Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Патогенетическая роль дефицита селена и структурно-функциональных нарушений мембран эритроцитов при железодефицитной анемии у детей раннего возраста

На правах рукописи

Баранова Татьяна Ивановна

ПАТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ РОЛЬ ДЕФИЦИТА СЕЛЕНА И СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ НАРУШЕНИЙ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ЖЕЛЕЗОДЕФИЦИТНОЙ АНЕМИИ У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА

14.00.16 - патологическая физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Чита - 2004

Работа выполнена в ГОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия МЗ РФ

Научный руководитель:

доктор медицинских наук,

профессор Хышиктуев Баир Сергеевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор,

заслуженный врач РФ Бишарова Галина Ивановна

кандидат медицинских наук, доцент Федосеева Татьяна Александровна

Ведущая организация: Государственное учреждение Научный центр медицинской экологии ВСНЦ СО РАМН (г. Иркутск)

Защита состоится « Л/» 200 У г. в часов на

заседании диссертационного совета Д 208.118.01 при ГОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия (672090, г. Чита, ул. Горького, 39а).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО Читинской государственной медицинской академии (672090, г. Чита, ул. Горького, 39а).

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук

О.В. Кузьмина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Анемии - наиболее распространенные гематологические заболевания и синдромы у детей. Частота железодефицитных анемий (ЖДА) у детей до 15 лет в среднем по России достигает 12%, а у детей раннего возраста - 73% (Коровина Н. А., 1999). Именно в этот период чаще всего возникают ситуации, приводящие к дефициту железа в организме. К таковым относят антенатальную недостаточность депонирования железа, обусловленную сидеропе-ническим состоянием матери, увеличение потребности в микроэлементе за счет высоких темпов роста организма ребенка, а также легко возникающую алиментарную недостаточность железа (Румянцев А.Г., Токарев Ю.Н., 2000, Григорьев К.Н., 2001, Захарова И.Н., 2003). Нормальная кроветворная функция зависит и от достаточного поступления с пищей таких микроэлементов, как кобальт, цинк, марганец, медь, селен (Коровина Н.А., 1999, Папаян А.В.,

2001, Дворецкий Л.И., 2003).

В детском организме дефицит железа ощущается наиболее остро. Снижение активности целого ряда железосодержащих энзиматических систем (цитохромов, каталазы, пероксидазы и др.) провоцирует нарушение тканевого метаболизма. Продолжительный дефицит железа приводит к снижению синтеза гемоглобина и развитию анемии.

Одним из важных патогенетических звеньев анемических состояний является дисбаланс в системе "ПОЛ - антиоксиданты". В настоящее время убедительно доказано, что активация процессов липопероксидации на фоне угнетения антиоксидантных ресурсов организма сопровождает практически все анемии (Синевич О.Ю., 2002, Ермакова Т.А., 2003). Это, в свою очередь, приводит к усилению мембранодеструкции, накоплению в крови токсических продуктов ПОЛ. В то же время в работах ряда авторов, изучающих эту проблему, доказано, что лечение железодефицитной анемии ферропрепара-тами инициирует гиперпродукцию свободных радикалов, вызывая оксидатив-ный стресс (Коровина Н.А., 1999, Казюкова Т.В., 2000, Александрова В.А.,

2002, Захарова И.Н., 2003).

Однако не все факторы, вызывающие ЖДА, равнозначны. Существенные различия в причинах ее возникновения обусловлены географическими и социально-бытовыми условиями. Особую значимость проблема железодефи-цитной анемии приобретает в эндемичных по дефициту некоторых микроэлементов (в том числе, селена) регионах, к числу которых относится Читинская область.

Способность селена обеспечивать адекватный ответ со стороны ферментативного антиоксидантного звена за счет его включения в структуру глу-татионпероксидазы, а также отсутствие исследований по применению препаратов селена при анемиях у детей раннего возраста делают актуальным вопрос об их использовании в лечении данных патологических состояний, особенно в регионах, дефицитных по этому микроэлементу.

Изучение биохимических особенностей течсии^ ^^^^ОД^^рй анемии у детей раннего возраста в Забайкалье позв >лит ^ЯЩЭДНУ^ЙК Лдекв*т"

ный комплекс лечебно-профилактических мероприя' ий. СПек^ут»^^ |

— - - '

Цель работы: установить патогенетическое значение изменения содержания селена в крови и структурно-функциональных нарушений мембран эритроцитов при железодефицитных анемиях у детей раннего возраста в Забайкалье, на основе полученных результатов разработать патогенетически обоснованные подходы к лечению железодефицитной анемии.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

1. Изучить показатели системы эритрона, состояние антиоксидантной системы эритроцитов и содержание селена в крови у детей раннего возраста с железодефицитной анемией, проживающих в Забайкалье.

2. Исследовать фосфолипидный статус мембран эритроцитов при железодефицитной анемии у детей раннего возраста в зависимости от района проживания.

3. Оценить характер корреляционных взаимоотношений между изучаемыми параметрами у детей раннего возраста с железодефицитной анемией, проживающих в Забайкалье.

4. Определить клинико-лабораторную эффективность применения «Неоселена» в комплексной терапии железодефицитной анемии у детей раннего возраста.

Научная новизна. Приоритетным в работе является установление закономерных изменений показателей системы «ПОЛ — антиоксиданты» на фоне снижения содержания селена в крови у детей раннего возраста, как здоровых, так и больных железодефицитной анемией. У детей с анемией, проживающих в селенодефицитном регионе, его уровень снижается значительно ниже критического и составляет в среднем 24 мкг/л.

Установлено, что у детей с железодефицитной анемией, независимо от района проживания, выявляются однонаправленные изменения со стороны фосфолипидного состава мембран эритроцитов. Это проявляется падением уровня фосфатидилхолина (ФХ), фосфатидилсерина (ФС), повышением содержания фосфатидилэтаноламина (ФЭА), сфингомиелина (СМ) и лизоформ фосфолипидов - лизофосфатидилхолина (ЛФХ) и лизофосфатидилэтанола-мина (ЛФЭА). Причем содержание последних составляет более трети всего пула фосфолипидов, что является одним из ведущих факторов усиленного гемолиза.

С помощью корреляционного анализа доказано, что уровень селена в крови детей раннего возраста, больных железодефицитной анемией, определяет активность как глутатионзависимых ферментов, так и каталазы, а также содержание лизофосфолипидов эритроцитарных мембран.

Показано, что применение препарата «Неоселен» в комплексной терапии железодефицитной анемии приводит к более ранней нормализации системы эритрона, восстановлению активности антиоксидантных ферментов и спектра фосфолипидов мембран эритроцитов, за счет уменьшения их лизоформ. Корреляционный анализ подтверждает, что одним из факторов, обусловливающих эти сдвиги, является селен.

Теоретическое и практическое значение. Выявленные закономерности изменений изученных лабораторных показателей позволили установить

важную патогенетическую роль снижения уровня селена в крови при железо-дефицитной анемии у детей раннего возраста. Доказана целесообразность использования препарата «Неоселен» в комплексном лечении данного заболевания. Разработана и внедрена схема использования «Неоселена» при лечении анемии у детей раннего возраста.

Оценка параметров перекисного статуса, совместно с исследованием уровня селена в крови, может быть использована для дифференцированного назначения препаратов селена в комплексной терапии железодефицитной анемии и контроля ее эффективности.

Результаты работы внедрены в учебный процесс кафедры патологической физиологии, пропедевтики детских болезней и педиатрии ЧГМА, используются в практике врачей-педиатров, врачей-гематологов.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В патогенезе железодефицитной анемии у детей раннего возраста, проживающих в Забайкалье, существенную роль играет выраженный дефицит селена, приводящий к дисбалансу в системе «ПОЛ - антиоксиданты», увеличению количества лизоформ фосфолипидов в мембранах эритроцитов и усилению гемолиза.

2. Применение препарата «Неоселен» в комплексной терапии железо-дефицитной анемии у детей в условиях недостатка селена предотвращает чрезмерную липопероксидацию мембранных структур, повышает активность системы антирадикальной защиты, способствуя интенсивному суточному приросту гемоглобина и сокращению сроков лечения.

Апробация диссертации. Полученные данные неоднократно обсуждались на заседаниях кафедры патологической физиологии, биохимии, пропедевтики детских болезней, госпитальной педиатрии ЧГМА; заседаниях регионального отделения Союза педиатров России; на научно-практической конференции «Проблемы и перспективы развития детской онкологии, гематологии в Читинской области», г. Чита, 2001; на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 50-летию Читинской государственной медицинской академии, г. Чита, 2003 г, на 4й Российской биогеохимической школе «Геохимическая экология и биогеохимическое изучение таксонов биосферы», г. Москва,2003 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 112 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 150 работ отечественных и 74 - зарубежных авторов и списка сокращений. Работа иллюстрирована 22 таблицами и 21 рисунком.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования

Для решения поставленных задач нами были обследованы дети раннего возраста, здоровые и больные железодефицитной анемией, проживающие в г.

5

Чите и Алек.-Заводском районе Читинской области за период 2000-2003 гг. Данный район относится к селенодефицитным, содержание микроэлемента в суточном пищевом рационе снижено до 30-60 мкг (при потребности 180-200 мкг), за счет его недостатка в почве и воде (Иванов В.Н., 1995, Вощенко А.В., 1996, Прудеева Е.Б., 2001, Аникина Л.В., Никитина Л.П., 2002).

Анамнестическое обследование проводили по специально разработанной карте-схеме, включающей оценку состояния здоровья родителей, течения беременности, характеристику пренатального, интранатального, грудного периодов жизни ребенка, питание, физическое и нервно-психическое развитие, социальный статус семьи.

Исследования проводились в следующих группах.

Первая группа детей с анемией - 75 человек, проживающих в городе Чите. Из них мальчиков - 40, девочек - 35. Возрастная характеристика обследованных детей представлена в таблице 1. Все дети родились доношенными, от родителей, постоянно проживающих в Чите. Из них детей от первой беременности - 26 (34,7%), от второй - 29 (38,7%), от третьей - 12 (16%), от четвертой - 8 (10,6%). Во время беременности у 16 женщин (21,3%) отмечались гестозы в первом триместре, у 28 (37,3%) - во втором и третьем триместрах беременности. У 22 женщин (29,3%) в период беременности диагностировалась анемия легкой степени. Курили во время беременности - 25 женщин (33,3%).

Анемия легкой степени (уровень гемоглобина от 90 г/л до 110 г/л) была выявлена у 36 детей (48%), средней степени (уровень гемоглобина от 70 г/л до 89 г/л) - у 39(52%) детей. Во время обследования из 24 детей до 1 года 8 (33,3%) находились на искусственном вскармливании, 16 (66,7%) - на естественном. Дети, находившиеся на искусственном вскармливании, получали детские адаптированные молочные смеси. Фоновые состояния (дисбактериоз, рахит, дисметаболическая нефропатия, аллергодерматоз) отмечались у 13 детей (54,2%).

Характерными клиническими симптомами ЖДА являлись: бледность кожных покровов и слизистых оболочек - в 100% случаев, сухость кожи - у 69 детей (92%), снижение аппетита отмечалось у 72 детей (96%), снижение эмоционального тонуса - у 70 (93,3%).

Первую контрольную группу составили 25 здоровых детей раннего возраста. Из них мальчиков - 12, девочек - 13. Возрастной состав группы представлен в таблице 1. Для обследования отбирались дети, не имеющие в анамнезе хронических заболеваний и не болевшие в течение трех месяцев, предшествующих осмотру и забору крови. Все дети - жители города Читы, родились доношенными, от родителей, проживающих в Забайкалье постоянно. Из них детей, родившихся от первой беременности -15 (60%), от второй -10 (40%). Настоящая беременность у всех женщин протекала без особенностей. Курящих женщин не было. На момент осмотра дети до 1 года (8 человек) находились на естественном вскармливании, все дети не отставали в физическом и нервно-психическом развитии.

б

Вторую группу больных анемией составили 38 детей в возрасте от 6 месяцев до 3 лет (табл.1), проживающих в Алек.-Заводском районе Читинской области. Среди обследованных 20 девочек и 18 мальчиков. Все дети родились доношенными, от родителей, постоянно проживающих в этом районе. Из них детей от первой беременности - 20 (52,6 %), от второй - 10 (26,3%), от третьей - 6 (15,8%), от четвертой - 2 (5,3%). Во время беременности у 4 женщин (10,5%) отмечались гестозы в первом триместре, у 24 (63,2%) - во втором и третьем триместрах беременности. У 16 женщин (42,1%) в период беременности отмечалась анемия легкой степени. Курили во время беременности - 16 женщин (42,1%).

Таблица 1

Возраст 1 контроль- 1 группа 2 контроль- 2 группа

ная группа больных ная группа больных

(п=25) (п=75) (п=13) (п=38)

6-12 мес. 10 24 6 15

1-2 года 8 26 3 15

2-3 года 7 25 4 8

У всех обследованных детей зарегистрирована анемия средней степени тяжести (уровень гемоглобина от 70 до 89 г/л).

Из 15 обследованных детей в возрасте до 1 года, 6 находились на естественном вскармливании (40%), 9 - на искусственном (60%) (получали коровье молоко, цельное или в разведении). Фоновые состояния (дисбактериоз, рахит, дисметаболическая нефропатия, аллергодерматоз) отмечались у 10 детей (66,7%).

Характерными клиническими симптомами ЖДА являлись: бледность кожных покровов и слизистых оболочек - в 100% случаев, сухость кожи - у 30 детей (78,9%), снижение аппетита отмечалось у 35 детей (92,1%), снижение эмоционального тонуса - у 31 (81,6%).

Вторую контрольную группу составили 13 детей (6 мальчиков и 7 девочек), проживающих в Алек.-Заводском районе Читинской области. Все дети не имели в анамнезе хронические заболевания, не болели в течение трех месяцев, предшествующих осмотру и забору крови. Все дети родились доношенными, от родителей, постоянно проживающих в этом районе. Из них детей от первой беременности - 7 (53,8%), от второй - 6 (46,2%). Настоящая беременность протекала у женщин без особенностей, курящих женщин не было. На момент осмотра дети до одного года (5 человек) находились на грудном вскармливании, все дети не отставали в физическом и нервно-психическом развитии.

Дети с железодефицитной анемией, проживающие в Алек.-Заводском районе Читинской области, были повторно обследованы после лечения.

В зависимости от вида терапии обследуемые были разделены на две группы: первая включала 10 человек (6 мальчиков и 4 девочки), с анемией средней степени тяжести (уровень гемоглобина от 70 до 89 г/л), которым про-

водилось традиционное лечение ЖДА («Гемофер» в возрастной терапевтической дозе, витамин С в возрастной дозировке). Лечение ЖДА начинали с дозы «Гемофера», равной половине терапевтической с последующим постепенным достижением полной дозы в течение семи дней с целью снижения риска развития побочных эффектов терапии. Суточная доза вводилась в два приема перед едой. Необходимое количество капель препарата добавляли в 5-10 мл кипяченой воды.

Вторая группа состояла из 28 лиц (12 мальчиков и 16 девочек) с анемией средней степени тяжести (уровень гемоглобина от 70 до 89 г/л), которым наряду со стандартной терапией анемии назначался «Неоселен» (представляет собой 0,05% раствор ЫагБеОз в 4% соляной кислоте). Препарат зарегистрирован Минздравмедпромом России (№ 04-31/344. Код ОКП 9325740288. Код ОКДП 423257 20.06.96), утвержден Государственным. Фармакологическим комитетом Минздрава России (№ 211-15-2133 26.06.96). Концентрат разводится дважды: содержимое флакона (10 мл) разводят кипяченой водой в 0,5 литрах и хранят в холодильнике. Полученный раствор в объеме 2,5 мл (25 мкг селена) добавляют в 5-7 мл воды.

Суточная доза препарата составила 50 мкг, согласно рекомендациям ВОЗ (Женева, 1989); способ введения - пероральный, кратность приема - 2 раза в день после кормления. Побочных явлений при приеме «Неоселена» отмечено не было. Срок лечения в обеих группах составил 12 недель.

Для определения уровня гемоглобина, гематокрита, количества эритроцитов, показателей МСН, МСНС, MCVиспользовали автоматический гематологический анализатор АС*Т 10 HAEMATOLOGY ANALYSER фирмы Bekmann - Kulter (Германия) со стандартным набором реактивов.

Определение концентрации сывороточного железа проводили при помощи набора для определения концентрации железа «CORMAY IRON-120» (Германия).

Уровень селена в крови изучали по методу определения массовой концентрации селена (ГОСТ 19413-89) и выражали в мкг/л.

Эритроциты служили средой, где исследовались скорость каталазной (Королюк М.А., 1988) глутатионредуктазной и глутатионпероксидазной реакций (Карпищенко А. И, 1999) и их устойчивость к перекисному гемолизу (Яровая Г. А., 1987).

Содержание фосфолипидов определяли при помощи двухмерной микротонкослойной хроматографии. Зоны, содержащие фосфолипиды, идентифицировали с помощью соответствующих стандартов фирмы "Sigma" (USA). Для определения количества каждой фракции применяли метод V.E. Vaskovsky et. а1.(1975).Исследования показателей перекисного окисления ли-пидов выполнялись в биохимической лаборатории НИИ медицинской экологии при Читинской государственной медицинской академии.*

* - Автор выражает благодарность за помощь в проведении биохимических исследований ст.н.с. П.П. Терешкову, к.в.н. Л.А. Мининой.

8

Анализ полученных данных проведен с помощью метода вариационной статистики с определением различий по критерию Стьюдента. Корреляционную связь оценивали с помощью линейного коэффициента корреляции (г) по методу Пирсона. Статистический обсчет выполнялся на компьютере IBM Pentium-Ill пакетом «Microsoft Exell professional for Windows XP».

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Проведенные исследования ряда гематологических и биохимических показателей крови и эритроцитов здоровых детей раннего возраста Забайкалья показали ряд отличий от таковых показателей детей средней климатической зоны. Содержание гемоглобина в крови детей Забайкалья несколько ниже, чем удетей, проживающих в умеренном климате (124-129 г/л и 130 г/л соответственно), также снижено количество эритроцитов крови (4,0-4,1x10,2/л и 4,5х10|2/л соответственно). Учитывая довольно высокую величину гема-токрита, отмечается больший объем эритроцита, чем у детей средней полосы (92 и 82 мкм3 соответственно). Среднее содержание гемоглобина в эритроците у детей Забайкалья отчетливо выше и составляет больше 31 пг, когда у детей в умеренном климате этот показатель равен в среднем 29 пг (Румянцев А.Г., Токарев Ю.Н., 2000, Захарова И.Н., 2003). Аналогичные данные получены при исследовании крови детей, проживающих в северных условиях (Булы-гин В.Г, 1999, Панин Л.Е., 2000, Долматова Ю.В., 2002).

Указанные изменения со стороны красных клеток крови говорят о напряжении системы эритрона, а также системы "ПОЛ - антиоксиданты" у здоровых детей раннего возраста, проживающих в экстремальных условиях Забайкалья.

Содержание гемоглобина, количество эритроцитов и гематокритная величина в крови обследованных детей соответствовали степени тяжести анемии. Анемия носила гипохромный, микроцитарный, регенераторный характер, что подтверждало ее железодефицитный характер. Уровень сывороточного железа снижался в 1,5 раза у больных железодефицитной анемией легкой степени (р<0,001) и в той же степени у лиц с заболеванием средней степени тяжести (р<0,001) по сравнению с контролем (табл.2). Содержание селена крови уменьшалось в 1,4 раза (р<0,001) при анемии легкой и средней степени тяжести, в отличие от показателей контрольной группы. В условиях се-ленодефицита и дефицита железа изменения в системе "глутатионредуктаза-глутатионпероксидаза" характеризовались следующим: скорость глутатион-пероксидазной реакции достоверно уменьшалась на 64,3% в эритроцитах больных анемией легкой степени и на 68,2% у лиц с анемией средней степени (р<0,001 в обоих случаях); со стороны глутатионредуктазы происходило снижение ее активности на 47,3% у детей с легкой степенью анемии и на 49,4% у лиц с анемией средней степени тяжести (р<0,001 в обоих случаях). При этом активность каталазы падала в 1,1 (р<0,01) раза при заболевании легкой степени и в 1,2 раза (р<0,01) - при анемии средней степени тяжести. На этом фоне отмечались следующие сдвиги устойчивости эритроцитов к пе-

рекисному гемолизу: данный параметр снижался в 1,2 раза (р<0,01) в обеих группах больных детей (процент гемолизированных эритроцитов возрастал).

Достоверных различий между показателями обеих групп больных (с анемией легкой и средней степени) зарегистрировано не было (табл.2).

При проведении корреляционного анализа было выявлено, что у детей с анемией легкой степени имелись одинаковые по силе и направлению зависимости между скоростью каталазной реакции и активностью ГПО и ГР (г =-0,53 (р<0,001) и г =-0,64 (р<0,001) соответственно).

Таблица 2

Биохимические показатели крови и эритроцитов при анемиях у детей раннего возраста, проживающих в г. Чите (М ± т)_

Показатели Контроль (п=25) Дети с анемией легкой степени. (п=36) Дети с анемией -средней степени (п=39)

Железо сыворотки (ммоль/л) 16,8 ± 0,9 10,4 ± 0,1* 103 ±0,1*

Селен крови (мкг/л) 85,3 ±1,2 62,2 ± 0,4* 62,5 ±0,6*

Активность каталазы (ммоль/ с *мг белка) 14,6 ± 0,9 12,9 ± 0,48» 11,8 ± 1,6*

Активность глутатионперокси-дазы (мкмоль/мин*мг белка) 192,1 ± 13,6 68,6 ±8,31* 61,1 ±6,7*

Активность глутатионредуктазы (мкмоль/мин*мг белка) 290,6 ±6,9 153,1 ±11,3* 147,1 ±11,9*

ПРЭ (% гемолизи-рованных клеток) 8,3 ±0,6 10,2 ±0,5* 10,1 ±0,8*

Примечание: *- достоверные различия с контрольной группой.

Отмечалась прямая зависимость активности каталазы и обратная - активности ГПО от уровня железа сыворотки (г=0,51 (р<0,001) и г=-0,64 (р<0,001) соответственно). Выявлялась тесная взаимосвязь, между активностями ГПО, ГР (г=0,56 (р<0,001) в обоих случаях) и концентрацией селена крови. У детей с анемией средней степени тяжести наблюдалась связь между величиной перекисной резистентности эритроцитов и активностью глутати-онпероксидазы (г=О,35; р<0,02), при этом сила связи данного показателя и активности каталазы уменьшалась (г= 0,47; р<0,001).

У детей с ЖДА, проживающих в Алек.-Заводском районе, статистически значимо изменялись все исследуемые показатели (табл. 3). Уровень сыво-

роточного железа снижался в 1,8 раза (р<0,001), селена крови - в 2,7 раз (р<0,001) по сравнению с контролем. Следует подчеркнуть, что содержание селена в крови больных детей было ниже критического уровня (50 мкг/л) и достоверно отличалось от такового показателя городских детей с анемией (р<0,001).

Это, в конечном итоге, обусловливало характер изменений в системе "глутатионпероксидаза-глутатионредуктаза": скорость глутатионпероксидаз-ной реакции достоверно уменьшалась на 54,6% (р<0,001), а глутатионредук-тазной - на 28,8% (р<0,001). При этом активность каталазы падала в 1,4 раза (р<0,01). Весьма логичным на этом фоне выглядят сдвиги устойчивости эритроцитов к перекисному гемолизу. Данный параметр снижался почти в 2 раза (процент гемолизированных эритроцитов возрастал).

Содержание сывороточного железа и селена в крови было ниже, чем у городских на 19,6% и 61,2% соответственно (в обоих случаях р<0,001). Тем не менее, активность ГПО имела лишь тенденцию к снижению, а ГР - практически не изменялась. Скорость каталазной реакции была достоверно меньше на 24,8%. При этом уровень пероксидиндуцированного гемолиза был значимо выше более, чем на четверть (табл.3).

Таблица 3

Биохимические показатели крови и эритроцитов у детей раннего возраста с анемией, проживающих в Алек.-Заводском районе Читинской области (М±т)_

Показатели Контроль (п=13) Дети с анемией Гп=3 8)

Сывороточное железо (ммоль/л) 14,9 ± 0,7 8,2 ± 1,3*

Селен крови (мкг/л) 66,3 ± 3,6 24,4 ±3,4*

Активность каталазы (ммоль/с * мг белка) 12,5 ± 0,6 8,8 ±0,6*

Активность глутатионпероксидазы (мкмоль/мин* мг белка) 182,8 ±5,2 82,9 ± 4,9*

Активность глутатионредуктазы (мкмоль/мин* мг белка) 284,2 ± 8,91 202,4 ±9,8*

ПРЭ(% гемолизированных клеток) 10,5 ± 1,5 18,4 ± 1,8*

Примечание: * - достоверные различия с контрольной группой.

Концентрация селена крови прямо коррелировала с активностью ГР (г=0,48; р<0,001) и ГПО (г= 0,58; р<0,001). Перекисная резистентность эритроцитов взаимозависела от содержания селена (г= 0,33; р<0,02), железа (г= 0,34; р < 0,02) и активности каталазы (г=0,62; р<0,001). Концентрация сывороточного железа и активность каталазы были достоверно связаны между

собой (г=0,46; р<0,001). Отмечалась также сильная прямая корреляционная связь между активностью ГПО и ГР (г=0,81; р< 0,001).

Таким образом, проведенные нами исследования показали, что у детей с анемией, проживающих в Забайкалье, наряду с дефицитом железа выражен и недостаток селена в крови, что приводит к значительному дисбалансу в системе "ПОЛ-антиоксиданты". Неадекватный ответ со стороны факторов анти-оксидантной защиты способствует изменению функциональных свойств мембран эритроцитов, что ведет к усилению их гемолиза, снижению продолжительности жизни и, в итоге, усугубляет анемические состояния.

Изменения в профиле фосфолипидов эритроцитарных мембран у детей г. Читы представлены в таблице 4.

Таблица 4

Спектр фосфолипидов эритроцитарных мембран у детей с анемией, проживающих в г.Чите (М ± т)_

Содержание фосфолипидов (%) Контроль (п=25) Дети с анемией легкой степени (п=36) Дети с анемией средней степени (п=39)

СМ 13,6 ±0,7 15,2 ±0,9 16,1 ±0,8*

ФХ 16,1 ±0,7 15,9 ±0,5 9,8 ± 0,4* р<0,02

ФЭА 13,6 ± 0,6 16,4 ±0,9* 13,5 ± 0,6 р<0,001

ФС 23,8 ± 1,3 19,7 ±1,1* 14,5 ± 0,9* р<0,001

ФИ 13,9 ±0,3 10,7 ±0,7* 11,9 ±0,6 р<0,001

ЛФХ 10,4 ±1,7 17,3 ±0,9* 18,4 ±0,7*

ЛФЭА 8,6 ±0,7 14,8 ±0,4* 15,7 ±0,8*

ЛФХ+ЛФЭА 20,1 ±0,4 32,1 ±0,4* 34,1 ±0,7* р<0,02

Примечание: * - достоверные различия с контрольной группой; р - уровень значимости достоверных различий между группами дете? с анемиями.

Содержание сфингомиелина (СМ) возрастало, достигая уровня значимых различий у лиц с анемией средней степени тяжести (р<0,02). Уровень фосфтидилхолина (ФХ) имел тенденцию к снижению в группе больных с анемией легкой степени и достигал значимых отличий от контроля на 19% (р<0,02) у детей с анемией средней степени тяжести. При этом фракция его

лизоформ увеличивалась в обеих группах - в 1,7 раза (р<0,001) у лиц с анемией легкой степени и в 1,8 раза (р<0,001) у детей с анемией средней степени тяжести. Цифры фосфатидилэтаноламина (ФЭА) по сравнению с контролем увеличивались в 1,2 раза в группе детей с анемией легкой степени. При этом доля лизофосфатидилэтаноламина (ЛФЭА) повышалась в 1,7 раза (р<0,001) у детей с анемией легкой степени и в 1,8 раза (р<0,001) у детей с анемией средней степени тяжести по сравнению с контролемСумма лизоформ фосфолипидов была достоверно выше у детей с анемией средней степени тяжести, чем у больных анемией легкой степени (р<0,01).

Уровень фосфатидилинозитола (ФИ) снижался в 1,3 раза (р<0,001) в группе детей с анемией легкой степени и практически не отличался от контрольных значений у лиц с анемией средней степени тяжести. Цифры фос-фатидилсерина (ФС) значимо уменьшались в большей степени при анемии средней степени тяжести.

При обследовании детей с анемией, проживающих в селенодефицитном районе, получены следующие результаты (табл. 5): достоверно снижалось содержание ФХ - в 1,8 раза (р<0,001) и ФС - в 1,7 раза (р< 0,001) по сравнению с контролем.

Содержание СМ не изменялось у детей с анемией, тогда как цифры ФЭА по сравнению с контролем увеличивались в 1,2 раза, достигая при этом уровня значимых различий.

Таблица 5

Спектр фосфолипидов мембран эритроцитов детей раннего возраста, больных железодефицитной анемией, проживающих в Алек-Заводском районе Читинской области (М± т)_

Содержание фосфолипидов(%) Контроль (п=13) Дети с анемией средней степени (п=38)

СМ 16,0 ±0,4 15,1 ±0,5

ФХ 15,8 ±0,6 8,9 ± 0,6*

ФЭА 11,4 ±0,3 13,9 ±0,6*

ФС 25,8 ±1,1 15,1 ±0,6*

ФИ 11,2 ±0,4 11,7 ±0,2

ЛФХ 10,8 ±1,1 19,3 ±0,6*

ЛФЭА 9,2 ±0,5 16,7 ±0,5*

ЛФХ+ЛФЭА 20,0 ±0,6 36,0 ±0,5*

Примечание:*- достоверные различия с контролем.

Доля ЛФЭА и ЛФХ возрастала в 1,8 раза (р<0,001 в обоих случаях) у детей с анемией. Уровень ФИ при этом практически не отличался от контрольных значений.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что у детей в условиях дефицита селена нарушение структурно-функциональных свойств мембран эритроцитов является одним из патогенетических факторов железодефицитной анемии.

Учитывая низкий уровень селена в крови, дисбаланс в системе «ПОЛ-антиоксиданты», а также изменения фосфолипидного спектра эритроцитар-ных мембран, нами был применен препарат «Неоселен» в комплексной терапии железодефицитной анемии у детей Алек.-Заводского района Читинской области.

После проведенного лечения в обеих группах детей показатели системы эритрона достигали нормальных значений.

В группе детей, получавших комплексное лечение с «Неоселеном», нормализация уровня гемоглобина происходила к 4 неделе, тогда как у пациентов, получавших традиционное лечение, только к концу 5 недели. При этом необходимо отметить различные темпы прироста данного гемопротеида: если у первых он составил 1,55г/л в сутки в первые 10 дней и далее 0,8 г/л в сутки в течение 4 недель, то у вторых они были 1,50 г/л и 0,66 г/л соответственно (рис.1).

140 п

НЬ,г/л

80 -1-1-1-1-1

1 нед 2 нед 3 нед 4 нед 5 нед

-♦-традиционное лечение (1 группа) -■-традиционное лечение +"Неоселен" (2 группа)

Рис. 1. Еженедельный прирост гемоглобина у детей с анемиями.

Следует подчеркнуть, что содержание сывороточного железа, так же, как и активность каталазы, в обеих группах обследуемых к концу лечения приходило к уровню контрольной группы (табл.6).

. Величины селена в крови достоверно возрастают более чем в три раза только у детей, получавших «Неоселен», однако его уровень после лечения данным препаратом, так же, как и у лиц контрольной группы, остается ниже физиологической нормы (110-130 мкг/л). Это обусловливает характер изме-

14

нений в системе "глутатионпероксидаза - глутатионредуктаза - скорость глутатионпероксидазной реакции повышалась на 30,5% и 78,8% в 1 и 2 группах соответственно. Аналогичная картина сдвигов была характерна и для глу-татионредуктазы. При этом активность обоих ферментов имела статистически значимые отличия между группами

Вероятно, неоднозначная реакция со стороны антиоксидантных ферментов обеспечивает различную устойчивость эритроцитов к перекисному гемолизу. Наибольшая их резистентность характерна для детей, получавших «Неоселен» (табл.6).

Таблица 6

Биохимические показатели крови при анемиях у детей раннего возраста до и после лечения (М± m)

Показатели Контроль (п-13) Дети с ЖДА

до лечения (п=38) 1 группа (п=10) 2 группа (п=28)

Железо сыворотки (ммоль/л) 14,9 ± 0,7 8,2 ± 1,3* 13,2 ±0,4 р< 0,001 13,1 ±0,8 р< 0,001

Селен крови (мкг/л) 66,3 ±3,6 24,4 ±3,4* 37,3 ±3,2* р< 0,01 79,3 ± 2,4* р< 0,001 р, <0,001

Активность ка-талазы (ммоль/с*мг белка) 12,5 ±0,6 8,8 ± 0,6* 12,1 ±0,5 р< 0,001 12,6 ±0,4 р< 0,001

Активность глутатион-пероксидазы (мкмоль/мин* мг белка) 182,8 ±5,2 82,9 ± 4,9* 108,2 ± 4,2* р< 0,001 148,2 ± 5,2* р< 0,001 р, <0,001

Активность глутатион-редуктазы (мкмоль/мин* мг белка) 284,2 ±8,9 202,4 ±9,8* 251,1 ± 8,4* р< 0,001 275,1 ±6,5 р< 0,001 р,<0,001

ПРЭ (% гемо-лизированных клеток) 10,5 ±1,5 18,4 ± 1,8* 11,5 ± 1,4 р< 0,001 6,5 ±0,3* р< 0,001 Р1 <0,001

Примечание: достоверные различия с контрольной группой;

р - уровень значимости достоверных различий показателей до и после лечения; р! - уровень значимости достоверных различий между показателями 1 и 2 групп.

Изучение корреляционных связей между исследуемыми параметрами крови и эритроцитов показало, что в группе детей, получавших традиционную терапию, регистрировалась прямая связь между концентрацией сывороточного железа и активностью каталазы (г=0,39; р<0,05), между скоростью глутатионпероксидазной реакции и цифрами перекисной резистентности эритроцитов (г=0,41; р<0,02). При этом между уровнем селена крови и активностью глутатионредуктазы фиксировалась обратная зависимость (г=-0,38; р<0,05).

У детей, получавших дополнительно «Неоселен», уровень селена крови был связан с активностью глутатионпероксидазы (г=0,51; р<0,01), каталазы (г=0,46; р<0,02) и уровнем перекисной резистентности эритроцитов (г=0,39; р<0,05). Регистрировалась обратная связь межу активностью антиоксидант-ных ферментов и перекисным гемолизом эритроцитов: г=-0,51 (р<0,01) - для каталазы, г=-0,39 (р<0,05) - для глутатионредуктазы и г=-0,46 (р<0,02) - для глутатионпероксидазы.

В обеих группах после лечения отмечались достоверные изменения содержания практически всех классов фосфолипидов, их значения приближались к таковым у лиц контрольной группы. Исключение составляла лишь фракция ФИ.

Следует подчеркнуть, что доля лизоформ фосфолипидов (ЛФХ и ЛФЭА) у больных, получавших комплексное лечение с «Неоселеном», практически достигала величин контроля, снижаясь при этом более, чем на 40% каждая фракция (р<0,001), а у детей, получавших традиционную терапию, эти изменения были менее выражены. Снижение уровня классов лизофосфа-тидов сопровождалось повышением перекисной резистентности эритроцитов.

Содержание сфингомиелина достоверно уменьшалось в обеих группах после лечения (р<0,001), при этом уровень СМ практически достиг такового у здоровых детей. Количество ФХ изменялось после лечения в обеих группах детей в сторону увеличения (р<0,001) и практически соответствовало уровню такового у здоровых детей. Величины фосфатидилсерина увеличивались после лечения в обеих группах (р<0,001). Причем в группе детей, получавших «Неоселен», они были достоверно выше, чем при традиционной терапии (р<0,001).

При изучении корреляционных связей между параметрами крови и эритроцитов и спектром фосфолипидов, установлено следующее. В группе детей, получавших традиционную терапию, регистрировались прямые корреляционные связи между уровнем гемоглобина - с одной стороны и железа сыворотки (г=0,39; р<0,05) и содержанием фосфатидилсерина (г=0,36; р<0,05) -с другой. Отмечалась обратная зависимость между активностью ГПО и цифрами ЛФХ (г=-0,49; р<0,01).

В группе детей, получавших «Неоселен», выявлены отрицательные зависимости между величинами ЛФХ (г=-0,49; р<0,01) и ЛФЭА (г=-0,51; р<0,01) и уровнем селена крови. Активность глутатионпероксидазы отрицательно коррелирует с величиной ЛФЭА (г=-0,54; р<0,01).

В этой же группе отмечается прямая корреляционная связь между уровнем селена крови и содержанием гемоглобина (г=0,33; р<0,05).

Полученные данные свидетельствуют о том, что у детей с анемией, проживающих в Забайкалье, наряду с дефицитом железа выражен и недостаток селена в крови, что сопровождается дисбалансом в системе "ПОЛ-антиоксиданты". Неадекватный ответ со стороны факторов антиоксидантной защиты способствует изменению функциональных свойств мембран эритроцитов, что ведет к усилению их гемолиза, снижению продолжительности жизни и усугубляет анемические состояния.

Использование в лечении "Неоселена", наряду с препаратами железа, предотвращает чрезмерную липопероксидацию мембранных структур, повышает эффективность системы антирадикальной защиты, способствуя интенсивному суточному приросту гемоглобина, скорейшему выздоровлению.

ВЫВОДЫ

1. У здоровых детей раннего возраста, проживающих в регионе с выраженным селенодефицитом (Алек.-Заводский район Читинской области) регистрируются низкие величины селена в крови по сравнению с детьми г. Читы при одинаковой активности ферментов системы «глутатионпероксидаза-глутатионпероксидаза».

2. В условиях Забайкалья при железодефицитной анемии у детей на фоне типичных изменений показателей гемограммы наблюдается снижение содержания селена и активности антиоксидантных ферментов эритроцитов, приводящие к усилению их перекисного гемолиза; у детей, проживающих в регионе с выраженным дефицитом селена, его уровень уменьшается ниже критического (50 мкг/л).

3. У детей с железодефицитной анемией, независимо от региона проживания, выявляются однонаправленные изменения фосфолипидного состава мембран эритроцитов, характеризующиеся падением уровня ФХ, ФС и повышением доли СМ, ФЭА и лизофосфолипидов, причем содержание последних составляет более трети всего фосфолипидного пула.

4. Выявленные корреляционные взаимоотношения между изученными показателями свидетельствуют о том, что при железодефицитных анемиях уровень селена в крови определяет активность (положительные связи) не только глутатионзависимых ферментов, но и каталазы, а также содержание лизофосфолипидов (отрицательные связи) в эритроцитарных мембранах.

5. Использование «Неоселена» в комплексной терапии железодефицит-ной анемии у детей раннего возраста способствует более ранней нормализации показателей системы эритрона, на фоне выраженного клинического эффекта, восстановлению активности антиоксидантных ферментов и спектра фосфолипидов мембран эритроцитов за счет уменьшения их лизоформ, что приводит к повышению перекисной резистентности эритроцитов. Одним из факторов, обусловливающих эти сдвиги, является селен, что подтверждается результатами корреляционного анализа.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИЮ

1.В условиях Забайкалья для оценки характера течения ЖДА у детей раннего возраста рекомендуется определять уровень селена в крови. При его значениях ниже 50 мкг/л необходимо назначение препаратов селена.

2.В качестве препарата, содержащего селен, для лечения железодефи-цитиой анемии у детей раннего возраста, рекомендуется использовать «Неоселен» (0,05% раствор ЫагЗеОз в 4% соляной кислоте). Концентрат разводится дважды: содержимое флакона (10 мл) разводят кипяченой водой в 0,5 литрах и хранят в холодильнике. Полученный раствор в объеме 2,5 мл (25 мкг селена) добавляют в 5-7 мл воды. Способ введения - пероральный, кратность приема- 2 раза в день после кормления, срок лечения 12 недель.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Баранова Т.И. Оценка здоровья детей первого года жизни, проживающих в условиях резкоконтинентального климата Забайкалья / Т.И. Баранова, О.Г. Максимова // Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины: Материалы II Российской конф. молодых ученых России с меж-дун. участием. - Москва, 2001. - С. 105.

2. Баранова Т.И. Особенности изменений биохимических параметров эритроцитов при анемиях у детей раннего возраста / Т.И. Баранова // Забайкальский медицинский вестник. - 2001. - №3. - С.64-65.

3. Хышиктуев Б.С. Использование препарата «Неоселен» в комплексной терапии железодефицитной анемии у детей / Б.С. Хышиктуев, Т.И. Баранова, О.Г. Максимова // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра. - 2003. - №6.-С. 107-109.

4. Селенодефицит у населения в Забайкалье / Л.А. Минина, А.В. Во-щенко, Е.Б. Прудеева, Т.И. Баранова и др. // Геохимическая экология и биогеохимическое изучение таксонов биосферы: Материалы 4й российской биогеохимической школы. - М.:Наука, 2003. - С.238-239.

5. Хышиктуев Б.С. Диагностика, профилактика и лечение железодефи-цитной анемии у детей раннего возраста: учебное пособие для студентов, клинических ординаторов, аспирантов, врачей-интернов / Б.С. Хышиктуев, Т.И. Баранова. О.Г. Максимова, Л.А. Минина. - Чита: ЗИП Сиб. УПК, 2003.24 с.

6. Баранова Т.И. Реабилитация детей раннего возраста, больных желе-зодефицитной анемией / Т.И. Баранова, Б.С. Хышиктуев, О.Г. Максимова // Реабилитология. Сборник научных трудов (ежегодное издание). - Москва, 2003.-С.89-91.

7. Баранова Т.И. Спектр фосфолипидов эритроцитарных мембран при железодефицитной анемии у детей раннего возраста / Т.И. Баранова, Б.С. Хышиктуев, П.П. Терешков // Актуальные проблемы клинической и экспериментальной медицины: Материалы всероссийск. научн.-практич. конф., поев.

50-летию образования Читинской государственной медицинской академии. -Чита, 2003.-С.169-170.

8. Баранова Т.И. Роль селена в развитии железодефицитной анемии у детей раннего возраста / Т.И. Баранова, Б.С. Хышиктуев, О.Г. Максимова // Вопросы современной педиатрии. - 2004. - т.З, приложение №1. - С.45.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГПО — глутатионпероксидаза

ГР -тлутатионредуктаза

ЖДА - железодефицитная анемия

ЛФХ — лизофосфатидилхолин

ЛФЭА — лизофосфатидилэтаноламин

МСН - среднее содержание гемоглобина в эритроците

МСНС- средняя концентрация гемоглобина в эритроците

МСУ — средний объем эритроцита

ПОЛ — перекисное окисление липидов

ПРЭ - перекисная резистентность эритроцитов

СМ - сфингомиелин

ФИ - фосфатидилинозитол

ФС — фосфатидилсерин

ФХ - фосфатидилхолин

ФЭА -фосфатидилэтаноламин

Лицензия ЛР № 001735 от 19.04.95 Подписано в печать 19.05.04

Бумага Business Xerox. Гарнитура Times New Roman.

Формат 60x84 1/16. Усл. печ. л. 1,5. Тираж 100 экз. Заказ № 1478.

Отпечатано в типографии Забайкальского института предпринимательства Сибирского университета потребительской кооперации.

672086, г.Чита, ул. Ленинградская, 16.

»10949

Анемии - наиболее распространенные гематологические заболевания и синдромы у детей. Частота железодефицитных анемий (ЖДА) у детей до 15 лет в среднем по России достигает 12%, а у детей раннего возраста - 73%. Именно в этот период чаще всего возникают ситуации, приводящие к дефициту железа в организме [5, 6, 13, 25, 89]. К таковым относят антенатальную недостаточность депонирования железа, обусловленную сидеропеническим состоянием матери, увеличение потребности в микроэлементе за счет высоких темпов роста организма ребенка, а также легко возникающую алиментарную недостаточность железа [41, 48, 54, 82, ИЗ].

Нормальная кроветворная функция зависит и от достаточного поступления с пищей таких микроэлементов, как кобальт, цинк, марганец, медь, селен [33, 54, 89].

В детском организме дефицит железа ощущается наиболее остро. Снижение активности целого ряда железосодержащих энзиматических систем (цитохромов, катапазы, пероксидазы и др.) провоцирует нарушение тканевого метаболизма. Продолжительный дефицит железа приводит к снижению синтеза гемоглобина и развитию анемии.

Одним из важных патогенетических звеньев анемических состояний является дисбаланс в системе "ПОЛ - антиоксиданты". В настоящее время убедительно доказано, что активация процессов липопероксидации на фоне угнетения антиоксидантных ресурсов организма сопровождает практически все анемии [5, 25, 181, 183]. Это, в свою очередь, приводит к усилению мембранодеструкции, накоплению в крови токсических продуктов ПОЛ. В то же время в работах ряда авторов, изучающих эту проблему, доказано, что лечение железодефицитной анемии ферропрепаратами инициирует гиперпродукцию свободных радикалов, вызывая оксидативный стресс [5, 27, 33,39,51,82,99,159, 169].

Однако не все факторы, вызывающие ЖДА, равнозначны. Существенные различия в причинах ее возникновения обусловлены географическими и социально-бытовыми условиями- Особую значимость проблема железодефицитной анемии приобретает в эндемичных по дефициту некоторых микроэлементов (в том числе, селена) регионах, к числу которых относится Читинская область.

Способность селена обеспечивать адекватный ответ со стороны ферментативного антиоксидантного звена за счет его включения в структуру глутатионпероксидазы [2, 7, 8, 69,135,155], а также отсутствие исследований по применению препаратов селена при анемиях у детей раннего возраста делают актуальным вопрос об их использовании в лечении данных патологических состояний, особенно в регионах, дефицитных по этому микроэлементу.

Изучение биохимических особенностей течения железодефицитной анемии у детей раннего возраста в Забайкалье позволит определить адекватный комплекс лечебно-профилактических мероприятий.

Цель работы: установить патогенетическое значение изменения содержания селена в крови и структурно-функциональных нарушений мембран эритроцитов при железодефицитных анемиях у детей раннего возраста в Забайкалье, на основе полученных результатов разработать патогенетически обоснованные подходы к лечению железодефицитной анемии.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

1. Изучить показатели системы эритрона, состояние антиоксидантной системы эритроцитов и содержание селена в крови у детей раннего возраста с железодефицитной анемией, проживающих в Забайкалье.

2. Исследовать фосфолипидный статус мембран эритроцитов при железодефицитной анемии у детей раннего возраста в зависимости от района проживания.

3. Оценить характер корреляционных взаимоотношений между изучаемыми параметрами у детей раннего возраста с железодефицитной анемией, проживающих в Забайкалье.

4. Определить клинико-лабораторную эффективность применения «Неоселена» в комплексной терапии железодефицитной анемии у детей раннего возраста.

Научная новизна. Приоритетным в работе является установление закономерных изменений показателей системы «ПОЛ - антиоксиданты» на фоне снижения содержания селена в крови у детей раннего возраста, как здоровых, так и больных железодефицитной анемией. У детей с анемией, проживающих в селенодефицитном регионе, его уровень снижается значительно ниже критического и составляет в среднем 24 мкг/л.

Установлено, что у детей с железодефицитной анемией, независимо от района проживания, выявляются однонаправленные изменения со стороны фосфолипидного состава мембран эритроцитов. Это проявляется падением уровня фосфатидилхолина (ФХ), фосфатидилсерина (ФС), повышением содержания фосфатидилэтаноламина (ФЭА), сфингомиелина (СМ) и лизоформ фосфолипидов - лизофосфатидилхолина (ЛФХ) и лизофосфатидилэтаноламина (ЛФЭА). Причем содержание последних составляет более трети всего пула фосфолипидов, что является одним из ведущих факторов усиленного гемолиза.

С помощью корреляционного анализа доказано, что уровень селена в крови детей раннего возраста, больных железодефицитной анемией, определяет активность как глутатионзависимых ферментов, так и каталазы, а также содержание лизофосфолипидов эритроцитарных мембран.

Показано, что применение препарата «Неоселен» в комплексной терапии железодефицитной анемии приводит к более ранней нормализации системы эритрона, восстановлению активности антиоксидантных ферментов и спектра фосфолипидов мембран эритроцитов, за счет уменьшения их лизоформ. Корреляционный анализ подтверждает, что одним из факторов, обусловливающих эти сдвиги, является селен.

Теоретическое и практическое значение. Выявленные закономерности изменений изученных лабораторных показателей позволили установить важную патогенетическую роль снижения уровня селена в крови при железодефицитной анемии у детей раннего возраста. Доказана целесообразность использования препарата «Неоселен» в комплексном лечении данного заболевания. Разработана и внедрена схема использования «Неоселена» при лечении анемии у детей раннего возраста.

Оценка параметров перекисного статуса, совместно с исследованием уровня селена в крови, может быть использована для дифференцированного назначения препаратов селена в комплексной терапии железодефицитной анемии и контроля ее эффективности.

Результаты работы внедрены в учебный процесс кафедры патологической физиологии, пропедевтики детских болезней и педиатрии ЧГМА, используются в практике врачей-педиатров, врачей-гематологов.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В патогенезе железодефицитной анемии у детей раннего возраста, проживающих в Забайкалье, существенную роль играет выраженный дефицит селена, приводящий к дисбалансу в системе «ПОЛ - антиоксиданты», увеличению количества лизоформ фосфолипидов в мембранах эритроцитов и усилению гемолиза.

2. Применение препарата «Неоселен» в комплексной терапии железодефицитной анемии у детей в условиях недостатка селена предотвращает чрезмерную липопероксидацию мембранных структур, повышает активность системы антирадикальной защиты, способствуя интенсивному суточному приросту гемоглобина и сокращению сроков лечения.

Апробация диссертации. Полученные данные неоднократно обсуждались на заседаниях кафедры патологической физиологии, биохимии, пропедевтики детских болезней, госпитальной педиатрии; заседаниях регионального отделения Союза педиатров России; на научно-практической конференции «Проблемы и перспективы развития детской онкологии, гематологии в Читинской области», г. Чита, 2001 г.; на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 50-летию Читинской государственной медицинской академии, г. Чита, 2003 г.; на 4й Российской биогеохимической школе «Геохимическая экология и биогеохимическое изучение таксонов биосферы», г. Москва, 2003 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 110 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 116 работ отечественных и 69 — зарубежных авторов и списка сокращений. Работа иллюстрирована 23 таблицами и 18 рисунками.

ВЫВОДЫ

1. У здоровых детей раннего возраста, проживающих в регионе с выраженным селенодефицитом (Алек.-Заводский район Читинской области) регистрируются низкие величины селена в крови по сравнению с детьми г. Читы при одинаковой активности ферментов системы «глутатионпероксидаза-глутатионредуктаза».

2. В условиях Забайкалья при железодефицитной анемии у детей на фоне типичных изменений показателей гемограммы наблюдается снижение содержания селена и активности антиоксидантных ферментов эритроцитов, приводящие к усилению их перекисного гемолиза; у детей, проживающих в регионе с выраженным дефицитом селена, его уровень уменьшается ниже критического (50 мкг/л).

3. У детей с железодефицитной анемией, независимо от региона проживания, выявляются однонаправленные изменения фосфолипидного состава мембран эритроцитов, характеризующиеся падением уровня ФХ, ФС и повышением доли СМ, ФЭА и лизофосфолипидов, причем содержание последних составляет более трети всего фосфолипидного пула.

4. Выявленные корреляционные взаимоотношения между изученными показателями свидетельствуют о том, что при железодефицитных анемиях уровень селена в крови определяет активность (положительные связи) не только глутатионзависимых ферментов, но и каталазы, а также содержание лизофосфолипидов (отрицательные связи) в эритроцитарных мембранах.

5. Использование «Неоселена» в комплексной терапии железодефицитной анемии у детей раннего возраста способствует более ранней нормализации показателей системы эритрона, на фоне выраженного клинического эффекта, восстановлению активности антиоксидантных ферментов и спектра фосфолипидов мембран эритроцитов за счет уменьшения их лизоформ, что приводит к повышению ПРЭ. Одним из факторов, обусловливающих эти сдвиги, является селен, что подтверждается результатами корреляционного анализа.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В условиях Забайкалья для оценки характера течения ЖДА у детей раннего возраста рекомендуется определять уровень селена в крови. При его значениях ниже 50 мкг/л необходимо назначение препаратов селена.

2. В качестве препарата, содержащего селен, для лечения железодефицитной анемии у детей раннего возраста, рекомендуется использовать «Неоселен» (0,05% раствор Ыа28еОз в 4% соляной кислоте). Концентрат разводится дважды: содержимое флакона (10 мл) разводят кипяченой водой в 0,5 литрах и хранят в холодильнике. Полученный раствор в объеме 2,5 мл (25 мкг селена) добавляют в 5-7 мл воды. Способ введения -пероральный, кратность приема - 2 раза в день после кормления, срок лечения 12 недель.