Автореферат и диссертация по медицине (14.04.01) на тему:Разработка тнехнологии и стандартизация капсул "экорсин форте" и гастроретентивных таблеток с экстрактом коры осины сухим

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Алтайский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский институт фармакологии» Сибирского отделения Российской академии медицинских наук

На правах рукописи

04201361689

МАКАРОВА ОЛЕСЯ ГЕННАДЬЕВНА

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ КАПСУЛ «ЭКОРСИН ФОРТЕ» И ГАСТРОРЕТЕНТИВНЫХ ТАБЛЕТОК С ЭКСТРАКТОМ КОРЫ

ОСИНЫ СУХИМ

14.04.01 - технология получения лекарств

Диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Научный руководитель - доктор фармацевтических наук, профессор В.Ф. Турецкова

Научный консультант - доктор биологических наук С.Г. Крылова

Барнаул-2013

Список сокращений

АГМУ - Алтайский государственный медицинский университет

БАВ - биологически активные вещества

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ГРЛС - государственный реестр лекарственных средств

ГФ - государственная фармакопея

ЖКТ - желудочно-кишечный тракт

МКЦ - микрокристаллическая целлюлоза

НД - нормативная документация

ОФС - общая фармакопейная статья

ПА - противоязвенная активность

ПВП — поливинилпирралидон

СО - стандартный образец

СТ - степень порожения

ТП - тяжесть порожения

СФМ - спектрофотометрия

ТФУК - трифторуксусная кислота

УФ-спектр - ультрафиолетовый спектр

ФСП - фармакопейная статья предприятия

Hp - Helicobacter pylori

Na-КМЦ - натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ.............................................................................................................................6

ГЛАВА I. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА И ФИТОПРЕПАРАТЫ ГА СТРОЗАЩИТНОГО ДЕЙСТВИЯ. ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗРАБОТКИ ГА СТРОРЕТЕНТИВНЫХЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ

ПРОТИВОЯЗВЕННОГО ДЕЙСТВИЯ...............................................................................13

1.1. Лекарственные средства и фитопрепараты гастрозащитного действия..........13

1.1.1. Общие сведения о язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки и основных групп противоязвенных средств............................................13

1.1.2. Роль фитопрепаратов в терапии язвенной болезни.....................................18

1.2. Перспективы разработки гастроретентивных лекарственных форм противоязвенного действия.........................................................................................26

1.2.1. Современные подходы для достижения гастроретентивного эффекта.....26

1.2.2. Развёртывающиеся системы как одна из наиболее перспективных направлений..............................................................................................................32

Заключение....................................................................................................................37

ГЛАВА II. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ...................................................39

2.1. Выбор объекта исследования................................................................................39

2.2. Методы изучения качественного состава и

количественного определения.....................................................................................42

2.3. Методы изучения физико-химических, технологических свойств материалов и оценки качества экспериментальных лекарственных форм.............45

2.4. Методы фармакологических исследований........................................................49

2.5. Статистическая обработка результатов...............................................................54

ГЛАВА III. РАЗРАБОТКА И/ИЛИ ВАЛИДАЦИОННАЯ ОЦЕНКА МЕТОДИК АНАЛИЗА ОСНОВНЫХБАВ В ЭКСТРАКТЕ КОРЫ ОСИНЫ СУХОМ.......................56

3.1. Валидационная оценка методики количественного определения суммы фенолокислот методом прямой спектрофотометрии................................................56

3.2. Валидационная оценка методики количественного определения суммы фенологликозидов методом спектрофотометрии......................................................61

3.3. Разработка методик качественного обнаружения и количественного определения салицина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии..............................................................................................................66

3.3.1.Выбор условий хроматографирования.........................................................66

3.3.2.Качественное обнаружение салицина в экстракте коры осины сухом......69

3.3.3.Количественное определение салицина в экстракте коры осины сухом .. 72

3.3.4.Валидация методик качественного обнаружения и количественного определения салицина..............................................................................................73

Выводы по главе...........................................................................................................82

ГЛАВА IV. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ, СТАНДАРТИЗАЦИЯ И ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОЯЗВЕННОЙ АКТИВНОСТИ КАПСУЛ «ЭКОРСИН ФОРТЕ».....................83

4.1. Изучение технологических свойств экстракта коры осины сухого.................84

4.2. Выбор состава прописи.........................................................................................86

4.3. Получение, разработка технологической схемы и стандартизация капсул «Экорсин форте 0,35»...................................................................................................89

4.4. Разработка технологической схемы получения капсул «Экорсин форте»......90

4.5. Сравнительная оценка противоязвенной активности капсул

«Экорсин форте» и таблеток «Экорсин»....................................................................99

4.5.1. Изучение антиульцерогенного и стресс-регулирующего действия на модели нейрогенного повреждения слизистой желудка у мышей....................101

4.5.2. Изучение антиульцерогенного действия на модели индометацинового повреждения слизистой желудка у крыс..............................................................107

Выводы по главе.........................................................................................................110

ГЛАВА V. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ, СТАНДАРТИЗАЦИЯ И ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОЯЗВЕННОЙ АКТИВНОСТИ ГАСТРОРЕТЕНТИВНЫХ ТАБЛЕТОК «ЭКОРСИН ГР»................................................................................................................112

5.1. Выбор синергической пары полимеров для создания

матричной платформы................................................................................................112

5.2. Изучение технологических свойств экстракта коры осины

сухого и пар полимеров..............................................................................................115

5.3. Выбор состава прописи для таблетирования....................................................116

5.4. Получение и экспериментальное обоснование «in vitro»

гастроретентивного и пролонгированного действия таблеток..............................125

5.5. Разработка технологической схемы...................................................................130

5.6. Стандартизация таблеток....................................................................................132

5.7. Сравнительная оценка противоязвенной активности таблеток

«Экорсин ГР», капсул «Экорсин форте» и таблеток «Экорсин»...........................139

Выводы по главе.........................................................................................................144

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ............................................................................................................146

Список литературы............................................................................................................148

Приложения........................................................................................................................164

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. С признанием биофармацевтической концепции развитие фармации осуществляется не только по пути изыскания новых высокоэффективных и безопасных лекарственных средств, но и по пути совершенствования существующих, а так же разработки новых лекарственных форм с требуемыми характеристиками, в том числе локализацией действия лекарственных препаратов в заданной области и контролируемым высвобождением лекарственных веществ [39].

В последние годы для лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки используется большое количество синтетических препаратов с патогенетически обоснованным механизмом действия. Однако многие из них характеризуются наличием побочных эффектов и имеют противопоказания к применению (гиперчувствительность, почечная и/или печеночная недостаточность и др.) [53, 74, 110]. В связи с этим, препараты растительного происхождения в силу своего многогранного позитивного воздействия на слизистую желудка (противовоспалительное, обволакивающее, ощелачивающее, нормализующие процессы проницаемости мембран, секреции и всасывания) с успехом используются в качестве гастропротективиых средств как самостоятельно, так и в комплексной терапии деструктивных поражений желудка и кишечника [95, 98].

Одним из перспективных растительных препаратов является экстракт коры осины сухой, разработанный в совместных исследованиях кафедры фармацевтической технологии АГМУ, НИИ фармакологии РАМН (г. Томск) и ЗАО «Алтайвитамины», который показал в эксперименте на животных отсутствие токсичности и высокую противоязвенную активность, которая была подтверждена в клинических испытаниях на базе двух клиник [60, 124].

Выявлено, что механизм антиульцерогенного действия данного экстракта обусловлен снижением кислотно-пептической «агрессии» (увеличение рН, уменьшение дебита соляной кислоты) и повышением защитных факторов (увеличение фукозы, эндогенного аммиака, стимуляции слизеобразования и сохранение морфоструктурной целостности желез и клеток, отвечающих за

выработку бикарбонатов). Репаративные свойства экстракта коры осины проявляются в ускорении заживления хронического язвенного дефекта за счет усиления образования защитных компонентов, более активном созревании грануляционной и формировании зрелой соединительной ткани [62].

Вместе с тем, предложенная ранее классическая таблетированная лекарственная форма не позволяет в полной мере реализовать весь потенциал гастрозащитного действия указанного экстракта, так как не обеспечивает длительного периода нахождения лекарственной формы в желудке, что снижает эффективность лечения данного отдела ЖКТ, а также не устраняет горького вкуса экстракта. Кроме того, выбранная доза экстракта в таблетках «Экорсин» требует трехкратного применения препарата в сутки, что создает определенные неудобства при лечении такого хронического заболевания как язвенная болезнь.

Все вышесказанное обусловливает необходимость разработки капсулированной лекарственной формы с повышенной дозой экстракта коры осины сухого, позволяющей сократить кратность приема с одновременным корригированием его органолептических свойств [57].

Анализ данных литературы по инновационным лекарственным формам последних лет свидетельствует о том, что одним из путей повышения эффективности действия лекарственных средств для лечения язвенной болезни желудка может явиться создание на их основе гастроретентивных лекарственных форм, которые длительное время удерживаются в желудке, и при этом обеспечивают постепенное высвобождение действующих веществ. На настоящий момент одним из наиболее перспективных для реального использования в медицинской практике, не требующих использования специальных технологий и аппаратуры, считается способ удерживания лекарственной формы в желудке за счет увеличения ее объема в среде желудочного сока (более 15 мм) [130, 167].

Исходя из выше изложенного, проведение комплексных исследований по разработке капсулированной и гастроретентивной лекарственных форм на основе экстракта коры осины сухого представляется актуальным.

Целью исследования является теоретическое и экспериментальное обоснование составов, технологии, показателей и методик оценки качества

капсулированной и гастроретентивной лекарственных форм с экстрактом коры осины сухим для лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Задачи исследования:

В соответствие с поставленной целью определены следующие задачи:

1. Разработать современные методики качественного обнаружения и количественного определения основного фенологликозида салицина в экстракте коры осины сухом и препаратах полученных на его основе, с применением метода ВЭЖХ.

2. Провести валидационную оценку разработанных методик и существующих методик качественного обнаружения и количественного определения основных БАВ экстракта коры осины сухого.

3. Теоретически и экспериментально обосновать состав и оптимальную технологию капсул «Экорсин форте» и провести его стандартизацию.

4. Экспериментально обосновать состав синергической пары полимеров, разработать на ее основе технологию гастроретентивных таблеток («Экорсин ГР») с экстрактом коры осины сухим и провести их стандартизацию.

5. Провести сравнительную оценку противоязвенной активности капсул «Экорсин форте», таблеток «Экорсин ГР» и таблеток «Экорсин» в экспериментах на животных.

6. Изучить стабильность капсул «Экорсин форте» и таблеток «Экорсин ГР», установить их срок годности и составить проекты нормативной документации.

Научная новизна. Проведены исследования по выбору оптимального состава и разработки научно обоснованной технологии капсулированной лекарственной формы на основе экстракта коры осины сухого для лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

Теоретически обоснованы и экспериментально подтверждены состав и технология гастроретентивной лекарственной формы с изучаемым экстрактом для лечения язвенной болезни желудка. При этом впервые осуществлен подбор синергической пары полимеров для обеспечения гастроретентивного действия

таблетированной лекарственной формы с экстрактом коры осины сухим. Изучены процессы гелеобразования и продолжительности высвобождения действующих веществ из подобранной композиции в средах, имитирующих содержимое ЖКТ.

Установлена более высокая противоязвенная активность капсул «Экорсин форте» по сравнению с таблетками «Экорсин» на двух экспериментальных моделях (нейрогенное язвообразование у мышей, индометациновое язвообразование у крыс) и гастроретентивных таблеток «Экорсин ГР» по сравнению с капсулами «Экорсин форте» и таблетками «Экорсин» на модели индометацинового язвообразования у мышей.

Разработаны современные научно обоснованные методики качественного обнаружения и количественного определения салицина (ВЭЖХ) экстракта коры осины сухого и проведена их валидация. Впервые определено содержание салицина в экстракте коры осины сухом.

Практическая значимость работы. Разработаны современные стабильные лекарственные формы с экстрактом коры осины сухим в виде капсул «Экорсин форте» для лечения язвенной болезни верхних отделов ЖКТ и гастроретнтивных таблеток «Экорсин ГР» для лечения язвенной болезни желудка. Предложены показатели качества капсул «Экорсин форте» и таблеток «Экорсин ГР» и методики их определения.

По результатам исследований разработаны проекты ФСП «Экорсин форте капсулы 0,35», «Экорсин ГР таблетки 0,35» и лабораторные регламенты на производство капсул «Экорсин форте» и таблеток «Экорсин ГР».

В ЗАО «Алтайвитамины» (г. Бийск) проведена апробация предлагаемых технологий «Экорсин форте капсул 0,35» и «Экорсин ГР таблеток 0,35» (акты апробации от 5.04.2013 г.) (приложения 7, 10-11). Материалы диссертационной работы внедрены в учебный процесс на кафедре ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России фармацевтической технологии (акты внедрения от 01.04.13 г.) (приложения 12).

Положения, выносимые на защиту: результаты теоретического и экспериментального обоснования составов, технологий, показателей и методик оценки качества капсулированной и гастроретентивной лекарственных форм с

экстрактом коры осины сухим, а так же сравнительной оценке их противоязвенной активности с ранее предложенными таблетками «Экорсин» в экспериментах на животных.

Апробация работы. Основные положения исследований доложены и обсуждены на XIII и XIV научно-практических конференциях молодых ученых «Молодежь-Барнаулу» (г.Барнаул, 2011, 2012 гг.); 67-ой, 68-ой региональной конференции по фармации и фармакологии «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (г. Пятигорск, 2012 г., г. Волгоград, 2013 г.); II Итоговой конференции Научного общества молодых ученых и студентов АГМУ (г. Барнаул, 2012 г.); V Всероссийской конференции с международным участием «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» (г. Барнаул, 2012 г.); Всероссийской молодежной научной школе «Биоматериалы и нанобиоматериалы: Актуальные проблемы и вопросы безопасности» (г. Казань,

2012 г.); конференция посвященной Дню российской науки в АГМУ (г. Барнаул,

2013 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 работ, из них 3 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России (номер государственной регистрации 01200600351) как фрагмент комплексной НИР фармацевтического факультета «Изучение природных ресурсов Алтая, пути их рационального использования и совершенствование лекарственного обеспечения населения» (научный руководитель комплексной НИР д-р мед. наук, профессор В.М. Брюханов). Тема утверждена на заседании научно-координационного совета ГОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Росздрава (протокол № 5 от 26.05.2011 г.).

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 191 странице м�