Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Реакция нейронов собственного аппарата спинного мозга в условиях де - и регенерации периферического нерва

р Г 8 од

7 О

' МЫСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДИРАЦИИ ВЛАДИВОСТОКСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

БОРОДАЙ Светлена Витальевна

ГЕАШЯ НЕЙРОНОВ СОБСТВЕННОГО АППАРАТА СПИННОГО МОЗГА В УСЛОШЯХ ,1В- И РЕГЕНЕРАШИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОГО НЕРВА

14.00.23 - гистология, цитология и эмбриология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации- на соискание ученой степени кандидата медицинских иаук

На правах рукописи

УЖ 612.Я18.914/312.56:611-018.Я;М

Владивосток 1С93

Работе выполнена на кафедре гаотологии Владивостокского Государственного медицинского института

Научный руководитеи:

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор П.Л.Мотавкин

доктор медицинских наук, профессор Ч.М.Черток

кандидат медицинских неук А.И.Фисенко

Ведущая организация: Российский Государственный

медицинский Университет

Защита диссертации состоится 1993г.

в 10 часов на заседания специализированного совота Д 084.24.01 при Владивостокском медицинском институте (690600 ГСН, Владивосток, пр. Острякова, 4)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Кдадввоотокскс го Государственного медицинского института

Автореферат разослан " 1993 года

Учений секретарь -

специализированного совете /

кандидат биологических наук ; ( К Г.Ц.ХЩщйш

С

OKi,AI ХАГЛ1Г'ЕГ!'CTi'KA РАБОТЫ

Ai-ту.тьч^гть пгрГу,ои.т. Более IOO лет назад Уоллер (Idol) f""n»n!W, 'ттг-. перк^ерическуй отрезок мякотного волокна, отпе-г.енчнй от своего центра, лг трргяется дегенераиии на всем тггтлтрнии. Это вторичное перерождение нервного волокна в честь 5вторя получило налвание уоллеровекая дегенераиия.

Вторичное перерождение нервных волокон постоянно привлечет внимание исследователей. Объясняется ото тем, что для "егенеряцги поврежденного периферического нерва необходима определенная структурная и Гиохимическая готовность гананновских глртек на периферии и нейронов в нервных иен^рах.

Уолл°ровекая дегрнеряикя лолгое время исслеповялясь преи-ivnecTBeHiio морфологическими метопами (Дойников I?35, 1943,1947, :948,1955, Залин 1952, 1954, Abercrosbie , Johnson, 1246, Leh-ипп.ТГбО, Holländer , Mehraein, 1966, Simon, Wade, Sarco, 969).

Наряду с изучением распада аксонов обращалось" внимание я процрссм иекомлсзици'/ миелина, образование нейтрального жира онсСопннх бюнгиерозских лент. Последовательное превраи<"'ние црлннп описано, у многих видов животных различного возраста, зучено при травме нервных стволов у человека в периоп, первой второй мировых войн (Дойников 1943,1948). Несмотря на много-исленность работ, выполненных световой, а теперь и с псмолью лектронной микроскопии ( Melis , Giordano , Palmas,1967, 3tapert,T967, Kazuda Hidechiko, 1969, Fried«, Martinen, 1970), утшость уоллеровокой дегенерации, её биологический сад-зл и еачрнно остаются неяостаточно понятными.

7. При уоллеровской дегенерации слабо исследованы ферменты, отвечавшие за важнейшие функции клеток. В литературе нет бесспорных данных о том,'что же происходит с энзимами в отрезке нерэа, потерявшей связь с центром. Практическая необходимость

иметь эти сведения существует. По уровню активности энзимов можно судить о потенции шванновских клеток сыграть роль в восстановлении нерве. (Сидорова, 1972, Баранов, Прокопенко, 196?, Нотавкин и др. 1992).

2. Неясность ряде сторон уоллеровской гегенершии обгяс--няе^ся тем, что для исслепопяния её мало применялись количестве №,ifi метопм. Использование же меры и числа уточняет качественные характеристики, позволяет вскрыть новые явления.

Реактивные изменения, наступающие в спиннсм мезге и спинномозговых /злах в ответ на перерезку нервов, описывались неоднократно, олнако при этом они не сопоставлялись с ходом це- и регенерации нерва (Мотавкин 1959, Bunge, 1991). Болыаинств исследований выполнено методом Ниссля и посвящено изучению ретроградных -зыенений, одним ио характерных, признаков которого является первичное раздражение, наступаюдее в нейронах в резуль тате травмы их аксонов ( uieal, Ю92). Соответствующая реакция клеток возникает у человека при болезнях,.связанных с поранением нервно!! системы (Каминский,IPSO). Поэтому ргтрг.грзпнуи реакцию моя но рассматривать как модель пля нзучрния биолтическ особенностей нейронов, акхшвалентп которой сспроготгаюгпатологи ческие прглегги у человека,

'i. С нжылп XX веко, то петь, со вргменк иирокого испо,и-аонаьгн ö н.Мрогистолории wnrewunvcHHOii техники, вопрос of

wi'f!'!:!' »^.muns-' v ''O^t-h hcíípohob napsuy c. pn.-mooCpanmni ho:>cr«íj\«iari;anunm' -"'"nn9,rx osxoctkob, crr.jj jncryccitOFHHM m sw.wtoh 40 mpctoj-in^ro ppp? •, i« jipnmetcv iobojibuo cnib.mmn¡1 JiitTepnTypiiofl n'jj'OMUPt'.

Oum rpyrrnn i'^cxprroBSTe^efi (DogelJ£08, Agduhr, IS20) vjhtpt, ttto ritii kj'ptk'-;, ot^iníajomhpcn ot ock<mrro ncPBr,riyHJ?no-"¡tpa, nopas^c* b pfoyxbTare 0HTcreHf»TínecK0ft m$$ep»HnHpr5BKH.

APTCru ( Bielochowaky, 1908,Rosal, 1908, Marinesco, A¡T9), rwrñ*10.f< H» líll'HMP »ISyVfiM'H MOp'TiOJOrilIl HPTrHnii PHCVIV rph r.yrypiivnr, pi-h^ch1" fithniít'wro hpílppf'w k

tpyk^ypnr ra-wnrweckcro xacawtma. 3^0 w^hkp, d rpitprnp»',

pinpjfíTf-Tr,n Tivnjrpft Ifaxm ( Hamon y Cajal,

P2H. de Caotro, 1632).

frri^pp Toupa 3pp"i»p priTHfwi!"' HÍVOT"'^ (IíC2) wm1! Tpen.eji*;- iTr^rui!^"' PTi'nnm KRK KPt'aPHCíiTopHO-np^onccoíiiTPJibiiw ^KIIHP: "sn CVPT r6pp3PB?Hnn Heílponahu; apno.iMHTfVfcHHX CTPOCTKOD -oKprcK- m pacniip^Hi'p oBmeR (flFwrKH,íIpwn??», 19731

5. ty>3yjjkr«',rm jjp-u pft'wr^'jhw b hpotfvürpr

n.rn boo ínsfín «'."npap.THfci na no::cKH pppppt.? PUHxpoHK.ntp.'r"'!« pí;pcc¡t. npo;¡c\onn ntepn'snpi»:! p •npnhhchckux rto^'-hx j:

wr-'x, C1 KV^n tftWrtXOni«* pprvwpp.'HJMíi n^p7:[irpi!'!'=CK0r0 HPlvr

laraan e> al., IC'T , Zalewaky, 1991, Scott, 1991).

I'orvfTps vn ^'K'^p vjT'cr.o pnf^oT, mji'PtwKa pp35rwp»oT,c nm-?í\'i, Cf.'ph?» H npSP."CTPPHHCP.Tíj P33IMX WPT0<íH*tX *lOrv PC FC"-r.'r''i¡!, rfH0J!"iríW^CKOP H fQJiPfí .VHKPP Me^HOTHOK^ OH^tlPUtr» 0CT<?B?C!T 50 "?rnnv>rr ppr>l/"H!I I?» yPTni!0BJ'Pin7'».'ií (i.,ctí! P"'.'!? ic5v , ií-5'?) .

Цель работы и задачи исследования. Установить временную зависимость изменений между процессами, протекавшими в периферическом отрезке нерва и нейронами собственного аппарата спинного мозга.

В работе решались следующие задачи:

1. Изучить динамику активности гицрслрз: кислой и щелочной фг.сфатоз, холиностераз.

2. Изучить динамику активности скеирепуктаз: оукцинатчогиг рогегазн, иитохроноксицазы..

3. Сопоставить изменения активности форе? нтоь с ттипрми:-:ой первичного раздражения и ультраетруктурнкми подстройками нейрона.

Теоретическая и практическая ценность раооти. Изучение сегментарных центров после повреждения седалишного нерва имеет практическое значение. В конечном итоге от функционального состояния нейронов во многом зависит успех восстановления поврежденного нерва.

В практик« хирургического лечения поврежденного нерва о сроках наложения шва существуют различные точки зрения. Одни хирурги стремятся наложить шов непосредственно вслед за повреждением, другие откладывают операцию на неопределенно долгий срок, третьи считают, что время наилучшее для нейрорафии -перше 3-4 недели после ранения (Григорович 1981). Противоречивость взглядов объясняется, как мы думаем, недостатком данных о вроени функциональной готовности нервных центров к учес/ию в восстйноелонии. Несмотря на то, что литератупа по '•■Г--\7 з с:; у Е'.-.ч«, она рздко рассыаг^к-

залась пол углом зрения практической ценности. Зтому препятствовал ряд обстоятельств:

- большинство данных получено только с использованием мотолики . {росляг .и в меньше» степени гг.чрегнационной техники, что нр 'авале основания гтля глубоких теоретических обобгарний. Соврр-<~кные цитохимические и електрсннсмикроскопические метопы исследования для характеристики реактивных процессов стали широко гепользовятьог лишь в последние 20 лет;

• для опенки функционального состояния нервных центров почти е применялись количественные цитофотометрические методы, а пк известно, материалы, не подвергнутые математической обработ-е. сопоставлять весьма трудно.

На злшиту выносятся слепукгпие положения:

- изменение активности ферментов в периферическом нерве условиях уоллеровской дегенерации происходит синхронно с

инамикой их изменений в нервных центрах.

- активность п'тролаз и оксиренуктоп колсблс-сл ог;от,е<\тст-*нно стапияы реакции нгйрона, покязптрлем которых являются его РуГУКТУрчиЛ и уль^рпструктугимр ПРОесТГО^КИ.

Апробация работы. Материя л* писсергании коложенк на нпуч-■й кпЛсрпнпии "Мср^рлогия раневого пронесся" (Санк^-Петгг— грг, IC92 ), на XI р-ъраае АГЭ (Смоленск, 1С"Г2), i-:a кси^прен-

мрлр>ч..х уч'-^.'Х ВП.!К (Владивосток. Iv03), на проблемней кс- . ¡pe?«! ¿r;,í: £1 гпрлгя ТСОЗ года.

tjVi-'jигации. Лр дкррегтапик сг.уб/.ккггенр ¡5 податных Сот. '

введения, обзора литературы, данных собственных исследований, обсуждения, заключения, выводов, указателя литературы, прилежания, Работа содержит 167 страниц ыаиинолисногг текст;;, 4С уис«/1; коь. Указатель литературы включает 103 рточестьнншх и 139 зарубежных источников. Диссертация.изложена на русском языке,

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и метопы исследования. Нами исслеповались проксимальный и дистальнмй отрезок седалищного нерва, спинномозговые узлы Ьу - Зц и спинной мозг кроликов на протяжении Ьу

Зд после перерезки седалищного нерва. В работе использовались клинически здоровые, половозрелые кролики в возрасте от 6 месяцев до I года. Оперативным путем в ассептических условиях острой бритвой перерезался правый седалицный нерв у выхода из малого таза. Исследования проводили через 12,24.36,48,72 часа, 5,7,10,15,20,30,40,60,90,180,360 суток после операции. Кроме того, для анализа использованы окрашенные по Нисслю, Кахалю и Кампосу гистологические препараты спинного мозга, спинномозговых узлов и седалищного нерва после повреждения его от кроликов принадлежащие Мотавкину (1956), Баранову (1968), Сидоровой (1972), Дороховой (1974), и приготовленные на кафедрах гистологии ВПйИ и ЯГШ. Для контроля обработан тот же материал от 5 здорошх животных, в основном на ферменты и ультраструктурные исследования.*

Исследование проводилось с помошью следующих методик: I. Ней[огистологические методики. Материал фиксировался

•»чгг-а^ьняя морфология узлов взята из работ Мотввкина (1956), Еа.лноьь (19С8), Сидоровой'<1572*, Дороховой 'Л974) за что г пор-приносит глубокую благодарность.

Г6г> спирте и импрогнировался по Кахалю в модификации Мотав-на (Т956). Для выявления базоФильного вещества применялся год Нио^лр с окраской срезов толшиной в 10 мкм в 0,1 Я отверг» т'плуипиновсй сини, "'.э нерва послр Фиксации 10 нейтря-

ньтм Формалином пелвлиоь срезы на заморагкизяюцем микротоме и

>

прргннровались по Кампосу. Для изучения изменений' в миелино-•1 оболочке нерв Фиксировали в жидкости Орта, затем срезы окра-вали по методу Марки.

2. Гистохимические методы. Кислая {ФосФогидролаза. моноз-ров ортофосфорной кислоты 3.1.3.1) и шелочная (фосфогидрола-монопфиров ортофосфорной кислота 3.1.3.2.) фосфатазы определись по методу Гомсри (1939) в свежезамороженных срезах тка-толшиной в 10 мкм. Материал, на выявление шдлочной Лосфатазл» {снрг.Еался хсггщт. 10 ^ нейтральным формалином или хслочнм :г>"Т. В кячеогви суГстрята примялся р- глицерофосфат. •!!В!"тть к!'сллй Фос^атпян »»являли на свежезамороженных оре-.. ¡'^гтглль№>е срезы дл<* фссфатпз инкубировались в без

-глииег.офос^ата или обрабатывались горячей водой для г,"яктн-|ии +ер»'е1!топ.

Сукшгка'-погмярогрказ? ( Г.3.99.1) определялась по методу ляся (Пирс, 1962) о нчтро-СТ при рН-7,6 на свекеяп"сро,ррннь,х зах, котогь'о заключали в глицерин-.телатину. Цктгхрггоксиля-(1.9.3.1.К) определяли по методу Нахласа (Берстон, 1965). убиргвание ^-атерияля проводилось в парафинилендиамине с нитрона Ф00*пт>!0" буфер«3 с рН-7,4. Срезы заключали в глииерин-ртпну. Синий осадок Форказана в виде гранул сЕидетельство-о наличии Фермента. С целью контроля проводилась темпера-ная иноктизацня Ферментов.

Для выявления холинсстераэ (ацетилхолинэстеразн - 3.1.1.7. и холинзстеразн - 3.1.1.8.) ш использовали тиохолкновый метоп. fc-ребиова (1953) с аиетилхолиниом и бутирилтиохолином. фермент обнаруживался по наличию в препаратах коричневых гранул сульфида мэди. Реакция протекает наиболее интенсивно при рН 6,2-7,(1.

Количественные данные получены на сканирующем штоденси-тонетро "Виккерс М - Ь5". Данже морфологических и гистохимических исследований подвергались вариаиионно-статистическоР. обра-оотке по Сгъвденту. Различия считались достоверными при р<0,05.

3. Электронномикроскопические исследования. Материал фиксировали 2,б/[ раствором г лют ара льде гида на фосфатном буфере в течение, одного часа. После обезвоживания в спиртах возрастающей концентрации, кусочки заключали в эпон 812. Срезы, контрас-тированнне уранилацштатом и цитратом свинца, просматривали и фотографировали на электронном микроскопе JEM -100В.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУВДВНКЕ. , . . .

Плестичнос j нервных элементов, их адаптационные возможности зависит от структурно-химической организации нейронов: состояния базсфильного вещества, нейрофибрилл, целостности синапсов, активности океиреду-ктаз и гидролаз, содержания гликогена, белков и прочих оиохим1ческих компонентов клетки.

Повреждение, седалишмго нерва вньывает в с.еответств^'ымх оогмептиг пых центрах динамичные морфологические и цитохими-чеекчи изменения. Учитывая последовательность ретроградны» Mi'iiinuti, можно говорить об этаанойти реактивного пргцесса. П.. i ыли г тал сгнзан с глубокими парз'шекиьми ррануляр.'ого э»;по-.•»tun.iwwn ротикулуга. Лсд сьетовнм мисроскопом :зтот этап-'

_ О _

халзктрризуотся разнообразной глубиной первичного раздражения нейронов: хроматолизом, набуханием тела, эктопией ядра.

Начало второго ота.пэ с0,-зано с восстановлением бязоФильного вещества. .Усиленный синтез зтого вешества и образование шероховатого ретнкулума ранъшр всего отмечается в околоядерной зоне и только позднее распространяется на остальную цитоплазму.

В перерр "вое суток пссле повреждения нерва каких-либо заметных изменений в мотонейронах не происходит: хроматолиз наступает только на третьи сутки. Мотонейроны более устойчивы к тврр^понию, чем чувствительные клетки спинальных ганглиев , Ьисаго, Г6?3, Нг^авкин 1?57). Максимальное число нейронов о '°зйгрегацией базофильного векества наблюдается на ТО-е сутки юсле оперативного вмешательства. К этому времени 65±4,5% мо-онейронов находятся в состоянии хроматолиза. В последующее вре-'я количество нейронов с изменениями баз обильного вешества ослеловательно от срока к сроку уменьшается и спустя год сос-авляет только 5-2,7?.

Восстановительный процесс в значительной части нейрсноь на-инлется уже на 15 сутки после операции, а спустя I месяц иперхрэмше нейроны с массивными накоплениями Оазофильного пе-*ствя регистрируется в 60-4,к кониу года число таких поток составляет всего л иль 1-2. уТ1.

Состояние базолильного вещества является не только Еопуцтм, > и глав!«»; цитологическим признаком для характеристики нор-1льней и поврежденной нервной клетки.

Ня црс("ггневлр?ме паролю затрачивается энергия, образуемая результате метаболизма. Эта анергия чг-споется из лвгамрвр^ких ?сфатов, главным оораоом - АМ. Креме апенсзинграфос^атаам,

органические фосфаты гидролизуются неспецкфическими ^ос^атаза-ми, активность которых в мотонейроне при повреждении аксона повышается. Особенно высоким уровнем функциональной активности но длительном отрезке времени обладает кислая фосфатаза, действие которой усилено в местах хроматолиза и синтеза базофильного вешества. Следовательно., кислая фоофомоноостераза катализирует как гидролитические, так и синтетические процессы, осуществляет реакции трансфосфорилирования (Диксон, Уэбб,, 1966).

Форме.нт не обнаруживается в местах завершенного хроматолиза там, где произошло полное разрушение гранулярно-трубчатой оргас^олла.'змн нейрона. Вполне возможно, что при гидролизе РНК освобождается энергия, которая используется для внутриклеточных процессов во время восстановления нейрона (Бродский, 1966).

Мм поддерживаем гипотезу об энергетическом значении РНК, исходя из следующих данных: РНК исчезает в местах тотального хроматолиза одновременно с кислой фссфатазой; восстановление базофилии и активности фермента совпадают во времени (Дорохова, 1971). Очевидно, утилизация РНК на ранних этапах ретроградного процесса носит приспособительный характер.

Исследования показывают, что ужз через сутки после травмы нерва активность окислительных ферментов в мотонейронах значительно снижается и сопровождается ультраструктурными изменениями. Ярким показателем'угнетения энергетических функций неС-рона следует считать несоответствие в активности ферментов, контролирующих окислительное фосфорилирование: низкая актив-пост., океиредуктозной системы при ¿нсокой активности гидролаз ^меньдацт запас клеточной энергии, баланс ее в ряде случаев

¡питается цо уровня, за котормм наступает некроз нейрона.

Ир,достаток энергии вследствие низкой активности окисли-■ельнсго гЬосфорклирегания t 'одопрецеляет угнетение пластичео-:их функций геНрона, что проявляется снижением концентрации елка в цитоплазме клетки в течение цв.ух першх недель (Доро-ова, I97I). В первче 2-3 недели энергетические Лункиии пов-руденнмх нейронов находятся в критическом состоянии. Их даль-ейгаер развитие определяет "судьбу" нейрона - его восстановлено или смерть. '

На пертрезку нерва наиболее динамично и ярко-реагируют готенейрогат. Изученный материал показывает, что врсетанови-рльный процесс начинается уже через сутки после трэвмн и продается в течение долгого времени. В разные сроки после пов-зщения керва восстановление имеет более ийи менее специфичес-ло морфологическую и цитохимическую характеристику, что поз-)ляет говорить, конечно, условно, о двух периодах.этого пропса.-

• В першР период, ограниченный цвугя-трекч недэлями, р 'вствотел.ьгах узлах преобладает явления роста нервных отгротков , г привсит г. оСрарсвонию структур веськс tie**ко встр^чркг.кхся нор/с. Грпьрк» всего появляются дольпг.тые и ра.*> фанетляе н-Ei-нн. После "»чип "исллН!!о чопянртот в тгч'енкр Ю-Т5 пней. В тс вр°мя за'.'рчя^тся густоте лерицеллюлярнте и интерстициалыгчо рвньге сети, стпоящиеся преимущественно из тонких волокон.

Периоду усиленного рост? соответствует дезагрегация бэ-^ильнрго вршества, которое последовательно исчезает из пго-туточной и краевой зон клетки, сохраняясь в большем или к^чь-

¡нем количестве в перинуклеарноП цитоплазме.. Изменения субстанции Ниссля коррелируют с динамикой цитоплаэматической РНК (Мо-тавкин, Баранов, 1971).

Второй период восстановительного процесса характеризуется увеличением числа мультиполярннх и, особенно, окончатых нейронов (Мотавкин, 1959). Среди атипичных элементов клетки последнего видя становятся преобладающими и сохраняются до конпя наблюдений. Из узлов постепенно исчезают неупорядочные нервные сети. Их заменяют перикапсулярные или перицеллюлярше аппараты, обра-зованнне тончайшими нервными волокнами с наличием пуговчатых и кольцевидных терминалей. В межуточной ткани узла открываются различной величины интерстициальные нервные клубочки, во многом напоминающие рецепторные образования других органов и тканей. Перечисленные гистологические изменения являются показателями плеточной дифференцировки, которая характеризуется не только морфологическими признаками, но и комплексом раэличвдх биохимических процессов. В этот период повышается активность гидролаз и оксиредуктаз (Ыотавкин и др., 1970).

Дольчатые и раздраженные нейроны образуются в узлах прежде других клеток. Они характеризуют ответную реакцию псевдоунипо-ляров непосредственно на травму. Это клетки с обратишмн морфологическими изменениями, дальнейшее развитие которых'определяется г ядом поеходящих или постоянно действующих факторов, таких как ирритация с поврежденных еолокон, нарупения интраганг-J,иона [.ной гемодинамики, индуцирующее влияние нейротропных ье-цеств. [нV. обстоятельства, несомненно, отягощс^т действие пер-(ч.чпото Фактора и приводят одни нейроны к гекробиозу, другие -

солее слсгнсй адаптационной перестройке.

Показателем процессов второго порядка являются окончатче етки, строение которых необратимо и более приспособленно к ном условиям сушествования. Преобладание окончатнх клеток в более зание сроки после операции свидетельствует в пользу такого епположения. Развивающиеся компенсации строго соответствуют пепеленным условиям, отягощение которых приводит к нарушениям ;1епсссбительнкх дифференцировок. Использовав биологически ак-

вше вещества, исчерпав энергетические возможности, клеточные 45

гменты сказываются^ состоянии адаптироваться к новым и, вовмоч-, более слсяннм требованиям; они превращаются в сенильшз элемен-, обреченные на некробиоз.

Так™ образом, морфологическая изменчивость псевдсуииполяр-с нейронов последовательно может быть выражена реактивной (доль-№ и раздраженные клетки), компенсаторной (окснчатые и мультипс-)ные клетки) и инаолютной ( сенильные нейроны) стадиями,качсдая соторых характеризует определенное состояние клетки, а ь целом [ иллюстрируют единый процесс, развивающийся под алллнием мнспп :торов. Следует указать, что атипичных клеток меньшинство, и ье они проходят полный цикл изменений. Кенробг.стическчо процессы ут развиваться в ялементах; нахопяпшчсч в перэг.,1, и> втор г и днях и, наконец, ь титгашх п^евдоунип^лярих г »;Лр -пах. В о-;».- -и посчепних сяеаует попчаркнуто одну дт?вл>: ; си ррьпн;!-

ЬГО СНСТ'. К рОЗЬпртПЗОИИИ ЯРНрРбцСЗВ , КАОТМ: поч -му-ю, В ■■

РМ О'ОЛКЯННРТВ* Р.ЛуЧООВ, ИМСПТ КОСО" 'КИР. .Л ГГ^чГК.'ОКИе Г'.'р' С"«";. м?:»!10, ч^о об/.яьот.ио таких простое ячляотея и^елддкП? »¡< ;

к пчг птгспи, которая не остячонлкваег, а няобсгст, гич ас т р",-рс'ки ускспяет некробиоз, так .так оЗсчас-г-чир» ч-.т.-V» ;■■>.• гл -

щает последние резервы энергетических материалов.

Представления о стадийности развития с конкретной оценкой биологических возможностей каждой клеточной форт имеет несомненное практическое значение. При всех заболеваниях, поражвюши: нервнуго систему, прямо или косвенно, атипичные клетки встречаются в том или другом.числе ( Каминский, Т590). Однако они не получили достаточно определенной оценки. Большинство учешх рассматривает зти изменения как явление, Функциональное значение которого, весьма проблематично. Об ятом, в частности, свидетельствует разнообразие терминов, применяемых исследователе для обозначения втипичных элементов: "избыточный", "старческий' "патологический","реактивный", "регенеративный" рост,что не объ няет сущности наблюдаемых форм. В. условиях повреждения перед исследователем выступает не первоначальный дефект, а сложная ре ция на него, направленная на устранение нарушенного в организме равновесия. Разделение атипичных элементов на формы с частичной или полной адаптацией позволяет судить не только о глубине патологического процесса, но и степени его компенсации.

Уоллеровсккй процесс в соответствии с его основными мсрфс-гистохимическими признаками можно разделить на три стадии. Первая •• некроз аксона - состоит из трех последовательно совершающихся Фаз - четковипных, Фрагментировандах и зернистых аксонов. Кропая - химическая декомпозиция миелина. Третья стадия -бюнгнепозмх лент. Согласно нашим наблюдениям в нервном волокне уолдсрсвсгаг дегенерация развертывается в центростремительном направлении. Наиболее рано повреждаются моторные блятаотт. Вслед за ними чегенерпрувт внутримышечные пучки нервных волокон.

ге медленнее дегенерирует нервный ствол.

Изучение феокентов в процессе уоллеровской дегенерации жазало, что вслед за перерезкой наблюдается общая реакция уюкня, которая усилена все не в сужениях ранвъе. Именно в ъгг*тх постепенно нарастает активность оксиропуптро и гиг-

Дпнямик'Э ферментов исключительно ярко хиреетошзувт •с цесгы, происходящие в.нервном волокне и подчеркивает егс •с;кную структуру ( котавкин, Сидорова, 1972). Активность скои-гпуктаз имеет две ({азы. Первая, более короткая, фаза начинает-1 с падения активности цитохромоксидазы и сукцикатдегидрогена--I, что продолжается до конца второй недели. Вторая фаза растрата во времени. В течение её активность оксиредуктаз вначитехь-) увеличивается, перекрывает норму и, несмотря на тенденцию снижению, к концу наблюдений не достигает активности, свсйет-гнной интактному волокну.

Инструментальные методы исследований показали большее содство изменений активности гидролаз. Диаграммы, построенные 1 основе изменения оптических плотностей как в отношение фос--1таз, так и холинэстеразы, характеризуются двумя почти поиное-ью синхронными пиками. Первый из них соответствует глубокой ;етрукции осевого цилиндра, другой - химической текочпопьт;!'. юлмна, Сопоставляя активность окислительных ферментов и пч-злаз, можно заметить две интересные закономерности.

Первая из них характеризуется угнетением скоиредуьтиз усилением активности гидролаз, сссбэкно кислой фосфато.?г в грвые трое суток. Длсооциания окислитэлъносо фоофоу ичи^эшмя --нстенке О'с.с; даз и повышение екгизногти фссф-ат.эз ярячегс*, эзыожке, одшаи из механизмов дегенерат: (Над а'.., 1 ,

ШЬоуу, Зу1гепвка, 1988).

На втором этапе уоллеровской дегрнерацин наблюдается си хронике увеличение актиЕности оксиредуктаз и гидролэз. Это характеризует, вероятно, нормализацию окислительного фосфори. рования и говорит о вдеоком уровне энергетических процессов . иванновских клетках. Следует согласиться, что роль оксидал шванновских олементов в дегенерации нервного волокна велика, однако только при целостности и непременном участии всего р.ш рата, обеспечивавшего знергетику клетки ( Ыагипеасо, К'И

Успешная регенерация нерва зависит от многих условий, ж происходит она при определенной готовности центрер регенерат и взаимодействии их со пванновекгй глияй в ппгиЛрричпрггг ст,-к? ио{>8?. Зрелость этой систем», '■Срснрч/пяу.псй рг.гм'ррашг. »титула су в спр^'-.е.^онн:'"® вре>*г, '.окапаю.""' датгг-'чг г^ '•-»ргетп",'«!:;'!!0 н штспЛ'сч.-к0 Лунки'/м к*"- '-у. . !•' гл "^й

иг гтп?-рйрс!'н и глг.-ки ыьсм'с.вскем глк1' ю'>г*к>г-т'ч.->'»кт0 ОТР^кр норн С ПС состоянию ртр^к^у'сно-мотгчо^ких кг^пом^^ов

во времени коррелируют к?жду собой. Отмечается синхронно* нем н^ние активности Ферментов. Если принять за показатель относи тельного благополучия клетки "норму", то вся система: сегментарные ь:-.ьтры, чувствительные узлы, бюнгнеровскио ленты приходят к от ой "ноп/о", примерно, в одно к то пе время - 3-4 недели псс;:е говрэ*дения периферического нерве.. Сходные п.анге/е ? отношении некоторых ферментов имеются в работах Галабова, Канолосе, Ичэва (1Р66), Галабова, Давидова, Мянолова (1969), Книа-ас 1о , Зоитс, (1£64), ЛагипаЪе, (1°бо). Репаратквннй рост аксонов из проксимального отрезка Норьег начиняемся через

oft суток и на 20 сутки они врастают в бюнгнеровские ленты 2 - 2,5 см их длины. Их дальнейшее продвижение привело у ного кролика - через полгода, у другого - через год к полному восстановлению функции конечности.

Согласно нашим экспериментальным исследованиям, отгрочен-

й шов на 3-4 недели с точки зрения состояния центров реге-

рации, должен давать в клинике наилучшие результаты (Григо-«и,

вич,I960г Mira, 1977, 1979, Миропнккова, Чумасов,I9Ó3, сов, Светикова, Петрова,1989).

Существенного внимания заслуживает вспрос о том, что же нхрониэирует процессы взаимодействия центра и периферии. Hi голняшний день по этому вопросу имеется большая л^ература, поиск "синхронизатора" интенсивно продолжается.Полагает, что анновские клетки синтезируют хемоаттракталта, стиыулиру-ле регенерацию ( Berry et al., 1987). В регенерации реферического нерва, как стимуляторы роста акоонои, участву-лейпептин, 4-аминопиридин, бета-фактор созревания глил ¡arman et al., • I9SI). В качестве информационной молекулу еду глиеД и центрами иннервации может быть щелочная фосфа-за, гамма-глутаматтранспептидаза ( Zalewal:i, 1991), но збое значение, как полагают, в информационном процессе игра-холиностеразм ( Svizenoka, Dubovy, Sychra, I95T). Этим свойством обладает даларгин (Акоев и др.,7.969), коллаген с. шженной антигенногтыо ( Новеп et а)., .Í9B9). лвминин

Lies! et ai., Н09), пльфа-меланотрорин ( bo-Jit, 1991). >Фа-тубулин ( Miller at s3., 1989). Пскас-онс, ч?г зти '.ества индуцируют в sксотсмкрованкм.ч cir.rrnr- i'.-F"vK.

bspoK GAP 43 и холинзстерззы стимулирлгт осрэяенани« w растущих Г.КСОНЯХ И ШВаНИОВСКИХ КЯРТК^Х СГ^иу^ИЧОСК'ЛХ ¡3, •тегоя которые усиливаются регрнеготиш-'нг пг^цпрры. ijr гепоРт, что окияг.ткчрокио fT>rciftoirpгтгf|>м ( Теtzlaff et al.,IC8C, biuz-2i, IT88: r 'liPWmii (Klein, Kilmer, Carlaen, Tibi*) В'-'Ц--«-ci vp yoiirr.i't:- j.orr>»»®paiy.»: '-"nr. г ■••■■г] г.^тци -

J4■ЗН'.то TCTOMV. o.r.fpico, ГГЯ вгсюиов/х-гип i.'phv г

практике и вглгени налогения ¿ива вожко«* онг-ченпс шо».т:- лсгцлг больных, квялуйикяция хирурга, комбинация травмн нерва с глубиной повреждения мышц, костей, о.ухояилий, кровеносных -сосудов ( Kailander et al., 1969).

Материалы наших исследований подтверждают известное положение о высокой реактивности и широкой морфологической изменчивости первкчночувствительных нейронов спинномозговых узлов. Более устойчива форма мотонейронов, которая в процессе реакции фактически не меняется. В то же время обе клетки - псото- и мотонййроч синхронно перестраивают -срою внутреннюю организацию. Особо следуем подчеркнуть одновременное начало активных восстановительных процессов в нейронах с готовностью к этому вгр»«рни ^вянчегешх клеток принять участие в регентши"" нерве. Няг не известна пока природа синхронизатора» ° его происхождении и с'тднестг »/ежно 'вмгкяяеть литль ориентировочные ссобряжония и, согласно литературным и неким данным, считать'"-оковим хглиносте разу. Зотгик связи с периферией не'прорывает контактов мст-ду 4yBCTBir'°."b!-.rO и двигательной клеткой, однако, между ними созда ¡07с:п ное-'о нгам'оотиоае.ния. Меняется качество информации и по грз-чинг иевроздзния синапткческогс пппарстг., екгкялн могут

гедевать как в анте-, чок и ретроградном направлениях (Мот а б -ли,1959). Находящийся в составе функциональной микросистем ::отснейрсн и двигательная клетка, вероятно, способны исполь-звать пту сигнализацию для синхронизации репаративных процес.-1В. Сложнее объяснить одновременную готовность центров и пэри-5рии взаимодействовать друг с другом. Наиболее вероятной обоюд-эй связью, в этом случае, могут быть клеточные медиатору, об-азующиеся в нейронах и леммоцитах. Сведения о природе этих зшеств интересны для нейрохирургической практики.

Экспериментальные данные, полученные на животных, могут чужить ориентиром и споре о том, когда же следует выполнять 1В поврежденного нерва? Существует мнение, что нпйросафив чедует сделать немедленно. Теоретически эта точка зрения опрь.тз-зня, не практически реализовать её весьма трудно. В бдитайшие ■1?. часов аксош в листальном отрезке цррва сохраняют а-пгоич-••скуо целостность и способность провопить электрический той. Бее же, ранней шов не поет благоприятных результатов кз-зэ южной гистоструктурн нерва. В составе его имеются, как самые :лстне волокна группы "А", так и тонкие безмякотные пповодни-I типа "С". Хирург должен обладать уникальной оперативней ¡хникой для того, чтобы совместить волокна центральной чаегк фва с соответствующей им ложей. Между тем, ьозмозшость тли: л типуляций остается пока лишь мечтой. С течением времени, на-I надеяться, эти трудности будут все яз преодолели. Однако и этом случае срочная нейрорафия можьт бн"1 сдельна Л1пъ пгрз--1чпннсму кругу пострсдавгаих, так кач тра.у/а нлрва. папирус гул1 1С го в лдлек з ст лечебных центрое.

- Р.0 -

Отсроченный на 3-4 нецели лор нервя, выгоден отнесптельш восстановительного процесса по двум обстоятельством:

- нейроны и иваиновскиэ клетки пс главным параметрам, харак- ■ теризуютим их энергетические и. пластические Функции способнь к этому времени участвовать в регенеращюнном процессе;

- ло*.и бюнгнеровских лент в связи с их перестройке?* и перекалибровкой могут принять новообразованные веточки от аксона любого диаметра.

Задача нейрохирурга состоит в том, чтоб" устранить щадящим способом препятствия (если они имеются), »"=!лнюыио взаимоде отвию проксимального и дистального гтгозкп червя. Яри я во, емп

пеняем профрссиоквxow, остальных работу нр сег'я бор-" пиеггия

t

гизни. заложенная в клетках природой.

В Ы В О Д U :

Т. /[егенярогдия нервного волэкня. - распад аксона и ыякотней ' оболочки - начинается' спустя 12 чссге, остаточные явления сохраняются через год после перерезки нерза. Через 2 недели исчезает продукты распада аксона, через 6 месяцев рассасываются трмгляцериды, а формирование бюнгрерошх лент не завершаемся спустя год.

2. Б чувствительных узлах (Формируются атиш-чные нервные клетки, ••изменяется базсФильнсе- ветество (оггас^рпгазма) в две

Фазы : а) дисперсия к лизис и б) вгеетяновлоние, сопровождают^ сп зн.'^трльпыг числом гияорхромннх НеГфГМОВ-.

Г.. Тиги"КЬ'м героичным раздражением (центрамы-ы" хроматолиз,

набухание тела и эктопия ядра) реагируют мотонейроны спинного мезга, что характерно пля первого периода реакции. Второй пе^иоп начинается с образования базоФильной субстанции в перь-¡ч'клеарнгй зоне.

Л'^гогозка иегпа вырывае1" первоначально угнетение цитохромокси-Р!<."ы и сукцлн^рргипрпггноам в периферическом отселке нерва, ь НРЙГ( н£х СНИНЧП'ОЗГОПЫХ узлсв 1! передних popjb спинного i'.::pa. низкал активность энзимов отмечена на- 10~15

pv, гг. Вссртанооленир структуры нейрона сопровождается выравниванием активности цитохрсмскси^азы и сукцинатдегипрогенагы

11.0 НОрМП.

Снижение и восстановление активности цлтохромоксипазы и сукци-нат.п.егидрогеназы коррелирует, с содержанием митохондрий в шван-ногских клетках, чувствительных и двигательных нейронах. В периферическом отрезке нерва активность щелочной и кислой фосфатезы, первоначально снижается, а в чувствительных узлах и сегментарных центрах спинного мозга повыпается, что по времени соответствует распапу или восстановлению базофпльного вещества.

Активность холинэстераз после перерезки нерва повышена. Наиболее высокой активностью в течение 6 месяцеб сблалнет ьцптил-холинзетераза. Активность холнностерагы нормализуется к 30 -45 суткам после операции.

К известным в литераторе синхронизаторам восстановления иерг..), согласно нашим наблюдениям,уожно отнести ¿цэт'илхсл.Ииостеррау по слеп/хиим признак,!?«: ч) активности ''ч ^tw м тр.., -• о "а . -.'сгь, i» и-^иод t,cc i з ae.cor ct- п>-1»-:гнч', ; .и;--, к: -холиняс repase. является специфическим фьр*1Н'»\:ц мод/г/гэьчт -.

обмена в холинергических синапсах, восстановление которых в поперечнополосатых мыпгаах составляет огтыел регенерации; в) цитоплазма тпванновеких клеток, гвигатолы*ых и чувствительных нейронов по л;1торат.урны1/ данным содержит ггцсптсг* к ацетшгхолину.

СШ'СОК. РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ'ДИССЕПдЦИИ

1. Уоллеровская дегенерация.и восстановительные реакции нейронов собственного аппарата спиннсго мозга.-107 с.-Деп. в "¿КНИТИ 04.11.92, № 3177 - В92(ссоавт. П-АЛставкишм, А.Г. Сидоровой, В.Ф.Барановым).

2. Активность окскредуктаз и йюсфатаз при регенерации нерва. .- В кн.: Тезисы научной конференции "Морфология раневого процесса", Санкт-Петербург, 199?, с.18.

3. Динамике, активности Ферментов в" чувечвитолы'ом -/ двигатель кем нейроне при де— и регеиоря1:ци а-'сена.-Б кн.Тезилы XI съезда анатомов, гистологов и опорке; сг ог. Полпазо. К"/1., С. ¿3 (о г грач. В.Барановым, А.Г. Стс: гг.оИ).

1. Х.'.лкг.Уптр-'ааы каг еннхргм:!оатп,ы регенерации '»лргс.л, Б кг.

ХТ кгнгррррр АГЭ. Зг^-р*, 1093, с 26.

5. Акт п несть Ферментов в нейронах спинного мг.зга и спинио-мозго'-ых узл.оь при повретлешги неива. В кн. Тезксьг докладов научно-практической конференции "Здоровье и болез ни человека на Дальнем Востоке". Владивосток, ВП.ВД, Т993, о. 16 (с еояэт. В.5-Барановым, А.Г.Сипоровсй).