Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Патогенетические факторы бесплодия в браке как артерии прогноза эффективности вспомогательных репродуктивных технологий
- Ученая степень
- доктора медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.16
Автореферат диссертации по медицине на тему Патогенетические факторы бесплодия в браке как артерии прогноза эффективности вспомогательных репродуктивных технологий
На правах рукописи
АЙЗИКОВИЧ Борис Исаевич
ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ БЕСПЛОДИЯ В БРАКЕ
КАК КРИТЕРИИ ПРОГНОЗА ЭФФЕКТИВНОСТИ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ РЕПРОДУКТИВНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ
14.00.16 — патологическая физиология 14.00.01 - акушерство и гинекология
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук
Омск 2008
003454590
Работа выполнена в ГОУ ВПО Новосибирский государственный университет и ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН.
Научный консультант: академик РАМН, профессор
Козлов Владимир Александрович
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Долгих Владимир Терентьевич (Омская государственная медицинская академия)
доктор медицинских наук, профессор Антонов Александр Рудольфович (Новосибирский государственный медицинский университет) доктор медицинских наук, профессор На-заренко Татьяна Алексеевна (ФГУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им.В.И.Кулакова) Ведущая организация: ГОУ ВПО Сибирский государственный
медицинский университет, г.Томск
Защита диссертации состоится 2008 г. в_часов на
заседании диссертационного совета /Г208. 0&5.04 при ГОУ ВПО Омской государственной медицинской академии Росздрава по адресу: 644043, г. Омск, ул. Ленина, 12; тел.: (3812) 23-32-89.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Омской государственной медицинской академии по адресу. 644043, Омск, ул. Ленина 12.
Автореферат диссертации разослан « » 2008 г.
Ученый секретарь диссертационного совета, д.м.н., профессор
Е.А. Потрохова
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Проблема бесплодия супружеских пар приобретает сегодня не только медицинское, но и огромное социально-демографическое и экономическое значение (Заславская B.C., 2001; Под-золкова Н.М, 2003; Кулаков В.И., 2006). По данным ВОЗ около 100 млн. супружеских пар бесплодны и их число с каждым годом увеличивается. Частота бесплодных браков среди супругов репродуктивного возраста колеблется от 12 до 30,0% (Овсянникова Т.В., 1998; Филиппов О.С., 1999; Tempelton A.A., 1999). Причиной бесплодного брака в 40-50% случаях является патология репродуктивной системы у одного из супругов, реже - в 25-30,0% у обоих (Селезнева И.Ю., 1999; Фролова О.Г., 2004). Поэтому значимость проблемы инфертильности определяется необходимостью решения вопросов, связанных с совершенствованием методов диагностики, повышением эффективности лечения и профилактики бесплодия.
Современная диагностическая и лечебная помощь при бесплодии основывается на основополагающих достижениях в области репродукции, к которым относятся расшифровка механизмов гормональной регуляции репродуктивного процесса (Сидорова И.С., 2004; Серов В.Н., 2005), ультрасонографическое сканирование (Хачкурузов С.Г.. 1999; Смирнова A.A., 2003), эндоскопическая хирургия (Гаспаров A.C., 2001), а так же экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) и перенос эмбриона (Кулаков В.И., 1999; Edwards R.G., 1995). В результате этого открылись новые перспективы при изучении механизмов оплодотворения и имплантации. Тем не менее, в 8-10% случаев установить причину бесплодия не представляется возможным (Курило Л.Ф., 2000; Савельева, Г.М., 2004), что связано с огромным числом разнообразных факторов, влияющих на репродуктивный процесс (Кулаков В.И., 2006). Так обстоит дело, с заболеваниями, передающимися половым путем, при которых инфекционный агент определяется у обоих половых партнеров. Подобные проблемы значительно быстрее могут быть решены в программах вспомогательной репродукции (ВРТ), когда оценке подвергаются именно те гаметы, которые в данный момент участвуют в процессе оплодотворения и есть возможность оценить состоятельность ранних этапов дробления зиготы и отсеять неполноценные гаметы и порочные эмбрионы. Однако и в этом случае эффективность оценки результатов определяется разрешающей способностью методов оценки качества гамет, включаемых в программу оплодотворения, точно так же, как и состояния образующейся зиготы (Светлаков A.B. и др., 2002; Тишкевич О.Л. и др., 2004).
Известно, что функционирование репродуктивной системы, как у мужчин, так и женщин осуществляется при тесном взаимодействии с иммунной и эндокринной системами (Древаль A.B., 2001). Но при этом роль
иммунной регуляции ряда этапов репродуктивного процесса (сперматогенеза, фолликулогенеза, овуляции, имплантации) у человека остаются еще мало изученной. На сегодняшний день наиболее исследованными являются иммунологические аспекты, связанные физиологическим протеканием беременности и включающие изучение .механизмов иммунологической перестройки, направленной на подавление реактивности иммунной системы матери по отношению к аплоантигенам плода. Вместе с вопросы участия иммунной системы в регуляции ранних этапов репродуктивного процесса - фолликулогенеза, овуляции, доимплантационных этапов развития эмбриона и его имплантации требуют своего дальнейшего изучения (Виси1шег О., Ала А., 2000; Згекегеэ-ВаЛЬо I., 2002). Учитывая тесную взаимосвязь иммунной и репродуктивной системы, становится очевидным, что наличие исходных иммунных дисфункций, а также развитие их в процессе стимуляции гиперовуляции может быть серьезной причиной низкого качества ооцитов, дефекта оплодотворения яйцеклетки, нарушения развития и имплантации эмбриона, и, в конечном итоге, невынашивания беременности (БрегоАХ. е1 а1., 1999). Поэтому большой интерес представляет исследование показателей системного и локального иммунитета, а также овариальной функции в группах женщин, оппозитных по уровню фертиль-ности, качеству эмбрионов, имплантации и клинической беременности. Исследования такого рода имеют большое теоретическое и практическое значение, поскольку позволяют осмыслить новые аспекты иммуноэндок-ринной регуляции ранних этапов репродуктивного процесса и патогенеза бесплодия, а, также разработать прогностические критерии эффективности использования вспомогательных репродуктивных технологий.
Цель исследования: выявить иммунологические и эндокринные особенности нарушения фертильной функции у мужчин и женщин, состоящих длительное время в бесплодном браке, и провести анализ значимости изменений иммунного и цитокинового статуса как критериев эффективности программы вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
Задачи исследования:
1. Исследовать особенности гормонального статуса и состояния микробиоценоза урогенитального тракта у мужчин и женщин из бесплодных супружеских пар, включенных в программу вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
2. Провести спермиологическое исследование с оценкой количества сперматозоидов, их двигательной способности и морфологических особенностей у мужчин, состоящих длительное время в бесплодном браке.
3. Изучить содержание цитокинов в спермальной плазме при нор-моспермии и патоспермии у мужчин, состоявших длительное время в бесплодном браке и провести сравнительную оценку изменения характера цитокинового баланса в зависимости от степени лейкоцитоспермии.
4. Выявить закономерности взаимоотношений между морфологическими, функциональными характеристиками сперматозоидов и цито-кинами спермальной плазмы у мужчин, состоявших длительное время в бесплодном браке.
5. Изучить особенности иммунного статуса женщин на этапах овариального цикла при его физиологическом течении и в условиях проведения контролируемой гиперстимуляции по программе вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
6. Провести анализ содержания цитокинов в фолликулярной жидкости на пике стимулированной суперовуляции и на этой основе оценить роль цитокинов в процессе созревания ооцитов.
7. Провести сравнительный анализ параметров иммунного и цито-кинового статуса женщин в зависимости от эффективности вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО) и проанализировать информативность и прогностическую значимость показателей иммунитета и овариальной функции в оценке эффективности лечения бесплодия с помощью вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
Научная новизна. Показано, что важным патогенетическим звеном нарушения фертильной функции у мужчин и женщин, состоявших длительное время в бесплодном браке, является нарушение иммунных цитокин-опосредованных и клеточно-опосредованных механизмов регуляции репродуктивного процесса.
Впервые обнаружено, что нарушение локальной продукции цитокинов у мужчин из супружеских пар с бесплодием может негативно сказываться на подвижности и морфологии сперматозоидов и, как следствие, приводить к снижению их фертилизационного потенциала в условиях латентного воспалительного процесса в мужском репродуктивном тракте и эндокринной дисрегуляции сперматогенеза. Установлено, что при патоспермии в семенной плазме мужчин наблюдается повышенный уровень ТЫ/провоспалительных цитокинов (ШЫ-у, ТЫР-а, 1Ь-1|3,1Ь-12) в сочетании с ростом хемокинов (1Ь-8, МСР-1, М1Р-1Р) и дефицитом 1Ь-7.
Впервые показано, что в патогенезе бесплодия имеет значение системный эндокринно-иммунный дисбаланс.
Впервые установлено, что на пике стимулированной суперовуляции происходит изменение баланса регуляторных факторов в сторону доминирования медиаторов с иммуносупрессорной, противовоспалительной и проапоптогенной активностью. Сдвиг баланса регистрируется как на системном (в крови), так и на местном (в фолликулярной жидкости) уровне и сочетается с увеличением доли циркулирующих регуляторных СБ4+СВ25+ Т-лимфоцитов, что свидетельствуют о супрессорной реорганизации цитокин-опосредованных и клеточно-опосредованных иммунорегуляторных механизмов фолликулогенеза.
Впервые дана характеристика цитокинового профиля микроокружения фолликула у женщин с бесплодием при проведении контролируемой суперстимуляции яичников по программе вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО). Установлено, что усиление противовоспалительного и иммуносупрессорного потенциала фолликулярных факторов ассоциируется со снижением уровня IL-8 и IFN-y, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, G-CSF цитокинов.
Впервые показано, что у женщин с бесплодием в условиях фолликулярного многокомпонентного дефицита Thl/провоспалительных, ТЬ2/противоспалительных цитокинов, ростовых факторов и хемокинов нарушаются как количественные, так и качественные характеристики ооцитов, и как следствие - эффективность оплодотворения в культуре in vitro при проведении вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО). Баланс и уровень цитокинов в микроокружении фолликула не только определяет количество и качество созревающих ооцитов, но также имеют большое значение для имплантации оплодотворенных яйцеклеток.
Теоретическая и практическая значимость. В результате выполнения работы получены новые данные, позволяющие расширить существующие научные представления о роли иммунного и цитокинового статуса в регуляции фертильной функции мужчин и женщин, а также раскрыть иммунопатологические механизмы формирования бесплодного брака.
Комплексное исследование цитокинового спектра семенной и фолликулярной жидкости могут позволить выявить минимальные, «неочевидные» нарушения, которые в изолированном виде не являются определяющими для развития мужского или женского бесплодия, но становятся патогенетически значимыми, когда одновременно присутствуют у супругов, состоящих в бесплодном браке.
Комплексная оценка параметров иммунного и цитокинового статуса у женщин с бесплодием, обследованных на пике стимулированной суперовуляции, может использоваться в качестве ранних прогностических маркеров эффективности программы вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
Разработана методологическая основа для выделения диагностического комплекса признаков, прогнозирующего вероятность неэффективного цикла программы вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО), что может послужить дополнительной основой для изменения тактики лечения бесплодия.
Внедрение результатов исследования. Результаты исследований внедрены в практику работы отделения экстракорпорального оплодотворения Медицинского Центра «Авиценна», г. Новосибирск, а также в учебный процесс Новосибирского государственного медицинского университета Росздрава.
Положения, выносимые на защиту: '
1. Наиболее типичными особенностями патогенеза бесплодных пар являются наличие системного эндокринно-иммунного дисбаланса, а также нарушение микробиоциноза урогенитального тракта
2. В патогенезе нарушения сперматогенеза у мужчин из супружеских пар с бесплодием ведущая роль принадлежит изменению цитокино-вого баланса, что проявляется в увеличении содержания Thl/провоспалительных, цитокинов, хемокинов и снижением уровня ТЬ2/противоспалительных цитокинов в семенной плазме
3. В овуляторный период менструального цикла на пике контролируемой суперовуляции по программе экстракорпорального оплодотворения у женщин с бесплодием происходит сдвиг баланса регуляторных факторов на системном и местном уровнях, что проявляется усилением иммуносупрессорной и противовоспалительной активности крови и фолликулярной жидкости.
4. Цитокины, продуцируемые в микроокружении фолликула, принимают активное участие в регуляции процесса созревания ооцитов, определяя не только количественные и качественные характеристики созревающих ооцитов, но также эффективность последующей имплантации оплодотворенных яйцеклеток и развитие беременности у женщин с бесплодием в цикле экстракорпорального оплодотворения.
5. Параметры иммунного и цитокинового статуса, а также показатели овариальной функции женщин, обследованных на этапе стимулированной суперовуляции, могут являться прогностическими критериями результативности экстракорпорального оплодотворения
Апробация работы. Основные положения диссертации были представлены на б-й отчетной сессии Института Клинической иммунологии СО РАМН (Новосибирск, 2003); Всероссийском научном симпозиуме с международным участием «Цитокины. Стволовая клетка. Иммунитет» (Новосибирск, 2005); Российской научно-практической конференции «Новые технологии в репродуктивной медицине» (Новосибирск, 2007); XVII международной конференции РАРЧ «Репродуктивные технологии сегодня и завтра» (Казань, 2007); Симпозиуме «Некоторые аспекты сексуальной дисфункции. Репродуктивная функция больного туберкулезом» (Новосибирск, 2007); Международной научно-практической конференции «Иммунологические аспекты репродукции человека» (Новосибирск, 2008); VII Межрегиональной научно-практической конференции урологов Сибири «Современные вопросы урологии, оперативной нефрологии, андрологии и репродуктивной медицины» (Новосибирск, 2008); Объединенном иммунологическом Форуме (Санкт-Петербург, 2008), Международном конгрессе «Репродуктивное здоровье Урала и Сибири» (Екатеринбург, 2008).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 23 печатные работы, из которых 9 статей в научных журналах, рекомендованных ВАК для публикации материалов диссертационных работ.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 271 странице печатного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав «Материалы и методы исследования», «Результаты собственных исследований», «Обсуждение собственных результатов», выводов, практических рекомендаций и списка цитируемой литературы. Список литературы включает 506 источников, из них 139 отечественных и 367 иностранных. Диссертация иллюстрирована 46 таблицами и 9 рисунками.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В настоящей работе представлены данные обследования 250 мужчин и женщин в возрасте от 24 до 46 лет (35,1 ± 4,3), состоящих в бесплодном браке. Продолжительность бесплодия в браке варьировала от 2 до 16 лет (6,5 ±2,1 лет). В этиопатогенетической структуре бесплодия женский фактор обнаруживался в 30% случаев, мужской - в 10% случаев, тогда как у большинства супружеских пар (60%) диагностировались комбинации сочетанных нарушений репродуктивной функции.
До начала цикла ВРТ (ЭКО) проводилось развернутое обследование партнеров: сбор соматического, акушерско-гинекологического и гидрологического анамнеза, УЗИ-исследование, клинико-лабораторные и биохимические исследования.
В случае выявления какой-либо сопутствующей патологии, в первую очередь урогенитальной инфекции, назначалась соответствующая терапия, которая проводилась в объеме, необходимом для достижения санирующего эффекта.
Все исследования выполнялись в соответствии с Хельсинской декларацией Всемирной ассоциации «Этические принципы научных и медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 года и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г., № 266. Все обследованные лица давали информированное согласие на участии в исследовании.
Лечебные мероприятия проводились в соответствии с нормативными документами, утвержденными Министерством здравоохранения РФ (приказ Министерства здравоохранения и медицинской промышленности Российской Федерации от 28.12.1993 № 301 «О применении метода искусственной инсеминации женщин спермой донора по медицинским показаниям и метода экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона в полость матки для лечения женского бесплодия»; приказ Минздрава РФ от 26.02.2003 «О применении вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) в терапии женского и мужского бесплодия».
Контрольная группа (п=76) была составлена из практически здоровых мужчин и женщин аналогичного возраста, состоящих длительное время в браке и имеющих здоровых детей.
Для анализа содержания гормонов (тестостерона, лютеинизирую-щего гормона (ЛГ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), пролак-тина и эстрадиола) в сыворотке крови использовался метод иммунофер-ментного анализа. Применялись тест-системы ИФА «Bio-Rad Lipocheck». Регистрацию результатов проводили на спектрофотометре Multiskan (МСС-340).
Оценка состояния микробиоценоза урогенитального тракта осуществлялась по результатам культурального исследования микрофлоры и ПЦР-диагностики.
Спермиологическое исследование проводилось в соответствии с рекомендациями ВОЗ (1999).
Иммунологическое исследование включало: культивирование лимфоцитов в планшетах для иммунологических исследований со стимуляцией КонА; определение субпопуляций клеток на лазерном клеточном сортере-анализаторе FACSCalibur (Becton Dickinson, США) с использованием программы CellQuest (Becton Dickinson, США) в соответствии с методикой Becton Dickinson, в модификации Кожевникова (2005); оценку содержания апоптотических клеток (лимфоцитов, моноцитов и нейтро-филов) с помощью метода проточной цитофлуориметрии по окрашиванию пропидиумом иодидом (Ayala А. et al., 1996); оценку содержания в фолликулярной жидкости и семенной плазме цитокинов (IL-lß, TNF-a, IFN-y, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12 (p70), IL-13, IL-17, G-CSF, GM-CSF, MCP-1, MlP-lß) методом проточной флюориметрии на 2-х лучевом лазерном автоматизированном анализаторе Bio-Plex Protein Assay System (Bio-Rad, США) с использованием тест-систем 17-Р1ех.
Иммунологические исследования, осуществлялось совместно с сотрудниками лаборатории клеточной иммунотерапии ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН, г. Новосибирск (руководитель лаборатории доктор медицинских наук, профессор Черных Е.Р.).
Математическая обработка полученных результатов проводилась методами описательной, параметрической и непараметрической статистики (Гланц С., 1999) на персональном компьютере с использованием программы «STATISTICA 5.0». Таблицы и рисунки содержат информацию в виде средних арифметических величин (М) и стандартных ошибок средних (т), медианных значений. Сравнение вариационных рядов осуществлялось с помощью непараметрического U критерия Вилкоксона-Манна-Уитни. Достоверность различия частоты встречаемости признака определяли, используя точный метод Фишера или кси-квадрата (у2). Дос-
товерными считались результаты при уровне значимости р < 0,05. Корреляционный анализ проводился методом ранговой корреляции Спирмана.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В зависимости от поставленных задач исследования выполнялась в несколько этапов. На первом этапе проводилось изучение клинико-лабораторных параметров у супружеских пар, включенных в программу лечения бесплодия с помощью ВРТ (ЭКО).
При оценке функционального состояния репродуктивной системы у мужчин было обнаружено, что только у 30% обследованных показатели числа, морфологии и подвижности сперматозоидов соответствовали установленным нормативным значениям (ВОЗ, 1999), тогда как в 70% случаев обнаруживались различные нарушения сперматогенеза (Табл. 1).
Таблица 1
Показатели спермограммы у пациентов с нормо- и патоспермией (М±т)
Показатели Нормоспер-мия Патоспермия
Объем, мл 4,5 ± 0,2 4,1 ± 0,3
Концентрация спе эматозоидов, млн./мл 128 ± 19 88 ± 9,5
Подвижность сперматозоидов, % нормокинетические гипо / дискинетиче-ские акинетические 55 ± 3,0 21 ±4,0 23 ± 3,0 37 ±2,0** 17 ± 1,5 45 ±2,0**
Морфологически полноценные формы, % 15,2 ±0,7 10,9 ±0,7*
Дегенеративные формы, % патология головки патология шейки патология хвостика 65 ± 2,5 9.6 ± 1,4 9.7 ± 1,2 63,5 ± 1,9 13,3 ± 1,5 11,5 ± 1,0
Количество сперматозоидов, прошедших через градиент плотности, % 57 ±7,8 35 ± 6,0 *
Примечание: * - р<0,05 и ** -р < 0,01 по сравнению с контролем
Так, анализ подвижности сперматозоидов обнаружил значимое снижение нормокинетических и увеличение акинетических форм половых клеток в эякуляте у мужчин с патоспермией по сравнению с аналогичными параметрами в группе мужчин с нормоспермиёй. Кроме этого у них было снижение количества морфологически нормальных клеток эякулята и количества сперматозоидов, прошедших через градиент пло тности.
Проведенная оценка фертилизационного потенциала сперматозоидов по числу оплодотворенных in vitro ооцитов показала, что в экстракорпоральном режиме все исследуемые образцы спермы мужчин, включенных в программу ВРТ (ЭКО) были способны к оплодотворению.
Тем не менее, у мужчин с патоспермией фертилизационная активность сперматозоидов была достоверно ниже, т.к. индекс оплодотворения составил 60% против 87%.
Среди широкого спектра патогенетических причин нарушения структурной целостности и функциональной активности половых гамет ведущее значение отводится гормональным и инфекционным факторам.
При обобщении результатов оценки гормонального статуса (Табл. 2) было выяснено, что уровень гипофизарных гормонов (ЛГ, ФСГ) у мужчин групп контроля и ВРТ не различался, и находился в пределах нормы. Но в тоже время, у пациентов группы ВРТ отмечено достоверное (р < 0,05) повышение уровня пролактина в крови (299 ± 15,5 мМЕ/л) относительно пациентов контрольной группы (219 ± 12,7 мМЕ/л). При этом высокая величина уровня гормона выявлена у 4,5% пациентов с нормос-пермией и у 16% пациентов с патоспермией группы ВРТ.
Таблица 2
Концентрация гормонов в сыворотке крови у практически здоровых мужчин (контроль) и пациентов программы ВРТ (М± т)._
Показатели Контроль Пациенты
ЛГ, МЕ/л 5,2 ± 0,47 6,1 ±1,1
ФСГ, МЕ/л 3,7 ± 0,85 4,5 ± 0,96
Пролактин, мМЕ/л 219 ±12,7 299 ± 15,5*
Тестостерон, нмоль/л 18,8 ±0,55 14,9 ±0,75*
Эстрадиол, пмоль/л 23,1 ±1,19 37,2 ± 0,74*
Примечание: * - р<0,05 и ** -р < 0,01 по сравнению с контролем
Известно, что уровень пролактина четко коррелирует с состоянием гипоталамуса и аденогипофиза (Гладкова А.И., 1998). Учитывая отсутствие признаков патологии гипоталамуса и аденогипофиза у пациентов можно предположить, что повышение концентрации пролактина является возможным проявлением хронического стресса, и его относительно высокий уровень может отражать снижение содержания тестостерона в крови обследуемых лиц.
Действительно, при оценке концентрации тестостерона в крови было обнаружено его уменьшение у мужчин из группы ВРТ по сравнению с лицами из группы контроля (соответственно 14,9 ± 0,75 нмоль/л и 18,8 ± 0,55 нмоль/л, р < 0,05). Причем среди пациентов с патоспермией имеется значительная доля лиц с низкой продукцией тестостерона (61,5%) и с отклонениями в продукции гонадотропинов (39,5%). Однако, отсутствие клинических признаков гипогонадизма у пациентов программы ВРТ, указывает на то, что андрогенная недостаточность у них, по всей вероятности, носит относительный характер на фоне, как правило, сохраненной гонадотропной функции.
При микробиологическом анализе видового состава микрофлоры картина нормоценоза уретры наблюдалась только у 34,4% пациентов, а секрета предстательной железы - лишь у 50,9%, тогда как в группе здоровых лиц эти показатели составили 77,8% и 88,9% соответственно. Данные бактериологического исследования согласуются с результатами клинического обследования пациентов - у 41,5% мужчин с нормоспермией и у 54,5% с патоспермией имеются хронические воспалительные заболевания мочеполовой системы.
Таким образом, анализ состояния репродуктивной системы у мужчин, включенных в программу ВРТ, продемонстрировал отсутствие физиологической нормы в их репродуктивном статусе.
Аналогичные исследования у женщин также выявили целый ряд отклонений (Табл. 2). Так, уровни пролактина в крови у пациенток с бесплодием в фолликулиновую и лютеиновую фазу цикла был достоверно выше по сравнению с параметрами фертильных женщин, хотя и находились в пределах нормы (до 500 МЕ/л). У 32,8% женщин, включенных в программу ВРТ, отмечаются эндокринные нарушения преимущественно в виде гиперпролактинемии.
Анализ гормональной функции яичников показал, что имеются определенные различия в функциональном состоянии репродуктивной системы пациенток и практически здоровых женщин, которые выражаются в достоверном (р < 0,05) снижении концентрации эстрадиола в 1,5 раза в периовуляторный период (475,0 ±7,6 пмоль/л и 710,2 ±10,5 пмоль/л) и в уменьшении продукции прогестерона в лютеиновую фазу цикла (11,9 ± 0,8 нмоль/л и 35,1 ± 1,2 нмоль/л).
Все это является указанием на меньшую стероидогеуную активность яичников у пациенток ЭКО. Но следует отметить, что ритм секреции прогестерона в течение менструального цикла у обследованных пациенток сходен с таковым у фертильных женщин, что указывает на полноценную функцию желтого тела. Вместе с тем можно думать, что более низкая концентрация прогестерона у женщин с бесплодием отражает, видимо, нарушение того оптимального баланса стероидных гормонов, который обеспечивает готовность репродуктивной системы к реализации генеративной функции.
При оценке результатов бактериологического исследования из С-канала у женщин группы ВРТ условно-патогенные микроорганизмы (Escherichia coli, Staphylococcus, Streptococcus, Candida albicans и т.д.) обнаружены в 87,3% случаев. При анализе частоты встречаемости ИППП, отмечено, что они выявлены у 3,5% женщин, включенных в программу ВРТ.
Таким образом, предварительные клинико-лабораторные исследования в супружеских парах свидетельствуют о более глубоком, чем это принято считать, нарушении репродуктивной функции и мужчин, и женщин, включенных в программу ВРТ. При этом основными патогенетиче-
Таблица 3
Концентрация гормонов в сыворотке крови у практически здоровых женщин (контроль) и пациенток программы _ВРТ (ЭКО) в различные фазы менструального цикла (М ± ш)._
Гормоны Фаза менструального цикла
Фолликулярная Периовуляторный период Лютеиновая
Контроль Пациентки Контроль Пациентки Контроль Пациентки
ЛГ, МЕ/л 5,8 ± 1,1 6,6 ± 1,5 25,9 ±2,5 18,5 ±3,0 5,5 ± 1,0 4,9 ± 1,0
ФСГ, МЕ/л 4,6 ± 0,9 4,4 ± 0,9 7,7 ±1,3 6,5 ± 1,3 3,1 ±0,5 2,4 ± 0,4
Пролактин, мМЕ/л 240 ± 7,0 420 ±4,5* 300,3 ± 7,4 425,5 ± 3,6* 275,1 ±6,4 465 ± 5,5*
Эстрадиол, пмоль/л 270,5 ± 4,5 260 ±5,5 710,2 ±10,5 475 ±7,6* 520,1 ±5,6 485,5 ±8,4
Прогестерон, нмоль/л Примечание: * - р<0 1,7 ±0,7 05 и ** -р < 0, 1,1 ±0,3 31 по сравнени 2,85 ± 0,6 ю с контролем 3,2 ± 0,55 35,1 ± 1,2 11,9 ±0,8*
скими звеньями нарушения репродуктивной функции у представителей супружеских пар являются нарушения нейроэндокринной регуляции и микробиоценоза мочеполовой системы.
Однако в последнее время ведущая роль в патогенезе как мужского, так и женского бесплодия отводится нарушениям, возникающим в организме со стороны иммунной системы. Иммунорегуляция процессов гаметогенеза, оплодотворения и беременности играет важную роль при репродукции человека.
Поэтому следующий этап работы был посвящен изучению состояния системы иммунитета у мужчин и женщин, состоящих длительное время в бесплодном браке (Табл. 4). Так, сравнительный анализ цитоки-нового профиля СП у пациентов с нормоспермией и патоспермией показал, что снижение качества эякулята (подвижности, морфологии сперматозоидов) ассоциируется с умеренным, но статистически достоверным увеличением концентрации ТЫ/провоспалительных цитокинов (№N-7, ТЫР-а, 1Ь-1(3,1Ь-12). Отмечается также отчетливая тенденция повышения уровня хемокинов (1Ь-8, МСР-1), которая в отношении М1Р-1р была наиболее выраженной. Среди ростовых факторов регистрировалось снижение концентрации 1Ь-7 в 1,5 раз на фоне сохранного уровня вМ-СБР и умеренно повышенного содержания в-СБР.
Таблица 4
Уровень цитокинов семенной плазмы у мужчин
нормо- и патоспермией (М± ш)__
Группы Цитокины Нормоспермия Патоспермия
ТЫ 7,0 ±1,2 13,1 ±2,2*
1Ь-2 9,6 ±1,1 13,0 ± 1,1
1Ь-4 9,0 ± 0,9 11,3 ±0,5
1Ь-5 19,5 ±6,0 23,0 ± 7,6
Т\й 1Ь-6 31,0 ± 13,0 49,6 ± 19,5
1Ь-10 11,2 ± 1,7 16,0 ±2,3
1Ь-13 2,2 ±0,2 2,8 ± 0,2
плр 8,5 ±0,9 20,8 ±4,6*
Про- ТОТ-а 8,6 ± 0,9 13,5 ± 1,9 *
воспалительные 1Ь-12 (р70) 10±1,1 12,7 ±0,4*
1Ь-17 1,8 ±0,1 2,2 ±0,3
1Ь-7 487,0 ±55,0 336,0 ±52,0*
Факторы роста в-СБР 164,0 ± 16,0 211,0 ± 13,0*
вМ-СБ? 42,2 ±2,7 49,0 ±3,6
1Ь-8 114,0 ± 18,0 271,0 ± 16,6*
Хемокины М1Р-1Р 73,0 ± 18,0 339,0 ±12,2**
МСР-1 271,0 ±33,0 452,0 ± 40,0*
Примечание: * - р<0,05 и ** -р < 0,01 по сравнению с нормоспермией
12
Можно предположить, что цитокиновый профиль СП при патос-пермии у мужчин, состоящих в бесплодном браке, характеризуется повышенным содержанием ТМ/провоспалительных цитокинов в сочетании с увеличением уровня хемокинов и дефицитом ростовых факторов, что может негативно сказываться на подвижности и морфологии сперматозоидов и, как следствие, приводить к снижению их фертилизационного потенциала.
Более наглядно взаимосвязь морфологических нарушений сперматогенеза с уровнем цитокинов СП просматривалась при проведении корреляционного анализа, который показал наличие значимой (р<0,05) положительной связи между частотой встречаемости морфологически аномальных сперматозоидов с уровнем 1Ь-1(3 (г= +0,55), М1Р-1(3 (г= +0,53), в-СБР (г= +0,70) и отрицательной с содержанием 1Ь-5 (г= -0,57), 1Ь-10 (г= -0,82) в СП. При этом необходимо отметить, что частота встречаемости при патоспермии различных форм морфологически аномальных сперматозоидов составляет от 11,5 до 63,5% случаев. Полученные результаты можно трактовать как подтверждение значимости локальных изменений цитокинового статуса в патогенезе инфертильности мужчин, состоящих длительное время в бесплодном браке.
При рассмотрении данных, включающих анализ параметров иммунитета и биологической активности сывороточных факторов у женщин в различные периоды менструального цикла и в динамике суперстимуляции яичников по программе ЭКО, следует отметить, что сравнительная оценка показателей иммунного статуса не выявила значимых различий у здоровых доноров и женщин с бесплодием, ни по количественному составу иммунокомпетентных клеток, ни по уровню их функциональной активности.
Отсутствие заметных отклонений иммунологических параметров на системном уровне у пациенток могло быть обусловлено несколькими причинами. Во-первых, все женщины до начала ЭКО проходили тщательное медико-лабораторное обследование. В случае выявления патологии им назначалась соответствующая терапия, которое проводилось в объеме, необходимом для достижения санирующего эффекта. Кроме того, среди обследованных женщин не было пациенток, у которых основной причиной бесплодия выступал бы иммунный фактор. Вторичная форма бесплодия являлась доминирующей, и, как правило, была связана с нарушением проходимости маточных труб или наличием спаек в брюшной полости (у 76-78%).
Поскольку пациентки обследовались в первые (2-4) дни менструального цикла, т.е. до начала индукции овуляции по программе ЭКО, можно предположить, что на базовом уровне иммунные механизмы играют минимальную патогенетическую роль в нарушении репродуктивной
функции, или же они начинают проявлять себя в более критичный период овариапьного цикла, связанный с созреванием ооцитов, а также на этапах оплодотворения и имплантации эмбрионов.
Исследование иммунитета у женщин с бесплодием в день проведения трансвагинальной пункции ооцитов (на пике стимулированной овуляции по программе ЭКО), показали (Табл. 5), что по сравнению с исходным статусом у них регистрируется достоверное снижение интенсивности спонтанной пролиферации и относительного количества СО 16*№С-клеток, в сочетании с увеличением доли С020+В-лимфоцитов и НЬА-ОЯЬ18Ьмоноцитов. Кроме того, отмечалась также тенденция к увеличению алоптоза циркулирующих клеток крови, которая в отношении свежевыде-ленных нейтрофилов достигала статистически значимого уровня (р< 0,05). Важно отметить при этом, что обследованные пациентки не отличались по анализируемым параметрам иммунного статуса у здоровых женщин. По-видимому, выявленные отклонения в иммунной системе в большей степени обусловлены изменениями гормонального фона вследствие использования препаратов-индукторов созревания ооцитов, и не связаны непосредственно с нарушенной репродуктивной функцией.
Другая причина выявленных иммунологических изменений у обследованных женщин может быть связана также с особенностями цито-киновой регуляции. Очевидно, что и в динамике физиологического менструального цикла, и, особенно, в условиях стимулированной суперовуляции в организме женщины могут происходить «флюктуации» цитоки-нового профиля в том или ином направлении, которые в свою очередь и могут обуславливать специфические изменения параметров иммунитета на системном уровне.
Для проверки высказанного предположения были проведены исследования биологической активности сывороточных факторов ориентированных на интегральную оценку суммарного эффекта цитокинов у женщин в различные периоды физиологического и стимулированного овуляторного цикла по программе ЭКО.
Исследования показателей биологической активности сыворотки крови показали (Рис. 1), что в первые дни (2-4 сутки) физиологического менструального цикла они значимо не отличались от значений контроля. В то же время в период овуляции регистрировалось появление супрес-сорной и противовоспалительной активности, о чем свидетельствует снижение ИСА и ИВА, соответственно в 1,6 и 1,35 раз. Аналогичная закономерность наблюдается и при проведении контролируемой овариаль-ной стимуляции по программе ЭКО. Причем у большинства женщин из программы ЭКО значения соответствующих индексов выходили за нижнюю границу нормативных диапазонов (ИСА. в 68,6% случаев и ИВА в 74% случаев).
Таблица 5
Характеристика иммунитета в группах женщин-доноров ооцитов и паци-
Показатели До начала На пике стимулирован-
ЭКО ной овуляции
Пациентки Пациентки Доноры-
ооцитов
CD3 Т-лимфоциты (%) 69,6 ± 1,2 72,6 ± 1,3 70,2 ±4,1
CD4 Т-лимфоциты (%) 42,0 ± 1,2 44,6 ± 1,3 44,0 ± 4,9
CD8 Т-лимфоциты (%) 25,9 ±0,9 26,0 ± 0,9 26,0 ±2,9
CD4/CD8 1,71 ±0,09 1,78 ±0,07 1,71 ±0,16
CD20 В-клетки (%) 9,2 ±0,5 12,0 ± 0,6** 12,6+1,2*
CD16 NK-клетки (%) 14,4+1,3 10,7 ±0,8* 11,4 ±2,3*
HLA-DRhigh моноциты (%) 42,0+1,8 69,0 ±2,6** 70,0 ± 5,0**
Пролифера- Спонтанная 1560 ±90 1280 + 80 * 1230± 160*
ция КонА- 43930±3160 36950±2780 3288015790
(имп/мин) индуцированная
ИВКонА 32,4 ± 1,3 35,8 ± 3,6 28,0 ±5,3
Апогпоз (%) лимфоцитов 6,5 ± 1,0 9,0 ± 1,6 -
моноцитов 13,1 ± 1,4 17,5 ±1,9 -
нейтрофилов 7,8 ±1,1 12,9 ±2,0* -
Приыечание: * - р<0,05 и ** -р < 0,01 по сравнению с группой женщин до начала ЭКО
Полученные данные свидетельствуют об изменении у женщин с бесплодием баланса сывороточных факторов в сторону доминирования медиаторов/цитокинов с иммуносупрессорной/противовоспалительной активностью в овуляторный период менструального цикла, особенно после проведения контролируемой суперстимуляции яичников по программе ЭКО.
Дополнительным подтверждением этого могут являться изменения субпопуляции регуляторных С04+С025+Т-лимфоцитов и СЭ14+ С01б+моноцитов в качестве потенциальных кандидатов-участников, задействованных в супрессорной перестройке иммунитета у женщин в период стимулированной суперовуляции. Результаты показывают, что в овуляторный период менструального цикла при проведении суперстимуляции яичников у женщин увеличивается доля С04+С025+Т-лимфоцитов по сравнению с контролем (соответственно 9,6 ± 0,8% и 5,4 ± 0,5%). Можно предположить, что эти системные изменения не случайные, поскольку они четко синхронизированы с фазой овуляторного цикла, и мо-
гут лежать в основе супрессорнои реорганизации иммунорегуляторных механизмов, реализуемых как через растворимые факторы, так и на уровне межклеточной кооперации, в том числе и на местном уровне. 1,6
Контроль
2-4 сутки цикла Физиологическая Стимулированная овуляция гиперовуляция
И ИСА И ИВА
Рис. 1. Биологическая активность сыворотки крови в группах женщин контроля и программы ВРТ (ЭКО) в различные фазы менструального цикла и контролируемой овариальной гиперстимуляции (М±т)
Выявленную взаимосвязь между биологической активностью ФЖ и содержанием в ней цитокинов иллюстрируют результаты сравнительного анализа пациенток ЭКО, оппозитных по уровню иммуносупрессор-ной активности ФЖ.
Из представленных в табл. 6 результатов видно, что у пациенток с чрезмерно выраженной иммуносупрессорной активностью (ИСА < 0,6) концентрация в ФЖ №N-7, ¡1-2,1Ь-4,11-6,1Ь-7, и 0-С8Р была в 2-3 раза ниже. В том случае, если супрессорный потенциал ФЖ не выходил за установленную границу значений ИСА >0,6, то содержание в ФЖ №N-7, 1Ь-2, 1Ь-4, 1Ь-7, и С-СБР в исследуемых образцах находилось на уровне здоровых женщин.
При проведении корреляционного анализа оказалось, что цитокины, продуцируемые на местном уровне, взаимосвязаны не только с характером биологической активности ФЖ, но и с относительным содержанием регу-ляторных С[)4н С025 +'Г-клеток периферической крови. В частности, была выявлена достоверная обратная зависимость между количеством циркулирующих СБ4+С025+Т-клеток и концентрацией 1Ь-1{3 (г= - 0,36, р< 0,05), ТЫР-а (г= - 0,35, р< 0,05), И-8 (г= - 0,49, р< 0,01), а также их прямая взаи-
мосвязь с уровнем 1Ь-4 в ФЖ (г= + 0,31, р< 0,05). Установленный факт свидетельствует, очевидно, о сопряженности цитокин-опосредованных и клеточно-опосредованных механизмов регуляции фолликулогенеза, реализуемых как на местном, так и на системном уровне.
Таблица 6
Уровень цитокинов (пкг/мл) в ФЖ пациенток ВРТ (ЭКО), оппозитных по _уровню супрессорной активности (Median)_
Группы Цитокины Контроль Пациентки
ИСА > 0,6 ИСА <0,6
ТЫ IFN-Y 55 60 10**
IL-2 25 27,5 j 2 **
Th2 1L-4 9,6 10 4,9*
IL-5 2,7 2,8 1,3
IL-6 13 22,4 11,6*
IL-10 10 11 10
IL-13 24 22,5 27
Про-воспалительные IL-lß 23 24 26
TNF-a 10 10,5 10,5
IL-12 (p70) 12 12 12
IL-17 16 15,7 16,3
Факторы роста IL-7 11 11,4 3,0**
G-CSF 166 155 43 **
GM-CSF 136 137 135
Хемокины IL-8 21 10 22
MlP-lß 75 85,5 75
MCP-1 1 1 1
Примечание: * - р<0,05 и ** -р < 0,01 по сравнению с контролем
Поэтому в дальнейшем был проведен анализ цитокинового профиля ФЖ во взаимосвязи с особенностями фолликулогенеза при проведении у женщин контролируемой суперовуляции по программе ЭКО.
Сравнительный анализ пациенток ЭКО (Табл. 7), оппозитных по количеству ооцитов, полученных на пике стимулированной овуляции, а также различающихся по развитию синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ) показал тесную сопряженность между количеством созревающих ооцитов и уровнем цитокинов в микроокружении фолликула на пике стимулированной суперовуляции. Так, образование малого числа яйцеклеток (I группа) ассоциировано с дефицитом 1L-2, IL-4, IL-7 и G-CSF. Схожая цитокиновая картина ФЖ определяется и при развитии СГЯ (III
группа). Однако в этом случае регистрируется повышенный уровень 1Ь-1|3, провоспалительная активность которого вероятно и вызывает перито-неальную экссудацию и развитие болевого синдрома у женщин с СГЯ. Можно предположить, что в условиях развивающегося цитокинового дисбаланса, по-видимому, изменяются и качественные характеристики яйцеклеток, что снижает эффективность их последующего оплодотворения.
Таблица 7
Уровень цитокинов (пкг/мл) в ФЖ и показатели овариальной функции в группах пациенток ЭКО, различающихся по количеству полученных
ооцитов и развитию синдрома гиперстимуляции яичников (Median)
Показатели Контроль Пациенток, различающиеся по количеству полученных ооцитов и развитию СГЯ
I (< 8; СГЯ -нет) II (>8; СГЯ -нет) III (>8; СГЯ -есть)
Кол О 8 4 ** 13 15
Кач_0 100 100 90 87,5
Инд Опл 67 66 68 51,5
1Ь-2 25 1,5 ** 1 30,3 6,0 п
1Ь-4 9,6 3,5 ** i 11,5 2,7 П
1Ь-13 24 23,7 26 59 ** t
1Ь-1р 23 23,7 24,9 34 * t
1Ь-7 11 7,3 ** | 11,5 5,3 * 1
в-СБР 166 88 **1 194 46**|
мпмр 75 65* 122| 77
Примечания: достоверность различий медианы исследуемых параметров по сравнению с подгруппой II (* - < 0,05, ** - < 0,01). Стрелками помечены достоверные различия в уровне цитокинов по сравнению с женщинами-донорами ооцитов(контролем)
Действительно, из полученных данных видно (Табл. 8), что в группе женщин, у которых 100% яйцеклеток, полученных на пике стимулированной овуляции, имели высокую оценку качества (4-5 баллов по международной шкале), базальная секреция цитокинов в ФЖ находится на уровне медианных значений контроля. Во второй группе, где выход яйцеклеток высокого качества был ниже в 2 раза, обнаруживалась принципиально иная картина.
Видно, что концентрация подавляющего большинства цитокинов находится на нижней границе чувствительности метода. При этом регистрируется дефицит ТЬ1 (№N-7,1Ь-2) и ТЬ2 (1Ь-4,1Ь-6,1Ь-10) цитокинов, провоспалительных (1Ь-1р, ТЫР-а, 1Ь-12, 1Ь-17, 1Ь-б) и противовоспалительных (1Ь-10) медиаторов, ростовых факторов (1Ь-7, О-СБР) и М1Р-1Р (хемокина). Полученные данные свидетельствуют, что для созревания
ооцитов в морфологически качественные яйцеклетки необходимым фактором является наличие и поддержание в микроокружении фолликула определенного баланса цитокинов. Таблица 8
Уровень цитокинов (пкг/мл) в ФЖ и показатели овариальной функции в группах пациенток ВРТ (ЭКО), различающихся по качеству полученных
ооцитов (М±ш)
Показатели Контроль (МесНап) Пациентки, различающиеся по качеству полученных ооцитов
Кач О = 100% Кач О <60%
Овариальная функция Кол_0 Кач_0 Инд О пл 8 100 67 9,0 ± 1,0 100 81 ±5,0 9,8 ± 2,4 47,7 ±4,4** 42,6 ± 12,5 **
ТЫ 55 56 ±8,7 7,5 ± 4,6 **
1Ь-2 25 20,5 ± 2,8 1,6 + 0,4**
1Ь-4 9,6 7,6 ± 1,0 1,2 ±0,2**
11-5 2,7 2,3 + 0,1 1,2 ±0,1
ТЬ2 1Ь-6 13 42,6 ± 19,5 5,7 ±3,1 **
1Ь-10 10 10,4 ±0,9 3,8 ± 1,3 **
1Ь-13 24 47,5 ± 23 37,6 ± 18
Про-воспалотельные ¡ир 23 27,3 ± 2,2 16,2 ± 3 *
Т№-а 10 12,8 ±2,1 4,3 ± 1,6**
1Ь-12 (р70) 12 15,0 ±2,9 6,2 ± 2 **
1Ы7 16 25,7 ± 5,8 3±2**
11-7 11 8,7 ±0,9 1,2 ±0,1 **
Факторы роста в-СБР 166 144 ± 17 10,5 ± 6,8 **
вМ-СБР 136 222 ±40 336 + 201
1Ь-8 21 50,6 ± 34,7 27,5 ± 5
Хемокины М1Р-1Р 75 125 ±23 48,7 ±9,8*
МСР-1 1 34,8 ± 16,8 3,3 ± 2,3
Примечание: * - р<0,05 и ** -р < 0,01 достоверность различий средних значений исследуемых параметров между оппозитными группами пациенток ВРТ (ЭКО)
Поэтому несомненный научно-практический интерес представляют данные о связи уровня и биологической активности цитокинов ФЖ с клинической эффективностью ЭКО. Так, результаты частотного анализа показывают, что проградиентное уменьшение содержания в ФЖ 1Ь-2 характеризуется четким, линейным трендом снижения эффективности ЭКО с 91 до 19%. (Рис. 2).
11_-2 (пкг/мл)
Рис. 2. Эффективность ВРТ (ЭКО) в группах женщин, с различным уровнем ¡Ь-2 в фолликулярной жидкости
Аналогичная, но обратная зависимость частоты развития беременности регистрируется при увеличении в ФЖ уровня-1Ь-8 (Рис. 3).
Полученные результаты дополнительно свидетельствуют, что уровень цитокинов, продуцируемых в микроокружении фолликула в период созревания ооцитов и имплантации оплодотворенной яйцеклетки, может иметь определенную диагностическую ценность в раннем прогнозе успешного или неэффективного проведения ЭКО. Это, возможно, может послужить основой для определения иммунологических критериев раннего прогноза развития беременности.
Поэтому для оценки диагностической ценности выделенных диапазонов признаков в прогнозе эффективности ЭКО определяли их диагностические коэффициенты (ДК), специфичность и чувствительность (БР и БЫ), информативность по К. Шеннону и относительный риск (ЯЛ).
Достоверность различия частот встречаемости признаков в группах определялась точным методом Фишера. Информативность каждого признака вычислялась по соотношению двух вероятностей Р(Х1М.1) и Р(Х1/А2), где А) и А2 - классы прогноза; XI - номер признака, а Р(Х1/Ак) — вероятность (частость) события.
11-Я /пкг/мп\
Рис. 3. Эффективность ВРТ (ЭКО) в группах женщин, с различным уровнем 1Ь-8 в фолликулярной жидкости
Информативность по К. Шеннону ДБИ) по формуле: Р(Х1/А1> / 10 Р(М/А2) X [Р(Х|/А,) - Р(Х1/А2)] Диагностический коэффициент (ДК) вычислялся по формуле: ДК = 10 х Р(Х1/А,) / Р(Х1/А2)
Использование такого математического подхода позволило все выделенные и диагностически значимые показатели сгруппировать в отдельные комплексы признаков, ранжированных по степени значимости для прогноза неэффективного и успешного цикла ЭКО (табл. 9 и 10). Из результатов видно, что количественный состав и уровень информативности выделенных диапазонов признаков, прогнозирующих неэффективность ЭКО, существенно превышает аналогичные значения комплекса «позитивных» признаков, маркирующих наступление клинической беременности после проведенного цикла ЭКО. Тем не менее, можно полагать, что выделенные диагностические комплексы как «негативных», так и «позитивных» предикторных факторов могут дополнить и существенно повысить эффективность традиционных методов прогноза результативности ЭКО.
Таблица 9
Комплекс диагностически значимых показателей, прогнозирующих не-
эс )фективный цикл ВРТ (ЭКО)
Показатели (признак) Уро-вень(пкг/мл) ДК SN % SP% J(Sh) RR
CD4CD25 Т-кл (%) Кач 0(%) <6 <66 -12 -11 46 24 100 100 3,94 3,65 -27 -16,3
ИСА ф/ж (расч.ед.) CD 8 Т-кл (%) <0,49 >32 -8,7 -8,1 39 40 95 93,8 2,9 2,68 -11 10
IL-7 ф/ж (пкг/мл) IL-4 ф/ж (пкг/мл) G-CSF ф/ж (пкг/мл) IL-2 ф/ж (пкг/мл) MIP-1P ф/ж (пкг/мл) IL-13 ф/ж (пкг/мл) Абс. лимфоцитоз (х109) IL-8 ф/ж (пкг/мл) Кол_0 <6 <2 <50 <7 <55 >40 >2,0 >25 <4 -8,1 -7,3 -7,3 -6,3 -5,2 -5,1 -4,2 -4,0 -3,6 54 67 67 71 41 54 50 41 42,5 91,7 87,5 87,5 83.4 87.5 83,4 81 83,4 81,3 2,7 2,42 2,42 2,09 1,74 1,-7 1,39 1,32 1,2 - 13 - 14 - 14 -12 -5 -5,9 -4,2 -3,6 -3,2
Пргшечание: представлены ДК с отрицательными значениями в порядке убывания информативности.
Таблица 10
Комплекс диагностически значимых показателей, прогнозирующих на-
ступление клинической беременности в цикле ВРТ (ЭКО)
Показатели(признак) Уро-вень(пкг/мл) ДК SN % SP% J(Sh) RR
IL-4 ф/ж (пкг/мл) >8 +6,0 83 79 1,88 19
IL-7 ф/ж (пкг/мл) >11 +5,8 79 79 1,93 14,4
IL-2 ф/ж (пкг/мл) >26 +5,2 83 75 1,74 15
G-CSF ф/ж (пкг/мл) > 157 +4,8 75 75 1,58 9
IL-8 ф/ж (пкг/мл) <15 +4,8 75 75 1,58 9
IL-13 ф/ж (пкг/мл) <26 +4,0 83 67 1,32 10
М1Р-1р ф/ж (пкг/мл) >81 +3,6 67 71 1,19 4,9
Абс. лимфоцитоз (х109) < 1,85 +3,8 71,5 70 1,25 5,8
ИСА ф/ж (расч.ед.) >0,6 +3,0 68,5 66 1,0 4,2
Кол_0 >8 +2,4 65,6 62,5 0,81 3,2
Примечание: представлены ДК с отрицательными значениями в порядке убывания информативности
В самом общем виде связь системного эндокринно-иммунного дисбаланса с нарушениями фертильной функции и возможной эффективностью ЭКО представлена на схеме 1.
Нарушения гормонального и иммунного статуса
4
системный эндокринно-иммунный дисбаланс
I т
модификация цитокннового профиля
4
патоморфологические изменения сперматоцитов и овариальная дисфункция
4
формирование фертильной дисфункции
4
эффективность ВРТ (по комплексной оценке параметров иммунного и цитокинового статуса в качестве ранних прогностических маркеров эффективности программы вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
4
эффективность ВРТ (по комплексной оценке параметров иммунного и цитокинового статуса в качестве ранних прогностических маркеров эффективности программы вспомогательньрср^'еп^одуктиты^ технологий (ЭКО).
высокая низкая
Схема 1. Роль эндокринно-иммунных нарушений в патогенезе фертильной дисфункции и эффективности ВРТ.
ВЫВОДЫ
1. У мужчин из супружеских пар с бесплодием лишь в 30% случаев показатели числа, морфологии и подвижности сперматозоидов соответствуют нормативным значениям, тогда как в 70% случаев обнаруживаются нарушения сперматогенеза. Частота встречаемости при патоспер-мии морфологически аномальных сперматозоидов составляет от 11,5 до 63,5% случаев. У мужчин с патоспермией фертилизационная активность сперматозоидов достоверно снижена (инд. опл. 60 ± 4,6% против 87 ± 4,6% при нормоспермии)
2. У мужчин из супружеских пар с бесплодием отмечаются признаки гормональной дисфункции, что проявляется в достоверном снижении тестостерона и увеличении эстрадиола и пролактина в крови по сравнению с практически здоровыми мужчинами. У мужчин с патоспер-мией доля лиц с андрогенодефицитом составляет 61,5%, а гиперпролак-тинемией -16%.
3. У женщин из супружеских пар с бесплодием, отмечается снижение концентрации эстрадиола в периовуляторный период и уменьшение продукции прогестерона в лютеиновую фазу цикла, что указывает на меньшую стероидогенную активность яичников в сравнении с практически здоровыми женщинами.
4. У большинства мужчин из супружеских пар с бесплодием определяется нарушение микробиоциноза урогенитального тракта. Картина нормоценоза уретры наблюдается только у 34,4% пациентов, а секрета предстательной железы - у 50,9%, тогда как у практически здоровых мужчин эти показатели составили соответственно 77,8% и 88,9%. У 33% пациентов с патоспермией выявляется лейкоцитоспермия, что свидетельствует о наличии латентного инфекционно-воспалительного процесса в урогенитальном тракте
5. У женщин из супружеских пар с бесплодием, условно-патогенные микроорганизмы (Escherichia coli, Staphylococcus, Streptococcus) обнаружены в 87,3% случаев.
6. У мужчин с патоспермией цитокиновый профиль семенной плазмы характеризуется повышенным содержанием провоспалительных медиаторов (IFN-y, TNF-a, IL-ip, IL-12) в сочетании с увеличением уровня хемокинов (IL-8, МСР-1, MIP-1P) и дефицитом 1Ь-7,.что свидетельствует об иммунной дисрегуляции сперматогенеза. Сравнительная оценка параметров спермограммы и цитокинового профиля спермальной плазмы у мужчин из супружеских пар с бесплодием показала наличие значимой положительной корреляционной связи между частотой встречаемости морфологически аномальных сперматозоидов с уровнем IL-ip, MIP-lp, G-CSF и отрицательной с содержанием IL-5, IL-10 в семенной плазме.
8. У женщин из супружеских пар с бесплодием в овуляторный период менструального цикла при проведении контролируемой суперстимуляции яичников по программе вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО) увеличивается доля циркулирующих регуляторных С04+С025+Т-лимфоцитов на фоне доминирующей иммуносупрессор-ной, противовоспалительной и проапоптогенной активности сывороточных и фолликулярных факторов. Наличие обратной корреляционной зависимости между количеством циркулирующих CD4+CD25+T-mieTOK и концентрацией в фолликулярной жидкости IL-ip, TNF-a и 1L-8, а также их прямая взаимосвязь с уровнем IL-4 свидетельствует о сопряженности
цитокин-опосредованных и клеточно-опосредованных механизмов регуляции фолликулогенеза у женщин.
10. У женщин с бесплодием по программе вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО) на фоне пониженного в фолликулярной жидкости содержания IL-2, IL-4, IL-7 и G-CSF происходит снижение количества образующихся ооцитов. При наличии многокомпонентного дефицита Thl (IFN-y, IL-2), Th2 (IL-4, IL-6, IL-10), провоспалительных (IL-ip, TNF-a, IL-12, IL-17) цитокинов, ростовых факторов (IL-7, G-CSF) и MIP-ip нарушаются качественные характеристики ооцитов, что приводит к снижению эффективности оплодотворения в культуре in vitro.
11. На основании математического анализа выделены диагностически значимые диапазоны параметров иммунного и цитокинового статуса, а также показателей овариальной функции, которые обладают высокой информативностью в раннем прогнозе эффективности лечения супружеского бесплодия с помощью программы вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Иммунологическое обследование супружеских пар с бесплодием, должно стать обязательным компонентов комплексного обследования при подготовке к применению методов экстракорпорального оплодотворения.
2. Супружеским парам с бесплодием, готовящимся к проведению экстракорпорального оплодотворения, рекомендуется проводить исследования уровней Thl/провоспалительных, ТЬ2/противовоспалительных цитокинов, факторов роста и хемокинов в семенной плазме и фолликулярной жидкости для выявления факторов риска неудачи предстоящей технологии.
3. Выделение групп риска по неудачному результату проведения экстракорпорального оплодотворения может осуществляться на основании прогностических критериев значимости показателей иммунитета и овариальной функции у женщин с бесплодием, участвующих в программе вспомогательных репродуктивных технологий.
4. При значениях IL-7 < 6 пкг/мл (ДК -8,1), 1L-4 < 2 пкг/мл (ДК -7,3), IL-2 < 7 пкг/мл (ДК -6,3), G-CSF < 50 пкг/мл (ДК -7,3), MIP-ip < 55 пкг/мл (ДК -5,2), IL-13 > 40 пкг/мл (ДК -5,1), IL-8 > 25 пкг/мл (ДК -4,0), ИСАф/ж < 0,49 расч ед (ДК - 8,7) в ФЖ, числа лимфоцитов в крови > 2,0 х 109/л (ДК -4,2), С08+Т-лимфоцитов > 32% (ДК -8,1), CD4+CD25+ Т-клеток < 6% (ДК -12,0), числа ооцитов, полученных на пике стимулированной суперовуляции < 4 (ДК - 3,6) и яйцеклеток хорошего качества < 66% (ДК - 11,0) нецелесообразно проведение процедуры в связи с отсутствием положительного результата экстракорпорального оплодотворения.
5. При значениях IL-4 > 8 пкг/мл (ДК +6,0), IL-7 > И пкг/мл (ДК +5,8), IL-2 > 26 пкг/мл (ДК +5,2), G-CSF > 157 пкг/мл (ДК +4,8), MHMß > 81 пкг/мл (ДК +3,6), IL-8 < 15 пкг/мл (ДК +4,8), IL-13 < 26 пкг/мл (ДК +4,0) в ФЖ, ИСАф/ж > 0,6 расч ед (ДК +3,0), числа лимфоцитоз в крови < 1,85 х 109/л (ДК +3,8), количества ооцитов, полученных при трансвагинальной пункции яичников > 8 (ДК +2,4) предполагается успешное развитие беременности в цикле экстракорпорального оплодотворения.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Айзикович Б.И., Останин A.A., Хонина H.A., Черных Е.Р. Доброкачественная гиперплазия предстательной железы: иммунологические аспекты патогенеза и лечения // Бюллетень СО РАМН.- 2002.- № 2.- С. 96-101
2. Айзикович Б.И., Останин A.A. Особенности иммунитета у здоровых мужчин старшей возрастной группы и больных доброкачественной гиперплазией предстательной железы. // Материалы 6-й отчетной сессии ИЕИ СО РАМН.- Новосибирск, 2003.
3. Останин A.A., Айзикович И.В., Айзикович Б.И., Леплина О.Ю., Черных Е.Р. Роль цитокинов в регуляции созревания ооцитов // Цитоки-ны и воспаление. - 2005. - Т. 4, № 2. - С. 86-87.
4. Айзикович И.В., Айзикович Б.И., Леплина О.Ю., Черных Е.Р., Останин A.A. Показатели иммунитета женщин с бесплодием в прогнозе эффективности экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) // Цитокины и воспаление. - 2005. - Т. 4, № 2. - С. 89.
5. Айзикович Б.И.„ Айзикович И.В., Хонина H.A., Черных Е.Р., Останин A.A. Иммунологические аспекты регуляции ранних этапов репродуктивного процесса (обзор литературы) // Проблемы репродукции. -2005,-№.6.-С. 7-14
6. Айзикович И.В., Айзикович Б.И., Леплина О.Ю., Хонина H.A., Черных Е.Р., Останин A.A. Иммунологический мониторинг женщин в динамике физиологического и стимулированного овуляторного цикла // Проблемы репродукции. - 2006.- №.1 - С. 39-45
7. Айзикович Б.И., Айзикович И.В., Останин A.A., Черных Е.Р. Прогностическая модель оценки эффективности лечения бесплодия с помощью ЭКО // Проблемы репродукции, 2006,- № 4. - С. 63-69
8. Айзикович Б.И., Останин A.A., Черных Е.Р. Цитокиновый профиль семенной плазмы человека // Проблемы репродукции, 2006.- № 6. -С. 65-74
9. Останин A.A., Айзикович Б.И., Айзикович И.В., Кожин А.Ю., Черных Е.Р. Роль цитокинов в регуляции репродуктивной функции // БЭБиМ .- 2007,- Т. 143, № 1С. 81-85
lO.Ostanin A.A., Aizikovich B.I., Aizikovich I.V., Kozhin A.Yu., Chemykh E.R. Role of cytokines in the regulation of reproductive function // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2007. - Vol. 143, N. 1. - P. 75-80
11. Айзикович И.В., Мехова Н.Д., Айзикович Б.И., Верба О.Ю. Целесообразность проведения профилактической сальпингэктомии у женщин с гидросальпинксом перед экстракорпоральным оплодотворением // Вестник НГУ. - Серия: Биология, клиническая медицина. - 2007. -Т.5.-Вып.З,- С. 125-128.
12. Айзикович И.В., Мехова Н.Д., Айзикович Б.И., Верба О.Ю. Эффективность процедуры ЭКО у женщин с сактосальпинксом //Материалы XVII международной конференции РАРЧ «Репродуктивные технологии сегодня и завтра» 6-8 сентября, - Казань, 2007. - С.23-24.
13. Маринкин И.О., Айзикович Б.И., Геворкян И.А., Сергеева Ю.С., Семыкин Д.С., Баева H.H. Родовспоможение без оглядки на «традиции» // Материалы научно-практической конференции «Иммунологические аспекты репродукции человека» 5-6 марта 2008 г. - Новосибирск, 2008. -С.102-105.
14. Айзикович И.В., Мехова Н.Д., Айзикович Б.И., Верба О.Ю. Эффективность процедуры ЭКО у женщин с сактосальпинксом // Бюллетень СО РАМН (Приложение № 1). - 2008. - С. 5-8.
15. Логинова Е.О., Айзикович Б.И., Белова А.Е., Трейвиш Л.С., Бройтман Е.В., Лебедева В.А.Опыт применения аргоноплазменной коагуляции при лечении патологии шейки матки // Бюллетень СО РАМН (Приложение № I). - 2008. - С. 45-49.
16. Устинов Д.В., Айзикович Б.И. Цитокины семенной плазмы и их роль в этиологии мужского бесплодия // Бюллетень СО РАМН (Приложение № 1). - 2008. - С. 84-87.
17. Айзикович Б.И., Айзикович И.В., Верба О.Ю., Козлов В.А. Характер взаимосвязи аномальных сперматозоидов с уровнем цитокинов семенной плазмы у мужчин, состоящих длительное время в бесплодном браке // Медицинская иммунология. - 2008.- Т. 10, № 2-3.- С. 191-193.
18. Айзикович Б.И., Айзикович И.В., Верба О.Ю., Козлов В.А. Роль цитокинов в регуляции сперматогенеза: современный взгляд на проблему // Иммунология. - 2008. - Т. 29, №3. - С. 180-185.
19. Устинов Д.В., Айзикович Б.И. Роль цитокинов в этиологии мужского бесплодия // Материалы VII Межрегиональной научно-практической конференции урологов Сибири «Современные вопросы урологии, оперативной нефрологии, андрологии и репродуктивной медицины». - Новосибирск, 2008. - С.55-56.
20. Логинова Е.О., Айзикович И.В , Айзикович Б.И., Белова А.Е., Ладыгина Е.А., Трейвиш Л.С., Бройтман Е.В., Верба О.Ю. Динамика лимфоцитарного профиля периферической крови у пациенток с хрониче-
ским эндометритом в программах ЭКО //Материалы Объединенного иммунологического Форума. - СПб, 2008. - С. 134.
21. Устинов Д.В., Айзикович Б.И., Верба О.Ю. Уровень провос-палительных и противовоспалительных цитокинов семенной плазмы человека при лейкоцитоспермии // Материалы Объединенного иммунологического Форума - СПб, 2008. - С.132.
22. Мехова Н.Д., Айзикович И.В., Айзикович Б.И., Верба О.Ю. Влияние содержимого сактосальпинкса на эндометрий и фолликулярный аппарат яичника //Материалы Объединенного иммунологического. - СПб, 2008.-С.135.
23.Бройтман Е.В., Айзикович И.В., Айзикович Б.И., Белова А.Е., Ладыгина Е.А., Логинова Е.О., Трейвиш Л.С., Верба О.Ю. Результаты эффективности ВРТ у женщин со сниженным овариальным резервом //Материалы Объединенного иммунологического Форума. - СПб, 2008. - С.136.
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВРТ Вспомогательные репродуктивные технологии
ИВконА Индекс влияния КонА
ИВА Индекс воспалительной активности
ИСА Индекс супрессорной активности
Инд_Опл Индекс оплодотворения
КонА Конканавалин А
Кол О Количество полученных ооцитов
Кач_0 Доля качественных ооцитов
ЛГ Лготеинизирующий гормон
СП Семенная плазма
ФЖ Фолликулярная жидкость
ФСГ Фолликулстимулирующий гормон
ЭКО Экстракорпоральное оплодотворение
IL-lp и др. Интерлейкин-ip и др.
IFN-y Интерферон- у
G-CSF, GM-CSF Гранулоцитарный и гранулоцитарно-
макрофагальный колониестимулирующие факторы
МСР-1 Макрофагальный хемоаттрактантный белок-1 М1Р-1р Макрофагальный воспалительный протеин-ip SP, SN, JSh, RR Специфичность, чувствительность,
информативность по К. Шеннону, относительный риск TNF-a Фактор некроза опухолей-a Thl и Th2 Субпопуляции Т-хелперных клеток
Соискатель Айзикович Б.И.
Подписано в печать 16 11 2008. Формат бумаги 60x90/16. _Уч.-изд л 1,75 Заказ 1661. Тираж 100 экз_
Ротапринт СНИИГГиМСа. 630091, Новосибирск, Красный проспект, 67
Оглавление диссертации Айзикович, Борис Исаевич :: 2008 :: Омск
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. Обзор литературы
1.1 Механизмы нарушения репродуктивной функции: современные патогенетитические и иммунологические аспекты мужского и женского бесплодия
1.1.1 Патогенез мужского бесплодия 18 1.1.1.1 Роль иммунной системы в регуляции сперматогенеза
1.1.2 Патогенез женского бесплодия 3 5 1.1.2.1 Роль иммунной системы в регуляции созревания ооцитов, овуляции и имплантации эмбрионов
1.1.3 Цитокины и их роль в регуляции репродуктивного потенциала у мужчин и женщин
1.1.3.1 Цитокины семенной жидкости и их возможные функции
1.1.3.2 Цитокины фолликулярной жидкости и их возможные функции
1.2 Современные методы вспомогательной репродукции в лечении женского и мужского бесплодия
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования
2.1 Характеристика обследуемых групп
2.1.1 Характеристика мужчин, включенных в исследование
2.1.2 Характеристика женщин, включенных в исследование
2.2 Методология клинических мероприятий
2.3 Методы клинико-лабораторного обследования пациентов
2.3.1 Инструментальные методы исследования
2.3.2 Лабораторные методы исследования
2.4 Специальные методы исследования 101 2.4.1 Порядок забора материала и его предварительная обработка
2.4.2 Спермиологическое исследование
2.4.3 Исследование параметров иммунитета
2.4.3.1 Культивирование лимфоцитов
2.4.3.2 Определение субпопуляций клеток методом проточной цитофлуориметрии
2.4.3.3 Метод оценки апоптоза клеток
2.4.3.4 Метод оценки биологической активности сыворотки крови и фолликулярной жидкости
2.4.3.5 Определение концентрации цитокинов методом ВЮ-PLEX анализа
2.5 Статистическая обработка полученных результатов
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований
3.1 Характеристика клинико-лабораторных параметров у супружеских пар, включенных в программу лечения бесплодия с помощью вспомогательных репродуктивных технологий
3.2 Характеристика параметров иммунитета у супружеских пар, включенных в программу лечения бесплодия с помощью вспомогательных репродуктивных технологий
3.2.1 Цитокиновый профиль семенной жидкости у мужчин с нормоспермией и патоспермией
3.2.2 Состояние иммунитета у женщин на различных этапах физиологического и стимулированного овариального цикла
3.2.3 Цитокиновый профиль фолликулярной жидкости и особенности овариальной функции
3.2.4 Клинико-иммунологический анализ эффективности лечения бесплодия с помощью вспомогательных репродуктивных технологий
3.3 Анализ информативности иммунологических параметров в прогнозе наступления беременности при лечении бесплодия с помощью вспомогательных репродуктивных технологий
ГЛАВА 4. Обсуждение собственных результатов
ВЫВОДЫ
Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Айзикович, Борис Исаевич, автореферат
Актуальность проблемы.
Проблема инфертильности супружеских пар приобретает сегодня не только медицинское, но и огромное социально-демографическое и экономическое значение (Анохин JI.B., Коновалов О.Е., 1994; Заславская B.C., 2001; Подзолкова Н.М., 2003). По данным ВОЗ (WHO, 1999) около 100 млн. супружеских пар бесплодны и их число с каждым годом увеличивается. Частота бесплодных браков среди супругов репродуктивного возраста колеблется от 12 до 30,0% (Овсянникова Т.В., 1998; Филиппов О.С., 1999; Speroff L. et al., 1994 Tempelton A.A., 1999). Причиной бесплодного брака в 40-50% случаях является патология репродуктивной системы у одного из супругов, реже - в 25-30,0% у обоих (Селезнева И.Ю., 1999; Фролова О.Г., 2004). ВОЗ выделяет 22 причины женского и 16 причин мужского бесплодия. Женское бесплодие встречается у 35-40% бесплодных браков, на долю мужского бесплодия приходится 30-35% (WHO, 1999).
Бесплодный брак - это отсутствие беременности у женщины детородного возраста в течение одного года регулярной половой жизни без применения ■ каких-либо контрацептивных средств, это сочетание социального неблагополучия, психического дискомфорта и практически всегда физического нездоровья супругов (Кулаков В.И., 2006).
Ситуация бесплодного брака требует от специалистов обширных знаний не только в гинекологии и андрологии, но и в эндокринологии, патофизиологии, терапии, генетике, иммунологии, неврологии, психологии и др. (Куиин А.И.,1989; Антонов А.И.,1992; Оганесян М.Г., 1997; Дейнека Н.В., 2001; Тимченко В.Н., 2007). Поэтому медицинская значимость проблемы инфертильности определяется необходимостью решения вопросов, связанных с совершенствованием методов диагностики, повышением эффективности лечения и профилактики бесплодия.
Известно, что современная диагностическая и лечебная помощь при бесплодии основывается на основополагающих достижениях в области репродукции человека, к которым относятся: расшифровка механизмов гормональной регуляции репродуктивных процессов, что способствовало синтезу и эффективному применению гормонов в клинической практике (Сидорова И.С., 2004; Серов В.Н., 2005; Paul D.S., 1997); ультрасонографи-ческое сканирование, которое стало высокоинформативным при диагностике и лечении заболеваний, являющихся причиной бесплодия (Хачкурузов С.Г., 1999; Смирнова А.А., 2003); эндоскопическая хирургия, изменившая коренным образом научно-практический подход к проблеме бесплодного брака (Гаспаров А.С., 2001; Letterie G.S., 1999); принципиально новый метод лечения инфертильности - экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) и перенос эмбриона, в результате внедрения которого открылись перспективы в изучении неизвестных механизмов оплодотворения и имплантации (Никитин А.И., 1997; Кулаков В.И., 1999; Edwards R.G., 1995). Тем не менее, даже на современном этапе развития науки и практики в 8-10% случаев установить причину бесплодия не представляется возможным (Гаспаров
A.С., 1999; Курило Л.Ф., 2000; Савельева, Г.М., 2004; Olsen J., 1996). Это связано с огромным числом разнообразных факторов, влияющих на репродуктивный процесс. Ряд авторов, разделяя мнение о влиянии мужского и женского факторов на зачатие и развитие эмбриона, обращают внимание, что сочетание этих составляющих может колебаться от 40 до 80% (Кулаков
B.И., 2006). Так обстоит дело, с заболеваниями, передающимися половым путем, при которых инфекционный агент определяется у обоих половых партнеров. Подобные проблемы значительно быстрее могут быть решены в программах вспомогательной репродукции (ВРТ), когда оценке подвергаются именно те гаметы, которые в данный момент участвуют в процессе оплодотворения и есть возможность оценить состоятельность ранних этапов дробления зиготы и отсеять неполноценные гаметы и порочные эмбрионы. Однако и в этом случае эффективность оценки результатов определяется разрешающей способностью методов оценки качества гамет, включаемых в программу оплодотворения, точно так же, как и состояния образующейся зиготы (Фанченко Н.Д. и др., 2000; Аншина М.Б., 2002; Светланов А.В. и др., 2002; Тишкевич O.JT. и др., 2004). В то же время в ходе естественного оплодотворения приходится полагаться лишь на суммарные показатели, характеризующие состояние половой системы в момент обследования -показатели спермограмм, характеристики циклической работы яичников, уровни гормонов и т.д. В связи с чем, бесплодие как актуальная проблема требует комплексного подхода к ее решению с изучением не только клинических аспектов заболевания, но и патогенетических молекулярпо-клеточных механизмов инфертйльности.
В настоящее время показано, что функционирование репродуктивной системы как у мужчин, так и женщин осуществляется при тесном взаимодействии с иммунной и эндокринной системами (Древаль А.В., 2001; Schlatt S. et al., 1997). Установлено, что пролактин способен вызывать активацию опосредованного макрофагами яичка синтеза TNF-a и как следствие уменьшение наработки стимулируемого гонадотропином тестостерона клетками Лейдига (Huang W.J. et al., 2003). Увеличение же уровня тестостерона усиливает клеточный иммунитет (Donat Н. et al., 2002). Поэтому, можно предположить, что не только локально синтезируемые цитокины, но и цитокины из общего сосудистого русла способны проявлять свои эффекты на тестикулярном уровне. О чем свидетельствуют факты активного участия цитокинов в формировании гамет и регуляции сперматогенеза (Hedger М.Р., Meinhardt А., 2003; Itman С. et al., 2006; Lui W.Y., Cheng C.Y., 2007), а также их вклада в иммуносупрессию семенной плазмы (Ochsenkuhn R. et al., 2006). У женщин, происходящие во время менструального цикла и беременности изменения контролируются со стороны гипоталамо-гипофизарной системы и являются прямым результатом индуцированного гормонами тканевого ремоделирования тканей яичника и слизистой матки. Действие гормонов на клеточном уровне реализуется через вовлечение множества пептидных ростовых факторов, среди которых особая роль отводится цитокинам, синтезируемым иммунокомпетентными клетками
Machelon V., Emilie D., 1997; Al-Harthi L. et al., 2000; Bornstein S.R. et al., 2004). Наряду с регуляцией овариальной функции клетки иммунной системы и продуцируемые ими цитокины выполняют исключительно важную роль в подготовке эндометрия к имплантации эмбриона, а впоследствии — в сохранении беременности (Sharkey А., 1998; Norwittz M.D. et al., 2001; Jones R.L. et al., 2004).
На сегодняшний день наиболее исследованными являются иммунологические аспекты, связанные физиологическим протеканием беременности и включающие изучение механизмов иммунологической перестройки, направленной на подавление реактивности иммунной системы матери по отношению к аллоантигенам плода. Вместе с тем роль иммунной системы в регуляции самых ранних этапов репродуктивного процесса - фолликуло-генеза, овуляции, доимплантационных этапов развития эмбриона и его имплантации, остаются существенно менее изученными (Buculmez О., Arici А., 2000; Szekeres-Bartho J., 2002). Учитывая тесную взаимосвязь иммунной и репродуктивной системы, становится очевидным, что наличие исходных иммунных дисфункций, а также развитие их в процессе стимуляции гиперовуляции может быть серьезной причиной низкого качества ооцитов, дефекта оплодотворения яйцеклетки, нарушения развития и имплантации эмбриона, и, в конечном итоге, невынашивания беременности (Speroff L. et al., 1999). Поэтому большой интерес представляет исследование показателей системного и локального иммунитета, а также овариальной функции в группах женщин, оппозитных по уровню фертильности, качеству эмбрионов, имплантации и клинической беременности. Исследования такого рода имеют большое теоретическое и практическое значение, поскольку позволяют осмыслить новые аспекты иммуно-эндокринной регуляции ранних этапов репродуктивного процесса и патогенеза бесплодия, а, также разработать прогностические критерии эффективности проведения вспомогательных репродуктивных технологий.
Цель. Изучить иммунопатогенетические особенности нарушения фертильной функции у мужчин и женщин, состоящих длительное время в бесплодном браке, и провести анализ изменений иммунного и цитокинового статуса в зависимости от эффективности программы вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
Задачи:
1. Исследовать особенности гормонального статуса и состояния микробиоценоза урогенитального тракта у мужчин и женщин из бесплодных супружеских пар, включенных в программу вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
2. Провести спермиологическое исследование с оценкой количества сперматозоидов, их двигательной способности и морфологических особенностей у мужчин, состоящих длительное время в бесплодном браке.
3. Изучить содержание цитокинов в спермальной плазме при нормоспермии и патоспермии у мужчин, состоящих длительное время в бесплодном браке и провести сравнительную оценку изменения характера цитокинового баланса в зависимости от степени лейкоцитоспермии.
4. Выявить закономерности взаимоотношений между морфологическими, функциональными характеристиками сперматозоидов и цитоки-нами спермальной плазмы у мужчин, состоящих длительное время в бесплодном браке.
5. Изучить особенности иммунитета женщин на этапах овариального цикла при его физиологическом течении и в условиях проведения контролируемой гиперстимуляции по программе вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
6. Провести анализ содержания цитокинов в фолликулярной жидкости на пике стимулированной суперовуляции и на этой основе оценить роль цитокинов в процессе созревания ооцитов.
7. Провести сравнительный анализ параметров иммунного и цитокинового статуса женщин в зависимости от эффективности вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
8. Проанализировать информативность и прогностическую значимость показателей иммунитета и овариальной функции в оценке эффективности лечения бесплодия с помощью вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
Научная новизна исследования.
Показано, что важным иммунопатогенетическим звеном нарушения фертильной функции у мужчин и женщин, состоящих длительное время в бесплодном браке, является нарушение цитокин-опосредованных и клеточно-опосредованных механизмов регуляции репродуктивного процесса в организме.
Впервые обнаружено, что нарушение локальной продукции цитокинов у мужчин из супружеских пар с бесплодием может негативно сказываться на подвижности и морфологии сперматозоидов и, как следствие, приводить к снижению их фертилизационного потенциала в условиях латентного воспалительного процесса в мужском репродуктивном тракте и эндокринной дисрегуляции сперматогенеза. Установлено, что при патоспермии в семенной плазме мужчин наблюдается повышенный уровень Thl/провоспалительных цитокинов (IFN-y, TNF-a, IL-1(3, IL-12) в сочетании с ростом хемокинов (IL-8, МСР-1, MIP-1(3) и дефицитом IL-7.
Впервые установлено, что на пике стимулированной суперовуляции происходит изменение баланса регуляторных факторов в сторону доминирования медиаторов с иммуносупрессорной, противовоспалительной и проапоптогенной активностью. Сдвиг баланса регистрируется как на системном (в крови), так и на местном (в фолликулярной жидкости) уровне и сочетается с увеличением доли циркулирующих регуляторных CD4+CD25+ Т-лимфоцитов, что свидетельствуют о супрессорной реорганизации цитокинопосредованных и клеточно-опосредованных иммунорегуляторных механизмов фолликулогенеза. .
Впервые дана характеристика цитокинового профиля микроокружения фолликула у женщин с бесплодием при проведении контролируемой суперстимуляции яичников по программе вспомогательных репродуктивных технологий ( ЭКО). Установлено, что усиление противовоспалительного и иммуносупрессорного потенциала фолликулярных факторов ассоциируется со снижением уровня IL-8 и IFN-y, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, G-CSF цитокинов.
Впервые показано, что у женщин с бесплодием в условиях фолликулярного многокомпонентного дефицита Thl/провоспалительных, ТЬ2/противоспалительных цитокинов, ростовых факторов и хемокинов нарушаются как количественные, так и качественные характеристики ооцитов, и как следствие — эффективность оплодотворения в культуре in vitro при проведении вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО). Баланс и уровень цитокинов в микроокружении фолликула не только определяет количество и качество созревающих ооцитов, но также имеют большое значение для имплантации оплодотворенных яйцеклеток.
Практическая значимость исследования.
В результате выполнения работы получены новые данные, позволяющие расширить существующие научные представления о роли иммунного и цитокинового -статуса в регуляции фертильной функции мужчин и женщин, а также раскрыть иммунно-патогенетических механизмы формирования бесплодного брака.
Комплексное исследование цитокинового спектра семенной и фолликулярной жидкости могут позволить выявить минимальные, «неочевидные» нарушения, которые в изолированном виде не являются определяющими для развития мужского или женского бесплодия, но становятся патогенетически значимыми, когда одновременно присутствуют у супругов, состоящих в бесплодном браке.
Комплексная оценка параметров иммунного и цитокинового статуса у женщин с бесплодием, обследованных на пике стимулированной суперовуляции, может использоваться в качестве ранних прогностических маркеров эффективности программы вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
Разработана методологическая основа для выделения диагностического комплекса признаков, прогнозирующего вероятность неэффективного цикла программы вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО), что может послужить дополнительной основой для изменения тактики лечения бесплодия.
Положения, выносимые на защиту.
1. Наиболее типичными особенностями патогенеза бесплодных пар являются наличие гормональной дисфункции, проявляющейся в андрогенной активности у мужчин и стероидогеннуой активности яичников у женщин, а также нарушение микробиоциноза урогенитального тракта.
2. В патогенезе нарушения сперматогенеза у мужчин из супружеских пар с бесплодием ведущая роль принадлежит изменению цитокинового баланса, что проявляется в увеличении содержания Thl/провоспалительных, цитокинов, хемокинов и снижением уровня ТЬ2/противоспалительных цитокинов в семенной плазме.
3. В овуляторный период менструального цикла на пике контролируемой суперовуляции по программе экстракорпорально оплодотворения у женщин с бесплодием происходит сдвиг баланса регуляторных факторов на системном и местном уровнях, что проявляется усилением иммуносупрессорной и противовоспалительной активности крови и фолликулярной жидкости.
4. Цитокины, продуцируемые в микроокружении фолликула, принимают активное участие в регуляции процесса созревания ооцитов, определяя не только количественные и качественные характеристики созревающих ооцитов, но также эффективность последующей имплантации оплодотворенных яйцеклеток и развитие беременности у женщин с бесплодием в цикле экстракорпорально оплодотворения.
5. Параметры иммунного и цитокинового статуса, а также показатели овариальной функции женщин, обследованных на этапе стимулированной суперовуляции, могут являться прогностическими критериями результативности экстракорпорального оплодотворения Объем и структура диссертации.
Диссертация изложена на 266 страницах печатного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав «Материалы и методы исследования», «Результаты собственных исследований», «Обсуждение собственных результатов», выводов, практических рекомендаций и списка цитируемой литературы. Список литературы включает 506 источников, из них 139 отечественных и 367 иностранных.
Заключение диссертационного исследования на тему "Патогенетические факторы бесплодия в браке как артерии прогноза эффективности вспомогательных репродуктивных технологий"
ВЫВОДЫ
1. У мужчин из супружеских пар с бесплодием лишь в 30% случаев показатели числа, морфологии и подвижности сперматозоидов соответствуют нормативным значениям, тогда как в 70% случаев обнаруживаются нарушения сперматогенеза. Частота встречаемости при патоспермии морфологически аномальных сперматозоидов составляет от 11,5 до 63,5% случаев. У мужчин с патоспермией фертилизационная активность сперматозоидов достоверно снижена (инд. опл. 60 ± 4,6% против 87 ± 4,6% при нормоспермии)
2. У мужчин из супружеских пар с бесплодием отмечаются признаки гормональной "дисфункции, что проявляется в достоверном снижении тестостерона и увеличении эстрадиола и пролактина в крови по сравнению с практически здоровыми мужчинами. У мужчин с патоспермией доля лиц с андрогенодефицитом составляет 61,5%, а гиперпролактинемией - 16%.
3. У женщин из супружеских пар с бесплодием, отмечается снижение концентрации эстрадиола в периовуляторный период и уменьшение продукции прогестерона в лютеиновую фазу цикла, что указывает на меньшую стероидогенную активность яичников в сравнении с практически здоровыми женщинами.
4. У большинства мужчин из супружеских пар с бесплодием определяется нарушение микробиоциноза урогенитального тракта. Картина нормоценоза уретры наблюдается только у 34,4% пациентов, а секрета предстательной железы - у 50,9%, тогда как у практически здоровых мужчин эти показатели составили соответственно 77,8% и 88,9%. У 33% пациентов с патоспермией выявляется лейкоцитоспермия, что свидетельствует о наличии латентного инфекционно-воспалительного процесса в урогенитальном тракте
5. У женщин из супружеских пар с бесплодием, условно-патогенные микроорганизмы (Escherichia coli, Staphylococcus, Streptococcus) обнаружены в 87,3% случаев.
6. У мужчин с патоспермией цитокиновый профиль семенной плазмы характеризуется повышенным содержанием провоспалительных медиаторов (IFN-y, TNF-a, "IL-1 (3, IL-12) в сочетании с увеличением уровня хемокинов (IL-8, МСР-1, MIP-1J3) и дефицитом IL-7, что свидетельствует об иммунной дисрегуляции сперматогенеза. Сравнительная оценка параметров спермограммы и цитокинового профиля спермальной плазмы у мужчин из супружеских пар с бесплодием показала наличие значимой положительной корреляционной связи между частотой встречаемости морфологически аномальных сперматозоидов с уровнем IL-1(3, MIP-ip, G-CSF и отрицательной с содержанием IL-5, IL-10 в семенной плазме.
8. У женщин из супружеских пар с бесплодием в овуляторный период менструального цикла при проведении контролируемой суперстимуляции яичников по программе вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО) увеличивается доля циркулирующих регуляторных CD4+CD25+T-лимфоцитов на фоне доминирующей иммуносупрессорной, противовоспалительной и проапоптогенной активности сывороточных и фолликулярных факторов. Наличие обратной корреляционной зависимости между количеством циркулирующих CD4+CD25+T-KneToic и концентрацией в фолликулярной жидкости IL-ip, TNF-a и IL-8, а также их прямая взаимосвязь с уровнем IL-4 свидетельствует о сопряженности цитокин-опосредованных и клеточно-опосредованных механизмов регуляции фолликулогенеза у женщин.
10. У женщин с бесплодием по программе вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО) на фоне пониженного в фолликулярной жидкости содержания IL-2, IL-4, IL-7 и G-CSF происходит снижение количества образующихся ооцитов. При наличии многокомпонентного дефицита Thl (IFN-y, IL-2), Th2 (IL-4, IL-6, IL-10), провоспалительных (IL-1(3, TNF-a, IL-12, IL-17) цитокинов, ростовых факторов (IL-7, G-CSF) и MIP-1(3 нарушаются качественные характеристики ооцитов, что приводит к снижению эффективности оплодотворения в культуре in vitro.
11. На основании математического анализа выделены диагностически значимые диапазоны параметров иммунного и цитокинового статуса, а также показателей овариальной функции, которые обладают высокой информативностью в раннем прогнозе эффективности лечения супружеского бесплодии с помощью программы вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО).
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Иммунологическое обследование супружеских пар с бесплодием, должно стать обязательным компонентов комплексного обследования при подготовке к применению методов экстракорпорального оплодотворения.
2. Супружеским парам с бесплодием, готовящимся к проведению экстракорпорального оплодотворения, рекомендуется проводить исследования уровней Thl/провоспалительных, ТЬ2/противовоспалительных цитокинов, факторов роста и хемокинов в семенной плазме и фолликулярной жидкости для выявления факторов риска неудачи предстоящей технологии.
3. Выделение групп риска по неудачному результату проведения экстракорпорального оплодотворения может осуществляться на основании прогностических критериев значимости показателей иммунитета и овариальной функции у женщин с бесплодием, участвующих в программе вспомогательных репродуктивных технологий.
4. При значениях IL-7 < 6 пкг/мл (ДК -8,1), IL-4 < 2 пкг/мл (ДК -7,3), IL-2 < 7 пкг/мл (ДК -6,3), G-CSF < 50 пкг/мл (ДК -7,3), М1Р-1|3 < 55 пкг/мл (ДК -5,2), IL-13 > 40 пкг/мл (ДК -5,1), IL-8 > 25 пкг/мл (ДК -4,0), ИСАф/ж < 0,49 расч ед (ДК — 8,7) в ФЖ, числа лимфоцитов в крови > 2,0 х 109/л (ДК -4,2), С08+Т-лимфоцитов > 32% (ДК -8,1), CD4+CD25+ Т-клеток < 6% (ДК -12,0), числа ооцитов, полученных на пике стимулированной суперовуляции < 4 (ДК - 3,6) и яйцеклеток хорошего качества < 66% (ДК - 11,0) нецелесообразно проведение процедуры в связи с отсутствием положительного результата экстракорпорального оплодотворения.
5. При значениях IL-4 > 8 пкг/мл (ДК +6,0), IL-7 > 11 пкг/мл (ДК +5,8), IL-2 > 26 пкг/мл (ДК +5,2), G-CSF > 157 пкг/мл (ДК +4,8), MIP-lp > 81 пкг/мл (ДК +3,6), IL-8 < 15 пкг/мл (ДК +4,8), IL-13 < 26 пкг/мл (ДК +4,0) в ФЖ, ИСАф/ж > 0,6 расч ед (ДК +3,0), числа лимфоцитоз в крови < 1,85 х 109/л (ДК +3,8), количества ооцитов, полученных при трансвагинальной пункции яичников > 8 (ДК +2,4) предпологается успешное развитие беременности в цикле экстракорпорального оплодотворения.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2008 года, Айзикович, Борис Исаевич
1. Адамян Л.В., Кулаков В.И. Эндометриозы. Руководство для врачей. М., 1998.
2. Адаскевич В.П. Инфекции, передаваемые половым путем. Руководство для врачей. М.: Медицинская книга, 1999.
3. Айламазов Э.К. Хламидийная инфекция в акушерстве и перинатологии (диагностика, профилактика, лечение). СПб., 1995
4. Анохин Л.В., Коновалов О.Е. Медико-социальные последствия бесплодия // Здравоохранение РФ. -1994. №1. - С. 16-20.
5. Антонов А.И. Микросоциология семьи. М.,1992. - 348 с.
6. Аншина М.Б. Принципы гормонального мониторинга в программе ЭКО // Проблемы репродукции.- 1995.- № 2 С. 43-45
7. Аншина М.Б. ВРТ: прошлое, настоящее, будущее // Проблемы репродукции. 2002.- № 3.- С. 6-15.
8. Артифексов С.Б., Артифексова А.А., Одинцов А.А. Анализ структуры мужской инфертильности // Актуальные вопросы урологии и андрологии. Н. Новгород, 1998. - С. 71-78
9. Артифексов С.Б., Артифексова А.А., Потемина Т.Е. Варикоцеле и инфертильность (обзор литературы) // Проблемы репродукции. — 2001.-№6.-С. 12-17
10. Артифексова А.А. Этиология и патогенез репродуктивных потерь при нарушении гаметогенеза у мужчин: Автореф. дис. д-ра мед. наук. Казань, 2000. - 40 с.
11. Асмолова А.К., Павлов О.В. Генитальный туберкулез у женщин // УМЖ. 2001. - № 4 (Т. 24). - С. 110-114
12. Асышбаева К.С., Джусупгалиева М.Х., Исенова С.Ш. и др. Микоплазменная инфекция среди больных с нарушением репродуктивной функции. Казань, 1996.-С. 128-129;
13. Айзятулов Р.Ф. Вирусные заболевания кожи и слизистых оболочек (этиология, патогенез, клиника, диагностика, лечение, профилактика). Киев, 2000. - 279 с.
14. Бабичев В.Н. Нейроэндокринная регуляция репродуктивной системы. Пущино, 1995. - 224 с.
15. Бабюк И.А., Федотов В.П., Цветкова П.Д., Найденко С.И., Черепков В.Н., Васякина JI.A., Побережная Н.В. Системное лечение рецидивирующего герпеса у мужчин // Здоровье мужчины. 2006. — № 3. — С.121-124
16. Базанов П. А., Волков Н.И. Миома матки и нарушения репродуктивной функции (обзор литературы) // Проблемы репродукции. — 2002. №4.-С. 16-18
17. Баскаков В.П. Состояние репродуктивной системы женщины при эндометриозе // Проблемы репродукции. 1995. - № 2. - С. 15-18.
18. Божедомов В.А., Лоран О.Б., Николаева М.А., Сухих Г.Т. Влияние антиспермальных антител на мужскую репродуктивную функцию. // Андрология и генитальная хирургия. 2000. - №2.- С.25-33.
19. Божедомов В. А., Лоран О.Б., Сухих Г. Т. Этиология и патогенез мужского аутоиммунного бесплодия. Часть 1. // Андрология и генитальная хирургия. 2001. - №1. - 27-33
20. Божедомов В. А., Лоран О.Б., Сухих Г. Т. Этиология и патогенез мужского аутоиммунного бесплодия. Часть 2. // Андрология и генитальная хирургия. -2001. №1. С. 34-39
21. Бондарев Д.А., Скорова Н.Е., Курносова Т.Р. Иммунологический аспект вспомогательных репродуктивных технологий // Андрология и генитальная хирургия. 2000. - №2. - С. 30-39
22. Брагина Е.Е., Орлова О.Е. Заболевания, передаваемые половым путем. М; 1998. -Вып 1.-С. 3-9.
23. Браверман Л.И. Болезни щитовидной железы. М: Медицина, 2000. - 432 с
24. Быков В.Л. Сперматогенез у мужчин в конце XX века (обзор литературы) // Проблемы репродукции. 2000. - № 1. - С. 27-30
25. Волков Н.И. Бесплодие при наружном генитальном эндометриозе (клиника, диагностика, патогенез, лечение): Дис. . д-ра мед. наук. Москва, 1996.
26. Воробьева О.А., Скрипкина О.А., Корсак B.C. Анализ морфологии сперматозоидов в программе ЭКО // Проблемы репродукции. — 1995.-№3.-С. 71-76.
27. Воробьева О.А., Потин В.В., Корсак B.C., Кирсанов А.А. и др. Особенности оплодотворения ооцитов и развития эмбрионов в культуре в зависимости от реакции яичников на стимуляцию суперовуляции // Проблемы репродукции. 1998. - № 5. - С. 53-58
28. Воробьева О.А., Кирсанов А.А., Потин В.В. Особенности оплодотворения ооцитов и развития эмбрионов в культуре у женщин с недостаточностью яичников // Проблемы репродукции-1999. № 4.- С. 17-21
29. Воробьева О.А. Особенности оплодотворения ооцитов и доимплантационного развития эмбрионов человека в зависимости от показателей гаметогенеза: Автореф.дис.д-ра биол. наук.-Ст-Петербург, 2001
30. Ворсанова С.Г., Шаронин В.О., Курило Л.Ф. Аномалии половых хромосом при нарушении репродуктивной функции у мужчин (Обзор литературы) // Проблемы репродукции. 1998. - № 2. - С. 12-21
31. Витязева И.И. Течение, ведение и исход беременностей после лечения бесплодия методами вспомогательной репродукции: Автореф. дис. .канд. мед. наук. Москва, 1999. - 20 с.
32. Вихляева Е.М. Руководство по эндокринной гинекологии. -Москва, 1997. 708 с.
33. Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ). Руководство по лабораторному исследованию спермы человека и взаимодействию спермы с цервикальной слизью / Пер. с англ. Тбилиси, 1988.
34. Галимов Ш.Н., Валеева Х.Г., Камилов Ф.Х. и др. Репродуктивное здоровье мужчины как индикатор экологического неблагополучия // Лечение бесплодия: нерешенные проблемы. Саратов 2001.-С. 15—16.
35. Гарбуз А.Е. Современное состояние проблемы по виелегочному туберкулезу //Проблемы туберкулеза. 1998. - № 2. — С. 32-33
36. Гапарян О.М., Штыкунова Е.В. Актуальные проблемы хламидийной инфекции: Обзор // РМЖ. 1997. - № 4. - С. 48-50
37. Гаспаров А.С., Волков Н.И., Корнеева М.Е. Трубно-перитонеальное бесплодие у женщин // Проблемы репродукции. 1999. - № 5.-С. 43-44.
38. Герасимов A.M. Причины бесплодия при наружном эндометриозе (обзор литературы) // Проблемы репродукции. 2006. - №5. -С 51-54
39. Гьюдайс Л.С. Имплантирующаяся оплодотворенная яйцеклетка и материнский организм // Проблемы эндокринологии. 1999.-№ 5. —С. 30-32
40. Гилязутдинов И.А. Нейроэндокринная патология в гинекологии и акушерстве. Руководство для врачей. -М.: МЕДпресс-информ, 2006.- 416 с.
41. Гладкова А.И. Гормональная регуляция мужского сексуального поведения (Обзор литературы)/ Проблемы репродукции. -1998—№ 6.-С.21-28
42. Глазкова Л.К., Герасимова Н.М. Заболевания, передаваемые половым путем.-М:, 1996.-Вып.4. С. 9 - 12.
43. Гланц С. Медико-биологическая статистика.- М.: Практика, 1998.- 459 с.
44. Гоголевский П.А., Витязева И.И., Буянова Е.В., Хилькевич Л.В. Достижение беременности при бесплодии, обусловленном ретроградной эякуляцией, с помощью ICSI // Проблемы репродукции — 1997.-№ 2.-С.47-49.
45. Гомберг М.А., Ковылок В.П. Хламидиоз и простатиты // ИППП. -2002.-№4.-С. 3-8.
46. Горюнов В.Г., Жиборев Б.Н., Евдокимов В.В. Причины и признаки мужского бесплодия. Рязань, 1993.
47. Грицуляк Б.В., Збиран Н.П. Влияние варикоцеле на сперматогенез и интерстициальные эндокриноциты // Морфология. Киев: Здоров'я, 1984; Вып. 9. - С. 71-73.
48. Дедов И.И., Мельниченко Г.А., Фадеев В.В. Эндокринология. -М.: Медицина; 2000. 632 с.
49. Дедов И.И., Мельниченко Г.А., Романцева Т.И. Синдром гиперпролактинемии.- Москва, 2004.
50. Демченко А.Н. Клиническая диагностика и терапия мужского препубертатного гипогонадизма: Метод, рекомендации.-Харьков, 2000.-16 с
51. Древаль А.В. Роль гормональных факторов в становлении мужской репродуктивной системы (лекция). // Андрология и генитальная хирургия. 2001. - №1. - С. 44-47
52. Дубчак А.Е. Эндометриоз и бесплодие. Дискуссионные аспекты лечения эндометриоза // Репродуктивное здоровье женщины 2007. Т. 2, № 31.-С. 37-40
53. Евдокимов В.В., Раков С.С., Липатова Н.А. и др. Комплексное лабораторное исследование эякулята при заболеваниях мужской реепродуктивной системы // Клин. лаб. 1995. - № 6. - С. 114-116
54. Евдокимов В.В., Ерасова В.И., Демин А.И. Функция репродуктивной системы у ликвидаторов // Мед радиол и радиац безопасность. 1995. -№ 1. - С. 142-143.
55. Евдокимов В.В., Ерасова В.И., Наджиорум Нгам-Асра, Тагирова А.К., Терентьев А.А. Сравнительное изучение влияния пептидов AFP FPP и оуабаинана подвижность сперматозоидов // Андрология и генитальная хирургия. 2003. - №2. - С. 67-69
56. Здановский В.М., Гоголевский П.А., Хилькевич Л.В. Первые положительные результаты лечения мужского бесплодия методоминтрацитоплазматической инъекции сперматозоида в яйцеклетку // Проблемы репродукции. 1996. - № 2. - С. 53-56
57. Иен С.С.К., Джаффе Р.Б. Репродуктивная эндокринология. Пер. с англ. -М.: Медицина, 1998.
58. Кашкин К.П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность // Клин. лаб. диагностика. 1998. - № 11.- С.21-32.
59. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С., Воробьев А.А. Эндогенные иммуномодуляторы. СПб: Гиппократ, 1992. - 256 с.
60. Кетлинский С.А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета // Иммунология. 2002. - Т. 23, № 2.- С.77 79.
61. Кирпатовский И.Д. Очерки по хирургической андрологии. М: Ун-т дружбы народов, 1989. 124 с.
62. Кирьянов А.В., Калинченко С.Ю. Задержка полового развития у мальчиков // Андрология и генитальная хирургия. — 2003. №2. - С. 20-29
63. Китаев Э.М., Никитин А.И., Молчанов А.А., Стажков Н.В. Короткая схема стимуляции сперматогенеза гонадотропинами в процедурах вспомогательной репродукции // Проблемы репродукции, N1-1999, с.32-34
64. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания гениталий. — М:, 1995. С. 174 - 224.
65. Козлова С.И., Демикова Н.С., Семанова Е., Блинникова О.Е. Наследственные синдромы и медико-генетическое консультирование. М: Практика, 1996. - 305 с.
66. Кондриков Н.И. Структурно-функциональные изменения эндометрия под воздействием стероидных гормонов // Журнал практическая гинекология. 1999. - Т. 1, № 1. - С. 12-19.
67. Коробейникова Э.А. и др. К вопросу о частоте и клинических особенностях урогенитального хламидиоза // Труды ИГМИ. — 1995. Том 33. -С. 166-168
68. Коростелев А.А., Южалина И.В., Гольдшмидт Н.А., Полуэктова С.Б. Определение иммуномодулирующих свойств сыворотки крови в диагностике иммунопатологических состояний. — Мет. рекомендации МЗ РФ., Кемерово, 1995.- 35 с.
69. Корнеева И.Е. Современная концепция диагностики и лечения бесплодия в браке: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. М., 2003
70. Корякин М.В., Акопян А.С. Анализ причин мужского бесплодия // Проблемы репродукции. 2000. - № 5. - С.62-64
71. Краснопольский В.И., Буянова С.Н., Щукина Н.А. Гнойные воспалительные заболевания придатков матки. М.: МЕДпресс, 1999. - 233 с.
72. Краснопольская К.В., Штыров С.В., Бугеренко А.Е., Чеченова Ф.К. Хирургическое лечение трубного бесплодия (обзор литературы) // Проблемы репродукции. 2000.- №4.- С. 55-59
73. Крыжановский Г.Н. Общая патофизиология нервной системы / Г.Н. Крыжановский. М.: Медицина, 1997. -352 с.
74. Кузнецов В.П., Беляев Д.Л., Бабаянц А.А. Концепция иммунокоррекции при многофакторных иммунодефицитных состояниях, инфекционных и онкологических заболеваниях // Журнал микробиологии эпидемиологии и иммунобиологи. 1996.- №5.- С. 104-110.
75. Кузнецов В.П. Интерфероны в каскаде цитокинов: исторический и современный аспекты //Антибиотики и химиотерапия. — 1998. № 5. - С. 28-40.
76. Кулаков В.И. Овсянникова Т.В. Значение лапароскопии в клинике бесплодия: структура и частота патологии, эффективность лечения // Проблемы репродукции. — 1996. № 2. - С. 35-38.
77. Кулаков В.И., Леонов Б.В., Фанченко Н.Д., Щедрина P.M., Яворовская К.А. Состояние репродуктивной системы супружеских пар, включенных в программу ЭКО // Проблемы репродукции. -1998. № 3. - С. 55-58
78. Кулаков В.И., Сухих Г.Т., Гатаулина Р.Г. Апоптоз в клинике гинекологических заболеваний (обзор литературы) // Проблемы репродукции. 1999. - №2. - С. 37-40
79. Кулаков В.И., Леонов Б.В. Экстракорпоральное оплодотворение в лечении женского и мужского бесплодия. М., 2000.
80. Кулаков В.И., Маргиани Ф.А., Назаренко Т.А. и др. Структура женского бесплодия и прогноз восстановления репродуктивной функции при использовании современных эндоскопических методов // Акуш. и гин. — 2001.-№3.-С. 33-39.
81. Кулаков В.И., Леонова Б.В., Кузьмичева Л.Н. Лечение женского и мужского бесплодия. М: МИА, 2005
82. Кулаков В.И. Бесплодный брак. Современные подходы к диагностике и лечению.- Изд-во: ГЭОТАР-Медиа, 2006. 616 с
83. Кунин А.И. Бесплодный брак. М: Педагогика, 1989. - 211 с.
84. Курило Л.Ф. Генетически обусловленные нарушения мужской репродуктивной системы //Сексология и андрология. Киев, 1996. — С. 28 -46.
85. Курило Л.Ф., Евдокимов В.В., Ерасова В.И., Шилейко Л.В. Влияние облучения на состояние сперматогенеза родителей и потомства // Проблемы репродукции. — 2000. №1. — С. 54-58
86. Леонов Б.В., Яворовская К.А., Кузьмичев Л.Н., Щедрина Р.Н., и др. Особенности функционального состояния репродуктивной системысупружеских пар программы ЭКО/ПЭ / Проблемы эндокринологии в акушерстве и гинекологии. -М.: 1997. С. 70
87. Леонтьева О.А., Воробьева О.А. Сравнительный анализ морфологии сперматозоидов человека: нативный эякулят прогрессивно подвижная фракция // Проблемы репродукции. 1999. - № 3. - С. 29-36
88. Лесков В.П., Гаврилова Е.Ф., Пищулин А.А. Изменения иммунной системы при внутреннем эндометриозе // Проблемы репродукции. -1998. -№ 4. С. 26-30
89. Мамина В.П. О механизмах действия малых доз ионизирующей радиации на сперматогенный эпителий // Пробл. репродукции.- 2003. №2.-С. 22-24.
90. Манухин И.Б., Геворкян М.А., Кушлинский Н.Е. Синдром поликистозных яичников. -М.: ООО МИА, 2004. 192 с.
91. Мерзляков В.А., Коробейникова Э.А. // Труды ИГМА. 1997. -Том 35.-С. 153 - 154.
92. Молочков В.А., Ильин И.И. Хронический уретрогенный простатит. М.: Медицина, 1998. - 304 с
93. Морозов П.Г. Новые перспективы клинического применения гонадотропинов в андрологии // Andrology, reproductology, sexology, 1993; 2: 3:29-33
94. Назаренко Т.А., Дуринян Э.Р., Перминова С.Г. Современные подходы к диагностике и лечению бесплодия у женщин // Consilium Med. -2004. Том 6, № 6. - С. 20-24
95. Национальный регистр ВРТ-2000 г. Сводный отчет // Проблемы репродукции. 2002.- № 6.- С. 5-7
96. Некрасова М.Ф. Роль неклассических гиперандрогений у женщин в развитии дисгонадотропизма // Эндокринная регуляция физиологических функций в норме и патологии. Новосибирск, 2002.
97. Никитин А.И. Факторы неудач в программах вспомогательной репродукции. // Проблемы репродукции.- 1995.- № 2.- С. 36-37
98. Овсянникова Т.В. Гормонотерапия бесплодного брака: Практическое руководство. — М.: Органон, 1997.
99. Овсянникова Т.В., Корнеева И.Е. Бесплодный брак // Акуш и гин 1998.-№. 1.-С. 32-36.
100. Овсянникова Т.В. Эндокринное бесплодие у женщин при гиперпролактинемии // Репродуктивное здоровье женщины. 2007. — Том 1, №30.-С. 45-48
101. Ориел Дж. Д., Риджуэй Д.А. Хламидиоз: Пер. с англ. М 1984.
102. Останин А.А., Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Шевела Е.Я. и др. Цитокин-опосредованные механизмы развития системной иммуносупрессии у больных с гнойно-хирургической патологией // Цитокины и воспаление. -2002.-Том 1,№ 1.- С. 38-45.
103. Останин А.А., Айзикович Б.И., Черных Е.Р. Цитокиновый профиль семенной плазмы человека // Проблемы репродукции. 2006. - № 6. -С. 65-74.
104. Пепперел Р.Дж., Хадсон Б., Вуд К. Бесплодный брак. М. Медицина, 1986. - 336 с.
105. Пшеничникова Т.Я. Бесплодие в браке. М.: Медицина, 1991. —318 с.
106. Райцина С.С. Сперматогенез и структурные основы его регуляции.- М.: Наука, 1985.-205 с.
107. Светлаков А.В., Яманова М.В., Салмина А.Б., Серебренникова О.А. Вероятность наступления имплантации у женщин с разными формами бесплодия при лечении методом ЭКО // Проблемы репродукции.- 2002.- № 3.- С. 61-66.
108. Светлаков А.В., Яманова М.В., Егорова А.Б., Михуткина С.В. Молекулярно-биологические аспекты имплантации у человека и животных // Проблемы репродукции. 2002. - № 2. - С. 16-28
109. Сексопатология: Справочник / Под ред. Г.С. Васильченко. М.: Медицина; 1990. - 576 с.
110. Ш.Селезнева Н.Д. Хирургическое лечение трубного бесплодия и стерилизация / Оперативная гинекология // под ред. В.И. Кулакова. М: Медицина, 1998. С. 336-342.
111. Серов В.Н., Прилепская В.Н., Овсянникова Т.В. Гинекологическая эндокринология. — М.: МЕДпресс-информ, 2004. 528 с.
112. Сизякин Д.В. Некоторые механизмы формирования бесплодия при варикоцеле: Автореф. дис. на .к. м. н. Москва,1996. - 21 с.
113. Симбирцев А.С. Биология семейства интерлейкина-1 человека // Иммунология. 1998. - № 3. - С. 9-17.
114. Симбирцев А.С. Цитокины новая система регуляции защитных реакций организма// Цитокины и воспаление. - 2002. - Т. 1, № 1. - С. 9-17.
115. Симбирцев А.С. Цитокины: классификация и биологические функции // Цитокины и воспаление. 2004. - Т. 3, №2.- С.16- 21
116. Сметник В.П., Тумилович Л.Г. Неоперативная гинекология: Руководство для врачей. М.: ООО МИА, 2000. - 592 с
117. Смирнов В.В. Врожденная дисфункция коры надпочечников // Лечащий Врач. 1998. - № 4, - С. 33-35
118. Стрижаков А.Н., Давыдов А.И. Эндометриоз. Клинические и теоретические аспекты. -М., 1996. С. 206-207.
119. Стрижаков А.Н., Давыдов А.И., Белоцерковцева Л.Д. Клинические лекции по акушерству и гинекологии. М.: Медицина, 2000
120. Судаков К.В. Функциональные системы организма / К.В. Судаков М: Медицина, 1987.- 432 с.
121. Сухих Г.Т., Ванько Л.В., Кулаков В.И. Иммунитет и генитальный герпес. Н. Новгород: НГМА, 1997. - 224 с.
122. Сухих Г.Т. Ваиько JI.B. Иммунология беременности. Изд.: РАМН, 2003.- 400 с.
123. Тер-Аванесов Г.В., Овсянникова Т.В., Кулаков В.И., Нерсесян Р.А. Эндокринное бесплодие у мужчин // Проблемы репродукции. — 1997. -№4. с. 17-21
124. Тиктинский O.J1. Руководство по андрологии. JI: Медицина, 1990.-416 с.
125. Тимченко В.Н. Эпидемический паротит (эволюция, причина бесплодного брака, современная терапия и экстренная профилактика). — Изд-во: ЭЛБИ-СПб, 2007. 260 с.
126. Тишкевич О.Л., Жабинская А.Б., Малышева А.В. Клинико-эмбриологическая оценка результатов экстракорпорального оплодотворения в зависимости от возраста пациенток. // Проблемы репродукции.- 2004.- № 2.- С. 33-37.
127. Тупицын Н.Н. Роль рецептора цитокинов gpl30 в гемопоэзе // Современная онкология. 2001. - Т.З, № 1. — С. 20-23
128. Хонина Н.А., Дударева А.В., Тихонова М.А., Леплина О.Ю. и др. Нарушение механизмов активной иммуносупрессии при беременности, осложненной гестозом // Бюллетень СО РАМН. 2003. - № 3. - С. 73-76
129. Хонина Н.А., Айзикович И.В., Шевела Е.Я., Тихонова М.А. и др. Регуляторные факторы и цитокины в сыворотке и фолликулярной жидкости у женщин при контролируемой овариальной гиперстимуляции // Цитокины и воспаление.- 2005. Т.4, №2.- С.38-44.
130. Фанченко Н.Д., Леонов Б.В., Щедрина Р.Н., Кузмичев Л.Н. и др. Об эффективности экстракорпорального оплодотворения. // Проблемы репродукции.- 2000.- № 5.- С. 22-26.
131. Фетисова И.Н. Наследственные факторы при различных формах нарушения репродуктивной функции супружеской пары: Автореф.д.м.н, Москва, 2007.-42 с.
132. Филиппов О.С. Бесплодный брак в Западной Сибири: Дисс. д-ра мед. наук. Томск, 1999. — 43 с.
133. Фильченков А.А., Залесский В.Н., Стойка Р.С. TGFB: Проатерогенный или антиатерогенный цитокин? // Журнал Цитокины и воспаление. 2002. - № 1.-39-44
134. Шабалина Н.В., Длин В.В., Малиновская В.В., и др. Интерфероновая система человека: Биологическая роль и взаимосвязь с иммунной системой // Российский вестник перинаталогии и педиатрии.-1995,-№5.- С. 29-35.
135. Шибаев Г.П., Рахимбеков М.О., Нильдабаев Б.А. Грыжесечение как причина ятрогенного бесплодия у мужчин // Здравоохранение Казахстана. 1988. - № 3. - С. 70-71.
136. Шинский Г.Э., Мерзляков В.А., Тимофеева С.Б. Эпидемиологические аспекты хламидийной инфекции // Вестник дерматологии и венерологии. 1999. -№ 1.-С. 11-13.
137. Юнда И.Ф., Иванюта Л.И., Имшенецкая Л.П. Бесплодие в супружестве. Киев: Здоров' я, 1990. - 463 с.
138. Agarwal A., Prabakaran S.A., Sikka Suresh С. Clinical Relevance of Oxidative Stress in Patients With Male Factor Infertility: Evidence-Based Analysis // AUA Update Series. 2007. - Vol. 26, Les. 1
139. Adachi H, Waza M, Katsuno M, Tanaka F, Doyu M, Sobue G. Pathogenesis and molecular targeted therapy of spinal and bulbar muscular atrophy //Neuropathol Appl Neurobiol. -2007. Vol. 33, N 2. - P. 135-51
140. Aitken RJ, Baker MA. Reactive oxygen species generation by human spermatozoa: a continuing enigma // Int J Androl. 2002. - Vol. 25. - P. 191-4.
141. Al-Harthi L., Wright D.J., Anderson D., et al. The impact of the ovulatory cycle on cytokine production: evaluation of systemic, cervicovaginal and salivary compartments. // J. Interferon & Cyt. Res.- 2000.- Vol. 20, N 8.- P. 719724
142. Alicani M., Calderon G., Tomkin G., Garrisi J. et al. Cleavage anomalies in early human embryos and survival after prolonged culture in vivo // Hum Reprod.-2000.-Vol. 15, N 12.-P. 2634—2643
143. Andersson P, Varenhorst E, Soderkvist P. Androgen receptor and vitamin D receptor gene polymorphisms and prostate cancer risk // Eur J Cancer. -2006. Vol. 42, N 16. - P. 2833-7.
144. Antinori S., Versaci C., Dani G. et al. Fertilization with testicular human spermatids: four successful pregnancies // Hum Reprod. 1997. — Vol. 12. -P. 286-291
145. Araki M., Fukumatsu Y., Katabuchi H. et al. Follicular development and ovulation in macrophage colony-stimulating factor-deficient mice homozygous for osteopetrosis (oo) mutation. // Biol. Reprod.- 1996.- Vol. 54.- P. 478-484.
146. Arici A., Head J.R., MacDonald P.C., Casey M.L. Regulation of IL-8 gene expression in human endometrial cells in culture. // Mol. Cell. Endocrinol.-1993-Vol. 94-P. 195-204
147. Arici A., Oral E., Bukulmez O., Duleba A. et al. The effect of endometriosis on implantation: results from the Yale University in vivo fertilization and embryo transfer program // Fertil Steril. 1996. - Vol. 65. - P. 603—607
148. Arici A., Oral E., Bukulmez O. IL-8 expression and modulation in human preovulatory follicles and ovarian cells. // Endocrinol.- 1996- Vol. 137.- P. 3762-1369.
149. Arici A., Oral E., Bahtiyar O., et al. LIF expression in human follicular fluid and ovarian cells. // Hum. Reprod.- 1997- Vol. 12.- P. 1233-1239.
150. Arici A., Oral E., Bukulmez O., et al. MCP-1 expression in human preovulatory follicles and ovarian cells. // J. Reprod. Immunol.- 1997- Vol. 26.- P. 201-10.
151. Ashman LK. The biology of stem cell factor and its receptor c-kit // Int JBiochem Cell Biol. 1999.-Vol. 31.-P. 1037-51
152. Ayala A., Herdon C.D., Ayala C.A. et al. Differential induction of apoptosis in lymphoid tissues during sepsis: variation in onset, frequency, and the nature of mediators. // Blood. 1996.- Vol. 87.- P. 4261-4275.
153. Ayala A., Chung C.-S., Song G.Y. IL-10 mediation of activation-induced Thl cell apoptosis and lymphoid dysfunction in polymicrobial sepsis // Cytokine.- 2001.- Vol. 14.- P. 37-48.
154. Bahamondes L., Bueno J.C.R., Hardy E. et al. Edentification of main risk factors for tubal infertility // Fertil Steril. 1994. - Vol. 61. - P. 478-482.
155. Balaban В., Isiklar A., Aksoy S. et al. Incubation of testicular spermatozoa with recombinant FSH for 24 h prior to ICSI improves sperm motility, fertilization rate and embryo quality // Human Reprod. 1998. — Vol. 13, N l.-P. 269-270
156. Bar-Chama N. Goluboff E., Fisch H. Infection and pyospermia in male infertility. Is it really a problem? // Urol Clin North Am. 1994. - Vol. 21. -P. 469-475
157. Barnhart K., Dunsmoor-Su R., Coutifaris C. Effect of endometriosis on in vitro fertilization. // Fertil. Steril.- 2002.- Vol. 77.- P. 1148-1155
158. Barratt C.L., Harrison P.E., Robinson A., Cooke I.D. Antisperm antibodies and lymphocyte subsets in semen not a simple relationship.// Int. J. Androl.- 1990.- Vol. 13, № 1.- P. 50-58.
159. Bartocci A., Pollard J.W., Stanley E.R. Regulation of colony-stimulating factor 1 during pregnancy. // J. Exp. Med.- 1986.- Vol. 164.- P. 956961
160. Baschat A.,Kupker W., Al Hasani S. et al. Results of cytogenetic analysis in men with severe subfertility prior to intracytoplasmic sperm injection // Hum Reprod.- 1996.-Vol. 11.-P. 330-333
161. Basu S., Aballa T.C., Ferrell S.M. et al. Inflammatory cytokine concentrations are elevated in seminal plasma of men with spinal cord injuries // J Androl. 2004. - Vol. 25, N 2. - P. 250-254.
162. Bergere M., Lombroso R., Gombault M., Wainer R. et al. An idiopatic infertility with oocytes metaphase I maturation block // Hum Reprod. — 2001. Vol. 16, N 10. -P. 2136—2138
163. Best C.L., Pudney J., Welch W.R., et al. Localization and characterization of white blood cell populations within the human ovary throughout the menstrual cycle and menopause. // Hum. Reprod.- 1996.- Vol. 11.-P. 790-797.
164. Bohring, C., Krause, E., Habermann, В., Krause, W., Isolation and identification of sperm membrane antigens recognized by antisperm antibodies, and their possible role in immunological infertility disease // Mol. Hum. Reprod. -2001.-Vol. 7.-P. 113-118
165. Bourne H., Watkins W., Speirs A., Baker H. Pregnancies after intracytoplasmic injection of sperm collected by fine needle biopsy of the testis // Fertil Steril. 1995. - Vol. 64. - P. 433-436
166. Branca AA, Franke MA, Sluss PM, Reichert Jr LE. Interferon inhibits FSH-stimulated estradiol production in rat Sertoli cell cultures // Med Sci Res. -1987.-Vol. 15.-P. 739-43.
167. Brannstrom M., Bonello N., Norman R.J., Robertson S.A. Reduction of ovulation rate in the rat by administration of neutrophil-depleting monoclonal antibody. // J. Reprod. Immunol.- 1995.- Vol. 29.- P. 265-270.
168. Brannstrom M., Pascoe V., Norman R.J., McClure N. Localization of leukocyte subsets in the follicle wall and in the corpus luteum throughout the human menstrual cycle. // Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol.- 1999.- Vol. 83.-P. 213-217.
169. Boockfor FR, Shwarz LK. Effects of interleukin-6, interleukin-2, and tumor necrosis factor a on transferrin release from Sertoli cells in culture // Endocrinology. 1991. -Vol. 129. - P. 256-62.
170. Bukovsky A., Chen T.T., Wimalasena J., Caudle M.R. Cellular localization of luteinizing hormone receptor immunoreactivity in the ovaries of immature, gonadotropin-primed and normal cycling rats. // Biol. Reprod.- 1993-Vol. 48.-P. 1367-1382
171. Burke F., Relf M., Negus R., Balkwill F.A. Cytokine profile of normal and malignant ovary. // Cytokine- 1996.- Vol. 8.- P. 579-585.
172. Buscher U., Chen F.C., Kentenich H., Schmiady H. Cytokine in follicular fluid of stimulated and non-stimulated human ovaries; is ovulation a suppressed inflammatory reaction? // Hum. Reprod. 1999.- Vol. 14.- P. 162-166
173. Cahill DJ, Wardle PG, Maile LA et al. Pituitary-ovarian dysfunction as a cause for endometriosis-associated and unexplained infertility // Hum Reprod. 1995.-Vol. 10, N 12.-P. 3142-6.
174. Candiani G. В. et al. Mild endometriosis and infertility: a critical review of epidemiologic data, diagnostic pitfalls, and classification limits // Obstet Gynecol Survey. 1991. - Vol. 46. - P. 374
175. Carbone D.J. Jr., Shah A., Thomas A.J. Jr, Agarwal A. Partial obstruction, not antisperm antibodies, causing infertility after vasovasostomy.// J. Urol.- 1998.- Vol. 159, N3.-P. 827-830.
176. Castilla J.A., Sampalo A., Molina R., et al. Mononuclear cell subpopulations in human follicular fluid from stimulated cycles. // Am. J. Immunol. Reprod. 1990.- Vol. 22.- P. 127-129.
177. Castro A., Castro O., Troncoso J.L., et al. Luteal leukocytes are modulators of the steroidogenic process of human mid-luteal cells // Hum.Reprod.-1998. Vol. 13. - P. 1584-1589.
178. Catizone A., Ricci G., Galdieri M. Functional role of hepatocyte growth factor receptor during sperm maturation // J Androl. 2002. - Vol. 23, N 6. -P. 911-918.
179. Centers for Control and Preventation. Guidelines for treatment of sexually transmitted diseases // MMWR. 1998. - Vol. 47, NO R.R.I.
180. Chang R.J., Gougeon A., Erikson G.F. Evidence for a neutrophil-interleukin-8 system in human folliculogenesis. //Am. J. Obstet. Gynecol.- 1998.-Vol. 178.-P. 650-657
181. Chedid S. et al. Comparison among different ovarian stimulation regimens for assisted procreation procedures in patients with endometriosis// Hum Reprod. 1995.-Vol. 10, N9.-P. 2406-2411
182. Chegini N., Flanders K.C. Presence of TGF-b and their selective cellular localization in human // Endocrinol.- 1992.- Vol. 130,- P. 1303-1307
183. Cianci A., Calogero A.E., Palumbo M.A., et al. Relationship between TNF-a and sex steroid concentrations in the follicular fluid of women with immunological infertility. // Hum. Reprod.- 1996.- Vol. 11.- P. 256-258.
184. Cohen P.E., Zhu L., Pollard J.W. Absence of colony stimulating factor-1 in osteopetrotic (csfmop/csfmop) mice disrupts estrous cycles and ovulation. // Biol. Reprod.- 1997.- Vol. 56.- P. 110-118.
185. Cohlen В J, te Velde ER, Scheffer G et al. The pattern of the luteinising hormone surge in spontaneous cycles is related to the probability of conception // Fert Ster. 1993. - Vol. 60. - P. 413-7
186. Coskun S., Uzumcu M., Jaroudi K., et al. Presence of LIF and IL-12 in human follicular fluid during follicular grouwth. //Am. J. Reprod. Immunol.-1998.- Vol. 40.-P. 13-18
187. Craft I., Bennet V., Nicholson N. Fertilising ability of testicular spermatozoa // Lancet. 1993. - Vol. 342. - P. 864
188. Crockett-Tobari E., Fantone J.C. The selectines: insights into selectin-induced intracellular signaling in leukocytes. // Immunol. Res.- 1995.-Vol. 14.-P. 237-251
189. Croy B.A., Ashkar A.A., Minhas K., Greenwood J.D. Can murine uterine NK cells give insights into the pathogenesis of preeclampcia? // J. Soc. Gynecol. Invest.- 2000,- Vol. 7.- P. 12-20
190. Cua D.J., Stohlman S.A. In vivo effect of T helper cell type 2 cytokines on macrophage antigen-presenting cell induction of T helper subsets. // J. Immunol.- 1997.- Vol. 159.- P. 5834-5840
191. Dalton D.K., Pitts-Meek S., Keshav S., et al. Multiple defects of immune cell function in mice with disrapted IFNg genes. // Science. 1993. - Vol. 259.- P.1739-1742.
192. D'Cruz O.J., Haas G.G. Jr. Betta 2-Integrin (CDllb/CDI8) is the primary adhesive glycoprotein complex involved in neutrophil-mediated immune injury human sperm.// Biol. Reprod.- 1995.-Vol. 53. P. 1118-1130
193. De Kretser D.M., Loveland K.L., Meinhardt A., Simorangkir D., Wreford N. Spermatogenesis // Hum Reprod. 1998. - Vol. 13 (Suppl 1). - P. 1-8.
194. De Los Santos M.J., Mercader A., Frances A. et al. Immunoreactive human embryonic interleukin-1 system and endometrial factors regulating theirsecretion during embryonic development. // Biol. Reprod.- 1995.- Vol. 54.- P. 563574
195. Desai N., Scarrow J., Kinzer D., Goldfarb J. Evaluation of the effect of IL-6 and human extracellular matrix on embrionic development. // Hum. Reprod.- 1999.-Vol. 14.-P. 1588-1592
196. Devroey P., Nagy Z., Tournaye H. et al. Outcome of itracytoplasmic sperm injection with testicular spermatozoa in obstructive and non-obstructive azoospermia // Hum Reprod. 1996. - Vol. 11. - P. 1015-1018
197. Dinarello C. Proinflammatory cytokines // Chest. 2000. - Vol. 118. -P. 503-508
198. Dinarello C.A Anti-inflammatory cytokines and cytokine antagonists. // Curr. Pharm. Des. 2000. - Vol. 6, N. 6. - P. 633-649
199. Dousset В., Hussenet F., Daudin M. et al. Seminal cytokine concentrations (IL-lbeta, IL-2, IL-6, sRIL-2, sRIL-6), semen parameters and blood hormonal status in male infertility // Hum Reprod. 1997. — Vol. 12, N 7. - P. 1476-1479.
200. Drake P.M., Gunn M.D., Charo I.F., et al. Human placental cytotrophoblasts attract monocytes and CD56(bright) natural killer cells via the actions of monocyte inflammatory protein-1 alpha. // J. Exp. Med.- 2001.- Vol. 193.-P. 1199-1212
201. Droesch K., Fulgham D.L., Liu H.C., et al. Distribution of T cell subsets in follicular fluid. // Fertil. Steril.- 1988.- Vol. 50.- P. 618-621
202. Duriglision G.F., Barlow D.H., Sargent I.L. LIF significantly enhances the blastocyst formation rates of human embryos cultured in serum-free medium. //Hum. Reprod.-1996.- Vol. 11.- P. 191-196
203. Eggert-Kruse W., Probst S., Rohr G., Tilgen W., Runnebaum B. Induction of immunoresponse by subclinical male genital tract infection? // Fertil Steril. 1996. -Vol. 65.-P. 1202-1209
204. Eggert-Kruse W., Boit R., Rohr G. et al. Relationship of seminal plasma interleukin (IL)-8 and IL-6 with semen quality // Hum Reprod. — 2001. — Vol. 16, N3.-P. 517-528.
205. Erlebacher D., Zhang A.F., Parlow В., Glimcher L.H. Ovarian insufficiency and early pregnancy loss induced by activation of the innate immune system. // J. Clin. Invest.- 2004.- Vol. 114, N 1.- P. 39-48.
206. Espey L.L. Current status of the hypothesis that mammalian ovulation is comparable to an inflammatory reaction. // Biol. Reprod. 1994. - Vol. 50. - P. 233-238.
207. Gallinelli A., Ciaccio I., Gianella L. Correlation between concentrations of 11-12 and IL-13 and lymphocyte subsets in the follicular fluid of women with and without polycystic ovary syndrome // Fertil. Steril.- 2003.- Vol. 79.-P. 1365-1372
208. Gamble J.R., Rand Т.Н., Lopez A.F., et al. Heterogeneity of recombinant granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-mediated enhancement of neutrophil adherence to endothelium // Exp. Hematol.- 1990.- Vol. 18.-P. 897-902
209. Garcia-Velasco J.A., Arici A. Chemokines and human reproduction. //Fertil. Steril.- 1998.- Vol. 71.- P. 983-993
210. Garrido N., Navarro J., Garcia-Velasco J., Remohi J. et al. The endometrium versus embryonic quality in endometriosis-related infertility // Hum Reprod Update. 2001. - Vol. 8, N 1. - P. 95—103
211. Gasson J.C. Molecular physiology of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor.//Blood.- 1991.-Vol. 77.-P. 1131-1145
212. Gaytan, F., Carrera, G., Pinilla, L., Aguilar, R., Bellido, C., Mast cells in the testis, epididymis and accessory glands of the rat: effects of neonatal steroid treatment//J. Androl. 1989.-Vol. 10.-P. 351-358
213. Gazvani M.R., Bates M., Vince G., et al. Follicular fluid concentrations of IL-12 and IL-8 in IVF cycles. // Fertil. Steril. 2000. - Vol. 74. -P. 953-958.
214. Genazzani A.D., Stomati M., Bersi C. Pivagabine decreases stress-related hormone secretion in women with hypothalamic amenorrhea // J Endocrinol Invest. 2000. - Vol. 23, N 8. - P. 526-32.
215. Geva E., Lessing J.B., Lerner-Geva L., et al. Interleukin-10 in preovulatory follicular fluid of patients undergoing in-vitro fertilization and embryo transfer. // Am. J. Reprod. Immunol.- 1997.- Vol. 37.- P. 187-190
216. Gil-Salom M., Romero J., Minguez Y. et al. Pregnancy in an azoospermic patient with markedly elevated serum follicle stumulating hormone leveles //Fertil Steril. 1995. -Vol. 64. - P. 1218- 1220
217. Gnessi L, Fabbri A, Spera G. Gonadal peptides as mediators of development and functional control of the testis: an integrated system with hormones and local environment // Endocr Rev. — 1997. -Vol. 18. — P. 541-609.
218. Goncalves J., Rocha Т., Vale F. et al. Delineation of genetic basis of azoospermia // Eur J Hum Genet. 1996. -N 4. - P. 1-21
219. Gorelick J., Goldstein M. Loss of fertility in men with varicocele // Fertil Steril. 1993. - Vol. 59. - P. 613-616
220. Griveau J.F., Le Lannou D. Reactive oxygen species and human spermatozoa: physiology and pathology // Int J Androl. 1997. - Vol. 20. - P. 61.
221. Guo H, Calkins JH, Sigel MM, Lin T. Interleukin-2 is a potent inhibitor of Leydig cell steroidogenesis // Endocrinology. — 1990. Vol. 127. — P. 1234-9.
222. Gutsche S., von Wolff M., Strowitzki Т., Thaler C.J. Seminal plasma induces mRNA expression of IL-1 beta, IL-6 and LIF in endometrial epithelial cells in vitro //Mol Hum Reprod. -2003. -Vol. 9, N 12. -P. 785-791.
223. Farhi J. et al. Effect of uterine leiomyomata on the results of in vitro fertilization treatment // Hum Reprod. 1995. - Vol. 10, N 10. - P. 2576-2578
224. Faas M., Bouman A., Moesa H., et al. The immune response during the luteal phase of the ovarian cycle: a Th2-type response? //Fertil. Steril.- 2000.-Vol. 74, N 5.- P.1008-1113
225. Ferlin A, Raicu F, Gatta V, Zuccarello D, Palka G, Foresta C. Male infertility: role of genetic background // Reprod Biomed Online. 2007. - Vol. 14, N6.-P. 734-45.
226. Fierro R., Schwed P., Foliguet B. et al. Expression of IL-2alpha and IL-2beta receptors on the membrane surface of human sperm // Arch Androl. — 2002. Vol. 48, N 5. - P. 397-404.
227. Fisch J.D., Rodriguez H., Ross R., Overby G. et al. The graduated embryo score (GES) predicts blastocyst formation and pregnancy rate from cleavage — stage embryos//Hum Reprod. 2001.-Vol. 16, N9.-P. 1970-1975
228. Fishel S., Green S., Bishop M. et al. Pregnancy after intracytoplasmic injection of spermatid //Lancet. 1995. - Vol. 345. -P. 1641-1642
229. Fornari M.C., Sarto A., Berardi V.E., et al. Effect of ovaric hyper-stimulation on blood lymphocyte subpopulations, cytokines, leptin and nitriteamong patients with unexplained infertility. // Am. J. Reprod. Immunol.- 2002.-Vol. 48, N 6.- P. 394-403
230. Francavilla F., Pomando P. et al. Effect of sperm morphology and motile sperm count on outcome of intrauterine insemination in oligozoospermia and/or asthenospermia // Fertil Steril. 1990. - Vol. 53, N 5. - P. 892-897
231. Francavilla F., Romano R., Santucci R., La Verghetta G., D'Abrizio P., Francavilla S. Naturally-occurring antisperm antibodies in men: interference with fertility and implications for treatment // Front. Biosci. 1999.-Vol. 4. - E9-E25.
232. Fraser L.R. Fertilisation Promoting Peptide: a key player in male fertility/subfertility? // Expert Opin Investig Drugs. 1997. - Vol. 6, N 12. - P. 1797-801
233. Freund M., Link H., Schmidt R.E., Welte K. Cytokines in hemopoesis, oncology and immunology. Berlin: Springer-Verlag, 1994: XXVI. -711pp.
234. Fridman C.I., Seifer D.B., Kennard E.A., et al. Elevated level of follicular fluid vascular endothelial growth factor is a marker of diminished pregnancy potential. // Fertil. Steril. 1998. - Vol. 70. - P. 836-839.
235. Friebe K, Bohring C, Skrzypek J, Krause W. Levels of interleukin-6 and interleukin-8 in seminal fluid of men attending an andrological clinic //Andrologia. 2003. - Vol. 35, N 2. - P. 126-9.
236. Fry R.C., Batt Р.А.,- Fairclough R.J., Parr R.A. Human LIF improves the viability of cultured ovine embryos. // Biol. Reprod.-1992.- Vol. 46.- P. 470474
237. Furuya Y., Akashi Т., Fuse H. Soluble FAS and interleukin-6 and interleukin-8 levels in seminal plasma of infertile men // Arch Androl. 2003. -Vol. 49, N6.-P. 449-452
238. Hales DB, Diemer T, Hales KH. Role of cytokines in testicular function // Endocrine. 1999. - Vol. 10. - P. 201-17.
239. Hammond M.G., Oh S., Anners T. et al. The effect of growth factors on the proliferation of human endometrial stromal cells in culture // Am J Obstet Gynecol.-1993.-Vol. 168.-P. 1131-1136.
240. Haugen, T.B., Landmark, B.F., Josefsen, G.M., Hansson, V., Hogset, A., The mature form of interleukin-la is constitutively expressed in immature male germ cells from rat // Mol. Cell. Endocrinol. 1994. - Vol. 105. - R. 19-23.
241. Head, J.R., Neaves, W.B., Billingham, R.E. Reconsideration of the lymphatic drainage of the rat testis // Transplantation. 1983. - Vol. 35. - P. 91-95
242. Healy D.L., Trounson A.O., Andersen A.N. Female infertility: couse and treatment //Lancet. 1994. - Vol. 343. - P. 1539-1544.
243. Hedger, M.P. Testicular leukocytes: what are they doing // Rev. Reprod. 1997. - N 2. - P. 38-47.
244. Hedger, M.P., Meinhardt, A., Local regulation of T cell numbers and lymphocyteinhibiting activity in interstitial tissue of the adult rat testis // J. Reprod. Immunol. 2000. - Vol. 48, N 10. - P. 69.
245. Hedger M.P., Meinhardt A. Cytokines and the immune-testicular axis // J. of Reproductive Immunology. 2003. - Vol. 58. - P. 1-26
246. Iiellberg P., Thomsen P., Jansen P.O., Brannstrom M. Leukocyte supplementation increases the luteinizing hormone-induced ovulation rate in the in-vitro-perfused rat ovary // Biol Reprod. 1991. - Vol. 44. - P. 791-797.
247. Hill J.A. Fertil Steril. 1992. - Vol. 58. - P. 262-264.
248. Но P.C., Tang G.W., Lawton J.W.M. Lymphocytes subsets in patients with oestrogen deficienty. // J. Reprod. Immunol.- 1991.- Vol. 20.- P. 8591
249. Ho H.N., Wu M.Y., Chen H.F., et al. In vivo CD3 lymphocyte subpopulation is down-regulated without increased serum-soluble IL-2 receptorsIL-2R) by gonadotropin releasing hormone agonist (GnTH-a). // Am. J. Reprod. Immunol.- 1995-Vol. 33.-P. 134-139
250. Ho H.N., Chao K.H., Chen C.K., Yang Y.S., Huang S.C. Activation status of T and NK cells in the endometrium throughout menstrual cycle and normal and abnormal early pregnancy. // Hum. Immunol.- 1996.- Vol. 49.- P. 130136.
251. Hoeben E, Damme JV, Put W, Swinnen JV, Verhoeven G. Cytokines derived from activated human mononuclear cells markedly stimulate transferrin secretion by cultured Sertoli cells // Endocrinology. — 1996. Vol. 137. — P. 51421.
252. Hovatta O., Moilanen J., von Smitten K., Reima I. Testicular needle biopsy, open biopsy, epididymal aspiration and intracytoplasmic sperm injection in obstructive azoospermia // Hum Reprod . 1995. - Vol. 10. - P. 2595-2599
253. Huleihel M., Lunenfeld E., Levy A., Potashnik G., Glezerman M. Distinct expression levels of cytokines and soluble cytokine receptors in seminal plasma of fertile and infertile men // Fertil Steril. 1996. - Vol. 66, N 1. - P. 135139.
254. Huleihel M, Levy A, Lunenfeld E, Horowitz S, Potashnik G, Glezerman M. Distinct expression of cytokines and mitogenic inhibitory factors in semen of fertile and infertile men // Am J Reprod Immunol. 1997. - Vol. 37. — P. 304-9.
255. Huleihel M, Lunenfeld E, Horowitz S, Levy A, Potashnik G, Mazor M, et al. Involvement of serum and lipopolysaccharide in the production of interleukin-6-like molecules by human sperm cells // Am J Reprod Immunol. — 2000.-Vol. 43.-P. 41-6.
256. Huleihel M, Lunenfeld E, Horowitz S, Levy A, Potashnik G, Glezerman M. Production of IL-l-like molecules by human sperm cells // Fertil Steril. 2000. - Vol. 73. - P. 1132-7.
257. Huleihel M, Zeyse D, Lunenfeld E, Zeyse M, Mazor M. Induction of transferrin secretion in murine Sertoli cells by FSH and IL-1; the possibility ofdifferent mechanism(s) of regulation // Am J Reprod Immunol. 2002. - Vol. 47. -P. 112-7
258. Huleihel 1 M., Lunenfeld E. Regulation of spermatogenesis by paracrine/autocrine testicular factors // Asian J Androl. 2004. - N 6. - P. 259-268
259. Hull M., Glazener C., Kelly N., Conway D. et al. Population study of causes, treatment and outcome of infertility // Br Med J. 1985. - Vol. 291. -1693-1697
260. Hutson J.C., Testicular macrophages // Int. Rev. Cytol. -1994. Vol. 149.-P. 99-143.
261. Inaba K., Inaba M., Romani N., et al. Generation of large numbers of dendritic cells from mouse bone marrow cultures supplemented with granulocyte-macrophage colony-stimulating factor. // J. Exp. Med.- 1992.- Vol. 176.- P. 16931702
262. Incerpi MH, Miller DA, Samadi R, Settlage RH, Goodwin TM. Stillbirth evaluation: what tests are needed? // Am J Obstet Gynecol. 1998. -Vol. 178, N6.-P. 1121-5.
263. Infertility: Male and Female (Eds. V. Insler and B.Lunenfeld). 2nd edit. Edinburgh et al.: Churchill Livingstone, 1993
264. Isobe Т., Minoura H., Tanaka K. et al. The effect of RANTES on human sperm chemotaxis // Hum Reprod. 2002. - Vol. 17, N 6. - P. 1441-1446.
265. Ito H.S., Yanagi S. et al. Varicocele and pathogenesis of male infertility is varicocele a cause of male infertility? // Nishihon J Urol. 1986. -Vol. 48, N5.-P. 1105-1111.
266. Iwashiro M., Messer R.J., Peterson K.E., et al. Immunosuppression by CD4+ regulatory T cells induced by chronic retroviral infection. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2001.- Vol. 98.- P. 9226-9230
267. Jasper M.J., Brannstrom M., Olofsson J.I., et al. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor: presence in human follicular fluid, protein secretion and mRNA expression by ovarian cells. // Mol. Hum. Reprod.- 1996.-Vol. 2,- P. 555-562
268. Jasper M.J., Robertson S.A., Norman RJ. GM-CSF and GM-CSF receptor mRNA in the mouse ovary through the oestrous cycle. // Biol. Reprod.-1997,-Vol. 56.-P. 285
269. Jasper M.J., Robertson S.A., Van der Hoeka K.H., et al. Characterization of ovarian function in granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-deficient mice // Biol. Reprod.- 2000.- Vol. 62.- P. 704-713
270. Jean M., Mirallie S., Barriere P., et al. LIF expression in human follicular fluid. //Hum. Reprod.- 1999.- Vol. 14.- P. 571,
271. Karagouni E.E., Chryssilopoulos A., Mantzavinos T. IL-1 (3 and IL-la may affect the implantation rate of patients undergoing in vitro fertilization-embryo transfer. II Fertil. Steril.- 1998.- Vol. 70.- P. 553-559
272. Katayama К., Matsubara Т., Fujiwara M., Koga M., Furukawa S. CD14+CD16+ monocytes subpopulation in Kawasaki disease. // Clin. Exp. Immunol. 2000.- Vol. 121.- P. 566-570.
273. Kauma S.V., Malt D.W. Coculture cells that express LIF enhance mouse blastocyst development in vitro //J. Assist. Reprod. Genet.- 1995.- Vol. 12.-P. 153-156
274. Kawasaki F., Kawano Z., Kosayhasan Z. The clinical role of IL-6 and IL-6sR in human follicular fluids. // Clin. Exp. Med.- 2003.- Vol. 3.- P. 27-31
275. Kelly R.W., Critchley H.O. Immunomodulation by human seminal plasma: a benefit for spermatozoon and pathogen? //Hum Reprod. 1997. — Vol. 12, N 10. - P. 2200-2207.
276. Kenny D. T. IVF and GIFT: an integrative analysis of research, 19871992 // Br J Obstet Gynaecol. 1995. - Vol. 102, N 4. - P. 317-325
277. Kern S., Robertson S.A., Mau V.J., Maddocks S., Cytokine secretion by macrophages in the rat testis // Biol. Reprod. 1995. - Vol. 53. - P. 1407-1416.
278. Khan SA, Khan SJ, Dorrington JH. Interleukin-1 stimulates deoxyribonucleic acid synthesis in immature rat Leydig cells in vitro // Endocrinology. 1992. - Vol. 131.-P. 1853-7.
279. Klentzeris L.D. The role of endometrium in implantation // Hum Reprod.-1997.-Vol. 12.-P. 170—175
280. Knight D. Leukaemia inhibitory factor (LIF): a cytokine of emerging importance in chronic airway inflammation // Pulm Pharmacol Ther. 2001. — Vol. 14. - 169-176.
281. Kocak I., Yenisey C., Dundar M. et al. Relationship between seminal plasma interleukin-6 and tumor necrosis factor alpha levels with semen parameters in fertile and infertile men // Urol Res. 2002. - Vol. 30, N 4. - P. 263-267.
282. Koch A., Bilina A., Teodorowicz L., Stary A.M. hominis and U. urealyticum in patients with sexually transmited diseases // Klin Wschr (Wien). — 1997.-Vol. 109.-P. 584-589.
283. Koch A.E., Polverini P.J., Kunkel S.L. et al. Interleukin-8 as a macrophage-derived mediator of angiogenesis. // Science.- 1998.- Vol. 258.- P. 1798-1801
284. Kodama H, Kuribayashi Y and Gagnon C: Effect of sperm lipid peroxidation on fertilization//J Androl. 1996. - Vol. 17. - P. 151.
285. Koh E, Choi J, Namiki M. Spermatogenesis // Nippon Rinsho. — 2006.-Vol. 64, Suppl4.-P. 184-188
286. Koninckx P.R., Kennedy S.H., Barlow D.H. Endometriotic disease: the role of peritoneal fluid // Hum Reprod Update. 1998. - Vol. 4, N 5. - P. 741751
287. Komori S, Kasumi H, Sakata K, Koyama K. The role of androgens in spermatogenesis // Soc Reprod Fertil Suppl. 2007. - Vol. 63. - P. 25-30.
288. Krausz C, Degl'Innocenti S. Y chromosome and male infertility: update, 2006 // Front Biosci. 2006. - Vol. 11. - P. 3049-3061.
289. Krausz C, Giachini C. Genetic risk factors in male infertility // Arch Androl. 2007. - Vol. 53, N3.-P. 125-133.
290. Kretser D.M. et al. Spermatogenesis // Hum Reprod. 1998. - Vol. 13, N 1.-P. 1-8.
291. Kruger T.F., Menkveld R,, Stander F.S.H., Lombard C.J., van der Merve J.P., van Zyl J.A., Smith K. Sperm morphologic features as a prognostic factor in in vitro fertilization//Fertil Steril. 1986. - Vol. 46. -P. 1118-1123.
292. Kruger T.F., Acosta A.A., Simmons K.F., Swanson R.J., Matta J.F., Oehninger S. Predictive value of abnormal sperm morphology in vitro fertilization //Fertil Steril.-1988. Vol. 49.-P. 112-117
293. Kurnosova Т., Verbitsky M., Markin A. The investigation of antispermal immunity in the infertile marrid couples treated by course of in IN VITRO fertilization (IFET) // AJRI. 1998.-Vol. 40. - P. 252.
294. Kutteh W.H. Antisperm antibodies. Do antisperm antibodies bound to spermatozoa alter normal reproductive function? //Hum. Reprod. 1999. - Vol. 14, N 10. - P. 2426-2429
295. Kwak J.Y., Beer A.E., Kim S.H., Mantouvalos H.P. Immunopathology of the implantation site utilizing monoclonal antibodies to natural killer cells in women with recurrent pregnancy losses. // Am J Reprod Immunol. 1999.-Vol. 41, N l.-P. 91-8.
296. Lafon C., Mathieu C., Guerrin M. et al. Transforming growth factor beta 1-induced apoptosis in human ovarian carcinoma cells: protection by the antioxidant N-acetylcysteine and bcl-2 // Cell Growth Differ. 1996. - Vol. 7, N 8.-P. 1095-1104.
297. Landsteiner K. Zur kenntnis der spezifisch auf blutkorperchen wirkende sera // Zentralbl. Bakeriol. 1998. - Vol. 25. - P. 546.
298. Lavergne N. et al. Uterine anomalies and in vitro fertilization: what are the results // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1996. - Vol. 68, N 1-2. - P. 19-34
299. Ledee-Bataille N., Lapree-Delage G., Taupin J.L., et al. Follicular fluid concentration of LIF is decreased among women with polycystic ovarian syndrome during assisted reproduction cycles. // Hum. Reprod.- 2001.- Vol. 16.- P. 2073-2078
300. Lee A., Christenson L.K., Stouffer RL, Burry KA, Patton PE. Vascular endothelial growth factor levels in serum and follicular fluid of patients undergoing in vitro fertilization. // Fertil. Steril.- 1997.- Vol. 68, N 2,- P. 305-311
301. Lin T, Wang D, Nagpal ML, Chang W, Calkins JH. Down-regulation of Leydig cell insulin-like growth factor-I gene expression by interleukin-1 // Endocrinology. 1992. - Vol. 130. - P. 1217-24
302. Liyanage U.K., Moore T.T., Joo H.-J., et al. Prevalence of regulatory T cells is increased in peripheral blood and tumor microenvironment of patients with pancreas or-breast adenocarcinoma. // J. Immunol.- 2002.- Vol. 169.- P. 27562761
303. Loret de Mola J.R., Flores J.P., Baumgardner G. Elevated IL-6 level in the ovarian hyperstimulation syndrome: ovarian immunohistochemical localization of IL-6 signal. // Obstet. Gynecol.- 1996.- Vol. 87.- P. 581-587
304. Loret de Mola J.R., Goldfarb J.M., Hecht B.R., et al. Gonadotropins induce the release of IL-lb, IL-6 and TNFa the human preovulatory follicle. //Am. J. Reprod. Immun.- 1998. Vol. 39.- P. 387-390
305. Loukides J.A., Loy R.A., Edvards R., et al. Human follicular fluids contain tissue makrophages. // J. Clin. Endocrinol. Met. 1990. - Vol. 71. - P. 1363-1367.
306. Lucey D.R., Clerici M., Shearer G.M. Type 1 and Type 2 cytokine dysregulation in human infectious, neoplastic, and inflammatory diseases // Clinical microbiology reviews. 1996. - Vol. 9. - P. 532-562
307. Lundin K., Bergh C., Hardarson T. Early embryo cleavage is a strong indicator of embryo quality in human IVF // Hum Reprod. 2001. - Vol. 16, N 12. - P. 2652—2657
308. Liu D.Y., Baker H.W. Evaluation and assessment of semen for IVF/ICSI // Asian J Androl. 2002. - Vol. 4, N 4. - P. 281 -285
309. Lui W.Y., Cheng C.Y. Regulation of cell junction dynamics by cytokines in the testis: a molecular and biochemical perspective //Cytokine Growth Factor Rev. -2007. Vol. 18, N 3-4. - P. 299-311.
310. Lunenfeld E, Zeyse D, Huleihel M. Cytokines in the Testis, Human Sperm Cells, and Semen//Assist Reprod. 1998.-Vol. 9.-P. 157-65.
311. Maegawa ML, Kamada M., Irahara M. et al. A repertoire of cytokines in human seminal plasma // J Reprod Immunol. 2002. - Vol. 54. - P. 33-42.
312. Maccio A., Mantovani G., Turnu E., Artini P., et al. Evidence that granulosa cells inhibit IL-1 and IL-2 production from follicular lymphomonocytes. // Assist. Reprod. Genet. 1993. - Vol. 10. - P. 517-522.
313. Machelon V., Nome F., Salesse R. Comparative IL-6 effects on FSH and hCG-induced functions in porcine granulosa cell cultures. // Cell. Molecul. Biol.- 1994.- Vol. 40.- P. 373-380
314. Machelon V., Emilie D., Lefevre A., et al. IL-6 biosynthesis in human preovulatory follicles: some of its potential roles at ovulation. // J. Clin. Endocrin. Metab.- 1994.- Vol. 79.- P. 633-642
315. Mackiewicz A., Schooltink H., Heinrich P.C., Rose-John S. Complex of soluble human IL-6 receptor upregulates expression of acute-phase proteins. // J. Immunol.- 1992.- Vol. 149.- P. 2021-2027
316. Malter H., Cohen J. Partial zona dissection of the human oocyte: a non traumatic method using micromanipulation to assist zona pellucida penetration // Fertil Steril. 1989. - Vol. 51. - P. 139-148
317. Mancini A, Conte G, Milardi D, De Marinis L, Littarru G. Relationship between sperm cell ubiquinone and seminal parameters in subjects with and without varicocele // Andrologia. 1998. - Vol. 30. - P. 1-4.
318. Marcoux S. et al. Laparoscopic surgery in infertile women with minimal or mild endometriosis // N Engl J Med. 1997. - Vol. 337, N 4. - P. 217222
319. Mardesic T, Ulcova-Gallova Z, Huttelova R et al. The influence of different types J of antibodies on IVF results // Fertil Steril. 1998. - Vol. 70, N 3 (Suppl. 1).-P. 489.
320. Mardesic Т., Ulcova-Gallova Z., Huttelova R., Muller P., Voboril J., Mikova M., Hulvert J. The influence of different types of antibodies on in vitro fertilization results. //Am. J. Reprod. Immunol.- 2000.- Vol. 43, N 1.- P. 1-5
321. Martin-Du Pan R.C., Bischof P., Campana A., Morabia A. Relationship between etiological factors and total motile sperm count in 350 infertile patients //Arch. Androl.- 1997.- Vol. 39, N 3.- P.197-210.
322. Maruo N., Morita I., Shrao M., Murota S. IL-6 increases endothelial premeability in vitro. // Endocrinol.- 1992.- Vol. 131.- P. 710-714
323. Massague J. The TGF-(3 system // Nature Reviews Molecular Cell Biology.-2000.-Vol. l.-P. 169-178
324. Mathur R.S., Jenkins J.M., Bansal A.S. The possible role of the immune system in the aetiopathogenesis of ovarian hyperstimulation syndrome. // Hum. Reprod.- 1997.- Vol. 12.- P. 2629-2634
325. Matthiesen L., Berg G., Ernerudh J., Halcansson L. Lymphocyte subsets and mitogen stimulation of blood lymphocytes in normal pregnancy. // Am. J. Reprod. Immunol.- 1996.- Vol. 35, N 2.- P. 70-79
326. Meachem S., von Schonfeldt V., Schlatt S. Spermatogonia: stem cells with a great perspective//Reproduction.-2001.-Vol. 121.-P. 825-34.
327. Menkveld R., Stander F.S.H., Kotze T.J.W., Kruger T.F., van Zyl J.A. The evaluation of morphological characteristics of human spermatozoa according to stricter criteria // Hum Reprod. 1990. - Vol. 5. - P. 586-592
328. McLachlan R., Wreford N., OyDonell L. et al. The endocrine regulation of spermatogenesis: independent roles for testosterone and FSH // J Endocrinol. 1996.-Vol. 148.-P. 1-9
329. Miceli F., Tropea A., Minici F., et al. Interleukin-1 {beta} stimulates progesterone production by in vitro human luteal cells: evidence of a mediatory role of prostaglandins. // J. Clin. Endocrinol. Metab.- 2003.- Vol. 88, N 6.- P. 2690-2694
330. Miller M.D., Krangel M.S. Biology and biochemistry of the cytokines: a family of chemotactic and inflammatory cytokines. // Crit. Rev. Immunol.- 1992.-Vol. 12.-P. 17-46
331. Mosmann T.R., Sad S. The expanding universe of T-cell subsets: Thl, Th2 and more // Immunol. Today.- 1996.- Vol. 17, № 3.- P. 138-146
332. Moulding D.A., Walter C., Hart C.A., Edwards S.W. Effects of staphylococcal enterotoxins on human neutrophil functions and apoptosis // Infect. Immun. 1999.- Vol. 67.- P. 2312-2138.
333. Moulik S., Ranga G., Meherji P.K., Shahani S.K. Detection of immunosuppressive activity in human seminal plasma by an immunobioassay // Int JAndrol.- 1989. -№ 12.-P. 131-138
334. Mori T. Immuno-endocrinology of cyclic ovarian function. // Am. J. Reprod. Immunol. 1990. - Vol. 23. - P. 80-89.
335. Moura M. et al. Does hydrosalpinx affect the success of in vitro fertilization?// Ac Obst et Gynec Scand. 1997. - Vol. 76. - P. 167-171
336. Mueller B.A., Lus-Jimenez V., Daling J.R. et al. Risk factors for tubal infertility: influence of history of prior pelvic iflammatory disease // Sex Trans Dis. 1992. - Vol. 19. - P. 28-34.
337. Mues В., Langer D., Zwadlo G., Sorg C. Phenotypic characterization of macrophages in human term placenta. // Immunology.- 1989.- Vol. 67.- P. 303307
338. Mukaida N., Harada A., Yasumoto k., Matsushima K. Properties of proinflammatory cell type-specific leukocyte chemotactic cytokines, IL-8 and monocyte chemotactic and activating factor. // Microbiol. Immunol.- 1992,- Vol. 36.- P. 773-789
339. Nakamura K. Menotropin stimulation after prolonged GnRH agonist pretretment for IVF in patients with endometriosis // J Assist Reprod Genet. — 1992. Vol. 9, N 2. - P. 113- 117
340. Nandipati K.C., Pasqualotto F.F., Thomas A.J., Agarwal A. Relationship of interleukin-6 with semen characteristics and oxidative stress in vasectomy reversal patients // Andrologia. 2005. - Vol. 37, N 4. - P. 131-134.
341. Narasaki M., Yasukawa K., Saito T. et al. Soluble forms of the IL-6 signal-transducing receptor component gpl30 in human serum possessing a potential to inhibit signals through membrane-anchored gpl30. // Blood.- 1993.-Vol. 82,-P. 1120-1126
342. Navarro C, Martin Q, Diaz D, Marrs RP. Immunology and Infertility in the Clinical Setting // Fert Ster. 1998. - Vol. 70, N3 (Suppl. 1). - P. 489.
343. Naz R.K., Menge A.C. Antisperm antibodies: origin, regulation, and sperm reactivity in human infertility // Fertil. Steril. 1994. - № 6. - P. 1001-1013.
344. Naz P.K., Evans L. Presence and modulation of interleukin-12 in seminal plasma of fertile and infertile men // J Androl. 1998. - Vol. 19, N 3. — P. 302-307.
345. Nehar D, Mauduit C, Boussouar F, Benahmed M. Interleukin 1 alpha stimulates lactate dehydrogenase A expression and lactate production in cultured porcine Sertoli cells // Biol Reprod. 1998. - Vol. 59. - P. 1425-32.
346. Nishizuka Y., Sakakuta T. Thymus and reproduction: sex-link disgenesia of the gonad after neonatal thymectomy in mice. // Science. 1969. -Vol. 166.-P. 753-755.
347. Norman R.J., Brannstrom M. Cytokines in the ovary: pathophysiology and potential for pharmacological intervention. // Pharmacol. Ther.- 1996.- Vol. 69.- P. 219-227
348. Norman R.J., Bonello N., Jasper M.J., Van der Hoek K.H. Leukocytes: essential cells in ovarian function and ovulation. // Reprod. Med. Rev.- 1997.- Vol. 6.-P. 97-111.,
349. O'Bryan, M.K., Schlatt, S., Phillips, D.J., de Kretser, D.M., Hedger, M.P., Bacterial lipopolysaccharide-induced inflammation compromises testicular function at multiple levels in vivo // Endocrinology. 2000. - Vol. 141. — P. 238246.
350. Ogasawara M, Aoki K, Kajiura S, Yagami Y. Are antinuclear antibodies predictive of recurrent miscarriage? // Lancet. 1996. - Vol. 27, N 347 (9009).-P. 1183-4.
351. Olivennes F. et al. Endometriosis: a stage by stage analysis — the role of IVF // Fertil Steril. 1995. - Vol. 64, N 2. - P. 392-398
352. Omrani MD, Samadzadae S, Bagheri M, Attar K. Y chromosome microdeletions in idiopathic infertile men from west azarbaijan // Urol J. — 2006. — Vol. 3, N 1. — P. 38-43.
353. Omu A.E., Al-Qattan F., Al-Abdul-Hadi F.M. et al. Seminal immune response in infertile men with leukocytospermia: effect on antioxidant activity // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1999. - Vol. 86, N 2. - P. 195-202
354. Oppenheim J., Feldman M. (Eds.). Cytokine Reference. — Academic Press, London, 2000. — 2015 pp.
355. Opsahl M.S., Hayslip C.C., Klein T.A., Cunningham D.S. Characterization of peripheral blood and peritoneal fluid mononuclear cell subsets in fertile and infertile women. // Gynecol. Obstet. Invest.- 1994.- Vol. 37, N 3.- P. 176-179
356. Orava M, Voutilainen R, Vihko R. Interferon-gamma inhibits steroidogenesis and accumulation of mRNA of the steroidogenic enzymes P450scc and P450cl7 in cultured porcine Leydig cells // Mol Endocrinol.- 1989. N 3. - P. 887-894.
357. Ozornec M.H., Bielfeld P., Krussel J.S., et al. Epidermal growth factor and LIF levels in follicular fluid. Association with IVF outcome. // J. Reprod. Med.- 1999.- Vol. 44.- P. 367-369
358. Pagidas К., Hemmings R., Palcone R., Miron P. The effect of antisperm autoantibodies in male or female partners undergoing in vitro fertilization-embryo transfer // Fertil. Steril. 1994.-Vol. 62. - P.363-369.
359. Palermo G., Joris H., Devroey P., Van Steirteghem A.C. Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte // Lancet. -1992.-Vol. 340. P. 17-18
360. Palermo G., Cohen J., Alikani M. et al. Intracytoplasmic sperm injection: a novel treatment for all forms of male factor infertility // Fertil Steril. — 1995.-Vol. 63.-P. 1231-1240
361. Paradisi R., Capelli M., Mandini M. et al. Increased levels of interferon-gamma in seminal plasma of infertile men // Andrologia. -1996; Vol. 28,N3.-P. 157-161.
362. Pasqualotto E.B., Agarwal A., Sharma R.K. et al. Effect of oxidative stress in follicular fluid on the outcome of assisted reproductive procedures // Fertil. Steril.- 2004.- Vol. 81.- P. 973-976.
363. Paul W.E., Seder R.A. Lymphocyte response and Cytokines // Cell. -1994.-Vol. 76, 241 -251
364. Piffer C.R., Piffer M.S. Anatomical observation of the testicular veins // Anat Anz. 1988. - Vol. 16, N 1-5. - P. 249-255
365. Pina-Neto J.M., Carrara R.C., Bisinella R., Mazzucatto L.F. et al, Somatic cytogenetic and azoospermia factor gene microdeletion studies in infertile men // Braz J Med Biol Res. 2006. - Vol. 39, N 4. - P. 555-561.
366. Piquet-Pellorce C., Gomez E., Cudicini C., Stephan J.P. et al. Cytokines and spermatogenesis. In: Hedon B, Bringer J, Mares P, editors. 5th World Congress on Fertility and Sterility. London and New York: Parthenon Publishing Group; 1995. p. 249-55.
367. Piquet-Pellorce C, Dorval-Coiffec I, Pham MD, Jegou B. Leukemia inhibitory factor expression and regulation within the testis // Endocrinology. — 2000.-Vol. 141.-P. 1136-1141.
368. Poizat R., Steg A. Varicocele et infertilite. Fails, incertitudes et hypotheses//Sem Hop. 1983. - Vol. 59.-P. 1341-1347
369. Polan M.L., Loukides J.A., Honig J. Interleukin-1 in human ovarian cells and in peripheral blood monocytes increases during the luteal phase: evidence for a midcycle surge in the human. // Am .J. Obstet. Gynecol.- 1994 .- Vol. 170.-P. 1000-1006 .
370. Pollanen P, Soder O, Parvinen M. Interleukin-1 alpha stimulation of spermatogonial proliferation in vivo // Reprod Fertil Dev. — 1989. Vol. 1. - P. 85-87.
371. Pollard J.W. Role CFS-1 in reproduction and development. //Mol. Reprod. Develop.- 1997.- Vol. 46.- P. 54-61
372. Pouly JL, Zambrano R, Canis M et al. Place of IVF in the treatment of endometriosis related infertility // J Assisted Reprod Genetics. Abstracts of the 10th World Congress on IVF and Assisted Reproduction. 1997. Vol. 14, N 5. -55S.
373. Polan M.L., Loukides J.A., Honig J. Interleukin-1 in human ovarian cells and in peripheral blood monocytes increases during the luteal phase: evidence for a midcycle surge in the human. // Am .J. Obstet. Gynecol. 1994. - Vol. 170. -P. 1000-1006.
374. Polittoff L., Handzislimovic P. et al. Does hydrocele affect later fertility? // Fertil Steril. 1990. - Vol. 53, N 4. - P. 700-703.
375. Pryor J.L., Howards S.S. Varicocele // Urol Clin North Am. 1987. -Vol. 14.-P. 499
376. Pryor J., Kent-First M., Muallem A. et al. Microdeletions in the Y chromosom of infertile men // New Engl Journ Med. 1997. - Vol. 20. - P. 534539
377. Rahimi A., Sepehri H., Pakravesh J., Bahar K. Quantification of C3 and C4 in infertile men with antisperm antibody in their seminal plasma. // Am. J. Reprod. Immunol. 1999. - Vol. 41, №5. - P. 330-336
378. Rango U., Alfer J., Kertschanska S., et al. Interleukin-11 expression: its significance in eutopic and ectopic human implantation. // Mol. Hum. Reprod.-2004.- Vol. 10.-P. 783-792
379. Ravel C, Chantot-Bastaraud S, McElreavey K, Siffroi JP. Molecular anomalies of the Y chromosome: Consequences on male fertility // Gynecol Obstet Fertil. 2006. - Vol. 34, N 10. - P. 885-893.
380. Reddy S.P., Yeturu S.R., Slupik R. Chlamydia trachomatis in adolescents: a review // J Pediat Adolesc Gynecol. 1997. - Vol. 10. - P. 59-72
381. Roaiah MM, Khatab H, Mostafa T. Mast cells in testicular biopsies of azoospermic men // Andrologia. 2007. - Vol. 39, N 5. - P. 185-189
382. Robertson S.A. Control of the immunological environment of the uterus//Rev Reprod.-2000.-Vol. 5.-P. 164-174
383. Robertson S.A., Sjoblom C., Jasper M.J., Norman R.J., Seamark R.F. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor promotes glucose transport and blastomere viability in murine preimplantation embryos. // Biol. Reprod.- 2001.-Vol. 64.-P. 1206-1215
384. Roby K.F., Lyles W.R., Terranova P.F. Immunological evidence for a human ovarian TNFa. // J .Clin. Endocrnol. Metab.- 1990.- Vol. 71.- P. 1096-1102
385. Royen E.V., Mangelschots K., Neubourg D.D., Valkenburg M. et al. Characterization of a top quality embryo, a step towards single-embryo transfer // Hum Reprod. 1999. - Vol. 14, N 9. - P. 2345—2349
386. Royen E.V., Mangelschots K., Neubourg D.D, Laureys I. et al. Calculating the implantation potential of day 3 embryos in women younger than 38 years of age: a new model // Hum Reprod. 2001. - Vol. 16, N 2. - P. 326—332
387. Romagnani S. Thl and Th2 in human diseases // Clin Immunol Immunopathol. 1996. - Vol. 80', N 3 (Pt 1). - P. 225-35
388. Rossato M, Balercia G, Lucarelli G, Foresta C, Mantero F. Role of seminal osmolarity in the reduction of human sperm motility // Int J Androl. — 2002. Vol. 25. - P. 230-235.
389. Rumke P., Hellinga G. Autoantibodies against spermatozoa in sterile men // Am. J. Clin. Pathol. 1959. - Vol. 32. - P. 357.
390. Runesson E., Bostrom E.K., Janson P.O., Brannstrom M. The human preovulatory follicle is a source of the chemotactic cytokine interleukin-8. // Mol. Hum. Reprod. -1996.- Vol. 2.- P. 245-250
391. Ruiz A. et al. The role of IVF and ICSI in couples with unexplained infertility after failed intrauterine insemination // Fertil Steril. 1997. - Vol. 68, N l.-P. 171 — 173
392. Salmassi A., Schmutzler A.G., Huang Let al. Detection of granulocyte colony-stimulating factor and its receptor in human follicular luteinized granulosa cells. // Fertil. Steril.- 2004.- Vol. 81,- P. 786-791
393. Salmon J.E. A non-inflammatory pathway for pregnancy loss: innate immune activation? // J. Clin. Invest.- 2004.- Vol. 114, N 1.- P. 15-17
394. Samra Z., Soffer V., Pansky M. Prevalence of genital chlamydia and mycoplasma infection in couples attending a male infertility clinic // Eur J Epidemiol. 1994. - Vol. 10. - P. 69-73.
395. Sanchez-Luengo S., Fernandez P.J., Romeu A. Insulin growth factors may be implicated in human sperm capacitation // Fertil Steril. 2005. - Vol. 83, N4.-P. 1064-1066.
396. Sandalinas M., Sadowy S., Alicani M., Calderon G. et al. Developmental ability of chromosomally abnormal human embryos to develop to the blastocyst stage//Hum Reprod. 2001.-Vol. 16, N9.-P. 1954—1958
397. Seibel M.M. Infertility // Appleton and Lange. 1990. - P. 608.
398. Senturk L.M., Seli E., Gutierrez L.S., et al. MCP-1 expression in human corpus luteum. //Mol Hum. Reprod.- 1999.- Vol. 5.- P. 697-702
399. Seoud M. et al. Indications for in vitro fertilization: changing trends // Ann Acad Med Singapure. 1992. - Vol 21, N 4. - P. 459-470
400. Sergerie M., Laforest G., Bujan L. et al. Sperm DNA fragmentation: threshold value in male fertility // Hum Reprod. 2005. - Vol. 20, N 12. - P. 3446-3451.
401. Shanley T.P., Warner R.L., Ward P.A. The role of cytokines and adhesion molecules in the development of inflammatory injury // Mol. Med. Today. 1995. - N1. - P. 40-45.
402. Schlatt, S., Meinhardt, A., Nieschlag, E. Paracrine regulation of cellular interactions in the testis: factors in search of a function // Eur. J. Endocrinol. 1997.-Vol. 137.-P. 107-117.
403. Shafik A., Bedeir G.A.V. Venous tention patterns in cord viens in normal and varicocele individuals // J Urol. 1980. - Vol. 123, N 1. - P. 383-385.
404. Sharkey A. Cytokines and implantation. // Reviews of reproduction.-1998.- Vol. 3.- P. 52-61
405. Sharma R.K., Pasqualotto F.F., Nelson D.R. et al. Relationship between seminal white blood cell counts and oxidative stress in men treated at an infertility clinic // J Androl. 2001. - Vol. 22, N 4. - P. 575-583
406. Shimokawa K., Katayama M., Matsuda Y. et al. Matrix metalloproteinase (MMP)-2 and MMP-9 activities in human seminal plasma // Mol Hum Reprod. 2002. - Vol. 8. - P. 32-36.
407. Shimokawa K., Katayama M., Matsuda Y. et al. Complexes of gelatinases and tissue inhibitor of metalloproteinases in human seminal plasma // J Androl.-2003.-Vol. 24, N l.-P. 73-77.
408. Shrivastav P., Nadkarni P., Wensvoort S., Craft I. Percutaneous epididymal sperm aspiration for obstructive azoospermia // Hum Reprod. — 1994. — Vol. 9.-P. 2058-2061
409. Sica A., Wang J.M., Colotta F., et al. Monocyte chemotactic and activating factor gene expression in endothelial cells by IL-1 and TNF. // J. Immunol.- 1990.- Vol. 144.- P. 3034-3038
410. Sigman M., Howard S. Male Infertility. Campbell's Urology. Seventh edition. Ed. by P.C. Walsh, A.B. Retik, E.D. Vanghan, A.J. Wein. W.B. Saunders com. Philadelphia, 1998. P. 1287-1330.
411. Silber S., Van Steirteghem A.C., Liu J. et al. High fertilization and pregnancy rates after sperm obtained from testicle biopsy // Hum Reprod. — 1995. -Vol. 10.-P. 148-152
412. Simon C., Frances A., Piquette G.N., et al. Embryonic implantation in mice is blocked by interleukin-1 receptor antagonist // Endocrinol.- 1994.- Vol. 134,-P. 521-528
413. Skinner MK. Cell-cell interactions in the testis // Endocrin Rev. — 1991.-Vol. 12.-P. 45-77.
414. Skrzeczynska J., Kobylarz K., Hartwich Z., Zembala M., Pryjma J. CD14+16+ monocytes in the course of sepsis in neonates and small children: monitoring and functional studies. // Scand. J. Immunol. 2002.- Vol. 55.- P. 629638.
415. Sliwa L. Effect of transforming growth factors (TGFalpha and TGFbeta) on human sperm chemotactic migration in vitro •// Arch Androl. 2003. -Vol. 49, N2.-P. 155-159.
416. Soliman S. et al. A randomized trial of IVF versus conventional treatment for treatment // Fertil Steril. 1993. - Vol. 59, N 6. - P. 1239-1244
417. Spaczynski R.Z., Arici A., Duleba A.J. TNF-a stimulates proliferation of rat ovarian theca-interstitial c611s. // Biol. Reprod. 1999. - Vol. 61. - P. 993998.
418. Spandorfer S.D., Neuer A., Giraldo P.C., Rosenwaks Z., Witkin S.S. Relationship of abnormal vaginal flora, proinflammatory cytokines and idiopathic infertility in women undergoing IVF. // J. Reprod. Med.- 2001.- Vol. 46, N 9.- P. 806-810
419. Speroff L., Glass R.H., Kase N.G. Assisted reproduction. // In: Speroff L, Glass RH, Kase NG, eds. Clinical gynecologic endocrinology and infertility. 6th ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 1999. P. 643724.
420. Srivastava MD, Lippes J, Srivastava BI. Cytokines of the human reproductive tract//Am J Reprod Immunol. 1996. - Vol. 36, N3.-P. 157-166.
421. Stephan, J.P., Syed, V., Jegou, В., Regulation of Sertoli cell IL-1 and IL-6 production in vitro // Mol. Cell. Endocrinol. 1997. - Vol. 134. - P. 109-118.
422. Stewart E.A., Friedman A.J. Steroidal treatment of myomas: preoperative and long-term medical therapy // Sem Reprod Endocrinol. 1992. -Vol. 10.-P. 344-357
423. Stewart C.L. LIF and the regulation of preimplantation development of the mammalian embryo. // Mol. Reprod. Dev. 1994.-Vol. 39. - P. 233-238.
424. Strandell A., Lindhard A., Waldenstrom U., et al. Hydrosalpinx and IVF outcome: a prospective, randomized multicentre trial in Scandinavia on salpingectomy prior to IVF. // Hum. Reprod.- 1999.- Vol. 14.- P. 2762-2769
425. Sun XR, Hedger MP, Risbridger GP. The effect of testicular macrophages and interleukin-1 on testosterone production by purified adult Leydig cells cultured under in vitro maintenance conditions // Endocrinology. 1993. -Vol. 132.-P. 186-92.
426. Surgarello G., Lagossi M. Transvenous sclerothetapy of the gonadal viens for treatment of varicocele: long-time results // Andrologia. 1990. — Vol. 41, N6.-P. 427-431
427. Szyllo K., Tchorzewski H., Banasik M., et al. The involvement of T lymphocytes in the pathogenesis of endometriotic tissues overgrowth in women with endometriosis. //Mediators Inflamm.- 2003.- Vol. 12, N 3.- P. 131-138
428. Tabraue C., Diaz Penate R, Gillardo G., et al. Induction of guanosine trihposphate cyclohydrolase by follicle stimulating hormone enhances IL-lb stimulated nitric oxide synthase activity in granulosa cells. // Endocrinol.- 1997.-Vol. 138.-P. 162-168
429. Takao T, Mitchell WM, Tracey DE, De Souza EB. Identification of interleukin-1 receptors in mouse testis // Endocrinology. 1990. - Vol. 127. - P. 251-258.
430. Tanbo T. et al. Assisted fertilization in infertile women with patent fallopian tubes // Hum Reprod. 1990. - Vol. 5, N 3. - P. 266 — 270
431. Tasdemir I., Tasdemir M., Fukuda I., Kodama IT., Matsui Т., Tanaka T. Effect of sperm-immobilising antibodies on the spontaneous and calcium-ionophore (A23187) induced acrosome reaction // Int. J. Fertil.- 1995-V.40.-P. 192195.
432. Teerds, K.J., Dorrington, J.H., Localization of transforming growth factor pi and (32 during tesicular development in the rat // Biol. Reprod. 1993. — Vol. 48.-P. 40-45.
433. Temple-Smith P., Southwick G., Yates C., Trounson A., De Kretser D. Human pregnancy by in vitro fertilization (IVF) using sperm aspirated from the epididymis // J In Vitro Fertil Embryo Transfer. 1985. - Vol. 2.- P. 119-122
434. Terranova P.F., Sancho-Tello M., Hunter V.J. TNFa and ovarian function //In Adashi E.Y. and Leung P.C.K. The ovary. Raven, New York. 1993
435. Thomson A.M., ed. Cytokines handbook. London ect: Acad Press, 1992: XI.-425 pp.
436. Tilg H., Dinarello C.A., Mier J.W. IL-6 and APPs: anti-inflammatory and immunosuppressive mediators // Immunol. Today. 1997. - Vol. 18, № 9. - P. 428-432.
437. Toumaye H., Devroey P., Liu J. et al. Microsurgical epididymal sperm injection: a new effective approach to infertility as a result of congenital bilateral absence of the vas deferens // Fertil Steril. 1994. - Vol. 61. - P. 10451051
438. Towson D.H., Warren J.S., Flory C.M. Expression of MCP-1 in the corpus luteum of rat. // Biol. Reprod.- 1996.- Vol. 54.- P. 513-520
439. Tsay H.D., Chang C.C., Hsieh Y.Y., et al. Recombinant human LIF enhances the development of preimplantation mouse embryo in vitro. // Fertil. Steril.- 1999.- Vol. 71.- P. 722-725
440. Tsirigotis M., Craft I. Sperm retrieval methods and ICSI for obstructive azoospermia//Hum Reprod. 1995. - Vol. 10. - P. 758-760
441. Twandelbaum M.J., Salat-Baroux J. // Mol. Hum. Reprod. 1996. -Vol. 2.-P. 538-543.
442. Urbanek M, Legro RS, Driscoll DA. et al. Therty-seven Candidate genes for polycystic ovary syndrome: strongest evidence for linkage is with follistatin // Proc Nat Acad Sci. 1999. - Vol. 96. - P. 8573.
443. Ujioka Т., Matsukawa A., Tanaka N., et al. IL-8 as an essential factor in the human HGIi-induced rabbit ovulatory process: IL-8 induced neutrophil accumulation and activation in ovulation. // Biol. Reprod.- 1998.- Vol. 58.- P. 526530
444. Varghese A.C., Sinha В., Bhattaccharyya A.K. Current trends in evaluation of sperm function: in vitro selection and manipulation of male gametes for assisted conception // Indian J Exp Biol. 2005. - Vol. 43, N 11. - P. 10231031.
445. Verajankorva E, Martikainen M, Pollanen P. Cytokines in the BALB/c mouse testis in various conditions // Asian J Androl. 2001. - Vol. 3. - P. 9-19
446. Vilanova L.T., Rauch M.C., Mansilla A. et al. Expression of granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) in male germ cells: GM-CSF enhances sperm motility // Theriogenology. 2003. - Vol. 60. — N. 6. -P. 1083-1095.
447. Vinatier D., Dufour P., Tordjeman-Rizzi N., et al. Immunological aspects of ovarian function: role of the cytokines. // Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 1995.- Vol. 63, N 2.- P. 155-168.
448. Wang J.M., Colella S., Allavena P., Mantovani A. Chemotactic activity of human recombinant granulocyte-macrophage colony-stimulating factor. // Immunology.- 1987.- Vol. 60.- P. 439-444
449. Wang, D.L., Nagpal, M.L., Calkins, J.H., Chang, W.W. et al, Interleukin-lb induces interleukin-la messenger ribonucleic acid expression inprimary cultures of Leydig cells // Endocrinology. 1991. - Vol. 129. - P. 28622866.
450. Wang L.J., Norman R.J. Concentrations of immunoreactive IL-1 and IL-2 in human preovulatory follicular fluid. // Hum. Reprod.- 1992.- Vol. 7.- P. 147-150
451. Wang L.J., Brannstrom M., Robertson S., Norman R.J. TNFa in the human ovary; presents in follicular fluid and effects in cell proliferation and prostoglandin production // Fertil. Steril.- 1992.- Vol. 58.- P. 934-940
452. Watter F., Matheieu D.E. et al. Hyperbaric oxygen therapy in chronic vascular wound management // Andrologia. 1990. — Vol. 41, N 1. — P. 59-66
453. Westrom L.V. Sexually transmitted diseases and infertility // Sex Transm Dis. 1994. - Vol. 21.-P. 32-37
454. Wilson T.I., Munnery L., Hertzog P.S. et al. Decreased natural killer cell activity in endometriosis patients: relationship to disease pathogenesis // Fertil Steril. 1994. - Vol. 62. - P. 1086-1088.
455. Witkin S S, Jeremias J, Bongiovanm A M, Munos G Immune regulation m the male genital tract//Inf Dis m Obstetr Gynecol 1996 - Vol 4 - P 131 -135.
456. Witt N.A., Lipshultz L.I. Varicocele: a progressive or static lesion? Urology. 1993. - Vol. 42. - P. 541-543
457. Wolff H. The biological significance of white blood cells in semen // Fertil Steril. 1995. - Vol. 63.-P. 1143-1157.
458. World Health Organization. Manual for the standardized investigation and diagnosis of the infertile couple / P.J. Rowe et al. WHO: Cambridge university press, 1993. - P. 35.
459. World Health Organization. Laboratory manual for the examination of human semen and sperm-cervical mucus interaction. 4th ed. New York: Cambridge University Press; 1999.
460. World Health Organization. Manual for the standardized investigation and diagnosis of the infertile couple. Cambrige: Cambrige University press, 1999.
461. Wolfe J.P., DeAlmeida M., Ducot В., Rodrigues D., Jouannet P. High levels of sperm-associated antibodies impair human sperm oolemma interaction after subzonal insemination.//Fertil. Steril. 1995.-Vol. 63. - P. 584-590.
462. Wu M.Y., Chen H.F., Chao K.H. // Am. J. Reprod. Immunol. 2001. -Vol. 46.-P. 386-392.
463. Varghese A.C., Sinha В., Bhattaccharyya A.K. Current trends in evaluation of sperm function: in vitro selection and manipulation of male gametes for assisted conception // Indian J Exp Biol. 2005. - Vol. 43, N 11. - P. 10231031
464. Vassiliadoul N., Searle R.F., Bulmer J.N. Immunoregulatory activity of decidua in spontaneous early pregnancy loss. // Hum. Reprod.- 1999.- Vol. 14.-P. 2252-2256
465. Villegos H., Pinon M., Shor V., Karchmer S. Electron microscopy of Chlamydia trachomatis infection of the male genital tract // Arch Androl. 1991. -Vol. 27.-P. 117-126
466. Vujisis S., Lepej A., Aksamija A., et al. T-cells in the follicular fluid and peripheral blood of patients undergoing IVF/ET procedures. //Am. J. Reprod. Immunol.- 2004.- Vol. 52, N 6.- P. 379
467. Yamagiwa S., Gray J.D., Hashimoto S., Horwitz D.A. // J. Immunol.-2001.- Vol. 166.- P. 7282-7289
468. Yong EL, Lim J, Wang Q7~Mifsud A, Ong YC, Sim CK Genetics of male infertility: role of androgen receptor mutations and Y-microdeletions //Ann Acad Med Singapore. 2000. - Vol. 29, N 3. - P. 396-400.
469. Yoshimura Т., Robinson E.A., Tanaka S., et al. Purification and amino acid analyses of two human glioma-derived monocyte chemoattractants. // J. Exp. Med.- 1989,- Vol. 169.- P. 1449-1159
470. Yoshioka S., Fujiwara H., Yamada S. // J. Clin. Endocr. Methab.-1998.- Vol. 83.- P. 3943-3950
471. Yoshimura Т., Leonard E.J. Secretion by human fibroblasts of monocyte chemoattractant protein-1, the product of gene JE. // J. Immunol.- 1990.-Vol. 144.-P. 2377-2383
472. Zerhouni E.A., Seigelinen S.S. et al. Elevated pressure in the left renal vein in patients with varicocele: preliminary observations // J Urol. — 1980. — Vol. 123, N4.-P. 512-513
473. Zeyse D, Lunenfeld E, Beck M, Prinsloo I, Huleihel M. Interleukin-1 receptor antagonist is produced by Sertoli cells in vitro // Endocrinology.- 2000. -Vol. 141.-P. 1521-7.
474. Zhang Q., Shimoya K., Ohta Y. et al. Detection of fractalkine in human seminal plasma and its role in infertile patients // Hum Reprod. 2002. -Vol. 17, N6.-P. 1560-1564
475. Zhang Q., Shimoya K., Temma K., Kimura T. et al. Expression of fractalkine in the Fallopian tube and of CX3CR1 in sperm // Hum Reprod. 2004. -Vol. 19, N2.-P. 409-414.
476. Zorn В., Virant-Klun I., Meden-Vrtovec H. Semen granulocyte elastase: its relevance for the diagnosis and prognosis of silent genital tract inflammation//Hum Reprod. 2000. - Vol. 15, N 9. - P. 1978-1984.