Автореферат и диссертация по медицине (14.04.02) на тему:Сравнительное фармакогностическое исследование долговегетирующих видов рода Euphrasia L. флоры Пермского края

ДИССЕРТАЦИЯ
Сравнительное фармакогностическое исследование долговегетирующих видов рода Euphrasia L. флоры Пермского края - диссертация, тема по медицине
АВТОРЕФЕРАТ
Сравнительное фармакогностическое исследование долговегетирующих видов рода Euphrasia L. флоры Пермского края - тема автореферата по медицине
Кроткова, Ольга Александровна Пермь 2012 г.
Ученая степень
кандидата фармацевтических наук
ВАК РФ
14.04.02
 
 

Автореферат диссертации по медицине на тему Сравнительное фармакогностическое исследование долговегетирующих видов рода Euphrasia L. флоры Пермского края

На правах рукописи

Кроткова Ольга Александровна

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ДОЛГОВЕГЕТИРУЮЩИХ ВИДОВ РОДА EUPHRASIA L. ФЛОРЫ ПЕРМСКОГО КРАЯ

14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

з О А В Г Ш1

Пермь 2012

005046775

Диссертационная работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Научный руководитель: кандидат фармацевтических наук, доцент

Бомбела Татьяна Владимировна

Официальные доктор фармацевтических наук, профессор

оппоненты: фурса Николай Сергеевич

ГБОУ ВПО «Ярославская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России

кандидат фармацевтических наук, доцент

Калина Милитина Александровна

ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздравсоцразвития России

Ведущая организация: ГБОУ ВПО «Самарский государственный

медицинский университет» Минздравсоцразвития России

Защита состоится «18» сентября 2012 г. в 13.00 часов на заседании Диссертационного совета Д 208.068.01 при ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздравсоцразвития России по адресу: 614990, г. Пермь, ул. Полевая, д. 2. Тел./факс (342)233-55-01

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке при ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия»

Минздравсоцразвития России по адресу: 614990, г. Пермь, ул. Крупской, д. 46.

Автореферат разослан « августа 2012 г.

Дата размещения объявления о защите диссертации на сайте Министерства образования и науки РФ http://www.mon.gov.ru «августа 2012 г. и на сайте ГБОУ ВПО ПГФА Минздравсоцразвития России http://www.pfa.ru авгута 2012 г.

Учёный секретарь

диссертационного совета,

кандидат фармацевтических наук, *

доцент И.А. Липатникова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одной из приоритетных задач здравоохранения является расширение ассортимента отечественных лекарственных средств за счет внедрения в лечебную практику новых лекарственных растений. Как известно, фитопрепараты по эффективности не уступают синтетическим аналогам, они благоприятно действуют иа организм при длительном применении, используются в реабилитационный период у всех возрастных групп.

Перспективными объектами для изучения являются растения рода Очанка, источники высокоактивных природных соединений, издавна используемые в народной медицине для лечения заболеваний глаз, верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта. Некоторые виды рода Очанка являются официнальными в Европейских странах. Трава очанки Ростковиуса включена в фармакопею Германии, а очанки лекарственной в Британскую травяную фармакопею. В Польше являются официнальными виды очанка Ростковиуса и очанка прямая. Они отпускаются аптеками под торговым названием «НегЪа ЕирИгахше» и используются в традиционной медицине этих стран как противовоспалительное, вяжущее и антисклеротическое средство.

В результате ранее проведенных в Пермской государственной фармацевтической академии исследований было установлено, что виды рода Очанка (о. коротковолосистая, о. Рейтера, о. мелкоцветная) имеют близкий химический состав продуктов вторичного обмена, обладают гипотензивной, противовоспалительной, антимикробной, противолейкемической активностью, сочетающейся с низкой токсичностью. По итогам исследований разработан проект фармакопейной статьи «Очанки трава»,

Однако исследования химического состава продуктов первичного обмена у представителей рода Очанка носят фрагментарный характер, так как проводились в отношении только некоторых групп биологически активных веществ (БАВ).

Для современного производства фитопрепаратов необходима гарантированная сырьевая база, которую можно обеспечить за счет использования морфологически близких видов рода Очанка, произрастающих совместно. Во флоре Пермского края встречаются 11 представителей, особое внимание заслуживают долговегетирующие (позднецветушие) виды, как широко распространенные, образующие значительные заросли, имеющие максимальный габитус, а соответственно и сырьевую массу.

В связи с этим представляется актуальным комплексное фармакогностическое исследование долговегетирующих видов рода Очанка, произрастающих в Пермском крае, и обоснование возможности их использования в качестве дополнительных производящих растений, а также изучение распределения и накопления продуктов первичного метаболизма и пигментов в растениях рода Очанка.

Цель работы. Целью работы является сравнительное изучение морфолого-анатомического строения и химико-фармакологических свойств

долгавегешрующих видов рода Очанка (Euphrasia L.), встречающихся во флоре Пермского края, н обоснование возможности их использования в медицинской практике.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели предусматривалось решение следующих задач:

изучить морфолого-анатомическое строение перспективных видов рода Очанка (о. лекарственной, о. татарской, о. прямой, о. Мурбека), провести сравнительный анализ с ранее изученными видами (о. Рейтера, о. коротковолосистой и о. мелкоцветной) и выявить диагностические признаки лекарственного расти тельного сырья (ЛРС);

провести сравнительный фитохимический анализ продуктов вторичного метаболизма четырех ранее не изученных видов рода Очанка, установить константные компоненты, которые могут быть использованы в качестве химических маркеров рода, а так же в аналитических целях;

установить нормы числовых показателей ЛРС и обосновать возможность использования в качестве дополнительных производящих растений перспективных видов, разработать изменение к ФС «Очанки трава»:

исследовать качественный состав, количественное содержание и закономерности накопления в растениях рода Очанка продуктов первичного метаболизма (аминокислот, углеводов, липофильных веществ) и пигментов;

разработать методику количественного определения углеводов, позволяющую проводить сравнительную оценку их содержания в растениях рода Очанка;

изучить фармакологические свойства и острую токсичность долговегетирующих видов рода Очанка.

Научная новизна. На основании макро- и микроскопического анализа растений рода Очанка установлен комплекс диагностических признаков морфолого-ai ¡атомического строения, позволяющий проводить дифференциальную диагностику морфологически близких видов. Получены объективные иллюстрации анатомо-диагностических признаков в виде оригинальных микрофотографий.

Проведено сравнительное фитохимическое исследование продуктов вторичного метаболизма очанки лекарственной, о. татарской, о. Мурбека и о. прямой. Выявлены особенности внутри- и межвидовой изменчивости компонентного состава и количественного содержания основных групп БАВ в растениях рода Очанка. Показана необходимость выделения и использования константных, аналитически значимых компонентов при разработке нормативной документации.

Изучен компонентный состав и количественное содержание продуктов первичного обмена и пигментов очанки лекарственной, о. татарской, о. прямой, о. Рейтера, о. Мурбека, о. коротковолосистой и о. мелкоцветной. Показано, что данные виды могут быть использованы в качестве источников углеводов, аминокислот, каротииоидов. хлорофиллов, жирных кислот и других веществ.

Проведен фармакологический скрининг перспективных видов рода Очанка, установлено антикоагулянтиое и антирадикальное действие, сочетающееся с низкой токсичностью.

Практическая значимость. Доказана целесообразность использования очанки лекарственной, о. татарской, о. Мурбска и о. прямей к качестве дополнительных производящих растений. Перспективные ниды включены в проект изменения к «Очанки трава».

Материалы диссертационного исследования но теме «Морфолого-анатомическое строение растений рода Очанка, произрастающих в Пермском крае» использованы при разработке иллюстрированного методического пособия, которое рекомендовано студентам, интернам, аспирантам для учебного процесса, а так же биологам; провизорам и врачам для практической деятельности.

Научно обоснована целесообразность использования растений рода Очанка для получения препаратов, оказывающих антикоагуляитное и антирадикальное действие.

Разработана методика количественного определения углеводов и сырье очанки, позволяющая проводить поэтапное определение содержания низкомолекулярных Сахаров и полисахаридов, а также их суммы из одной навески.

Положения, выносимые на защиту: результаты морфолого-анатомического изучения растений рода Очанка и разработка характеристик подлинности ЛРС; фитохимического изучения продуктов вторичного метаболизма перспективных видов о. лекарственной, о. татарской, о. Мурбека и о. прямой, их распределение и накопление в зависимости от условий произрастания; данные сравнительного изучения продуктов первичного метаболизма и пигментного состава долговегетирующих видов рода Очанка флоры Пермского края; результаты разработки методики количественного определения углеводов в сырье очанки; итоги фармакологических исследований перспективных видов рода Очанка.

Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на: ежегодных научных конференциях студентов и молодых ученых Пермской государственной фармацевтической академии (Пермь. 2006, 2007, 2008. 2009, 2010, 2011, 2012); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Актуальные проблем!»! современной науки и образования» (Уфа, 2010); Российской научно-практической конференции «Создание лекарственных средств на основе продуктов природного происхождения» (Пермь, 2010); Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежная наука и современность» (Курск, 2011); Конкурсе «Молодежная инновационная медицина XXI века», проходившем в рамках конгресса «Здравоохранение Российской Федерации, стран СНГ и Европы» (Москва, 2011); Научно-практической конференции с международным участием «Актуальные проблемы науки фармацевтических и медицинских вузов: от разработки до коммерциализации» (Пермь, 2011).

Публикации материалов исследования. По результатам исследований опубликовано 30 работ, которые отражают основное содержание диссертации, из них 5 в рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК,

Связь задач исследовании с проблемным «лаком фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с- планом научных исследований Пермской государственной фармацевтической академии (номер государственной регистрации 01.9.¡0018875).

Конкретное участие автора в получении научных результатов. После обобщения современных данных литературы, автором осуществлено сравнительное морфологс-анатомическое исследование растений рода Очанка: проведено изучение качественного состава и количественного содержания веществ вторичного (флавоноидов, иридоидов. фенолкарбоновых кислот), первичного (аминокислот, углеводов, липофильных веществ) метаболизма и пигментов; разработана методика количественного определения углеводов в сырье очанки, позволяющая проводить поэтапное определение содержания низкомолекулярных Сахаров и полисахаридов, а также их суммы из одной навески; установлены отдельные фармакологические свойства растений рода Очанка.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 208 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (1 глава), материалов к методов (2 глава), экспериментальной части (4 главы), общих выводов, списка литературы и приложения; иллюстрирована 43 рисунками и 41 таблицами. Список литературы включает 297 источников, из них 31 на иностранных языках.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Объекты и методы исследовании

Объектами исследования служила надземная часть с корнями дикорастущих, однолетних, травянистых растений семи видов рода Euphrasia: Е. officinalis L. - о, лекарственная; Е. tatarica Fisch, ex. Spreng. - о. татарская; Е. striata D. Wolff ex. J.F. Lehm. - о. прямая; Е. х reuteri Wettst. - о. Рейтера; Е. х murbeckii Wettst. - о. Мурбека; Е. brcvipila Burn, et Gremli -о. коротковолоснстая; Е. parviflora Schag. - о. мелкоцветная. Образцы заготовлены в фазу цветения - начало плодоношения в период с 2003 по 2009 гг. преимущественно в Уральском регионе.

Морфолого-анатомическое строение изучали на свежем и гербарном материале (35 - 50 образцов) по общепринятым методикам (ГФ XI).

Качественный состав и количественное содержание БАВ исследовали с помощью современных методов и приемов фотохимического анализа: избирательная жидкостная экстракция, хроматография на бумаге (БХ.) и в тонком слое (ТСХ), хромато - масс - спектрометрия (ГХ/МС), фотоэлектроколориметрия, спектрофотометрия.

Исследование липофильных веществ проводили в лаборатории Пермского краевого бюро судебно-медицинской экспертизы, с помощью ГЖХ на приборе Hewlett - Packard 5S90/II (США) с квадрупольным масс-спектрометром (MS) (HP MSD 5971), вещества идентифицировали путем

сравнения времени удерживания и полных масс-спектров с соответствующими данными библиотеки Wiley275 и N1ST98.

Для оценки антирадикальной активности использовали реакцию со свободным стабильным радикалом дифенилпикрилгидразилом (ДФПГ). Антикоагулянтную активность исследовали in vitro с помощью коагулометра «Minilab-701». Оценку острой токсичности сухих спиртовых экстрактов определяли на нелинейных белых мышах массой 17-25 г при вн)'трижелудочном введении. Для обработки полученных данных использовали статистический анализ.

Морфолого-анатомические особенности растений рода Euphrasia

Сравнительный анализ морфолого-анатомических признаков долговегетирующих видов рода Очанка показал, что, несмотря на принадлежность к различным подсекциям, изучаемые виды имеют общие признаки строения. Ни один признак не обладает абсолютной таксономической и диагностической ценностью. Для надежного определения вида и диагностики лекарственного растительного сырья необходимо использовать комплекс низковариабильных признаков, имеющих достоверные отличия. Результаты включены в изменение к проекту ФС «Очанки трава».

Диагностическими признаками морфологической структуры являются: для стебля — длина и ветвистость, длина максимального бокового побега, отношение длины стебля к длине максимального бокового побега; для листа -форма и количество зубцов на листовой пластинке, остистость зубцов стеблевых и прицветных листьев; для цветка — длина венчика, длина нижней губы венчика, отношение длины венчика к длине нижней губы, степень рассечения лопастей верхней губы; длина соцветия; для плода - форма, глубина выемки.

Диагностическими признаками анатомической структуры являются: для листа — сочетание типов трихом, толщина столбчатого и губчатого мезофилла; для стебля - диаметр, отношение толщины первичной коры к радиусу, отношение толщины флоэмы, перицикла, камбия к радиусу, отношение толщины ксилемы к радиусу, число рядов клеток ксилемы, отношение диаметра сосудов к радиусу стебля; для корня - диаметр, отношение толщины перидермы к радиусу корня, отношение толщины флоэмы к радиусу, отношение толщины ксилемы к радиусу.

Химический состав и распределение продуктов вторичного метаболизма у представителей рода Euphrasia

На основании результатов хроматографического анализа установлен состав и характер распределения основных групп БАВ по органам растений: флавоноидов, фенолкарбоновых кислот и иридоидов в четырех, ранее не исследованных видах рода Euphrasia: Е. officinalis, Е. latarica, Е. х murbeckii и Е. stricta (табл. 1). С помощью аутентичных образцов доказано наличие цинарозида, хлорогеновой кислоты и аукубина.

Таблица 1

Хроматографическая характерист'нка БАВ растений рода Euphrasia L.

№ вещества Значение Rf Е. ofßcinalis Е. tatarica Е. * murbeckii Е. stricla

КУБ, 4:1: 2 ж о Q О U трава ! J s * S ЛИСТЬЯ 1 цветки | ПЛОДЫ 1 трава | 3 о. о У. | стебли j Г 1 листья j цветки плоды cd s Cd Э" ъ к ю CJ н о 1 ЛИСТЬЯ j Ö и а Г плоды CS и С. | корни ID <u b j ЛИСТЬЯ а н У га Я 1 ПЛОДЫ

Фласоноиды

1 0,21 0,31 + + -f -г + + + + + 4 4 + + + + + + + + + + 4. +

2 0.22 0,74 + 4 + + 4 + 4 + + + + + + + +

3 0,24 0,38 + + + + + 1 + + + + + + + + + + + + + +

4 0,32 0,16 + + + + + + + 4- 4 + 4- + + + + + + + + + + +

5 0,32 0,47 + ■н + + + + 4 4 + + +

6 0,42 0,30 1 + л. + 4- + + + + 4- + + + + + + + + 4.

7 0,43 0,18 + + + + + + + + + 4 4 + + + + + + + +

8 0,53 0,32 + + л. + + + 4 + 4 4 + + + + + -t- + +

9 0,56 0.56 + -t- + + + + + 4 + + + Ч- + + + + + + + + + +

10 0,25 0,69 + + + + 4 + + + + + + +

11 0,74 0,77 + + + + + + +

12 0,32 0,52 + 4- 4

13 0,11 0,45 + + 4 + +

14 0.07 0,08 + +

Фснолкарбоповые кислоты

Г 0,45 0,74 + 1 + + + + 4 + 4 j

2 0,48 0,64 + + т + + + + 4 4 + + _L

3 0,55 0,69 + + + ■i- + + + + 4 4 4- 4 +1 + + + +

4 0,66 0,69 -г + + 4- + + + + 4 + + 4 + 4. + + + + + + + + + +

5 0,7S 0,83 + + + + + + + + + + + +

6 0,23 0,86 I + + +

7 0,58 0.40 1 + + + + + + -г +

8 0,79 Ö.6V 1 1 + + + + + + + + + + +

9 0,78 0,32 1 + + 4-

Ирпдоидм

1 0,13 ___ + + + -ь + + + + 4- 4 4 О. + + + + + + + + + + +

2 0,22 — + + + + 4- 4 + + + + + + + + + + + + + +

3 0,26 — + + 4- + + + + + 4 + 4 4 + + + + + + + + + -h + +

4 0,37 — + + + + + -г 4 4 4 4 + + + +

5 0,41 — + + 4- + + 4- + + 4 + + + + + + + + + + + + + + +

С 0.56 — + + + + 4- + 4. + + + + + + + + + +

7 0,78 + + 4- + + + + 4- 4 4- -г ■f + + + + + +

Примечание: * 15% CHjCOOH используется для анализа флавоноидов, 2% СН3СООН -фвволокислот. Значения Rf PCO цинарозида в системе: БУВ, 4:1:2 - 0,32; СНзСООН, 15% -0,17; значение Rf PCO хлорогеновой кислоты в системе БУВ, 4:1:2 - 0,65; СН3СООН, 2% -0,68; значение Rf PCO аукубина в системе БУВ, 4:1:2 — 0,41.

Сравнительный фитохимический анализ изученных видов показал, что флавсноидный состав является близким и представлен 14 веществами. Типичными для данного рода являются девять веществ, в том числе цинарозид. Наиболее разнообразный состав флавоноидов (13 веществ) отмечен у

E. latarica, несколько беднее у Е. х murbeckii и Е. slricta (11 веществ), минимальное количество найдено в траве Е. officinalis (9 веществ).

У изученных видов обнаружено 9 фенолкарбоновых кислот. Сравнительный хроматографический анализ показал, что компонентный состав исследуемых видов варьирует от четырех до шести веществ. Близкий химический состав установлен для Е. officinalis и Е. latarica, а так же для Е. х murbeckii и Е. stricta. Данные пары видов характеризуются наличием четырех совпадающих веществ. Постоянным компонентом рода Euphrasia является хлорогеновая кислота.

Компонентный состав иридоидов четырех видов очанок представлен 7 веществами. По качественным реакциям на хроматограммах эти соединения разделены по окраске пятен на две группы. Вещества группы А (1 -4) проявляются только реактивом Бэкона — Эдельмана, что указывает на их принадлежность к иридоидным соединениям подгруппы каталпола. Вещества группы Б (5 - 7) проявляются как реактивом Бэкона - Эдельмана, так и другими реактивами, что подтверждает их принадлежность к подгруппе аукубина. Сравнительный фитохимический анализ четырех видев Очанок показал, что их иридоидиый состав имеет близкое значение. Постоянными компонентами данного рода являются четыре вещества, в том числе аукубин. Наиболее разнообразный состав (6 веществ) обнаружен у Е. officinalis и Е. stricta. Компонентный состав Е. latarica и Е. х murbeckii представлен шестью иридоидными веществами.

Исследовано количественное содержание флавоноидов, окисляемых веществ и иридоидов (рис. 1). Установлено, что наибольшее количество накапливается в траве и органах Е. *murbeckii, а наименьшее в Е. officinalis и Е. stricta. Среднее содержание БАВ (флазоноиды — 6,11%; иридоиды — 0,33%; окисляемые вещества - 7,81%), установленное для рода, характерно для Е. tatarica.

Сравнительный анализ компонентного состава БАВ показал, что исследованные виды характеризуются незначительной вариабельностью флавоноидного и иридоидного пула внутри рода Euphrasia. Константными компонентами являются девять флавоноидных и пять иридоидных веществ, в том числе цинарозид и аукубин. Накопление фенолкарбоновых кислот сильно варьирует внутри рода, типичным компонентом является хлорогеновая кислота. Идентифицированные вещества являются химическими маркерами рода Euphrasia, значение коэффициентов их распределения можно использовать в аналитических целях.

Сравнительный анализ внутривидовой изменчивости четырех видов рода Euphrasia проведен на образцах, собранных в Уральском регионе. Установлено, что на компонентный состав флавоноидов, фенолкарбоновых кислот и иридоидов не оказывает влияние местообитание растения. Сходство, вероятнее всего, обусловлено онтогенетическими факторами, а незначительные различия в количественном содержании влиянием экологических условий произрастания.

£

n 6

a 1 3.1

v

C,.B <■

i pctbti корни с;е6ли листья цоежи плоды Е. officinalis

.1 г i.12

п

Г, ¿J

^ CL 53 1.1 Л

гг .10

8

6 ^

2 0

11.2 И 7

jjv г

_ it® rlifes L

I ров-j корпи Стебли ЛНС1Ы1 цветки плоды

Е. tatarica

Э 15

Щ «

я я й а.

а,-«

о О

10

jO.f'li

1u.5j

1н.7г, ' 12.27

Ш

трава корпи стебли листья цветки плоды я. х murbecku

10 i -

'1 »3

r \

\ L

0 : t

гч «./•>

).8Ь УЗ

я,52 i-°*na<>.«

7,05 7,68

•i.27 3.5%

Wfe

37 I

to

23

трава корни стебли лиоьн цветки плоды Е. stricta

□ флавононды; ¡ЕД окисляемые вещества; Щ иридоиды

Рис. 1. Содержание БАВ в траве и органах растений рода Euphrasia L.

Характер накопления БАВ в органах исследуемых видов имеет общие тенденции. Содержание флавоноидов и окисляемых веществ максимально в листьях и генеративных органах (цветках, плодах). .Минимальное количество содержится в корнях и стеблях. Наибольшее количественное содержание иридоидов установлено для плодов, стеблей и корней.

В ходе стандартизации образцов сырья Е. officinalis, Е. tatarica, Е. х murbeckii и Е. stricta установлены числовые показатели, которые регламентируют доброкачественность цельного и измельченного ЛРС. Рекомендуемые нормы включены в проект изменения к ФС «Очанки трава»: флавоноидов в пересчете на цинарозид не менее 2%; экстрактивных веществ, извлекаемых <40% спиртом, не менее 20%; влажность не более 10%; золы общей не более 10%; золы, не растворимой в 10% растворе кислоты хлористоводородной, не более 10%; органической примеси не более 3%; минеральной примеси не более 1%.

Химический состав и распределение продуктов первичного метаболизма и пигментов долговегетирумнцих видов рода Euphrasia

Компонентный состав свободных аминокислот исследованных видов представлен двенадцатью веществами, из них идентифицированы: орнитин, пролин, глутаминовая кислота, аланин, аспарагин, серин и три незаменимые

аминокислоты - вални, изолейцин, аргинин. Наиболее разнообразный состав аминокислот (двенадцать веществ) отмечен у Е. brevipila и Е. officinalis, а наименьший (восемь веществ) в траве Е. х reuteri (табл. 2).

Таблица 2

Хроматографическаи характеристика свободных аминокислот

растений рода Euphrasia L.

я а ь Щ а а £Й Значение R¡ Вид Стандартные образцы

lift i о ь Я ® 5 & g. i * с ™ « § я. о ' 3 и N ё &I 1°: в gs 1§ хлороформ -этанол - уксусная кислота - вода (24,5:13,5 4,0:2.2) Е. brevipila s i £ с а, fei S ■a Iii a ■ü ■3 fei ■S3 "a .g o ^ o> fei ■8 и ■o 1 4 fej g o S fei 1 я а, о 5 i и 6 1 о g- глутаминовая ¡ i кислота i i S § 8 а к fe & с. о cct к & ID о к § es изолейцин

i ÖTÖS 0,04 + + + + + + + + - - - - - - - -

2 0,05 0,07 + + + + + + -i - - - - - - -

3 0,14 0,26 + + - + t

4 0,17 0,24 - + + + - - -

Г 5 0,20 0,22 + + + + + + + - - +

6 0,21 0,16 + + + + + + + - - +

7 0,24 0,20 + + + + + + a. - - - + - - - -

8 0,37 0,13 + + - + + - + - - - - - + - - -

9 0,48 0,16 + + + + + + + +

30 "1 0,50 0,39 + + + + + + +

11 0,55 0,46 + + + + + + + +

12 0,63 0,20 + + - + + + + - -

Количественное содержание свободных аминокислот в траве семи исследованных видов находится в пределах 0,82 - 1,64% (рис. 2). По органам аминокислоты распределены неравномерно, их максимальное количество установлено в генеративных органах (цветках, плодах) и листьях, а минимальное - в корнях и стеблях.

о

3 2

ч

с

О

1.8 - 1,64

1.6 -1.4 - 1 -v.-...

1.2 ■ щ

т. .....

0.S - щ

0.6 - г

0.4 ■ ijuyh

0,2 - '.'f-í 1ЫШ

0 - ¡Hfc

1,17

1

¡S

! ш i

0,82 i —--Чда-—-- И Plis В 1

Щ i íffiSS I

1.14

и^редмse значение

Е brevipila E.parviflora Е. reuteri Е tatarica Е. officinalis Е. ¡mirbeckii Е. strick!

Вид

Рис. 2. Содержание свободных Euphrasia L.

аминокислот в растениях рода

1Z -

Компонентный состав углеводов долговегетирующих представителей рода Euphrasia представлен шестью веществами, при этом глюкоза, галактоза, ксилоза, арабиноза и рамноза присутствуют как в свободном, так и в связанном состоянии.

Из травы Е. brevipila выделены фракции водорастворимых полисахаридов (ВРПС), выход составил 4,1%; пектиновых веществ (ПВ) - 2,7%; гемицеллюлозы А (ГЦ А) - 1,4%; гемицеллюлозы Б (ГЦ Б) - 2,3% и установлен их компонентный состав (табл. 3).

Таблица 3

Содержание и состав полисахаридных фракций травы Е. brevipila

Фракция Характеристика Мономерный состав

о 3 СЗ о X а

ВРПС темно-коричневый аморфный порошок, без запаха и вкуса + - + -

ПВ светло-серый аморфный порошок, без запаха и вкуса + - - -

ГЦ А бежевый аморфный порошок, без запаха и вкуса - + + -

ГЦ Б темно-серый аморфный порошок, без запаха и вкуса - 4- + +

Мономерами водорастворимых полисахаридов являются глюкоза и ксилоза. В комплексе пектиновых веществ обнаружена только глюкоза. Обязательные компоненты пектиновых веществ — уроновые кислоты не найдены, что вероятно связано с ферментативным или химическим восстановлением карбоксильных групп в процессе экстракции и гидролиза. Гемицеллюлоза А — это природный галактоксилан, а гемицеллюлоза Б — галактоксилоарабан.

РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУММЫ УГЛЕВОДОВ В РАСТЕНИЯХ РОДА EUPHRASIA

Разработана методика количественного определения углеводов, спектрофотометрическим методом, с использованием антронсерного реактива, в пересчете на глюкозу, как постоянного и доминирующего компонента в растениях рода Очанка.

В ходе последовательного анализа (три этапа) возможно параллельное определение полисахаридов и низкомолекулярных Сахаров, а также их суммы из одной навески. С антронсерным реактивом будут взаимодействовать свободные и связанные, полимерные углеводы, а также и углеводные компоненты гетерозидов (рис. 3).

Метрологическая характеристика разработанной методики показала, что относительная ошибка определения суммы полисахаридов и низкомолекулярных Сахаров составляет ± 4,7%, а полисахаридов ± 6,5%, при доверительной вероятности 95%.

С целью сравнительной оценки количественного содержания углеводов в долговегетирующих видах была использована разработанная методика. Установлено, что содержание углеводов находится в пределах от 3,91% до

8,65% (рис. 4). Максимальное количество от общей суммы приходится на низкомолекулярные сахара, тогда как полисахариды от общей суммы составляют 10%. Наибольшее количество углеводов накапливается в траве Е. officinalis, наименьшее — в траве Е. х reuteri. По органам углеводы распределены неравномерно, их максимальное количество установлено в цветках, плодах и листьях, а минимальное- в корнях и стеблях.

i этап - сШрЕДЮййШ содкМйний CVS«mbi ннжбмолею. лягаых сд.чАй'ит

полнсахаи1дов (Еимсчпс) Ч

в водаом щвдагешт без лредаарщенького оеетдетщ поцисахаридок •

учитывается оптическая плотности продуктов реакции низкомолекуллрных ¡моно-, ди-) Сахаров и

полисахаридов сантроном в присутствии концентрированной серной кислоты

"]..... ...........

)

II этап - определение содержания полисахаридов (¿„с)" после предварительно! о осаждения полисахаридов'95Н спиртом этиловым. в отношении! й учитывается оптическая плотность продуктов реакции только осажденных полисахаридов с антроном в присутствии концентрированной серной кислоты

г..... г......

:4 ; '

ш ?тагх -'расчет содержаний шнкомп ттктляптык cas.a-pob istwc)

^ НМС — нмс+пс" —' ПС' где, 2' „„( - содержание низкомолекулярных Сахаров, .„„ - сумма полисахаридов и низкомолекулярных Сахаров (i этап), хж - содержание полисахаридов (и этап).

Рис. 3. Схема количественного определения углеводов в растениях рода EuDhmsia Ь.

ю

! 3 I

; з

I

S 6 ;

с

ь *

г,

а

I 1

s,

I " i г1 i

£=5,-14

•195

0 : -

5>3.91

3,64

-0.02

5,0')

£«5,49

5,1 г

1С! Я

=8,65

8,09

1 полисахариды О нпшомолекулярные сахара £ - сумма углеводов

Е. hreripih Б v renter) Е fm-rijlorn Е. х mwhecUit Е. tatarica Е officinalis Е shlcta

Вид

Рис.4. Содержание суммы углеводов в траве растений рода Euphrasia L.

Качественный состав пигментов семи видов рода Euphrasia незначительно отличается и представлен основными фотосинтетическими пигментами высших растений. Обнаружено 11 веществ, в сравнении с аутентичными образцами идентифицированы (по значению Rf и УФ-спектрам элюатов с хроматограмм) Д-каротии и хлорофилл а. В стандартных условиях в сравнении с литературными данными (по УФ-спектрам элюатов с хроматограмм) - хлорофилл Ъ. Девять веществ по окраске отнесены к производным каротина и ксантофилла (табл. 4, рис. 5).

Таблица 4

Качественный состав пигментов растений рода Euphrasia L.

Окраска Виды

№ вещества § g Значение Rf ПЭ : ДЭ (1:10) * в видимом свете в УФ свете после детектирования ** 1 J3 § S*. о hi 1 X <ч II CJ ta «с X g 1, fc « ft, hi Та 5 hi С! 8 (4 а к hi

1 - 0,05 - - синяя + + + + + + +

о - 0,09 - - синяя J. + + + + +

3 - 0,18 - - синяя + -Г 4- "Г 4- + +

4 - 0,22 - - синяя + + + + т + +

5 - 0,26 бледно-желтая зеленая - + + + + + + +

6 - 0,32 желтая зеленая - + + + + + +

7 459,645 0,43 зеленая красная - + .1. + + + + +

8 - 0,46 - - синяя + "Г + + + +

о 432,666 0,53 темно-зеленая красная - + + + + + + +

10 - 0.63 - - синяя + + + - + - +

11 424. 45?. 480 0,70 - - синяя + + —I. + + + т

Стандартные образцы

/.'-каротин 430. 453. 480 0,69 ярко-желтая зеленая синяя + + + + + + +

хлорофилл а 430, 666 0,52 темно-зеленая красная - + + + + + + +

хлорофилл Ь 453. 642'" * - - - - -Ь + + + + + +

Примечание: * - петродейный эфир - диэтиловый эфир (1:10); ** - 10% спиртовым раствором фосфорно-молибденовой кислоты; *** - литературные данные.

А

0,6

0,4

424

452

. вещество ] I

А 0,6

0,4 -L

А

400

432

459

V Г

500

вещество 7 * вещество 9

600

X. им

666

/5Л

/А \

/ / \ \ У-'" \ \ ••• \ V.

400

500

453

430 ч 4S0

/Т" -Л .

600

Д-каротнн

_ хлорофилл о

X, им

400

500

600

X, нм

Рис. 5. Спектральные характеристики веществ 7, 9 и 11, элюированных с хроматограмм и стандартных веществ: /?-каротина и хлорофилла а.

Суммарное содержание зеленых пигментов и продуктов их разрушения в исследованных видах рода Euphrasia в среднем составляет 5,01 мг/г (табл. 5). Содержание феофетинов преобладает над содержанием хлорофиллов. Доминирующими являются феофетин а (его содержание у исследованных видов колеблется от 2,20 до 3,20 мг/г) и хлорофилл а (от 1,20 до 1,70 мг/г). Максимальное количество хлорофиллов и феофетинов обнаружено в Е. striata.

Содержание каротиноидов в растениях рода Euphrasia варьирует от 0,26 до 0,40 мг/г (табл. 6). Наибольшее их количество обнаружено в Е. parviflora, а наименьшее - в траве Е. х reuteri и Е. tatarica. Установлено, что на накопление пигментов влияют функциональные особенности органов растений. Максимальное количество обнаружено в листьях, активно участвующих в фотосинтезе, а минимальное в корнях, у которых отсутствует светособирающая функция.

Фотосинтетический аппарат растений рода Euphrasia, характеризующихся полупаразитическим типом питания, является сформированным и прошел успешную адаптацию к природным условиям, о чем свидетельствуют стабильные показатели отношений хлорофилла а (С а) к

хлорофнллу !> (С Ь) - 2,5; суммы хлорофиллов к каротиноидам (С а+Ы Саг) -6,2 и их совпадение со значениями данных отношений, установленными для автотрофных растений (табл. 6).

Таблица 5

Содержание хлорофиллов и феофетинов в растениях рода Euphrasia L.

№ п/п Вид Содержание, мг/г

хлорофшшы феофетнны

а Г ь а+Ь а b а+Ь

1 Е. brevipila 1,37±0,21 0,47±0,1 1 !,85±0,09 2,48±0,24 0,42±0,02 2,92±0,21

2 Е. х reuteri 1,22±0,13 0,61 ±0,06 1,83±0,21 2,20±0,09 0,66±0,02 2,86±0,!3

3 Е. х murbeckii 1,20±0,22 0,53±0,03 1,46±0,16 2,22±0,08 0,50±0,03 2,29±0,17

4 Е. parviflora 1,54±0,16 j 0,52±0,03 2,15±0,22 3,05±0,09 0,32±0,07 3,14±0,09

5 Е. officinalis 1,54+0,05 0,65±0,07 2,19±0,24 2,81±0,12 0,57±0,04 3,38±0,22

6 Е. tatarica 1,22*0,08 0,51+0,10 1,73±0,03 2,20±0,05 0,41 ±0,03 2,61 ±0,08

7 Е. striata !,70±0.11 0,61±0,04 2,58±0,13 3,20±0,21 0,41±0,06 4,П±0,15

Таблица 6

Содержание пигментов и их отношение в растениях рода Euphrasia L.

№ п/п Вид Содержание, мг/г Отношение

Са СЬ Саг Сумма пигментов Са/СЬ С а+Ь/Саг

1 Е. brevipila 1,37 0,47 0,28 2,12 2,9 6,6

1.1 корни 0,14 0,1 0,05 0,29 1,4 4,8

1.2 стебли 0,99 0,55 0.21 1,75 1,8 7,3

1.3 листья 7.21 2,87 1,71 11,79 2,5 5,9

1.4 цветки 2,55 1,17 0.61 4,33 2,2 6,1

1.5 плоды 1,87 1,08 0,49 3,44 1,7 6,0

2 Е. х reuteri 1,22 0,61 0,26 2,09 2,0 7,0

3 Е. х murbeckii 1,20 0,53 0,30 2,03 2,3 5,8

4 Е. parviflora 1,54 0,52 0,40 2,46 2,9 5,2

5 Е. officinalis 1,54 0,65 0,35 2,54 2,4 6,3

6 Е. tatarica 1,22 0,51 0,27 2,0 2,4 6,4

7 Е. stricla 1,70 0,61 0,39 2,7 2.8 5,9

В гексановых извлечениях, полученных из травы исследуемых видов рода Euphrasia, обнаружено 16 липофильных компонентов, доминирующими являются: высшие алканы (сктадекан, нонадекан, гексакозан, октакозан, нонахозан, эйкозан), а так же фитостерин (у - ситостерол) и его предшественник (сквален). Содержание жирных кислот и их альдегидов незначительно (табл. 7).

Таблица 7

Состав гексановых извлечений из растений рода Euphrasia L.

Соединение Количественное содержание, %* Степень совпадения с библиотечным масс-спектром. %

"3 .с о м Е. tatarica J g и С £ о С X bj о ^ Е к '■4 Е. brevipila в 1 ? S а. ьз

Неофитадиен ___** — — — — 0,60 ... 99

Октадекан — ... — 9.45 ... 1,11 ... 95

Нонадекан 9,82 ... 4,01 — 7,78 6,S9 7,34 90

Эйкозан — 6,62 ... ... ... 6,71 3,10 98

Гексакозан 6,68 — 20,90 — 38,49 ... 27,69 91

Гептакозан — ... — 9,79 ... 7,08 ... 99

Октакозан 33,62 ... 6,28 ... 7,19 2,85 7,50 83

Нонакозан — 14,24 ... 21,47 ... 35,38 ... 97

2-Нонакозанон — — 0,56 — — ... ... 94

Сквален 1,96 1,48 — 2,97 — ... ... 92

у - Ситостерол 1,56 — 28,161 2,67 10.87 21,32 15,03 93

Додекановый (лауриновый) альдегид 2,05 ... — ... 0,59 ... ... 91

Тетрадекановый (мирнстиновый) альдегид 1,86 ... — ... 0,42 ... ... 95

Гексадекановая (пальмитиновая) кислота 2,81 ... 7,75 1,59 5,32 ... 10,05 93

Октадекаиовая (стеариновая) кислота — .... 1,91 ... ... ... ... 91

9,12-октадекадиеновая (линолевая) кислота ... ... ... ... ... ... 1,91 99

9,12,15- Октадекатриеновая (линоленовая) кислота ... ... 15,92 ... 6,04 6,93 93

9-Октадеценовая (олеиновая) кислота ... ... ... ... ... ... 2,91 86

Тиомочевина 4,22 ... ... ... ... ... ... 80

6,10,14-триметил-2-пеигадеканон (гексагидрофарпезил-ацетон) ... ... 0,27 ... ... 0,48 ... 97

1,2-Бензолдикарбоновая (фталевая) кислота ... ... ... ... 0,66 ... 97

Фитол ... ... ... ... ... 1,24 ... 91

Примечание: * - содержание компонентов в нормировочных процентах от суммы площадей всех зарегистрированных пиков; ** - содержание соединения относительно суммы всех пиков менее 0,005% или его отсутствие.

Сравнительный анализ долговегетирующих видов показал, что компонентный состав липофильных веществ варьирует от трех (Е. talarica) до одиннадцати (Е. brevipila) веществ, у Е. officinalis, Е. stricta и Е. parviflora представлен девятью веществами.

Суммарное содержание идентифицированных липофильных компонентов в растениях рода Euphrasia убывает в ряду Е. stricta > Е. brevipila > Е. х murbeckii > Е. parviflora > Е. officinalis > Е. х reuteri > Е. tatarica.

Фармакологические свойства растений рода Euphrasia

Проведена сравнительная оценка антикоагулянтной активности сухих водных и спиртовых экстрактов из долговегетирующих растений рода Euphrasia флоры Пермского края.

Наиболее высокая антикоагулянтная активность отмечена у спиртовых экстрактов из травы Е. х reuteri (22,5%) и Е. stricta (21,3%), водного из Е. х murbeckii (23,5%), а так же водного и спиртового из Е. parviflora (22,5 и 22,0% соответственно). Остальные экстракты проявляют активность в пределах от 15,3 до 19,1% (табл. 8).

Таблица 8

Антикоагулянтная активность сухих экстрактов из растений рода Euphrasia L.

№ п/п Вид Экстрагент Время свертывания, с Изменение свертываемости, % Р

контроль опыт

1 Е. brevipila вода 30,5±0,63 34,5±0,79 --16,6 < 0,002

спирт- 29,9±0,53 34,4±1,20 -15,3 <0,01

2 Е. * reuteri вода 29,7±1,26 35,1±1,75 -18,3 <0,02

спирт 28,2±1,16 34,5±1,44 -22,5 <0,002

3 Е. parvifora вода 26,6±1,24 32,6±1,73 -22,5 <0,02

спирт 26,4± 1,13 32,2±1,35 -22,0 <0,02

4 Е. officinalis вода 28,2±0,58 33,4±1,27 -18,5 < 0,002

спирт 20,9±1,07 24,9±0,93 -19,1 <0,01

5 Е. tatarica вода 20,5±0,89 24,1±1,43 -17,7 <0,05

спирт 35,3±1,49 41,2±1,84 -16,7 <0,05

6 Е. х murbeckii вода 22,6±1,21 27,9±0,94 -23,5 <0,01

спирт 22,7±1,17 2б,8±0,15 -18,1 < 0,02

7 Е. stricta вода 14,6±0,62 17,4±0,72 -18,8 <0,02

спирт 18,6±0,б4 22,6±0,42 -21,3 < 0,001

8 Гепарин — 29,9±0,48 36,6±1,82 -22,4 <0,01

Установлена антирадикальная активность (АРА) у исследуемых видов рода Euphrasia. Время полураспада стабильного радикала ДФПГ изменяется в пределах 0,5 - 27 мин. Наиболее высокую активность показали извлечения из Е. Y-murbeckii, Е. brevipila, Е. tatarica, Е. stricta (0,5 - 6 мин). Низкая

антирадикальная активность обнаружена у извлечений из Е. х reuteri, Е. officinalis и Е. parviflora (18 - 27 мин). Степень выраженности антирадикальной активности изученных видов зависит от содержания в них фенольных соединений и иридоидов (рис. 6). Коэффициент корреляции составляет - 0,841 и - 0,681, соответственно.

I

20 I

§ I

2 15

с ' н 10

о I

я. 5

JJ.4

/ /

/ /

У

й;___А о.зб

А4

..6.2.

—»-■-

-о-

0.35

-.11

O.i"

~ov

Е. brevipila Е. * reuteri 11. parvifora Е. officinalis Е. tatanca Е. х murbeckii Е. stricia

10

1.У 5

,3.85. 4 3

1 о

п

> и

д окисляемые вещества;

флавоновды; нридонды;

АРА, мин.

Рис. 6. Зависимость между АРА (т ¡п) и количественным содержанием БАВ в растениях рода Euphrasia. L.

Наибольшей антирадикальной активностью обладают извлечения из генеративных органов - цветков и плодов (не более 0,5 мин). Низкую активность показали извлечения из корней и стеблей (45 мин). Антирадикальная активность травы составила 2 минуты, что объясняется большим удельным весом в массе растения листьев, цветков и плодов.

Сухие спиртовые экстракты всех исследуемых видов рода Euphrasia малотоксичны, ЛД50 при введении в желудок - более 5000 мг/кг.

Анализ результатов биологических испытаний подтверждает целесообразность использования растений рода Euphrasia в научной медицине и позволяет рекомендовать их для разработки фитопрепаратов с антикоагулянтной и антирадикальной активностью.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Изучено морфолого-анатомическое строение четырех перспективных видов рода Euphrasia, произрастающих в Пермском крае: Е. officinalis, Е. tatarica, Е. х murbeckii и Е. stricia. Методом сравнительного анализа с морфологически близкими ранее изученными видами (Е. reuteri, Е. brevipila, Е. parviflora), определен комплекс низковариабельных признаков для диагностики цельного и измельченного сырья, включенный в проект изменения к ФС «Очанки трава».

2. Установлено, что исследованные виды рода Euphrasia имеют близкий химический состав продуктов вторичного метаболизма, представленный флавоноидами, ирндоидами и фснолкарбоновыми кислотами. С помощью аутентичных образцов доказано наличие цинарозида, хлорогеновой кислоты и аукубина. Данные вещества являются константными для рода Euphrasia и могут использоваться в фармацевтическом и хемосистематическом анализе.

Изучено количественное содержание основных групп БАВ, наибольшее количество накапливается в траве и органах E.x-murbeckii, а наименьшее в Е. officinalis и Е. slricta. Среднее содержание БАВ, установленное для рода составляет: флавоноидов - 6,11%; иридоидов - 0,33%; окисляемые вещества -7,81% и сопоставимо с результатами, полученными ранее.

3. Разработаны и включены в проект изменения к ФС «Очанки трава» числовые показатели, регламентирующие доброкачественность цельного и измельченного сырья (флавоноидов в пересчете на цинарозид не менее 2%; экстрактивных веществ, извлекаемых 40% спиртом, не менее 20%; и др.), с учетом дополнительных производящих растений: Е. officinalis, Е. tatarica, Е. х murbeckii, Е. stricia.

4. Изучен качественный состав и количественное содержание продуктов первичного метаболизма и пигментов в траве и органах семи видов рода Euphrasia: Е. officinalis, Е. tatarica, Е. х murbeckii, Е. stricta, Е. reuteri, Е. brevipila и Е. parviflora.

Установлено наличие 12 аминокислот, в том числе 3-х незаменимых. Из них идентифицированы: орнитин, аргинин, пролин, глутаминовая кислота, аланин, аспарагин, серин, валин, изолейцин. Количественное содержание свободных аминокислот в траве находится в пределах 0,82 - 1,64%.

Компонентный состав углеводов представлен шестью веществами, при этом глюкоза, галактоза, ксилоза, арабиноза и рамноза присутствуют как в свободном, так и в связанном состоянии. Содержание углеводов в траве находится в пределах от 3,91% до 8,65%, максимальное количество от общей суммы приходится на низкомолекулярные сахара.

Пигменты исследуемого рода представлены 11 веществами, три из которых идентифицированы как /?-каротин, хлорофилл а и Ъ, девять веществ отнесены к производным каротина и ксантофилла. Суммарное содержание зеленых пигментов и продуктов их разрушения в траве в среднем составляет 5,01 мг/г. Содержание каротиноидов варьирует от 0,26 до 0.40 мг/г.

По органам исследуемые вещества распределены неравномерно, их максимальное количество установлено в генеративных органах (аминокислоты и углеводы) и листьях (пигменты), а минимальное - в корнях и стеблях.

В гексаиовых извлечениях обнаружено 16 липофильных компонентов, доминирующими являются: высшие алканы (октадекан, нонадекан, гексакозан, октакозан, нонакозан, эйкозан), а так же фитостерин (у - ситостерол) и его предшественник (сквален). Содержание жирных кислот и их альдегидов незначительно.

5. Разработана методика количественного определения углеводов в сырье очанки, позволяющая проводить поэтапное определение содержания

низкомолекулярных Сахаров и полисахаридов, а также их сумм!,; из одной навески. Относительная ошибка метода определения суммы полисахаридов и низкомолекулярных Сахаров составляет:). 4,7%, п полисахаридов J 6,5%.

6. Установлено, что растения рода Euphrasia перспективны для разработки фитопрепаратов с антикоагулянтной и аптирадикальной активностью. В результате определения острой токсичности сухис спиртовые экстракты из исследуемых растений отнесены по общепринятой классификации к группе малоопасных.

Список опубликованных работ

1. Абдуллипа, Е. С. Сравнительный морфологический анализ Euphrasia hirtella и Euphrasia lalarica (Scrophulariaceae) // Е. С. Абдуллипа. О. А. Кроткова // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. - 2006. - №1. -С. 92.

2. Кроткова, О. А, Сравнительный анализ анатомического строения Euphrasia tatarica Fisch. и Euphrasia fennica Kihlm. (Scrophulariaceae) / О. Л. Кроткова, E. С. Абдуллипа // Там же. -- С. 244 - 246.

3. Кроткова, О. А. Сравнительное исследование флапоноилов Euphrasia tatarica (Scrophulariaceae), произрастающей в Уральском регионе/ О. А. Кроткова, Т. В. Сухинина /У Актуальные вопросы судсбмо-химическич, химико-токсикологических исследований и фармацевтического анализа: Материалы Российской научно-практической конференции с международным участием, 28 сентября - 3 октября 2009 г., Пермь, ГОУ ВПО ПГ'ФА Росздрава, 2009. - С. 153 -156.

4. Петриченко, В. М. Биологические и химические свойства растений семейства норичниковые / В. М. Петриченко, ... О. А. Кроткова и др. // Региональный конкурс РФФИ - Урал. Результаты научных исследований, полученные за 2007-2009 гг. Сб. статей. Ч. 2. Пермь: ПМЦ УрО РАН, 2010. -С. 113- I 17.

5. Кроткова, О. А. Фенольные соединения Euphrasia officinalis / О. А. Кроткова, Т. В. Сухинина, В. М. Петриченко // Актуальные проблемы современной науки и образования. Биологические науки: Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участие?.!. Т. II. - Уфа: РИЦ БашГУ, 2010. - С. 418 - 422.

6. Кроткова, О. А. Компонентный состав иридоидов некоторых видов рода очанка флоры Пермского края / О. А. Кроткова, Е. А. Булгакова, li. А. Мальцева, Е. П. Смирнова // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии.-2010.-№6.-С. 211 - 213.

7. Кроткова, О. А. Влияние места произрастания на содержание биологически активных веществ в очанке лекарственной / О. А. Кроткова, М. В. Мельник, Е. С. Солодникова, В. А. Захарова // Там же. - С, 213 - 216.

8. Бомбела, Т. В. Подлинность и количественное определение действующих компонентов настойки очанки коротковолосистой / Т. В. Бомбела,

О. А. Кроткова и др. /7 Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. -2010. - №7. -С. 28 - 31.

9. Бомбсла, Т. В. Иридоиды Euphrasia tatarica (Scrophulariaceae)! Т. В. Бомбела, О. А. Кроткова, В. М. Петриченко //Там же. - С. 23 - 26.

10. Бомбела, Т. В. Состав полисахаридов травы Euphrasia brevipila (Scrophulariaceae) / Т. В. Бомбела, О. А. Кроткова, В. М. Петриченко// Там же. -С. 26 - 28.

11. Кроткова, О. А. Исследование компонентного состава фенольных соединений Euphrasia х murbeckii / О. А. Кроткова, Е. В. Смирнова // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. - 2011. - №8. - С. 169 -171.

12. Кроткова, О. А. Морфологические признаки стеблевого и прицветиого листа Euphrasia х murbeckii Wettst. и Euphrasia stricta D. Wolf et J.F. Lehm // О. А. Кроткова, О. П. Копылова, Jl. Ф. Нигамаева // Там же. - С. 167 - 169.

13. Кроткова, О. А. Содержание биологически активных веществ в экстракционных препаратах растений рода Euphrasia L. / О. А. Кроткова,

A. А. Бажин /'/ Там же. - С. 165 - 167.

14. Бомбела, Т. В. Микроскопическое исследование травы очанки лекарственной /' Т. В. Бомбела, О. А. Кроткова, В. М. Петриченко // Фармация, 2011.- №4. -С. 21 -23.

15. Бомбела, Т. В. Оценка антимикробной активности растений рода Euphrasia L. / Т. В. Бомбела, О. А. Кроткова, В. М. Петриченко, Т. Ф. Одегова // Актуальные вопросы фармацевтической науки и образования: мат-лы науч. конф. с междун. участием, поев. 70-летию фарм. фак. СГМУ, Томск, 7-8 сентября 2011 г. -Томск, 2011.-С. 27-30.

16. Кроткова, О. А. Полисахариды Euphrasia brevipila (Scrophulariaceae) / О. А. Кроткова, Т. В. Бомбела, В. М. Петриченко // Вестник уральской медицинской академической науки, 20П. -№ 3/1.- С. 64-65.

17. Бомбела, Т. В. Выделение и идентификация пигментов травы очанки коротковолосистой / Т. В. Бомбела, О. А. Кроткова, М. А. Секерина,

B. М. Петриченко // Актуальные проблемы науки фармацевтических и медицинских вузов: от разработки до коммерциализации / Материалы научно-практической конференции с международным участием, посвященной 75-летию Пермской государственной фармацевтической академии (7-9 декабря 2011 года, г. Пермь). - Пермь, ПГФА, 2011.- С. 191 -193.

18. Кроткова, О. А. Компонентный состав биологически активных веществ Euphrasia stricta (Scrophulariaceae) / О. А. Кроткова, Т. В. Бомбела, Е. П. Смирнова, В. М. Петриченко // Там же. - С. 224 - 227.

19. Бомбела, Т. В. Влияние экологических и онтогенетических факторов на содержание окисляемых веществ Е. tatarica, Е. х murbeckii и Е. stricta // Т. В. Бомбела, О. А. Кроткова, В. М. Петриченко // Там же. - С. 188 - 190.

20. Кроткова, О. А. Особенности микроструктуры прицветиого листа двух видов рода Euphrasia L. / О. А. Кроткова, Т. В. Бомбела, В. М. Петриченко // Там же.-С. 228 -231.

21. Бомбела, Т. В. Фенольные соединения некоторых видов рода очанка (.Euphrasia L.) флоры Пермского края /' Т. В. Бомбела, В.М.Петриченко, О. А. Кроткова // Химия растительного сырья, 2011. - №4. — С. 177-180.

22. Бомбела, Т. В. Изменчивость морфолого-анатомических признаков стеблевого и прицветиого листа двух видов рода Euphrasia L. / Т. В. Бомбела,

О. А. Кроткова, В. М. Петриченко // Разработка, исследование я маркетинг поной фармацевтической продукции: сб. науч. тр. / под. ред. М. В. I 'аврилшш. Пятигорск: I (ятягорская ГФА, 2011. - Вып. 66. - С. 23 - 27.

23. Кроткова. О. Л. Влияние условии произрастания на содержание флаионоидов в траве и органах Euphrasia х murbeckii / О. А. Кроткова, Т. В. Бомбела, Е. П. Смирнова // Материалы 76-й всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых: Молодежная паука и современность. 19-20 апреля 2011 ¡ода. В 3-х частях. Часть 11 - Курск: ГОУ BIIÜ КГМУ, 2011. -С. 247.

24. Бомбела, Т. В. Изменчивость химических параметров травы очанки коротковолосистой в условиях интродукции / Т. В. Бомбела, О. А. Кроткова И Материали за 7-а международна научна практична конференция, ".Achievement of high school», - 20П. Т. 25. Биологии. Бкология. География и геологии. София: сБял ГРАД-БГ» ООД, 2011. - С. 3 - 7.

2.5. Бомбела, Т. В. Проявлясмость анатомо-диагиостических признаков травы очанки лекарственной при измельчении / Т. В. Бомбела, О. А. Кроткова, В. М. Петриченко // Фармация, 2012. - №!. - С. 12- 16.

26. Бомбела, Т. В. Инновационный подход к созданию .лекарственных препаратов для лечения социально значимых заболеваний / Т. В. Бомбела, ... O.A. Кроткова и др. // Менеджмент качества в сфере здравоохранения и социального развития, 2012. - №1 (11).-С.97- 100.

27. Бомбела, Т. В. Фармакогносгическое изучение Euphrasia tatarica Fisch, ex Spreng. (Scrophuiariaceae) / Т. В. Бомбела, О. А. Кроткова, В. М. Петриченко, В. Д. Белоногова // Медицинский альманах, 2012. - №2 (21). - С. 230 - 233.

28. Даминова, Э. Ф. Лекарственные растении, применяемые для лечения болезней глаз / Э. Ф. Дамииова, О. А. Кроткова /7 Вестник Пермской государственной фармацевтической академии, 2012. — № 9. - С. 16! - 163.

29. Кроткова, О. А. Исследование состава фелолкарбоновых кислот в траве и органах очанки татарской, произрастающей в Уральском регионе / О. А. Кроткова, Е. Г1. Смирнова // Там же. - С. 187 - 190.

30. Тимофеева, К. А. Перспективы использования растений рода Очанка в медицине / К. А. Тимофеева, О. А. Кроткова // Там же. — О. 2'! 7 - 219.

Благодарность. Автор выражает благодарность заведующему кафедрой физиологии ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздравсоцразвития России, д.м.н., профессору Сыропятову Б.Я. за помощь в изучении антикоагулянтной активности, лаборанту кафедры физиологии Ковалёвой М. Ю. за установление острой токсичности, Пермскому краевому бюро судебно - медицинской экспертизы в лице Гаранина В. П. за помощь в исследовании липофильных веществ.

Кроткова Ольга Александровна (Россия)

Сравнительное фармагсогностическое исследование

долговегетирующнх' видов рода Euphrasia L. флоры Пермского края

На основании проведенного комплексного фармакогностического исследования обоснована возможность использования долговегетирующих видов рода Очанка флоры Пермского края в качестве лекарственного растительного сырья, разработан проект изменения к ФС «Очанки трава». Установлен комплекс диагностических признаков морфолого-анзтомического строения, позволяющий проводить дифференциальную диагностику близкородственных видов. С использованием хроматографии (БХ, ТСХ, Г'Х-МС), спектрофотометрии и других методов осуществлен анализ фенольных соединений, иридоидов, углеводов, аминокислот, пигментов и липофильных веществ у растений рода Очанка и отмечена возможность применения результатов исследования в аналитических целях и для хемосистематики. Установлено, что экстракционные формы растений рода Очанка малотоксичны и перспективны для разработки фитопрепаратов с антикоагулянтной и анти ради кал ьн ой акти вн остью.

Krotkova Oiga (Russia)

Comparative phannacognostic research of late-flowering species of the genus Euphrasia L. flora of Perm Krai

On the basis of a comprehensive pharmacognostic study, the availability of late-flowering species of the genus Euphrasia L. flora of Perm Krai, as a medicinal plant raw material, has been proved. The Pharmacopoeia article «Euphrasiae Herba» draft change has been developed. Complex of diagnostic morphological and anatomical characteristics for differential diagnostics of closely-related species has been established. Analysis of phenolic compounds, iridoids, carbohydrates, amino acids, pigments and lipophilic compounds of plants of the genus Euphrasia has been carried out by chromatography (PC, TLC, GC-MS), spectrophotometry and other methods. The possibility of application of research results for analytical and chemosystematic purposes has been noted. It was found that the extraction forms of plants of the genus Euphrasia have low toxicity and they are perspective for the development of plant-based medicinal preparations with anticoagulant and antiradical activity.

Подписано в печать 09.07.2012 Формат 60*84/16. Набор компьютерный. Бумага ВХИ. Тираж 100 экз. Усл. печ. л 1,65 Заказ № 80/2012.

Отпечатано на ризографе в типографии ГБОУ ВПО ПГФА 614070, г. Пермь, ул. Крупской, 46, тел. (342) 282-57-92

 
 

Оглавление диссертации Кроткова, Ольга Александровна :: 2012 :: Пермь

Введение.

Глава 1. Фармакогностические особенности растений рода Euphrasia. Продукты первичного метаболизма и пигменты - их роль, свойства и степень изученности в растительных объектах.

1.1. Ботанико - фармакогностическая характеристика растений рода Euphrasia.

1.1.1. Систематическое положение и распространение.

1.1.2. Ботаническое описание и биологические особенности.

1.1.3. Сведения о химическом составе.

1.1.4. Фармакологическая активность и применение в медицине

1.2. Продукты первичного метаболизма и пигменты - их роль, свойства и степень изученности в растительных объектах.

1.2.1. Краткая характеристика аминокислот.

1.2.1.1. Физиологическая роль и фармакологические свойства

1.2.1.2. Степень изученности аминокислотного состава у лекарственных растений.

1.2.2. Краткая характеристика углеводов.

1.2.2.1. Физиологическая роль и фармакологические свойства.

1.2.2.2. Степень изученности углеводного состава у лекарственных растений.

1.2.3. Краткая характеристика пигментов.

1.2.3.1. Физиологическая роль и фармакологические свойства.

1.2.3.2. Степень изученности пигментного состава у лекарственных растений.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Методы морфолого-анатомических исследований.

2.2.1. Макроскопический анализ растительного сырья.

2.2.2. Микроскопический анализ растительного сырья.

2.3. Методы химических исследований.

2.3.1. Методы качественного анализа.

2.3.1.1. Исследование продуктов вторичного метаболизма.

2.3.1.2. Исследование продуктов первичного метаболизма и пигментов.

2.3.2. Методы количественного анализа.

2.3.2.1. Исследование продуктов вторичного метаболизма.

2.3.2.2. Исследование продуктов первичного метаболизма и пигментов.

2.4. Методы фармакологических исследований.

2.4.1. Испытание на антикоагулянтную активность.

2.4.2. Испытание на антирадикальную активность.

2.4.3. Испытание на острую токсичность.

2.5. Статистическая обработка результатов эксперимента.

Глава 3. Морфолого-анатомические особенности растений рода Euphrasia

3.1. Морфологическая характеристика.

3.1.1. Особенности морфологического строения Е. officinalis,

Е. tatarica, Е. xmurbeckii и Е. stricta.

3.1.2. Сравнительный анализ морфологического строения долговегетирующих видов.

3.2. Анатомическая характеристика.

3.2.1. Особенности анатомического строения Е. officinalis,

Е. tatarica, Е. xmurbeckii и Е. stricta.

3.2.2. Сравнительный анализ анатомического строения долговегетирующих видов.

Глава 4. Химический состав и распределение продуктов вторичного метаболизма у представителей рода Euphrasia.

4.1. Хроматографические исследования основных групп БАВ.

4.2. Влияние экологических факторов на характер распределения и накопления основных групп БАВ.

4.2.1. Внутривидовая изменчивость компонентного состава флавоноидов, иридоидов и фенолкарбоновых кислот.

4.2.2. Динамика накопления флавоноидов, иридоидов и окисляемых веществ.

4.3. Стандартизация лекарственного растительного сырья.

Глава 5. Химический состав и распределение продуктов первичного метаболизма и пигментов долговегетирующих представителей рода Euphrasia.

5.1. Исследование свободных аминокислот.

5.1.1. Изучение качественного состава.

5.1.2. Изучение количественного содержания.

5.2. Исследование углеводного состава.

5.2.1. Выделение полисахаридных фракций из травы Е. brevipila и исследование их мономерного состава.

5.2.2. Исследование качественного состава углеводов.

5.2.3. Разработка методики количественного определения суммы углеводов в траве Е. brevipila.

5.2.4. Исследование количественного содержания углеводов.

5.3. Исследование пигментного состава.

5.3.1. Выделение и идентификация основных фотосинтезирующих пигментов.

5.3.2. Исследование качественного состава.

5.3.3. Исследование количественного содержания.

5.4. Исследование липофильных веществ.

Глава 6. Фармакологические свойства растений рода Euphrasia.

6.1. Антикоагулянтая активность.

6.2. Антирадикальная активность.

6.3. Острая токсичность.

 
 

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия, фармакогнозия", Кроткова, Ольга Александровна, автореферат

Актуальность темы. Одной из приоритетных задач здравоохранения является расширение ассортимента отечественных лекарственных средств за счет внедрения в лечебную практику новых лекарственных растений. Как известно, фитопрепараты по эффективности не уступают синтетическим, благоприятно действуют на организм при длительном применении, используются в реабилитационный период у всех возрастных групп.

Перспективными объектами для изучения являются растения рода Очанка, источники высокоактивных природных соединений, издавна используемые в народной медицине для лечения заболеваний глаз, верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта. Некоторые виды рода Очанка являются официнальными в Европейских странах. Трава о. Ростковиуса включена в фармакопею Германии, а о. лекарственной в Британскую травяную фармакопею. В Польше являются официнальными виды о. Ростковиуса и о. прямая. Они отпускаются аптеками под торговым названием «Herba Euphrasiae» и используются в традиционной медицине этих стран как противовоспалительное, вяжущее и антисклеротическое средство.

В результате ранее проведенных в Пермской государственной фармацевтической академии исследований было установлено, что виды рода Очанка (о. коротковолосистая, о. Рейтера, о. мелкоцветная) имеют близкий химический состав продуктов вторичного обмена, обладают гипотензивной, противовоспалительной, антимикробной, противолейкемической активностью, сочетающейся с низкой токсичностью. Исходя из полученных данных, разработан проект фармакопейной статьи «Очанки трава».

Однако исследования химического состава продуктов первичного обмена у представителей рода Очанка носят фрагментарный характер, так как проводились в отношении только некоторых групп биологически активных веществ (БАВ).

Для современного производства фитопрепаратов необходима гарантированная сырьевая база, которую можно обеспечить за счет использования других широко распространенных видов рода Очанка, произрастающих совместно.

В связи с этим представляется актуальным комплексное фармакогностическое исследование морфологически близких видов рода Очанка и обоснование возможности их включения в проект нормативной документации в качестве дополнительных производящих растений, а также изучение распределения и накопления продуктов первичного метаболизма в растениях рода Очанка.

Целью настоящих исследований является сравнительное изучение морфолого-анатомического строения и химико-фармакологических свойств долговегетирующих видов рода Очанка {Euphrasia L.), встречающихся во флоре Пермского края, и обоснование возможности их использования в медицинской практике.

Для достижения поставленной цели предусматривалось решение следующих задач: изучить морфолого-анатомическое строение перспективных видов рода Очанка (о. лекарственной, о. татарской, о. прямой, о. Мурбека), провести сравнительный анализ с ранее изученными видами (о. Рейтера, о. коротковолосистой и о. мелкоцветной) и установить диагностические признаки лекарственного растительного сырья (JIPC); провести сравнительный фитохимический анализ продуктов вторичного метаболизма четырех ранее не изученных видов рода Очанка, установить константные компоненты, которые могут быть использованы в качестве химических маркеров рода, а так же в аналитических целях; установить нормы числовых показателей JIPC и обосновать возможность использования в качестве дополнительных производящих растений перспективных видов, разработать изменение к ФС «Очанки трава»; исследовать качественный состав, количественное содержание и закономерности накопления в растениях рода Очанка продуктов первичного метаболизма (аминокислот, углеводов, липофильных веществ) и пигментов; разработать методику количественного определения углеводов, позволяющую проводить сравнительную оценку их содержания в растениях рода Очанка; изучить фармакологические свойства и острую токсичность долговегетирующих видов рода Очанка.

Научная новизна работы.

1. На основании макро- и микроскопического анализа растений рода Очанка установлен комплекс диагностических признаков морфолого-анатомического строения, позволяющий проводить дифференциальную диагностику близкородственных видов. Получены объективные иллюстрации анатомо-диагностических признаков в виде оригинальных микрофотографий.

2. Проведено сравнительное фитохимическое исследование продуктов вторичного метаболизма очанки лекарственной, о. татарской, о. Мурбека и о. прямой.

3. Выявлены особенности внутри- и межвидовой изменчивости компонентного состава и количественного содержания основных групп БАВ в растениях рода Очанка. Показана необходимость выделения и использования константных, аналитически значимых компонентов при разработке нормативной документации.

4. Изучен компонентный состав и количественное содержание продуктов первичного обмена и пигментов очанки лекарственной, о. татарской, о. прямой, о. Рейтера, о. Мурбека, о. коротковолосистой и о. мелкоцветной. Показано, что данные виды могут быть использованы в качестве источников углеводов, аминокислот, каротиноидов, хлорофиллов, жирных кислот и других веществ.

5. Проведен фармакологический скрининг перспективных видов рода Очанка, установлено антикоагулянтное и антирадикальное действие, сочетающееся с низкой токсичностью.

Практическая значимость работы. Доказана целесообразность использования очанки лекарственной, о. татарской, о. Мурбека и о. прямой в качестве дополнительных производящих растений. Перспективные виды включены в проект изменения к ФС «Очанки трава».

Материалы диссертационного исследования по теме «Морфолого-анатомическое строение растений рода Очанка, произрастающих в Пермском крае» использованы при разработке иллюстрированного методического пособия, которое рекомендовано студентам, интернам, аспирантам для учебного процесса, а так же биологам, провизорам и врачам для практической деятельности.

Научно обоснована целесообразность использования растений рода Очанка для получения препаратов, оказывающих антикоагулянтное и антирадикальное действие.

Разработана методика количественного определения углеводов в сырье очанки, позволяющая проводить поэтапное определение содержания низкомолекулярных Сахаров и полисахаридов, а также их суммы из одной навески.

Положения, выдвигаемые на защиту: результаты морфолого-анатомического изучения растений рода Очанка и разработка характеристик подлинности ЛРС; результаты фитохимического изучения продуктов вторичного метаболизма перспективных видов о. лекарственной, о. татарской, о. Мурбека и о. прямой, их распределение и накопление в зависимости от условий произрастания; результаты сравнительного изучения продуктов первичного метаболизма долговегетирующих видов рода Очанка, встречающихся во флоре Пермского края; результаты разработки методики количественного определения углеводов в сырье очанки; результаты фармакологических исследований перспективных видов рода Очанка.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований Пермской государственной фармацевтической академии (номер государственной регистрации 01.9.10018875).

Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на: ежегодных научных конференциях студентов и молодых ученых Пермской государственной фармацевтической академии (Пермь, 2006, 2007, 2008, 2009, 2010, 2011); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Актуальные проблемы современной науки и образования» (Уфа, 2010); Российской научно-практической конференции «Создание лекарственных средств на основе продуктов природного происхождения» (Пермь, 2010); Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежная наука и современность» (Курск, 2011); Конкурсе «Молодежная инновационная медицина XXI века», проходившем в рамках конгресса «Здравоохранение Российской Федерации, стран СНГ и Европы» (Москва, 2011); Научно-практической конференции с международным участием «Актуальные проблемы науки фармацевтических и медицинских вузов: от разработки до коммерциализации» (Пермь, 2011).

Личный вклад автора. После обобщения современных данных литературы, автором осуществлено сравнительное морфолого-анатомическое исследование растений рода Очанка; проведено изучение качественного состава и количественного содержания веществ вторичного (флавоноидов, иридоидов, фенолкарбоновых кислот), первичного (аминокислот, углеводов, липофильных веществ) метаболизма и пигментов; установлены отдельные фармакологические свойства растений рода Очанка.

Публикации материалов исследования. По результатам исследований опубликовано 30 работ, которые отражают основное содержание диссертации, из них 5 в рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 208 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (1 глава), материалов и методов (2 глава), экспериментальной части (4 главы), общих выводов, списка литературы и приложения; иллюстрирована 43 рисунками и 41 таблицами. Список литературы включает 297 источников, из них 31 на иностранных языках.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Сравнительное фармакогностическое исследование долговегетирующих видов рода Euphrasia L. флоры Пермского края"

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Изучено морфолого-анатомическое строение четырех перспективных видов рода Euphrasia, произрастающих в Пермском крае: Е. officinalis, Е. tatarica, Е. х murbeckii и Е. stricta. Методом сравнительного анализа с морфологически близкими ранее изученными видами (Е. reuteri, Е. brevipila, Е. parviflora), определен комплекс низковариабельных признаков для диагностики цельного и измельченного сырья, включенный в проект изменения к ФС «Очанки трава».

2. Установлено, что исследованные виды рода Euphrasia имеют близкий химический состав продуктов вторичного метаболизма, представленный флавоноидами, иридоидами и фенолкарбоновыми кислотами. С помощью аутентичных образцов доказано наличие цинарозида, хлорогеновой кислоты и аукубина. Данные вещества являются константными для рода Euphrasia и могут использоваться в фармацевтическом и хемосистематическом анализе.

Изучено количественное содержание основных групп БАВ, наибольшее количество накапливается в траве и органах Е. хmurbeckii, а наименьшее в Е. officinalis и Е. stricta. Среднее содержание БАВ, установленное для рода составляет: флавоноидов - 6,11%; иридоидов - 0,33%; окисляемые вещества -7,81% и сопоставимо с результатами полученными ранее.

3. Разработаны и включены в проект изменения к ФС «Очанки трава» числовые показатели, регламентирующие доброкачественность цельного и измельченного сырья (флавоноидов в пересчете на цинарозид не менее 2%; экстрактивных веществ, извлекаемых 40% спиртом, не менее 20%; и др.), с учетом дополнительных производящих растений: Е. officinalis, Е. tatarica, Е. х murbeckii, Е. stricta.

4. Изучен качественный состав и количественное содержание продуктов первичного метаболизма и пигментов в траве и органах семи видов рода Euphrasia: Е. officinalis, Е. tatarica, Е. х murbeckii, Е. stricta, Е. reuteri, Е. brevipila и Е. parviflora.

Установлено наличие 12 аминокислот, в том числе 3-х незаменимых. Из них идентифицированы: орнитин, аргинин, пролин, глутаминовая кислота, аланин, аспарагин, серин, валин, изолейцин. Количественное содержание свободных аминокислот в траве находится в пределах 0,82 - 1,64%.

Компонентный состав углеводов представлен шестью веществами, при этом глюкоза, галактоза, ксилоза, арабиноза и рамноза присутствуют как в свободном, так и в связанном состоянии. Содержание углеводов в траве находится в пределах от 3,91% до 8,65%, максимальное количество от общей суммы приходится на низкомолекулярные сахара.

Пигменты исследуемого рода представлены 11 веществами, три из которых идентифицированы как /?-каротин, хлорофилл а и Ь, девять веществ отнесены к производным каротина и ксантофилла. Суммарное содержание зеленых пигментов и продуктов их разрушения в траве в среднем составляет 5,01 мг/г. Содержание каротиноидов варьирует от 0,26 до 0,40 мг/г.

По органам исследуемые вещества распределены неравномерно, их максимальное количество установлено в генеративных органах (аминокислоты и углеводы) и листьях (пигменты), а минимальное - в корнях и стеблях.

В гексановых извлечениях обнаружено 16 липофильных компонентов, доминирующими являются: высшие алканы (октадекан, нонадекан, гексакозан, октакозан, нонакозан, эйкозан), а так же фитостерин (у - ситостерол) и его предшественник (сквален). Содержание жирных кислот и их альдегидов незначительно.

5. Разработана методика количественного определения углеводов в сырье очанки, позволяющая проводить поэтапное определение содержания низкомолекулярных Сахаров и полисахаридов, а также их суммы из одной навески. Относительная ошибка метода определения суммы полисахаридов и низкомолекулярных Сахаров составляет ± 4,7%, а полисахаридов - ± 6,5%.

6. Установлено, что растения рода Euphrasia перспективны для разработки фитопрепаратов с антикоагулянтной и антирадикальной активностью. В результате определения острой токсичности сухие спиртовые экстракты из исследуемых растений отнесены по общепринятой классификации к группе малоопасных.

 
 

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Кроткова, Ольга Александровна

1. Абдуллина, Е.С. Сравнительный морфологический анализ Euphrasia hirtella и Euphrasia tatarica (Scrophulariaceae) 1. E. С. Абдуллина, О. А. Кроткова // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. - 2006. - №1. - С. 92.

2. Аджунова, Т.А. Полисахаридный комплекс Aloe arborescens Mill, как средство дополнительной терапии сахарного диабета / Т.А. Аджунова, С.М. Николаев, А.Д. Бакуридзе // Растит, ресурсы. 2004. - Т. 40, № 1. - С. 76-81.

3. Аминокислотный и минеральный состав надземной части Atragene speciosa Weinn. / И.В. Шилова, Е.А. Краснов, Н.В. Барановская и др. // Хим.-фармац. журнал. 2002. - № 11. - С. 36-38.

4. Аминокислотный и углеводный составы молочно-растительного экстракта якона / Е.С. Рудниченко, Я.И. Коренман, Е.И. Мельникова и др. // Химия растительного сырья. 2008. - № 4. - С. 79-82.

5. Аминокислотный состав и ноотропные свойства полиноофита / И.Г. Николаева, Л.Д. Дамшеева, С.М. Николаев, Г.Г. Николаева // Хим.-фармац. журнал. 2011. - № 8. - С. 45-48.

6. Аминокислотный, жирнокислотный и углеводный состав сока некоторых видов рода Betula / Т.А. Шуляковская, Л.В. Ветчинникова, М.К. Ильинова и др. // Растит, ресурсы. 2006. - Т. 42., вып. 2. - С. 69-77.

7. Аминокислоты в медицине / В.И. Западнюк, Л.П. Купраш, М.У. Заика, И.С. Безверхая. Киев: Здоров'я, 1982. - 200 с.

8. Аминокислоты и циклические дипептиды в настойках гомеопатических матричных Urtica dioica L. и Urtica urens L. / Е.С. Лапинская, Я.Ф. Копытько, Е.А. Тимохина и др. // Хим.-фармац. журнал. 2008. - № 11. - С. 49-52.

9. Андреева, В.Ю. Исследование химического состава надземной части манжетки обыкновенной Alchemilla vulgaris L.S.L. / В.Ю. Андреева, Г.И. Калинкина // Химия растительного сырья. 2000. - № 2. - С. 79-85.

10. Антикоагулянтная активность in vitro сульфатированного арабиногалактана и экстракта коры кедра / H.H. Дрозд, В.А. Макаров, Н.Ю. Васильева и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2008. - № 4. - С.30-34.

11. Антимикробная активность извлечений из трех видов Euphrasia L. / В. М. Петриченко, Т. В. Сухинина, Т. Ф. Одегова и др. // Растит, ресурсы. 2002. - Т 38, вып. З.-С. 82-86.

12. Антонов, В.И. Спектральные характеристики препаратов хлорофилла из еловой древесной зелени / В.И. Антонов, В.И. Ягодин // Химия растит, сырья.2006.-№2.-С. 47-49.

13. Бандюкова, В.А. Природные С гликозиды флавоноидов / В.А. Бандюкова, В.А. Югин // Химия природ, соединений. - 1981. - № 1. - С. 5-24.

14. Бандюкова, В.А. Фенолокислоты растений их эфиры и гликозиды / В.А. Бандюкова // Химия природ, соединений. 1983. - № 2. - С. 271-275.

15. Бейлин, И. Г. Паразитизм и эпифитотиология / И.Г. Бейлин. М.: Наука, 1986. -351 с.

16. Бейлин, И.Г. Паразитизм и эпифитотиология (на примере паразитов из высших растений) / И.Г. Бейлин. М.: Наука, 1986. - 352 с.

17. Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта/М.Л. Беленький.-Л., 1963.

18. Беликов, В.Г. Изучение полисахаридного состава отходов зерна проса Panicum milliaceum L. / В.Г. Беликов, Ю.В. Якимова // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2008. -№ 1. - С. 116-119.

19. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте / Е.Б. Бурлакова, A.B. Алесенко, Е.М. Молочкина и др. М.: Наука, 1975. - 214 с.

20. Биологически активные вещества сухого экстракта какали копьевидной / Д.Н. Олейников, Л.М. Танхаева, Г.Г. Николаева и др. // Химия растит, сырья. 2004. -№ 3. - С. 59-62.

21. Блинова, М.П. Углеводный состав подземной части Adenophora perisckiifolia (Campanulaceae) / М.П. Блинова, В.Г. Дударев, Н.И. Котова // Растит, ресурсы.2007. Т. 43, вып. 4. - С. 99-101.

22. Бобиев, Г.М. Получение и изучение состава координационных соединений серебра и триптофана / Г.М. Бобиев, Т. Суфиев, А.Н. Шахматов // Хим.-фармац. журнал. 2008. - № 12. - С. 36-39.

23. Бомбела, Т.В. Иридоиды Euphrasia tatarica (Scrophulariaceae) / Т.В. Бомбела, О.А. Кроткова, В.М. Петриченко // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. 2010. - №7. - С. 23-26.

24. Бомбела, Т.В. Микроскопическое исследование травы очанки лекарственной / Т.В. Бомбела, О.А. Кроткова, В.М. Петриченко // Фармация, 2011. №4. - С. 2123.

25. Бомбела, T.B. Состав полисахаридов травы Euphrasia brevipila (Scrophulariaceae) / T.B. Бомбела, O.A. Кроткова, B.M. Петриченко // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. -2010. -№7. С. 26-28.

26. Бомбела, Т.В. Фармакогностическое изучение Euphrasia tatarica Fisch, ex Spreng. (Scrophulariaceae) / T.B. Бомбела, O.A. Кроткова, B.M. Петриченко, В.Д. Белоногова // Медицинский альманах, 2012. -№2 (21). С. 230-233.

27. Бомбела, Т.В. Фенольные соединения некоторых видов рода очанка (.Euphrasia L.) флоры Пермского края / Т.В. Бомбела, В.М. Петриченко, O.A. Кроткова // Химия растительного сырья, 2011.- №4. С. 177-180.

28. Борисенков, М.Ф. Адсорбция эстрогенов in vitro на фракциях пектиновых веществ перца сладкого и капусты белокочанной / М.Ф. Борисенков, В.В. Головченко, Ф.В. Витязев // Химия растит, сырья. 2011. - № 3. - С. 53-58.

29. Бочков, А.Ф. Углеводы / А.Ф. Бочков, В.А. Афанасьев, Т.Е. Заиков. М.: Наука, 1980.-176 с.

30. Бриттон, Г. Биохимия природных пигментов / Г. Бриттон; пер. с англ. М.: Мир, 1986.-422 с.

31. Бубенчиков, P.A. Аминокислотный и минеральный состав Viola hirta L. / P.A. Бубенчиков II Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения. Финляндия, 2004. - С. 223-232.

32. Бубенчиков, P.A. Изучение аминокислотного состава травы фиалки удивительной / P.A. Бубенчиков // Молодежная наука и современность: материалы 69-й межвузовской конф. студентов и молодых ученых. Курск, 2004. -Ч. 2.-С.108-109.

33. Бубенчиков, P.A. Изучение полисахаридов травы фиалки донской // P.A. Бубенчиков, Н.Ф. Гончаров // Разработка, исследование и маркетинг новой фармац. продукции: сб. науч. тр. Пятигорск, 2004. - Вып. 59. - С. 8.

34. Бубенчикова, В.Н. Аминокислотный состав некоторых представителей растений семейства розоцветных / В.Н. Бубенчикова, Ю.А. Сухомлинов, Н.Ф. Гончаров // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2009. - №3.-С. 135-138.

35. Бубенчикова, В.Н. Фенольные соединения и полисахариды листьев Fragaria vesca L. / В.Н. Бубенчикова, И.Л. Дроздова // Растит, ресурсы. 2003. - Т. 39, вып.4.-С. 94-99.

36. Вергейчик, E.H. Получение и изучение соединений индия хлорида с а-аланином и фенилаланином / E.H. Вергейчик, М.А. Мокрушина // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2007. - № 4. - С. 92-96.

37. Википедия свободная энциклопедия Электронный ресурс. // URL: http://ru.wikipedia.org/wiki/ Незаменимыежирныекислоты (Дата обращения 14.02.2012)

38. Википедия свободная энциклопедия Электронный ресурс. http://ru.wikipedia.org/wikiMjiKaHbi (Дата обращения 14.02.2012)

39. Википедия свободная энциклопедия Электронный ресурс. Ьцр://ги^к{рей!а.о^Ау}к!/Фитостеролы (Дата обращения 14.02.2012)

40. Википедия свободная энциклопедия Электронный ресурс. http://upload.wikimedia.org (Дата обращения 18.02.2011)

41. Википедия свободная энциклопедия Электронный ресурс. http://en.wikipedia.Org/wiki/l -Octacosanol (Дата обращения 14.02.2012)

42. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. - 252 с.1. URL:1. URL:1. URL:1. URL:

43. Влияние L-аргинина на электрокожную и температурную болевую чувствительность у крыс i -JI:А. • Северьянова, И.И. Бобынцев, Н.А/Кирьянова и ' др. // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2005. — № 2. — С. 44-49.

44. Влияние аминокислот, составляющих пептид глицил-гистидил-лизин, на регенерацию кожных ран и функцию нейтрофилов / A.A. Курцева, М.Ю. Смахтин, A.B. Иванов и др. // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье».-2008,-№3.-С. 5-10.

45. Влияние полисахаридов Potamogeton perfoliatus (Potamogetonaceae) на активность факторов естественной клеточной резистентности in vitro / A.A. Фомина, С.А. Коннова, O.A. Фучеджи и др. // Растит, ресурсы. 2010. - Т. 46, вып. 1.-С. 118-125.

46. Влияние полисахаридов бурых водорослей на рост проростков Glicine max (Fabaceae) и Fagopyrum esculentum (Polygonaceae) / E.JI. Чайкина, H.M. Шевченко, Т.Н. Звягинцева и др. // Растит, ресурсы. 2009. - Т. 45, вып. 3. - С. 130-136.

47. Волков, В.А. Кинетический метод анализа антирадикальной активности экстрактов растений / В.А. Волков, H.A. Дорофеева, П.М. Пахомов // Хим.-фармац. журн. 2009. - Т. 43, вып. 6. - С. 27-31.

48. Воронова, И. А. Очанка творит чудеса / И.А. Воронова // Физкультура и спорт.- 1998.-№6. -С. 20-22.

49. Выделение и анализ полисахаридных фракций из биомасс штаммов Panax Ginseng С.А. Меу. и P. Quinquefolius L., с герматраном «LX 5» / Е.Г. Остроженкова, Е.С. Тулупова, Е.И. Саканян и др. // Растит, ресурсы. - 2002. - Т. 38, вып. 2.-С. 120-125.

50. Галактоманнаны семян некоторых видов сем. Fabaceae / O.B. Анулов, С.Ф. Пономаренко, A.B. Егоров и др. // Растит, ресурсы. 2003. - Т. 39, вып. 1. - С. 80-83.

51. Галишевская, Е.Е. Фармакогностическое изучение марьянника лугового: дис. . канд. фармац. наук / Е.Е. Галишевская: Пермская фармац. акад. Пермь, 2004.- 141 с.

52. Гастропротективное действие густого экстракта из хвои Pinus sylvestris L. и Picea abies (L.) Karst. / Ю.В. Селезнев, С.Ю. Кузнецов, Ю.П. Рубене и др. // Растит, ресурсы. 2001. - Т. 37, № 1. - С. 63-70.

53. Герберд, И.Я. Противосвертвающее действие полифенольной фракции из надземной части медуницы мягчайшей / И.Я. Герберд, П.И. Левен, А.Ш. Бышевский // Растительный ресурсы. 1988. - Т. 22, вып. 3 - С. 429-434.

54. Гергардт, А. Гомеопатия практическое руководство/ А. Гергардт. М.: Двойная звезда, 1993. - 298 с.

55. Гипотензивная активность извлечений из некоторых видов сем. Scrophulariaceae, произрастающих в Пермском крае / В.М. Петриченко, Т.В. Сухинина, Б.Я. Сыропятов и др. Растит, ресурсы. 2009. - Т. 45, вып. 1. - С. 140-147.

56. Годнев, Т.Н. Строение хлорофилла и методы его количественного определения / Т.Н. Годнев. ~ Минск: АН БССР, 1952. 215 с.

57. Гончаров, М.Ю. Состав полисахаридных фракций из надземной части Alhagi maurorum Medic. / М.Ю. Гончаров, Г.П. Яковлев, Г.А. Витовская // Растит, ресурсы. 2001. - Т. 37, вып 4. - С. 76-81.

58. Государственная фармакопея СССР. 11-е издание. Вып. 2. М.: Медицина, 1990.-400 с.

59. Государственная фармакопея СССР: 11-е издание. Вып. 1. Общие методы анализа. М.: Медицина, 1989. - 399 с.

60. Грин, Н. Биология: В 3-х Т.: Пер. с англ. / Н. Грин, У. Стаут, Д. Тейлор. М.: Мир, 1996.-Т. 1.-368 с.

61. Гринкевич, H.H. Химический анализ лекарственных растений / Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронович. М. Высш. шк., 1983. - 175 с.

62. Гриффит, В. Витамины, травы, минералы и пищевые добавки: Справочник / В. Гриффит; Пер. с англ. К.Ткаченко. М.:ФАИР ПРЕСС, 2000. - 485 с.

63. Гришина, Е.А. Перспективы использования очанки коротковолосистой при остром гепатите / Е.А. Гришина, A.B. Гришин, Н.В. Кармацкая // Лекарственные растения Алтайского тграя.' Томск; Л986. С. 46-49.

64. Губаненко, Г.А. О химическом составе вегетативной части Artemisia sieversiana Willd. // Г.А. Губаненко, Л.П. Рубчевская, С.М. Репях // Химия растит, сырья. 1998.-№2.-С. 11-13.

65. Гудвин, Т. Сравнительная биохимия каротиноидов / Т. Гудвин; пер. с англ. Б.В. Евстигнеева, под ред. и с предисл. A.B. Благовещенского. М.: Ин. лит., 1954. -396 с.

66. Гусарова, Г.Л. Конспект рода Euphrasia (Scrophulariaceae) России и сопредельных государств / Г.Л. Гусарова // Ботанический журнал, 2005. -№7. С. 1087-1115.

67. Гусарова, Г.Л. Систематика видов Euphrasia L. {Scrophulariaceae) России и сопредельных стран : дис. . канд. биол. наук / Г.Л. Гусарова. С.-Петербург, 2000.- 169 с.

68. Понтер, Е.А. Влияние регуляторов роста на клеточную культуру Silene vulgaris и на химические характеристики продуцируемых ею полисахаридов / Е.А. Гюнтер, Ю.С. Оводов // Химия растит, сырья. 2001. -№ 2. С. 57-62.

69. Гюнтер, Е.А. Культуры клеток нетрадиционных растений как продуценты полисахаридов / Е.А. Гюнтер // Химия и компьютерное моделирование Бутлеровские сообщения. 2001. - Т. 2, № 5. - С. 11-12.

70. Гюнтер, Е.А. Полисахариды из каллусной культуры Lemna minor L. / Е.А. Гюнтер // Химия растит, сырья. 2001. - № 2. - С. 63-67.

71. Дёготь, A.B. Фитохимическое исследование некоторых представителей семейства норичниковых : дис. . канд. фармац. наук: 05. 00. 15 / A.B. Деготь; Запорожский мед. ин-т. Запорожье, 1971. - 198 с.

72. Долгинцев, М.Е. Иммунотропные эффекты L-лизина в исходном состоянии и в условиях эмоционально-болевого стресса / М.Е. Долгинцев, Л.А. Северьянова, И.И. Бобынцев // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2009. -№ 1.-С. 5-14.

73. Долгова, A.A. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии / A.A. Долгова, Е.Я. Ладыгина. М.: Медицина, 1977. - 275 с.

74. Долгова, И.Г. Исследование эффективности и безопасности применения препарата Мексиприм у пациентов с первичной открытоугольной глаукомой /

75. И.Г. Долгова, Т.Н. Малишевская // Русский медицинский журнал. 2012. - №1: Электронный ресурс. URL: http://www.rmj.ru/ (Дата обращения 03.03.2012).

76. Дроздова, ИЛ. Исследование растительных источников полисахаридов и фенольных соединений и перспективы их практического использования в фармации : дис. . д-ра фармац. наук / ИЛ. Дроздова. Курск, 2006. - 362 с.

77. Дроздова, ИЛ. Состав и противовоспалительная активность полисахаридных комплексов фиалки душистой и мальвы низкой / ИЛ. Дроздова, P.A. Бубенчиков // Хим.-фармац. журнал. 2005. - Т. 39, № 4. - С. 29-32.

78. Егорова, ЕЛО. Состав углеводов, минеральных элементов и жиров околоплодной оболочки кедрового ореха / Е.Ю. Егорова, Р.Ю. Митрофанов, Г.Ю. Бахтин // Химия растит, сырья. 2006. - № 3. - С. 33-37.

79. Елькина, Е.А. Влияние пектинов на рост злаковых культур / Е.А. Елькина, A.A. Шубаков, Ю.С. Оводов // Химия растит, сырья. 2005. - № 4. - С. 53-56.

80. Елькина, Е.А. Влияние растительных полисахаридов на скорость проростания семян Lycopersicon esculentum М. и Cucumis sativus L. / Е.А. Елькина, A.A. Шубаков, Ю.С. Оводов // Химия растит, сырья. 2002. - № 2. - С. 105-109.

81. Емелина, Т.П. Получение углеводсодержащих субстратов из вегетативной части топинамбура / Т.Н. Емелина, Т.В. Рязанова, H.A. Чупрова // Химия растит, сырья.-2002.-№2.-С. 117-119.

82. Ефремов, A.A. Выделение пектина из нетрадиционного растительного сырья и применение его в кондитерском производстве / A.A. Ефремов, Т.А. Кондратюк // Химия растит, сырья. 2008. - № 4. - С. 171 -176.

83. Зайцев, Г.Н. Математическая статистика в экспериментальной ботанике / Г.Н. Зайцев. М.: Наука, 1984. - 434 с.

84. Зайчикова, С.Г. Белковый, аминокислотный и минеральный состав отдельных представителей рода Чина / С.Г. Зайчикова, И.А. Самылина, М.О. Бурляева // Хим.-фармац. журнал. 2001. - № 6. - С. 51 -53.

85. Запрометов, М.Н. Основы биохимии фенольных соединений: Учеб. пособие для биол. специальностей ун-тов / М.Н. Запрометов. М.: Высш. шк., 1974. -214 с.

86. Захаров, A.M. Действующие вещества некоторых видов растений флоры Тянь-Шаня / A.M. Захаров, С.М. Кабанов // Аптеч. дело. 1964. - Т. 13, № 5. - С. 46-49.

87. Захарова, В.А. Распространение видов рода Euphrasia L. на территории Пермского края / В. А. Захарова, Е.П. Смирнова // Вестник ПГФА. 2008. - № 4. -С. 227-229.

88. Зевахина, Ю.А. Сравнительное содержание пектиновых веществ в листьях и стеблях Galega orientalis / Ю.А. Зевахина, Е.Н. Офицеров // Химия растит, сырья. -2003.-№2.-С. 33-38.

89. Зеленский, С.Е. Лекарственные растения СССР / С.Е. Зеленский. 3-е изд. -М.: Медгиз, 1958.-610 с.

90. Земнухова, Л.А. Исследование аминокислотного состава в отходах производства риса, гречихи и подсолнечника / Л.А. Земнухова, Н.В. Макаренко, Л.Я. Тшценко // Химия растительного сырья. 2009. - № 3. - С. 147-149.

91. Злобин, А.А. Динамика накопления водорастворимых пектинов в плодах Rosa rugosa (Rosaceae) / А.А. Злобин, Р.Г. Оводова // Растит, ресурсы. 2007. - Т. 43, вып. 2. - С. 52-59.

92. Злобин, А.А. Общая характеристика водорастворимых полисахаридов плодов шиповника морщинистого Rosa rugosa. / А.А. Злобин, Р.Г. Оводова, С.В. Попов // Химия растит, сырья. 2003. - № 2. - С. 39-44.

93. Злобин, А.А. Химическая характеристика водорастворимых полисахаридов каллусной ткани шиповника морщинистого Rosa rugosa Thub. / А.А. Злобин, Н.А. Жуков, Р.Г. Оводова // Химия растит, сырья. 2008. - № 1. - С. 51 -55.

94. Зяолицева, Н.С. Изучение полисахаридов клубней топинамбура и создание на их основе лечебно-профилактических средств: автореф. дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02/Н.С. Зяблицева. Пятигорск, 1998.-24 с.

95. Иванова, Н.В. Общая характеристика полисахаридов коры лиственницы / Н.В. Иванова, Р.Г. Оводова, В.А. Бабкин // Химия растит, сырья. 2006. - № 1. -С. 15-20.

96. Иллюстрированный определитель растений Пермского края / С.А. Овеснов, Е.Г. Ефимик, Т.В. Козьминых и др.; под ред. С.А. Овеснова. Пермь: Кн. мир, 2007. - 743 с.

97. Иммунотропные эффекты L-аргинина в исходном состоянии и в условиях эмоциоа 1ьно-болевого стресса / JI.A. Северьянова, И.И. Бобынцев, A.A. Крюков и др. // К) рский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2007. - № 2. - С. 5-11.

98. Интернет магазин 9 vita Электронный ресурс. // URL: http://9-vita.ru/pi oductinfo.php?products id=268 (Дата обращения: 08.09.2011).

99. Интернет магазин oriflame Электронный ресурс. // URL: http://oriflame-club.ru/oriflame/id 22486.html (Дата обращения: 08.09.2011).

100. Интернет магазин Vesta Электронный ресурс. // URL: http://ve^ ta.visitpage.ru/ (Дата обращения 13.10.2011).

101. Исаева, Е.В. Групповой состав углеводов почек тополя / Е.В. Исаева, Т.В. Рязанова // Химия растит, сырья. 2006. - № 1. - С. 33-36.

102. Исследование аминокислотного состава сфагнума бурого / H.A. Буркина, Г.И. Ка.пшкина, JI.B. Фоминых и др. // Химия растительного сырья. 2000. - № 1. -С. 81 -ЬЗ.

103. Исследование натуральных каротиноидно-антоциановых красителей / П.Н. Саввин, Е.В. Комарова, В.М. Болотов и др // Химия растит, сырья. -2010. -№ 4. -С. 135-1 *8.

104. Исследование функциональных свойств облепихового пектина / A.M. Золотарева, Т.Ф. Чиркина, Д.Ц. Цыбикова и др. // Химия растит, сырья. 1998. -№ 1. - С 29-32.

105. Исследование химического состава отходов переработки пихтовой лапки / О.Н. Ухов, В.Н. Буркова, Г.И. Калинкина и др. // Химия растит, сырья. 2006. -№ 1. - С 55-58.

106. Источники получения лютеолина и его 7-глюкозида / Г.Н. Земцова, Г.И. Геращенко, В.А. Компанцев и др. // Фармация. 1972. -№ 3. - С. 37-39.

107. Качымова, К.Г. Хлорофилл в лечении ран / К.Г. Кадымова // Сб. науч. работ НИИ решгенологии, радиологии, онкологии. Баку, 1953. - С. 223-230.

108. Кайшева, Н.Ш. Исследование процессов распределения полисахаридов в полярных и неполярных системах и тканях организма / Н.Ш. Кайшева, Л.П. Мыкоц, Ю.К. Василенко // Хим.-фармац. журнал. 2004. - Т. 38, № 1. - С. 31-34.

109. Карнаухов, В.Н. Биологические функции каротиноидов / В.Н. Карнаухов. -М.: Наука, 1988.-240 с.

110. Каррагинаны сульфатированные полисахариды красных водорослей как ингибиторы вируса табачной мозаики / А.О. Барабанова, И.М. Ермак, A.B. Реунов и др. // Растит, ресурсы. - 2006. - Т. 42, вып 4. - С. 80-86.

111. Кернер, А. Жизнь растений / А. Кренер. Спб.: Просвещение, 1903. - Т. 1 -773 с.

112. Киселева, Т.Л. Аминокислотный состав цветков фармакопейных и нефармакопейных видов Crataegus L. / Т.Л. Киселева, И.А. Самылина, Л.А. Баратов;. // Растит, ресурсы. 1989. - Т. 25, вып. 2. - С. 145-154.

113. К.тышев, Л.К. Флавоноиды растений (Распространение, физико-химические свойства, методы исследования) / Л.К. Клышев, В.А. Бандюкова, Л.С. Алюкина. -Алма-А i а: Наука, 1978. 220 с.

114. Кнорре, Д.Г. Биологическая химия / Д.Г. Кнорре, С.Д. Мызина. М.: Высшая школа, 1998.-479 с.

115. Ковалевский, Е.И. Офтальмология. Учебник / Е.И. Ковалевский. М.: Медицина, 1995.-480 с.

116. Количественное определение аминокислот в пыльце (обножке) / И.В. Духанина, А.Ю. Айрапетова, Г.Д. Лазарян и др. // Хим.-фармац. журнал. 2006. -№2. -Г. 22-23.

117. Кольман, Я. Наглядная биохимия: Пер. с нем. / Я. Кольман, К.-Г. Рём. М.: Мир, 2000.-469 с.

118. Комбинированная фармакологическая и хирургическая коррекция хронической ишемии конечности в эксперименте / А.Д. Мясников, Е.Б. Артюшкова, Д.В. Пашков и др. // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2007. - № 4. - С. 17-21.

119. Коренман, И.М. Фотометрический анализ. Методы определения органических соединений / И.М. Коренман. -М.: «Химия», 1975. -360 с.

120. К'иростелев, С.А. Фармакология и механизм антиканцерогенного действия каротшмидов: автореф. дис. . д-ра мед. наук / С.А. Коростелев. Москва, 2002. -43 с.

121. Кочетков, Н.К. Химия природных соединений / Н.К. Кочетков, И.В. Торгов, М.М. Бо I виник. М.: АН СССР, 1961. - 559 с.

122. Крегович, В Л. Биохимия растений / B.JI. Кретович. М.: Высшая школа, 1980.- 445 с.

123. Кроткова, О.А. Исследование компонентного состава фенольных соединений Euphrasia х murbeckii / О.А. Кроткова, Е.В. Смирнова // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. 2011. - №8. - С. 169171.

124. Кроткова, О.А. Исследование состава фенолкарбоновых кислот в траве и органах очанки татарской, произрастающей в Уральском регионе / О.А. Кроткова, Е.П. Смирнова // Вестник Пермской государственной фармацевтической академия, 2012.-№9.-С. 187-190.

125. К|огкова, О.А. Компонентный состав иридоидов некоторых видов рода очанка флоры Пермского края / О.А. Кроткова, Е.А. Булгакова, Е.А. Мальцева, Е.П. Смирнова // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. -2010.-№6.-С. 211-213.

126. Кроткова, О.А. Полисахариды Euphrasia brevipila (Scrophulariaceae) I О.А. Кроткова, Т.В. Бомбела, В.М. Петриченко // Вестник уральской медицинской академической науки, 2011. № 3/1. - С. 64-65.

127. Кроткова, О.А. Сравнительный анализ анатомического строения Euphrasia tatarica Fisch. и Euphrasia fennica Kihlm. (Scrophulariaceae) / О.А. Кроткова, Е.С. Абдуллина // Вестник Пермской государственной фармацевтической академии. -2008.-№4.-С. 244-246.

128. Куваев, В.Б. Предварительная химическая оценка лекарственных растений тибетской медицины, произрастающих в Забайкалье / В.Б. Куваев, К.Ф. Блинова // Вопросы фармакогнозии. 1961. - Вып. 1. - С. 213-262.

129. Курнигин, В.Т. Антибактериальное действие препаратов хлорофилла / В.Т. Курнигин, Т.В. Никитина // Тез. докл. 8-го совещ. по проблемам фитонцидов. -Киев, 1979.-С. 55.

130. Лебедев, С.И. Физиологическая роль каротина в растении / С.И. Лебедев. -Киев: Издательство Академии Наук Украинской ССР, 1953. 217 с.

131. Лебедева, Т.С. Пигменты растительного мира / Т.С. Лебедева, K.M. Сытник. Киев: Наукова Думка, 1986. - 87 с.

132. Лечамо, В. О стандартизации облепихового масла / В. Лечамо, И.И. Лобачева // Химия растит, сырья. 1997. - № 1. - С. 22-25.

133. Ловцева, Е.А. Совершенствование способов контроля качества лекарственных средств производных пурина N гликозидной структуры: автореф. дис. . канд. фармац. наук. - Пятигорск, 1993. - 18 с.

134. Луговые травянистые растения. Биология и охрана: Справ. / И.А. Губанов, К.В. Киселева, B.C. Новиков и др. М.: Агропромиздат, 1990. - 183 с.

135. Ляпина, Л.А. Антикоагулянтно-фибринолитические и гипогликемические эффекты препаратов из высших растений / Л.А. Ляпина, В.Е. Пасторова, B.C. Новиков // Вестник Московского университета. Биология. 2001. - № 2. - С. 3-7.

136. Ляпина, Л.А. Противосвертвающие и гемостатические компоненты растений (обзор) / Л.А. Ляпина // Новости науки и техники. Гематология. 1997. -№ 3. - С. 2-6.

137. Макро- и микроэлементный состав Euphrasia brevipila Burnat ex Gremli /

138. B.M. Петриченко, T.B. Сухинина, Н.С. Фурса и др. // Растит, ресурсы. 2003. - Т. 39, вып. 3. - С 111-115.

139. Мартынов, A.M. Аминокислотный и минеральный состав фиалки одноцветной / A.M. Мартынов, A.M. Собенин // Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья: Матер. III Всерос. научной конф. -Барнаул, 2007. Т. 2. - С. 112-115.

140. Матасова, С.А. Химический состав водного экстракта из шрота шиповника /

141. C.А. Матасова, Г.Л. Рыжова, К.А. Дычко // Химия растительного сырья. 1997. -№2.-С. 28-31.

142. Машковский, М.Д. Лекарственные средства. 15-е издание / М.Д. Машковский. М.: РИА «Новая волна», 2007. - 1206с.

143. Медведева, E.H. Арабиногалактан лиственницы свойства и перспективы (обзор) / E.H. Медведева, В.А. Бабкин, Л.А. Остроухова // Химия растит, сырья. -2003.-№ 1.-С. 27-37.

144. Мерзлек, М.Н. Активированный кислород и окислительные процессы в мембранах растительной клетки. Физиология растений / М.Н. Мерзлек; Под ред. И. И. Иванова. M., 1989. - Т. 6. - 165 с.

145. Михайлов, И.В. Справочник по гомеопатии / И.В. Михайлов. М.: Медицина, 2000.- 120 с.

146. Мнацаканян, В.А. Иридоидные гликозиды/ В.А. Мнацаканян. Ереван, 1986.- 187 с.

147. Муравьева, Т.И. Фармакосанирующие эффекты полисахаридов растительного происхождения: автореф. дис. . д-ра фармац. наук / Т.И. Муравьева. СПб, 1999. - 40 с.

148. Мутыгуллина, Ю.Р. Динамика содержания и роль пигментов фотосинтеза у видов рода Diantus L флоры Предкавказья / Ю.Р. Мутыгуллина // Вестник Московского госуд. обл. университета. 2009. - № 1. - С. 52-55.

149. Ноздрюхина, JI.P. Нарушение микроэлементного обмена и пути его коррекции / JI.P. Ноздрюхина, Н.И. Гринкевич. М.: Наука, 1980. - 280 с.

150. Облучинская, Е.Д. Влияние факторов внешней среды на содержание полисахаридов фукуса пузырчатого Fucus vesiculosus L. / Е.Д. Облучинская // Химия растит, сырья. 2011. - № 3. - С. 47-51.

151. Овеснов, С. А. Конспект флоры Пермской области/ С. А. Овеснов. Пермь, 1997.-252 с.

152. Оводов, Ю.С. Полисахариды цветковых растений: структура и физиологическая активность / Ю.С. Оводов // Биоорганическая химия. 1998. - Т. 24, №7.-С. 483-501.

153. Олейников, Д.Н. Исследование препарата «Сок подорожника» / Д.Н. Олейников, JI.M. Танхаева // Фармация. 2008. -№ 1.-С. 10-14.

154. Отраслевой стандарт 91500. 05. 001. 00 «Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения». - Введ. с 01.11.01. - М.: Изд-во стандартов, 2001. - 48 с.

155. Офтальмология. Учебник / Под ред. Е.И. Сидоренко. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002.-408 с.

156. Павлов, М. Энциклопедия лекарственных растений / М. Павлов; пер. с немец, предисл. И. А. Губанова. М.: Мир, 1998. - 467 с.

157. Патент 2095808 РФ, МПК G 01 N 30/94. Способ разделения и детектирования аминокислот / И.И. Малахова, В.Д. Красиков, Б.В. Тяглов, Е.В. Деггерев; № 94028253/25; заявл. 27.07.1994; опубл. 10.11.1997. 3 с.

158. Пектиновый полисахариды рябины обыкновенной Sorbus aucuparia L. / A.A. Злобин, E.A. Мартинсон, С.Г. Литвинец и др. // Химия растит, сырья. 2011. - № 1.-С. 39-44.

159. Пермякова, Г.В. Содержание пектиновых веществ в коре Pinus sylvestris (Pinaceae) / Г.В. Пермякова // Растит, ресурсы. 2007. - Т. 43, вып. 2. - С. 47-52.

160. Перспективы использования растительных полисахаридов в качестве лечебных и лечебно-профилактических средств / H.A. Криштанова, М.Ю. Сафонова, В.Ц. Болотова и др.//Вестник ВГУ. 2005.-№ 1.-С. 212-221.

161. Петриченко, В.М. Очанки западного Урала (фармакогностические и биологические аспекты): Монография. / В.М. Петриченко, Т.В. Сухинина. -Пермь: ГОУ ВПО «ПГФА Росздрава», 2006. 145 с.

162. Петриченко, В.М. Фармакогностические исследования и биологическая активность растений семейства норичниковые : дис. . д-ра фармац. наук : 15.00.02 / В.М. Петриченко; Пермская фармац. акад. Пермь, 2005. - 299 с.

163. Пищевые волокна в профилактической и лечебной медицине / Под ред. М.А. Самсонова. М.: ВИНИТИ, 1985. - Вып. 3. - 30 с.

164. Поддубная-Арнольди, В.А. Общая эмбриология покрытосемянных растений / В.А. Поддубная-Арнольди. М.: Наука, 1964. - 720 с.

165. Полевой, В.В. Физиология растений / В.В. Полевой. М.: Высшая школа, 2006.-464 с.

166. Полежаева, И.В. Аминокислотный и минеральный состав вегетативной части Chamerion angustifolium (L.) Holub. / И.В. Полежаева, Н.И. Полежаева, JI.H. Меняйло // Хим.-фармац. журнал 2007. - № 3. - С. 27-29.

167. Полисахариды из торфов и мхов / Н.В. Юдина, С.И. Писарева, A.B. Зверева и др. // Химия растит, сырья. 1999. - № 4. - С. 97-100.

168. Полле, А .Я. Выделение и общая характеристика полисахаридов из пижмы обыкновенной, мать-и-мачехи и лопуха войлочного / А.Я. Полле, Р.Г. Оводова, C.B. Попов // Химия растительного сырья. 1999. -№ 1. - С. 33-38.

169. Получение высокочистого арабиногалактана лиственницы и исследование его иммуномодулирующих свойств / E.H. Медведева, В.А. Бабкин, O.A. Макаренко и др. // Химия растит, сырья. 2004. - № 4. - С. 17-23.

170. Получение и свойства энтеросорбентов из луба березовой коры / С.А. Кузнецова, МЛ. Щипко, Б.Н. Кузнецов и др. // Химия растит, сырья. 2004. - № 2.-С. 25-29.

171. Получение сухого экстракта из корней девясила высокого и изучение его химического состава / С.А. Матасова, H.A. Митина, Г.Л. Рыжова и др. // Химия растит, сырья. 1999.-№ 2.-С. 119-123.

172. Получение энтеросорбентов из отходов окорки березы / Е.В. Веприкова, M.JI. Щипко, С.Л. Кузнецова и др. // Химия растит, сырья. 2005. - № 1. - С. 65-70.

173. Полякова, JI.B. Флавоноидный комплекс Astragalus austrosibiricus Schischk. в природных популяциях Алтая / JI.B. Полякова, Э.А. Ершова // Растит, ресурсы. -1996.-Выи. 2.-С. 81-87.

174. Полякова, Н.Э. Некоторые аспекты реакционной способности каротиноидов. Окислительно восстановительные процессы и комплексообразование // Н.Э. Полякова, Т.В. Лешина // Успехи химии. - 2006. -Т. 75, №12.-С. 1175-1192.

175. Поляковская, М. Лесные лекарственные растения / М. Поляковская. -Варшава: Гос. изд-во с.-х. и лесн. лит., 1986. -251 с.

176. Прозина, М.Н. Ботаническая микротехника / М.Н. Прозина. М. Высш. шк., 1960.-260 с.

177. Прозоровский, В.Б. Экспресс-метод определения средней эффективности дозы и ее ошибки / В.Б. Прозоровский, М.П. Прозоровская, В.М. Демченко // Фармакол. и токсикол. 1978. - № 4. - С. 497-503.

178. Противовоспалительная активность пектинов и их галактуронового кора / П.А. Марков, С.В. Попов, И.Р. Никитина и др. // Химия растит, сырья. 2010. - № 1. - С. 21-26.

179. Разводовский, Ю.В. Влияние L-триптофана на содержание свободных аминокислот и биогенных аминов в головном мозге крыс при субхронической интоксикации фенобарбиталом / Ю.В. Разводовский, Е.М. Дорошенко // Хим.-фармац. журн. 2003. - № 1. - С. 6-7.

180. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Caprifoliaceae Plantaginaceae. - Л.: Наука, 1990. - 362 с.

181. Регистр лекарственных средств России РЛС. Энциклопедия лекарств / под ред. Г.Л. Вышковского. М.: РЛС 2006, 2005. - Вып. 14. - 1392 с.

182. Репарагивная активность пептидов различных функциональных групп при гепатопатиях / М.Ю. Смахтин, А.И. Конопля, Л.А. Северьянова и др. // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2006. - № 3. - С. 11-17.

183. Рогожина, T.B. Триптофан как регулятор реакций пероксидазного окисления о-дианизина и гидрохинона в присутствии пероксидазы хрена / Т.В. Рогожина, В.В. Рогожин // Химия растительного сырья. 2010. - № 4. -С. 105-109.

184. Роль галактоманнанов в хемосистематике семейства Fabaceae / O.B. Анулов, В.Д. Щербухин, Н.М. Местечкина и др. // Бот. журн. 1999. - Т. 84, № 8. -С. 24-32.

185. Романенко, H.A. Эффективность препаратов черники в офтальмологии: клинические наблюдения / И.А. Романенко // Русский медицинский журнал. -2011. № 1: Электронный ресурс. URL: http://www.rmj.ru/ (Дата обращения: 10.12.2011).

186. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией Р.У. Хабриева. 2-е Изд., перераб. и доп. М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - 832 с.

187. Ряжова, Г.Л. Получение сухого экстракта из плодов рябины сибирской и изучение его химического состава / Г.Л. Ряжова, С.А. Матасова, С.Г. Башуров // Химия растит, сырья. 1997. - №2. - С. 37-41.

188. Сапронова, H.H. Коровяк густоцветковый / H.H. Сапронова, A.A. Копнин // Российские аптеки. 2003. - № 10.

189. Сараев, И.В. Химический состав василистника малого Thalictrum minus L. / И.В. Сараев, H.A. Величко, С.М. Репях // Химия растит, сырья. 2000. - № 2. - С. 37-39.

190. Северьянова, Л.А. Механизмы действия L-аргинина на нервную и иммунную регуляторные системы / Л.А. Северьянова, И.И. Бобынцев // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2006. - № 3. - С. 60-75.

191. Северьянова, Л.А. Современные представления о действии аминокислоты L-лизина на нервную и иммунную регуляторные системы / Л.А. Северьянова,

192. М.Е. Долгинцев // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». 2007. -№ 2. - С. 67-79.

193. Сезонная динамика содержания свободных аминокислот и алкалоидов в Aconitum septentrionale (Ranunculaceae) и Euonymus verrucosa (Celastraceae) / M.P. Лугманова, Г.В. Шендель, Н.И. Федоров и др. // Растит, ресурсы. 2010. - Т. 46, вып. 4.-С. 98-104.

194. Селенсодержащие комплексы аргинина и лизина / З.Н. Куваева, Д.В. Лопатик, О.П. Попова и др. // Хим.-фармац. журнал. 2007. - № 3. - С. 37-39.

195. Сергунова, Е.В. Исследования по стандартизации плодов шиповника / Е.В. Сергунова, А.А. Сорокина // Фармация. 2011. -№ 5. - С. 12-15.

196. Сибикина, О.В. Комплексы полисахаридов с катионами металлов: применение и строение (обзор) / О.В. Сибикина, А.А. Иозеп, А.В. Москвин // Хим.-фармац. журнал. 2009. - Т. 43, № 6. - С. 35-39.

197. Синтез и фармакологическая активность 21-эфиров преднизолона с глицином и глутаминовой кислотой / М.И. Ряховская, Г.С. Гриненко, Л.М. Алексеева и др. // Хим.-фармац. журнал. 1991. - №4. - С. 16-18.

198. Синтез, противовоспалительная и анальгетическая активность амидов напроксена с производными аминокислот / Г.Л. Левит, Л.В. Аникина, Ю.Б. Вихарев и др. // Хим.-фармац. журнал. 2002. -№ 5. - С. 12-15.

199. Синтез, противовоспалительная и анальгетическая активность аминокислот, ацилированных ибупрофеном / Л.В. Аникина, Г.Л. Левит, А.М. Демин и др. // Хим.-фармац. журнал. 2002. - № 5. - С. 16-17.

200. Современная фитотерапия / Под ред. В. Петкова. София: Медицина и физкультура, 1982. - 504 с.

201. Современная фитотерапия / Под ред. В. Петкова. София: Медицина и физкультура, 1988. - 616 с.

202. Содержание каротиноидов и флавоноидов в соцветиях некоторых сортов Calendula officinalis L. / С.А. Ивасенко, JI.H. Прибыткова, С.М. Адекенов и др. // Растит, ресурсы. 2000. - Т. 36, вып. 2. - С. 107-110.

203. Состав и свойства пектиновых полисахаридов зверобоя продырявленного Hypericum perforatum L. / А.А. Злобин, Е.А. Мартинсон, И.А. Овыкина и др. // Химия растит, сырья. 2011. - № 1. - С. 33-38.

204. Состав и свойства пектиновых полисахаридов шрота шиповника / А.А. Злобин, Н.А. Жуков, Р.Г. Оводова // Химия растит, сырья. 2007. - № 4. - С. 91-94.

205. Спектрофотометрический метод определения содержания полисахаридов в листьях Tilia cordata Mill. / В.Ц. Болотова, Е.И. Саканян, Е.И. Лесиовская и др. // Растит, ресурсы. 2001. - Т. 37, вып. 3. - С. 109-112.

206. Сравнительный аминокислотный состав растений продуцентов экдистероидов / М.И. Алиева, О.А. Бездудная, С.О. Володина и др. // Химия растительного сырья. - 2002. - № 1. - С. 63-68.

207. Судачкова, Н.Е. Белки и свободные аминокислоты в древесине сосны обыкновенной, лиственницы сибирской и лиственницы гмелина в Центральной Сибири / Н.Е. Судачкова, И.Л. Милютина, Г.П. Семенова // Химия растительного сырья. 2000. - № 1. - С. 69-76.

208. Сухинина, Т.В. Жирнокислотный состав очанки коротковолосистой / Т.В. Сухинина, В.М. Петриченко, Н.С. Фурса // Материалы 67-й межвуз. конф. студентов и молодых ученых. В 2-х частях. Ч. 2. Курск, 2002. С. 138-139.

209. Сухинина, Т.В. Фармакогностическое изучение растений рода Очанка : дис. . канд. фармац. наук : 15.00.02. / Т. В. Сухинина; Пермская фармац. акад. -Пермь, 2002.-194 с.

210. Таланов, A.A. Углеводы листьев и плодов голубики / A.A. Таланов, Н.С. Фурса // Фармация. 2009. - № 3. - С. 27-28.

211. Терехин, Э.С. О строении гаусторий у Omphalotrix, Phtheirospermum и Rhynchocorys (Scrophulariaceae) / Э.С Терехин // Бот. журн. 1983. - № 1. С. 74-77.

212. Технология лекарственных форм / Под ред. Т.С. Кондратьевой. В 2-х т. -М.: Медицина, 1991. Т. 1. - 496 с.

213. Титова, М.С. Содержание фотосинтетических пигментов в хвое Picea abies и Picea koraiensis / М.С. Титова // Вестник ОГУ. 2010. - № 12 (118). - С. 9-12.

214. Турищев, С.Н. Рациональная фитотерапия / С.Н. Турищев. М., 2000. -98 с.

215. Фадеева, Н.В. Аминокислотный состав белков древесной зелеи Padus avium Mill. / H.B. Фадеева, Л.П. Рубчевская, С.М. Репях // Химия растительного сырья. -1998.-№2.-С. 49-51.

216. Фармакогностическая характеристика надземной части галении рогатой (Halenia corniculata (L.) Cornaz) / T.M. Шишмарева, О.Г. Потанина, Л.М. Танхаева // Химия растит, сырья. 2006. - № 3. - С. 39-47.

217. Фармакология / Под. ред. Р.Н. Аляутдина. 3-е изд., испр. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - 592 с.

218. Федосеева, Л.М. Изучение и сравнительная оценка липофильных веществ зеленых, красных и черных листьев бадана толстолистного, произрастающего на Алтае / Л.М. Федосеева, Т.С. Малолеткина // Химия растит, сырья. 1999. - № 2. -С. 113-117.

219. Филиппенко, Т.А. Антиоксидантная активность аминокислот при окислении подсолнечного масла в эмульсии / Т.А. Филиппенко, Н.Ю. Грибова // Хим.-фармац. журнал. 2011. - №5. - С. 40-42.

220. Флора Европейской части СССР / Под ред. Ан. А. Федорова, Р.В. Камелина. -Л.: Наука, 1981.-380 с.

221. Флора СССР / Под ред. Б.К. Шишкина. М. Л.: Изд-во АН СССР, 1955. - Т. 22. - 705 с.

222. Френкель, Л.Д. Гомеопатическое лекарствоведение: Справочное руководство / Л.Д. Френкель. Харьков: Эмуш, Велес, 1993. - 584 с.

223. Фризе, К.Х. Гомеопатическая терапия в оториноларингологии / К.Х. Фризе; Пер. под ред. В.М. Захаренкова. Смоленск: Гомеопат, медицина, 1997. - 89 с.

224. Харук, В.И. Внелистовые пигменты древесных растений / В.И. Харук, H.A. Тереков. Новосибирск, 1982.-81 с.

225. Химический анализ лекарственных растений / Под ред. Н. И. Гринкевич, Л. Н. Сафронич. М.: Высш. шк., 1983. - 175 с.

226. Химический состав и антиоксидантная активность биологически активных веществ очанки коротковолосистой / В.М. Петриченко, Т.В. Сухинина, Л.К. Бабиян и др. // Хим.-фармац. журнал. 2006. - Т. 40, № 6. - С. 22-26.

227. Химический состав пырея ползучего и изучение его антиоксидантной активности при аллергическом контактном дерматите / А.П. Петрова, Е.А. Краснов, Э.В. Сапрыкина и др. // Хим.-фармац. журнал. 2009. - Т. 43, № 1. - С. 30-32.

228. Химия углеводов / Н.К. Кочетков, А.Ф. Бочков, Б.А. Дмитриев и др. М. : Химия, 1967.-671 с.

229. Чекрышкина, Л.А. Инструментальные методы в фармацевтическом анализе : учеб. пособие / Л.А. Чекрышкина, Н.И. Эвич; под ред. Л.А. Чекрышкиной. -Пермь, 2005.-210 с.

230. Чернобровкина, Н.П. Накопление L-аргинина в хвое сосны обыкновенной при регуляции азотного и борного обеспечения / Н.П. Чернобровкина, Е.В. Робонен, М.И. Зайцева // Химия растительного сырья. 2010. -№ 3. - С. 71-75.

231. Шабаров, Ю.С. Моно- и дисахариды / Ю.С. Шабаров, Т.С. Орецкая, П.В. Сергиев. Москва, 2010. - 82 с.

232. Шелестова, B.B. Современные подходы к стандартизации лекарственных средств, содержащих каротиноиды: бета-каротин и ликопин: дис. . канд. фармац. наук / В.В. Шелестова; ВИЛАР РАСХН. Москва, 2002. - 186 с.

233. Шкроботько, П.Ю. Аминокислотный состав подземных органов валерианы Фори и валерианы бузинолистной / П.Ю. Шкроботько, Д.М. Попов, Н.С. Фурса // Фармация.-2009.-№7.-С. 19-23.

234. Шмидт, В. М. Математические методы в ботанике / В.М. Шмидт. Л., 1984. -287 с.

235. Щелокова, Л. Г. Атлас лекарственных растений Пермского края. Применение в медицине и ветеринарии / Л. Г. Щелокова, С. Г. Глумов. Пермь, 2009. - 240 с.

236. Экспресс-метод определения антиокислительной активности лекарственных веществ / Т.В. Починок, М.Л. Тараховский, В.А. Портнягина и др. // Хим.-фарм. журн,- 1985.-№ 5.-С. 565-569.

237. Эммануэль, М.Н. Физико-химические основы применения фенольных соединений в химии и биологии / М.Н. Эммануэль // Фенол, соединения и их биолог, функции. М., 1968. - С. 311 -331.

238. Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения: Учеб. пособие / Под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. Спб.: Спец. лит., 1999. - 407 с.

239. Энциклопедический словарь. М.: Большая советская энциклопедия, 1955. - 864с.

240. Энциклопедия лекарственных растений Электронный ресурс. // URL: http://www.medgrasses.ru/preparationofgrasses/alkaloidy.html

241. Юсупова, Н.Я. Влияние очанки на кровообращение и экспериментальную гипертонию: Дис. . канд. мед. наук / Н.Я. Юсупова. Ташкент, 1956. - 210 с.

242. Яковлев, Г.П. Ботаника: Учеб. для фармац. институтов и фармац. фак. мед. вузов / Г.П. Яковлев, В.А. Челомбитько; под ред. И. В. Грушвицкого. М.: Высш. шк„ 1990.-367 с.

243. Якубке, Х.-Д. Аминокислоты. Пептиды. Белки. / Х.-Д. Якубке, X. Ешкайт. -М.: Мир, 1985.-82 с.

244. Ямалеева, A.A. Метаболиты лекарственных растений и перспективы их использования в пищевой и фармацевтической промышленности / A.A. Ямалеева, Т.Е. Осокина // Вестник ОГУ. 2009. - № 6. - С. 523-525.

245. Яцко, Я.Н. Пигментный аппарат вечнозеленых растений на Севере: автореф. дисс. . канд. биол. наук / Я.Н. Яцко. СанктПетербург, 2010. - 23 с.

246. Anticancer and antithrombin activity of Russian plants / E.A. Goun, V.M. Petrichenko, S.U. Solodnikov et al. // Journal of Ethnopharmacology. 2001. -№81 -P. 337-342.

247. Antioxidative effect of ubiguinone on mitochondrial membranes / L. Ladi, L. Cabrini, A.M. Sechi et al. // Biochem. J. 1984. V. 222. - P. 463-466.

248. Armstrong, D. Free radical involvement in the formation of lipopigments / L.D. Armstrong et al. // Free radical in molecular biology, aging, and disease. New York: Raven Press, 1984.-P. 163-180.

249. Bobear, Jean B. An analysis of populations of Jrish Euphrasia L. / Jean B. Bobear // Watsonia. 1969. - V. 7, № 2. - P. 68-91.

250. Broda, В. Owyst^powaniu kwasu kawowego w niektorich roslinach leczych / B. Broda, W. Jaronewski, L. Swi^tek // Acta pol. Pharm. 1960. - Vol. 17, № 4. - P. 301-306.

251. Deutsches Homöopathisches Arzneibuch. Berlin, 1953 - 180 s.

252. Extraction and purification of squalene from amaranthus grain / H.P. He, Y. Cai, M. Sun, et al. // J. Agric. Food Chem. 2002. - V. 50, № 2. - P. 368-372.

253. Greger, G. Zur Kenninis iridoidez Pflanzensteffe / G. Greger, P. Simchen // Die Pharmazie. 1967. - V. 22, № 6. - P. 315.

254. Hegnauer, R. Chemotaxonomie der Pflanzen: Bd. 1-6/ R. Hegnauer. Stuttgart, 1964.

255. Hultein, E. The total range of Euphrasia / E. Hultein // Bot. notis. 1975. - Vol. 128, №3-P. 357-364.

256. Jalas, J. New nomenclatural combinations in Euphrasia, Rumex, silene and Stachys / J. Jalas//Ann. bot. fenn. 1977. - Vol. 14, № 4. - P. 191-192.

257. Jalas, J. Tipification of the taxa of Euphrasia (Scrophulariaceae) discribed by finnish botanists / J. Jalas, J. Kukkonen // Ann. bot. fenn. 1973. - Vol. 10, № 1. -P. 27-42.

258. Jorgensen, E. Die Euphrasia-Arten Norwegens // Bergens Mus. Aarb., 19161917. Kristiania.- 1919.-Bd. 5, Hf. 2.-337 p.

259. Krolikowska, M. Skladniki ziela swietlika t^kovego (Euphrasia rostkoviana Hayne.) / M. Krolikowska // Rocz. Chem. 1967. - V. 41, № 2. - P. 327-336; № 3. - P. 529-540.

260. Kuo, Y.H. Neuroactive and other free amino acids in seed and young plants of Panax ginseng / Y.H. Kuo, F. Ikegami, F. Lambein // Phytochemistry. 2003. - V. 62, №7.-P. 1087-1091.

261. Larkum, Anthony W.D. Chlorophyll d: the puzzle resolved / Anthony W.D. Larkum, M. Kuhl // Trends in plant science. 2005. - V. 10, № 8. - P. 355-357.

262. Lichtenthaler, Hartmut K. Chlorophylls and Caratenoids: Pigments of Photosynthetic Biomembranes / Hartmut K. Lichtenthaler // Methods in Enzymology. -1987.-V. 148.-P. 350-382.

263. Prospective cohort trial of Euphrasia single-dose eye drops in conjunctivitis / M. Stoss, C. Michels, E. Peter et al. // Altern Complement Med. 2000. - Vol. 6, № 6. - P. 499-508.

264. Pugsley, H.W. A revision of the British Euphrasia / H.W. Pugsley // Journal Linn. Soc. London, Botany. 1930. - V. 48. - P. 467-544.

265. Rozan, P. Amino acids in seeds and seedling of the genus Lens / P. Rozan, Y.H. Kuo, F. Lambein // Phytochemistry. 2001. - V. 58, №2. - P. 281-289.

266. Rozan, P. Nonprotein amino acids in edible lentil and garden pea seedlings / P. Rozan, Y.H. Kuo, F. Lambein // Amino Acids. 2001. - V. 20, № 3. - P. 319-324.

267. Salama, O. Jridoidglucoside von Euphrasia rostkoviana Hayne. / O. Salama, O. Sticher // Planta med. 1983. - V. 47, № 2. - P. 90-94.

268. Sell, P.D. Yeo P.F. A revision of the North American species of Euphrasia L. / P.D. Sell, P.F. Yeo // Bot. J. Linnean Soc. 1970 - V. 63, № 3. - P. 189-234.

269. Sticher, O. Euphraside, a new iridoid glycoside from Euphrasia salisburgensis Hoppe. / O. Sticher, O. Salama // Helv. chim. acta. 1981. - V. 64, № 1. - P. 78-81.

270. Sukran, D. Spectrophotometric determination of chlorophyll A, B and total carotenoid contents of some Algae species using different solvents / D. Sukran, G. Tohit, S. Ridvan // Tr. J. of Botany. - 1998. - № 22. - P. 13-17.

271. Vitamin E and the heart: possible role as antioxidant / R. Ferrari, O. Viscoli, C. Guarnieri et al. // Acta vitaminol. and enzymol. 1983. - V. 5, № 1. - P. 11-22.

272. Wagner, H. Search for plant natural products with immunostimulatory activity (recent advances) / H. Wagner // Pure and Appl. Chem. 1990. - V. 62. - №7. - P. 1217-1222.

273. Wang, C.C. Chromatographic determination of polysaccharides in Lycium barbarum Linnaeus / C.C. Wang, S.C. Chang, B.H. Chen // Food Chemistry. 2009. -V. 116.-P. 595-603.

274. Wettstein, R. Monographie der Gattung Euphrasia / R. Wettstein. Leipzig, 1896. -316 s.

275. Yagi, K. A simple fluorimetric assay for lipoperoxide in blood plasma / K. Yagi // Biochem. Med. 1976. - V. 15, № 2. - P. 212-216.

276. Yeo, P.F. A toxonomic revision of Euphrasia in Europe / R.F. Yeo // Bot. J. Linnean Soc. 1978. - V. 77, № 4. - P. 223-228, 329-330.i