Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Структурные особенности реакции селезенки при воздействии пестицидов и некоторые пути ее коррекции

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН

ВТОРОЙ ТАШКЕНТСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ , Я л Л ИНСТИТУТ

- 9 И¡0/1 1997

На правах рукописи

МАМАТНАЗАРОВА Майсара Фармановна

УДК 616.411,—015.4—08

СТРУКТУРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ РЕАКЦИИ СЕЛЕЗЕНКИ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ПЕСТИЦИДОВ И НЕКОТОРЫЕ ПУТИ ЕЕ КОРРЕКЦИИ

14.00.23 — гистология, цитология, эмбриология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Ташкент — 1997

Работа выполнена на кафедре гистологии, цитологии, эмбриологии Второго Ташкентского Государственного медицинского института.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор К. Р. ТУХТАЕВ Научный консультант:

кандидат биологических наук доцент К. Р. ОЧИЛОВ Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор К- И. РАСУЛЕВ

Доктор медицинских наук А. Р. СИРОТА

Внешнее учреждение, давшее отзыв о научно-практической ценности работы: Ташкентский Государственный педиатрический медицинский институт

Защита диссертации состоится «_»___.

1997 г. в ____ час - на заседании Специализированного

совета Д.087.09.02 при Втором Ташкентском Государственном медицинском институте (Ташкент, ул. Фароби, 2, Главный учебный корпус).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке II ТашГосМИ.

Автореферат разослан «_•*>__1997 г.

Ученый секретарь Специализированного Совета, доктор медицинских наук, профессор

А. А. БАТЫРБЕКОВ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Сохранение чистоты окружающей среды н предупреждение загрязнения ее различным» токсическими продуктами промышленности и сельского хозяйства является одной из глобальных задач современной экологии.

В настоящее время ео многих странах, в том числе и в нашей Республике, приняты действенные меры по охране окружающей среды. К их числу относятся строгое запрещение использования иысокотоксичных ксенобиотиков в сельском хозяйстве, Переход к пестицидам с коротким периодом распада н обладающим относительно малой токсичностью для организма человека и животных. Однако, длительное использование достаточно высокотоксичных пестицидов в сельскохозяйственных регионах Узбекистана привело к выраженному загрязнению ими почвы й воды, что способствовало хронической интоксикации организма. Токсическое действие пестицидов усугубляется па фоне жаркого климата к интенсивной солнечной инсоляции в условиях пашей Республики (Р.М.Рузь.бжиев и др., 1981,1987; Р.А.Касымов, 1987; Р.Х.Х.алметов, А.У.Садыков,1991).

Пестициды оказывают неблагоприятное влияние на функциональную деятельность практически всех систем организма (Н.Х.Абдуллаев и др., 1985; С.И.Полванова, 1987; Э.А.Турсунов, 1989; А.Р.Сирота, 1992).

Среди них одной из наиболее чувствительных является система крови и иммунитета, чутко реагирующая на даже очень низкие концентрации ксенобиотиков (Л.И.Миркамалова и др.,1989; А.А.Батырбебеков и др., 1989; С.А.Бобкова и др., 1989; В.В.Корпаче», 199l'; T.N.Patil, 1988).

В настоящее время установлено, что-оазличные пестициды оказывают угнетающее влияние на отдельные звенья клеточнего и гуморалыюго иммунитета (А.В.Маджидов и др., 1991; Л.Н.Ангипова, Ж.Л.Арипова, 1990).

Известно, что одним из основных органов иммунной системы является селезенка, где осуществляется дальнейшая дифференцировка Т- л В-лимфоцитов, их кооперативное ьзаимодействие с макрофагами и образование эффекторных клеток иммунной системы (М.Р.Сапин, 1987; К.А.Зуфаров, К.Р.Тухтаев, 1987; Л.В.Копахллук, А.П.Чередеев, 1990; M.Kashimura, A.Shibata, 1989).

Следовательно, селезенха может служить в качестве органа-индикатора, позволяющего одегогъ характер влияния того или иного пестицида на иммунную систему в целом. Вместе с тем, дайные по изучению реакции

селезенки при воздействии различных доз ксенобиотиков той или иной химической природы немногочисленны и разноречивы (И.Д.Гадалина, Ю.В.Иванов, 1987; А.Р.Снрота, 1995; М.Б.ЬееК « а1„ 1990; Н.МиШаш с( а1., 1992).

Другим, не менее важным в теоретическом и практическом отношении, вопросом является коррекция неблагоприятных эффектов пестицидов различными биологически активными веществами (Н.Р.Нуригов, 1993; А.У.Садыков и др., 1993).

Однако в большинстве случаев зги вещества использовались чисто эмпирически, без достаточных структурно-функциональных обоснований к их применению. Изложенное свидетельствует об актуальности и обоснованности проведения дальнейших исследоалний реакции селезенки на воздействие пестицидов и разработки некоторых способов ее коррекции.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью настоящей работы явилось выяснение структурных особенностей реакции селезенки при остром и хроническом отравлении хлорорганическими (маирик) и фосфо-органичеекими (фозалон) пестицидами и изыскание некоторых путей их коррекции.

Для достижения цели поставлены следующие задачи:

1. Изучить морфологические, морфометрические и ультраструктурные особенности селезенки, при остром отравлении мавриком и фозалоном.

2. Исследозать структурные особенности селезенки при хроническом отравлении мавриком и фозалоном.

3. Изучить влияние некоторых биологически активных веществ (аскорбиновой, липоевой кислот и биокомплекса кобальта) на структурное состояние селезенки при хроническом отравлении пестицидами,-

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ. В работе впервые установлены структурные особенности реакции селезенки на острое и хроническое воздействие хлорорганического (маврик) и фосфорорганического (фозалон) пестицидов. При остром отравлении мавриком и фозалоном выявлены стереотипные изменения: снижение числа и уменьшение площадей лимфатических узелков селезенки, усиление степени деструкции лнмфоидных клеток, особенно в Т-зависимой периартериальной зоне. Установлено снижение плотности распределения клеток во всех структурно-функциональных зонах белой пульпы, которое также сравнительно более выражено в периартериальной зоне. При хроническом отравлении мавриком выявлены более выраженные деструктивные изменения и гипоплазия структурно-функциональных зон селезенки по сравнению с хроническим отравлением

фо;>алоном. Сравнительный анализ покачал, что коррекция аскорбиновой или липоевой кислотами к отдельности ие оказывает существенного положительного влияния на структурное состояние белой пульны селезенки при хроническом отравлении манриком, и, напротив, одновременное впадение смеси обей;; кислот приносит к снижению деструктивных изменений и восстановлению клеточное™ лимфондноп ткани селезенки. Введение смеси указанных кислот оказало незначительное положительное'влияние на состояние структурно-функциональных зон бег ->й пульпы селезенки при хроническом отравлении фозалоном, тогда как ссс-итанное использование биокомнлекса кобальта и смеси этих кислот способствовало существенному восстановлению структурных изменений белой пульпы селезенки.

Практическая ценность полученных данных заключается в том, что они углубляют представления о структурных механизмах влияния пестицидов различных групп па иммунный статус организма. Установленный положительный эффект смеси аскорбиновой и липосвой кислот при хроническом отравлении мавриком и биокомплекса кобальта в сочетании с указанными кислотами при хроническом отравлении фозалоном может служить обоснованием к использованию этих препаратов для профилактики и лечелия при интоксикациях пестицидами.

АПРОБАЦИЯ. Материалы диссертации доложены и обсуждены на: Республиканской научно-практической конференции "Актуальные проблемы современной медицины и вопросы подготовки высококвалифицированных кадров" (Бухара, 1995); Ш- IV научно-практических конференциях "Актуальные вопросы медицины" (Ташкент, 1994,1996).

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ РАБОТЫ. Основные положения диссертации внедрены в учебный процесс на кафедрах гистологии и патологической физиологии З-орого Ташкент ского и Бухарского Государственных медицинских институтов.

ПУБЛИКАЦИИ. По теме диссертации опубликовано 5 работ, из которых 2 статьи и 3 тезиса докладов.

ОБЬЕМ И СТРУКТУРА РАБОТЫ. Диссертация изложена на 140 страницах машинописного текста, содержит 62 рисунка, 21 таблицу. Состоит из введения, обзора литературы, материалог и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов. Список использованной литературы включает 163 источника на русском и 30 на английском языках.

ЗАЩЛТГУ: Н ' РТ Ц М

1. Структурные особенности реакции лимфоиднон ткани селезенки при интоксикация): мавриком и фозалоном носят стереотипный характер, различаясь по степени выраженности. Они проявляются в виде гипоплазии б-слой пульпы,-особенно се Т-зяписнмой нериартернальной зоны, и усиления деструкции пммунокомпетентных клеток.

2. При хроническом отравлении мавриком коррекция смесыо аскорбиновой и липосвой кислотами способствует восстановлению клеточности зон белой пульны селезенки и снижению деструктивных процессов, а при хроническом отравлении фозалоном аналогичный эффек': достигается сочетанным применением биокомплекса кобальта и смеси указанных кислот.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В экспериментах использованы 148 белых крыс-самцов массой тела 140-200 г. До постановки эксперимента крысы и течение двух исцели находились в условиях карантина для исключения тех или иных заболеваний. Животные содержались в обычном лабораторном рационе.

Острое отравление мавриком вызывали однократным внутрижелудоч-ным введением маврика (флувалинат) в дозе 1/20 ЛД 50 (14 мг'кг) на 0,5 .мл хлопковом масле. Острое отравление фозалоном также вызывали внутрижелудочным введением препарата в дозе 1/20 ЛД 50 (5,2 мг/кг) на хлопковом масле. Контрольные животные получали только 0,5 мл очищенного хлопкового масла.

Животные этих групп забивались на 3, 7 и 10 сутки опытов. Для хронического отравления маврик ежедневно внутрижелудочно вводили в дозе 1/100 ЛД 50 (2,8 мг/кг) в течение 30 суток. Далее животные были разделены на 3 группы. Они в течении 30 суток получали с пищей аскорбиновую (3 мг/кг), или лииоевую кислоту (1,5 мг/кг), или их смесь в этих же дозах. Забой этих животных производили на следующий день после окончания коррекции. Группа крыс без коррекции служила контролем для этих групп.

Для хронического отравления фозалон животным ежедневно внутрижелудочно вводили 1/100 ЛД 50 (1,04 мг/кг) в течение 30 суток. Далее, часть животных был'а выделена для проведения коррекции. Одна группа животных получала в течении 30 суток смесь аскорбиновой и липосвой кислот в указанных выше дозах. Другой группе вводили биокомплекс кобальта (бисаква, трисгидрат метил метионинатсульфония хлорид, монозамещенный глютаминатом кобальта) в дозе 10 мг/кг массы и одновременно с пищей давали смесь аскорбиновой и липоевой кислот з течении 30 суток. Животные без коррекции служили контролем для этих

групп.

В процессе постановки экспериментов И животных погибли от интоксикации при явлениях сердечно-сосудистой и дыхательной недостаточности, и oiu не были включены п работу. Таким образом, общее количество животных, использованных в экспсримснтах.составнло всего J37 крыс.

Забои всех животных производили утром натощак, в соответствующие сроки, под эфирным наркозом.

Для морфологических исследований кусочки селезенки фиксировали в жидкости Буэна пли 12%-ном нейтральном формалине и заливали в парафин. Срезы, проведенные на уровне ворот селезенки , окрашивали гематоксплином-эозшюм и использовали дли морфологических и морфо-мстрических исследований.

Длл морфомстрнческих исследований был использован метод А.Г.Ав-тандилова с модификациями (К.Р.Тухтаев, У.Д.Джалалов. 1987).

Применяли модифицированную морфометрическ\го сетку, позволяющую определить площадь различных структурно-функциональных soh селезенки в мкм/кв. Для количественного подсчета клеток на едшишу площади использовали полутонкие срезы, окрашенные метилемовым синим и основные фуксином.

Для электронно-микроскопических исследований кисочки селезенки фиксировали в 1,25% глютаровом альдегиде и 1%-ном растворе четырех-окиси осмия на фосфатном буфере. После обезвоживания кусочки заливались в смесь ьралднт - эпон, Ультраточкие срезы после контрастирования уранил-ацетатом и цитратом свинца просматривали под электронным микроскопом "JEM-7'. Для морфомет.эических и ультргструктурных исследований использовали по 5-6 животных с каждой группы с соответствующим контролем.

Все цифровые данные статистически обрабатывались по.критериям Фишера-Стьюдента. Достоверными считались различия, удовлетворяющие Р<С,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Наши исследования показали, что острое отравление уавриком и фозалоном сопровождается стереотипными изменениями селезенки, которые характеризуются определенной динамикой и незначительно различаются по степени выраженности в зависимости от вида использованного пестицида. В ранние сроки (3 сутки) посте острого.отравления мавриком и фозалоьом в селезенке преобладали гемоциркуляторные .изменения в вчде полнокровия сосудов и венозных синусов, отека паренхимы органа. Наиболее выраженнме морфологические и морфометричес-

кис изменения отмечены на 7-10 сутки острого отравления обоими вилами пестицидов. Количество лимфатических узелков как с герминативными центрами, так и без них в 1,4 - 1,8 раза снижалось по сравнению с контролем. Следует отмстить, что степень уменьшения числа лимфатических узелков, особенно с герминативными центрами, была несколько выше при остром отравлении фозалоном.

При исследовании общей площади лимфатических узелков и площадей их структурно-функциональных зон также выявлена определенная динамика. На 7-10 сутки острого отравления мавриком общая площадь лимфатических узелков снизилась и 1,6 раза но сравнению с контролем, причем в наибольшей степени снижались площади герминативных центров и нориар-териальных зон.

Аналогичное снижение общей площади лимфатических узелков, площадгй их герминативных центров и периартерналыюй зоны выявлено и при остром отравлении фозалоном. Все изложенное указывало на то, что острог воздействие пестицидов различных групп оказывает стереотипное влияние на состояние лимфонднон ткани селезенки. В ближайшие сроки острого воздействия пестицидами на первый план выступают гемоцерку-ляторные изменения селезенки, а в последующие сроки развивается дезорганизация лимфондной ткани органа. Полученные нами результаты согласуются с данными других исследователей, которые выявили, что острое токсическое воздействие различными пестицидами в раннем периоде сопровождалось гемоциркуляториыми нарушениями в органах (Н.М.Де-мидеяко, Э.М.Байбекова, 1992; А.И.Искандеров, А.Р.Сирота, 1992.1995; З.И.Коганова, Т.И.Бонашевская, 1993; П.И.Ташходжаев и др., 1996).

Острое отравление пестицидами, по нашим данным, приводило к определенным изменениям количественных показателей и структурного состояния клеток различных зон белой пульпы селезенки. При остром отравлении мавриком выявлено прогрессирующее уменьшение общего количества клеток во всех структурно-функциональных зонах органов, достигающее своего максимума на 7-10 сутки эксперимента. При этом наибольшее снижение плотности распределения клеток установлено в периартерналыюй зоне, где абсолютное содержание клеток лимфо-цитарного ряда уменьшается в 2-3 раза. Одновременно с этим отмечено достоверное повышение абсолютных и относительных показателей числа клеток моноцитарно-макрофагального ряда. Во всех зонах выявлялось высокое'содержание деструктивных клеток, составляющих 1,4 - 2,0 % от всех клеток. Изменения количественных показателей клеток лимфоидной ткани селезенки при остром отравлении фозалоном были практически

б

идентичны нынтеепнсанным изменениям. При этом также установлено уменьшение общего числа клеток на единицу плогц^'!" «о гесх структурно-функционалы;! ix зонах, и особенно. в чераартериальной зоне. О'нако. степень выраженности гипоплазии различных зон при интоксикации фозалоиом была несколько меньше по сравнению с острым отравлением мавриком.

Уменьшение общего числа клеток нериартерналькои зоне при остром отравлении фозалоиом, главным образом, была'обусловлена снижением содержания лимфобластов, пролимфоцитов и ретикулярных клеток. В то же время абсолютное и относительное содержание моноцитов и макрофагов повышалось более чем п 2 раза по сравнению с контролем. В гермила-тивных центрах и маргинальной зоне выявлено достоверное возрастание числа тканевых гранулецпток более чем в 2 раза. Характерно, что. независимо от вида пестицида, острое отравление не приводило к существенным изменениям числа плазматических клеток, а в периартериальноп гоке при обеих видах воздействия отмечена небольшая тенденция к уменьшению их числа. ГЬ данным отдельных авторов, острое отравление пестицидами первоначально приводит к выраженному снижению процесса иммуногенеза (А.П.Искалдаров и др., 1989; А Р.Сиротл и др., 19У5). П последуй!:uïo сроки острой интоксикацш. происходит некоторая активация иммунных процессов, которые способствуют нормализации иммунного статуса (А.А.Баты-рбеков и др.,1989).Результаты некоторых работ свидетельствуют, что острое и подострое воздействие хлорорганическими и форсфорсрганичес-кимн пестицидами угнетает Т-систему иммунитета, и в тоже время оказывает умеренное стимулирующее влияние на В-систему (Л.А.Каце-нович, Ш. К. Махмудова, 1979; Л. А.Пономарева,.1979; Р.М.Рузибакиев, 1980; В.Т.Ангнченко и др., 1987).

Полученные нами данные носят несколько иной характер. Нами выявлено, что острое отравление мавриком и фозатоном оказывает наиболее выраженное отрицательное воздействие на Т-зависимые (периартер-нальные) зоны лимфатических узелков селезенки. Однако, в В-зависимых зонах (маргинальная зона, герминатилнын цен- р) мы не выявили каких-либо структурных признаков стимуляции процессов иммуногенеза. Напротив, в ¿тих зонах отмечено снижение числа клеток лимфоцитарното ряда, особенна лимфобластов, больших к средних лимфоцитов, что сочеталось с усилением степени деструкции клеток данном популяции. И наконец, содержание плазматических клеток, которые являются эффекторными клетками В-спстемы иммунитета. оставалось без существенных изменений, а в перлартцриальных зонах оно даже несколько уменьшалось. Все пзло-

жеиное указывало на угнетении Т-звеньев системы иммуногенеза в селезенке при отсутствии признаков стимуляции клеток В-зависнмых зон.

Возникает вопрос - каковы же механизмы уменьшения плотности распределения клеток и площадей различных зон лимфоидной ткани селезенки при острой интоксикации пестицидами?

Известно, что центральным органом иммунной системы является тимус, который регулирует пролиферацию и дифференцнроику иммуно-компстентных клеток (10.Н.Чернявский, 1996; В.И.Соколов ч др., 1996; М.Х.Рахматова, 1996). Пестициды различной химической природы оказывают отрицательное влияние на структурно-функциональное состояние тимуса, изменяя его клеточный состав, нарушая миграцию Т-лимфоцнтоп в соответствующие зоны периферических органов иммунной системы (Ю.Н.Потапова и др., 1993; А.С.Усманова и др., 1995; А.Р.Сирота и др., 1995).

Это обстоятельство может служить одной из причин уменьшения плотности распределения клеток в лимфатических узелках селезенки, особенно в их периартериалыюй зоне. С другой стороны, мы выявили выраженное усиление степени деструкции клеток лимфоцитарного ряда практически во всех зонах белой пульпы селезенки. Одновременно с этим нами установлено выраженное увеличение числа клеток системы мононук-лсарных фагоцитов.

Электронно-микроског/ическн при остром отравлении пестицидами нами обнаружены многочисленные клетки лимфоцнгарного ряда, которые имели деструктивные изменения ядра и цитоплазмы. Также выявлена высокая функциональная активность макрофагов, в цитоплазме которых локализовались многочисленные вторичные лизосомы и гетерофагосомы с остатками фагоцитированных димфоидных клеток.

Изложенное указывало на то, что другой, причиной уменьшения плотности распределения клеток различных зон белой пульпы селезенки, и особенно ее периартериалыюй зоны, является повышение, степени деструкции клеток лимфоцитарного ряда. Нужно полагать,что высокая функциональная активность макрофагов явлается ответной реакцией на этот процесс .

Макрофаги лимфатических узелков селезенки выполняют различные функции: они представляют антиген в переработанном виде к Т- и В-лимфоцитам иммунной системы, являются основными утилизирующими клетками, очищающими организм от погибших клеток и их детритов (К.А.Зуфарюв, К.Р.Тухтаев, 1987; М.Вуг е1 а1., 1990; В.Нагпя е1 а1., 1990).

В наших опытах увеличение числа и повышение функциональной ак-

тивности макрофагов связано с усилением деструкции клеток лпмфоци-тарного ряда. Это может быть обусловлено как прямым деструктивным действием'псстицидов на клетку и целом и се субклеточные структур!,I, или же нарушением равновесия между процессами пролиферации и дифферсн-цнровки нммунокомпетентных клеток вследстшш нарушения регуляторных функций центральных органов (Р.В.Петров, 1978: О.К.Хмельницкий и др.. 1990).

Таким образом, острое отравление маврнком " фозалоном приводит к дезорганизации лпмфоидной ткани селезенки и уменьшению плотности распределения клеток в ее структурно-функциональных гонах. Эти изменения наиболее выражены в Т-завнснмых зонах органа и могут быть обусловлены как непосредственно токсическим влиянием самих пестицидов, так и нарушением регуляторных механизмов в иммунной системе. Вместе с тем, не исключается и включение аутоиммунных процессов в виде появления антител против собственных клеток под ьлпянием пестицидов (А.И.Николаев и др., 1988; C.L.Barri, 1988).

Хроническое отравление маврнком и фозалоном также сопровождалось однотипными изменениями в селезенке, которые, однако, были более выражены по сравнению с острой интоксикацией этими пестицидами. В селезенке преобладали явления отека, нарушения гемоцнркулпции и дезорганизации лчмфондной ткани органа. Обращали на себя внимание стертость границ лимфатических узелков н наличие участков лизиса и кровоизлияния в них. Как и при остром отравлении, хроническое отравление пестицидами сопровождалось снижением общего количества и площадей различных структурно-функциональных зон лимфатических узелков селезенки. Установлено небольшое различие по степени выраженности изменений количественных показателен белой пульпы селезенки при хроническом отравлении маврнком и фозалоном. Оно проявлялось в виде более умеренного .уменьшения числа и площадей различных структурно-функциональных зон белой пульпы селезенки при хроническом отравлении маврнком. Тем не менее, подсчет количества клеток на единицу площади зон при хронической пнто-сснкации указанными пестицидами показал несколько иные результаты. При хроническом отррвленич маврнком на фоне гемоциркуляторпых расстройств и дезорганизации лимфатических узелков селезеьки отмечено уменьшение числа лимфатических узелков почти в 1,7 раза по с равнению с контролем. При этом в наибольшей степени уменьшалось количество узелков с герминативными центрами. Аналогичное изменение числа лимфатических узелков выяелсно и при хронлческо: i отравлении фозалоном. Установлено, что в этом эг.спе-

рименге наиболее значительно (более чем в 2 разр) уменьшается число узелков без герминативных центров. Количественные показатели клеток различных структурно-функциональных зон белой пульпы селезенк-н изменялись неодинаково и зависимости от химической природы использованного для хронического отравления пестицида. При хроническом отравлении дгаориком выявлено достоверное снижение числа клеток на единицу площади практически по всех зонах, особенно выраженное в периартериалыюй зоне. В последней число клеток лимфоцитгрного ряда на единиму площади уменьшалось в 4-5,5 раза преимущественно за счет снижения числа лп.мфобластов. пролимфоцптов, больших и средних лимфоцитов. Практически во всех остальных зонах установлено уменьшение общего количества клеток лимфоцитарного ряда при достоверном возрастании числа клеток системы мононуклеарных макрофагов.

Хроническое отравление фозалоном сопровождалось аналогичными изменениями количественных показателей клеток различных структурно-функциональных зон белой пульпы селезенки. Вместе с тем, уменьшение числа лимфсбластов. пролимфоцитов и средних лимфоцитов в этих опытах было несколько менее выражено ( в 3-3,5 раза) по сравнению с хроническим отравлением мавриком. Уменьшение общего количества клеток в других зонах белой пульпы селезенки также было относительно менее выражено.

Морфологическая картина селезенки при хроническом отравлении мавриком и фозалоном в целом носила идентичный характер и проявлялась в виде дезорганизации лимфоидкой ткани селезенки, деструкции и лизиса различных зон лимфатических узелков, уменьшения плотности распределения клеток в них.

При электронно-микроскопическом исследовании селезенки животных с хроническим отравлением фосфорорганическими и хлороргани-ческими соединениями установлены определенные изменения как со стороны иммунокомпетентных, так и стромалыю-макрофагальных клеток. Отмечены деструктивные изменения в митохондриях и других органеллах лимфоидных клеток. Выявлены многочисленные макрофаги, содержащие вторичные лизосомы и остатки фагоцитированных клеток на различных стадиях деструкции. •

Таким образом, хроническое отравление пестицидами приводило к угнетению процессов лимфоцитоиезза в белой пульпе селезенки, о чем свидетельствовало нарушение гистотопографии белой пульпы селезенки и уменьшение абсолютного числа клеток лимфоцигарного ряда в различных ее зонах. Все это сопровождалось возрастанием степени деструкции лим-

фондных клеток и их субклеточных органелл. повышением функциональной активности клеток моиоцитарпо-макрофагалыюго ряда.

Полученные данные послужили основанием для поиска наиболее рациональных способов коррекции иммуноморфологическпх нарушений при интоксикациях фосфорорганпческимн и хлор-органическими пестицидами.

Одним нч классических препаратов, который п течении длительною времени используется для повышения общей сопротивляемости организма, является аскорбинопая кислота (витамин С). В настоящее время установлено, что витамин С является эффективным корригирующим препаратом для стимуляции различных звеньев иммунитета, особенно при дисбалансах между Т- и В-системами иммунитета (К.Д.Плсцитый, 1979, 1986). Доказано, что аскорбиновая кислота оказывает иммувомодулирующий эффект при хронических гепатитах и различных интоксикациях ( А.И.Николаев, 1988; В.С.Васильеп и др., 1989).

Линосвая кислота (6,8 днтиооктановая кислота) участвует в регулировании лшшдне.го и углеводного обмена, оказывает липотроиный эффект, улучше.ет функцию печени, оказывает детокепцирующее влияние при различных отравлениях (И.М.Трахтенберг и др., 1974; В.Н.'Гоцкий, 1976). Указанные препараты, как показано в отдельных исследованиях, окрзыг?ли дезинтоксикационный эффект при отравлениях пестицидами (А.У.Садыков и др., 1993).

За последние годы синтезирован ряд металлокомплсксов, который обладает иммунокорригпрующим. эффектом при иммунодефицитных состояниях (А.А.Батырбеков и др., 1989,1991,1994; А.Р.Сирота, 1995).

Также показана эффективность отдельных металлосодержащих полиэлектролитов для иммунокоррекции при интоксикациях различными пестицидами (А.Р.Сирота и др., 1990; А.А.Батырбеков и др., 1989). При остром и хроническом отравлении фозалоном установлено выраженное положительное действие биокомплекса кобальта (бисаква,трис гидрат метилмстиошшат сульфония хлорид, ! юнозамещенный глютаминатом кобал1,та) на состояние кроветворной системы (Н.Р.Нуритов, 1993). Все это послужило основанием для апробации биологически активных веществ в целях коррекции структурных нарушений селезенки при хронических интоксикациях пестицидами.

Введение только аскорбиновой кислоты животным с хроническим отравлением мавриком не оказывало существенного влияния на морфологические и морфометрические показатели селезенки. Отмечено умеренное, но недостоверное увеличение числа лимфатических узелков и площадей

их различных структурно-функциональных зон. Выявлено небольшое увеличение количества плазматических клеток в периартериальной зоне. Ультрастрчктурные исследования показал» сохранность функциональной напряженности клеток лимфоцитарного ряДа и деструктивных изменений их органелл. Все это свидетельствовало о том. что коррекция аскорбиновой кислотой оказывала незначительный положительный эффект на--структурно-функциональное состояние белой пульпы селезенки в условиях хронического отравления мавриком.

Введение липосвоп кислоты оказывало несколько более выраженный положительный эффект на структурное состояние белой пульны селезенки . при этом же эксперименте. При этом на фоне сохранности явлений дезоргашиацки лимфатических узелков отмечалось умеренное повышение их числа по сравнению с группой без коррекции. Лппоевая кислота приводила к более выраженному, чем аскорбиновая,увеличению площадей различных зон белой пульпы и возрастанию содержания клеток лимфоцита р! ¡ого ряда в них. При этом в наибольшей степени возросло чнело.кле-ток в периартериально.ч зоне. Электронно-микроскопичсскн выявлено некоторое снижение деструктивных изменений цитоплазмы клеток лнмеро-цитарного ряда, хотя в отдельных.клетках сохранялись признаки деструкции ядра и цнтонлазматнческих органелл.

Таким образом, лшюсвая кислота оказывала относительно более выр- • аженный но сравнению с аскорбиновой кислотой положительный эффект на структурное состояние лимфатических узелков селезенки, особенно их периартериальной зоны. По-видимому, это объясняется мембраностабили-зпрующим. антитоксическим и гепатотрадиым действием данного препарата (А.Э.Соколовская, 1976).

При хроническом отравлении мавриком наиболее выраженные структурные и морфометричеекпе перестройки были установлены в результате коррекции смесыо аскорбиновой и липоевой кислот. При этом существенно снижалась степень дезорганизации и деструкции лимфатических узелков. Число последних увеличивалось и достигало нижних границ контрольных показателен. Также выявлено достоверное увеличение площадей различных зон белой пульпы, особенно, её периартериальной зоны. Установлено выраженное повышение плотности распределения клеток во всех зонах лимфатических узепков. При этом достоверно возрастало число клеток лимфоцитарно-плазмоцнтарного рядов, а количество клеток макрофа-гальной системы уменьшалось. Однако, число деструктивных клеток во всех зонах все еще сохранялось на достаточно высоком уровне.

Изложенное показывает, что при хроническом отравлении мавриком

наиболее эффективным является применение смеем обоих кислот, которое способствует восстановлению клсточности различных зон белой пульпы селезенки и умеренному снижению степени деструктивных изменений в них.

Несколько иные данные получены при коррекции животных с хроническим отравлением фозалоиом. Учитывая малую эффективность использования вышеуказанных кислот в отдельности, при хроническом отравлении фозалоно.м коррекцию проводили.смесью указанных кислот. Результаты показали, что коррекция смесыо обоих кислот при хроническом отравлении фозалоиом оказало незначительное положительное влияние па структурные белой пульпы селезенки. Отмечалось умеренное, но недостоверное увеличение числа и площадей лимфатических узелков. Количество клеток, в частности средних и малых лимфоцитов, но всех зонах, особенно в периартериальной зоне, имело тенденцию к возрастанию. В то же время деструктивные изменения клеток лимфоцитарного ряда сохранялись на достаточно высоком уровне. Все это указывало на умеренно кыртженнос положительное влияние смеси использованных кислот на структурное состояние белой пульпы селезенки при хроническом отравлении фозалоиом.

Наиболее положительные морфологические сдвиги в лимфоидной ткани селезенки в условиях хронического отравления фозалоиом обнаружены при введении смеси указанных кислот в сочетании с биокомплексом кобальта. В результате згой коррекции отмечено выраженное снижение степени дезорганизации и деструкции лимфатических узелков. Число лимфатических узелкоп достоверно увеличивалось по сравнению с животными без коррекции. Увеличивалась также площадь практически всех лруктурно-функциональных зон, и особенно, герминативных центров и териарТериальных зон. В периартериальной зоне существенно возрастало шело лимфобластов'и пролимфоцитов (более чем в 2 раза) и плазмати-1еских клеток (в 1,8 раза). Существенно уменьшалось число клеток юноцитарно-макрофагалъной системы во всех зонах. Электронно-микро-копически обнаружено уменьшение частоты выявляемости деструктивных [зменений субмикроскопических структур иммунокомпетентных и строма-ьных клеток.

Таким образом, сочетанная коррекция со смесью аскорбиновой, ипоепой кислот и биокомплекса кобальта при хроническом отравлении )озал. ном способствовала восстановлению структурных зон белой пульпы глезенки, существенно снижала степень гипоплазии Т-зависимой периар-гриальной зоны и уменьшала частоту деструктивных изменений строма-

.:¡,:u.¡x и имм^юкомиетентвых клсгок. Механизм положительного эффекта ;/¡oií сочетлнчой коррекции не может быть объяснен однозначно. Известно, что бнокомплекс кобальта обладает автидотным действием при отравлении фозапоиом, :i также повышает пролнферагнвную активность гемоно-этпческнх и нммуиокомпететных клеток (Н.Р.Нурнгов, 1993), Эти качества бнокомплекса, потеншфоланные иммуностимулирующими, мембраиостабнлиз11р)!01Цнмн, гепатотронпымн и дезинтоксикационнымн свойствами использованных витаминов, по-видимому, и обеспечили более чыражс.чный положительный эффект сочеташюй коррекции при хроническом отравлении фозатоном.

ВЫВОДЫ

1. Острое отравление мавриком н фозалоном на 3-10 сутки вызывает однотипные изменения в белой пульпе в виде уменьшения числа и размеров лимфатических узелков, повышения степени деструкции лнмфоидных клеток и их субклеточных органелл. усилении функциональной активности клеток махрофагалыюм системы. Эти изменения наиболее выражены и 'Г-зависимых нериартерпильных зонах, белой пульпы.

2.0страя интоксикация пестицидами сопровождается уменьшением абсолютного и относительного числа лимфобластов, средних и малых лимфоцитов и 2-3 раза, в тоже время содержание клеток макрофагальной системы и тканевых гранулоцитос в селезенке повышается.

3. Хроническое отравление мавриком приводит к выраженной дезорганизации и гипоплазии структурно-функциональных зон белой пульпы селезенки, обусловленной усилением деструкции их клеток. При этом выявляется достоверное уменьшение абсолютного числа клеток лимфоци-тарного ряда, наиболее выраженное в периартсриальной зоне. Повышение числа клеток макрофагальной системы сочетается с высокой их функциональной активностью.

4. Коррекция аскорбиновой и лнпосвой кислотами в отдельности при хроническом отравлении мавриком оказывает незначительный потожите-Лоный эффект на количественные и структурные показатели лнмфоидной ткани селезенки. Коррекция смесью указанных кислот способствует более существеному уменьшению деструктивных изменений в клетках лимфоцита рного ряда и восстановлению структурных зон бетой пульпы селезенки:

- достоверно повышается число лимфобластов, пролимфоцитов, средних, малых лимфоцитов и плазматических клеток;

- количество моноцитов, макрофагов и тканевых гранулоцнтов уменьшается.

М

5. Хронической отрявление фозалопом соггропох-дастск дезорганизацией и гипоплазией белой пульпы селезенки, особенно, ее пернаргериа-льной зоны. При этом коррекция смесью аскорбиновой н липоевон кислот оказывает умеренно выраженный эффект, тогда как сочеташюе мсполь-зование смеси этих кислот вместе с биокомплексом кобальта способствует значительному восстановлению структурных и морфометрическнх показателей лнмфоидной ткань органа:

- во всех зонах, особенно в периартериальной зоне, повышается число лимфобластоп пролимфоцитоп и плазматических клеток при уменьшении количества клеток макрофагальной системы;

- уменьшается частота выявлясмости деструктурных изменений субмикроскопических структур иммутюкояпетептшм клеток.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ НО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. М.Ф.Маматназарова, К.Р.Тухтаев, М.А.Абдурахмонов. Ультраструктурные особенности периферических органов иммунной системы при воздействии пестицидов // Материалы III научно-практической конференции. -Ташкент, 1994. - С. 190-191.

2. К.Р.Тухтаев, М.Ф.Маматназарова, К.Р.Очилов. Морфологические и морфометрическне особенности селезенки при интоксикации пест! цид1ми в эксперименте // Сб.науч. трудов "Функциональная морфология ппутрен-них органов,тканей и клеток в клинике и эксперименте". - Ташкент, 1995. -С. 169-172.

3. М.Ф.Маматназарова, К.Р.Тухтаев, М.А.Абдурахмонов, Б.Хотамов. Морфологические перестройки селезенки при воздействии пестицидами и некоторые пути их коррекции // Материалы Республиканской научно-практической конференции " Актуальные проблемн современной медицины." - Бухара, 1995. - С. 29.

4. Х.Азизов, М.А.Абдурахмонов, М.Ф.Маматназарова и др. Цитологическая характеристика Т-зависимых зон иммуногенеза прн хронических интоксикациях //Узбекский биологический журнал, 1996. -К 1-2. -С. 72-75.

5. М.Ф.Мамзтназарова. Структурние особенности реакции селезенки на возденет вин пестицидов и пути ее коррекции // Материалы IV научно-практической конференции. - Ташкент, 1996. - С. 25.

ТАЛОК.НИНГ ПЕСТИЦИДЛАР ТАЪСИРИГА НИСБАТАЫ РЕАКЦИЯСИНИНГ МОРФОЛОГМК ХУСУСИЯТЛАРИ ВА УЛАРНИ ТУЗАТИШНИНГ БАЪЗИ ЙУЛЛАРИ

М.Ф.Маматиазарова ХУЛОСА

Итшшгасосна мак,сади тплоцшшг хлорооргаинк (маврик) вафосфоро-оргаиик (фомлон) пестшдидлар билач уткпр на суруикалн захарланганнда кузлтп.ч 1ДИП1П морфологпк узгарншларпнн ашщллш ва уларни тузатиш йулларшш шпллб чик,ншдир.

Тажрибалар огнрлшп 140-200 г булган 137 та о к, каламушларда олиб борилди. Уткир захарлашип маврнкни (14 мг/кг) вафозалонни (5.2 мл/кг) пахта егидп бир марта ошцозин нчнга юборша пули бплан чак.прилдн. Суруикалн за\арланиш маприкни (2,8 мг/кг) ски фозалонни (1',04 мг/кг) х,айвонларга хар куш) 30 кун мобайнида муптазам бсрилиб чакирилди. Маврик бплан сурункали за\арлапгандаги узгарншларии тузатиш у тун пскорОнн кислотлси (3 мг/кг), ски липой кислота (1,5 мг/кг), ски ушбу кислотпларпкнг арллашмасн шнлатплди. Суруикалн фозалон билан ззхар-ллпгапдаги узгаршпларни тузатиш учун курсатилган кнслоталаршшг ара-лашмаси ски ушбу кнслоталар орллашмаси кооалтбиокомплекси (10 мг/кг) билан бичгллнкда кулланилдн. Барча тузатиш учун ишлатплган модцалар суруикалн за\арла|г.Н11дап сунг мунтазам равншда 30 куп мобайнида юбори-лди. Талок, тукнмасп уткпр, суруикалн злхарлачгандан ва тузатусчи модцалар берилгандан сунг м.тьлум муддатларда морфологик, морфомстрнк ва электрон мнкроскопик услублар ердамида урганилдп. Маврик ва фозало I билан уткпр захарланнш талоцнннг лимфоид тук,имаснда бир бирига ухшаш >/згарншларга олиб келдп. Улар лимфоид тукимашшг, хусусан, унпнг пернартернал цнемшымг гипоплазписн, иммунитет хужайраларнпнг ва ху-жанра органеллаларшшнг деструкцияси енфатида намоси булдп. Пестиинд-лар бплан суруикалн захарланганда юкоридаги узгаришлар чукуррок. нфода-ланди.Курсатилган узгаришларнн тузатиш учун берилган моддаларнинг таъсири турлн хил пестииидлар учун 1урлича эканлнги аннкландн. Маврик билан суруикалн захарланганда кнслоталар аралашмасининг, фозалон билан захарланганда эса шу кнслоталар аралашмасининг кобальт биокомплекси билан биргаликда ишлатнлиши яхши ижобий натижа бернши курсатнлди. Олинган натижалар тузатувчн моддаларнинг пестицидлар билан захарла-нишнин,- олдини олишда ва уларни даволашда истик,боллу, эканини тас-дикладл.

STRUCTURAI. PRINCIPLES OF TUF REACTION OF SPLEEN AT THE INTOXICATION IÏV ÎM'.S I IC'IDKS AND SOMK WAYS OF THEIR CORRECTION

M.EMamatnazarova SUMMARY

The purpose of this work was to study of the structural peculiarities of the spleen at die acute and chronic intoxications by chlorinco.-ganic (mavrik) and phosphororganic (pho/alon) pesticides and to devise some ways of their correction.

The experiments were carried out on 137 white rats with weight of body 140-200 g. The acute intoxication was induced by single introjzastric inirodtice of mavrik (14 mg/kg) or phozalon (5,2 mg/kg) in vegetable oil. The chronic intoxication was induced by daily intragastric introduce of mavric (2,8 mg/kg) or phozalon (1,04 mg/kg) during 30 days. For the correction of the changes at the chronic intoxication by mavric ascorbic acid (3 mg/kg), or lipoie acid (1,5 mg/kg) or mixtuic both of these acid were used. In the cases of the chronic intoxication by phozalon the mixture both of acids without or in combination with biocomplex of cobalt (10 mg/kg) were used. Treatment with all these agents were carried out during 30 days after chronic intoxication by pesticides. linir-air^cnt and intact rats were used as controls. The spleen all the rats were studied by morphological,niorphomethrical and electrone microscopical methods. It was showed, that the acute intoxication by the both of pesticides is accompanied with similarly changes in the white pulps of the spleen, such as deso.-ganization and hypoplasia of the lymphatic tissue of spleen, especially of it's periarterial zones. The degree of destruction processes of immunocompetent cells and their organelles was increased, identically, but more pronounced alteration were noted in the rats with chronic intoxication by pesticides. The comparative analisis showed, that at the chronic intoxication by mavrik correction with mixture both of ascorbic and lipoic acids was more effective. However, in the cases of the chronic intoxication by phozalon markedly positive effect was found after treatment by the mixture both of acids in combination with the biocomplex of cobalt. The obtained datas may be served as experimental basis to use these agents for the prevention and treatment at the intoxications by pesticides.