Автореферат и диссертация по медицине (14.00.21) на тему:Оценка биосовместимости золотых стоматологических сплавов по показателям гомеостаза слюнных желез

ДИССЕРТАЦИЯ
Оценка биосовместимости золотых стоматологических сплавов по показателям гомеостаза слюнных желез - диссертация, тема по медицине
АВТОРЕФЕРАТ
Оценка биосовместимости золотых стоматологических сплавов по показателям гомеостаза слюнных желез - тема автореферата по медицине
Канцерова, Лариса Рустамовна Москва 2005 г.
Ученая степень
кандидата медицинских наук
ВАК РФ
14.00.21
 
 

Автореферат диссертации по медицине на тему Оценка биосовместимости золотых стоматологических сплавов по показателям гомеостаза слюнных желез

На правах рукописи

КАНЦЕРОВА ЛАРИСА РУСТАМОВНА

УДК 616.316-089,29

ОЦЕНКА БИОСОВМЕСТИМОСТИ ЗОЛОТЫХ СТОМАТОЛОГИЧЕСКИХ СПЛАВОВ ПО ПОКАЗАТЕЛЯМ ГОМЕОСТАЗА СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ ( ЛАБОРАТОРНО- ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)

14.00.21 - «Стоматология» 14.00.16 - «Патологическая физиология»

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на тискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва-2005

РАБОТА ВЫПОЛНЕНА В ГОСУДАРСТВЕННОМ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОМ УЧРЕЖДЕНИИ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИКО-

СТОМАТОЛОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНСТВА ПО ЗДРАВООХРАНЕНИЮ И СОЦИАЛЬНОМУ РАЗВИТИЮ»

Научные руководители: заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук, профессор Игорь Юльевич Лебеденко

доктор медицинских наук; профессор

Официальные оппоненты:

заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Алексей Иванович Дойников

доктор биологических наук, профессор Инга Алексеевна Вальцева

Ведущая организация:

ФГУ ЦНИИС Росздрава

Защита состоится «_»

2005. в часов

на заседании диссертационного Совета Д 208.041.03 при ГОУ ВДОМГМСУ Раздета (127066, г.Москва, улДолгоруковская, 4)

Автореферат разослан «_»_2005

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке университета про адресу: г. Москва, ул. Вучетича, д. 10-а

Ученый секретарь диссертационного совета доцент

аВ.Шарашн

200тмтг

Актуальность проблемы:

В настоящее время значительно возросло число лиц с непереносимостью зубных протезов из сплавов неблагородных металлов (Л.Д.Гожая , 1988 ; ДЛДемнер, 1988; ВЛКолейкин, 1993 ; И.ЮЛебеденко , 1996 ;Б.П. Марков, 1997 ). В связи с этим продолжаются научно-исследовательские работы по совершенство ванию технологии зубных протезов и поиску новых биосовместалых материалов.

Для ортопедического лечения этой категории больных за рубежом успешно используются протезы, изготовленные из сплавов металлов на основе золота. В России для зубных протезов многие десятилетня применяют сплав 900 пробы -ЗлСрМ-900-40, а последние годы сплавы подмосковного ФГУП НПК Суперметалл: термоупрочняемы сшив Супер (ТЗ 750 пробы) и золото-платиновый сплав для металлокерамики Супер КМ.

Все эти сплавы прошли стандартные испытания на биосовместимость. Однако не изученным остался вопрос их влияния на функцию слюнных желез, хотя общеизвестна большая роль слюноотделения и других функций слюнных желез для нормального функционирования тканей полости рта.. В международном стандарте изучения биосовместимости стоматологических сплавов (ISO 10993-6,1994) отсутствуют указания на изучение структуры и функции слюнных желез, несмотря на важнейшую роль слюнных желез и их секрета - слюны в процессах гомеостаза рта и ответной реакции тканей полости рта на зубные протезы (А.Б.Денисов, 2001). В доступной литературе работы по слюнным железам для изучения биосовместимости стоматологических сплавов отсутствуют.

Цель исследования:

Предупреждение возможных осложнений при ортопедическом лечении с использованием золотых

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ ■ БИБЛИОТЕКА |

—I 1М К.1— Ш

применения сплавов Супер ТЗ, Супер КМ, ЗлСрМ-90040 на основе всестороннего изучения их влияния на струетуру и функцию слюнных желез в эксперименте

Задачи исследования:

1 Изучить морфометрические изменения в слюнных железах при имплантации экспериментальным животным образцов сплавов Супер ТЗ, Супер КМ, ЗлСрМ-900-40.

2 Исследовать функционирование слюнных желез у экспериментальных животных с имплантированными образцами трех вышеуказанных сплавов

3. Исследовать влияние сплавов Супер ТЗ, Супер КМ, ЗлСрМ 900-40 на лимфатическую систему.

4 Дать практические рекомендации по применению золотых стоматологических сплавов для ортопедического лечения зубными протезами.

Научная новизна и практическая значимость работы:

Получены новые данные о биосовместимости отечественных золотых зубопротезных сплавов: Супер ТЗ, Супер КМ, ЗлСрМ-900-40

Впервые в сравнительном аспекте изучено влияние золотых стоматологических сплавов на морфологию и функцию слюнных желез и лимфатической систем в эксперименте

Доказано, что сплавы Супер ТЗ и Супер КМ, оказывают меньшее влияние на функцию слюнных желез, чем ЗлСрМ-900-40. Даны практические рекомендации по применению сплавов драгметаллов в стоматологической практике.

Положения, выносимые на защиту

1 В эксперименте на животных имплантация образцов сплавов Супер ТЗ, Супер КМ, ЗлСрМ-900-40 опосредованно сопровождается морфометрическими, функциональными и структурными изменениями в слюнных железах

2. При имплантации образцов золотого сплава ЗлСрМ -900-40 экспериментальным животным возникает достоверное уменьшение массы подчелюстной слюнной железы

3. Образцы стоматологических золотых сплавов при имплантации крысам вызывают качественные и количественные изменения состава слюны.

Апробация и внедрение результатов исследования

Материалы диссертации доложены и обсуждены на совместном заседании кафедры госпитальной ортопедической стоматологии, кафедры стоматологии общей практики и подготовки зубных техников, лаборатории материаловедения НИМСИ и кафедры патофизиологии стоматологического факультета МГМСУ (2005). Рекомендации по применению сплавов Супер ТЗ, Супер КМ, ЗлСрМ-900-40 внедрены в практику и педагогический процесс кафедр госпитальной ортопедической стоматологии и кафедры стоматологии общей практики и подготовки зубных техников. Работа включена в план НИР МГМСУ. Номер госрегистрации 01970008621

Объем и структура диссертации:

Диссертация состоит из введения, обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Указатель литературы содержит 194 источника, из них 127 работ иностранных авторов. Текст диссертации изложен на 171 странице, иллюстрирован 18 таблицами, 79 рисунками и имеет 2 приложения.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

В главе «Обзор литературы» приведены сведения об изменении состава и свойств слюны и ротовой жидкости при некоторых патологических состояниях. Подробно и всесторонне освещены анатомия и гистология слюнных желез. Представлен обзор работ отечественных и зарубежных ученых, обстоятельно раскрывающий современные сведения о функции и роли регионарной лимфоидной ткани в гомеостазе слюнных желез с позиции представления о функциональном элементе. Сделано убедительное заключение о целесообразности изучения функция слюнных желез при определении биосовместимости стоматологических сплавов металлов. Это открывает новые перспективы для выбора материала зубного протеза при ортопедическом лечении пациентов группы риска.

Однако, актуальная проблема, имеющая большую клиническую значимость, лишь фрагментарно отражена в литературе. Отсутствуют данные об изучении состояния тканей слюнных желез как показателя биосовместимости материала.

В главе «Материалы и методы исследования приведены составы изученных сплавов (см .табл.1), описана методика изготовления образцов и их имплантации.

Таблица 1

Содержание основных компонентов изучаемых стоматологических сплавов, %.

Сплав стоматологический из благородных металлов высокопробный на основе золота «Супер-КМ» (КМ) ЗлСрМ-900-40 стоив 900 цюбы (900) Сплав ТЗ Сплав термоупрочняемый стоматологический на основе золота «Супер-ТЗ» (ТЗ)

Нормативный документ ТУ 9391-01517444965-2003 Патент РФ №2172159 от 20.08.2001 ТУ 48-1-299-80 ТУ 9391-01517444965-2003 Патент РФ № 1836474 от 20.08.1992

Золото (Ли) 85-86 90 75

Медь (Си) 0,5-1 6 12

Платина (14) 9-10

Палладий (Рё) 4-5

Олово (Бп) 0,5-1

Серебро 4 12

Цинк (го) 1

Работа с животными проводили иа экспериментальной базе кафедры патофизиологии стоматологического факультета МГМСУ с учетом « Правил доклинической оценки безопасности фармакологических средств (ОДР)» (1992) на 48 нелинейных крысах обоего пола в соответствии с требованиями (ИСО 10993, 1991 часть 6, пункт 3.3.1). Исходная масса животных составила 250 ■+■ 280 г. Содержание животных проводили в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей (Страсбург,1986).

Образцы сплавов для исследований готовили в зуботехнической лаборатории кафедры госпитальной ортопедической стоматологии МГМСУ.

Расчет массы имплантата проводили по формуле: (М.Р)-К, где

М - максимальное количество материала, требуемого дня протезирования одного пациента (50 г); Р - средняя масса человека 70 кг; К - коэффициент аггравации, равный 10.

Следовательно, животному массой 250 г имплантировали образец сплава массой 1,8 г прямоугольной или квадратной формы с округлыми краями.

Контрольным животным вводили образцы медицинского стекла марки ВС-3 ГОСТ 19808-86 такого же объема. Образцы материалов стерилизовали и имплантировали подопытным животным под кетаминовым наркозом (в дозе 5- 7 мг/кг) подкожно в область шеи. Для этого делали разрез длиной 10 мм выше крестца, и препарировали подкожный туннель тупым отделением к шее. Затем через туннель длинным пинцетом вводили один имплантат в область шеи (ISO 10993-6,1994 .часть 6, пункт 4.5.2).

Длительность эксперимента с момента операции (12 недель) выбрана в соответствии с международным стандартом ИСО (1991 часть 6, пункт 3.3.2.). Испытательные периоды выбраны так, чтобы установить состояние гомеостаза в ответ на биологическую реакцию имплантации. Обследование животных проводили до начала эксперимента (фоновые показатели) и через 12 недель (3 месяца) после вживления материалов В течение всего эксперимента проводили наблюдения за приростом массы тела подопытных и контрольных животных. Данный показатель в токсикологических исследованиях, по-прежнему, остается одним из самых чувствительных.

Всего для оценки биосовместимости было проведено 7 серий исследований, что представлено в таблице 2

• Определение массы тела

• Оценка состояния слюноотделительной функции

• Биохимический анализ слюны

• Биохимический анализ крови

После вывода животных из эксперимента проводились

• Биометрическая оценка массы подчелюстной слюнной железы

• Гистологический анализ слюнных желез и регионарных лимфоузлов

• Количественная оценка морфометрических изменений слюнных желез Всего проведено 1272 исследования

Таблица 2

Объем проведенных исследований

№ Вид исследования Количество исследований

1 Определение массы тела крысы 48

2 Оценка состояния слюноотделительной функции 48

3 Биохимический анализ крови 48X9=432

4 Биохимический анализ слюны 48 X 11 = 528

5 Биометрическая оценка массы слюнных желез 24 X 2 = 48

6 Гистологический анализ СЖ и ЛУ 24 X 4 = 96

7 Морфометрическая оценка по Стефанову СБ. 24 X 3 = 72

ИТОГО 1272

В качестве объектов исследования были выбраны ряд слюнных желез околоушная - (ОУСЖ); поднижнечелюстная (ПЧСЖ), подъязычная (ПЯСЖ), а также выделяя лимфоузлы (Л/У) шеи Для количественной оценки изменений был проведен подсчет площади функциональных структур по методике Стефанова (1974). Морфометрические и гистологические исследования проведены нами в лаборатории функциональной анатомии НИИ морфологии человека РАМН под руководством ведущих научных сотрудников кандидата биологических наук Григоренко Дины Ефремовны и кандидата биологических наук Амировой Гульшат Гареевны Все данные количественных исследований подвергали статистической обработке методом вариационного анализа

Результаты исследований

На рис 1 представлены результаты изучения динамики массы тела животных в течение 12 недель после имплантации образцов золотых стоматологических сплавов Было установлено, что прирост массы тела после имплантации образцов разных золотых сплавов различен В контроле прирост массы тела составил 121±20% у самцов и 118±19% у самок В случае сплава 900 соответственно 108±17% и 107±19%, Супер ТЗ 108±14% и 119±17%. Супер КМ 114±15% и 111±15% Различия в полученных значениях статистически не достоверны, что соответствует ранее проведенным токсикологическим исследованиям данных сплавов Биометрическое исследование массы железистой ткани после имплантации золотых сплавов показало, что сухая масса ПЧСЖ достоверно уменьшилась через 12 недель опыта при имплантации сплава 900 (Рис.2).

Супер ТЗ

900

Супер КМ

Контроль

Рис 1 Прирост массы тела крыс-самцов через 3 месяца после имплантации,%

0200005353025300010101530100024800025353480201010201020053

п: ±ао О

° М«п

масса ПЧСЖ "таорвтичасмЯ" масса ПЧСЖ фактическая

Рис 2 Уменьшение массы подчелюстных слюнных желез при имплантации сплава 900.

Биометрическая оценка больших слюнных желез была подкреплена исследованием их структуры Обнаружено, что в реакции отдельных желез на имплантацию драгоценных сплавов есть разница " исчерченные" протоки в ОУСЖ уменьшаются в размерах, а в ПЧСЖ клетки их набухают В ПЧСЖ на месте погибших ацинусов образуются небольшие полости, напоминающие " микрокисты"

Рис.3 Подчелюстная слюнная железа через 12 недель имплантации сплава 900. Окраска гематоксилин - эозин Увеличение X 400 . Отмечено стрелкой -образование микрокисты.

Наибольшие изменения в структуре слюнных желез у животных отмечаются при имплантации сплава 900.

В ОУСЖ ацинусы и дольки в целом выглядят уменьшенными в размерах, более плотными с большим содержанием выводных протоков. Встречаются небольшие очаги некроза (рис 4) Отмечается мелкая вакуолизация ацинарных клеток Соединительная ткань выглядит увеличенной в размерах Чаше встречаются вставочные отделы В междольковых прослойках обширные кровоизлияния. Некоторые протоки полностью окружены кровью.

Рис 4 Околоушная слюнная железа через 12 недель имплантации сплава 900 Окраска гематоксилин - эозин Увеличение X 400. Выделено кругом - некроз ацинуса

У животных группы КМ в ОУСЖ ацинусы мелкие, но отмечаются и нормальных размеров со светлой центральной частью Крупные протоки без изменений Мелкие - часть без изменений, в некоторых - признаки пролиферации (рис. 5)

Рис 5 Околоушная слюнная железа через 12 недель имплантации сплава Супер КМ Окраска гематоксилин - эозин Увеличение X 200 Долька железы нормального строения обведена кругом Гиперхром ность ядер эпителиальных клеток концевых отделов помечена стрелками.

В венулах, расположенных рядом с крупными междольковыми протоками, отмечается гемолиз Признаки воспаления более выражены только в капсуле В ПЧСЖ ацинусы с нечеткими контурами, сильно различаются по величине В других случаях из-за отека межуточной ткани хорошо дифференцируются

Рис.6 Подчелюстная слюнная железа через 12 недель имплантации сплава Супер КМ. Окраска гематоксилин - эозин. Увеличение X 400. Отмечено стрелками - сильная вакуолизация эпителия ацинусов, уменьшение их размеров.

Эпителиоциты секреторных отделов интенсивно окрашиваются, имеют уплотненную цитоплазму Нередко в них содержатся вакуоли, отмечается перинуклеарный отек На месте погибших ацинусов возникают кистеобразные структуры Строма железы отечна эпителиоциты протоков набухшие, их цитоплазма зернистая или содержит крупные вакуоли. Местами клетки некротизируются и отслаиваются пластами. Протоки частично разрушены Через стенку сохранившихся протоков из окружающей ткани мигрируют лимфоциты, которые поступают в просвет протока и выводятся вместе с секретом В междольковых и внутридольковых прослойках соединительной ткани в области протоков отмечаются кровоизлияния, которые нередко полностью окружают проток (рис. 6).

При имплантации сплава Супер-ТЗ отмечены наименьшие структурные изменения. Видна лишь гиперхромность ядер ацинарных клеток(рис.7).

Рис 7 Подъязычная слюнная железа через 12 недель имплантации сплава Супер ТЗ Окраска гематоксилин - эозин Увеличение X 400. Стрелками отмечена - гиперхромность ядер эпителиальных клеток концевых отделов

Дольки железы уменьшены Они имеют большое число внутридольковых протоков Кровь встречается внутри протоков. В сосудах наблюдается краевое стояние лимфоцитов и нейтрофилов В большинстве выводных протоков эпителий дистрофически изменен (набухание, вакуолизация, кариолизис) Через стенки протоков мигрирует значительное число лимфоцитов и нейтрофилов (рис.8).

Рис 8 Подчелюстная слюнная железа через 12 недель имплантации сплава Супер ТЗ. Окраска гематоксилин - эозин.Увеличение X 400 Выделено -разрушение протока, миграция лимфоцитов через стенку.

Таким образом, в отличие от контроля установлено, что при имплантации золотосодержащих сплавов при микроскопическом анализе в железистой ткани больших слюнных желез происходят патологические изменения.

Установлено, что в ОУСЖ размер ацинусов и протоков достоверно не изменен Напротив, в ПЧСЖ происходят высоко достоверные изменения в группе, где имплантировали сплав 900.У самцов этой группы площадь протоков междольковых и особенно мелких (вставочных и исчерченных) достоверно увеличилась на 61 условный %. В той же группе у самок также достоверно увеличилась на 21 условный %.

Шедймусй

|»Я|МШ*Я

ТЭт ТЭм 900т 800к КМт КМ» Мт Я«г

Рис.9 Площадь протоков и ацинусов в подчелюстных слюнных железах крыс после имплантации золотосодержащих сплавов (в %).* Р<0,0001.

Таким образом мы получили достоверное количественное подтверждение того, что при краткосрочном имплантационном тесте на биосовместимость золотосодержащих сплавов происходит достоверное изменение ацинусов и протоков в ГТЧСЖ в группе животных .которым имплантировали сплав 900.

Эти результаты совпадают с данными функциональных исследований. В них было установлено, что имплантация золотых стоматологических сплавов по стандартной методике (в область шеи) опосредованно влияет на функцию слюнных желез. Изменяется нормальное функционирование слюнных желез, изменяются процессы секреции, экскреции и рекреции, что приводит к изменению состава слюны.

У самок скорость слюноотделения достоверно не изменяется. У самцов слюноотделение достоверно замедляется на 24% под влиянием сплава - 900 ( контроль - 8,85 ± 1,02;опыт - 6,17 ±1,00 мг/ час/ кг).

В собранной слюне крыс определяли ионный и органический состав, активность ферментов по отношению к контролю (N), принятому за 100% для каждого показателя. (Таб.3 и 4)

Во всех группах с имплантацией сплавов отмечено значительное (4-5 раз) усиление активности а - амилазы (AMY). У самцов и у самок соответственно 498%+544% Супер ТЗ, 537%-М 10% Супер КМ и 538%+ 549% сплав-900. Достоверное увеличение общего белка (TP) в группе с имплантацией сплавов 900 и Супер КМ. У самцов и у самок соответственно 98% + 111% Супер ТЗ, 122%+132% Супер КМ и 121%+135% у сплава 900. Таким образом, процесс секреции после имплантации образцов сплавов усиливается.

Достоверно установлено угнетение выведения из клетки не синтезируемых в ней продуктов метаболизма во всех опытных группах, в частности по содержанию в слюне мочевины (UREA) показало высоко достоверное угнетение этого процесса во всех опытных группах. Наиболее выражен этот процесс в группе с имплантацией сплава Супер ТЗ. У самцов и у самок соответственно 27% +33% Супер ТЗ, 51%+47% Супер КМ и 45%+ 47% сплав- 900. Следовательно, процесс экскреции в железистой ткани после имплантации сплавов тормозится.

При изучении выведения из клеток неизменяемых продуктов обнаружено достоверное значительное увеличение концентрации в слюне ионов натрия. У самцов и у самок соответственно 89% +136% Супер ТЗ, 98% +120% Супер КМ и 385%+ 438% сплав- 900.

Для обнаружения возможности развития некробиотических процессов в слюнных железах мы изучали активность в слюне аминотрансфераз (аспартатаминотрансферазы - GOT и аланинаминотрансферазы - GTP). Нами обнаружено достоверное усиление активности аспартатаминотрансферазы (GOT). Оно наиболее выражено у сплава - 900. У самцов и у самок соответственно 446%+454% Супер ТЗ, 364%+

292%Супер КМ и 583%-^ 513%сплав- 900. Изменение активности аланинами-нотрансферазы (GTP) имеет ту же направленность. У самцов и у самок соответственно 212% +191% Супер ТЗ, 181%-202% Супер КМ и 491% -481% 900. То есть налицо активные некробиотические процессы, которые приводят к увеличению активности этих ферментов в слюне.

Таблица 3

Биохимический состав смешанной слюны самцов крыс после имплантации золотых сплавов при пересчете на условную скорость 10 мл/ час/ кг

показатели IP GTP GOT UREA AMY NA

размерность г% Е/л Е/л ммоль/л ммкат/л ммоль/л

TZ 1,61 4,82 11,41 0,61 8421 4,92

% 98 212 446 27 498 89

900 2,00 11,15 14,95 1,01 9105 21,32

% 121 491 583 45 538 385**

КМ 2,01 4,25 9,34 1,14 8980 5,45

% 122 187 364 51 531 98

N 1,64 2,27 2,56 2,23 1689 5,53

% 100 100 100 100 100 100

20

Таблица 4

Биохимический состав смешанной слюны самок крыс после имплантации

золотых сплавов при пересчете на условную скорость 10 мл/ час/ кг

показатели TP GTP GOT UREA AMY NA

размерность г% Е/л Е/л ммоль/л ммкат/л ммоль/л

TZ 1,66 4,48 11,4 0,74 9019 6,28

% 111 197 454 33 544 136

900 2,02 10,93 12,88 1,04 6798 24,22

% 135 481 513 47 410 438

КМ 1,98 4,58 7,33 1,06 9090 6,43

% 132 202 292 47 549 120

N 1,5 2,27 2,51 2,23 1656 5,53

% 100 100 100 100 100 100

Обозначения TP - общий белок, GTP - аланинаминотрасфераза; GOT -аспартатаминотрасфераза UREA - мочевина, AMY - а - амилаза,GLUC -nn0K03a;TZ - сплав Супер Т3,900 - сплав ЗлСрМ-900-40; КМ - сплав Супер КМ; N - контроль

После имплантации золотосодержащих сплавов проницаемость гематоса-ливарного барьера для глюкозы достоверно не изменилась. Напротив, проницаемость другого органического вещества мочевины в опыте достоверно изменилась У самок под влиянием сплава ЗлСрМ-900-40 величина проницаемости уже достоверно снизилась на 16% (Р < 0,01). Таким образом, при исследовании проницаемости гематосаливарного барьера после имплантации золотосодержащих сплавов нами обнаружено достоверное её изменение Наиболее сильно это выражено после имплантации сплава ЗлСрМ-900-40

Еще одним этапом нашей работы было морфологическое исследование структуры лимфатического узла, через который осуществляется отток жидкости из этого региона Обнаружено, что процесс имплантации сплавов заметно сказывается на структуре регионарных лимфоузлов Возникают как неспецифические реакции плазмоцитоз, гипертрофия ретикулярных клеток, так и признаки повреждения лимфоидной ткани в органе - вокруг лимфо-идных узелков и на границе с паракортикальной зоной появляются фиброзные валики, разрастается соединительная ткань и фиброциты, в паракортикальной зоне резко расширяются сосуды, которые заполнены эритроцитами Микроскопический анализ структуры лимфатических узлов, регионарных для слюнных желез, показал, что через 12 недель после имплантации сплава 900 происходит резкое повреждение лимфоидной ткани в лимфатическом узле, наблюдаются - фиброз, деструкция, застойные явления и слабая плаз-матизация органа (рис. 10)

Рис 10 Микрофотография регионарного лимфоузла крысы регионарного для субмандибулярной слюнной железы через 12 недель после имплантации сплава 900 (самка). Окраска гематоксилин-эозином Увеличение X 400. Соединительная ткань (1) и фиброз (2) со стороны капсулы Через 12 недель имплантации сплава СУПЕР КМ установлено нарушение структуры лимфоидной ткани в лимфатическом узле, наблюдаются: фиброз, деструкция, застойные явления.

При имплантации образцов сплава СУПЕР ТЗ строение лимфатического узла не нарушается - четко выражены лимфоидные узелки, расположенные по периферии органа и паракортикальная зона под узелками.

Проведенное исследование позволяет ранжировать по эффекту биосовместимости выпускаемые в РФ золотые стоматологические сплавы Нетривиальным является заключение о лучшей биосовместимости сплава ТЗ в сравнении со сплавом- 900, не смотря на более высокую пробу последнего.

Практически важным является заключение о целесообразности применения зубных протезов из сплава ТЗ вместо сплава- 900.

Выводы

1. Имплантация золотых стоматологических сплавов для зубных протезов по стандартной методике опосредованно влияет на функцию слюнных желез. Изменяется нормальное их функционирование: слюноотделение, процессы секреции, экскреции и рекреции, что приводит к изменению состава слюны.

2. Имплантация золотого сплава 900 вызывает достоверное уменьшение массы подчелюстной слюнной железы, в равной степени как у самцов, так у самок экспериментальных животных.

3. Процесс имплантации сплавов заметно сказывается на структуре регионарных лимфоузлов. Возникают как неспецифические реакции: плазмоцитоз, гипертрофия ретикулярных клеток, так и признаки повреждения лимфоид-ной ткани в органе - вокруг лимфоидных узелков и на границе с паракор-тикальной зоной появляются фиброзные валики, разрастается соединительная ткань и фиброциты, в паракортакальной зоне резко расширяются сосуды, которые заполнены эритроцитами.

4. В полученной смешанной слюне отмечено качественное и

количественное изменение состава слюны под воздействием золотых стоматологических сплавов.

Практические рекомендации

В стандартные испытания биосовместимости стоматологических сплавов в краткосрочный эксперимент (12 недель) целесообразно включать исследования структуры и функции больших слюнных желез. Для обоснованного применения стоматологических сплавов для зубных протезов особенно в имплантологии в стандартные испытания на биосовместимость следует рекомендовать включить исследования структуры регионарных лимфатических узлов.

В случае выбора материала для зубных протезов из выпускаемых отечественных золотых сплавов, предпочтение надо отдавать согласно ранжированному ряду:

1) Супер ТЗ

2) Супер КМ

3) ЗйСрМ-900-40

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1 Л.Р.Канцерова, А.Б. Денисов. Макроскопические и биометрические показатели больших слюнных желез при имплантации золотых сплавов. Российский стоматологический журнал ,2003 № б. С. 10-11

2. Л.Р.Канцерова, А.Б. Денисов. Оценка биосовместимости золотых сплавов по функциональным показателям слюнных желез в эксперименте Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.2004 №3 С 257-260

3. Л.Р.Канцерова, А.Б. Денисов. Изменение морфологии подчелюстных лимфатических узлов после подкожной имплантации золотых сплавов. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2005 №4.С. 476-479

В2242 9(Г

РНБ Русский фонд

2006-4 26729

Заказ №417. Объем 1 ил. Тираж 100 экз.

Отпечатано в ООО «Петроруш». г. Москва, ул. Палнха-2а, тел. 250-92-06 www.postator.ru

 
 

Оглавление диссертации Канцерова, Лариса Рустамовна :: 2005 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Обзорлитературы.-. I. А натом ня и гистология слюнных желез.

1.1,2. Пищеварительная функция слюны .—.,,

1.13 Муцин слюны.,.

1.1.4 Защитим функция слюны.,.,.,,.,,.

1.1.5 Ремннерализация эмали.,„.

1.1.6 Трофическая функция слюны.

1.1.7 Инкреторная функция слюны.,.

1.1.8 Изменение состава и свойств слюны и ротовой жидкости при некоторых патологических состояниях.

1.5.9 Химические н биохимические показатели слюны.„.,.,.

1.2.Роль регионарной лнмфондной ткани а гомсостаэе слюнных желез с позиции представления о функциональном элементе,.„.,,.

ГЛАВА 2, Материал ы н методы исследования.

2.1 Объект исследования

2.2 Исследуемые сплавы.,.

2.3 Образцы для исследований.,,.

2.4 Метод имплантации в подкожную ткань сю дорсальной средней линии.«л1.

2.5 Методы экспериментальных исследований.

2.5.1 Сиаяомстрня,.

2.5.2 Изучение состава слюны.

2.6. Методы патоморфологичсских и патофизиологических исследований. .„„

2.6.1 Методика пзтоморфологнческих исследований органов подопытных крыс.

2.6.2 Биометрические исследования органон животных после забоя.„.,

2.7. Методы статистического анализа.-----------------.

ГЛАВА 3 Результаты собственных исследований. -,

3.1. Результаты ¡пучення макроскопических и биометрических показателен больших слюнных желез.,

3.2. Результаты изучения биометрических показателей.

3.3. Результаты морфомегричеекнх исследований больших слюнных желез .,.

3.4. Результаты оценки скорости слюноотделения смешанной слюны

3.5. Результаты изучения состава слюны.

3.6. Структурные изменения а больших слюнных железах при имплантации экспериментальным животным образцов сплавов.

3.7. Результаты гистологического исследования слезных желез.

3.8. Результаты изучения проницаемости гематосаливарного барьера.—.^,.

3.9. Оценка биосоамсстимости образцов золотых сплавов по морфологическим показателям регионарных лимфатических узлов.

ГЛАВА 4 Обсуждение результатов. Заключение.

ВЫВОДЫ.

 
 

Введение диссертации по теме "Стоматология", Канцерова, Лариса Рустамовна, автореферат

Актуальность проблемы:

В настоящее время значительно возросло число лни с непереносимостью зубных протезов из out икон неблагородных металлов (Л,Д. Гожая 1988 r.t ДЛ. Демнер l98Sr„ B.R Копейкнн 1993 г., И,Ю Лсбеденко 1996 г. Б П. Марко« 1997 г). В евши с этим продолжаются научно-исследовательские работы по совершенствованию технологии зубных протезов н поиску новых биосовместнмых материалов.

Для ортопсдн*гсского лечения этой категории больных за рубежом успешно используются протезы, изготовленные нз сплавов металлов на основе золота. С древних времен лая зубопротезнроватм применяется золото и его сплавы. В России для зубных протезов многие десятилетия применяют сплав 900 пробы -ЗлСрМ-900-40, а последние годы сплавы подмосковного ФГУП НПК Суперметалл: термоупрочняемый сплав Супер ТЗ 750 пробы и золото-платиновый сплав для металлокерамики Супер КМ

Сплав для зубных протечет должен обладать целым комплексам особых спойств: физико-химических» физнко-мехалнческих , термических нлн температурных бнолоп[Чкн1х(б«юеолместчюстыо}.

Все эти сплавы прошли стандартные испытания на бносовместимость. Однако не изученным остался »опрос их влияния на функцию слюнных желез, хотя общеизвеспи огромная патогенетическая роль слюноотделения н других функций слюнных желез для нормального функционирования тканей полости рта. Дело в там, что и международном стандарте изучения биоеовместимости (ISO 10993-6, \ 994) практически отсутствуют указания на изучение, структуры н функции слюнных желез, несмотря на важнейшую роль слюнных желез к нх секрета - слюны в процессах гомеоетаза рта и ответной реакции тканей полости рта на зубные протезы. В доступной лигературе работы по слюнным железам дня изучения биосовместимостн стоматологических сплавов отсутствуют {Л-Б.Деннеов.2001).

Цель нк.1Ш1яшкй:

Профилактика риска осложнений при ортопедическом лечении с использованием золотых стоматологических сплавов путем обоснованного применении сплавов Супер ТЗ , Супер КМ. ЗлСрМ-'XKWO на основе всестороннею изучения их влияния на структуру н функцию слюнных желез в эксперименте. кнчк исследования;

1, Изучить морфомстрические изменения в слюнных железах при нмплантадин экспериментальным животным образцов сплавов Супер ТЗ, Супер КМ, ЗлСрМ-900-40.

2, Исследовать функционирование слюнных желез у экспериментальных животных с имплантированными образцами трех вышеуказанных сплавов,

3, Исследовать влияние сплавов Супер ТЗ, Супер КМ, ЗлСрМ 900-40 на лимфатическую систему.

4, Дать практические рекомендации по применению золотых стоматологических сплавов для ортопедического лечения зубными протезами,

Киучная новизна и практическая значимость работы:

Получены новые данные о бносовместимости отечественных золотых зубопротезных сплавов: Супер ТЗ, Супер КМ, ЗлСрМ-900-40,

Впервые в сравнительном аспекте изучено влияние золотых стоматологических сплавов на морфологию и функцию слюнных желез и лимфатической систем в эксперименте.

Доказано, что сплавы Супер ТЗ и Супер КМ оказывают меньшее влияние на функцию слюнных желез, чем ЗлСрМ-900-40, Даны практические рекомендации по применению сплавов драгметаллов в стоматологической

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Оценка биосовместимости золотых стоматологических сплавов по показателям гомеостаза слюнных желез"

Практически с рекомендации

В стандартные испытания биосовместимостн стоматологических сплавов в краткосрочный эксперимент (12 недель) целесообразно включать исследования структуры и функции больших слюнных желез. Для обоснованного применения стоматологических сплавов для зубных протезов, особенно в имплантологии, в стандартные испытания на бносовместнмость следует рекомендовать включить исследования структуры регионарных лимфатических узлов.

В случае лыбора материалн и прогсчов из н ьпдо кюшж

ОТСЧССТМЧНЫХ ЗОЛОТЫХ CtUldBOU предпочтение налу отдавать согласно рэнткчроаанчуму рйду:

1) Супер ТЗ

2) Супер КМ

3) ЗлСрМ-iWJn

 
 

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Канцерова, Лариса Рустамовна

1. Афанасьев А.А. Сиаладенит (Этиология, патогенез, клиника, диагностика и лечение). МЛ 995.90с.

2. Алиева Х.Х. Обнаружение метаболитов гельминтов в слюне хозяина и разработка нового метода диагностики и для массовых обследований очаге. Дисс. ...канд. мед. наук.1980.

3. Барабаш Р.Д. Регуляция секреции ферментов слюнных желез // Успехи физиол. Наук.1980.№1.С.73-99.

4. Баевский P.M. Прогнозирование состояний на грани нормы и патологии Л Л 979.

5. Бичкене Э - Ф. А. Функциональное и морфологическое состояние околоушной слюнной железы при заболеваниях желудочно-кишечного тракта. Автореф. дисс.... канд. мед. наук.-Минск,1989.- 16 с.

6. Бородин Ю. И.. Григорьев В. Н Лимфатический узел при циркулятор- ных нарушениях. — Новосибирск, 1986. — С . 64-65.

7. Бородин Ю И.. Сапин М. Р.. Этинген Л. Е. и др. Функциональная анатомия лимфатического узла / — Новосибирск, 1992.

8. Бородин Ю. И. Проблемы лимфологии и эндоэкологии.—Новосибирск, 1998. —Т. 7. — С . 50—53.

9. Гожая Л.Д. Аллергические заболевания в ортопедической стоматологии. -М.: Медицина, 1988. 160с. \6.ДемнерД.Л. Аллергические реакции на металлические зубные протезы: Дис.... канд. мед. наук. - М., 1988. 105с.

10. Евстафьева ЕВ. Физиологическое и биогеохимическое обоснование проблемы адаптации человека в различных условиях среды обитания. Дисс.... докт. мед. наук. 1996. 281с.

11. Капитаненко A.M., Дочкин И.И. Клинический анализ лабораторных исследований. М.: Военное издательство. 1988.270с.

12. Ковалевский Г.В. Очерки иммуноморфологии. Изд. «Наука» Сибирское отд., Новосибирск, 1976, 266 с.

13. Колесникова Е.Н. Использование слюны для иммунологической диагностики и клинико-эпидемиологического анализа дизентерии у взрослых. Дис. ... канд.мед.наук.Л.1980.

14. Комарова Л.Г. Биохимические параметры крови и слюны при язвенной болезни у детей.//Вопр.охр. матер, и детства.1988.№7.С.13-16.

15. Марков Б.П. Профилактика непереносимости металлических включений в полости ртаУ/Стоматология. - 1995.-№ 1.-С.52-54.

16. Образцов ЮЛ. Экологические основы стоматологической патологии //Стоматология. 1997.№5.С.75-79. А2.Петров Р В. Иммунология. - М.: Медицина 1982.368с.

17. Правила докнинической оценки безопасности фармакологических средств(GLP), РД-64-126-91. М.1992.78с.

18. Приказ Минздрава СССР № 290 от 11.04.1972 «Об унификации клинических лабораторных методов исследования».

19. Ромачева И.Ф., Юдин Л-А.. Афанасьев А. А.. Морозов АН. Заболевания и повреждения слюнных желез. 1987 М.Медицина.240с.

20. Розенберг П.А.. Бялко Н.К. Химические методы исследования биологических субстратов в профпатологии. М.,Медицина .-1967.-183 с.

21. Рузуддинов С Влияние протезных материалов на активность ферментов смешанной слюны: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - М.- 1974.-19

22. Рытвин Е-. Тыкочинский Д. Васекин В. Лебедежо И. Стоматологические сплавы благородных металлов ( краткий обзор и информация) //Драгоценные металлы. Драгоценные камни.2003.№10 ( 118) 58-66.

23. Серов ВВ.. Шехтер А.Б. Соединительная ткань (функциональная морфология и общая патология). М„ Медицина,1981,312 с.

24. Советский энциклопедический словарь, 1990, C.1U5. 6\.Стефанов СБ. Морфометрическая сетка случайного шага как средство ускорения измерения морфогенезаУ/Цитология. 1974.Т.16,№6.-С.785-787.

25. Терсенов О.А., Голан Л. Тромбопластнческая активность слюны как показатель адаптивных возможностей организма //методы массового обследования состояния здоровья населения на селе. Тюмень. 1984. П6-П7.

26. Чернух A.M. Функциональный элемент - орган - организм ( особенности адаптации, повреждения, восстановления)//Пат.физиол.-1977.-№4.-С.3-10.

27. Щипский А.В. Сиалоаденоз (Сиалоз). Классификация, патогенез. Клиника, дифференциальная диагностика и выбор схем лечения (кли-нико-экспериментальное исследование). Дисс. ... доктора, мед. наук. М. 2002.357 с.

28. Энциклопедический словарь медицинских терминов, 1982, T.I 379.

29. Banoczy J.. Albrecht М.. Rigo et at. Salivary secretion rate, pH, lactobacilli and yaest counts in diabetic women //Acta Diabetol. Lat. 1987. Vol. 24. №3. P.223-228.

30. Bertolacini R.J., Barney J.E.//Amer.J.Chem.l 958).

31. Desseyn J. L.. M. P. Buisine, N. Porchet. J. P. Aubert. P. Degand & A. 1.aine; Evolutionary history of the l l p ! 5 human mucin gene family. J Mol Evol46, 102-106(1998)

32. Ebisu S.. H. Fukuhara & H. Okada Purification and characterization of Eikenella corrodens aggregating factor from submandibular-sublingual saliva. J Periodontal Res 23, 328-333 (1988)

33. Edgerton. M. Scannapieco. FA.; REDDY. M.S.: LEVINE, M.J. Human Submandibular-Sublingual Saliva Promotes Adhesion of Candida albicans to Polymethylmethacrylate.// Infect Immun. 1993.- Vol.61.-№6.-P. 2644-2652.

34. Epivatiamos A. Harrison J.D.. Garrett JR.. Davics K.J., Senkus R. Ultra- structural and histochemical obseivations on intra-cellular and luminal mi-crocalculi in the lelme sublmgual salivary gland. III. Oral Pathol.1986.-Vol.l5.-P.513-517.

35. Fernley R.T.. Wright R.D. Coghlan JP (1979) A novel carbonic anhydrase from the ovine parotid gland. FEBS Lett 105:299-302

36. Fischer J.. Tovarek J. "Chromolytic" metods for alpha -amylase //Clin.Chem.l975.-Vol.21,№l.P.169-169.

37. Fiske C, Subbarow J.The colorimelric detemination of phosphorus //J.Biol.Chem.l925.Vol.66.P.375-400.

38. Frawlly T.F.. Forshman P. The salivary Na/K ratio and adrenel salt reglat- ing factor// J.Clin.Endocr. 1951 .№ 11 .P.772-777

39. Gendler S. J.. C. A Lancaster. J. Taylor-Papadimitriou. T Dithig. N. Peat, J. Burchell, L. Pemberton, E. N. Lalani & D. Wilson: Molecular cloning and expression of human tumor-associated polymorphic epithelial mucin. JBiolChem 265, 15286-15293(1990)

40. Gibbons RJ, Hay Dl, Schlesinger DH. Delineation of a segment of adsorbed salivary acidic proline-rich proteins which promotes adhesion of Streptococcus gordonii to apatitic surfaces // Infect Immun. 1991 Sep;59(9):2948-54.

41. GroeninkJ.. A. J Ligtenberg. E. C. Veerman. J. G. Bolscher & A. A. Nieuw. Interaction of the salivary low-molecular-weight mucin (MG2) with Actinobacillus actinomycetemcomitans. Antonie Van Leeuwenhoek 70. 79-87(1996)

42. Groth, U., Prellwitz, W„ Jdnchen, E. (1974). Estimation of pharmacokinetic parameters of lithium from saliva and urine // Clinical Pharmacology and Therapeutics. 16, 490-498.

43. Guohua D., Naora K.. Nagasako S.. Hirano H and Iwamoto K. Excretion of Ofloxacin into Saliva in Rats with Renal Failure // Journal of Pharmacology And Experimental Therapeutics Vol. 287. Issue 1, 31-36, October 1998

44. Gurkan S. Bradley RM (1988) Secretions of von Ebner's glands influence responses from taste buds in rat circumvallate papilla. Chem Senses 13:655-661

45. Gururaja T. L„ N. Ramasubbu, P. Venugopalan. M. S. Reddy, K. Ramalingam & M. J. Levine: Structural features of the human salivary mucin, MUC7. Glycoconj J 15, 457-467 (1998)

46. Haeckel R. Hanecke P. Application of saliva for drug monitoring. An in vivo model for transmembrane transport // Eur J Clin Chem Clin Bio-chem.l996.Vol.34№3.P.171-191.

47. Henkin RI. Martin BM. Agarwal RP (1999a) Decreased parotid saliva gustin/carbonic anhydrase VI secretion: an enzyme disorder manifested by gustatory and olfactory dysfunction. Am J Med Sci 318:380-391

48. Henkin RI. Martin BM, Agarwal RP (1999b) Efficacy of exogenous oral zinc in treatment of patients with carbonic anhydrase VI deficiency. Am J Med Sci 318:392-405

49. Hioki S..Niva K. Kishimoto T. et al. The effects of an incisal bite plane on rat sublingual glands.//J.Dent.Res.!983.Vol.62.№6.P.715-720.

50. Holly FJ. hemp MA. Tear physiology and dry eye. Surv Ophthalmol. 1997; 22:69.

51. Idowu, О. R.. Caddy. В. (1981). A review of the use of saliva in the forensic detection of drugs and other chemicals. Journal of the Forensic Science Society. 22, 123-135.

52. International Siandart. Biological evaluation of medical devices. ISO 10993-4. (First edition 1992-12-15).-Geneva.-1994.

53. Jacobson E.D. Salivary secretion // Gastrointestinal physiology/ Ed. R. Jahnson. St. Louis. 1977.P.46-49.

54. Jensen-JL : Lamkin-MS: Troxler-RF; Oppenheim-FG Multiple forms of statherin in human salivary secretions. // Arch-Oral-Biol. 1991; 36(7): 529-34

55. Jensen-JL ,- XuT: lamkin-l: Brodin-P; Aars-H: Berg-T: Oppenheim- FG. Physiological regulation of the secretion of histatins and statherins in human parotid salivaV/J-Dent-Res. 1994; 73 (12): 1811-7

56. Lacassagne A. Dimorphisme sexull de la glande sous-maxillaire chez la souris// Compt.rend.Soc.Bid.- 1940a,- Vol. 133,№ 2.- P. 180-181.

57. Lacassagne A. Reactions de la glande sous-maxillaire а I'homione male chez la souris et le rat // Canpt.rend.Soc.Biol. - 1940b.- Vol.l33,№ 4.-P.539-540.

58. Lamkin-MS: Oppenheim-FG 1993; Structural features of salivary function.// Crit Rev Oral Biol Med 1993;4(3-4):251-9.

59. Larsson A. Henriksson G. Manthorpe R. Sallmyr A. Bredberg A. Ku protein and DNA strand breaks in lip glands of normal and primary Sjogren's syndrome subjects: lack of correlation with apoptosis.// Scand J Immunol 2001 Sep;54(3):328-34

60. Li XJ. Snyder SH (\995) Molecular cloning of ebnerin. a von Ebner's gland protein associated with taste buds. J Bio! Chem 270:17674-17679.

61. Lilt JZ Drug eruption reference manual. London. The Parthenon Publishing Group. 2001: 274-421.

62. Liu В.. $ Rayment. F. G. Oppenheim & R. F. Troxler. Isolation of human salivary mucin MG2 by a novel method and characterization of its interactions with oral bacteria. Arch Biochem Biophys 364. 286-293 (1999)

63. Liu XB, Masago R. Kong L. Zhang BX. Masago S. Vela-Roch N. Katz MS. Yeh CK. Zhang GH. Talal N. Dang H. G-protein signaling abnormalities mediated by CD95 in salivary epithelial cells.// Cell Death Differ 2000 Nov;7(ll):l 119-26

64. Loomis R.E.. Prakobphol A.. Levine V.J.. Reddy M.S. Biochemical and biophysical comparision of two mucins from human submandibular-sublingruial saliva.// Arch.Biochem.Biophys.l987.-Vol.258.P.452-464.

65. Mandel ID. Sialochemistry in diseases and clinical situations affecting salivary glands // Crit.Rev.CIin.Lab.Sci.1980.-12:321-366.

66. Mangos. J. A.. McSherry. N. R. (1970). Micropuncture study of urea excretion in parotid saliva of the rat. American Journal of Physiology. 218, 1329-1332.

67. Martin. К.. Burgen. A. S. V. (1962). Changes in the permeability of the salivary gland caused by sympathetic stimulation and by catecholamines. Journal of General Physiology. 46, 225-243.

68. Mayadas T. N. & D. D. Wagner: von Willebrand factor biosynthesis and processing. Ann N Y Acad Sci 614, 153-166 (1991)

69. Mayadas T. N. & D. D Wagner: Vicinal cysteines in the prosequence play a role in von Willebrand factor multtmer assembly. Proe Natl Acad Sci US A 89, 3531-3535 (1992)

70. Mehrotra R., Thornton D.J.. Sheehan J.K. Isolation and physical characterization of the MUC7 (MG2) mucin from saliva: evidence for self-association.// Biochem-J. 1998 Sep 1; Vol.334 ( Pt 2): P.415-422

71. Moniaitx N.. S. Notlet. N. Porchet. P. Degand, A. Laine & J P. Auberf. Complete sequence of the human mucin MUC4: a putative cell membrane-associated mucin. Biochem J 338, 325-333 (1999)

72. Morse DR., Schacterle G.R.Martin J.S. et al. Stress and relaxation: evaluation by questionnaire salivary changes and physiological responses in a trained mediator//J. Oral Med. l984.Vo!.39.№3.P.I42-!47.

73. Morris-Wiman J. Sego R, Brinkley L, Dolce С (2000) The effects of sialoadenectomy and exogenous EGF on taste bud morphology and maintenance. Chem Senses 25:9-19

74. Moss-^Salentijn L. Klyvert M (1980) Dental and Oral Tissues. 1st ed 1.ondon, Henry Kimpton Publishers, pp. 48-51

75. Murakami H. Sly WS (1987) Purification and characterization of human salivary carbonic anhydrase. J Biol Chem 262:1382-1388

76. Murray P. A.. A. Prakobphol. T. Lee. С /. Hoover & S. J. Fisher: Adherence of oral streptococci to salivary glycoproteins. Infect Immun 60, 31-38(1992)

77. Nagashunmugam Т.. D Malamud. C. Davis. W. R. Abrams & H M. Friedman: Human submandibular saliva inhibits human immunodeficiency virus type I infection by displacing envelope glycoprotein gpl20 from the vims. J Infect Dis 178.1635-1641 (1998)

78. Newman MG, Takei HH. Carranza FA. Carranza's clinical periodontology. London, W.B. Saunders Company, 2002:281-285.

79. Nielsen P.A.;Bennett E.P.Wandall H.H.Therkildsen M.H.Mannibal J.C/aiiie«.Identification of a major human high molecular weight salivary mucin (MG1) as tracheobronchial mucin MUC5B.// Glycobiology 1997 Vol.7.-№3.-P.413-419

80. Nollet. S.. N. Moniaux. J. Maury, D. Petitprez, P. Degand, A. Lame, N. Porchet. and J. P. Aubert. 1998. Human mucin gene MUC4: organization of its 5'-region and polymorphism of its central tandem repeat array. Biochem. J. 332:739-748

81. Olsen P.S.. Kirkegaard P. Poulsen 5 5 Nexo E. Adrenergic effect on exocrine secretion of rat submandibular epidermal growth factor // Gut. -1984-V.25-№11-P.1234-1240.

82. Parkkila 5. Kaunisto K, Rajaniemi L, Kumpulainen T, Jokinen K. Rajaniemi H (1990) Immunohistochemical localization of carbonic anhydrase isoenzymes VI, II, and I in human parotid and submandibular glands. J Histochem Cytochem 38:941-947

83. Paxton. J. W. (1979). Measurement of drugs in saliva: A review. Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology. 1, 11-21.

84. Peil J. Rother P. Quntitative und qualitative Aspekte der Darstellung von

85. Altemskurven der Gewebszusammensetzung der menschlichen Unter- skurven durch Empirische Regression.// Gegenbaurs morphol. Jahrb., 1984,bd.l30,№3,s.461-472

86. Percy D. H'.. Z. W. Wojcinski andM. K. Schunk .Sequential changes in the harderian and exorbital lacrimal glands in Wistar rats infected with sialodacryoadenitis virus/Veterinary Pathology, 1989 Vol 26, Issue 3 P.238-245,

87. Pollock J. J.. L. Denepitiya. B. J. MacKay & V. J- lacono: Fungistatic and fungicidal activity of human parotid salivary histidine-rich polypeptides on Candida albicans. Infect Immun 44, 702-707 (1984)

88. Pratt. W- S.: Crawley, S.; Hicks, J.; Ho. J.; Nash, M . Kim. Y. S.: Gum, J. R.: Swallow, D M. Multiple transcripts of MUC3: evidence for two genes, MUC3A and MUC3B //Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000.Vol.275: 916-923.

89. Ramasubbu-N : Reddy-MS: Bergey-EJ: Haraszthy-GG: Soni-SD; 1.evme-MJ. Large-scale purification and characterization of the major phosphoproteins and mucins of human submandibular-sublingual saliva. // Biochem-J. 1991 280 341-52

90. Ramasubbu-N: Thomas-LM: Bhandary-KK: Levine-MJ. Structural characteristics of human salivary statherin: a model for boundary lubrication at the enamel surface.// Crit-Rev-Oral-Biol-Med. 1993; 4 (3-4): 363-70

91. Reddy M. S. L. A. Bobek G G Haraszthy. A. R Biesbrock & M. J. 1.evine: Structural features of the low-molecular-mass human salivary mucin. Biochem J 287. 639-643 (1992)

92. Regezi JA. Sciubba JJ. Oral pathology clinical pathologic corrections. 3rd ed„ London, W.B. Saunders Company, 1999: 62-65, 158-159, 179, 181, 496.

93. Reitman S..Frankel S A calorimetric method for the determination of serum glutamic oxalacetic and glutamic pyruvic transaminases. // Am.J.C!in.Pathol.-1957.-Vol.28.-P.56-63.

94. Saliva ; its role in health and disease. Working Group 10 of the commission on oral health, research and epidemiologyV/Inter. Dental J., 1992, Vol.42 №4.Suppl.2. P. 291-304.

95. Saliva and dental health: clinical implications of saliva and salivary stimulation for better dental health in the 1990s. /Ed. W.M. Edgar ,D.M.O'Mullane. London; British Dental Association.

96. Scannapieco FA. Torres GI, Levine MJ. Salivary amylase promotes adhesion of oral streptococci to hydroxyapatite//J Dent Res. 1995 74:1360-1366.

97. Schlesinger-DH, Hay-DL Complete covalent structure of a proline- rich phosphoprotein, PRP-2,an inhibitor of calcium phosphate crystal growth from human parotid saliva. // Int J Pept Protein Res 1986 Apr;27(4):373-9

98. Schwartz-SS: Иау-DI: Schluckebier-SK. Inhibition of calcium phosphate precipitation by human salivary statherin: structure-activity relationships. // Calcif-Tissue-Int. 1992; 50 (6):511-7

99. Seymour RA. Oral and dental disorders. In: Davies DM, Ferner RE, DeGlanville H. eds., Davies's textbook of adverse drug reactions, 5th ed., 1.ondon, Chapman & Hall Medical, 1998: 234-250.

100. Siegel A. The role of saliva in drug monitoring //Ann NY Acad Sci 1993 694:86-90

101. Sly WS. Ни PY (1995) Human carbonic anhydrases and carbonic anhydrase deficiencies (review). Annu Rev Biochem 64:375-401

102. Spielman AI: Bernstein A; Hay Di; Blum M: Bennick A. Purification and characterization of a rabbit salivary protein, a potent inhibitor of crystal growth of calcium phosphate salts.//Arch Oral Biol 1991;36(I):55-63

103. Sreebny, L. M. 2000. "Saliva in health and disease: An appraisal and update" : International Dental Journal: (50), 140-61.

104. Stromberg-N: Boren-T: Carlen-A; Olsson-J. Salivary receptors for GalNAc beta-sensitive adherence of Actinomyces spp.: evidence for heterogeneous GalNAc beta and proline-rich protein recept // Infect-Immun. 1992 Aug; 60(8): 3278-86.

105. Sullivan DA. Block KJ, Allansmith MR. Hormonal influence on the secretory immune system of the eye: androgen regulation of secretory component levels in rat tears. J Immunol. 1984;132:1130-1135.

106. Sullivan DA. Wickham LA. Rocha EM. et al. Influence of gender, sex steroid hormones, and the hypothalamic-pituitary axis on the structure and function of the lacrimal gland. Adv Exp Med Bio. 1998; 438:11-42.

107. Tabibzadeh S. Salivary gland tumors; clinical and pathological features.// Frontiers in bioscience; lecture series. 1998 Vol 3, January 1, http://www.bioscience.org/lecture/tabibza/list.htm

108. Takamura K.. Hayashi K.. Ishinishi N. Yamada T. Sugioka Y. Evaluation of carcinogenicity and chronic toxicity associated with orthopaedic implants in mice . / / J . Biomed. Mater. Res. 199428:583-589

109. Thatcher BJ, Doherty AE. Orvisky E, Martin BM. Henkin Rl (1998) Gustin from human parotid saliva is carbonic anhydrase VI. Biochem Biophys Res Commun 250:635-641

110. Trinder P. Determination of glucose in blood using glucose oxydase with on alternative oxygen receptor.//Ann.Clin.Biochem.- 1969.-Vo!.6.-P.24-27.

111. Troxler R. R. G D. Offner. T. Xu. J. С Vanderspek & F. G. Oppenheim: Structural relationship between human salivary histatins. J Dent Res 69, 2-6 (1990)

112. Tsai H. & L. A. Bobek: Human salivary histatins: promising antifungal therapeutic agents. Crit Rev Oral Biol Med. 9, 480-497 (1998)

113. Ussing H.H., Eskesen K. Mechanism of isotonic water transport in glands//Acta Physiol. Scand.I989.Vol.l36.P.443-454.

114. Verdier-JM; Dussol-B; Berland-Y: Dagorn-JC. Protein inhibitors of calcium salt crystal growth in saliva, bile and pancreatic juice .//Scanning-Microsc. 1993 Sep; 7(3): 1017-30

115. Vining, R. F, McGinley, R. A. (1985). Hormones in saliva. Critical Reviews in Clinical Laboratory Sciences. 23, 95-346.

116. Wang J. Y., Tsukayama D.T.Wicklund B.H.GustiloR.B. Inhibition of T and В cell proliferation by titanium,cobalt and chromium : role of IL-2andIL-6. //J. Biomed. Mater. Res 1996.-Vol. 32. P. 655-661.

117. Wells K. Zackin S.J., Cold-Haber P. et ai. Increase in weight of the submandibular salivary glands of rats following periodic amputation of the erupted portion of the incisor teeth.//Am.J.Physiol.1959.Vol.l96.№4.P.827-830.

118. Williams S. J., M. A. McGuckin. D. С Gotley, H. J. Eyre. G. R. Sutherland & Т. M. Antalis: Two novel mucin genes down-regulated in colorectal cancer identified by differential display. Cancer Res 59, 4083-4089(1999)

119. Wong GT. Gannon KS, Margolskee RF (1996) Transduction of bitter and sweet taste by gustducin. Nature 381:796-800

120. Хи Т.. S. M. Levitz. Й. D. Diamonds. F. G Oppenheim: Anticandidai activity of major human salivary histatins. Infect Immun 59, 2549-2554 (1991)

121. Zuidema. J.. Van Ginneken, С A M. (1983b). Clearance concept in salivary drug excretion, part II: experiments. Pharmaceutica Acta Helvetiae. 58, 136-143. Интернет ресурсы.

122. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for Experimental and Other Scientific Purposes. Strasbourg, 18.III.I9S6. http://conventions.coe.int/treatv/enytreaties/html/123.htm.