Разработка способа получения и стандартизация экстракта жидкого противодиабетического

Смольникова, Валентина Петровна

Диссертации по медицине → Фармацевтическая химия, фармакогнозия

Автореферат и диссертация по медицине (14.04.02) на тему:Разработка способа получения и стандартизация экстракта жидкого противодиабетического

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Смольникова, Валентина Петровна Пермь 2012 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 14.04.02

Автореферат диссертации по медицине на тему Разработка способа получения и стандартизация экстракта жидкого противодиабетического

На правах рукописи

005044982

СМОЛЬНИКОВА ВАЛЕНТИНА ПЕТРОВНА

РАЗРАБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЭКСТРАКТА ЖИДКОГО ПРОТИВОДИАБЕТИЧЕСКОГО

14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

2 4 МАЙ 2012

Пермь, 2012

005044982

Диссертационная работа выполнена в ГБОУ ВПО «Дальневосточный государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель: доктор фармацевтических наук, профессор

Степанова Татьяна Алексеевна

Официальные оппоненты: доктор фармацевтических наук, профессор Фурса

Николай Сергеевич

ГБОУ ВПО «Ярославская государственная медицинская академия» Министерства

здравоохранения и социального развития Российской Федерации

доктор фармацевтических наук, профессор Кудашкина Наталья Владимировна ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Ведущая организация: ГБОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Защита диссертации состоится «19» июня 2012 г. в 13 часов на заседании Диссертационного совета Д 208.068.01 при ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу: 614990, г. Пермь, ул. Полевая, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО ПГФА Минздравсоцразвития России по адресу: 614070, г. Пермь, ул. Крупской, 46.

Дата размещения объявления о защите диссертации на сайте Министерства

образования и науки Российской Федерации http://vyww.mon.gov.ru «_»

_2012 г. и на сайте ГБОУ ВПО ПГФА Минздравсоцразвития России

http://www.pfa.ru «_»_2012 г.

Автореферат разослан «/ » «///?, Р 2012 г.

Ученый секретарь ■

диссертационного совета Д 208.068.01 г /7/

кандидат фармацевтических наук, доцент • И.А. Липатникова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одним из перспективных направлений применения лекарственных средств растительного происхождения является лечение хронических заболеваний, так как фитопрепараты обеспечивают безопасность терапии, а поливалентность химического состава позволяет использовать их для компенсации патологических процессов, сопутствующих основному заболеванию. Ряд вторичных метаболических и патофизиологических нарушений, возникающих при сахарном диабете, обосновывает актуальность использования лекарственных растений при данном заболевании.

Необходимость поиска новых фитопрепаратов для лечения сахарного диабета определяется уровнем заболеваемости и смертности в результате болезни,- а также недостаточным ассортиментом гипогликемических лекарственных средств растительного происхождения. В связи с этим на кафедре фармакогнозии и ботаники ДВГМУ разработан состав сбора противодиабетического.

В последнее время все большее внимание уделяется разработке готовых к употреблению препаратов из растительного сырья. Создание таких препаратов позволяет увеличить выход биологически активных веществ (БАВ) из сырья и соответственно увеличить их процентную концентрацию в фитопрепарате, а также повысить терапевтический эффект за счет точности дозирования. Кроме того, при использовании готовых лекарственных форм обеспечивается удобство применения и хранения. К распространенным готовым лекарственным формам относятся жидкие экстракты, которые не потеряли актуальности и в современных условиях.

Разработка нового лекарственного препарата влечет за собой необходимость решения задач стандартизации. Наиболее сложной является стандартизация многокомпонентных средств, к которым относится разработанное в ДВГМУ оригинальное средство для лечения сахарного диабета. Современная система контроля качества лекарственных средств предъявляет к разработчикам все более жесткие требования по стандартизации, поэтому разработка подходов, позволяющих надежно оценить качество препарата, представляет научно-практический интерес.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является разработка способа получения и метода стандартизации оригинального экстракта жидкого противодиабетического.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить качественное и количественное содержание основных биологически активных веществ в экстракте и сравнить с выходом БАВ в настой;

- изучить влияние технологических факторов на качество получаемого экстракта и определить оптимальную концентрацию спирта этилового, размер частиц и способ закладки сырья в перколяторы;

- установить показатели подлинности и доброкачественности экстракта;

- разработать методику количественного определения флавоноидов в экстракте;

- обосновать нормативные показатели качества экстракта;

- изучить влияние продолжительности хранения на содержание БАВ в экстракте, обосновать сроки хранения экстракта;

- определить с помощью метода математического планирования оптимальный способ получения экстракта.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтической науки. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований Дальневосточного государственного медицинского университета (№ государственной регистрации 01.200 309930). Тема работы утверждена на заседании научно-плановой комиссии ДВГМУ (Протокол № 11 от 19.11.2003 г.).

Научная новизна. Впервые разработан оптимальный способ получения оригинального противодиабетического фитопрепарата в форме жидкого экстракта. С использованием современных методов анализа изучен качественный состав и количественное содержание БАВ экстракта. Установлен элементный состав препарата. Разработана спектрофотометрическая методика количественного определения флавоноидов и ВЭТСХ методика (высокоэффективная тонкослойная хроматография) определения подлинности экстракта. Установлены нормативные показатели качества экстракта. Исследованы изменения в количественном содержании пяти групп БАВ в процессе хранения препарата. Показано влияние числа ступеней экстракции на показатель «сухой остаток» и продолжительности экстрагирования на себестоимость экстракта.

Практическая значимость работы. Разработан способ получения стандартного продукта при минимальных экономических затратах. Разработаны методики анализа для контроля качества препарата при его серийном производстве.

Обоснованы показатели подлинности и доброкачественности экстракта противодиабетического, а также сроки хранения, включенные в проект Фармакопейной статьи предприятия (ФСП).

Результаты работы апробированы в ГУЗ «Центр контроля качества и сертификации лекарственных средств» Министерства здравоохранения Хабаровского края» и внедрены в учебный процесс кафедры фармакогнозии и ботаники Дальневосточного государственного медицинского университета, а также кафедры фармацевтической технологии и биотехнологии с курсом ФПК и III 1С Владивостокского государственного медицинского университета.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на 60-й, 62 -й и 63-й итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых «Актуальные вопросы современной медицины» (Хабаровск, 2004; 2005; 2006 гг.); региональной научно-практической конференции «Организация лекарственного обеспечения рациональной фармакотерапии в условиях

реализации национального проекта в Дальневосточном Федеральном округе» (Хабаровск, 2008 г), межкафедральной научной конференции (Хабаровск, 2009 Г.); конференции, посвященной 45-летию фармацевтического факультета ДВГМУ «Дальневосточная фармация - основные тенденции развития» (Хабаровск, 10-11 сентября 2009 г); XIII краевом конкурсе молодых ученых и аспирантов (Хабаровск, 20 января 2011 г).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 работ, в том числе 4 статьи в журналах, рекомендуемых ВАК для публикации результатов диссертационных исследований.

Личный вклад автора. Автором диссертационного исследования самостоятельно проведены представленные в работе эксперименты, включая подготовку исследуемых образцов к анализу, работу на аналитическом оборудовании, анализ полученных данных с использованием методов математической статистики. При непосредственном участии автора проведено сопоставительное изучение химического состава экстракта противодиабетического и изученных ранее лекарственных форм - сбора и настоя. Проведены эксперименты по определению оптимальных технологических параметров экстрагирования лекарственного растительного сырья. Разработан метод стандартизации экстракта. Определены нормативные показатели. Выполнен статистический анализ результатов. Проведена валидация методик стандартизации препарата. Разработан проект ФСП на экстракт. А также разработан и экономически обоснован способ получения нового фитопрепарата.

Основные положения, выносимые на защиту: результаты сравнительного изучения качественного состава и количественного содержания действующих веществ в экстракте и настое; результаты изучения влияния технологических факторов на выход БАВ в экстракт; обоснование методик определения подлинности экстракта и количественного содержания флавоноидов в препарате; обоснование норм качества экстракта; результаты изучения влияния сроков хранения экстракта на содержание действующих веществ; результаты оптимизации способа получения экстракта.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 171 страницах машинописного текста, иллюстрирована 29 рисунками и 52 таблицами. Результаты экспериментов обработаны статистически. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, четырех глав экспериментальной работы, общих выводов, списка литературы и приложений. Список литературы включает 243 источника из них 38 на иностранных языках.

Во введении раскрыта актуальность темы, определены цели и задачи исследования, сформулированы научная новизна и практическая значимость работы.

В главе I (литературный обзор) приводятся сведения по изучению влияния технологических факторов на процессы массопередачи веществ при экстрагировании лекарственного растительного сырья (ЛРС). А также рассмотрено использование веществ-маркеров для разработки методов

стандартизации многокомпонентных препаратов растительного происхождения.

В главе II охарактеризованы основные объекты исследования и приведены методы анализа, использованные в экспериментах.

В главе III приведены результаты фотохимического исследования экстракта и настоя, полученных по одной прописи.

Глава IV посвящена изучению факторов, интенсифицирующих процесс экстрагирования лекарственного растительного сырья.

В главе V описаны исследования по разработке методик подтверждения подлинности экстракта и количественного определения флавоноидов в препарате. Приведены нормативные показатели. Даны результаты исследования по изучению изменчивости содержания Б AB в экстракте в процессе хранения и результаты изучения микробиологической чистоты препарата.

Глава VI посвящена оптимизации способа получения экстракта противодиабетического.

Приложение 1 содержит проект ФСП на экстракт противодиабетический. В приложение 2 включены графические результаты по оптимизации способа получения экстракта. В приложение 3 включен отчет по изучению гипогликемической активности экстракта противодиабетического. В приложение 4 включены акты внедрения.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования

Основной объект исследования — экстракт противодиабетический. Для его получения использовали сырье, собранное на Дальнем Востоке: черника обыкновенная, брусника, леспедеца двухцветная, крапива узколистная, шиповник даурский, калина Саржента. Экстракт получали методом реперколяции в соотношении растительного сырья и готового продукта 1:1. В качестве экстр агента использовали спирт этиловый. Измельчение лекарственного растительного сырья проводили на мельнице ножевой РМ-120.

Химический состав экстракта изучали с использованием современных методов фотохимического анализа. Высокоэффективную тонкослойную хроматографию (ВЭТСХ) проводили с помощью систем для тонкослойной хроматографии "Camag" и "Sorbfil" на пластинках Kieselgel 60 F254 (Merk) и ПТСХ-П-В-УФ (Sorbfil). Высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) проводили с использованием хроматографа "Agilent Technologies 1100 Series".

В качестве стандартных образцов веществ сравнения (СОВС) использовали ГСО и PCO флавоноидов, фенольных соединений, Сахаров, органических и оксикоричных кислот.

Определение элементного состава проводили с помощью масс-спектрометра с индуктивно-связанной плазмой ICP-MS Elan DRC II PerkinEImer (США).

Количественное определение полисахаридов, дубильных веществ органических кислот, суммы фенольных соединений, флавоноидов и арбутина проводили по фармакопейным и оригинальным методикам (спектрофотометрическим и хроматографическим). Спектрофотометрические исследования выполняли на спектрофотометре UV-1700 (Shimadzu).

Обоснование возможности разработки готовой лекарственной формы на основе прописи сбора противодиабетического

Для обоснования перспективности разработки экстракта по противодиабетической прописи проводили изучение его химического состава и дальнейшее сопоставление биологически активных комплексов экстракта и настоя.

Были определены основные группы БАВ: флавоноиды, дубильные вещества, простые фенолы, сапонины, полисахариды. Дальнейший анализ химического состава экстракта проводили с помощью ВЭТСХ.

Применение хроматографических методов позволило подтвердить присутствие в экстракте веществ флавоноидной природы, простых фенольных соединений, органических кислот, моносахаров и идентифицировать некоторые индивидуальные вещества - рутин, гиперозид, кверцетин, кемпферол, хлорогеновую, кофейную и галловую кислоты, арбутин, гидрохинон, яблочную, аскорбиновую, янтарную, бензойную и салициловую кислоты! глюкозу, фруктозу, галактозу. Всего в экстракте идентифицировано 17 индивидуальных веществ.

Сопоставление хроматографических профилей сравниваемых лекарственных форм противодиабетического состава показало хорошее совпадение пиков доминирующих веществ. Коэффициент корреляции относительных величин, характеризующих площадь пиков в хроматограммах экстракта и настоя, равен 0,92.

Сравнение экстемпоральной и готовой лекарственных форм проводили также по количественному содержанию флавоноидов, дубильных и экстрактивных веществ (табл. 1).

Таблица 1

Содержание БАВ и экстрактивных веществ в настое (1:40) и экстракте противодиабетическом (1:1), %

Вещества Показатели настоя Показатели экстоакта

абс. содержание отн. содержание (выход) абс. содержание отн. содержание (выход)

экстрактивные 0,56 60 25,90 71

флавоноиды 0,01 47 0,5 56

дубильные 0,11 59 6,09 71

Результаты анализа свидетельствуют о преимуществе экстракта по выходу указанных веществ.

Кроме суммы веществ, в настое и экстракте количественно оценивали содержание рутина и гиперозида. Определение проводилось методом ВЭЖХ. При сравнении выхода флавоноидов в настой и экстракт (табл. 2), было также отмечено преимущество экстракта перед настоем по выходу рутина и гиперозида почти в 2 раза.

Таблица 2

Содержание рутина и гиперозида в настое и экстракте

Лекарственная форма БАВ Содержание в сырье, мг/г Содержание в препарате, мг/мл Выход, %

настой рутин 0,053 0,00051 15,47

гиперозид 0,92 0,0071 13,04

экстракт рутин 0,053 0,015 28,30

гиперозид 0,92 0,26 28,26

Известно, что минеральный состав препарата играет важную терапевтическую роль в коррекции метаболических реакций патологического процесса. В частности, присутствие в препаратах таких элементов как цинк, хром, ванадий, никель, медь и др. обосновывает их применение при лечении сахарного диабета. В связи с этим был изучен минеральный состав экстракта. Всего было выявлено 32 элемента, в том числе терапевтически значимые при сахарном диабете (табл. 3), из которых содержание марганца соответствует адекватному уровню потребления, остальные компоненты восполняют суточную потребность организма в рационе питания.

Таблица 3

Содержание микроэлементов в суточных дозах препаратов и их выход

Микроэлементы Экстракт Настой

содержание в суточной дозе, мг выход, % содержание в суточной дозе, мг выход, %

Ванадий 0,00008 25 0,0001 100

Хром 0,005 48 0,0007 17

Марганец 4,92 25 2,24 25

Кобальт 0,0002 22 0,0001 31

Никель 0,03 66 0,007 37

Медь 0,01 11 0,02 40

Цинк 0,11 14 0,09 25

Проведенный сравнительный анализ выхода микроэлементов в экстракт и настой показал, что спиртом лучше извлекаются Сг и водой — V и Си, на выход Мп, Со и Хп вид экстр агента не оказывает существенного влияния.

Суточные дозы экстракта и настоя по содержанию V, Со, Си и Тп сопоставимы, по содержанию Сг, Мп и N1 экстракт обладает преимуществом перед настоем.

В результате проведенных исследований была показана целесообразность создания готового к употреблению препарата на основе существующей прописи сбора противодиабетического.

Разработка способа получения многокомпонентного экстракта жидкого противодиабетического

Сырьевыми источниками разрабатываемого препарата являются растения, относящиеся к трем морфологическим группам, характеризующиеся разной гистологической структурой и химическим составом. В связи с этим при разработке оригинального экстракта мы решали как традиционные задачи (подбор рационального экстрагента и размера частиц ЛРС), так и специфические (выбор способа закладки сырья в перколяторы с учетом совместного экстрагирования).

Анализ УФ спектров извлечений, полученных с использованием спирта этилового 40 и 70 %, показал совпадение в положении экстремумов. Некоторые различия отмечены в интенсивности поглощения.

Для более объективного сравнения фенольных комплексов проводилось хроматографическое исследование 40 % и 70 % извлечений (рис. 1), в результате которого не было выявлено существенных различий в хроматографической картине экстрактов.

Кроме качественного анализа определяли количественное содержание БАВ в извлечениях, полученных на спирте этиловом 40 % и 70 % (табл. 4).

Анализ показал, что по содержанию экстрактивных веществ и полисахаридов преимуществом обладает извлечение, полученное на спирте этиловом 40 %. Некоторые преимущества спирта этилового 40 % наблюдаются и по выходу суммы фенольных соединений и арбутина. По содержанию суммы 1 флавоноидов, органических кислот и дубильных веществ извлечения достоверно не различаются.

Таблица 4

Содержание биологически активных веществ в извлечениях, полученных на спирте этиловом 40 % и 70 %

Группы анализируемых веществ Концентрация экстр агента, %

40 70

экстрактивные вещества, % 9,53 7,85

сумма флавоноидов, % 0,20 0,24

сумма фенолов, % 7,44 6,15

дубильные вещества, % 2,12 2,12

органические кислоты, % 0,25 0,27

полисахариды, % 1,72 0,28

арбутин,%. 0,44 0,38

По совокупности полученных данных нами рекомендовано использовать в технологии экстракта противодиабетического в качестве экстр агента спирт этиловый 40 %.

Далее в серии экспериментов проводили выбор оптимального размера частиц ЛРС. Проведенное исследование в выбранном интервале варьирования измельченности (табл. 5) показало достоверное влияние размера частиц сырья на выход экстрактивных веществ при экстрагировании плодов шиповника, побегов черники и листьев брусники.

Таблица 5

Содержание экстрактивных веществ и флавоноидов в извлечениях из

сырья в зависимости от размеров частиц

Содержание веществ, %

Сырьевой экстрактивные вещества флавоноиды

компонент диаметр отверстий сита, мм

0,5 1 2 3 5 0,5 1 2 3 5

плоды калины 53,0 50,8 49,5 50,1 - 0,02 0,02 0,02 0,02 -

плоды шиповника*'** 40,2 43,0 42,8 27,8 - 0,07 0,06 0,03 0,04 -

побеги черники* 27,9 27,1 26,3 21,0 - 1,24 1,21 1,30 1,16 -

листья брусники*'** 50,9 45,5 42,5 42,6 - 1,00 0,97 0,89 0,84

побеги леспедецы 20,9 20,7 - 19,3 18,7 1,20 0,93 0,92 0,92 0,84

** листья крапивы 18,7 18,1 - 18,2 18,5 0,96 0,79 0,84 0,69 0,70

Примечание: *РЭП1. > для экстрактивных веществ; ** РЭП1. > Р„р. для флавоноидов.

На выход этих же веществ из плодов калины, побегов леспедецы и листьев крапивы размер частиц влияния не оказывает.

На экстрагирование флавоноидов достоверно влияет размер частиц листьев крапивы, брусники, побегов леспедецы и плодов шиповника; для побегов черники и плодов калины это влияние не достоверно.

Для определения оптимального выхода действующих веществ из совместно экстрагируемого сырья разных морфологических групп, был проведен дополнительный эксперимент, в котором были учтены такие факторы как морфологическая группа сырья (листья, плоды, побеги) и размер частиц ЛРС. Проведенный анализ экспериментальных данных в указанном в таблице 5 диапазоне показал, что при совместном экстрагировании сырья влияние измельченности на выход экстрактивных веществ и БАВ нивелируется.

На основании полученных результатов выбраны оптимальные размеры частиц, приведенные ниже.

Изучение влияния способа закладки сырья в перколяторы проводили путем сравнения выхода веществ в экстракт при загрузке сырья в перколяторы слоями и в виде смеси растительных компонентов (табл. 6).

Таблица б

Содержание биологически активных и экстрактивных веществ в экстрактах, полученных при закладке сырья в перколяторы разными

способами

Группа анализируемых веществ Смесь сырьевых компонентов Сырьевые компоненты заложены слоями

экстрактивные вещества, % 22,48 28,26

флавоноиды, % 0,48 0,50

сумма фенолов, % 17,22 23,88

дубильные вещества, % 5,90 7,65

органические кислоты, % 0,32 1,04

полисахариды, % 4,65 5,14

Проведенный эксперимент показал статистически достоверное (при вероятности 95 %) преимущество послойной закладки сырья по содержанию экстрактивных веществ (t3K. = 3,89; tKp = 2,45), дубильных веществ (W = 4,13; trp = 2,45), фенольных соединений (t,KC = 3,87; tKp. = 2,78) и органических кислот (W = 15,67; t^p. = 3,18).

Таким образом, при разработке способа получения экстракта противодиабетического были выбраны следующие условия экстрагирования: в качестве экстр агента - спирт этиловый 40 %, размер частиц сырья для шиповника и черники - 2 мм, калины, брусники, леспедецы - 3 мм, крапивы - 5 мм, вариант загрузки сырья - послойный.

Выбранные условия экстрагирования были положены в основу получения серий опытных образцов экстракта. Эти экстракты были использованы при

разработке метода стандартизации и для проверки фармакологической активности препарата.

Разработка метода стандартизации экстракта жидкого противодиабетического

Разработку метода стандартизации препарата проводили в соответствии с действующими нормативными положениями по разделам описание, подлинность, тяжелые металлы, количественное определение, содержание спирта, сухой остаток, срок годности, микробиологическая чистота.

Для разработки методики определения подлинности экстракта на 6 сериях препарата были апробированы качественные реакции на флавоноиды и дубильные вещества. На следующем этапе разработки критериев подлинности экстракта нами были определены спектральные характеристики препарата. Фактические данные и статистическая обработка показали, что в УФ спектре должны наблюдаться минимум в интервале 259-263 нм, максимум II полосы в интервале 279-283 нм и максимум 1 полосы (плечо) - 313-323 нм.

При хроматографическом определении подлинности экстракта в качестве приоритетных маркеров предложено использовать кверцетин и арбутин. Арбутин определяется в системе этипацетат: метанол: вода (100:17:13), кверцетин - в системе толуол: этилацетат: муравьиная кислота (2:2:1). Для подтверждения присутствия в препарате всех сырьевых компонентов определены специфические маркеры, получена стандартная хроматограмма, включенная в проект ФСП (рис. 2).

I н

Рис. 2 Стандартная хроматограмма экстракта противодиабетического: I - ГСО кверцетина; II - очищенный экстракт; 1, 2 -маркеры черники; 3, 4 - маркеры брусники; 5 - маркер крапивы. 6 - маркер калины; 7 - маркер шиповника. 8 -маркер леспедецы.

Валидация хроматографических методик по показателям подвижность (1*0, коэффициент разделения (Яб), число теоретических тарелок (1М), высота

эквивалентной теоретической тарелки (Н) показала их пригодность для решения задач стандартизации экстракта.

Для количественного определения содержания флавоноидов с целью контроля качества серийной продукции экстракта была разработана спектрофотометрическая методика, основанная на реакции комплексообразования с алюминия хлоридом. В ходе разработки методики был обоснован выбор стандарта и определены условия комплексообразования (количество алюминия хлорида, влияние подкислителя, продолжительность реакции комплексообразования и стабильность комплекса).

В качестве аналитической длины волны была выбрана 413±2 нм, что соответствует максимуму дифференциального .спектра рутина в тех же условиях. В качестве подкислителя была выбрана хлористоводородная кислота. Добавление 1 капли хлористоводородной кислоты разведенной в раствор сравнения приводит к выравниванию значений рН исследуемого раствора и раствора сравнения.

Количество алюминия хлорида, достаточное для образования стабильного комплекса, эквивалентно 2 мл 2 % раствора. Динамическое равновесие реакции комплексообразования наступает через 30 минут от начала реакции и продолжается в течение следующего часа наблюдения.

Относительная средняя погрешность методики (ё ) составляет 1,29 % (табл. 7).

Таблица 7

Метрологическая характеристика методики определения суммы флавоноидов в экстракте противоднабетнческом

п f х,% 52 ? Р,% Ах £ь% ё,%

6 5 0,505 3,85-10'5 0,002534 95 0,007 3,17 1,29

Валидационную оценку методики, проводили в соответствии с проектом ОФС «Валидация фармакопейных методов» по показателям сходимость, воспроизводимость, правильность, специфичность, линейность, надежность, предел обнаружения и предел количественного определения.

В качестве примера в таблице 8 даны результаты по воспроизводимости методики. Остальные параметры приведены в таблице 9.

Эксперименты по воспроизводимости проводили в разных условиях: в условиях одной лаборатории, разных лабораторий, на разных приборах (в лаборатории ГУЗ «ЦККиСЛС» на спектрофотометре СФ-46, в лаборатории кафедры фармацевтической и аналитической химии (СФ-46) и в фотохимической лаборатории кафедры фармакогнозии и ботаники ДВГМУ на спектрофотометре 1Л/-1700 ЗЫтаёги). Относительная величина среднеквадратичного отклонения не превышает допустимый интервал варьирования (8гр) для каждого вида воспроизводимости, что подтверждает высокую точность методики.

Таблица 8

Статистическая обработка результатов по воспроизводимости методики количественного определения флавоноидов в экстракте противодиабетическом

Статистические параметры Воспроизводимость

лабораторная инструментальная межлабораторная

п 3 2 3

Р,% 95 95 95

Х,% 0,449 0,441 0,459

Б1 0,000043 0,0000045 0,000052

Б 0,00656 0,000212 0,0072

¿X 0,016 0,019 0,018

1,55 0,74 1,32

2 1 3

Таблица 9

Валидационная оценка методики количественного определения содержания флавоноидов в экстракте противодиабетическом

Исследованные показатели Определяемый параметр Рассчитанное значение Критическое значение

правильность допустимый отклик, % 9,32 £10

сходимость среднеквадратическое отклонение, % 0,39-0,76

линейность коэффициент корреляции 0,998 1

предел обнаружения минимальное количество суммы флавоноидов, измеряемое с установленной точностью, % 0,228 0,298 (Р=97 %)

предел количественного определения максимальное количество суммы флавоноидов, измеряемое с установленной точностью, % 0,698 0,710 (Р=97 %)

специфичность отклонение от фактического содержания флавоноидов при добавлении фенолкарбоновых кислот, % 0,004 0,007

Проведенная валидационная оценка методики подтвердила ее пригодность для решения вопросов стандартизации. Разработанная методика апробирована на б образцах препарата.

В ходе стандартизации были определены нормативные показатели содержания флавоноидов, дубильных веществ, спирта, плотности и сухого остатка (табл. 10).

Таблица 10

Статистические параметры и нормативные показатели экстракта противодиабетического

Статистические параметры по выборке п = 6 Показатели содержания, % Плотность, г/см3 Сухой остаток, %

флавоноиды дубильные вещества спирт

ДХ 0,504 6,1 29,3 1,057 26,3

АХ 0,072 0,6 0,7 0,005 1,2

Хгпах 0,599 7,3 30,7 1,066 30,0

0,402 5,5 28,6 1,051 24,8

5 0,0686 0,61 0,76 0,005 1,56

Б' 0,00471 0,3733 0,5828 0,00003 2,45

Предлагаемый норматив не менее 0,3 не менее 4,5 28-31 1,05 -1,07 не менее 22

Для изучения влияния процесса хранения на содержание БАВ в экстракте противодиабетическом было использовано шесть опытных образцов. Эксперимент проводили в течение 33 месяцев. Каждые три месяца оценивали количественное содержание 5 групп БАВ, приведенных в табл. 11. Для интерпретацию! результатов был проведен однофакторный дисперсионный анализ, парное сравнение данных проводили по критериям Стъюдента и Шеффе. Однофакторный дисперсионный анализ показал, что изменения, происходящие в процессе хранения в содержании флавоноидов, фенолов, полисахаридов и органических кислот, статистически незначимы (при Р=95 %). Изменения в содержании дубильных веществ хотя и незначительны, но достоверны.

Таблица 11

Изменение содержания БАВ в экстракте в процессе хранения, %

Группа веществ Сроки хранения, месяцы v.u6

0 3 6 9 12 15 18 21 24

флавоноиды 0,51 0,51 0,50 0,51 0,50 0,48 0,47 0,46 0,46 14 6

фенолы 24,3 24,5 24,7 24,5 24,8 24,7 24,9 25,0 25,0 3 2

органические кислоты 0,93 0,93 0,95 0,96 0,94 0,93 0,93 0,93 0,94 9 1

дубильные вещества 6,1 6,1 6,3 6,2 6,3 6,3 6,3 6,4 7,1 7 5

полисахариды 4,8 4,8 4,9 5,0 5,0 4,9 4,9 5,1 5,0 7 2

Учитывая колебания в содержании основных действующих веществ в образцах экстрактов разных серий, мы определили коэффициенты вариации содержания БАВ по серийной выборке образцов (УВЫ6.) и по срокам хранения

(У,ф.).Сопоставление коэффициентов вариации подтверждает незначимость изменений, происходящих в процессе двух лет хранения экстракта с точки зрения фармацевтической практики.

Определение физических показателей качества экстракта (содержание спирта, сухого остатка, плотность) и его микробиологической чистоты показало, что на протяжении всего периода хранения эти показатели остаются стабильными.

В целом, по экспериментальным данным и результатам статистического анализа следует сделать заключение о возможном сроке годности экстракта проти одиабетического в течение двух лет.

Таким образом, в результате проведенного исследования разработаны методики подтверждения подлинности и доброкачественности препарата, нормативы качества экстракта. Определены срок годности и показатели микробиологической чистоты. На основании проведенных исследований подготовлен проект ФСП.

Оптимизация способа получения экстракта жидкого противодиабетического

Как известно, на себестоимость продукта оказывает влияние ряд технологических факторов, подлежащих регулированию: в частности длительность настаивания, соотношение твердой и жидкой фаз, число ступеней экстракции. Перечисленные факторы могут быть изменены при этом качество продукта должно соответствовать требованиям НД. Для достижения баланса между себестоимостью и качеством препарата нами была проведена оптимизация способа получения экстракта противодиабетического.

Оптимизацию технологии экстракта проводили с использованием метода математического планирования эксперимента, при этом определяли влияние трех основных факторов (соотношение твердой и жидкой фаз, число ступеней экстракции и продолжительность экстрагирования). Диапазоны изменений и уровни градаций факторов выбирали с учетом опыта производства жидких экстрактов, получаемых методом реперколяции.

Экстракты, полученные в каждом из 9 опытов, анализировали по параметрам содержания флавоноидов, фенолов, дубильных веществ, показателей спирта, плотности и сухого остатка.

Однофакторный дисперсионный анализ полученных результатов показал, что при Р = 95 % на содержание сухого остатка значимое влияние оказывает количество перколяторов в батарее, на себестоимость готового продукта значимо влияет фактор продолжительности настаивания. Влияние факторов в выбранных интервалах варьирования на экстрагирование флавоноидов оказалось на уровне ошибки определения.

Корреляционный анализ экспериментальных данных показал тесную взаимосвязь при экстрагировании суммы фенольных соединений, флавоноидов и дубильных веществ. Коэффициент корреляции находится в диапазоне от 0,96 до 0,98. Относительно невысокий коэффициент корреляции между

содержанием флавоноидов и сухим остатком в экстрактах подтверждает целесообразность стандартизации препарата по обоим показателям. Эти показатели, а также себестоимость единицы готового продукта послужили критерием оптимизации технологии экстракта.

Множественный регрессионный анализ, проведенный с использованием программы Statgraphic Plus for Windows 2.1, позволил выбрать следующие функции отклика для показателя «сухой остаток» (F), для показателя «содержание флавоноидов» (Е) и для показателя «себестоимость» (Н): F = 10,7792 - 7,27333 у + 9,43833 z — 0,68916 z2

Е = 0,377958 - 0,112у + 0,0855z - 0,003458332^

Н = 378,473-33,0203x+3,04167x2-14,6969xz-40,0357^+117,151Z+28.6667Z2, где х - продолжительность настаивания, у - соотношение сырье: готовый продукт, z - число перколяторов.

Проверка статистических гипотез показала, что между экспериментально полученными и расчетными значениями статистически значимых различий не наблюдается (табл. 12).

Таблица 12

Результаты статистической обработки результатов, полученных _экспериментальным и теоретическим способом _

Исходные данные Сухой остаток, % Доверительный интервал Дисперсия, Критерий Стьюдента, t Критическое значение, '0.05

экспериментальные данные 29,82 3,97 26,69 0,004 2,31

рассчитанные результаты 29,81 3,75 23,85

Расчет оптимальной схемы производства показал, что наименьшие значения себестоимости при полном соответствии препарата стандартным показателям ожидаются при соотношении сырье: готовый продукт — 1:1,5, количество перколяторов — 6, продолжительности настаивания —12 ч.

Общие выводы

1. Показано присутствие в препарате флавоноидов, простых фенолов, фенолкарбоновых кислот, дубильных веществ, сапонинов, кумаринов, моносахаров и полисахаридов; хроматографически идентифицировано 17 индивидуальных веществ. Установлен минеральный состав препарата: в экстракте обнаружено 32 элемента, в том числе терапевтически значимых при сахарном диабете - V, Сг, Мп, Со, Си, Хп.

2. Установлено сходство комплекса БАВ экстракта и настоя из сбора противодиабетического, обоснована возможность создания готовой лекарственной формы - экстракта жидкого.

3. Определен оптимальный экстр агент для получения препарата - спирт этиловый 40 %, и установлен оптимальный размер частиц ЛРС: для плодов калины 3 мм, плодов шиповника—2 мм, листьев брусники - 3 мм, побегов черники — 2 мм, побегов леспедецы — 3 мм, листьев крапивы — 5 мм. Разработан оптимальный способ закладки сырья в перколяторы: послойная загрузка с ранжированием по содержанию экстрактивных веществ.

4. Установлены показатели подлинности экстракта: в УФ спектре должны обнаруживаться экстремумы - минимум в интервале 259-263 нм, максимум II полосы в интервале 279-283 нм и максимум I полосы (плечо) - 313-323 нм; разработана ВЭТСХ методика, получены стандартные хроматограммы, включенные в проект ФСП.

5. Разработана спекхрофотометрическая методика количественного определения флавоноидов в экстракте и обоснован норматив их содержания - не менее 0,3 %.

6. Установлены нормы содержания дубильных веществ - не менее 4,5 %, спирта - 28-31 %, показатели сухого остатка - не менее 22 %, плотности -0,050-0,070 г/см3. Разработан проект ФСП на экстракт.

7. Обоснован срок годности препарата - 2 года. Установлено, что в течение указанного срока содержание флавоноидов, фенолов, органических кислот и полисахаридов изменяется не достоверно.

8. С помощью метода математического планирования проведена оптимизация технологии и предложен способ получения экстракта противодиабетического по минимальной себестоимости.

Список опубликованных работ

1. Фогт (Смольникова), В. П. Исследование возможности получения экстракта из сбора сахароснижающего /В. П. Фогт // Актуальные вопросы современной медицины: материалы 60-й итоговой научной конференции студентов и молодых ученых. Хабаровск, апрель 2003. - Хабаровск: Издательство ДВГМУ, 2003. - С. 132-133.

2. Фогт, В. П. К вопросу разработки количественного определения флавоноидов в экстракте жидком гипогликемическом /В. П. Фогт // Актуальные вопросы современной медицины: материалы 62-й итоговой научной конференции студентов и молодых ученых. Хабаровск, апрель 2005. - Хабаровск: Издательство ДВГМУ, 2003. - С. 123-125.

3. Фогт, В. П. Обоснование возможности разработки готовой лекарственной формы на основе прописи сахароснижающего сбора / В. П. Фогт, Н. А. Цимбалист, А. С. Степанов, Т. А. Степанова // Дальневосточный медицинский журнал. - 2006. - № 1. - С. 88-90.

4. Фогт, В. П. Оптимизация способа получения противодиабетического экстракта жидкого / В. П. Фогт, Т. А. Степанова // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. трудов. - Пятигорск, 2006. - Вып. 61. - С. 144-145.

5. Кононова, А. В. Влияние измельченности компонентов экстракта противодиабетического на извлечение флавоноидов / А. В. Кононова, В. П. Фогт // Актуальные вопросы современной медицины: материалы 63-й итоговой научной конференции студентов и молодых ученых. Хабаровск, апрель 2006. - Хабаровск: Издательство ДВГМУ, 2006. - С. 93-95.

6. Фогт, В. П. Количественное определение флавоноидов в экстракте противодиабетическом / В. П. Фогт, Т. А. Степанова // Фармация. - 2007. -№ 4. -С. 24-25.

7. Фогт, В. П. Микроэлементный состав экстракта противодиабетического / В. П. Фогт, Т. А. Степанова, Л. С. Боковенко // Дальневосточный медицинский журнал. - 2007. - № 3. - С. 96-99.

8. Фогт, В. П. Основные этапы разработки экстракта жидкого противодиабетического / В. П. Фогт, Т. А. Степанова // Организация лекарственного обеспечения рациональной фармакотерапии в условиях реализации национального проекта в дальневосточном федеральном округе: сб. науч. трудов Дальневосточной региональной научно-практической конференции (27-28 марта 2008 г.). - Хабаровск, 2008. - С. 104-106.

9. Фогт, В. П. Использование методов ВЭТСХ и ВЭЖХ в разработке экстракта противодиабетического / В. П. Фогт, А. С. Степанов, Т. А. Степанова // Химия растительного сырья. - 2008. - № 4. - С. 75-78.

10.Фогт, В. П. Стандартизация экстракта жидкого противодиабетического / В. П. Фогт, Т. А. Степанова // Дальневосточная фармация — основные тенденции развития: сб. науч. трудов Дальневосточной региональной научно-практической конференции (10-11 сентября 2009 г.). — Хабаровск, 2009.-С. 108-110.

11.Фогт, В. П. Разработка способа получения и стандартизация экстракта жидкого противодиабетического / В. П. Фогт // Молодые ученые -Хабаровскому краю: материалы XIII краевого конкурса молодых ученых и аспирантов, Хабаровск, 14-25 января 2011 г.: в 2 т. - Хабаровск: Изд-во Тихоокеанского гос. Ун-та, 2011. - Т. 2. - С. 274-279.

Ю '::

Смольникова Валентина Петровна (Россия)

Разработка способа получения и стандартизация экстракта жидкого противодиабетического

Изучен химический состав экстракта. Обоснована перспективность разработки новой лекарственной формы противодиабетического состава. Определены оптимальные параметры экстрагирования сырья. Разработан метод определения подлинности препарата. Разработана спектрофотометрическая методика количественного определения флавоноидов. Проведена валидация хроматографических методик определения подлинности и количественного определения флавоноидов в препарате. Обоснованы нормативы качества и срок хранения препарата. Проведена оптимизация способа получения экстракта с использованием методов математического планирования эксперимента. Предложен способ получения нового препарата при минимальных экономических затратах.

Smolnikova Valentina Petrovna (Russia)

Working out of a way of reception and standardization of an liquid hypoglycemic extract

The chemical composition of an extract is studied. Prospects of development of a new medicinal form of hypoglycemic structure are proved. Optimum parameters of extraction of raw materials are defined. Techniques of determination of authenticity of a preparation are developed. Spectrophotometric technique of definition of flavonoids is developed too. Validation of a spectrophotometric technique and chromatographic techniques of determination of authenticity is carried out Standard indicators of extract are defined. The preparation expiration date is reasonable. Optimization of a way of receiving a preparation with use of methods of mathematical planning of experiment is carried out. The way of receiving a new preparation is offered at the minimum economic expenses.

Формат 60x84/16. Бумага писчая. Усл. печ. л. 1. Тираж 100 экз. Заказ . Изд-во ДВГМУ. 680000, г. Хабаровск, ул. Пушкина, 31

Оглавление диссертации Смольникова, Валентина Петровна :: 2012 :: Пермь

Введение.

ГЛАВА I. Влияние основных факторов на выход экстрактивных и биологически активных веществ (БАВ) из лекарственного растительного сырья (ЛРС) в извлечение (обзор литературы)

1.1 Влияние факторов, обеспечивающих разность концентрации экстрагируемых веществ между сырьем и экстрагентом.

1.2 Влияние размера частиц и характера измельчения растительного сырья на выход БАВ в извлечение.

1.3 Влияние способа измельчения сырья на выход БАВ в извлечение.

1.4 Влияние морфологической структуры ЛРС на выход БАВ в извлечение при совместном экстрагировании различных видов сырья.

1.5 Влияние полярности растворителей на выход БАВ в извлечение.

1.6 Сравнительное изучение химического состава многокомпонентных фитопрепаратов и сырьевых компонентов как основа их стандартизации.

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия, фармакогнозия", Смольникова, Валентина Петровна, автореферат

Актуальность темы. В настоящее время лекарственные средства, полученные из растительного сырья, составляют около 40 % от общего числа разрешенных к применению препаратов. Лекарственные растительные препараты используются как в комплексном лечении заболеваний, так и в профилактических целях.

Современную тенденцию роста интереса к лекарственным средствам (ЛС) растительного происхождения можно объяснить многочисленными научными и научно-популярными публикациями, способствующими повышению уровня информированности специалистов и населения об эффективности и безопасности таких ЛС. Кроме того, многовековые традиции народной медицины сформировали большое доверие к лекарственным растениям практически во всех социальных группах населения. Следует отметить, что рыночные цены на отечественные препараты растительного происхождения в основном ниже, чем на синтетические препараты. Таким образом, на российском фармацевтическом рынке существует обоснованный спрос на фитопрепараты.

Одним из перспективных направлений применения лекарственных растений и препаратов на их основе является лечение хронических заболеваний, так как фитопрепараты обеспечивают безопасность терапии при длительном курсовом лечении. Кроме того, поливалентность химического состава лекарственных растений позволяет использовать их для компенсации патологических процессов, сопутствующих основному заболеванию. Так, например, при сахарном диабете возникает ряд вторичных метаболических и патофизиологических нарушений. Терапия таких больных с использованием лекарственных растений оказывается более эффективной, если она проводится параллельно с основным курсом лечения и направлена не только на снижение содержания сахара в крови, но и на лечение различных осложнений.

Необходимость поиска новых фитопрепаратов для лечения сахарного диабета определяется уровнем заболеваемости и смертности в результате болезни, а также недостаточным ассортиментом гипогликемических лекарственных средств растительного происхождения [164]. Государственный реестр лекарственных средств включает всего четыре номенклатурных позиции - сбор "Арфазетин" в пачках и брикетах, листья земляники, створки плодов фасоли обыкновенной [37].

Все лекарственные растения, обладающие гипогликемизирующим эффектом, могут применяться самостоятельно (в виде настоев и отваров), либо в виде различных сборов [91, 130, 205-212, 215-217, 220, 221, 225, 227, 228, 230-233, 236, 237, 239-242]. При составлении прописи сбора рекомендуется, в первую очередь, включать лекарственные растения, у которых наряду с основным фармакологическим действием установлено гипогликемическое действие [157]. В этом случае можно рассчитывать на комбинированное действие, направленное как на коррекцию осложнений, так и на основное заболевание.

В последнее время все большее внимание уделяется разработке экстракционных препаратов из растительного сырья вместо отваров и настоев. Травы и сборы на их основе, требующие экстемпорального приготовления, не удовлетворяют потребности различных групп населения. В меньшей степени они приобретаются людьми, ведущими активный образ жизни. Для данной группы населения предпочтительным является использование готовых лекарственных форм. Создание экстракционных препаратов позволяет повысить выход БАВ из сырья и соответственно увеличить их процентную концентрацию в фитопрепарате. При использовании готовых лекарственных форм наблюдается также повышение терапевтического эффекта за счет точности дозирования, обеспечивается удобство применения и хранения.

Современная система контроля качества лекарственных средств предъявляет к разработчикам все более жесткие требования по стандартизации новых препаратов. Наиболее сложной является стандартизация многокомпонентных средств, к которым относятся средства растительного происхождения. Поэтому разработка подходов, позволяющих надежно оценить качество препарата, представляет научно-практический интерес. Одним из перспективных направлений в этой сфере научных исследований является определение стандартной хроматограммы фитопрепарата.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является разработка способа получения и метода стандартизации экстракта жидкого противодиабетического.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- установить показатели подлинности и доброкачественности экстракта;

- разработать методику количественного определения флавоноидов в экстракте;

- обосновать нормативные показатели качества экстракта;

- определить с помощью метода математического планирования оптимальный способ получения экстракта.

Научная новизна. Впервые разработана оптимальная технологическая схема получения оригинального экстракта жидкого противодиабетического. С использованием современных методов анализа изучен качественный состав и количественное содержание БАВ экстракта. Установлен элементный состав препарата. Разработана спектрофотометрическая методика количественного определения флавоноидов и ВЭТСХ методика определения подлинности. Получены числовые показатели. Показано влияние числа ступеней экстракции и времени экстрагирования на себестоимость экстракта.

Практическая значимость работы. Разработан способ получения стандартного продукта при минимальных экономических затратах.

Разработаны показатели подлинности и доброкачественности экстракта противодиабетического, включенные в проект Фармакопейной статьи предприятия (ФСП).

Результаты работы апробированы в ГУЗ «Центр контроля качества и сертификации лекарственных средств» министерства здравоохранения Хабаровского края» и внедрены в учебный процесс кафедры фармакогнозии и ботаники ДВГМУ, а также кафедры фармацевтической технологии и биотехнологии с курсом ФПК и ППС ВГМУ. Акты внедрения прилагаются (Приложение 4).

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на: 60-й 62-й и 63-й итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых «Актуальные вопросы современной медицины» (Хабаровск, 2004; 2005; 2006 гг.); региональной научно-практической конференции «Организация лекарственного обеспечения рациональной фармакотерапии в условиях реализации национального проекта в Дальневосточном федеральном округе» (Хабаровск, 2008 г), межкафедральной научной конференции (Хабаровск, 2009 г.); конференции, посвященной 45-летию фармацевтического факультета ДВГМУ «Дальневосточная фармация -основные тенденции развития» (Хабаровск, 10-11 сентября 2009 г); XIII краевом конкурсе молодых ученых и аспирантов (Хабаровск, 20 января 2011 г).

Личный вклад автора. Автором диссертационного исследования самостоятельно проведены представленные в работе эксперименты, включая подготовку исследуемых образцов к анализу, работу на аналитическом оборудовании, анализ полученных данных с использованием методов математической статистики. При непосредственном участии автора проведено сопоставительное изучение химического состава экстракта противодиабетического и изученных ранее лекарственных форм - сбора и настоя. Проведены эксперименты по определению оптимальных технологических параметров экстрагирования лекарственного растительного сырья. Выполнен статистический анализ результатов. Разработан метод стандартизации экстракта. Определены нормативные показатели. Проведена валидация методик стандартизации препарата. Разработан проект ФСП на экстракт. А также разработан и экономически обоснован способ получения нового фитопрепарта.

Основные положения, выносимые на защиту: результаты изучения комплекса БАВ экстракта противодиабетического; результаты сравнительного анализа качественного состава и количественного содержания действующих веществ в экстракте и настое; результаты изучения влияния технологических факторов на выход БАВ в экстракт; обоснование методик определения подлинности экстракта и количественного содержания флавоноидов в препарате; результаты изучения влияния сроков хранения экстракта на содержание действующих веществ; результаты оптимизации способа получения экстракта.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, пяти глав экспериментальной работы, общих выводов, списка литературы и приложений. Список литературы включает 243 источника из них 38 на иностранном языке.

Заключение диссертационного исследования на тему "Разработка способа получения и стандартизация экстракта жидкого противодиабетического"

Общие выводы

3. Определен оптимальный экстрагент для получения препарата - спирт этиловый 40 %, и установлен оптимальный размер частиц ЛРС: для плодов калины 3 мм, плодов шиповника - 2 мм, листьев брусники - 3 мм, побегов черники - 2 мм, побегов леспедецы - 3 мм, листьев крапивы - 5 мм. Разработан оптимальный способ закладки сырья в перколяторы: послойная загрузка с ранжированием по содержанию экстрактивных веществ.

5. Разработана спектрофотометрическая методика количественного определения флавоноидов в экстракте и обоснован норматив их содержания - не менее 0,3 %.

6. Установлены нормы содержание дубильных веществ - не менее 4,5 %, спирта - 28-31 %, показатели сухого остатка - не менее 22 %, плотности - 0,050-0,070 г/см3. Разработан проект ФСП на экстракт.

7. Обоснован срок годности препарат - 2 года. Установлено, что в течение указанного срока содержание флавоноидов, фенолов, органических кислот и полисахаридов изменяется не достоверно.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Смольникова, Валентина Петровна

1. Авцын, А. П., Микроэлементозы человека Текст. / А. П. Авцын, А. А. Жаворонков, М. А. Риш. М.: «Медицина», 1991. - 596 с.

2. Акопян, В. Б. Ультразвук в производстве пищевых продуктов Текст. / В. Б. Акопян // Пищевая промышленность. 2003. - № 3. - С. 54-55.

3. Акопян, В. Б. Ультразвук в производстве пищевых продуктов Текст. / В. Б. Акопян // Пищевая промышленность. 2003. - № 4. - С. 68-69.

4. Албаков, А. Ю. Оптимизация процесса экстракции многокомпонентного сбора антистрессорного действия Текст. /А. Ю. Албаков // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб. науч. трудов. Вып. 59. -Пятигорск, 2004. - С. 72-74.

5. Андреева, В. Ю. Исследование химического состава надземной части манжетки обыкновенной Alchemillia vulgaris L.S.L Текст. / В. Ю. Андреева, Г. И. Калинкина // Химия растительного сырья. 2000. - № 2.-С. 79-85.

6. Антиоксидантные свойства сверхкритических экстрактов Текст. / А. Г. Лепешков, А. Р. Водник, В. Н. Прокофьев [и др.] // Пищевая промышленность. 2003. - № 12. - С. 56-57.

7. Арзамасцев, А. П. Валидация фармакопейных методов Текст. / А. П. Арзамасцев, Н. П. Садчикова, Ю. Я. Харитонов // Ведомости научного центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств. МЗ РФ. 2001. - № 1. - С. 28-35.

8. И.Ахрем, А. А. Тонкослойная хроматография Текст. / А. А. Ахрем, А. И. Кузнецова. М.: «Наука», 1965. - 175 с.

9. Бабенко Г. А. Микроэлементы в экспериментальной и клинической медицине Текст. / Г. А. Бабенко. Киев: Издательство «Здоров'я», 1965.- 183 с.

10. Беликов, В. В. Аналитические исследования природных фенольных соединений и разработка методов их количественного определения: автореф. дисс. докт. фарм. наук Текст. / Владимир Владимирович Беликов. Харьков, 1990. - 36 с.

11. Блинова, О. А. Теоретические и экспериментальные аспекты создания лекарственных средств на основе сырья природного происхождения : автореф. дисс. док. фарм. наук Текст. / Ольга Алексеевна Блинова. -Пермь, 2009. 43 с.

12. Бубенчиков, Р. А. Изучение флавоноидных соединений Viola odorata L. : материалы съезда Текст. / Р. А. Бубенчиков, Н. Ф. Гончаров // VIII

13. Международный Съезд Фитофарм 2004 «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения». Миккели, Финляндия, 21-23 июня 2004 года. СПб. : ВВМ, 2004. - С.235-237.

14. ВФС 42-1942-89 Побеги леспедецы двухцветной

15. ВФС 42-2660-95 Бальзам "Московия"

16. ВФС 42-2871-97 Эликсир "Кедровит"

17. Выделение, химический состав и гиполипидемическая активность суммы флавоноидов из ТЬегторз18 аКЬегтАога Текст. /3. А.

18. Хушбактова, С. X. Файзиева, В. Н. Сыров и др. // Химико-фармацевтический журнал. 2001. - Т. 35, № 3. - С. 35-38.

19. ВЭЖХ экстрактов шиповника Текст. / А. А. Аль-Нажар, А. С. Гаврилов, А. Н. Гришаков [и др.] // «Приоритеты фармацевтической науки и практики»: материалы заочной международной конференции. Москва 31 октября 2005 г. М.: Изд-во РУДН, 2006. - С. 287-289.

20. Гейсс, Ф. Основы тонкослойной хроматографии (планарная хроматография) Текс. / Ф. Гейсс; под ред. В. Г. Березкина; перевод с англ. М. А. Кошевник, Б. П. Лапин. Москва, 1999. - T. I. - С. 405.

21. Гейсс, Ф. Основы тонкослойной хроматографии (планарная хроматография) Текс. / Ф. Гейсс; под ред. В. Г. Березкина; перевод с англ. М. А. Кошевник, Б. П. Лапин. Москва, 1999. - T. II. - С. 348.

22. Государственная фармакопея Российской федерации XII издание. Часть 1. М.: «Издательство «Научный центр экспертизы средств медицинского применения», 2008. - 704 с.

23. Государственная Фармакопея СССР. 10-е изд. - М. : Медицина, 1968.- 1968 с.

24. Государственная Фармакопея СССР. 11-е изд. - М. : Медицина, 1987.-Вып. 1.-333 с.

25. Государственная Фармакопея СССР. 11-е изд. - М. : Медицина, 1990.-Вып. 2.-400 с.

26. Государственный реестр лекарственных средств. Официальное издание. М.: Минздрав РФ, 2002. - T. I. - 1300 с.

27. Гужва, Н. Н. Технология жидкого экстракта астрагала серпоплодного Текст. / Н. Н. Гужва. Фармация. - 2008. - № 6. - С. 40-42.

28. Дедов, И. И. Эпидемиология сахарного диабета: пособие для врачей Текст. / И. И. Дедов, Т. Е. Чазова, Ю. И. Сунцов. М., 2003. - 245 с.

29. Демченко, Д. В. Разработка технологии жидкого экстракта на основе листьев черники и женьшеня Текст. / Д. В. Демченко, Ю. Д. Папок, А. Б. Легостаева // Химико-фармацевтический журнал. 2008. - Т. 42, № 3. - С. 20-24.

30. Дифференциальная диагностика и лечение внутренних болезней: руководство для врачей. В 4 томах Текст. / Под общей редакцией Ф. И. Комарова. Изд. 3-е, обновленное и дополненное. Т. 4.

31. Ревматические болезни. Эндокринные болезни / Под ред. Е. JI. Насонова, М. И. Балаболкина М.: «Медицина», 2003. - 310 с.

32. Иванова, С. А. Особенности массопереноса липофильных БАВ при экстрагировании сырья двухфазной системой экстрагирования Текст. /

33. С. А. Иванова, В. А. Ванштейн, И. Е. Каухова // Химико-фармацевтический журнал. 2003. - Т. 37, № 8. - С. 30-33.

34. Изучение биологической активности масляного экстракта яснотки белой Текст. / Н. М. Петухова, А. В. Бурякина, Е. JI. Авенирова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. 2008. - Т.42, № 6. - С. 43-45.

35. Изучение экстракции плодов рябины и шиповника двухфазной системой экстрагентов : материалы съезда Текст. / С. А. Иванова, В.

36. А. Вайнштейн, И. Е. Каухова и др. // VIII Международный Съезд Фитофарм 2004 «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения». Миккели, Финляндия, 21-23 июня 2004 года. СПб. : ВВМ, 2004. - С. 660-664.

37. Ильясова, С. М. Выявление флавоноидов в листьях калины Текст. / С. М. Ильясова, Д. М. Попов // Фармация. 2005. - № 5. - С. 12-15.

38. Интенсивный метод экстрагирования кумаринов из корней Seseli grandivittatum Текст. М. А. Балабудкин, Э. М. Агаев, А. 3. Абышев [и др.] // Хим.-фарм. журнал. 1993. - № 3. - С. 47-48.

39. Исследование процесса экстрагирования при получении фитопрепарата «Эликсир Демидовский» Текст. / JI. И. Соколова, В. А. Вайнштейн, О. Н. Пожарицкая [и др.] // Фармация. 2000. - № 5-6. - С. 23-25.

40. Исследование экстракции алкалоидов из травы скополии Текст. / С. А. Минина, Н. А. Громова, Н. А. Филипин [и др.] // Хим.-фарм. журнал. -1998. № 3. - С. 82 (338)-85 (341).

41. К исследованию масляного экстракта семян лимонника китайского Текст. / Е. Н. Жукович, М. Ю. Семенова, JI. А. Шарикова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. 2008. - Т. 42, № 3. - С. 28-31.

42. Кайшева, Н. Ш. Применение интенсивного экстрагирования в технологии гемицеллюлоз Текст. / Н. Ш. Кайшева, Л. А. Бережная // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб. науч. тр. Вып. 61. - Пятигорск, 2006. - С. 94-95.

43. Карелин, А. И. Особенности экстракционных процессов, реализуемых в колонном аппарате Текст. / А. И. Карелин, Е. Н. Семенов // Журнал прикладной химии. Вып. 11.- 1997.-Т. 70. - С. 1852-1854.

44. Касьянов, Г. И. С02-экстракты лекарственных растений Текст. / Г. И. Касьянов, В. Ш. Банашек, Е. Ю. Рослякова // Пищевая промышленность. 2003. - № 6. - С. 86.

45. Каухова, И. Е. Новая методика получения растительных препаратов Текст. / И. Е. Каухова. Фармация. - 2006. - № 1. - С. 37-39.

46. Количественное определение гиперозида в сырье и жидком экстракте боярышника методом ВЭЖХ Текст. / С. Н. Морев, Т. Л. Киселева, Д. М. Попов [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. 1989. - № 7. -С.853-855.

47. Косматова, Н. В. Оптимизация процесса получения суммарного экстракта на основе растительного сырья с десенсибилизирующим действием : материалы съезда Текст. / Н. В. Косматова, А. В. Михайлова, М. А. Буракова, Н. Ю. Фролова // VII Международный

48. Съезд «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения». Санкт-Петербург Пушкин, 3-5 июля 2003 года. - СПб., 2003. - С.53-55.

49. Кравченко, Н. В. Выбор оптимальных размеров частиц при совместном экстрагировании различных видов растительного сырья, входящего в состав сборов Текст. / Н. В. Кравченко, И. А. Муравьев, Ю. Г. Пшуков // Фармация. 1976. - № 6. - С. 9-13.

50. Куркин, В. А. Место и роль ведущей группы биологически активных соединений в фармакогнозии Текст. / В. А. Куркин // Медицинский Вестник Башкортостана. Спец. выпуск. 2006. - Т. 4, № 1. - С. 141143.

51. Лобанова, А. А. Исследование биологически активных флавоноидов в экстрактах из растительного сырья Текст. / А. А. Лобанова, В. В. Будаева, Г. В. Саколич // Химия растительного сырья. 2004. - № 1. -С. 47-52.

52. Ломовский, О. И. Обработка дисперсных материалов и сред Текст. / О. И. Ломовский // Международный периодический сборник научных трудов. Вып. 12. - Одесса, 2002. - С. 133-149.

53. Макаров, В. Г. Стандартизация жидких лекарственных форм фитопрепаратов. 3.Исследование летучих компонентов препарата «Эликсир Алтайский» Текст. / В. Г. Макаров, К. А. Краснов, Н. А. Тюкавкина // Фармация. 1997. - № 5. - С. 20-22.

54. Марх, А. Т. Биохимия консервирования плодов и овощей Текст. / А. Т. Марх. М.: Пищ. пром-ть, 1973. - 371 с.

55. Масюк, И. М. Фармакогностическое изучение леспедецы двуцветной и разработка получения препарата гипоазотемического действия Рукопись. : автореф. дисс. . канд. наук / И. М. Масюк. Хабаровск, 1988.- 19 с.

56. Матющенко, Н. В. Стандартизация плодов рябины Текст. / Н. В. Матющенко, Т. А. Степанова // Фармация. 2003. - № 5. - С. 16-18.

57. Матющенко, Н.В. К вопросу стандартизации крапивы узколистной и рябины амурской / Н.В. Матющенко // Матер, регион, науч.-практ. конф. «Клиническая фармакология на Дальнем Востоке», Хабаровск, 29-30 мая 2001 г.-Хабаровск, 2001,- С. 187-189.

58. Мечикова, Г. Я. Определение суммы флавоноидов в листьях земляники восточной Текст. / Г. Я. Мечикова, Т. А. Степанова // Дальневосточный медицинский журнал. 2005. - № 2. - С. 78-81.

59. Минина, С. А. Оптимизация процесса экстрагирования корня женьшеня Текст. / С. А. Минина, Л. В. Шигарова, В. А. Вайнштейн // Хим.-фарм. журнал. 1998. - № 7. - С. 42-45.

60. Минина, С. А. Химия и технология фитопрепаратов Текст. / С. А. Минина, И. Е Каухова. М: Гэотар-мед, 2004. - 560 с.

61. Мичник, О. Ю. Методы получения сухих экстрактов из лекарственного растительного сырья Текст. / О. Ю. Мичник // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб. науч. трудов. Вып. 59. - Пятигорск, 2004. - С. 101.

62. Петербург Петродворец, 5-7 июля 2001 года. - СПб., 2001. - С. 111113.

63. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация Текст. / Под ред. проф. В. Л. Багировой, проф. В. А. Северцева. СПб. : СпецЛит, 2001. - 223 с.

64. Нуралиев, Ю. Н. Эффективность кверцетина при аллоксановом диабете Текст. / Ю. Н. Нуралиев, Г. А. Авезов // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1992. - №1. - С. 42-44.

65. Орловская, Т. В. Макро- и микроэлементный состав корней копеечника альпийского Текст. / Т. В. Орловская, М С. Бабаян // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб. науч. тр. Вып. 61. - Пятигорск, 2006. - С. 44-45.

66. Перспективы создания сухих экстрактов Текст. / И. А. Самылина, О. А. Блинова, JI. А. Кумышева [и др.] // Фармация. 2006. - № 2. - С. 43-46.

67. Петриченко, В. М. Очанки западного Урала (фармакогностические и биологические аспекты) Текст. / В. М. Петриченко, Т. В. Сухинина. Пермь: ГОУ ВПО «ПГФА Росздрава», 2006. - 145 с.

68. Печерская, JI. Г. Количественное определение флавоноидов в цветках ромашки Текст. / JI. Г. Печерская, Н. J1. Рогозкина // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической промышленности : сб. науч. тр. Вып. 60. - Пятигорск, 2005. - С. 4446.

69. Положение об организации управления качеством в учреждениях здравоохранения Российской Федерации: Приложение 1 к приказу МЗ РФ от 7 февраля 2000 г. № 45.

70. Получение антиоксиданта из листьев толокнянки экстракцией под действием постоянного электрического тока Текст. / Н. Ю. Грибова, Н. И. Белая, Т. А. Филипенко [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. 2008. - Т. 42, № 3. - С. 25-27.

71. Пономарев, В. Д. Экстрагирование растительного сырья Текст. / В. Д. Пономарев. М.: Медицина, 1976. - 203 с.

72. Попова, А. И. Содержание хлорофилла в омеле белой (Viscum aloum) Текст. / О. И. Попова, Д. А. Муравьева // Фармация. 1990. -№6.-С. 16.

73. Препараты плодов шиповника Текст. / А. А. Аль-Нажар, А. С. Гаврилов, А. Н. Гришаков [и др.] // «Приоритеты фармацевтической науки и практики»: материалы заочной международной конференции. Москва 31 октября 2005 г. М.: Изд-во РУДН,2006. - С. 289-291.

74. Пшуков, Ю. Г. Метод прогнозирования качества жидких экстрактов при их производстве способом репер ко ляции Текст. / Ю. Г. Пшуков, И. А. Муравьев // Фармация. 1987. - № 5. - С. 19-20.

75. Пшуков, Ю. Г. Разработка ресурсосберегающей технологии и норм качества на жидкий экстракт левзеи Текст. / Ю. Г. Пшуков, Т. А. Шаталова // Региональная конференция по фармации, фармакологии и подготовке кадров. Пятигорск, 1994. - С. 66-67.

76. Пшуков, Ю. Г. Разработка ресурсосберегающей технологии и принципов нормирования качества жидких экстрактов и настоек : автореф. дис. докт. фарм. наук Текст. / Юрий Георгиевич Пшуков. -Харьков, 1987. 36 с.

77. Разделение и идентификация компонентов комплексного фитопрепарата «Простанорм» методом ВЭЖХ Текст. / В. Л. Белбородов, Н. Г. Захарова, А. М. Савватеев // Химико-фармацевтический журнал. 2011. - № 9. - С. 19-22.

78. Разживин, Р. В. Определение веществ-маркеров при исследовании комплексных препаратов из лекарственного растительного сырья : автореф. дисс. канд. фарм. наук Текст. /Роман Вячеславович Разживин. Москва, 2008. - 24 с.

79. Разживин, Р. В. Поиск веществ-маркеров лекарственного растительного сырья Текст. / Р. В. Разживин, В. Ю. Решетняк, В. А. Попков // Фармация. 2008. - № 6. - С. 25-28.

80. Растительные препараты в комплексном лечении больных сахарным диабетом Текст. / С. М. Кит, И. С. Турчин, В. С. Кит [и др.] //Врачебное дело. 1987. - №7. - С. 7-10.

81. Растительные ресурсы России и сопредельных государств Текст.: [в 2 ч.]. СПб: Мир и семья.- 571с.

82. Ч. I: Семейства ЬусоросНасеае ЕрЬеёгасеае.,1995 - 281 с.

83. II : Дополнения к 1-7-му томам., 1996. 290 с.

84. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Magnoliaceae -Limoniaceae Текст. JL: Наука, 1984. -460 с.

85. Растительные ресурсы СССР: цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Paeoniaceae -Thymelaeaceae Текст. JL: Наука, 1985. - 336 с.

86. Руководство ICH «Валидация аналитических методик. Содержание и методология» Q2 (R1) //Фармация. 2008. — № 4. — С. 310.

87. Руководство по стандартизации лекарственных средств Текст. / Под ред. Р. У. Хабриева, В. JI. Багировой, В. Б. Герасимова. М.: ОАО «Издательство Медицина», 2006. - 352 с.

88. Рябова, Т. Н. Распространенность нарушенной регуляции глюкозы среди коренного (нанайцы) и пришлого населения в Хабаровском крае Текст. / Т. Н. Рябова, JI. Ю. Калинина // Дальневосточный медицинский журнал. 2005. - № 1. - С. 10-12.

89. Рябова, Т. Н. Распространенность сахарного диабета среди коренного (ульчи) и пришлого населения в Хабаровском крае Текст. / Т. Н. Рябова // Дальневосточный медицинский журнал. 2006. - 2. -С. 24-25.

90. Сальникова, Е. Н. Химическое исследование флавоноидов полыни горькой (Artemisia absintium L.), П. Сиверса (A. Sieversiana willd.) и П. Якутской (А. Jacutica Drob.) Текст. / Е. Н. Сальникова, Г.

91. И. Калинкина, С. Е. Дмитрук // Химия растительного сырья. 2001. -№3.-С. 71-78.

92. Самылина, И. А. Лекарственные растения: опыт и перспективы Текст. /И. А. Самылина, Г. Е. Пронченко, М. В. Кашникова // Новая Аптека 2001. № 1. - С 64-69.

93. Самылина, И. А. Пути использования лекарственного растительного сырья и его стандартизация Текст. / И. А. Самылина, И. А. Баландина// Фармация. -2004. № 2. - С. 39-41.

94. Самылина, И. А. Сравнительное изучение настоек календулы Текст. / И. А. Самылина, Н. С. Терешина. Фармация. - 2005. - № 6. -С. 6-8.

95. Селиванчикова, И. Б. Изучение компонентного состава фенольных соединений в гомеопатических настойках туи методом ТСХ. Сообщение 1. Текст. / И. Б. Селиванчикова, М. Н. Лякина, 3. П. Костенникова // Фармация. 2001. - № 3. - С. 19-21.

96. Сизова, А. И. Содержание антиоксидантов в экстрактах растительного сырья, полученных методом сверхкритической экстракции Текст. / А. И. Сизова, и. Ю. Попова // Химико-фармацевтический журнал. 2006. - Т. 40, № 4 . - С. 29-33.

97. Скорикова, Ю. Г. Полифенольный состав плодов и овощей и его изменение в процессе консервирования Текст лекций. / Ю. Г. Скорикова. Краснодар, 1988. - 70 с.

98. Сокольская, Т. А. Комплексная переработка плодов расторопши пятнистой : материалы съезда Текст. / Т. А. Сокольская // II

99. Международный Съезд «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения». Санкт-Петербург Валаам, 29 июня -2 июля 1998 года. - СПб., 1998. - С. 145-147.

100. Сорокина, А. А. Теоретическое и экспериментальное обоснование стандартизации настоев, отваров и сухих экстрактов из лекарственного растительного сырья: автореф. дис. докт. фарм. наук Текст. / Алла Анатольевна Сорокина. Москва, 2002. - 46 с.

101. Сорокина, А. А. Фитотерапия сахарного диабета у детей Текст. /А. А.Сорокина, В. П. Кукса, А. К. Углицких // Медицинский научный и учебно-методический журнал. 2001. - № 4. - С. 60-65.

102. Способ экстрагирования лекарственного растительного сырья Текст. / М. В. Швырев, А. Ю. Прошин, Е. В. Иванов [и др.] // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической промышленности : сб. науч. тр. Вып. 60. - Пятигорск, 2005. - С. 164166.

103. Стандартизация спиртосодержащих жидких лекарственных форм фитопрепаратов. 4.Исследование химического состава лекарственного препарата «Эликсир Кедровит» Текст. / В. Г. Макаров, К. А. Краснов, В. А. Утсаль [и др.] // Фармация. 1998. - № 4. - С. 44-46.

104. Степанова, Т.А. Фармакогностическое изучение викарных видов лекарственных растений Дальнего Востока: дис. . доктора фарм. наук Текст. / Татьяна Алексеевна Степанова- Хабаровск, 1997. 700 с. 192

105. Сунцов, Ю. И. Значение государственного регистра больных сахарным диабетом в развитии диабетологической службы Текст. / Ю. И. Сунцев, С. В. Кудрякова, JI. J1. Болотская // Сахарный диабет. -2002. -№ 1.-С. 28-31.

106. Супильникова, А. В. Качественный и количественный анализ лекарственного сырья и настойки полыни эстрагон Текст. / А. В. Супильникова // Фармация. 2002. - № 3. - С. 11-14.

107. Теория и аппаратурное оформление процесса экстракции Текст. / Под ред. С. А. Мининой, Н. А. Громовой. Л. : ЛХФИ, 1985. - 39 с.

108. Технология лекарственных форм шалфея (Salvia officinalis) для отоларингологии Текст. / С. Р. Магомедова, Э. Ф. Степанова, И. Н.

109. Зилфикаров и др. // Региональная конференция по фармации, фармакологии и подготовке кадров : сб. науч. тр. Пятигорск, 2002. -С. 50-51.

110. Технология получения и фармакогностические свойства сухого экстракта из травы очанки коротковолосистой Текст. / В. М. Петриченко, Т. В. Сухинина, Н. И. Шрамм [и др.] // Хим.-фарм. журнал. 2005. - Т. 39, № 3. - С. 33-36.

111. Технология получения и фармакологические свойства сухого экстракта из травы очанки коротковолосистой Текст. /В. М. Петриченко, Т. В. Сухинина, Н. И. Шрам [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. 2005 - Т.39. - № 3. - С. 33-36.

112. ТУ 64-4-72-88 «Плод облепихи сухой»

113. Ушакова, О. В. Эпидемиология сахарного диабета в Хабаровском крае Текст. / О. В. Ушакова // Дальневосточный медицинский журнал. -2005.-№2.-С. 30-32.

114. Фархутдинов, Р. Г. Оптимизация методов экстракции и определения флавоноидов. Оценка содержания флавоноидов в красностебельном сорте гречихи в различных фазах развития Текст. /

115. Р. Г. Фархутдинов, Н. Л. Егудин, А. М. Сабитов // Медицинский вестник Башкортостана. Спец. выпуск. 2006. - Т.4, № 1. - С. 173-175.

116. Федеральный закон № 86-ФЗ «О лекарственных средствах». М.: Издательство «Ось-89», 2000. - 32 с.

117. Фридман, В. М. Физико-химическое действие ультразвука на гетерогенные диффузионные процессы жидкостной обработки материалов : Применение ультразвука в химико-технологических процессах Текст. / В. М. Фридман. М., 1960.

118. ФС 42-18889-95 Настойка зверобоя

119. ФС 42-1932-95 Настойка стальника

120. ФС 42-1966-98 Экстракт пустырника жидкий

121. ФС 42-1971-90 Экстракт горицвета жидкий

122. ФС 42-2163-96 Экстракт родиолы жидкий

123. ФС 42-2833-92 Экстракт элеутерококка жидкий

124. ФС 42-3044-98 Настойка «Панаксел»

125. ФС 42-3056-98 Настойка «Кристина»

126. ФС 42-3267-98 «Простанорм»

127. ФС 42-3360-99 Настойка прополиса

128. ФС 42-3719-99 Экстракт боярышника жидкий

129. Хазиев, Р. Ш. Влияние технологических факторов на изготовление настоев из цветков ромашки Текст. / Р. Ш. Хазиев, Ю. В. Бусыгина, Р. А. Юсупов // Фармация. 2005. - № 5. - С. 26-28.

130. Химико-фармацевтическое изучение экстракта пятилистника кустарникового сухого Текст. / И. Г. Николаева, Т. А. Асеева, О. Д. Цыренжапова [и др.] // Хим.-фарм. журнал. 1999. - № 7. - С. 36-37.

131. Хмелев, В. Н. Многофункциональные ультразвуковые аппараты и их применение в условиях малых производств, сельском и домашнем хозяйстве Текст. / В. Н. Хмелев, О. В. Попова. Барнаул : Изд-во АлтГТУ, 1997. - 160 с.

132. Цимбалист, Н. А. Стандартизация сахарпонижающего сбора Текст. / Н. А. Цимбалист // Фармация. 2005. - № 4. - С. 12-14.

133. Чукарин, А. В. Изучение химического состава и разработка способов идентификации перца опьяняющего в БАДах, фитопрепаратах и сырье для их изготовления : автореф. дисс.канд. фарм. наук Текст. / Андрей Валерьевич Чукарин. Пермь, 2011. - 25 с.

134. Экстрагирование антиоксидантов из листьев толокнянки (Агси^арЬу^ Аёаш) в электрическом поле Текст. / Н. И. Белая, Т. А. Филипенко, А. В. Белый [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. -2006. Т. 40, № 9. - С. 42-44.

135. Экстрагирование в вакуум-осциллирующем режиме кипения Текст. / Е. В. Иванов, М. В. Швырев, М. А. Артемова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. 2006. - Т. 40, № 6. - С. 39-43.

136. Экстракция плодов софоры японской в присутствии ПАВ Текст. / О. С. Охременко, В. И. Погорелов, В. В. Верещагина [и др.] // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сб. науч. тр. Вып. 61. - Пятигорск, 2006. - С. 123-126.

137. Электроимпульсная методика переработки надземной части женьшеня Текст. / К. В. Мартиросян, О. Н. Васильева, Д. А. Муравьева [и др.] // Человек и лекарство : тезисы доклада 6-го Российского национального конгресса. М., 1999. - С. 439-440.

138. An experimental evaluation of the antidiabetic and antilipidemic properties of a standardized Momordica charantia fruit extract Electronic resource. / N. P. Fernandes, С. V. Lagishetty, V. S. Panda [etc.]. [India] :

139. NSBI. Regime available : http://BMC/Complement/Altern/Med/2007/Sep-PubMed/Result.mht

140. Anti-diabetic activity of Jussiaea suffruticosa extract in rats Text. / T. Murugesan, Rao Bhaskara, Sinha Sanghamitra [et al.] // Pharm, and Pharmacol, commun. 2000. - Vol.6, № 10. - P. 451-453.

141. Anti-diabetic and hypoglycaemic effects of Momordica charantia (bitter melon): a mini review Electronic resource. / L. Leung, R. Birtwhistle, J. Kotecha [etc.]. [Canada] : NSBI. - Regime available :http://Br/J/Nutr./2009/Dec-PubMed/result.mht

142. Antidiabetic effect of Oenanthe javanica flavone Text. / Yang Xin-Bo, Huang Zheng-Ming, Cao Wen-Bin [et al.] // Acta Pharmacol. Sin. 2000. -Vol. 21, №3,-P. 239-242.

143. Catchpole, O. J. Extraction of polyunsaturated Fatty Acids and Fatty Acids Ethyl Esters from Urea Solutions Using Supercritical C02 Text. / Proc. Meeting of Supercritical Fluid. Venice, Italy. 2002. Italy, 2002. - P. 352-353.

144. Effect of a hypoglycemic components of ginseng radix on insulin biosynthesis in normal and diabetic animals Text. / I. Waki, H. Kyo, M. Yasuda [et al.] // J. pharm, dyn. 1982. - Vol. 5, N 8. - P. 547-554.

145. Ellmain-Wojtassek, M. Zwazki flavonoidowe w Urtica Dioica L. Text. / M. Ellmain-Wojtassek, W. Bylka, Z. Kowalewski // Herba pol. -1986. Vol. 32, No. 3. P. 131-137.

146. Flavonoids: chemistry, biochemistry and application Text. / Edited by 0yvind M. Andersen, Kenneth R. Markham. Taylor & Francis group, 2006. - 1209 p.

147. Green tea polyphenols and dietary fibre protect against kidney damage in rats with diabetic nephropathy Text. / Takako Yokozawa, Takako Nakagawa, Takeshi Oya [et setera] // Journal of pharmacy and pharmacology. Vol. 57. - 2005. - № 6. - PP. 773-780.

148. Hypoglycemic effect of flavonoids from Prinsepia utilis on alloxan-induced diabetic mice Electronic resource. / R. Y. Jia, Z. Q. Yin, X. L. Wu, [etc.]. [China] : NSBI. - Regime available : http://Zhong/Yao/Cai./2008/Mar-PubMed/result.mht

149. Isolation and Characterization of Polyphenol Type-A Polymers from Cinnamon with Insulin-like Biological Activity Text. / R. A. Anderson, C. L. Broadhurst, M. M. Polansky [et al.] // J. Agric. Food Chem. 2004. -Vol.52, №1.-P. 65 -70.

150. Jean, F. I., Essential oils and microwave extract of cultivated plants Text. / F. I. Jean, G. J. Colling, D. Lord // Perfumer and Florist. 1992. -№ 17.-P. 35-41.

151. King, H. Global burden of diabetes, 1995-2025: prevalence, numerical estimates, and projections Text. / H. King, R. E. Aubert, W. H. Herman // Diabetes Care. 1998. - N 21. - P. 1414-1431.

152. Krawinkel, M. B. Bitter gourd (Momordica Charantia): A dietary approach to hyperglycemia Electronic resource. / M. B. Krawinkel, G. B. Keding. [Germany] : NSBI. - Regime available : http://Nutr/Rev./2006/Jul-PubMed/result.mht

153. Melichar, M. Viriva extrakce jako metoda pripravy nekterych galenik Text. / M. Melichar, V. Ruser // Pharm, z. verein, apot. L. 1963. - Bd. 108. - P. 440-445.

154. Srijayanta, S. In vitro screening of medicinal plants for potential antidiabetic effects Text. / S. Srijayanta, P. M. Jones, S. Persand // J. pharm and pharmacol. 1998. - Vol. 50. - P. 219.

155. Stimulation of insulin release in rats by Die-Huang-Wan, a herbal mixture used in Chinese traditional medicine Text. / Cheng Juei-Tang, Liu I-Min, Chi Tzong-Cherng [et al.] // J. Pharm, and Pharmacol. 2001. -Vol. 53, N 2. - P. 273-276.

156. Study of the anti-hyperglycemic effect of anti-diabetic plants in rabbits with impaired glucose tolerance Text. / F. J. Alarcon-Aguilar, T. Banderas-Dorantes, A. Gutierrez-Leon [et al.] // Proc West Pharmacol. Soc. 2003. -N46. - P. 148-152.

157. Supercritical Fluid: Chemical Engineering principles and application Text. / Eds. N. G. Scuires, M. E. Paulaytis // ACS Symp. Ser. 329. -Washington, 1987. - P. 400-404.

158. Supercritical Fluid: Science and Technology Text. / Ed. M. E. Paulaytis // ACS Symp. Ser. 400. - Washington, 1989. - P. 170-175.

159. Ultrasound in Food Processing : Culinary and Hospitelity Industry Publications services Text. / Ed. M. Povey, T. Mason. 1998.

160. Yoon, Ji-Won. Medicinal herbal compound for the prevention and treatment of diabetes. PCT Int. Apl. WO 02 89,825 (CI. A 61 К 33/24) Text. / Yoon Ji-Won, Jun Hee-Sook // Chem. Abstrs.- 2002,- Vol.137.- P. 57-60.

161. Zhang Xiang-Fan Anti-diabetic property of ethanolic extract of Andrographis paniculata in streptozotocin-diabetic rats Text. / Zhang Xiang-Fan, Tan Benny Kwong-Huat // Acta Pharmacol. Sin. 2000. - Vol. 21, №12. -P. 1157-1164.

162. Zhang, S. Q. Extraction of steroid saponins from Paris polyphylla Sm. Var. Yunnanensis using novel ultrahigh pressure extraction technology Text./ S. Q. Zhang, J. S. Zhang, C. Z. Wang // Химико-фармацевтический журнал. 2007. - т. 41, № 8. - С. 27-31.