Роль калия и систем, регулирующих его транспорт, в реализации иммуномодулирующих эффектов хорионического гонадотропина и окситоцина

Лялина, Ольга Григорьевна

Диссертации по медицине → Аллергология и иммулология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Роль калия и систем, регулирующих его транспорт, в реализации иммуномодулирующих эффектов хорионического гонадотропина и окситоцина

ДИССЕРТАЦИЯ

Роль калия и систем, регулирующих его транспорт, в реализации иммуномодулирующих эффектов хорионического гонадотропина и окситоцина - диссертация, тема по медицине

АВТОРЕФЕРАТ

Роль калия и систем, регулирующих его транспорт, в реализации иммуномодулирующих эффектов хорионического гонадотропина и окситоцина - тема автореферата по медицине

Лялина, Ольга Григорьевна Пермь 2002 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 14.00.36

Автореферат диссертации по медицине на тему Роль калия и систем, регулирующих его транспорт, в реализации иммуномодулирующих эффектов хорионического гонадотропина и окситоцина

На правах рукописи

Г • ■ - -

- и <;,

ЛЯЛИНА Ольга Григорьевна

РОЛЬ КАЛИЯ И СИСТЕМ, РЕГУЛИРУЮЩИХ ЕГО ТРАНСПОРТ, В РЕАЛИЗАЦИИ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ ЭФФЕКТОВ ХОРИОНИЧЕСКОГО ГОНАДОТРОПИНА И ОКСИТОЦИНА

14.00.36 Аллергология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Пермь-2002

Работа выполнена в Институте экологии и генетики микроорганизмов Уральског отделения РАН, г.Пермь

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Ширшев С.Е

Официальные оппоненты: кандидат медицинских наук, доцент Бахметьев Б.А

доктор биологических наук, профессор Рябшшп В.Е

Ведущая организация: ГНЦ НИИ иммунологии Минздрава России,Т. Москва

Защита состоится « » 2002 г. в часов

на заседании диссертационного совета Д.208.117.03 в Челябинской государственно; медицинской академии по адресу: 454092, Челябинск, ул. Воровского, 64.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Челябинской государственно! медицинской академии.

Автореферат разослан «» ¿У/'^чР 2002 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

д.м.н., профессор А.В. Зурочка

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В процессе беременности,~ "помимо'гормональных перестроек, в организме матери происходят существенные изменения иммунной системы [Кеворков и др., 1993; Ширшев, 1999]. В силу того, что клетки плода экспрессируют на своей поверхности антигены отцовского гаплотипа, они, как полуаллогенный трансплантат, являются потенциальной мишенью для цитотоксического ответа со стороны иммунной системы матери [Ceppellini et al., 1971; Miggiano et al., 1974; Segaloff et a/.,1990]. Однако отторжения не происходит, отчасти • благодаря синтезу ряда плацентарных гормонов [Кеворков и др., 1993; Ширшев, 1999; Ширшев, Кеворков. 1991] Наиболее важным гормоном плаценты, протектирующим развитие беременности, является хорионический гонадотропин (ХГ) [Кеворков и др., 1993; Ширшев, 1995; 1997; Fabris, 1973; Hammarstrom et al., 1979]. Окситоцин (ОТ), в свою очередь, ответственен за индукцию родовой деятельности, лактацию и специфическое материнское поведение [Hatton, 1990; Pedersen, Prange, 1987].

Показано, что ХГ обладает рядом иммуномодулирующих эффектов и участвует з контроле функциональной активности мононуклеарных фагоцитов - эффекторов гормона в репродуктивных тканях [Femberg et al., 1994; Hashii et al., 1998; Schafer et al., 1992]. При этом молекулярные механизмы его действия остаются недостаточно изученными, а регуляция функций моноцитов ОТ практически не исследована.

Известно, что функциональная активность моноцитов/макрофагов, в частности, процессы активации, пролиферации, продукции цитокинов и пр., зависят от деятельности системы К+-транспорта [Beauvais et al., 1992; Beeton et al., 2001; Blunk et al., 2001; Jensen et al., 1999; Khanna et al., 2001; Lin et al., 1993]. В связи с этим, представляется важным изучить влияние гормонов на транспорт К* и его место в гормональной регуляции функциональной активности клеток. Поскольку К+-транспортирующие системы мононуклеарных клеток [Ehring et al., 1998; Revelli et al., 2000], как и некоторые эффекты XI" и ОТ [Ширшев, 1998; Maas et al., 1992; McArdle et al., 1991], регулируются половыми стероидными гормонами, необходимо было оценить их участие в гормональной регуляции системы К+-транспорта и функциональной активности мононуклеаров. Учитывая, что при беременности ХГ и ОТ одновременно присутствуют в материнском кровотоке, также важно было оценить и их совместное влияние на уровне мононуклеарных клеток.

Цель работы. Исследование роли ионов К+ и его основных транспортных систем в реализации эффектов ХГ и ОТ, а также их совместного действия, на уровне моноцитов периферической крови с учетом пола и фаз менструального цикла.

Задачи:

1. Изучить влияние ХГ, ОТ и их комбинаций на фагоцитарную активность моноцитов периферической крови человека, а также зависимость их эффектов от пола и фаз менструального цикла.

2. Изучить самостоятельные и совместные эффекты физиологических доз ХГ и ОТ на модуляцию уровня внутриклеточного К+ в моноцитах с учетом пола и фаз менструального цикла.

3. Исследовать роль ХГ, ОТ и их сочетаний в регуляции активности секреторной эластазы моноцитов периферической крови в зависимости от пола и фаз менструального цикла.

4. Оценить участие системы К+-транспорта в самостоятельной и совместной регуляции ХГ и ОТ процессов фагоцитоза и эластазной активности моноцитов периферической крови.

Научная новизна работы. Новыми являются данные о влиянии ОТ, как-самостоятельно, так и совместно с ХГ, на фагоцитарную и эластазную активность моноцитов периферической крови. Выявлена зависимость эффектов ОТ и ХГ от пола и фаз менструального цикла.

Установлена способность гормонов, а также их комбинаций, дозозависимо модулировать уровень внутриклеточного К+ в моноцитах в зависимости от пола и фаз менструального цикла.

Исследована роль потенциалзависимых К+-каналов и Ка7К*-АТРазы. осуществляющих основной транспорт К* в клетках, в регуляции гормонами функциональной активности моноцитов. Установлено непосредственное участие системы К+-транспорта в регуляции ХГ и ОТ фагоцитарной активности моноцитов периферической крови. Впервые показано, что К+-транспорт участвует также в регуляции ОТ активности секреторной эластазы моноцитов.

клеток периферической крови. Представлены новые данные о взаимосвязи гормонов в контроле функций фагоцитирующих клеток с учетом фаз менструадьногоцикла.

Представлен один из аспектов комплексного иммунорегуляторного действия репродуктивных гормонов, который необходимо учитывать при изучении иммуноэндокринного статуса беременных.

Полученные данные внедрены в учебный процесс на кафедрах микробиологии и иммунологии, зоологии позвоночных и экологии, экологии и безопасности жизнедеятельности Пермского государственного университета, кафедре патофизиологии Пермской государственной медицинской академии.

Положения, выносимые на защиту:

1. ХГ реализует фагоцитоз-модулируюшее действие в зависимости от дозы, пола и фазы менструального цикла. В низкой концентрации гормон оказывает депрессивное, а в высокой - стимулирующее действие на фагоцитарную активность моноцитов женщин.

2. ОТ вне зависимости от дозы стимулирует фагоцитарную активность фракционированных моноцитов и его эффект напрямую связан с полом и фазой менструального цикла. При совместном применении ХГ препятствует действию ОТ в фолликулярной фазе менструального цикла, а в лютеиновой фазе, напротив, эффект ХГ усиливается ОТ.

3. ХГ и ОТ регулируют активность секреторной эластазы моноцитов периферической крови в зависимости от пола, фаз менструального цикла и степени активации клеток. При совместном использовании гормоны выступают как сянергисты.

4. ХГ и ОТ способны дозозависимо модулировать уровень внутриклеточного Кт в мононуклеарных клетках периферической крови в зависимости от пола и фаз менструального цикла. При совместном применении гормоны усиливают самостоятельные эффекты друг друга.

5. Регуляция ХГ фагоцитарной активности моноцитов периферической крови связана с системой К^-транспорта посредством потенциалзавиСимых К+-каналов.

6. Система К+-транспорта непосредственно включена в механизм регуляции ОТ фагоцитарной и эластазной активности моноцитов, причем наибольшая роль принадлежит мембранной Na+/KT-ATPa3e клеток.

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ. Результаты представлены на III и IV Научных конференциях с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге '99» и «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2000», а также на научной конференции «Актуальные

проблемы фундаментальных исследований в области биологии и медицины» (Санкт-Петербург, 2000), Научной сессии Пермской государственной медицинской академии. (Пермь, 2000), XIV Российской конференции «Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях» (Челябинск, 2000), 5-й Путинской конференции молодых ученых «Биология - наука 21-го века» (Пущино,2001) и I Конференции иммунологов Урала (Екатеринбург-2001).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 165 страницах печатного текста и состоит из введения, двух глав обзора литературы, материалов и методов, трех глав собственных исследований, заключения и выводов. Работа содержит 14 рисунков и 20 таблиц. Список литературы включает 451 источник.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования

Работа выполнена в Институте экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН (г. Пермь).

В работе использовали фракционированные моноциты практически здоровых доноров, мужчин и небеременных женщин в возрасте 19-48 лет. Женщины были разделены на группы: женщины, находящиеся в фолликулярной (1 фаза) и лютеиновой (2 фаза) фазах менструального цикла. ХГ («Profasi», Serono, Италия) применяли в дозах 10 и 100 ME/мл (Димитров, 1979), а ОТ (Гедеон Рихтер, Венгрия) - 0,001 и 0,0001 МЕ/мл (Fuchs et al., 1983), что соответствует их физиологическим концентрациям в разные сроки беременности и при родах. Для блокирования потенциалзависимых К+-каналов и Na+/K+-АТРазы использовали тетраэтиламмония хлорид (TEA) ("Sigma",США) в концентрации 30 мМ (Crutchley, Conanan, 1995) и уабаин ("Sigma",США) в концентрации Ю"7 М (Dornand eta!., 1984), соответственно.

Моноциты выделяли из гепаринизированной периферической крови (30 мл) по методу, основанному на стандартных методиках выделения адгезивных клеток (Rola-Pleszczynski, Hallowell, 1978; Pertof, 1980; Эккерт, 1987). Мононуклеарные клетки центрифугировали в градиенте плотности фиколл-верографина (1,077 г/см3) («Sigma», США; «Спофа», Чехия, соответственно). Полученную суспензию мононуклеаров после двойной отмывки в среде 199 помещали на стеклянные чашки Петри с 5% эмбриональной телячьей сывороткой («Sigma», США) и инкубировали 45 мин при 37°С. Затем адгезировавшие моноциты снимали механическим способом, дважды отмывали и повторно инкубировали 45 мин при 4°С для стабилизации функциональной активности.

Жизнеспособность, определяемая по включению 0,0!% эозина, составила 93-98%.

Чистота ^выделения моноцитов, оцениваемая иммунофлуоресцентным методом----------

(Джаносен, Амлот, 1990) с использованием моноклональных антител к CD 14 (Primary Anti-Human CD14; clone 2D-1SC, ICN Ph.), составила 78-85%.

Фагоцитарная активность моноцитов оценивалась методом, основанном на регистрации поглощения формалинизированных эритроцитов барана (ФЭБ) в качестве объектов фагоцитоза (Каплин, 1992; 1996). Рассчитывали стандартные показатели: 1) Процент фагоцитоза - количество клеток, захвативших один или более одного объекта фагоцитоза па 100 потенциальных фагоцитов. 2) Фагоцитарное число (ФЧ) - количество объектов фагоцитоза, которое в среднем приходится на один из 100 потенциальных фагоцитов. 3) Фагоцитарный индекс (ФИ) - количество объектов фагоцитоза, которое приходится на одну фагоцитирующую клетку.

Активность эластазы (ЭЛ) в клеточных супернатантах определяли по интенсивности гидролиза синтетического субстрата ВАЕЕ (O'Connor et al, 1993). Оптическая плотность фиксировалась в многоканальном спектрофотометре Anthos HMTL II! (Labtec Instruments, Австрия) при длине волны 340 нм.

Уровень внутриклеточного калия ([К"],) в моноцитах определяли на пламенном фотометре ФПЛ-1 (Россия) после обработки клеток 1% Тритоном Х-100 («Serva».США) (Edberg et al., 1995). Пробы оценивались в триплетах, уровень [Ю], выражали в мкМ/106 клеток.

Результаты представлены в виде средней арифметической и ее стандартной ошибки (М±га). Статистический анализ полученных данных проводили с использованием непараметрического U-критерия Манна-Уитни. В таблицах значения р представлены только для достоверных (р<0,05) отличий.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

ХГ как регулятор функциональной активности моноцитов периферической крови

Для изучения влияния ХГ на фагоцитоз была проведена серия экспериментов in vitro на фракционированных моноцитах периферической крови*.

Установлено, что ХГ в исследуемых дозах (10 и 100 ME/мл) на 60 мин культивирования достоверно угнетает поглотительную способность (ФЧ и ФИ)

* - автор благодарит к.б.н. Заморину С.А., совместно с которой выполнена работа по оценке влияния ХГ на фагоцитарную активность моноцитов.

моноцитов женщин, находящихся в фолликулярной фазе менструального цикла (рис.1). В клетках лютеиновой фазы ХГ в дозе 100 МЕ/мл снижает процент фагоцитирующих клеток на 10-й мин инкубации, а на 60 мин, напротив, повышает их фагоцитарную активность, в то же время не оказывая влияния на клетки мужчин (рис.1). Таким образом, фагоцитоз-модулирующее действие ХГ напрямую зависит от дозы гормона, пола, фазы менструального цикла и времени гормонального воздействия.

При оценке эластазной активности супернатантов культур моноцитов выявлено, что ХГ в дозах, характерных для беременности, не оказывает влияния на активность секреторной эластазы как интактных, так и зимозан-стимулированных клеток, вне зависимости от пола и фаз менструального цикла (табл.1).

Таблица 1

Влияние ХГ и ОТ на активность эластазы в супернатантах кратковременной культуры фракционированных моноцитов

N Эксперимент, воздействие Женщины, 1 фаза (п=7) Женшины, 2 фаза (п=6) Мужчины (п=6)

Спонт.ЭЛ Стим. ЭЛ Спонт.ЭЛ Стим. ЭЛ Спонт.ЭЛ Стим.ЭЛ

1 Контроль (растворитель гормона) 0,87 ± 0,025 1,09 ±0,094 0,9$ ±0,097 1,13 ± 0,123 1,00 + 0.039 1,40 ±0,114

2 ХГ 10 МЕ/мл 0,87 ±0,022 1,11 ±0,103 1,54 ±0,657 1,18 + 0,099 1,13 ±0,061 1,17 ±0,068

3 ХГ 100 МЕ/мл 0,88 ± 0,008 1,10 ± 0,105 0,98 ± 0,097 1,16 ± 0.130 1,10 + 0.031 1.24 + 0.050

4 ОТ 0,001 МЕ/мл 0,85 ± 0,022 1,09 ±0,108 0,96 ±0,098 1,15 ±0,133 0,89 ±0,037 1,08 + 0,043 р{4-1)<0,05

5 ОТ 0,0001 МЕ/мл 0,86 ± 0,013 1,17 ±0,114 0,97± 0,103 1,24 ±0,114 0,92 ±0,052 1,07 + 0,091 р(5-1)<0,05

6 ХГ 10 МЕ/мл + ОТ 0,001МЕ/мл 0,87 ±0,018 1,12 ±0,092 0,96 ±0,105 1,20 ±0,095 0,88 ± 0,032 р(6-1)<0,05 р(б-2)<0,05 1,14 + 0,097 р(6-1)<0,05

7 ХГ 10 МЕ/мл + ОТ 0,0001 МЕ/мл 0,89 + 0,018 1,11 ±0,092 1,02 ±0,120 1,18 ± 0,107 0,93±0,04б р(7-2)<0,05 1,39 + 0,120 р(7-5)<0,05

8 ХГ 100 МЕ/мл + ОТ 0,001 МЕ/мл 0,91 ±0,019 1,09 ±0,091 1,00 ±0,096 1,12 ± 0,109 0,94 ± 0.033 р(8-3)<0,05 1,15 + 0,104

9 ХГ 100 МЕ/мл + ОТ 0,0001 МЕ/мл 0,79 + 0,015 р(9-1)<0,05 р(9-3)<0,01 р(9-5)<0,0> 1,27 ±0,086 0,92 ±0,106 р(9-1)<0,05 р(9-3)<0,05 1,22 ±0,041 0,93 ± 0,057 р(9-3)<0,05 1,11+0.049 р(9-1 )<0,05

При оценке уровня [К*], во фракционированных моноцитах установлено, что низкая доза ХГ (10 МЕ/мл) повышает этот показатель на 10 мин инкубациии в клетках женщин фолликулярной фазы менструального цикла (рис.2, а), тогда как высокая доза ХГ (100 МЕ/мл) приводит к его снижению на 30 мин культивирования по отношению к 10-й и 60-й мин (рис.2,в) в моноцитах мужчин.

т в

10 мин

30 мин

- 1 3

т -

60 мин

З' 60

О 50

го •Я- 40

3»

X ?0

о 10

а с 0

1.5

0.5

10 мин

30 мин

•Зйт-ЭЕ-

за

-Ь

10 мин

30 мин

60 мин

10 мин

30 мин

60 мин

3 2.5 2

| 1.5 1

0.5 0

! О МИН

60 мин

з: в

Рис.1. Влнянне ХГ на фагоцитарную активность моноцитов периферической крови женщин, находящихся и фолликулярной (а) и лютсиновой (б) фазах менструального цикла

Примечание: а - досшвериые оыичия от контроля, р-0.05: 1 контроль; 2 ■ ХГ 10 МГ:./мл: 3 - ХГ' 100 МЕ'мл.

Юмин ЗОмнн бОмин

10 мин 30 мин бОмин а_ХГ_«0____¿НЗХГ 100 -^Контроль]

Рис.2. Влияние ХГ на уровень (К*]-, в моноцитах периферической крови Примечание: а) женщины в фолликулярной фазе цикла, б) женщины в лютеиновой фазе цикла, в) мужчины, а - достоверные отличия от контроля, Ь - достоверные отличия от 10 мин инкубации, с - достоверные отличия от 30 мин инкубации, р<0,05. По оси X - уровень [К*}, мкМ/106 клеток; по оси У - время инкубации, мин.

В клетках прогестерс доминантной фазы цикла уровень [К стабилизировался относительно контро в процессе инкубации (рис. 2, б). Таю образом, влияние ХГ на уровень [К зависит от дозы гормона, пола и фа: менструального цикла. По-видимому, моноцитах женщин фолликулярной фа: цикла эстрогены и ФСГ способствова: К+-потенциирующему эффекту низк( дозы ХГ, тогда как в моноцит; лютеиновой фазы, под действие доминирующего прогестерона, в> эффекты ХГ нивелировались.

Таким образом, в моноцит; женщин, находящихся в фолликулярнс фазе цикла, ХГ в исследуемых доз; оказывает депрессивное действие I фагоцитарную активность клеток на бОмин инкубации, при этом низкая до: гормона индуцирует повышение уровр [К+]( на 10-й мин. Возможно, гормо) индуцированный всплеск уровня [К+], клетках на раннем этапе инкубаци создает предпосылки на молекулярно уровне для проявления угнетающе! действия низкой дозы гормона на и фагоцитарную активность. В то же врем: для реализации фагоцит-регулирующег действия высокой дозы ХГ модуляци внутриклеточного содержания К+, пс видимому, несущественны. В моноцита мужчин не наблюдается эффекто гормона ни на фагоцитоз, ни н

уровень [К+]„ из чего можно заключить, что решающим значением в реализации гормонального действия обладают женские половые! стероиды. Поскольку в лютеиновой — фазе модуляция фагоцитарной активности не сопровождается изменениями уровня [К'],, по-видимому, именно с влиянием стероидного фона фолликулярной фазы цикла, с действием эстрогенов, связано сопряжение фагоцитарной активности клеток с уровнем |К+], при их регуляции низкой дозой ХГ.

В связи с этим, дальнейшая расшифровка молекулярных механизмов действия ХГ с оценкой основных транспортных систем К+ проводилась только на моноцитах данной фазы. При блокаде К»-каналов и Ка+/К*-АТРазы, определяющих основной поток К* и уровень [К+], в клетках, TEA и уабаином выявлено повышение процента фагоцитирующих моноцитов, что указывает на равное участие обеих транспортных систем К+ в регуляции фагоцитарной активности клеток (табл 2). В то же время, уровень [K+]i клеток достоверно повышался при блокаде №+/К+-АТРазы, но не Ку-каналов, демонстрируя большее участие мембранной Na+/K+-ATPa3bi в поддержании уровня [K+]i в клетке (табл.3). Поскольку стимуляция фагоцитоза сопровождается в одном случае повышением, а в другом -отсутствием изменений уровня [K+]i, можно заключить, что фагоцитарная активность и система К+-транспорта моноцитов связаны в большей степени на уровне самих К"-транспортеров

Таблица 2

Влияние ХГ иа фагоцитарную активность моноцитов женщин в фолликулярной фазе менструального цикла на фоне блокады К+-каналов и ."\'а/'К*-АП'аш

N Экспериментальное воздействие п Процент фагоцитоза Фагоцитарное число Фагоцитарный индекс

1 Контроль (растворитель гормона) 13 24.01 ±1,459 0,32 + 0,032 1,31 ± 0,051

о ХГ 10 МЕ/мл 11 22.02 ± 2,537 0,26 ; 0,048 1,21 ±0,072

3 ХГ 100 МЕ/мл 11 30,24 ± 3,620 0,39 + 0,071 1.25 + 0,080

4 TEA 30 мМ 10 34,97 ±4,050 р (4-1) <0,05 р (4-2) < 0,05 0,46 + 0,073 р(4-2)< 0,05 1.33 ± 0.045

5 Уабаин Ю''М 9 34,50 ±3,781 р (5-1) <0,05 р (5-2) < 0,05 0,45 + 0.072 р(5-2) < 0,05 1,24+0,107

6 ХГ10 ME/'мл т TEA 5 29,26 ± 5,457 0,34 + 0,063 1,19 ± 0,010

7 ХГ 100 МЕ/мл + TEA 6 27,33 ±6,107 0,34 ±0,107 1,23+ 0.077

8 ХГ 10 МЕ/мл + уабаин 5 29,67 ±4,474 0,26 + 0,107 0,98 ± 0.208

9 ХГ 100 МЕ/мл + уабаин 5 22,84 ±3,351 0,25 ±0,046 1,10 + 0.116

Таблица 3

Влияние ХГ иа уровень (К*]| во фракционированных моноцитах на фоне блокады К+-каналов и ^+/К+-АТРазы

N Экспериментальное воздействие п [К1, мкМ/10 клеток Р

1 Контроль (растворитель гормона! 24 7,70 ± 0,520

2 ХГ 10 МЕ/мл 9 8,66 ± 1,404

3 ХГ 100 МЕ/мл 20 8,81 ±0,777

4 TEA 30 мМ 23 7,45 ± 0,578

5 Уабаин 10"7 М 22 9,68 ± 0,609 р(8-1)<0,02

6 ХГ 100 МЕ/мл + TEA 10 7,66 ±0,551

7 ХГ 100 МЕ/мл + уабаин II 7,4810,838

ХГ в исследуемых дозах полностью отменял эффекты ингибиторов Ку-каналов и Ка+/К+-АТРазы на моноцитарный фагоцитоз, что указывает на антагонизм гормона по отношению к обоим К+-ингибиторам (табл.2). Гормон также снимал действие ингибитора Ма7К+-АТРазы на уровень [К+], (табл.3), по-видимому, являясь эффективным антагонистом уабаина как на уровне регуляции фагоцитоза, так и внутриклеточного содержания К+, тогда как его антагонизм к блокатору Ку-каналов проявляется только при регуляции фагоцитоза.

Таким образом, ХГ в низкой дозе реализует фагоцитоз-угнетающее действие на моноциты фолликулярной фазы менструального цикла, сопровождаемое повышением уровня [К+], в этих клетках. При регуляции фагоцитоза высокой дозой гормона не наблюдается изменений уровня [К+], в клетках женщин обеих фаз цикла, тогда как в мужских фагоцитах, наоборот, ХГ в этой дозе способен модулировать [К+]„ не влияя на фагоцитоз. Поскольку процент активных фагоцитов связан с действием К*-транспортеров. а уровень [К+]„ определяет их поглотительную активность, можно предположить, что ХГ регулирует фагоцитоз моноцитов через КУ-каналы и №+/К+-АТРазу, а в низкой дозе гормон модулирует и поглотительную способность фагоцитов - изменяя уровень [К*],. Учитывая, что №+/К+-АТРаза является ферментом, определяющим уровень [К*], в клетках, она, по-видимому, участвует и в ХГ-зависимой регуляции их поглотительной активности, тогда как Куканалы - влияют только на количество фагоцитирующих моноцитов.

На основе собственных результатов и литературных данных (Ширшев, 1995; 1998: Peralta, 1995] мы разработали гипотетическую схему дозозависимой регуляции ХГ К"— транспорта моноцитов периферической крови (рис 3).

При взаимодействии низкой дозы ХГ (10 МЕ/мл) с макрофагами стимулируется образование внутриклеточного сАМР [Заморина, 2000] и активируются ферменты фосфатидил-инозитолового цикла, приводящие к активации СОХ и продукции PGF;. осуществляющего негативный контроль за процессами антигеннезависимой дифференцировки лимфоцитов [Ширшев, 1998]. Кроме того, при этом активируются тнрозшшшазы, которые угнетают активность К-канатов [Peralta, 1995]. Учитывая, чго уровень [К+], в клетке определяется, главным образом, Na+/K+-ATPa3oñ. его повышение под действием гормона может быть обусловлено также снижением ее активности при фосфорилировании протеинкиназой С [Муртазина и др., 2001].

Kv-канал Ыа^К^-АТРаза

Регуляция

Рис. 3. Возможный механизм действия низкой дозы ХГ (10 МЕ/мл) в моноцитах периферической крови человека.

Примечание: здесь и в след, рис. R - рецептор; PLC. PLA - фосфолипаза С, А; Р1Р. -фосфатидилинозитол-4,5-дифосфат; DAG - диаиилглицерол; 1Р3 - инозитол-1,4,5-трифосфат; РКС -протеинкиназа С; АА - арахидоновая кислота; СОХ - циклооксигеназа; ТК - тирозинкиназа; PGE, -простагландин Е^; АС - аденилатциклаза; сАМР - циклический AMP; Сплошные линии - активация, пунктирные - ингибирование.

Таким образом, иммуносупрессивное действие низкой дозы ХГ [Ширшев, 1998] выражается не только в снижении фагоцитарной активности моноцитов, но и в угнетении функций К+-транспорта. Учитывая, что ХГ 10 МЕ/мл проявляет антагонизм по отношению к ингибиторам Ку-каналов и Ыа+/К+-АТРазы, можно предположить, что при регуляции фагоцитарной активности моноцитов гормон или непосредственно контактирует с К+-транспортерами, или препятствует их взаимодействию с ингибиторами. Угнетение поглотительной активности фагоцитов, по-видимому, модулируется гормоном через Kv- или Ыа+/К+-АТРаза-зависимое повышение уровня [K+]¡ в клетке (рис.3).

Возможный молекулярный механизм действия высокой дозы ХГ представлен на рис.4. Ранее показано, что именно после часовой инкубации с высокой дозой ХГ в моноцитах возрастает уровень внутриклеточного сАМР [Заморина, 2000]. Повышение сАМР, посредством сАМР-зависимой РКА, приводит к активации канала [Peralta, 1995] и. соответственно, усиленному выходу К+ из клетки. Кроме того, индуцированная воздействием высокой дозы ХГ деполяризация клеточной мембраны активирует Kv- и потенциалзависимые Кса- каналы, потенциалзависимые Са2+-каналы и Кса-каналы выходящего выпрямления, роль которых заключается в реполяризации мембраны после действия гормона [Gallin, 1989; Carnio, Varanda, 1995]. Поскольку уровень [К+], в клетках в значительной степени определяется мембранной Na7K+-ATPa3oñ, можно предполагать,

Рис..4 Возможный молекулярный механизм действия высокой дозы ХГ (100 МЕ/мл) в моноцитах периферической крови человека. Примечание; РКА - протеинкиназа А

тЯ

2а За

-1*3

что ХГ, также с помощью РКА [Ьорта, 2000], способен активировать этот мембранный транспортер и снижение уровня [К1^ в моноцитах под действием высокой дозы ХГ может быть обусловлено и этим событием. Отмена фагоцитоз-стимулирующего действия гормона в высокой дозе, как и низкой, может быть сопряжена с взаимодействием

------- ... молекулы ХГ непосредственно с

каналами или их ингибиторами.

Таким образом, система ЬС-транспорта и фагоцитарная активность моноцитов периферической крови сопряжены на уровне их регуляции ХГ. При этом Ку-каналы и Ыа+/К+-АТРаза участвуют в регуляции фагоцитарной активности моноцитов обеими дозами гормона, а №7К+-АТРаза - еще и в угнетении низкой дозой ХГ поглотительной активности клеток.

Я 40 £ 35

5 зо Й 25 » 20 I 15' % Юс 5

жен. 1 фаза жен.2фаза

муж.

0.7 0.6 0.5 04

0.3 0.2 0 1 о

*• 2 3

жен 1 фаза жен 2фээа

муж

жен.1фаза жен.2фаза муж.

Рис.5, Влияние ОТ на фагоцитарную активность моноцитов. Примечание:

I - контроль; 2 - ОТ 0,001 МЕ/мл; 3-ОТ 0,0001 МЕ/мл.

а - достоверные отличия от контроля, р<0,05.

Модуляция ОТ функциональной активности моноцитов

При оценке фагоцитарной активности фракционированных

моноцитов под действием ОТ выявлено стимулирующее действие гормона в исследуемых дозах в отношении процента фагоцитирующих клеток, проявляемое только в моноцитах женщин, и только в фолликулярной фазе менструального цикла (рис.5). Таким образом. ОТ способен модулировать фагоцитарную активность моноцитов в прямой зависимости от фона женских половых стероидов.

а)

15Т

Юмин 30 мин 60 мин.

| СИ ОТ 0.001 ШН ОТ 0.0001 } "^контроль______

Рис. 6. Влияние ОТ на уровень [К^ во фракционированных моноцитах

Примечание: а) женшины в фолликулярной фазе цикла, б) женшины в лютеиновой фазе цикла, в) мужчины

а - достоверные отличия от контроля, Ь - достоверные отличия от 10 мин инкубации, с - достоверные отличия от 30 мин инкубации, й - достоверные отличия от предыдущей дозы гормона, р<0,05.

По оси X - уровень [К*^, мкМ/106 клеток; по оси У - врем» инкубации, мин.

ОТ в дозе 0,001 МЕ/мл индуцировал снижение уровня [К+], на 10 мин инкубации, при дальнейшей стабилизации этого показателя, в клетках женщин фолликулярной фазы менструального цикла (рис.6,а). В моноцитах лютеиновой фазы уровень [К+], достоверно повышался в динамике культивирования под действием всех доз ОТ, хотя в исследуемых временных точках эффектов гормона не выявлено (рис.6,б). В клетках мужчин также только под действием дозы ОТ 0,001 МЕ/мл показано достоверное повышение уровня [К4], на 10-й мин инкубации относительно низкой дозы гормона и на 30-й мин - по отношению к 10-й мин и контролю (рис.6, в). Таким образом, во фракционированных моноцитах

периферической крови действие ОТ дозозависимо и определяется полом и фазой менструального цикла.

Оценка эластазной активности моноцитов под действием ОТ выявила зависимость его действия от половых стероидов, которые препятствовали проявлению эффектов гормона в женских клетках, тогда как в моноцитах мужчин ОТ в исследуемых дозах достоверно снижал зимозан-индуцированную

активность ЭЛ (табл.1). Учитывая, что регуляция эластазной активности моноцитов мужчин сопровождалась модуляцией уровня [К+]й можно

предположить, что активность фермента в какой-то мере зависит от К+-транспорта. но проявление ее регулируется, главным образом, половьми стероидными гормонами,- -------------

Таким образом, в фолликулярной фазе менструального цикла ОТ индуцирует повышение фагоцитарной активности моноцитов, при снижении уровня [К*]] и отсутствии изменений активности ЭЛ. В моноцитах женщин лютеиновой фазы и мужчин модуляции уровня [К+]1 не сопровождаются изменениями показателей фагоцитоза. По-видимому, система К+-транспорта моноцитов сопряжена с их фагоцитарной активностью только в клетках эстрогендоминантной фазы менструального цикла.

При исследовании молекулярных механизмов сопряжения К+-транспорта с фагоцитарной активностью моноцитов с применением блокаторов Ку-каналов и Ыа+/К+-АТРазы установлено, что и ОТ, и блокада Ку-каналов и Ка*Ж^-АТРазы. индуцируют повышение процента фагоцитоза моноцитов (табл.4). Сочетанное применение гормона и К+-ингибиторов выявило угнетающее действие ОТ в низкой дозе (0,0001 МЕ/мл) по отношению к Ыа+/К+-АТРазе, но не Ку-каналам, тогда как высокая доза гормона (0,001 МЕ/мл) в равной степени может регулировать оба транспортера. Уровень [К+], при

Таблица 4

Влияние ОТ иа фагоцитарную активность и уровень [К+]| о моноцитах женщин в фолликулярной фазе менструального цикла на фоне блокады К+-каналов и Ха*/К"-

АТРазы

N Эксперимент, воздействие п Процент фагоцитоза Фагоцитарное число Фагоцитарный индекс п Уровень [К"]„ мнМ/Ю'кл

! Контроль (раств гормона) 13 24,01 ± 1,459 0.32 + 0,032 1,31 ±0,051 36 8,84 г 0.386

2 ОТ 0,001 МЕ/мл 10 29,30 + 2,103 р (2-1) <0,05 0,38 ±0,040 1,28 ±0,054 22 6,97 ±0,475 р(2-1)< 0,002

3 ОТ 0.0001 МЕ/мл 9 30.48 + 2,663 П (3-1) <0,05 0,42 ± 0,047 1,37 ±0,047 22 8.35 ±0.710

4 TEA 30 мМ 10 34,97 ±4,050 О (4-1) <0,05 0,46 ±0,073 1,33 ±0,045 23 7,45 ± 0,578

5 Уабаин 10-1М 9 34,50 ±3,781 р (5-1) <0,05 0,45 ± 0,072 1,24 ±0,107 22 9.68 ± 0.609

6 ОТ 0,001 МЕ/мл -TEA 4 39,50 ± 3,594 р (6-1) <0,05 0,51 + 0,060 р (6-1) <0,05 1,30 + 0,054 12 \0? ± 0,54? р(й-1) < 0,05

/ ОТ 0,0001 МЕ/мл + TEA 4 39,25 ±4,151 р (7-1) <0,05 0,51 ±0,079 р (7-1) <0,05 1.28 + 0,070 12 9.62 ±0,617 р(7-2) < 0,01 р(7-6) < 0,01

8 ОТ 0,001 МЕ/мл + уабаин 4 46.50 ±2.217 р (8-1) <0,01 р (8-3) < 0,05 0.65 ± 0,060 р (8-1) <0,05 1,40 ±0,079 12 6,40 ±0.714 р(8-1) < 0,05

9 ОТ 0,0001 МЕ/мл + уабаин 4 37,25 ± 4,989 р (9-1) <0,01 0,52 ± 0,096 1,38 ±0,083 12 8,58 ±0,605 D (9-8) <0,05

действии ОТ на фоне блокады К»-каналов оказался таким же низким, как при действии одного гормона, следовательно, ОТ не влияет на эти каналы, но индуцирует выход Ю через другие транспортеры, возможно, через Кса, участвующие в механизмах реализации действия ОТ в репродуктивных тканях [Anwer et al., 1993; Holda et a!., 1996]. При блокаде Na+/K+-ATPa3bi в сочетании с ОТ уровень [К*], значительно увеличился, как относительно соответствующих комбинаций с TEA, так и относительно эффекта одного гормона в дозе 0,001 МЕ/мл (табл.4). Это подтверждает, что основной транспорт К+ в клетке определяется именно №+/К+-АТРазой и предполагает, что гормон не препятствует действию уабаина, сам являясь ингибитором этого транспортера.Учитывая, что фагоцитоз-регулирующее действие ОТ также связано с угнетением активности Na+/K+-АТРазы, можно предположить, что ОТ и уабаин оказывают сходное инактивирующее действие на АТРазу и при регуляции уровня [К*],.

На рис.7 представлена гипотетическая схема действия ОТ на систему К+-транспорта моноцитов.

Ка-канал Са -канал

Kv-канал Na+/K+-ATPa3a

Фагоцитарная активность моноцитов

Функциональная активность клеток-мишеней

PGE2, PGF2a

Рис.7. Возможный механизм действия окситоцина в моноцитах периферической крови человека.

ОТ, связавшись с поверхностным рецептором, активирует каскад фосфо-инозитидов, в результате чего происходит"высвобождение Са2+ из внутриклеточных запасов, вхол этих ионов через рецептор-ассоциированные Са2+- каналы, включение Кса-канапов и активация РКС [Holda et al.1996; Kimberly. 1998; Moore et а!.. 1988; Sanborn et a!., 1995; 1998]. Кроме того, повышается экспрессия СОХ, усиление продукции PGEi и PGFjn. осуществляющих контроль за функциональной активностью клеток-мишеней [Asselin et al, 1997; Moore et al., 1988; Shemed et al., 1997]. РКС способна ингибировать Na+/K+-ATPa3y [Муртазина, 2001], которая обеспечивает поддержание уровня [K+]j в клетках. Предложенная схема подтверждает наши данные о способности ОТ, как и уабаина, инактивировать Иа+/К+-АТРазу моноцитов и позволяет предположить, что именно с инактивацией Ыа+/К+-АТРазы связано фагоцитоз-стимулирующее действие гормона (рис.7).

Таким образом, система К+-транспорта и фагоцитарная активность моноцитов на уровне регуляции их ОТ в большей степени сопряжены посредством Na+/K+-ATPa3bi. определяющей и уровень внутриклеточного [K+]j и активность клеток, как фагоцитов. Кроме того, существенным влиянием на эффекты ОТ обладают половые стероиды, определяющие проявление и направленность гормонального действия.

Совместное влияние ХГ и ОТ на функциональну ю активность моноцитов

Поскольку при беременности ХГ и ОТ одновременно присутствуют в кровотоке матери а плода, при этом их эффекты реализуются на фоне половых стероидов, регулирующих и фагоцитарную активность и систему К+-транспорта клеток, важно было оценить и их совместное влияние на активность моноцитов.

ХГ и ОТ оказывают разнонаправленное действие на уровне регуляции поглотительной активности моноцитов женщин, в зависимости от фазы менструального цикла, не влияя на таковую мужских клеток. В фолликулярной фазе менструальной) цикла при взаимодействии гормонов в сочетании, отражающем их уровни в I триместре беременности (ХГ 100 ME/мл + ОТ 0,0001 ME/мл), ХГ ослабляет эффект ОТ, тогда как в лютеиновой фазе - в сочетании высоких доз гормонов (ХГ 100 ME/мл ч- ОТ 0,001 МЕ/мл). ОТ усиливает самостоятельное действие ХГ (табл.5). По-видимому, направленность гормонального действия определяется половыми стероидами, что может быть связано и с их регуляцией экспрессии ОТ-Р [Теппермен, 1989].

При модуляции К+-транспорта ХГ и ОТ выступают как синергисты, повышая уровень [К+]1 относительно самостоятельного действия и, следовательно, усиливая эффекты друг друга, в клетках женщин фолликулярной фазы менструального цикла и мужчин (табл.5). По-видимому, действие гормонов зависит от фона женских половых стероидов.

Активность секреторной ЭЛ при совместном воздействии гормонов угнетается как в неактивированных, так и стимулированных зимозаном, клетках (табл.1, 7). Поскольку спонтанная активность ЭЛ не модулируется гормонами самостоятельно, а только при совместном воздействии в дозах, соответствующих I триместру беременности (ХГ 100 МЕ/мл + ОТ 0,0001 МЕ/мл), можно заключить, что гормоны усиливают эффекты друг друга. Не исключено, что это является своеобразным механизмом отрицательной регуляции "неуместной" инвазии трофобласта в процессе гестации. Кроме того, учитывая, что ХГ не влияет на ЭЛ активность моноцитов, а их модуляция ОТ имеет сходный характер с комбинированным действием гормонов, по-видимому, именно ОТ принадлежит главная роль в совместной регуляции активности ЭЛ моноцитов.

Учитывая результаты ингибиторного анализа, проведенного на моноцитах фолликулярной фазы менструального цикла, можно предположить возможный механизм

Таблица 5

Совместное влияние ХГ и ОТ на показатели функциональной активности моноцитов

Гормональное воздействие Фагоцитарная активность Уровень К* Активность ЭЛ

Спонт. Стим.

Женщины, фолликулярная фаза

хг+от ОФИ* (100+0.0001) й* (100+0,001) и*,*« (100+0,0001) о

Женщины, лютеиновая фаза

хг+от 1)ФИ" (100+0,001) О и» (100+0,0001) о

Мужчины

ХГ + ОТ о Г!" (100+0,001) (100+0,0001) и» (10+0,001) (10+0,0001) (100+0,001) (100+0,0001) 1) (10+0,001) (100+0,0001) (10+ 0,0001)*

Примечание:

о - нет эффекта; Л - стимулирующий эффект; ^ - депрессивный эффект; * - эффект относительно самостоятельного действия окситоцина; *» - эффект относительно самостоятельного действия ХГ.

взаимодействия гормонов при совместной регуляции фагоцитарной активности и Кт-

транспорта клеток (рнс.8). ________________ . ----------- ------------

При регуляции моноцитарного фагоцитоза в эстрогендоминантной фазе менструального цикла ХГ в дозе 100 МЕ/мл угнетает поглотительную активность моноцитов, тогда как ОТ ее стимулирует. ХГ реализует свое действие через активацию Ку-каналов и №+ЛС-АТРазы, участвующих в регуляции фагоцитоза моноцитов, фосфорилированием сАМР-зависимой РКА, тогда как ОТ, напротив, ингибирует активность Ка7К'-А'ГРазы, с помощью РКС. При совместном действии гормонов (ХГ100 МЕ/мл и ОТ 0,0001 МЕ/мл) поглотительная активность фагоцитов, зависимая от уровня [К*], в клетке, понижается относительно эффекта ОТ, что, по-видимому, связано с нивелированием ХГ стимулирующего действия ОТ. Известно, что ОТ-индуцированная стимуляция РЬС|3, приводящая к генерации фосфоинозитидов, может ингибироваться сАМР на уровне ее связывания с б-белком и этот механизм включает прямое действие сАМР-зависимой РКА [валЬот е/ а!., 1995; 1998]. Не исключено, что ХГ использует данный механизм при нивелировании эффекта ОТ на уровне К^-транспорта моноцитов. При регуляции уровня [К+]| в моноцитах фолликулярной фазы результаты совместного действия гормонов, по-видимому, определяются ОТ. Поскольку уровень [К+], в клетках зависит, главным образом, от деятельности Ка7К*-АТРазы, то повышение этого

Рис. 8. Возможный механизм совместного действия ХГ и ОТ в моноцитах периферической крови человека.

показателя, скорее всего, является результатом действия ОТ, который угнетает ее активность посредством РКС. ХГ-активированная РКА, в данном случае, по-видимому, также проявляет ингибирующее действие на активность Ыа+/К+-АТРазы [Lopina, 2000].

Таким образом, наши результаты по регуляции гормонами фагоцитарной активности моноцитов периферической крови подтверждают литературные данные о противоположной направленности эффектов ХГ и ОТ [Benneguard et al.,1987; Eta et al., 2994; Maas et al.,1992;Wuttke et al.,1993], Однако, на уровне модуляции системы JC-транспорта, а также эластазной активности моноцитов, ХГ и ОТ, по-видимому, утрачивают антагонизм взаимодействий и выступают как синергисты по отношению к эффектам друг друга. Существенную роль при этом играют женские половые стероиды, которые контролируют как эффекты гормонов, так и непосредственно К+-транспорт моноцитов.

Выводы

1. Хорионический гонадотропин модулирует фагоцитарную активность фракционированных моноцитов периферической крови в зависимости от дозы, пола и фазы менструального цикла. Так, в исследуемых дозах гормон угнетает фагоцитоз моноцитов женщин, находящихся в фолликулярной фазе менструального цикла, тогда как высокая доза гормона (100 ME/мл) снижает на 10-й мин, и стимулирует на 60-й мин, фагоцитарную активность моноцитов лютеиновой фазы.

2. Окситоцин в физиологических концентрациях стимулирует фагоцитарную активность моноцитов женщин, находящихся в фолликулярной фазе менструального цикла, не влияя на моноциты лютеиновой фазы цикла и мужчин.

3. При совместном применении хорионический гонадотропин и окситоцин угнетают фагоцитарную активность моноцитов женщин, находящихся в фолликулярной фазе менструального цикла, и стимулируют таковую моноцитов женщин лютеиновой фазы. При этом, доминирующим действием обладает гонадотропин, а окситоцин способствует проявлению его эффектов.

4. Хорионический гонадотропин и окситоцин не влияют на эластазную активность моноцитов женщин вне зависимости от фазы менструального цикла, тогда как в клетках мужчин окситоцин угнетает зимозан-индуцированную активность фермента. При сочетанном действии гормоны снижают спонтанную активность секреторной эластазы моноцитов мужчин и женщин обеих фаз менструального цикла, а у мужчин - также зимозан-индуцированную эластазную активность клеток. По-видимому, половые

стероиды препятствуют проявлению самостоятельных эффектов гормонов в женских клетках, не влияя на их совместное действие. _________ _ ________ - --------------------

5. Хорионический гонадотропин и окситоцин дозозависимо модулируют уровень внутриклеточного К* в моноцитах периферической крови и направленность их эффектов зависит от пола и фазы овариального цикла. В высоких дозах гормоны преимущественно снижают, а в низких - повышают уровень [K+]i в моноцитах. При совместном воздействии гормоны также повышают внутриклеточное содержание выступая как синергисты по отношению к самостоятельным эффектам.

6. Система К+-траяспорта участвует в регуляции фагоцитарной активности моноцитов периферической крови. Хорионический гонадотропин регулирует фагоцитарную активность моноцитов, используя Куканалы и №+/К+-АТРазу клеток. В регуляции окситоцином моноцитаркого фагоцитоза принимает участие Ка7К*-АТРаза клеток, тогда как в гормональный контроль эластазной активности моноцитов включены, по-видимому, другие К+-зависимые механизмы.

Список печатных работ

1. Ширшев C.B.. Лялина О.Г. Влияние хорионического гонадотропина и окситоиина на уровень внутриклеточного калия в лимфоцитах периферической крови человека /7 Тез. докл. III Научной конференции с Международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге'99». Санкт-Петербург, 1999,- Т.1, № 3-4.-С. 31.

2. Лялина О.Г.. Ширшев C.B. Влияние хорионического гонадотропина на уровень внутриклеточного калия в мононуклеарах периферической крови мужчин.// Тез. Докл. научной сессии Пермской государственной медицинской академии, 2000,- С.71-72.

3. Ширшев C.B., Заморина С.А., Лялина О.Г. Роль фаз менструального цикла в регуляции фагоцитарной активности моноцитов хорионическим гонадотропином.// Тез. докл. VI Научной конференции с Международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге'2000». Санкт-Петербург, 2000,- Т.2, № 2,- С. 204.

4. Ширшев C.B., Лялина О.Г., Заморина С.А. Роль калия в иммуномодулируюшем действии хорионического гонадотропина.// Тез. докл. VI Научной конференции с Международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге'2000». Санкг-Петербург, 2000,- Т.2, № 2,- С.145.

5. Ширшев C.B., Заморина С.А., Лялина О.Г. Влияние хорионического гонадотропина на фагоцитарную активность и уровень цАМФ в моноцитах периферической крови женщин .// Тез. Докл. XIV Российской научной конференции «Факторы клеточного и

гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях».- Челябинск, 2000.-С.139-140.

6. Ширшев C.B., Заморина С.А., Лялина О.Г. Роль фаз менструального цикла в регуляции фагоцитарной активности моноцитов хорионическим гонадотропином.// Тез. Докл. научной конференции «Актуальные проблемы фундаментальных исследований в области биологии и медицины». Санкт-Петербург, 2000,- С.198.

7. Ширшев C.B., Лялина O.P., Заморина С.А. Значение калия в моноцитрегулирующем действий хорионического гонадотропина.// Бюл. эксперим. биологии и медицины. -2000.-Т. 130, № И- С.566-569.

8. Ширшев C.B., Лялина О.Г. Влияние хорионического гонадотропина на уровень внутриклеточного калия в мононуклеарах периферической крови человека.// Доклады Академии Наук,- 2001,- Т.377, №6,- С.838-840.

9. Заморина С.А., Лялина О.Г., Ширшев C.B. Изучение роли цАМФ и [K+]i в иммунорегулирующем действии хорионического гонадотропина.// Тез. Докл. 5-ой Пущинской конференции молодых ученых «Биология - наука 21-го века».- 2001,- С. 128.

10. Лялина О.Г., Ширшев C.B. Влияние окситоцина на уровень внутриклеточного калия в мононуклеарных клетках периферической крови человека. Роль фаз менструального цикла. // Тез. Докл. 5-ой Пущинской конференции молодых ученых «Биология - наука 21-го века»,- 2001.- С. 146.

11. Лялина О.Г., Ширшев C.B. Половые стероидные гормоны как регуляторы ¡О-модулирующих эффектов хорионического гонадотропина в лимфоцитах периферической крови человека И Тез. Докл. I Конференции иммунологов Урала,-Екатеринбург, 2001.- С.11-12.

Оглавление диссертации Лялина, Ольга Григорьевна :: 2002 :: Пермь

Список основных сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ БЕРЕМЕННОСТИ.

1.1. Роль гормонов и белков беременности в регуляции иммунных реакций.

1.2. Хорионический гонадотропин и окситоцин как модуляторы реакций иммунной системы.

1.2.1.Биологическая характеристика хорионического гонадотропина.

1.2.2. Иммуномодулирующие эффекты ХГ.

1.2.3. Биологическая характеристика окситоцина.

1.2.4. Иммуномодулирующие эффекты окситоцина.

Глава 2. РОЛЬ ИОНОВ К+ И СИСТЕМЫ К+-ТРАНСПОРТА В РЕГУЛЯЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ КЛЕТОК.

2.1. К+- каналы клеточных мембран.

2.2. К+-каналы в клетках иммунной системы и репродуктивных тканей, их роль в регуляции функциональной активности клеток.

2.3. Гормональная регуляция К+-каналов.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Глава 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Объекты исследования.

3.2. Биологические активные вещества

3.3. Фракционирование моноцитов и лимфоцитов периферической крови

3.4. Оценка фенотипа моноцитов по экспрессии CD14 в иммунофлуоресцентном тесте.

3.5. Оценка фагоцитарной активности фракционированных моноцитов периферической крови.

3.6. Определение уровня эластазы.

3.7. Определение уровня внутриклеточного калия.

3.8. Статистический анализ результатов.

Глава 4. ХГ КАК РЕГУЛЯТОР ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ МОНОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ.

4.1. Влияние ХГ на фагоцитарную и эластазную активность моноцитов периферической крови и связь этих процессов с уровнем внутриклеточного К+. Зависимость действия гормона от пола и фаз менструального цикла.

4.2. Молекулярные механизмы действия ХГ.

4.3. Резюме.

Глава 5. МОДУЛЯЦИЯ ОКСИТОЦИНОМ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ МОНОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ.

5.1. Влияние окситоцина на фагоцитарную и эластазную активность моноцитов периферической крови. Связь с уровнем внутриклеточного К+. Значение пола и фаз менструального цикла.

5.2. Молекулярные механизмы действия окситоцина.

5.3.Резюм е.

Глава 6. СОВМЕСТНОЕ ВЛИЯНИЕ ХГ И ОКСИТОЦИНА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ МОНОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ.

6.1. Совместное влияние ХГ и окситоцина на фагоцитарную и эластазную активности моноцитов периферической крови. Связь с системой К+-транспорта и зависимость от пола и фазы менструального цикла.

6.2. Резюме.

Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Лялина, Ольга Григорьевна, автореферат

Актуальность проблемы. В процессе беременности, помимо гормональных перестроек, в организме матери происходят существенные изменения иммунной системы [21, 53]. В силу того, что клетки плода экспрессируют на своей поверхности антигены отцовского гаплотипа, они, как полуаллогенный трансплантат, являются потенциальной мишенью для цитотоксического ответа со стороны иммунной системы матери [105, 289, 380]. Однако отторжения не происходит, отчасти благодаря синтезу ряда плацентарных гормонов [21, 46, 53, 54]. Наиболее важным гормоном плаценты, протектирующим развитие беременности, является хорионический гонадотропин (ХГ) [21, 50, 51, 151, 183]. Окситоцин (ОТ), в свою очередь, ответственен за индукцию родовой деятельности, лактацию и специфическое материнское поведение [186, 336].

Показано, что ХГ обладает рядом иммуномодулирующих эффектов и участвует в контроле функциональной активности мононуклеарных фагоцитов - эффекторов гормона в репродуктивных тканях [155, 185, 376]. При этом молекулярные механизмы его действия остаются недостаточно изученными, а регуляция функций моноцитов ОТ практически не исследована.

Известно, что функциональная активность моноцитов/макрофагов, в частности, процессы активации, пролиферации, продукции цитокинов и пр., зависят от деятельности системы К+-транспорта [73, 75, 90, 216, 230, 256]. В связи с этим, важным представляется изучить влияние гормонов на транспорт К+ и его место в гормональной регуляции функциональной активности клеток. Поскольку К+-транспортирующие системы мононуклеарных клеток [144, 358], как и некоторые эффекты ХГ и ОТ [52, 263, 279], регулируются половыми стероидными гормонами, необходимо было оценить их участие в гормональной регуляции системы К+-транспорта и функциональной активности мононуклеаров. Учитывая, что при беременности ХГ и ОТ одновременно присутствуют в материнском кровотоке, также важно было оценить и их совместное влияние на уровне мононуклеарных клеток.

Цель работы. Исследование роли ионов К+ и его основных транспортных систем в реализации эффектов ХГ и ОТ, а также их совместного действия, на уровне моноцитов периферической крови, с учетом пола и фаз менструального цикла.

Задачи:

2. Изучить самостоятельные и совместные эффекты физиологических доз ХГ и ОТ на модуляцию уровня внутриклеточного К+ в моноцитах, с учетом пола и фаз менструального цикла.

Научная новизна работы. Новыми являются данные о влиянии ОТ, как самостоятельно, так и совместно с ХГ, на фагоцитарную и эластазную активность моноцитов периферической крови. Выявлена зависимость эффектов ОТ и ХГ от пола и фаз менструального цикла.

Исследована роль потенциалзависимых К+-каналов и Na+/K+-ATPa3bi, осуществляющих основной транспорт К+ в клетках, в регуляции гормонами функциональной активности моноцитов. Установлено непосредственное участие системы К+-транспорта в регуляции ХГ и ОТ фагоцитарной активности моноцитов периферической крови. Впервые показано, что К+-транспорт участвует также в регуляции ОТ активности секреторной эластазы моноцитов.

Теоретическая и практическая значимость. В теоретическом плане работа расширяет представления о контроле иммунной системы репродуктивными гормонами. Установлены новые, ранее неизвестные, молекулярные механизмы иммуномодулирующих эффектов ХГ и ОТ на уровне К+- транспорта мононуклеарных клеток периферической крови. Представлены новые данные о взаимосвязи гормонов в контроле функций фагоцитирующих клеток с учетом фаз менструального цикла.

Положения, выносимые на защиту:

1. ХГ реализует фагоцитоз-модулирующее действие в зависимости от пола и фазы менструального цикла. В низкой концентрации гормон оказывает депрессивное, а в высокой - стимулирующее действие на фагоцитарную активность моноцитов женщин.

2. ОТ вне зависимости от дозы стимулирует фагоцитарную активность фракционированных моноцитов, и его эффект напрямую связан с полом и фазой менструального цикла. При совместном применении ХГ препятствует действию ОТ в фолликулярной фазе менструального цикла, а в лютеиновой фазе, напротив, эффект ХГ усиливается ОТ.

4. ХГ и ОТ способны дозозависимо модулировать уровень внутриклеточного К+ в мононуклеарных клетках периферической крови в зависимости от пола и фаз менструального цикла. При совместном применении гормоны усиливают самостоятельные эффекты друг друга.

5. Регуляция ХГ фагоцитарной активности моноцитов периферической крови связана с системой К+-транспорта посредством потенциал-зависимых К+-каналов и Na+/K+-ATPa3bi клеток.

Апробация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ. Результаты представлены на III и IV Научных конференциях с международным участием "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге '99" и "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2000", а также на научной конференции "Актуальные проблемы фундаментальных исследований в области биологии и медицины" (С-Петербург, 2000), Научной сессии Пермской государственной медицинской академии, (Пермь, 2000), XIV Российской конференции (Челябинск, 2000), 5-й Пущинской конференции молодых ученых «Биология - наука 21-го века» (Пущино,2001) и I Конференции иммунологов Урала (Екатеринбург-2001).

Заключение диссертационного исследования на тему "Роль калия и систем, регулирующих его транспорт, в реализации иммуномодулирующих эффектов хорионического гонадотропина и окситоцина"

ВЫВОДЫ

1. Хорионический гонадотропин модулирует фагоцитарную активность фракционированных моноцитов периферической крови в зависимости от дозы, пола и фазы менструального цикла. Так, в исследуемых дозах гормон угнетает фагоцитоз моноцитов женщин, находящихся в фолликулярной фазе менструального цикла, тогда как высокая доза гормона (100 МЕ/мл) снижает на 10-й мин, и стимулирует на 60-й мин, фагоцитарную активность моноцитов лютеиновой фазы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Известно, что репродуктивные гормоны способны контролировать иммунные процессы. Несмотря на то, что иммуномодулирующие эффекты ХГ уже давно являются предметом исследований [50, 51, 159, 183], ОТ остается практически неизученным с этой точки зрения. Исследование влияния гормонов на функции мононуклеарных фагоцитов, играющих центральную роль в механизмах резистентности организма и инфильтрирующих ткани репродуктивного тракта [82, 334, 399, 413, 433], показало многофакторную зависимость реализации гормональных эффектов.

Изучение влияния ХГ на фагоцитарную активность фракционированных моноцитов периферической крови выявило достоверное угнетение поглотительной активности фагоцитов женщин, находящихся в фолликулярной фазе менструального цикла на 60 мин культивирования с гормоном в дозах 10 и 100 МЕ/мл. В клетках лютеиновой фазы ХГ в высокой дозе (100 МЕ/мл) снижал процент фагоцитирующих клеток на 10 мин инкубации, а на 60 мин, напротив, повышал их фагоцитарную активность. Таким образом, фагоцитоз-моду л ирующее действие ХГ напрямую зависит от дозы гормона, пола, фазы менструального цикла и времени гормонального воздействия.

Учитывая, что в процессе беременности одним из факторов активации системы мононуклеарных фагоцитов, участвующих в ремоделяции репродуктивных тканей, является активность секреторной эластазы моноцитов, важно было оценить активность этого фермента. В отличие от моноцитарного фагоцитоза, при оценке эластазной активности супернатантов краткосрочных культур моноцитов не выявлено эффекта ХГ, ни в спонтанном, ни в зимозан-стимулированном вариантах опыта, вне зависимости от дозы гормона, пола и фазы менструального цикла.

При оценке уровня [К+]; во фракционированных моноцитах установлено, что низкая доза ХГ (10 МЕ/мл) повышает этот показатель в клетках женщин эстрогендоминантной фазы цикла, тогда как высокая доза ХГ (100 МЕ/мл) приводит к его снижению в динамике культивирования в моноцитах мужчин. В клетках прогестерондоминантной фазы этот показатель стабилизировался относительно контроля в процессе инкубации. Таким образом, влияние ХГ на уровень [K+]j зависит от дозы гормона, пола и фазы менструального цикла. По-видимому, в моноцитах женщин фолликулярной фазы цикла эстрогены и ФСГ способствовали К+-потенцирующему эффекту низкой дозы ХГ, тогда как в моноцитах лютеиновой фазы, под действием доминирующего прогестерона, все эффекты ХГ нивелировались.

Таким образом, в моноцитах женщин, находящихся в фолликулярной фазе цикла, ХГ в исследуемых дозах оказывает депрессивное действие на фагоцитарную активность клеток на 60-й мин инкубации, при этом низкая доза гормона индуцирует повышение уровня [К+]; на 10-й мин. Возможно, гормон-индуцированный всплеск уровня [K+]j в клетках на раннем этапе инкубации создает предпосылки на молекулярном уровне для проявления угнетающего действия низкой дозы гормона на их фагоцитарную активность. В то же время, для реализации фагоцит-регулирующего действия высокой дозой ХГ модуляции внутриклеточного содержания К+, по-видимому, несущественны. В моноцитах мужчин не наблюдается эффектов гормона ни на фагоцитоз, ни на уровень [К+];, из чего можно заключить, что решающим значением в реализации гормонального действия обладают женские половые стероиды. И именно с влиянием стероидного фона фолликулярной фазы цикла, с действием эстрогенов, по-видимому, связано сопряжение фагоцитарной активности клеток с уровнем [К+]; при их регуляции низкой дозой ХГ.

В связи с этим, дальнейшая расшифровка молекулярных механизмов действия ХГ с оценкой основных транспортных систем К+ проводилась только на моноцитах данной фазы.

При блокаде Ку-каналов и Na+/K+-ATPa3bi, определяющих основной поток К+ и уровень [К+]; в клетках, выявлено повышение процента фагоцитирующих моноцитов, что указывает на равное участие обеих транспортных систем К+ в регуляции фагоцитарной активности клеток. В то же время, уровень [K+]i клеток достоверно повышался при блокаде Na+/K+-АТРазы, но не Ку-каналов, демонстрируя большее участие мембранной Na+/K+-АТРазы в поддержании уровня [K+]i в клетке. Поскольку стимуляция фагоцитоза сопровождается в одном случае повышением, а в другом -отсутствием изменений уровня [К+]ь мы предполагаем, что фагоцитарная активность и система К+-транспорта моноцитов связаны в большей степени на уровне самих К+-транспортеров.

ХГ в исследуемых дозах полностью отменял эффекты ингибиторов Ку-каналов и Ыа+/К+-АТРазы на моноцитарный фагоцитоз, что указывает на антагонизм гормона по отношению к обоим К+-ингибиторам. Поскольку оба транспортера влияют на процент фагоцитоза моноцитов, а ХГ снимает их действие, можно предположить, что гормон должен оказывать самостоятельное депрессивное действие на этот показатель. Именно это и происходит в лютеиновой фазе цикла, но не в фолликулярной, указывая на регулирующее влияние эстрогенов, которые препятствовали проявлению подобного эффекта ХГ.

Гормон также снимал действие ингибитора Na+/K+-ATPa3bi на уровень [K+]i, по-видимому, являясь эффективным антагонистом уабаина как на уровне регуляции фагоцитоза, так и внутриклеточного содержания К+, тогда как его антагонизм к блокатору Ку-каналов проявляется только при регуляции фагоцитоза.

Суммируя полученные данные, можно заключить, что ХГ в низкой дозе реализует фагоцитоз-угнетающее действие на моноциты фолликулярной фазы менструального цикла, которое сопровождается повышением уровня [К+]; в этих клетках. При угнетении фагоцитоза высокой дозой гормона не наблюдается изменений уровня [К+]; в клетках лютеиновой фазы, тогда как в мужских фагоцитах, наоборот, ХГ в этой дозе способен модулировать [К+];, не влияя на фагоцитоз. Поскольку процент активных фагоцитов связан с действием К+-транспортеров, а уровень [К+];, определяет их поглотительную активность, можно предположить, что ХГ регулирует фагоцитоз моноцитов через Ку-каналы и Na+/K+-ATPa3y, а в низкой дозе гормон модулирует и поглотительную способность фагоцитов - изменяя уровень [К+];. Учитывая, что Na+/K+-ATPa3a является ферментом, определяющим уровень [К+]; в клетках, она, по-видимому, участвует и в ХГ-зависимой регуляции их поглотительной активности, тогда как Ку-каналы - влияют только на количество фагоцитирующих моноцитов.

Ранее показано, что ХГ проявляет разнонаправленные эффекты в интактных клетках селезенки в зависимости от применяемой дозы, при этом гормон в низкой концентрации (10 МЕ/мл) в основном реализует иммуностимулирующие эффекты, тогда как в высокой - депрессивные [52]. Иммуносупрессивное действие ХГ в культуре спленоцитов реализуется только в присутствии макрофагов и зависит от активности АС и СОХ в этих клетках [45]. На основе собственных результатов и литературных данных [50, 52, 338] мы разработали гипотетическую схему дозозависимой регуляции ХГ элементов К+-транспорта моноцитов периферической крови человека (рис 11).

При взаимодействии низкой дозы ХГ (10 МЕ/мл) с макрофагами стимулируется образование внутриклеточного с AMP [15] и активируются ферменты фосфатидил-инозитолового цикла, приводящие к активации СОХ

Na /K -АТРаза

Рис.11 Возможный механизм действия низкой дозы ХГ (10 МЕ/мл) в моноцитах периферической крови человека.

Здесь и в след. рис.: R - рецептор; PLC, PLA - фосфолипаза С, А; Р1Р2 -фосфатидилинозитол-4,5-дифосфат; DAG - диацилглицерол; IP3 - инозитол-1,4,5-трифосфат; РКС - протеинкиназа С; АА - арахидоновая кислота; СОХ - циклооксигеназа; ТК - тирозинкиназа; PGE2 - простагландин Е2; АС - аденилатциклаза; сАМР -циклический AMP; Сплошные линии - активация, пунктирные - ингибирование. и продукции PGE2, осуществляющих негативный контроль за процессами антигеннезависимой дифференцировки лимфоцитов [52]. Кроме того, при этом активируются тирозинкиназы, которые угнетают активность Ку-каналов [338].

Таким образом, можно предположить подобный механизм действия низкой дозы ХГ, в результате которого наблюдается увеличение уровня [К+]; в моноцитах фолликулярной фазы на 10 мин инкубации с гормоном. Однако, учитывая, что уровень [К+]; в клетке определяется, главным образом, Na+/K+-АТРазой, подобный эффект гормона может быть обусловлен и снижением ее активности, засчет фосфорилирования протеинкиназой С [34].

Таким образом, иммуносупрессивное действие низкой дозы ХГ [15, 50, 52] выражается не только в снижении фагоцитарной активности моноцитов, но и в угнетении функций К+-транспорта. Учитывая, что ХГ 10 МЕ/мл проявляет антагонизм по отношению к ингибиторам Ку-каналов и Na+/K+-АТРазы, отменяя их фагоцитоз-стимулирующее действие, можно предположить, что при регуляции фагоцитарной активности моноцитов гормон или непосредственно контактирует с К+-транспортерами, или препятствует их взаимодействию с ингибиторами. Угнетение поглотительной активности фагоцитов, по-видимому, модулируется гормоном через Kv- или Ма+/К+-АТРаза-зависимое повышение уровня [K+]j в клетке (рис.11).

Возможный молекулярный механизм действия высокой дозы ХГ представлен на рис.12. В отличие от низкой концентрации ХГ, высокая индуцировала снижение уровня [K+]jb моноцитах мужчин в динамике 60-мин культивирования. Ранее показано, что именно после часовой инкубации с высокой дозой ХГ в моноцитах возрастает уровень внутриклеточного сАМР [15]. Повышение сАМР, посредством сАМР-зависимой РКА, приводит к активации канала [338] и, соответственно, усиленному выходу К+ из клетки. Кроме того, известно, что воздействие высокой дозы ХГ значительно деполяризует клеточную мембрану [102]. За счет этого активируются Kv -[102] и потенциалзависимые Кса-каналы [166], потенциалзависимые Са2+-каналы и возрастает уровень внутриклеточного Са [55, 102], активирующий Kca-каналы выходящего выпрямления, роль которых заключается в реполяризации мембраны после действия гормона [102]. С предложенной

2-ь

Kca-канал Са -канал

Kv-канал Na+/K+-ATPa3a к+ хг к+ к+ i

Клеточная мембрана

Функциональная активность

Рис.12. Возможный молекулярный механизм действия высокой дозы ХГ (100 МЕ/мл) в моноцитах периферической крови человека. РКА - протеинкиназа А схемой согласуются и наши результаты, демонстрирующие антагонизм ХГ в высокой дозе по отношению к К+-ингибиторам и, как следствие, вероятность активации транспортеров гормоном. Поскольку уровень [K+]j в клетках в значительной степени определяется мембранной Na+/K+-АТР аз о й, можно предполагать, что ХГ, также с помощью РКА [259], способен активировать этот мембранный транспортер и снижение уровня [K+]j в моноцитах под действием высокой дозы ХГ может быть обусловлено и этим событием. Отмена фагоцитоз-стимулирующего действия гормона в высокой дозе, как и низкой, может быть сопряжена с взаимодействием молекулы ХГ непосредственно с каналами или их ингибиторами.

Таким образом, система К+-транспорта и фагоцитарная активность моноцитов периферической крови сопряжены на уровне их регуляции ХГ. При этом Ку-каналы и Na+/K+-ATPa3a участвуют в регуляции фагоцитарной активности моноцитов обеими дозами гормона, a Na+/K+-ATPa3a - еще и в угнетении низкой дозой ХГ поглотительной активности клеток.

В отличие от ХГ, ОТ, вне зависимости от дозы, достоверно стимулировал фагоцитарную активность моноцитов женщин, находящихся в фолликулярной фазе менструального цикла, не оказывая влияния на моноциты женщин, находящихся в лютеиновой фазе цикла и мужчин. Таким образом, модуляция ОТ фагоцитарнй активности моноцитов периферической крови находится в прямой зависимости от фона женских половых стероидов, в частности, эстрогенов и ФСГ, которые обладают прямым стимулирующим действием на экспрессию ОТ-Р на клетках-мишенях [38, 154, 204, 210, 248, 252].

Оценка влияния ОТ на уровень [К+]; во фракционированных моноцитах выявила модулирующее влияние дозы гормона 0,001 МЕ/мл, которая индуцировала снижение этого показателя в клетках фолликулярной фазы цикла и его повышение - в клетках мужчин. Таким образом, во фракционированных моноцитах периферической крови действие ОТ дозозависимо и определяется полом и фазой менструального цикла.

Регуляция гормоном эластазной активности моноцитов, по-видимому, напрямую зависит от половых стероидов, которые препятствовали проявлению гормональных эффектов в женских клетках, тогда как в моноцитах мужчин ОТ в исследуемых дозах достоверно снижал зимозан-индуцированную активность ЭЛ. Учитывая, что регуляция эластазной активности моноцитов мужчин сопровождалась модуляцией уровня [K+]i; можно предположить, что активность фермента в какой-то мере зависит от К+-транспорта, но проявление ее регулируется, главным образом, половыми стероидными гормонами.

Таким образом, в фолликулярной фазе менструального цикла ОТ индуцирует повышение фагоцитарной активности моноцитов, при снижении уровня [К+], и отсутствии изменений активности ЭЛ. В моноцитах женщин

Ill лютеиновой фазы и мужчин модуляции уровня [К4"]; не сопровождаются изменениями показателей фагоцитоза. По-видимому, система К+-транспорта моноцитов сопряжена с их фагоцитарной активностью только в клетках эстрогендоминантной фазы менструального цикла.

При исследовании молекулярных механизмов сопряжения К+-транспорта с фагоцитарной активностью моноцитов установлено, что и ОТ, и блокада Ку-каналов и Na+/K+-ATPa3bi, индуцируют повышение процента фагоцитоза моноцитов. Сочетанное применение гормона и К+-ингибиторов выявило угнетающее действие ОТ в низкой дозе (0,0001 МЕ/мл) по отношению к Na+/K+-ATPa3e, но не Ку-каналам, тогда как высокая доза гормона (0,001 МЕ/мл) в равной степени может регулировать оба транспортера. Уровень [К+]; при действии ОТ на фоне блокады Ку-каналов оказался таким же низким, как при действии одного гормона, следовательно, ОТ не влияет на эти каналы, но индуцирует выход К+ через другие транспортеры, возможно, через КСа, участвующие в механизмах реализации действия ОТ в репродуктивных тканях [66, 197]. При блокаде Na+/K+-ATPa3bi в сочетании с ОТ уровень [K+]j значительно увеличился, как относительно соответствующих комбинаций с TEA, так и относительно эффекта одного гормона в дозе 0,001 МЕ/мл. Это подтверждает, что основной транспорт К+ в клетке определяется именно Ыа+/К+-АТРазой и предполагает, что гормон не препятствует действию уабаина, сам являясь ингибитором этого транспортера. Учитывая, что фагоцитоз-регулирующее действие ОТ также связано с угнетением активности Na+/K+-ATPa3bi, можно предположить, что ОТ и уабаин оказывают сходное инактивирующее действие на АТРазу и при регуляции уровня [K+]j.

На рис. 13 представлена гипотетическая схема действия ОТ на систему К+-транспорта моноцитов.

Рис.13. Возможный механизм действия окситоцина в моноцитах периферической крови человека.

ОТ, связавшись с поверхностным рецептором, активирует каскад фосфоинозитидов, в результате чего происходит высвобождение Са из внутриклеточных запасов, вход этих ионов через ассоциированные с рецептором Са2+-каналы и активация РКС [207, 232, 298, 374]. Наряду с этими событиями повышается экспрессия СОХ, усиление продукции PGE2 и PGF2a, осуществляющих контроль за функциональной активностью клеток-мишеней [69, 164, 298, 389]. Повышение внутриклеточного уровня Са деполяризует мембрану и приводит к активации КСа-каналов [66, 197, 373], обеспечивающих восстановление мембранного потенциала. Кроме того, РКС способна ингибировать Na+/K+-ATPa3y [34], которая обеспечивает поддержание уровня [К+]; в клетках. Предложенная схема подтверждает наши данные о способности ОТ, как и уабаина, инактивировать Na+/K+-АТРазу моноцитов и позволяет предположить, что именно с инактивацией Na+/K+-ATPa3bi связано фагоцитоз-стимулирующее действие гормона.

Таким образом, система К+-транспорта и фагоцитарная активность моноцитов на уровне регуляции их ОТ в большей степени сопряжены посредством Na+/K+-ATPa3bi, определяющей и уровень внутриклеточного [К+]; и активность клеток, как фагоцитов. Кроме того, существенным влиянием на эффекты ОТ обладают половые стероиды, определяющие проявление и направленность гормонального действия.

Поскольку при беременности ХГ и ОТ одновременно присутствуют в кровотоке матери и плода, при этом их эффекты реализуются на фоне половых стероидов, регулирующих и фагоцитарную активность и систему К+-транспорта клеток, важно было оценить и их совместное влияние на активность моноцитов.

Гормоны оказывают разнонаправленное действие на уровне регуляции поглотительной активности моноцитов женщин, в зависимости от фазы менструального цикла, не влияя на таковую мужских клеток. При угнетении фагоцитоза сочетанием гормонов, отражающим их уровни в I триместре беременности, в фолликулярной фазе менструального цикла ХГ ослабляет эффект ОТ, тогда как в лютеиновой фазе - в сочетании высоких доз гормонов, ОТ усиливает самостоятельное действие ХГ. По-видимому, направленность гормонального действия определяется половыми стероидами, что может быть связано и с их регуляцией экспрессии ОТ-Р [3 8].

На уровне модуляции К+-транспорта ХГ и ОТ выступают как синергисты, повышая уровень [K+]i относительно самостоятельного действия и, следовательно, усиливая эффекты друг друга. То же можно сказать и об эластазной активности моноцитов. Активность секреторной ЭЛ угнетается сочетаниями гормонов как в неактивированных, так и стимулированных зимозаном, клетках. Поскольку спонтанная активность ЭЛ не модулируется гормонами самостоятельно, а только при совместном воздействии в дозах, соответствующих I триместру беременности (ХГ 100 МЕ/мл + ОТ 0,0001 МЕ/мл), можно предположить, что гормоны усиливают эффекты друг друга. Не исключено, что это является своеобразным механизмом отрицательной регуляции "неуместной" инвазии трофобласта в процессе гестации.

Учитывая результаты ингибиторного анализа, проведенного на моноцитах фолликулярной фазы менструального цикла, можно предположить возможный механизм действия гормонов при совместной регуляции фагоцитарной активности и К+-транспорта клеток (рис.14).

Рис.14. Возможный механизм совместного действия ХГ и ОТ в моноцитах периферической крови человека.

При регуляции моноцитарного фагоцитоза в эстрогендоминантной фазе менструального цикла ХГ в дозе 100 МЕ/мл угнетает поглотительную активность моноцитов, тогда как ОТ ее стимулирует. ХГ реализует свое действие через активацию Ку-каналов и Ыа+/К+-АТРазы, участвующих в регуляции фагоцитоза моноцитов, фосфорилированием сАМР-зависимой РКА, тогда как ОТ, напротив, ингибирует активность Na+/K+-ATPa3bi, с помощью РКС. При совместном действии гормонов (ХГ100 МЕ/мл и ОТ 0,0001 МЕ/мл) поглотительная активность фагоцитов, зависимая от уровня [K+]j в клетке, понижается относительно эффекта ОТ, что, по-видимому, связано с нивелированием ХГ стимулирующего действия ОТ. Известно, что ОТ-индуцированная стимуляция PLC(3, приводящая к генерации фосфоинозитидов, может ингибироваться сАМР на уровне ее связывания с G-белком и этот механизм включает прямое действие сАМР-зависимой РКА [373, 374]. Не исключено, что ХГ использует данный механизм при нивелировании эффекта ОТ на уровне К+-транспорта моноцитов.

На уровне регуляции внутриклеточного содержания К+ в моноцитах фолликулярной фазы результаты совместного действия гормонов, по-видимому, определяются ОТ. Поскольку уровень [К+]; в клетках зависит, главным образом, от деятельности №+/К+-АТРазы, то повышение этого показателя, скорее всего, является результатом действия ОТ, который угнетает ее активность посредством РКС. ХГ-активированная РКА, в данном случае, по-видимому, также проявляет ингибирующее действие на активность Na+/K+-ATPa3bi [259].

Таким образом, наши результаты по регуляции гормонами фагоцитарной активности моноцитов периферической крови подтверждают литературные данные о противоположной направленности эффектов ХГ и ОТ. Однако, на уровне модуляции системы К+-транспорта, а также эластазной активности моноцитов, ХГ и ОТ, по-видимому, утрачивают антагонизм взаимодействий и выступают как синергисты по отношению к эффектам друг друга.

Система К+-транспорта и фагоцитарная активность моноцитов периферической крови взаимосвязаны на уровне их регуляции ХГ и ОТ. При этом, в регуляции ХГ количества фагоцитирующих клеток участвуют и Kv-каналы и Na+/K+-ATPa3a клеток, а низкая доза гормона, через регуляцию активности Na+/K+-ATPa3bi, конролирует и их поглотительную способность. Влияние ОТ на фагоцитоз моноцитов связано с К+-транспортом, в основном, через мембранную Na+/K+-ATPa3y, а активность ЭЛ регулируется гормоном посредством других К+-зависимых механизмов. ХГ и ОТ, в сочетаниях, соответствующих уровням гормонов в I триместре беременности, угнетают фагоцитарную активность моноцитов, не модулируя при этом уровень [К4];. Учитывая участие К+-транспортеров в реализации самостоятельных эффектов гормонов, можно заключить, что именно системы, контролирующие К+-транспорт, а не уровень иона в клетке, имеют значение в гормональной регуляции функций фагоцитов.

Таким образом, ХГ и ОТ регулируют функциональную активность фагоцитов в тесной связи с модуляцией системы К+-транспорта клеток. Существенную роль при этом играют женские половые стероиды, которые контролируют как эффекты гормонов, так и непосредственно К+-транспорт иммуноцитов. Вышесказанное позволяет заключить, что гормональная регуляция процессов фагоцитоза и системы К+-транспорта моноцитов является важной составной частью эндокринного контроля процессов гестации, направленного на обеспечение успешного протекания беременности.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2002 года, Лялина, Ольга Григорьевна

1. Абрамов В.В. Взаимодействие иммунной и нервной систем. Новосибирск: Наука,-1988.-166 с.

2. Бекиров М, Крехова М.А. Влияние хорионического гонадотропина на функцию коры надпочечников у интактных и гонадэктомированных крыс. // Проблемы эндокринологии.-1973.-Т. 19, N3.-C. 61-66

3. Бекиров М, Крехова М.А. О влиянии хорионического гонадотропина на функциональное состояние коры надпочечников крыс.// Проблемы эндокринологии.-1974.-Т.20, N1 .-С.77-81.

4. Бекиров М. Влияние хорионического гонадотропина на содержание кортикостерона в плазме крови крыс. // Проблемы эндокринологии.-1970.- Т.16, N3.-C.60-63.

5. Болдырев А.А. Na/K-АТРаза как олигомерный ансамбль // Биохимия.-2001.-T.66,N 8.-С.1013-1025.

6. Брондз Б.Д. Т-лимфоциты и их рецепторы в иммунологическом распознавании. М.: Наука.-1987.- 471 с.

7. Вальтищева Е.Ю. Акушерство и гинекология //.-1988.-Т.З. -С.З.

8. Вейсскопф Д. Азбука Excel 97: Пер. с англ. -К.: ВЕК, М.: ЭНТРОП, М.: Бином Универсал, 1997.- 480 с.

9. Джаносен Д.Ю., Амлот П. Иммунофлуоресценция и иммуногистохимия. /В кн.: Лимфоциты: методы. М.: Мир.-1990.-С.112-173.

10. Исследование системы крови в клинической практике / Пол ред. Г.И.Козинца и В.А. Макарова.-М.: Триада-Х,-1997.-480 с.

11. КагаваЯ. Биомембраны. /Пер с яп., М.:Высш.шк., 1985.-303 с.

12. Каплин В.Н. Нетрадиционная иммунология инфекции. Пермь: Изд.-во Пермской государственной медицинской академии, 1996.-163 с.

13. Каплин В.Н., Кузнецов В.Ф., Обернебесова Т.П. Методические аспекты изучения фагоцитоза // I съезд иммунологов России: Тез. Докл. (23-25 июня 1992 г.). Новосибирск, 1992. -С.200-201.

14. Кашкин К.П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность // Клиническая и лабораторная диагностика.-1998, N11.-С.21-32.

15. Кеворков Н.Н., Шилов Ю.И., Ширшев С.В., Черешнев В.А. Гормоны репродукции в регуляции процессов иммунитета. Екатеринбург.: УИФ Наука, 1993, с. 169.

16. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакций воспаления и иммунитета // Иммунология.-1995.-N5.-С.30-41.

17. Кирпатовский И. Д., Полянская И. С., Рахманова Г. А. // Пробл. гематологии и переливания крови.-1981.-Т. 26,N 5. -С.35

18. Ковальчук JI.B., Чередеев А.Н. Иммунорегуляторная роль моноцитов в норме и при иммунопатологии // Итоги науки и техн. ВИНИТИ. Сер. Иммунология.-1991 .-Т.27.-С. 1 -220.

19. Красникова T.JL, Марахова И.И., Виноградова Т.А. Влияние 1-изопротеренола на транспорт моновалентных катионов в активированных лимфоцитах человека // Цитология.-1993.-T.35, N 6/7.-С.42-49.

20. Крутецкая З.И., Лебедев О.Е. Модуляция активности ионных каналов клеток арахидоновой кислотой, продуктами ее метаболизма и другими жирными кислотами. //Цитология.- 1995,- T.37,Nl/2.- С.5-65.

21. Крутецкая З.И., Лебедев О.Е. Роль тирозинового фосфорилирования в регуляции активности ионных каналов клеточных мембран. СПб., Изд."Айю".-1998.-244 с.

22. Крутецкая З.И., Лонский А.В. Биофизика мембран. СПб., Изд.СПбГУ.-1994.-288 с.

23. Кузнецова Л.В. Уровень хорионического гонадотропина в сыворотке крови плода человека и новорожденного // Педиатрия.-1982.-Т.7.-С. 6-8.

24. Куклина Е.М. Влияние ХГ на антигеннезависимую дифференцировку Т-лимфоцитов и функциональную активность нейтрофилов человека. Дисс. канд. биол. наук, Пермь: Ин-т экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН.-1999.-145 с.

25. Куклина Е.М., Ширшев С.В. Модуляция функциональной активности нейтрофилов хорионическим гонадотропином // Цитология.-1999-T.41,N6.-C.516-520.

26. Марахова И.И. Ионный транспорт и пролиферация клеток.// Цитология.-1991.-Т.ЗЗ, N 11.-С.67-77.

27. Медуницын Н.В. Процессинг и презентация антигена макрофагами // Иммунология.-1995 .-N3 .-С. 17-25.

28. Муртазина Д.А., Петухов С.П., Рубцов А.М, Стори К.Б., Лопина О.Д. Фосфорилирование а-субъединицы Ыа,К-АТРазы из солевых желез уток под действием сАМР-зависимой протеинкиназы ингибирует активность фермента // Биохимия.-2001.-Т.66, N8-C. 1066-1077.

29. Попова Т.Т., Чистяков В.А. Влияние хорионического гонадотропина на проникновение 1131-альбумина через гистогематический барьер беременных крыс.// Бюл. эксперим. биологии и медицины.-1973.-Т.75,N 4. -С.60-61.

30. Солопаева И.М., Рощина Н.М., Иванова Н.Л. Влияние хорионического гонадотропина на содержание простагландинов (Е+А) в ткани патологически измененной печени и в плазме крови крыс.// Бюл. эксперим. биологии и медицины.-1983.-Т.96, N12.-C.40-42.

31. Стрижова Н.В., Ковальчук Л.В., Старцева Н.М. и др. Значение системы ИЛ-1 и ИЛ-2 в пролиферации лимфоцитов у женщин // Тез. докл. I съезда иммунологов России. Новосибирск, 1992.-С.460-461.

32. Теппермен Дж., Теппермен X. Физиология обмена веществ и эндокринной системы. М.: Мир, -1989.- 656 с.

33. Токарь В.И. Влияние хорионического гонадотропина на экскрецию эстрогенов у здоровых мужчин и больных флюорозом. // Пробл. Эндокринологии.-1980.-Т.26, N1 .-С.34-38.

34. Трунова Л.А. Иммунология репродукции. Новосибирск: Наука,-1984.-157с.

35. Угрюмов М.В. Механизмы эндокринной регуляции. М.:Наука.-1999.-299с.

36. Фрейдлин И.С. Система мононуклеарных фагоцитов. М.: Медицина,-1984.-157 с.

37. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Современные подходы к оценке основных этапов фагоцитарной активности // Иммунология.-1995.-N 4.-С.7-11.

38. Хип Р., Флинт А. В кн. Гормональная регуляция размножения у млекопитающих (под ред. Остина К., Шорта Р.).- М.: Мир-1987 С.193-245.

39. Шилов Ю.И., Кеворков Н.Н. Дифференцированное влияние женских половых гормонов стероидной природы на Т- и В-зависимые системы иммунитета//Патол. физиология и эксперим.терапия.-1980.-N4.-C.73-75.

40. Ширшев С.В. Влияние хорионического гонадотропина на динамику первичного иммунного ответа // Бюл.эксперим. биологии и медицины.-1992.-Т.63, N6.-C.624-629.

41. Ширшев С.В. Белки фетоплацентарного комплекса в регуляции иммунных реакций // Успехи соврем, биологии.-1993.-Т. 113,N 2.-С.230-238.

42. Ширшев С.В. Цитокины плаценты в регуляции иммунноэндокринных процессов при беременности // Успехи соврем, биологии-1994.-Т.114,N 2.-С.223-228.

43. Ширшев С. В. Механизмы совместного влияния хорионического гонадотропина и рекомбинантного интерлейкина 2 на спленоциты при формировании гуморального иммунного ответа // Цитология.-1994,-T.36,N 5.-С.459-464.

44. Ширшев С.В. Механизмы иммуномодулирующего действия гормонов репродукции: Дисс. . д-ра мед. наук. Пермь: Ин-т экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН, 1995. 400 с.

45. Ширшев С. В. Молекулярные механизмы иммуномодулирующего действия хорионического гонадотропина на Т- и В- лимфоциты интактной селезенки //Биохимия.-1997.-T.62,N5.-C.603-612.

46. Ширшев С. В. Клеточные и молекулярные механизмы иммуно-модулирующего действия хорионического гонадотропина // Успехи соврем, биологии.-1998.-Т.118,N1.-C.69-85.

47. Ширшев С.В. Механизмы иммунного контроля процессов репродукции / Екатеринбург: УрО РАН.-1999.-381 с.

48. Ширшев С.В., Кеворков Н.Н. Репродуктивные гормоны белково-пептидной природы как регуляторы иммунных реакций // Успехи соврем, биологии.-1991 .-Т. 111,N 5.-С.683-687.

49. Эккерт Р. Разделение клеток иммунной системы // В кн. Иммунологические методы (под ред. Фримеля Г.), М.: Медицина,-1987. с.226-254.

50. Abell A.N., Segaloff D.L. Evidence for the direct involvement of transmembrane region 6 of the lutropin/choriogonadotropin receptor in activating Cs // J.Biol.Chem.-1997.-V.272, N 23.-P.14586-14591.

51. Adcock E.W., Teasdale F., August Ch.S. et al. Human chorionic gonadotropin: Its possibly role in maternal lymphocytes suppression // Sci.-1973.-V.181, N 4102.-P.845-847.

52. Akins P.T., Surmeier D.J., Kitai S.T. Muscarinic modulation of a transient K+ conductance in rat neostriatal neurons // Nature.-1990.-V.344.-P.240-242.

53. Alafaleq A.I., Homeida A.M. Effect of low doses of oestradiol, progesterone and dihydrotestosterone on the immune response of broiler chicks // Immunopharmacol. Immunopathol.-1998.-V.20, N2.-P.315-327.

54. Alexander H., Zimmerman G., Lehmann M., Pfieffer R., Schone E., Leiblein S., Ziegert M. HCG Secretion by peripheral mononuclear cells during pregnancy // Domest. An.Endocrinol.-1998.-V.15, N15.-P.377.-387.

55. Altthan H., Stenman U.H. Pathophysiological importance of various molecular forms of human choriogonadotropin // Mol.Cell.Endocrinol.-1996.-V.125, N1-2.-P.107-120.

56. Aniansson H., Stendahl O., Dahlgren C. Comparison between luminol- and lucigenin-dependent chemiluminescence of polymorphonuclear leukocytes // Acta pat. Microbiol. Immunol. Scand. Sect. C. Immunol.-1984.-V.92.-P.357-365.

57. Antoni FA. Oxytocin receptors in rat adenohypophysis: Evidence from radioligand binding studies // Ibid.-1986.-V. 119.-P.2393-2395.

58. Anwer K., Oberti C., Perez G.J., Perez-Reyes N., McDougall J.K., Monga M., Sonborn B.M., Stefani E., Того L. Calcium-activated K+-channels as modulators of human myometrial contractile activity //Am.J.Physiol.-1993.-V.265,N4.-P.976-985.

59. Aperia A.C. Intrarenal dopamine: a key signal in the interactive regulation of sodium metabolism.//Annu. Rev. Physiol. -2000.-V.62.-P.621-647.

60. Ashcroft P.M., Gribble F.M. Correlating structure and function in ATP-sensitive K+channels // Trends Neurosci.-1998.-V.21.-P.288-294.

61. Asselin E., Drolet P., Fortier M.A. Cellular mechanisms involved duing oxytocin-induced PGF2-alpha production in endometrial endothelial cells in vitro: role of C0X2 // Endocrinology.- 1997.-V.138, N11.-P.4798-4805.

62. Backus B.T., Affront L.F. Tumor-associated bacteria capable of producing a human choriogonadotropin like substance // Infect.Immun.-1981.-V.32, N3.-P.1211-1215.

63. Baines M.G., Gendron R.L. Are both endogenous and exogenous factors involved in spontaneous foetal abortion? // Res.Immunol.-1990.-V.141.-P.154-158.

64. Bean M.A., Salser J.S., Newman M et al. Human chorionic gonadotropin: doubtful role as an inhibitor of cell-mediated immunity // Cancer Immunol. Immunother.- 1977.-Y.2.-P.85-90.

65. Beauvais F., Shimahara Т., Inoue I., Hieblot C., Burtin C., Benveniste J. Regulation of human basophil activation.II. Histamine release is potentiated by K+ efflux and inhibited by Na+ influx // J.Immunol.-1992.-V.148,Nl.-P.149-154.

66. Beck D., Ginsburg H., Naot Y. The modulating effect of human chorionic gonadotropin on lymphocyte blastogenesis // Am.J.Obstet.GynecoL-1977.-V.129, N1.-P. 14-20.

67. Beeton C., Barbaria J.,Giraud P. et a\. Selective blocking of voltage-gated IO channels improves experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T cell activation//J.Irnmunol.-2001 .-V.166.-P.936-944.

68. Bell S.C., Billington W.D. Humoral immune responses in murine pregnancy. III. Relationship between anti-paternal alloantibody levels in maternal serum, placenta and fetus // J.Reprod.Immunol.-1983.-V.5-P.299-310.

69. Bell S.C., Billington W.D. Major anti-paternal alloantibody induced by murine pregnancy is non-complement-fixing IgGl //Nature.-1980.-V.288.-P.387-388.

70. Benirsghke K. The placenta: normal development // Maternal-Fetal Medicine: Principal and Practice. / Eds.Creasy R.K., Resnick R. Philadelphia: WB Saunder Co.,-1989.-P. 123-123.

71. Beimeguard В., Hahlin M., Dennefors В. Antigonadotropic effect of oxytocin on the isolated human corpus luteum // Fertil.Steril.-1987.-V.47,N3.- P.431-435.

72. Benveniste R, Scommegha A. Human chorionic gonadotropin alpha-subunit in pregnancy // Am. J. Obstet.Gynecol.-1981.-V.141,N8.-P.952-961.

73. Bergh A., Damber J.E., van Rooijen N. The human chorionic gonadotropin-induced inflammation-like response is enhanced in macrophage-depleted rat testes // J.Endocrinol.-1993.-V. 135, N3.-P.415-420.

74. Bernier M., Clerget M., Mombrial C.F., Saez J.M. Processing of human choriogonadotropin alpha-subunit. I. Characterization of topographic sites recognized by monoclonal antibody П J.Biol.Chem.-1998.-V.263, N21.-P.10364-10369.

75. Bertorello A.M., Aperia A., Walaas S.I., Nairn A.C., Greengard P. Phosphorylation of the catalytic subunit of Na+,K(+)-ATPase inhibits the activity of the enzyme // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A.- 1991.-V.15,N88 (24).-P.l 1359-11362.

76. Bertorello A.M., Katz A.J. Short-term regulation of renal Na-K-ATPase activity: physiological relevance and cellular mechanisms. Review // Am. J. Physiol. -1993.-V.265,N 6 (Pt 2).-P. F743-F755.

77. Bielefeldt K., Waite L., Abbound F.M., Conklin J.L. Nongenomic effects of progesterone on human intestinal smooth muscle cells // Am J. Physiol.-1996.-V.271 .-P.G370-G376.

78. Birkeland S.A., Kristoffersen K. Lymphocyte transformation with mitogens during normal human pegnancy: a longitudinal study // Scand.J.Immunil.-1980.-V.11-P.321-325.

79. Blalock J.E., Johnson H.M., Smith E.M., Torres B.A. Enhancement of the in vitro antibody response by thyrotropin // Biochem. Biophys. Res. Commun.-1984.-V.125, N1.-P.30-34.

80. Block L.H., Locher R., Tenschert W., Siegenthaler W., Hofmann Т., Mettler E., Vetter W. 1251-8-L-arginine vasopressin binding to human mononuclear phagocytes.// J.Clin.Invest.- 1981.-V.68,N2.-P. 374-381.

81. Blunck R., Scheel O., Muller M.,Brandenburg K., Seitzer U., Seydel U. New insights into endotoxin-induced activation of macrophages: involvement of a K+ channel in transmembrane signalling.// Jimmunol.-2001.-V.166.-P.1009-1015.

82. Bobrova N.A., Vazhnichaia E.M., Kaidashev I.P. Effects of regulator peptides on expression of mannose-containing membrane structures in leukocytes in acute stress. // Patol.Fiziol.Eksp.Ter.-2000.-N4.-P.l 1-13.

83. Bockman R.S., Rothschild M. Prostaglandin E inhibition of T-lymphocyte colony formation: a possible mechanism of monocyte modulation of clonal expansion. // J.Clin.Invest.-1979.-V.64.-P. 812-817.

84. Boone D.L., Carnegie J.A., Rippstein P.U., TsangB.K. Induction of apoptosis in equine chorionic gonadotropin (eCG)-primed rat ovaries by anti-eCG antibody // Biol. Reprod.- 1997.- V.57, N2.-P. 420-427.

85. Bowlby M.R., Fadool D.A., Holmes T/C., Levitan I.B. Modulation of the Kvl.3 potassium channel by receptor tyrosine kinases.// J.Gen.Physiol.-1997.-V. 110,N5.-P.601-610.

86. Braunstein G.D., Kamdar V., Rasor J. Widespread distribution of a chorionic gonadotropin like substance in normal human tissues // J.Clin.Endocrinol.Metabol.-1979.-V.49.-P.917-925.

87. Bregestovsky P., Redkozubov A., Alexeev A. Elevation of intracellular calcium reduces voltage-dependent potassium conductance in human T-cells // Nature.-1986.-V.319, N 6056.-P.776-778.

88. Buyon J.P., Korchak H.M., Rutherford L.E., Ganhuly M. Weissmann G. Female hormones reduce neutrophils responsiveness in vitro II Arthritis Rheum.-1984.-V.27, N6.-P.623-630.

89. Cahalan M.D., Chandy K.G. Ion channels in the immune system as targets for immunosuppression. // Curr OpinBiotechnol.-1997.-V. 8. -P.749-756.

90. Cahalan M.D., Chandy K.G., DeCoursey Т.Е., Gupta S. A voltage-gated potassium channel in human T-lymphocytes // J.Physiol.-1985.-V.358.-P.197-237.

91. Cannon J.G. Neuroendocrine modulators of interleukin-1 action // J.Endocrinol.-1986.-V.3.-P.686-691.

92. Cannon J.G., Tatro J.B., Reichlin S., Dinarello Ch. A. Alpha-melanocyte stimulating hormone inhibits immunostimulatory and inflammatory action of interleukin-1 // J.Immunol.-1986.-V.137, N7.-P.2232-2236.

93. Carnio E.C.,Varanda W.A. Calcium-activated potassium channels are involved in the response of mouse Leydig cells to human chorionic gonadotropin // Braz.J. Med. Biol. Res.-1995.-V.28,N7.-P.813-824.

94. Cassoni P, Sapino A, Munaron L. et al. Activation of functional oxytocin receptors stimulates cell proliferation in human trophoblast and choriocarcinoma cell lines // Endocrinology.-2001 .-V.142,N3.-P.1130-1136.

95. Catt K.J., Harwood J.P., Clayton R.N., Davies T.F., Chan V, Katikineni M., Nozu K., Dufau M.L. Regulation of peptide hormone receptors and gonadal steroidogenesis // Rec.Prog.Horm. Res.-1980.-V36.-P.557.

96. Ceppellini R., Bonnard V.D., Coppo F. et al. Mixed leukocyte cultures and HLA antigens. Reactivity of young fetus, newborns at delivery // Transplant. Proc. 1971.-V.3-P.58-63.

97. Chan W.Y., Chen D.L., Mannig M. Oxytocin receptor subtypes in the pregnant rat myometrium and decidua: pharmacological differentiations // Endocrinology.- 1993.-V.132.-P.1381-1386.

98. Chandy K.G., DeCoursey Т.Е., Cahalan M.D. et al. Voltage-gated potassium channels are required for human T-lymphocyte activation // J Exp Med.-1984.-V.160.-P.369-385.

99. Channing CP, Kammerman S. Effects of hCG, asialo hCG and the subunits of hCG upon luteinization of monkey granulosa cell cultures // Endocrinology.-1973 .-V.93 .-P. 1035-1043.

100. Chard T, Gibbens GL. Spurt release of oxytocin during surgical induction of labor in women // Am. J. Obstet. Gynecol.-1983.-V. 147,N6.-P. 678-680.

101. Chen N.N., Wu S.G. Effect of recombinant human interleukin-1 beta on K+ channels of mice bone marrow stromal cells. // Sheng Li Xue Bao.-1999-V.51.-P.637-644.

102. Chen W., Bahl O.P. High expression of the hormone binding active extracellular domain (1294) of rat lutropin receptor in E.coli II Mol.Cell.Endocrinol.-1993.-V.91 .-P.3 5-41.

103. Chen W., Loke Y.W. Antibody isotype produced by pregnant mice immunized with fetal allogenic lymphocytes is mainly IgGl // J.Reprod.Immunol.-1989.-V.10.-P.189-199.

104. Cheuk J.M., Hollingsworth M., Hughes S.J., Piper I.T., Maresh M.J. Inhibition of contractions of the isolated human myometrium by potassium channel openers // Am. J. Obstet. Gynecol.-1993.-V.168.-P.953-960.

105. Chibbar R, Toma JG, Mitchell BF, Miller F. Regulation of neuronal oxytocin gene expression by gonadal steroids in pubertal rats // Mol. Endocrinol.-1990.-V.4.-P.2030-2038.

106. Chibbar R, Wong S, Miller FD, Mitchell BF. Estrogen stimulates oxytocin gene ezpression in human chorio-decidua. // J. Clin. Endocrinol. Metab.-1995.-V.80.-P.567-572.

107. Chung I., Schlichter L.C. Native Kvl.3 channels are upregulated by protein kinase С // J.Membr.Biol.-1997.-V.156, N 1.-P.73-85.

108. Chung SK, McCabe JT, Pfaff DW. Estrogen influences on oxytocin mRNA expression in preoptic and anterior hypothalamic regions studied by in situ hybridization // J.Comp. Neurol.-1991.-V.307.-P. 281-295.

109. Clarke A.G., Gil A.L., Kendall M.D. The effects of pregnancy on the mouse thymic epithelium // Cell.Tissue Res.-1994.-V.275, N2.-P.309-318.

110. ColdenStanfield M., Scanlon M. VCAM-1-induced inwardly rectifying K+ current enhances Ca2+ entry in human THP-1 monocytes // Am.J.Physiol.-2000.-V.279, N 2.-P.C488-C494.

111. Collins G.D., Chrest F.J., Adler W.H. Maternal cell traffic in allogeneic embryos // J.Reprod.Immunol.-1980.-V.2,N2.-P.163-172.

112. Contactor S.F., Davies H. Effect of human chorionic somatomammotropin and human chorionic gonadotropin on phytohaemagglutinin-induced lymphocyte transformation//Nature New Biol.-1973.-V.243.-P.284-286.

113. Copland JA, Ives KL, Simmons DJ, Soloff MS. Functional oxytocin receptors discovered in human osteoblasts // Endocrinology.-1999.-V. 140,N9.-P.4371-4374.

114. Correale J., Arias M,, Gilmore W. Steroid hormone regulation of cytokine secretion by proteolipid protein-specific CD4+ T cell clones isolated from multiple sclerosis patients and normal control subjects // J.Immunol.-1998.-V.161, N7.-P.3365-3374.

115. Crutchley D.J., Conanan L.B., Que B.G. K+ channel blockers inhibit tissue factor expression by human monocytic cells // Circ. Res.- 1995.-V.76,N1.-P.16-20.

116. Cunningham ET, Sawchenko PE. Reflex control of magnocellular vasopressin and oxytocin secretion// Trends Neurosci.-1991.-V.14.-P.406-411.

117. Das C, Salahuddin M, Talwar GP. Investigations on the ability of antisera produced by Pr-HCG-TT to neutralize // Contraception.-1976.-V13,N2.-P. 171-181.

118. Davis J.S., West L.A., Farese R.V. Effect of LH on phosphoinositide metabolism in rat granulose cells // J.Biol.Chem.-1984.-V.259.-P.32768-32774.

119. Dawood M.Y., Raghavan K.S., Ylikorkala O. Oxytocin in the blood during pregnancy and labor // Ugeskr.Laeger.-1978.-V.140,N 48.-P.2992-2996.

120. Daynes R.A., Robertson B.A., Cho B.-H. et al. Alpha-melanocyte-stimulating hormone exhibits target cell selectivity in its capacity to affect interleukin-1-inducible responses in vitro and in vivo I I J.Immunol.-1987.-V.139, Nl.-P.103-109.

121. DeCoursey Т.Е., Chandy K.G., Gupta S., Cahalan M.D. Voltage-gated potassium channel in human T-lymphocytes: a role in mitogenesis? // Nature.-1984.-V.307, N 5950.-P.465-468.

122. Desaphy J.-F., Rogier C., Joffre M. Modulation of K+ conductances by Cf2+ and human chorionic gonadotropin in Leydig cells from mature rat testis //J.Physiol.-1996.-V.495,Nl.-P.23-35.

123. Dirnhofer S., Koessler P., Ensinger C., Feichtinger H., Madersbacher S., Berger P. Production of trophoblastic hormones by transitional cell carcinoma of the bladder: Association to tumor stage and grade // Human Pathology.-1998.-V.29, N4.-P.377-3 82.

124. Djelic N., Soldatovic В., Andjelkovic M., Cvetkovic D. In vitro cytogenetic analysis of the effects of oxytocin on human peripheral blood lymphocytes // Mutat.Res.-1996.-V.356.-P.265-268.

125. Dornand J.,Favero J., Bonnafjus J.C., Mani J.C. Paradoxical production of mouse thymocyte activating factor by ouabain-treated human mononuclear cells // Cell Immunol.-1984.-V.83,N2.-P.351-359.

126. Dresser D.W. The potentiating effect of pregnancy on humoral immune responses of mice // J. Reprod. Immunol.-1991.-V.20.-P.253-256.

127. Duchatelle P., Joffre M. Potassium and chloride conductances in rat Leydig cells: effects of gonadotropins and cyclic adenosine monophosphate // J.Physiol (Lond).-1990.-V.428.-P. 15-37.

128. Dufau M.L., Catt K.J. Gonadotropin receptors and regulation of steroidogenesis in the testis and ovary // Vitam. Horm.-1978.-V.36.-P.461-466.

129. Duridanova DB, Nedelcheva MD, Gadov HS. Oxytocin-induced changes in single cell K+ currents and smooth muscle contraction of guinea-pig gastric antrum//Eur J. Endocrinol.-1997.-V.136,N5.-P.531-538.

130. Edberg J.C., Ching-Tai Lin, Dana Lau , Unkeless J.C., Kimberly R.P. The Ca2+dependence of human Fc-gamma receptor-initiated phagocytosis // J. Biol.Chem .-1995.-V.270,N38.- P.22301-22307.

131. Ehring G.R., Kerschbaum H.H., Eder C. et al. A nongenomic mechanism for progesterone-mediated immunosuppression: inhibition of К channels, Casignalling, and gene expression in T lymphocytes // J. Exp.Med.-1998.-V. 188.-P.1593-1602.

132. Elands J., Resink A., De Kloet E.R. Neurohypophyseal hormone receptors in the rat thymus, spleen, and lymphocytes // Endocrinology.-1990.-V.l26.-P.2703-2710.

133. El-Maallem H., Fletgher J. Impaired neutrophil function and myeloperoxidase deficiency in pregnancy // Br J.Haematol.-1980.-V.44-P.275-384.

134. Engstrom Т., Bratholm P., Christensen N.J., Vilhardt H. Effect of oxytocin receptor blockade on rat myometrial responsiveness to prostaglandin f(2)(alpha) //Biol. Reprod.- 2000.-V.63,N5.-P. 1443-1449.

135. Eta E., Ambrus G., Rao C.V. Direct regulation of human miometrial contractions by human chorionic gonadotropin // J. Clin. Endocrinol. Metab.-1994.- V.79, N6.-P.1582-1586

136. Evagelatou M., Webster A.D., Farrant J. Effect of beta-oestradiol on function of lymphocytes from normal donors and patients with common variable immunodeficiency (CYID) //Clin.Exp.Immunol.-1994.-V.98, N2.-P.203-209.

137. Faas M.M., Schuiling G.A., Bailer J.F., Bakker W.W. Glomerular inflammation in pregnant rats after infusion of low dose of endotoxin. An immunohistological study in experimental pre-eclampsia // Am J.Pathol.-1995.-V.147,- N5.-P.1510-1518.

138. Fabris N. Immunological reactivity during pregnancy in the mouse // Experienta.-1973.-V.29.-P.610-612.

139. Fadool D.A., Holmes T.C., Berman K., Dagan D., Levitan I.B. Tyrosine phosphorylation modulates current amplitude and kinetics of a neuronal voltage-gated potassium channel // J. Neurophysiol.-1997.-V.78,N3.-P.1563-1573.

140. Falke N. Modulation of oxytocin and vasopressin release at the level of the neurohypophysis // Progr.Neurobiol.-l 991.-V.36.-P.465-484.

141. Fang X, Wong S, Mitchell BF. Relationships among sex steroids, oxytocin, and their receptors in the rat uterus during late gestation and at parturition // Endocrinology.-1996.-V. 137.-P.3213-3219.

142. Feinberg B.B., Anderson D.J., Steller M.A., Fulop V., Berkowitz R.S., Hill J.A. Cytokine regulation of trophoblast steroidogenesis // J. Clin. Endocrinol. Metab. -1994.-V.78, N3.-P.586-591.

143. Feola R.P., Collins M.T., Czuprynski С J. Hormonal regulation of phagocytosis and intracellular growth of Mycobacterium avium ss. paratuberculosis in bovine peripheral blood monocytes // Microb. Pathog.-1999.- V.26,N1.-P.1-11.

144. Flint A.P.F., Sheldrick E.L. Ovarian oxytocin and the maternal recognition of pregnancy // J. Reprod. Fertil.-1986.-V.76.-P.831-839.

145. Flint A.P.F., Sheldrick E.L. Ovarian oxytocin. Oxytocin: Clinical and laboratory studies. Ed.JA Amico, AG Robinson. // Amsterdam: Esevier.-1985 -P.335-350.

146. Friebe-Hoffmann U., Chiao J.P., Rauk P.N. Effect of IL-lbeta and IL-6 on oxytocin secretion in human uterine smooth muscle cells // Am. J. Reprod. Immunol.-2001 .-V.46,N3 .-P.226-231.

147. Fuchs Т., Hammarstrom L., Smith C.I.E., Brundin J. In vitro induction of human suppressor T-cells by a chorionic gonadotropin preparation // J.Reprod.Immunol.-1981 .-V.3 .-P.75-80.

148. Fuchs Т., Hammarstrom L., Smith C.I.E., Brundin J. Sex-dependent induction of human suppressor T-cells by chorionic gonadotropin // J.Reprod.Immunol.-1982.-V.4, N4.-P. 185-190.

149. Gallin E.K. Calcium- and voltage-activated potassium channels in human macrophages // Biophys J.-1984.-V.46, N 6.-P.821-825.

150. Gallin E.K. Evidence for a Ca-activated inwardly rectifying К channel in human macrophages // Am J Physiol .-1989.-V. 257, N1 (Ptl).-P. 77-85.

151. Gallin E.K. Ion channels in leukocytes // Physiol. Rev.-1991 .-V.71,N3.-P.775-811.

152. Gallin E.K., McKinney L.C. Patch clamp studies in human macrophages: single-channel and whole-cell characterization of two K+ conductances // J. Membran.biol.-l988.-У. 103.-P. 41-53.

153. Geek P., Pfeiffer B. Na+K+Cl" cotransport in animal cells - its role in volume regulation // Ann. NY Acad. Sci.-1985.-V.456.-P.166-182.

154. Geenen V., Martens H,. Brilot F., Renard C., Franchimont D., Kecha O. Thymic neuroendocrine self-antigens. Role in T-cell development and central T-cell self-tolerance //Ann. N Y Acad. Sci.- 2000.-V.917.-P.710-723.

155. Gibbons J.M., Mitnick M., Chieffo V. In vitro biosynthesis of TSH- and LH-releasing factors by the human placenta // Am.J.Obstet.Gynecol.-1975.-V.121.-P.127-130.

156. Gibbs D.M. Vasopressin and oxytocin: Hypothalamic modulators of the stress response: A review // Psychoneuroendocrinology.-1986.-Vl.-P. 131-140.

157. Giebisch G. Renal potassium channels: an overview // Kidney Int.-1995.-V.48.-P. 1004-1009.

158. Gilmore W., Weiner L.P., Correale J. Effect of estradiol on cytokine secretion by proteolipid protein-specific T cell clones isolated from multiple sclerosis patients and normal control subjects // J.Immunol.-1997.-V.l58, N1.-P.446-451.

159. Goodwin J.S., Webb D.R. Role of prostaglandin in the depressed cell-mediated immune response in rheumatoid arthritis // Clin. Immunol, and Immunopathol.-1980.-V. 15 .-P. 106-111.

160. Grinstein S., Dupre A., Rothstein A. Volume regulation by human lymphocytes. Role of calcium. //J.Gen.Physiol.-1982.-V.79.-P.849-868.

161. Grissmer S., Nguyen A.N., Cahalan M.D. Calcium-activated potassium channel in resting and activated human T-lymphocytes. Expression levels, calcium dependence, ion selectivity, and pharmacology. // J.Gen.Physiol.-1993.-V.102, N 4.-P.601-630.

162. Gross G.A. Imamura T.,Luedke C., Vogt S.K., Olson L.M., Nelson D.M., Sadovsky Y., Muglia L.J. Opposing actions of prostaglandins and oxytocin determine the onset of murine labor //Proc.Natl.Acad.Sci.USA.-1998.-V.95,N20.-P. 11875-11879.

163. Gross S.A., Newton J.M., Hughes F.M.Jr. Decreased intracellular potassium levels underlie increased progesterone synthesis during ovarian follicular atresia // Biol.Reprod.-2001 .-V.64,N6.-P. 1755-1760.

164. Gupta R.L., Rao V.J., Munje R.R. Experimental evaluation of various methods used for prolongation of skin homografts studies done in rats and rabbits // Indian J.Med.Res.-1972.-V.60, N8.-P. 1196-1204.

165. Gutman G.A., Chandy K.G. Voltage-gated K+-channel genes // In: Handbook of Receptors and Channels: Ligand- and Voltage-gated Ion Channels. CRC Press.-1995.- P. 1-71.

166. Halila H., Alfthan H., Stenman U.H. Clinical use of gynaecologic tumor markers // Ann.Chir.Gynaecol.-1989.-V.78, N1.-P.65-70.

167. Hammarstrom L., Fuchs Т., Smith C.I.E. The immunodepressive effect of human glicoproteins and their possible role in the honrejection process during pregnancy // Acta Obstet. Gynecol. Scand.- 1979.-V.58, N5.-P.417-422.

168. Harbour-McMenamin D., Smith E.M., Blalock J.E. Production of immunoreactive chorionic gonadotropin during mixed lymphocyte reaction: a possible selective mechanism for genetic diversity // Proc.Nat.Acad.Sci.USA.-1986.-V.83, N12.-P.6834-6838.

169. Hatton GI. Emerging concepts of structure-function dynamics in adult brain: The hypothalamo-neurohypophysal system // Progr. Neurobiol.-1990.-V.34.-P. 437-504.

170. Hearn JP, Webley GE, Gidey Baird AA. Chorionic gonadotropin and embrio-maternal recognition during the peri-implantation period in primates // J. Reprod. Fertil.-1991.-V.92.-P.497-509.

171. Hegde U.C. Immunomodulation of the mother during pregnancy // Med. Hypothases.-1991.-V.35.-P.159-164.

172. Heller J.H., Meier R.M., Zucker R., Mast G.W. The effect of natural and synthetic estrogens on reticuloendothelial system function //Endocrinology.-1957.-V.61,N3.-P.235-241.

173. Hennen G., Pierce J.G., Freychet P. Human chorionic thyrotropin: Further characterization and study of its secretion during pregnancy // J.Clin.Endocrinol. Metab.-1969.-V.29.-P.581-587.

174. Herrlich A., Kahn В., Grosse R., Schmid A., Schultz G., Gudermann T. Involvement of Gs and Gi in dual coupling of the luteinising hormone receptor to adenylyl cyclase and phospholipase С // J.Biol.Chem.-1996.-V.271, N28.-P. 16764-16772.

175. Heyborne K., Fu Y-X., Nelson A. Recognition of trophoblasts by yST cells // J.Immunol.-1992.-V.149.-P.2877-2880.

176. Hille B. Ionic channels of excitable membranes // Sinauer Associates Inc., Sunderland.-1992.

177. Hinko A, Soloff M.S. Characterization of oxytocin receptors in rabbit amnion involved in the production of prostaglandin E2 // Endocrinology. -1992.-V.130.-P.3547-3553.

178. Hinko A, Soloff M.S. Up-regulation of oxytocin receptors in rabbit amnion by adenosine 3',5'-monophosphate // Endocrinology.-1993.-V.132.-P. 126-132.

179. Hoare S, Copland JA, Wood TG. et al. Identification of a GABP alpha/beta binding site involved in the induction of oxytocin receptor gene expression in human breast cells. Potentiation by c-Fos/c-Jun // Endocrinology.- 1999.-V. 140,N5.-P. 2268-2279.

180. Holda J.R., Oberti C., Perez-Reyes E., Blatter L.A. Characterization of an oxytocin induced rise in

181. Ca .i in single human myometrium smooth muscle cells //Cell Calcium. -1996. -Y.20, N1.-P.43-51.

182. Holland D.,Bretsher P., Russell A.S. Immunologic and inflammatory responses during pregnancy // J.Clin.Lab.Immunol.-1984.-V.14.-P. 177-179.

183. Holmes T.C., Berman K., Swartz J.E., Dagan D., Levitan I.B. Expression of voltage-gated potassium channels decreases cellular protein tyrosine phosphorylation // J. Neurosci.-1997.-V.17,N 23.-P.8964-8974.

184. Holmes T.C., Fadool D.A., Ren R., Levitan I.B. Association of Src tyrosine kinase with a human potassium channel mediated by SH3 domain // Science.-1996.-V.274.-N 5295 .-P.2089-2091.

185. Huang X.-Y., Morielli A.D., Peralta E.G. Tyrosin kinase-dependent suppression of a potassium channel by the G-protein-coupled ml muscarinic acetylcholine receptor // Cell.-1993.-V.75,N6.- P. 1145-1156.

186. Hughes F.M.Jr., Bortner C.D., Purdy G.D., Cidlowski J.A. Intracellular K+ suppresses the activation of apoptosis in lymphocytes // J.Biol.Chem.-1997.-V.272,N 48.-P.30567-30576.

187. Huhtaniemi I.T., Korenbrot C.C., Jaffe R.B. HCG binding and stimulation of testosterone biosynthesis in the human fetal testis // J.Clin. Endocrinol, and Metab.-1977.-V.44.-P.936-941.

188. Husslein P. The importance of oxytocin and prostaglandins to the mechanism of labor in humans. // Wien. Klin. Wochenschr. Suppl.-1984-V.155.-P.1-32.

189. Iacona G, Bernardini A. Action of luteinizing chorionic gonadotropin on the immune response in vivo II Boll. Soc. Ital. Biol. Sper.-1976.-V.52,N4.-P.272-275.

190. Inagaki N, Seino S. ATP sensitive potassium channels—Kir6.2 gene.// Nippon Rinsho .-1997.-V. 55.-P. 452-457

191. Inoue Y., Shimamura K., Sperelakis N. Oxytocin actions on voltage-dependent ionic channels in pregnant rat uterine smooth muscle cells // Can. J. Physiol.Pharmacol.-1992.-V.70.-P. 1597-1603.

192. Ito Y, Kobayasci T, Kimura T. et al. Investigation of the oxytocin receptor expression in human breast cancer tissue using newly established monoclonal antibodies // Endocrinology.-1996.-V.137.-P.773-779.

193. Ivell R., Walther N. The role of sex steroids in the oxytocin hormone system // Mol.Cel. Endocrinol.-1999.-V. 151 ,N 1 -2.-P.95-101.

194. Jaffe R.B., Lee P.A., Midgley A.R. Serum gonadotropin before, at the inception of, and following human pregnancy // J.Clin.Endocrinol.Metab.-1969.-V.29.-P. 1022-1031.

195. Jaffe R.B., Seron-Ferre M.C., Huhtaniemi I.T., Korenbrot C.C. Regulation of the primate fetal adrenal gland and tast in vitro and in vivo // J.Steroid. Biochem.-1977.-V.8.-P.479.

196. Jan L.Y., Jan Y.N. Receptor-regulated ion channels 11 Curr.Opin.Cel.Biol.-1997.-V.9.-P. 155-160.

197. Janeway C.A., Travers H. Immunobiology: The immune system in health and desease / Second Edition. London, San Francisco, Philadelphia: Current Biology, Ltd, N.York and London: Garland Publishing Inc., 1996.

198. Jard S. Vasopressin and oxytocin. Hormones: From molecules to decease. Ed. E.-E. Paullien, PA Kelly. N.Y.: Chapman and Hall.-1990.-P. 282-302.

199. Jensen B.S., Odum N., Jorgensen N.K. et al. Inhibition of T cell proliferation by selective block of Ca2+-activated K+ channels // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1999.-V 96 P.10917-10921.

200. Ji I., Ji Т.Н. Human choriogonadotropin binds a lutropin receptor with essentially no terminal extension and stimulates camp synthesis // J.Biol.Chem.-1991.-V.266, N.23.-P. 13061-13079.

201. Johnson H.M., Torres B.A. Regulation of lymphokine production by arginine vasopressin and oxytocin: modulation of lymphocyte function by neurohypophyseal hormones // J Immunol.-1985.-V.135, (2 Suppl).-P.773-775.

202. Johnson M.H. Immunology of human reproduction. Grune and Stratton: Acad. Press. 1976.-P.33-60.

203. Joiner W.J., Khanna R., Schlichter L.C., Kaczmarek L.K. Calmodulin regulates assembly and trafficing of SK4/IK1. // J.Biol.Chem.-2001.-V.276, N 41.-P.37980-37985.

204. Josimovich J.B., MacLaren J.A. Presence in human placenta and term serum of hihgly lactogenic substance immunologically related to pituitary hormone // Endocrinology.-1962.-V.71 .-P.209-215.

205. Jow В., Nelson D.J. Outwardly rectifying K+ current as a marker of cellular activation in human macrophages // Biophys.J.-1989.- V.55,N2 (Pt2).-P.539a.

206. Judd H.L., Yen S.S.C. Serum androstendione and testosterone levels during the menstrual cycle //J.Clin.Endocrinol. Metab.-1973.-V.36.-P.475-479.

207. Kanazawa K., Ohno M., Moridaira H., Takenchi S. The suppressive effect of human chorionic gonadotropin and human placental lactogen on lymphocyte response to phytohaemagglutinin (PHA) in vitro I I Acta. Medica. Biol.-1978.-V.25, N3-4.-P.155-158.

208. Kase N.G., Reyniak V.J. Endocrinology of pregnancy // Mount. Sinai. J.Med.-1985.-V.52.-P. 11-34.

209. Kawate N., Okuda K. Coordinated expression of splice variants for luteinizing hormone receptor messenger RNA during the development of bovine corpora lutea //Mol.Reprod.Develop.-1998.-V.51, N2.-P.66-75.

210. Kelly L.S., Dobson E.I., Finney C.R., Hirsch J.D. Proliferation of the reticuloendothelial system in the liver // Amer.J.Physiol.- I960.- V.198.-P.1134-1138.

211. Khan-Dawood F.S., Dawood M.Y. Human ovaries contain immunoreactive oxytocin // J. Clin. Endocrinol. Metab.-1983.-V.57,N6.-P.l 129-1132.

212. Khan-Dawood F.S., Dawood M.Y. Oxytocin content of human fetal pituitary glands // Am.J. Obstet. Gynecol.-1984.-V.148,N4.-P.420-423.

213. Khanna R., Roy L., Zhu X., Schlichter L.C. K+ channels and the microglial respiratory burst //Am.J.Physiol.-2001.-V.280,N4.-P.796-806.

214. Kim S.Y., Silver M.R., De Coursey Т.Е. Ion channel in human THP-1 monocytes // J.Membr.Biol.-1996.-V.152,N2.-P.117-130.

215. Kimberly L.D., Sanborn B.M. Evidence for inhibition by protein kinase A of receptor/G alpha q/phospholipase С (PLC) coupling by a mechanism not involving PLC(32 //Endocrinology.-1998.-V.139,N5.-P.2265-2271.

216. Kimura T, Takemura M, Nomura S. et al. Expression of oxytocin receptor in human pregnant myometrium // Endocrinology.-1996.-V. 137.-P.780-785.

217. Kitazawa Т., Kajiwara Т., Kiuchi A., Hatakeyama H., Taneike T. Muscle layer- and region-dependent distributions of oxytocin receptors in the porcine myometrium // Peptides.-2001.-V.22.-P.963-974.

218. Knobloch V., Plundrova D. Fagocytoza v tehotenstvi // Cs.gynekol.-1991.-V.56.-P.473-476.

219. Kohler M., Hirschberg В., Bond C.T. et al. Small-conductance, calcium-activated potassium channels from mammalian brain // Science.-1996.-V.273.-P. 1709-1714.

220. Kondoh Y. Immunosuppressive effect of hCG and HPL in pregnancy // Acta Obstet.Gynecol.-1976.-V.23, N2.-P. 115-122.

221. Koo G.C., Blake J.T., Talento A. et al. Blockade of the voltage-gated potassium channel Kvl.3 inhibits immune responses in vivo II J.Immunol.-1997.-V.158, N 11.-P.5120-5128.

222. Korallus-Prinz K., Mann K., Moncayo R., Siddle K. HCG and the free -subunit exist in the human pituitary // Acta. Endocrinol.-1988.-V. 117, N287.-P.70-78.

223. Kruger Т.Е., Blalock J.E. Cellular requirements for thyrotropin enhancement of in vitro antibody production ГI J.Immunol.-1986.-V.137, N1.-P. 197-200.

224. Ku E.C., Wasvary J.M., Cash W.D. Diclofenac sodium. A potent inhibitor of prostaglandin synthetase //Biochem. Pharmacol.-1974.-V.23.-P.641-643.

225. Kuhn-Velten W.N., Pippirs U. Novel connections between HADPH-induced lipid peroxidation and cytochrome p450 inactivation, and antioxidant and enzyme protective properties of estradiol in gonadal membranes // Free Radic. Res.-1997.-V.26, N2.-P.125-133.

226. Kumaresan P., Kumaresan M., Hossini M., Arellano C., Vasicka A. Human ovulation and plasma oxytocin // Int. J. Gynaecol. Obstet.-1983.-V.21,N5.-P. 413-418.

227. Kume H., Mikawa K., Takagi K., Kotlikoff M.I. Role of G proteins and KCa channels in the muscarinic and beta-adrenergic regulation of airway smooth muscle // Am J Physiol.-1995.-V.268.-P.L221-L229.

228. Ladisch S., Ulsh L., Feig S.A. Influence of monovalent cation concentrations on monocyte-mediated ADCC (Antibody-Dependent Cell Cytotoxicity) // Adv Exp Med Biol.-1982.- V.146 -P.255-264.

229. Landesman R., Saxena B.B. Radioreceptor assay of human chorionic gonadotropin as an aid in miniabortion // Fertil Steril.-1974.-V.25.-P.1022-1029.

230. Larcher A, Neculcea J, Breton C. et al. Oxytocin receptor gene expression in the rat uterus during pregnancy and the estrous cycle and in response to gonadal steroid treatment // Endocrinology.-1995.-V.136.-P.5350- 5356.

231. Lauener R.P., Piani A., Sigrist C.-A., Hossle J.P. et al. MHC klasse II-molekule spielen eine zentrale Rolle in der Aktivierung von Phagozyten durch Lipopolysaccharid // Schweiz. Med. Wochenschr.-1995.-V.125, N22 (Suppl n 70).-P.7-ll.

232. Leake R.D., Fischer D.A., Ross M., Buster I.E. Oxytocin secretory response to breast stimulation in pregnant women //Am.J.Obstet.Gynecol. -1984. -V.148, N3.- P. 259-262.

233. Lederis K, Goren HJ, Hollenberg MD. Oxytocin: Clinical and laboratory studies. Ed.JA Amico, AG Robinson. Amsterdam: Esevier.-1985.-P. 284-302.

234. Lefebvre DL, Farookhi R, Giaid A, Neculcea J, Zingg HH. Uterine oxytocin gene expression. II. Induction by exogenous steroid administration // Endocrinology.-1994.-V. 134.-P.2562-2566.

235. Lei Z.M., Rao C.V., Pridham D. Novel coexpression of human chorionic gonadotropin/luteinizing hormone receptor and their ligand hCG in human fallopian tubes // J.Clin.Endocrinol.Metab.-1993.-V.132.-P.2262-2270.

236. Lester E.P., Miller J.B., Baron J.M., Yachnin S. Inhibition of human lymphocyte transformation by human alpha-faetoprotein (HAFP): studies on the mode of HAFP action and the role of HAFP polymorphism // Immunology.-1978.-V.34, N.2.-P.189-198.

237. Lewis R.S., Cahalan M.D. Potassium and calcium channels in lymphocytes // Annu.Rev. Immunol.-1995.-V.13.-P.623-653.

238. Lin J., Lojun S., Lei Z.M., Wu W.X., Peiner S.C., Rao C.V. Lymphocytes from pregnant women express human chorionic gonadotropin/luteinizing hormone receptor gene // Mol.Cell.Endocrinol.-1995.-V.l 11, N.1.-P.13-17.

239. Liotta A., Osathanondh R., Ryan K.J., Krieger D.T. Presence of corticotropin in human placenta: Demonstration of in vitro synthesis // Endocrinology.-1977.-V. 101 .-P. 1551-1064.

240. Lopina O.D. Na+,K>-ATPase: structure, mechanism, and regulation // Membr. Cell. Biol.- 2000.-V.13,N 6.-P.721-744.

241. Luster M.I., Boorman G.A., Dean J.H. The effect of adult exposure to diethylstilboestrol in the mouse: alterations in immunological functions // Reticuloendothelia.Sos.-1980.-V.28, N6.-P.561-569.

242. Lydon N.B., Young J.L., Stansfield D.A. Activation of adenylate cyclase in bovine corpus luteum membranes by human choriogonadotropin, guanine nucleotides andNaF //Biochem.J.-1981.-V.198, N3.-P.631-638.

243. Lytton J., Lin J., Di Antonio L. et al. In The Sodium Pump (Bamberg E. and Schoner W., eds), 1993, Steinkopf, Darmstadt e.a., pp.670-681.

244. Maas S, Jarry H, Teichmann A. et al. Paracrine actions of oxytocin, prostaglandin F2 alpha, and estradiol within the human corpus luteum // J. Clin. Endocrinol. Metab.-1992.-V.74.-P.306-312.

245. Maes R.F., Claverie N. The effect of preparation of human chorionic gonadotropin on lymphocytes stimulation and immune response // Immunology.-1997.-V.33,N3.-P.351-360.

246. Magness RR, Huie JM, Hoyer GL. et al. Effect of chronic ipsilateral or contralateral intrauterine infusion of prostaglandin E2 on luteal function of unilaterally ovariectomized ewes //Prostaglandins Med.-1981.-V,6.~ P.389-401.

247. Mains R.E., Eipper B.A., Ling N. Common precursor to corticotropin and endorphins // Proc.Natl.Acad.Sci USA.-1977.-V.74.-P.3014-3021.

248. Makino Т., Nakazawa K., Ishii K., Haginiwa I., Nakayama A., Iizuka R. Detection of immunoreactive human placental oxytocin and its contractile effect on the uterine muscle // Endocrinol. Jpn.-1983.-V.30,N3.-P.389-395.

249. Marrion N.V. Calcineurin regulates M channel modal gating in sympathetic neurons // Neuron.-1996.-V. 16.-P. 163-173.

250. Martens H., Kecha O., Charlet-Renard C., Defresne M.P., Geenen V. Neurohypophyseal peptides stimulate the phosphorylation of pre-T cell focal adhesion kinases // Neuroendocrinology.- 1998.-V.67.-P.282-289.

251. Martinoli C., Zocchi E., Querzola F. Effetto del progesterone sulla produzione di specie reattive dell'ossigeno (H202) da parte di monociti umani in vitro II Therapeutika.-1985.-V.2, N5.-P.277-299.

252. Maruo Т., Cohen H., Segal S.J., Koide S.S. Production of choriogonadotropin-like factor by microorganisms II Proc. Natl. Acad. Sci. US A.-1979.-V. 76, N12.-P. 6222-6626.

253. Masaaki A. The effect of monocyte on cytotoxic response in pregnant women // Nagoya Med.J.-1988.-V.-32.-P.229-241.

254. Mason NR, Marsh JM, Savard K. An action of gonadotropin in vitro 11 J.Biol. Chem.-1962.-V.237.-P. 1801-1806.

255. Matsubara H., Ikuta R., Ozaki Y., Suzuki Y., Sato Т., Suzumori K. Gonadotropins and cytokines affect luteal function through control of apoptosis in human luteinized granulosa cells // J. Clin. Endocrinol. Metab.-2000.-V. 85, N4.-P. 1620-1626.

256. Matthiesen L., Berg G., Ernerudh J., Hakansson L. Lymphocyte subsets and mitogen stimulation of blood lymphocytes in normal pregnancy // Am. J. Reprod.Immunol.-1995.-V. 3 5P. 70-79.

257. Mayerhofer A, Sterznik K, Link H, Wiemann M, Gratzl M. Effect of oxytocin on free intracellular Ca2+ levels and progesterone release by human granulosa-lutein cells // J.Clin.Endocrinol. Metab.-1993.-V.77:5.-P.1209-1214.

258. McArdle C.A., Kohl C., Rieger K., Groner I., Wehrenberg U. Effects of gonadotropins, insulin and insulin-like growth factor 1 on ovarian oxytocin and progesterone production // Mol. Cell. Endocrinol.-1991.- V.78, N3.- P.211-220.

259. McCabe R.D., Bakarich M.A., Srivastava K., Young D.B. Potassium inhibits free radical formation // Hypertension .-1994.-V. 24, N1 .-P.77-82.

260. McCann F.V., Keller T.M., Guyre P.M. Ion channels in human macrophages compared with the U-937 cell line // J.Membr.Biol.-1987.-V.96, N 1 .-P.57-64.

261. Mcintosh N., Rodeck C.H., Heath R. Plasma amino acids of the mid-trimester human fetus // Biol.Neonate.-1984.-V.45,N5 .-P.218-224.

262. McKinney L.C., Gallin E.K. G-protein activators induce a potassium conductance in murine macrophages. // J.Membr.Biol.-1992.-V.130, N 3.-P.265-276.

263. McKinnon D. Isolation of a cDNA clone coding for a putative second K+ channel indicates the existence of a gene family // J.Biol.Chem.-1989.-V.264.-P.8230-8236.

264. Mcllroy P.J. Effect of cation on binding of human choriogonadortopin // Biochem. Cell.Biol.-1988.-V.66, N 12.-P.1258-1264.

265. Mells M.G., Troffa C., Manunta P. et al. Effect of menstrual cycle hormones on cation transport in the red-cell membrane // Boll Soc Ital Biol Sper.-1990.-V.66.-P.679-684.

266. Midgley A.R.Jr., Jaffe R.B. Regulation of human gonadortopins: VI. Correlation of serum concentrations of follicle-stimulating and luteinizing hormones during the menstrual cycle // J.Clin.Endocrinol Metab.-1968.-V.28.-P.1699-1709.

267. Midgley A.R.J., Pierce G.B. Immunohistochemical localization of human chorionic gonadotropin // J.Exp .Med.-1962.-V.115.-P.289-294.

268. Miggiano V.C., Meo Т., Nabhol N. et al. Ontogeny of cellular immunocompetence in early human fetus probed with current and novel in vitro test//Immun. Obstet. Gyneaecol., Amsterdam.- 1974. -P.157-160.

269. Miller E.D., Ozimek G., Milner R.J., Bloom F.E. Regulation of neuronal oxytocin mRNA by ovarian steroids in the mature and developing hypothalamus // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1989.-V.86.-P.2468-2472.

270. Minakuchi R., Wacholtz M.C., Davis L.S., Lipsky P.E. Delineation of the mechanism of inhibition of human T cell activation by PGE2 // J.Immunol.-1990.-V.145.-P.2616-2620.

271. Mitchell B.F., Wong S. Metabolism of oxytocin in human decidua, chorion, and placenta // J. Clin. Endocrinol. Metab.-1995.-V.80.-P.2729-2733.

272. Mitchel M.D. The regulation of decidual prostaglandin biosynthesis by growth factors, phorbol esters, and calcium // Biol. Reprod.-1991.-V.44.-P.871-874.

273. Miyagi M.,Morishita M., Iwamoto Y. Effect of sex hormones on production of prostaglandin E2 by human peripheral monocytes // J.Peridontol.-1993.-v.64,Nll.-P. 1075-1078.

274. Mobasheri A, Avila J, Cozar-Castellano I. et al. Na+/K+-ATPase isozyme diversity; comparative biochemistry and physiological implications of novel functional interactions // Biosci. Rep. -2000.-V.20, N 2.-P.51-91.

275. Monaghan J.C., Flemming C.L., Stokes G.S. Effects of 17 alpha-ethinyl oestradiol in vitro on erythrocyte cation transport in men and women // Clin Exp Hypertens A.-1991.-V.13.-P.53-63.

276. Moore J.J., Dubyak G.R., Moore R.M., Vander Kooy D. Oxytocin activates the inositol-phospholipid-protein kinase С system and stimulates prostaglandin production in human amnion cells // Endocrinology.-1988.-V.123.-P.1771-1777.

277. Mora J., Gascon N., Tabernero J.M., Rodriguez-Espinosa J., Gonzalez-Sastre F. Different hCG assays to measure ectopic hCG secretion in bladder carcinoma patients // Br.J.Cancer.-1996.-V.74,N7.-P.1081-1084.

278. Morrison J.J., Ashford M.L., Khan R.N., Smith S.K. The effects of potassium channel openers on isolated pregnant human myometrium before and after the onset of labor: potential for tocolysis // Am. J. Obstet. Gynecol.-1993.-V.169.-P. 1277-1285.

279. Morse J.H. The effect of human chorionic gonadotropin and placental lactogen on lymphocyte transformation in vitro // Scand.J.Immunol.- 1976.-V.5, N6-7.-P.779-787.

280. Morse J.H., Stearns G., Arden J. et al. The effect of crude and purified human gonadotropin on in vitro stimulated human lymphocyte cultures // Cell. Imminol.-1976.-V.25, N2.-P. 178-188.

281. Motta A.B., Franchi A.M., gimeno A.L., Gimeno M.A. Influence of oxytocin on the synthesis of prostaglandins by uterus from rats in different stages of the estrous cycle // Prostaglandins Leucot. Essent. Fatty Acids.-1994.-V.51,N2.-P. 133-139.

282. Moyle W.R., Myers R.V., Wang Y.H., Han Y., Lin W., Gelley G.L., Ehrich P.H., Rao S.N.V., Bernard M.P. Functional homodimeric glicoprotein hormones: implication for hormone action and evolution // Chemistry and Biology.-1998.-V.5, N5.-P.241 -251.

283. Mujais S.K., Nora N.A., Chen Y. Regulation of renal Na+/K+-pump: role of progesterone // J.Am.Soc.Nephrol.-1993.-V.3, N 8.-P.1488-1495.

284. Nagy P., Panyi G., Jenei A., Bene L., Gaspar R.Jr., Matky J., Damjanovich S. Ion-channel activities regulate transmembrane signalling in thymocyte apoptosis and T-cell activation // Immunol.Lett.-1995.-V.44,N2-3.-P.91-95.

285. Nakazawa K., Makino Т., Nagai Т., Suzuki H., Iizuka R. Immunoreactive oxytocin in human placental tissue // Endocrinol. Exp.-1984.-V.18,Nl.-P.35-41.

286. Namba Т., Ishii T.M., Ikeda M. et al. Inhibition of the human intermediate conductance Ca2+-activated K+channel, hIKl, by volatile anesthetics // Eur.J.Pharm.-2000.-Y.395, N 2.-P.95-101.

287. Nathan C.F., Arrick B.A., Murray H.W. Macrophage oxygen-dependent antimicrobial activity. IV. Role of endogenous scavengers of oxygen intermediates // J.Exp.Med.-1980.-V.153.-P.766-771.

288. Nathan C.F., Murray H.W., Cohn Z.A. The macrophage as an effector cell // New Engl. J. Med.-1980.-V.303.-P.622-634.

289. Nelson D.J., Jow В., Jow F. Whole-cell currents in macrophages I. Human monocyte-derived macrophages // J.Membr.Biol.-1990.-V. 117.-P.29-44.

290. Nelson D.J., Jow В., Jow F. Lipopolysaccharide induction of outward potassium current expression in human monocyte-derived macrophages: lack of correlation with secretion //.J.Membr.Biol.-1992.-V.125,N 3.-P.207-218.

291. Nelson D.J. Jow В., Popovich K.J. Whole-cell currents in macrophages II. Alveolar macrophages // J.Membr.Biol.-1990.-V. 117.-P.45-55.

292. Nelson J.H.J., Hall J.E. Manuel-Limson G. et al. Effect of pregnancy on the thymolymphatic system. I. Changes in the intact rat after exogenous hCG, estrogen and progesterone administration // J.Obstet.Gynecol.-1967.-V.98.-P.895-899.

293. Nichols C.G., Lopatin A.N. Inward rectifier potassium channels // Annu.Rev.Physiol.-l 997.-V.59.-P. 171-191.

294. Nilsson N., Carlsten H. Estrogen induces suppression of natural killer cell cytotoxicity and augmentation of polyclonal В cell activation // Cell. Immunol.-1994.-V.158, N1.-P.131-139.

295. Nishizuka Y. The molecular heterogeneity of protein kinase С and its implication for cellular regulation // Nature.-1988.-V.334.-P.661-665.

296. Nobel C.S.I., Aronson J.K., van den Dobbelsteen D.J., Slater A.F.G. Inhibition of Na+/K+-ATPase may by one mechanism contributing to potassium efflux and cell shrinkage in CD95-induced apoptosis // Apoptosis.-2000.-V.5,N 2. -P.153-163.

297. Northentt R.C., Albert A. Folliculostimulating activity of human chorionic gonadotropin further evidence of nonidentifity with follicule stimulating hormone //J.Clin. Endocrinol.Metab.-l 970.-V.31.-P.91-95.

298. O'Connor C.M., Gaffney K., Keane G., Southley A., Byrne N., Mahoney S., Fitzerald M. Alpha 1-proteinase inhibitor, elastase activity and lung disease severity in cystis fibrosis // Am.Rev.Resp.Dis. 1993.-V.148.-P.1665-1670.

299. Odell W.D. Humoral manifestations of cancer // Textbook of endocrinology. Philadelphia.-1981 .-P. 1228-1241.

300. Odell W.D., Griffin J. Pulsative secretion of human chorionic gonadotropin in normal adults // N.Engl.J.Med. -1987.-V.317, N27.-P.1688-1697.

301. Odell W.D., Griffin J. Pulsatile secretion of chorionic gonadotropin during the normal menstrual cycle // J. Clin. Endocrinol. Metab.-1989.-V.69,N 3.-P. 528-532.

302. Ogawa S., Kitsunai Y., Takahashi S., Fukuchi S., Hata K., Saito M. Studies on oxytocin secretion during pregnancy, labor and post-delivery in the human // Nippon .Naibunpi .Gakkai. Zasshi .-1978.-V.54,N11.-P.1229-1237.

303. Ohama K., Kajii T. Mixed cultures of fetal and adult lymphocytes // Amer.J.Obstet.Gynecol.-1974.-V.119.-P.552-556.

304. Okamura K., Kuramoto M., Hamacaki V., Suzuki M. The effect of various hormones on the humoral immune response of murine lymphocytes in vitro // Tohoku.J.Exp.Med.-1978.-V. 126, N3.-P.235-238.

305. Oleson D.R., DeFelice L.J., Quinn M.F., Donahoe R.M. Cyclic adenosine 3',5'-monophosphate increases the open probability of potassium channels in activated human T-cells // J. Immunol.- 1996.-V.157,N3.-P. 1080-1086.

306. Oral E., Seli E., Bahtiyar M.O., Jones E.E., Arici A. Growth-regulated alpha-expression in human preovulatory follicles and ovarian cells // Am. J. Reprod. Immunol. -1997.-V.38, N1 .-P. 19-25.

307. Ostrowski N.L., Young W.S., Lolait S.J. Estrogen increases renal oxytocin receptor gene expression // Endocrinology.-1995.-V. 136.-P. 1801 -1804.

308. Pabon J.E., Bird J.S., Li X., Lei Z.M.,Sanfilippo J.S., Yussman M.A., Rao C.V. Human skin contains luteinizing hormone/chorionic gonadotropin receptors // J. Clin. Endocrinol. Metab.-1996.-V.81.-P. 2738-2741.

309. Pabon J.E., Li X., Lei Z.M., Sanfilippo J.S., Yussman M.A., Rao C.V. Novel presence of luteinizing hormone/chorionic gonadotropin receptors in human adrenal gland // J.Clin.Endocrinol.Metab.-1996.-V.81.-P. 2397-2400.

310. Pahapill P.A., Schlihter L.C Modulation of potassium channels in intact human T-lymphocytes //J. Physiol. (Lond.).-1992.-V.445.-P.407-430.

311. Pajot-Augy E., Couture L., Bozon V., Remy J.J., Bianche G. High level expression of recombinant porcine LH receptor in baculovirus-infected insect cells or caterpillars //Mol.Cell.Endocrinol.-l995.-V.14.-P.51-66.

312. Paulmichl M., Nasmith P., Hellmiss R., Reed K. et al. Cloning and expression of a rat cardiac delayed rectifier potassium channel // Proc.Natl.Acad.Sci.USA.-1991.-V.88.-P.7892-7895.

313. Pedersen C.A., Prange A.J. Evidence that central oxytocin plays a role in the activation of maternal behaviour. Perinatal development: A psychologycal perspective. N.Y.: Acad.press.-1987.P.299-320.

314. Pepper F.J. The effect of age, pregnancy and lactation on the thymus gland and lymph nodes of the mouse // J.Endocrinol.-1961.-V.22.-P.335-348.

315. Peralta E.G. Dual modulation of a potassium channel by the ml muscarinic and beta-2-adrenergic receptors // Life Sci.-1995.-V.56,N11-12.-P.957-964.

316. Pernitcheva-Rostaing E., Foutagne J., Adolbne M. Effect of chorionic gonadotropin an phagocytic activity and proliferative capacity of the rat peripheral macrophages in culture // Acta. Endocrinol.-1979.-V.92,Nl.-P.187-192.

317. Persellin R.H., Rhodes J. Inhibition of human monocyte FC-receptor and HLA-DR-antigen expression by pregnancy alpha -2 glycoprotein // Clin. Exp. Immunol.- 1981 .-V/46,N2.-P.350-354.

318. Pertof H., Johnsson A., Warmegard B. and Seljelid R. Separation of human monocytes on density gradients of percoll // Journal of immunological methods. -1980.-V.33.-P.221-229.

319. Pitzel L., Jarry H., Wuttke W. Demonstration of oxytocin receptors in porcine corpora lutea: effects of the cycle stage and the distribution on small and large luteal cells // Biol. Reprod.-1993.-V.48,N3.-P.640-646.

320. Pitzel L., Jarry H., Wuttke W. Effects and interactions of prostaglandin F2 alpha, oxytocin, and cytokines on steroidogenesis of porcine luteal cells // Endocrinology.-1993a.-V.132.-P. 751-756.

321. Plam J., Heyner S., Brinster R.L. Different immunofluorescence of fertilized mouse eggs with H-2 and поп H-2 antibody // J. Exp. Med.-1971.-V.133,-P. 1282-1293.

322. Pol'shin V.V., Shelegiia G.Sh., Mkhitarov V.A. Effect of folliculin and estradiol-dipropionat on the phagocytic properties of the blood neutrophils of the female white rat // Fiziol.Zh.SSSR.-1986.-V.72, N2.-P.221-223.

323. Poulain D., Jard S. Peptides neurohypophysaires: Vasopressine et ocytocine. Neuropeptides et neuromediateurs. Ed. J.Epelbaum. Rueil- Malmaison: Laboratories Sandoz.-1992.-P. 185-195.

324. Pratt B.B., Butcher R.L., Inskeep E.K. Antiluteolytic effect of the conceptus and ofPGE2 in ewes // J. Animal. Sci.-1977.-V.45.-P.784-791.

325. Quattrocchi G., Armelini G. Influenza della gonadotropina chorionica su alcuni indici immunitari // Arch. Sci med.-1963.-V.l 15, N3.-P.183-191.

326. Rader R.K., Kahn L.E., Anderson G.D. et al. T-cell activation is regulated by voltage-dependent and calcium-activated potassium channels.// J.Immunol.-1996.-V. 156, N 4.-P. 1425-1430.

327. Randriamampita C., Trautmann A. Ionic channels in murine macrophages // J.Cell.Biol.-1987.-V.105,N2.-P.761 -769.

328. Rauk P.N., Chiao J-P. Oxytocin signaling in human myometrium is impaired by prolonged exposure to interleukin-1 //Biol. Reprod.-2000.-V.63.-P.846-850.

329. Redondo J.M., Lypez-Rivas A., Fresno M. Activation of the Na+/K+-ATPase by interleukin-2 // FEBS Lett.-1986.-V.206, N.2.-P. 199-202.

330. Reimann F., Ashcroft F.M. Inwardly rectifying potassium channels // Curr.Opin.Cell.Biol.-1999.-V.l 1 .-P.503-508.

331. Reiter E., McNamara M., Closset J., Hennen G. Expression and functionality of luteinizing hormone/ chorionic gonadotropin receptor in the rat prostate // Endocrinology.-1995 .-V. 13 6.-P.917-923.

332. Reshef E., Lei Z.M., Rao C.V., Pridham D.D., Chegini N., Luborsky J.L. The presence of gonadotropin receptor in non-pregnant uterus, human placenta, fetal membranes and decidua // J.Clin.Endocrinol.Metab.-1990.-V.70.-P.421-430.

333. Revelli A., Massobrio M., Tesarik J. Nongenomic action of steroid hormones in reproductive tissues //Endocrine Reviews.-2000.-V.19,Nl.-P.3-17.

334. Ricketts R.M., Jones D.E. Differential effect of human chorionic gonadotropin on lymphocyte proliferation induced by mitogen // J.Reprod.Immunol.-1985 .-V.7, N3.-P.225-232.

335. Robert F.R., Martens H., Cormann N., Benhida A., Schoenen J., Geenen V. The recognition of hypothalamo-neurohypophyseal functions by developing T cells // Dev. Immunol.-1992.-V.2.-P, 131 -140.

336. Rola-Pleszczynski M., W.Hallowell Churchill. Purification of human monocytes by continuous gradient sedimentation in ficoll // Journal of immunological methods. -1978.-V.20.-P.255-262.

337. Rosen S.W., Weintraub B.D., Vaitukaitis J.L., Sussman H.H., Hershmann J.M., Muggia F.M. Placental proteins and their subunits as tumor markers // Am.Intern.Med.-1975.-V.82.-P.71-76.

338. Ross E.M., Gilman A.C. Biochemical properties of hormone-sensitive adenylate cyclase // Annu. Rev. Biochem.-1980.-V.49.-P.533-564.

339. Rossel T.G., Davis D.P., Chai Y., Segaloff D.L. Association of gonadotropin receptor precursors with the protein folding chaperone calnexin // Endocrinology.-1998.-V. 139, N4.-P. 1588-1593.

340. Roth A., Kaufman M.-T., Craehannd A., Dayer J.M. Human lymphocytes induce a differential release of prostaglandin E2 and interleukin 1-like mononuclear cell factor from normal blood monocytes // Europ. J. Immunol.-1985.-V.15.-P.960-968.

341. Runnenbaum В., Runnenbaum H., Stober I., Zander J. Progesterone 20 alpha-dihydroprogesterone and 20 beta-dihydroprogesterone levels in different compartments from the human foeto-placental unit //Acta Endocrinol.-1975.-V.80.-P.558-568.

342. Rzucidlo S.J., Weigl R.M., Tilton J.E. Myometrial LH/ hCG receptors during the estrous cycle and pregnancy in pigs // Anim.Reprod.Sci.-1998.-V.51, N3.-P.249-257.

343. Saad A.H., Koo S.S., Koong A.C., Hahn G.M., Giaccia A.J. Modulation of potasssium channels be protein kinase inhibitors // J.Cell.Physiol.-1994.-V.161, N 1.-P.142-148.

344. Sachida Т., Jonson D.C. The response of the immature rat ovary to gonadotropins: acute change in cyclic AMP, progesterone, testosterone, androstendione and oestradiol after treatment with PMS or FSH, LH // Acta. Endocrinol.- 1976.-V.82, N2.-P.413-422.

345. Saint D.A., Thomas Т., Gage P.W. GABAB agonists modulate a transient potassium current in cultured mammalian hippocampal neurons // Neurosci Lett.-1990.- V.l 18.-P.9-13.

346. Sairem M.R. Complete dissociation of gonadotropin receptor binding and signal transduction in mouse Ley dig tumor cell. Obligatory role of glycosylation in hormone action // Biochem. J.-1990.-V.265, N3.-P.667-674.

347. Sakurabayashi I., Shimanuki K., Shinpo A., Ishii S. Inflammatory reaction and laboratory tests: granulocyte elastase. // Rinsho. Byori. -1990.- V.38.- P. 267-271

348. Sanborn B.M.,Dodge K., Monga M., Qian A., Wang W., Yue C. Molecular mechanisms regulating the effects of oxytocin on myometrial intracellular calcium // Adv. Exp. Med. Biol. -1998.- V.449.- P.277-286.

349. Sanborn B.M., Qian A., Ku C.Y. et al. Mechanisms regulating oxytocin receptor coupling to phospholipase С in rat and human myometrium // Adv. Exp. Med. Biol.-1995.-V.395.-P. 469-.479.

350. Sapino A., Macri L., Tonda L., Bussolati G. Oxytocin enhances myoepithelial cell differentiation and proliferation in the mouse mammary gland // Endocrinology .-1993.-V.133.-P.838-842.

351. Schmid В., Wong S., Mitchell B.F. Transcriptional regulation of oxytocin receptor by interleukin-lbeta and interleukin-6 // Endocrinology.-2001.-V.142,N.4.-1380-1385.

352. Schmidt A., Jard S., Dreifuss J.J., Tribollet E. Oxytocin receptors in rat kidney during development//Am. J. Physiol.- 1990.-V. 259.-P. 872-881.

353. Segaloff D.L., Sprengel R., Nikolics K., Asconli M. Structure of the lutropin/choriogonadotropin receptor // Recent.Prog.Horm.Res.-1990.-V.46,-P.261-303.

354. Seino S., Inagaki N., Namba N., Gonoi T. Molecular biology of the beta-cell ATP-sensitive K+ channel // Diabetes Rv.-1997.

355. Sellers S.M, Mitchell M.D., Bibby J.G., Anderson A.B., Turnbull A.C. A comparison of plasma prostaglandin levels in term and preterm labour.// Br. J. Obstet.Gynaecol.-1981 .-V.88,N4.-P.362-326.

356. Selveraj R.J., Sbarra A.J., Thomas G.B. A microtechnique for studying chemiluminescence response of phagocytes using whole blood and its application to evaluation of phagocytes in pregnancy // Reticuloendothel.Sos.-1982.-V.31, Nl.P.3-16.

357. Selyanko A.A., Brown D.A. Intracellular calcium directly inhibits potassium M channels in excised membrane patches from rat sympathetic neurons // Neuron.-1996.-V. 16.-P. 151 -162.

358. Sernia C., Gemmell R.T., Thomas W.G. Oxytocin receptors in the ovine corpus luteum // J. Endocrinol.-1989.-V.121,N1.-P. 117-123.

359. Seron-Ferre M.C., Lawrence С.С., Jaffe R.B. Role of HCG in the regulation of the fetal zone of the human fetal adrenal gland // J.Clin. Endocrinol.Metab.-1978.-V.46.-P.834-837.

360. Shao K., Purohit S., Bahl O.P. Effect of modification of all loop regions in the alpha- and beta-subunits of human choriogonadotropin on its signal transduction activity // Mol. Cell. Endocrinol.- 1996,- V.-122, N2.-P.173-182.

361. Sharon P.M.C., Crocer I.P., Fletcher J. The effect of pregnancy on polymorphonuclear leukocyte function // J.Immunol.-1995.-V.155.-P.5436-5443.

362. Shemed M., Dombrovski L., Gurevich M., Shore L.S., Fuchs A.R., Fields M.J. Regulation of bovine cervical secretion of PGs and synthesis of cyclooxygenase by oxytocin//Reprod. Fertil. Dev.-1997.-V.9,N5.-P. 525-530.

363. Shimamoto Т., Yamoto M., Nakano R. The role of tyrosine kinase in gonadotropin-induced ovulation in the rat ovary // Eur. J. Endocrinol.-1998.-V. 138, N5.-P.594-600.

364. Shirihai O., Attali В., Dagan D., Merchav S. Expression of two inward rectifier potassium channels is essential for differentiation of primitive human hematopoietic progenitor cells // J.Cell Physiol.-1998.-V.177.-P. 197-205.

365. Shlichter L., Sidell N., Hagiwara S. Potassium channels are expressed early in human T-cell development // Proc.Natl.Acad.Sci.USA.-1986.-V.83, N 15.-P.5625-5629.

366. Shlichter L.C., Pahapill P.A., Schumcher P.A. Reciprocal regulation of a K+channels by Ca2+ in intact human T-lymphocytes //Receptor Channels.-1993.-V.1, N 3.-P.201-215.

367. Sikdar S.K., Mcintosh R.P., Mason W.T. Differential modulation of Ca2+-activated K+ channels in ovine pituitary gonadotrophs by GnRH, Ca2+ and cAMP// Brain Res.-1989.-V.496, N1-2.-P. 113-123.

368. Sirotkin AV, Nitray J. Effects of prolactin on estrogen, cAMP and oxytocin secretion by porcine granulosa cells in vitro II Reprod. Nutr. Dev.- 1994.-V34,N2.-P. 141-148.

369. Sirotkin AV, Schaeffer HJ, Mlyncek M, Missik J, Bulla J. Oxytocin affects the release of sterioids, insulin-like growth factor-1, prostaglandin F2 alpha and cyclic nucleotides by human granulosa cells in vitro II Hum. Reprod.-1996.-V.11,Nl.-P.152-155.

370. Sljivic V.S., Clark D.W., Warr G.W. Effect of oestrogens and pregnancy on the distribution of sheep erythrocytes and antibody response in mice // Clin.Exp.Immun.-1975 .-V.20, N1 .-P. 179-186.

371. Smarason A.K., Gunnarsson A., Alfredsson J.H., Valdimarsson H. Monocytosis and monocytic infiltration of deciduas in early pregnancy // J.Clin.Lab.Immunol.-1986.-V.21.-P.l-7.

372. Sofroniew M.V. Vasopressin and oxytocin in the mammalian brain and spinal cord // Trends. Neurosci.-1983.-V.6.-P. 467-472.

373. Spangelo B.L., de Holl P.D., Kalabay L., Bond B.R., Arnaud P. Neurointermediate pituitary lobe cells synthesize and release interleukin-6 in vitro\ effects of lipopolysaccharide and interleukin-1 beta // Endocrinology.-1994.-V. 135,N2.-P.556-563.

374. Stein S.H., Phipps R.P. Antigen-specific IgG2A production in response to prostaglandin E2, immune complexes, and IFN-gamma // J.Immunol.-1991.-V.147.-P.2500-2505.

375. Stern J.E., Armstrong W.E. Sustained outward rectification of oxytocinergic neurones in the rat supraoptic nucleus: ionic dependence and pharmacology // J. Physiol.-1997.-V.500, ( Pt 2).-P.497-508.

376. Stock S., Fastbom J., Bjorkstrand E. Effects of oxytocin on to release of insulin and glucagon studied by microanalysis in the rat pancreas // Regul.Peptides.-1990.-V.30.-P.l-13.

377. Szekeres J., Csrenus V., Pejtsik S. Progesterone as an immunological blocking in the human pregnancy serum // J.Reprod. Immunol.-1981.-V.3.-P.333-339.

378. Szereday K., Yarga P., Szekeres-Bartho J. Cytokine production by lymphocytes in pregnancy // AJRI: Amer.J.Reprod.Immunol.-1997.-V.38, N6.-P.418-422.

379. Takemura M., Nomura S., Kimura T. Expression and localization of oxytocin receptor gene in human uterine endometrium in relation to the menstrual cycle //Endocrinology.- 1993.-V.132.-P.1830-1835.

380. Tejada F., Cremades A., Alives M., Castells M.T., Penafiel R. Hypokalemia alters sex hormone and gonadotropin levels: evidence that FSH may be required for luteinization // Am.J.Physiol.-1998.-V.275, N6.-P.1037-1045.

381. Teodorezyk I. J. A., Kellen J. A. Chorionic gonadotropin-induced cell proliferation and polyclonal immunoglobulin synthesis in human mononuclear cells // Biomed. Pharmacother.- 1988.-V.42, N1.-P.49-54.

382. Thibonnier M., Conarty D.M., Preston J.A. Human vascular endothelial cells express oxytocin receptors //Endocrinology.-1999.-V.l40,N3.-P. 1301-1309.

383. Toder V., Blank ML, Nebel L. Immunosuppressive effect of alpha-fetoprotein at different stages of pregnancy in mice // Develop. And Сотр. Immunol.-1979.-V.3, N3.-P.537-542.

384. Tuffrey M., Bishan N.P., Barnes R.D. Porosity of the placenta to the maternal cells in normally derived mice II Nature.-1969 .-V.224.-P.701-704.

385. Ulevitch R.J. Endotoxin opens the Tollgates to innate immunity // Nat.Med.-1999.-V.5.-P.144-145.

386. Vaanen J.E., Lee S., Vaanen C.C.M., Yen B.H., Leung P.C.K. Stepwise activation of the gonadotropic signal pathway, and the ability of prostaglandin F2-alpha to inhibit this activated pathway // Endocrinology.-1998.-V.8, N3.-P.301-307.

387. Van Damme M.P., Robertson D.M., Diczfalusy E. An improved in vitro bioassy method for measuring luteinizing hormone (LH) activity using mouse Leydig cell preparation // Acta. Endocrinol. (Kbh).-1974.-V.77.-P.656-671.

388. Vande Wiele, Bogumil R.J., Dyrenfurth I., Ferin R. et al. Mechanisms regulating the menstrual cycle in women //Recent. Prog. Horm. Res.-1970.-N26 P.63-67.

389. Vasicka A., Kumaresan P., Han G.S., Kumaresan M. Plasma oxytocin in initiation of labor // Am. J. Obstet. Gynecol.-1978.-V.130,N3.-P.263-273.

390. Verbalis J.G., Mangione M.P., Stricher E.M. Oxytocin produces natriuresis in rats at physiological plasma concentrations // Endocrinology.-1991.-V. 128.-P.1317-1322 .

391. Vergnese M.W., McConnel R.T., Lenhard J.M., Hamacher L., Jin C. S.-L. Regulation of distinct cyclic AMP-specific phosphodiesterase (phosphodiesterase type 4) isozyme in human monocytic cells // Mol.Pharmacol.-1995.-V.47, N6.-P. 1164-1171.

392. Verheugen J.A., van Kleef R.G., Oortgiesen M., Vijverberg H.P. Characterization of calcium-activated potassium channels in excised patches of human T-lymphocytes // Pflugers Arch.-1994.-V.426, N 6.-P.465-471.

393. Vernon-Roberts B. The effects of steroid hormones on macrophage activity // Int. Rev.Cytol.-1969.- V.25.-P.131-159.

394. Villee C.A. Placenta and fetal tissues: a biphasic system for the synthesis of steroids // Am. J. Obstet. Gynecol.- 1969.-V.104.-P.406-415.

395. Voisin G.A. Role of antibody classes in regulatory facilitation reaction // Immunil. Rev.-1980.-V.49.-P.3-59.

396. Waldegger S., Beisse F., Apfel H. et al. Electrophysiological effects of progesterone on hepatocytes // Biochim.Biophys.Acta.-1995.-V. 1266.-P. 186190.

397. Walev I., Klein J., Husmann M., Valeva A. et al. Potassium regulates IL-1 beta processing via calcium-independent phospholipase A2 // J.Immunol.-2000.-V.164.-P.5120-5124.

398. Wang Y., Askari A., Huang W-Y. In The Sodium Pump (Bamberg E. and Schoner W., eds), 1994, Steinkopf, Darmstadt e.a., pp.880-883.

399. Ware C.C., Nicol T. Duration of stimulation of phagocytic activity of the reticuloendothelial system after cessation of treatment with diethylstilbestrol // Nature.-1960.-V. 186,N.4729.-P.974-975.

400. Watanabe M., Iwatani Y., Keneda T. Changes in T, В and NK lymphocytes subsets during and after normal pregnancy // Am.J.Reprod.Immunol.-1997.-V.37.-P.368-377.

401. Watches D.C., Borwick S.C., Timmons P.M., Leung S.T., Thornton S. Oxytocin receptor expression in human term and preterm gestational tissues prior to and following the onset of labor // Endocrinology.- 1999.-V.161,N1.-P. 143-151.

402. Watches D.C., Kendall P.A., Perks C., Brown D. Effects of stage of the cycle and estradiol-17 beta on oxytocin synthesis by ovine granulosa and luteal cells // Endocrinology.-1992.-V. 130.-P. 1009-1016.

403. Watson E.D., Sertich P.L., Zanocosky H.G. Detection of chemotactic factor in preovulatory follicular fluid from mares // Am.J.Vet.Res.-1991.-V.52, N9.-P.1412-1415.

404. Watson E.D., Stokes C.R., Bourne F.J. Influence of administration of ovarian steroids on the function of neutrophils isolated from the blood and uterus of ovariectomized mares // J.Endocrinol.-1987.-V.112, N3.-P.443-448.

405. White R.E., Lee A.B., Shcherbatko A.D. et al. Potassium channel stimulation by natriuretic peptides through cGMP-dependent dephosphorylation //Nature.-1993.-V.361.-P.263-266.

406. Wilson Т., Ganendren R. Serum concentrations of secretory IgA in pregnancies at term or preterm // Prostaglandins.-1992.-V.44.-P.373-379.

407. Wright P.A. 3-keto 4-steroid: requirement for ovulation in Rana pipiens // Gen. Compar. Endocrinol.-1971.-V.16.-P.511-515.

408. Wu W.X., Verbalis J.G., Hoffman G.E. Characterization of oxytocin receptor expression and distribution in the pregnant sheep uterus // Endocrinology.-1996.-V.137.-P. 722-728.

409. Wuttke W., Jarry H., Pitzel L., Knoke I., Spiess S. Luteotrophic and luteolytic actions of ovarian peptides // Hum. Reprod.-1993.-V.8 (Suppl.2).-P.141-146.

410. Xie Z., Kometiani P., Liu J., Haas M., Tian J. In Na/K-ATPase and related ATPases (Taniguchi K. and Kaya S., eds), 2000, pp. 617-624.

411. Yachnin S., Soltani K., Lester E.P. Further studies of the mechanism of suppression of human lymphocyte transformation by human alpha-fetoprotein // J.Allergy Clin. Immunol.-1980.-V.65, N2.-P.127-135.

412. Yagel S., Parhar R.S., Lala P.K. Trophic effect of first-trimester human trophoblast and human chorionic gonadotropin on lymphocyte proliferation // Am. J. Obstet.Gynecol.-1989.-V. 160, N4.-P.946-953.

413. Yamada M., Ianobe A., Kurachi Y. G protein regulation of potassium channels // Pharmacol. Reviews.-1998.-V.50.-P. 723-757.

414. Yamaguchi K., Akaishi Т., Negoro H. Effect estrogen treatment on plasma oxytocin and vasopressin in ovariectomized rats //.Endocrinology.-1979.-V. 526.-P. 197-205.

415. Yamamoto Т., Bkaily G., Belisle S. Inwardly rectifying currents in human term placental cells // Pflugers Arch.-1991.-V.419, N3-4.-P.421-423.165

416. Yoshimoto Y., Wolfsen A.R., Odell W.D. Glycosylation variable in the production ofhCG by cancers //Amer.J.Med.-1979.-V.67.-P.414.-420.

417. Ypey D.L., Clapham D.E. Development of a delayed outward-rectifying K+ conductance in cultured mouse peritoneal macrophages // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A.-1984.-V.81 ,N10.-P.3083-3087.

418. Zakar Т., Olsen D.M. Stimulation of human amnion prostaglandin E2 production by activators of protein kinase С // J. Clin. Endocrinol. Metab.-1988.-V.67.-P.915-923.

419. Zingg H.H. Vasopressin and oxytocin receptors // Baillieres. Clin. Endocrinol. Metab.-1996.- V.10, N1.-P.75-96.

420. Zlatnik M.G., Copland J.A., Ives K., Soloff M.S. Functional oxytocin receptors in a human endometrial cell line // Am. J. Obstet. Gynecol.-2000.-V. 182,N4.-P. 850-855.

421. Zuo J., Lei Z.M., Rao C.V. Human myometrial chorionic gonadotropin/ luteinizing hormone receptors in preterm and term deliveries // J.Clin. Endocrinol. Metab.-1994.-V.79.-P.907-911.

Оглавление диссертации Лялина, Ольга Григорьевна :: 2002 :: Пермь

Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Лялина, Ольга Григорьевна, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2002 года, Лялина, Ольга Григорьевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций