Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Нейтральные липиды и (Na+,K+)-АТФазная активность мембраны эритроцитов при талассемии

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ ГРУЗИЯ'

тбилисский государственный мздацикский лнстйтут

* На правах рукописи

' 20ЛАБЕРИДЗБ МАНАНА АВКСЕНТЬИЕЬНА

НЕЙТРАЛЬНЫЕ ЖТЛШ И (л'а+ ,Н+)-АТ5азязя АКТИВНОСТЬ МЕМБРАНЫ ЭРИТРОЦИТОВ ПР'А ЗШССВШ

14.00.16 - патологическая физиология АВТОРЕФЕРАТ

ТШЛЕСИ - 1992

.. Работа выполнена в Нэучн£>-иселздов81альсном института гематологии и перзлйвания ирови имени академика Г.М.Мухадза Министерства здравоохранения и соцобвспачания Республики Грузия

Научный руководитель доктор медицинских наук И.Г.ШЗСТИАШШШ

Официальные оппонент:'

1. Доктор медицинских наук, профессор Н.З.МАЙСУРАДЗЕ

2, Доктор биологических наук, профессор Т.П.ПИЧХАЯ

Ведущее научнее учрвадвниз.-- Институт усовершенствования зрачэй (г-ТЕШмСИ).

й^дее диссертации состоится " 1992 годе в

"-/Н " час, на заседании специализированного совета д 078.01.< !в Тбилисском государственном медицинском институте (г.Тбилиси проспект Вала Пыавела, 33).

С диссертацией мокно ознаноашхея в библиотеке института. Автореферат разослан " " {¿('£¿/9^ 1992 года.

■Ученый айЩйфь-^^к, о .■> /

савцпалйзип)5крв^«то> соьввйу- X \

к "ч- *

;октор О.'Л.МРДЗЕИШШ!

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ_ .

Актуальность, проблею. Среди генетических заболеваний крови по распространенности к значимости тэлассзмкп закипает одно из первых мест, она отличается -широким клякичаскяч г.оликорфизнок и генетической гетерогенностью (Ю.К.Токарев, 1.983,1584; И.Г. Меотившвили, 1980,1985,1986). Извзстны нан выявленные, тзя и сяэртьч и ламкяные форма патологии; дяегкоозикв этдас последних представляет значительную трудность (ЛЛ1;Иделъсон, 1972; Р.Г. Яестваишили, 1381,1986; 1980).

Мйеду тем, своевременное их выявление весьма веяно для правильного диагностирования манифестных форм заболеваний, прогнозирования и мэдико-ренвтичвскэго консультирования.

Освбув актуальность проблема приобретает в условиях ?зв~ публики Грузия, для коаорой талоссемкя представляет краевую патологию и, 'следовательно, является одной кз взЕкейишх задач прэнтичасг<ого здравоохранения.

Сбщаизвбстко, что пагоганэтичесной основой тал&ссемяи является нерувониз баланса о< и кв с< ( в , % у ) ценой,я что дели, накопизмося в избыточной количестве, агрегируют к откладываются в' эритроците/., тяжело поврехдзр. их мзмбраму. Этому вопросу посвящены работа РсШьск (, 1Э?3, ), ¿йси/'е&^З&Ц £&еге* и&8£"Л- Лаой^&мяЧг ОЭ8"М, (15*3) и другие..

Механизмы этих повреждений почти, ко игучбьы.

¡То мнению большинства авюрсв преципитаты свободных ц&пйй при содействии характерного для тялоссзйии новькпгкия внутриклеточного железа способны образовывать свободные кислородные р-з-дикалы; эти последниехарактеризуются кис эк ой способностью окислять липады, а тэкжо ¿Н группы структурных и $уиаи«аналь-

них белкоз мембраны, в частности С>/а'<"1К+)-АТФаз1», тем самым, они повреждаю? мембрану и вызывают изменения ев морфологических и функциональных свойств ЗолоУ 09&) , Лил (>933) , ЙасЦтс-

Ьиа&г (\ъьъ), Пиитом* ат), $гм>г с 1эгг. 128<з ),

^¿сь'/Ы-и (13УО) И др.

Зиосгб о гбм, леблюдае-лые нами (Меотиаивили, 1981,1986) и другими коследоватэлящ ¿тИк С¡9 ТЗЗ, ^па-К^лоШ С1983). ооСзкд (>№6) характерные для таяассейия морфологические изменения эритроцитов, в частости, евальныа, узкозлипсоидкыв фврш о зазубренными краник, палочкообразные, иишоаввилныв.; илаковид-ныа й с.чэзовилкые аригроциш укозиззкт на несомненную роль мор-фо-функционального состояния момйрэш»- эритроцитов в патогенезе талаосаики.

Следовательно, нам прздсловлккось весьма вэкным и актуальный йзучиниэ при салассвмйи морфологических характеристик эритроцитов и компонентов мембраны, в частности, лияидов. Принимая во внимание ют фэы, что фссфэднлады эритроцктарной мембраны при данной патологии научены рядом авторов, ыиэнио которых сходны {№>), ЫиьЦаШтёЬ^ , ЗосИоай1^ Идр,, мы сочли цоке сообразным парзазстя анцэкт на изучение нейтральных лшшдов; по мнению некоторых исследователей, повышенное ^содержание холестерина, одного из важных составных частей нейтральных дилидов," должно играть важную роль в формировании мишепэвидных зрктроцито.з (й.й.йдзмьсоц, 1575), с .'опь ¡штогкомичцыми для та-дзссемщ.

М'.'шю было предположить, что изшиаиив содержания других йвйтрэлт-х лшшдов (повино холестерина) также аозшкно и, что

изменэния структурные компонентов мембраны повлечет за собой измокониИ а и* инн ос гс и функциональных белков, в частности

(>/з+,К+)-АТФозы..

Целью настоящая работа было выявление'новых дифференциально-диагностических критерий» и ¿-¿р-таласоемии на-основании изучения (>/' а+,К+)-АТ<5азнпй активности и нейтральных .лкпвдоз мембраны эритроцитов при различных генотах ъ сопоставлении о фанотипичосяими проявлениями донной патологии и данными семай-н0-гинв1ич80яих исследований.

Задачи исследования: I. Провести комплекснойисследование количественных эритроцитарных показателей (КЗП), морфэлогичда-них характеристик эритроцитов, (|/э+,1(+)-АТФааной активности .и нейтралььих липидоз яеыбраиы эритроцитов у здоровых дотай к взрослых.

2. Изучить при различных галощилах ^-тялассаиик (//з+,К+) -АТФззкую активность и ьайхрэлъные липедн мембраны эритроцитоо

в сопоставлении с фенмипичвскиии проявлениями, (морфологичосние характеристики зритроцитоз, НЭП, сгапэиь аномии, фракционный состав гемоглобина, нллничэсная симптоматика).

3. Охарактеризовать гоногиск о<-тэлзсс(шик на основании комплексного изучения всех.вышеуказанных параметров.

4. Установить дополнительные критерии дилере кциэлы-шй диагностики для манифестных форм таязссзиии и четкие диагностические критерии для стертых и латентных формой /#-талгссемик.

Научная новизна. Зпервка устаповлзно, что пониженно а.чгиз-ности (Л^з+,К+)-АТФазы и повышение содержания фракции триглицо-ридов"(иэ числа ноИтралънах липидоз) мяус'рэны зр^троиитов, н также макропданэцитэз оригроцитоз различной степени характерны для разных гомотилэп с.«:' и ^ -тэлассаы::и. доказано, '¡тс стапзнь указанных нару^вшй коррелирует оо с^эпеньи.^онсткппчйсккх :.рс— явлений ЛоЛ^сое^:!!'. На основании якяьщит ¡»олнх г.зтох'Юмэтос-

ккх признаков <=>< и fG -талассзиии ус.гшшвлэны дополнительнее дкаскссткчаскиа критерии для манифзстчых форм о<и ^-тэлассо-1Шй ¡1 решающие диагностические критерии дгя стэртых и латентных форм потологик (.получено авторское свидетельство й 1649359).

Практическая ценность^ Првдложенниз новые дифференциально--длагностическиа критерия будут использованы в клинической практика для своевременного 'выявления носителей аномальных генов в тех регионах, где при значительной частоте патологии нет возможности провбдения анализа ¿Щ или биосинтеза цзпей глобина, что даэг возможность рационального'иедико-тенездческого консультирования. Устаяовленкые у здоровах-дзтзй и у взрослых КЭП иогут слукчть в'кзчзстзе регионарной норда при дальнейших научно-, -практичяст«; исследованиях мздицмнской службы Грузил.

Вкедреста в практику, Исследования {■ /а+,К+)-АТФазной активности и качественного и количественного состава нейтролышх липиды* мзмбрэны эритроцитов внедрены б практику реботь; НИИ гематологии и переливания крози Республики Грузия с I9S7 года".

Ссноуныо полокоипя, выкосимиз на г.ав.иту:

.1. ChiissiHio (^/а+.К+)-АТФаздой1 активности к повыаекиз содер-кэния фракции триглицерндов, а тзнм снижение КЭП коррелирует со степенью стенотипических' лроязлений талэссемии.

2. Как для гетзрозигстной ^ -талессемии со стертой клини-ко-гематояогяческой картиной, так и для сХ-млзссемш^ харак-тзрны снижение (jfa+,X+)-AI0s3:-icn активности и лоакаэние содер-мзьвд фракции тригмцвркдов, но в меньший стьпеш:, чем при манифестных формам телассемии.

. 3. Сш-.кснио (/^а^К^-АТОззной. йкмшссти и т.овыкалив со- • держания фракции тригллцеридов являатсл основным диагностичес-н-рчгирйзм для с тертых и латентных ¿ори и р -таласоемии,

и дополнительным » для манифестных Дорн заболевания.

Апробация диссертации и публикации. Материалы диссертации доложены нэ Втором республиканском съездо гематологов тл трзнсфу-зиологов Грузии (Тб., 1986), на заседании республиканского общества гематологов и трансфузиологов (Тб.,1989), на заседании ученого совета НИИ гематологии и леролиьаьия криви (16.,1590).

По основный полошжкям диссертации опубликовано 2 научные работы и получено одно вЕторское свидетельстве № 164935?.

Объзм и структура диссертации. Диссертация изложена на^140 страницах машинописного текста, состоит из введения,. обзора литературы, материалов л методов исследования, 2 глав, результатов собственных исследований, обсуждений реэул.ьтэтэв исследования и . выводов ц предложений. Библя ограйиче с кий указатель включает 203

» 4

источнинов литорэтуры (40 отсчествэнньл и 163 иностранных авторов). Работа иллюстркрозана 18 таблицами и 35 рисунками.

СОДйРЖАИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. В основу работы положен анализ результатов изучения при различных тоио- и фенотипах <хи • р -талэссеыии, (Уа+,К+)-АТФаэной активности и состава нейтральных липидов мембран гритроцитсв з сопоставлении с фонотиличаски-ми проявлениями денного заболевания у лиц, находившихся на отзциэкврноа и амбулаторном лечении'НИИ'гам"згол згил и переливя-. няя крови пм. акад.. Г.К.Яухэдза Республики Грузия (тнблЛ.).

В нэчес-твз контроля мы пользовались показателями, лочучен-ничи при исследовании 70 здоровых лиц (таолЛ).

Ганогчп халасоемпи устанавливали при ломошт разработанного в института снатого комплекса методов (Цестиаигкли И.Г.. 1931), внлючэп' морфологические характеристики и осиотичсскую резистентность эритроцитов, э тэи&ь количествэжша эратроцитарние гоказе-

Таблица I

Общая характеристика нонтигента. обслэдовэнных

Группы сболадозвшш

Число обс-ладованных

Контрольная группа

Всего е группа

70

Возраст1 обследованных

а) практически

здоровые дети 2и 5-15

б) здоровые . '

взоослы6

кенздны 25 16 - 60

иунчикы 25 16 - 60

5 - 60

Группы

бОЛЬ-

н1'х

Болыша с в -ТП-"лессенивй

а) Еольнкь с Г8М0-зигетной В -талэеоенибй

й) Больные с гвгеро-' ВКГЬЯНОЙ 6 -18-

лас-сэмией'

дети

ВЗрОГЛЫв

10 30

Всего в группа

2. Есльные с. о-', -талао-

семиай

в) Больные с гамог-лооинопатиай Н

дзти взрослые

б) Больные с р<.-Т5-лаесемизй^

в) Больные с сх.-та-лассеккойо

5

8

-IV 10

Бспго в группа - 37 Всого оЛслйдовако .156

5-10

6-15 18 -60

60

5 -II 16 -

20 - 58

22 - 53

6-59 5-60

толп (КЭП) (Станка М.И., 1575).

Проводили: опрэделенио фракционного состава гемоглобина, включая коди^иственнос испарение НззЛр, НвН, Ив ¿2сд.ъГ£ "Р1" и и щи адьнгрофорза но эцетс'тцелялезних г.л?:-:кех а гола полиичрил-амид'з ( Гас-? , ■ количцс^злшои определении НвР(.РеЬ»о

196(1) и ^ччонос1у8оильноз1-и гаиьглс'л'и:и ( дидкивс

9

- s -

пий, 1971), цитолргическое определении числа эритроцитов о Нв ( к'¡ьЛъл&ь >1^57) н выплланиг е'нутризрктрсциторннх тзлец включений ( ,j£/)c£Wïoi/ ¡boJiiii) пра инкубации с Ш'С, определение сьворо-тот:ого железе ( Цшта/ , i960).

для изучения вдрфо-функвдокалыгех характеристик мембран эритроцитов проводили опрздэлание активности (*/а+,К+)-4ТФвзы -белок ( ЗЬи,^ и соавт., 1959) и неорганический фосфор (F¿¿Ît , Д^ёа-шс « 1952), экстракцию и хроматогргфкв липидор (Кейтс, 1975),"'тонкослойное хромаюграфпрование нейтральных линадов' (Италь, 1965) мембраны эритроцитов, выборочное сканирование хро-матограммы на цриборе 1ЖВ UitWiScxMV XL

Фрагменты работы-выполнены совместно с сотрудником лаборатория биохимия с научи, сотр. Ц.Ш.Эрадзэ (заэ.л-эб. - к.биил.н., Л.Й.Ахметали), а также в лаборатории наследственных и приобретенных анемии со ст. научи, сотр. ,' к.н.н. В.Й.Нацзьчшзили и мл. н.сотр. МЛ'.Чхеидзс (зев.лаб. - д.м.н. й.Г.Месгпэлвнли) и в лаборатории электронной микрпскспки совместно с руководители ле-< бораторчи д.б.н. Г.Г.Гэгичадзэ.

ПолучэЕныэ результаты, обработаны методом вариационной статистики по Стюденту.

Результаты исследования и их »бс^хдзниа Исследование практически здоровых Летни к взрослых пиказо-, ло, что "их НЭП .не отличается значительно лт подобны:: понзеете-лой разных других популяций и, следовательно, маг.уг быть-использованы в качестве региональной нормы (табл. 1,2,4).

Исследование ( }iя+,Кт)-АМззной активности и нейтральна* лилидов ьгеыбраш гритроцитов у тнх яэ лиц (проведанное ПЛ. Зрадзо)'- показали, что.( /а+,1С+)-АТФбзиол екзиваэсть у adtsîi составляет б среднем 1,01 — 0,024 мм н,е_орг.фрсф,/аг белка х чао.

и у взрослых ] ,08 " 0,023.' При тонкослойной хроматогрэфяи нейтральных липидов мзмСраны эричроцьтов (проведенной .в сопоставлении со свидетелей) фозфолилиды оставались у старта, а фракций нейтральных липидов, как у здоровых детей, так и у взрослых, распределялись окздуюцик рбразом: I) фракция очень сильной интенсивности стериаы, з основном холестерин; 2) фракция слабой 1+ или очень слабой 0,5+ интенсивности свободные жирные ьис-' лоты; 3) фракция той же интенсивности 1+ Или 0,5+ трчглицеркда (рис. 2, 4).

Для точисго количественного определения фракционного состз-вз нейтральных липидов в контрольной группе дополнительно провали расчет1 индексов, отображающих соотношения фракций (табл.5).

Иослэдовекий больных с гомозиготной у?-талаосемией (генотип //5^^ показали, что у всех 9 больных детей фекотипически болезнь протекала по типу классической большой р -таласоемии.

К.ЗЧ при этом были СНКЕ6НЫ у всех оолььых, как это чаблю- . дается исследователями во многих популяциях мира (С.В.КолодэЙ, 1978; РволЗс^ 13И; - Р^даШ ( /,5,<?з> Исключение составил

СД эритроцитов, который нолебокся в. прьдэлех нормы (табл.2)," . ввиду наличия у больных наряду с микрпцитаыи и макроцитной фракции эритроцитов.

Вместе с теи, у всех наблюдаемых нами больных отмечается выракэпнзя тенденция эритроцитов к планоцитозу, о чаи свидетельствует ПС, котсрый б сраднэы составляет 4,83 - 0,15 (разница стагистичеени достоверна Р<0,0и1) табл. 2.

У всех 9'больных детей с исмозиготной />-талассамнз$ ( ,К+)-АТЬагная битиъность мэибраш эритроцитов етатистичиск:' достоверно саилена (РЛи,001) и в среднем составляет и,39 - 0,3£ мМ неорг.фосф./иг. Салка х час. (,рио. I, 1,.- 3).

Генотип

Теолица ¿

Статистические показатели КЭП при различной фенотипах ^-талассемии

гено- и

Группа Стат. показатели

ССГЭ пг

СОЭ MHl!S

Olí

еде

UHU

СТЭ шш

г

пс

t'~t дети . Л1 - m

ß >ß

21,1*0,60 О,COI .

62,7=0,64 0,001

0,72*0,02 0,001

7,30*0,02 0,1

1,4-9*0,05 0,001

4,88*0,15 0,001

ti и

дети M - ф • p

24,4*0,46 /■0.001 .

72,0-1,40 0,001

0,33*0,02 0,001

7,35*0,02 0.5

1,69*0,02 0,001

4,35*0,09 0,001

ЕзрСС-

л> ¡a лыо M* m f Ir проявленная форка P

24,5*0,37 0,001

V2,4*1,02 0,001

0,83*0,01 0,001

7,40*0,02 ОД

1,69*0,03 0,001

4,36*0,07 O.OOÏ

взрослые i ^ C-yapïJH

форма

p

23,3*0,79 O.I-''

83,9*1,69 0,1

0,36*0,02 О,Г '

.7,37*U,03 ОД ■

1,95*0,04 ОД ,

3,70*0,03 0,05

Контроль дети Л1*Щ 29,7*0,24 83,1*0,71 ' I,0I¿0,01 7,39*0,02 2,04*0,01 взрослые/V]* m 30,3*0,18 91,0*0,51 1,07*0,01 7 ,43*0,02 " 2,0£*0,05

3,60*0,05 3,50*0,03

П2 йзрс^^КЦ

Ркс.1. Активность ( /</а+,К+)-АТОззы мембраны эритроцитов гря различных гало- и фенотипах $ -талзссзмии. Гомозиготная £/?-талзссемня (генотип ).

' (2); гетерозиготная /з-талассемия (генотип' $'¡.8 ) "' Г'роявлааг.ан форма (4,5), стертая дорг-. (б); контроль (I - дети, '¿' - взрослые),.

-13

Некоторые исследователи Рьас1съ у больных с гомозиготной г/)--2СЛ?ссемибЙ обнаружили аначиталъноа снижение концепт-рации К+ в эритроците, что по мнению авторов -подтверждает применимость этого показателя для выявления талассамик.

?1сли исходить из того, что иоддарнанио кэткон>юго гомеосто-за клетки определяется сохранностью активных сульфгядрилышх групп в катонных изеоз&г, тэ маки о допустить, что при талас-сепии потарл К+ обусловлено экизяс-шюи ¿¡Н групп фу чкцп опальных оелаБЧ иаморащ эритроцит га и является результатом увеличенной концэяграцш сааСзды/х радикалов, ъ таких условиях преципитация избыточных ципеш глос.ина с экислзны.ми ,?11-группзна на мз:.:бри-чу приводит к ;К'ГА'1:!с:.1».о рзоогы зсЪх $уькцпэаблмах белковых

_ TJ _

компонентов, .в частности, ( д/а+К+)-АТ^ази

г \

r\ ^ ^ ^ ! Триглицериды

_ _ - -ос оо О О О \ х ,

© © ф 0

Свсбодные жирные кислоты

3+ Старины

í Старт .ч

Рис.2. ТСХ су-ммы нейтральных липидов м&кбрачи эритроцитов больных с гомозиготной р'-тялаосемиаЗ (генотип .fe/j3z) (3/0; .гэтзрозиготной -та-лэссемиай (генотип- *р/р* ) " чрояглечцая форма (5,6).стертая йориа (7), контроль (1,2).

При злой, ввиду доказанного нами снижения (»/а+,К+)-АТФазной активности мембран эритроцитов при различных гоно- к фенотипах талассемии " эритроцит на способэн компенсировать потерянный налий и концентрация К:в эритроцитах снижена.

Низкое содержание ионоз К* в эритроците приводит к уменьшению .ссгдерданип одновалентных катизко?, что ооусловлизае? да- . гидратацию'И сморвдвэшт эритроцитов, а также увеличивает ригидность нлэгни; это, л скначном итога, надо1? к деструкции орт:ро-цитоз

. У всох 9 больных при тонкослойкой хрэаотогряфии аейтрельнкх липидоз эрутроцидной мембраны интяндиенрсть фракции трмглнцери-дов усилена до 4+'(у 6 детей) и до 3+ (у 3 дагаП), зиисто 1+ , или t),5+ б норме. При .этой индексы, этобряьег.сда сзот:;ого::и: даанций ибйтралышх липидов -средней си-став.'яте:

I) ______ ^54 ± 0)03; 2) _1Е!ЗШЦеЕ!!аЫ -

Всэ каПтр. липидо . Сторина

« 1,13 - С,05; 3) -ШшшШ----= 3,8 ± 0,27

Св. жирн. кислоты <

и указывают на повышенна. содержания триглицеридсв у больных

,'данной группы (тлбл. 3; рис. 2).

Повышение содержания триглкцеридов среди липидных компонентов мембраны возможно ягляатся результатом адаптационных процессов. происходящих в оритроидних Пр8Д1В0СТБеНКИКОХ костного мосгз. Эти адаптационные процессы характеризуются -уввличениеч эластичности мьмбрЭ'Ш (за счат влияния большого количества три-глицеридов), гибкость которой нарушенв преципитацией цапзй глобина.

Воз1;ох:но Тс'ме, что это результат селективного отбора эритроцитов на-стадии хыхода из костксги иозга в нровь и на стадии циркуляции в периферической крови, гдя гибкость и эластичность клеток тестптустся рэтикуло-эндотелиалх.ной системой.'В результаты постоянной селекции ь кроЕИ остаются эритроциты с повышенным содержанием тр/.глицсридов.

Нпзледованиз больных манифестной формой, гетерозиготной £ -талассамии (генотип ^/в* ) показало, что феноткпичаски они ка отлича:стсл от больных с подобным гонотипои, описанных в литературе.

У всех 31 обслйдиз&ьных больных данной группы ( ;/а+,К+)'-АТФазнан активность иритроцитарной мембраны снижена к в среднем соотавляо! у .детей и,':-5 0.С5 г.;М кеорг.фосф./мг. бвлка х час; у взрослых С,¿2 - с,02 Ы нзорг.фосч./'мг. белка х час при срЬв-нсннк и контрольными группами разница статистически достоверна !•< 0,001 (рис.1, № ^ Ь спатзЛлстзвкно).

Таблица 3

Статистический показатели индексов, отображающих соотношения фрзнций нейтральных липидов

Генотип Группы . Статно- Индексы состноионяя фракций ооследованг тичос- нейтральных липидов

НЫХ кие показатели трнглиц. все н.л. триглиц. стерини триглгц. с.ж.к.

г// дети М - Ш 0,54-0,03 I,13-0,С5 5,8*0,2?

0,001 0,001 0,001

дети М ¿т 0,40-0,02 0,84-0,03 2,9*0,12'

/// .Р< 0,001 0,001 0,001

а 3 « о о выявленная фор- йа Ыт т Р< 0,36*0,01 0.С01 0,81*0,03 0,001 2,7*0,07 0,С01

й п стэртая М т 0,42*0,02 0,68*0 .'05 2,8*0,13

форма .Р< 0,007. 0,001« • 0,001

дети М1гп 0,57-0,14 1,03*0,36 4,2*0,16

.Р< 0,001 0,01 0,001

взрослые М 1 т 0,51*0,0?. 1,15*0,05 4,0*0,21

.Р < 0,001 0,001 0,001

0 •> / о< оСуЫ ' У СА. ззрослые IV! 1 гг. 0,^0*0,02 0,62*0,03 2,8*0,03

-Р < 0,001 0,001 0,001

0 ' / * о^оусА с'-. взрослые М 1 т 0,33*0,01 0,52*0,' 02 2,9*0,13

-Р < /Л I гг) 0,001 0,001 ■ 0,001

1 дети 0,08-0,01 0,16*0,01 0.8*0,01

о о М о. взрослее М * т 0,11-0,02 0,12*0,01 1,0*0,03

У всех гетерозиготных больных данной группы отмечается усиление интенсивности франций триглицаридов (рис.2, №5 и И? 6; табл. 3).

О сэдаряании отдельных компонентов нейтральных липлдоз при гетерозиготной ^-талэссемии существуют противоречивые мнения: имеются денные, свидетельствующие о незначительной снижении оо-дзркання холестерина, хотя более распространено мнение о его

повышении при ^-талассемии. Чао ке касается григлицеридов, то лишь накогорыа авторы уявзывзыт на статистически недостовзр- • чое сникэнчо их содержания в мембране -эритроцитов при гетерозиготной /»-талассзиии (&»сй/т&иясг ,, 1381)

Особое внимание уделено в нашей работе гетерозиготный носителям -талассемии с нормальным уровнем КзА^.я НбР (генотип ^¡^ )• Э-9 фенотипичесни бессимптомная группа определилась нами в результате тщательных исследований родословной семьи . пробаьдов. Факогипкчзскл эта группа отличалась от носителей гене ^ -талеосамии с классическими манифестными формами: споцифи-ческие признаки этой патологии были для них не характерны, нй по ' показателям морфологических изменений, ко по показателям ДОП; ОДЭ и ПС были также в пределах нормы (табл.£). В то же время, по-видимому, эту группу не слодует также относить н гетерозиготным носителям немого, гана ^ -талассемии ( ca/¿í:eг<^,,'), -ибо им грисуад определенные, небольшие изменения морфологических характеристик эритроцитов, которые не обнаруживаются у гетерозиготных носителей немого гене. Ганой группе гетерозиготны:: носителей необходимо было подобрать информативные показатели,'' по которым они существенно отличались бы от здоровых лиц.

Изучение (;/ я+,К+)-АТФазы и фракционного составе лиледэв в эритроцитах этой группы выявило изменения, которые нами были обнаружены при гомозиготной и классической гетерозиготной £ - . талассемии (Рис. I, № - . рис. ?.. К 7; табл. 3).

Подытоживая результаты -исследования контингента больных и члэнэз их семой о различными гено- и фенотипами -тэлзссамии, мы пришли к заключению, что наиболее характерными признакам . лвляйтся зкижьнне (-|/а+,К+)■ -А1'Фазной бктивнооти и увеличение содержания фракции григлицеридов из числа нейтральных лтгадов

эригроцигарной моибрана. Эти признаки оточены в 100^ случаев не только при манифестных, но л при стертых формах данной патологии. Как видно из рис. I, 2; табл. 3, показатели наиболее розно изменены-при гомозиготной ^ -тзлассомии, меньше при манифестной форма гетерозиготной -талассемии и еще меныае при стертой фэрко данной патологии. Это говорит о том, что степень указанных нарушений коррелирует со степенью вырэженностк фэио-' типических признаков, в том числе и КЭП: при гомозиготной ~ талассемии характерно снижение ССГЭ, СОЗ к ОН на фпно макрсплб-нодитозе в 100% случаев, при манифестной форме гетерозиготной $ -талассемии в 37,1% случаев, а при стертой форме гетерозиготной 0 -1алзссемии с нормальным уровнем КвА^ и'НвГ т.ишь 2с! ,3$ случаев (табл. 2). ,

Следующей задачей наших исследований было выявление специфических нарубаний б мембране эритроцто при различных генотипах с/.-талассемии, диагностика гетерозиготных форм которой представляет о'ольшиз трудности по сравнению с гетерозиготной ¡3 -талассемией. • .

Особенное внимание уделано в нашей работе 10 облигатяым

а " ~

взрослым носителям гэна о! -тэлассемш^ (генотип ).

Как показал!! чаши нзблк^эния, для них на характерны явные, спэ-' цифи.ческие нарушения морфологии эритроцитов, а также измонещчн НЭП. Исключением является СДЭ, который превышает .норму, составляя в среднем 7,65 мин - 0,03 и указывает на тенденцию эритроцитов к ма-фэцитозу ,■ при этом тб'ьдонщш к планоцнтозу'отьечеет-. ся у 3 из 1и больных (табл. ч).

У всех 10 носителе.'! гена -- -талассеичи^ ь результате специальных исследований мембраны эритроциты были выявлены то де нзменвт',)!, киторые нвмл были обнарунеии при гвчоглобинолатии Н

(

Таблица 4

Сгетистические показатели КЭП при различных генотипах &С -тал&ссеиии

Генотип Группа Статис- лпа тические _ показа- пг икм° тели_

ОП

-СДЭ шш

егэ

1'НМ^

ПС

дети 22,6*0,9 65,4*2,89 0,77*0,04 7,59*0,03 1,47*0,07 5,10*0,25

• Р<. ..0,001 0,001 0,001 0,01 0,001 0,001

с/

№1*1 22,5*0,69 66,5*1,89 0.77*0,0?. 7,66*0,02 1,^9*0,05 5,0 *0,15

Р С

0,001

0,001

0,001

0,01

0,001

С.С01

о о

oi.cZ-/

^ЙГ" М+ГЛ 25,7*0,31 75,5*0,92 0,87*0,01 7,6 *0,03 1,61*0,02 4,3 *0,06 ' Р < 0,001 , 0,001. 0,0С1 0,01 0,001 0,001

Бзрос-

лые

М1ГП 29,6*0,35 87,5*1,12 1,0*0,02 7,65*0,03 1,95*0,02 3,8*0,06 р< 0,05 0,1 0,05 0,01 ' 0,05 0,05

Кона- дети М±т 29,7*0,24 88,1*0,71 1,01*0,01 7,39*0,02 2,04*0,01 3,60*0,03

роль

лыз°°~ М1ГЛ 50,9*0,18 91,0*0,51 1,07*0,01 7,43*0,02 2,08*0,05 3,50*0,03

0<смгр»«> В Ят

Рис. 3. Антивнооть (/V 8+,Кт)-АТФаьы момбран эритроцитов при различных генотипах оС-талассомиа. Гемоглобинопатия 11 (ганотипс><-о^-^-с^) (3,^); схС-телаосемия^ (генотип о^'с^уЬ'-оО (5); =><-та^ассвмия^ (гэнптип с/.'о^/оСо'-) (5) к контроль (Т.-дети, 2-взрослье).

О О Ф в

О О О О

I I

О о о

о <•

3'

Триглицариды

Свободнее жирные кислоты

Старины

Старт

з. 1

Рис.* ТСХ суммы неитралышх ллппдов меыоран эритроцитов мольных о гйиоглобинопатпай Н (генотип ) (3,'|), •^К-таласоемиайт (гевогип (5,6), о'-.-галпе-Сймне^ (ганотпп (7) и контроль (1,2).

и с<-талисссмиЕр а именно, статистически достоверное снижение (;/а+,К+)-АТОазной активности до 0,65 * 0,02 мМ ноорг.фэсф. Дг. билка х час и усиленна кнтенсивности.фракции триглицеридоз до 2+, на что указывают также и индексы (рис. 3,4, й б, №7 соответственно; табл. 3).

Поскольку подобные ясслвд меняя в мхаратуре не встречаются, у нес нет возможности сравнить результаты наших исследований с данными других авторов и считаем полученные данные уникальными.

Подытокиьвя результаты исследования больных с различными формами сх.-талассзики, мы пришли к заключению, что наиболзе характерными признаками являются снижение (А/£+,К+)--ЛТФазной активности и повышение фракции тркглкцеридоь из числа нейтральных ли-пидов эритроцитариой мембраны. Вти признаки харэкторны в 100% случаев но только при манифестных, но и при латерных формах данной патологии. При игом, квк видно из рисунка 3, 4 и табл. 5, . стопень изменения обеих показателе? наиболее высокая при гемоглобинопатии Н, машьые при о< -талассзмии}- и еще меньше при лэ-тонтной форма данной патологии -тэлассеыиир_. Это свидетельствует о том, что сташнъ указанных нарушений коррелирует со сте-' пеныо выр8жоннопги фенотилических признаков. Что 'аса касается КВП у обследованных нами больных при гемоглобинопатии Н и о<-тал^с-ебмии^ характерно снижение ССГЭ, СОЭ и ОН нч Фона макроплэноци-тояа в 100% случаев, при о<-тала?семии2 КЭй остаются в пределах нормы, Х01Я отмечается тенденция эритроцитов к макроплано-цитозу в 3($ случаев (тас'л. 4) цо СД и РС.

Сравнивая результаты изучения всех генотипов о< и в -та-зеоэиии мы пришли к заключению, что сникеикз активности (/з+К+) -АТ1>эзи и повышиниэ содврхзаил фракции тр;;глицар;;дов являются -< пичболее веяными чатогномичшши признаками всех без исключения

изученных генотипов се и £ -тэлоссемил, ибо имеются в 100/» случаев.

Макропланоцмоз эритроцитов различной степени присущ всем формам телассэмии, но. при гомозиготной и классической формах р -галассзмии этот признак сочвиогся с наличием макропоиуля-ций эритроцитов, в то время, как при гоноглобиноплтии Н и -талассемии^ манрэпланоциты являются преобладающими. Что же касается стертых и латентных форм тяласосмии (геногиг /Р "

„ V ✓ V

) этот признак почти нз встричеится.

Следовательно, выявленные нами при тачассумии специфические' изменения мембран эритроцитов (пзшкениз (//з+,К+)-аТФознсй активности и лоЕышэние содержанья фракции триглицапидоь) могут служить- надекньта диагностическим критерием но только для подтверк-дония диагноза манифестных форм, по и для выявления стортых и латентных ферм с< и р -талассом^и, что является необходимы дм профилчитини и рационального мадино-гянатичоскох'о консультирования.

Таким оо'рэзом, выявленные нами изменения.в мембрана эритроцитов связаны с Еыладением избыточного количества цепей-глпбине и их концентрации и воздействия на мамбран.у.

ни волы

.Не

1. При различных генотипах таласоемии ( в ¡А ; р¡В ;

; с^-гу--/у-су-. ) выннлоас снижение

(Л'а+,К+)-АТОозной активности и' пошиенио содержания-фракции тркглицэридоз из числа нойтрульшх лкпндоц мембраны эритроцитов.

2. Яри манифестных формах тзлзезашш харэагерно оитеэть КЭП за иснлотшшеы'НС, укаэизеы^ьгэ на плэноднтоз эритроиитог и СД, .тторый остается и пределах нормы при 0-таяассчыии за

счет наличия популяции макроцчтгв (наряду с микроцитаыи) и превышает норму при ^-талассемии эа счет преобладания макрсци-тэв.

3. Установлена корреляция между степенью снижения (л/а+,К+)-: ЛТФазной активности и повышения содержания фракции григлицеридов мембраны эритроцитов, а такие снижения КЭП с одной стороны и степенью фенотипичезких проявлений талассемии о другой.

4. Для гетерозиготной ^ -талассемии (генотип ) с нормальным уровнен НвА^ и Нз Р и со стертой клинико-гаматоло-гической картиной характерны ае же нарушения, что и для классической формы геторэзиготной -талассемии, а именно, снижение

( //а+,К+)-АТФэ5ной ективности к новышеняе содержания фрзкцйи три-глицеридов мемораны эритроцитов (в 100% случаев), а такие снипе-ние КЭП (в 22,3$ случаев).

5. При о<-талассемии^ (генотип с^-с^уЬ*- ос ) с отсутетви-\ зм клинико-гематологических признаков патологии (в том числа и* сьижения КЭП) характерны те ке нарушения, что и для гетерозиготной с- -таласоемиит, но выраженные в'меныдай степени, а именно:* снижение (Уа1',К+)-АТФезной активности и повышение содержания фракции триглицеридов мемораны.эритроцитов (в 100% случаев).

6) Установлено, что снижение (Уа+,К+)-А1Фазкой вктивноадк и повышение содержания фракции триглицоридов мембраны эритроцитов является основным диагностическим критерием при латентных и стертых формах ^ и ¿3 -талассемии и дополнительным дифферен-циально-дйагностичесним критерием при манифестны 4 формах талас- . семии.

- 23 -

ПРВДЛЭИН'Лй

I.. Рекомендуем применять исследование (//а+,К+)-АТФа.чной активности и нейтральных липидов мембраны эритроцитов для вьыл-ленля латентной и стертой формы и /3 -талаесемии и длн вкиения точности диагноза микичесни проявленных форм ь целях своевременной диагностики и рационально мадкно-генетичэскогконсультирования.

2. Рекомендуем для использования в качества региональных . норм количественные эритроцитарныэ показатели, получанные нсми в результате иссладования репрезентативной группы здоровы)' дэтий и взрослых.

Слисок научных работ, опубликованных по тоие диссертации:

1. дифференциально-диагностические значения количественных эрит-роцитарных показателей при различных наследственных гемолитических анемиях. Тезисы докладов ¿еслубл. конференции мол.,д!.> ученых, специалистов и работников производств "Наука - тик-тике", Тбилиси, 1984, с. 29-30.

2. Сравнительное изучение количественных эрит-роц.итари'ых иэк'ииз-гелей и (У8+,К+)-АТФззной активности мембран эритроцит»}', при различных формах талассаиии. В кн.: Клинико-пагоганети-чесноя харэктэристика заболеваний систеш крови и вопросы гемотерапии, Тбилиси, 1985, с. 49-50.