Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Нейрофармакологическая и фармакокинетическая оценка корригирующего эффекта натрия о...тирата при хронической внутриутробной гипоксии плодка в эксперименте

РГ6 од

2 о № iS33

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ ИЕДИЦКНСКИХ НАУ1С ЕДУЧНО- ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИ!! ИНСТИТУТ ФАИЙКОЛОИС!

На правах рукописи Экз. М

УДЙ 615. 015: 618.33:612.273. 2:547. 473. 2

козя?

Валигпша Сгашкугшюн:» штъзтшдэяюг-тж&я я вдрыашжзшсчЕсгая оцкшд

^FKSUPi^STO ЭМВКГД (ШЖЗШКЕА Ш1 ЖШЧЕШШ

еаташю гашш ¡иода а зйсишшеяге

14.00.25 - Фармачодогия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учезой степени кандидата бкологичоских наук

Н00КВЛ - 19S3

. .- ^ J

Работа выполнена в лаборатории фармакогагаетики и лаборатории психофармакологии НИИ фариакодопш РАШ (директор - член-корр. РАШ, профессор С,В.СШданВД)

Научные руководители: доктор иодидашских наук, профессор В.ШШ'ЯБВ доктор медицинских наук Р. У. ОСШЭЕОШ

Официальные оппоненты: член -корр. РАШ, профессор ЕЕШШ

доктор медицинских наук, профессор &Н.ШШЕЗ Бе дутаре учреждение: Московский стоматологический медицинский кистигут ий. Н. А. Сеиаско

Защита состоится "_"_1893г. в_час. на еасе-

Д9НКИ специализированного ученого совета Д 001.25.01 при Институте фариаколопи РАШ по адресу. 125315, Ыосква, ул. Балтийская, д. 8.

С диссертацией можно ознакомиться в Ученой части Института фармакологии РАШ

Автореферат разослан "_и_1993г.

Ученый секретарь Специализированного Совета, доктор медицинских наук

ВВЕДЕНИЙ

Актуальность работ Гипоксические состояния плода и новорожденного занимают одно из первых мест среди ..ричин перинатальной заболеваемости и смертности. Ни один из факторов риска не привлекал к себе такого внимания исследователей и ни одному из них не• приписывали такого широгого спектра повреждений, как кислородная недостаточность. Внутриутробная гипоксия плода занимает одно из первых мест з ряду причин недоношенности, мертворождаемости, ранней датской смертности, ровдения детей с отставанием в психическом и физическом развитии и инвалидности (Вихляева Б. М., 1983; Тобо-ЛИНВ.А., 1985; Студентом М. Я. , 1985; Осмоловская JL Е , 1991; ЯцикГ. а, 1984; Perkins R. Р., 1977; Reinis S., 1970). Поданным ВОЗ 10% детей страдают нервно-психическими заболеваниями, причем 80Х из числа этих патологических состояний связано с хронической внутриутробной гипоксией (ХВГ).

Одной из распространенных видов гипоксии во время беременности является гемическая гипоксия. Она может быть обусловлена анемией, изменением сродства гемоглобина к кислороду, а также метгемог-лобикопатией у матери (Мочалова JL Д. , 1984). Помимо этого, причинами гипоксии могут быть негемолитическая анемия ьследствии кровотечения в антенатальном периоде, гемолитическая болезнь, геморрагический синдром, повышенная вязкость крови, полйглобулия и другие патогенные факторы, наиболее характерные для второй половины беременности. Б развитии анемии играют роль, как эндогенные факторы (недостаток витаминов, нарушение обменных процессов, патология ЖКТ и т. д.), так и экзогенные факторы. Примером последнего может быть употребление экологически нечистых продуктов питания вместе с овощами и фруктами, колбасными и консервными изделиями, питьевой водой, вдыхаамьм воздухом, которые могут содержать повиданное количество нитратов. Рядом авторов отмечено, что нитраты за счет нитратредуцирующей микрофлоры полости рта и ЖКТ могут превращаться Б нитриты, вызывая метгемоглобинемию (Ажипа Я. И., Реутов Е IL и соавт., 1990; Nyakas С. et al., 1990; Doranee i. l. , 1976; Fritsch P.'etal. , 1982; Walters C. Z., 1985; Veisburger J. H. ,1975). Более того, установлено, что нитриты оказывают прямое тератогенное и цитотоксическсо действие на организм за счет угнетения синтеза 5ежа и процессов митохондриэпьной дыхательной цепи, тем самый возникает смешанный тип гипоксии - гемическая к гистстсксическая :Н1ЬЬЗ J. B., TaintorR, R. , 1987; Lt Jinsky V., 'l984).

Вааокзя зувствтеяьндстъ к «иаородаой кедостаточаосж» разга-Bsacytes ЩЮ офсгаыниза-г Coscyu &ерэяткос?г -сггиаою$еяю crsa-леиг г аостдаксв .геля аораяашЯ вкмз» гж?пграсав!ак fiscal w.-.эга. СП? йЁгйегегьсгвуег «5 айгузлъногги аойека средств 4тар>££ко-¡ед-регали в задеты к,ша в сюрвод B^-rpfigrtpßCfeoro jws-шая». Янж шпшавпз щшлек Bsrsotaai s «аккйчгеког пр&кскке азра? - чацш шйзчвр«, «^гиздйся ааакгш звдогеш?« ГСШ. Его гжскнй э&окгенюсяь щ® рз&этшк $qpmx гшоке^сяаз; варг-к-шй. шаш^ив. й s^nspKœaîtï (Uborit H, l§54; Ззкуссв В. §., CteT-{.«йскап Р. У. » 1935; ЗЬагоаа s. 1С, Шфг&шв Н, В., 1977; Л Д.» 18!«}. Епрэяов кзвадаша«» щйшекйш ^егщв в сердач-ко-ссотеасгой кфздгак, i^¡»яфургыа, тразшговогмм, «тяскмоЯ кашслогаа яо&ттхюа ev« шкщэд «&*smceci№s«QX> exaasoen* пак ерадавд уршгпаой iwaasm B.Ü, ïtetpcsctesa s, «s.,

Буна-ган Е.Л.» 19?4Ц Bspee Гшда В.&., ДШ;). зфо-г^ттстй гажсва ihssä «fesnœcom вэтрм osciöftfi-р«гз. us вбвдвдмшяазд. Учлги^зй? sk о&угоак-йьетьо, л зэдаю «айкйе доясмвгошмс евс&вэгв» щ^жтвтж&х кязедес «fei «еряаа-tsÄbKöS ошмаод!: «кл*реад»г*> <xö., ií#35j; шзггагого

¡»а крл ш« «эзта {teôïsïswa ЕЕ » а

С,С., i'.Ä., t9S5); Ser

p« V. A. % ia?ôî i» ьеб&оздмэвг* «аучэдак

шда osciíS/íi'íufü ПУЙ едггш-в-з^вй №\Ш№ ÖÄ&ÄS.

fifois» гак., ass&vt гскэдодйп* cïcyïcîstfî ¡ътптя газаÔSÏSS-S»-ö» Uásfí^s здокшедок»-« шага ь mai« « средни «юуга-

ïfaî« 8 «j>»¿üSfí »MI» m ттъ&ужа&ъ

й&ааагкай* ocôÇcè mmstoK s. fcaxacsy ярш^а?? да щт^;^«»

ft Î^ÇAfeUVaorRsî..

«есад^сша. Эдодяшмймш»» ввогоздздзд ъгртшш тч&я* щ® ш^щщ^рс^юй tmrnem задайся

Hä oOK^&ùiV fcÔS^K® ййв; ft VïÂSÎ.Wà v^^üSS-

гичг^шда вдща ¡с шййгйег&чш*. тщжъ шщи s

2. Разработать высокочувствительные методы экстракции натрия оксибутирата из различного биоматериала и его количественного оп-оеделения с использованием газо-жидкостной хроматографии.

3. Изучить уровень . эндогенной гамма-оксимасляной кислоты (ГОМК) з мозге матери и плода в условиях гемической внутриутробной-гипоксии.

4. Установить влияние натрия оксибутирата на показатели высших йнтегративньсс функций мозга потомства, подвергшегося хронической внутриутробной гипоксии, при его пренатальном введении при различных схемах введения.

5. Выявить влияние беременности, нитрита натрия и длительного введения натрия оксибутирата на его фармакокинетические характеристики в системе "тть-плацента-плод".

Научная тштт работы. Впервые разработана экспериментальная модель хронической внутриутробной гипоксии плода с «пользованием йэтгемоглобинобразователя - нитрита катр.'Ш в различных дозовых ре-¡здмах его зведения беременным крысам. Показано, что наиболее выра-ттыь и отдаленные нарушения общего поведения, обучаемости и памяти у потомства крыс проявляются при ежедневном знутрибркимнном введении нитрита натрия а дозе 40 мт/кг в течение 9 дней (с 10 по 18 день беременности). Модифицирован и значительно упрощен метод экстракции натрия оксибутирата из биоматериала и' его количествен-чого определения с помощью ГЖХ. .Впервые установлено, что уровень зидогенной ГОМК достоверно снижается ( более чем в 10 раз) в мозге иода в условиях экспериментальной хронической гемической гипок-гу,к. Впервые* выявлен^, что ежедневное пероральное введение раствора натрия оксибутирата в дозе 150 мг/кг с 12 по 18 день беремзн-rocrvK повышает рождаемость и выживаемость гипоксированного ютоыства, предотвращает психоневрологические нарушения и улучшает :3учаекость иа различных поведенческих моделях, а такие устраняет дефицит эндогенной ГОЖ

Впервые изучены фармакокинетические характеристики натрет ок ¡ибутирата у беременных крыс в сравнительном аспекте. Установлено, гго в значительной степени изменяются фармакокинетические покааа-•ели натрия оксибутирата у беременных крыс в сравнении ¿ небере-5еннььгл. Показано существеннее влияние нитрита натрия на фармако-мнетические характеристики натрия оксибутирата в системе

"мать-плацента-плод", что проявляется в ускорении всасывания препарата из ЖГ, улучшении его распределения и элиминации в материною-плаце цтарно- плодном комплексе. Б тоже время практически ке выявлены различия в фармакокинетических процессах натрия оксибути-рата у беременных крыс при его однократном и длительном введении, что определяется физико-химическими показателями исследуемого препарата

Практическая ценность работ Разработанная модель экспериментальной патологии хронической гемической внутриутробной гипоксии плода может быть широко использована для доклинической оценки антигилоксической и ноотропной активности новых и известных лекарственных препаратов. Устранение натрия оксибутиратом нарушений высшей интегративной функции ЦНС и отдаленных последствий при влиянии гемической внутриутробной гипоксии дает основание для внедрения данного препарата в акушерскую практику для клинических испытаний с целью лечения хронических гипоксических состоянии плода при различных патологических течениях беременности.

Оармакокинетические закономерности натрия оксибутирата позволяют предположить усиление его эффектов у беременных крыс по сравнению с небеременными. Ускорение процессов транплацентарного переноса натрия оксибутирата и его элиминации из плацентарно-плодного комплекса под влиянием нитрита натрия, а также отсутствие выраженных различий фармакокинетических характеристик при однократном и длительном введении натрия оксибутирата не дают основания для кумуляции исследуемого препарата в организме беременных крыс. Это необходимо учитывать для адекватной оценки эффективности натрия оксибутирата

Достоверно значимое снижение уровня эндогенной ГОМК в шаге плода при однократном и дальнейшее истощение ее уровня при продолжительном введении метгемоглобинообразователя, по всей вероятности, указывает на важную роль данного вещества в регуляции гипокси-ческого состояния и адаптационных механизмов центральной нервной системы. Это дает перспективные пути поиска новых лекарственных препаратов антигиттоксяческого и ноотропного действия на основе гамма-оксшзсдяной кислоты.

Настоящее исследование осуществлялось в рамках государственной программы "Фарнакокинетические подходы к оптимизации примене-

пия лекарственных препаратов при беременности" ( регистрационный N 01.9.10. 050077).

Аггробадщ работы. Основные положения рг..Зоты докладывались на Ш-Всееоюзной конференции по фармакокинетике "Совремалное состояние и перспективы развития фармакокмнетики" (Москва, 1991 г), I и II конференция Московской ассоциации молодых ученых Казахстана (Москва, 1992 и 1993 гг) и мэкгабсраторной конференции НИИ фармакологии РАШ (Москва, 1993 г).

Структура и сбгем работ Диссертационная работа наложена на _ страницах, содержит 17 таблиц и 12 рисунков. Диссертация состоит из введения, литературного обзора (1 глава), методической части (2 глава) и части собственных результатов (3,4 и 5 главы), заключения, выводов и списка цитируемой литературы, включающего источники отечественных 104 и зарубежных 108 авторов.

УдТ1ШиШ И ИЕТ02Щ ЙОСЗДОВШШ

* Эксперименты проводились на беременных и небеременных крыса;: Л'?!:ии Vistar и потомстве, полученном от этих крыс. Бсего для экспериментов было использовано 1233 крыс.

Для созданий хронической внутриутробной гипоксии (XBF) плода онл использован метгэмоглобинообразоз&тель - нитрит натрия, который иримзнядся в различных дозовык режыах - 10 ur/кг (11 группа), 40 иг/кг (III группа) и постепенно :;арастаю1дал доза от 20 до 60 иг /кг при ежедневном увеличэнии на 5 мг/кг (IV группа). Полученные результаты сравнивались с группой интакткых беременных крыс (I группа). Еаутрнбрзашпное введение нитрита натрии проводили с 10 по 18 дни беременности.

Раствор натрия оксибутирата вводился беременным крысам, подвергшихся ХВГ (-10 мг/кг нитрита натрия), перорапьно з ¿оз& 150 иг/ кг ирн радличной схеме введения - однократно (III группа), либо трехкратно ( IV группа) в сутки - с 1<г по 18 дни беременности. Зрапн^ние прсзодилось по отношению к глтактинм беременным красам (I группа) и к группе животных, подвергшихся ХБГ (II группа).

* Исследования были выполнены совместно с докторантом дабо-эаторни фзрмакокинетики Сариевым А. К. и старшим научным сотрудники лаборатории психофармакологии Трофимовым С. С.

Все эксперименты по изучению поведения проводилось ка потомстве крыс, начиная с 1-месячяого возраста. Определение мышечной ¡ет-орди7 эдии движений проводили по методике Boissier и Sitron (1960). Двигательную и орриентировочно-исследовательскую активность животных определяли по тесту "открытое поле". Для исследования рабочей памяти крыс проводили эксперименты по изучению оптимальности исследовательского поведения в крестообразном лабиринте (Салимов P.M., 1988; Hender T. et al., 1977). Б "открытом поле" и крестообразном лабиринте регистрировали направление первого поворота для оценки функциональной асимметрии мозга. Для изучения способности крыс к избавлению из острой стресс-ситуации использовали тест экс-траполяционного избавления (ТЭЯ), предложенный Бондаренко Е А. (1980). Для выработки условного рефлекса с положительным (пищевым) подкреплением использовали Т-образный лабиринт, регистрируя латентное время (ЛВ) достижения подкрепления и количество обученных кивотных (в %). Выработку условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ) осуществляли в установке "Lafayette instrument С" (США), описанной R. Ader, регистрируя ЛЗ первого захода в "опасное" отделение камеры и количество обученных животных при воспроизведении навыков обучения через 24 часа и через 2 недели после его выработки. Условный рефлекс активного избегания (УРАИ) вырабатывали у крыс в челночной камере фирмы "Ugo-Basile" (Италия), предъявляя в течении 5 дней по 50 сочетаний условного звукового и злектрободе-вого раздражений и регистрируя количество обученных кивотных (в X).

Фармакокинетические исследования натрия оксибутирата (ISO мг/кг, перорально) проводились в следующих группах животных: небеременные и беременные крысы (18-20 день беременности) - однократно (после инъекции нитрита натрия); интактные беременные и беременные после введения нитрита натрия - однократно на 18-20 день беременности; однократно на 18-20 день беременности и длительно с 12 по 18 дни беременности на фоне хронического введения нитрита натрия с 10 по 18 дни беременности. Во всех случаях доза нитрита натрия составляла 40 мг/кг, внутрибршинно. Животных декапиткровали в дискретные интервалы времени и количественное содержание натрия оксибутирата проводилось в плазме крови, плаценте, плодной ткани и мозге плода.

Анализ натрия оксибутирата проводили по модифицированной нами

методике с использованием газо-хроматогргфической системы "Varian aerograph" серии 2850 (USA) с ПИД и стеклянной колонкой длиной 150 см и внутренним диаметром 2 мм. Неподвижная фаза - 10% ПЭРС на хромосорбе V (80-100 меш). Скорость потоков: азота высокой чистоты - 36 мл/мин, водорода - 40 мл/шн, воздуха - 300- 350 мл/мин. Температурный pemt колонки - Иб'с, инжектора - 14СГС, детектора -200!с. Количественное содэржание натрия оксибутирата определяли по соотношению площадей и высот пиков бутирслакгона (БЛ) к внутреннему стандарту - трчметину. Калибровочные кривые стандартных растворов (ГОШ - БЛ) в диапазоне от 20 до 100 мкг/мл линейны. Коэффициент корреляции составлял 0,699. Пороговая чувствительность метода 1 гг/мл. Процохт экстракции препарата из плазмы 1фови составил 34%, а из мозга - 59,7Z.

Расчет фармакокинет иче ских параметров натрия оксибутирата у берьменных и небеременных крыс проводился по программе "Constat" и с применением многокамерной модели, разработанной доцентом Ростовского медицинского института В.В. Хоронько и адаптированной для компьютера IBM AT.

Определение степени свчг^ения препарата с бь-яками плазмы кро-ш; ¡.'поводилось по методу равновесного диализа (Briggs С.J., 1983), а лкпофнаности - по коэффициенту распределения препарата с системе "октанол-вода".

Излученные эксперимантальные данные подвергались матемзтичес-гмп статистической обработке по t-критерию Стьвденга и непарамет-рически'д »,етода^; Билкоксоиа- -laHH-i-Уитни <л Хи-квалрат.

РЕЗУЛЬТАТЫ МОЖДСВШЙ

1. вшгглв й?о:т№{ескш вкухи^ювзгся гипоисни на шет-ш гаь

TSvATHBHLS «ГСППЩИ liöoFA ШСШШ

На первом этапе исследования было проведено изучение по пове-дсичсоким тестам псзможных наругкиий функционирования ЦНС у потомства, подвергшегося ХВГ.

Показано, что пренатальное введение нитрита натрия в дозе 10 мг/кг не влияет на течение беременности, о чем свидетельствует от сутстеке различий в показателях прибавки зеса з течем:: беременности и выживаемости потомства по сравнению с "онтролей. У потомства этой группы рабочая память, оцененная в крестообразном

лабиринте, и обучаемость в Т-образкоы лабиринте не были нарушены, а воспроизведение навыков избегания на модели УРПИ было даже несколь \о улучшено.

Лля беременных животных, получавших нитрит натрия в дозе 40 мг/кг и в нарастающем порядке от 20 до 60 мг/кг (суммарная доза в обоих случаях 360 мг/кг) наблюдалась противоположная картина. Сравнение динамики прибавки в весе беременных крыс показало, что для животных этих групп этот показатель был значительно ниже и составлял к концу беременности 17,8 7. и 24,7 X соответственно, что было значительно ниже, чем у контроля - 33,4 X. Установлено повышение смертности крысят в первый месяц жизни для потомства этих групп кивоткых. Хроническая гемическая гипоксия нарушала координацию движений потомства по тесту"горизонтальная проволока", приводила к ухудшению еыспшх интегративных функций мозга в крестообразном лабиоинте, гиподинамии в "открытом поле" (табл.1). В ТЭй обнаружено исчезновение подгруппы Б, для которых время первой попытки избавления не превышало 15 с, а время подныривания более 15 с (табл.1).

В Т-образном лабиринте для потомства III и IV груш ЛВ достижения цели было увеличено и соответственно количество обученных животных уменьшено, что говорит о большей степени амнезии для этих групп шеотньк (табл. 2). При ^армировании УРПИ у животных 111 группы было уменьшено ЛВ захода в опасное отделение камеры с электродным полом при воспроизведении навыков через 2 недели после его выработки (рис.1). Следует отметить увеличение этого показателя до нанесения злектроболевого раздражения при выработке УРПИ у самцов всех подопытных групп. Это свидетельствует о том, что гемическая гипоксия вызывает отдаленные нарушения врожденного норкового рефлекса. На модели УРАЛ в челночной камере в группах II и III обучаемость самцов по показателю числа животных, достигших критерия обученности, была ниже, чем в контроле в течение всех дней выработки навыка

Следует указать, что нарушения общего поведения и условнореф-лекторкой деятельности в большей степени выражены у половозрелых самцов потомства, нежели у самок. В связи с этим в дальнейшей серии экспериментов поведенческое тестирование проводилось только на самцах.

Таблица 1

Влияние ХВГ на показатели поведения потомства

Шказатсли Дни Группы

I II III IV

самцы самки самцы самки самцы самки I самцы самки

■й'сло пересеченных квадратов алело вертикальных стоек исло заглядыва-шй в отвереткэ 1 Б 1 5 1 р 15,2 15,9 14,7 11,5 6,5 9,6 8,2 8,4 6,8 6,4 8,1 6,2 "ОТКРЫТОЕ 13,2 11,9 13,7 10,2 6,8 7,1 7,2 5,5 7,0 5,2 6,2 6,7 ПОЛБ" 15,6 16,0 12,8 13,8 8,7 6,7 9,3 7,8 6,9 6,3 3,7 4,3 5,9*А 8,3** 13,3 6,2* 3,9л 6,2 6,0 8,3 4,6 6,7 6,8 5,7

шсло зшвот!!ы>:,заце-швзгахся за проволоку (в Z) 'TOPIC 73,7 66,7 ЮНТАЛЫ1АЯ га 60,0 С8,8 ЮЮЛ0КА" 57,1 33,3 |3б,4 41,7

нсло заходов в ру~ аг.а в течение одного обхода KP! 5,5 5,3 £Т00ВРА31Ш 6,1* 5,6 ЛАБИРИНТ 5,0 5,0 6,2л 4,9

число животных в подгруппе (Z) А Б Р 0 TXT 3i я8,8 27,3 33,3 45,5 27,8 27,3 5,2 0,0 страполяцюуг 37,5 57,1 54,2 28,6 8,3 14,3 0,0 0,0 ШОГО ЮБАВЛЕ 85,7* 66,7 0,0л 33,3 0,0 0,0 14,3 0,0 лшя 70.0 18,2 20.0 63,6 10,0 9.1 0,0 9,1

¿йУвинние: 1 - контрольная группу П - 10 мг/кг, III - 40 мг/кг, IV - от 20 до 50 мг/кг NaNOj,, А - быстро подныривающие крысы; Б - мэд.-екно подныривающие крысы; Р - "рефлексивные" крысы; О - крысы, не ретавше задачу избавления, а - Р < < 0,05; - Р < 0,01 по критерию U (Вилкоксона-Шнна-Унтпи) относительно контрольной группы з&вотных того жа пола.

Таблица 2

Влияние ХБГ на формирование условного пищедобывательного рефлекса в Т-образном лабиринте у потомства

Группы Время достижения результата (с) 1 2 3 4 5 Количество обученных животных (X) 1 2 3 4 5

самцы I (П-19) самки (п-11) 131,3 58,0 36,3 26,2 14,5 112,1 108,4 65,9 68,8 59,5 0 0 26,3 47,4 89,5 0 0 0 9,1 18,2

самцы П(п=24) самки (р-17) 102,3 48,7 28,3 18,4 22,0 132,В 69,1 55,8 64,8 37,5 0 8,3 29,2 54,2 79,2 0 0 17,6 29,4 35,3

самцы Ш(п=7) самки (п=8) ***** 125,2 75,2 77,4 72,3 47,7 87,0. 72,2 109,5 98,7 98,0 на 0 0 0 0 28,6 ООО 16,6 16,6

самцы Щп=10) самки (п»11) * ** ** 98,3 57,1 81,1 83,3 50.9 88,1 73,5 101,8 72,4 61,2 * 0 20,0 30,0 50,0 50,0 0 9,1 9,1 36,4 45,4

Примечание: I - контрольная; группа, II - 10 мг/кг, III - 40 мг/кг, IV - от 20 до 60 ыг/кг 1, 2, 3, 4, 5 - дни обучения.

* - Р < 0,05; •** - Р < 0,01 по критерию и (Видкоксона-Манна-Уитни); «- Р < 0,05; ## - Р < 0,01 по критерию Хи-квадрат относительно контрольной группы.

Таким образом хроническая гемическая гипоксия вызывает отдаленные нарушения функционирования ЦНС у половозрелых крыс, нарушения общего поведения и условнорефяекторной деятельности наиболее выраяены при введении гипоксанта в постоянной дозе 40 мг/ кг ежедневно, тогда как при применении постепенно-нарастающих доз изменения были менее выражены, что, вероятно, связано с адаптацией к повреждающему фактору. Это послужило основой для выбора дозы нитрита натрия 40 мг/кг в последующей серии экспериментов при моделировании у потомства психопатологических последствий внутриутробной гипоксии.

Рис.1 Влияние ХВГ на выработку УРПИ у потомства крыс

2. BJffiffiOS УШШЧЕСТОЯ ГЕНИЧЕСКОЙ ГИПОКСИИ НА СОДЕРНАШК ЭНДОГЕННОЙ ГОШТ В Ы08ГЕ

Йавзстно, что нитриты вызывают серьезные изменения окислительно- восстановительных процессов и разрушение ГАМК-ергически/ гейронов (Реутов Е П. и соавт. , 1990; Hlbbs J. В et al. , 1987, .IJiitolcy W. , 1984; RomijriH. J. et al. , 1988). Учитывая представ-гения о валаой роли ГОМК, как компонента эндогенной системы адап-■ации к гипоксии (Оогро некая Р. У. , 1977), были проведены исслядо-

вания по определении уровня эндогенной ГОШ нри хронической гемической гипоксии. Шло установлено, что содержание эндогенной ГОЫР з мозге развиьащегэся плода в 2 раза больше, чем в зрелом мозге матери (табл. 3), что соответствует данным Бпеаа 0. К., ЬЬг1ву В. .1. (1979). Нами впервые показано, что в условиях однократного к хронического введения нитрита натрия в дозе 40 мг/кг имеются статистически значимые различия в содержании эндогенной ГОЫК в тканях головного мозга матери и мозга плода. Особенно показательны результаты, полученные при хронической гипоксии, при которой наблюдается снижение концентраций эндогенной РОМК: в мозге матери почти в 2 раза, а в мозге плода в 10 раз (Р<0,001). Следовательно, хроническая гемическая гипоксия истоЕрет содержанке эндогенной ГОМК преимущественно в шзге плода, который оказывается более чувствительным к гипоксическому воздействии.

Таблица 3

Уровень эндогенной ГОШ в шзге матери и плода крыс в условиях гемической гипоксии (мкг/гр).

группы мозг матери мозг плода I

I (контроль) 75,56 + 12,25 134,67 + 15,20

И (однократное введение NaN02) * 134,75 18,60 76,56 + 7,78

III (хроническое введение NaNOa) # 44,30 + 9,61 *** # 12,30 + 3,20

Примечание: * - Р < 0,05-, ** - Р<0,01; *** - Р < 0,001 относительно контроля; # - Р < 0,01 мееду II и III группами по t-критерию Стьюдента.

а ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ НАТРИЯ ОКСИВУТЙРАТШ НАРКШДО ОБЩЕГО ПОВЕДЕНИЯ И ВШЖХ ЮГТЕГРАТИШШХ ФУ1ШЩШ ЕОЗГА НО-ТШСТВЛ, ПОДВЕРГШЕГОСЯ ХНГ

Вышеуказанные результаты послужили основанием для изучения возможного лечебного эффекта натрия оксибутирата, являющегося нат-

- 13 -

риевой солью ГСМ, по принципу заместительной терапии.

Установлено, что пр»=натальное воздействие натрия окспбутирата предотвращает большинство нарушений внутриутробного развития и поведения пото* тва, вкзывае?лж гипоксией, в постнатальный период. Так, для потомства ГII и IV групп характерно увеличение рождаемости и выживаемости (рис, 2). Гипоксическое воздействие мало изменяло исходную активность в "открыток поле". Однако, анализ динамики угашения ориентироЕочно-ксследователъского поведения позволил выя; вить у гкппксического потомства нарушение привыкания, т. е. отношение показателей активности 1 к 5 дно обучения (рис.3). Прена-талькое ваедение натрия оксибугирата приводило к контрольному уровню и делало это прнвыкашо более глубоким, что ¡сак показано ранее характерно для действия ноотрспов (Островская р. У. и соавт., 1991).

В наших экспериментах установлено, что в "открытом поле" и в крестообразном лабиринте з контрольной группе преобладали крысы с ггавостороякей рогзцией (54,5Х). Поел? пренатального гипоксичесдо-го воздействия наблюдалось уменьшение этого показателя (36%). Натрия окскбуткрат приводил к его нормализации (50Z). Эги данные позволяют предположить, что пренатальная гипоксия нарукзет нормальное развитие негкполушарной асимметрии мозга, а натрия оксибутират монет коррепфовать это отклонение.

Показательны результаты ТЭИ, который проводился дважды - в - в 1,5-месячном и 4-месячном возрасте (рис. 4). Показано, что поведение 1,5-месячных крыс во всех исследуемых группах мало различалось меюду собой. При повторном тестировании через 2,5 месяца число безуспешных попыток избавления, ЛВ подныривания и выхода на сетку для животных II группы не изменялось, а для контрольной группы и животных III и IV группы уменьшалось. Неизменность стратегии поведения у тавотных II группы говорит о их неспособности использовать опыт избавления, полученный в 1,5-месячном возрасте. Натрия оксибутират, как в III так и в IV группе, предотвращал эту патологию, ускоряя избавление крыс из острой стресс-ситуации.

Антиамнеетическое действие пренатального воздействия натрия оксибутирата при хронической гипоксии было наглядно продемонстрировано на модели УРШ (табл.4). При выработке этого условного рефлекса наблюдалась тенденция к нарушению врожденного норкового реф-

№

Рис.2 Влияние пренатального воздействия натрия оксибутирать на рождаемость и выживаемость потомства, подвергшегося ХВГ

X

100

«

Рождаемость ГР<0,001 [.....PcO.OOl

Выживаемость ГР<0,05

ш

rv

контроль

нитрит натрия. 40 иг/кг, пренатально (ХВГ) ХВГ + натрия оксибутират (I раз в суткк) ХВГ + натрия океивуифЕГ (3 раяа в сутки)

С

Рис.3 Влияие пренатального воздействия натрия оксибутирата на поведение потомства, подвергшегося ХВГ, в'Ьткрытом пола"

число пересеченных квадратов

14

¡г to в

в «

*

о

число стоек

И ш

ЕЭ tea. С

I - Контроль

И - нитрит натрия, 40 иг/кг, пренатально (ХВГ) Ш -ХВР 4 натрия оксивутират (150 мг/кг 1 раа в сутки) IV -ХВГ 4 натрия оксиОутират (150 иг/кг 3 Газа в сугки)

** - отнаии-ге/ико П грулпы ♦ - относительно 1 дня

(Р < 0,01)

Рис.4 Эффект предатель ного воздействия натрия оксибутирата на потомство, подвергшееся ХВГ,

В ТЭИ (врем* вызсод« на сетку)

КОНТРОЛЬ

... _ р«.о,(»

ХВГ

XBT+Nn-rOUK (1 раз в сутки)

ХВГ+Nü-TOMK (3 раэа в сутки)

Wrffttffi (МуСУ

■ « - P<0,05 ■

-о» - p<0,01-

(C) 10

1,6 МЕСЯЦА ШИЗ * ИЕСЯЦА

—1 10

лекса, что проявилось в некотором увеличении ЛВ первого захода в темное отделение. Применение натрия оксибутирата в IV группе предотвращало эти изменения. Воспроизведение навыка через 24 часа и 2 недели после обучения показало ухудшение его сохранности у гипок-сического нелеченого потомства Препарат нормализовал процессы памяти или проявил тенденцию к их улучшению по показателям ЛВ захода в темное отделение. Через 24 часа после обучения число животных, так и не зашедших в "опасное" отделение камеры, которых можно считать полностью помнящими о болевом подкреплении, как среди интакт-ных животных, так и среди леченых натрия оксибутиратом, было значительно больше, чем среди потомства И группы. При воспроизведении навыка обучения через 2 недели после его выработки среди крыс II группы обученных животных совсем не обнаружено в отличие от животных III и IV групп. Эти результаты свидетельствуют о хорошей сохранности навыка обучения для леченых групп животных.

- IS -

Таблица 4

Влияние длительного пранатального воздействия натрия окспбу-тирата на формирование УРШ1 у потомства, подвергшегося ХВГ.

Группы Ш 1 2 3 Ш 12 3 % 2 3

I (п-20) ** it 29,5 155,3 122,* А* Л 149,9 12,0 44.2 80,0 58,8

П(п-8) 48,4 91,2 62,1' 130,3 37,9 112,9 37,5 0

IIКп-20) А* ** 41,9 145,4 136,6 А* 138,3 27,8 35,2 70,0 64,3

IV <п-18) 18,2 121,9 65,4 ** 159,9 37,4 78,5 50,0 25,0

Примечание: I - контрольная группа, И - ХВГ ( 40 ыг/кг Mai ¡Од,), Hi - ХВГ + натрия оксибутирах (150 ыг/кг 1 рал в сутки), IV - ХВГ + натрия оксибутират (150 мг/кг 3 раза б cjt-|си>. ЛВ - латентное время первого захода в "опасное" отделение камеры (с), ВП - время пребывания е "оп^з-ном" отделении (с), Z - количество обученных животных. 1 - первый день эксперимента, 2 - воспроизведение через 24 часа, 3 - воспроизведение через 2 недели. * - Р < 0.05; ** - Р < 0,01 по критерию U (Е'длкоксона-¡Лаяна-Уитни) относительно И группы. • Нарушение процессов обучения и памяти у потомства, подвергшегося ХВГ, на модели УРАН не обнаружено. Выявлена jsmoi тенденция к улучшению обучаемости для потомства, подвергшегося внутриутробной гипоксии и леченого натрия окскбутиратом. По-видимому, в данном случае это улучшение связано с ноотропньш эффедаоы натрпл с;;-сибутират- ( Трофимов С. С., 1686).

Как следует иэ полученных данных, для предатвршдений постгн-язкснческих психон^врологичеошх нарушений достаточно применения

150 мг/кг препарата один раз в сутки . Улучшение показателей для потомства, получавшего в перинатальный период развития оксибутират натрия три раза в сутки, наблюдалось только в отношении моторной асишетрии в тестообразном лабиринте и норкового рефлекса при выработке УРПЯ В остальных случаях показатели обеих исследуемых групп либо не отличались, либо были даже хуже. Возможно, это обусловлено еедативным дейстзием препарата, снижающим активность и, как следствие, потребление гскии беременными самками. Подтверждением этого может быть меньший прирост их массы с 12 по 18 день беременности по сравнению с контролем. Известно, что ограничение в пище беременных самок ведет к алиментарной и как следствие белковой недостаточности, что в свою очередь вызывает нарушения мнестичес-ких функций мозга (Jaisvai А.К. et al., 1989). По-видимому, при использовании натрия оксибутирата трижды в сутки его коррегиругаее действие вступало в противоречие с депримирующими свойствами.

Таким образом, натрия оксибутират, вводимый беременным крысам и?1 фоне созданной гипоксии, оказывает пололэдтелькое влияние на развитие потомства и проявляет антиамнестяческий эффект, улучшая когнитивные функции мозга потомства.

з. §тшсшиет1чшшЕ сшбшюсгй шит сяшбушрйта у ее-

РЕИЕШШХ КРИС

В свяли с обнаруженными фармакологическими эффектами натрия оксибутирата у беременных животных в норме и на фоне гипоксии представляло интерес исследовать его фармакокинетические характеристики в системе "мать-алацента-плод". Обоснованная оценка эффективности натрия оксибутирата с точки зрения фармакокшетических подходов требовала выявления его кинетических закономерностей в зравнительном аспекте у беременных и небеременных крыс, в условиях введения нитрита натрия и без него, однократного и курсового введения.

В результате проведенных исследовании'установлено, что аб~ :орбция натрия оксибутирата у беременных крыс протекает в 5 раз ¡ыстрее и значительно быстрее достигается его максимальная кон-(ентрация в крови по сравнению с неберемеиными. Установлено замедление его элиминации с улучшение процессов распределения в орфизме. Зто в свою очередь, полет способствовать быстрому наступле-

- le -

нию эффектов препарата, продолжительному и более выраженному проявлению его действия у беременных крыс.

При исследования влияния метгемаглоби^ообрззоватедл на фарыа-кокинетические закономерности натрия окоибуткрата у береыекных крыс в сравнении с штактныш беременными швотными было установлено, что однократное внутрибрюшиннсе введение нигшгга натрия оказывает выраженное влияние на процессы всасывания, распределения я трансплацантарного переноса препарата. Его влияние характеризуемся прежде всего значительным увеличением скорости всазьшания (Kabs) натрия оксиОутиратя из ЖКТ и времени достижения иа^скмальной концентрации (Ттах) б плазме крови беременных крыс и лучшим распределением 'Установлено, что процессы перехода .препарата (1Ü3, К34), в материнско-плацентарно-плодном компартмзнте, так да как и его элиминация (Kel) из плаценты, ткани и мозга плода протекают аначи-тельио интенсивнее (табл. 5). Несмотря на обнаруженные различия в фармакокинетических показателях натрия оксибутирата под влияш^м нитрита натрия, исследуемый прэпарат оказывает вираиеикое положительное воздействие на функцию центральной нервной систеж внутри-утробноразвиващегося плода, как это было подробно описано выше,

При сравнительном анализе фармакокинетики натрия О!*си0утират& в плазме матери при его однократное и курсовом введение как это еидно из данных таблицы б, наблюдается отсутствие явных различий в основных фарыакокинетических параметрах исследуемого препарата (Ке], Tl/2el, Vd и КйГ). Исключение составляют солее низкие величины площади под фармакскикетичеекой кривой (A'JC), шксшальной концентрации (Стах) и более высокое вначение плазменного клиренса (Clapp) при длительном введении натрия оксибутирата. Ото дает основание утверждать, что при продолжительном введении натриевой соли ГОЫК не происходит кумуляции препарата в организме беременных ктотных. Очезидно, такая закономерность объясняется фкзяга-хими-ческиии особенностями исследуемого препарата и его субстратной специфичностью. Это подтверждается результатами исследовали в условиях in vitro, где препарат в различной концентрации не связывается с белками плазмы крови и имеет крайне низкую липофильность. Отмечается незначительное ускорение плазменного клиренса (CLapp), снимание максимальной концентрации t Сгах) и значения площади "концентрация-врехи" (A!¡C) у беременных животных при длительном введе-

Таблица 5

Влияние шгарита натрия на фариако^нетичесюте параметры натрия оксибутирата в системе "мать-плацента-плод" после его однократного пероралького введения беременным крысам в дозе 150 мг/кг.

Бкочатериал

Шраметры Размерность Группы Плазиа Плацента Ткань Мозг

материнс- плода плода

кая

Kabs i/час I 2,99 - - -

II 11,25 - - -

!l/2abs час I 0,23 - - -

II 0,06 - - -

Kol 1/час I 1,06 10,72 8,00 4,77

II 0,98 22,55 11,56 11,30

Tl/2el час i 0,66 0,07 0,09 0,15

II 0,71 0,03 0,06 0,06

Kl 2 1/час I 0,094 - - -

II 0,178 - - - .

K21 1/час I 2,27 - - -

II 1,71 - - -

K13 1/час I 9,20 - - -

II 24,64 - - -

K34 1/час I 11,38 - -

II - 20,21 - -

Tmax час I 0,50 0,50 0,65 0,75

II 0,17 0,25 0,35 0,35

Cmax мкг/мл I 123,00 51,20 69,60 61,50

II 81,00 46,90 75,90 58,10

Clapp ЛАчас/кг I 0,62 - - -

II 1,29 - -

Vd л/кг I 0,58 - - -

II 1,32 - - -

ШТ час I 0,57 1,04 1,16 1,25

II 0,74 0,87 0,95 0,96

AUC час*мкг/мл I 449,80 67,70 96,30 90,80

.................j II 89,80 44,80 78,40 60,20

Примечание: I - без NaNO^, II - с NaNO^.

Таблица 6

Сравнительный анализ фармакокииетических параметров натрия окибутирата в плазме крови беременных крыс при его однократном к хроническом введении виутрь в дозе 150 мг/кг.

Параметры Размерность Однократное ................—i Хроническое

введение введение

Kabs 1/чае 1,92 2,76

Tl/2abs час 0,36 0,25

Kel 1/час 1,46 1,51

Г1/2е1 час 0,48 0,46

Tiiiax час 0,60 0,48

Си ЫКГ/ЫД 139,23 101,59

Clapp д*час/кг 0,66 1,08

Vd л/кг 0,45 0,32

ШТ час 1,05 1.03

AUG цас*ьэт/мл 227,95 139,55

нии препарата по сравнению с однократны},!. Полученные данные позволяют судить об отсутствии кумулятивных процессов при курсовом введении натрия оксибутирага в организме беременных животных.

зяшочаш

Полученные экспериментальные данные свидетельствует о чсы. что легкая степень хронической гипоксии (суммарная доза - 30 иг/кг) не оказывает существенного поврекдаквдего влияния на течение беременности и гысшие интегративнш функции ыоага потомстга, а но некоторым тестам дике улучшет коказатели,- Известно, что легкая форма гипоксии ьизцваег быстрое включение адаптационно-компенсаторно- приспособительных механизмов в организма матери (Уедведцев В. С. и соавт., 1989). Тренировка в виде повторной гнпо-Харичзской гипоксии половозрелых крыс удучигег их обучаемость и память и активирует синтез информационных макромолекул1^ Шерсон Ф. 3., Майзэ-лис 11 Я., 1959). Поскольку в наших опытах гипоксант вводился регулярно, едаднепное применение его в минимальной из использованных доз могло вести к ькдючани» защитных механизмов.

Для групп животных, получавших нитрит натрия в дозе 40 мг/кг и от 20 а нарастающем порядке до 60 мг/кг (суммарная доза в обоих случаях - 360 мг/кг) было характерно отставание в росте массы тела беременных кр'гс, повышение смертности крысят в первый месяц жизни, нарушение координации движений на "горизонтальной проволоке", ухудшение навыков обучения и воспроизведения на различных моделях. Вероятно, нарушения общего поведения и высших интегративных функций мозга потомства связаны с тем, что интоксикация нитритом натрия в перинатальный период вызывает повреждение определенных мозговых структур, таких как гиппскаш (Jsaaeson R. L., Fahey J.M., 1987), угнетает процессы окислительного фосфорилирования (Ажипа Я И., Реутов ЕЕ, Кашин Л. П., 19S0), нарушает развитие нейротранс-киттерных систем, ингибируя активность тирозин- триптьфангидрокси-лазы (Hender Т. et al. , 1977), утнетает электрическую активность головного мозга (Behroozi К., Robinson S. , 1972; Retnís 3., 1970; Walley Т., Flanagan М , 1987).

Нарушения общего поведения и условнорефлекторной деятельности . з большей степени выражены у половозрелых самцов потомства, чем у самок. Известно, что различные токсические воздействия в период беременности вызывают большие нарушения развития у самцов потоме- -тва, чем у самок (Jarairoto J. et al., 1991; Myslivecek J. et al., 1991). Судя по результатам наших исследований, это касается и воздействия такого патогенного фактора, как гемическая гипоксия.

Показано, что натрия оксиОутираг, вводимый в дозе 150 мг/кг с 12 по 18 дни беременности предотвращает большинство вызванных гипоксией нарушений внутриутробного развития и поведения потомства в постнатальный период: повышает показатели ровдаемостн и выживаемости потомства, восстанавливает координацию движений, устраняет развитие фушсционаяьной асимметрия мозга, снижает отдаленные нарушения обучаемости и памяти.

Установлено, что при ХВГ, вызванной нитритом натрия, уровень эндогенной ГОЖ в мозге плода снижается в 10 раз, а длительное введение лекарственного препарата натрия оксибутирата в перинатальный период устраняет возникающий дефицит эндогенной ГОМК. Зтот . впервые выявленный эффект, по-видимому, является важным звеном защитного действия натрия оксибутирата при изучаемой форме гипоксии. Ш, не исключена возможная роль других механизмов его действия,

выявленных ранее. Например, в условиях гипоксии он стимулирует транспорт электронов в дыхательной цепи и скорость фосфорилирова-ния АДФ в АТФ, повышая устойчивость тканей и организма в целом к гипоксическим состояниям (Хватова Е. М. , Мартынов Е В. , 1977) и способен предотвращать накопление лактата и аммиака, недостаток г лют амина в тканях (Островская Р. У., 1984). Еажную роль в механизме описанных эффектов натрия оксибугирата может играть выявленная ранее его способность стимуляции метаболизма информационных макромолекул, необходимых для реализации когнитивных функций мозга (Шрзоян С. А., 1980).

Обнаруженные различия процессов распределения и элиминации натрия оксибутирата у беременных и небеременных крыс вполне объяснимы с точки зрения физиологических изменений, происходящих в организме беременных. Эти различия характерны для большинства ЛП и во многом зависят от их физико-химических свойств. Исключение составляет пысокая скорость всасывания препарата из ЖКТ, что по-видимому объясняется жидкой лекарственной формой натрия оксибутирата

Увеличение времени достижения максимальной концентрации, констант скоростей перехода к элиминации в системе "мать-плацента-плод" натрия оксибутирата на фоне введения нитрита натрия, видимо, обусловлено опосредованные улучшением нитрита натрия на проницаемость клеточной мембраны за счет его Еазодилятаторного воздействия на сосуды внутренних органов у берэменнных животных, что характерно для нитритов (Кукес КГ., 1991). Проведенные фармакокинетические исследования позволили проанализировать распределение изучаемого препарата в системе "мать-плацента -плод" к сделать вывод об отсутствии накопления препарата в организме беременных крыс под воздействием нитрита натрия.

Относительно низка! концентрация натрия оксибутирата и высокое значение плазменного клиренса при его длительном введении возможно связано с индуцирувадш влиянием курсового применения препарата на ферментативную систему, в частности, НАД и НАЛН - зависимых ферментов, принимающих участие в превращении ГОШ в янтарный полуальдегид. Следовательно, при длительном введении натрия оксибутирата, препарат не кумулируется в организме беременных, а его эффекты могут Сыть несколько сглакакы за счет возможной активации ферментов, ыетаболизирунцих ГОМК.

- 23 -

огглзом, ь результате <^рмшаэдинам1«еских и фармакоки-эеаяувдаас «с^ело?з£;ч'« натрия окпибутирата • у беременных крыс, йо^гг^яшгса /ВТ, установлено его коррегирующре влияние на высшие гз-?зггжг»давж факцюг козга потомстз?, отсутствие кумуляции препарата яра его курсовом »поденпи и под воздействием нитрита натрия. Эея сотся^расегь полуеккшс даяишс £о изучению вейропог.елекческих я закономерностей дает основание етздить воп-

о это ре*с!«>ндзиии для проведения клинических испытания при рзелэгаг.гс 5ор*езс хронической внут?-®угробной гипоксшг плода

ЗЯЙи д I?

Готическая внутриутробная гипоксия, создаваемая у бере-лтнс гяутрибрязинным введением нитрита натрия, приводит к •сгс-азж^-й з даглп шссы тела беремаизых крыс, снижает показатель ггыта^'жсгм яатомотва, вызывает отдаяоняыэ нарушения когнитивных ъсггз / ¡половозрелых крис. Пайолс-е выраженные нарушения ^/^^шлхг: йялтевним введениям нитрита натрия в дозе 40 мг/кг.

г. г:л7гт омгййугирот (150 иг./яг) на фоне гипоксии нормализу-родаемостк и вьштеэешсти потомства, способствует ^высших интегративних Фгккидй шага потомства, коор-даззяк ^г.ад-л'й, коррекции функзвкйшьной асимметрии мээга и его .»''«ЙЗГ^ЮИТ ¡СЕКЦИЙ.

3. гначитвдьяо изменяет фармакоютнетические ха-рл^срлйз?5«* ^гатркя оксмбутирата, ускоряя всасывание препарата иэ 13&, «го эдимкнашто и улучлая процессы его распределения 3 {ЗДКЧЭНШа животных.

4. нитрита пагмэ» в качестве средства для создаем г^ъкческой гипоксии изменяет фармакокинетические ха-

натрия оксибутирата, что проявляется в ускорении вса-ив Ш, времена достижения максимальной котгент-Р^йя 5з Крови беременных крыс, процессов перехода и эйими-

^йй«» В >«1%рШясо-алах1егггарно-шюднои комплексе и в лучшем расп-» системе 'Ъать-шгацеита-плод''.

•5. С^^ктфльннй анализ ¡бармякскинетики натрия оксибутирата -с^адгч^^Лм "я дактальчом введении препарата беремечным крьюач яижш з&здэдзх различий в фврмакакшбтяческик показателях, чт"» Жй'кА«^? об отсутствии эффекта накопления препарата.

б. Хроническая гемическая гипоксия существенно снижает содержание эндогенной ГОЫК в мозге матери и особенно в моаге плода.

Длительное введение натрия оксибутирата в дозе 150 ыг/кг беременным крысам устраняет дефицит эндогенной ГОМК, возникающий вследствие гипоксии.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ЙО ТЕМЕ ДЙОСЕРТАЦЩ

1. Модификация газохроиатографического метода количественного определения натрия оксибутиррта в биоматериале //Хим. - фарм. журн. - 1992. -N 11-12. - С. 97-100. (Соавт.- Сариев А. К., Жйр-дев Е П., Островская Р. У. )

2. Проблема фармакокинетического мониторинга при беременности. //Тез. третьей Бсесоюз. конфер. по фармакокинетике "Современное состояние и перспективы развития фармако кинетики". - 11 -1990.- С. 24. (Соавт. - Жердев Е П., Сариев А. К. , Бойко С. С.)

3. Эффективность применения натрия оксибутирата в качестве корректора последствий хронической внутриутробной гипоксии' плода //Tes. 2-ой научн. конф, молодых ученых с участием деятелей науки стран СНГ и зарубежья "Человек-общэство-наука". - И 1993, - С. 102-103. (Соавт. - Сариев А. К., Трофимов С. С., Островская Р. У., Шрдев Е П. )

4. Фармакокинетические основы эффективного и безопасного применения лекарственных препаратов при беременности // Тез. 2-ой научн. конф. молодых ученых с участием деятелей науки стран СНГ и зарубежья "Человек-общество-наука", - Ы. 1993. часть 3. - С. 18 -19. (Соавт.- Сариев А. К., Иардев В. П., Вихляева Е. Ы., Асымбе-кова Г. У. )

5. Шведекческие последствия пренатальной гемической гипоксии у потомства крыс // Журн. высш. нерв. деят. - 1993. - N 3. ( принята в печать в соаьт. Трофимов С. С., Островская Р. У., Сариев А. К.. Кердев В. И )

6. Преиатальное воздействие натрия оксибутирата предотвращает нарушения обдаго поведения и памяти у потомства крыс, подвергшихся хронической внутриутробной гипоксии // Эксп. и клин, фарт-код. - 1893. - N (принята в печать в соавт. / Трофимов С. С., Островская Р. У., Сариев А. К., Еердев ЕЕ)