Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Поиск новых бета-адреноблокаторов (длительнодействующих и "гибридных") среди производных 4-(2-окси-3-алкиламинопропокси)индола и 4-(изоксазолилкарбамоил)-феноксипропаноламина

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И МЕДИЦИНСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ РФ ЦЕНТР ПО ХИМИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ — ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ХИМИКО-ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ

ПОИСК НОВЫХ Р-АДРЕНОБЛОКАТОРОВ (ДЛИТЕЛЬНОДЕЙСТВУЮЩИХ И «ГИБРИДНЫХ») СРЕДИ ПРОИЗВОДНЫХ 4-(2-ОКСИ-3-АЛ КИЛАМИ НОПРОПОКСИ) ИНДОЛА И 4-(ИЗОКСАЗОЛИЛКАРБАМОИЛ)-ФЕНОКСИПРОПАНОЛАМИНА

(ЦХЛС — ВНИХФИ)

На правах рукописи

для служебного пользования

Экз. № ^

ДОЛГУН Ольга Викторовна

14.00.25 — фармакология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Работа выполнена в лаборатории фармакологии Центра по химии лекарственных средств — Всероссийском научно-исследовательском химико-фармацевтическом институте (ЦХЛС — ВНИХФИ; зав. — академик РАМН М. Д. Машковский).

Научный руководитель: доктор медицинских наук С. Д. Южаков

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор С. С. Либерман доктор медицинских наук, профессор О. Н. Чиченков

Ведущая организация — кафедра молекулярной фармакологии и радиобиологии Российского медицинского университета.

Защита состоится « » 1994 г. в часов

на заседании специализированного совета при Центре по химии лекарственных средств — ВНИХФИ по адресу: 119815, Москва, Зубовская ул., д. 7.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ЦХЛС — ВНИХФИ.

Автореферат разослан « ¥ ъ&М/ЛьФЯ 1994 г.

Ученый секретарь специализированного совета

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Сердечно-сосудистые заболевания продолжают занимать первое место в структуре заболеваемости и смертности в экономически развитых странах и в нашей стране (Е.И.Чазов, Г.И.Царегородцев,1983). По данным ВОЗ в наиболее крутых странах мира 39-156% всох случаев смерти обусловлено сердечно-сосудистыми заболеваниями. От шшзмяческой болезни сердца и ев осложнений только в США погибает сеьшэ 0,5 млн человек в год (î'ny et al., 1983). В hossЯ стране болезш! сердца и сосудов уносят ежегодно около I млн 400 тис. кнзней (Е.И.Чазов,1983). В.30% случаев инвалидность такта обусловлена сердечно-сосудистыми заболеваниями. В связи с этим одной из наиболее актуальных проблем современной медицин« является борьба с сердечно-сосудистым;! заболеваниями.

Е комплексе мероприятий по профилактике и лечению сердечнососудистых заболеваний с помощью лекарственных средств важное место принадлежит ß-адреноблокаторсм, которые оказывают выраженный лечебкнй и профилактический эффект при наиболее распространенных заболеваниях сердечно-сосудистой системы: при мимической болезни сердца, аритмиях, разных видах артериальных гипергензий (В.И.Метелица, 1386; Van Zwleten.^SS; Prlchard.1988; Holmes et al.,1990; Fitzgerald,1991). По имеющимся данным.ß-адреноблокзторы превосходят другие сорременшв аптиангинальные и антиаритмичоские препараты (в том числе и антагонисты ионов кальция) по показателю уменьшения смертности болышх, перенесикх осгруй фазу инфаркаа миокарда (Kay et а1.,'>Ф2; Korganroth, 1987; Berglimd,1989; Psa-ty et al.,1990, Pitt,1992). Они эффективны также при гипертрофической застойной кардиомиопатии, расслаивающейся аорте, выпадении митрального клапана и друтггх сердачно-сосудистых заболеваниях (irishman, 1979; Berggren et al.,1983; Fisher et al,,i986). Предттрзпгашшся попытки использовать р-адреноблокаторы для первичной профилактики инфаркта миокарда, особенно у больных с гипертензиами (Dollery,19SS).

р-Дцреноблокаторы широко используют также по некардкологи-ческш показаниям: при мигрзни, эссенциальном треморе, проявлениях тревокных состояний, синдроме отмены алкоголя и наркотиков, тиреотоксикозе, гиперпар атареокда" i е и др. (Jacob et.al.,1983; Burgess,1986). Кроме того, некоторые р-адреноблокаторы успешно применяют при лечении глаукомы (Ермакова В.Н. ,1981; Шырева В.О. и др.,1Э82; Nathanson,1981,1984; Dorigo et al.,1990).

В настоящее время в мировой медицинской практике применяйся целый ряд р-адрвнобдохаторов (пропранолол, окспренолол, ате-нолол, лабеталол и др.). Несмотря на это, судя по литературным данным, дальнейший поиск новых препаратов этого класса продолжается (Sugal.1990; UirohasM et al.,1990; Cecchetti et al.,1991, 1993; ProMich, 1991; Vo et al.,1992). Связано это с тем, что существующие препараты не вполне удовлетворяют требованиям кли-ншиетов. Большинство из них hg обладает достаточной избирательностью действия и вызывает нежелательные побочные реакции, не всп они достаточно эффективны; ведется поиск препаратов которые наряда с fS-адрзноОлокируадим обладают и другими важными фармакологическими свойствами, в частности, кальций-антагонистической, диуретической активностью, жггибируюц&ч действием в отношении ан-гиотензян превращающего фермента и.ренина. Широкая сфрэ исполь--зования p-адреноблокаторов в кардиологии, необходимость длительного, а нередко пожизненного применения и связанная с этим проблема соЕ;/естимостк обусловливает необходимость поиска препарратов длительного действия, что составило одно из основных направлений направлений настоящей работы. Следует особо подчеркнуть актуальность поиска "гибридных" р-адреноблокаторсв в качестве антигипер-т".наивных средств, так как эффективность обычных 6-здре:юблокато-ров в ионотерапии при артериальных пшертензиях не превышает 50Х.

В нагаэГ: стране до последнего времени наиболее широко применялся p-здреноблокатор пропранолол, выпускаемый Харьковским

химико-фармацевтическим.заводом "Здоровье трудяацися" под названием анаприлин. В моньшей степени используются атенолол, оксире-полол и другиэ зарубежные препараты. Ограниченное применение имеет "гибридный" ф-,а-)адреноблокатор лабеталол,

В последнее время в 1Ш!С-В!ЖК1 разработан оригинальный "гибридный" ф-,а-)эдреноблокатор проксодолол. Препарат успешно прешел клинические испытания и разрешен для медицинского примекв-ния в качество антигипертензивного, антиангинального и антигла-укоматозного средства. Однако, промышленное производство этого препарата пока не налажено.

Изыскание и изучение новых р-адреноблокаторов оригинальной химической структуры, обладающих существенными отличиями от известных препаратов этого класса является актуальной задачей.

Настоящая работа выполнялась в соответствии с государственной научно-технической программой "Национальные приоритеты в- медицине и здравоохранении" по направлении 7.07 "Фундаментальные а прикладные проблемы создания лекарственных средств" и государственной программой РФ по улучшению лекарственного обеспечения и развития фармацевтической промышленности.

состояла в направленном поиске новых оригинальных р-адреноблокатороз, отличающихся от известных препаратов как по химической структуре, гак и по фармакологическим свой- . ствам, в том числе препаратов длительного действия и "гибридных" соединений, а именно, сочетающих р-адреноблокирующую ¡жглт.чость со способностью ингибировать ангистензин превращающий фер?.'?нт или диуретическим действием.

В связи с этим, задачи работы состояли в ¿ледухшом: I) Совместно с химиками разработать программу синтез?. :: провести фармакологическое изучение новых рядов соединений, содержали! фрагменты основного агонистз й-адренорецепторег пропилнорадреяалина (изадрина). Вместе с тем, сглг'етзлп'гу- -о-

строзниэ еновь СКН183Ир02!ШШХ рядоз соединений, вв8д9еиэ в их молекулы новых фрагментов долюю было обеспечить особенности их специфической р-адреноблокирущей активности и других фармакологических свойств.

2) Руководствуясь утвержденными Фармакологическим Кожте-том РФ "Методическими рекомендациями по экспериментальному (доклиническому) изучению р-адреноблокирупцих соединений.и рядом дополнительных материалов, изучить основные вида фармакологической активности синтезированных соединений, связь ыевду их структурой и действием.

3) Провести углубленное фармакологическое изучение наабо-лее активных соединений, сравнить их с известными р-адренобло-каторамя и выбрать соединения, преде т велящие интерес для клинического исследования.'

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ заключается в следующем:

1) Впервые изучены в качестве потенциальных р-адреноблока-. торов следующие группы специально синтезированных химических соединений: .

а) индольные аналоги феноксипропаноламина, включая производные 4-(2юкси-3-алкиламннощюпокси5ивдола;

б) азольные аналоги феноксипропаноламина, включая производные 4-(изоксазолилкарбамоил)феноксипропанолЕмина.

2) Показано, что Л-(4-замещенные)бензольные производные 4-(2-окси-3-алккламинопропокси)индола являются новой, группой р-адреноблокаторов длительного.действия.

3) Обоснована и экспериментально доказана возможность получения новых "гибридных" р-адреноблокаторов, сочетающих р-ад-реноблокируодую активность со способностью ингибировать ангио-тензин превращающий фермент среди производных 4-(2-окси-3-ал-киламинопропокси)индола.

4) Обоснована и экспериментально доказана возможность по-

лучения препаратов, сочетающих р-адреноблокирушую и диуретическую активность среда производных 4-(изоксазолилкарбамоил) феноксипропанолашшв.

5) Показана высокая эффективность новых оригинальных соединений, обладающих р-адреноблокирупцей активностью и отличающихся по суше фармакологических свойств от известных р-адре-ноблокаторов, а именно: а) производных 4-(2-окси-3-алкиламино-пропокси)индола - гидрохлорида 4-(2-окси-3-трет.бутил-3-/4-нитробензил/аминопропоксй)скатола (соединение * 18) и дигидро-хлорида Н-1-{8-карбокси-5~/4- (3-трет.бутиламиног2-гидроксипро-покси)-индолил-3-карбоксамидо/пентил}-БЬ-алашл-1г-пролина (соединение * 26); б) производных 4-(изоксазолилкарбомаил)-феяокси-пропаноламина - гидрохлорида 1-/4-(3-метилизоксазолил-5-карбо-ниламино)фенокси/-3-трэт.Сутиламинопропанола-2 (соединение Л 30). Из всех изученных соединений наибольший интерес представляют соединения № 18, 26 и 30.

Н4УЧН.0-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ заключалась в следующем:

1) Производное 4-(2-окси-3-алкиламинопропокси)индола, гидрохлорид 4-(2-окси-3-тр9Т.бутил-3-/4-нитробензил/аминопропокси) скатола (соединение Л 18) обладает р-адрёноблокиругацей активностью, отличается большой длительностью дейстшя и наличием, "острой" антигипертензивной и сосудорасширяющей активности. Это соединение перспективно как возможное лекарственное средство.

2) Другое производное 4-(2-окси-3-алкиламинопропокси)ин-дола - дигидрохлорид N-1~{3-карбокси-5-/4-(3-трет.бутиламкно-2-гидроксипропокси) -индолил-3-карбоксашдо/-пентил} -БЬ-аланил-Ь-пролина (соединение * 26) - проявляет одновременно р-адренобло-кирувдую активность и ингибируздее действие в отношении ангио- • тензш превращащего фермента. Кроме того, это соединение проявляет высокую антигипертевзивную активность и обладает избирательным сосудорасширяющим действием.

3) Практический интерес мояет представить такта гвдрохлорид I-/4- (З-метилизоксазолил-5-карбониламино )фенокси/-3-трет. бутилвминолропанола-2 (соединение % 30), сочётащий избирательную Pj-адреноОлокирухщую и диуретическую активность.

4) Изучены закономерности связи между фармакологическими свойствами и химическим строением в ряду оригинальных индоль-ных и азольных производных феноксипропаноламина, что может быть использовано при дальнейшем направленном поиске новых р-адрено-блокаторов.

¿Шпация работы.. Результаты исследований доложены на конференции молодых ученых ВНИХФИ (1984), на 2 Всесоюзной конференции "Химия, биохимия и фармакология производных индола", Тбилиси, 1991.

ПубликацииПо теме диссертации опубликовано 4 печатные работы, получено 2 авторских свидетельства на изобретения. •

Объем и структура диссертации. Работа■изложена на 129 страницах машинописного текста, включает 8 таблиц, 23 рисунка и 187 ссшюк на работы отечественных и зарубежных авторов. Текст диссертации состоит из введения, обзора литературы, изложения собственных экспериментальных данных (включающего описание исследованных соединений, методов исследования и результатов экспериментов), обсуждения результатов и выводов, а также библиографии.

Исследованные соединения

Всего в настоящей работе изучено 35 новых оригинальных химических соединений. Из них 2S являются производными 4-(2-окси-3-алкиламинопропокси)индола общей структуры (I) и соответствую -ними заместителями - Rt, Rg, Rg, R4 (таблица * I); 10 соединений являются производными 4-(изоксазолшшарбамоил)с1еноксйпропаяол-аыина общей структуры (II) с соответствующими заместителями --ïb.Ro.ïl} (таблица № 2).

Таблица Л I

R3 I

ОСИаСНСНаМЯа»!

.1 JS соединений R1

I СН(СНз)2 H OH . G%

2 ен(сн3)2 H OH CHgCOOOHg

3 C(CH3>3 H OH СНзСООСНз

4 €(СНз)3 я OH ■ CH3 ■

5 C(CH3)3 H OH 'CH9COÎÎHNH2

6 С(СН3)3 H OH ,CH2CHliH=G(CH3)p

7 С(СН3)3 H OH CHgCHîilIg

8 С(СН3}3 H OH СЕгСН1ЦС'А3)г

9 CH2°6H5 OH GH3

10 С(СН3)3 H ососбя5 СН2ССОСНз

11 С(СН3)3 H осес-Нг O l' CH3

12 С(СН3)3 CH2C6H5 OH CH2C00CH3

13 С(СН3)3 CH2G6E4(0GH3-a) GH CH2C0CCII-

14 С(СН3)3 CH2C6H4(M02-n) CH Cii2CCCCH3

15 С(СН3)3 CH2G6H4(F-n) OH СНоОООСНЛ с. ¿>

16 сн(са3)г . CH2C6H5 GK СH^СииСПо

17 С(СН3)3 CH2C6H4(F-n) OH сн3

Л и СОе-ДННЭ-КИй «2

16 с(снз)з СЯ2С6Н4 (Ю2-п) он сн3

19 РЬ-ОСН2СН(0Н)СН?КСН2Р1Л102 С(СН3)3

20 С(СН3)3 СЕ^С^С^Н^ он сн3

21 С(СН3)3 СК2СсН4(С00Иа-п) он СНз

22 С(СН3)3 СН2 С6К4(СООС2Н5-П) он сн3

23 С(СН3>3 СН2С6Н4(01-гг) он СНз ■

2 К С(СН3)3 СН2СбН4(СН3-;1) он СНз

25 С(СН3)3 СН206Н4(ОСНз-71) ОБ снз

26 С(СН3)3 н он с^сонщин^снсоон кнсисо^} соон

Соединения & а 1-25 синтезированы- в ЦХЛС-ВНИХФй (старшим научным сотрудником Л.X.Виноградом под руководством академика ' РАМН Р.Г.Глушкова и профессора Н.К.Суворовз) совместно с Институтом физиологии и биохимот. микроорганизмов РАК, где впервые микробиологическим гидроксидировашем осуществляли получение индолил-3-уксусной кислоты (исходного продукта для синтеза конечных соединений).

Соединение Л 26, включающее карбоксешдо-петил-Шг-аланил-Ь-пролиновый остаток синтезировано в ЦХЛС-ВНИХФИ совместно с Институтом биологической и медицинской химии РАМЫ,

Соединения № а 27-36 синтезированы в ЦХЛС-ВНИХФй старшим научным сотрудником С.М.Виноградовой под руководством доктора химических наук С.Д.Соколова.

Таблица Jâ 2

ft*

R<.-C0N»<^O^>0C4>CHC0H?CHaf.'H^3 » НС i (II)

H,

Из

Н,С

ck сн3 э3

À1

н,с-

Tí

сссн,>,

спс сч3 ь

31

Н'СТГ~П

V4

С.и,-гггг

с1ня-тгт1

СИ а

<2>Ï~

Ci Ч/сня

н3с-

CCOCjHs

С< СН3 >3

СИС ОН-

СС СН3

снс сн3 э3

сс сн3 53

СНС СН3 У?

Н,С-

CCOCjHs

СС СН,

H

H

и

H

и

Уз7сдсы_исалб2овэкия Для проведения настоящей работа был использовал ряд методов, нозеолявдих выявить наличие р-адреноблоккрувдей активности у исследуемы! соединений, определить специфические особэкности их В-адрешСлокируюдэго действия (избирательность и длительность эффекта, наличке частичной агонистической активности и др.) и углубленно изучить соединения, проявивши каисолъшую активность и представляющие наибольсп-й интерес как потенциальные лекарственные средства.

В работа руководствовались "Методическими рекомендациями но Ексаоршентальному (доклншческсму) изучению р-адреноблоки-рушгах соединений, предлагаемых для клинических испытаний в качестве антианпшальных, антиариткических, антигипертензивчых . и вЕгиглаукомчтозных средств". Для углубленного исследования использовали также ряд дополнительных методов.

р-Адреноблокирунцув активность определяли у наркотизирован- -, кых крыс и кошек при внутривенном к пероральном введении по влиянию на хроногропный и депрессорный "аффекты кгадркна (определяли значение ЭД^д); в ряде случаев проводили исследования на изолированных предсердиях морских свинок в отношении торможения хроно-тропного эффекта изадркна (определяли значение рА^) (Р1 ^£ега1(1, 0'БоппеП,:!971 • 982). Длительность действия при

пероральном введении изучали у крыс, кошек и в отдельных опытах - у собак.

сродство к (З-адрено рецепторам и характер антагонизма исследовали на плазматических мембранах сердца кроликов и морских свинок методом радиолигвидного связывания (ЬеПкжНз еЪ а1.,197ь).

Нзличие не специфического ыембраностабилизирувдзго действия определяли у кроликов по местноанэстезкрувдей активности (по методу Ронье). Наличие частичной агснистической активности определяли у резерпикизированных крыс по способности соединений увели-

- rr -

f

чивать частоту сердечных сокращений (Fitzgerald, 0'Donnell,i97l).

Наличие антапшертензивного действия при однократном и длительном введении определяли у бодрствующих крыс со спонтанной гнпертензией и с моделью 2-шчечвой реноваскулярной гишртензии путем прямой регистрации артериального давления.

Антааритмическое действиэ изучали в опытах на наркотизированных крысах с аритмиями, вызванными аконитином (З.И.Веденеева, 1955), на морских свинках по влиянию на аритмогеннсе и летальное действие строфантина'(Vaughan-ffllliams, Seklja,1963), на кошках по влиянию на порог электрической Сибрялляции желудочков Szekeres, Papp,1971), на собаках по влиянию на частоту фибрилляции желудочков при острой коронарной окклюзии:

Влияние на системную и регионарную гемодинамику изучали на наркотизированных нормотензивных крысах с помощью метода меченых изотопами микросфэр (Rudolph, Heymann,1967).

йнгибирущув активность в отношении ангиогензин превраща-адего фермента изучали на внделецном ферменте и на гомогенате различных органов крыс по начальной скорости ферментативного гидролиза Z-Phe-Hls-Ieu (Priedland, -Sllver3tein,1976), а также по способности соединений блокировать прессорный эффект ангио-тензина-I при внутривенном введении наркотизированным крысам.

Определение содержания электролитов в моче крыс проводили методом пламенной фотометрии (Полупяов Н.С.,1959).

Общее действие и токсичность ясслэдова.и на мышах-самцах. Исследование проведено на 7 собаках, 6 кроликах, 58 кошках, 79 морских свинках, 1310 крысах и 1500 мышах.

Результаты экспериментов обрабатывали статистически с вычислением средней арифметической, ее с-тавдзртной ошибки и доверительного интервала; сравнение значений средних проводили по "t" критерию Стьдента.

Результаты исследования

Химически полученные соединения близки к некоторым известным 8-адреноблокаторам индольного ряда - пиндололу, Оошшдололу, мепиндололу и Б№ А5Т5С, но отличаются наличием заместителей в 3 положении индольного цикла, сензоильлых заместителей вместо гвдроксила боковой цепи, замещенных и незамещенных бензильних и фенэтильных заместителей вместо свободного водорода у вторичного азота боковой цепи. Лоследование новых соединений проводили г сравнении с их ближайшими аналогами по структуре - пиндололом бошшдололом.

Оведешя.о результатах исследования р-адреноблокярущих свойств и длительности действия производных 4-(2-окси-3-8Лкил-амакопропокси)индола приведены в таблице й 3.

Проведенные эксперимента показали, что все изученные соединения оказывают р-адреноблокируюс.ее действие при внутривенном введении наркотизированным крысам. Из всах изученных соединений, наибольшую активность проявляют соединения # 3 и 4, содержащие трет.Оутильный остаток у азота боковой цеш и соответственно мэтоксикарбОЕияьный и метальный заместители в поло-женив 3 издольного цикла. Эти соединения активнее пивдолола в 3-12 раз, а на изолированных предсердиях морских сетнск - в £00 раз. Однако, при введении крысам внутрь соединения й 3 и 4 менее активны, чем шшдолол.

Активность других изученных соединений (при внутривенном введении у наркотизированных крыс) значительно уменьшается при замене трет.бутильного остатка боковой цепи на йзопрошльный (соединения а I; 2; 16), при переходе от метилового эфира индо-лкл-3-уксусной кислоты (скатола) к гидразиду, ацетониду гвдра-зкда, амиду и N,Н-дазамащенвому амиду (соединения * 5-8), равно как при замене гидрокс-ила боковой цепи Сензоильной эфирной

Таблица А 2

mcmmbJEommMiAziZzmc^mmmomimmimm

» й соединений р-адреноблскирушая активность Длительность 0-адрено-блокирую- Щ6Г0 действия ^50 МЫШИ в/в

крысы -изолированное предсердие морских свинок

внутривенно внутривенно внутрь

доза.вызыв. уменьшение хронотроп-ного эффекта изадрина на 50% доза.вызыв. уменьшение депрессор-ного эффекта изадрина на 50» доза.вызыв. уменьшение хронотроп-ного эффекта изадрина на 50%

крысы] кошки

SIgQ (мг/кг). рА2 часы

1 а а ч « « 7 3

I 0,07 0,10 2,0 20

2 0,17 0,20 60

3 0,01 0,006 0,25 11,04 24-48 24-48 45

4 0,002 0,006 0.17 10,60 <24 23

5 0,40 0,17 45 ЗУ

6 1,20 1,00

7 0,15 ' 0,18 29

8 0,70 0,30 20

9 1,25 0,80 I.I • 24 37

10 1,10 1,00 0,3 <24 21

II 0,07 0,05 0.5 <24 35

12 0,30" 4,60 1,7 6,30 24-48 24-43 96

13 >2,00 >2,00 2,7 <24 64 '

14 10,0 >24 170

15. 3,5 24 105

16 35,0 <24 68

17 0,24 1,90 0,8 24-48 144-168 40

13 0,60 1,70 0,8 5,50 24-48 144-168 65

з. ! а 3 ч * 3 7 в

! 50,0 35

20 | 4,0 34

21 | >2,СО >2,00 3,2 24 390

22 | >2,00 >2,00 7.5 24 48

23 | >2,00 >2,00 0,6 24 40

24 >2,00 >2,00 10,0 <24 37

>2,00 >2,00 2,0 <24 25

Нин-додол 0,025 0,02 0.05 8,7 8-15 24-48 20

Бонин-дслол 0,24 0,10 0,8 24 24-48 14

Ате-нолол 0,30 2,СГ 100,0 24 <24 147,

группой (соединения $ 10 к II).

По сравнению с пиндолслом и соединениями й 3 к 4 (с незамещенной боковой цэпыо) соединения, содержащие у азота незамеченный бензильнкй заместитель вместо свободного водорода (соединения № 9 и 12), а такке пара-фтор- .(соединения Л 15; 17), пара-нитро- (соединения & 14;18), тара-метоься- (соединения $ 13;25), пвра-карбокси натриевую соль (соединение Л 21), пара- . карбэтокси- (соединение Л 22), пара-хлор- (соединение й 23) и пара-метил- (соединение Я 24) бензольные производные менее активны как при внутривенном, так и при пероральном введении. Аналогичные результаты получены при удлинении цепочки между атомом азота и фенильной группировкой (соединение * 20), а также при замене индольного цикла на феннльный (соединение * 19).

Соединение * 3 отличается большой длительностью действия. При пероральном введении крысам в дозах 1-5 мг/кг оно эффективно в течение 24-48 часов. Несмотря на то, что соединения Я 10 к II являются структурными аналогами Сопиндолола, они, в отличие от последнего, не оказывают длительного (3-адреноблокирую-

оего доЗствяя (не взквняв* гфБвкта »задрана чэроз 24 часа после парорального введения е дозо 10 ыг/кг).

Несмотря на невысокую р-адреноблокнруидую активность, соединения Я 14;15;21;22 и 23, в отличие'от бензоилышх эфиров и пиндолола и подобно соединению А 3, шзывают блокаду р1-адреноре цепторо в сердца у крыс в течение 24 часов, а соединения й 12; 17 и 18 действуют в течение 48 часов.

В связи с том, что соединения й 3;12;17 и 18 оказывают длительное (от 24 до 48 часов) р-адреноблскируадэв действие у крыс, возникла необходимость проверять пх по данному тесту на другом виде зшвотинх.

Оказалось, что в опытах на бодрствующих кошках изученные соединения существенно различаются меэду собой по длительности действия при введешь в желудок в дозах, вызывающих через 2 часа полную блокаду р^-адренорецаггторов сердца. Наибольшая длительность действия обнаружена у соединений # 17 и 13 (пара-фтор- и пара-нитробензильные производные скатола). Оба соединения в дозе 10 кг/кг полностью блокируют эффекты изадрина в течение 24-72 часов. Восстановление эффектов изадрина (частичное или полное) отмечено не ранее чем через 144-168 часов после введения препаратов. В аналогичных условиях длительность действия соединений № 3 (I шн 5 мг/кг, с незамещенной боковой цепью), Л 12 (10 мг/кг, незамещенное бензоильное-производное скатола), бопиндололэ с10 мг/кг) и пиндолола (I мг/кг) составляет 24-48 часов (максимальная блокада эффектов изадрина в течение 2-6 часов) и атенолола (50 мг/кг) - менее 24 часов.

Изученные соединения существенно различаются мевду собой по величине Д%0. Большинство соединений, оказывапцих длительное р-адреноблокирухщеэ действие (Л 12,17 и 13), менее токсичны (в 2-5 раз), чем шндолол и бопиндолол при внутривенном я пер-оральноы введении.

Таким образом, в ряду производных 4-(2-окси-3-алкиламшю-пропохси)индола обнаружены соединения, не уступающие пиндололу и богшндололу по р-адрвноблокируодей активности (метиловый афир 4-оксишдолил-З-уксусной кислоты : 4-оксискатола, соединения * 3 и 4) и вместе с тем превосходящие их по длительности действия (пара-фтор- и пвра-нитробензильные производные скатола, соединения Л 17 в 18). Соединение * 18, отличающееся от других р-ад-реноолокаторов большей длительностью действия (и от соединения .' 17 более простым и доступным синтезом), было отобрано для углубленного фармакологического изучения.

Проведенные исследования показали, что у наркотизированных кошек, как и у крыс, по р-адреноблокирующей активности при . внутривенном введении соединение й 18 уступает пиндололу и бо-шшдололу, хотя при пероральном введении оно не отличается по силе действия от последнего.

На очищенных сарколеммах миокарда кроликов соединение * 18 и бошвдолол только в концентрации свыше ЗМСГ6!! способны вытеснять меченый тритием дигидроальпренолол, тогда как пиндолол проявляет ингибируюцую активность начиная с концентрации 1«10-%. Константы ингибирования соединения * 18, бошшдолола и пиндоло-ла составляют соответственно 6 мкМ; 2,5 ыкМ и 1,9 нМ. Таким образом, по ингиОирукщему действию (по эффективности вытеснения связанного лиганда с сарколеммы миокарда кроликов) соединение * 18 существенно уступает шндололу и мало чем отличается от бопиндолола.

У собак соединение Л 18 в дозе 10 мг/кг пероральЕО вызывает полную блокаду эффектов изадрина в течение 120 часов, частичное (на 10%) восстановление которых наблюдается на 6 сутки после' однократного введения. Б аналогичных условиях пиндолол (I мг/кг) вызывает блокаду реакций на изадрин в течение 8 часов, а через 12 часов эффекты последнего восстанавливаются до исходного

!

уровня. Таким образом, у собак, также как у крыс и кошек, соединение Л 18 вызывает пролонгированную блокаду р-эдренорецэп-гороз сердца, превосходя по длительности действия пиндолол, бопиндолол и атенолол.

В опытах на гомогенизированных желудочках сердца морских свикок, которым за 2 часа до исследования вводили соединение А 18 и бопиндолол в дозе 10 мг/кг перорельно, наблюдается снижение количества р-адренорецепторов с 48 фмолэй на I мг белка мембран кардиомиоцитов в контроле до 23 и 25 фмолей соответ-ствсшю. Кд для лиганда не изменяются под влиянием обоих препаратов и составляют 1,65 нМ, о чем свидетельствует параллельный ход кривых, на графике Скетчарда. Из этих данных можно заклочить, что вызываемая соединением а 18 инактивация (5-адреноре-цепторов носит неравновесный характер.

На изолированных спонтанно сокрвщавдгосся предсердиях морских свинок изучали изменение хронотропного эффекта«изадрлна в

_0 А

кумулятивных концентрациях (1»Ю -Г» 10 М) в контроле и под влиянием препаратов. Об обратимом характере антагонизма судили по параллельному сдвигу кумулятивной кривой без депрессии максимума. Установлено, что после введения соединения $ 18 и бо-пиндолола, в отличие от пиндолола, происходит непараллельный сдвиг вправо кумулятивных кривых концентрация-эффект изадрина с уменьшением максимального эффекта'последнего. Таким образом, соединение Д 18, подобно бопиндололу и в отличие от пиндолола, не проявляет свойства классического обратимого антагониста р-адре-норецепторов и, вероятно, является медленно диссоциирующим р-адреноблокатсром.

Соединение Л 18 обладает слабым неспецифическим мембрано-стабилизирущим действием и высокой частичной агонистической активностью по сравнению с пиндололом и бопиндололом.

Соединение #18 (10 мг/кг, внутрибршинно), подобн пиндо-

- ¡Й -

лу (I иг/кг, шу трибрясинно), вызывает кратковременное снижение артериального давления у крнс при реноваскулярной гшгертензии.

С помощью метода меченых микросфер было проведено сравнительное изучение влияния соединения Л 18 и пиндолола в дозах, вызыващих полную блокаду р-адренорецепторов (2 и 0,1 мг/кг в/в соответственно), на сердечный выброс и его распределение иезду различными сосудистыми областями нормотензивных наркотизирован- а крыс. Соединение * 18 вызывает снижение артериального давления в результате уменьшения общего периферического сопротивления. Несмотря на некоторое замедление сердечного ритма, наблюдается повышение сердечного выброса за счет увеличения ударного объема. Аналогичные изменения системной гемодинамики наблюдаются при введении пиндолола. Установлено, что соединение & 13 расширяет сосуды скелетных мышц, печени, сердоа и почек и повышает тонус сосудов кожи. При атом наблюдается достоверное увеличение кровотока в скелетных мышцах и почках. Несмотря на увеличение сердечного выброса, кожный кровоток уменьшается. В аналогичных условиях пиндолол расширяет сосуды печени, сердца и надпочечников и несколько увеличивает тонус сосудов кожи и легких. Кровоток в коже и легких снижается, а в печэни увеличивается.

Таким образом, соединение * 18 в полной р-адреноблоки-рупцей дозе сходно с пиндолслом по влиянию на параметры системной гемодинамики, но несколько отличается по влиянию на регионарную. Если к соединению * 18 наиболее чувствительны сосуда скелетных шшц, печени, сердца и почек, то к шшдололу - печени, сердца и надпочечников.

Как анти&ритмическое средство соединение * 18, подобно пиндололу, неэффективно.

В "острых" опытах на белых мьшах соединение £ 18 при внутривенном и пвроральном введении менее токсично, чем пиндолол и

Сстидолол.

Данные фармакологического исследования дают основание считать, что соединение % 18 является но elm эф^октаЕттм (З-адрено-блокирукгцкм средством длительного действия, которое может представлять интерес для дальнейшего доклинического изучения.

В продолжение работ по поиску p-адреноблокзторов в ряду производных 4-оксюшдолкл-3-уксусной кислота исследован аналог соединения B'S Л575С, содержащий кзрбоксамидо-пентил-БЬ-алзнил-L-пролиновыЯ остаток в 3-м, а не во 2-м положении шдолыгаго цтола и чрет.бутилышй, а не изопрогшъный остаток у азота боковой цепи (соединение й 26).

Соединение Л 2S при внутривенном введении наркотизированным крысам обладает умеренной р-ареноблокируицей активностью. По сило действия оно уступает пшдэлолу на 2 порядка и бошшдо-лолу на I порядок, по сопоставило по активности с соединением BW A575G (Allan et ai.,1986). В то же время соединение й 26 оказалось высокоактивным ингибитором ангиотензин превращающего Форманта. По влиянию на првссортЗ эффект ангиотонзина-I у крыс соединение Л 26 превосходит каптоирил в 10 раз. Сопоставление эффективных доз показывает, что это вещество является более активным ингибитором ангиотензин превращающего'фермента, чем 3-адреноблокатором.

Таким образом,' введение карбоксамлдо-лентил-БЬ^алгнил-Ь-пролинового остатка.в положение 3 индольного цикла приводит х получению соединения, у которого высокая йнгио'ирунцзя активность в отношении ангиотензин превращающего фермента сочетается с умеренным р-адреноблокирущлм действием. Сочетание этих вгдов фармакологической активности может быть потенциальным преимуществом соединения 16 26 по сравнении с известными р-адренобло-катораки при его использовании в качестве антигипертенэир?'ого средства. Это соединение было отобрано для гдубленного чз^ения.

Проведенные исследования показали, что у наркотизированных кошек, как и у крыс, по p-адреноблокирущей активности соединение & 2S сопоставимо с соединением B'fl А575С (Allan et al., 1986), хотя значительно уступает гттдололу.

У наркотизированных кошек, такзкэ как и у крыс, соединение & 26 проявляет высокую антагонистическую активность в отношении ангаотонзина-1. ЭД50 соединения J 26 составляет 5 мкг/кг, в то врем как каптоприл в дезах до I ыг/кг не оказывал эффекта.

По влиянию на скорость гидролиза ангкотензин превращающего фермента (субстрата Z-Phe-His-Leu в His-Leu-) в условиях In vitro ннгкбирущая активность соединения JS 26 близка к таковой для каптоприла (константы ннгибированля составляют соответственна 5*10 и 2*10 М). У крыс соединение а 26 в дозе 1 мг/кг внутривенно ингибирует активность ангиотензик превращающего фермента в сиворогко крови и легких. Наблюдается также тенденция к ингибировашш фермента в почках и сердце.

В опытах на бодрствующих спонтанно гипертензивных крысах соединение JS 26, начиная с дозы 10 мкг/кг в/в, оказывает зависимое от доза антигипертензивноэ действие, превосходя -по активности каптоприл в среднем в 2 раза (максимальное снижение артериального давления после внутривенного введения соединения Ji 26 в дозах 10; 100 и 1000 мкг/кг составляет в среднем соответственно 7; 12 и 17% по сравнению с таковым для каптоприла - 4; 6 и 9%).

Соединение Л 26 отличается от каптоприла по влиянию как на системную, так и на регионарную гемодинамику нормотензивных крыс (данные мжросферного метода). Если гипотензивный эффект соединений л 26 определяется ставшем сердечного выброса, то аналогичный эффект каптоприла является следствием снижения общего периферического сопротивления (сердечный выброс увеличивается). Кроме этого, соединение Л 2S, в отличие от каптоприла, вызыззет уменьшение частоты сердечных сокращений. Несмотря на то, что как

соединение ,1 26, так и каптоприл, оказывает сосудорасетряпцее действие, этот вффзкт проявляется в отношении разных перлфзри-•ческих сосудистых областей. К соединению Я 26 (в дозе, вызыза-хцей полую блокаду прессорного оффокга ЕНГиотеизгша-1 ) наиболее чувствительны сосуда головного мозга, тонкого кивечника, печени, сердца, почек п надпочечников, к каптоприлу - сосуды поджелудочной железы, тонкого кишечника, печени и сердца. При использовании полной р-адреноблокирующей дозы соединения Я 26 сосудорасаиряпплй эффект проявляется только в отношении сосудов почек.

Данные фармакологического изучения дают основание считать, что соединение Д 26 является новым высокоактивным ингибитор-м ангиотензин превращающего фермента, оказывающим одновременно умеренное р-адреноблокирукдое и шрягоннов антигипертензивное и сосудорасширяющее действие.

Исходя из опыта работы з ЦХЛС-ВНИХСИ по поиску ж создании "гибридных" ф-,а~) адреко^локаторов среди азольных производных феноксипропаноланича, а тэкке на основании близости стереохими-чэских параметров изоксазола и тиофена, в настоящей работе проводили поиск "гибридных" соединений, сочетающих р-адреноблоки-рущую и диуретическую активность среди производных 4-(изокса-золикарбамоил 5ф8ноксшроп8ноламта.

Сведения о р-адреноблокирупцей, диуретической и салуретиче-сксй активности, а гаклэ острой токсичности производных 4(изо-ксазолилкарбамоил)фенсксипропаноламина приведены в таблице й 4.

Проверенные исследования показал!, что у крыс при пер-орэльном введении в дозе 60 мг/кг из всех изучешшх производных но не р2-8дреноблокирумцую активность проявляют соединения, у которых карбамоильная группа связана с положением 3 пли 5 изоксвзольного кольца, и без заместителей в бензильном

Таблица Х- 4

Результата салур§1Ш§ской_актшшос

* л соедагешй Рт-Лдренобло-кирующая активность в ДОЗЭ 60 ЫГ/КГ, внутрь (5 блокады хронотропной реакции на изадрин) Диуретическая и салурети-ческая активность (за 18 пасов в дозо 60 мг/кг, внутрь) Що мыши (МГ/К1

диурез экскреция экскреция К+ (изменения в % к контроле) Б/Е)

27 41 , +12 + 13 . +44* 135

28 57 +17 +47* +62* 130

29 75 +40* +147** +40* 190

30 88 +45* +162** +78* 142

31 35 0 0 0 172

32 0 0 0 0 136

33 0 0 0 • 0 127

34 0 0 0 0 . 138

35 0 + 15 +28* +4 58

35 0 +34* +48* +62* 14

Гидрохлортиа вид +46* +181** +125**

Атенолол 42 0 0 0 147

Пропранолол 64 >13 +20 +2 28

* - р<0,05; ** - р<0,02 (п=6)

цикле. При этом, если 5-кзтилкзоксазолил-З-карбамоильные производные (соедкнбштя Л 27 и 28) по силе действия не уступают атейололу, то З-метилизоксазолил-5-карбамокльныа производные (соединения № 29 и 30) превосходят как атеяолэл, так и пропра-нолсл.

5-Метилизоксазо.тал-4-карбамоильные производные, содерхазщо в 3 положении кзоксазолила фенилъную или 2,6-дихлорфенильную

груши (соединения Л 31-34), а такгге З-метнлизснсазолзл-б-кар--бамоальные производные, содержащие во втором полсгзпии бензойного кольца карбэтокси грушу (соединения й 35 и 36), не проявляют р-адреноблокирувдей активности, а в отдельных опытах вызывают даже усиление положительного хропотропного эффекта изад-рйна.

р-Адреноблокирущее действие наиболее активного соединения (Л 30) было Изучено также на наркотизированных кожах,При внутривенном введении это соединение уступает по Р-^адреноблокирунцей активности пропранслолу и атенололу, но превосходит лабеталол (?Д50 в отношении блокады хронотролного эффекта изадрина - со= ответственно 0,53; 0,007 ; 0,13 и 1,10 мг/кг). По р2-адреноб»юки-рувдей активности (блокада депроссорнсго эффекта изадрина) оно уступает всем препаратам сравнения.

Значительный интерес представляет обнаружение у некоторых соединений, а именно у метилизоксаэолил-З и 5-карбамояльных производных фенсксипропаноламина (соединения № 27-30, 35, 36), способности проявлять одновременно с р1-адреноблокируодей активностью диуретическое и салуретическое действие. Наиболее выраженная диуретическая активность обнаружена у 3-метилизокса-золил-5-карбамоильннх производных (соединения # 29 и 30). Эти соединения не' отличаются по диуретическому и натркй-уротическому эффектам от гйдрохлортиазвда. Вместе с тем, они'несколько меньше способствуют выведению ионов калия.

Введение в положение 2 бензольного цикла карбэтокси группы (соединения № 35 и 36) приводит к снижению диуретической и сал-уретической активности.

У соединений * 31-34 (4-карбамоильных производных, не проявляющих р-адреноблокнрующего действия) диуретическая активность не обнаружена.

Острая токсичность соединений Л 27-34 мало отличается от

таковой для атенолола, а соединений * 35-35 - от пропранолола.

Таким образом, в ряду производных 4-(изоксазолилкарбамоил) феноксипропаноламина обнаружены соединения, сочетающие избирательные р^-адреноблокирувдие и диуретические свойства в одной молекуле. Наиболее активное по обоим видам актишости соединение Л 30 при гороральном введении по ^-адреноблокирущей активности превосходит атешлол и по диуретическому и салурети-ческому действию не уступает гидрохлортиазиду. При этом оно называет менее выраженное налий-уретическое действие. Представляется целесообразным продолжение поиска р-адреноблокаторов с диуретической активностью в ряду этих производных с различной длиной углеводородной цепи мекду изоксазольной и арильной час-тяш молекулы, а также содержащих вместо изоксазола другие азольные гетеро циклы.

ВЫВОДЫ

1. На основании анализа современных данных о связи мекду химическим строением и действием р-адреноблокаторов был предпринят поиск новых "гибридных" и длительнодействуювщх р-адреноблокаторов среди производных 4-(2-окси-3-алкиламинопропокси)ин-дола и 4-(изоксазолилнарба\;оил)феноксипропано-1амина.

2. Впервые изучены фармакологические свойства 26 производных . 4-(2-окси-З-алкилаиинопропокси)индола и 10 производных 4-(изо-ксазолилкарбамоил)феноксипропаноламина.

' 3. При первичном фармакологическом изучении производных 4-(2-окси-3-алкиламинопропокси)индола найдены" соединения, обладающие длительным р-адреноблокируишим действием. Наиболее длительно-действундим соединением этого ряда является гндрохлорид 4-(2-ок-си-3-трет.бут,ил-3-/4-нигроОензил/аминопропокси)скатола (соединение * 18).

4. Углубленное изучение соединения * 18 показало, что оно является р-адреноблокатором пролонгированного действия, превосхо- ■

дадим другие известные р-адрелоблокаторк длительного действия (боглпдолол к атенолол); по механизму действия соединение А 18, подобно бопиндололу и в отличие от пиндолола, является, по-видимому, медленно диссоциирующим соединением; подобно пиндололу, оно обладает кратковременным антигипертвнзивннм и избирательным сосудорасширяющим действием.

5. Дигидрохлорид Н-1-{3~харбокси-5-/4-(трет.бутиламино-2-гид-роксипропокси)-индолил-3-карбоксамидо/-п8нтил)-вь-ала1шл-ь-про-лина (соединение Я 26) наряду с р-адреноблокирующими свойствами обладает способностью ингибировать ангиотензин превращающий фермент. Это соединение оказывает острое антигипэртензивное и сосудорасширяющее действие.

■6. В ряду производных 4-(изоксазолилкарбамоил)феноксипропа-ноламинз обнаружены соединения, сочетающие р^-адреноблокирующие и диуретические свойства. Наиболее активное по обоим видам активности соединение * 30 (1-/4-(3-метилизоксазолил-5-карбо-нипамино)фенокси/-3-трет.бутиламтаопропанол-2 гидрохлорид) при пероральном введении по р^-адреноблокирущей активности превосходит .атенолол и по диуретическому и салуретическому действию не уступает гидрохлортиазиду.

7. Наиболее активные из исследованию: соединений (Я 18, 26 и 30) могут представлять практический интерес как эффективные р-адре-ноблокаторы с новыми особенностями, фармакологического действия и быть рекомендованы для доклинического и клинического изучения.

СПИСОК РАБОТ. ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТМЕ ДИССЕРТАЦИИ I. Авторское свидетельство Я 1299101 с приоритетом от 21.08. 85 г. "Гидрохлорида производных 4-(2-окси-3-трет.бутиламинопроп-окси)ицдола, обладающие р-адреноблокируюдей активностью, и производные 4-(2,3-эпоксипропокси)индола в качестве полупродуктов для синтеза гидрохлоридов производных 4-(2-окси-3-трет.6угил-

ампнопропокси)индола, обладающие ß-адреноблокпруюеей активностью".- Бшл. изобретений, 1993, * 43-44, с.184 (совместно с Р.Г.Глушковым, М.Д.Мажовским, Г.К.Скрябиным, Н.Н.Суворовым, А.Г.Козловским, Л.X.Виноградом, С Д.Скоковым, М.У.Аринбасаровым, Ю.Н.Мошковэт, К.А.Кощеенко).

2. Авторское свидетельство J6 1552595 с приоритетом от 03.06. 1988 г. "Производные аминооксипрояоксшвдола, обладающие длительным ß-адреноблокирупцгач действием".- Билл. изобретений, 1991,

17, с.278 (совместно с Р.Г.Глушковым, М.Д.Машковскш, Г.К.Скрябиным, Н.Н.Суворовым, А.Г.Козловским, Л.X.Виноградом, С.Д.Юкако-вым, Л.В.Розэнштраухом, 0.С.Медведевым, Е.П.Анюховским, М.У.Аринбасаровым, С.Н.Трибунской, В.А.Ежовым, В.И.Метелицей, В.К.Пиотровским, В.А.Ткачуком, Г.Н.Балденковым).

3. Бета-адреноблокаторы длительного действия в ряду производных 4-оксиикдола.- Тезисы доклада на 2 Всесоюзной конференции по химии, биохимии и фармаколопш производных индола (г. Тбилиси), 1991, с.170 (совместно с Л.Х.Виноградом, С.Д.Пжаковнм, D.H. Трибунской, М.У.Аринбасаровым).

4. Поиск ß-адреноблокаторов среди амшюоксипропильных производных 4-оксииндолилуксусной. кислоты, и 4-оксискатола. -Хим. -фарм.курн. ,1992, J6 6, с.18-21 (совместно с Р.Г.Глушковым, М.Д. Машковским, Г.R.Скрябиным, Н.Н.Суворовым, А.Г.Козловским, Л.Х. Виноградом, С.Д.Юкаковш«, М.У.Аринбасаровым, Ю.К. Трибунской, К.А.Кошеенко, Т.Я.Филипенко)..

5. Поиск ß-адреноблокаторов длительного действия в ряду производных 4-оксииндола.-Хим,-фарм.журн.,1993, И 8, с.8-13 (совместно с Р.Г.Глушковым, М.Д.Машковским, H.H.Суворовым, А.Г.Козловским, Л.Х.Виноградом, С.Д.таковым, М.У.Аринбасаровым, Ю.К. Трибунской, Ь.А.Ежовым, Г.Н.Балденковым, Т.Я.Филипенко).

6. Дигкдрохлорид 1-[4-(2-гидрокси-3-трет-буталаминопрополСИ) -индол-3-ил (5 -ацетамидо-1 - (S )-карбоксипентил) -DL-аланил J -L-

пролпна - нсенй ингибитор ангиотензинпревращащзго фермента с ß-адренобдокирущши свойства?,я.-Хим.-фарм.курн.,1993, J6 10, с.16-20 (совместно с М.Д.Машковским, Л.X.Виноградом, С.Д.Юка-ковым, Н.А.Крит, М.П.Филатсзой, Е.А.Духаниной, С.Ф.Дуганым, D.H.Трибунской).