Автореферат и диссертация по медицине (14.00.03) на тему:Особенности реакции гиппокампа крыс на экспериментальный гипо-и гиперкортицизм

' и з з;

» V

í

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ

Киевский научно-исследовательский институт эндокринологии и обмена веществ

На правах рукописи

ЗИНЧУК Сергей Фадеевич

ОСОБЕННОСТИ РЕАКЦИИ ГИППОКАМПА КРЫС НА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ ГИПО-И ГИПЕРКОРТИЦИЗМ

(14.00.03 — эндокринология)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

КИЕВ — 199!

Работа выполнена в Центральной научно-исследоват|ель-. А ской лаборатории Кемеровского медицинского инстизд^тЙ-МЗ РСФСР.

Научный руководитель — доктор медицинских наук, профессор Кононенко В. Я.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук Зур-наджи Ю. Н., доктор медицинских наук Верхратский Н. С.

Ведущее учреждение — Харьковский научно-исследовательский институт эндокринологии и химии гормонов МЗ Украины.

Защита состоится ./У » 1999 г. в-ча-

сов на заседании специализированного совета по эндокринологии Д.008.14.01 при Киевском научно-исследовательском институте эндокринологии и обмена веществ МЗ Украины (254114, Киев, ул. Вышгородская, 69).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Киевского научно-исследовательского института эндокринологии и обмена веществ МЗ Украины.

Автореферат разослан « ¿3 ъЯтеМ^гМ 1999 г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат медицинских наук

И. Н. ШОСТАК-ПАСЕЧНИК

'ЯДГСТГГ:- '' Sí. "ОТ£;,д «

у - ОБЩАЯ XAPAKTEFM СТИКА РАБОТЫ

». i- itSSIl

^T^tenrya, ьносгь темы. Одной из проблем современной эндокриноло-зсертдций

"" J'ИИ яъляется изучение взаимоотношений нервной и эндокринной систем организма, обеспечивающих гомеостаз и эашитно-приспо-собительные реакции■/КомиссареНко В.П.,1968; Ксмиссаренко В.П., Кононенко В.Я. ,1980; Резников Л.Г.Д982; Sapoisky Я. (jg86 Филаретов -А, А. ,1987; Xovacs К,, Macara С, ,1988; De Kloet Е. ,1990; Зурнаджи Ю.Н.,1991/. Существенная роль в этик процессах принадлежит лимбической системе мозга, центральным звеном которой является гиотокамп'/McEwen ' В.; Schwartz L., Veía a J. ,1969; Ма-лшенко Н.М.,1976; Кононенко В.Я.,1982; Ьепеу M.,Aitken Д., . 1985;Herman J.et al. >1989/. Гиппскамп Имеет многочисленные связи'с центрами коры, ствола мозга, Назальными ганглиями и гипоталамусом, однчко,. его роль не исчерпывается участием в интегративной деятельности мозга.. В настоящее время получен ряд доказательств того, что гиппокамп при различных экспериментальных воздействиях, таких как_ электрораздр'ажение, перерезка проводяотх nyíefl, фармакологические воздействия, межег /влиять На функционйроьание корь; надпочечников /Cassadi R. ,•• . Taylor ,А., 197G; Felárrián. , 1963; Пут 'J. tt al.,Í985; Малы-шенко H,1987/. Однако,, несмотря на накопленный'фактический материал, до сих пор. остается .неясной роль-гиппонампа в рогу' ,ляции функций >ипотал9мо-гйпофий'арно:-я^адпочечниковой системы.

Необходимость изучения взаимоотношений между центральни-' ми звеньями нервной системы и эндокринными механизмами диктуется клиническими данными', свидетельствующими о расстройст- . вах нервной деятельности- при патологии периферических эндокринных желез. К ним относятся , заболевание, сопровождающиеся

либо гиперпродукцией кортикостероидов, либо снижением корти-коотероидов в периферической крови. Кроме того, широкое применение глюкокортикоидных препаратов в лечебной практике часто сопровождается осложнениями со стороны нервной системы /Беклемишев К.Д. ,1963; Krieger Д., 1972; Miura К.,1976; Дри-вотинов Б.В.,1989/. Сдвиги в функционировании центральной нервней системы наблюдаются и у больных после оперативного удаления надпочечников. Все вышеизложенное может свидетельствовать о существовании определенной зависимости между активностью коры надпочечников и деятельностью мозга. Однако, если факт влияния глюкокортикоидов на нервную систему является твердо, установленным, то механизмы и пути, посредством которых осуществляется их действие на мозг, пока изучены недостаточно. Таким образом, изучение заинтересованных структур мозга, в частности, гиппокампа,'при экспериментальном нарушении баланса кортикосгероидов в организме,,представляет значительный интерес. Гиппокамп не только имеет рецепторы к глюкокортикоидам, но и . способен накапливать стероида .в значительно большей степени, чем.другие структуры мозга /McEwenВ.,1969; Жуков Д.А., 1984; Halpain et al. ,1986; Шаляпина В.Т. с соавт.,1991/.

Таким образом, принципиальная возможность участия гиппокампа в регуляции баланса; кортикосгероидов в организме не исключена; хотя в настояшеё время еще не имеет достаточного экспериментального обоснования.

Цель и задачи исследования.- Основной целью .Настоящего исследования, явилось выяснений механизмов влияния гиппокампа на поддержание баланса кортикосте'роидов _в организме,' а также' . вопроса о существовании обратных связей между гиппокампом к гипоталамическиии коргикодиб.еринпродуцируизими центрами. ■

Для реализации указанной цели были поставлены следующие эацачи:. .

1. Изучить реакцию медиаторных систем гиппокампа крыс на различные изменения баланса кортикостероидов в организме, вызванные либо введением гидрокортизона, либо адреналэктомией.

2. Изучить монофункциональные изменения в гиппокампе при экспериментальном нарушении баланса кортикостероидов в сопоставлении с реакцией медиаторных систем.

3. Исследовать уровни кортиколиберина в гиппокампе и в периферической крови при экспериментальном гиперкортицизме.

.4. Проанализировать возможную роль гиппокампа в механизмах парагипофизарных влияний на гипоталамо-гипофизарно-над- .. псчечниковуо систему при дисбалансе кортикостероидов в орга-. низме. ;

Научная новизна. В работе получены новые факты, дохазыватаив участие гиппокампа в системе регуляции баланса кортикостеро- • идов в организме. В частности впервые показано, что:

1. Введение гидрокортизона'/ГК/ вызывает сникениз уровней норадреналина-Мк/ и сербтониНа в гиппокампе, а такка накопление и'ммунореактивного кортиколиберина'и снижение уровня АКТГ в плазме, что.свидетельствует о тормозных влияниях на. '

. гипоталамо-гйп6ф!3арно-надлочечниковую. систему .

2. Изменение баланса.биогенных аминов в гиппокампе после двухсторонней адреналэктомии•/АЭ/ носят полифязный характер. .

.3. Нарушение баланса кортикостероидов в организме приводит к возникновению многочисленных дегенеративных изменений в пирамидальных нейронах гиппокампа, что свидетельствует о заинтересованнрсти данной структуры в этом процессе.

Теоретическая и практическая значимость. Результаты работы, Подтверждающие участие гилпокампа в механизмах регуляции функционирования гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы, . углубляют и развивают современные представления о взаимоотношениях нервной и эндокринной систем регуляции.

Практическая ценность исследования заключается в том, что полученные факты могут быть использованы при разработке способов коррекции гипо- и гиперкортикоидных состояний в клинике путем воздействия на центральные механизмы регуляции гипота-ламо-гилофизарно-кадпочечниковой системы и заместительной терапии после АЭ.

. Основные положения, выносимые на защиту.

1. Гиппокамп принимает участие в механизмах регуляции • функции гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы в ус- ■ ловиях дисбаланса кортикосгероидов в организме.

2. Гиппокамп является важным звеном в осуществлении механизмов отрицательной обратной связи в системе регуляции функций коры надпочечников. ■ '

3; Глубокий дисбаланс кортикостероидо'в в организме вызывает дегенеративные изменения нейронов гилпокампа как при гипо-, так и при гиперкортицизме.

Апробация работы.' Отдельные .фрагменты диссертации были- доло- , кечы и обсуздены.на Научной конференции молодых ученых г.Кемерово /1990г./, на'5-ой''Всесоюзной конференции, посвященной 90-летию со дня рождений.X.С.Каатоянца физиология и биохимия медиаторчых процессов/ /Москва,1990г./, на региональной конференции молодых учены* Сибири ./Красноярск, 1991г./, на заседаниях Кемеровского' отделения Всероссийского научного общества анатомов, гистологов и; эмбриологов /1987,1990гг./, на 'за-

седаниях областного общества эндокринологов /1991г./. По мч- . териалам диссертации имзется 3 публикации.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, I глава /обзор литерагуры/, 2-оР, главы /материал и методики/, 3~ей главы /результаты исследования/, 4-ой главы /обсуждение результатов/ и выводов.

Материалы диссертации изложены на 156 страницах.машинописного текста, включая таблицы и рисунки, в том числе 20 микрофотографий, Список использованной литературы состоит из 389 источников, в.том числе.218 иностранных авторов.

.. ■ ' МАТЕНЩ И МКГОДИКИ ИСОЩОВАНЙЯ ; .

Работа выполнена на взрослых крысах-самцах линии Вистср. Средняя масса тела товотных. составила 190-220 граммов. Все животные. содержались. в виварии при естественном освещении- на' стандартных диетйх.; Эксперименты проводились в летний и ссён~ нйй периоды года« Все животные, которых брали в эксперимент, были предварительно адаптированы к ■ обстановке'и кочтлгп'у с людьми'а течение 3D Сутс'к.'..; • ' . .'

Было проведена' 2 :серии экспериментов.' В первой, серии экспериментов создавали состояние гиперкортицизма у крыс в двух-экспериментальных моделях.'С. целью создания у подопытных крыс гиперкортикоидного состояния животным первой экспериментальной- модели вводили внутримышечно гидрокортизона .ацетат /фирмы "Гидес'н РихТер", .Венгрия/ однократно в дозе 5 мг на 100 гратов массы. ?ела и забирали материал для исследования че-: рез-1,4 и 24 часа после'инъекций. Животном второй экспериментальной модёли гидрокортизон вводили в вышеуказанной дозе один.

раз в сутки ежедневно в течение 3 и 7 суток и забирали материал для исследования через 24 часа после заключительной инъекции гормона.

Контролем к животным первой серии экспериментов служили интактные крысы и крысы, которым внутримышечно один раз в сутки вводили физиологический раствор.

Во второй серии экспериментов создавали состояние гипо-кортицизма при помощи операции двухсторонней адреналэктомии. Операцию выполняли по общепринятой методике /Кабак Я.М.,1968/. Контролем к адреналэкгомированнш крысам служили интактные и ложноадреналэктомированные животные, Кивотных умервщляли и забирали материал для исследований через 1,2.,3,7,14 и 30 суток после операции.

Определение медиаторов в гомогенатах гиппокампа в первой серии экспериментов проводили: норадреналина и дофамина радиоэнзимным методом, серотонина -- радиоиммунным методом во второй серии экспериментов все медиаторы определяли флюори-метрическим методом по JacoЪowitz, Д.,1978, Определение кор-тиколиберина в гиппокампе и .плазме крови, а также АКТГ в плазме проводили радиоиммунным методом при помощи коммерческих тест-Наборов.

Для электронной.микроскопий выделенный гиппокамп фиксировали в 3% растворе глюгаровсго альдегида на фосфатном буфере. После.промывки в буфере ткань дофиксировали в I% растворе гетраокиси осмия, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заключали в аралдит. Блоки полимеризовали и после изучения полутонких срезов, окрашенных толуидиновым синим на 1% растроре буры, ультратомироаали на ультратоме 1КЗ-Нова. Ультратонкие срезы контрастировали уранклацетатом и

цитратом свинца в Ультрастейнере. Просмотр и фотографирование препзратов проводили в электронных.микроскопах У3Mî-IOOk, ЭМВ-ЮОБ и II3M-ID0. . ' ■ ч

Для световой микроскопии мозг крысы фиксировали в 10$ нейтральном формалине. Предварительную гистологическую обра- . ботку проводили общепринятыми методами /Ромейс Б.,1953; Лил- '• ли Р.,1969/. Серийные фронтальные срезы мозга окрашивали ге-матоксилин-эозинрм и галлоцианин-хромовыми квасцами по Эйнзр-сону. Цитофотометрию проводили двухволновнм методом с целью определения нуклеиновых кислот на цигофотометре. Цитофотомет-рйя проводилась на центральных 'срезах гйппокампа в полях CAI, СА2,..САЗ, СА4. Содержание нуклеиновых: кислот в каждом из указанных полей определялось в ядрах не менее 50 клеток и выражалось в условных единицах оптической плотности.

Весь цифровой материал обработай методами вариационной • статистики с использованием t- критерия-Стьюдента /Плохин-ский Н.А.,1975; Урбах B.Ï).,I975/i '

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ 01 СУЖДЕНИЕ

Влияние экспериментального изменения баланса корти::о-стероидов в организме крыс на обмен медиаторов в гиппоиампе _-

Концентрация серотонйна в ткани гйппокампа достоверно снижалась через.I и 4 часа после однократного введения гидрокортизона, а также черев 3 и 7 суток его ежедневного введения (табл.1). После АЭ концентрация серотонйна резко возрастала и к концу первых суток дослз операции составила 240ÍS от исходного уровня. 0. дальнейшем -, к V суткам его содержание несколько снижается, к концу 14 суток возврацается к исход-

ному уровню и сохраняется в пределах нормы до 30 суток /рис.1/.

Концентрация НА в гиппокампе достоверно снижена на всех сроках после однократной инъекции ГК. Самый низкий уровень данного медиатора отмечается через 7 суток ежедневного введения /281,4^78,2 пг/мг ткани: в контроле 2811,6*461,1, Р* 0,01/.

Снижение уровня НА в гиппокампе в условиях гиперкортициз-ма сопровождалось накоплением ДА. Наибольшее его содержание отмечалось'^через I и 4 часа после введения однократной дозы ГК и через 7 суток после длительного введения /табл.1/.

Таким образом, в условиях повышенного содержания корги-' костероидов в периферической крови, изменения содержания НА и ДА в гиппокампе носят разнонаправленный характер: на фоне увеличения количества ДА отмечается низкое содержание НА. Учитывая данные литературы о том, что ДА в гиппокампе является в основном предшественником НА (ЫпйнуаИ, В.,1964) можно пред-

V ■

положить, что в данном случае нарушается превращение ДА в НА.

После АЭ содержание как НА, так и ДА резко возрастало, при этом, увеличению содержания НА предшествовало увеличение содержания ДА /рис.1/. Максимальное увеличение НА в гиппокампе отмечается к концу третьих суток после операции и достигает 1,03*0,05 мкг/г ткани /в контроле 0,51*0,05 мкг/г;Р<0,01/. К седьмым суткам концентрация НА и ДА восстанавливается и сохраняется в пределах нормы через 14 и 30 суток /рис.1/.

Концентрация иммунореактивного кортиколиберина существенно увеличивалась в гиппокампе после введения ГК /табл.1/. -Так, через 4 часа после однократной инъекции содержание кортиколиберина достигало 0,98*0,14 пг/мг ткани, через 7 суток ежедневного введения- 0,91*0,07 пг/мг ткани /в контроле 0,56*0,36 пг/мг, 0,01/. .В связи с полученными' результата-

ми вопрос о влиянии ГК на содержание кортиколиберина в гиппо-кампе был изучен более широко в Сопоставлении с уровнем кортиколиберина в периферической крови. Полученные результаты свидетельствуют о том, что напротив, в периферической крови у этих животных отмечались низкие концентрации кортиколиберина по сравнению с исходными, через 4 часа поело однократного введения гидрокортизона уровень кортиколиберина составил 1,2 -0,39 пг/мл;.через 3 суток ежедневного введения 0,22^0,12 пг/мл, в контроле 3,67±1,09 пг/мл /Р<0,01/. . / '' *

Интересно сопоставить результаты изменения медиаторов в гиппскампе в условиях дисбаланса кортикостероидов, полученные в Наших экспериментах, с результатами по определению содержания кортикостероидов в экспериментах использовавпих такие же модели, проводимых другими авторами. Показано, что концент- ' рация кортикосгерсна в периферической крови крыс после одно-кратного введения ГК в.дозе 50 мг/кг приводит к максимальному увеличению гормона через 2-3 часа, а к концу первых суток •. нормализуется, т.е. условия гиперкортицизма сохраняются после, однократного введения гормона лишь в течение первых 2-3 часов Дуков Д.А.,1984/. В эти сроки в Наийх экспериментах отмечается существенное снижение, серотонина и НА и накопление ДА и-кортиколиберина в гиппокампе. . • ' - ..... .

. После-АЭ отмечается резкое уменьшение концентрации кор-гикостерона в периферической крови крыс, которое сохраняется '. низким в течение 1,& месяца после операции и Нормализуется •■.. к концу'второго месяца'//Кравченко Б.И. ,19657. Таким образом, состояние гипокортицизма:сохраняется во все изученные нами .сроки после АЗ. Низкий Уровень ксртикостерсидов вызывает повышение содержания в'гиппокампе НА и,ДА, которые, несмотря " ■ 9 ' '

Таблица I.

Содержание серотонина, норадреналина, дофамина и кортиколиберина в гиппокампе крыс при экспериментальном гиперкортицизме.

Концентрация нора- Концентрация до- Концентрация се- Концентрация кор-дреналина йамина ротонина ткколиберина ■. " .

(пг/мг ткани)_ (пг/мг ткани) (пг/мг -»каки! (п~/Уг ткани)

Группы кивотных

+

±

+ -С

I. Интаятные крысы-

2,.Ложное введение физиологического . раствора

Однократное введение гидрокортизона_

3, I час

4. 4 чада

а. 24 часа Длительное введение

б. 3 суток 7. 7 суток

2811,581461,1(5) - 13,04^3,32(5) 57,515,05(7) 0,5610,36(7)

1625,931510,3(6) 13,7512,51(6). 54,6^,26(6) 0,5410,43(5)

597,21200,5(5)** 40,57±5,86(5)хх 24,86±3,07(7)хх 0,6610,04(5)

459,73±159,06(3)хх 25,7716,36(4) "34,8^,99(8)хх 0,98±0,14(7)х

359,23^87,67(4)хх 16,2814,61(4 ) 43,771б,14(9) . 0,7510,10(9)

802,941471,41(5)х 11,7311,81(5) 39,7616,07(6)Х 0,9210,05(4)хх

281,47178,25(5)хх • .51,13112,17(5) 33,1113,32(9)ХХ 0,9110,07(5)хх

Примечание:'X - различия статистически достоверны при 0,05; хх - различия статистически достоверны при Р<0,01. В скобках указано количество животных

%

Ric.I. Изменение содержания ееротонина (I), дофг^ина С2) и■ корадиеналина (3) в гиппокампе посла адреналэктоиш. За IG03& принят уроеень данных веществ в гиппокампе интьктных крыс. ** - Р<0,05; - P<Q,GI - при-сравнении с показателями у.иктактных крыс.

на сохраняющиеся гипокортикоидное состояние, быстро нормализуется.

Таким образом, проведенные исследования показали, что глубокое нарушение балансе кортикостероидов в организме ведет к существенным изменениям в содержании медиаторов и кортико-либерина в гиппокампе.

Морфофункциональное состояние гиппокампа . ' в условиях гипер- к гипокортицизма_

В пирамидальном слое Гиппокампа черёз I час после однократного введения ГК отмечается появление пикноморфных клеток, количество которых возрастает спустя 4 часа после инъекции. При длительном.введении гормона в течение 3 или 7 суток оча-' ги пикноморфных клеток в основном локализуются в пирамидальном слое полей САЗ и СА4.

. Результаты цитофотоыетрического' определения содержания '•• суммарных нуклеиновых кислот, в ядрах пирамидных нейронов гиппокампа /рис.2/ показывают, что через 4 часа после однократного введения 1TÍ, их количество заметно снижается в полях CAI ц СА2 при сравнении с предыдущим сроком после инъекции. При. длительном ежедневном введении гормона реакция пирамидных- нейронов носит, фазный характер: спустя 3 суток содержание нуклеиновых кислот' увеличивается, главным образом, в полях САЗ и GA4 и достигает в'среднем. 120% /Р<0,О5/, спустя 7 суток данный показатель уменьшается по сравнению с предыдущим сроком Ьшта /рис.2/.'

Йрй изучении ультраструктуры пира5ш5льных нёйронов гиппокампа после однократного введения ГК через I час ядра при- '. обретают неправильную форму, ядрьшки • увеличиваются в разме-' ' " ■' -Í'". ; 12. • '

рах и становятся рыхлыми, уменьшается количество свободных рибосом, которые агрегируются в крупные комплексы. В мито -хондриях отмечаются признаки набухания и разрушения крист. Наибольшие изменения на этом сроке огыга отмечаются в•синапсах: они о-устовены, митохондрии в них имеют электронноплот-ный матрикс, часть везикул увеличивается в размерах и агрегируется в комплексы. Спустя 4 часа после введения ГК в телах пирамидальных нейронов гиппокампа отмечаются более существенные изменения: цитоплазматический матрикс деструктурирован, резко уменьшается количество полисом, расширения эндоплазма-тического ретикулума /2ПР/ часто образуют цистерны, увеличивается количество лизосом й осмиефильных мультивезикулярных телец. Встречаются нейроны, имеющие признаки дегенерации. Через 24 часа после инъекции ультраструктурная картина в целом нормализуется, хотя сохраняются отдельные нейроны с признаками дегенерацмм..

При длительном ежедневном введении ГК реакцию нейронов можно' разделить на два типа. Первый тип клеток характеризуется электронноплотной цитоплазмой, гипертрофией органоидов /ЭПР, полирибосом, комплекса Гольджи/, в митохондриях отмечается разрушение крист. В нейронах второго типа цитоплазмати-• ческий матрикс просветлен,'содержит множество фрагментов ср-ганелл и нейрофиламентов. В полях САЗ и СА4 нейроны второго типа составляют большинство клеток. Синапсы при длительном введении либо опуст.опены, либо содержат крупнне везикулы или их агрегаты.

К концу первых суток после "АЭ в гилпокампе отмечается появление крупных очагов пикноморфных клеток в полях САЗ и СА.4. Через 3 суток после операции можно выделить два типа ре!»

акции"нейроноводни имеют небольшие размеры и мелкие темно- . окрашенные ядра, другие - крупные размеры и округлые светлые ядра. Спустя 7 и 14 суток после операции в гиппокампе отмечаются небольшие очаги пикноморфных клеток, в полях САЗ-СА4 увеличивается' число клеток, имеющих большие размеры и оптически пустую.цитоплазму. В полях CAI и CAZ морфологическая картина не отличается от таковой у интакгных крыс.

Однократное введение

Длительное введение

1D0

О

ш

II

I1

8

"У ^

1234 1234 ( 1234 1234 1 час 4 часа 3 суток 7 суток Рис.2. Изменение содержания нуклеиновых кислот в ядрах пирамидных нейронов различных полей гиПпокампа при введе-■нии гидрокортизона. .За 1002 принят уровень содержания нуклеиновых киСлот в гиппокампе интактных крыс. Условные обозначения: •

I - поле CAI; Z - поле СА2; 3 - поле САЗ; 4 - поле СА4. ' • * - P<-Q,05; ; - E¿0,01 - при сравнении с показателя-.ми у интактных животных.

В течение первой недели после АЭ содержание суммарных ' нуклеиновых кислот снижается во всех полях гиппокампа./рис,3/, ;а спустя 14 суток восстанавливается до исходного уровня. При

электронномикроскопических исследованиях гйппокампа после АЭ отмечается в течение первых нескольких дней отмечается появление митохондрий с разрушенными кристами, увеличение количества рибосом, локальные расширения Э11Р, гипертрофия комплекса Гольдки. Спустя 7 суток после операции в гиппокампе встречаются нейроны с признаками дегенерации. Цитоплазма таких нейронов бедна органеллами, которые зачастую фрагментированц, цитоплазматиче-ский метрике просветлен, ядра клеток по периферии имеют ободок из гетерохроматина. К концу второй недели все нейроны гйппокампа можно условно разделить на две. группы: нейроны с выраженными признаками дегенерации и нейроны с признаками активации синтетических процессов. Через 30.суток после АЭ существенных изменений, по сравнению с ультраструктурой пирамидальных нейронов гйппокампа предыдущего послеоперационного срока не отмечается, за исключением того, что в единичных нейронах с признаками дегенерации можно отметить нарушения целостности цито- -плазматической мембраны.

Таким образом, как гипер- так и гипокортикоидное состояние вызывает в гиппокампе изменения, которые характеризуются разнонаправленной реакцией пирамидных нейронов. Глубокий дисбаланс кортикостероидных гормонов в организме приводит к дегенерации и гибели части нейронов гйппокампа, при этом, процесс протекает счагово, поражая, в первую очередь, области САЗ и СА4. Другой тип нейронов имеет морфологические признаки активации синтетических процессов и повышенной функциональной активности в целом. По-видимому, эти нейроны могут компенсировать процесс дегенерации или потери клеток .в результате дисбаланса кортикостероидов.

15

.различия достоверны при сравнении с показателями интактных крыс

Рис.3.■ Результаты цитофотометрическит измерений содержания суммарных нуклеиновых кислот в ядрах нейронов различных полей гиппокампа крыс в динамике после адреяалэктомии. За 100% принят уровень нуклеиновых' кислот у шгаактных животных.

, ■ При длительном гипо- или гилеркортицизме наблюдаются очаговые дегенеративные'изменения в пирамидальных нейронах гиплокамла. Таким образом, экспериментальное нарушение, баланса кортикостероидов в организме приводит к -структурным изменениям в синапсах и нейронах наблюдаемые в основном в полях САЗ и СА4. Данные дегенеративные процессы могут являться структурной- основой наблюдаемых в клинике нейропсихических нарушений при синдроме Ицгчко-Кушинга и длительной терапии глюко-кортикоидами. Такое предположение правомочно, поскольку известно, что гиппокамп является центральным звеном лимбической системы, и играет важную роль в формировании эмоций, сна, памяти.

Полученные в работе факты о,параллельном изменении биогенных аминов и кортиколиберина в гиппокампа, а также'изменение уровней кортиколиберина и АКТГ а периферической крови при создании экспериментального гиперкортицизма позволяет предполагать, что гиппокамп является, одним из важных регуляторных звеньев функции надпочечных желез. Кроме того факт накопления кортиколиберина гиппокампом при гиперкортицизме поаволя-. ет подтвердить имеющуюся в литературе гипотезу о том, что гиппокамп является одним из звеньев в системе обратной связи регуляции уровня кортикостероидов в организме.

Несмотря на то, что изложенные соображения и наблюдения еще недостаточны для создания исчерпывающей концепции о механизмах и степени вовлечения гиппскампа в регуляцию уровня глккокортикоидов в организме при гипо- или гиперкортккоидных состояниях, но они позволяют считать, что гиппокамп несомненно вовлекается в эти регуляторные процессы;'участвуя в них через посредство нейромедиаторов и нейропептидов.

I? ' '■ '

."•" Вопросы влияния глюкокортикоидов на гиппокамп заслуживают дальнейшего более углубленного изучения и это имеет важное значение для экспериментальной и клинической эндокринологии, для объяснения нейропсихических растройств в условиях измененного баланса кортикостероидов в организме вызванного нарушением функции коры надпочечных желез при.гипо- и гиперкортикоид-ных состояниях. Полученные в работе факты необходимо учиты- '• ьать при.терапии гипо- и гиперкортикоидных. состояний в клиниг ке, а также при длительном применении глюкокортикоидов в терапии различных заболеваний.

ВЫВОДЫ.' ;

1. Гиппокамп является глюкокортикоид чувствительной лимбиче-- -ской структурой, которая активно вовлекается в реакцию на изменение баланса кортикостероидов в,организме и принимает участие в регуляции функции коры надпочечников.

2.'.При введении гидрокортизона содержание биогенных аминов в

, гйппокампе изменяется в динамике. Однократное либо длительное введение'гормона приводит к существенному понижению уровней серотонина и норадреналина и накоплению дофамина. . 3. Гидрокортизон 'вызывает торможение функциональной активности кортиколиберин-продуцирующих центров гипоталамуса, о чем свидетельствует быстрое понижение иммунореактивных кор-тиколиберинд И,адренокортикотропкого.гормона в крови. 4.'При экспериментальном гидеркортацизме активируется механизм обратной связи между функционированием гиппокампа, с одной стороны, и коргиколибсринпродуцирующими центрами гипоталамуса , с другой сторюны, 'о'чем свидетельс-вует накопление . иммунореактивного кортиколиберина тканью гиппокампа при

„одновременном снижении уровней биогенных аминов в нем.

5. После двухсторонней адреналэктомии у крыс в гишюкампе отмечается увеличение уровней серотонина, дофамина и норадре-налина в первые трое суток после операции. . ■ '

6. При изучении морфо-функциональных показателей гиппокампа у крыс с нарушенным гормональным статусом /гипер- и гипо-кортицизм/ установили, что дисбаланс кортикостероидов со-провоедаётся появлением большого количества'пикноморфяых и дегенерирующих пирамидальных нейронов, преимущественно

- . в полях САЗ-СА4, концентрация нуклеиновых кислот в нейронах гиппокампа снижается, дегенерация, пирамидных нейронов сопровождается выраженными ультраструктурнцми сдвигами.

Список работ, опубликованных по материалам диссертации:

1. Зинчук С.Содержание биогенных аминов,в гишюкампе у крыс при введении гидрокортизона ацетата.//Тезисы докл.У Всесоюзной конференции "Физиология и биохимия медиаторных,процессов", посвяшенной 90-летию со дня рождения академ.АН Арм. ССР, члена-кор.АН СССР Х.С.Коатоянца,- М.,1990.-0.121.

2. Зинчук С.Ф. Ультра структурные изменения в гиппокагше после введения гидрокортизона ацетата.//Тезисы докл.области ой научно-практической конф."Молодые ученые Кузбасса - народному хозяйству". - Кемерово, 1990.- - С.22.

3. Зинчук С.Ф. Содержание серотонина в гиипокэмпе и АНТГ в плазме,крови при введении гидрокортизона ацетата.//Тезисы У научно-практической конф."Молодые ученые практическому здравоохранению". - Красноярск,1990. - 0.54.

19