Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Деструктивные и репаративные изменения в спинном мозге при травме (экспериментальное исследование)

ТВ од

На правах рукописи

. 1

!

САТАНОВА ФЛОРА СЕМЕНОВНА

ДЕСТРУКТИВНЫЕ II РЕПАРАТИВПЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В СПИННОМ МОЗГЕ ПРИ ТРАВМЕ (экспериментальное исследование)

14.00.23 - гистология, цитология, эмбриологии

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации иа соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА - 1990

Работа выполнена в научно-исследовательском институт мои а PAMI1

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, Г.Н.КРИВИЦКАЯ

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор В.П.ТУМАНОВ Доктор медицинских наук, профессор И.Н.КОГОЛЕПОНЛ

Ведущая организация - Научно-нсслсдовательскнй институт

нейрохирургии им. II.Н.Бурденко РАМП

Защита состоится " ... " .............. 1996 г. и ... часов

на заседании Специализированного ученою сонета Д 081.14.01 при Российском Государственном медицинском университете по адресу: 117869, Москва, ул. Островитянова, д. 1.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Российского Государственного медицинского униперснгсга (ул. Островитянова; 1).

Автореферат разослан "... " ............... 19% г.

Ученый секретарь Специализированного сонета Д 081.14.04. доктор медицинских наук,

профессор А.Н.ТИХОМИРОВ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА i'AliO l h!

Актуальность темы. Проблема регенерации структур сшшного мозга при его травме является одной из трудноразрешимых проблем медицины и биологии. В настоящее время достаточно полно изучен патогенез травматической болезни спинного мозга (Яковлева Л.А., 1954; Степанян-Тараканова A.M., 1959; Уиндль, 1959; Фримен, (959; Несмеянова Т.П., 1971; Лившиц A.B., 1990; R.Cajal, 1928;). Основным препятствием для регенерации нервных волокон при травме спинного мозга является поперечный спинномозговой рубец. В литературе имеются данные о нншбироэашш спинномозгового рубца в эксперименте различными ферментами и как следствие прорастание через него единичных нервных волокон (Несмеянова Т.Н., 1961; Коган О.Г., 1963; Матинян Л.А., Авдреасян A.C., 1965; Freeman L.M., 1953;). Одним из направлений в решении этой проблемы являлось применение различных трансплантатов при травме спинного мозга. Установлено, что имплантация в диастаз спинного мозга сформированных тканей (мышцы, формалшшэированный спинной мозг, периферические нервы) приводит к постепенному замещению трансплан гата плотной соединительной тканью, ню не способствует процессам регенерации нервных волокон (Яковлева Л.А., 1956; Несмеянова Т.Н., 1971; Юмашев Г.С., 19&4; Ткач Е В. с соавт., 1986 ; Gerard R.W.,1940;).

В 1978 году Е.В.ТкаЧом была высказана гипотеза о ведущем значении силовых линий магнитного поля на архитектонику соединительнотканных волокон в рубце, которая подтверждена экспериментально. Автором было показано, что при использовании постоянного, электромагнитного поля (ПЭМП) после полной поперечной перерезки сшшного мозга у крыс соединительнотканные волокна

располагались продольно, более упорядочено, соответственно длиннику спинного мозга и регенерирующие нервные волокна прорастали через рубец.

Поиск субстрата для стимуляции репаративных процессов в ¡•¡чином мозге при его травме привел нзе к. «спочкзонанию в качества

трансплантата -нрп шачНтелытх диастазах сшитою мозга у крыс деиатурнрованного желткового концентрата (ДЖЮ, который но сиосй природе не нуждается в резорбции и при термической обработке теряет антигенные свойства. Макромолекулы ДЖК представляют собой сложные биополимеры, расщепляющиеся после термической обработки на мономеры, легко усвояемые макрофа!амн. Продукты переработки, выделяемые макрофагами, используют с; для биосинтеза различных реконструктивных процессов при травме спинного мозга.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлось изучение морфологических изменений в спинном .чо.ие крыс при трансплантации денатурированного концентрата и воздействии постоянным электромагнитным полем.

Поставленная цель определила необходимость решения следующих задач:

1. Изучить динамику морфологических изменений в спинном мозге крыс при обширных его диастазах.

2. Изучить динамику морфологических изменении в епшшом мозге крыс при замещении его диастаза ДЖК.

3. Изучить морфологические изменения в сплином мозге крыс при замещении его диастаза ДЖК и воздействии постоянным электромагнитным полем.

4. Провести сравнительный анализ н выявить различия дннамнкн деструктивных и репаративных процессов в спинном мозге в исследуемых группах.

Научная новизна работы. Новизна работы заключается в

т-орфологическом обосновании применения денатурированного желткового концентрата и постоянного электромагнитного поля для стимуляции реларативных процессов при спинномозговой травме в эксперименте. Получены новые данные о роли ПЭМП в гистогенезе соединительнотканного рубца, образующегося в месте диастаза спинного мозга, которая заключается и ингнбировании -процессов пролиферации сосудов. Выявлен стимулирующий эффект ПЭМП на формирование "глиальных мостиков" и отмечена тесная связь между числом "глиальных мостиков" и высокой степенью регенерации

нервных волокон. Впервые получены данные о пучковом росте нервных Волокон в глиомезодермальном рубце и отмечен феномен отклонения нервных подокон от основного нервного ствола. . Впервые представлена динамика деструктивных и ренаративных процессов п епшшом мозге при применении биологического концентрата (ДЖК) и воздействии ПЭМП.

Теоретическая и практическая ценность работы. Оригинальный и нестандартный подход к решению проблемы замещений значительных диастазов спинного мозга при его травме позволил расширить представления о возможности процессов регенерации п ЦНС. На основании результатов исследований определены требования, предъявляемым к трансплантатам, замещающим диастаз сшшиого мозга и установить благоприятные условия для регенерации нервных волокон при воздействии ПЭМП с целью реабилитации больных при спинномозговой тпавме

Апробация диссертационного материала. Материмы диссертационной работе были представлены и обсуждены на: третьей Всесоюзной школе по современным проблемам регенерации (Йошкар-Ола, 1986), Всесоюзном симпозиуме "Регенерация спинного мозга" (Симферополь, 1989); симпозиуме "Макро- и микроуроини организации мозга" (Москва, 1992); межлабораторной конференции в НИИ мозга РАМН (Москва, 1994); семинаре "Биологические системы и электромагнитные поля" (Москва, 1995). По материалам диссертации опубликовано 8 статей, п том числе 1 монография п соавт."Магнитотераш!я острых травм спинного мозга", Алма-Ата, из-во "Наука", 1988.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения и 4 глав (обзора литературы, материалов и методик исследования, результатов исследования, обсуждения) и выводов.

Объем текста диссертации - 111 машинописных страниц, в состав диссертации входят таблица, 57 микрофотографий. Библиографический указатель включает 71 работу отечественных и 43 работы зарубежных исследователей.

Автор данной работы с глубокой благодарностью посвящает эти исследования своему учителю Е В.ТКАЧУ. Его идеи нашли воплощение в

настоящей работе и в исследованиях его учеников. Результаты исследований дали возможность установить ряд закономерностей пагогепеза травматической болезни сшшного мозга. Экспериментальная часть работы выполнена в лаборатории производственного травматизма и реабилитации больных с травмами спинного мозга Института физиологии и гигиены труда г. Караганды АН Казахстана.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Изучение динамики изменений структур еншшою мозга при образовании обширных диастазов, трансплантации ДЖК и его сочетание с воздействием ПЭМ11 проведено на 112 беспородных крысах самках. Выбор пола животных обуслов::-"! анатомической особенностью строения мочевьшодящих путей, который облетал послеоперационный уход за животными. Операции приводили под эфирным наркозом. В средне-грудном отделе спины выстригали и выбривали шерсть, после чего кожу обрабатывали антисептическими растворами. Тщательно обложив операционное ноле стерильными салфетками, производили разрез по срединной линии срс/ше-грудлого отдела позвоночника. Поэтапно, тупим и острым путем рану послойно углубляли до остистых отростков позвоночника поднадкостннчным отслаиванием мышц, обнажали костные пластинки. Глазным петрактором производили резекцию остистых отростков и костных пластинок одного или двух лаизонков.

После ляминэктомни, осколком бритвы, укрепленном па зажиме, дважды производили разрез в поперечном направлении по окружности сшшного мозга на расстоянии 2-4 мм друг от друга. Это обеспечивало полное пересечение всех проводниковых волокон и свободное удаление блока спинного мозга на средне-грудном уровне у животных 1 группы. В диастаз, созданный после уд. дшя блока спинного мозга, помещали денатурированный желтковый концентрат (вторая группа). Животным третьей группы после трансплантации' ДЖК проводилась мапштотерапни. Мышцы ушивали 1-2 кетгутовыми швами, кожу - 3 шелковыми швами, рану обрабатывали антисептическими средствами.

iloc.ie операции крыс помещали в специальные ящики и укладывали на лшют. В последующем, послеоперационном периоде, животным четыре раза в день выводили мочу, путем надавливания на мочевой пузырь до восстановления акта мочеиспускания. Для профилактики пролежней животных обмывали и обсушивали.

Для проведения магнитотерапии в лаборатории производственного травматизма института гигиены труда и профзаболеваний г.Караганды, под руководством К. 15.Ткача, был создан аппарат собственной конструкции (рац.предложение N 147 от 9.12.1976 года).

Аппарат постоянного электромагнитного поля представлял собой установку, рассчитанную на одномоментное воздействие магнитным полем на 4 животных. Сечение соленоида 115 х 115 мм, длина 220 мм. Выпрямитель двухполупериодный, со стабилизированным выходом 180-200 В., сила тока в цени соленоида 350 мА. Электрическая обмотка соленоида - 22500 витков, с отводами ог каждых 500 витков, провод ПЭЛ-0,8. Внутри соленоида создавалось магнитное поле с индукцией 38 мТл. Параметр! ■ соленоида выбирались соответственно размерам животного и обеспечивали свободное продольное расположение в нем тела крысы.

По окончании эксперимента животных усыпляли эфирным наркозом, затем извлекали позвоночник вместе со спинным мозгом. Позвоночник фиксировал» а 10% растворе нейтрального формалина в течение 1-1,5 месяца. После фиксации выделяли снииной мозг и проводили через спирты по восходящей крепости.

Морфологическому исследованию подвергали участок спинного мозга на 1 см выше и ниже места деструкции, а также весь участок диастаза. Заключенные в парафин участки спинного мозга резали сагнталыю. Срезы окрашивали по следующим методам:

1) гематоксилин-эозин - общая гистологическая картина;

2) азур П-эозин - на клетки соединительной ткани;

3) метод Пнссля - внутриклеточная организация нейронов;

4) импрегнация серебром по Глису - на нервные волокна, нейрофибриллы;

5) метод ван Гизона - на соединительнотканные волокна.

Подопытные животные были разделены па 3 группы. В первую, контрольную группу вошло 21 животное, которым был удален фрагмент спинного мозга и экспериментально создан диастаз спинного мозга. Животным второй группы (23 крысы) в диастаз спинного был трансплантирован денатурированный желтковый концентрат. Животным третьей группы (68 крыс) после трансплантации ДЖК в диастаз спинного мозга проводили магниготерапию (экспозиция 1 час, индукция магнитного ноля 0,38 мТл, ежедневно). Характеристика экспериментального материала представлена " таблице.

ТАБЛИЦА

ХАРАКТЕРИСТИКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО МАТЕРИАЛА

Условия эксперимента Длительность жизни (дни) коим жшнм

до 7 8-14 15-21 22-30 31-60 61-90

1 группа - контрольная 7 3 2 3 2 4 21

2 группа трансплантация ДЖК 8 3 2 2 2 6 2.3

3 группа сочетание ДЖК и ПЭМП 28 13 7 4 5 11 68

Как видно из таблицы наибольшее количество животных погибает в первые 7 сутох. Ранняя гибель крыс объясняется, во-первых, тяжестью нейрохирургической операции на спинном мозге; во-вторых, появлением осложнений в послеоперационном периоде в виде пролежней, пиелонефрита, уросенсиса и пр.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

I. Морфологические изменения в спинном мозге при обширных его диастазах.

Морфологические исследования спинного мозга при обширных его диастазах позволили выявить определенные закономерности течения патологического процесса.

Через 2 дня после удаления блока спинного мозга у контрольных крыс отмечается кровоизлияние в диастаз, отек белого вещества, серое вещество культей спинного мозга пропитано плазмой (плазморея). Явления набухания распространяются и на нейроны спинного мозга выше и ниже места травмы. Набухшие, увеличенные в размерах нейроны подвержены хроматолиз^. Отмечены явления нейронофагии, "клетки-тени", вакуолизация цитоплазмы. Клетки глии серого и белого вещества обнаруживают умеренную склонность к пролиферации. Нервные полокна также подвергались деструктивным изменениям, которые заключались в их набухании, на концах волокон колбовидные расширения (шары раздражения). Многочисленные волокна находились в состоянии распада, что выражалось в фрагментации аксонов п виде четок.

Вокруг сосудов отмечено расширение периваскулярного пространства, небольшая лнмфоцитарная инфильтрация, периваскулярное кровоизлияние. Количество макрофагов в культях спинного мозга незначительно. В области рассечения спинного мозга отмечены тонкие тяжи дифференцирующихся клеток фибробластического ряда, начало пролиферации из оболочек мозга тяжей соединительной ткани, имеющей поперечное направление по отношению к длншшку мозга.

Спустя 7 дней от начата эксперимента наблюдается некоторое уменьшение степени выраженности деструктивных процессов в нейронах, реже обнаруживаются вновь распадающиеся нервные клетки. Большая чаоь нейронов в культях спинного мозга находилась в состяпни ретроградной дегенерации н гилерхромнн. Однако признаков восстановительных процессов в нейронах обнаружить не удалось. Со стороны клеток глин отмечена активная пролиферация. В ткани ешмиого мозга выше и ниже мата травмы наблюдался интенсивный распад нервных волокон с большим количеством глыбок миелина и миелшювых шарон Признаки дегенерации нервных волокон выявлялись на некотором расстоянии от основания культей сшшнон) мозга. Деструктивные процессы проявлялись возникновением варикозных утолщений но ходу осевых цилиндром и набуханием терминальных аппаратов.

Между культями спинного мозга отмечена крупная полость, заполненная жидким, прозрачным содержимым, формировалась киста спинного мозга. На границе культей и полостей появляется широкий слой соединительнотканных волокон, расположенных поперечно длиннику спинного мозга. Клеточный состав его представлен и основном фиброцитами и клетками глии. Стенки сосудов в культях спинного мозга отечны, отмечено полнокровие. Наблюдается бурная гнетноцитарная реакция как гистиоцитов вещества мозга, так и адвентициальных клеток. Вокруг сосудов отмечается пролиферация фибробластов, гистиоцитов, макрофагов. Наблюдалось также образование тонкостенных кровеносных сосудов в глиомезодермалыю.м рубце.

Через 2 недели после операции у части нейронов отмечено состояние тяжелого перерождения, гиперхроматоз, сморщивание. Отмечена гиперплазия ■слеток глин с образованием глиального вала в основаниях культей спичного мозга. В нервных волокнах появлялось большое количество нервных волокон с признаками распада: миелиновые шары, глыбки миелина, сегментарные полосы демпелшшзацин. Наряду с деструктивными процессами и нервных волокнах отмечались начальные реиаратнвпые процессы, которые проявлялись в образовании тонких, извилистых волоконец с "колбами роста" на концах.

В участках некроза спинного мозга большое количество мелких "»вообразованнмх сосудов, которые прорастают в глиомезодермальпый рубец. Между культями снниного мозга образуются ? крупные полости, разделенные тединителыштканной перегородкой. Стенки полос-тей организованы соединительнотканными волокнами, клеточный состав стенок представлен фибробластамн и клетками глин в незначительном количестве. Незначительная часть полости частично заполнена коллагеновыми волокнами, макрофагами, фибробластамн, клетками глни. Содержимое полостей гомогенное, бесцветное.

Спустя 1 месяц после операции у контрольных крыс отмечено нарастание деструктивных процессов в нейронах. Большинство нейронов находились в стадии распада, сморщивании. В нейронах, лежащих на несколько сегментов выше места травмы, происходит развитие классической аксональной реакции - эктопия ядра и ядрмшка, центральный хроматолиз. У части нервных волокон была типичная картина характерная для ретроградной дегенерации (в обоих отрезках). К концу первого месяца после операции нервные волокна в процессе роста и разветвления сильно уюнчаются и приобретают терминальный вид. Необходимо отметить, что волокна лишь подрастают к зоне рубца, но не прорастают через него.

Новообразованные сосуды идут широкой полосой от периферии спинного мозга к его центральным отделам. В краевой зоне культей спинномозговой рубец представлен плотными коллагеновыми волокнами, расположенными перпендикулярно оси спинного мозга. Клеточный состав рубца обеднен и представлен фибробластамн, фиброцитами, макрофагами. Как и в предыдущие сроки наблюдения, между культями мозга сохраняются 2 крупные полости. Стенки полостей, но сравнению с 2-х недельным сроком, более плотной, грубой структуры. Коллагеновые волокна плотно прилегают друг к другу, между которыми располагаются фиброциты. В просвете полостей отмечено частичное его заполнение коллагенновыми волокнами, клеточными элементами (фибробласты, фиброциты).

Через 2-3 месяца после удаления блока спинного мозга нейроны верхней и нижней культи были без признаков ретроградной дегенерации, .-.легка гипертрофирование, гннерхромные, некоторые из них двуядерные. Часть

нервных волокон выше и ниже места операции была деформирована и фрагментирована. Регенерирующие полокна прослеживались до

спинномозгового рубца, но ни п одном случае мы не наблюдали прорастания нервных волокон в рубец.

Процесс созревания рубца усиливался. Зона повреждения уменьшалась в размерах, стягивалась плотным соединительнотканным рубцом, идущим поперек оси спинного мозга. Рубцовая ткань замуровывала макрофаш. гистиоциты. Рубцово измененные мягкие мозговые оболочки, инфильтрированные лимфоцитами, содержат большое количество

новообразованных сосудов. От них идут соединительнотканные тяжи внутрь спинного мозга. В этих тяжах много фиброциюп, имеющих палочковидную форму. Полости, образованные в месте диастаза спинною мозга, имели хорошо организованную капсулу. Стенка капсулы состояла из н ипных оедннигельнотканных волокон.

. Анализ морфологических изменений в спинном мозге при образовании обширных днетазов показал, чго в ранние сроки пос ле операции преобладаю г деструктивные процессы во всех структурах нервной паренхимы и стромм, чго позволяет характеризовать течение процесса до 2 недель после травмы как деструктивно-дегенеративную стадию травматической болезни спинного мо.иа. В более• поздние сроки эксперимента на фоне деструктивно-дистрофических изменений нарастают ренаратипные процессы, выражающиеся и ор1аннзацнн рубцовой ткани, новообразовании сосудов, реггнераннн нервных волокон. К 2-3-м месяцам происходит завершение сг;иин формирования рубца к основаниях культей спинною мо.иа, а в месте диастаза образуются крупные ПОЛОСТИ, стспки КОТОрЫ.. формируются ИЗ 11.101 ной соединительной ткани Несмотря на регенерацию нервных проводников нрираашши их через р)бсц не наблюдалось. Результаты исследований морфилошческих изменений при обширных диастазах сшитого мозга согласимся с гистологическими исследованиями травматической болезни сшншшо мозга у больных и животных Стенанян-Таракановой А.М.(1!Ш), Терещенко. Т.К. (1974), Богонатовой Л.П.(1988).

2 Лсструктипныс и ренаративные процессы в сппнпом мозге при трансплантации ДЖК и воздействии НЭМП

Через 2 дня после трансплантации ДЖК в диастаз спинного мозга морфологические изменения в культях мозга и в самом трансплантате протекают идентично у животных второй и третьей групп.

Отмечаются начальные процессы деструкции в нейронах и нервных волокнах каудального и краниального отделов спинного мозга. Нейроны, расположенные ближе к месту травмы подвергались изменениям, характерным для первичного раздражения: центральный хроматолиз, эктопия ядра. У многих нейронов отмечена эмиссия ядрышковых глыбок. базальные отростки пеироноп гипертрофированы и видны на расстоянии. Нейроны каудального отдела спинного мозга более подвержены деструктивным изменениям: пернцеллюлярный отек, гиперхромия, уменьшение размеров ядра, эктопия ядрышка.

Нервные волокна как с краниальной, гак и с каудалышй сторон спинного мозга подвергались значительным деструктивным изменениям. .С м извитые, гипертрофированные, с шаровидными утолщениями на концах. Вещество сшшиого мозга отличается криброзностыо в зоне деструкции с обеих сторон культей. Методом Глиса определялись отшнурованные, изолированные миелиновые шары. Ядра глии в сером веществе без явных признаков изменений, в белом же веществе отмечена активггая пролиферация ядер глии.

Наряду с деструктивными процессами в нейронах и нервных волокнах спинного мозга происходят и репаративные изменения в виде пролиферации сосудов и образовании аргирофильных волокон между глыбками ДЖК, что согласуется с положением П.Е.Снесарева (1946) о том, что аргнрофильные волокна первыми начинают размножаться в мозге при репаративних процессах. Их появление генетически связано с размножением и гипертрофией адвенгициальных фибробластов. Аргнрофильные волокна сначала появляются в стенке сосудов, затем распространяются и вне ее, образуя волокнистые сети без клеток. Аргнрофильные волокна, образующиеся между глыбок ДЖК представляют собой сеть, не содержащую клеток. В результате пролиферации аргирофильных волокон трансплантат не распадается и через 2 дня он

представляет собой единое целое, состоящее ил глыбок желткоиого концентрата, соединенных между собой аргнрофильными волокнами.

Через 7 дней после операции у 2-х групп подопытных крыс выявляются ■у щсственные изменения структур спинного мозга.

Нейроны верхнего и нижнего отрезков спинного мозта крыс, леченных II.-JMH, имели более сохранную структуру, по сравнению с таковыми ко шорой группе. Нигоплаз! а и ядра большинства нейронов имела близкую к норме структуру, ядрышко никноморфное, иногда эктоннровано. Ниже уровня травмы спинною мозга наряду с сохранившимися нейронами отмечались гнперхромные, а также ■ тнпохромные клетки в состоянии набухания Изменения нейронов спинного мозга у животных шорой группы выражены сильнее. Они подвергались набуханию (крупное ядрышко, ядро не кон турнроналось, цитоплазма светлая, ro.voi енная), сморщиванию.

Iтшерхроматозному окрашиванию.

Количество ядер глин у крыс обеих экспериментальных групп имело генденцию к уменьшению. 13 основаниях культей отмечалась гиперплазия ядер [лнн с образованием глначьною вала.

Изменения нервных волокон н культях спинною мозга у крыс второй группы носили регрессивный характер. Большинство нервных волокон, подверглось распаду. IIa фоне некротизнрованноп нервной паренхимы спинною .мозга наблюдались гипертрофированные нервные волокна, миелинопые шары У крыс, леченных ПЭМЧ, наряду с деформированными волокнами в культях спинного мозга наблюдались сохранные нервные ho'iokiu разного калибра

У животных второй группы обращает па себя внимание обширна» •ролиферання сосудов, которые прорастали трансплашат по всему обьечу. И третьей группе сосуды отмечены только в зоне л< гфукпни и срелп г пчбок ДЖК. лежащих н непосредственной б икюстп к (и новациям культей спинною мозга.

Количество макрофаюв в куп.гях мола ч'рс» 7 дней ног. к-грашммлпгашш ДЖК резко вотрясталп Макрофаги v<;\rпитали im i;..iii;m ii процессе самсичкке.'шы раны от нрелпппн расшил w ¡ч-иы.ч волокон 11 ' чршл. по н в поглощении 1г ||('.р>'пар|кчшш1 частичек Д«КК Питон тазма 'fit. | мф.но.!.

1.1

расположенных и культях мол га, содержала фра! менты распавшихся мнелокластоп нервных волокон, а те клетки которые окружали т.тыбки ДЖК имели включении и виде мелких зерен. Пели при применении различных трансплантата» не отмечено выраженной макрофшллмюи реакции (Яконлепл Л.Д., 19.")Í; Несмеянова Т П., 1971 и др.), то при трансплантации денатурированного желткового концентрата мы наблюдали выраженную макрофагальную реакцию в си пег на внедрение трансплантата. Можно вредно тожтпь, что это связано с биологической природой ДЖК, который вызывает усиленную реакцию со стороны иммунной системы организма. Максимальное количество макрофагов п культях спинного мозга отмечено к 7-М-гн дням после введения желткового концентрата в диастаз шинного мозга в '■•беих сравниваемых группах. Процесс "переваривания" и "поглощения" ДЖК оканчивался к 3-1-м педелям после операции.

Через 2 недели после трансплантации ДЖК но второй труппе животных деструктивные изменения нейронов и нервных волокон с обеих сторон культей снииион) мо ла нарастали

Волыная часть нейронов находилась в состоянии набухания, резко выражена вакуолизация цитоплазмы, что придавало клеткам пенистый вид. Вазофи.н.ное вещество сохранялось п виде небольших островков окот ядра Ко тчеггно еагеллнтной и лнффуинш глин

резко уменьшено. I) группе крыс, леченной ИЭМИ, у большинства нейронов паблюда тсн частичный гиперхрочатоз, набухание апикального отростка и ядра.

■Чпачтпелт.ная часть нервных волокон в культя:; спинного мозга у животных [порой группы подвергатась распаду. Подокна деформированы, с образованием па их концах мне шитых шаров. В нар» нхиме мо на образуется •ШОН ei; 1 lio Mi; 1КГЯЧ0ИСТЫХ ноюстей. У Ч 1П:С)| ЦТ14*. НрОШСДНПГХ курс ítaiHHioi'-painni. паблюдаеи я попообраюпжи" ii'-pi них волокон в виде снра\ ITTIÜ а {обра юпанне китих .жеонов), наличия ко |б рое in на концах и нрор.'к I анне но юкон черо ч:ну деструкции Гана и.нме к тгючныг тя.т:п Нролифернр.кп Hill'. Hill (IHHITI.'IO ПО'га. I'pop." 1 Ч'Н ч . Í зону lrC I рУ MIHI! и

вра;: шин н ч .иппантаг. И" х<цл т.тна и-и'-г; ••< • isifii nprr н .кпр.ч'меч

ih piuii.ii i ¡ .i н i е Ki i.'ifi.iMii ро; i а

В начальных участках ДЖК, на стыке с культями спинного мозга, определяюсь скопление макрофагов с богатыми включениями. С каудалышй стороны отрезка спинного мозга обнаруживалось чередование клеток (макрофагов, ядер МИН, фибробластои) и соединительнотканных волокон. В глубине трансплантата отмечалось большое количество макрофагов, окружающих глыбки ДЖК. У животных второй группы между глыбками трансплантата формировались коллагеновые волокна более грубой структуры, которые окрашивались по методу ван-Гнзон в красный цвет. С краниальной стороны спинного мозга сохранился плавный переход культи в трансплантат, без образования поперечного рубца.

Характер пролиферации сосудов идентичен таковому через 7 дней после трансплантации ДЖК. У животных, леченных ПЭМГ1, количестьо капилляров гораздо меньше, чем во второй группе животных. У последних выявлялось увеличение количества и диаметра просвета капилляра».

Через 1 месяц после трансплаптаинн ДЖК и верхней и нижней культях спинного мозга сохраняется деструкция большинства нейроои. Их тела деформированы, цитоплазма вакуолиэирована, гинохромна. Вокруг многих клеток отмечался иерицеллюлирный отек. У животных, получавших стимуляцию ПЭМП, преобладали нейроны с признаками -аксонального раздражения, что выражалось в эктошш ядра н ядрышка.

По сравнению с 2-х недельным сроком наблюдений в культях спинного мозга резко увеличивается количество ядер глии. Причем у животных, получавших стимуляцию ПЭМП, количество глиальных мостиков значительно превышает таковое во второй группе. Глиальные мостики представляют собой организованную структуру, состоящую из последовательно расположенных клеток глин. Расположение глиальных мостиков в глиомезодермальпом рубце хаотично, одни из них лежат параллельно длишшку спинного мозга, другие поперечно.

Соответственно- расположению глиальных мостиков п глиомезодермальпом рубце наблюдалось и расположение регенерирующих нервных волокон. У животных третьей группы врастание нервных волокон и глиомезодермальную ткань происходило с обеих сторон культей спинного

мозга, по более выражено с краниальной стороны Регенерирующие нервные волокна прорастали глиомезодермальный рубец п пиле отдельных пучков (до 2-5 волокон) или одиночных волокон. Волокна в пучке размещались либо параллельно друг дру|у, либо хаотично. Па концах волокон наблюдались колбы роста или по ходу волокон отмечались варикозные расширении. У животных второй груши,i формировались единичные г.тмлдЩ1Ые мостики, т лиомезодермалытую ткань прорастали единичные нервные полокна, образования пучков не отмечено.

Процесс поглощения ДЖК .завершается. I) зоне диастаза образуется новая ткань - глиомезодермалытая. II обоих группах животных глиомезодермальный рубец представлял собой нежную рыхлую • ткань, клеточный состав которой представлен макрофагами, фибробластами и ядрами мин. Архитектоника переходной юны niiiiinoiо моща в г.тиомезодермальную ткань н исследованных группах заменю отличается. У животных, получавших II3MII, краниальный отдел спинною мозга плавно переходит в i лиомелодермалытую ткань замен ich hoi о трансплантата без поперечного грубого рубца. На границе каудадыкно о (резка н замещенном ткани отмечается образование кнегозных полостей среднего диаметра. В то же время у крыс н горой ipvniiM имеккгя поперечные коллатсновые волокна на границе г.нтмслодерма ишой ткани и краниальной культи спинного мозга. Однако не образующие плотного поперечною рубца. На Гранине каудальпого отрезка спинною и глиомезодерчальнон ткани вошикала обширная полость.

Отличие морфолошческой картины и исследуемых группах состоит в большем количестве (формированных глиалытых клеточных мостиков, определяющих массивный рост нервных волокон с образованием пучков у животных, подвергавшихся воздействию ПЭМП и наличием единичных i/шальных мостиков и небольшим количеством регенерирующих нервных волокон у крыс второй труппы.

В .жеш'рнментальных исследованиях, проведенных Т.П.Несмеяновой (1971), при использовании ж-дченн« релербнрумщето трансплантата было отмечено увеличение числа i .шальных клеток в ростовой зоне, что способствовало более обильному отрастанию нервных волокон с "колбами

роста" но сравнению с контрольной группой. По мнению Т. 11.Несмеяновой эют факт подчеркивает возможность участил нейроглии в трофической функции нервной системы и указывает на возможность активации метаболических ироцессац, приближая их к условиям на периферии, где шванновекпе клетки при повреждении нерва пролиферируют и формируют бю( перовские тяжи, которые являют ся направляющими структурами растущего волокна (Дойников B.C., 1955; Фукс Б.Б., 1959). Морфологическая картина распределения глин и культях спинного мозта а обеих группах в нашем материале имела существенное различие. Во второй группе наблюдалось скопление клеток глии в основаниях культей в виде глицлыюго ьала. При трансплантации ДЖК и воздействии ПЭМП отмечалось образование гли-альных мостиков, в виде тяжей из ядер глии, растущих из паренхимы епшшого мозга и врастающих в глиомезодермальный рубец. Глиальные мостики впервые оиисаиы Подачиным В. Г1. и соавт. (1983) при гладкой поперечной перерезке спинного мозга у собак и последующим склеивании культей специальным медицинским клеем.

Нами установлена взаимосвязь между степенью образования глиальных мостиков и процессами регенерации нервных проводников. Глиальные мостики создают как бы матрикс, но которому растут регенерирующие аксоны. Чем больше формируется глиальных мостиков, тем интенсивнее прорастание нервных волокон через зону деструкции сшитого мозга. ПЭМП стимулирует процессы формирования глиальных мостиков, определяет их направленный рост соответственно оси спинного мозга. Рост нервных волокон по глнальным мостикам имеет сходные признаки с регенерацией периферических нервов, где шванновские клетки создают условия для регенерирующего аксона (Abercrombi М., Johnson M.L., 1942).

Созревание грануляционной ткани происходило к 2-м месяцам после операции. У животных, не получавших магнитотерапию,

соединительнотканные волокна более коллагенизированы, плотно пролегали друг к другу, ткань обеднена клеточными структурами. Грануляционная ткань животных, леченных ПЭМП отличалась от предыдущей группы своей архтектоникой. Коллагеновые волокна, основная масса, располагались

параллельно оси спинного мозга. Количество клеточных элементов в этой группе гораздо больше, при гном преобладали ядра олигодендроглни.

В нейронах верхней и нижней культей второй группы наблюдалось нарастание деструктивных процессов: вакуолизация цитоплазмы, деформация клеточной мембраны, иерицел.тюлярпнн отек; появляются кле1ки-тсни и инкрустированные нейроны. В полднем периоде отмечены единичные гипертрофированные нейроны, что творит о проявлении репаратиппых изменений в клетках. По-мнснию Э.П.Поповой, С.К.Лапина и Г.Н.Кришшкой (197(5) пшертрофня нейронов • является признаком ренарлтшшмх и компенс.тгорно-нрисносойнгслытых процессии в IШС.

При трансплантации ДЖК и воздействия ПЗМП преобладали обратимые изменения нейронов: набухание, нерицеллюляриый отек, центральный хроматолиз, жтопия ялра. Отмечены также необратимые изменения нейронов (клетки-тени, инкрустированные клетки). В более отдаленные сроки после операции нарастают репаратнвные изменения нейронов с тенденцией к нормализации их структуры. Проявлением компеисторишо характера изменений является гипертрофия отдельных нейронов. Выше места травмы тннертрофиропанные нейроны превосходят по обьему цитоплазмы, ядра и ядрышка мотонейроны, расположенные ниже места травмы. При лтом характерно укрупнение г.тыбок базофнльного веитества цитоплазмы, крупное, светлое ядро, окруженное утолщенной ядерной мембраной, гипертрофированное ядрышко с эмиссией ядрышконых г.тыбок. Умеренная гипертрофия нейроном может быть материальным субстратом усиления функции сохранившихся клеток при гибели других и явиться источником регенерации нервных проводников при активной реакции со стороны г.пш (Кривнцкая Г.II., 19(>1).

Архитектоника глпомеюдерма.тьного рубца резко отличается в сравниваемых 2-х группах крыс. У животных второй группы отмечалось уплотнение соединительнотканных волокон, обширная пролиферация сосудов, неоднородность структур их стенок и деформация. Глиалытые мостики формировались в незначительном количестве, а' их архитектоника отличалась рыхлостью. Регенерирующих нервных проводников немного. В группе

животных, леченных ПЭМП, глиомезодермальная гкань более рыхлая по своей структуре с большим числом клеточных элементов (фнбробласты, клетки глии, макрофаги). Количество сосудов меньше, по сравнению со второй [руиной, стенки сосудов не имеют инвагинаций и выпячиваний.

Глиальные мостики представляли собой организованную структуру и создавали остов для регенерирующих нервных проводников. Число глиальных мостиков определяло и количество регенерирующих нервных волокон. При стимуляции ПЭМ11 отмечалось массивное прорастание нервных волокон с образованием пучков. Впервые наблюдалось отхождение нервных волокон от основного пучка иод разными углами.

Через 3-й месяца эксперимента у крыс, без стимуляции ПЭМП, в культях спинного мозга обнаруживается полиморфизм структуры нейронов, преобладали резко импрегнированные нейроны и клетки-тени при наличии единичных гипертрофированных клеток. Вокруг дистрофн-чсски измененных нейронов наблюдается перицеллюлярный отек. У животных, получавших магнитотерагшю выявляются типичные для нормы нейроны с хорошо выраженными, крупными глыбками базофильного вещества, которые равномерно распределяются по всей цитоплазме.

В обеих группах животных отмечено прорастание регенерирующих нервных волокон через зону деструкции, их количество гораздо больше прн стимуляции ПЭМП. Разница не только количественном отношении, но и в качественном - ориентации подокон внутри пучка. Как отмечалось и в предыдущем сроке исследования закономерным был феномен отклонения волокон в пучке. Эффект постоянного магнитного поля проявлялся также и ингнбировании процессов пролиферации сосудов, что прослеживается от 7 дней до 3-х месяцев эксперимента.

Полученные данные свидетельствуют о стимулирующем влиянии ПЭМП на репаративные процессы в нейронах, нервных проводниках прн травме спинного мозга и ннгибирующее - на пролиферацию сосудов. Однако, деструктивные изменения нейронов сохраняются, хотя и менее выраженные по сравнению с таковыми при применении только биологического концентрата.

Анализ динамики морфологических изменении п спинном мозге крыс при трансплантации ДЖК позволил прийти к заключению, что ДЖК является биологическим нолиуером, состав которого позволяет, без дополнительных процессов ферментации, утилизировать его макрофагам. Макрофаги, в спою очередь, поставляют необходимые биоло-шческие .-элементы для синтеза белков, идущих на процессы репарации нейронов, аксоиллзмы регенерирующих нервных полоком и глномеэодермалыюго рубца Макро(|)агальная реакция на трансплантацию ДЖК H последующая реорганизация структур спинного мозга позволяют сделать заключение о прямой связи процессов регенерации и фагоцитопа.

В созревании грануляционной ткани, ведущее значение имеет сосудистая реакция. Источником физиологической регенерации соединительной Iканн впляются капилляры (Смольяннпкоп А.В., Саркисов Д.С , Малыши Л.Л., 1!)Я1). Исследования Лейгеса СМ. (НИ.)) показали, что большое количество капилляров, формирующихся п ткани, повышает степень окисления и ведет к усилению дифференниропкн клеточных злементов соединительной ткани, то есть к се уплотнению. По результатам наших исследований можно судить, что ранняя пролиферация сосудов влечет за собой и образование более грубого соединительнотканного рубца. Постоянное ■ текгромашитное поле играет значительную роль в морфогенезе соеднннтелыюй ткани, которая проявляется п ннгибиропаннн процессов пролиферации сосудов, что приводит к образованию рыхлой соединительной ikîhiii. К положительному аффекту постоянного электромагнитного поля необходимо отнести его влияние на архитектонику аргирофильных и кот пионовых волокон в глномезодермальном рубце, которые располагались юопитонпию длицннку спинного мозга и не создавали препятствий для pi генерирующих нервных проводников.

Мл осноплшн наших морфологических данных имеются основания иредп'макмь, что ПЭМП создает условия для активной внутренней перестройки структур нейронов, которая согласно положению Д.С.Саркисова и В.11. Туманова ( 1990), определяет репаративиые процессы в п^йронах, направленных на восстановление нарушенного томсостаза.

Следствием этого является взаимосвязь структурных изменений, происходящих в нейронах и количеством регенерирующих нервных проводников.

Основным признаком полноценной морфологический регенерации является рост нервных волокон через глиомезодермальный рубец и их количество. По данным литературы при применении химических биостимуляторов (ииромсн, пирогснал, трипсин, лидаза к пр.), а также различных видов трансплантатов (формалшшзировавный спинной мозг, жир животного, периферические нервы, эмбриональная ткань и пр.) лишь единичные нервные волокна прорастают через спинномозговой рубец.

При использовании же биологического концентрата ДЖК, мы наблюдали прорастание значительного числа нервных проводников через глиомезодермальный рубец. В ранние сроки после трансплантации ДЖК в культях мозга преобладали деструктивные изменения в нровод-никах, которые заключались в фрагментации волокон, в образовании гигантских наплывов аксоплазмы на концах, с последующем их отрывом (миелиновые шары). .Через 1 месяц после трансплантации ДЖК наблюдались единичные варикозно расширенные нервные волокна про-растающне зону деструкции. По мнению Н.Е.Ярыпша п В.Н.Ярыгнна (1973) перераспределение нсйроплазмы в нервном волокне является приспособительным процессом. [5 2-3 месяца отмечено массивное подрастание нервных волокон через зону деструкции, но прорастает небольшое количество волокон. Рост нервных проводников через зону диастаза спинного мозга ярче выражен у животных, которым проводилась магнитотерапия. При сочетании трансплантации ДЖК с воздействием ПЭМП начальные репаративные процессы аксонов отмечались к 2-м неделям эксперимента. Нервные волокна, подрастающие к трансплантату тонкие, извитые с "колбами роста" на концах, с новообразованными волоконцами. На данном этапе морфологическая картина регенераторных процессов, происходящая в нервных волокнах может быть расценена как приспособительная реакция, дальнейший ход которой будет протекать в зависимости условий окружающей среды. Наличие "колб роста" говорит о наличии препятствия но ходу волокна, если препятствие будет удалена, то

нервное волокно Судет регенерировать с образованием нови* побегом (Б. Б. Фукс, 1959; Ярыги н Н.Е.. Николаев Г.М., 1962). Анализ морфологических изменении в нерпных подокнах при сочетании ДЖК и ИЗ МП в более поздние периоды наблюдений показач, что п зоне деструкции создаются благоприятные условия для процессов регенерации нервных подокон. Через 1 месяц в глномезодер.мальном рубце формировались пучки' нервных волокон, а через 2 месяца отмечалось разпетвленис нервных волокон в пучке н их отклонение. П 3-й месяца пучки нервных волокон становятся массивнее за счет увеличения количества нервных проводников и также наблюдается отклонение аксонов под разными углами. Пучковый рост и отклонение нервных волокон не были описаны при проведении п-слсдос »чин процессов рсгсисращш п спинном мозге у экспериментальных животных с применением других видов трансплантатов. По-нашему мнению, феномен отклонения волокон в пучке генетически связан с сегментарным типом строения спиннсго мозга.

Анализ собственных исследовании и данных литературы позволил определить требования, выдвигаемые к трансплантатам при замещении диастазов в нервной системе: во-первых, они должны быть изначально рыхлыми ио своей структуре, так ¡сак плотные, сформированные ткани, используемые п качестве трансплантатов, требуют выработки организмом значительного колтссч'.а ферментов для резорбции и постепенно замещаются плотной соединительной тканью, что создает препятствие для регенерирующих нервных волокон; во-вторых, трансплантат, в своем составе, должен содержать набор биологических веществ в усвояемой для макрофагов форме, которые после утилизации пойдут на восстановительные процессы. Очевидно, денатурированный желтковый концентрат является оптимальным биополимером дли всех видов тканей, так как даже в такой высокоорганизованной ткани, как нервная, судя ио результатам наших исследований, происходят активные репаратнинные процессы. Сочетанпое применение ДЖК и ПЭМП усиливает и коррелирует репарационные события, проис:,.-аящке при замещении диастазов н травчнрованных тканях.

ВЫВОДЫ

I. В месте экспериментально созданного диастаза спинного мозта возникают обширные полости, стенки которых формируются из плотных соединительнотканных волокон. В основаниях культей спинного мозта образуются поперечные глиомеэодермальные рубцы.

' 2. В ранние сроки эксперимента у контрольных животных превалируют деструктивные процессы в нейронах, нервных волокнах. В более поздние сроки на фоне деструктивных изменений наблюдаются ренарапшные процессы, заключающиеся в регенерации нервных волокон, новообразовании сосудов, формировании рубцовон ткани. Регенерация нервных волокон носит а

бортивный характер, прослеживается только до спинномозгового рубца.

3. Денатурированный желтковый концентрат, используемый в качестве трансплантата при диастазах спинного мозга, замещается глиомезодермалыюн тканью, волокна которой расположены хаотично. Через 1 месяц после трансплантации ДЖК глиомезодермальный рубец рыхлой структуры со множеством клеточных элементов : фибробласты, макрофаги, клетки глии. В более поздние сроки происходит коллагенизация глиомезодермалшого рубца. Архитектоника замещенной ткани представляет собой плотную соединительную ткань обедненную клеточными элементами.

4. При трансплантации ДЖК отмечена резкая пролиферация сосудов в ранние сроки эксперимента, что приводит к образованию более грубого глцомезодермального рубца в поздние сроки.

5. При замещении диастаза спинного мозга ДЖК нейроны верхней и нижней культей спинного мозга в ранние сроки эксперимента подвержены деструктивным изменениям: тотальный гнперхроматоз, "клеткн-тенн", инкрустация, набухание, вакуолизация цитоплазмы. В более поздние сроки наряду с деструктивными изменениями отмечены репаративные - гипертрофия отдельных нейронов,- нормохромия, гипертрофия ядер нейронов, эмиссия ядрышкоиых глыбок.

6. В начальные сроки после трансплантации ДЖК отмечено резкое обсднсште клетками глин культей сшпшого мозга и образование глиалытого

нала на границе трансплантата Через 1 месяц после операции отмечена гиперплазия клеток г лип.

7. Деструктивные процессы в нервных волокнах, при трансплантации ДЖК, проявлялись в фрагментации, варикозных расширениях, образовании зернистых шаров. Через 1 месяц после операции отмечено прорастание незначительного количества волокон через зону деструкции и единичные волокна в глиомезодсрмалыюм рубце. Через 2-3 месяца количество вотской в глисмезодермальнои рубце возрастает, они представлены в виде единичных волокон и пучков, состоящих из 2-1 полпконец.

8. У животных третьей группы (ДЖК + 11ЭМП) глномсзодсрмальный рубец через 1 месяц после операции был рыхлым с большим количеством клеточных элементов, соединительнотканные волокна располагались, в основном, соответственно длнннику егшипого мозга. В поздние сроки эксперимента соединительнотканные волокна уплотнялись, но сохранились широкие клеточные прослойки. У этой группы животных отмечена умеренная сосудистая реакция.

!). В трет1>ей группе у большей части нейронов в культях спинного мозга крыс отмечены обратимые изменения, острое набухание, умеренная пшерхромия, эктопия ядра. Через 2-3 месяца наблюдались нейроны с крупными глыбками базофнлыюго вещества, сохранным ядром, структура которых была близка к норме.

10. У крыс третьей группы отмечена выраженная глиальная реакция на Гранине культей .мозга н трансплантата в ранние сроки эксперимента. Через 2-3 педели после операции наблюдалось образование "глиальных мостиков", которые архитектонически представляли собой организованную структуру.

11. Воздействие ПЭМП в сочетании с ДЖК вызывает массивное подрастание нервных волокон к трансплантату в ранние сроки. Через 1 месяц после операции в глиомезодсрмалыюм рубце большое количество нервных волокон в виде пучков в "глиальных мостиках",часть пучков располагалась продольно, другие - в поперечном направлении. Через 2-3 месяца после операции отмечалось увеличение количества волокон в пучках с ориентацией

их соответственно оси спинного мозга, а также отклонение волокон от основного нервного ствола.

12. Сравнительный морфологический анализ динамики дестр/ктнвних и реиаративных процессов в спинном мозге исследуемых групп свидетельствует о возможности стимуляции репаративных процессов при травме спинного мозга при сочетавши применении 2 факторов: денатурированного желткового концентрата и воздействии постоянным электромагнитным полем.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Володнна-Сатанова Ф.С с соанг. Экспериментальное замещение спинного мозга. // Тез. докл. третьей Всесоюл. школы по современным проблемам регенерации. Йошкар-Ола, 1386.- С. 98-99.

2. Володина-Саганова Ф С. с соавт. Повое в стимуляции регенерации спинного мозга при различных видах его повреждения. // Сб. науч. трудов "Новые технические решения в клинической практике". Куйбышев, 1987,- С 6065

3. Володина-Саганова Ф.С. с соавт. Замещение дефектов спинного мозга в -жеиерименге.// Тез.докл. 1 съезда нейрохирургов, психиатров, наркологов Кал.ССР., Алма-Ата, 1987 - С. 91.

1. Володнна-Сатанова Ф.С. с соапт. Экспериментальное замещение дефектов снинного мозга. // Тез. краевой науч-иракт. конф. "Этапное воссгаповшельнос лечение заболеваний и травмы ПНС". Ставрополь, 1987,- С 231-231.

5 Володнна-Сатанова (I) С. с соавт. Экспериментальные и клинический рпультагы стимуляции регенерации спииного мозга постоянш . электромамппным полем. / Мат. симпозиума "Регенерация спинного simia", Симферополь, 1989 - С. 118-220.

В Володина-Саганова Ф.С. с соавт. Мапштотерапия острых травм еппнпогп мозга. Алма-Ата, Наука, 1988.- 85 с.

7. Сатанона Ф.С. Деструктивные „ репаративиыс процессы в спинном мозге при замещении его денатурированным куриным желтком. / / Мат. симпозиума "Макро- и мнкроуровнп организации мозга", М., 1992.- С. 130.

8. Саганова Ф.С. с солит. Морфологические изменения в спинном мозге при ксенотранспланганин и воздействии постоянным электромагнитным молем. ' Мат. третьих научных чтений им. акад. АМН Саркисона С.А. и симпозиума "Современные представления о структурно-функциональной организации мозга". М., 1995.- С. 10-1.