при р <0,05.

Определение фармакологических свойств лантана ацетата, обусловливающих его церебропротекторное влияние

Острую токсичность лантана ацетата изучали на мышах массой 18-20 г при внутрибрюшинном и внутрижелудочном введении. ЛД<0 испытуемого средства при внутрибрюшинном введении составила 4160,7 ± 251,7 мг/кг массы животного. При внутрижелудочном введении лантана ацетата в максимально растворимой дозе - 9000 мг/кг не было зарегистрировано ни одного летального случая животных. Согласно полученным данным, по классификации Сидорова, лантана ацетат является малотоксичным соединением и относится к IV классу токсичности ^ химических веществ.

Нейротропную активность лантана ацетата изучали на модели тиопенталового сна. Тиопентал натрия в дозе 40 мг/кг, вызывающей * тестирующий сон у 100% животных, вводили внутрибрюшинно.

Продолжительность снотворного действия тиопентала натрия оценивали по времени нахождения животных в боковом положении (табл.8).

Лангана ацетат увеличивал продолжи!ельносгь типенталового сна у животных в дозах 3 и 30 мг/кг, причем с увеличением дозы отмечали увеличение длительности снотворного эффекта.

Таблица 8

Влияние лантана ацетата на продолжительность тиопенталового сна (М±т, п=10)

Показатель Контроль Доза лантана ацетата

0,3 мг/кг 3,0 мг/кг ЗОмг/кг

Продолжительность тиопенталового сна (мин) 24,1±5,6 28,3±1,7 45,1+4,6* 70,4±10,2"

Примечание *' различия достоверны при р<0,05 по сравнению с контропеи; - различия достоверны при р<0,01по сравнению с контрочеч, п-количество животных в каждой группе

Установлено, что лантана ацетат оказывает стабилизирующее влияние на мембраны эритроцитов при их гемолизе, вызванном реактивом Фенюна. Наиболее выраженную активность испытуемого средства наблюдали в диапазоне концентраций - 105 - 10"6 М, при котором отмечено максимальное уменьшение степени гемолиза эритроцитов, соответственно, на 32,5% и 30,8% по сравнению с контролем, (рис.2).

Гемолиз, %

80

60

40 -^

Ю-2 10 3 10"4 10'5 10" 10'7 10"8 Ьа(СН3СОО)М Рис. 3. Влияние лантана ацетата на гемолиз эритроцитов, вызван ный реактивом Фентона

При ишемии головного мозга происходит резкое увеличение содержания в клетке ионизированного кальция, что приводит к активации процессов ПОЛ. Результатом усиления ПОЛ является изменение липидного бислоя мембран, что приводит к нарушению ее барьерной функции и в конечном итоге к повреждению и гибели клетки. В связи с этим нами проведено исследование влияния лантана ацетата на ПОЛ. В качестве повреждающего агента гкани головного мозга, вызывающего активацию ПОЛ использовали

СС14 - нсйротоксичный ял При введении лангана ацетата содержание МДА было меньше на 40%, а активность каталазы была выше на 35,7% по сравнению с контролем. Результаты полученных исследований свидетельствуют о выраженной антиоксидантноЙ активности лантана ацетата Расчетные данные отражены в таблице 9

Таблица 9

Влияние лантана ацетата на состояние ПОЛ в гомогенатах мозга при введении СС14 (М±ш, п=6)

Показатель Интактные Контроль Лантана ацетат

Малоновый диальдегид, нмоль/ г, ткани 0,13+0,01 1,25+0,18* 0,50±0,0ГХ

Активность каталазы, мкат 7,52 ±0,29 4,99 ±0,58* 6,77± 0,22*"

Примечание - различия достоверны при р<0,05 по сравнению с интактым контрролем, * - различия достоверны по сравнению с контролем, п-копичество животных в каждой группе

Лантана ацетат обладает выраженной адренолитической активностью (табл.10). При исследовании спазмолитической активности лантана ацетата выявлено, что он уменьшал достоверно на 32% и недостоверно на 15,7% соответственно адренергическую и холинергическую реакции мускулатуры тонкой кишки.

Таблица 10

Влияние лантана ацетата на холино - и адренореактивность __тонкой кишки белых крыс (1У1±ш, п=8)_

Условия опь(та Величина реакции, мм

'к, Лантана ацетат (3 мг/кг) к2

Карабхолин, п^Ю 45,3±4,2 38,2±3,0 40,5±3,1

Адреналин, п=10 35,4±3,13 23,8±2,9* 21,03+2,03

Примечание:*- различия достоверны по сравнению с контролем при р<(),05,

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Биологические свойства лантана определяют широкий спектр фармакологических эффектов лантана ацетата. В основе церебропротекторной активности лантана ацетата лежит способность ионов лантана замещать ионы кальция, железа и др. [В Ф. Золин, Л.Г Коренева, Ю.И. Москалев, 1985; СН Evans, 1983]. Ионы лантана блокируют вольтаж-зависимые и рецептор-управляемые кальциевые каналы [DB., Reichling, 1991] Лантан модулирует активность Г'АМК^-рецепторов, вызывая дополнительную гиперполяризацию мембран нейронов [С.Н. Колбаев, 2001.

М Уап, Т. Narahashi,l 991]. Наличие спазмолитической и антикоагулянтной активности лантана ацетата препятствует вазоконстрикторным реакциям и тромбообразованию, что, в целом, оказывает положительное влияние на уровень микроциркуляции в ткани головного мозга при ишемии. Церебропротекторное влияние лантана ацетата обусловливает повышение выживаемости нейронов и уменьшение выраженности повреждения ткани головного мозга при ишемическом воздействии.

Церебропротекторный эффект лантана ацетата определяется его мембраностабилизирующим, антиоксидантным, спазмолитическим и антикоагулянтным фармакологическими свойствами.

Мембраностабилизирующая и антиоксидантная активность лантана ацетата обусловлена, возможно, свойством ионов лантана завещать ионы железа, которые являются индукторами перекисного окисления липидов. Свойство ионов лантана замещать ионы кальция играет, по-видимому, главную роль в нейропротекции, в подавлении реакций глутамат-кальциевого каскада.

ВЫВОДЫ

1. Лантана ацетат обладает церебропротекторной активностью при ишемии головного мозга. По степени церебропротекторной активности лантана ацетат не уступает или превосходит препарат сравнения - циннаризин.

2. Курсовое введение лантана ацетата оказывает положительное влияние на морфофункциональное состояние головного мозга при острой, транзиторной и хронической ишемии: уменьшает долю регрессивных форм нейронов за счет увеличения доли нейронов с обратимыми изменениями. По степени церебропротекторного влияния на структуры мозга лантана ацетат превосходил циннаризин, благодаря снижению доли нейронов с признаками цитолиза.

3. Лантана ацетат проявляет нейропротекторный эффект: увеличивает продолжительность гаспинга животных при полной глобальной ишемии головного мозга.

4. Лантана ацетат улучшает состояние микроциркуляторного русла коры головного мозга: уменьшает количество резкосуженных, нефункционирующих капилляров и увеличивает средний диаметр капилляров.

5. Лантана ацетат оказывал положительное влияние на состояние гемостаза: снижал скорость агрегации тромбоцитов и уменьшал активность плазменных факторов свертывания крови при ишемии головного мозга.

Практические рекомендации

1. Результаты проведенных исследований позволяют использовать соединения лантана для дальнейшего изучения церебропротекторной активности, а также могут быть рекомендованы для клинических исследований при ишемических заболеваниях головного мозга

2. Данные исследований могут бы гь использованы в учебном процессе.

Список опубликованных работ:

1. Гуляев С М , Убашеев И.О., Цыдыпов В.И., Кожевникова Н.М Лантана ацетат как перспективное средство для использования в качестве биологически активной добавки к пище.// Материалы Всероссийской научной конференции «Актуальные проблемы адекватного питания в эндемичных регионах» (10-12 октября 2002 года г. Улан-Удэ)

2. Гуляев С.М., Александрова Т.Е., Убашеев И.О. Противоишемический эффект лантана ацетата при экспериментальной ишемии головного мозга у крыс.// Тезисы докладов X Российского национального конгресса «Человек и лекарство» (7-11 апреля 2003 года г.Москва).

3. Гуляев С.М., Александрова Т.Е., Убашеев И.О. Церебропротекторное влияние лантана ацетата при ишемии головного мозга // Материалы международной конференции «Возрастная физиология и патология сельскохозяйственных животных», посвященной 90-летию профессора В.Р. Филлипова (25-27 июня 2003года, г Улан-Удэ).

4. Гуляев С.М., Александрова Т.Е., Убашеев И.О. Нейропротекторное влияние лантана ацетата в условиях ишемии головного мозга у крыс // Материалы международной конференции «Возрастная физиология и патология сельскохозяйственных животных», посвященной 90-летию профессора В.Р. Филлипова (25-27 июня 2003года, г Улан-Удэ).

5. Гуляев С.М., Александрова Т.Е., Убашеев И.О., Кожевникова Н.М. Церебропротекторное влияние лантана ацетата при экспериментальной ишемии головного мозга у крыс/ Вестник Бурятского университета, Улан-Удэ.-2003,-С. 154-160.

6. Гуляев С.М., Александрова Т.Е., Убашеев И.О. Церебропротекторное влияние лантана ацетата при ишемии головного мозга. /Материалы научно-практической конференции «Биологически активные добавки в профилактической и клинической медицине», 18-19 сентября 2003, г. Улан-Удэ.

7. Гуляев С.М., Забанова В.Н., Н.М.Кожевникова, Убашеев И.О. Влияние лантана ацетата на показатели гемостаза при экспериментальной ишемии головного мозга // Материалы ежегодной научно-практической конференции «Наука, образование, новые технологии» (3-5 февраля 2004 года г. Улан-Удэ).

8. Цыдыпов В.И., Гуляев С.М., Александрова Т.Е., Лоншакова К.С. Диуретическая и салуретическая активность лантана ацетата при острой двусторонней ишемии почек. // Материалы ежегодной научно-практической конференции «Наука, образование, новые технологии» (3-5 февраля 2004 года г. Улан-Удэ).

9.' Гуляев С М , Забанова В.Н., Убашеев И.О. Влияние лантана ацетата на скорость агрегации тромбоцитов при ишемии головного мозга. Тезисы докладов XI Российского национального конгресса «Человек и лекарство» (2004 года г.Москва).

Подписано в печать 30.09.2004 г. Формат 60x84 Бумага офсетная. Объем 1,3 печ. л. Тираж 100 Заказ №163

1 ,

Отпечатано в типографии Изд-ва БНЦ СО РАН 670047 г Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6,

#16546

РНБ Русский фонд

2005-4 14866

 
 

Оглавление диссертации Гуляев, Сергей Миронович :: 2004 :: Улан-Удэ

ВВЕДЕНИЕ. б

ГЛАВА X. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Современные представления о патогенезе ишемического инсульта.

1.2 Современные подходы к терапии ишемического инсульта.

1.3. Фармакологические свойства лантаноидов.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Способы воспроизведения ишемии головного мозга у лабораторных животных.

2.2. Описание методов, примененных для оценки церебропротекторного влияния лантана ацетата при ишемии головного мозга.

2.3. Описание методов, примененных для изучения общей фармакологической активности лантана ацетата.

ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

ЛАНТАНА АЦЕТАТА.

3.1. Определение мембраностабилизирующей активности лантана ацетата in vitro.•.

3.2 . Определение токсичности лантана ацетата.

3.3 . Изучение распределения лантана в тканях головного мозга и внутренних органов при введении лантана ацетата.

3.4 . Исследование нейротропной активности лантана ацетата. ^

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ЛАНТАНА АЦЕТАТА НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИШЕМИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА.

4.1. Изучение церебропротекторного влияния лантана ацетата при острой ишемии головного мозга. ^

4.1.1. Определение церебропротекторной активности лантана ацетата и его оптимальной дозы при острой ишемии головного мозга. ^

4.1.2. Влияние лантана ацетата на неврологический статус и выживаемость животных при острой ишемии головного мозга.

4.1.3. Морфологическое исследование церебропротекторного влияния лантана ацетата при острой ишемии головного мозга.

4.2 . Исследование церебропротекторного влияния лантана ацетата при острой ишемии головного мозга в сочетании с контролируемым кровопусканием.

Морфологическое изучение защитного влияния лантана ацетата на структуры головного мозга при острой ишемии.

4.3. Исследование церебропротекторного влияния лантана ацетата при транзиторнои ишемии головного мозга.

4.3.1. Влияние лантана ацетата на когнитивные функции животных при транзиторной ишемии головного мозга.

4.3.2. Морфологическое исследование церебропротекторного влияния лантана ацетата при транзиторной ишемии головного мозга.ОЛ

4.4. Исследование церебропротекторного влияния лантана ацетата при хронической ишемии головного мозга.ос

Морфологическое изучение церебропротекторного влияния лантана ацетата при хронической ишемии головного мозга.

4.5. Влияние лантана ацетата на энергетический обмен головного мозга при острой ишемии.

ГЛАВА 5. К МЕХАНИЗМУ ДЕЙСТВИЯ ЛАНТАНА АЦЕТАТА.

5.1. Нейропротекторный эффект лантана ацетата. п

5.2. Цереброваскулярный эффект лантана ацетата.

5.3. Антикоагулянтный эффект лантана ацетата.

5.4. Изучение антиоксидантной активности лантана ацетата.

5.5. Изучение противосудорожной активности лантана ацетата.^^

5.6. Изучение спазмолитической активности лантана ацетата.

5.7. Изучение антикоагулянтной активности лантана ацетата.^ ^

5.8. Изучение диуретической активности лантана ацетата.

ГЛАВА 6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

 
 

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Гуляев, Сергей Миронович, автореферат

Актуальность темы

Сосудистые заболевания головного мозга остаются одной из актуальных проблем современной медицины. Это обусловлено высокой частотой острых нарушений мозгового кровообращения, которые нередко заканчиваются летально или приводят к инвалидизации больных. Проблема инсульта приобретает все большую медико-социальную значимость. Это связано с увеличением среди населения лиц пожилого и старческого возраста, а также нарастающим негативным влиянием факторов урбанизации в экономически развитых странах (Виленский Б.С.,1995). Инсульт в большинстве стран занимает 2-3 место в структуре общей смертности населения, в России -второе, уступая лишь кардиоваскулярной патологии. Согласно международным эпидемиологическим исследованиям, в мире от инсульта ежегодно умирают 4,7 млн. человек. В течение ближайшего месяца с момента начала заболевания в России умирают около 30%, а в течение года - примерно 50% больных, т.е. каждый второй заболевший (Гусев Е.В.,2001). Инсульт является основной причиной инвалидизации населения. Из больных, переживших инсульт, к ~ трудовой деятельности возвращаются не более 10-12%; 25-30%) остаются до конца жизни инвалидами (Виленский Б.С.,1995).

Среди всех видов инсульта преобладает ишемический инсульт. По данным международных мультицентровых исследований,ишемический инсульт в среднем составляет 80-85 %, геморрагический - 15-20% (Гусев Е.И., 2001). Главными причинами сосудистой окклюзии и острой церебральной ишемии являются тромботические осложнения атеросклероза, связанные с повышенным тромбообразованием и отложением тромбов на относительно молодых атеросклеротических бляшках, наиболее подверженных повреждениям и разрывам. Ишемический инсульт приводит к последовательным патологическим изменениям в нервной ткани: накоплению кальция в нейронах и избыточному выбросу возбуждающих нейромедиаторов глутамат-кальциевый каскад), интенсификации перекисного окисления липидов (ПОЛ), изменениям в системе гемостаза и нарушению микроциркуляции.

Внутриклеточное накопление кальция запускает каскад патологических реакций и является одним из ключевых механизмов деструктивных процессов, лежащих в основе некротической смерти нейрона (Siesjo В.К., 1986). В этой связи изыскание фармакологических средств, способных предотвращать кальциевое повреждение клеток и оказывать комплексное регулирующее влияние на каскад патологических реакций, остается важной задачей современной фармакологии и фармакотерапии ишемических заболеваний головного мозга.

В настоящее время в экспериментальной медицине доказана эффективность применения антагонистов кальция (нимодипин, флунаризин и др.) при острых нарушениях мозгового кровообращения, а в клинической практике они не получили должного резонанса из-за побочных эффектов.

Известно, что лантаноиды являются антагонистами кальция. Ионы лантана в биологических системах замещают ионы кальция, блокируют их поступление в клетку, подавляют активность кальций - зависимых ферментов, проявляют антикоагулянтные свойства (Haley T.J., 1965; Evans С.Н., 1983). В экспериментальной фармакологии накоплен большой материал о взаимодействии лантана с рецепторами нейронов: ионы лантана блокируют кальциевые каналы в глутаматных М-метил-Б-аспартат NMDA рецепторах, активируемых возбуждающими нейромедиаторами - глутаматом и аспартатом, и увеличивают активность рецепторов у-аминомасляной кислоты (ГАМК рецепторы) (Reichling D.B., Yan М., Narahashi Т., 1991). Данные факты позволяют предполагать о возможности и способности лантана подавлять развитие глутамат-кальциевого каскада при ишемии головного мозга.

Роль лантана в защитном влиянии на морфофункциональное состояние головного мозга при ишемии еще не изучена. Учитывая, что ключевыми механизмами в этиологии и патогенезе инсульта являются повышенное тромбообразование, глутамат-кальциевый каскад и нарушение микроциркуляции, изучение церебропротекторной активности соединений лантана представляет большой интерес.

Цель и задачи исследования. Цель настоящего исследования: выявить особенности церебропротекторного действия лантана ацетата при ишемии головного мозга у белых крыс.

Для достижения указанной цели были сформулированы следующие задачи:

- изучить церебропротекторную активность лантана ацетата и определить его оптимальную дозу на модели острой неполной ишемии головного мозга;

- оценить степень выраженности церебропротекторного влияния лантана ацетата при острой, транзиторной и хронической ишемии головного мозга в сравнении с циннаризином на основе изучения морфофункциональных изменений структур мозговой ткани;

- определить нейропротекторную активность лантана ацетата на модели полной глобальной ишемии головного мозга;

- изучить влияние лантана ацетата на структуру микроциркуляторного русла при ишемии головного мозга;

- изучить влияние лантана ацетата на состояние гемостаза при ишемии головного мозга.

Научная новизна. В работе впервые установлена церебропротекторная активность лантана ацетата при экспериментальной ишемии головного мозга. Изучена степень выраженности церебропротекторного влияния лантана ацетата при острой, транзиторной и хронической ишемии головного мозга в сравнении с циннаризином. Установлено, что в основе церебропротекторного действия лантана ацетата лежат нейропротекторный, цереброваскулярный и антикоагулянтный эффекты.

Практическая значимость работы. Экспериментально доказана фармакотерапевтическая эффективность применения лантана ацетата при ишемии головного мозга. Результаты проведенных исследований могут служить основанием для дальнейшего изучения и разработки на их основе лекарственных препаратов для профилактики и лечения ишемических заболеваний головного мозга. Данные, полученные в работе, могут быть использованы в учебном процессе и служить иллюстрацией для объяснения механизмов церебропротекторного влияния лекарственных веществ при лечении сосудистых заболеваний головного мозга. Положения, выносимые на защиту:

1. Лантана ацетат обладает церебропротекторной активностью при ишемии головного мозга.

2. Церебропротекторное действие лантана ацетата при ишемии головного мозга реализуется через нейропротекторный эффект.

3. Лантана ацетат проявляет цереброваскулярный эффект при ишемии головного мозга

4. Лантана ацетат оказывает антикоагулянтный эффект при ишемии головного мозга.

Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на:

- Всероссийской научной конференции «Актуальные проблемы адекватного питания в эндемичных регионах» (Улан-Удэ, 2002);

- X Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва,

2003);

- Международной научной конференции «Возрастная физиология и патология сельскохозяйственных животных» (Улан-Удэ, 2003);

- Научно-практической конференции «Биологически активные добавки в профилактической и клинической медицине» (Улан-Удэ, 2003);

- Научно-практической конференции «Наука, образование, новые технологии» (Улан-Удэ, 2004);

- XI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва,

2004).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 155 страницах компьютерного текста и состоит из введения, 6 глав, выводов, списка литературы, включающего 290 источников, из них 77 на иностранных языках. Работа иллюстрирована 18 таблицами, 31 рисунком, 3 схемами.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Церебропротекторное действие лантана ацетата при экспериментальной ишемии головного мозга"

Выводы

1. Лантана ацетат обладает церебропротекторной активностью. По степени церебропротекторной активности лантана ацетат не уступает или превосходит препарат сравнения - циннаризин.

2. Курсовое введение лантана ацетата оказывает положительное влияние на морфофункциональное состояние головного мозга при острой, транзиторной и хронической ишемии: уменьшает долю регрессивных форм нейронов за счет увеличения доли нейронов с обратимыми изменениями. По степени церебропротекторного влияния на структуры мозга лантана ацетат превосходит циннаризин, благодаря снижению доли нейронов с признаками цитолиза.

3. Лантана ацетат проявляет нейропротекторный эффект: увеличивает продолжительность гаспинга животных при полной глобальной ишемии головного мозга.

4. Лантана ацетат улучшает состояние микроциркуляторного русла коры головного мозга при ишемии: уменьшает количество резкосуженных, нефункционирующих капилляров и увеличивает средний диаметр капилляров.

5. Лантана ацетат оказывает положительное влияние на состояние гемостаза при ишемии головного мозга: снижает скорость агрегации тромбоцитов и уменьшает активность плазменных факторов свертывания крови.

Заключение

Проведенное исследование установило выраженную церебропротекторную активность JIA при его курсовом введении при острой, транзиторной и хронической экспериментальной ишемии головного мозга. Способность лантана к антиморфному замещению кальция и железа в биомолекулярных системах, а также его свойство модулировать активность тормозных рецепторов нейронов определяют широкий спектр фармакологических эффектов испытуемого средства.

Мембраностабилизирующая активность JIA, наряду с подавлением активности кальций-зависимых ферментов (протеаз, липаз), уменьшает выраженность цитолитических процессов в нервной ткани при ишемии головного мозга.

Нейротропная активность JIA оказывает тормозное влияние на нейроны, тем самым, препятствует быстрому снижению энергетического потенциала клеток при ишемии головного мозга.

JIA подавляет процессы свободнорадикальных реакций и повышает активность системы антиоксидантной защиты при интенсификации процессов ПОЛ.

Нейропротекторное действие ЛА при ишемии головного мозга, вероятно, основано на прерывании реакций глутамат-кальциевого каскада, свободнорадикальных механизмов и устранении нейротрансмиттерного дисбаланса путем активации тормозной системы нейронов.

Цереброваскулярное действие лантана ацетата препятствует снижению уровня микроциркуляции в мозге за счет устранения вазоконстрикторных реакций. В основе цереброваскулярного влияния лантана ацетата лежит его спазмолитическая активность.

Антикоагулянтное действие ЛА заключается в снижении скорости агрегации тромбоцитов и подавлении активности плазменных факторов свертывания крови. Указанный эффект JIA оказывает положительное влияние на уровень микроциркуляции в головном мозге при ишемии.

Таким образом, JIA совмещает в себе несколько фармакологических свойств, влияющих одновременно на основные звенья патогенеза ишемии головного мозга. JIA, в отличие от циннаризина, оказывает дополнительное нейропротекторное влияние при ишемии головного мозга, что составляет значительное преимущество его церебропротекторного действия перед препаратом сравнения. Увеличение дозы JLA или липофильности соединения лантана приводит к увеличению силы его церебропротекторного действия, превосходящей таковую циннаризина.

Данные, полученные при морфологическом исследовании, подтверждают эффективность церебропротекторного влияния JIA при экспериментальной ишемии головного мозга. JIA и циннаризин оказывали защитное влияние на клетки головного мозга, которое сводилось к уменьшению доли нейронов с необратимыми изменениями (гиперхроматоз и «тяжелые» изменения по Нисслю) за счет увеличения доли нейронов с обратимыми изменениями, в отличие от контроля. Морфометрический анализ показал эффективность профилактического и фармакотерапевтического применения JIA при разных вариантах ишемии головного мозга, что выражалось в меньшей степени повреждения мозгового вещества по сравнению с контролем. Выраженность цитолитических процессов при применении JIA была меньше в отличие от циннаризина, что указывает на наличие в спектре церебропротекторной активности JLA дополнительного нейропротекторного действия при ишемии головного мозга.

Таким образом, проведенные исследования показали, что применение JIA оказывает выраженное церебропротекторное влияние при острой, транзиторной и хронической ишемии головного мозга у лабораторных животных. JIA является перспективным средством для профилактики и лечения ишемических заболеваний головного мозга.

 
 

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Гуляев, Сергей Миронович

1. Автандилов Н.Д. Медицинская морфометрия / Н.Д.Автандилов.- М.: Медицина, 1990.-3 36с.

2. Акмаев И.Г. Взаимодействие нервных, эндокринных и иммунных механизмов мозга / И.Г. Акмаев // Журн. неврол. и психиатрии.- 1998.-Т.98, №3.- С.54-56.

3. Акопян В.П. О роли агонистов ГАМК в механизмах регуляции мозгового кровообращения / В.П. Акопян, JI.C. Балян // Фармакология и научно-технический прогресс: Тез. докл. VI Всеросс. Съезда фармакологов 25-27 окт. Ташкент, 1988.-С.11-12.

4. Андреев Н.А. Антагонисты кальция в клинической медицине / Н.А. Андреев, B.C. Моисеев. М.-1995.-162с.

5. Архангельская JI.H. Сумма редкоземельных элементов иттриевой группы / JI.H. Архангельская, С.С. Спасский. В кн.: Новые данные по токсикологии редких металлов и их соединений.-1988.- с. 194.

6. Ашмарин И.П. Быстрые методы статистической обработки и планирование экспериментов / Ашмарин И.П., Васильев Н.Н., Амбросов В.А. Ленинград: Изд-во Ленинградского ун-та.-1975.-76с.

7. Ашмарин И.П. Нейрохимия / Под ред. Ашмарина И.П. и Стукалова П.В.// М.: Инст. Биомедицинской химии РАМН, 1996.- 496с.

8. Баженова Т.Г. Цереброкраст как корректор постишемических феноменов при острой транзиторной ишемии мозга / Т.Г. Баженова, М.Б. Плотников, Т.М. Плотникова, А.С. Саратиков// Бюл. эксперим. биол.- 1992.- Т.114.-№10.- С. 278-380.

9. Барабой В.А. Перекисное окисление липидов и стресс./ Барабой В.А., Брехман И.И., Голотин В.Г. и др. СПб., 1992,- 149с.

10. Бархатова В.П. К патологии метаболизма катехоламинов при цереброваскулярных заболеваниях / В.П. Бархатова, Ю.Л. Варакин, З.А. Суслина // Журн. неврол. и психиатр,-1994.-Т.94, №2.-С.33-37.

11. Бархатова В.П. Основные направления нейропротекции при ишемии мозга / В.П. Бархатова, З.А. Суслина // Журн. неврол. и психиатр.-2002.-№4.-С.42~50.

12. Башкатова В.Г. Оксид азота в механизмах повреждения мозга, обусловленных нейротоксическим действием глутамата / В.Г. Башкатова, К.С. Раевский // Биохимия.- Т.63, вып.7.- 1998.- С.1020-1028.

13. Бекетов А.И. Кальций, антагонисты кальция и мозговое кровообращение / А.И. Бекетов // Бюл. экспер. биол. и медицины.-1988.- № 2.- С. 103.

14. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов/ М.В. Биленко. М., 1989.- 368с.

15. Биологические аспекты координационной химии / Яцимирский К.Б., Братушко Ю.И., Бударин и др.- Киев.- 1979.- 268с.

16. Биохимия мозга. /Под. ред. И.П.Ашмарина, П.В.Стукалова, Н.Д.Ещенко. -СПб.,1999.-328с.

17. Бойко Г.Х. Фармакокинетика ноотропных лекарственных средств / Г.Х. Бойко, Г.Ю. Вицкова, В.П. Жердев // Эксперим. и клинич. фармакол.-1997.-Т.60, №6.-С.62-70.

18. Болдырев А.А. Двойственная роль свободнорадикальных форм кислорода в ишемическом мозге. / А.А. Болдырев // Нейрохимия Т. 12, вып.З.- 1995 С.3-13.

19. Болдырев А.А., Функциональные взаимодействия между глутаматными рецепторами разных классов / А.А. Болдырев // Бюл. эксперим. биол. и мед.-2000.- №9.- С.244-251.

20. Большаков К.А. Химия редких и рассеянных элементов. М., 1965.

21. Булдаков J1.A. Распределение церия и рутения в органах крысы при ингаляционном введении / Л.А. Булдаков, Ю.И. Москалев, Д.И. Семенов // Мед. Радиол,-1960.-№6.-С.42.

22. Бурцев Е.М. Вопросы классификации, клинического течения и патогенетического лечения дисциркуляторных энцефалопатии. / Е.М. Бурцев // Журн. неврол. и психиатр.-1991.-№7.-С. 19-22.

23. Бурцев Е.М. Дисциркуляторная (сосудистая) энцефалопатия. / Е.М. Бурцев // Журн. неврол. и психиатр.,-1998.-№1.-С.45-48.

24. Бурцев Е.М. О клинической и морфологической сущности начальных и проявлений недостаточности кровоснабжения мозга./ Е.М. Бурцев // Журн. неврол. и психиатр.-1997.-№6.-С.71.

25. Верещагин Н.В. Патология вертебробазиллярной системы и нарушения мозгового кровообращения./ Н.В. Верещагин.- М.: Медицина.-1980.-310с.

26. Верещагин Н.В. Мозговое кровообращение. / Н.В. Верещагин, В.В. Борисенко, А.Г. Власенко. М.: Интер-Весы, 1993.- 208с.

27. Вернер X. Профилактика и лечение инсульта. Рекомендации Европейской инициативной группы по проблеме инсульта. / X. Вернер // Инсульт.-2001 .-№4.-С.54-64.

28. Верхова О.А. Биологическая роль лантанидов./ О.А. Верхова, В.Р. Сорока // Успехи современной биологии.-1980.- Т.90, № 3 (б).- С. 365-381.

29. Весельский И.Ш. Применение корректоров процессов ПОЛ и гемостаза в комплексном лечении больных с цереброваскулярными расстройствами. / И.Ш. Весельский, А.В. Сонник // Журн. неврол. и психиатр.-1997.-Т.97, №2.-С.51-54.

30. Виберс Д. Руководство по цереброваскулярным заболеваниям. / Д Виберс, В Фейгин, Р. Браун.- М., 1999.-672с.

31. Виленский Б.С. Инсульт./ Б.С. Виленский.- СПб.: Мед. информ. агентство, 1995.-287с.

32. Виленский Б.С. О пересмотре принципов и совершенствования методов дифференцированной терапии ишемического инсульта / Б.С. Виленский, Е.А. Широков // Журн. неврол. и психиатр.-1992.-Т.92, №1.-С.53-56.

33. Владимиров Ю.В. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах./ Ю.В. Владимиров, А.И. Арчаков. М.,1972.- 252с.

34. Власова Н.Г., Куцов Г.М., Ломакин Ю.В. и др. Влияние гипоксии на нейроны различных структур мозга в условиях переживающих срезов. В кн.: Гипоксия: Механизмы, адаптация, коррекция. Материалы второй Всероссийской конференции. - М., 1999.- 14с.

35. Волкова О.В. Основы гистологии с гистологической техникой./ О.В. Волкова, Ю.К. Елецкий.- М., 1982,- 304 с.

36. Волошин В.А О роли люминисцентных состояний ионов редких земель в реакции коагуляции крови / В.А. Волошин, В.Р.Сорока, П.М. Шварцбурд //Биофизика.- 1974.-С.358-359.

37. Волошин П.В. Лечение сосудистых заболеваний головного и спинного мозга./П.В.Волошин, В.И. Тайцлин. М.: Запорожье, 1999.-557с.

38. Воронина Т.А. Гипоксия и память. Особенности эффектов и применения ноотропных препаратов/ Т.А. Воронина // Вестник РАМН.-2000.-№9.-С.27-34.

39. Воронина Т.А. Новые направления поиска ноотропных препаратов./ Т.А. Воронина// Вестник РАМН.-1998.-№ 11 .-С. 16-20. '

40. Воронина Т.А. Современные проблемы фармакологии ноотропов: состояние и перспективы / Т.А. Воронина // Фармакология и токсикология.-1991 ,-№2.-С. 16-20.

41. Воронина Т.А. Экспериментальное изучение препаратов с ноотропным типом действия/ Т.А. Воронина, Р.У.Островская// Ведомости Фармакологического комитета,-1998.-№2.-С.25-31.

42. Высоцкая В.Г. Реологические свойства крови при нарушениях мозгового кровообращения ишемического характера./ В.Г. Высоцкая, Т.Н. Лобкова, Тхуан В.Х. //Журн. неврол. и психиатр.- 1982.-Т. 82, вып.12.- С.49-53.

43. Гаврилина Т.В. Прекондиционирование ишемии головного мозга: модели, феномены, механизмы / Т.В. Гаврилина, JI.H. Минакина //Сибирский медицинский журнал. 2003, №2.-С.23-26.

44. Гаевый М.Д. Фармакология мозгового кровообращения/ М.Д. Гаевый.-М.: Медицина, 1980.- 190с.

45. Ганнушкина И.В. Гипертоническая энцефалопатия. / И.В. Ганнушкина, Н.В. Лебедева. М.,-1987.-224с.

46. Ганнушкина И.В. Мозговое кровообращение при различных видах циркулятороной гипоксии мозга. / И.В. Ганнушкина // Вестник РАМН.-2000.- №9.-С. 22-26.

47. Ганнушкина И.В. Патоморфологические механизмы нарушений мозгового кровообращения и новые направления в их профилактике и лечении / И.В. Ганнушкина // Журн. неврол. и психиатр.-1996.-№12.-С.14-18.

48. Ганыиина Т.С. Влияние блокаторов кальциевых каналов на активность в симпатических нервах, вазомоторный рефлекс и мозговое кровообращение / Т.С. Ганыпина, Н.Р. Мирзоян // Эксперим. и клинич. фармакол.- 1996.-Т.59, №5.-С.12-17.

49. Гацура В.В. Фармкологические агенты в экспериментальной медицине и биологии /В.В. Гацура, А.С. Саратиков.- Томск.- 1977.- 157 с.

50. Геннис Р. Биомембраны молекулярная структура и функции / Р. Геннис,-М.: Мир, 1997.-622 с.

51. Георгиев В.П. Участие ГАМК и других медиаторов в регуляции судорожного порога / В.П. Георгиев // Фармакол. и токсикол.-1983.- №4.-С.15-19.

52. Гистохимия. / Ред. А.И. Кононский.- Киев.- 1976.- 280 с.

53. Гусев Е.И. Ишемическая болезнь головного мозга / Е.И. Гусев // Вестник РАМН.-1993.-№7.-С.34-39.

54. Гусев Е.И. Механизмы повреждения ткани мозга на фоне острой фокальной ишемии/ Е.И. Гусев, В.И. Скворцова, А.В. Коваленко, М.А. Соколов // Журнал неврол. и психиатр.- 1999.- Т. 99, №2.- С.65-69.

55. Гусев Е.И. Нейропротективная терапия ишемического инсульта. I. Первичная нейропротекция / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова //Журн. неврол. и психиатр. Инсульт, 5.- 2002., С.3-7.

56. Гусев Е.И. Нервные болезни: Учебник / Е.И. Гусев, В.Е. Гречко, Г.С. Бурд. Пол ред. Е.И. Гусева. М.: Медицина, 1988.- 640с.

57. Гусев Е.И. Основные факторы, влияющие на исход инсультов/ Е.И. Гусев, Б.С. Виленский, А.А. Скоромец // Журн. неврол. и психиатр.-1995.- Т.95, вып.1.-С.4-7.

58. Гусев Е.И. Сосудистые заболевания головного мозга./ Е.И. Гусев, Г.С. Бурд, Н.Н. Боголепов. М.: Медицина, 1979.-142с.

59. Гусев Е.И. Ишемия головного мозга./Е.И. Гусев, В.И.Скворцова. М., 2001.-328с.

60. Давиденко Н.К. Изучение биосистем с помощью металлов-зондов / Н.К. Давиденко // Биологические аспекты координационной химии. Киев, 1977.-С.46-57.

61. Дамбинова С.А. Нейрорецепторы глутамата./ С.А. Дамбинова.- Л.:Наука, 1989.-С.144.

62. Деннис В. Парк. Биохимия чужеродных соединений./ Деннис В. Парк. М.: Медицина, 1973.- 288с.

63. Добрынина Н.А. Комплексы РЗЭ в медицине. Фармация XXI веке: инновации и традиции./ Н.А. Добрынина. Н.В. Новикова. // Тез. докл. межд. конф. 7-8 апр. СПб. 1999.

64. Ермохин П.Н. Гистопатология центральной нервной системы./ П.Н. Ермохин.- М., Медицина.,-1969.

65. Есипова И.К. Патологическая анатомия./ И.К. Есипова.- М., 1977.- 78с.

66. Жаботинский Ю.М. Нормальная и патологическая морфология нейрона./ Ю.М. Жаботинский.- М.,1965.- 324с.

67. Жданов Г.Г. Свободно-радикальные процессы, гипоксия и применение антиоксидантов в реаниматологии./ Г.Г. Жданов, В.Н. Нечаев, M.JI. Нодель //Журн. анестезиол. и реаниматол.- 1989, №4.- С.63-68.

68. Жилова Н.А. Экспериментальные исследования токсичности редкоземельныз элементов празеодима и самария./ Н.А Жилова. Сб. Гигиеническая наука - практике. М., 1972.-С. 88-89.

69. Завалишин И.А. Оксидантный стресс общий механизм повреждения при заболеваниях нервной системы./ И.А. Завалишин, М.Н. Захарова.// Журн. неврол. и психиатр,-1996, №2.- С.111-114.

70. Захарова М.Н. Клинические аспекты патологии астроглии (обзор). / М.Н. Захарова, И.А. Завалишин // Журн. неврол. и психиатр.-1997.- №12.-С.100-103.

71. Збровская И.А. Антиоксидантная система организма, ее значение в метаболизме. Клинические аспекты. / И.А. Збровская, М.В. Банникова // Вестник РАМН.-1995.-№6.-С.53-60.

72. Зимаков Ю.А. Изменение свертывания крови под влиянием лантанидов. -/ Ю.А. Зимаков.- Сб.Механизмы реакций свертывания крови и внутрисосудистых тромбообразований. Саратов.-1971.С.-160-162.

73. Золин В.Ф. Редкоземельный зонд в химии и биологии / В.Ф. Золин, Л.Г. Коренева. М.: Наука, 1980.-3 50с.

74. Идельсон Л.И. Методические разработки: методы исследования гемостаза./Идельсон Л.И. М.Д995.-4бс.

75. Израэльсон З.И. Вопросы гигиены труда и профессиональные патологии при работе с редкими металлами / З.И. Израэльсон, О.Я. Могилевская, С.В. Суворов.- М.: Медицина, 1973.- 304с.

76. Инсульт: практическое руководство для ведения больных / Ч.П. Верлоу, М.с. Деннис и др. СПБ «Политехника», 1998.- 629с.

77. Ищенко М.М. Влияние антагонистов кальция на церебралную и системную гемодинамику у больных с ишеимическими нарушениями мозгового кровообращения. / М.М. Ищенко, В.А. Лобас.// Журн. Неврол. и псих.- 1989.- Т.89.- вып. 9.- С.52-56.

78. Клец О.П. Влияние некоторых дигидропиридиновых блокаторов кальциевых каналов на мозговое кровообращение при острой транзиторной церебральной ишемии: Автореф. дис. канд. мед. наук/ О.П. Клец.- Пятигорск ., 1997.- 20с.

79. Ковалев И.Е. Влияние эномеланина на гемолиз эритроцитов, вызываемый свободнорадикальными реакциями и другими факторами/ И.Е. Ковалев, Н.П. Данилова, С.А. Андронати // Фармакол. и токсикол. -1986.- №4.-С.89-91.

80. Козловский В.Л. Антикальциевые препараты, предупреждающие действие хинолиновой кислоты / В.Л Козловский, Н.В. Гейнисман, И.В. Прахье // Фарм. и токсикология.- 1990.- Т. 53, № 2.- с.27-29.

81. Козловский В.Л. Эндогенные факторы нейродеструкции (фармакологические аспекты). Фармакол. и токсикол.-1990.- Т.53, №5.- С. 7-13.

82. Колбаев С.Н. Модуляция лантаном ГАМК-активируемых токов в изолированных нейронах мозжечка крысы /С.Н. Колбаев // Бюл. экспер. биол.- 2002.-Т. 133, №1.-С. 55-59.

83. Коломийцева М.П. Микроэлементы в медицине./ М.П. Коломийцева, Р.Д. Габович.- М.- 1970.-288с.

84. Коммисаров И.В. Ноотропы: обоснование и результаты клинического применения//Междунар. Мед. Журн.-1998.-№1.-С.59-63.

85. Коренева Л.Г., Викторова А.В., Барсуков Л.И. и др.// Биофизика.-1978.-Т.23, №4.- С.624.

86. Королюк М.А. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова //Лабораторное дело.-1988.-№6.-С.16-1

87. Косолапов В.А. Антиоксидантная защита и перекисное окисление липидов в тканях крыс после гипобарической гипоксии / Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. // Бюлл. эксперим. биологии и медицины.-1998.-Т. 126.-№11.-С.519-521.

88. Крапивин С.В. Нейрофизиологические механизмы действия ноотропных препаратов//Журн. невр. и психиатр.-1993.-Т.93.-С.104-107.

89. Кресюн В.И., Рожковский Л.В. Молекулярно-биохимические механизмы действия ноотропных средств// Бюлл. эксперим. биологии и медицины.-1990.-Т.110, № 7.-С.58-60.

90. Круглякова К.Е., Шишкина Л.Н. Общие представления о механизме действия антиоксидантов.// Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo: Сб. Научных статей.-М.: Наука, 1992.-110с.

91. Крыжановский Г.Н. Влияние органических кальциевых антагонистов и магния на развитие коразолового кидлинга./ Г.Н. Крыжановский, М.Н. Карпова, О.Ю. Панков // Бюл. эксп. биол. и мед. 1990.- №10.- С.348-350.

92. Крыжановский Г.Н. Противосудорожная активность вальпроата Na и некоторых антагонистов Са при их сочетанном применении у мышей./ Г.Н. Крыжановский, М.Н. Карпова, Ю.И. Абросимов и др.// Бюлл. эксп. биол. и медицины.- 1993.- №3 С.231-232.

93. Кулинский В.И. Нейропротекторный эффект гипоксического прекондиционирования: феномен и механизмы. / В.И. Кулинский, Л.Н. Минакина, Т.В. Гаврилина. // Бюл. эксперим. биол.- 2002.- Т. 133, №2.237-240.

94. Кулинский В.И. Нейропротекторный эффект ГАМКергических веществ при ишемии головного мозга. / В.И. Кулинский, Г.В. Михельсон.// Эксперим. и клинич. фармкол. 1997.- Т. 60, №1.- С.56-58.

95. Кулинский В.И. Рецепторные механизмы нейропротекторного эффекта ГАМКергических веществ. / В.И. Кулинский, Г.В. Михельсон // Бюл. эксперим. биол.- 1998.- Т. 125, №2 -С. 162-164.

96. Лабораторные методы исследования в клинике/ Под.ред. Меньшикова В.В.-М.,1987.-365с.

97. ЮО.Лабори Г. Метаболические и фармакологические основы нейрофармакологии. / Г. Лабори.- М.: Медицина.- 1974,-168с.

98. Лазаревич Е.В. Изменения обмена кальция в структурах коры головного мозга при аноксии in vitro. / Е.В. Лазаревич // Бюлл. эксперим. биологии и мед.- 1988.- № 3.- С. 261-264.

99. Лакин Г.Ф. Биометрия./ Г.Ф. Лакин,- М.- 1990.- 352 с.

100. ЮЗ.Лакин К.М. Действие антагонистов кальция на агрегацию тромбоцитов /К.М. Лакин, Е.М. Маневич, А.Г. Муляр // Фармакология и токсикология. 1987.-№5.-С.78-85.

101. Лебедева Н.В. Ноотропы в неврологии./ Н.В. Лебедева.- Фармакология ноотропов.-М.1989.-С.125-128.

102. Лебедева Н.В. Ноотропы и вазоактивные препараты в нейрореабилитации.- Иваново, 1995.-49с.

103. Юб.Липосомы в биологических системах / Под ред. Г. Григориадиса, А. А. Аллисона.- М., Медицина., 1983.- 384 с.

104. Лойда 3., Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов лабораторные методы. М., 1982. -272с.

105. Лукьянова Л.Д. Биоэнергетическая гипоксия: понятие, механизмы и способы коррекции. / Л.Д. Лукьянова // Бюлл. эксепер. биол. и мед. 1997.-Т.124, №9.-0.-244-253.

106. Лукьянова Л.Д. В кн.: Использование моделей патологических состояний при поиске биологически активных препаратов. М., 1983, 94-95.

107. Лукьянова Л. Д. Новые подходы к созданию антигипоксантов метаболического действия./ Л.Д. Лукьянова // Вестник РАМН 1999.- № 3.-С.18

108. Ш.Лукьянова Л.Д. Современные проблемы гипоксии. / Л.Д. Лукьянова // Вестник РАМН.- 2000.-№9.-С.З-12.

109. Лукьянова Л.Д. Биоэнергетические механизмы антигипоксического действия сукцинатсодержащего производного 3-оксипиридина мексидола. / Л.Д.Лукьянова, Р.Е. Атабаева, С.Ю. Шепелева // Бюл. экспер. биол и мед.- 1993.- №3.- С. 259-260.

110. ПЗ.Марголис Л.Б. Липосомы и их взаимодействие с клетками./ Л.Б. Марголис, Л.Д. Бергельсон,- М: Наука, 1986.- 240 с.

111. Максимов В.И. Локализованное внутрисосудистое свертывание крови в микроциркуляторном русле головного мозга при геморрагическом инсульте. / В.И. Максимов // Журн. неврол. и психиатр.- 1986.- Т. 86.-вып.9.-С. 1297-1299.

112. Малышев И.Ю. Гипоксия и оксид азота./ И.Ю.Малышев, Е.А. Монастырская, Б.В.Смирин // Вестник РАМН.- 2000.-№9.- С.44-47.

113. Манвелов Л.С. Профилактика сосудистых заболеваний головного мозга. / Л.С. Манвелов, Ю.Я. Варакин, В.Е. Смирнов, Г.В. Горностаев // Журн. невропатол. и психиатр.- 1998.-№12.- С.44-47.

114. Манвелов Л.С. Дисциркуляторная энцефалопатия: патогенез, патоморфология, клиника. / Л.С. Манвелов, А.С. Кадыков // Лечащий врач.-2000.- №7.-С.4-7.

115. Машковский М.Д. Лекарственные средства: в 2-х т.: изд.8-е.-М.: Медицина, 1994.- Т. 1 .-624с.;Т.2-575с.

116. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. М., 1969.-423с.

117. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств //Ведомости ФК.-1998.-№1-С.27-32.

118. Методы исследования массопереноса в системе микроциркуляции / С.О. Алейников, П.Н. Александров, В.Г. Афанасьев и др.- Новосибирск: Наука. Сибирское отделение, 1991.- 217с.

119. Механизмы действия анксиолитических, противосудорожных и снотворных средств./ Андронати С.А., Яворский А.С., Чепелев В.М. и др.-Киев.-Наук. Думка.- 1988.-256с.

120. Мирзоян Н.Р. Цереброваскулярные эффекты ГАМК, циннаризина ифлунаризина в условиях гипокинезии: автореф. дис.канд. мед. наук /

121. Н.Р. Мирзоян.- М., 1996.- 25с.

122. Мирзоян Р.С. Различие реакций сосудов интактного и ишемизированного мозга на адренергические воздействия./ Р.С. Мирзоян, А.В. Топчян, М.И. Тимкина, М.Г. Баласанян // Эксперим. и клинич. фармакол.- 1999.-Т.62, №5 С. 11-14.

123. Мирзоян Р.С. Изучение механизмов регуляции тонуса сосудов мозга в условиях его локального ишемического поражения/ Р.С. Мирзоян, М.Г. Баласанян.//Информац. Бюллетень РФФИ, Т.7 (1999), №4.-С.99.

124. Мирзоян С.А. Влияние бедитина на мозговое кровообращение и некоторые метаболические показатели./ С.А. Мирзоян, А.А. Петросян, С.А. Арутюнян и др.// Эксперим. и клинич. фармакол.- 2000 Т. 63, №4.-С.20-23.

125. Мирзоян С.А. Ишемический контроль мозгового кровообращения./ С.А. Мирзоян //Фармакол. и токсикол. 1983.- №4.- С.5-13.

126. Мирзоян С.А. Нейрохимический контроль мозгового кровообращения./ С.А. Мирзоян.// Фармакол. и токсикол,- 1983.-№4.- С.5-15.

127. Мирзоян С.А. Биохимический контроль мозгового кровообращения/ С.А.Мирзоян// Фармакол. И токсикол. 1983.-№4.-С.5-13.

128. Мищенко В.П. Свободнорадикальное окисление липидов и гемокоагулирующая активность эритроцитов у больных ишемической болезнью мозга. / В.П. Мищенко и др.// Врачебное дело, 1985.- №3.- С. 47-49.

129. Моругова Т.В. Влияние лекарственных средств на свободнорадикальное окисление. / Т.В. Моругова, Д.Н. Лазарева. Эксперим. и клиническая фармакол,- 2000.- Т.63, №1.- С.71-75.

130. Москалев Ю.И. Минеральный обмен./ Ю.И. Москалев.- М.- 1985.-288с.

131. Москаленко Ю.Е. Мозговое кровообращение: Физико-химические приемы изучения / Ю.Е.Москаленко. Л. 1988.-159с.

132. Мотавкин П.А. Гистофизиология сосудистых механизмов мозгового кровообращения. / П.А. Мотавкин.- М.: Медицина, 1980.-198с.

133. Мотавкин П.А. Капилляры головного мозга. / П.А. Мотавкин, А.В. Ломакин, В.М.Черток.- Владивосток.-1983.-139с.

134. Намсараева Г.Т. Фитотерапия начальных форм хронической недостаточности мозгового кровообращения. / Г.Т. Намсараева, С.М. Николаев.- Улан-Удэ.- 2003.- 176с.

135. Неврология для врачей общей практики. / Под ред. A.M. Вейна.- М.: Издательство «Эйдос Медиа», 2001.-504 с.

136. Нейрометаболическая терапия / Ред. Е.И. Бурцева.-М.-1999.-53с.

137. Николаев С.М. Свободнорадикальное окисление липидов при патологических состояниях. / С.М. Николаев и др.-Улан-удэ, 1992.- 52с.

138. Никушкин Е.В. Антиокислительная активность препаратов, применяемых в противосудорожной терапии. / Е.В. Никушкин, М.М. Бордюков // Бюл. Эксп. биол. и мед.- 1993.-№3.-С.254-256.

139. Ноздрюхина Л.Р. Биологическая роль микроэлементов в организме животных и человека. / Л.Р. Ноздрюхина.- М.: Наука.- 1977.- 184с.

140. Общая патология человека / Под. ред. Струкова А.И., Серова В.В. Саркисова Д.С.- М.: Медицина.- 1990.- С. 259-265.

141. Одинак М.М. Современные средства лечения ишемического инсульта. / М.М. Одинак, И.А. Вознюк.- Терра Медика, 1999.-276с.

142. Одинак М.М., Михайленко А.А., Иванов Ю.С., Семин Г.Ф. Сосудистые заболевания головного мозга.- СПб., Гиппократ, 1997.-157с.145.0ковитый С.В., Смирнов А.В. Антигипоксанты. Экспериментальная и клиническая фармакология.- 2001, Т.64, №3.- С.76-80.

143. Орлов Б.Н. Процессы макро- и микроциркуляции в организме.Горький ГГУ,1979.-90с.

144. Отелин В.А. Нейропротективный эффект креатина при ишемии головного мозга./ В.А.Отелин, Д.Э.Коржевский, В.Б. Косткин, и др. // ДАН.,2003 т.390.-№3.- С.406-408.

145. Парфенов В.А. Неврология в общемедицинской практике: Приложение к журналу «Врач»/ В.А. Парфенов, Н.Н. Яхно. М.: Издательский дом «Русский врач», 2001.-144с.

146. Патологическая анатомия нарушений мозгового кровообращения/ А.Н.Колтовер, Н.В.Верещагин, И.Г.Людковская и др.-М.,1975.-256с.

147. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная.-М.,1962.- 962с.

148. Плотников М.Б. Коррекция синдрома повышенной вязкости крови в-условиях ишемии мозга у крыс комплексом дикверитина и аскорбиновой кислоты./ М.Б. Плотников, О.И. Алиев, М.Ю.Маслов// Эксперим. и„ клинич. фармакол.- 1999.- Т. 62, №6.- С.45-47.

149. Плотников М.Б. Сравнительный анализ двух моделей хронической ишемии головного мозга у крыс./ М.Б.Плотников, О.Е. Ваизова // Патол. физиол. и эксперим. терапия.- 1994.- №2.- С.-59-60.

150. Плотников М.Б. Противоотечная активность цереброкраста при ишемии мозга./ М.Б. Плотников, О.Е. Ваизова, Т.М. Плотникова // Бюлл. экспер. биол. и мед. 1995.- №3.-С.291-293.

151. Плотников М.Б., Колтунов А.А., Алиев О.И., и др. Гемореологические свойства экстрактов из некоторых растений, содержащих флавоноиды./

152. М.Б.Плотников, А.А.Колтунов, О.И. Алиев.//Растительные ресурсы .-1998.-Т.34, вып. 1С.87-90.

153. Плотникова Т.М. Влияние цереброкраста на микроциркуляцию при острой транзиторной ишемии мозга / Т.М. Плотникова, Т.Г. Баженова, М.Б.Плотников, А.С. Саратиков// Эксперим. и клинич. фармакол.-1995.-Т.58.-№2.-С.27-29.

154. Плотникова Т.М. Влияние цереброкраста на функциональное состояние эритроцитов./ Т.М.Плотникова, Н.Н.Фирсов, А.С.Саратиков // Экспер. и клинич. фармакол.-1993.Т.56.-№3.-С.35-37.

155. Подколзин А.А. Иммунитет и микроэлементы./ А.А. Подколзин В.И., Донцов-М., 1994.-144с.

156. Полонский В.М. Средства профилактики ишемического инсульта / В.М. Полонский // Фарматека, 2001.- №2.- С.24-26.

157. Попова JI.M. Нейрореаниматология. М. Медицина.- 1983.-301с.

158. Проблемы инсульта: перспективные идеи и новые решения //Материалы научно-практической конференции неврологов медицинских учреждений МО РФ Московского региона.- М.,2000.-117с.

159. Программированная клеточная гибель/ Под ред. B.C. Новиков.- СПб.: Наука, 1996.-276с.

160. Пряникова Н.А., Духанин А.С., Стаховская JI.B., Чекнева Н.С. Влияние нимодипина на внутриклеточный уровень кальция и агрегацию тромбоцитов больных с ишемическим инсультом.// Бюлл. Экспеим. Биол и мед. 1996, №3.- С. 317-320.

161. Раевский К.С., Башкатова В.Г. Окислительный стресс, апоптоз и повреждение мозга. Нейрохимия Т.13,вып. 1, 1996.- С.61-64.

162. Раевский К.С., Георгиев В.П. Медиаторные аминокислоты: нейрофармакологические и нейрохимические аспекты. М., Медицина.-1986.-240с.

163. Разуваева В.В. Гемостаз и реологические свойства крови у больных с малым инсультом.// Журн. Невр. И псих.- 1985 т.85. вып.9.- С.1324-1329.

164. Разумовский Н.О., Торчииская O.JI. Особенности накопления редкоземельных элементов в тканях// Мед. Радиол.-1970.-Т.15,№ 11.С.46.

165. Ринькис Г.Я. Методы ускоренного колориметрического определения микроэлементов в биологических объектах. / Г.Я. Ринькис.- Рига, 1963.-123с.

166. Розанов В.А. Роль системы ГАМК в механизмах фармакометаболической защиты мозга от гипоксии.- Анестезиология и реаниматология.- 1989., №2,- С. 68-78.

167. Ройтбак А.И. Глия и ее роль в нервной деятельности.- СПб: Наука, 1993.-352с.

168. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению лекарственных веществ.- М.,2000.

169. Савченкова JI.B. Возможные механизмы антиоксидантного действия блокаторов кальциевых каналов при гипоксическом синдроме. / JI.B. Савченкова, Е.М. Дзубан, В.Д. Лукьянчук // Эксперим. и клинич. фармакол.- 1996.- Т. 59, №2.- С.53-55.

170. Салалыкин В.И. Гипоксия головного мозга: клиника и лечение./ В.И.Салалыкин, А.И. Арутюнов М.: Медицина.-1978.-296с. *

171. Саратиков А.С. Экспериментальная и клиническая фармакология мозгового кровообращения./ А.С. Саратиков, В.В. Белопасов, М.Б. Плотников.-Томск.- 1979.-248.

172. Сергеев П.В. Рецепторы. / П.В. Сергеев, Н.Л. Шимановский, В.И. Петров. М. Волгоград, 1999.- С. 346-423.

173. Сидоров К.К. О классификации токсических ядов при парентеральных способах введения. Токсикология новых промышленных химических веществ. - М., Медицина, 1973.- вып. 13.-160с.

174. Скворцова В.И. Содержание нейротрансмиттерных аминокислот в спинномозговой жидкости больных острым ишемическим инсультом. / В.И. Скворцова, К.С. Раевский, А.В. Коваленко и др. // Журн. Неврол. и психиатр.- 1999.- №2.- С.34-38.

175. Скулачев В.П. Феноптоз: запрограммированная смерть организма / В.П. Скулачев//Биохимия.- 1999.-т. 64, вып. 12.- С. 1679-1688.

176. Сосудистая патология нервной системы: Сб. статей под ред.М.М. Одинака и А.К.Кузнецова.- СПб., 1998.-230с.

177. Справочник Видаль.-2000.- 1023с.

178. Справочник по клиническим лабораторным методам иследования / под ред. Е.А. Кост.- М.: Медицина, 1975.- 383 с.

179. Стальная И.Д. Метод определения малонового альдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии. М.Д977.-С.66-68.

180. Стволинский В.Н. Противоишемическая активность карнозина / В.Н. Стволинский, Д. Доброта // Биохимия.- 2000.- Т.65.- Вып.7.- С.998-1005.

181. Стволинский С.Л.Влияние карнозина на крыс в условиях экспериментальной ишемии мозга / С.Л Стволинский, М.Л. Куклей, Е.Р. Булыгина и др.//Докл. Акад. Наук, 2000.-Т.371, №1.- С. 132-135.

182. Сухачева Е.И., Лекохмахер С.С., Архипова Т.П. Распределение редкоземельных элементов в организме// Тр. Института экол. раст. и животн. Уральского научн. Центра АН СССР.-1974.-Т.89.-С.43.

183. Таммухамедов Б. А., Гагельганс А.И., Маматкулов Х.М. и др. Биологические эффекты редкоземельных элементов// Мат. симп. «Биофизикаи мембраны».- Каунас, 1972.-С.442.

184. Тараканов А.В. Механизмы действия кетамина.// Экспер. и клин. фармакол.-1996.- №6.- С.56-61.

185. Тараканов И.А. ГАМКергические механизмы нарушений дыхательного ритма./ И.А. Тараканов, В.А. Сафонов // Патологич. Физиол. и эксперим. терапия.- 1998.- №2.-С-48-54.

186. Токсикологическая оценка новых химических веществ. / Под ред. И.И. Барышникова, С.И. Колесникова.- Иркутск: изд- во Иркут. Ун-та.- 1992.-ч.1.-160с.

187. Топчян А.В. Локальная ишемия мозга крыс, вызванная перевязкой средней мозговой артерии. / А.В. Топчян, Р.С. Мирзоян, М.Г. Баласанян.// Эксперим. и клинич. фармакол.- 1996.-Т.59, №5.- С.62-64.

188. Туманов В.П. К патологической анатомии инфаркта головного мозга.-Архив патологии/ В.П. Туманов // 1983,- №1.- С.3-12.

189. Урбах В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях./В.Ю. Урбах.-М.- 1975.-295с. •

190. Фармакологическая регуляция тонуса сосудов / под. ред. П.А. Галенко-Ярошевского.- М.: Изд-во РАМН, 1999.- 608с.

191. Фармакология и клиническое применение нейроактивных аминокислот и их аналогов./ Тр. ВГМИ, Т. XXXVII, вып.5. Под .ред. Г.В.Ковалева.

192. Федорова Т.Н. Перекисное окисление липидов при экспериментальной ишемии головного мозга / Т.Н. Федорова, А.А. Болдырев, И.В. Ганнушкина // Биохимия, 1999.-Т.64.- вып.1.- С.94-98.

193. Феофанова М.А., Добрынина Н.А., Горелов И.П. Кирьянов Ю.А. Лантаниды как заместители кальция в модельных биосистемах; Тез. Докл. Первой Междунар. Конф. По биокоординационной химии. 20-22 декабря 1994 г. Иваново, 1994.

194. Феофанова М.А., НикольскийВ.М., Горелов И.П. Применение в качестве антикоагулянтов жидкофазных материалов на основе некоторыхкомплексонатов РЗЭ; Тез. докл.У Всесоюзн. Совещ. Прблемы комплексообразования в растворах, Иваново, 1991.

195. Фишер М, Шебитц В. Обзор подходов к терапии острого инсульта: прошлое, настоящее и будущее. Инсульт, 1, 2001.- С.21-31.

196. Флеровский А.А. Рациональные биометрические методы, применяемые при определении биологической активности лекарств. Эксперим. и клинич. фармакол.- 1999.- Т. 62 , №5.- С.67-70.

197. Хватова Е.М. Нуклеотиды мозга./ Е.М. Хватова, А.Н. Смирнова, Г.В. Миронова.- М.- Медицина, 1987.- 206с.

198. Ходоров Б.И. Механизмы дестабилизации кальциевого гомеостаза нейрона при гиперстимуляции глутаматных рецепторов/ Б.И. Ходоров, В.Г. Пинелис, И.В. Викторов// Вестник РАМН.- 1998. №8- С.42-46.

199. Ходос Х.-Б. Г. Нервные болезни. Руководство для врачей М. 1999.

200. Хэм.А., Кормак Д. Гистология. М.: Мир, 1983.- Т.З. 293с.

201. Чернух A.M. Микроциркуляция. М., Медицина.- 1984.- 429с.

202. Швец Ф. Фармакодинамика лекарств с экспериментальной и клинической точки зрения. Т. 1.

203. Шутов А. А. Патология системы гемостаза в остром периоде ишемического инсульта / А.А. Шутов // Журн. неврол. и психиатр. 1996.-№1.- С.45-49.

204. Яхин Ф.А. Попова Э.Н., Яхина Ф.Ф. Цереброваскулярные нарушения и эпилепсия.- 1990.- Издательство Казанского университета. -216с.

205. Яцимирский К.Б. Биологические аспекты координационной химии. -Киев: Наукова думка, 1979.-364с.1. Иностраннная литература

206. Araki Н., Korasawa Y., Nojiri М., Aihara Н.// Meth. And Find. Exptl. Clin. Pharmacol.- Vol.l0,№6.-p.349-356.

207. Aederhardt A. The biological effects of lanthanide / A. Aederhardt, P Nizza, J. Remmy // Interat. J. Radiat. Biol.-1972. Vol.5. - p.217 .

208. Ames A. Cerebral ischemia: The no-reflow- phenomenon/ A. Ames et al. // Am. J. Pathol. -1968. -p.52-437.

209. Benveniste H. Calcium accumulation by glutamate receptor activation is involved in hippocampal cell damage after ischemia. / H. Benveniste, M.B. Jorgensen, N.H. Diemer//- Acta Neurol. Scand.- 1988. -78.- p. 529-536.

210. Bickler P.E. Caueses of calcium accumulation in rat cortical brain slices during hypoxia and ischemia: role of ion channels and membrane damage./ P.E. Bickler, B.M. Hansen // Brain Res. 1994.- 665.- 269-276.

211. Borges M. The distribution of calcium in normal and ischemic brain tissue. / M.Borges //Clinical Research Reviewes. 1984. - 4: 70-71.

212. Brittain H.G. J Studies on effects of lanthanum on Ca-dependent damages /H.G. Brittain, F.S. Richardson, R.B. Martin // Amer. Chem. Soc.-1976. -Vol.98. -№25.- P.8255.

213. Casteels R. Effects of lanthanum on Ca flux / R. Casteels, C. Breemen, C.J. Mayer//Life Sci.-1973. -Vol.13. -№7. -p.783-794.

214. Das T. Effects of lanthanum in cellular systems. / T. Das, A. Sharma, G. Talucder//Biol Trace Elem Res.-1988. 18:201-228.

215. De Keyser Clinical trials with neuroprotective agents in acute iscemic stroke: are we doing the right things? / J. De Keyser, G suiter, P.G. Luiten //Trends Neurosci.-1990.-22.-p. 535-540.

216. Dirnagl U. Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view. Trends Neurosci.- 1999.- 22,- 391-397.

217. Ducastaing A. Studies of influence lanthanum on Ca released processes/ A.Ducastaing, C. Monceyron, C. P. Azanza, J. Raymond // Compt. Rend. Soc. Boil. -1973. -Vol. 167,№ 2. P.262.

218. Evans CH. Interesting and useful biochemical properties and lanthanides /СН Evans// Trends Biocem. Sci.- 1983, 8: 445-449.

219. Fisher J. Lanthanum-mediated modification of GABAa receptor deactivation, desensitization and ingibitori synaptic currents in rat cerebellar neurons / J.L. Fisher, J. Zhang, R. L. Macdonald // Mol. Pharmacol. 1997. - Vol.52, N4. -P.714-724.

220. Furchgott R.F. The pharmacological differentiation of adrenergic receptors/ R.F. Furchgott // Ann. N.Y. Acad. Sci.-1967. Vol.139.- p.553-570.

221. Garcia J.Y. Neuronal necrosis after middle cerebral artery occlusion in Wistar rats progresses at different time intervals in the caudputamen and the cortex./ J.Y.Garcia, K.F. Ziu , K.L. Ho // Stroke .-1995. Vol 26, №4. - p.636-643.

222. Gotoch O. Nimodipin and the hemodinamic and histopatological consequencese of middle cerebral artery occlusion in the rat / O. Gotoch, A.QA. Mohamed, J. McCulloch et al. //J. cerebral blood flow metab. 1986. -6.- p.321-331.

223. Greenberg J.H. Cytosolic free calcium during focal cerebral ischemia and effects of nimodipin on calcium and histologic damage. / J.H. Greenberg, D. Uematsu, N. Araki, W.F. Hickey // Stroke. 1990.- 21.-(suppl IV): IV-72.- IV.-77.

224. Greenberg J.H. Intracellular calcium and pathophysiological changes in cerebral ischemia. / J. H. Greenberg, D. Uematsu, N Araki, M Reivich //Arzneimittelforschung.- 1991.- 41,- p. 324-332.

225. Grotta J.C. Why do all drugs work in animal models but none in stroke patients?: neuropritective therapy./ J.C. Grotta // J. Intern. Med. 1995.- 237.- p. 89-94.

226. Haley JT Pharmacology and toxicology of the rare earth elements./ J.T. Haley //J Pharm Sci.- 1965. 54:663-670.

227. Hatanaka H., Enokido Y. Neuronal apoptosis.- Tanpakushitsu Kakusan Koso.-1995.-Vol.40,#3 .-P.263-272.

228. Horn J. Limburg M. Calcium antagonists for acute ischemic stroke. Cochrane Database Syst. Rev. 2000: CD 001928.

229. Horn J. Nimodipin in animal model experiments of focal cerebral ischemia a sistematic review. / J. Horn, R.J. de Haan, M. Vereulen et al.// Stroke.- 2001.32.- №10.- p.2433-2438.

230. Hossman V. Return of neuronal functions after prolonged cardiac arrest Brain Res/ V. Hossman. 1973. - 60.- p. 423-438.

231. Im MS Selective potentiation of GABA-mediated СГ current by lanthanum ion in subtypes of cloned GABAa receptors. / MS Im, В.J. Hamilton, D.B. Carter, W.B.Im //Neurosci Lett.- 1992.- 144.-p.165-168.

232. Kazda S. Cerebrovascular effects of the calcium antagonists digodropiridine derivate nimodipine in animal experiments Arzneimittelforschung .--1982.-32.-p. 331

233. Kristian T. Calcium-related damage in ischemia. / T.Kristian, B.K. Siesjo. // Life Sci.- 1996.- 59.- p. 357- 367.

234. Langer GA. Lanthanum in heart cell culture. Effect of calcium exchange correlated with its localization. / G.A. Langer, J.S.Frank //J Cell Biol. 1972. -54.-p. 441-445.

235. Lesseps RJ. Removel by phospholipase С of a layer of La staining material external to the cell membrane in embryonic chick cells. /R.J. Lesseps // J Cell Biol.- 1967.- 34.-173-183.

236. Lyden P.D. Effects of calcium channel blocers on neurologic outcom after focal ischemia in rabbits. / P. D. Lyden , J.A. Zivin, A Cochlar et al. // Stroke.-1988;19:1020-1026.

237. Ma JY. Differential modulation of GABAa receptor-channel complex by polyvalent cations in rat dorsal root ganglion neurons./J.Y. Ma, T. Narahashi // Brain Res . 1993. -607. - p.222-232.

238. Ma J.Y. Enhancement of y-Aminobutiric Acid-activated chlorid channel currents by lanthanides in rat dorsal root ganglion neurons. / J.Y. Ma, T. Narahashi. // J.Neurosci. -1993. -Vol.13, N11. -p.4872-4879.

239. Martin RB. Lanthanides as probes for calcium in biological systems. / R.B. Martin, F.S. Richardson //Q. Rev. Biophys . 1979. -12.- p.181-209.

240. Mc Grow Experimental cerebral infarction effects of pentobarbital in Mongolian gerbils/ Mc Grow // Arch Neurol.- 1977.-Vol 34.-p.334-336.

241. Millican C. Animal stroke models / C. Millican // Stroke. 1992. -23. - p.795-797.

242. Molinari G.F. Why model strokes? .- Stroke / G.F.Molinari //1988.-19.- p. 1195- 1197.1. I t

243. Nacamura T. Increased intracellular Ca concentration in the hippocampal CA1 area during global ischemia and reperfiision in the rat: a possible cause of neuronal death. / T. Nacamura, H. Minavisawa, Y. Katayama. // Neuroscience.- 1999.- 88.- p. 57-67.

244. Nathanson J.A. Biological activiti of lanthanide ions // Health Physici.- 1976.-Vol28.- P.207.

245. Neelands T. R., MacdonaldR. L.// Mol. Pharmacol.-1999. -Vol.56,N3.- P.598-610.

246. Ogurusu T. Functional characterization of lanthanide binding sites in the1. OAsarcoplasmic reticulum Ca -ATPase: do lanthanide ions bind to the calcium transport site?/ T.Ogurusu, S. Wacabayashi, M.Shigekawa // Biochemistry. -1991.- 30.-p. 9966-9973.

247. Orrenius S. Role of Ca in toxic cell killing. / S. Orrenius, D. J. McConcey, G. Bellomo //Trends Pharmacol Sci.- 1989.-10.- p.281-285.

248. Randall R.D. Glutamate-induced calcium transient triggers delayed calcium overload and neurotoxicity in rat hippocampal neurons. / R.D. Randall, S. Diochot, J. Nargeot //J. Neurosci. 1992.- 12.- p. 1882-1895.

249. Reccomidation for standarts regarding preclinical neuroprotective and restorative drug development. Stroke. 1999. - 30. - p.2752- 2758.

250. Reichling DB. Lanthanum actions on excitatory amino acid-gated currents and voltage-gated calcium currents in rat dorsal horn neurons. / D.B. Reichling,

251. A.B. MacDermott //J Physiol (Lond). 1991. - 441. - p. 199-218.

252. Robertson В Characteristic of GABA-activated chloride channels in mammalian dorsal root ganglion neurons. / B.Robertson //J Physiol (Lond).1989,- 144. -p.285-300.

253. Sandage Jr. Reduction of infarct volume using citicoline / Sandage Jr. // United States Patient Number. -1990. 5. -872. - p. 108.

254. Sedmak JJ. Lantanide ion enhancement of interferon binding to cells. / J.J. Sedmalc, H.S. MacDonald, V.M.Kushnaryov //Biochem Biophys Res Commun. 1986. - 137. -p. 480-485.

255. Siesjo B.K. Historical overvitw. Calcium, ischemia, and death of brain cells. /

256. B.K. Siesjo // Ann N.Y. Acad Sci.- 1988.- 522.- p. 638-661.

257. Siesjo B.K. Calcium fluxes, calcium antagonists, and calcium related pathology in brain ischemia, hypoglycemia and spreading depression: a unifying hypothesis. / B.K. Siesjo, F. Bengtsson // J. Cereb. Blood flow Metabol. -1989.- 9.- p. 127-140.sy |

258. Silver I.A. Intracellular and extracellular changes of Ca in hipoxia and ischemia in rut brain in vivo./ I.A. Silver, M Erecinska // J. Gen. Physiol.1990.- 95.- p. 837-865.

259. Steen Nimodipin improves cerebral blood flow and neurologic recovery after compete cerebral ischemia in the dog./ Steen // J. Cereb. Blood flow Metabol. -1983.- 3.-p.38-43.

260. Sun J. Lanthanide (Ill)-phophatidic acid complex: binding site heterogeneity and phase separation. /J. Sun, M. Petersheim // Biochim Biophys Acta. -1990. -1024. -p.159-166.

261. Sweeney M. I. Cellular mechanisms involved in brain ischemia. / M. I. Sweeney, J.Y. Yager, W. Wals et al. // can J. Physiol Pharmacol.- 1995.- 73.-p.1525-1535.

262. Tagaya M., Liu K.F., Copeland B. et al. Strok. -1997; 28:1245-1254.

263. Takahashi M. Ca and CI dependent, NMDA receptor-mediated neuronal death induced by depolarisation in rat hippocampal organotipic cultures. / M. Takahashi, S.Y. Liou, M Kunihara // Brain Res.- 1995.- 675.- p. 249-256.

264. Tamura A. Focal ischemia in the rut. 1. Description of technique and early neuropatological consequences following middle cerebral artery occlusion./ A. Tamura, D. I.Graham, J. McCulloch // J. Cereb. Blood Flow Metabol.- 1981.-1.-p. 3-60.

265. Tamura A., Graham D.F., Mc Culloch J., Teasdale G.M.// Cerebral blood flow and metabolism.- 1971.- vol.1 .-p.53-60.

266. The European Ad Hoc Consensus Group. Neuroprotection as unicial therapy in acute stroke: third report of an Ad Hoc Consensus Group Meeting. Cerebrovasc. Dis.-1998.- 8.- p. 59-72.

267. Vardmon AD. Rare earth magnets and impaction/ A.D.Vardmon, T.M. Graber, D.Drescher //Am J Orthod Dentofacial Orthop. -1991.- 100.- p. 494512.

268. Vega J.A., Dell Valle M., Amenta F. Immunocytochemical aspects of the central nervous system in aging: sensitivity to choline alfscerate treatment.

269. Velazquez J.L.P. In vitro ischemia promotes dlutamate-mediated free radical generation and intracellular calcium accumulation in hippocampal pyramidal neurons. / J.L.P. Velazquez, M.V. Frantseva, P.L. Carlen // J. Neurosci.- 1997.-17.-p. 9085-9094.

270. Venugopal B. Luckey T.D. Toxicity of group III metals. In: Metal toxity in mammals, 1978, pp 127-157. New York: Plenum.

271. Villani F. Biochemical Pharmacology by rare earth elements / F. Villani // Biochem. Pharmacol. 1975.- Vol. 45, №2.- P. 1349.

272. Vincke E. Trombose and Embolie Basel. Los-Angeles, 1960. 509p.

273. Vogel W Calcium and lanthanum effects at the nodal membran. Pflugens Arch./ W. Vogel // 1974. -350.- p. 25-39.

274. Vogel W. Rare earth elements.- N.Y., 1974.- 364p.

275. White ВС et al. Possible role of calcium blockers in cerebral resuscitation. 1983.

276. Wiebers D.O. Animal models of stroke: are they releavent to human dieses? / D.O. Wiebers, H.P. Adams, J.P. Whinstan // Stroke.-1990,- 21.- p. 1-3.

277. Yan M, Narahashi T (1991) Differantial modulation of GABA receptor channel by polyvalent cations. Soc Neurosci Abstr. 1991. - 17.-p.1333.

278. Yan M, Narahashi T. Modulation of GABA receptor channel complex by polyvalent cations Biophys j. 1992,- 62.-p.A105.

279. Yasima H. Lanthanide iona for the first non-enzymatic formation of adenosine-3-5-cyclic monophosphate under physiological conditions / Yasima H., Sumaoka Z., Mijama S. // J. Biochemistry. -1994. -Vol.115, №6. P.1038-1039.

280. Zhang Y. Cytosolic Ca2+ Changes during in vitro ishemia in rat hippocampal slices: major roles for glutamate and Na+- dependent Ca release from mitchondria. / Zhang Y., Liton P.// J. of Neurosciens. - 1999. - 19. -9. -p. 3307-3315.

281. Zhu W. J., Wang J. F., Corsi L., Vicini S.// J. Physiol. 1998. Vol. 511, N 3P.647-661.

282. Zivin J.A. Animal models of stroke: are they releavent to human dieses?/ J.A. Zivin, J.C. Grotta // Stroke.-1990.-21.- p. 981-983.