Автореферат и диссертация по медицине (14.00.09) на тему:Профилактика и терапия бактериальных осложнений рекомбинантным, гранулоцитарным колониестимулирующим фактором у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением центральной нервной
Автореферат диссертации по медицине на тему Профилактика и терапия бактериальных осложнений рекомбинантным, гранулоцитарным колониестимулирующим фактором у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением центральной нервной
На правах рукописи
ПУХТИНСКАЯ МАРИНА ГАЕВНА
ПРОФИЛАКТИКА И ТЕРАПИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ РЕКОМБИНАНТНЫМ ГРАНУЛОЦИТАРНЫМ КОЛОНИЕСТИМУЛИРУЮЩИМ ФАКТОРОМ У НОВОРОЖДЕННЫХ С РЕСПИРАТОРНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ И ПЕРИНАТАЛЬНЫМ ПОРАЖЕНИЕМ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ, НАХОДЯЩИХСЯ НА ИСКУССТВЕННОЙ ВЕНТИЛЯЦИИ ЛЕГКИХ
14. 00. 09 - Педиатрия 14. 00. 36 - Аллергология и иммунология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Ростов-на-Дону 2005
Работа выполнена в Ростовском научно-исследовательском институте акушерства и педиатрии Минздравсоцразвития РФ
Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор
Эстрин Владимир Владимирович, кандидат медицинских наук Ефанова Елена Антоновна
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор
Сизякина Людмила Петровна доктор медицинских наук, профессор Антонов Альберт Григорьевич
Ведущая организация: Кубанская государственная медицинская академия
Защита состоится <г'»__2005 г. в (О часов
на заседании диссертационного совета Д 208.082.05 при ГОУ ВПО Ростовском государственном медицинском университете (344022, г. Ростов-на-Дону, пер. Нахичеванский, 29)
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО Ростовского государственного медицинского университета
Автореферат разослан « ^ »_2005 г.
Ученый секретарь диссертационного совета доцент
В.А. Шовкун
Челн
toon мъьчьь
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АД - артериальное давление
АПК - антигенпредставляющие клетки
АЧН - абсолютное число нейтрофилов
БАВ - биологически активные вещества
Г-КСФ - гранулоцитарный колониестимулирующий фактор
ГКГ - главный комплекс гистосовместимости
ГМ-КСФ - гранулоцитарно-макрофагальный КСФ
чр-ГКСФ - человеческий рекомбинантный ГКСФ (филграстим)
ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа
ИВЛ - искусственная вентиляция легких
ИКК - иммунокомпетентные клетки
ИЛ - интерлейкины
ИРИ - иммуно-регуляторный индекс
ИФА - иммуноферментный анализ
ЛПС - липополисахариды
MAC - мекониально-аспирационный синдром
МКА - моноклональные антитела
НИ - нейтрофильный индекс
OAK - общий анализ крови
РДС - респираторный дистресс-синдром
рИФ - рекомбинантный интерферон
СВРО - системная воспалительная реакция организма
ФГА - фитогемаглютинация
ФНО - фактор некроза опухоли
ЦНС - центральная нервная система
CD - антигены кластеров дифференцировки клеток
NK - естественные киллеры
IVIG - иммуноглобулин для внутривенного введения
Г-КОЕ - гранулоцитарно-колон1|ев^^э^5|й5553ЙЙйН
БИБЛИОТЕКА I
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы
Внедрение в клиническую практику современных методов терапии респираторной патологии позволило значительно снизить уровень перинатальной смертности. Однако рост бактериальных осложнений остается важной проблемой в отделениях интенсивной терапии и реанимации новорожденных, так как септическая инфекция по-прежнему занимает одно из ведущих мест в структуре детской смертности. По данным различных авторов летальность от неонатального сепсиса в настоящее время составляет 13-50%, что существенно снижает достижения современной педиатрической науки (М. Эрикссон, Р. Беннет, 1998; Ю. Ф. Исаков, Н. В. Белобородова, 2001), Низкая толерантность новорожденных, находящихся на ИВ Л, к возникновению бактериальных осложнений определяется целым рядом факторов: тяжесть состояния пациентов вследствие основного и сопутствующих заболеваний, особенности иммунной системы новорожденного ребенка, необходимость проведения инвазивных методов диагностики и лабораторного мониторинга, а также изменение этиологической структуры инфицирующих микроорганизмов, и появление среди них штаммов, полирезистентных к большинству антибиотиков, применяемых в клинике. Эти обстоятельства указывают на необходимость разработки иных методов профилактики и интенсивной терапии бактериальных осложнений, так как высокий уровень летальности при неонатальном сепсисе неоспоримо доказывает, что традиционные программы практически исчерпаны.
В настоящее время взаимосвязь между возникновением бактериальных осложнений и развитием нейтропении доказана и не вызывает сомнений (в. Р. Вос1еу, У. 8. БаИге, 1996). Ряд авторов и клинический опыт нашего отделения указывали на терапевтическую эффективность использования в неонатологии человеческого рекомбинантного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора для коррекции нейтропении, в профилактике и терапии сепсиса (Гилан и соавт., 1994; БсЫЫег и соавт., 1998). Разработка клинико-иммунологических критериев назначения чр-ГКСФ у новорожденных с нейтропенией, оптимального дозирования препарата, оценка его влияния на возникновение, развитие и исход бактериальных осложнений, а так же изучение безопасности его использования у данного контингента больных определяют актуальность настоящих исследований.
Цель исследования
Целью настоящих исследований явилось снижение частоты развития и повышение эффективности терапии бактериальных осложнений у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся.^ ИВЛ,•ттутем использования чр-ГКСФ в стандартной
интенсивной терйапии.»' '3 *'"
• »{„ '
Задачи исследования:
1. Провести контролируемое рандомизированное клиническое испытание чр-ГКСФ у новорожденных с нейтропенией, имеющих респираторную патологию и перинатальное поражение ЦНС.
2. Определить влияние чр-ГКСФ на основные медико-статистические показатели (частота развития бактериальных осложнений, летальность, длительность ИВЛ и продолжительность госпитализации) у новорожденных, имеющих тяжелую респираторную патологию и перинатальное поражение ЦНС.
3. Изучить состояние иммунитета у новорожденных с нейтропенией, тяжелой респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС.
4. Изучить влияние чр-ГКСФ на плазменный уровень некоторых ИЛ, субпопуляционный состав лимфоцитов и некоторые биохимические показатели у новорожденных с нейтропенией и тяжелой респираторной патологией, сочетающейся с перинатальным поражением ЦНС.
5. Разработать клинико-иммунологичекие критерии назначения и оптимального дозирования чр-ГКСФ у данного контингента больных.
Научная новизна
В результате исследования впервые:
- дано теоретическое и клинико-лабораторное обоснование безопасности и эффективности использования чр-ГКСФ в профилактике и терапии бактериальных осложнений у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ;
- выявлены изменения субпопуляционного состава лимфоцитов и активности некоторых ИЛ плазмы, сопровождающие развитие нейтропении у новорожденных с тяжелой респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС;
- изучено влияние чр-ГКСФ на субпопуляционный состав лимфоцитов, плазменный уровень про- и противовоспалительных ИЛ и некоторые биохимические показатели у новорожденных с указанной патологией;
- обоснованы рекомендации по оптимальному дозированию чр-ГКСФ у новорожденных.
Практическая значимость
Теоретическое обоснование использования чр-ГКСФ в профилактике и терапии бактериальных осложнений у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ, позволит значительно сократить частоту развития неонатального сепсиса и летальность среди указанного контингента больных.
Положения, выносимые на защиту
1. Развитие нейтропении у новорожденных с тяжелой респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС сопровождается изменением
активности про- и противовоспалительных ИЛ плазмы и субпопуляционного состава лейкоцитов.
2. Использование чр-ГКСФ в стандартной интенсивной терапии позволит снизить частоту развития неонатального сепсиса и летальность у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ.
3. Терапевтическая эффективность чр-ГКСФ определяется его способностью увеличивать количество лейкоцитов, изменять их субпопуляционный состав, а так же влиять на активность про- и противовоспалительных ИЛ плазмы.
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 26 печатных работ, в том числе 3 изобретения:
«Способ доклинической диагностики сепсиса у новорожденных с дыхательными расстройствами и перинатальным поражением ЦНС» (№ 2185628 от 20.07.2002).
"Способ ранней диагностики сепсиса у новорожденных" (№ 2180119 от 27.02. 2002).
«Способ прогнозирования исхода бактериальных инфекций у новорожденных детей» (№ 2246729 от 20.02. 2005).
Внедрение полученных результатов в практику здравоохранения
Практические рекомендации, вытекающие из материалов исследования, внедрены в практику работы отделения реанимации РНИИАП. Результаты проведенных исследований используются при проведении лекций на республиканских и областных семинарах и курсах повышения квалификации врачей по интенсивной терапии и реанимации.
Апробация работы
Материалы диссертации представлены на Российском конгрессе по педиатрической анестезиологии, реанимации и интенсивной терапии (24-26 сентября 2001, Москва), научно-практической конференции ЮФО "Антибактериальные стратегии в гинекологии, акушерстве и педиатрии" (11.12.2001, Ростов-на-Дону), I научно-практической конференции анестезиологов и реаниматологов Юга России «Актуальные проблемы педиатрической анестезиологии, реаниматологии и интенсивной терапии» (18.05.02, Ростов-на-Дону), научно-практической конференции педиатров Юга России "Актуальные вопросы педиатрии" (13-14 ноября 2003, Ростов-на-Дону), на тематическом семинаре для врачей ЮФО «Новые диагностические и лечебные технологии» (30.09-1.10.03, Ростов-на-Дону).
Основные положения работы заслушаны на заседании Ученого совета Ростовского НИИ акушерства и педиатрии Минздравсоцразвития РФ 3.03.2005 г. Протокол №2.
Структура диссертации
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием объема и методов исследования, трех глав изложения результатов собственных исследований, заключения, выводов и практических рекомендаций. Библиография включает 138 первоисточников, из них 63 отечественных автора. Работа иллюстрирована 44 таблицами, 17 рисунками и одной схемой.
СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ
Методы исследования.
В исследование вошли 56 новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ.
Пациенты включались в исследование, если соответствовали следующим критериям:
- имели респираторную патологию (MAC, ателектазы легких); и перинатальное поражение ЦНС;
-гестационный возраст 38-40 недель; -вес при рождении не менее 2500 грамм;
-поступали в отделение реанимации на ИВЛ не позднее 28-х суток; -при поступлении не имели клинических признаков бактериального инфицирования.
Пациенты не включались в исследование в случае: -генетического нарушения гемопоэза; -синдрома Дауна;
-если к ним уже применялась гранулоцитарная трансфузия или проводилось предшествующее лечение цитокинами.
При поступлении в отделение все испытуемые были разделены на две группы. Процедура рандомизации осуществлялась методом компьютерной программы генератора случайных чисел.
В первую (I) группу (п=26) вошли новорожденные, получавшие чр-ГКСФ. Пациенты контрольной (II) группы (п=30) р-ГКСФ не получали. В группе детей, получавших р-ГКСФ, новорожденные были разделены на подгруппу А (п=14) и подгруппу Б (п=12) в зависимости от вводимой дозы препарата. Пациенты обеих групп получали стандартную интенсивную терапию, соответствующую тяжести состояния и заболевания, принятую в отделении.
Критериями назначения терапии чр-ГКСФ служили: -четный личный номер, полученный в результате рандомизации, -тенденция к нейтропении (в OAK количество лейкоцитов < 6 х 10\л); -наличие письменного согласия родителей ребенка.
Критериями досрочного прекращения терапии чр-ГКСФ были приняты:
-гиперлейкоцитоз > 20 х 10\л.;
-любое изменение состояния, представляющее собой угрозу жизни для пациента или приводящее к продлению госпитализации;
чр-ГКСФ (Neupogen "F.Hoffmann La Roche") вводился внутривенно в дозе 5 мкг\кг (подгруппа А) и 10 мкг\кг (подгруппа Б) два раза в сутки (10 и 22 часа) на 10 миллилитрах 5% раствора глюкозы с добавлением в качестве стабилизатора 1 миллилитра 10% раствора альбумина со скоростью 11 миллилитров в час в течение 3-х дней.
Безопасность оценивалась документальным протоколированием всех побочных эффектов и динамикой лабораторных данных. Легкие случаи неблагоприятных эффектов определялись, как любое изменение существующего состояния пациента, происходящее во время терапии чр-ГКСФ. Серьезное неблагоприятное воздействие как любой опыт, предполагающий угрозу жизни или приводящий к продлению госпитализации.
В нашем испытании основными медико-статистическими критериями оценки эффективности использования чр-ГКСФ были приняты частота развития сепсиса, осложнившего течение РДС в изучаемой популяции, летальность, длительность пребывания на ИВЛ и продолжительность госпитализации в отделении реанимации (В. А. Таболин, Н. Н. Володин и соавт., 2001).
Исследование было одобрено локальным этическим комитетом Ростовского НИИ акушерства и педиатрии.
Всем пациентам, вошедшим в исследование, в процессе терапии осуществлялось ежедневное динамическое клинико-лабораторное и иммунологическое обследование при поступлении, на 3-5-е сутки и 20-22 сутки или в исходе заболевания.
У детей определяли:
-общий анализ крови, гематокрит, тромбоциты по общепринятой методике ежедневно.
-показатели кислотно-щелочного состояния в капиллярной крови на аппарате КЩС «ABL» (Дания) ежедневно три раза в сутки и по показаниям.
-общий белок, глюкоза, мочевина, билирубин, креатинин крови ежедневно на биохимическом программируемом полуавтомате «HUMALYZER 2000, HUMAN» (Германия) ежедневно.
-электролитный состав плазмы ежедневно на ионоселективном анализаторе крови «EASY LYTE - CALCIUM analyzer» (США).
-общий анализ мочи ежедневно с использованием автоматического анализатора мочи «URITEK Urine Stripe Reader ТС-101» (США).
-клиренс эндогенного креатинина через день по стандартной методике.
-параметры центральной гемодинамики (пульса, систолического, диастолического и среднего артериального давления) измеряли осциллометрическим методом на мониторах «Neonatal» (США), «SW» (Дания), «МРиА» (Россия).
-многопробное комплексное бактериологическое обследование посевов крови, ликвора (при необходимости), мочи, мазков из пупочной ранки, глаз, носа, зева и кала с идентификацией выявленных микроаргонизмов и определением антибиотикочувствительности.
-уровень ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8 методом ИФА, используя тест-системы фирмы Cytimmune sciences inc.(CUlA) по прилагаемой к набору инструкции на многофункциональном программируемом счетчике для
иммунологических исследований с компьютером и программным обеспечением - Victor (Финляндия). Уровень ИЛ-4, ФНО, ГКСФ с использованием тест-систем Bender MedSystems GmbH (Австрия, Вена).
Для избежания выброса цитокинов лейкоцитами крови ex vivo использовали специально разработанную методику забора материала (D. Е. Griffith, Е. Miller, 1994). У новорожденных набирали 1 мл. венозной крови в пробирку Vacutainer для получения плазмы с разделительным гелем и ЭДТА в качестве антикоагулянта (Becton Dickinson, США), центрифугировали 3 минуты при 5 ООО об/мин. при 4°С и 100 мкл полученной плазмы использовали для анализа. Оптическую плотность определяли на многофункциональном фотометре "Viktor" (Финляндия) при длине волны 450 нм. Анализ результатов проводился автоматически с помощью программы "Viktor-Wallab).
субпопуляционный состав лимфоцитов крови методом однопараметрического иммунофенотипирования, используя реагенты фирмы IQProducts (Нидерланды), а также Beckman Coulter (США): фитц-меченные CD 3, CD 4, CD 8, CD 14, CD 19, CD 34, CD 56, CD 69, CD 71, IILA-DR моноклональные антитела. Результаты учитывали на проточном цитометре Beckman Coulter Epics XL (США), используя стандартные протоколы.
Выделение пула лейкоцитов из крови новорожденных производили с использованием лизирующего раствора OptiLyse С Beckman Coulter (США) по прилагаемому протоколу.
Клиническая характеристика больных
Все дети поступали в отделение на ИВЛ в тяжелом и крайне тяжелом состоянии с выраженными нарушениями деятельности дыхательной, сердечно-сосудистой, нервной систем; с глубокими метаболическими расстройствами. В обеих клинических группах чаще всего дети поступали в отделение в первые 48 часов жизни.
Проведенный анализ показал, что у 56% матерей пациентов обеих групп до беременности отмечались различные заболевания (гипертоническая болезнь, ожирение, бронхиальная астма, нейро-циркуляторная дистония, хронический пиелонефрит). Естественно, что состояние здоровья матерей не
могло не сказаться на патологическом течении беременности (90%) и родов (46%). В 58% случаев беременность у женщин протекала на фоне сочетанной патологии. Наиболее часто в обеих группах течение беременности осложняли фетоплацентарная недостаточность, хроническая гипоксия плода и сочетанный гестоз. Проведенный анализ позволил говорить о том, что акушерский и материнский анамнез пациентов обеих групп не выявил значительных различий. Наличие соматической патологии матерей пациентов обеих групп, патологическое течение беременности и родов в значительной мере определяли тяжесть состояния новорожденных.
В обеих группах свыше 30% детей родились в тяжелом состоянии. В контрольной группе среднее значение оценки по шкале Апгар на 1-й минуте составило 5,3±2,2, на 5-й - 6±1,9. В группе получавших чр-ГКСФ среднее значение на 1-й минуте равнялось 5,5±1,9, на 5-й - 6,1±1,7 баллов. Наличие у большинства детей острой дыхательной недостаточности в сочетании с данными прямой ларингоскопии, обнаружившей меконий ниже голосовых связок, позволили поставить диагноз MAC 13-и (43,3%) пациентам контрольной группы и 16-и (61,53%) пациентам, получавшим чр-ГКСФ. У остальных детей, вошедших в исследование, имели место вторичные ателектазы легких, причиной которых в 2% случаев стал геморрагический синдром и в 98 % - тяжелое перинатальное поражение ЦНС.
Неврологическая симптоматика тяжелой степени имела место у 100% новорожденных обеих групп, вошедших в исследование. Для оценки поражения нервной системы в работе использовалась классификация Ю.А. Якунина (1979). У пациентов обеих групп при поступлении не было зарегистрировано клинических признаков бактериального инфицирования.
Проведенный нами клинический анализ позволил выделить следующие бактериальные осложнения, развитие которых мы наблюдали у пациентов в процессе пребывания в отделении реанимации: гнойный трахеобронхит (87,4%), двусторонняя пневмония (100%), сепсис (23,6%).
В нашем исследовании основанием для постановки клинического диагноза «сепсис» служило сочетание не менее двух симптомов СВРО с наличием любого гнойно-воспалительного очага, или с положительной гемокультурой, или с наличием клинических симптомов инфекции (Ю. Ф. Исаков, Н. В. Белобородова, 2001). Клинический анализ показал, что в форме септицемии сепсис диагностирован у 61,5% детей. В форме септикопиемии сепсис наблюдался у 38,5% пациентов. Септикопиемическая форма заболевания регистрировалась только у пациентов контрольной группы. В нашем исследовании у 4-х (30,8%) пациентов из 13-и диагноз сепсиса был подтвержден наличием положительной гемокультуры. В остальных случаях кровь оставалась стерильной. Однако необходимо отметить, что из 5-и случаев септической инфекции, закончившихся летальным исходом, наличие сепсиса было подтверждено результатами патологоанатомического вскрытия (референтный метод) у всех 5-и
пациентов, тогда как положительная гемокультура была выявлена лишь у 2-х из них.
Пейзаж выделенной микрофлоры был представлен стафилококками (91%) и граммотрицательными микроорганизмами семейства Enterobacteriaceae (9%). Удельный вес оксациллин - резистентных стафилококков составил (70%). В видовом составе стафилококков преобладал S.epidermidis (60%). Число детей, инфицированных в отделении госпитальными штаммами, составило 26,63%. Из них число заражений Ps. aeruginosa - 23,18%, S. haemolyticus - 6,52%. Отмечена элиминация Stenotrophomonas maltophilia и зарегестрировано 2 случая (1,44%) внутрибольничного заражения новыми видами: К. ornithinolytica и К. Pneumoniae, являвшихся продуцентами плазмидных бета-лактамаз расширенного спектра действия, определяющих устойчивость грамотрицательных микроорганизмов ко всем цефалоспоринам и аминогликозидам. Выделенные возбудители сохранили чувствительность лишь к карбопенемам и цефтазидиму/клавулановой кислоте. Основными путями заражения новорожденных вышеперечисленными штаммами были зев (20,28%) и трахея (50%).
Летальность среди пациентов, вошедших в исследование, была представлена следующим образом: из 30-и детей, составивших контрольную группу, умерло 12 (40%) человек, а из 26-и новорожденных, получавших чр-ГКСФ, летальный исход зарегистрирован у 2-х (7,69%) пациентов. Таким образом, общая летальность в проведенном исследовании составила 14 (25,4%) человек. В контрольной группе в 45,4% случаев (5 человек из 11-и) сепсис заканчивался летальным исходом. Причиной смерти среди пациентов, получавших чр-ГКСФ, в одном случае была мекониально-аспирационная пневмония, а в другом - родовая черепно-мозговая травма. Оба случая развития септической инфекции, зарегистрированных в этой группе, имели благоприятный исход.
Обобщая результаты проведенного клинического анализа следует отметить, что сформированные группы были достаточно однородны по своему составу. Последнее обстоятельство позволло в ходе клинического испытания объективно оценить преимущества терапии с использованием чр-ГКСФ по сравнению со стандартной интенсивной терапией у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС.
Статистическая обработка
Статистический анализ полученных цифровых результатов был проведен исходя из фактически полученной пациентами терапии чр-ГКСФ, предписанной рандомизацией. Результаты исследования оценивались методом вариационной статистики с использованием выборочного среднего, стандартного отклонения, средней квадратичной ошибки, доверительных интервалов, медианы и ошибки медианы. Достоверность различия отдельных выборок определялась с использованием непараметрического критерия
Вилкинсона (W-критерий для несвязанных и Т-критерий для связанных групп). Критическим уровнем значимости, ниже которого результаты исследования считались статистически значимыми, было принято значение а <0,05. Статистическая мощность исследования составила 80% (критерий хи-квадрат Пирсона, формула Jlepa). Абсолютный и относительный риск развития неонатального сепсиса и летального исхода заболевания оценивался методом построения четырехпольных таблиц. Графики Каплана-Майера построены по длительности ИВЛ и продолжительности госпитализации; достоверность полученных результатов оценена с использованием критерия Гехана-Вилкоксона. Достоверность высказанных гипотез была подтверждена посредством использования точного теста Фишера-Ирвина при 5% уровне значимости в отношении двухсторонней альтернативы. Корреляционный анализ выполнен методом Спирмена. В исследовании использовались следующие пакеты прикладных программ: Excel-2000, «Мегастат», Statistica-6.
Результаты исследования и их обсуждение
Согласно рекомендациям CONSORT (2001), представление результатов проведенного контролируемого рандомизированного слепого клинического испытания чр-ГКСФ следует начинать со схемы испытания. На представленной схеме видно, что все пациенты, соответствующие целям испытания, прошли рандомизацию и были включены в него. Группу детей, получавших чр-ГКСФ, составили 26 человек. Из них 14 новорожденных получали чр-ГКСФ в дозе 5 мгр\кг\сут (подгруппа А), остальные 12 человек получали чр-ГКСФ в дозе 10 мгр\кг\сут (подгруппа В). Распределение участников исследования на подгруппы А и В было произвольным. Контрольную группу составили 30 новорожденных. Все участники исследования обеих групп были включены в анализ.
i исключи
1 группа ч[ЯКСФ (20) [ | попуч тар-ю чр-ГКСФ (5в) j.
[ прошли рандомизацию Г группа конуропя (30) 1 j. - ; (56) v ^ j jwnyn сганд тер-к) (30) J
1 летальный исход (Z) j
Схема
проведения рандомизированного клинического нспытанпя чр-ГКСФ
В процессе исследования нами не было зарегистрировано ни одного случая легкого или серьезного неблагоприятного воздействия чр-ГКСФ на организм пациентов.
Изменения, происходившие под влиянием чр-ГКСФ, послужили основой формирования состояния повышенной активности защитных сил организма, способного противостоять развитию бактериального сепсиса на фоне проводимой интенсивной терапии. Так в группе детей, получавших чр-ГКСФ, лишь у 2-х пациентов сепсис осложнил течение основного заболевания, причем в обоих случаях пациенты остались живы. Летальный исход в этой группе так же был зарегистрирован у 2-х человек. Но оба случая летального исхода не были связаны с терапией чр-ГКСФ, что подтверждено результатами патологоанатомического вскрытия. Среди 12 пациентов контрольной группы с летальным исходом заболевания в 5 случаях сепсис стал непосредственной причиной смерти и лишь у 6-и человек из 11-и заболевших сепсисом зарегистрирован благоприятный исход (таблица 1).
Таблица 1
Сравнительная оценка проводимой терапии между контрольной группой и группой детей, получавших чр-ГКСФ, по частоте развития сепсиса и
летального исхода
Критерии Контрольная группа (п=30) М±т Группа чр-ГКСФ (п=26) М±т Р
Заболевшие сепсисом (абсолютное кол-во) 11 2 0,0106
Летальный исход (абсолютное кол-во) 12 2 0,0054
Далее нами было проведено статистическое сравнение частоты развития сепсиса и числа летальных исходов (бинарные признаки) между двумя исследуемыми несвязанными группами (группа вмешательства и группа контроля). Для проведения сравнения были построены таблицы сопряженности (таблица 2 и 3).
Таблица 2
Таблица сопряженности для сравнения групп по частоте развития сепсиса
Группа (выборка) Наличие сепсиса Размер группы
НЕТ ДА
Леченне чр-ГКСФ (Вм.) 2 24 26
чр-ГКСФ не применялся (Контр.) 11 19 30
Сумма 13 43 56
Абсолютный риск при лечении чр-ГКСФ АРу=А/(А+В) 0,077
Абсолютный риск без применения чр-ГКСФ 0,367
АРк=С/(С+0)
Изменение абсолютного риска САР=МОО(АРу-
АРк) 0,29
Относительный риск ОР=АРу/АРк 0,21 Изменение относительного риска СОР=тос1
(АРу-АРк)/АРк 0,790 Число больных нуждающихся в лечении
ЧБНЛ=1/САР 3
Отношение шансов 0Ш=А*0/С/В 0,14 Стандартная ошибка для разности относительных
частот пи! 0,102
Число степеней свободы ёГ=п1+п2-1 55
Для р=0,05 ёГ=551=2,005 1= 2,005
Границы доверительного интервала для
разности относительных частот Ь= -0,495
и= -0,085
Стандартная ошибка для логарифма ОР
1п(ОР) ш= 0,720
Число степеней свободы <^=п1+п2-1 55
Для р=0,05 <Я=55 1=2,005 2,005
Границы доверительного интервала для
относительного риска 0,049
и= 0,890
Стандартная ошибка для логарифма ОШ
1п(ОШ) ш= 0,828
Число степеней свободы (^=п1+п2-1 55
Для р=0,05 ёГ=55 1=2,005 1= 2,005
Границы доверительного интервала для 0,027
отношения шансов и= 0,757
Где нижняя граница доверительного интервала (Ь) и верхняя граница (Ц).
Числовые границы доверительного интервала (ДИ) для относительного риска (ОР), свидетельствовали о том, что ОР развития сепсиса был статистически значимо ниже в группе первой строки четырехпольной таблицы (группа чр-ГКСФ), по отношению к контрольной группе, то есть, имело место снижение относительного риска (СОР) (обе границы ДИ < 1). Полученные числовые границы доверительного интервала (ДИ) для отношения шансов (ОШ), так же говорили о том, что шанс развития сепсиса был статистически значимо ниже в группе, соответствующей первой строке четырехпольной таблицы (группа чр-ГКСФ), чем в группе контроля (обе границы ДИ < 1). При анализе таблицы сопряженности для частоты развития летального исхода и определения его статистической значимости в группе чр-ГКСФ и контроля (таблица 3) использовались те же показатели.
Таблица 3
Таблица сопряженности для сравнения групп по частоте _летального исхода_
Группа (выборка) Летальный исход
НЕТ ДА
Лечение чр-ГКСФ (Вм.) 2 24
чр-ГКСФ не применялся (Контр.) 12 18
Сумма 14 42
Абсолютный риск при лечении чр-
ГКСФ APV=A/(A+B) 0,077
Абсолютный риск без применения чр-
ГКСФ APk=C/(C+D) 0,400
Изменение абсолютного риска CAP=MOD(APv-APk)
0,32
Относительный риск OP=APv/APk 0,19
Изменение относительного риска COP=mod
(APv-APk)/APk)
0,808
Число больных нуждающихся в лечении ЧБНЛ=1/САР
3
Отношение шансов 0Ш=А*0/С/В 0,13
Число степеней свободы ёР=п 1 +п2-1 55
Для р=0,05 (№551=2,06 1= 2,06
Границы доверительного интервала для ^- _о 654
разности относительных частот и= -0,110 Стандартная ошибка для логарифма ОР
1п(ОР) ш= 0,715
Число степеней свободы сН^п 1 +п2-1 55
Для р=0,05 с№=55 4=2,005 1= 2,06
Границы доверительного интервала для Ь= 0,044
относительного риска 11= 0,839
Стандартная ошибка для логарифма
ОШ 1п(ОШ) т= 0,825
Число степеней свободы (1Г=п1+п2-1 55
Для р=0,05 а^55 1=2,005 1= 2,06
Границы доверительного интервала для Ь= 0,023
отношения шансов 11= 0,684
где нижняя граница доверительного интервала (Ь) и верхняя граница (II).
ОР летального исхода был статистически значимо ниже в группе чр-ГКСФ по отношению к контрольной группе, т. е. имело место СОР летального исхода (так как обе границы ДИ для ОР < 1). Шанс летального исхода так же был статистически значимо ниже в группе нейпогена (обе границы ДИ < 1).
Таким образом, в нашем исследовании использование чр-ГКСФ позволило снизить заболеваемость сепсисом и смертность среди
новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС в 5,5 и 6 раз соответственно (рисунок 1 и 2).
40,00% 1)00% 10 1)0% 23,00% 20 00% 13 00% 10.00%
КОНТРОЛЬНАЯ
группя
7,6»%
группя р-ГКСФ
Рисунок 1
Частота развития бактериального сепсиса в контрольной группе и группе детей, получавших чр-ГКСФ
43 00%
Я
£ 40.00%
Р 35,00%
X
10,00%
£ 29.00%
1 20,00".
5 15.00е/,
О
10.00%
X 5 5.00%
а 0.00%
40,00*/.
контрольная группя
7,69%
группа р-ГКСФ
Рисунок 2
Частота развития бактериального сепсиса в контрольной группе и группе детей, получавших чр-ГКСФ
Таблица 4
Сравнительная оценка проводимой терапии между подгруппой А и В
Критерии Под фу п па А (п=|4) М±ш Подгруппа В (п=12) М±ш Р
Заболевшие сепсисом (абсолютное кол-во) 1 1 0,7200
Летальный исход (абсолютное кол-во) 1 1 0,7200
Однако в нашем исследовании не была подтверждена зависимость снижения частоты развития сепсиса и летального исхода от используемой дозы чр-ГКСФ (таблица 4).
Таблица 5
Сравнительная оценка продолжительности проводимой ИВЛ и длительности госпитализации в контрольной группе и группе детей, получавших
чр-ГКСФ
Критери и Контрольная группа (п=30) 95% ДИ Группа чр-ГКСФ (п=26) 95% ДИ Р
ИВЛ (сутки) 22,94±2,31 4,53 17,961=1,89 3,71 0,030652
К\ДНИ 25,33±2,43 4,76 24,58±2,07 4,06 0,351199
В таблице 5 представлены полученные данные, которые свидетельствовали о том, что в группе детей, получавших чр-ГКСФ, длительность пребывания на ИВЛ была статистически достоверно ниже, чем в контрольной группе. Однако использование чр-ГКСФ не способствовало снижению продолжительности госпитализации детей в отделении реанимации. Статистическая достоверность этого предположения не была подтверждена. Интересен и тот факт, что увеличение дозы чр-ГКСФ не привело к статистически достоверному снижению длительности проведения ИВЛ и продолжительности госпитализации детей в отделении реанимации, не смотря на разницу в результатах на первый взгляд (таблица 6). С уверенностью можно было говорить лишь о существовании клинической тенденции снижения длительности проводимой ИВЛ и продолжительности госпитализации с увеличением дозы чр-ГКСФ.
Таблица 6
Сравнительная оценка продолжительности проводимой ИВЛ и длительности госпитализации между подгруппами А и В
Критерии Подгруппа А (п=14) 95% ДИ Подгруппа В (п=12) 95% ДИ Р
ИВЛ (сутки) 19,38*2,11 4,14 16,27±3,Э4 6,55 0,06901
К\ЦНИ 26,00±2,45 4,81 22,91±3,53 6,92 0,169208
Числовые значения длительности проведения ИВЛ в обеих группах были проанализированы, как вероятность наступления изучаемого исхода в определенный период времени (функция выживания) методом Каплана-Мейера (рисунок 3). Медиана для перевода пациентов на самостоятельное дыхание (период времени, в течение которого, исследуемый исход произойдет у 50% участников исследования) в группе контроля была равна 19 суткам. То есть на 19 сутки пребывания в отделении половина пациентов контрольной группы была переведена на самостоятельное дыхание. В группе чр-ГКСФ медиана была равна 14 дням. При сравнении полученных данных с использованием критерия Гехана-Вилкоксона получено значение р=0,02546. То есть чр-ГКСФ достоверно уменьшал длительность проведения ИВЛ у наблюдаемых пациентов.
Футуя киноамя (Кар1ап-Мс1а1
о Нецеиэуриронннывдмшв (Ьоурирмамиедамм
10
1 01
1 08 1 ? 0,4 О о«*"'
г в | 0.2 ЧнТЦ-,'
г. * о.о 4 1-1.
•02
о 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 —Группаюжрот - • Группа получавших чр-ГКСФ Время
Рисунок 3
Сопоставление времени перевода пациентов (сутки) на самостоятельное дыхание в обеих группах
Значительные затраты, которые несет здравоохранение в области неонатологии свидетельствуют о том, что эффективность больше не может оставаться единственным критерием, по которому судят о целесообразности внедрения нового препарата в практику здравоохранения. Не удивительно, что в последнее время нарастает интерес к методам экономической оценки, при проведении которой делаются попытки охарактеризовать каждый альтернативный подход в области здравоохранения неким суммарным показателем, который бы отражал стоимость и экономию конкретного *
лечебного подхода. В своем исследовании мы использовали простейший вид экономической оценки, который может быть выполнен любым врачом. Этот тип исследования - анализ минимизации затрат, сравнивающий только финансовые затраты на лечение. Расчетный отдел бухгалтерии по нашему запросу предоставил данные о том, что средняя стоимость одних суток пребывания новорожденного на ИВЛ в нашем отделении равна 7900 рублям. Оптовая цена одного флакона чр-ГКСФ, содержащего 300 мкг, составляет
5400 рублей. Стоимость терапии чр-ГКСФ на курс лечения (3-е суток в дозировке 5 мкг\кг\сут) для ребенка со средней массой тела 3500 равна 945 рублей. В дозировке 10 мкг\кг\сут стоимость терапии чр-ГКСФ обходилось в 1890 рублей.
Таблица 7
Фармако-экономпчсская эффективность использования чр-ГКСФ
Группы наблюдения Средняя стоимость терапии на 1 сутки (руб.) Средняя длительность ИВЛ (сут.) Общая стоимость терапии (руб.)
контрольна 7900 22,94 7900x22,94=176960
чР-ГКСФ 5 мкг\кг\сут 7900+315=8215 19,38 7900x19,38+945=154047
чР-ГКСФ 10 мк|Лкг\сут 7900+630-8530 16,27 7900х 16,27++1890=130423
Таким образом, из результатов, приведенных в таблице 7, следовало, что использование чр-ГКСФ в стандартной терапии новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВ Л, способствовало снижению финансовых затрат на лечение в 1,14 раза в случае использования чр-ГКСФ в дозе 5 мкг\кг\сут и в 1,35 раза в дозе 10 мкг\кг\сут. Следовательно, использование чр-ГКСФ оправдано с экономической точки зрения.
Дальнейший анализ полученных результатов показал, что статистически значимое снижение лейкоцитов (наличие лейкопении) в развернутой гемограмме сочеталось со снижением АЧН, падением уровня гемоглобина и сниженным содержанием моноцитов. Кроме того, у пациентов контрольной группы отмечался сдвиг лейкоцитарной формулы до юных клеток. Различия по остальным показателям общего анализа крови между пациентами обеих групп статистически не были значимыми (рисунок 4).
Рисунок 4
Величины некоторых показателей OAK в обеих группах при поступлении
В дальнейшем, при изучении уровней ИЛ плазмы в обеих группах с высокой степенью статистической достоверности было подтверждено, что нейтропения сопровождалась снижением эндогенного ГКСФ (таблица 8).
Таблица 8.
Сравнительный анализ уровней интерлейкинов плазмы обеих групп при поступлении в отделение (1-е сутки).
Показатели (пг\мл) НеЛтропения (п=26) М±ш Без нейтропении (п-30) М±т Р
ГКСФ 0,95± 0,08 1,65± 0,06 6.05Е-08
ИЛ 8 359, № 27,27 309,76± 7,46 0,031672
ИЛ 6 18,27± 1,21 16,90-Ь 0,57 0,393146
ФНО 182,79± 23,14 158,01±4,65 0,33762
ИЛ 4 20,69± 1,03 20,18± 0,83 0,116736
ил 1р 168,03± 22,13 136,76± 4,24 0,158037
Кроме того, в нашем исследовании у новорожденных с нейтропенией отмечалось статистически достоверное увеличение уровня провоспалительного ИЛ-8, как наиболее чувствительного и специфичного параметра в отношении развития системной воспалительной реакции (Н. Н. Володин, М. В. Дегтярева и соавт., 2000). Различие уровней остальных интерлейкинов между двумя группами в нашем исследовании не было статистически достоверным.
Результаты фенотипирования лимфоцитов методом проточной цитометрии на первые сутки в обеих изучаемых группах представлены на рисунке 5. Полученные данные свидетельствовали о том, что у новорожденных с нейтропенией было достоверно повышено процентное содержание цитотоксических Т-лифоцитов (СО-8) и статистически достоверно понижено содержание СО-19 (В-лимфоциты) и СО-34 (стволовые клетки). Очевидно, что на момент поступления в отделение реанимации, состояние иммунной системы новорожденных с РДС и развившейся нейтропенией характеризовалось активацией Т-лимфоцитарного звена, супрессией В-лимфоцитов и истощением костно-мозговых резервов клеток-предшественниц зрелых нейтрофилов. Перечисленные механизмы определяли состояние наибольшей уязвимости этого контингента больных по развитию тяжелых бактериальных осложнений.
Рисунок 5
Числовые значения некоторых СБ-маркеров (%) у пациентов сравниваемых групп при поступлении
Таким образом, проведенный анализ изменений некоторых иммунологических показателей у новорожденных с нейтропенией, тяжелой респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, свидетельствовал о резком снижении защитных сил организма на момент поступления пациентов в отделение реанимации. Следовательно, назначение терапии р-ГКФ у этих пациентов было своевременным и патофизиологически обоснованным.
Дальнейший сравнительный анализ результатов обследования пациентов обеих групп выявил, что у детей, получивших р-ГКФ, по сравнению с пациентами контрольной группы, происходило статистически значимое повышение количества лейкоцитов, АЧН и сегментоядерных нейтрофилов; снижалось процентное содержание лимфоцитов (рисунок 6).
Рисунок 6.
Влияние чр-ГКСФ на показатели развернутой гемограммы
Таким образом, чр-ГКСФ выступал в роли иммуномодулятора, способствующего увеличению количества лейкоцитов и активации нейтрофилов у новорожденных с тяжелой респираторной патологией (рисунок 7 и 8).
нсюд
Рисунок 7
Сравнительный уровень лейкоцитов крови у пациентов контрольной группы н получавших чр-ГКСФ
Рисунок 8
Сравнительный уровень ЛЧН у пациентов контрольной группы и получавших чр-ГКСФ
Кроме того, чр-ГКСФ обеспечивал рост и стимуляцию клеток не только гранулоцитарного происхождения, но и способствовал гемопоэзу, а так же увеличению количества тромбоцитов (рисунок 9).
' 'у * ' 1 ^
21171
1-1 4 »1,1 1 ' * ' ' '
200 Пи
"*' ' )
150 [—| "* » |
вв ■ °Гр чр-ГКСФ
100 \ Им ■я ■ король
50 1 1 ■цННЦ
Троиб хМК9/л Гсмогдобг/л Эритроциты хКПЗ/я |
Рисунок 9
Нлпшше чр-ГКСФ на показатели «красной крови» и тромбоциты
В дальнейшем было выявлено, что способность стимулировать гемопоэз у чр-ГКСФ носила дозозависимый характер (таблица 9). Полученные данные подтверждали имеющиеся в литературе указания на то, что в высоких концентрация гранулоцитарный колониестимулирующий фактор влияет на предшественники эритроидных клеток (Э-КОЭ) и на ранние предшественники эритроцитов (РЫгег, 1989).
Таблица 9
Влияние чр-ГКСФ на показатели «красной крови» в зависимости от используемой
дозы препарата
Показа тели 3-5-е сутки Р
А (п^Н) 5 мкг/кг М±т В(п=12) 10 мкг/кг М±т
НЬ (г/л) 142,21±1,19 153,50±2,25 0,012667
Эритр. (1012/л) 4,28±0,09 4,7±0,08 0,002602
В процессе исследования было подтверждено, что чр-ГКСФ способствовал повышению уровня эндогенного ГКСФ, ФИО, ИЛ-1 р и ИЛ-4. Стимулируя выработку эндогенного ГКСФ, чр-ГКСФ действовал как самостоятельный специфический фактор роста, влияя на стволовые гемопоэтические клетки, способные дифференцироваться в зрелые, активные нейтрофилы. Кроме того, чр-ГКСФ, стимулируя провоспалительные ИЛ-1Р и ФНО, одновременно способствовал повышению уровня противовоспалительного ИЛ-4, тем самым, активируя тормозные механизмы провоспалительного цитокинового каскада. Таким образом, под влияиием нейпогена создавалось некое «золотое равновесие» активности про- и противовоспалительных ИЛ в организме новорожденного ребенка с тяжелой респираторной патологией, способного противостоять развшию бактериального сепсиса (рисунок 10).
17«,37 ЗЗЭ^
Э50,
300 ПМ1 2S4.lt
280
год 150 ||т {■ Контрольная группа |
100 11,» »Л
50 1.09 «1 /^(¡иЛ щм
ГХС* ИЛ-4 «НО ИЛ 16
Рнсунок10
Влияние чр-ГКСФ иа плазменный уровень некоторых ИЛ
Эффективность влияния чр-ГКСФ на уровень противовоспалитеьного ИЛ-4 в нашем исследовании носила достоверный дозозависимый характер -с увеличением дозы препарата увеличивался уровень ИЛ-4. Кроме того, в дозе 10 мкг/кг/сут чр-ГКСФ снижал уровень ИЛ-6.
Таблица 10
Влияние чр-ГКСФ на плазменный уровень некоторых ИЛ в зависимости от исиолыусмоИ дозы препарата
ИЛ (пг/мл) 3-5-е сутки Р
А (п=14) 5 мкг/кг М±ш В(п=12) 10 мкг/кг М±111
ИЛ-6 396,21± 18,30 284,78± 27,19 0,003201
ИЛ-4 46,42± 5,01 63,99± 5,50 0,015377
В ходе дальнейшего исследования было подтверждено, что чр-ГКСФ способен изменять субпопуляционный состав лимфоцитов. Препарат статистически значимо увеличивал количество СБ 14, СБ 19, СО 56, СО 34, и не влиял на популяционный состав Т-лимфоцитарного звена (таблица 11).
Таблица 11
Сравнительная характеристика субпопуляциоиного состава лимфоцитов после терапии чр-ГКСФ
Показа тели (%) 3-5 сутки Р
1 гр-па (п-26) М±т 11 гр-па (п=30) М±т
СОЗ 79,99 ±2,15 76,50 ±2,01 0,08762
СО 4 62,63 ± 1,72 64,01 ±2,73 0,40585
СО 8 18,39 ±0,99 17,29 ± 1,09 0,14091
ИРИ 3,62 ± 0,27 3,88 ± 0,20 0,05917
СО 14 8,81 ±0,57 7,79 ±0,41 0,04683
СО 19 8,98 ±0,88 6,81 ± 0,68 0,01298
СО 56 3,30 ± 0,18 2,12 ±0,24 0,00026
СО 34 0,35 ±0,03 0,11 ±0,04 4,05 Е-07
СО 69 0,97 ±0,18 1,17 ± 0,12 0,11140
СО 71 4,87 ±0,50 3,16 ±0,36 0,01411
НЬЛ 7,17 ±0,74 5,55 ±0,33 0,05638
Проведенный корреляционный анализ процентного содержания стволовых клеток в периферической крови (СО 34) выявил высокую степень корреляции с уровнем эндогенного ГКСФ, дозой чр-ГКСФ, количеством лейкоцитов, АЧН и умеренную степень корреляции с количеством эритроцитов (рисунок 11).
Рисунок 11
Корреляция процентного содержания в крови стволовых клеток (CD 34) с дозой р-ГКСФ, эндогенным ГКСФ и некоторыми показателями OAK (Спирмен)
Таким образом, чр-ГКСФ способствовал пролиферации, дифференцировке и активации клеток-предшественниц нейтрофильного роста, а так же появлению зрелых нейтрофилов, что совпадало с литературными данными (Brochud, 1988; Lord, 1989; Colgan 1992; Lieschke, 1994). Кроме того, чр-ГКСФ стимулировал эритропоэз.
В ходе проведенного клинического испытания чр-ГКСФ нами не было получено ни одного клинико-лабораторного подтверждения отрицательного влияния чр-ГКСФ на организм новорожденного ребенка. Последнее утверждение относилось к обеим терапевтическим дозам (5 и 10 мкг\кг\сут), которые назначались пациентам в ходе исследования. Более того, чр-ГКСФ с большой степенью статистической достоверности способствовал нормализации мочевины крови и повышению клиренса эндогенного креатинина (таблица 12).
Таблица 12
Влияние чр-ГКСФ
на некоторые биохимические показатели организма новорожденного ребёнка
Показатели 3-5 сутки Р
1 гр-па (п=26) М±т II гр-па (п-30) М±т
Мочевина крови (ммоль\л) 7,52± 0,38 11,70± 0,78 2.65Е-05
Клиренс эндогенного креатииина (мл\нин х 1,73 м!) 29,31± 2,65 17,82± 1,11 0,000124
В ходе проведенного исследования мы пришли к заключению о том, что предпочтительнее использование р-ГКСФ в дозе 10 мкг\кг\сут. Основанием для этого послужили следующие факты:
1. Доза 10 мкг\кг\сут столь же безопасна для новорожденного, как и 5 мкг\кг\сут.
2. Некоторые эффекты р-ГКСФ носят четкий дозозависимый характер (стимуляция эритропоэза, увеличение общего количества лейкоцитов и АЧН, изменение плазменных уровней некоторых ИЛ).
3. Существует четкая тенденция сокращения длительности ИВ Л и продолжительности госпитализации при использовании р-ГКСФ в дозе 10 мкг\кг\сут по сравнению с 5 мкг\кг\сут.
4. Использование этой дозы препарата более предпочтительно с экономической точки зрения.
Таким образом, проведенное исследование позволило не только подтвердить эффективность и безопасность чр-ГКСФ в профилактике и терапии сепсиса у новорожденных с нейтропенией и тяжелой респираторной патологией, сочетающейся с перинатальным поражением ЦНС, но и понять механизмы его терапевтической эффективности. Кроме того, изучение некоторых иммунологических показателей у новорожденных с указанной патологией позволило расширить знания о патофизиологических механизмах развития бактериальных осложнений у этого контингента больных и тем самым обосновать использование чр-ГКСФ.
В заключение следует сказать, что чр-ГКСФ, конечно же, не является средством, которое позволит избавиться от неонатального сепсиса. Но дальнейшее изучение и совершенствование иммуномодуляторов, как принципиально нового направления в профилактике и интенсивной терапии бактериальных осложнений, позволит не только значительно уменьшить количество заболевших и погибших от сепсиса новорожденных, но и внесет существенный вклад в учение об общей патологии человека.
ВЫВОДЫ
1. При проведении стандартной интенсивной терапии неонатальный сепсис остается наиболее грозным и частым осложнением, развивающимся в 36,66% (из них в 45,45% с летальным исходом) у новорожденных с тяжелой респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС.
2. Развитие нейтропении у новорожденных с тяжелой респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС сопровождается снижением уровня эндогенного ГКСФ, истощением пула стволовых клеток (CD34), снижением содержания В-лимфоцитов (CD19), а так же повышением уровня провоспалительного ИЛ-8 и активацией Т-лимфоцитарного звена (CD8).
3. Действуя, как иммуномодулятор, чр-ГКСФ :
- увеличивает количество зрелых нейтрофилов, стимулируя выброс стволовых клеток (CD34) и активируя эндогенный ГКСФ; стимулирует эритропоэз и увеличивает количество тромбоцитов;
- усиливает активность В-лимфоцитарного звена и не влияет на Т-лимфоциты;
- одновременно способствует повышению уровня провоспалительных интерлейкинов (ИЛ-lp, ФНО) и противовоспалительного ИЛ-4.
4. Использование чр-ГКСФ в стандартной терапии у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ, снижает частоту развития неонатального сепсиса в 5,5 раз, летальность в 6 раз, сокращает длительность проведения ИВЛ и не оказывает отрицательного влияния на организм новорожденного ребенка.
5. Использование чр-ГКСФ в стандартной интенсивной терапии у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ, позволяет снизить финансовые затраты на лечение в 1,14 раз в дозе 5 мкг/кг/сут ив 1,35 раз в дозе 10 мкг/кг/сут.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. У новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ, при снижении числа лейкоцитов до 6х10\литр показано назначение чр-ГКСФ с целью коррекции нейтропении и профилактики септической инфекции.
2. чр-ГКСФ следует вводить внутривенно, в дозе 10 мкг\кг\сут, в виде двух внутривенных инфузий в течение 3 дней.
3. Приготовление инфузионного раствора чр-ГКСФ следует проводить согласно инструкции препарата.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г., Лелик М.П. Использование гранулоцитарного колониестимулирующего фактора для профилактики нозокомиальных инфекций у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС // Материалы 6 конгресса педиатров России. - М., 2000. - С. 328.
2. Ефанова Е.А., Эстрин В.В., Бичуль O.K., Пухтинская М.Г. Диагностика бактериальных осложнений у новорожденных при неотложных состояниях // Материалы 6 конгресса педиатров России. - М., 2000. - С. 109.
3. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г., Лелик М.П. Использование гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (филграстима) для профилактики бактериальных инфекций у новорожденных с респираторной патологией И Центрально-Азиатский медицинский журнал. - 2000. - Том VI. - С. 69.
4. Эстрин В.В, Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г., Лелик М.П. Диагностика нозокомиальных инфекций у новорожденных с респираторной
патологией // Материалы III съезда Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины. - М., 2000. - С. 212.
5. Ефанова Е.А., Эстрин В.В., Лелик М.П., Пухтинская М.Г. Профилактика нозокомеальных инфекций у новорожденных с респираторной патологией гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (нейпогеном) // Материалы III съезда Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины. - М., 2000. - С. 140.
6. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г., Лелик М.П. Использование нейпогена для профилактики нозокомиальных инфекций у новорожденных с респираторной патологией // Материалы I учредительного съезда Анестезиологов и реаниматологов Южно-Российского федерального округа. - Ростов-на-Дону, 2000. - С. 231.
7. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г., Лелик М.П. Доклиническая диагностика сепсиса у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС // Материалы I учредительного съезда Анестезиологов и реаниматологов ЮжноРоссийского федерального округа. - Ростов-на-Дону, 2000. - С. 230 - 231.
8. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г., Лелик М.П. Использование сывороточного уровня цитокинов для доклинической диагностики сепсиса у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС // Материалы IX съезда педиатров России «Детское здравоохранение России: стратегия развития». - М., 2000. - С. 667.
9. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г. Использование гранулоцитарного колониестимулирующего фактора для профилактики септических осложнений у новорожденных, находящихся на искусственной вентиляции легких // Сборник трудов Российского конгресса по педиатрической анестезиологии, реанимации и интенсивной терапии. - М., 2001.-С. 110-111.
10. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Лелик М.П., Пухтинская М.Г. Диагностика и профилактика нозокомиальных инфекций у новорожденных в критических состояниях // Сборник трудов Российского конгресса по педиатрической анестезиологии, реанимации и интенсивной терапии. - М., 2001.-С. 244.
11. Ефанова Е.А., Эстрин В.В., Лелик М.П., Пухтинская М.Г. Доклиническая диагностика сепсиса у новорожденных в критических состояниях // Материалы I научно-практической конференции анестезиологов и реаниматологов Юга России «Актуальные проблемы педиатрической анестезиологии, реаниматологии и интенсивной терапии». -Ростов-на-Дону, 2001. - С. 75-76.
12. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г. Использование нейпогена для профилактики септических осложнений у новорожденных, находящихся на искусственной вентиляции легких // Материалы I научно-практической конференции анестезиологов и реаниматологов Юга России
«Актуальные проблемы педиатрической анестезиологии, реаниматологии и интенсивной терапии». - Ростов-на-Дону, 2002. - С. 76-77.
13. Ефанова Е.А., Эстрин В.В., Пухтинская М.Г., Яковенко Е.П., Ермоленко E.H. Диагностика нозокомиальных инфекций у новорожденных в отделениях реанимации и интенсивной терапии // Сборник работ Всероссийской конференции «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии». - М., 2002. - С. 16-19.
14. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г. Профилактика бактериальных осложнений у новорожденных, находящихся на искусственной вентиляции легких, гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (нейпогеном) // Сборник работ Всероссийской конференции «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии». -М., 2002. - С. 16-19.
15. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Лелик М.П., Пухтинска М.Г. Ранняя диагностика сепсиса у новорожденных с респираторным дистресс-синдромом // Методические рекомендации. - Ростов-на-Дону, 2002.
16. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г. Профилактика бактериальных осложнений у новорожденных с респираторным дистресс-синдромом, находящихся на искусственной вентиляции легких, человеческим гранулоцитарным колониестимулирующим фактором // Сборник материалов II Российского конгресса "Современные технологиии в педиатрии и детской хирургии". - М., 2003. - С. 214.
17. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Лелик М.П., Пухтинская М.Г. Доклиническая диагностика сепсиса у новорожденных в отделениях реанимации и интенсивной терапии // Сборник материалов второго российского конгресса «Педиатрическая анестезиология и интенсивная терапия». -М., 2003. - С. 146.
18. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г. Использование человеческого гранулоцитарного колониестимулирующего фактора для профилактики бактериальных осложнений у новорожденных с респираторным дистресс-синдромом, находящихся на искусственной вентиляции легких // Сборник материалов научно-практической конференции педиатров России «Фармакотерапия в педиатрии». - М., 2003. -С. 96.
19. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г. Профилактика нейпогеном бактериальных осложнений у новорожденных с мекониально-аспирационным синдромом, находящихся на искусственной вентиляции легких // Материалы IX Конгресса педиатров России «Актуальные проблемы педиатрии». - М., 2004. - С. 479.
20. Эстрин В.В., Пухтинская М.Г., Ефанова Е.А. Профилактика и лечение бактериальных инфекций рскомбинантным человеческим гранулоцитарным колониестимулирующим фактором у новорожденных // Журнал «Анестезиология и реаниматология». - М., 2004. - № 3. - С. 43-45.
21. Эстрин В.В., Пухтинская М.Г., Ефанова Е.А. Дозозависимая
клииическая эффективность филграстима в профилактике и терапии инфекционных осложнений у новорожденных с респираторной патологией // Сборник материалов научно-практической конференции "Фармакотерапия в педиатрии". - М., 2004. - С. 77.
22. Пухтинская М.Г., Эстрин В.В. Дифференцированное применение нейпогена для профилактики и лечения инфекционных осложнений у новорожденных с респираторной патологией // Сборник материалов 3 Российского конгресса «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии». -М., 2004. - С. 197.
23. Пухтинская М.Г., Эстрин В.В., Ефанова Е.А. Диагностическое значение цитокинов для прогнозирования исходов угрожающих состояний у новорожденных // Сборник материалов 3 Российского конгресса «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии». - М., 2004. - С. 172.
24. Эстрин В.В, Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г., Лелик М.П. Способ доклинической диагностики сепсиса у новорожденных с дыхательными расстройствами и перинатальным поражением ЦНС // Патент № 2185628 от 20.07.2002.
25. Эстрин В.В., Ефанова Е.А., Пухтинская М.Г. Способ ранней диагностики сепсиса у новорожденных // Патент № 2180119 от 27.02.2002.
26. Ефанова Е.А., Яковенко Е.П., Эстрин В.В., Пухтинская М.Г., Дударева М.Е., Поляк С.Ш. Способ прогнозирования исхода бактериальных инфекций у новорожденных детей // Патент №2246729, от 20. 02.2005.
Печать цифровая Бумага офсетная Гарнитура «Тайме» Формат 60x84/16. Объем 1,2 уч.-изд -л
Заказ № 493. Тираж 100 экз. Отпечатано в КМЦ «КОПИЦЕНТР» 344006, г Ростов-на-Дону, ул Суворова, 19, тел 247-34-88
1-6992
РНБ Русский фонд
2006-4 4694
Оглавление диссертации Пухтинская, Марина Гаевна :: 2005 :: Ростов-на-Дону
Список сокращений. ^
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. Бактериальные инфекции у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ю центральной нервной системы.
1.1. Респираторный дистресс-синдром в структуре детской i о 11 заболеваемости и смертности.
1.2. Особенности иммунной системы новорожденных.
1.3. Значение перинатальной патологии в развитии 15 18 бактериальной инфекции у новорожденных.
1.4. Роль методов интенсивной терапии в развитии инфекционной патологии у новорожденных с респира- 19 20 торным дистресс-синдромом.
1.5. Профилактика и терапия бактериальных осложнений у новорожденных с респираторным дистресс - синдро- 20 30 мом.
ГЛАВА 2. Методы исследования и клиническая характеристика 54 больных.
О 7 Л* 30"
2.1. Методы исследования.
2.2. Клиническая характеристика больных.
ГЛАВА 3. Рскомбинантный гранулоцитарный колониестимули-рующий фактор в стандартной интенсивной терапии новорожденных с респираторной патологией и перинатальным пораже- ^ нием ЦНС.
3.1. Медико - статистические критерии эффективности рекомбинантного гранулоцитарного колониестимули- 55 58 рующего фактора.
3.2. Оценка эффективности использования рекомбинантного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора по частоте развития бактериального сепсиса и летального 58 64 исхода в изучаемой популяции.
3.3. Оценка эффективности использования рекомбинантного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора по длительности проводимой ИВЛ и продолжительности ^ ^ госпитализации пациентов.
3.4. Фармако - экономическая оценка использования рекомбинантного гранулоцитарного колониестимулирующего ^ 74 фактора.
ГЛАВА 4. Состояние иммунитета у новорожденных с респира- ^ ^ торной патологией и перинатальным поражением ЦНС.
4.1. Некоторые показатели иммунитета у здоровых ново- ^ ^ рожденных по литературным данным.
4.2. Некоторые показатели иммунитета у новорожденных с респираторной патологией по литературным данным.
4.3. Некоторые показатели иммунитета у новорожденных с респираторной патологией и нейтропенией по результа- со
Г* ~ oZ-o / там собственных исследовании.
ГЛАВА 5. Влияние рекомбннантного гранулоцитарного коло-ниестимулирующего фактора на некоторые показатели иммунитета и биохимические показатели у новорожденных с репи- gg ^q раторной патологией и перинатальным поражением ЦНС.
5.1. Гематологические изменения, происходящие на фоне терапии рекомбинантным гранулоцитарным колоние- gg стимулирующим фактором.
5.2. Изменение плазменного уровня некоторых интерлей-кинов в ответ на введение рекомбинантного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора. ^g
5.3 Изменение субпопуляционного состава лейкоцитов на фоне терапии рекомбинантным гранулоцитарным ^g ^ ^ колониестимулирующим фактором.
5.4. Динамика некоторых биохимичских показателей на фоне терапии рекомбинантным гранулоцитарным ^^ ^q колониестимулирующим фактором.
Введение диссертации по теме "Педиатрия", Пухтинская, Марина Гаевна, автореферат
Актуальность темы:
Внедрение в клиническую практику современных методов терапии респираторной патологии и перинатального поражения ЦНС у новорожденных позволило значительно снизить уровень перинатальной смертности. Однако рост бактериальных осложнений остается важной проблемой в отделениях интенсивной терапии и реанимации, так как септическая инфекция по-прежнему занимает одно из ведущих мест в структуре детской смертности. По данным различных авторов летальность от неонатального сепсиса в настоящее время составляет 13-50%, что существенно снижает достижения современной педиатрической науки (М. Эрикссон, Р. Беннет, 1998; Ю. Ф. Исаков, Н. В. Белобородова, 2001).
Низкая толерантность новорожденных, находящихся на ИВЛ, к возникновению бактериальных осложнений определяется целым рядом факторов. К ним относятся: тяжесть состояния пациентов вследствие основного и сопутствующих заболеваний, особенности иммунной системы новорожденного ребенка, необходимость использования инвазивных методов диагностики и лабораторного мониторинга, продолжительность ИВЛ, а также изменение этиологической структуры инфицирующих микроорганизмов, и появление среди них штаммов, полирезистентных к большинству антибиотиков, применяемых в клинике. Эти обстоятельства указывают на необходимость разработки иных методов профилактики и интенсивной терапии бактериальных осложнений, так как высокий уровень летальности при неонатальном сепсисе неоспоримо доказывает, что традиционные программы практически исчерпаны.
Известно, что развитие нейтропении у новорожденных с тяжелой респираторной патологией является неблагопритным симптомом, указывающим на присоединение бактериальных осложнений (G. P. Bodey, Y. S. Sathe,
1996). Это обосновывает более углубленное изучение показателей иммунитета у новорожденных при данной патологии. С клинико-диагностической точки зрения несомненный интерес представляет собой сопоставление уровней про- и противовоспалительных цитокинов, факторов активации иммуно-компетентных клеток и субпопуляционного состава лейкоцитов при развитии тяжелых бактериальных осложнений у новорожденных.
Ряд авторов и клинический опыт нашего отделения указывали на терапевтическую эффективность использования в неонатологии человеческого рекомбинантного гранулоцитарного колониестимулируюгцего фактора (фил-грастима) для коррекции нейтропении, а так же в профилактике и терапии сепсиса (Гилан и соавт., 1994; Schibler и соавт., 1998). Разработка клинико-иммунологических критериев назначения чр-ГКСФ у новорожденных с ней-тропенией, развившейся вследствие тяжелой респираторной патологии и перинатального поражения ЦНС, оптимальных доз и схем использования препарата, оценка его влияния на возникновение, развитие и исход бактериальных осложнений, а так же оценка безопасности его использования у данного контингента больных определяют актуальность настоящих исследований.
Цель и задачи исследования:
Целью настоящих исследований явилось снижение частоты развития и повышение эффективности терапии бактериальных осложнений у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ, путем использования чр-ГКСФ в стандартной интенсивной терапии.
Для достижения этой цели были поставлены задачи:
1. Провести контролируемое рандомизированное клиническое испытание чр-ГКСФ у новорожденных с нейтропенией, имеющих респираторную патологию и перинатальное поражение ЦНС.
2. Определить влияние чр-ГКСФ на основные медико-статистические показатели (частота развития бактериальных осложнений, летальность, длительность ИВЛ и продолжительность госпитализации) у новорожденных, имеющих тяжелую респираторную патологию и перинатальное поражение ЦНС.
3. Изучить состояние иммунитета у новорожденных с нейтропенией, тяжелой респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС.
4. Изучить влияние чр-ГКСФ на плазменный уровень некоторых ИЛ, субпопуляционный состав лимфоцитов и некоторые биохимические показатели у новорожденных с нейтропенией и тяжелой респираторной патологией, сочетающейся с перинатальным поражением ЦНС.
5. Разработать клинико-иммунологичекие критерии назначения и оптимального дозирования чр-ГКСФ у данного контингента больных.
Научная новизна работы:
В результате исследования впервые дано теоретическое и клинико-лабораторное обоснование безопасности и эффективности использования ч-ГТССФ в профилактике и терапии бактериальных осложнений у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ.
На защиту выносятся следующие положения:
1. Развитие нейтропении у новорожденных с тяжелой респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС сопровождается изменениями активности про- и противовоспалительных ИЛ плазмы и субпопуляцион-ного состава лимфоцитов крови. 2. Использование чр-ГКСФ в стандартной интенсивной терапии позволит снизить частоту развития неонатального сепсиса и летальность у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением
ЦНС, находящихся на ИВЛ. 3. Терапевтическая активность препарата основана на его способности увеличивать количество лейкоцитов, изменять их популяционный состав, а так же влиять на активность про- и противовоспалительных ИЛ.
Практическое использование полученных результатов:
По материалам диссертации опубликовано 26 печатных работ. Выполнены изобретения:
Способ доклинической диагностики сепсиса у новорожденных с дыхательными расстройствами и перинатальным поражением ЦНС» (№ 2185628 от 20.07.2002).
Способ ранней диагностики сепсиса у новорожденных" (№ 2180119 от 27.02. 2002).
Способ прогнозирования исхода бактериальных инфекций у новорожденных детей» (№ 2246729 от 20.02.2005).
Результаты проведенных исследований использовались при проведении лекций на республиканских и областных семинарах и курсах повышения квалификации врачей по интенсивной терапии и реанимации.
Практические рекомендации, вытекающие из материалов исследования, внедрены в практику работы отделения реанимации РНИИАП. Работа выполнена в отделении реанимации и лаборатории иммунологии и бактериологии Ростовского-на-Дону НИИ акушерства и педиатрии.
Апробация работы:
Материалы диссертации представлены на Российском конгрессе по педиатрической анестезиологии, реанимации и интенсивной терапии (Москва, 2001), I научно-практической конференции анестезиологов и реаниматологов Юга России «Актуальные проблемы педиатрической анестезиологии, реаниматологии и интенсивной терапии» (Ростов-на-Дону, 2002), научно-практической конференции педиатров Юга России "Актуальные вопросы педиатрии" (Ростов-на-Дону, 2003), на тематическом семинаре для врачей ЮФО «Новые диагностические и лечебные технологии» (Ростов-на-Дону, 2003).
Основные положения работы заслушаны на заседании Ученого совета Ростовского НИИ акушерства и педиатрии Минздравсоцразвития РФ 3.03.2005 г. Протокол №2.
Структура работы:
Диссертация изложена на 144 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием объема и методов исследования, трех глав изложения результатов собственных исследований, заключения, выводов и практических рекомендаций. Библиография включает 138 первоисточников, из них 63 отечественных автороа. Работа иллюстрирована 44 таблицами, 17 рисунками и одной схемой.
Заключение диссертационного исследования на тему "Профилактика и терапия бактериальных осложнений рекомбинантным, гранулоцитарным колониестимулирующим фактором у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением центральной нервной"
128 ВЫВОДЫ.
1. При проведении стандартной интенсивной терапии неонаталь-ный сепсис остается наиболее грозным и частым осложнением, развивающимся в 36,66% (из них в 45,45% с летальным исходом) у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ.
2. Развитие нейтропении у новорожденных с тяжелой респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС сопровождается снижением уровня эндогенного ГКСФ, истощением пула стволовых клеток (CD34), снижением содержания В-лимфоцитов (CD 19), а так же повышением уровня провоспалительного ИЛ-8 и активацией Т-лимфоцитарного звена (CD8).
3. Действуя, как иммуномодулятор, чр-ГКСФ:
- увеличивает количество зрелых нейтрофилов, стимулируя выброс стволовых клеток (CD34), активируя эндогенный ГКСФ; стимулирует эритропоэз и увеличивает количество тромбоцитов;
- усиливает активность В-лимфоцитарного звена и не влияет на Т-лимфоциты;
- одновременно способствует повышению уровня провоспалительных ИЛ-lp, ФНО и противовоспалительного ИЛ-4.
4. Использование чр-ГКСФ в стандартной терапии у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ, снижает частоту развития неонатального сепсиса в 5,5 раз, летальность в 6 раз и сокращает длительность проведения ИВЛ; является безопасным методом профилактики и терапии сепсиса у новорожденных с нейтропенией.
5. Использование чр-ГКСФ в стандартной интенсивной терапии у новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ, позволяет снизить финансовые затраты на лечение в 1,14 раз в дозе 5 мкг/кг/сут ив 1,35 раз в дозе 10 мкг/кг/сут.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.
1. У новорожденных с респираторной патологией и перинатальным поражением ЦНС, находящихся на ИВЛ, при снижении числа лейкоцитов до 6х10\литр показано назначение чр-ГКСФ с целью коррекции нейтропении и профилактики септической инфекции.
2. чр-ГКСФ следует вводить внутривенно, в дозе 10 мкг\кг\сут, в виде двух внутривенных инфузий в течение 3 дней.
3. Приготовление инфузионного раствора чр-ГКСФ проводить согласно инструкции, прилагаемой к препарату.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Пухтинская, Марина Гаевна
1.И., Безух С.М., Борисенко К.К. и др. Неизвестная эпидемия: герпес (Патогенез, диагностика, клиника, лечение)/ Под ред. JI.H. Хахали-на Смоленск: Фармаграфикс, 1997. - С.7.
2. Акопян Т.Э. Бактериальный вагиноз и беременность // Акуш. и гин.-1996.- № 6,- С. 3-5.
3. Антонов А. Г., Володин Н. Н., Гребенников В.А. и др. Принципы ведения новорожденных с респираторным дистресс-синдромом: Метод, рекомендации,- М.: Б.и., 2002,- С.14-18.
4. Багдатьев В. Е., Гологорский В. А., Гельфанд Б. Р. Респираторный дистресс- синдром // Вестн. интенс. тер.- 1996.- №2,- С. 15-25.
5. Башмакова М. А., Кошелева Н. Г., Калашникова Е. П. Инфекция и бактериальная колонизация урогениталий у беременных, влияние на течение беременности, плод и новорожденного ребенка // Акуш. и гин,- 1995.-№1,- С. 15-18.
6. Бочоришвили В. Г. Новая иммунологическая концепция сепсиса и ее клиническое значение // Междунар. журн. иммунореабилитации.- 1997.-№ 6.-С. 42-31.
7. Вельтшцев Ю. Е. Становление и развитие иммунной системы у детей. Иммунная недостаточность. Иммунодиатезы // Рос. вестн. перинатол. и педиатр.- 1997,-Прил.- С. 18.
8. Власенко А. В., Закс И. О., Мороз В. В. Прошлое и будущее определений понятий острого повреждения легких и респираторного дистресс-синдрома и их лечение.-М.: ВИНИТИ, 2000.- Вып. 3,- С.2-13.
9. Власенко А. В., Закс И. О., Мороз В. В. Нереспираторные методы терапии синдрома острого паренхиматозного поражения легких // Вестн. интенс. тер.-2001.- № 2.- С.31-38.
10. Ю.Володин Н. Н. Педиатрия.-М.: Гэотар, 1996.-833 с.
11. П.Володин Н. Н., Дегтярева М. В. Иммунотерапия в неонатологии // Справочник по иммунотерапии.- СПб.: Диалог, 2002.- С. 25, 28, 29.
12. Вольф В.Е., Гасанова JI.A., Жданов Г.Г. и др. Изменение иммунного статуса детей раннего возраста при сепсисе и пневмонии.// "Актуальные вопросы иммунологии и аллергологии". Махачкала, 1979, т. I, С. 10-11.
13. Вольф В.Е., Жданов Г.Г., Гуревич С.М. Иммуноглобулины при сепсисе новорожденных. // Актуальн. вопр. иммунологии и иммунопатологии. -Ростов-на-Дону, 1976.-С. 40-42.
14. Галактионов В. Г. Иммунология.- М.: Изд-во МГУ, 1998.- 479 с.
15. Гасанова JI.A. Влияние гипербарической оксигенации на фагоцитоз у детей первых трех месяцев жизни: Автореф. дисс. канд. мед. наук,- М., 1983.-22 с.
16. ГомеллаТ. Л. Неонатология .- М.: Медицина, 1995.- 636 с.
17. Гребенников В. А., Миленин О. Б., Рюмина И. И. Респираторный дистресс-синдром у новорожденных. Заместительная терапия синтетическим сурфактантом Exosurf Neonatal.-М.: Б.и., 1994,- 136 с.
18. Грегори Дж.А. Искусственная вентиляция легких у детей // Расстройства дыхания у детей. М.: Медицина, 1984. - С.31-47.
19. Гурина И. О. Клшшко-иммунохимическая оценка нарушений функций гематоэнцефалического барьера у недоношенных детей с перинатальными поражениями ЦНС: Дис. . канд. мед. наук,- М., 1996.- С. 34-38.
20. Данченко О. В., Зайдиева 3. С., Тютюнник В. Л., Цахилова С. Г. Тактика ведения беременности при генитальном герпесе // Патология беременности и родов: Тез. докл. науч.-практ. конф.- Саратов, 1997.- С. 42-43.
21. Дэвис П. А., Готефорс Л. А. Бактериальные инфекции плода и новорожденного / Пер. с англ.- М.: Медицина, 1987.- С. 34-56.
22. Дегтярева М. В. Комплексное исследование провоспалительных иммуно-цитокинов и функционального состояния лимфоцитов у новорожденных детей в норме и при патологии: Дис. . канд. мед. наук.- М., 1995,- 159 с.
23. Дегтярева М. В., Дегтярев Д. Н., Володин Н. Н., Ковальчук JL В. Роль ин-терлейкина-1 и фактора некроза опухолей у новорожденных детей в норме и при патологии // Педиатрия.- 1996.- № 1.- С. 93-97.
24. Дегтярева М. В. Функциональное состояние иммунной системы новорожденных детей при физиологическом и осложненном течении неонатально-го периода: периода иммунной адаптации: Автореф. дис. . д-ра. мед. наук,-М., 2000.-46 с.
25. Дементьева Г. М. Пульмонологические проблемы в неонатологии // Пульмонология.- 2002.- № 12.- С. 6-12.
26. Исаков Ю. Ф., Белобородова Н. В. Сепсис у детей.- М.: Изд. Мокеев, 2001.- С.44-45.
27. Каганов С. Ю., Вельтищев Ю. Е. Пневмонии у детей.- М.: Медицина, 1995.- С. 86.
28. Кассиль В. Л., Золотокрылина Е. С. Острый респираторный дистресс-синдром в свете современных представлений // Вестн. интенс. тер.- 2000.-№ 4,- С. 3-7.
29. Кассиль В. Л., Золотокрылина Е. С. Острый респираторный дистресс-синдром в свете современных представлений // Вестн. интенс. тер.- 2001.-№31.-С. 9-14.
30. Кетлинский С. А. Современные аспекты изучения цитокинов // Russian Journal of Immunology.- 1999.- № 4.- С. 46-52.
31. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С., Воробьев А.А. Эндогенные иммуно-модуляторы.- СПб.: Гиппократ, 1992,- 256 с. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции воспаления и иммунитета //Иммунология.- 1995.-№3.-С.30-44.
32. Кейт JI. Г., Бергер Г. С.5 Эдельман Д. А. Репродуктивное здоровье / Пер. с англ.- М.: Мир, 1988.- С. 67-78
33. Козлов В. А. Некоторые аспекты проблемы цитокинов // Цитокины и воспаление,- 2002.- № 1.- С. 5-8.
34. Коча М. Н., Гилберт Г. JL, Браун Дж. Б. Клиническая патология беременности и новорожденного / Пер. с англ.- М.: Медицина, 1986.- С. 121-127.
35. Котов А. Ю. Разработка диагностических тест-систем и их использование для изучения продукции провоспалительных цитокинов при воспалительных процессах: Дис. канд. мед. наук.- СПб., 1999.- С. 56-61.
36. Малашхия Ю. А., Сепиашвили Р. И., Надареишвили 3. Г., Малашхия Н. Ю. Проблемы неврологической и иммунологической памяти и перспективы реабилитации (Основы и концепция) // International Journal on Immimorehabilitation.- 1996.- № 2.- С. 53-58.
37. Новиков Д. К. Медицинская иммунология.- Минск; Витебск: БААКИ, 1999.- 175 с.
38. Покровский В.И. Внутрибольничные инфекции//Тер. арх.- 1988.-N 11.-С. 3-6.
39. Рогаткин С. О. Клинико-нейросонографические и иммунохимические критерии диагностики и прогноза перинатальных поражений центральной нервной системы у новорожденных детей различного гестационного возраста: Дис. канд. мед. наук.- М., 1993.- С. 64-73.
40. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология.- М.: Мир, 2000.- 592 с.
41. Сепиашвили Р. И., Малашхия Ю. А. Мозг один из центральных органов иммунной системы // International Journal on Immunorehabilitation.- 1995.-№ 1.- С. 3-17.
42. Страчунский JI. С. Антибактериальная терапия пневмоний у детей.- М.: Медпрактика, 2002,- Т.1.- С. 65-103.
43. Таболин В.А., Володин Н.Н., Дегтярева М.В. и др. Иммунокоррекция при бактериальных инфекциях у новорожденных детей: реальность и перспективы//Int. J. onbnrnunorehabmtation.-1998.-№ 10.- С. 174-182.
44. Таболин В.А., Володин Н.Н., Дегтярева М.В. и др. Актуальные вопросы перинатальной иммунологии // Int. J. on Immunorehabilitation.- 1997.-№ 6,-C. 112-122.
45. Хаитов P. M., Игнатьева Г. А., Сидорович И. Г. Иммунология.-М.: Медидина, 2000,- С. 189-192.
46. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Иммуномодуляторы и некоторые аспекты их клинического применения // Клин, мед.- 1996.- № 8.- С. 7-12.
47. Чернышов В. П., Слуквин И. И. Анализ субпопуляций Т-лимфоцитов и естественных киллеров методом проточной цитофлуориметрии у новорожденных детей // Педиатрия.- 1993,- № 5.- С. 15-17.
48. Шабалов Н. П. Неонатология.- СПб.: Изд-во Спец. лит-ра, 1997.-Т. 1.- С. 494.
49. Шаламов В. Ю. Оценка эффективности триггерной искусственной вентиляции легких в лечении новорожденных с тяжелой дыхательной недостаточностью: Автореф. дис. канд. мед. наук.- М., 2000.- 15 с.
50. Шалина Р. И., Тищенко Е. П. Дыхательная активность плода как прогностический критерий развития мекониальной аспирации у плода и синдрома аспирации мекония у новорожденного // Акуш. и гин.- 2003,- № 6.- С. 16-20.
51. Шалина Р. И., Курцер М. А., Тищенко Е. П., Бреусенко JI. Е. Прогностические критерии мекониальной аспирации у плода и синдрома аспирации мекония у новорожденного //Пробл. беременности.- 2000.- № 2.- С. 34-40.
52. Шокарев А.В. Клинико- иммунологическая характеристика детей59.первого года жизни, перенесших перинатальную гипоксию.// Диагностика и терапия гипоксических состояний у плодов, новорожденных и детей раннего возраста. -М.- 1983. С. 78-84.
53. Шокарев А.В. Клинико-иммунологические аспекты реабилитации детей раннего возраста,перенесших гипоксию в перинатальном периоде. // Автореф.диссерт. канд. мед. наук.- Ростов-на-Дону.- 1987.-19 с.
54. Эстрин В.В., Муравьев О.В., Крайнева Н.Н., Синичкин А.А. Этиология, патогенез и интенсивная терапия сепсиса у новорожденных // Актуальные вопросы инфекционно- воспалительных заболеваний у новорожденных детей.-М., 1990.-С. 110-117.
55. Ярилин А. А. Основы иммунологии,- М.: Медицина, 1999.- 608 с.
56. Andersson U.G., Bjork L., Skansen-Saphir U., Andersson J. P. Down-regulation of cytokine production and interleukin-2 receptor expression by pooled human Ig G // Immunology.- 1993.- Vol. 5.- P. 79-211.
57. Aujard Y., Bedu A., Bingen E., Bonacorsi S. Nosocomial infection in paediatrics // Med. Mai. Infect., Spec. Iss.- Nov. 1995.- Vol. 25.- P. 36-43.
58. Bertotto A., Arcangeli C. D. F., Gerli R. et al. Phenotypic heterogeneity within the circulating human neonatal T4-positive T-cell subset // Biol. Neonate.-1986.-Vol. 50.-P.318-322.
59. Bertotto A., Arcangeli C.D.F., Gerli R. et al. Phenotypic heterogeneity within the circulating human neonatal T4-positive T-cell subset // Biol. Neonate.1986.-Vol. 50.-P. 318-322.
60. Bessler H., Mendel C., Straussberg R. et al. Effects ofDexamethasone on IL-lb , IL-6, and TNF-a Production by Mononuclear Cells of Newborns and Adults // Biology of the Neonate.- 1999.- Vol. 75, №4.- P.225-233.
61. Bessler H., Sirota L., Dulitzky F., Djaldetti M. Production of interleukin-1 by mononuclear cells of newborns and their mothers // Clin. Exp. Immunol.1987.-Vol. 68.-P.655-661.
62. Bessler H., Sirota L., Dulitzky F., Djaldetti M. Production of interleukin-1 by mononuclear cells of newborns and their mothers // Clin. Exp. Immunol.-1987.-Vol. 68.-P. 655-661.
63. Bessler H., Sirota L., Notti I. et al. IL-2 receptor gene expression and EL-2 production by human preterm newborn cells // Clin. Exp. Immunol.- 1993.- Vol. 93, №3.-P. 479-483.
64. Bessler H., Sirota L., Notti I. et al. IL-l-b and IL-3-like activity in preterm infants // Clin. Exp. Immunol.- 1993.-Vol. 91, №2.- P. 320-324.
65. Bessler H., Sirota L., Notti I. et al. IL-l-b and IL-3-like activity in preterm infants // Clin. Exp. hnmunol.-1993.-Vol. 91, №2.- P. 320-324.
66. Bessler H., Sirota L., Notti I. et al. IL-2 receptor gene expression and IL-2 production by human preterm newborn cells // Clin. Exp. Immunol.-1993.-Vol. 93, №3.-P. 479-483.
67. BlasczykR., Westhoff U., Grosse-Wilde H. Soluble CD4, CD8 andHLA molecules in commercial immunoglobulin preparations // Lancet.- 1993.- Vol. 341, №8848.-P. 789-790.
68. Bona E., Andersson A.-L., Blomgren K. et al. Chemokine and Inflammatory Cell Response to Hypoxia-Ischemia in Immature Rats // Pediatr. Res.-1999.-Vol. 45, № 4.-P.500-509.
69. Bot A., Antohi S., Bona C. Immune response of neonates elicited by somatic transgene vaccination wiht naced DNA // Frontiers in Bioscience.-1997.-Vol. 2.-P. dl73-188.
70. Bronchud M. H., Potter M.R., Morgenstern G. et al. In vitro and in vivo analysis of the effects of recombinant human granulocyte colony-stimulating factor in patients // Br. J. Cancer.- 1988.- Vol. 58.- P. 64-69.
71. Cavallo M.G., Rozzilli P., Thorpe R. Cytokines and autoimmunity // Clin. Exp. Immunol.- 1994,- Vol. 96, № 1.- P. 1-7.
72. Crawford J., Ozer H., Stoller R. et al. Reduction by granulocyte colony-stimulating factor of fever and neutropenia induced by chemotherapy in patients with small cell lung cancer//New Eng. J.Med.-1991.-Vol. 325.-P. 164-170.
73. Cummings J. J., D'Eugenio D.B., Gross S.J. A controlled trial of dexamethasone in premature infants at high risk for bronchopulmonary dysplasia // New Eng. J. Med.- 1989,-Vol. 320.- P.1505-1510.
74. Damman O., Leviton A. Infection remote from the brain, neonatal white matter damage, and cerebral palsy in the preterm infant // Seminars in Perinatal Neurology.- 1998.-Vol.5.-P.190-201.
75. Darville Т., Tabor D. R., Jacobs R. F. Intravenous immunoglobulin (IVIG) modulates cord blood monocyte tumor necrosis factor alpha (TNF) production in vitro // Pediatr. Res.- 1993.- Vol. 33, №4.- P. 2: 282A.
76. Dinarello C.A., Wolff S.M. The role of interleukin-1 in disease // N. Engl. J. Med.-1993.-Vol. 328.-P.106.
77. Drew J. Immediate intubation at birth of very low birthweight infants: effects on survival // Am. J. Dis. Children.- 1992.-Vol. 136.- P. 207-210.
78. Duhrsen U., Villeval J. L., Boyd J. et al. Effects of recombinant human granulocyte colony-stimulating factor on hematopo-ietic progenitor cells in cancer patients//Blood.- 1988.-Vol.72.-P. 2074-2081.
79. Eun B.-L., Liu X.-H., Barks J. D. E. Pentoxifylline Attenuates Hypoxic-Ischemic Brain Injury in Immature Rats // Pediatr. Research.- 2000.- Vol. 47, №1.-P. 73-78.
80. Fairfax C.A., Borzy M.C. Interleukin-2 production, proliferative response and receptor expression by cord blood mononuclear cells // J. Clin. Lab. Immunol.-1988.-Vol. 27, №2,-P. 63-67.
81. Gessler P., Luders R., Konig S. et al. Neonatal neutropenia in low birthweight premature infants //Am. J. Perinatol.- 1995.-Vol.12.-P. 34-38.
82. Gillian E., Yu Suen, Del Stringhen A randomized placebo controlled phase I/II trial of human recombinant G-CSF in newborns with persumed sepsis // Pediatr. Res.- 1993.- Vol. 33, №4.- P. 2: 291A.
83. Givner L.B., Nagaraj S.K. Recombinant human GM-CSF for adjunctive therapy of Group В streptococcal sepsis in newborn rats // Pediatr. Res.- 1993.-Vol. 33, №4.-P. 2.-291A.
84. Green G.M., Kass E.H. The influence of bacterial species on pulmonary resistance to infection in mice subjected to hypoxia, cold stress, and ethanolic intoxication // Br.J.Exp.Pathol.-1965.-Vol.46.- P. 360-366.
85. Griffith D.E., Miller E., Gray L.D. Interleukin-1-mediated release of inter-leukin-8 by asbestos-stimulated human pleural mesothelial cells // Amer.J.Resp.Cell, Molec.Biol.-1994. Vol.10, №3. -P.245-252.
86. Ha!liday H. L. Natural vs synthetic surfactants in neonatal respiratory distress syndrome //Drugs.- 1996,-Vol. 51.-P.226-237.
87. Haque K. N., Remo C., Bahakin H. Comparison of two types of intravenous immunoglobulins in the treatment of neonatal sepsis // Clin. Exp. Immunol." 1995,- Vol. 101, № 2.- P. 328-333.
88. Hartung Т., Docke W.D., Gantner F. et al. Effect of granulocyte colony-stimulating factor treatment on ex vivo blood cytokine response in human volunteers.- Blood.-1995.-Vol. 85.- P.2482.
89. Hayward A., Cosyns M. Proliferative and cytokine responses by human newborn T-cells stimulated with staphylococcal enterotoxin В // Pediatr. Res.-1994.-Vol. 35, №3.-P. 293-298.
90. Hill H.R. Intravenous immunoglobulin use in the neonate: role in prophylaxis and therapy of infection //Pediatr. Infect. Dis. J.- 1993.- Vol. 12.- P. 549559.
91. Hird M.F., Greenough A., Gamsu H.R. Inflating pressures for effective resuscitation of preterm infants // Early Human Development.-1991.- Vol. 26,- P. 69-72.
92. Hoskyns E.W., Boon A.W., Vyas H., Hopkin I.E. Endotracheal resuscitation of preterm infants at birth // Archives of Disease in Childhood.- 1987.-Vol.62.- P. 663-666.
93. Ichiyama Т., Hayashi Т., Furukawa S. Cerebrospinal fluid concentrations of soluble TNF receptor in bacterial and aseptic meningitis //Neurology.-1996.-Vol. 46, №3.- P. 837-838.
94. KocherlakotaP., La Gamma E. F. Human Granulocyte Colony-stimulating Factor May Improve Outcome Attributable to Neonatal Sepsis Complicated by Neutropenia//Pediatrics. 1997. - Vol. 100, № 1. - P. 6-7.
95. Kind C., Due G. Pre- and perinatal infections.- Problems for the practicing pediatricians. Group В streptococci, varicella, toxoplasmosis // Schweiz. Med. Wochenschr.-1996.- Vol. 126, №7.- P. 264-276.
96. Lacy J.B., Ohlsson A. Administration of intravenous immunoglobulins forprophylaxis or treatment of infection in preterm infants: meta analyses I I Arch. Dis. Child. Fetal Neonatal Ed.-1995.-Vol. 72, №3.-P. 151-155.
97. Le Thi B.-T., Dicovich M., Peffer N.J. et al. Direct activation of human resting T-cells by IL-2: The role of an IL-2 receptor distinct from the Tac protein // J. Immunol.-1987.-Vol. 139.-P. 1550-1556.
98. Leckers L.M., Cossman J. Mitogen-induced activation of human T-cells // Proc. Natl. Sci.-1983.-Vol. 80.-P. 3494-3498.
99. Lee S., Im S.A., Yoo E.S. et al. Mobilization kinetics of CD34* cells in association with modulation of CD44 and CD31 expression during continuous intravenous administration of G-CSF in normal donors // Stem Cells.- 2000.-Vol. 18.-P. 281-286.
100. Leviton A., Paneth N., Reuss M.L. et al. Maternal Infection, Fetal Inflammatory Response, and Brain Damage in Very Low Birth Weight Infants // Pedi-atr. Res.-1999.- Vol. 45, №5.- P. 234-342.
101. Lord B.I., Bronchud M.H., Owens S. et al. The kinetics of human granulopoiesis following treatment with granulocyte colony-stimulating factor in vivo // Proc. Nati. Acad. Sci. USA.- 1989.- Vol. 86.- P. 9499-9503.
102. Lowbari E. J. L. et al. Control of Hospital infection. A Practical Handbuc.-2nd ed.- London: Charman and Hall, 1981. 616 p.
103. Moore F. D. Metabolic Care of the Surgical patient.- Filadelphia a. L.: Sannders Co., 1959.-P.305.
104. Morstyn G., Foote M., Perkins D., Vincent M. The clinical utility of granulocyte colony-stimulating factor: early achievements and future promise // Stem. Cells.- 1994.-Vol.12, Suppl. l.-P. 213-228.
105. Murray J.F., Matthay M.A. Luce J.M., Flick M.R. An expanded definition of the adult respiratory distress syndrome // Am. Rev. Respir. Dis.- 1988.-Vol. 138.-P. 720-723.
106. Pajkrt D., Manten A., van der Poll T. et al. Modulation of cytokine release and neutrophil function by granulocyte colony-stimulating factor during endotoxemia in humans //Blood.-1997.-Vol. 90.- P. 1415.
107. Pedrazzoli P., Gibelli N., Pavesi L. et al. Effects of glycosylated and non-glycosylated G-CSFs, alone and in combination with other cytokines, on the growth of human progenitor cells // Anticancer Res.- 1996.- Vol. 16.- P. 17811785.
108. Prabhakar Kocherlakota, Edmund F. Human Granulocyte Colony-stimulating Factor May Improve Outcome Attributable to Neonatal Sepsis // La Gamma PEDIATRICS.- 1997.- Vol. 100, №1,- P. 6.
109. Querol S., Cancelas J.A., Amat L. et al. Effect of glycosylation of recombinant human granulocytic colony-stimulating factor on expansion cultures of umbilical cord blood CD34* cells // Haematologica.- 1999,-Vol. 84.- P. 493498.
110. Raju T.N.K., Langenberg P. Pulmonary haemorrhage and exogenous surfactant therapy: a metaanalysis //J. Pediatr.- 1993.- Vol. 123.- P. 603-610.
111. Redl H., Bahrami S., Leichtfried G., Schlag G. Special collection and storage tubes for blood endotoxin and cytokine measurements // Clin. Chem.-1992,- Vol.38, N5.-P.764-765.
112. Roilides E., Lyman C.A., Mertins S.D. Ex vivo effects of macrophage-colony-stimulating factor on human monocyte activity against fungal and bacterial pathogens // Cytokine.- 1996,- Vol. 8, №1.- P. 42-48.
113. Tu W., Cheung P.-Т., Lau Y.-L. IGF-1 Increases Interferon-gamma and IL-6 mRNA Expression and Protein Production in Neonatal Mononuclear Cells // Pediatr. Res.- 1996.- Vol. 46, №6.- P. 342-357.
114. Tullus K., Escobar-Billing R., Fituri O. IL-la and IL-1 receptor antagonist in the urine of children with acute pyelonephritis and relation to renal scarring // ActaPaediatr. Int. J. Paediatr.-1996.- Vol. 85, №2,-P. 158-162.
115. Weisman L.E., Cruess D.F., Fischer G.W. Standard versus hyperimmune intravenous immunoglobulin in preventing or treating neonatal bacterial infections // Clin. Perinatol.- 1993.- Vol. 20.- P. 211-224.
116. Weisman L.E., Stoll B.J., Kueser T.J. et al. Intravenous immunoglobulin prophylaxis of late-onset sepsis in premature neonates // J. Pediatr.-1994.-Vol. 125, №6.-P. 922-930.
117. Weiss M., Gross-Weege W., Harms В., Schneider E.M. Filgrastim (rhG-CSF) related modulation of the inflammatory response in patients at risk of sepsis or with sepsis // Cytokine.-1996.-Vol. 8.- P.260.
118. Welliver R.C., McLaughlin S. Unique epidemiology of nosocomial infections in a children's hospital // Am. J. Dis. Clnld.-1984.-Vol. 138.- P. 131135.
119. Zeher M., Paloczi K., Sregedi G. Activation antigens in patients with Sjogren's syndrome//Haematologia.-1990.-Vol. 23, №4.-P. 293-297.
120. Zimmerman J.J. Pharmocologie modulation by prostaglan- din El ofsuperoxide anion production by human polymorphonuclear leukocytes // Crit. Care Med.-1986.-Vol. 14.-P. 761-767.i