Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Особенности роста некоторых экспериментальных опухолей под влиянием инфракрасного лазерного облучения (Экспериментальное исследование).

АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН р^СТЩУТ ОНКОЛОГИИ И РАДИОЛОГИИ

¡1 .....: " . на правах рукописи

САИДХАНОВ БОИСХОН АКАИДОВИЧ

УДК. 615.849.19:616—006.04 : 612.017.1

ОСОБЕННОСТИ РОСТА НЕКОТОРЫХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ОПУХОЛЕЙ ПОД ВЛИЯНИЕМ ИНФРАКРАСНОГО ЛАЗЕРНОГО ОБЛУЧЕНИЯ

(Экспериментальное исследование).

(Онкология — 14. 00. 14.)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

ТАШКЕНТ - 1997

Работа выполнена в Ташкентском Научном Центре Хирургии им. академика В. Вахидова Министерства Здравоохранения Республики Узбекистан.

Научный руководитель:

Доктор медицинских наук, профессор А. X. Касымов

Научный консультант:

Доктор медицинских наук В. Н. Кузнецов

Официальные оппоненты:

1. Доктор медициских наук, профессор Ходжаеп А. В.

2. Доктор медицинских наук, профессор Алимов А. Т.

Ведущая организация — Ростовский Научно исследовательский Институт Онкологии Министерства Здравоохранения Российской Федерации.

Защита состоится «---»-----------1997 г.

в « » часов на заседании Специализированного Ученого Совета Д. 087.-----Научно-исследовательского Института Онкологии и Радиологии Академии наук Республики Узбекистан.

Автореферат разослан «---» .-------1997 г.

Ученый секретарь Специализированного Совета, доктор медицинских наук

Ш. К. МУХАМЕДАМИНОВ

Актуальность пр ztл¿мы.

Как покавызаот данные РОЗ, частота заболеваемости раком во всей мире составляет в среднем от О,? до \,2Xt. При этом страдает преимущеогвевяо липа мужского пела ь трудссиюсСнл* вограсте (Магз Ж. ,1993; СгАтг.з S.U. ,1550; Parkin Ь. , et ai., 1936)..

Несмотря на тс, что в посл^дзяе годи достигнут невс-отныи прогресс в выявлении ранних ^орм глечачеогвеяных опухолей, а терапевтические во&ксечюсги созр*менчи>: проглзссп/холевых воздействии неуклонно возрастают, леч?н>:е злокачественных опухолей остается слолнои ¡i далеко ке ьсегда разрешимой задачей (. Меньшиков Р. А., 199Ü). Одним наиболее раоЕЛьасцихоя и перспективных, но недостаточно изученных направлений лечения злокачественных опухолей является лазеротерапия.

Экспериментальные исследования выя^вль ero анамгевирую^ее, протпвоотечнос*, противовссяалителйязе, регенеративное, антисептическое и гшитяое действие (Бапбегсэв й.М. с соаит,, 1991,19S2). Эта особенность нп^конктенсивкого лагерного излучения (ШЛИ) дает вогыохкост!, практического применения его для профилактики и лечения различных лаСолеьаннй.

Еысская проникающая способность инфракрасного лазерного излучения позволяет использовать tro кепн-^аеигно, для внешнего облучения проекции пораженного участка. Креме того доказано, что этот тип лазерного излучения ускоряет реферативную регенерафт здоровых тканей, улучшает процесс микроциркуляции в них, а также воздействует на пролифераглнные процессы з клетке. Учитывая зто обстоятельство, представляет несеыкеккий интерес изучить, какал о5ра<?см HJ1JD1 Ж-диапазона влияет на рост влокачестЕенкых опухолей. В литературе эгсыу ¿опросу посвящены единичные исследования (Андреев Б.Г. и др.,1933; Иванов A.B. и др.,j993,Михайлов З.А. с ссав. 1993)

Далее; в настоящее вреия отсутствует экспериментальное обоснование целесоойрааноета применения лазеротерапии в хирургических отделениях до л после оперативного вмешательства, в частности, не изучена эсгиоднсстъ блокирования роста злокачготвенных опухолей и стимулирования иммунного статуса при воздействии ШЛЯ ПК диапазона. Последнее представляет чеосыяенякй интерес для практической медицины, поскольку позволит проводить соответствующую предоперационную подготовку больных, а также предотвращать б ряде случаев появление метастазов. Вое наложенное ше и ойус-

лавливает згагуааносгь назгояп-й работы.

ЦЕЛЬРАгОТ Ы , игфгиеллть роль ¡: иесю нигкоиЕтекоив-нсгс лагерного излучения инфракрасного диапазона в хирургическом лечении различных видов злокачественных опухолей.

ЗАДА "Ч К И С С .1 Е Д О В А Н А Я. Для достижения указанной цели, необходимо Сьшо решить следующие ведачи; ; 1. Изучить влияние лагерного излучения Ж-диапазона на структуру ткаш: опухоли Sp.Hi.xa, аааг/нсшогшеокий статус экспериментальных лирсткых с ртим з'лдом опухоли и выявить оптимальную Экспозицию и догу мощности воздействия.

2. Изучить влкянпе лагерного излучения КК-диапазона с заданными характеристиками облучения из монофункциональное состояние экспериментальной аденокарцкно1.<ы-1*55.

3. Изучить ь1ияаке лазерного излучения Ж-диапазона на ультрзструктуру опухали мелакома 2-16.

4.' Сравнить влияния ниекоинтекоизного лазерного излучения инфракрасного диапазона на рост к развитие различных видов злокачественных опухолей.

Б. Оценим возможность использования ШШ в клинической практике в хирургическом лечении злокачественных новообразовании.

Научная новизна. Впервые определено, что лазерное излучение в зависимости от режима облучения и вида новообразования может оказывать так блоккруьдий эффект на рост опухоли, так и стимулирующее действие.

Впервые изучена динамика изменения эритроцитов под влиянием НИМ ИК-диапазона животных в равные сроки ¡заболевания.

На основании экспериментального и морфологического материала впервые изучена и проведена сравнительная оценка эффективности применения чреокожнога лазерного воздействия НИЛИ при различных видах злокачественных опухолей.

Впервые изучены особенности изменений ультраотруктуры и митотической активности опухолевых клеток разной этиологии под действием НИЛИ КК диапазона. •

Разработаны оптимальные режимы облучения м определена эффективность применения лазеротерапии в клинической практике с учетом выявленного неоднозначного аффекта ШУМ на равные виды злокачественных новообразований.

- Б -

Прзк'пшеская значимость. На основании проведенных экспериментально-морфологических исследований изучен характер изменения опухолевых клеток под действием лазерного излучения, что позволяет использовать его в предоперационной подготовке для уменьшения размера опухоли и снятия воспаления а окрулшющи тканей, а также в посгенерационном периоде для предотвращения развития метастазов и уменьшения интоксикации.

Патогенетически обосновано применение' КИЛИ Ж-диапазона как одного из способов воздействия на новообразования организма при раннем, их выявлении.

Доступность лазеров низкоинтексивиого излучения ИК диапазона делает возможным их широкое применение в клшгаеской практике в целях блокирования роста злокачественных новообразовании. ■

' Основные положения, выноспглые на зашт/.

1. Н11Ш может оказывать как стимулирующее. тан и ингиби-руюцее воздействие в зависимость от рехимз облучения и вида зто-качественных новообразовании.

2. ШШ оказывает блокирующее действие на реет опухолевых клеток аденокарцинош 755.

3. Чрескожное применение ВШ1 ПК. диапазона при злокачественной опухоли Зрлиха снимет митстическ-.'п активность, препятствуя тем самым ее росту.

4. Низкоинтенсивное лазерное излучение может применяться длг предоперационной подгото-еки больны:: с зденокзрциномой.

, 5. Для предотвращения метастаэирования опухоли возможно применения ШШ в поотсперащганнем периоде .

6. Инфракрасное излучение оказывает стимулирующее воздействие на рост мелэномы В-16.

Апробация работы.. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на 311 Мэжд. кокф. Московского региона "Акт. Еопросы лазерной медицины к опер, эндоскопии" (Елдное,1984); I конгрессе по "Внутренней медицины" стран Центр, £зии (Ташкент, 1904); Респ. конф."Вопросы рекокстр. и ьосст. хирургии"(Ташкент,1994); I съезда онкологов республики Узбекистан о межд. учзст..ем (Ташкент, 1994);Межотделенч'?ексм заседании Ученого Совета НЦХ Ш РУз (1996);Мевдтделенческом заседании Ученого Совета ИОиР АН РУ(1996).

Публикации: по теме диссертации опубликовано 7 работ.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, 7 глав, заключения, практических рекомендации, выводов и списка

литературы. Текстовой материал наложен на 151 страницах машинописи, работа иллюстрирована, 24 фотографиями, 5 графическими рисунками и '! таблицами. Список литературы представлен 211 работами, из которых 130 отечественных 81 зарубежных источников.

Материалы и методы исследований.

Экспериментальные исследования проводились на линейных мышах CS7BL, которым прививали злокачественную опухоль Зрлиха, мз-ланому В-16, аденокз.рциному-755. Контролем служили интактные тавотные этой же линии. Перевивки опухолей производились в специальных лаборзторных условиях по соответствующей стандартной методике.

Для перевивки опухоли йрлиха штамм размораживали в воде при температуре 27,0-39,0 градусов. После этого вводили по 0,2 гр. с помощью шприца в бок беспородным белым мышам гессм £0-22 гр. На месте введения через 14 дней появляется опухоль, которая после декапитации животных вырезается, промывается физраствором, продавливается в специальном измельчителе ткани, а затем полученная кашица разбавляется физиологическим раствором в соотношении 1:5, после чего вводили в Сок здоровым экспериментальным животным.

Для перевивки опухоли аденокзрцинома-755 штамм размораживали в воде при температуре 37,0-39,0 градусов. После этого вводили по 0,2гр. о помощью шприца в бок линейным мышам породы СЕ57ЕЦ; весом 20-22 гр. После то^о, как на месте введения через 16-18 дней появляется опухоль, животных умерщвляли мгновенной декали-тацией. Опухоль вырэзали и промывали физраствором,, .продавливали в специальном измельчителе.ткани и затем разбавляется физиологическим раствором в соотношении 1:8, после чего вводится в бок экспериментальным животным.

Для перевивки опухоли мелачома Б-1В штамм размораживается в воде при температуре 37,0-39,0 градусов. После втого вводится по 0,2-0,3 гр. с помощью шприца в бок линейным мышам породы C57BL весом 20-22 гр. На месте введения через 12-14 дней появляется опухоль, которая после декапитации вырезается и-промывается физраствором и в специальном измельчителе ткани продавливается. Затем, полученный гомогенат разбавляется физиологическим раство- ' ром в соотношении 1:7, после чего вводили в бок экспериментальным животным. - > .

-Для изучения вовдействия на рост злокачественных опухолей пользовались лазерным аппаратом низкоинтенсивного излучения инф-

ракрзсного диапазона "АУРА", мощностью 1В0-200 мВт.

В 1 серии нами были изучены в динамике морфология клеток, размеры и масса опухоли, транспортная функция эритроцитов крови, а также разработаны оптимальные дезы и экспозиция облучения. Эксперименты проводились на 3 группах животных.

1-ю группу-контрольную,_ составляли «нзогные о индуцированной опухолью Эрлкха, не подвергавшая лазерное воздействию. 2-й группу животных облучали в области опухоли на 2-ые сутки после первинки юл опухоли. Проведено Ю сеансов с экспозицией облучения - 3 минуты. 3-ю группу ^лестных облучали в области опухоли на 2-ые сутки после перевивки им опухояи. Куро ссстзеил также Ю сеансов, но время экспозиции было увеличено до - 5 минут.

Во 2 и 3 сериях нами изучено влияние лагерного облучения с заданными характеристика»! отработанными на животных 1 серий, на интенсивность роста злокачественной опухоли аденокарщшома-755. Исследована морфология, прслиферативная и митотическая активность клеток опухоли, проведен анализ взаимодействия стромы и паренхимы опухолезой ткани, определено состояние транспортной функции 'эритроцитов и иммунного статуса организма при облучении д.энного вида злокачественной опухоли.

В свою очередь животные 2 и 3 серии были разделены на 5 групп.

1-я группа: подвергалась лазерному облучению со 2-х суток после индукции опухолевых клеток. Проведено 10 сеансов по-5 минут, 2-я группа: лазерное облучение 10 сеансов по 5 минут начинали с 12-х суток посла яэрер.иеки опухолевых клеток. 3-я группа: 5 сеансов лазерного облучения по 5 минут осуществляли со 2-х суток после перевивки опухолевых клеток. 4-я группа: контрольная -животные с индуцированной опухолью не подвергавшиеся лазерному облучению.'Для изучения максимальной продолжительности жизни животных после индуцирования опухоли служила 5 группа, которая как и 4-я не подвергалась какому-либо воздействии. От 4 группы она отличалась тем, что животных не уыэрщвляли в определеннее сроки, а оставляли жить до их естественной гибели.

В 4-5 сериях'нами изучено влияние лазерного облучения с заданны!,ж характеристиками на злокачественную . опухоль меланому В-16, морфологию, пролиферативную и митстичэскую активность клеток опухолей, проанализировано взаимодействие стромы и паренхимы

опухолевой ткани, состояние транспортной функции эритроцитов и надлунного статуса организма при облучении злокачественной опухоли.

Животные были разделены на Б Групп аналогично как и в предыдущих сериях (S и 3). Характер производимого воздействия в соответствующих группах был аналогичен.

Во всех сериях исследовании после завершения эксперимента животных умерщвляли мгновенноой декапитации и производили забор Крови и ткани для дальнейшего изучения. Полученный экспериментальный материал- эритроциты переферической крови, нормальная ткань (кожа и мышцы), опухолевая ткань - исследовался с помощью следующих морфологических методов:

1. Для светооптичеокого исследования участки опухоли, иссеченные во время декапитации животного фиксировали 4% деполимери-зованним параформальрегидом на 0,1 М фосфатном буфере рй-7,4 в течении суток. После промывки в фосфатно-ролевом буфере и дегвд-ратации в растворах этанола в возрастающей концентрации кусочки Ваключали в парафин. Срезы толщиной 4 мкм. окрашивали гематоксилином и эозином.

2. Для авторадиографии за час до декалитации вводили брюшную полость ЗН-тимидин в дозе 18 мкБк на 1 г массы тела. Срезы покрывали фотоимульсией типа "М", проявляли через 30 дней, окра- -шивали гемотокаилином и определяли индекс меченых ядер при подсчете Б тыо. ядер.

3. Для сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) эритроциты крови фиксировали в 2,6% глютаровом альдегиде в фосфатном буфере ( рН-7,4 ). После дегидротация в растворах ацетона в возрастающих концентрациях, высушивали способом перехода черев критическую точку вакиси ааота в аппарате "НСП-2" ( Hitachi ). Образцы монтировали на алюминевые подложки электропроводящим ксеем. После ионного напыления золотом в аппарате "IB-3" ( Eiko, Japan ), клетки просматривали и фотографировали в СЭМ "Hitachi »5-405 А" под углом наклона 30 градусов.

4.Для трансмиссионной электрон 'ой микроскопии фрагменты опухолевой ткани фиксировали в 2,5! растворе глютарового альдегида в фосфатном буфере ( рН-7,4 ) с последующей дофяксацией в 1% растворе четырехокиси осмия. После обезвоживания в спирте и ацетоне в восходящих концентрациях кусочки опухоли заливали в смесь смол эпон-арапдит, -С блоков готовили'полутонкие (1ыкм) и

улыратсгоз» срезы с помелу» ультрзтомэ "1KB-8SQ" пли "Ultracut" ( Raichert-Joi^g- ). Первые окрззкзгли 1Х растворами метял«кжога синего и фуксина. Улътратсагак» срезы посла контрастирования в уранилацетате и нитрате свинца ( микропроцессор Ultrcsteiner, LKB ), просматривали и фотографировали б ТйМ ".4ir.ar.hi H-60D".

5. 2 качестве материала для «сслгдсвнн'П тммунолстичеехого статуса исполйвоаага: кровь. Ссдег.-ан:^ лпзсцима 2 сыъсрогке к реви определяли метолом диг^узии к агас-э по А. Еъб'.тохой, фапивггзгнуо активности лейкоцитов крови изучали с тест-культурой Кандида альСикано по З.О.Караеву с соавт.

Статистическая обработка псл/иекны>: экспериментальных денных проводилась на компьютере J3M/PC(программа stat graí) с нее-пользованием критерия Стьсдента - 'Хилера. Достоверными считались даяние, уровень экач:п.сзтп которых находился з предела?: 0,05.

Полученные результаты и и:' а^сурдение Для изучении воздействия кнзкспнтелсиввсго лагерного излучения на злокачественную опухоль и вк-вдоиия оптимального режима рзСсты при облучении, мы провели сер;г-: экспериментальных исследовании на модели опухоли Ррлиха. Макроскопически через 7 суток после переБивки спукопк «ркка под ко.чей в области индукихи опухоли определилось специфическое уплотнение, подвижное при пальпации. Размеры этого уплотнения были равны - С,5 см в диаметре. При разрезе опухолевая масса Бело-розового цгета, мягкой консистенции, весом в среднем составляет - 0,226 гр. Метастазов в регионарные узлы на обнаружено.

На 17 день после перевивки опухоль чекроскопическп имеет вид возвышения на брааасй стенке зг тесно опаляв с ней. На резре-ге ткань опухоли плотна!, весом - 1,400 гр. В центре опухоли определяются гены некроза. В некоторых случа-'л имело ^есто изъязвление опухоли, в колу, пскрывадцую опухоль, органы без метастатических изменении. СЕетооптлчеокпо исследования еыявили, что ткань опухоли представлена вытянутыми кагткаьш о большнип ги-перхремнкмн ядрами. Стргка опухоли представляет собой небольшое количество коллагековых волокон и тонкие кровеносные с 'суды. В опухоли встречается большое число митозов патологического характера. Матотшвский индекс составил 9,-1"'

Злектрсдасмикроскотиеские последоваяия ткани опухоли на 12 и 17 день пепле индукции не выявили существенных различий ь улъ-траструктуре опухолевых клеток. Митохондрии, единичные профили

- ID -

зернистой андоплазыатичеокой сети равномерно распределены па цитоплазме опухолевых меток, так же как и большое количество рибосом. Ядра крупные, овальной формы, с глубокими инвагинациями ядерной мембраны и содержат крупные ядрышки. Существенные различия структуры опухолей выявлены после 10 сеансов инфракрасного, облучения. Отмечались различия в размерах. Опухоли, подвергнутые облучению е течение 5 минут, были меньше, чем при 3-минутном облучении. После 10-дневного облучения в течение- 3 минут масса опухолей составляла 1,3г, а после Б-минутногг - 1 г., у необлу-ченных животных - 1,4г. Эти данные говорят о позитивном влиянии лазерного облучения инфракрасного диапазона. Данные литературы по вопросу влияния лазеров на рост опухолей Эрлиха весьма противоречивы. Одни исследователи приводят данные о выраженной стимуляции лазером размножения клеток асцитного рака Эрлиха ( Моска-лик К.Г.,1380; Schaart F.M.,1591). тогда как другие наблюдают отсутствие стимуляции роста опухоли ( Вондарь Н.Ы.,1981). Незначительное уменьшение массы опухоли отмечают в своих рзйатах Wei Х.В. и Jako Q.J. (1932).

Морфометричеокие исследования -показали, что штотичеосий индекс был в контроле равен 9,4л. По литературным данным митоти-ческий индекс у интактны;; ¡.идей о опухолью Эрлиха составляет 8,9-9,6% (Моокалпк К.Г.,1273). Результаты наших исследовании показали, что при 3-минутном .облучении ои снижен до 8ДХ. % при 6-минутном до Несмотря на широкое использование арсе-

нид-галиэьых инфракрасных лазеров в различных областях онкологии, сведения о влияния их на опухоль Эрлиха и, в частности, на их морфологическую структуру не изучено. Выявлено, что ежедневное облучение опухолей по 3 или Б минут в течение 10 дней вызвало нарастание индекса меченых ядер почти в 2 раза. Но это увеличение не сопровождалось соответствующим возрастанием мнтотичео-кого индекса и массы опухолей. Напротив, имела место тенденция уменьшения массы опухолей. Это явилось•необычным явлением. Увеличение лролкфератиЕной активности не сопровождалось соответствующим увеличением митотического индекса. Между этими показателями имелись различия в виде "ножниц" . В то гремя, как обычно существует прямая зависимость между митотическим индексом и индексам меченых ядер.

Ситуация в значительной мере прояснилась благодаря злект-ронномикроокоппчееккм исследованиям опухолевой ткани в указанных

группах. Ультраструктура опухолевых клеток била существенно изменена, особенно в группе подвергнутых 5 минутному облученпхз в течение 10 дней, митохсндрии в опухолевых клетках были набухши? с просветленным мзтриксом, профиля зернистой зндоплзрыатпчесвэй сети подвергались фрагментации. Бнраквнные явления альтерации на ультрэетруктурнс.м уровне отмечались со стороны ядер опухолевых клеток. Эти явления альтэргепл гаюдоагиоь в разрыве ядерной оболочки и "Еыдаэлаваяия" содержимого иухх(ктяаат, s первую очередь j хрокгтяяг, иэ ядер. При сохранении целостности яцеркей оболочки, что наблюдалось в больсей чзсти ядер, "выдавливание" хроматина происходило через ядерные поры. Было отмечено, что хроматин располагается в цитоплазме опухолевых клеток или же s кежвяеточяак пространствах. Stot феномен существенно сгличакоя по морфологической картлке от так нзаывзгшго зжптозз, наблюдаемого после лучевой терапии опухолей (Рыльков Е.З.. 1933).

Морфологические доследования позволяют азалючить, что инфракрасное лагерное излучение йреенпд-гзллиевего лаг ера в непрерывном режиме мощностью ÎSG-2GC мЗт влияет на включение ЗН-тиып-дина з ДНК, выбывая значительнее увеличение этсто включения. Это увеличение не сопровождается возрастанием митотического индекса, поскольку инфракрасное лазерное излучение вызывает повреждение ядер и "выдавливание" хроматина череа ядерные поры или разрывы ядерной оболочкь. Зтот феномен лежит в осксве уменьшения темпз ра^та опухоли.

Проведенные нами исследования по изучению влияния НИЛИ Щ диапазона на экспериментальную опухоль Эрлиха показали, что излучение выходной швдостьь 13C-2Û0 к5т оказывает ингЕбирующае действие на рост опухолей, выявлено оптимальное время экспозиции облучения, которое составляет - Б минут. Полученные нами результаты согласуется с данными литературы о том, что ливерное излучение инфракрасного дяапггонз лолодитгльво воздействует на опухоль Эрлиха (Жуков Б.Н./и др..гг83; Скобелкин O.K., и др. ,1992; Квансв A.B., и др.,1393).

С целью дальнейшего изучения зоршгноотей НИЛИ ИК .'„пзпзвена было проведено исследование влияния л&аера на структуру нормальных клетск а тканей акружэздлх злскэчёстгеш?0е новообразование -Аденокярцпксма 7Б5.

По некоторым данным литературы ниекопнтенсивное лазерное излучение воздействует аяьтеративко нз ткани окружащие опухоль

(Жуков В.Н.,15SS), особенно на сосуды (Siraoka Е.,1986), мышечные ткани и ко;«:/ (Смотрин С.М., ЮпатоЕ С.И. ,1938),

Результаты проведенных нами исследований показали, что ткань опухоли окружают поперечно-полосатые мышечные клетки и кола. Светооптическое' исследование ке обнаруживает каюк-либо елъ-тератианых изменений со стороны тканей , окружающих опухоль. О Иеразрушэющем влияний инфракрасных лучей на окружавшее ткани сообщают многие авторы (Вородаикевич Д.Т., 1973; Лазарев И.Г., 1977;1,!оокалик К.Г.,Чернина Л,А. и др. ,'Э82; Плетнев С.Д., Харченко Д.М., 1SB5; Дшакт И.Н., 1991; Харченко В.П., Остапенко Л.А., 1992; Мусаев Э.Ш., Еайбеков И.М. и др.,1992; Absten G.Т., 1991; Roberts Vi.0.1991). Нами убедительно показано, что структура клеток юти и поперечно-полосатой мышечной ткани после облучения не отличается от таковой у интактных животных. Следовательно, при проведении лазеротерапии не требуется их дополнительная ваилта от альтерации. ■

Незначительное торможение рсотз экспериментальной опухоли аденокарциномы 755 под действием лазерного облучения отмечают Никитенко В.А. и Ким В.X. (1976).

Проведенные исследования выявили, что наиболее эффективно• НШ ЙК диапазона непрерывного режима излучения при облучении экспериментальных аденокарцином 7Б5. При атом виде опухоли тор-.'' мохение их роста наиболее существенно. Tai-:, .после 5 -кратного ежедневного воздействия масса опухоли снижается более чем в три раза относительно контроля. Облучение в течение 10 суток выаыва- . ет снижение массы опухоли более, чем в 3 раза. В литературе описывается снижение массы опухоли лишь на 13-S0% (Sewerln С., La-tulas D.,1991), или же не отмечается Блокирование роста (Лобода И.П.,1987), что ш-видимому, связано с'разницей экспозиции и количества проводимых сеансов.

Таким образом, в результате проведенных нами макроскопических исследовании выявлено, что после 5 сеансов облучений опухоль па размеру в 2 раза меньше, чем в контрольной группе, а масса опухолей снижается 2,5-2 раза, . что связано с- изменением его плотности. В обеих группах метастаэы и увеличенные регионарные лимфатические узлы не обнаружены. Электронномикроскопически установлено, что тесный контакт нейтрофилов с клетками опухоли, выявляемый и ка светооптическсм уровне, сопровождается дееинтег-рацией опухолевых клеток и фагоцитозом клеточного детрита.нейт-

рофилачи.

Облучение опухоли в течении 10 сеансов тате сопровождалась снижением темпа прироста массы опухолей. При навешивании отмечается снижение-в 3 раза массы относительно контроля. Размеры также уменьшились в 4 раза. Проведенные озетооптические исследования показали, что облучение опухоли в течение 10 сеансов вызывает более выраженную дезинтеграцию опухолевых клеток, чем это млеет место в контроле. Среди клеток опухоли часто располагаются нейгрофильные лейкоциты, которые в контроле встречаются преимущественно в отроме опухолей. Число митозов меньше, чем в необлу-ченных опухолях.

Характерным для лазерного облучения является существенное по сравнению с контролем увеличение количества и усиление функциональной активности иммуннокомпетенткых клеток. В толще опухоли и в окружающей их ткани повышается содержание макрофагов и лимфоцитов, имеются также контакты между этими типами клеток. { Макрофаги интенсивно фагоцитируют элементы тканевого детрита в зоне распада опухолевой ткани.

Было проведено также изучение влияния лазерного излучения в ПК-диапазоне на форменные, элементы крови (эритроциты) животных, которым были индуцированы злокачественная опухоль аценокарцпно-мгг755. У животных с индуцированными опухолями (без лазерного воздействия) структура эритроцитов претерпевает существенные из- • менения. Большинство клеток подвергается зхиноцитарной трансформации (эхнноциты I, II и III порядка) что, вероятно, можно объяснить интоксикацией, развивающейся в процессе роста опухоли.

После лазерного воздействия также имеет место эхиноцитарная трансформация эритооцитов, однако степень выраженности ее меньше, чем у контрольных животных, не получавших лазеротерапию.

■ Таким образом, проведенные исследования позволяют предположить, что низкоинтенсивноэ лазерное излучение инфракрасного диапазона непрерывного режима выходной мощностью 180-200 мВт оказывает тормозящее действие нз рост опухолей, не ингибируя его. Морфологическим проявлением этого является снижение уровня пролиферации и митотической активности. Своеобразным проявлением воздействия этого вида КИЛИ нз экспериментальные опухоли аденс-карцинома-755 является реакция нейтрофшюв, которые, как показывают ультраструктурные данные, фагоцитируют опухолевые клетки. . ^

Изучено влияние ИК лазера непрерывного р<?.»има выходной мощ-

ностью ISO-200 мВт на экспериментальные опухоли - мелачомы В16. В результате проведенных исследований выявлено увеличение массы тела животных и массы индуцированной опухоли при облучении, прямо зависящее от срока облучения, что свидетельствует о стимулировании роста меланом-Blö под влиянием НКЛИ !1К диапазона непрерывного режима. Через 12 суток после индукции к 10 суток после начала лазеротерапии опухоль представляла собой конгломерат узлов общим размером 0,6 см. После сеанса лазеротерапии при ревизии органов ке обнаружено метастазов опухоли Е другие органы и ткани.

Согласно данным литературы, ежедневное 3-х минутное воздействие лагерного излучения (б'З'Знм), на келаному В-16 с интенсивностью 150-200 мВт в течении ES дней способствует увеличении средней продолжительности жизни, понижении интенсивности роста опухогп (Иванов A.B.,1987), однако выявляете! наличие метастазов в легкие (Иванов A.B.,1988). Под влиянием фотсдинэдаескон терапии при кожной мелансме отмечается некоторое снижение темпа роста (Favilla ]. et al.,1991).

Нами выявлено, что после курса облучения большая часть опухолей подвергалась изъязвлен',да, наблюдается прорастаний в брш-нунз стенку. Под влиянием лазеротерапии резко возрастал полиморфизм опухолей,что проявлялось а дезинтеграции солидных структур, увеличении вон некрозов, возрастании разнообразия опухолевых клеток, как по форме так и по размерам, значительном увеличении размеров и форм ядер. Это сопровождалось к существенным увеличением числа митозов. Возрастание числа митозов сопровождалось выраженные увеличением индекса меченых ядер опухолевых клеток. В большой степени варьировало и содержание меланина в опухолевых клетках.

Проведенные злектронкамккросшпшеекие исследования выявили значительное влияние лазеротерапии ка ультраструктуру опухолевых клеток, особенно на ультраструктуру ядер при мельноме В-16. Подобные изменения наблюдались независимо от тоге, через сколько дней после индукции опухоли начинали курс лазеротерапии. Увеличивалось такие и количество новообразованных сосудов,

Авюршюсграфвчеокае- исследования показали, что ШЛИ су-ои-отненко усиливает вклш&ние ЗК-ттйсшн& в ядра опухолевых клеток. Уопхпяается таксе и их штсттгаская активность.

Так: im обргеоы, проведенные исследования свидетельствуют о

выраженном стимулирующем воздействии НИШ ПК-диапазона- на poor экспериментальных м&ланом В16, индуцированные мышам линии С-Б7 BL. Это стимулирующее воздействие проявляется в увеличении индекса меченых ядер, ыитотической активности, тканевого и клеточного зтипиэма, что приводит к существенному возрастанию массы опухолей. Однако не отмечается метзотаэировалия опухолей.

Изучено влияние ШЛИ на факторы неспецкфическон резистентности при опухолях в эксперименте. Проведение курса облучения непосредственно после индукции опухоли Аденокарцинома 755 приводит к некоторому снижению содержания лизоцша (на £2,ЕХ) в сыворотке крозя по сравнению с контролен и к значительному росту фагоцитарной зктиеностм: фагоцитарный индекс (ФИ) возрос почти в 2 разз (с 13,5Z до 24%), фагоцитарное число (ФЧ) также достоверно увеличилось (Р<0,06). У мышей с меланомой В16 после курса лагерного облучения, проведенного непосредственно после перевивки опухоли, содержание лизоцима увеличилось незначительно (на 5,2%), тогда как активность фагоцитоза достоверно возросла (Р<0,05).

Таким образом, представленные данные свидетельствуют о выраженном стимулирующем влиянии НИЛК при опухолях на фагоцитарную активность лейкоцитов крови, более выраженное при раннем применении. В отношении содержания лизоцима результаты несколько противоречивы и требуют дальнейшего изучения.

С целью изучения транспортной функции даследовзлп кислотно- щелочное состояние эритроцитов. В литературе данные о влиянии лазеротерапии на биохимические показатели крови при вдсоксштао-тазирующих опухолях практически отсутствуют.

Сравнение данных ИЦС в группе животных пос. э проведения им лазеротерапии с контрольной группой показывает, что при прогрессирующем канцерогенезе происходит изменение всех изучаемых показателей К1ДС эритроцитов. Отмечается снижение буферного резерва эритроцитов при неполной компенсации pH. 'Наиболее характерным является изменение К1ЦС в сторону метаболического ацидоза, что ухудшает основную функцию эритроцитов - перенос кислорода.

Важное значение в превращении нормальной клетки в 'злокачественную и дальнейшем опухолевом процессе, как сейчас полагают, принадлежит процессам свободнорадинального окисления лишкк>ь (ПОЛ) (Конев В.В.,' Попов Г. А. ,1981). С свобсдноредикадььшп рг* акциями ПОЛ связывают такие патологические изменения как пс-врел-

дение мембран, кнактявзция ферментов, приводящие в конечном итоге к гибели клетки. Стадия ектстуилш ПОД определя-згоя пракгкчео-ки при всех ы'дзх канцерогенеза, .причем ока предшествует взнад-рсгенеэу (Милютин А.А.,1979).

Уже на 2-е сутки после перевивки опухоли содержание конеч-'ного продукта ПОЛ - мэпонсьога ди&зьдегида (МДА) в эритроцита;-; реэко возрастает, хотя в плазме крови внсаершентальных животных - не меняется. Ш уле укагквали, что согласно полученным результатам сс зпадаюшим с данными литературы, канцерогенез сопряжен о усилен,;зы гипоксии. Последнее является причиной частичного нарушения структуры мембран, в накоплении востаковленного железа, что и ссгдэет идеальные условия для резкой интенсификации ПОЛ (Шлша Н.К,, Чернаэинч Т.В., 1980). Это связано с двояким противоречивым процесссм, который наблюдался рядом авторов при перевозке опухолей и в клинике у онкологически', больных (Меерсол М. ,1551). Именно этим можно объяснить более резкое накопление мца б эрлгроцита-: по сравнению с плаамой. На более поздних стадиях развития заболевания эта разница выравнивается и уже к 22 суткам концентрация ЦЯА в плазме животных,, ке прсшедтк курс лазеротерапии, реако возрастает и да*е превышает таковую а эритроцитах. Это указывает из значительную иятексификацшо процесса в организме животных и о несостоятельности антиоксвдантной системы. Напротив, у животных, пропедыих курс лазеротерапии, незагш-cilmo от того,, когда он был начат (на 2 или 12 сутки после пере-елзки опухоли) уровзнь ЩА значительно снижен, причем в большей степени это выражено в плазме. Известно, что уровень продуктов ПОЛ в плавме отражает интенсивность этого процесса в тканях, откуда они поступают в кровь. Поэтому можно предположить, что лазеротерапия способствует активации антиокнслктегьных процессов самой опухоли и тем самым достигается более значительное ояиже-ш:е продуктов ПОЛ. С другой стороны, наблвдаетла усиленное снабжение рготудей опухоли гнтигксидавтеии, ссуцеогБДяемсе за счет с,тн1тпл пх у гдарсвьс: тканей. Следствием э^ого является менее дыргженвое снилеяш тштенсптнастп ПОЛ и ь аритроичтак,

Полученные результаты не противоречат данным литературы и объясняют характер г.орикшяого действия проводимого лечения.

Таким сбрэгсм, нпгкомктеноиЕнсэ лагерное к&лучекке оказывает положительное гогдейотвие на один из главных патогенетических

механизмов канцерогенеза.

ВЫВОДЫ

1. Низкоинтенсивное лазерное излучение ИК-диапазона не оказывает повреждающего воздействия на здоровые ткани, окружающие опухоль.

2. Лазерное воздействие не оказывает повреждающего воздействия на эритроциты животных, снижает содержания зхиноцитар-но-трансформированных клеток.

3.При Б-минутном облучении опухоли Эрлта отмечается более выраженный эффект, чем при 3-х минутном облучении. х

4.Б-минутные, ежедневные в течении 10 дней облучения ГОШИ ИК-диапазона являются блокирующим фактором роста опухоли Адено-карцинома-755.

5.Проведенные исследования свидетельствуют о выраженном стимулирующем воздействии НШШ ИК-диапазона на рост экспериментальных меланом В-16 г

6.При воздействии НИМ на опухоли стимулируется фагоцитарная активность лейкоцитов крози, свидетельствующая о повышении иммунного статуса организма.

7. НИЛИ оказывает положительное воздействие на один из важных патогенетических механизмов канцерогенеза - процесс ПОЛ, способствую снижению его интенсивности.

Практические рекомендации.

Проведенные нами исследования по изучению влдлкйя ШШ ИК диапазона на экспериментальную опухоль Эрлиха, а также Аденокар-цшюму-755 показали, что излучение выходной мощностью 18G-E00 МВт оказывзет ингибируицае действие на'рост опухолей при оптимальном времени облучения - 5 минут.

Мы считаем возможным использовать данные, полученные в эксперименте, в качестве обоснования целесообразности применения низкоинтенсивного лазерного излучения в'онкологической клинике, учитывая сходство морфологических изменении в ткани опухоли экспериментальных животных и человека.

Выраженное стимулирующее воздействие нцзкоинтенсивного лазерного излучения на ро-т экспериментальных меланом В15, выявленное у шаей линии С-Б7 BL, требует от клиницистов осторожности при назначении лазеротерапии больным с различными здокачесг-' венными опухолями, поскольку усиление сопротивля.мооти организма росту опухоли может протекать на фоне подавления некоторых факторов естественного иммунитета.

Список опубликованных работ по теме диссертации.

1.Саидханов Б.А., Касымов А.X."Воздействие ИК лазерного излучения на структуру экспериментальных опухолей" // В кн. "Вопросы реконструктивной и восстановительной хирургии". Ташкент .1Э94.с.214-215.

2.Байбаков И.М.,Касимов А.Х., Сакдханов Е.А. / Хорошаев В.А. "Влияние ИК непрерывного лазерного излучения на структуру экспериментальной адекокарциномк-755"' //В- кн. "Республиканский съезд онкологов". Ташкент. 1594. с.30-31. . .

3.Бзйбекав K.M., Саидханов Б.А., Хороиаев В.А,"Влияние ИК непрерывного лагерного излучения на структуру .экспериментальной меланомы В-16. // В кн. Республиканский съезд онкологов", Ташкент. 1994. с.32--33

4.Байбеков ММ., Касымов А.Х., Саидханов В. А. "Действие ИК непрерывного лагерного излучения на экспериментальные опухоли" И Б кн. "Актуальные вопросы лазерной медицины и оперативного вмешательства," Видное. 1994, с.405.

б.Еакбеков И.М., Касымов А.Х., Хорощаев В.А..Саидханов Б.А. "Ультраструктура и пролиферация клеток карциномы Эрлиха при воз-

- 19 - ,

действии инфракрасным непрерывным лазером" // В журнале "Бюллетень экспериментальной биологии и медицины." N5. С.585-088.

б.Вайбекоз И.М..Касыыов А.Х..Саидханов Б. А. .Хорошаев В.А. "Воздействие инфракрасного непрерывного лазерного излучения на экспериментальные опухоли" // В журнале "Физическая Медицинз". Обнинск, т.5. N1-2. 1996. С.9-10.

?.Касымов А.Х. ,Саид;санов Б.А. "Изменение некоторых факторов неспецифической резистентности организма под влиянием НЙЛИ при злокачественных опухолях. // В кн. "Вахвдовские чтения". Ташкент. 1996. с.240-341 ' "

- 20 -X 0 Т И М А

Мазкур щнинг макоади килиб, эксперимента? уоуд бягзн юкги-рилган турли кил усмаларга пэстинтенеивди инфракизил дпапазонда-ги лазер нурнни таъсири урганиб чигацди. Уибу тадклютни бир не-чз серияларда биохимия, морфология ва иымунодогяк текаирувлар ёрдамвда текширилди.

Тажркбада олинган материалларнц ггыонааий морфологик текши-рувлар ёрд: ада (скзнерли, трансмиссиои электрон микроскопи ва ёруглик ыг .роскопи) куриб чикилди.

Хайнонлардаги Эрлих усмасига ва Аденокарцинома-755 моделига инфракизил дизпазондаги нурланш 10 кун давомида хар куни Б ми-нутдан иборат экодоеицияовда гаъоир эггаяда, усманинг соф огир-лиги 1,5 баровар, улча..н эса 2-3 бгрсаерига камаиганлиги анж-ланди.

Ыорфологик текаирувлар хам юкзридзгя наииаларни исботлаб берди, яьни шготик индекс нурланыаггн хайвонлар гурухида 9,4% ни ташкил этган булса, лазер кулланигган гурухда 7,8% ни ташкил этди. Еу курсатгичлар жуда катта ахакияхга згадир.

Меланома-В1б усмасига пастинтенсивли инфракизил диапааонда-ги лазер нурлари таъслр эттирилганда сгщингиларга нисбатан бу-туллай караыа-саршн нзтижалар юзага шпда.

Хайвонлар такасида экспериментах уома булганда, ноопецифпк рэвистентликнинг айрим бир куриншлар! ни хам урганишни уз олди-мизга максад килиб куйгнн здик. Ааикланишича, пастинтенсивли инфракизил диапааондаги лазер нурлари хужайра ва гуморал фактор-ларига эффектна рааиида таъсир этади.

Шундай кшшб, бизнинг текширувларимиз шуни куроатдики, пастинтенсивли инфракизил длапазондаги лазер нурлари турли хилдаги усмаларга таъоир атгаида, уларнинг морфологпк тузилпиигз ва таг-сир килзетган лазер нурларининг пзрамегрларига изчил богликдир.

Олинган маълумотларга аоооланнб, клиник шифокорларга тавсия килиб шуни таъклдлаб утш керакки, лазер нурларини онкологик бе-морларда куллашда усма турига караб ахтиеткорликни талаб гтади.

S U M MARY

Peculiarity Growth of some experimental tumors after infrared LASER influence.

The, goal of our investigations was to study the influence of low intensive LASER infrared diapasone on growth of inalignant tumors (Erlich's carcinoma, adenocarcinoma - 755 and melanoma B-16 of line nouses).

The power of LASER was 180-200 mVT in 5*j 115 and 10 se-

anse.

The LASER oppressed the Erlich's carcinoma and adenocarcinoma - 755 and the tumors growth are slow. Opposite,,growth of melanoma 3-18 is increases.

The effect lowintensive laser radiation cn organisms stability in cancer. Hurrarale and cells factor has been stimulates by LASER in cases with nolanome B-16 and adenocarolnome -755. , j

So, our results show the LASER to patients with different malignant tumors increases resistents of organism to tumor growth but and oppres some factors of natural irraminitste.