Автореферат и диссертация по медицине (14.04.02) на тему:Обоснование состава и стандартизация стоматологического лекарственного средства на основе глюкозамина гидрохлорида и соков крапивы и каланхоэ
- Ученая степень
- кандидата фармацевтических наук
- ВАК РФ
- 14.04.02
Автореферат диссертации по медицине на тему Обоснование состава и стандартизация стоматологического лекарственного средства на основе глюкозамина гидрохлорида и соков крапивы и каланхоэ
На правах рукописи
■ ' // '
/
ВАЩЕНКО ЕЛЕНА СЕРГЕЕВНА
ОБОСНОВАНИЕ СОСТАВА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА НА ОСНОВЕ ГЛЮКОЗАМИНА ГИДРОХЛОРИДА И СОКОВ КРАПИВЫ И
КАЛАНХОЭ
14.04.02 - фармацевтическая химия и фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ
ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК
7 Г Г-' Г?
ПЯТИГОРСК 2011
48430
4843039
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высцц
профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению социальному развитию»
Научный руководитель: доктор фармацевтических наук, профессо
Компанцева Евгения Владимировна
Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор
Озеров Александр Александрович
кандидат фармацевтических наук,
Щербакова Лариса Ивановна
Ведущая организация: ГОУ ВПО «Самарский тосударственн медицинский университет Росздрава »
Защита диссертации состоится 2011 года в Р. РРчъо,
на заседании диссертационного совета Д 208.069.01 при ГУО ВП «Пятигорская ГФА Росздрава» (357532, Ставропольский край, Пятигорск, п Калинина, 11).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Пятигорск ГФА Росздрава».
Автореферат разослан «/Л»
20П г.
Ученый секретарь /V'1' ¿¡У
диссертационного совета В.В.Гацан
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. В 2001 году Американской стоматологической ассоциацией были проведены исследования, показавшие, что воспалительные заболевания пародонта являются одной из наиболее распространенных и сложных патологий челюстной области, что приводит к потере даже здоровых зубов и является причиной их удаления в 80% случаев.
Согласно рекомендациям ВОЗ для лечения заболеваний пародонта применяют наряду с хирургическим вмешательством комбинированную терапию, которая предусматривает использование двух и более лекарственных средств (ЛС) с лечебным действием различной направленности. Лечение данной патологии осуществляется путем использования аппликационных лекарственных форм (примочек, мазей, гелей, пленок и паст). В схемы лечения заболеваний пародонта очень часто включают применение настоев, отваров или соков из лекарственного растительного сырья.
На сегодняшний день в аптеках имеются зарубежные и отечественные ЛС, содержащие одно или несколько синтетических лекарственных веществ, а также растительные компоненты, но они малодоступны широкому кругу населения из-за их высокой стоимости.
Известно, что глюкозамин является неизменной составляющей глюкозаминогликанов и гиалуроновых кислот, принимающих активное участие в синтезе соединительно — тканных структур, в связи с чем глкжозамина гидрохлорид будет положительно влиять на процесс восстановления пораженных тканей пародонта. Со к каланхоэ широко применяется в стоматологии как репоративное средство при лечении заболеваний пародонта. Препараты крапивы двудомной (настои, отвары) оказывают кровоостанавливающее, сосудоукрепляющее действие и используются для лечения заболеваний полости рта. Сочетание глюкозамина с соками крапивы и каланхоэ в ЛС позволит быстрее достигнуть
терапевтического эффекта, направленного на снижение воспалительного процесса.
Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось обоснование состава и стандартизация комбинированного лекарственного средства, включающего глюкозамина гидрохлорид и объекты растительного происхождения - соки крапивы и каланхоэ, для использования в стоматологической практике.
Для реализации поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
-изучить возможность создания комбинированного лекарственного препарата, содержащего глюкозамина гидрохлорид и соки крапивы и каланхоэ;
- получить и обосновать нормы качества сока крапивы; -обосновать выбор основы и разработать технологическую схему получения лекарственного препарата, содержащего глюкозамина гидрохлорид и соки крапивы и каланхоэ;
-изучить возможность использования химических и физико - химических методов анализа для идентификации и количественного определения глюкозамина гидрохлорида и БАВ соков крапивы и каланхоэ при совместном присутствии;
-изучить стабильность глюкозамина гидрохлорида в присутствии соков крапивы и каланхоэ в препарате;
-подготовить проект ФСП на предлагаемый лекарственный препарат; -определить противовоспалительную и антимикробную активность предлагаемого препарата в опытах in vivo.
Научная новизна. В результате проведенных исследований был теоретически обоснован и предложен состав нового стоматологического лекарственного средства. Показана целесообразность следующего состава предлагаемого препарата: глюкозамина гидрохлорид, сок крапивы и сок каланхоэ. 4
На основании изучения влияния ВМС на высвобождение глюкозамина гидрохлорида из мази обоснован выбор основы для создания лекарственного стоматологического препарата для наружного применения.
В качестве основы мази обосновано использование сплава из ПЭО-400 и ПЭО-4000 с глицерином, в присутствии ДМСО, который обеспечивал наибольшее высвобождение глюкозамина гидрохлорида из мази.
В результате проведенных исследований был обоснован также выбор стабилизирующих веществ, препятствующих образованию продуктов деструкции глюкозамина.
Предложены оптимальные условия проведения методик качественного и количественного анализа БАВ сока крапивы.
Для установления сроков годности предлагаемого ЛС выбраны условия методики ТСХ методом планарной хроматографии для определения продукта деструкции глюкозамина гидрохлорида 5 - гидроксиметилфурфурола (5 -ГМФ) с последующей компьютерной обработкой полученных хроматограмм с помощью программы «Видеоденситометр Sorbfil». Впервые данной методикой изучена стабильность глюкозамина гидрохлорида в присутствии БАВ соков растений.
Проведено изучение противовоспалительной активности предложенного лекарственного средства с глюкозамина гидрохлоридом и соками крапивы и каланхоэ в опытах на животных на модели острого экссудативного воспаления. В результате проведенного исследования установлено, что новый комбинированный препарат приводит к значительному ускорению заживления раневой поверхности, обладает высокой противовоспалительной активностью. Показано, что в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий предлагаемый препарат проявляет антибактериальный эффект, установленный в опытах in vivo.
Практическая значимость исследований
Для получения сока крапивы из свежего сырья составлена соответствующая НД. Для нормирования качества сока крапивы предложено
определять органические кислоты, кислоту аскорбиновую, дубильные вещества, хлорофилл, флавоноиды, плотность и рН сока.
Для нормирования качества предложенного стоматологического лекарственного средства разработан проект ФСП, в который включены следующие показатели мази стоматологической: органические кислоты, флавоноиды, аскорбиновая кислота, плотность, рН, микробиологическая чистота и количественного определения глюкозамина гидрохлорида. Методики воспроизводимы и доступны для практического использования. Проведенная валидационная оценка методики Эльсона - Моргана показала, что при ее использовании для количественного определения глюкозамина гидрохлорида в ЛС соблюдается линейность в области аналитических концентраций. Методика воспроизводима и правильна.
Определены сроки годности разработанного средства, составляющие два года хранения в естественных условиях.
Внедрение результатов исследований в практику. В результате проведенной работы разработаны Технические условия (ТУ) и Технологическая инструкция (ТИ) на производство стоматологического лечебно - профилактического средства, получившего условное название «Глюкофитопарадонт», на который имеются акты апробации от ООО НПО «Фитодент» г. Ставрополь и ООО НПО «Полет» г. Ставрополь. Проведенные клинические испытания на базе факультета последипломного обучения на кафедре стоматологии в СГМА г. Ставрополь показали, что разработанное ЛС обладает выраженным противопарадонтозным действием (отчет от 24 апреля 2010 г). Положения, выдвигаемые на защиту:
- обоснование норм качества сока крапивы;
- выбор основы мази стоматологической, содержащей глюкозамина гидрохлорид, сок крапивы и сок каланхоэ;
- методики качественного и количественного определения глюкозамина гидрохлорида и БАВ соков крапивы и каланхоэ при совместном присутствии;
методика количественного определения примеси 5-гидрокси-метилфурфурола и родственных ему соединений в субстанции глюкозамина гидрохлорида и в мази стоматологической;
результаты изучения стабильности и установление срока годности глюкозамина гидрохлорида в мази;
- результаты изучения противовоспалительной и антимикробной активности стоматологического препарата.
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук
Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательской работы ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава, а также в соответствии с соглашением о выполнении НИР между Федеральным агентством по здравоохранению и социальному развитию и ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (№06/1049).
Апробация работы и публикации
Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на 62-й и 65-й региональных конференциях по фармации, фармакологии и подготовке кадров (Пятигорск 2007, 2010) и на научно - практических конференциях «Фармация из века в век» (Санкт - Петербургская ХФА, 20.04.2008г) и «Хроматография и капиллярный электрофорез» (г. Краснодар, 29.09.2010 г). По результатам диссертационной работы опубликовано 8 работ, из них одна в журнале, рекомендуемом ВАК. Подана заявка и получена приоритетная справка № 2008133255/15(041837) от 12.08.2008 г на патентование состава стоматологического средства, содержащего глюкозамина гидрохлорид, соки крапивы и каланхоэ.
Объем и структура диссертации
Диссертационная работа изложена на 150 страницах текста компьютерного набора и состоит из обзора литературы и 3 глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 139 источников, в том числе 19 иностранный; содержит 30 таблиц, 24 рисунка.
Объекты и методы исследования
В работе использовали полиэтиленгликоль с различной молекулярной массой (ПЭО-4СЮ, ПЭО-4000, ПЭО-1500, ПЭО-бООО, метилцелюлозу -300000 (МЦ), натрий карбиксиметилцелюлозу - 30000 (ЫаКМЦ), а так же глицерин и диметилсульфоксид (ДМСО).
Определение биологически активных веществ (БАВ) проводили методом бумажной хроматографии (БХ) и тонкослойной хроматографии (ТСХ). Для приготовления подвижных фаз использовали растворители: ацетон, п -бутиловый спирт, этилацетат, спирт 95%, кислоту уксусную ледяную, раствор аммиака концентрированного и воду.
Для хроматографии в тонком слое сорбента использовали пластинки «БогЬШ» ПТСХ-П-А-УФ, ТУ 26-11-17-89. Для хроматографии на бумаге использовали хроматографическую бумагу марки РШгак РЫ-1 (Германия).
В работе использовали следующие приборы и оборудование: аналитические весы марки Т-А-13, спектрофотометр СФ-2000, УФ облучатель типа «ВИО-1», рН - метр ионометр 410.
Термостатирование проводили в термостатах ТС - 60 и ТС - 40. Для сплавления основ использовали кипящую водяную баню.
Статистическую обработку результатов экспериментов проводили в соответствии с требованиями ГФ XII. Расчеты проводили с помощью компьютерной программы Ехсе1е версии 2007 года.
Для определения 5 - ГМФ в ЛС, разработали методику ТСХ с последующей обработкой полученных хроматограмм в компьютерной программе «Видеоденситометр - БогЬШ». В качестве подвижной фазы использовали этилацетат, а в качестве проявителя - раствор бензидина в этилацетате. При разработке методики руководствовались ГОСТом «Определение оксиметилфурфурола» для пищевой промышленности.
Валидационную оценку методик анализа проводили по таким характеристикам как специфичность, линейность, правильность и
воспроизводимость в соответствии с проектом ОФС «Валидация аналитических методик» ГФ XII.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Идентификация и количественное определение БАВ в соке крапивы двудомной и в соке каланхоэ
В качестве компонентов растительного происхождения нами были выбраны сок каланхоэ, выпускаемый отечественной промышленностью и сок крапивы двудомной.
В виду того, что сок крапивы не производиться фармацевтической промышленностью, первым этапом работы явилось получение и исследование сока крапивы. Из свежего сырья листьев крапивы двудомной по стандартной методике получили сок, который подвергли анализу.
В результате проведенного исследования хроматографическими методами в соке крапивы идентифицировали в сравнении с веществами свидетелей органические кислоты (яблочную, винную, янтарную, щавелевую, лимонную, аскорбиновую и феруловую кислоту), а также флавоноиды (рутин и кверцетин). Кроме того были установлены значения рН и плотность сока.
По общепринятым методикам определено количественное содержание некоторых групп БАВ, представленных в таблице 1.
Таблица 1 - Содержание БАВ в соке крапивы
Группа БАВ Метод Х±4Х (%)
Сумма органических кислот Алкалиметрия 0,833 ± 0,006
Аскорбиновая кислота Титрование раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолятом натрия 0,0295 ± 0,0003
Дубильные вещества Пермангонатометрия 0,0983 ± 0,0009
Хлорофилл Спектрофотометрия 0,026 ± 0,005
Для установления оптимальных сроков сбора, сырье собирали в мае, июне, сентябре месяцах 2007 и 2008 годах в Минераловодском районе Ставропольского края. Из собранного сырья готовили по три серии сока,
который подвергали анализу. Установлено, что время сбора сырья существенно не влияет на количество извлекаемых БАВ.
Проведенные исследования позволили разработать нормы качества сока крапивы двудомной, представленные в таблице 2.
Таблица 2 - Показатели и нормы качества «Крапивы двудомной сок»
Показатель Метод определения Норма
Внешний вид Органолептически темно - коричневая прозрачная жидкость со специфическим запахом
Плотность Гравиметрия с помощью пикнометра от 0,9939 до 1,1056 г/мл
рН С помощью рН- метра от7,0 до 7,8
Подлинность
1.Органические алифатические и фенолкарбоновые кислоты (яблочная, винная, внтарная, лимонная, щавелевая, аскорбиновая,феруловая) БХ Соответствует пятнам СОВС
2. Дубильные вещества Реакция с железоаммонийными квасцами Слабое синее окрашивание
3. Флавоноиды (рутин, кверцетин) тех Соответствует пятнам СОВС
Количественное определение
1. Сумма органических кислот Алкалиметрическое титрование Не менее 0,6%
2. Аскорбиновая кислота Титрование раствором индофенолята натрия (0,001 моль/л) не менее 0,02%
3. Хлорофилл Фотоколориметрия не менее 0,03%
4. Дубильные вещества Пермангонатометрическое титрование не менее от 0,9%
Полученные данные легли в основу проекта ТУ «Крапивы двудомной
сок».
Сок каланхоэ, используемый в составе мази, исследовали в тех же условиях, что и сок крапивы по идентичным показателям.
В соке каланхоэ найдены яблочная, янтарная, щавелевая кислоты, а также флавоноиды (рутин и кемпферол), т.е., содержатся те же соединения, что и в соке крапивы, однако, можно отметить, что в соке крапивы нами не обнаружен кемпферол, но идентифицирован кверцетин, что можно будет
использовать в дальнейшем для определения подлинности соков крапивы и каланхоэ в составе препарата. Кроме того, для идентификации сока крапивы можно использовать наличие аскорбиновой кислоты.
Изучение стабильности глюкозамина гидрохлорида в присутствии соков каланхоэ и крапивы В связи с тем, что предлагаемый стоматологический препарат будет мазью на гидрофильной основе, нами была изучена стабильность глюкозамина гидрохлорида в водных растворах в зависимости от рН среды, влияния катионов металлов и стабилизаторов.
На рисунке 1 представлены спектры поглощения водных растворов глюкозамина гидрохлорида, которые нагревали в течение различного времени.
к
1 - спектр поглощения 0,4% раствора глюкозамина гидрохлорида без нагревания; 2 - после нагревания 10 мин.; 3 - после нагревания 20 мин.; 4 -после нагревания 30 мин.; 5 - после нагревания 40 мин.; 6 - после нагревания 50 мин.
Рисунок 1 - Изменение спектров 0,4% водного раствора глюкозамина гидрохлорида в процессе хранения
Полученные результаты свидетельствуют, что спектр водного раствора
глюкозамина без нагревания имеет один максимум поглощения при 195 нм. Показано, что даже при коротком времени нагревания (до 10 минут) наблюдается увеличение оптической плотности и батохромный сдвиг
максимума поглощения глюкозамина гидрохлорида. Кроме того, появляется дополнительный максимум светопоглощения в области 280 нм.
Для определения оптимального значения рН среды, обеспечивающей стабильность глюкозамина гидрохлорида, было проведено изучение устойчивисти оптической плотности растворов глюкозамина гидрохлорида в зависимости рН и времени нагревания. В результате проведенных исследований было показано, что при рН от 2 до 4 растворы глюкозамина остаются стабильными в течение часа при температуре нагревания 80 °С. С дальнейшим увеличением рН стабильность резко снижается, о чем свидетельствует повышение оптической плотности растворов.
В связи с тем, что растворы с низким значением рН будут вызывать раздражение слизистой полости рта, оптимальное значение рН в стоматологическом препарате должно быть близко к 5,6. Поэтому необходимо подобрать стабилизатор, который способен обеспечить стабильность ЛС при рН 4,5 - 5,0. Результаты исследований представлены в таблице 3.
Таблица 3 - Значение оптической плотности 0,4% растворов глюкозамина гидрохлорида в присутствии стабилизаторов_
Наименование стабилизирующих веществ Оптическая плотность раствора при 280 нм
Время нагревания, мин
10 20 30 40 50 60
Лимонная кислота - - - 0,0305 0,052 0,071
Кислота аскорбиновая ■ 0,239 0,401 0,670
Натрия метабисульфит 0,071 0,105 0,223 0,366 0,696
Натрия сульфит ■ 0,131 0,333 0,42? 0,542 0,632
Смесь натрия сульфита и натрия метабисульфита (2:1) 0,082 0,089 0,1232 0,1689 0,186 0,263
Трилон Б 0,112 0,261 0,291 0,378 0,470: 0,568
Смесь трилона Б и натрия метабисульфита (1:2) 0,1512 0,2216 0,3102 0,4003 0,4588 0,6132
Анализируя полученные результаты, можно сделать вывод, что оптимальным стабилизатором является смесь натрия метабисульфита с натрия сульфитом (1:2).
Разработка методик анализа и показателей качества лекарственного средства, содержащего глюкозамина гидрохлорид, сок крапивы и сок
калонхоэ
В связи с тем, что наиболее удобной лекарственной формой для применения в стоматологии является мазь, на кафедре технологии были проведены исследования, в результате которых предложен следующий
состав мази стоматологической (в г):
Состав мази (на 100,0): Состав основы:
Глюкозамииа гидрохлорид 10,0 Полиэтиленоксид-400 60,0
Сок крапивы 10,0 Полиэтиленоксид-4000 30,0
Сок каланхоэ 10,0 Глицерин 10,0
Натрия метабисульфит 0,2 Основы мази до 100,0
Натрия сульфит 0,1
ДМСО 3,0
На модельных смесях предлагаемой прописи были разработаны методики
идентификации и количественного определения действующих веществ в предлагаемой мази.
Для идентификации действующих веществ в мази использовали хроматографические методы анализа, которые позволяют достоверно идентифицировать глюкозамина гидрохлорид и БАВ соков крапивы и каланхоэ при совместном присутствии. Для идентификации глюкозамина гидрохлорида в мази использовали метод ТСХ и реакцию Эльсона - Моргана с реактивом Эрлиха.
Таблица 4 - БАВ обнаруженных в мази
Название БАВ Яглятен СО Яг пятеп, проявившихся БАВ в извлечении из мази
Яблочная 0,48 0,43
Винная 0,27 0,23
Янтарная 0,74 0,71
Лимонная 0,37 0,33
Щавелевая 0,11 0,09
Аскорбиновая 0,35 0,32
Феруловая 0,85 0,82
Кверцетин 0,90 0,91
Рутин 0,40 0,39
Кемпферол 0,49 0,48
В таблице 4 указаны результаты обнаружения некоторых групп БАВ сока
крапивы и сока каланхоэ методами БХ и ТСХ в системе п - бутанол -
кислота ледяная уксусная - вода (4:1:2). Т.о., в разработанных условиях нами определены в составе мази органические кислоты, аскорбиновая и феруловая кислоты, а также флавоноиды.
Исходя из полученных результатов исследования, наличие сока крапивы можно идентифицировать по наличию пятен кислоты аскорбиновой и кверцетина, а наличие БАВ сока каланхоэ в пробе мази можно подтвердить по усилению интенсивности окраски пятен на хроматограмме определения органических кислот, в сравнении с интенсивностью пятен сока каланхоэ, а также по наличию пятна кемпферола.
Для количественного определения глюкозамина гидрохлорида в мази использовали метод Эльсона - Моргана.
Валидность методики определяли по показателям линейность, правильность в аналитической области от 80 до 120% от декларируемого количества глюкозамина. Результаты исследований представлены в таблице 5.
Таблица 5 - Валндационная оценка методики Эльсона-Моргана
Показатель Результат
Аналитическая область От 0,08 до 0,12 м г/пробе
Линейность у = 6,510х-0,005
Коэффициент корреляции 0,995
Правильность Я, % ср. =99,8
(табл. = 2,14 ББ = 0,46
ЯЯО = 0,46%
б=± 1,5%
1выч. =0,39
1выч<(табл^
Показано, что данная методика не отягощена систематической ошибкой, т.к. соблюдается неравенство 1выч < ^л (Р,^. График зависимости оптической плотности от концентрации имел линейный характер. Коэффициент корреляции был равен 0,9988, что позволяет использовать эту методику для количественного определения содержания глюкозамина. Воспроизводимость методики, проверенная на одной серии мази, составила 2,5 %. Т.о., предлагаемая методика прецизионна, линейна и правильна.
Следующим этапом исследований стало установление количества посторонних примесей в ЛС в процессе хранения.
Глюкозамина гидрохлорид в качестве посторонней примеси может содержать 5 - гидроксиметилфурфурол (5 - ГМФ) и родственные ему соединения, которых должно быть не более 0,05% (ФСП 42-0314-1478-01 «Глюкозамина гидрохлорид») .
В связи с тем, что БАВ сока каланхоэ имеют полосы поглощения в УФ -спектре в области 280 нм спектрофотометрическое определение примеси оказалось невозможным. Поэтому нами была разработана методика ТСХ, с последующей обработкой хроматограм в компьютерной программе «Видеоденситометр БогЬШ».
Метод пленарной хроматографии позволяет селективно идентифицировать 5 - ГМФ. В связи с этим, при разработке методики планарной хроматографии руководствовались нормой содержания 5 - ГМФ в пищевых продуктах, которая составляет не более 20 мг/л. В результате проведенных исследований были определены условия хроматографирования, оптимальный экстрагент для 5 - ГМФ, оптимальное число экстракций и степень экстракции примеси из водных растворов глюкозамина гидрохлорида (табл. 6).
Таблица 6 - Условия хроматографического определения 5 - ГМФ
Условия хроматографирования Результат
Экстрагент Этиловый эфир
Хроматографическая система Этилацетат
Проявитель Раствор 5% бензидина в этнлацетате
СОВС 0,02% раствор 5 - ГМФ в этнлацетате
Я1' 0,72 - 0,82
Селективность Число теоретических тарелок 1534
Степень экстракции 5 - ГМФ из водного 41,9%
раствора
Оптимальное число экстракций 5
При определении 5 - ГМФ из водного раствора на хроматограмму наносили пробу в объеме 2 мкл, а при хроматографировании извлечения из мази наносили пробу в объеме 20 мкл.
Для подтверждения валидности данной методики строили градуировочный график и определяли линейность методики в аналитической области концентраций от 0,01 до 0,05 мг/мл 5- ГМФ. Воспроизводимость методики составляла ± 5,7%. Коэффициент корреляции составлял 0,997. Правильность методики составила 97,9%.
Разработанную методику использовали для определения 5 — ГМФ в стоматологической мази. Степень экстракции 5 - ГМФ из мази составила 35,63%. Ошибка определения не превышала 10,3%. На основании проведенных исследований разработаны показатели и нормы качества мази, представленные в таблице 7.
Таблица 7 - Показатели и нормы качества мази стоматологической
ПОКАЗАТЕЛИ МЕТОДЫ НОРМЫ
Описание Визуальный однородная масса светло-коричневого цвета, со специфическим запахом. Легко намазывается на кожу и растекается при температуре тела.
Подлинность
Глюкозамина гидрохлорид Хроматография в тонком слое сорбента На хроматограмме при проявлении нингидрином должно наблюдаться пятно красно бурого цвета ЯГ 0,61-0,63
Реакция с реактивом Эрлиха Темно-розовое окрашивание раствора.
Органические кислоты Бумажная хроматография На хроматограмме после проявления бромфеноловым синим должны наблюдаться пятна желтого цвета на синем фоне с соответствующем свидетелей.
Аскорбиновая кислота Бумажная хроматография На хроматограмме после проявления 2,6 -дихлорфенолиндофенолятом натрия на голубом фоне должно проявляться бесцветное пятно с Яр=0,34-0,36
Феруловая кислота Бумажная хроматография В УФ свете должно проявляется пятно голубого цвета.
Флавоноиды (рутин, кверцетин, кемпферол) тех На хроматограмме после проявления 5% спиртовым раствором А1С1з проявляются пятна желтого цвета, соответствующие свидетелей
Определение рН С помощью рН-метра от 4,4 до 5,3 (5% раствора мази)
Посторонние примеси тех Не более 0,002%
Количественное определение глюкозамина гидрохлорид Спектрофотоме трия от 9,5% до 10,5%.
Микробиологи ческая чистота ГФ XII ст. ОФС 42-0067-07 Соответствует требованиям ГФ XII ст. ОФС 420067-07
В результате проведенных исследований выяснено, что хранение на протяжении 24 месяцев не влияет на внешний вид мази, рН и основные технологические показатели. В процессе исследования не было обнаружено в хранившихся образцах мази также и продуктов деструкции глюкозамина гидрохлорида.
Изучение противовоспалительного и антимикробного действия стоматологического лекарственного средства на основе глюкозамина гидрохлорида с соками крапивы двудомной и каланхоэ
Следующим этапом исследования было изучение противовоспалительной активности мази на животных на модели экссудативного отека на кафедре фармакологии. Результаты приведены на рисунке 2.
Результаты исследования, представленные на рисунке 2, свидетельствуют, что мазь достоверно снижает величину отека относительно контроля на 33% и достоверно не отличалась от действия мази метилурацила и мази календулы. Мазь с соками без глюкозамина не оказывала противоотечного действия, так как объем экссудата был выше, чем при применении мази метилурацила и мази календулы, а также мази с глюкозамина гидрохлоридом (на 44%).
Т>езупьтаты изучения противовоспалительного действия мази стоматологи чёской
I - Контроль, 2 - Метилурацила 10% мазь, 3 - Календулы мазь, 4 - Мазь стоматологическая, 5 - Мазь с соками крапивы и каланхоэ
Примечание: х - достоверно к контролю, р < 0,05; *- достоверно к мази метилурацила 10%, р < 0,05; Д - достоверно к мази календулы, р < 0,05; Т -достоверно к мази, содержащей глкжозамина гидрохлорид 10%, сок крапивы двудомной и сок каланхоэ.
Рисунок 2 - Результаты изучения противовоспалительного действия мази стоматологической
Синтез грануляционной ткани на фоне использования мази стоматологической достоверно увеличивался на 53% относительно контроля и на 74% в сравнении с мазью календулы, но не носил достоверных различий с действием мази метилурацила (на 6%). Мазь, содержащая только соки крапивы и каланхоэ, в отличие от мази по прописи достоверно снижала (на 22%) скорость пролиферации гранулёмы, но носила недостоверный характер в сравнении с контролем и мазью метилурацила.
Таким образом, стоматологическая мазь оказывала достоверное противоотечное действие, достоверно ускоряла процесс регенерации тканей и не уступала по действию мази метилурацила.
На кафедре микробиологии проводили исследования бактериостатической активности мази на тест - культурах, представленных в таблице 8.
Таблица 8 - Антибактериальное действие стоматологической мази
Состав лунок Диаметр зоны задержки поста тест - культур микроорганизмов, мм
1 2 3 4 5 6 7 8 9
1. мазь стоматологиче екая 17 б/с 15 б/с 17 б/с 15 б/с 12 б/с
2. основа мази - - - - - - - - -
3. 10%-ный раствор сока каланхоэ (контроль) 14 б/с 17 б/с 17 б/с 15 б/с
4. 10%-ный раствор сока крапивы 17 б/с 16 б/с 17 б/с 14 б/с
Примечание: «б/с» - подавление роста микроорганизма неполное и зона
задержки роста непрозрачная.
Тест - культуры: 1.Staphylococcus aureus (209), 2.Staphylococcus aureus (Макаров), 3.Staphylococcus aureus (Type), 4.Staphylococcus epidermidis Wood-46, 5.Escherichia coli 675, 6.Salmonella gallinarum, 7.Bacillus anthracoides - 96, 8. Bacillus subtilis L2,9. Pseudomonas aeruginosa
Результаты анализа, показали, что стоматологическая мазь имеет широкий спектр антибактериального действия и подавляет рост не только указанной грамположительной флоры, но и грамотрицательной (Pseudomonas aeruginosa). Бактериостатическая активность проявлялась только при использовании мази, в которой содержалось по 10% глюкозамина гидрохлорида и соков крапивы и каланхоэ.
Общие выводы
1. Теоретически обоснована и экспериментально подтверждена целесообразность создания стоматологической мази, в состав которой входят: глюкозамина гидрохлорид 10,0, сок крапивы двудомной 10,0, сок каланхоэ 10,0, натрия метабисульфит 0,2; натрия сульфит 0,1; ДМ СО 3,0; основы до 100,0.
2. Предложены нормы качества свежего сока, полученного из крапивы двудомной по показателям органические кислоты, хлорофилл, дубильные вещества, аскорбиновая кислота, флавоноиды, рН и плотность сока.
3. Разработаны методики БХ и ТСХ идентификации органических алифатических и фенолкарбоновых кислот, а также флавоноидов (кверцетин, рутин и кемпферол) в предлагаемой стоматологической мази.
4. Предложены методики идентификации (ТСХ и реакция Эльсона -Моргана) и количественного определения (метод Эльсона - Моргана) глюкозамина гидрохлорида в предложенном лекарственном препарате.
5. Разработана и рекомендована к применению методика планарной хроматографии определения продукта деструкции глюкозамина (5 -ГМФ).
6. Установлен срок хранения предлагаемого лекарственного препарата в естественных условиях (2 года). В качестве критериев качества мази взяты показатели: описание, подлинность, количественное содержание, посторонние примеси и определение рН.
7. В опытах на животных установлено выраженное пролиферативное, антиэкссудативное и репаративное действие стоматологически мази. В опытах in vitro показано, что стоматологическая мазь обладает бактериостатическим действием.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Разработка технологии и изучение противовоспалительного действия стоматологического геля на основе глюкозамина с соками крапивы и каланхоэ / С.А. Кулешова, Е.В. Компанцева, Д.В. Компанцев, Т.Ф.Маринина, Е.С. Ващенко // Курский научно - практ. вестник «Человек и его здоровье». - 2009. - № 1. - С. 136 - 142.
2. Ващенко, Е.С. Сравнительное изучение стабильности глюкозамина гидрохлорида и глюкозамина сульфата / Е.С. Ващенко // Разработка, исследование и маркетинг новой фармац. продукции: сб. науч. тр. -Пятигорск, 2008. - Вып. 63.- С. 221 -223.
3. Изучение степени и скорости высвобождения глюкозамина гидрохлорида (сульфата) из гелей на различных гидрофильных основах
/ И.Н. Андреева, Е.В. Компанцева, Л.И. Иванова, Е.С. Ващенко // Фармация из века в век: сб. науч. тр. - СПб: 2008,- С. 24-27.
4. Ващенко, Е.С. Разработка методик хроматографического контроля ингредиентов стоматологического геля / Е.С. Ващенко // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины (2009; Волгоград): материалы науч.- практ. конф. - Волгоград, 2009. - С. 283 -284.
5. Изучение реологических свойств геля стоматологического / Е.В. Компанцева, Т.Ф. Маринина, Е.С. Ващенко // Здоровье и образование в XXI веке. Инновационные технологии в биологии и медицине: тез. докл. междунар. конг. 9-12 дек. 2009 г.- М, 2009. - С. 721 - 723.
6. Определение 5 - оксиметилфурфурола методом планарной хроматографии / Д.В Компанцев, Т.Д. Мезенова, Е.С. Ващенко // Разработка, исследование и маркетинг новой фармац. продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск, 2010.- Вып. 65,- С. 278 - 280.
7. Ващенко, Е.С. Изучение стабильности 10% раствора глюкозамина сульфата / Е.С. Ващенко // Здоровье и образование в XXI веке; концепции болезней цивилизации: тез. докл. междунар. конгр. 14-17 ноябр. 2007 г. - М, 2007. - С. 172-173.
8. Ващенко, Е.С. Определение биологически активных веществ в соке крапивы / Е.С. Ващенко // Аналитика России (2009; Краснодар): материалы конф. - Краснодар, 2009. - С. 381.
9. Иванова, Л.И. Определение 5 - гидроксиметилфурфурола в геле стоматологическом с помощью ВЭЖХ / Л.И. Иванова, Е.В. Компанцева, Е.С. Ващенко // Аналитич. хроматография и капиллярный электрофорез (2010; Краснодар): материалы конф. - Краснодар, 2010. -С. 167.
ВАЩЕНКО ЕЛЕНА СЕРГЕЕВНА
ОБОСНОВАНИЕ СОСТАВА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА НА ОСНОВЕ ГЛЮКОЗАМИНА ГИДРОХЛОРИДА И СОКОВ КРАПИВЫ И
КАЛАНХОЭ
14.04.02 - фармацевтическая химия и фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ
ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК
Подписано к печати 10.01.2011 Формат бумаги 60x84 1/16 Бумага книжно - журнальная. Печать ротопринтная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № У
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (357532, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11).
Оглавление диссертации Ващенко, Елена Сергеевна :: 2011 :: Пятигорск
ВВЕДЕНИЕ
Список сокращений, используемых в тексте
ГЛАВА 1 Современная характеристика лекарственных средств, 12 применяемых для лечения заболеваний пародонта
1.1 Этиология и патогенез заболеваний пародонта
1.2 Применение и лекарственные препараты, содержащие соли 14 глюкозамина
1.3 Получение и характеристика глюкозамина гидрохлорида
1.3.1 Физико-химические свойства и способы анализа 17 глюкозамина гидрохлорида
1.3.2 Методы количественного определения глюкозамина 21 гидрохлорида
1.4 Сок каланхоэ и крапива двудомная (Urtica dioica L.)
1.4.1 Общая характеристика каланхоэ перистого , применение и 24 анализ сока каланхоэ
1.4.2 Крапива двудомная ( Urtica dioica L.) 27 Заключение по обзору литературы 31 Объекты и методы исследования
ГЛАВА 2 Исследования по разработке состава и технологической 35 схемы производства стоматологического лекарственного средства с глюкозамина гидрохлоридом и соками крапивы и каланхоэ
2.1 Получение и исследование сока крапивы
2.2 Исследование сока каланхоэ
2.3 Изучение стабильности глюкозамина гидрохлорида в 57 присутствии соков каланхоэ и крапивы
2.4 Выбор оптимального состава основы для приготовления 69 лекарственного средства
2.4.1 Изучение физических свойств гелей и мазей на различных 72 основах при хранении
2.4.2 Исследование реологических показателей разработанных 73 мягких лекарственных форм
2.4.3 Изучение степени и скорости высвобождения глюкозамина 74 гидрохлорида из гелей и мазей на различных гидрофильных основах
2.4.4. Выбор оптимального состава основы для мягкого 76 лекарственного средства методом диализа через полупроницаемую мембрану
2.5 Изучение структурно-механических свойств мази 79 стоматологической с глюкозамина гидрохлоридом и соками крапивы и каланхоэ
2.6 Технология производства мази, содержащей глюкозамина 83 гидрохлорид, соки крапивы и каланхоэ
Выводы по главе
ГЛАВА 3 Разработка методик анализа и показателей качества 88 мягкого лекарственного средства, содержащего глюкозамина гидрохлорид, сок крапивы и сок калонхоэ
3.1 Разработка методик идентификации ингредиентов мази
3.1.1 Идентификация глюкозамина гидрохлорида
3.1.2 Определение БАВ соков крапивы и каланхоэ в мази
3.1.3 Определение рН водного извлечения мази
3.2 Количественное определение действующих веществ в 101 стоматологическом препарате
3.2.1 Количественное определение глюкозамина гидрохлорида в 101 мази
3.2.1.1 Определение правильности результатов определения 105 глюкозамина гидрохлорида методом Эльсона - Моргана
3.2.1.2 Определение линейности результатов определения 106 глюкозамина гидрохлорида методом Эльсона - Моргана
3.3 Определение посторонних примесей глюкозамина 108 гидрохлорида
3.3.1 Определение 5 - ГМФ методом планарной хроматографии
Выводы по главе
ГЛАВА 4 Изучение противовоспалительного и антимикробного 125 действия стоматологического лекарственного средства на основе глюкозамина гидрохлорида с соками крапивы двудомной и каланхоэ
4.1 Изучение противовоспалительного действия мази на основе 125 глюкозамина гидрохлорида и соков крапивы и каланхоэ
4.2 Изучение антимикробного действия стоматологической мази 129 Выводы по главе 4 132 Общие выводы 133 Список литературы
Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия, фармакогнозия", Ващенко, Елена Сергеевна, автореферат
Актуальность темы. В- 2001* году Американской стоматологической ассоциацией были проведены исследования, показавшие, что воспалительные заболевания пародонта являются одной из наиболее распространенных и сложных патологий челюстной области, что приводит к потере даже здоровых зубов и является причиной их удаления в 80% случаев.
Согласно рекомендациям ВОЗ для лечения заболеваний пародонта применяют наряду с хирургическим вмешательством комбинированную терапию, которая предусматривает использование двух и более лекарственных средств (ЛС) с лечебным действием различной направленности. Лечение данной патологии осуществляется путем использования аппликационных лекарственных форм (примочек, мазей, гелей, пленок и паст). В схемы лечения заболеваний'пародонта очень часто включают применение настоев, отваров или соков из лекарственного растительного сырья.
На сегодняшний день в аптеках имеются зарубежные и отечественные ЛС, содержащие одно или несколько синтетических лекарственных веществ, а также растительные компоненты, но они малодоступны широкому кругу населения из-за их высокой стоимости.
Известно, что глюкозамин является неизменной составляющей глюкозаминогликанов и гиалуроновых кислот, принимающих активное участие в синтезе соединительно - тканных структур, в связи с чем глюкозамина гидрохлорид будет положительно влиять на процесс восстановления пораженных тканей пародонта. Сок каланхоэ широко применяется в стоматологии как репоративное средство при лечении заболеваний пародонта. Препараты крапивы двудомной (настои, отвары) оказывают кровоостанавливающее, сосудоукрепляющее действие и используются для лечения заболеваний полости рта. Сочетание глюкозамина с соками крапивы и каланхоэ в JIC позволит быстрее достигнуть терапевтического эффекта, направленного на снижение воспалительного процесса.
Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось обоснование состава и стандартизация комбинированного лекарственного средства, включающего глюкозамина гидрохлорид и объекты растительного происхождения - соки крапивы и каланхоэ, для использования в стоматологической практике.
Для реализации поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
- изучить возможность создания комбинированного лекарственного препарата, содержащего глюкозамина гидрохлорид и соки крапивы и каланхоэ;
- получить и обосновать нормы качества сока крапивы;
- обосновать выбор основы и разработать технологическую схему получения лекарственного препарата, содержащего глюкозамина гидрохлорид и соки крапивы и каланхоэ;
- изучить возможность использования химических и физико -химических методов анализа для идентификации и количественного определения глюкозамина гидрохлорида и БАВ соков крапивы и каланхоэ при совместном присутствии;
- изучить стабильность глюкозамина гидрохлорида в присутствии соков крапивы и каланхоэ в препарате;
- подготовить проект ФСП на предлагаемый лекарственный препарат;
- определить противовоспалительную и антимикробную активность предлагаемого препарата в опытах in vivo.
Научная новизна. В результате проведенных исследований был теоретически обоснован и предложен состав нового стоматологического лекарственного средства. Показана целесообразность следующего состава предлагаемого препарата: глюкозамина гидрохлорид, сок крапивы и сок каланхоэ.
На основании изучения влияния ВМС на высвобождение- глюкозамина гидрохлорида из мази обоснован выбор основы для создания лекарственного стоматологического препарата для наружного применения.
В качестве основы мази обосновано использование сплава из ПЭ0400 и ПЭ04000 с глицерином, в присутствии ДМСО, который обеспечивал наибольшее высвобождение глюкозамина гидрохлорида из мази.
В результате проведенных исследований был обоснован также- выбор стабилизирующих веществ, препятствующих образованию продуктов деструкции глюкозамина.
Предложены оптимальные условия проведения методик качественного и количественного анализа БАВ сока крапивы.
Для установления сроков годности предлагаемого ЛС выбраны условия методики ТСХ методом планарной хроматографии для определения продукта деструкции глюкозамина гидрохлорида 5 -гидроксиметилфурфурола (5 - ГМФ) с последующей компьютерной обработкой полученных хроматограмм с помощью программы «Видеоденситометр БогЬйИ». Впервые данной методикой изучена стабильность глюкозамина гидрохлорида в присутствии БАВ соков растений.
Проведено изучение противовоспалительной активности предложенного лекарственного средства с глюкозамина гидрохлоридом и соками крапивы и каланхоэ в опытах на животных на модели острого экссудативного воспаления. В результате проведенного исследования установлено, что новый комбинированный препарат приводит к значительному ускорению заживления раневой поверхности, обладает высокой противовоспалительной активностью. Показано, что в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий предлагаемый препарат проявляет антибактериальный эффект, установленный в опытах invivo.
Практическая значимость исследований
Для получения сока крапивы из свежего сырья составлена соответствующая НД. Для нормирования качества сока крапивы предложено определять органические кислоты, кислоту аскорбиновую; дубильные вещества, хлорофилл, флавоноиды, плотность и рН сока.
Для нормирования качества предложенного стоматологического лекарственного средства разработан проект ФСП, в который включены следующие показатели мази стоматологической: органические кислоты, флавоноиды, аскорбиновая кислота, плотность, рН, микробиологическая чистота и количественного определения глюкозамина гидрохлорида. Методики воспроизводимы и доступны для практического использования. Проведенная валидационная оценка методики Эльсона — Моргана показала, что при ее использовании для количественного определения глюкозамина гидрохлорида в JIC соблюдается линейность в области аналитических концентраций. Методика воспроизводима и правильна.
Определены сроки годности разработанного средства, составляющие два года хранения в естественных условиях.
Внедрение результатов исследований в практику.
В результате проведенной работы разработаны Технические условия (ТУ) и Технологическая инструкция (ТИ) на производство стоматологического лечебно - профилактического средства, получившего условное название «Глюкофитопарадонт», на который имеются акты апробации от ООО НПО «Фитодент» г. Ставрополь и ООО НПО «Полет» г. Ставрополь. Проведенные клинические испытания на базе факультета последипломного обучения на кафедре стоматологии в СГМА г. Ставрополь показали, что разработанное JIC обладает выраженным противопарадонтозным действием (отчет от 24 апреля 2010 г).
Положения, выдвигаемые на защиту:
- обоснование норм качества сока крапивы;
- выбор основы мази стоматологической, содержащей глюкозамина гидрохлорид, сок крапивы и сок каланхоэ;
- методики качественного и количественного определения глюкозамина гидрохлорида и БАВ соков крапивы и каланхоэ при- совместном присутствии; методика количественного определения примеси 5-гидрокси-метилфурфурола и родственных ему соединений в субстанции глюкозамина гидрохлорида и в мази стоматологической; результаты изучения стабильности и установление срока годности глюкозамина гидрохлорида в мази;
- результаты изучения противовоспалительной и антимикробной активности стоматологического препарата.
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательской работы ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава, а также в соответствии с соглашением о выполнении НИР между Федеральным агентством по здравоохранению и социальному развитию и ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (№06/1049). Апробация работы и публикации
Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на 62-й и 65-й региональных конференциях по фармации, фармакологии и подготовке кадров (Пятигорск 2007, 2010) и на научно - практических конференциях «Фармация из века в век» (Санкт - Петербургская ХФА, 20.04.2008г) и «Хроматография и капиллярный электрофорез» (г. Краснодар, 29.09.2010 г). По результатам диссертационной работы опубликовано 8 работ, из них одна в журнале, рекомендуемом ВАК. Подана заявка и получена приоритетная справка № 2008133255/15(041837) от 12.08.2008 г на патентование состава стоматологического средства, содержащего глюкозамина гидрохлорид, соки крапивы и каланхоэ.
Объем и структура диссертации
Диссертационная работа изложена на 149 страницах текста компьютерного набора и состоит из обзора литературы и 3 глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 139 источников, в том числе 19 иностранных; содержит 30 таблиц, 24 рисунка.
Список сокращений, используемых в тексте
ВЭЖХ — высокоэффективная жидкостная хроматография
БАВ - биологически активное вещество
ТСХ - тонкослойная хроматография
БХ - бумажная хроматография
ПЭО - полиэтиленоксид
ДМСО - диметилсульфоксид
ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения
ЛП - лекарственный препарат
ЛРС - лекарственное растительное сырье
ЛС - лекарственное средство
БУВ — п — бутиловый спирт : ледяная уксусная кислота : вода
Вода - вода очищенная
ФС - фармакопейная статья
ФСП - фармакопейная статья предприятия
ГФ - государственная фармакопея
НД - нормативная документация
5 - ГМФ - 5 - гидроксиметилфурфурол
Заключение диссертационного исследования на тему "Обоснование состава и стандартизация стоматологического лекарственного средства на основе глюкозамина гидрохлорида и соков крапивы и каланхоэ"
Общие выводы
1. Теоретически обоснована и ' экспериментально подтверждена целесообразность, создания стоматологической мази, в состав которой' входят: глюкозамина гидрохлорид Л ОД сок крапивы двудомной 10,0, сок каланхоэ 10,0, натрия метабисульфит 0,2; натрия сульфит 0,1; ДМСО 3,0; основы до 100,0.
2. Предложены нормы качества свежего сока, полученного из крапивы двудомной по показателям органические кислоты, хлорофилл, дубильные вещества; аскорбиновая кислота, флавоноиды, рН и плотность сока.
3. Разработаны методики БХ и ТСХ идентификации органических алифатических и фенолкарбоновых кислот, а также флавоноидов (кверцетин, рутин и кемпферол) в предлагаемой стоматологической мази.
4. Предложены* методики идентификации (ТСХ и реакция Эльсона -Моргана) и количественного определения (метод Эльсона — Моргана) глюкозамина гидрохлорида в предложенном лекарственном препарате.
5. Разработана и рекомендована к применению методика планарной хроматографии определения продукта деструкции глюкозамина (5 -ГМФ).
6. Установлен срок хранения предлагаемого лекарственного препарата в естественных условиях (2 года). В качестве критериев качества мази взяты показатели: описание, подлинность, количественное содержание, посторонние примеси и определение рН.
7. В опытах на животных установлено выраженное пролиферативное, антиэкссудативное и репаративное действие стоматологической мази. В опытах in vitro показано, что стоматологическая мазь обладает бактериостатическим действием.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Ващенко, Елена Сергеевна
1. Алюшина, М.Т. Полимеры; в фармации / А.И. Тенцова, М.Т. Алюшина.-М: Медицина, 1985.- 256с., ил.
2. Анализ лекарственных прописей, содержащих глюкозамина гидрохлорид и полисахариды / Самокиш И.И. и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.-Пятигорск, 2005.-Вып. 60. С. 102- 103
3. Астраханова, М. М. Новые лекарственные средства в виде мазей и гелей, разработанные в НИИ фармации / М.М. Астраханова // Соросовский обр. журн. 2001№1С.49-56.
4. Байколза, Н.Я. Целлюлоза и её производные / Н.Я. Байколза.-М: Мир, 1994.-2Юс.
5. Бандюкова, В.А. Флавонойды растений (Распространение, физико -химические свойства, методы исследования) / В.А. Бандюкова, Л.К. Е^лышев, Л.С. Алюкина. Алма - ата: Наука, Казахский ССР, 1978. — 220 с.
6. Барковский, B.C. Биомикроскипический метод оценки морфо-функционального состояния микроциркуляторного русла пародонта / B.C. Барковский // Функциональная диагностика в стоматологии: сб. науч. тр. М., 2004. - С.30-32.
7. Биосинтез глюкозаминов в гомогенатах слизистой оболочки желудка и образование их в нём из аммиака /Э.Э. Мартинсон и др. // Биол.химия. 1968. - Т. 27, №3'.- С. 437 -441.
8. Борисенко, Л.В. Болезни пародонта (клиника, лечение, профилактика) / Л.В. Борисенко // Стоматология.- 2001.-№7.-С. 23-31.
9. Бреус, В.Е. Тенденции современной стоматологии / В.Е. Бреус // Акт. вопр. стоматологии. -2001. -№5.- С. 13 14.
10. Валидация аналитических методов- / А.П. Арзамасцев и др. // Фармация. 2006. - Т. 55, №4. - С. 8-12.
11. Видаль. Справочник. Лекарственные препараты в России: справочник. М.: ОУРЕЕ - Астрафарм' Сервис, 2003. - Г408 с.
12. Влияние глюкозамина на антиэкссудативный эффект нестероидных противовоспалительных средств. / И: А. Зупанец и др. // Фармакология и-токсикология. 1991. - Т.541, № 2 . — С. 61 - 63.13. • Волкова,.Л.И. Биологическая активность оксиметилфурфурола / Л.И*.
13. Волкова // Хим.-фармац. журн. 1991. - Т4, №5. - С.Г4 - 17.
14. Гаевый, М:Д: Фармакотерапия воспаления и иммунных процессов / М.Д. Гаевый // Клиническая фармакотерапия. — М:, 2000. С. 501 -519.
15. Гальбрах, Л;С. Хитин и хитозан: строение, свойства, применение / Л.С. Гальбах // Соросовский обр. журн.-2001.-Т.7, № 1.- С. 51 56.
16. Гладышев, В.В. Теоретическое и экспериментальное обоснование создания мягких лекарственных форм антимикробного действия: автореф. дисс . доктора фармац. наук: 15.00.01 / Гладышев Виталий Валерьевич. Пятигорск, 1997. - 42 с.
17. ГОСТ 25276 82. Полимеры. Метод определения вязкости ротационным вискозиметром при определении скорости сдвига: введ. 01.01.84 б/о. -М.: Изд-во стандартов, 1993.- 34 с.
18. ГОСТ 29032 91 Библиографическая запись. Продукты переработки плодов и овощей. Методы определения оксиметилфурфурола. - Введ. 1992. - 07.01. - М.: Изд - во стандартов, 1992 . - 15 с.
19. ГОСТ 7482-96 Глицерин. Правила приемки и методы испытаний. -Введ. 1996. 19.08. - М.: Изд-во стандартов, 1996. - 37 с.
20. ГОСТ 7482-96 Глицерин. Правила приемки и методы испытаний. — Введ. 1996. 19.08. - М.: Изд-во стандартов, 1996. - 37 с.
21. Государственная Фармакопея. 12 изд. - Вып.1. Общие методы анализа. МЗ СССР.- М.: Медицина, 1987. - 336 с.
22. Государственный реестр лекарственных средств. М.: Материк, 2004. - 549'с.
23. Грудянов, А.И. Лекарственные средства, применяемые при заболеваниях пародонта / А.И. Грудянов // Пародонтология. 2002.-№2.- С. 6-17.
24. Гуревич, К.Г. Топическое применение нестеройдных противовоспалительных средств / К.Г. Гуревич // Фарматека. — 2006.-№ 2. С. 86- 88.
25. Дерфель, К. Статистика в аналитической химии: пер. с нем. / К. Дерфель. 2-е рус. изд. - М.: Медицина, 1994. - 278 с.
26. Дерхо, А.Э. Обоснование состава и стандартизация гранул с глюкозамина сульфатом- (гидрохлоридом) и растительными экстрактами : дис. . канд. фармац. наук: 15.00.02 / Дерхо Александр Эдвинович. Пятигорск, 2007. - 159.
27. Иванов, B.C. Заболевания пародонта / B.C. Иванов. М.: Медицина, 2001.-294 с.
28. Изучение комплексообразования глюкозамина гидрохлорида с ионами никеля ( II ). / В.А. Компанцев и др.// Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.-Пятигорск, 2008. Вып. 63. - С. 235 - 236.
29. Изучение модельных смесей глюкозамина гидрохлорида, индометацина и пектина / В.А. Компанцев и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. Пятигорск, 2006. - Вып. 61. - С 213- 214.
30. Изучение реологических параметров гелей на основе полимеров природного происхождения и их полусинтетических модификаций/ А.
31. И. Ершов и др. // Здоровье и образование в XXI веке (5; 2004; Москва): материалы науч. практ. конф. - М., 2004. - С. 126 - 127.
32. Изучение реологических свойств гелевых основ производных целлюлозы / J1.M. Ганичева и- др. //Актуальные: проблемы фармацевтической науки и образования: итоги и перспективы (55; 2000; Пермь): материалы нуч. практ. конф. - Пермь, 2000. - С.150 -153.
33. Инициальная роль функциональных изменений? сосудов пародонта в« патогенезе пародонтоза / H.A. Жижина и: др. // Стоматология.-2001.-Т.60,№4.-С.81-86/
34. Использование полиэтиленгликолей в медицине / O.E. Филиппова и др.-// Высокомолек. соединения, сер; С.- 2000.- Т.42, №12.- С. 2328 -2352.
35. Исследование продуктов разложения глюкозы в инъекционных лекарственных формах / И.В. Исаева и др. // Всерос. съезд фармацевтов (4; 1981; Воронеж): материалы. Воронеж, 1981. -С.320 - 321.
36. Исследование продуктов термодеструкции глюкозы в модельных растворах / О.И. Терешина и др. // Фармация. — 1991. Т. 40, № 3. -С. 24 - 27.
37. К фармакологической характеристике Д-глюкозамина гидрохлорида, как противоартрозного препарата. / Ю.К. Василенко и др.: // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.- Пятигорск ,2006. — Вып. 58. С. 275 —276.
38. Каланхоэ- перистое (Бриофиллюм чашечковый) Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. (Аналитический обзор) / Р. В. Куцик и др. // Ивано-Франковская гос. мед. академия: -2004.-№6. С. 11-13.
39. Ковалева, Н. Г. Лечение растениями / Н.Г. Ковалева^ М; : Наука, 1972: -164 с:
40. Количественное определение1 ингредиентов* в многокомпонентных таблетках противоартрозного действия для ветеринарии / Д.В. Компанцев и др. // Аграр: наука. 2007. - №10: - С. 29-31.
41. Количественное определение суммарного содержания флавонойдов в листьях Urtica Dioica (Urticaceae) спектрофотометрическим методом / М. Г. Ожигова и др. // Раст. ресурсы 2006. - № 2. - С. 126 - 130.
42. Количественное определение фурфурола / Э.М. Трофименко и-др. // Актуальные вопросы фармации: сб. науч. тр. Ставрополь, 1974'. — С. 176- 177.
43. Компанцев, В.А. Аминогликаны. Методы получения, исследование и медицинское применение (Монография) / В.А. Компанцев, И.И. Самокиш // Химико-фармацевтическое производство: Обзор, информ. -М.: НИИСЭНТИ, 1994. Вып. 6.-28 с.
44. Компанцев, Д.В. Разработка технологии и стандартизация таблеток и мази глюкозамина гидрохлорида: автореф. дис.канд. фармац. наук: 15.00.02 / Компанцев Дмитрий Владиславович: — СПб.,2003. — 23с.
45. Компанцева, Е.В. Глюкозамин; использование в медицине и ветеринарии, методы анализа (монография) / Е.В; Компанцева, Д.В .Компанцев. Пятигорск: Пятигорская ГФА, 2007. — 33 с.
46. Комплексная переработка панциря ракообразных для получения медицинских препаратов / В.А. Компанцев и др.' // Химики Северного Кавказа народному хозяйству. (2; 1989; Грозный): тез. докл. регион, конф. -Грозный, 1989. - С. 272.
47. Кьосьев, П.А. Полный справочник лекарственных растений / П.А. Кьосьев. М.- ЭКСМО -Пресс, 2001.- 992с:
48. Лагерь, А. А. Лечение растениями. Фитотерапия / A.A. Лагерь. Киев:: Алис, 1992.- 272 с.
49. Лежнева, Л.П: Фармакотехнологические исследования по расширению области использования крапивы двудомной : дис. . канд. фармац. наук : 15.00.01 / Лежнева Лариса Петровна. Пятигорск, 1995. - 147 с.
50. Лесновская, Е.Е. Фармакотерапия с основами фитотерапии: учеб. пособие / Е.Е. Лесновская, Л.В. Пастуменов. 2 - е'изд., перераб. и доп. - М. :ГЭОТАР - Мед., 2003. - 592 с.
51. Лурье, Ю. Ю. Справочник по аналитической химии / Ю. Ю. Лурье. -М: Химия, 1979. 480 с.
52. Марков, С.Ф. Метод заполучевене на гликозаминхидрохлорид / С.Ф.I
53. Марков // Фармация (Бълг.). 1964: - Т. 14, №2. - С. 30 - 32.
54. Марченко, А.И. Фармакотерапия в стоматологии / А.И. Марченко. -Киев: Здоровья, 2006. 251с.
55. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. / М.Д. Машковский,- 14-е изд., перераб. и доп. М.: Новая волна, 2006. - 2т.
56. Меркулова, Е. В: Технология и стандартизация стоматологических пленок с бишофитом и геля с натрия фторидом : дис. . канд. фармац. наук: 15.00.01 / Меркулова Екатерина Викторовна. Пятигорск, 2006.- 163 с.
57. Мешковский, А.П. Испытания стабильности и установление сроков годности лекарственных препаратов / А.П. Мешковский // Аптека: -2000. -№15. -С. 15.
58. Новые аспекты использования пектина и хитозана / С.А. Лисин и др. // Фитофарм 2003.- № 4. - С. 69-71.
59. О новых лекарственных средствах растительного происхождения /
60. B.Л. Багирова и др. // Фитофарм. 1999. - № 8. - С. 23 - 28.
61. Обнаружение продуктов' деструкции D-глюкозамина гидрохлорида / E.H. Вергейчик и*др;. // Регион, конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров (54; 1999; Пятигорск): материалы. Пятигорск,1999.-С. 73.
62. Определение азота в органических соединениях: фармакоп. ст. // Государственная фармакопея СССР: в 2 вып. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. 11-е изд.-М.,1987.1. C.176.
63. Определение посторонних примесей в суппозиториях, содержащих глюкозамина гидрохлорид и диклофенак /А. П. Кузнецов и др. // Вопросы биолог, мед. и фармац. химии. 2006. - №4. — С. 17 - 20.
64. ОСТ 91500.05.001-00. Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения.- Введ.2000.-01.03.-М.: Изд-во стандартов,2000.-36с.
65. Панкрушева,-Т.А. Разработка лекарственных препаратов для лечения воспалительных заболеваний пародонта / Т.А. Панкрушева // Вестн. ВГУ.- 2003.- №2.- С.214-219.
66. Панкрушева, Т.А. Экспериментально-теоретическое обоснование создания, мягких лекарственных форм на» полимерных основах-производных целлюлозы: автореф. дис. . доктора фармац. наук: 15.00.017 Татьяна Александровна Панкрушева. М., 1995.-43с.
67. Пат. 2275199 Российская Федерация, МПК А61 L 15/00 К47/34. Средство для лечения болезней суставов / С.Е. Васюков и др. (РФ). -№2005110016/15; заявл. 2005.04.06; опубл. 2006.04.27,Бюл. №5.-2с.
68. Пат. 2042685 Российская Федерация, МК С 07 Н5/06, КЗ 1/70. Способ получения гидрохлорида Д(+) глюкозамина / В.Ю. Новиков, A.JI. Иванов (РФ). - №92003453/04; заявл. 02.11.92; опубл. 27.08.95,41. Бюл.№10.-5с.
69. Пат. 2246959 Российская Федерация, МПК А61 L15/00 КЗ5/78. Мазь противовоспалительного и ранозаживляющего действия (варианты) / В.Н. Коновалов, Ю.В.Коновалова (РФ). №2002108231/15; заявл. 27.01.2004 ; опубл. 27.02.2005,Бюл. № 7.-2с.
70. Поиск новых противоревматических и противовоспалительных средств / Компанцев В.А. и др. // Человек и лекарство: тез. докл. 1 Рос. нац. конгр. 12-16 апр. 1992 г. М., 1992. - С. 346.
71. Получение гидрогелей на основе хлопковой целлюлозы. / Ш. М. Миркамилов и др. // Химия природ, соединений.- 2000. №1. - С. 71 -73.
72. Практикум по химии углеводов (моносахариды) / под. ред. Ю.А. Жданова М.: Высш. шк., 1973. - С. 170-171.
73. Применение хитина и его производных в фармации (обзор) / A.M. Дубинская и др. // Хим. фармац. журн. - 1989. - Т. 23, № 5. - С. 623-628.
74. Пути деструкции глюкозы (Обзор) / A.B. Титова и др. // Фармация. -1988. Т. 37, №4. - С.84 - 88.
75. Разработка лечебно-профилактических препаратов на основе пектинов. и хитина / В.А. Компанцев и др., // Синтетические и биологические полимеры в фармации: сб. науч. тр. -М, 1990: С. 8-23.
76. Разработка методик определения посторонних примесей в субстанции глюкозамина гидрохлорида / М.В. Гаврилин и др. // Регион, конф. пофармации, фармакологии и подготовке кадров (58; 2003; Пятигорск): материалы. Пятигорск, 2003. - С. 193.
77. Разработка нормативной документации на новый лекарственный препарат глюкозамина гидрохлорид / В.А. Компанцев и др. // Человек и лекарство: тез. докл. 7 Рос. нац: конгр 10-14 апр. 2001 г. - М, 2000.-С. 611.
78. Разработка состава и технологии стоматологических лекарственных пленок с фитопрепаратами / Т.Ф. Маринина и др.// Современные проблемы фармацевтической науки и практики: сб. ст. М., 1999. - Ч. 1.-С. 181-184.
79. Разработка технологии суппозиториев глюкозамина гидрохлорида с индометацином / А.А.Алябьев и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической- продукции: сб. науч. тр.-Пятигорск, 2003. Вып. 58. - С. 96 - 98.
80. Растительные лекарственные средства / Н.П. Максютина и др..— Киев: Здоровье, 1985. 280с.
81. Реологические свойства гелей противовоспалительного действия на полимерных основах / Н.М. Насыбулина и др. // Фитохимическое и фармакологическое изучение лекарственных растений: сб. науч. тр-М, 1998. Т. 37, ч. I - С. 253 - 259.
82. Руководство ICH «Валидация аналитических методик. Содержание и методология» Q2(R1). Международная конференция по гармонизации технических требований к регистрации медицинских лекарственных средств // Фармация. 2008. - №4. - С. 3-10.
83. Сдобнев, Е.В. Комплексное лечение больных с воспалительными заболеваниями пародонта / Е.В. Сдобнев // Воен. мед. журн.-2001.-№8.-С. 78-81.
84. Серов, B.B. Соединительная ткань (функциональная морфология иобщая патология / В.В. Серов, A.B. Шехтер. М: Медицина, 1981. 320 с.
85. Современные аспекты этиологии, патогенеза и лечения х воспалительных заболеваний пародонта / С.Т. Сохов и др.. М.:1. АНМИ, 2003.-145 с.
86. Сравнительное фитохимическое изучение листьев крапивы двудомной
87. Urtica dioica L.) и крапивы коноплевой ( Urtica cannabina L.) /
88. В.С.Пецуха и др. // Разработка, исследование и маркетинг новойфармацевтической продукции: сб. науч. тр.- Пятигорск, 2008. Вып. 63.- С. 81-82.
89. Стандартизация сахарного колера по содержанию 5-гидрокси-метилфурфурола / И.Г. Зенкевич и др. // Хим.-фармац. журн. 2002. -№1.-С. 50-53.
90. Стрельцов, Д.А. Исследование и стандартизация новых мягких лекарственных форм на основе бишофита: автореф. дис. . канд.i фармац. наук: 15.00.02/ Дмитрий Александрович Стрельцов.1. Пятигорск, 2004.- 24с.
91. Тенцова, А.И. Современные аспекты исследований и производства мазей /А.И. Тенцова. М.: Медицина, 1980.-192с.
92. Турищев, С.Н. Рациональная фитотерапия / С.Н. Турищев. М: Информпечать, 2000. - 240с.
93. Унификация контроля качества глюкозамина гидрохлорида и его лекарственных форм / И. И. Самокиш и др. // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.- Пятигорск, 2003. Вып. 58. - С. 116 - 117
94. Фенчин, K.M. Заживление ран / K.M. Фенчин Киев: Здоровья,2001.-109с.
95. Фисенко, В.П. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / В.П. Фисенко.-М: Медицина, 2000. 378 с.
96. Фитотерапия в стоматологии / Н.Ф.Данилевский и др.. М.: Медицина, 1984. - 176 с.
97. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р.У. Хабриев. 2-е изд., перераб. и доп. - М: Медицина, 2005. -832 с.
98. Хейс, И. Хроматография на бумаге: пер. с англ. / И. Хейс. М.: Иностр. Лит., 1962. - 851 с.
99. Хорлина, Л.Я. Методики исследования углеводов / Л.Я. Хорлина. — М: Мир, 1975.-С. 16.
100. Шамилов, A.A. Фармакогностическое изучение волжанки обыкновенной (Arunkus Vulgaris Rafín .) произрастающей на северном кавказе : дис. . канд. фармац. наук : 15.00.02 / Шамилов Арнольд Алексеевич. Пятигорск, 2007. - 153 с.
101. Шкавый, В.И. Справочник по фармакотерапии- основных стоматологических заболеваний / В.Н. Шкавый Минск: Картя Молдовеняскэ, 2000.-125с.
102. Экспериментальное изучение^влияния глюкозамина гидрохлорида на метаболические' ирепаративные процессы в- соединительнотканных структурах / И. А. Зупанец и др. // Эксперим. и клинич. фармакология. — 2002. — № 6. С. 67 - 69.
103. Яковлев, Т.П.' Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия (уч. Пособие) / Г. П. Яковлев, К.Ф. Блинова. Спб: СпецЛит, 2004. - 765 с.
104. Ohura, К. Experimental periodontitis in» rats / К. Ohura, M. Shinohara // Nippon. Yakurigaku Zasshi.- 2002.- №5 P.319-329.
105. Addy, M. An approach to efficacy screening of mouthrinses: studies on a group of French products (I). Staining and antimicrobial properties in vitro/M. Addy // J. Clin. Periodontal. — 2005. — Vol. 22, № 9. — P. 718—722.
106. Backer-Dirks, O. Posteruptive changes in dental enamel / O. Backer // J. Dent Res. -2002.-Vol.45.-P. 503-511.
107. Bassleer, C. Effect of glucosamine on efferentiated human chondrocites cultivated in clusters / C. Basseleer // Rev Esp Rheumatol 1993.- №20. -P.96 - 97.
108. Bixler, D. Experimental clinical human caries test design and interpretation / D. Bixler, J.C. Muhler // J. Am Dent Assoc.-2001 Vol.65. - P. 482-490.
109. Effect of pre-loading oral glucosamine HC1 (chondroitin sulfate) manganese ascorbate combination on- experimental arthritis in rats / J. Beren et al.. // Exp. Bid. Med. (Maywood). 2001. - Vol. 226; №-2. - P. 144-151.
110. Ekblad, F. Determination of chitin in fungi and mucorizal roots by« an improuved HPLC analysis of glucosamine / F. Ekblad, N. Nasholm // Plant and Soil. 1996. - Vol. 178; № 1. - P. 29 - 35.
111. Glucosamine obtained from crustacean shells and1 its biological and therapeutical importance / S. Oeriu et al.. // Ann. Pharm. Franc. 1962. -Vol. 20, №3.-P. 66-72.
112. In vivo chondroprotection and metabolic synergy of glucosamine and chondroitin sulfate / L. Lippiello et al. II Clin. Orthop. 2000. - №381. -P. 229-240.
113. Kalasz, H. Role ofpreparative rotation planar chromatography in the isolation of ecdysteroids /H. Kalasz //J. Liq. Chrom. — 2006. Vol.29 - P. 2095-2109
114. Molecular mechanisms implicated in the inhibition of collagenase expression by diacerhein / TF. Cruz, et al.. // Rev Prat Ed Fr 1996. -№46.-P.515-524.
115. Navratil, J.D. Lygand-exchenge chromatography of aminoshugars / J.D. Navratil, E. Murgia, H.F. Walton // Anal. Chem. 1975. - Vol. 47. - P. 122-125.
116. Pharmacokinetics of glucosamine in man / I. Setnikar. et al.. // Arzneim. Forsch. Drug Res. 1993. - Vol. 43, № 10. - P. 43 - 45.134.135.136.137.138.139.
117. Purchase, E.R. D-Glucosamine hydrochloride / E.R. Purchase, C.E. Braun // Org. Synth. 1946. - Vol. 26, №7. - P. 36-37.,
118. Saxen, L. The scientific basis of periodontal treatement / L.Saxen // Int. Dent S. 1995.-Vol.35, №4.-P.291-296.