Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Регуляция устойчивости организма к геморрагической гипотензии производными 2,7-нафтиридина. Роль гипофиз-надпочечниковой системы

ЕРЕВАНСКИЙ ОРДЕНА' ТРУДОВОГО- КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ им.М.ГЕРАВД

На правах рукописи. Для служебного пользования ЭКЗ. №.

АТАЯН ТАМлРА КАРАПЕТОВНА

РЕГУЛЯЦИЯ УСТОЙЧИВОСТИ ОРГАНИЗМА К ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ГИПОТЕНЗШ ПРОИЗВОДНЫМИ. 2,7-НАФТИРИДИНА . РОЛЬ ГШОФИа-НАДПОЧЕЧНИКОВОЙ СИСТЕМЫ

V

14.00.25 - Фармакология АВТОРЕФЕРАТ

ъ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

ЕРЕВАН

Работа выполнена в лаборатории фармакологии сердечнс-сосу-дистых средств Ордена Трудового Красного Знамени Института тонкой органической химии ш.А.Л.Мндаоянз АН Армении

Научные руководители: - кандидат биологических наук

Э.А.ШЙРИНЯН - доктор медицинских наук, профессор О.С.МЕДВЕДЕВ

Оффициальные оппоненты: - доктор медицинских наук,

профессор Р.Г.БОРОЯК - доктор медицинских наук, профессор В.М.САМВЕЛНН

Ведущая организация: Ереванский государственный институт усовершенствования врачей

Зашита диссертации состоится "7,3 1952 г. в

на заседании специализированного совета К 075.03.02 Ереванского ордена Трудового Красного Знамени государственного медицинского института го адресу: 375025, г.Ереван, ул.Корюйа 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ереванского

государственного медицинского института (375025, г.Ереван, ул.Корюна 2).

Ученый секретарь специализированного совета доктор медицинских наук,

и^фесдар

Э.А.АМРОЯН

ОБ*АЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

актуальность работы. Статистические данные смертности в клинике от кровопотери и шока (10-30%) (Кулагин В.К., 1978), возрастаниэ числа производственных, транспортных и сейсмических катастроф (приводящих к многочисленным травмам, а большинстве своем сопровождаемых кровопотерей и шоком), а также массовые ранения во время зоен-ных действия ставят проблему изучения кровопотери и борьбы с пел в ряд государственно важных задач.

Изучение проблемы кровопотери и шока посвящено большое количество работ, ведутся углубленные исследования интимных механизмов нарушения функций различных органов и систем, а такие метаболизма. Однако, наличие и использование различных экспериментальных моделей и животных, методов проведения кровопотери и ее продолжительности приводят к неоднозначности полученных данных и отражаются на их интерпретации. Кровопотэря, с последующей гжютензиэв., приводит' к расстройству многих систем и функций организма, в первую очередь, сердечно-сосудистой системы (в частности, микроциркуляции, а также параметров общей и регионарной гемодинамики) (Цвэйфах Б.В., 1976; Baiu-

my* R. F. et al. , 1084; Messmer К., 1Q74; Offenstadt G. et al. . 1982)

и дыхательной функции организма (возникновение гипоксии, приводящей К метаболичесяим и структурным нарушениям) (Seeger- W. , 1987).однако, одновременно с этим, кровопотери инициирует запуск компенсаторных механизмов организма, в том числе стресс-реакции, характеризующейся активацией нейро-эндокринвой системы, с усилением синтеза, высвобождения и выброса в кровь медиаторов и гормонов, в частности, катехол-аминов и коргикостеровдов, направленных на улучаю низ кровоснабжения жизненно важных органов, энергообеспечения организма, анаболических процессов и т.д.

Изучение при кровопотере отдельных патофизиологических механизмов позволило применить различные терапевтичеекие подходы: применяются крово- и плазмозаменяющие растворы (Кочетыгов Н.И. и др., 1989;

Waxraan К. et al. , 198S), КИСЛОООДНаЯ ТврЭПИЯ (КуЗНвЦОВ З.А. , 1988;

Леонов А.Н. и др., 1973), вазоактивныв (преимущественно адренергиче-скш) вещества (Братусь В.Д. и др., 1989; сьегло» в. et ¿1., isee; Tarazl R. , 1974), КОрТИКО СТврОИДЫ (ЫаШКОВСКИЙ М.Д. , 1986: Rubanyi G. et al . , 1980), ЭНТЭГОНИСТЫ НЭрКОТИЧеСКИХ анальгетжов (Dirksen R. et al., 1981; Feuerstein G. et al., 1986), ИСПОЛЬЗУЮТСЯ аНТИГИПОКСИЧЭС-

КИО свойства средств ДЛЯ наркоза (Longnecker D.E. et al., 1082; Met.-zg«r H et, al. , 1984) и Т.Д. ОДНЭКО, ЗффвКТИВНОСТЬ КЭЗДОГО из ЭТИХ

подходов, судя по клиническим результатам, явно недостаточна. Все

это свидетельствует о том, что теоретические положения о путях кор рекцш функций организма при кровопотере, а также роль при этом не ро-эндокринной системы, сформулчрованы с существенными допущениями В этом плане весьма важной (как в теоретическом, так и в практичес ком аспекте) задачей является дальнейшее углубленное исследование кровопотери, а также изыскание веществ, повышающих выносливость ор ганизма к данной патологии, с относительно новых позиций, в частно та, учитывающих естественные компенсаторно-приспособительные реакц организма.

цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явился по» новых соединения, повышающих выносливость организма к острой геморрагической гипотензии, с механизмом действия, направленным на поддержание и усиление защитно-компенсаторных функций организма. Важнейшей целью исследования явилось изучение состояния и механизмов эндогенной регуляции сердечно-сосудистой системы и резистентности организма, подвергнутого массивной кровопотере. В соответствии с поставленной целью были определены основные задач!

1. Разработать методический подход, позволяющий быстро и однозначно оцэнить степень специфической резистентности животных к острой геморрагической гипотензии.

2. Исследовать при этом сдвиги в функционировании гипофиз-надг. чечниковой и симпато-адреналовой систем, а также нарушений гемоданг: мических и метаболических параметров. На основе полученных данных определить факторы и системы, ответственные за повышение выносливости организма при массивных кровототерях.

3. Изучить постгеморрагические изменения в реакциях, опосредуе мых периферическими сосудистыми (с^ и с<2) и центральными («2) адре-норецеоторами. Выявить наличие зависимости реактивности а-адреноре-цепторов от активности гипофиз-надпочвчниковой и симпато-адреналово систем.

4. В ряду производных 2,7-нафтиридина изыскать эффективное соединение, повышающее устойчивость организма к острой кровопотере и установить основные его фармакологические характеристики.

5. Изучить сердечно-сосудистые эффекты отобранного соединения и расшифровать основные механизмы его действия.

научная новизна. Впервые проведенные у бодрствующих и наркотизированных нембуталон крыс широкие сравнительные гемодинамические исследования в стадии компенсированной геморрагической гипотензии и к моменту ее срыва позволили выявить, что нембуталовый наркоз вызы-

ээт сходное с массивной кровопсшэрей резкое изменение значений па-эметров регионарной гемодинамики и способствует быстрому срыву ме-энизма постгеморрагичсской централизации кровообращения.

Подучены новые данные, свидетельствующие о резком угнетении при эовопотере реакций, опосредуемых периферическими и ¡дент-

альными (а^) адронорзцепторами. Обнаружено, что из систем, формиру-щх постгеморрагическую защитную стресс-реакцию, главенствующую эль в организации компенсаторно-приспособительных реакция организ-з играет гипофиз-надпочечниковая система, при имитации угнетения ли гиперактиаации которой соответственно изменяется реактивность эстсиЕапгических о^-адренорецепторов, артериальное давление и резис-^нтность животных к кровопотерэ.

Разработан методический подход, позволяющей проводить широкий фининг соединений, повышающих выносливость организма к острой ге-эррагической гипотензии. Скрининг среди производных 2,7-нафтириди-1 позволил впервые в этом классе выявить новое эффективное вещес-ю (условно названное -тиморидин" ), повышающее выносливость орга-гама к острой кровопотере и установить основные его фармакологичес-ю характеристики.

Расшифрован основной механизм действия тиморидина, заключающий-1 в его антигипоксическом действии, сочетанном со способностью сти-глировать деятельность гипофиз-надпочечниковой системы, повьшать ¡активность постсинапшческих а^-адренорецэпторов и общее пврифе-гсеское сосудистое сопротивление.

научно-практическая ценность. Разработан и внедрен стандартизи-щанный метод воспроизведения кровопотери у бодрствующих и наркоти-1рованных крыс, позволяющий проводить широкий скрининг соединений, )вьпиающих устойчивость организма к геморрагической гипотензии' (Рац. зедложенда * 23 от 20 мая 1988г.)

Выявление у наркотизированных нембуталом крыс нарушения механи-!а ауторегуляции мозгового кровообращения и резких изменений величинах параметров системной и регионарной гемодинамики свиде-(льствует о необходимости учета гемоданамичвских эффектов нембутз-)Вой анестезии в экспериментальной практике.

Получение данные о резком постгеморрэгическом снижении величин ессорных реакции, опосредуемых различными подтипами постсинапти-:ских сосудистых а-адренорецепторов, указывают на целесообразность шенения при данной патологии их активаторов. С другой стороны, ишыо о значительной зависимости выживаемости животных, а также ре-

активности постсинаптических сосудистых -адренорецепторов (и опосредуемых ими гемоданамических реакция) от активности гипофиз-надпо-чечниковой системы указывают на перспективность поиска и применения при Даккой патологш веществ, стимулирующих деятельность гипофиз-надпочечниковой системы и/ш имипфуодга: основные свойства глвко-корггикоидов.

Выявление и исследование нового мзлотоксичыого вещества (тимо-рвдина), повышающего выносливость организма к острой геморрагической гипотензии, а также налгав у него аягигипоксической активности, сс-четанной со свойством активировать гипофиз-надпочвчниковую систему и постсинаигаческиз ^-адренорецэпхоры, позволяет считать тиморвдин одним из перспективных препаратов выбора в комплексе терапевтических мероприятий при массивных кравопотерях и шоковых состояниях.

На -тикоридин" получено авторское свидетельство за к 1577311 от 8 марта 1990г.

апробация работы. Материалы и положения диссертации.доложены. на семинарах биологического отдала .Института тонкой органической химии АН Армении (1980-1991); на Молодежных конференциях "Синтетические и природные физиологически активные соединения", Ереван, (1980,1884,1990); Меадународаых симпозиумах "Катехоламины и стресс", Братислава (1983,1987); 6-ом Всесоюзном съезде фармакологов,Ташкент,

(1988); Всесоюзной конференции "Физиология, патофизиология, фармакология мозгового кровообращения", Тбилиси (1988); Международном совещании "Онтогенетические и генетико-эводоционные асшкты неарозндо-криннсй регуляции стресса", Новосибирск (1888); Всесоюзной конференции "Механизмы действия медиаторов и гормонов на эффекторные клетки" Суздаль (1989); Всесоюзной научной конференции "Оцонка фармакологической активности химических соединений: принципы и подходы", Москва

(1989). Рзбота апробирована на заседании научного общества фармакологов Армении (1991).

публикации. По теме диссертации опубликовано 13 работ.

структура и объем работы. Работа состоит из введения, обзора литературы, главы с методами исследования и 3-х глав собственных исследований с их обсуждением, выводов и списка цитированной литературы, содержащего 79 отечественных и 239 иностранных источника. Диссертация иллюстрирована 21 таблицей и 6 рисунками.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты проведены на 960 наркотизированных и бодрствующих

крысах-самцах (170-220Г) и 450 белых мышах (20-25г).

Исследование параметров системной и регионарной гемодинамики проводили методом меченых изотопами микросфер (Медведев О.С. и др., 1986). Определяли сердечный выброс, сердечный индекс, ударный объем, общее периферическое сопротивление, кровоток и сосудистое сопротивление в 12 органах и тканях - мозг (ствол, правое и левое полушария), сердце, надпочечники, печень, почки, легкие, селезенка, желудок, поджелудочная железа, тонкий кшечник, кожа, мышцы. При этом использовались 4 вида микросфер диаметром 15 мкм меченых со-57, se-46, а--85, sn-из (wen, США), которые через вживленный катетер вводились в левый желудочек сердца. Удельная активность микросфер регистрировалась на гамма-счетчике Compu-Gamma 1282 (LKB-Wal 1 ас , ЩВвЦИЯ). АрТврИЗЛЬ-ноэ давление и частота сердечных сокращений определялись в брюшной аоргге с помощью элэктромзнометров cp-oi (cic, США) на самописца Grass-7D (США). Все рассчеты и статистическая обработка данных производились на компьютере uabtam 3015 (Австралия) с использованием стандартных формул (Не! mann M. A. et al.. 1977) И ПрИКЛЭДЕОЙ ПрОГрЭМ-МЫ Supercalc-S.

^активность периферических постсинагсгических сосудистых «т- и а^-адреЕорецепгоров определялась на крысах с разрушенной ЦНС (pithed rat) (Mouille P. et al.. 1S84; Ruffolo R. R. et al., lQe5) ПО

изменению величины преесорного эффекта на артериальное 'давление селективных а-адреномиметиков (фенилзфрша либо азепексола) в ответ на кровопотерю или введение испытуемого химического вещества. Реактивность центральных ^-адренорецегггоров у выгаэуказанных групп животных оценивали по степени изменения диаметра зрачка (Berr idge т. l.

et al.. 1983) И артерйаЛЬНОГО давления (Bousquet P. et ai.. 1987) В ответ на внутривенное введение о^-адреномиметика - клонидина. Диаметр зрачка измеряли при постоянном освещении микроскопом МБС-9, увеличен!« 1x10. Артериальное давление регистрировали в бедренной артерии животных, н^- к ^"АДренопозитивпые эффекты изучали известным методом регистрации артериального давления к частоты сердечных сокращений у крыс под влиянием изадрина до и после введения испытуемого соединения (Авэкяп О.М. и др., 1Ь76).

Определение содержания катехоламинов и коргг/костерона в крови и надпочечниках, а также серотонина в излом мозгу и гипоталамусе проводили флуорометрическим методом (Авакян О.М.,1977; Ширинян Э.А.

1982; Sadavongvivad Ch. , ÎO70). СПвКТрЫ фЛусреСЦвЯЦИИ BCGX НЭЙрО-

медиаторов и гормонов снимались на спектрофотофлуорометре Hitachi

(Япония ). Активность мошаминоксццазы (МАО) определяли по интенсивности дезамшшровзния норадревалина и сэротонина в гомогенатах мозга на фотометре-нефелометре ФЭК--2 (СССР) (Сафразбекян'Р.Р., 1983). Показатели кислород-транспортной функции крови (парциальное напряжение кислорода - р°г50 и кривую диссоциации оксигемоглобика -КД02) и еэ кислотас-щзлочного состояния (рн и рсо£) определяли общепринятым методом Зигаард-Андерсена (Агапов Ю.Я., 1968). Концентрацию 2,3-ди-фосфоглицерата (2,3-ДОГ) определят неферментативным калориметрическим методом (Мешкова H.A. и др., 1954). Для измерения использовался микроанализатор Аструпа (Radiomater, Дания), оксигемометр "Красногвардеец" (СССР), газовый калькулятор bgc-i (coming, США). Ра с счеты производились по соответствующим номограммам Зигаард-Андерсена с использованием стандартных формул (Агапов Ю.Я., 1968).Определение содержания лактата и пирувата проводили энзиматическим высокоспецифичным анализом С применением тест-наборов пируват-лактат (Sigma Diagnostics, США) на УЗКОПОЛОСИОМ спектрофотометре Вес man (США).

Острую нормобарическую гипоксическую гипоксию вызывали посредством помещения мышей в стекляную камеру, которая продувалась газовой смесью воздуха и азота (ро£= гг mm Hg). О действии испытуемых соединения судили по разнице в длительности жизни контрольных и опытных групп животных. Парциальное давление кислорода в камерах контролировали цифровыми анализаторами кислорода АКЦ-16 (СССР) и Пласто-мед (Польша) (Shi ri ni an Е. A. et al., 1084).

Для имитации активации или угнетения отдельных звеньев симпато-адреналовой и гипофиз-надаочечниковой систем использовались известные препараты: кортикостерон, пропранолол, фенилэфрин, изэдрин (sigma, США); дексаметазон (Галеника, Югославия); азепексол (ВоесыInger, ФРГ); б-гадроксвдофамин (Serva,ФРГ) клонидин (ВНИИХФИ. СССР); салйутамол, цразосин (опоп, Финляндия); ici-íesssi (imperial chemical Industries, АНГЛИЯ).

Б работе использовались также гипофиззктомированные (Федотов В.П. и др., 1971), адреналзктомированные, демедуллирсванные и химически симпатэктокированные (Авакян О.М., 1977) животные.

.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1.ГЕМОРРАГИЧЕСКАЯ ГИПОТЕНЗИЯ: СКРИНИНГОВЫЙ МЕТОД ВОСПРОИЗВЕДЕНИЯ; ВЛИЯНИЕ НА СИСТЕМНУЮ И РЕГИОНАРНУЮ ГЕМОДИНАМИКУ. При всея MHO-гочислэвности экспериментальных методов воспроизведения кровоготери,

доступной литературе мы не встретили метода, позволяющего прово-jTTb широкий отбор соединений, повышающих выносливость организма к строй кровопотерэ. Принцип разработанного нами метода, основанного а известных гипотензивных моделях кровопотери (Wiggers C.J. . 1950; higham Н. et. al. , 1ВВВ), СЛ0ДУЮЩИЙ: СОСУДИСТСЮ руСЛО НарКОТИЗИрОВЭЕ-

ых (нембутал 35 мг/кг, в/б) или бодрствующих крыс подключается к езервуару (с постоянно подаэркиваемым низким давлением - зо-зб mm нд) уда устремляется кровь из бедренной артерии до снижения и уравнове-ивания артериального давления животного с заданной величиной в ре-ервуаре. Подобная гипотензия (зо-зз ш нд) и ток крови подаержива-тся до срьгоа компенсаторных возможностей животного, который насту-ает через.IC0-I20 мин. Этот срыв четко регистрируется по обратному оку крови (из резервуара в артзрию), что позволяет судить о продол-ительности устойчивости животного к геморрагической гипотензии. Бы-трота эксперимента и возможность подключения к установка одеовремен-о большого числа животных позволяет использовать метод в качестве кринингового, что доказано относительной стабильностью объема крово-отери (3,256 веса тела), продолжительностью.выносливости контрольных ивотных (100-120 мин), а также эффективностью (увеличение выносливо-ти на 20-30%) известных фармакологических средств (дексамотазон, ск-ийутират натрия) ч мероприятия (антиортостаз), применяемых в проти-ошоковой терапии.

Следует отметить, что у наркотизированных нембуталом крыс мо-ент срыва компенсаторных- возможностей организма и переход в стадию ©компенсированной гипотензии характеризуется резким нарушением геодинамических; и метаболических параметров. Так, наряду, с резким наущением параметров системной гемодинамики, во всех органах снижается ровоток (например, в коже до -95%) и увеличивается сопротивление со-удов (до +1530Ж в подаелудочной железе). Сдвиги в показателях гемо-даамики в мозгу (и в сердце) свидетельствуют о срыве механизма пост-еморрагической цзнтрализации кровообращения. В крови зарегистрирова-о более чем-двукратное повышение уровня молочной кислоты и увеличено коэффициента лактат/пируват, т.е. отмечено развитие лактатного цвдоза.

Доведенные в динамике кровопотери сравнительные исследования емодинамических параметров у бодрствующих и наркотизированных крыс ыявили высокую эффективность компенсаторного механизма постгеморра-ической централизации кровообрашрния (стабильность скорости мозго-ого кровотока и сопротивляемости церебральных сосудов) у ненаркоти-

зированнъгх животных, что приводит к их устойчивости к кровопотере и соответственно, трудностям в испо.льзовании бодрствующих крыс для скрининговых исследований. Выявдэно, что подобная разница в гемоданамичвских показателях этих двух групп животных и их устойчивости к кровопотере обусловлена действием нембуталовой анестезии, которая сама по себе вызывает на только снижение мозгового кровотока, но и, в большинстве случаев, приводит к таким кв (по направленности) сдай гам в органной гемодинамике, которые наблюдаются при острой крового тере. в этом плане действие нембуталового наркоза и кровопотари од-нонаправлены, что способствует более раннему срыву специфических компенсаторных механизмов у наркотизированных животных, подвергнутых острой кровопотере, и является одним из условий для быстрой оценки эффективности испытуемых прэпаратов.

Таким образом, разработанный способ вызывания стандартизирован ной острой геморрагической гипотензии является подходящим инструмен том для дальнейших исследований фармакологических и патофизиологических аспектов повышения резистентности организма к острой массивной кровопотере.

2. анализ роли гипофиз-надпочечниковой и сиипато-адреналовоя

систем при геморрагической гипотензии. Полученные нами данные об из менении содержания катэхоламинов и кортикостероидов в надпочечниках и крови крыс, подвергнутых острой геморрагической гипотензии, в принципе, согласуются с существующий! представлениями о кровопотере как одном из сильнейших стресс-стимулов для коркового и мозгового слоя надпочечников. Так, концентрация ксртикостерзна в надпочечника: значительно увеличивается уже на второй минуте кровопотерк, достига. к моменту срыва компенсаторной фззы гипотензии 124,1-18,3 мкг/г (в контроле 17,3-3,3 мкг/г). Одновременно, несмотря на постоянное изъя тие крови из организма, почти в 3 раза увеличивалась концентрация в крови коргтикостерона. Подобная типеракггивация коры надпочечников пр: кровопотере является следствием как значительного повышения высвобождения из гипоталамуса кортикотропин-рилизинг фактора (КРФ) и последующей активации кортикотрогаюй функции гипофиза (Тартышников И.М. и др., 1978), так и увеличения чувствительности клеток коры надпочечников к адренокортккотропкому гормону (АКТГ) (ыиу м. р. ai.. 1983). Выявленные нами данные о прогрессивном увеличении в надпочечниках содержания дофамина (на 100% к'120 мин кровопотери), значительная гипернорадреналшемия (+123Я5 к 15 мин), а затем и а дрена-

анзмия (+59Ж к 120 мин) указывают на басспорную активацию гормо-эльного звена симпато-адреналовой системы при геморрагической гипо-знзии. Однако существенное и достоверное уменьшение содержания ад-зналина (-20%) и норадреналина (-3356) в надпочечниках в длительные роки кровопотери (120 мин) может свидетельствовать о превалировании короста секреции адреналина над процессами его биосинтеза. На важ-остъ обеспечения функционирования надпочечников при кровопотере хотя ввиду постоянного изъятия из организма крови, а значит и со-зржащихся в ней гормонов, они задействованы как-бы вхолостую) ука-ывают также выявленные нами факты о том, что надпочечники бодрству-щх крыс, подвергнутых кровопотере, являются одним из трех (наряду сердцем и печенью), а у наркотизированных - единственным органом, котором сохраняется повышенный уровень кровотока (10,95 мл/мин/г), ри одновременном снижении сопротивляемости сосудов (с 25 до 2,6 иго Нд/МЛ/МИН/Г).

Имеющиеся в литературе данные о влиянии кровопотери на состояло симпатического отдела симпато-адреналовой системы, противоречите сведения об эффективности применения, при этом адренергических еществ (Братусь В.Д. и др., 1989; Цимакуридзе А.Г. и др., 1989), ¡диничные исследования по определению при данной патологии чувстви-тэльности или плотности адренорецеггторов, играющих определяющую роль i регуляции сосудистого тонуса, предопределили серию экспериментов ю дифференцированному определению реактивности центральных (о>2) и ©риферических («^ и <*2) адренорецепторов• Впервые показано, что при ровопотере происходит резкое снижение реактивности обоих подтипов »-адренорецепторов (Таблица I).

)днако, если функциональное угнетение центральных с-адренорецепторов [особенно локализованных в продолговатом мозгу и тестируемых нами ю мидриэтическому и гипотензивному эффекту клонццина) способствует гсиленис функции сердечно-сосудистой системы (Авакян О.М., 1988; bouquet, f. ei ai.. 1987), то резкое подавление величин реактивности тостсинатгтических сосудистых ^-адренорецепторов (особенно «j-подти-гав) указывает на наступившую при кровопотере недостаточность периферических механизмов регуляции сосудистого тонуса. Следует отметить, ?то среди большой группы экстремальных воздействия (Мартиросян О.М.,

1980; Broadley K.J. et al. . 1385; U'Prichard D. S. el al . , 1980) ВЫ-

йвлевное нами угнетение реактивности постсинаптических сосудистых

и cg-адренорецепторов специфично лишь для геморрагического стре за и других тяжелых гипоксических состояний, в частности, гипокси-

Таблица 1.

Изменение реакция, опосредуемых центральными (1 и периферическими ностсинаптическкми сосудистыми (Oj к адренорецепторами, у крыс

при геморрагической гипотеияим

Эффекты агонистсв «-адренорёцвптороь Группы Периферия ЦНС

животных Прзссорныа Лрессорный МЩшатачёсжий' "Гипотензьтыьп эффект февшь эффект азе- эффект клони- эффект клони зфрина (aj) гоксола (л-,) дина (а?), в мм дина <«0)

Контроль 29,6-0,9 9,0^0,2 1,6-0,08 25,1-0,5

Кроволотеря 12,1-0,5* 2,0-0,7* 0.7Э+-С,15* 5,3±1,8* В % к КСНТр. -59 ' -78 -51 -79

Примечание: Кахдая цифра - среднее значение не менее 6 опытов.

Знак (-) - процентное снижение реактивцости «-адреноре-цепторов, <*1 " Р<0,05.

ческой гипоксии (Ширинян Э.А. и др., 1988). По всей вероятности, яр! .кроиоштере гипоксия выступает одним из основнь!х факторов (наряду с гуморально-гормональной недостаточностью) угнетающим реакции, опосредуемые постсинаотическими «-адренорецепторами, следствием которого является срыв периферических механизмов регуляции и поддержания сосудистого i'ouj ca, отмеченный и другими исследователями (Bond к. f.

et al. , 1967; Hutchi ns P.M. et al. , 1973).

С целью выявления роли симпато-адреналовой и гипофиз-надпочеч-никовоа систем и их составляющих в формировании комвенсаторно-приспс еобктельншХ реакций при острой геморрагической гипотензии, были проведены исследования на следующих "модельных" животных: а) с имота-цией выборочного угнетения активности гипофиз-надпочечниковой и симпато-адреналовой систем, посредством хирургического или химического удаления отдельных звеньев этих систем; б) с имитацией активации или блокады звеньев этих систем, применением селективно действующих фармакологических препаратов. Выявлено, что угнетение либо активация симпато-адреналовой системы (симпатэктомией. удалением мозгового вещества надпочечников или блокагорчми иди активаторами а^- и адренорецепторо'в) статистически значимо не изменяли выносливости животных к острой кровопотере, в то время как угнетение гипофиз-надпочечниковой системы (удалением гипофиза или надпочечников) приводит к уменьшению выносливости, а активация (экзогенном введением

ортикостероидов) - к ее повышению. Эти данные указывают на первое-епенную, главенствующую роль гипэрактивации гипофиз-надпочечниковой но не симпато-адреналовой) системы в мобилизации срочных постгемор-ai-ических приспособительных механизмов. Подобная же прямая зависи-ость от активности гипсфиз-надоочечншсовой системы выявлена у "мо-эльных" животных как в степени реактивности постсинапгических сосу-истых aj-адреворецепторов, так и в артериальном давлении у pithed at (Таблица 2).

Таблица 2.

ааисимость реактивности периферических постсинапгических сосудистых j-адренорецепторов, артериального давления у крыс, с разрушенной НС, а также продолхительности кэипенсаторнол фазы при геиоррагичес-ой гипотенэни от активности гмпофиз-надпочвчниковоЯ системы

'руппы Уровень (Кортм- Прессорный АД у pithed Устойчивости

квотных костеровдов в эффект фенил- rat, В mm Hg к кровопоте

крови, в мкг% эфрина (o<j) ре, в мин.

контроль 23,8±4,4 29,6^0,9 50,2-0,7 113-4,7

'ипофиззкт. 3,6±1,1* 11,0-1,8* 38,1-0,6* 95-6,6*

1 % к конт. -85 -83 -25 . -16

щреналэкг. 1,9-0,9* 19,5-2,6* 37,1-1,5* 75±5,0*

1 % к конт. -92 -35 -30 -34

1ексамотазон ;или кортико-ггерон) ¡ и конт. увеличение более чем в 5 раз 50,6-1,2* +70 68,2-1,3* +36 142±6,54 +22

[ринечание: В графе "устойчивость к кровопотере" знаки (+) или (-) -

чы>лич?ииь или

процинтно(Г>уПеньи[!ние величин, по отношении к показателю "лохноопернрованкых крыс". Знак (*) - Р<0,05.

Таким образом, порученные данные позволили вышить прямую зависимость продолжительности компенсаторной фазы геморрагической гиго-гензии, реактивности постсинапгических сосудистых а-^-адрэнорецепто-эов и артериального давления, поддерживаемого периферическими моха-шзмами, от активности гипофиз-надпочечниковой системы, в частности, зт уровня кортикостероидов в крови. Выявленные закономерности, каря-пу с некоторыми литературными предпосылками (nicoi с.j.m. ct ai.,

LQ7£:; Sandrini M. et al.. 1QS3), ПОЗВОЛЯЮТ СЧИТЭТЬ, ЧТО ОДНИМ КЗ

функциональных знамений гиперактивзции гилофиз-надпочечнюсовой тс-

темы является повышение чувствительности и/или реактивности постси-наптических сосудистых aj-адренорецэпторов к катехоламинам. Однако этот механизм при кровопотере мало действенен (по-видимому, из-за постоянной потери вместе с кровью и кортикостероидов), что приводит к снижению реактивности с^-адренорецепторов и последующему нарушению постгеморрагических адагггативных ответов сердечно-сосудистой си стемы. Подобное имеет место и при фармакологической блокаде aj-адре норецепторов, при которой также (как и при кровопотере) нарушаются процессы ауторегуляции в МОЗГОВЫХ (Edvlnsson L. et al. , 1985) И бры жеечных (srcaiovic g. et ai.. 1988) сосудах, сникается общее шрифе рическое сопротивление (Zhong-Ming L. et al. , 1384), уСИЛИВЗКГГСЯ Д8-компенсаторные процессы при кровопотере (Bond R. Г. et al. , 1984). И наоборот, агонисты а^-адренорецэпторов (мозатон, норадреналин) по-вытакгг сниженный после острой кровопотери уровень системного артериального давления (Дарчук В.В., 1989) и увеличивают сердечный выброс

(Richer С. et al. . 1Q87). ОДНЭКО, При ЭТОМ СУЩвСТШНКО Нв УВвЛИЧИВЗ-

ется продолжительность жизни животных, ввиду кратковременности корригирующего действия о^-агонистов на системную и регионарную гемодинамику (Уваров Б.С. и др., 1973; Дарчук В.В. и др., 1989), что позволяет заключить, что целесообразнее повышать a-j--ответы не за счет увеличения в крови симпатомиметических аминов, которые недостаточно действенны на фоне постгеморратического угнетения сосудистых «j-адреяорецепторов. а за счет функционального повышения чувствительно-та и реактивности о^-адренорецэпгоров .Подобное, как мы выяснили, имеет место при активации гигофиз-яадпочечниховой системы.

Таким образом, представленные результаты указывают на перспективность поиска и применения при геморрагической гипотензии веществ, одновременно сочетающих антигипоксяческие свойства со способностью стимулировать деятельность гипофиз-надпочечниковой системы и/или имитировать те свойства глюкокортиковдов - активация ¿»-¡--адренорецеп-торов, стимуляция энергетического метаболизма и др, которые способствуют повышению резистентности организма при массивных кровопоге-рях и шоковых состояниях. На этих цршщипах и был проведен поиск знтигеморрагических соединений.

3. поиск и исследование антигеиоррагкческих веществ, дктивиру-1их гипофиз-надпочечни1совув систему и обладающих антогипоксической активность», среди производных 2,7-нафтиридина.

Основанием для проведения поиска соединений, обладающих свозст-

вам повышать устойчивость организма к острой массивной кровопотерв, среда производных 2,7-нафтирвдипа, явились сообщения о наличии у некоторых из них антигипоксических, вазотропных и кэрдиотонических свойств (Норавян A.C. и др., 1985; 1989). Поиск проводился как среди производных 2,7-нафгиридана (7 соединений), содержащих в первом положении морфолиновый цикл, а в четвертом - циан группировку, так и среда веществ, представляющих собой различные модификации производных 1-морфолино-4-циан-2,7~нафтиридиновой структуры (5 соединений). Соединения были синтезированы в Институте тонкой органической химии АН Армении под руководством доктора химических наук, профессора Норавяна A.C. Эффективность каждого соединения исследовалась на крысах, подвергнутых острой геморрагической гипотензии. Проведенные скрининговые исследования позволили выявить некоторые закономерности между химической структурой морфолшовых производных З-меркапго-4-циан-2,7-нафтиридапа и их свойством повышать выносливость организма к острой массивной кровопотере (Таблица 3). Выявлено, что одним из необходимых условий для проявления искомого фармакологического свойства является наличие диметального заместителя в шестом положении нафтирвдинового гетероцикла. В этом случае замещение атома водорода у меркапгогруппы на -снэ или -Na приводит к проявлению выраженного свойства повышать выносливость животных к острой кровопотере (соединения 5 и 7). Соединения с незамещенной меркаптогруппой (соединения 3 и 4) либо с бензольным заместителем (соединение в) полностью лишены искомой активности. Замена у соединения 7 морфолинового цикла на пиперазиновый, циан группы на амино-карбоновую, а также атома азота в седьмом положении на атомы серы или кислорода приводила в испытанных дозах к полному лишению искомой активности. Из испытанных соединения для дальнейших углубленных исследований было отобрано соединение 7, которое в дозе 10 мг/кг увеличивает выносливость крыс к массивной кровопотере на 21,255, а в до-, зе 75 мг/кг - на 46,6%, не уступая по активности дексаметазону. При этом оно выгодно отличается от цексаметззона хорошей растворимостью в воде, меньшей токсичностью и отсутствием возрастания со временем его токсичности, которое имеет мести у дексаметазона вследствие генерализованной сетшхомт, наступающей от нарушения иммунного статуса животных. Более того, у огоб}.зтют соединения выявлен значительный антибактериальный аффект, ie уотуттий чо хкииотераповтической активности известному лекарств-•!№.ч.м* 4'ц-ву - невигрпмонг (Парони-кян 2.Г. и др., Т99П). огпбрятuoe с(. miW'8 (номер государственной

Та£лица 3.

Сравнительная активность оригинальных производных 7-иеткл-1-иорфоли-но-3-меркапто-4-цнан-5,Ь-двгкдро-вН-г,7-нафтиридина

СЫ

№ е. 1 с. Дозьг в МГ/КГ ' 1 Изменение выносливости к кровопоте-ре (в % к контр.) ДЦ^д Раство-мг/кг римость

I. к . н 25- +3,4±7 230(200-264)

60 ! -111-14

2. н Ма 5 -П,4±3,2 365(337-395) + .

25 +5,6-3,8

50 +8,4-6,5

3. снз Н 50 +10-9 >4000

100 ' +7,4-10,7 -

4. снз Н 25 +14-6 > 4000 +

гидрохлорид

5. снз сн3 5 •+2,7±3 120(111-130)

10 +43-13** •

25 -34±4,0*

6. снз снг_сбн 5 25 -4-4,7 870(750-990)

50 +4-11,7

150 +22-9

7. ск На 5 +18,5-16,8 1050(827-1334) +

о 10 +21,21^5,6*

25 +14,4^8

75 +46,6-16,1*

ДЕКСАМЕТАЗОН

Б

+22,1^6,2*

см.примечание

Примечание: Знаки (-И нлм (-) » графе активности - процентное увеличение или уменьшении выносливости по сравнения с соответствуюпим контролем, а в графе растворимости - растворимость в воде. <*)-Р<0,05. де-саметазона при подкожном введении у крыс равна 120 иг/кг, а

у мышей -700 иг/кг. В течении 21 дня наблюдения токсичность дексаме-тэлона прогрессивно возрастает и к концу составляет 14 ис'кг и 514 мг^кг соответственно (Tonelli G. , 1966).

регистрации 5492783, авторское свидетельство * I5773II от 8 марта 1990 г.) получило у нас условное название -тииориднн". Структурная формула и химическое название тиморидина приведены ниже:

SNa

Натриевая соль З-меркапто-1-морфолино-6,6,7-триметил-4-циан-5,6-догидро-8Н-2,7-нзфтирвдин

ТИКОРИЛИН

антигипоксические и метаболические эмекты тиморидина. Известно, что при массивной кровопотере и последующей геморрагической гипотен-зии фактор гипоксии является одним из определяющих тяжесть состояния организма, вследствие нарушения кислород- и знергозависимых функций клеток (Кулагин В.К., 1978; Колчинская А.З., 1981; Шустер Х.П. и др., 1981). В связи с этим положением и литературными данными, что некоторые представители нафтирвдинов обладают выраженным антигипоксичес-ким действием (Норавян A.C. и да., 1989), было предположено наличие у тиморидина антигипоксических свойств. Выявлено, что тиморкдин в диапазоне доз от 20 до 75 мг/кг приводит к статистически достоверному увеличению на 40г605? выносливости животных к нарастатацей нормоба-рической гипоксической гипоксии и по этому свойству не уступает ан-тигипоксическому действию известных лекарственных средств - пираде-тама и кавинтона. В отдельных сериях опытов исследозался "«еханизм антигипоксического и антишокового действия тиморидина посредством изучения его влияния на кислород-транспоргтаую функцию крози и кислотно-щелочное состояние. Выявлено, что под действием тиморидина (50 мг/кг, в/б) в артериальной крови уменьшается более чем

вдвое снижается концентрация основного фосфорорганического лигандэ гемоглобина 2,3-ДФГ и происходит сдвиг направленности КД02 влево. Подобные сдвиги, характеризующие увеличение сродства гемоглобина к

кислороду, обусловливают повышенно© (по сравнению с нелвченными животными) поглощение и насыщение кислородом крови как при гипоксичес-кой гипоксии, т.е. при низком ро£ во вдыхаемом воздухе, так и острой геморрагической гипотензш и других шоковых состояниях с нарушенной функцией•легких, которые являются одним из основных "шоковых" органов. С другой стороны выявлено, что под действием тиморидша в венозной крови происходит снижение величины рн и увеличение рсо2. Подобные сдвиги указызают на возможность (согласно эффекту Бора) повышенного перехода кислорода из крови в ткани (Hess w., 1987), с последующей активацией аэробных процессов обмена веществ в клетке и восстановлением метаболического баланса. Вероятность подобного предположения была доказана в исследованиях при кровопотере лактат/пиру-ватного соотношения, одного из основных индикаторов метаболического баланса.. Выявлено, что тиморидин приводит к более чем двукратному снижению содержания лакгата, резко увеличенного в контроле при кро-вопотере, и значительному уменьшению при этом коэффициента лактат/пи-руват (Таблица 4).

Таблица 4.

Изменение содержания молочной кислоты (а i к исходник данных! и лактат/пмруватного соотношения (К) в крови контрольных и леченых тмюрндкнош крыс, подвергнутых кровопотере

Кровопотеря Контроль . Тиморидин

30 минут +146-16* . +70-26**

К=16 • К=10

120 минут ^-290±35* • +120±39**

К=20 К=1Б

Примечание: Звездочками отпечены статистически достоверные сдвиги

(р<0,05);(*1 - по отношению к исходному уровни

+

(16,5-4,4 мг^дл 1; (**) - по отношению к контролю.

Следовательно, одним из основных компонентов механизма антиги-поксического и антшоковогс действия тиморидина является улучшение кислород-транспортной функции крови и аэробных процзссов в метаболизме клеток.

тиморидин - стимулятор стероидогенеза. Известно, ЧТО АКТГ и глю-кокортикостероида и их синтетические аналоги оказывают благоприятное воздействие на организм, подвергнутый кровопотере (Устинова Е.Е.,

1983; Hei 1 man A. et al. , 1983; Schorf M. et al. , 1S82), ВЫШв

были приведены выявленные нами фанты о прямой зависимости реактивности постсшаптитескжг сосудистых а-адренорецэгтгоров и выносливости организма к геморрагической гипотензш от активности гигофиз-над-почечниковой системы. В связи с этими предпосылками было предположено, что одним из следующих возможных компонентов в механизме антиге-моррагическсго действия тиморвдинэ является его стимулирующее действие на активность гипоталамус-гипофиз-надпсчечниковой системы, которое оценивалось нами по уровню кортикостеровдов в надпочечниках и крови. При этом для интерпретации полученных результатов использовались данные о влиянии тиморвдина на скорость кровотока и сосудистое сопротивление в надпочечниках, а также на состояние одного из регулирующих секрецию КРФ и АКТГ механизмов - серотонинергической системы мозга, в частности, гипоталамуса (Fuller R.W. , 1931 ; Hol roes м. с. et ai.. 1982). Выявлено, что под действием тиморидина наблюдается значительное увеличение уровня кортикостерона в надпочечниках (с 23,8 до 63,5 мкг/г) и крови (с 17,6 до 40,4 мкгЖ). При этом показана возможность одновременного действия двух механизмов активирующего действия тиморидина на процессы синтеза и секреции гормона: а) активации центральных механизмов стероидогенеза, т.к. тиморидин, ингибируя на 41Ж активность МАО, приводит к увеличению содержания серотонина в гипоталамусе (с 738i8l до 1054^43 мкг/г); б) усиления кровоснабжения надпочечников, т.к. под действием препарата зафиксировано достоверное уменьшение на 3456 сопротивления адреналовых сосудов току крови с выраженной тенденцией увеличения в них кровотока на 84%. . ■ • ■

Таким образом, тиморидин стимулирует глюкокортиковдную функцию надпочечников, одним из вероятных механизмов которого является активация центральных мехайизмов стероидогенеза и усиление кровоснабжения надпочечников.

сердечно-сосудистые эффекты тииоридинд. Острая массивная кро-вопотеря приводит к резкому расстройству (снижению) системного и периферического кровообращения. В этих условиях одним из главных механизмов повышения выносливости организма является быстрое обеспечение предпочтительного для жизненно важных органов режима кровоснабжения ценой снижения орошения других органов. В механизме подобных адаптационных реакций сердечно-сосудистой системы роль симпатической нервной, системы неоспорима, что подтверждается также выявленными нами однонаправленными сдвигами в величинах реактивности постсшаггтичес-

ких ^-адренорецэпторов, системной гемодинамики и выносливости животных к острой кровопотере. Эти положения предопределили проведение серии опытов по изучению влияния тиморидина на параметры систем-ног и регионарной гемодинамики, а та гаю на реактивность различных подтипов а- и /з-адренорецепгорсв. Выявлено, что если у интактных крыс тиморидин (25 иг/кг, в/б) не вызывает достоверных изменений (кроме надпочечников) параметров системной и органной гемодинамики, то при последующей кровопотере (1,5% веса тела) препарат уменьшает объемную скорость кровотока и увеличивает регионарное сосудистое сопротивление в большинства периферических органов (Таблица 5). При этом общее периферическое сосудистое сопротивление повышается на 65-22%.

Таблица 5.

Изменение параметров регионарной гемодинамики у контрольных и лече-НЦ'х тииоридиШН бодрствуюцих крыс, подвергнутых 1,5%-ноя кроиопотере (в X к ннтактнс.« группе 1 ,

Кровоток Сопротивление сосудов

Органы Контроль Тиморедин Контроль Тиморидин

Мозг (ствол) +7±31 +24±13 -10±17 -25±7*

Сердце +48^26 +26-17 -39^13 -22±12

Надпочечники +23±39 +25±16 -39±22 -23^10

Печень +?9±36 +141^59 -89-3* -55-8*-

Почки -24±10 -32-9* +6±14 +38^12*

Селезенка -34±4 -58^7* +4±9 +144-41*

Лзгкив -15-33 -7±53 +42-62 +173-79

Желудок -43-11 -69±7* ' +58^25 +241±5Э*

Подаел.железа -41-18 -51-8* +98±81 +96-20*

Тояк.кишечник -17±17 -48±7* +4±15 +85-21*

Кожа -39-16 -53-6* +47±39 +100±20*

Мышцы -66±4* -41-11* +59±24 +77±33

Примечание: Знаки (+1 или (-) — процентное увеличение или уменьшение по отношению к интактныи животным', ("I - Р<0.,05.

Регистрация действия таморидана на реактивность сосудистых <*т-, а2~ и ^2_а'СРеН0РеЦ!31ТГ0РС)Б а ^х-3^®0^1^1™?00 С0РДЦа позволила выявить, что препарат, существенно не влияя на реакции, опосредуемые «о- и /?~а.цроЕорецептораш, увеличивает на 2735 реактивность постсинап-тических сосудистых ^-адренорецэптороБ. Подобная умеренная активация (угнетенной от кровопотери) реактивности дастсинаптических сосу-

дастых а-г-адренорецепторов, ответственных за вазоконстрикцию, по-видимому является одним из существенных механизмов посттеморрагическо-го увеличения под действием тиморидана регионарного и общего периферического сопротивления сссудоз и последующей централизации кровообращения.

Таким образом, результатом поиска и изучения оригинальных производных 2,7-нафтиридина явилось выявление малотоксичного и эффективного соединения - тиморидана, которое повышает устойчивость организма к острой геморрагической гшотензш и обладает сочетанными свойствами антигипсксанта, активатора гипофиз-надпочечниковой системы и реактивности постсинаптических сосудистых ^-адренорецепторов.

выводы

1. Разработан и внедрен стандартизированный метод воспроизведения крозопотери у мелких лабораторных животных, позволяющий, наряду с изучением различных патофизиологических вопросов, проводить широкий скрининг соединений, повышающих выносливость организма к геморрагической гипотензии.

2. Нембуталовый наркоз вызывает сходное с массивной кровопоте-рей резкое изменение значений параметров регионарной гемодинамики. Кровопотеря у наркотизированных крыс, в отличие от бодрствующих, приводит к раннему срыву механизма ауторегуляции мозгового кровообращения и более значительному угнетению параметров системной гемодинамики и регионарного кровотока.

3. Острая геморрагическая гипотензия сопровождается значительной активацией симпато-адреналовой и, особенно, гипофиз-надпочечниковой системы. При этом главенствующую роль в организации компенсаторно-приспособительных рэакций организма играет гипофиз-надпочечни-ковая система, при имитации угнетения или гиперактивации которой соответственно изменяется выносливость животных к кровопотере.

4. Реакции, опосредуемые периферическими (с^ и а2) и центральными (а2) адренорецепторгми, при кровопотеро резко угнетены. Выявлена тесная связь между уровнем кортикостероидов в крови и реактивностью постсинаптических сосудистых с^-адренорецепторов, изменения которых приводят к однонаправленным сдвигам артериального давления у крыс с разрушенным спинным мозгом.

5. Впервые среди производных 2,7-нафтириданов выявлены соединения, обладающие свойством повышать выносливость организма к острой

кровопотере, и предложено эффективное малотоксичное соединение -натриевая соль 7-метил-1-морфолино-4-циан~5,6-дегидро-8Н-2,7-пафти-рвдина, условно названное "тиморидин"..

6. Механизм действия тиморвдина выражается, с одной стороны,

в значительной активации пшотзламус-гипофиз-надоочечниковой системы, в повышении реактивности постсинапгических «-адренорецегггороз резистивных сосудов и общего периферического сосудистого сопротивления, приводящих к умеренному потенцированию механизма централизации кровообращения, с другой - в улучшении кислород-транспорггной функции крови и процессов оксигенации тканей.

7. Совокупность выявленных фактов позволяет раскрыть один из основных механизмов кортиковдной коррекции параметров системной и регионарной гемодинамики, а также экспериментально доказать, что вещества. сочетающие антигипоксические свойства со способностью активировать деятельность гипофиз-надпочечниковой системы и реактивность постсинапгических с^-адренорецегггоров, перспективны для профилактики и лечения острых массивных кровопотерь.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕЛЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. О способах вызывания геморрагического стресса у лаборатор-зых животных. Разработка скрининговой методики.// Тезисы докладов 5-ой молодежной конференции "Синтетические иприродоыо физиологически активные вещества". Ереван, 1980, с.61.

2. Neuroendocrine regulation of endurance of rats during hypoxia in antiorthostatic position.// In "Stress: The role of catecholamines and other neurotransmitters". N.Y., 1Э84, p. 2e5-293 (В С0ЭВТ.

с Шириняном Э.А. и Авакяном О.М.).

3. Нейро-зндокринная регуляция резистентности крыс к геморрагическому шоку в нормальном и антиортостатическом положении.// Тезисы докладов 7-ой молодежной конференции "Синтетические и природные физиологически активные вещества". Ереван, 1984, с.193.

4. а-Adrenoceptors and neuroendocrine regulation of resistance of the organism to stress.// Abstracts Forth symposium on catecholamines and other neurotransmitters in stress. Czechoslovakia, 1087,

p.8i (в соавт, с Шириняном Э.А. и Мартиросяном О.М.).

5. Фармакологическая и нейроэндокринная регуляция реактивности и с,2~алР0ноР8ЦегггоРов ПРИ экстремальных воздействиях.// Тезисы

докладов 8-го всесоюзного съезда фармакологов. .Ташкент, 1388, с.427 (в' соавт. с Шириняном Э.А. и Мартиросяном О.М.).

6. Стресс-опосредуемые изменения и нейроэндокринная регуляция реактивности «j и о^-адренорецепторов.// Тезисы докладов международного совещания "Онтогенетические и генетико-эволюционные acneinu нейроэндокринной регуляции стресса". Новосибирск, 1988, с.427 (в соавт. с Шириняном Э.А., Мартиросяном О.М. и Арутюнян С.А.).

7. Особенности и адренергические механизмы регуляции мозгового кровообращения у наркотизировнных и бодрствующих животных при геморрагическом стрессе.// Тезисы докладов 2-ой всесоюзной конференции "Физиология, патофизиология, фармакология мозгового кровообращения". Тбилиси, 1988, с.17 (в соавт. с Шириняном Э.А. и Мартиросяном O.K.).

8. Influence of stress of the activity of the neuroendocrine system on a^ ^nd ci^-adrenoceptor-mediated reactions. //In: "Stress: Neuroendocrine and humoral mechanisms". N. Y. . 1QS9, p. 379-369

(в соазт. с Шириняном Э.А. и Мартиросяном О.М.).

9. Производные 7-метил-1-мсрФолин-4-цизн-5,в-де.гисро-вН-2,7-нзфпфвдина, обладающие свойством повышать выносливость организма к гипоксии.// Авторское свидетельство » I5773TI (СССР), 1990 (б соавт. о Пароникяном Е.Г., Мирзояном Г.В., Норавяном А.С., Давтян С.Б., Медведевым О.С. и д^..).

10. Роль а^адренорецепторов в регуляции системы сосуд-кровь: коррекция гипоксических и ишемических состояний.//Тезисы докладов всесоюзной конференции "Механизмы действия медиаторов и гормонов на эффекторные клетки". Суздаль, 1989, с.219 (в соав... с Шириняном Э.А., Екавяном А.Г., Арутюнян С.А. и Лйфзояном С.А.).

11. Метод скрининга соединений, повышающих резистентность организма к кровопотере.//Тезисы докладов всесоюзной'научной конференции "Оценка фармакологической активности химических соединений: принципы и подходы". Москва, 1989, c.I6< (в соавт. с Шириняном ЭЛ.).

12. Периферические механизмы регуляции артериального давления: с^адрвнорецепторы и гипофиз-надпочечниковзя система.// Тезисы докладов 10-ой молодежной конференции "Синтетические и природные физиологически активные вещества". Ереван, 1830, с.26 (в соавт. с Мартиросяном- О.М.).

13. Участие гипофизарно-надпочечниковдй системы в регуляции реактивности а-адренорецепторов. Эффекты экстремальных воздействий и <=<-адреноблокаторов.//Физиол.журнал СССР, 1990, т.76, *9, с.1197-1202 (в соавт. с Шириняном Э.А., Мартиросяном О.М. и Арутюнян С.А.).