Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Нарушение иммунологической реактивности при неспецифическом язвенном колите и болезни Крона и возможности иммунокоррекции

КИЕВСКИЙ орда Л ТРУДОБОГО КРАШОГО ЗНАМЕНИ ШДИЦИНСКДО ИНСТИТУТ ИМЕНИ ЛКДЕРЖА. А.А.БОГОМОЛЬЦА

На правах рукописи

БЛАШЕНКО Ирина Леонидовна

НАРУШЕНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИШОСТИ ПРИ НБСПЕЦИЙИЧЕСКОМ ЯЗВЕННОМ КОЛИТЕ'И БОЛЕЗШ КРОНА И ВОЗМОЖНОСТИ ИММУНОКОРРЕКЦИИ

14.00.36 - Аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание, ученой степени кандидата биологических наук

КИЕВ - 1991

Работа выполнена в Киевском ордена Трудового Красного Знамени медицинском институте им.академика А.А.Богомольца

Научный руководитель - доктор медицинских наук, профессор

Передерий В.Г.

Официальные оппоненты - доктор ¡.едииинских наук, профессор

Гвллинг Э.В.

доктор медицинских наук, профессор Сахарчук И.И.

Ведущая организация - институт иммунологии,МЭ СССР

13.30 на заседании специализированного совета Д.088.13.06 при Киевском медицинском институте (252004, г.Киев-4, проспект

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Киевского медицинского института.

Защита диссертации состоится

Победы, 34, санитарно-гигиенический факультет, ауд.2).

Автореферат разослан 76" %ялсг/г-п?£\ 1991 г.

Ученый секретарь специализированного совета, доктор ыедишноких наук,

В.Г.Бордонос

- ■ j ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТУ

. л. ;

! Актуальность теш

Проблема эффективной профилактики и лечения неспеиифических воспалительных заболеваний толстой кишки (НВЗТК) является одной из наиболее актуальных и сложных в современной гастроэнтерологии. Это связано с широким распространением воспалительных поражений толстой кишки, усиливгжцимсл ростом их удельного веса по отношении к остальным, сходным заболеваниям, тенденцией к увеличению заболеваемости людей молодого, наиболее трудоспособного возраста.

• Данные многочисленных работ последних лет свидетельствуют о том, что икаунопатологйческие процессы играют существенную роль з генезе НВЗТК, наряду с психоэмоциональными нагрузками и экзогенными факторами, нарушающими систему иммунологической защиты (Дубинин A.B. и соавт., 1987; Златима А.Р., 1989; Davidssn в. 1988). В настоящее время не вызывает сомнения тот факт, что пищеварительная капал представляет собой орган, принимающий участие а реализации гдастных юдлуннык реакций (Сазанова Н .Е. п соавг., IS87; Увекоэа H.A., 19Ш; Chu Ksdaan ' 1987).

; В то кэ время одогие вопроси отаологил и патогенеза HE333Î остгэтся кореэекиЕЛ), что затрудоет дифференциальную диагностику различных поражения толсто!! кшки и назначение адекватаих ке-тодоз яетгения.

Вродояулэт оставаться неясной гэажгосвязь ьээологическоЯ ' форта я тязееегл течения' заболеваний со степеньо нарушений различных эзеиьеа имиу! этета, э особенности местной ииаунноЯ реакции.

♦

Несошешо актуальна выработка адекватных »¡формативных иммунологических критериев для прогноза дальнейшего течения заболеваний я оптимизации лечебных зозцзйстгяй.

Цель работы

Основной келью работы явилось изучение причин и особенностей нарушений состояния иммунной системы при неспецифическом язвенном колите и болезни Крона, необходимых длл совершенствования способов их иммунотерапии.

Основные зацачи исследования

1. Провести сравнительный анализ состояния клеточного, гуморального и местного иммунитета у больных неспеиифическим язвенным колитом и болезнью Крона в зависимости от формы и тяжести течения заболеваний.

2. Выделить совокупность показателей, обладающих диагностической и прогностической значимость«) для оценки тяжести и дифференциальной диагностики больных неслешфичесним язвенным колитом и болезнью Крона. .

3. Определить эффективность применения иммуномодулятора диу-цифона в комплексной терапии больных неспецифическим язвенным колитом и болезнь» Крона.

Научная новизна работы

Уточнены особенности и патогенетическое значение вторичного Т-клетпчного иммунодефицита при- неспедафическоы язЕенном колите -и болезни Кроне.

У больчых НВЗТК установлено нарушение соотношения лимфоцитов и иммуноглобулинов в слизистой оболочке толстой кишки, а также резкое увеличение продуктов катеболического распада клеточных реиег.ггров а-белков в острой фазе заболевания.

Проведена сравнительная оценка эффективности иммуномодуля-торов тималина и даушфона при НВ31К.

Обоснована целесообразность применения при неспешфичзсном язьелноа колите и болезни Крона идаукомсдуиятара диушфоил.

Практическая значимость работы

На основе установленных особенностей иммунного гомеостаза при НВЗТК разработан ряд научных положений, открывающих новые ' возможности совершенствования диагностики и иммунокоррекции при неспецифическом язвенном колите и болезни Крона. Определены иммунологические критерии опенки тяжести течения неспеиифического язвенного колита и болезни Крона. Обосновано применение при НВЗТК иммуномодулятора диуцифона.

Внедрение результатов исследования в практику

Методы оценки иммунного статуса больных неспеиифичзским язвенным колитом- и болезнью Крона, а также иммунокоррекция путем введения диуцифона в схему общепринятого лечения внедрены в работу Республиканского прокгологического центра, гастроэнтерологического и проктологического отделений 1[РКБ Радянского района г.Киева. Способ'медикаментозной ишунокоррекшш при неспепифи-ческих воспалительных заболеваниях толстой кишки, распространенный в виде г информационного пястка, предложен для внедрения в практику работы прэктологических й гастроэнтерологических отделения районных и областных больниц.

Основные пояоаеняя. вшоси"ыэ на защиту

При неспешфичееком язвенной колите и болесни Крона набяв-давтся знтеатзлыгав нарушения гвлмушого гомеостаза;

степень этих нарушений по ряду показателей коррелирует с тяжестью заболеваний;

использование иммуномодулятора диуцифона в комплексной терапии больных иэспешфкчэскгы язвенным колетом и болезнью Крона способствует нормализации иммунных показателей и ускоряет сроки достижения клинической ремиссии о тих заболеваний.

Апробация работы

Материалы работы доложены на конференции молодых ученых Киевского медицинского института (Киев, 1939); ежегодной научной сессии ЦНИИ гастроэнтерологии (Москва, 1990).

Публикации

По маг'ериаяаы диссертации опубликовано 7 печатных работ, изданы 1 методические рекомендации и I информационный листок, подано 2 заявки «а изобретение.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 202 страницах машинописного текста, и включает введение, обзор литературы, материал и метода после- * дования, три главы собственных исследований и их обсуждение, общее заключение, выводы и практические рекомендаций. Диссертация иллюстрирована 56 таблицами и II рисунками. Библиографический указатель содержит 122 работы отечественных и 193 - иностранных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Клиническая характеристика больных и методы исследования

В процессе проведения работы было обследовано 79 больных не-спеиифическкы язвенным кояитоы й 52 - болезнью Крона толстой котки в дииашке лечения и условиях проктологического отделения ЦРКБ Радянского района г.Киева и контрольная групна, состоящая из 30 клинически здоровых лип.

При постановке диагноза использовалась классификация Федог рова В.в. (1962), согласно которой больные подразделялись по распространенности, характеру течения, продолжительности и тяжести заболевания. Применялись клинические, лабораторные и инструментальные методы исследования.

. 5

Всем больным проводилось двухразовое комплексное иммунологическое обследование, соответствующее требованиям Меморандума ВОЗ (1981), включающее :

1) количественное оценку Т- и B-систем иммунитета методом Е- и ЕАС-розеткообразования;

2) осуществление нагрузочных тестов Е-розеткооб разорения с иммуномодуляторами;

3) изучение функциональной активности Т- и В-лим^оидных популяций с помощью реакции бласттрансформации и определения сек-рэшш сывороточных иммуноглобулинов;

4) изучение факторов неспецифической резистентности путем определения бактерицидной и метаболической активности полиморфно-ядерных лейкоцитов;

5) идентификацию Т- и В-лимфсиитов и их основных субпопуляций с помощью монокяональных антител (МКА) в периферической крови и слизистой оболочке толстой кишки;

6) определение, соотношения тканевых иммуноглобулинов в слизистой оболочке толстой к;янки;

7> количественную оценку внеклеточных фрагментов рецепторов пиифоидных клеток (в-белков) в сыворотке крови.

Количественную оценку Т- и ^лимфоцитов осуществляли по микроиетоду, разработанному Бычковой Н.Г. и соавт.(1981); функциональную активность Т-лиыфоиитэв оценивали в реакцил бласттрансформации с несрецифическим митогеном ФГА в микромодификаиии, предложенной Копелы» И.И. и соавт. (1972) и Чернушенко Е.Ф. и-соавт. (1978). Оценку функционального состояния В-лимфоиитов проводили, эпрзцеляя уровень основных классов сывороточных иммуноглобулинов «еюдом простой радиальной иммунодиффузии ( Mancini а. o.a. , £965). Дл.т определения чувствительности лимфоцитов к кммуномоду-пяторам in vitro использовалась микромодификашя нагрузочного

теста, предложенного Бычковой Н.Г. (1985). Оценка состояния не-спешфической резистентности организма проводилась по методу Чернушенко и соавт. 11978) и lark в.Н. (1969). Исследование фрагментов рецепторных белков осуществлялось по методу Бар-товой Л.М. и соавт. (1989). Статистический анализ материала проводился по методу Мониевичюте-Эрингене Б.В. (1964). Различия принимали значимыми при р-г0,0й.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Обследовано 79 больных неспеиифическим язвенным колитом и 52 пациента с болезнью Крона толстой кишки. Клиническая характеристика проводилась в зависимости от распространенности, характера течения, продолжительности и тяжести заболевания. Средний возраст больных неспепифическим язвенным колитом составил 39,3 года, а пациентов с болезнью Крона. - 28,2 г. Среди больных неспепифическим язвенным колитом (НЯК) заболевание протекало остро только у 5 больных, а у пациентов с болезнью Крона (St) - у 23. Среди пациентов с HRK были выделены группы больных с легким, средне-тяжелым и тяжелым течением заболевания, в то время как для больных болезнью Крона легкое течение заболевания не было характерно. .

В ходе исследоввния иммунного статуса пациентов с НЯК и Ш с различной степенью тяжести воспалительного процесса установлено, что в острый период заболеваний отмечается значительное угнетение Т-звена иммунитота. Так, у больных НЯК с легким течением заболевания во время его реотдива наблюдается двухкратное снижение численности лопуляиии Г-клеток (2d,0^2,3 по сравнению с 55,2*5,9 - с контрольной группа), ариче« з.то обусловлено, в сс-чоегЮм, енмгинивм ко.лчеаюв сысоюоаидных субпопуляшй. Подобные изиеняиия ле'5пияад!1<!ь у бильнач са ехидно-."ямеаыа к гяжелым ?с'!гн'лгм э4б'.мсюки>1, у iiOTcpuf i> ого осгром кориода праа.мчески

не шяеляяись средне- и гссокоавицчые лимбопиты.

У пациентов с ЕК со ерсдос-тяуелым и тяже та* течениями вос-паяятеягхогэ гризссо, мгп отчается рзз;со гсргж'гк.к^а Т-юяду-. ноп.оф^'Ц'/т: 'счкгено "исло Т-г-йфеоттоя, пркчек б'.-яысе

у ткхвшх £оша (23,2*1,35; р-£(3,001 по срч'годоге с »счтрояем). Какболс? т»\я1дт.ш» ¿ааенекив отшчзюх-ся у пациентов с- болезнью Кру-.а Зоинж ПЕК -.тот коквзатеяь г,оетигг.?т 27,5*2,5).

Еагигнал терапия способствовала удлинении Т-клеточиой по-куяявии лкк^оиктсз со всех группах больных НЯК и ВК, однако, ни ь одйом случая после ер окончания не наблюдалось достоверного увеличений числа Т-лимфоцитов, облядчп-виг высокой плотностью поверхностных репзпторов, что может служить прогностически неблагоприятным признаком возможного рецидива заболевания.

Как у больных с легкой степенью тяжести НЯК, так и у остальных пациентов, набяпдалось резкое, 2-3-х-кратное уменьшение Т. хелперной субпойуляют лим^тгатоэ (13,58*1,3 по сравнению с контролем - 38,0*4,0) при довольно стабильном уровне количества Т-супрессоров '14,3*1,95, & у здоровых гага - 17,110,09), снижение которого в остром периоде заболевания было незначительным, а в ряда случаев содержание этих клеток быстро нормализовалось. Ука-занноё обстоятельство позволяет объяснить наблюдащувся инверсия йммунорзгулягорного индекса, причем, в большей степени у пациентов с тяжелым течйнпам'заболзвания (1,06*0,212) и в меньшей - у больных с'лзгяоЯ формой НЯК (1,6*0,034, а в кснтрогз - 2,2*0,1). * . У больных грануйеыатогним кохитом различной степени гяяести заболевания такяи откачнется вшокодостоаерное снижение количества лгафэтаюэ', пвеуцах на своей поверхности маркеры хелперов (10,0*1,05), Зо.тое вараяеяноз, чем у.лагке.чтоп с НЯК при тяжелом течении зЕбсяевашя (14,4*2,05; рс0,05). Так как содержание

е

сулрессоров при этом меняется мало <13,720,97 по сравнению с 17,1*0,09 - в норме), при этом заболевании также адекватно его тяжести течения снижается иммунорегуляторный коэффициент.

Проведение базисной терапии как при НЯК, так и БК приводит к нормализации преимущественно Т-супрессоров, в то время как количество хелперов увеличивается сравнительно мало.

Содержание "активных" Т-лимфоцитов в период рецидива обеих нозологических форм заболеваний было в 2 раза ниже (12,621,48 и 14,0*2,0 - для средне-тяжелого течения НЯК и БК, соответственно) уровня здоровых лиц (28,1*3,0); курс общепринятой терапии увеличивал их число при различной степени тяжести состояния больных НЯК и БК.

Во время обострения заболеваний не отмечалось снижения процента спонтанно трансформированных лшзфоцитов ни в одной группе больных, скорее наоборот, этот показатель функционального состояния Т-лимфоцитов как у пациентов с язвенным (5,05*0,92), так и гранулематозныы колитами (7,0*0,86) достоверно превышал показатели в контрольной группе (1,5*0,2), лишь несколько снижаясь к моменту достижения клинико-эндоскопической ремиссии (4,75*1,8 и 4,9*1,6 - для тякедого течения НЯК и БЙ, ссответстБЗнно). Митоген-индуцированный ответ на ФГА был незначительно снижен г период .обострения заболеваний у всех пациентов (74,5*2,73 и 65,5*2,6 у пациентов с тяжвлш течением НЯК и БК по сравнению с 80,0*8,7 -в контрольной группе).

В остром периоде заболеваний у всех больных наблюдалось некоторое уменьшение количества В-лимфоцитов, причем у пациентов с язвенным колитом намечалась тенденция корреляции снижения их числа со степенью тяжести заболевания (27,9*2,88 - при легком; 21,0*2,12 - средне-тяжелом и 23,3*2,6- тяжелом течении НЯК; при 35,6*1,83 - з контрольной группа). Важно отметить, что при обеих

9 '

нозологических формах заболеваний популяция В-лимфоиитов в период обострения воспалительного процесса была представлена, в основном, функционально низкоактивннма, малореиепторнымя сублопулягмя-. ми. Обращает на себя внимание также факт необычного влияния курса базисной терапии на реаепторный аппарат В-лимфоцитов. Так, у больных вовхгрупп яри обеих нозологических формах заболеваний к моменту наступления клинической и эндоскопической ремиссии, отмечается нормализация показателей В-звена иммунитета, однако, нарастание В-лимфоцитов происходит, в основном,за счет низкоавидных субпопуляций, В то же время у больных с тяжелым течением НЯК и Ш наблюдается увеличение количества В-лимфоиитов как с низкой, так и с высокой плотностью мембранных рецепторов.

: Изменения рецепторного аппарата Т-лимфоцитов в период возникновения рецидива заболевания проявляются также выраженным, зачастую пятикратным увеличением в периферической крови пациентов с язвенным и грэнулематознкм колитами числа"0"-лимфоиитов (44,7^4,04 и 63,44?,25 у больных с тяжелым течением НЯК и БК, соответствен"о, 9,2^1,6 - в контрольной группе). Следует отметить, что изменения их количества во многих случаях коррелируют с тяжестью воспалительного процесса и в ходе консервативной терапии заметно уменьшаются во всех гру: пах наблюдавшихся больных.

Важное значение в опенке функциональных способностей В-звена имеет определение количества сывороточных иммуноглобулинов. В ходе проведенных исследований не наблюдалось закономерных значительных отклонений в содержании трех классов иммуноглобулинов при различной тяжести течения НЯК и ЕС. ( 3,0^0,53 при легком течении НЯК; М: 2,0±0,32 - при тяжелом течении БК; хе А: 2,0^0,24; г? М: 1,21^0,24 - в контрольной группе).

Определение накопления клеткой разлитых активных соединений кислорода имеет важное значение в диагностике нарушения функцио-

нальнсй активности фагоцитирующих клеток, а танке в связи с чеи, что кислородный радакйлы лодавляат суярессорауи ьк^иьаосгь Т-лим-фоци'1'ов, сдьдош>ш 'чего тоже? быть изменение хелй£рии-суд(»сворного б£Л№Са.

У всех ¿Зеяедзеиих пациентов во время обострения воспалительного протеста отмечалась резкая активация бактерицидных свойств фагоштов. Наряду с этим наблюдалось снижение количества поли-морфноядерннх лейкоцитов (ПЯЛ), способных к фагоимгоэу, причем в большей степени у пациентов с БК, со средне-тянелой фо.|>мой заболевания (62,713,71 по сравнению с больными Я® - 64.0i0.94 и контролем - 69,3±3,2) и значительное повышение числа микроорганизмов, поглощаемых клеткой ШШ: 10,4-2,24; БК; 10,0^,25: контроль: 4,3^0,7). Куре базисной терапии не способствовал нормализации фагодаюза, лишь' в нескольких случаях после зге окончания обмечалось сиикеииь среднего числа микробных тел, поглоа;аешх фаго- .

Так :(ак лечебны« Бездействия, направленные на нормализацию состояния больных ШЖ и БК эачае-гую оказывается малоэффективными, проездами*:« кссйодойв«1|4лШ был продолжен попек и раз работ .а'. адекватных к яи'Лояее опкашяьяых ызтодов мечыж, а - вдот-БЬ^НО ¿¡следила -^¿»ЯПИЙ -.ид^^-сисду^йра ^-уш^ка -л клеившее ь гукораяьноо аггкз к^унггш^ гойес-стаса больных ¡: ^.¡глизьапа.;". ой раже-* с;.и. ¡.с 0,1 ид х Г; ^са I' здшде«; ¡0 дг;;:»!, длу^фон - ис 0,2 I х 2 ;&зе в С- дней.

Угчаао^леч^, "Р:-: ^.иуъйиод^/Л'-роЕ п :.снпле;:с

лечсСил !•• к '¿-тл&и,-. »«, -ь

К'АЧУ.2 и иьп ягиойььояси:.; бйопйио?. ^щкпг.'л.

ото увеличение оа --'чох- ерздле- и ¿ысокисълмшк

бу5аолуляоий, <ио дешипвп нрогиостичсскк блиоарш-лъ::^ г.риинс-кок стойкости наступающей ремиссии (рис.1).

Происходит снижение, в раде случаев, до нормальных значений числа недифференцированных "нулевых" лимфоцитов (больные с тяжелым течением НЯК после иммунокоррекиии тималином ~ 13,5±3,6; больные с тгде.'.ым течением БК после иммунокоррекши диуиифоном -12,6±2,б9; контроль: 9,2±1,6), значительное повышение количества "активн1'х"Т-клеток. Положительное влияние иммунокоррекции сказалось и на ишунорегуляторных субпопуляииях Т-ишфоцитов: практически у всех больных НЯК происходило-значительное, почти двухкратное нарастание лимфоштов, несущих маркеры хелперов (при средне-тяжелом течении заболевания после иммунокоррекши диуцифоном -

о о

26,6^3,1)и более медленное - супроссоров (19,3^3,06), что способствовало нормализаоии клеточного 'баланса и увеличению иммунорегу-ляторяого индекса (1,8^0^41, р>0,1 по сравнению с контрольными значениями).

В группе больных БК дкушфон улучшил соотношение- иммуноре-' гуляторнык субпопуляшй лимфоцитов (3Т12^0,39), тиыалин же способствовал более синхронному нарастанию Т-хелперной и.Т-супрес-сорной субпопуляций, чем и обусловил еще больную инверсию имМу- , норегуляторного индекса (0,6120,12?).

Ответ Т-лимфоцитов на ФГА после окончания курса иммунокорри-гируюцей терапии был вше,- чем .после общепринятого лечения й приблизился к значениям в контрольной группе (больные со средне-тяжелым тл-'ением БК, после применения ти.малинс - 79,4^2,27; конт-. роль - 80,0^8,7); в то же время процент спонтанно трансформированных лимфоцитов значительно сьизился (больные со средне-тяжелым течением БК, после применения диуцифона - I,2^0,09; контроль -1,Ы0,2).

Способность к фагоштозу у пациентов с язвенным и грануле-матоэным ;солитачи под влиянием различных иммунных препаратов приблизилась к норме не в равной степени. Если в группе- больных со

средне-тяжелой формой течения НЯК тималин не оказывал заметного • влияния на результаты лечения (56,4^7,2 по сравнению с контролем, где - 42,0^3,8), то у паииентов с БК при этом хотя и не отмечалось полной нормах.маши рырэботни свободных кислородных радикалов (53,8±5,09), но происходило восстановление поглотительной способности ПЯЛ (69,024,38; р>0,1 по сравнению с контролем). Введение в комплекс базисной терапии диуцифона способствовало наиболее достоверной нормализации окислительных процессов ПЯЛ и поглотительной способности фагоцитов при обеих формах заболеваний (при средне-тяжелой форме БК показатель НОТ-теста - 47,2±4,5; фагоцитарный индекс - 69,112,21).

В ходе проведенных исследований,отмечено, что эффект имму-нокорригирующегэ воздействия был различным в эавис!шости от нозологической формы заболевания и применяемого иммуностимулятора. »

При сравнении результатов иммунотерапии в группах больных со сред-не-тятелым течением заболевания установлено, что у пациентов с НЯК более выраженные воздействия наблюдаются при применении циу-иифона, а у больных гралулематозньм колитом - тималина. Это проявляется в усилении дифференпиро'вки и пролиферации 'Г-клеток. в особенности их многореиепторных субпопуляиий, числа "активных" Т-пимфоштов, нарастании функциональной активности иммукскомпе-тентных клеток, устранении дисбаланса иммунорегуляторных субпопуляиий.

При осуществлении выявления клеточных популяшй и суо'популя-ций в периферической крови с помощью МКА было проведено сопоставление результатов автоматического учета меченных лимфоцитов ка приборе "Зшта1" (ГДР) и общепринятого метода розеткообразованил с эритроцитами бореня. Б ходе исследований установлено, что численность В-лимфоидаой популяции в группах больных со срепне.-тяжелым течением НЯК и ЕК достоверно определяется обоими мотсдеи:!,

в tu время как E-РОК отличается более низкой выяьляеыостью числа , Т-лимфоиитов, чем при использовании MÍA, хотя разница в группе пациентов с НЯК не была достоверной. В группе больных гранулема-тозным колитом разница между двумя определениями фенотипа Т-пим-фоцитов была значительной <Е РОК-. 27,5*1,85 ; ША: 45,1*3,65 '; р<0,С01). Численность иммунорзгуляторных субпопупяияй, установленная методом рсзеткообразования, оказалась обеих группах больных также ни.^е, чем при выявлении экспрессии антигенов с по-молыо Жл (при НЯК: Т-хелперы теофиллшсвш тестом - 16,87*2,63; , ША - 28,03-1,68). ¿¡ммунорегулямрный индекс, вычисленный при проведении обоих способов выявления иммунокошетентных клеток, не ' имел достоверных отличий, что подтвердило достоверность iío¡;ученных данных при исследовании Т-клаточного звана иммунитета, с.помощью метода Е-РОК..

Таким образом, использование МКА для исследования иммунного/ гомеостаза при неспемфич&ском язвенном колите w болезни Крона подтвердило лслуцанные ранее данные о Т-киеточном шмунодефиците у болььых указанных нозологических форм заболеваний.

При исследовании состояния местного иммунитета в остром периоде .неспэцкфического язвенного 'колита и болезни Крона при тяжелой форме течения заболеваний, установлено преобладание .'в собственной пластинке слизистой оболочки толстой кишки В-лимфоштов. Обнаружено несколько меньшее число лимфоцитов, экспрзсскрушлх на своей поверхности антигены (в частности, ОДЗ-антиген), характерные для Т-клеток. Однако, в проведенных исследованиях выявлено,-что их количество почти четырехкратно превышает содержание Т-дии-фоиитов в контрольной группе, которую составили больные доикоколеи о к (табл.1>.

Вагло подчеркнуть, что при этом соотношение рммунорегулятор-ных лимфоцитов в слизистой оо'ояопке толстой кишки больных язвенны:.: и гранупематозным колитами не отличалось от такового з копа-

' Таблица I

Абсолютное содержание иымунсютов в I мм^ собственной пластинки слизистой оболочки толстой ккики, выявляемое с помощью ША различной видовой специфичности при тя-жзлой форме неспецифического .язвенного колита и болезни Крона

Нозологическая фо^ла

Статистические показатели

Специфичность МКА

ИКО-31 :Иыыуно-(Т-супрес- ;регул, сорн+килле- индекс ры)

ся

Кеепецяфичесяий язвенный колит (п = 7)

Болезнь Крона (п, - 13)

Контрольная группа

.М 1 т РГ

М ± а-

Р1

РЭ

969,8±66,4 1253,07¿83,2 775,0±54,8 588,6^40,0 ' 1,3

<0,001 <0,001 -¿0,001 <0,001 >0,1

819,2247,4 1526,9 ¿97,9 821,3243,2 С79,0±34,7 1,4

сО,001 <0,001 -¿0,001 <0,001 >0,1

=0,05 <0,05 г-ОТГ

>0,1

-0,1

294,8242,12 710,8 294,8 410,7263,2 322,2252,7 1,3

Тримевсние: р^- - достоверность различий по сравнению с контролем;

Р2 - достоверность различий нейду показателями, определяемыми у больных НЯК и' ЕК.

м

т

роле. Лимфоциты с поверхностным фенотипом Т-хелперов преобладали в lamine propria как У больных НЯК и БК, так и у.яиц контрольной группы.

У ов с тяжелым течением язвенного и гранулематозного

колитов иовлено резкое yi ;личение продукции всех иссле,дуемых классов иммуноглобулинов: 12-14-кратное повышение концентрации иммуноглобулина класса g ; почти 7-кратное увеличение уровня rg М и 3-4-кратное нарастание содержания Xg А.

Таким образом, количество иммуноиитов в собственной пластинке слизистой оболочки толстой килки при язченноы и гранулеыатозном колитах в период обострения заболеваний возрастает в несколько (до четырех) раз; одновременно с этим значительно усиливается ан-тителопродукиия, особенно иммуноглобулина класса а , что подтверждает существенную роль местных иммунных процессов в патогенезе указанных заболеьаний.

В связи с тем, что процессы дестабилизации иитоплазматической мембраны значительно опережают другие, патологические изменения в клетках, с целью.оценки степени нарушения жизнеспособности клеток ' и тканей у больных с различной тяжестью течения неспешфического язвенного колита и болезни Крона'было произведено исследование продуктов катаболйческого распада (в -белков) в сыворотке крови. В остром периоде этих заболеваний выявлены наиболее высокие значения щ титра, причем у пациентов со средне-тяжелым течением НЯК (28587¿7326,3) этог показатель превышал таковой в группе больных болезнью Крона (20840*4256,5; в контрольной группе - 3340ÍIII9). Однако, более эффективное восстановление нормального уровня титра к -белков в момент достижения клинико-эндоскопической ремиссии наблюдалось у пациентов со средне-тяжелым течением язвенного колита, где этот показатель снизился до уровня 4480±962."Изменение содержания r -белков находилось в прямой зависимости от тяжести течения

заболевьния и его стадии как для пациентов с неспешфическим язвенным колитом, так и с болезнью Крона, чтс подтвердило высокую Информативность теста.

Таким образом, изучение причин и особенностей нарушения иммунологической реактивности у больных с различной тяжесть;» течения неспешфическогс язвенного колита и болезни Крона толстой кишки позволило подтвердить наличие системных нарушений иммунного статуса, выделить совокупность наиболее информативных показателей, ■ характеризующих степень иммунологических расстройств, а также разработать и обосновать целесообразность применения иммуномодулятора диуцифсна в комплексной терапии больных НВЗТК.

шведа

1. Неспепифический яззенный колит и болезнь Крона характеризуются совокупностью специфических признаков, свидетельствующих о выргекенном вторичном иммунодефиците у этих больных, прэявяяжщомся количественными и функциональными дефектами в системе клеточного и гуморального иммунитета, значительно нормализуемыми в ходе иммунотерапии; нарушением местных иммунных реакций.

2. У больных неспеиифическим язвенным крлитом и болезнью .Крона закономерно выявляются следующие изменения иммунной системы:

- снижение содержания в крови зрелых Т-лимфоцитов и их основных субпопулятай - высокоавидных, "активных", хелперных;

■ - увеличение содержания в периферической кроги незрелых недифференцированных клеток и концентрации антител классов 1с А и М;

- спонтанное повышение кисяородозавгоимого метаболизма нейтрс-фильннх грпнулоштов; : '

- накопление продуктов катаболического распада клеток (В0-бел- ■ ков);

- увеличение содержания иммуноглобулинов различных классов с возрастанием числа иммумокомпетентных клеток в слизистой оболочке толстой кишки;

3. Прогностическими иммунологическими критериями состояния больных язвенным и гранулемат зным колитами являются функциональное состояние рецепторного аппарата еубпопуляций Т- и В-лимфоии-тов (авидность) и содержание В -белков в сыворотке крови,

4. По окончании курса базисной терапии у больных с тяжёлой формой'няк и БК наблюдаются повышение содержания в периферической'

крови Д-лимфоцитои и усиление пролиферации В-лимфоцитов.

П о "

5. Состояние иммунологической реактивности у больных с тяжелой формой болезни Крона характеризуется выраженным Т-иммунодефиии-том с преимущественным уменьшением Т-хёлперов и менее значительным снижением числа Т-супрессоров.

6. Использование иммуноыодулятора диулифона в комплексном лечении больных неспециЛическим язвенным колитом и болезнью Крона увеличивает содержание Т-лимфоиитов, нормализует количество В- • клеток, повышает их авидность» кимунорегулкруюцее свойство препарата проявляется в способности устранять дисбаланс з содержании субпопуляиий иммунорегуляторных клеток и стимуляции антибактериальной резистентности больных. , Введение дчушфона в дозе 0,3 г 2 раза в день на протяжении 6 дне Г. в комплекс лечебных мероприятий сокращает сроки, течения больных.- - ■ , :

V. Сравнительное изучение влияния иммунокодулятсров на иммунный статус больных показало, что назначение тималииа более эффективно у больных болезнью Крона, а диушфна - у больных НЯК.

практические таоетддцш

1. С целью прогнозирования тяжести и фазы неспеиифического яэьь-нного колита и болезни Крона рекомендуется оценивать функциональное состояние рецепторного аппарата субпопуляций Т- и В-лимфо-

jmtob по авидности и содержанию r -белков в сыворотке крови больных.

2. Курс базисной традиционной терапии больных неспешфичеоким тавенным колитом и болезнью Крона необходимо сочетать с иммунокор-эекыией наиболее адекватным иммукомодулятором, подбор которого осуществляется in vitro строго индивидуально.

3. Использование иммунсмодулятора диуиифона я дозе 0,3 г 2 раза в день в комплексном лечении пациентов с язвенным и гранулема-гозным колитами в течение 6 дней улучшает состояние клеточного, гуморального иммунитета и нормализует фагоцитарную способность 1ЫЛ

9

периферической крови больных, позволяет сократить сроки достижения клинико-эндоскопической ремиссии.

Оценка состояния местных иммунных" реакшй позволяет адекватно отобразить степень нарушений иммунологической реактивности паииентоз с неспеиифическим язвенным колитом и болезнью Крона.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТШ даССЕРТЛЦИ!

1. Диагностическая ценность иммунологических критериев в оценке здоровья.//Проблемы мониторинга за здоровьем населения промышленных городов. Тезисы докладов в сборнике трудов Всесоюзной научной конференции. Ангарск, июнь 1989 г.-с.89.(Соавт.Пере-церий В.Г., Бычкова Н.Г., Ткач С.М.). .

2. Иммунокорригируюцая терапия хронических неспецифических заболеваний кишечника .//Врач.дело.-1989.-К9.-с .58-62. (Соавт. Ткач С.М., Бычкова Н.Г.).

3. Дифференцированное применение иммунокорригируюших средств лрч неспеиифическом язвенксм колите.//Тезисы II съезда гастроэнтерологов УССР, Днепропетровск,*3-5 октября 1989 г.(Соавт.Пеоз-дерий В.Г., Ткач С.М., Бутова Н.Г.).

4. Эффективность далмуносткмулкруо.цих средств при иеспецики-чоском язвенном колита.//Со1ьгеди1жна.-1990.-if 4.-е Л7-19.(Со5ь'г. ПерсдертЧ В.Г., Ткач С.М,, Еычкоаа Н.Г.).

5, Метаболическая и фагоцитарная активность нейтрофильных грэнулоиитов у больных носпецифическим язвенным колитом и болезнь« Крона.//Врач.дело.-1990.б.-с.57-61. (Соэвт.Бцчьова Н.Г.,

Швеи Н.И.).

6. Эффективность микроес -яовой резонансной терапии при неспе-шфическом язвенном копите.//Материалы 1У Всесоюзного съезда гастроэнтерологов, 17-20 октября 1990 г., Москва-Ленинград.-1990.-т.2. с.554-555. <Соавт.Ткач С.М.). ■

71 Сравнительная характеристика уровней .фагоштарной и метаболической активности нейтрофильных гр'лул^иитов у больных неспе-шфическим язвенным колитом й болезнью Крона в результате применения базисной и иммунэхорригирующей' терапии.//Врач.дело.-1991.-1? I. с.70-72. (Соавт. Кучер Н.Д.).

8. Иммунный статус, критерия его оценки и прйниида назначения имыунокорригирующих препаратов.//Метод.рагработка^-Вивв»-1939,-53 с. (Соавт.Пере,дерий В.Г., Бычкова Н.Г,, Зеьяхоз A.M. и др.).

9. Медикаментозная ыеднохоррекция ,при неезшдафичгзких воспалительных заболеваниях-толстой кгахл .//Инфоаиапкаанй лксгок.-Киев.-1990.- 4 с.' (Соявт.Кучео Н.Д., Когш В.ГЛ.