Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:Некоторые вопросы патогенеза атопического дерматита

На правах рукописи

У!

Петрищева Ирина Владимировна

НЕКОТОРЫЕ ВОПРОСЫ ПАТОГЕНЕЗА АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА

14.03.03 - Патологическая физиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

11 МАР 2015

Чита-2015

005560489

005560489

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования "Читинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации

Научный руководитель:

Цыбиков Намжил Нанзатович - доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации, заведующий кафедрой патологической физиологии

Официальные оппоненты:

Каде Азамат Халидович - доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО "Кубанский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации, заведующий кафедрой общей и клинической патологической физиологии Фалько Елена Валентиновна- кандидат медицинских наук, доцент, Инновационная клиника "Академия здоровья" ООО "Реабилитационный центр кинезитерапии", врач-дерматовенеролог

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова" Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва

Защита диссертации состоится '2015 г. в ✓^^^асов на заседании диссертационного^совета Д 208.118.01 при ГБОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия" Минздрава России (672090, г. Чита, ул. Горького, 39а).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГБОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (672090, г. Чита, ул. Горького, 39а) и на сайте: http://chitgma.ru/nauka/zashchita-dissertatsij7task4tem. у1е\у&1с1=14

Автореферат разослан 15 п

Ученый секретарь

диссертационного совета Д 208.118.01/ доктор медицинских наук, профессор_^ "7 И.Н. Гаймоленко

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Атопический дерматит (АтД) - это хронический дерматоз, имеющий сложную многофакторную патогенетическую основу с характерным фенотипом и типичными очагами поражения. Заболеваемость АтД может составлять до 5% населения земного шара, в 60% случаев впервые диагноз выставляется детям в возрасте до года, а среди всех хронических дерматозов на АтД приходится до 30%. Относительный показатель заболеваемости АтД среди подросткового населения за последнее десятилетие увеличился на 15,2 % [Н.Г. Короткий и соавт., 2003; O.A. Сидоренко и соавт., 2006, Н.С. Williamsetal., 2008]. Актуальность проблемы проявляется повсеместной распространенностью, высоким ростом заболеваемости, частыми рецидивами и формированием тяжелых инвалидизирующих форм болезни с учащением патологических изменений внутренних органов, приводящих к увеличению восприимчивости к различным инфекционным агентам, а также к трудностям в лечении, влияя на психологическое, физическое состояние человека и качество его жизни [M.Boguniewicz, D.Y.Leung, 2010; A.J. Mancini, К. Kaulback, S.L. Chamlin, 2008; R. Kapooretal., 2008].

Степень разработанности темы. Наибольший интерес в последние годы привлекают вопросы нарушения в клеточно-опосре-дованном звене иммунитета и внутриклеточное содержание цито-кинов [C.Roduit, 2011]. Известно, что в патогенезе АтД принимают участие антимикробные пептиды, в том числе а-дефензины нейт-рофилов, однако в современной литературе недостаточно данных о функцииантимикробных пептидов в механизме развития атопии. Немаловажную роль в патогенезе АтД могут играть вазотоничес-кие соединения, в том числе эндотелии-1, однако в литературе абсолютно нет сведений о точных механизмах его возникновения и о роли эндотелина-1 в патогенезе АтД, кроме того То11-подоб-ным рецепторам отводится важная роль в механизме развития заболевания, однако в литературных источниках представлено много противоречивых данных, что требует дальнейшего изучения их функции при аллергических дерматозах.

Проводимые исследования, демонстрирующие значение врожденного и адаптивного иммунитета, роль цитокинов и некоторых неспецифических факторов защиты при АтД в литературе изложе-

ны недостаточно и крайне противоречиво, что свидетельствует о важности тщательного изучения патогенеза данной патологии для подбора рациональной терапии, направленной на индивидуальный подход к каждому пациенту. На сегодняшний день возможности лечения АтД сводятся к симптоматическим и патогенетическим воздействиям и очень далеки от этиотропного лечения, поэтому проблема совершенствования методов и качества лечения пациентов с АтД еще долгое время будет оставаться актуальной.

Цель исследования. Определить роль про- и противовоспалительных цитокинов (1Ь-1 р, 1Ь-4,1Ь-8,1Ь-10,1Ь-17а, ШМ-у), эндо-телина-1, а-дефензинов, То11-подобных рецепторов (ТЫ1-2 иТЬК-4) и иммуноглобулинов (1вА, ^М, щЕ) в патогенезе АтД у подростков и взрослых. Задачи исследования:

1. Изучить динамику 1Ь-1р, 1Ь-4,1Ь-8,1Ь-10,1Ь-17а при АтД в период обострения и ремиссии у подростков и взрослых.

2. Выявить содержание Т-лимфоцитов, экспрессирующих 1Ь-4 и 1РЫ-у у подростков и взрослых, страдающих АтД.

3. Определить уровень эндотелина-1 и а-дефензинов у больных АтД.

4. Исследовать экспрессию То11-подобных рецепторов (ТЬЯ-2 и ТЫ1-4) моноцитами у подростков и взрослых в механизме развития АтД.

5. Изучить динамику 1§А, 1§Е в период обострения и ремиссии у пациентов с АтД.

Научная новизна. Расширены представления об основных звеньях патогенеза атопического дерматита у подростков и взрослых, определены их отличия в стадию клинического обострения и ремиссии при ограниченной и распространенной форме заболевания. Впервые показано, что уровень II,-1,7а у подростков и взрослых, страдающих АтД, в отличие от динамики других провоспалитель-ных цитокинов, максимально увеличивался в период ремиссии заболевания. Выявлено увеличение концентрации эндотелина-1 у пациентов в период обострения АтД, оййсано его участие в патогенезе заболевания и в формировании специфического критерия, характерного для данной патологии - белого дермографизма. Показано увеличение концентрации а-дефензинов у подростков и взрослых в период обострения АтД особенно при распространенной форме, описана роль а-дефензинов в патогенезе данного дерматоза.

Выявлена разнонаправленная динамика экспрессии То11-подобных рецепторов у пациентов в подростковом и взрослом периодах АтД. У подростков экспрессия ТЫ1-2 рецепторов моноцитами выше при ограниченной форме заболевания, однако концентрация То11-4 рецепторов увеличивается при распространенном кожном процессе. У взрослых, страдающих распространенной формой АтД, зафиксировано увеличение концентрации То11-2 рецепторов, при ограниченном процессе больше экспрессируются То11-4 рецепторы. Сформирована теория наследования АтД согласно возрасту пациентов, базирующаяся на корреляционных взаимосвязях ^Е и То11-подоб-ных рецепторов.

Теоретическая и практическая ценность работы. В результате проведенных исследований у подростков и взрослых с АтД выявлены и обоснованы ранее не известные звенья патогенеза данной патологии. Так, представлен цитокиновый профиль ограниченной и распространенной форм АтД у взрослых и подростков, что дополняет имеющиеся представления о патогенезе данной патологии. Учитывая динамику 1Ь-17а в исследуемых нами возрастных группах при АтД, можно использовать данный критерий в качестве диагностического признака фазы ремиссии заболевания. На основе данных, полученных при исследовании эндотелина-1, сформирован механизм белого дермографизма при АтД. Установлены функции эндотелина-1 в патогенезе заболевания, что расширяет представления о вазоспастическом звене патологического процесса. Получены новые данные об изменении концентрации а-дефензинови экспрессии То11-подобных рецепторов (ТЬЯ-2 и ТЬ11-4) моноцитами при АтД и определена их роль в патогенезе данного заболевания.

Внедрение результатов исследований. Результаты работы внедрены в структуру основной образовательной программы высшего образования на кафедре патологической физиологии Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования "Читинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения РФ. Основные положения работы применяются в педагогической практике кафедры патологической физиологии лечебного и педиатрического факультетов ГБОУ ВПО "ЧГМА" Минздрава РФ.

Апробация работы. Полученные результаты были доложены на Всероссийской научно-практической конференции с международ-

ным участием, посвященной 60-летию Читинской Государственной Медицинской Академии, октябрь 2013г.. г. Чита; И научно-практической конференции с международным участием "Человек: здоровье, медицина, экология", июнь 2014г., Барселона (Испания); Международной научно-практической конференции "Тенденции развития медицины", сентябрь 2014 г., г. Уфа; Международной научной конференции "Инновационные медицинские технологии", ноябрь 2014г., г.Сочи.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ в научных журналах, из них 4 статьи в ведущих научных рецензируемых журналах, определенных Высшей аттестационной комиссией Министерства образования и науки Российской Федерации.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 113 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4 глав, выводов и списка использованной литературы, включающего 196 источников, из которых 68 отечественных и 128 иностранных. Диссертация иллюстрирована 13 таблицами, 28 диаграммами и 1 рисунком.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Концентрация 1Ь-1р, 1Ь-8 в сыворотке крови увеличивается в период обострения при распространенной форме АтД, а 1Ь-4 и 1Ь-10 возрастает при ограниченном кожном процессе. Уровень 1Ь-17а у пациентов с АтД повышается в период разрешения клинических симптомов.

2. У подростков и взрослых при ограниченной форме АтД преобладают Т-хелперы, экспрессирующие 1Ь-4, а при распространенном процессе - Т-хелперы, экспрессирующие ШЫ-у.

3. У подростков и взрослых в период обострения АтД, особенно при распространенной форме, уровень эндотелина-1 и а-дефен-зинов увеличивается.

4. У подростков и взрослых с АтД выявлен разный характер экспрессии моноцитами То11-2 и То11-4 рецепторов. Так, экспрессия То11-2 рецепторов выше у подростков с ограниченной формой, тогда как у взрослых - при распространенном варианте заболевания. Экспрессия То11-4 рецепторов возрастает у подростков при распространенной форме заболевания, а у взрослых при ограниченном кожном процессе.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Клинико-лабораторное обследование пациентов, страдающих АтД, проводилось в период с 2011 по 2014 год на базе ГУЗ "Краевой кожно-венерологический диспансер" г. Чита. Под наблюдением находились 112 человек: 82 пациента в возрасте от 15 до 40 лет с АтД и 30 добровольцев, составивших контрольную группу сопоставимую с опытной группой по возрасту и полу. В опытную группу были включены 40 подростков в возрасте от 15 до 18 лет (48,7%) и 42 взрослых от 20 до 40 лет (51,2%). Средний возраст подростков составил 16,7 лет, взрослых - 32,2 года. В каждой возрастной группе было выделено 2 подгруппы: пациенты с ограниченной формой заболевания (20 подростков и 20 взрослых) и пациенты с распространенной формой АтД (20 подростков и 22 взрослых). Подростков и взрослых, страдающих АтД, обследовали дважды: в период обострения АтД и в период стойкой ремиссии, продолжавшейся не менее 2 месяцев.

Диагноз АтД устанавливался в соответствии с МКБ-10 и международными критериями диагностики Ханифина и Райка. В период обострения заболевания все пациенты получали стандартную терапию согласно периоду и форме заболевания. В период ремиссии пациентам рекомендовалось использовать эмолиенты.

Основные критерии, применяемые для включения пациентов в группу исследования: наличие диагноза АтД, выставленного не ранее, чем за два года до включения пациента в группу исследования; возраст от 15 до 40 лет; наличие подписанного добровольного информированного согласия на участие в исследовании; средняя степень тяжести АтД согласно шкале БСОНАО, частоте обострений 3-4 раза в год, длительности периода ремиссии не менее 2 месяцев; полное отсутствие сопутствующих заболеваний, в том числе хронических в стадию ремиссии.

Основные критерии исключения пациентов из группы исследования: отсутствие диагноза АтД или его верификация менее чем за два года до включения пациента в группу исследования; возраст до 15 лет и старше 40 лет; отказ пациента от подписания добровольного информированного согласия на участие в исследовании; легкая и тяжелая степени тяжести АтД согласно шкале БСОКАО и частоте обострений один или более 5 раз в год; наличие сопутствующей патологии (заболевания сердечно-сосудистой, эндокринной и других систем), в том числе хронических заболеваний в стадию ремиссии.

В качестве основного биологического материала для исследования служила венозная кровь и сыворотка крови. Все пациенты и лица контрольной группы включались в исследование с их письменного добровольного информированного согласия. Локальный этический комитет одобрил протокол исследования №35 от 11 марта 2012 года.

Исследование уровня цитокинов: IL-ip, IL-4, IL-8, IL-1Q, IL-17а, иммуноглобулинов проводили тест-системами фирмы "Век-тор-Бест" (г. Новосибирск), эндотелина-1 и а-дефензинов- тест-системами фирм "BIOMEDICA GROUP" (Германия) и "Hycult Biotech" (США) соответственно методом ИФА. Изучения Т-хел-перов с внутриклеточным содержанием IL-4 и IFN-y, экспрессию Toil-2 и То11-4 рецепторов на моноцитах проводили методом четы-рехпараметрического фенотипирования, используя комбинации моноклональных антител, результаты учитывали на проточном цитоф-люориметре Beckman'Coulter FC-500 (США), используя стандартные протоколы. В каждом образце анализировали не менее 104 клеток.

Статистическую обработку полученного материала проводили с использованием пакетов STATISTICA6.1 для Windows. Проверку на нормальность распределения количественных показателей проводили с использованием критерия Шапиро-Уилка. Так как не все изучаемые показатели подчинялись нормальному закону распределения, применяли непараметрические методы. Описательная статистика изучаемых параметров представлена медианой и межквартильным интервалом (25-го; 75-го прецентилей); сравнение независимых выборок с помощью U-критерия Манна-Уитни и Вилкоксона для парных признаков. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез принимался р< 0,05. Для описания диаграмм используются следующие обозначения:* - различия от группы контроля при р < 0,05; * * - различия от контроля при р < 0,001; Р1=Манна-Уитни по сравнению с контролем, Р2 = Манна-Уитни сравнение между группами, Р3= Вилкоксона сравнение между ремиссией и обострением;

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ 1. Концентрация IL-ip, IL-4, IL-8, IL-10, IL-17a

в сыворотке крови у подростков и взрослых с АтД

Концентрация IL-1 р выше в период обострения при распространенной форме АтД: у подростков (2,59 пг/мл) и взрослых (36,25

пг/мл). Значительное превышение уровня 1Ь-1Р, в 36 раз, по сравнению с показателями лиц контрольной группы наблюдается только у взрослых (Р2=0,000021) (рис. 1).

35 -

30 -

25 -

20 -

15 -

Ю ' 5 -» Р1** РЗ* Р1* Г— ЕГ Р1" РЗ"

□ Ограниченная форма

□ Распространенная форма

ЕЗ но нтроль

Подростки Подростки Взрослые Взрослые обострение ремиссия обострение ремиссия

Рис. 1. Концентрация 1Ь-1 (3 у подростков и взрослых при АтД

Увеличение концентрации 1Ь-8 зафиксировано в период обострения независимо от возраста пациентов и формы АтД. Уровень !Ь-8 при ограниченной форме заболевания уступает показателям, полученным при распространенном процессе. В период регресса клинических симптомов содержание 1Ь-8 в периферической крови как у подростков, так и взрослых заметно снижается(рис. 2).

Р1*

р;-« рз*

а Ограниченная форма

ш Распространенная форма

Подросши Подростки Взрослые Взрослые обострение ремиссия обострение ремиссия

Рис. 2. Концентрация 1Ь-8 в сыворотке крови у подростков и взрослых с АтД

На рисунке 3 показано, что пик синтеза 1Ь-17а проявляется в период ремиссии заболевания как в подростковом, так и во взрослом периоде при ограниченной и распространенной форме. У подростков, страдающих ограниченной формой АтД в ремиссию концентрация данного цитокина выше в 2,4 раза (Р3=0,077), а у взрослых в 2 раза (Р3=0,000196) по сравнению с контрольными значениями. В стадию проявления клинических симптомов АтД концентрация 1Ь-17а заметно снижается: у подростков при ограниченной форме заболевания в 3.2 раза, при распространенном процессе практически в 2 раза (Р1 =0,00007; Р2=0,044), однако у взрослых при ограниченной форме ниже в 2.6 раз, при распространенной - в 2,3 раза (Р1=0,000063). Синтез 1Ь-17а происходит только Тп-17 типа, трансформация которых из ТЬО происходит под действием 1Ь-23 и ТСтР-р, максимальный их синтез наблюдается в период обострения заболевания. Именно поэтому увеличение концентрации 1Ь-17а зафиксировано в стадию ремиссии атопического дерматита.

□ Органнченная форма

а Распространенная форма

□ Контр о-ТЬ

Подростки Подростка Взрослые Взрослые обострение ремкссня обострение ремиссия

Рис.3. Концентрация 1Ь-17а в сыворотке крови у подростков и взрослых с АтД

На рисунке 4 представлена динамика противовоспалительного цитокина 1Ь-4. В период ремиссии у взрослых и подростков данный цитокин не выявлен. Увеличение его концентрации наблюдается при наличии симптомов АтД. Следует обратить внимание, что у взрослых уровень 1Ь-4 самый высокий во время обострения при ограни-

ченной форме 9,02 пг/мл (Р 1=0,000061), при распространенной форме данный показатель ниже практически в 3 раза (3,55 пг/мл). У подростков с АтД при обострении заболевания показатели незначительно превышают контрольные данные.

1_

|

|

< 1 __

-г

рз**

□ Ограниченная форма

В распространенная форма

□ Кошроль

По;ц>осткн Подростки Взрослые Взрослые обострение ремиссия обострение ремиссия

Рис.4. Концентрация в сыворотке крови 1Ь-4 у подростков и взрослых с АтД

2,5

1,5

0,5

□ Ограниченная форма

В Распространенная форма

з Контроль

Р!' РЗ'

Подростки Повестки Взрослые Взрослые обострение ремиссия обострение ремиссия

Рис.5. Концентрация в сыворотке крови 1Ь-10 у подростков и взрослых с АтД

Самый высокий уровень 1Ь-10 наблюдается у подростков с ограниченной формой заболевания при обострении клинических проявлений (2,19 пг/мл), у взрослых концентрация ¡НО выше в период обострения и примерно одинакова при ограниченной (1,40 пг/мл) и распространенной форме (1,42 пг/мл) АтД. В ремиссию содержание данного цитокина в сыворотке крови снижается относительно контрольных значений (рис.5).

По результатам наших исследований выявлено, что динамика цитокинов у подростков и взрослых подвержена определенным закономерностям: уровень цитокинов выше в период обострения при распространенной форме, чем при ограниченном процессе. Исключением явился 1Ь-17а, его концентрация возрастает при разрешении клинических симптомов АтД.

2. Содержание лимфоцитов, Т-хелперов, в том числе экспрессирующих 1Ь-4 и №N-7 в сыворотке крови

у подростков и взрослых с АтД Абсолютное содержание лимфоцитов в период ремиссии у подростков и взрослых, как при ограниченной, так и при распространенной форме заболевания ниже контрольных значений. У взрослых в период обострения наблюдается превышение общего количества лимфоцитов независимо от формы заболевания. В подростковом периоде при вовлечении в патологический процесс большей площади кожи увеличивается и общее количество лимфоцитов. В абсолютных показателях у взрослых с АтД при ограниченной и распространенной форме общее количество Т-хелперов в сыворотке крови снижается в период ремиссии, однако остается выше контрольных значений. У подростков с ограниченной формой заболевания абсолютное содержание Т-хелперов увеличивается в период ремиссии, а у пациентов с распространенной формой уменьшается.

Абсолютное содержание в сыворотке крови Т-хелперов, экспрессирующих №N-7 как у взрослых, так и у подростков независимо от распространенности кожного процесса значительно превышает данные полученные в контрольной группе. Наибольшие значения Т-хелперов, экспрессирующих №N-7, получены у взрослых с распространенной формой заболевания. Уменьшение концентрации данных клеток в абсолютных показателях наблюдается в период ремиссии заболевания (рис.6).

□ Ограниченная форма в Распространенная форма 3 Контроль

Рис. 6. Абсолютное содержание Т-хелперов с ШЫ-у в сыворотке крови у подростков и взрослых с АтД

У подростков и взрослых с АтД количество Т-хелперов, эксп-рессирующих 1Ь-4 при ограниченной форме процесса превалирует над показателями при распространенном кожном процессе. У взрослых в период ремиссии, количество данных клеток увеличивается, превосходя контрольные значения, однако у подростков с ограниченной формой АтД в ремиссию выявлено снижение уровня Г-хел-перов с 1Ь-4 (рис. 1).

45 40 35 30 25 20 15 10 5

Полостей Подростки Взрослые Взрослые обострение ремиссия обострение ремиссия

Н Распространенная форма

И Контроль

□ Ограниченная форма

0

Подростки Подростки Взрослые Взрослые обострение ремиссия обострение ремиссия

Рис.7. Абсолютное содержание Т-хелперов с 1Ь-4 в сыворотке крови у подростков и взрослых с АтД

Нами показано, что у пациентов с атоническим дерматитом независимо от возраста общее количество лимфоцитов выше, чем у лиц контрольной группы, аналогичная динамика характерна для Т-хелперов. У подростков и взрослых при ограниченной форме АтД уровень Т-хелперов, экспрессирующие 1Ь-4, выше, чем Т-хелперов, экспрессирующих 1РЫ-у. При распространенном процессе АтД выявлена обратная динамика. Это обусловлено тем, что при распространенной форме АтД происходит истощение Т-хелперов, экспрессирующих 1Ь-4, в виду большей площади очага поражения.

3. Концентрация эндотелина-1 у подростков и взрослых с АтД У взрослых и подростков, страдающих АтД, прослеживается схожая динамика эндотелина-1 (рис. 8). В период обострения заболевания концентрация эндотелина-1 выше результатов, полученных в контрольной группе. При разрешении клинических симптомов уровень эндотелина-1 заметно снижается. На наш взгляд, проявление белого дермографизма связано именно с увеличением концентрации эндотелина-1, являющимся мощным вазоконстриктором, а так же с дисфункцией эндотелия сосудов. Вероятнее всего снижение концентрации эндотелина-1 при разрешении клинических симптомов способствует улучшению микроциркуляции в сосудах кожи.

О Ограниченная форма

^ Распространенная ферма

0 Контроль

Подростке Подростки Взрослые обострение ремнссня обострение

Рис. 8. Содержание эндотелина-1 в сыворотке крови подростков и взрослых с АтД

Нами впервые исследован эндотелии-1 у подростков и взрослых с АтД. Динамика эндотелина-1 в разных возрастных группах аналогична. Его уровень повышается в стадию обострения АтД, особенно при распространенной форме. Выявлено, что при разрешении клинических симптомов заболевания концентрация эндотелина-1 в сыворотке крови снижается.

4. Уровнь а-дефензинов у подростков и взрослых,

страдающих АтД У подростков и взрослых с ограниченной формой АтД концентрация а-дефензинов в период ремиссии уменьшается (рис. 9). При распространенной форме заболевания уровень данного показателя является наиболее высоким независимо от возраста пациентов. При разрешении клинических симптомов при распространенной форме концентрация а-дефензинов в периферической крови снижается. Увеличение уровня а-дефензинов, возможно, связано с воспалительным процессом в коже и дегрануляцией нейтрофилов и/или наличием бактериального агента (S. aureus). Эти сдвиги, возможно, приводят к гипоксии структур кожи, что сопровождается угнетением функций врожденного иммунитета. По данным современной литературы известно, что у пациентов с АтД персистенция S. aureus выше, чем у здоровых людей.

□ Ограниченная форма Э Распространенная фор:.* а и Контроль

Рис. 9. Содержание а-дефензинов в сыворотке крови подростков и взрослых с АтД

Нами показано, что уровень а-дефензинов как у подростков, так и у взрослых повышается в период обострения заболевания, особенно при распространенной форме. В ремиссию концентрация а-дефензинов снижается.

5. Экспресиия ТЫ*-2 и I I К-4 рецепторов моноцитами у подростков и взрослых с АтД При ограниченной форме заболевания у подростков и взрослых выявлено усиление экспрессии ТЬК-2 рецепторов моноцитами в период ремиссии. У взрослых, страдающих АтД концентрация ТЬЯ-2 рецепторов ниже, чем у подростков. При распространенной форме в подростковом периоде уровень данного рецептора также увеличивается в ремиссию. У взрослых с распространенной формой патологического процесса в ремиссию экспрессия ТЫ1-2 рецепторов моноцитами снижается (рис. 10).

300

□ Ограниченная форма

250

0

Повестки Погростш Взрослые Взрослые обострение ремиссия обострение ремиссия

Рис. 10. Уровень экспрессии ТЬЯ-г (абс.) у подростков и взрослых с АтД

200 150

@Распространенная форма

ш Контроль

У подростков с ограниченной формой заболевания экспрессия ТЬЯ-4 рецепторов усиливается в период ремиссии, при распространенной форме - в период яркой клинической симптоматики (рис. 11). У пациентов во взрослом периоде АтД при ограниченной форме уровень ТЫ1-4 рецепторов выше при обострении кожного процесса, при распространенной - в ремиссию.

□ Огрзшпенная форма ® Распространенная ферма В Контроль

Подростка Повестки Взрослые Взрослые обострение ремиссия обострение ремиссия

Рис. 11. Экспрессия ТЬЯ-4 (абс.) моноцитами у подростков и взрослых с АтД

У подростков и взрослых выявлена разнонаправленная динамика экспрессии То11-2 и ТЫ1-4 рецепторов моноцитами. На наш взгляд, это обусловлено различными лигандами для данного вида рецепторов.

6. Показатели гуморального иммунитета у подростков и взрослых с АтД

Нами исследована концентрация ^А, ^М, ^Е у больных с АтД и проведена корреляционная взаимосвязь с факторами врожденного иммунитета. У всех пациентов с АтД увеличена концентрация ^Е по сравнению с контрольными значениями. Кроме того, у пациентов с АтД выявлена дйсгаммаглобулинемия: снижение концентрации ^А. кО и значительное увеличение уровня 1«Е, что свидетельствует о роли в патогенезе АтД аллергического компонента.

У подростков с ограниченной формой в стадию ремиссии АтД нами была обнаружена корреляционная связь 1§р с То11-подобными рецепторами, составляющая -0,78. У лиц контрольной группы и пациентов старше 20 лет подобных корреляционных связей нами не выявлено.

В настоящее время остается открытым вопрос о первопричине АтД. Базируясь на данных современной литературы и результатах проведенного исследования, мы предполагаем, что в основе патогенеза АтД лежит генетическая предрасположенность, которая реали-

зуется при определенных условиях, оказывая влияние на дифференци-ровку кератиноцитов и наивных Т-лимфоцитов. При запуске процессов дискератоза увеличивается синтез 1ИР, что способствует усилению синтеза (З-кератина, вызывая гиперкератоз, шелушение и сухость кожи. Безусловно, это приводит к увеличению рН кожи, снижению защитных механизмов и росту условно-патогенной флоры, способствуя персистенции микроорганизмов на поверхности кожи. В ответ на данные изменения усиливается синтез антимикробных пептидов, активация фагоцитоза и экспрессия То11-2 рецепторов. Обладая избыточным положительным зарядом а-дефензины, взаимодействуя с мембраной клеток, вызывают цитолиз. В результате гибели клеток кожи образуются аутоантигены, активирующие экспрессию моноцитов, То11-4 рецепторов и запуская аутоиммунные процессы. Кроме того 11.-1 р привлекает иммунокомпетентные клетки в очаг поражения, что безусловно приводит к увеличению медиаторов острой фазы воспаления, способствующих кожному зулу и образованию экскориации, в ответ на которые в коже усиливается синтез медиаторов острой фазы воспаления, таким образом, реализуется зудорасчесочный цикл. Несомненно, активация воспаления и вазодилятация приводят к увеличению площади поражения кожных покровов. С другой стороны эндотелиальная дисфункция вызывет увеличение концентрации эндотелина-1 и возоконстрикцию, которая ограничивает очаг воспаления и препятствует поступлению трофических веществ, защитных факторов и кислорода, в последующем-гипоксия, приводящая к активации перикисного окисления липидов и гибели клеток. Кроме того, у пациентов с АтД возникает стойкий белый дермографизм, который реализуется через готовность эндотелиоцитов к гиперсинтезу эндотелина-1 в ответ на механическое раздражение.

Несомненно, пусковые факторы влияют на дифференцировку наивных Т-лимфоцитов. При избытке Т-хелперов 2 типа увеличивается уровень 1Ь-4 в сыворотке крови, который является основным стимулятором пролиферации В-лимфоцитов и синтеза взаимодействующего с тучными клетками кожи способствуя их дегрануляции и увеличению медиаторов воспаления. Основным маркером Т-хелперов 1 типа является ПТЧ-у, вызывающий апоптоз кератиноцитов. Баланс между Т-хелперами 1 и 2 типа регулируется 1Ь-10, кроме того данный цитокин усиливает хемотаксис нейтрофилов, а следовательно и синтез антимикробных пептидов. Безусловно, важную роль в патогенезе атипического дерматита играет 1Ь-17а, поддерживая аутоиммунный процесс. Взаимосвязь изучаемых нами показателей мы представили в схеме патогенеза (рис.12).

Генетическая ггредраспоиаженаость + условные ф

Местный процесс

Повреждение жерахиноцитов

ИЛР*

#

Нарушение барьерной функции

Персистеиция микроорганизмов

Воспаление

Ажтавация ТоИ-2*

Кожный

Системный кровоток

тьо

№ 1*

ТЫ7 И--17а*

ЕЬ-4»

Щг

В-шфщия Апоптоз Аугоимму ЛЬ «ерюиноци нный фЕ» гив процесс

«здваторюв острой фазы вослсалеявя дисфункция

Ваэоспяэм

счета шкш&шшв

Вторичное повреждение щищшоцкш

Активация ТЫ1-4*

Примечание: * - собственные данные

Рис. 12. Схема патогенеза АтД

выводы

1. Максимальная концентрация II,-17а зафиксирована при разрешении клинических проявлений АтД как у подростков, так и у взрослых, особенно при распространенном кожном процессе. Однако содержание 1Ь-1Р и 1Ь-8 увеличивается в сыворотке крови в период обострения у больных с распространенной формой заболевания, в то время как уровень 1Ь-4 и 1Ь-10 возрастает при ограниченной форме АтД.

2. Концентрация эндотелина-1 и а-дефензинов увеличивалась в период обострения заболевания: наибольшие показатели эндо-телина-1 и а-дефензинов регистрировались при распространенной форме АтД.

3. При ограниченной форме АтД доминирующими являлись Т-хел-перы, экспрессирующие 1Ь-4, а при распространенном кожном процессе - экспрессирующие №N-7.

4. Динамика экспрессии То11-подобных рецепторов у подростков и взрослых имеет существенные различия. У подростков при ограниченной форме заболевания значительнее усиливается экспрессии ТЬЯ-2, а при распространенной - ТЬЯ-4. У взрослых, страдающих АтД, по сравнению с подростками, динамика ТЬЯ-2 и ТЫ1-4 носит прямо противоположный характер.

5. У пациентов с АтД независимо от возраста определяется дис-гаммаглобулинемия: снижение уровня ^М, ^ и увеличение 1^.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Увеличение концентрации 1Ь-17а в период разрешения клинических симптомову пациентов с АтД может служить маркером фазы ремиссии АтД, а патогенетическая терапия АтД должна быть направлена на селективную элиминацию 1Ь-17а.

2. Исследование концентрации эндотелина-1 у пациентов с АтД позволит выделить группу риска пациентов с эндотелиальной дисфункцией и принять меры по ее профилактике.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Публикации в ведущих научных рецензируемых журналах, определенных ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации:

1. Динамика интерлейкинов при атоническом дерматите у взрослых в период обострения и ремиссии [Электронный ресурс] / И.В. Петрищева [и др.] //Забайкальский медицинский вестник. - 2014.

- № 4. - С. 101- 104 . - Режим доступа: http://medacadem.chita.ru/ zmv (30.12.2014)

2. Петрищева, И.В. Концентрация цитокинов в сыворотке крови у больных атоническим дерматитом /' И. В. Петрищева // Врач -аспирант. - 2014. - №5(66). - С. 69-73.

3. Петрищева, И.В. Современные теории патогенеза атопического дерматита (обзор литературы) [Электронный ресурс] / И.В. Петрищева // Забайкальский медицинский вестник. - 2014. - № 4. - С. 169- 177. -Режим доступа: http://medacadem.chita.ru/zmv (30.12.2014)

4. Уровень эндотелина-1 и а-дефензинов у пациентов с атопичес-ким дерматитом / И. В. Петрищева [и др.] // Клиническая дерматология и венерология. - 2015. -№1. - С. 50-56.

Прочие публикации:

1. Содержание интерлейкина-4 и интерферона-гаммау пациентов с атопическим дерматитом / И.В. Петрищева [и др.] //Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины : материалы конф. ( 2013 год, Чита). - Чита, 2013. - С. 125 - 126.

2. Петрищева, И.В. Уровень цитокинов у больных атопическим дерматитом / И.В. Петрищева // Академический журнал западной Сибири Издательство: М-центр (Тюмень) ISSN: 2307-4701. - 2014.

- №3 (52). - С. 80-81.

3. Петрищева, И.В. Уровень экспрессии TLR2 и TLR4 рецепторов моноцитами, концентрация эндотелина (1-21) у подростков с атопическим дерматитом и их роль в патогенезе данного заболевания / И.В. Петрищева, H.H. Цыбиков, Е.В. Фефелова // Тенденции развития медицины: сборник статей международной научно-практической конференции. - Уфа: Аэтерна. - 2014. - С. 29-32.

4. Уровень а-дефензинов (1-3) у пациентов с атопическим дерматитом / И.В. Петрищева [и др.] // Межд. жур. приклад, и фундамент. исследований. - 2014. - № 10. - С. 165-166.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АтД - атопический дерматит

1Е - иммуноглобулины

1Ь - интерлейкины

1Ш-у - интерферон-гамма

НЬА - главный комплекс антигенов гистосовместимости

БСР - стволовой клеточный фактор

ТЬ - Т-хелперы

ТОБ-р - трансформирующий фактор роста бетта

ТЫ^ - То11-подобные рецепторы

ТОТ-а - фактор некроза опухоли альфа

Лицензия ИД №03077 от 23.10.00. Подписано в печать 17.02.2015. Бумага офсетная. Гарнитура Times New Roman Формат60 х 84 V16. Усл. печ. л. 1,0 Тираж 100. Заказ№ 23/2015.

Отпечатано в редакционно-издательском центре ЧГМА 672090, Чита, ул. Горького, 39-а.