Автореферат и диссертация по медицине (14.01.23) на тему:Направленный транспорт антибиотиков в лечении острого гнойного пиелонефрита у экспериментальных животных

На правах рукописи

Аносова Юлия Александровна

НАПРАВЛЕННЫЙ ТРАНСПОРТ АНТИБИОТИКОВ В ЛЕЧЕНИИ ¿СТРОГО ГНОЙНОГО ПИЕЛОНЕФРИТА У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

40

..- ^ 14 01 23 - урология 14 03 "06 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

□03430553

Саратов-2010

003490553

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Воронежская государственная медицинская академия им Н Н Бурденко Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

чл -корр РАМН, профессор

Кузьменко Владимир Васильевич, Свистунов Андрей Алексеевич.

Морозов Дмитрий Анатольевич, Спасов Александр Алексеевич

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшею профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию

Защита диссертации состоится «27» января 20 Юг в _часов на заседании

диссертационного совета Д 208 094.01 при ГОУ ВПО Саратовский ГМУ им В И Разумовского Росздрава по адресу 410012, г Саратов, ул Б Казачья, 112

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО Саратовский ГМУ им В И Разумовского Росздрава

Автореферат разослан « »_2009г

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор Маслякова Г Н

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования

Пиелонефрит - одно из самых распространенных заболеваний почек в любых возрастных группах, частота которого за последние годы увеличивается (Тиктинский О JI и соавт , 2002, O'Donnell J et al, 2002)

Увеличение частоты встречаемости острого пиелонефрита связано с возросшей вирулентностью микроорганизмов в результате приобретенной ими устойчивости к антибактериальным препаратам, следствием чего явилось снижение эффективности консервативной терапии (Неймарк АИ, Симашкевич А В , 2007)

В последние годы наблюдается увеличение числа случаев атипичного течения острого пиелонефрита Объясняется это не только улучшением диагностики и резко возросшей вирулентностью микроорганизмов, но и изменением течения инфекционного процесса в почке вследствие подавления иммунных реакций при проведении антибактериальной терапии и на фоне измененной реактивности организма (Лоран О Б , 1998)

Применяемая традиционная антибактериальная терапия нередко не оказывает достаточного лечебного эффекта, так как в результате нарушений в системе гомеостаза снижается возможность доставки препарата в очаг воспаления и достижения необходимой концентрации в нем (Пытель Ю А и соавт , 1994; Лохвицкий С В , 1999, Naber К G, 2000, Gilbert D. et al, 2002)

Антибиотикотерапия становится эффективной при условии создания высоких, длительно сохраняющихся концентраций лекарственного вещества в очаге микробного воспаления (Черний В И, 2004) При внутримышечном и внутривенном введении лекарственных препаратов не всегда удается достичь необходимой концентрации в ткани почки (Чазов Е И, 1987)

Говоря о лечении деструктивных форм пиелонефрита, следует уделить внимание влиянию оперативного вмешательства, наркоза, антибактериальной терапии на функциональное состояние почек Нарушение кровообращения в почке как в ходе операций, так и при эндогенных и экзогенных интоксикациях организма, делают почку более восприимчивой к инфекции (Калугина Г В , 1996)

Одним из возможных решений является поиск и изучение новых перспективных методов лечения, каким и является методика направленного транспорта антибиотиков (Белобородов В Б , 1999), что по эффективности и минимальной токсичности можно сравнить с «точечным бомбовым ударом» (Карпушина И А и соавт, 2004)

Направленный транспорт антибиотиков в зону воспаления позволяет, наряду с созданием в ней высокой концентрации вводимого препарата, максимально уменьшить нежелательные реакции организма на медикаментозное воздействие, снизить терапевтическую дозу препарата и кратность введения (Сипливая Л Е и соавт, 1998)

Таким образом, острый пиелонефрит и его гнойные формы представляют актуальную клиническую проблему, обусловленную неудовлетворительными результатами лечения и связанную со сложностью выбора оптимальной лечебной тактики, значительными экономическими затратами и длительной реабилитацией этой категории больных

Цель исследования

Цель исследования - повышение эффективности лечения острого гнойного пиелонефрита путем применения метода направленного транспорта антибиотиков в эксперименте на животных

Задачи исследования:

1 Изучить возможность повышения концентрации антибиотиков в форменных элементах крови путем изменения инкубационной среды

2 In vitro определить и обосновать объем крови, необходимый для связывания разовой дозы антибиотика

3. Изучить кривые концентраций цефотаксима в плазме крови при традиционном внутривенном введении и введении антибиотика методом направленного транспорта

4. Изучить влияние введения цефотаксима методом направленного транспорта на концентрацию антибиотика в ткани почки

5 Изучить влияние введения цефотаксима методом направленного транспорта на эффективность антибактериальной терапии у животных с острым гнойным пиелонефритом

Научная новизна

Установлено оптимальное соотношение объема форменных элементов крови и антибиотика для проведения направленного транспорта

Изучена динамика концентрации цефотаксима в форменных элементах крови при изменении условий инкубационной среды, что позволило повысить содержание антибиотика внутри клеток крови

Изучено влияние метода введения антибиотика на его концентрацию в плазме крови и ткани почки при моделированном остром пиелонефрите.

Дана оценка эффективности антибактериальной терапии острого пиелонефрита у экспериментальных животных при введении цефотаксима методом направленного транспорта

Практическая значимость исследования

Исследование влияния калия хлорида на проникновение цефотаксима внутрь клеток крови позволило определить оптимальные условия для инкубации клеточной взвеси с антибиотиком Проведение антибактериальной терапии методом направленного транспорта позволит в

значительной степени улучшить результаты лечения острого гнойного пиелонефрита

Реализация результатов работы

Результаты работы внедрены в работу экспериментальной лаборатории ГУЗ «Воронежская областная клиническая больница №1» Материалы диссертации используются в учебном процессе на кафедре урологии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Воронежская государственная медицинская академия им Н Н Бурденко Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Основные положения, выносимые на защиту

1 При инкубации клеточной взвеси с антибиотиком наличие в инкубационной среде раствора калия хлорида способствует повышению концентрации антибиотика внутри клеток крови

2 Для проведения направленного транспорта цефотаксима объем крови, необходимый для связывания 1,0г антибиотика, составляет 30 мл при условии наличия в среде инкубации раствора калия хлорида в концентрации 0,25 мг/мл

3 Применение метода направленного транспорта антибиотиков позволяет повысить эффективность комплексной терапии острого гнойного пиелонефрита, что выражается в более ранних сроках нормализации показателей периферической крови, состояния экспериментальных животных и ускорении темпов воспалительного процесса

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 136 страницах компьютерного текста, содержит 15 таблиц, 29 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, трех глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 191 источник (117 отечественных и 74 иностранных)

Апробация работы и публикации

Основные положения диссертации представлены на областном обществе урологов (Воронеж, 2008), межрегиональной конференции урологов «Современные вопросы урологии» (Воронеж, 2008), научно-практической межрегиональной конференции урологов «Актуальные проблемы урологии и андрологии, стандартизация подходов» (Воронеж, 2009), российской научной конференции с международным участием «Фундаментальные исследования в уронефрологии» (Саратов, 2009), совместном заседании кафедр урологии с курсом урологии и андрологии

ИПМО, общей хирургии, онкологии и лучевой терапии ВГМА им НН Бурденко

Результаты исследований изложены в сборнике научных статей «Современное состояние и перспективы развития медицины» (Воронеж, 2006), материалах научно-медицинского вестника Центрального Черноземья (Воронеж, 2008), материалах III Всероссийской конференции молодых ученых, организованной Воронежской государственной медицинской академией им Н Н Бурденко и Курским государственным медицинским университетом (Курск, 2009), материалах российской научной конференции с международным участием «Фундаментальные исследования в уронефрологии» (Воронеж, 2009), материалах научно-практической межрегиональной конференции «Актуальные проблемы урологии и андрологии, стандартизация подходов» (Воронеж, 2009), «Вестнике Воронежского государственного университета» Серия Химия Биология Фармация (Воронеж, 2009), Уральском медицинском журнале (Екатеринбург, 2009)

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

В ходе работы был использован антибиотик группы цефалоспоринов с действующим веществом «цефотаксим» Цефотаксим в своем составе имеет несколько ионогенных групп, поэтому можно предположить о фиксации цефотаксима на мембране эритроцитов за счет слабых взаимодействий с компонентами мембраны Кроме того, не исключены проникновение цефотаксима внутрь эритроцита и его взаимодействие с внутриклеточным содержимым

В работе приведены данные исследования зависимости распределения цефотаксима между средой инкубации и фракцией форменных элементов крови при изменении инкубационной среды

В инкубационные системы поочередно были внесены разные модификаторы.

Были выбраны- АТФ (за счет энергии гидролиза которого происходит активный транспорт ионов через клеточную мембрану),

- MgS04 (ионы Mg'"', связываясь с клеточными мембранами, регулируют их проницаемость для прочих ионов, а также механические свойства мембран),

- глюкоза (при облегченной диффузии глюкозы в мембране эритроцита открываются своеобразные каналы, через которые другие ионы могут проникать внутрь эритроцита),

- KCl (ионы К+ снижают устойчивость мембран клеток)

В ходе исследования форменные элементы крови после инкубации с антибиотиком были отделены от плазмы крови центрифугированием

Далее форменные элементы крови были гемолизированы путем добавления дистиллированной воды, а в полученной взвеси определяли концентрацию цефотаксима

Все спектрофотометрические исследования были проведены в 30 повторах

С целью определения объема крови, необходимого для проведения направленного транспорта 1,0 г цефотаксима, были созданы инкубационные системы с равными количествами в них цефотаксима и различными объемами крови

Во всех опытах был добавлен KCl в одинаковой конечной концентрации в клеточной взвеси, равной 0,25 мг/мл (оптимальная концентрация)

Полученные данные были применены далее в лечении моделированного пиелонефрита у собак

Экспериментальное исследование проводилось в двух группах на 30 беспородных собаках Для опыта отбирались внешне здоровые животные без видимых дефектов на коже и признаков общей патологии массой тела 1418кг

Группы экспериментальных животных отличались методом введения антибиотика цефотаксима.

- первая группа (контрольная) включала 15 собак, которым проводилась антибактериальная терапия путем традиционных внутривенных инъекций цефотаксима,

- вторая группа (опытная) состояла из 15 собак, которым цефотаксим вводился методом направленного транспорта

Методика направленного транспорта антибиотиков предусматривает забор венозной крови, добавление гепарина и полиглюкина, удаление плазмы после осаждения форменных элементов, экстракорпоральную инкубацию клеточной массы с цефотаксимом, последующее добавление 0,9%-ного раствора NaCl и внутривенное введение полученной взвеси

Для того чтобы максимально приблизить условия проводимой терапии в группах сравнения, в контрольной группе также выполнялась эксфузия венозной крови, добавление полиглюкина и гепарина в аналогичных дозировках и замещение плазмы 0,9%-ным раствором NaCl

Ежедневно оценивали общее состояние животных, отмечали наличие гипертермии, тахикардии, тахипноэ, сниженного аппетита и массы тела

В начале эксперимента все животные подвергались оперативному вмешательству с целью моделирования острого гнойного пиелонефрита путем создания обратимой обструкции верхних мочевых путей и введения взвеси Escherichia coli, 105 КОЭ в 1 мл в почечную лоханку

Введение взвеси Escherichia coli, 105 КОЭ в 1 мл обеспечивает получение достоверной модели пиелонефрита при отсутствии инфицирования брюшной полости и послеоперационной раны (Лоран О Б и соавт, 2006)

На третьи сутки у всех экспериментальных животных в разной степени выраженности отмечались повышение температуры тела, тахипноэ, тахикардия, снижение аппетита Наблюдали общее угнетение животного, утомляемость, исхудание

Производилась биопсия почки с целью гистологического исследования (гистологическое подтверждение развития гнойного пиелонефрита)

У всех животных был произведен общий анализ крови с лейкоцитарной формулой

На третьи сутки уродинамика на стороне поражения была восстановлена путем снятия П-образного шва с устья мочеточника После восстановления пассажа мочи начиналась антибактериальная терапия Антибактериальную терапию проводили препаратом цефотаксим Введение лекарственных препаратов проводилось традиционными внутривенными инъекциями или путем направленного транспорта (табл 1)

Таблица 1

План экспериментального исследования на животных_

Сутки эксперимента Контрольная группа Опытная группа

Начало эксперимента Моделирование пиелонефрита Моделирование пиелонефрита

Третьи сутки Биопсия почки (гистологическое исследование) Восстановление уродинамики путем снятия П-образного шва с устья мочеточника Начало антибактериальной терапии путем традиционных внутривенных инъекций цефотаксима Биопсия почки (гистологическое исследование) Восстановление уродинамики путем снятия П-образного шва с устья мочеточника Начало антибактериальной терапии методом направленного транспорта цефотаксима

Шестые сутки Ревизия, декапсуляция почки Биопсия почки (гистологическое и хроматографическое исследования) Ревизия, декапсуляция почки Биопсия почки (гистологическое и хроматографическое исследования)

Девятые :утки Нефрэктомия (гистологическое и хроматографическое исследования) Нефрэктомия (гистологическое и хроматографическое исследования)

На шестые сутки всем животным производили ревизию, декапсуляцию почки, при выявлении карбункулов - крестообразное вскрытие

После этого производили биопсию почки (с целью гистологического и хроматографического исследований) и общий анализ крови В послеоперационном периоде продолжалась проводимая антибактериальная терапия

На девятые сутки выполняли нефрэктомию, взятие материала для гистологического и хроматографического исследований и общий анализ крови

Предложенный способ направленного транспорта антибиотиков заключается в следующем

В шприц набирают из вены кровь, при этом добавляют гепарин и полиглкжин в расчете - на 30 мл крови 0,5 мл (2500 ЕД) гепарина и 1 мл полиглюкина Взвесь отстаивается, плазма удаляется Разовую среднетерапевтическую дозу цефотаксима растворяют в 0,9%-ном растворе NaCl и растворе КС1 (конечная концентрация КС1 - 0,25 мг/мл) и добавляют в шприц с клеточной массой Создают однородную гомогенную массу взвеси клеток крови с антибиотиком, которую затем инкубируют в термостате при температуре 37°С в течение 30 минут После этого доводят объем крови в шприце стерильным 0,9%-ным раствором NaCl до исходного объема и вводят внутривенно

При изменении дозы цефотаксима объем забираемой венозной крови высчитывается по формуле

V = 30 мл венозной крови х доза цефотаксима (мг) 1000 мг цефотаксима

Для обработки данных изучаемых показателей был использован компьютерный пакет прикладных программ STATISTICA (StatSoft, версия 6) Статистическая нулевая гипотеза о соответствии данных нормальному закону проверялась с помощью критерия Шапиро-Уилка В качестве порогового уровня статистической значимости р (вероятности ошибочно отклонить нулевую гипотезу) было принято значение 0,05

Для проверки различий средних изучаемых признаков в исследуемых группах использовали t-критерий Стьюдента для независимых групп, который заключается в проверке нулевой гипотезы о том, что средние значения в группах не различаются При значениях р < 0,05 принималась альтернативная гипотеза о существовании различий средних значений

Анализ качественных данных включал подсчет абсолютных и относительных частот для каждого признака По результатам подсчета проводилось сравнение контрольной и основной групп путем проверки нулевой гипотезы о равенстве относительных частот с помощью "Вероятностного калькулятора" пакета прикладных программ STATISTICA с использованием двустороннего критерия статистической значимости, когда неизвестно, какая из групп преобладает по частоте

В качестве порогового уровня статистической значимости было принято значение 0,05 (Реброва О Ю , 2002, Гринхальх Т , 2004).

Результаты исследования Экспериментальное обоснование условий инкубации и объема крови для проведения направленного транспорта цефотаксима

В начале исследования выявляли влияние концентрации цефотаксима, добавленного к клеточной взвеси, на его распределение между форменными элементами крови и надосадочной жидкостью Цитовзвесь готовилась из венозной крови Для этого к 30 мл крови из вены добавляли 0,5 мл гепарина и 1 мл полиглюкина (для ускорения осаждения форменных элементов крови) Спустя один час после осаждения форменных элементов крови плазму удаляли, оставшуюся цитовзвесь использовали для дальнейших исследований После инкубации клеточной взвеси с антибиотиком форменные элементы были отделены от плазмы крови центрифугированием Далее форменные элементы крови подвергались гемолизу путем добавления дистиллированной воды и в полученной взвеси определяли концентрацию цефотаксима Наличие цефотаксима в клеточной массе после центрифугирования и удаления надосадочной жидкости позволяет судить о том, что данный антибиотик способен проникать в клетки крови или связываться с компонентами мембраны этих клеток

Оказалось, что при увеличении концентрации цефотаксима, вносимого в инкубационную среду, увеличивается его концентрация в клетках крови, но при этом увеличивается его концентрация и в супернатанте. Соотношение данного антибиотика в форменных элементах и супернатанте увеличилось незначительно, при этом оставаясь выше во внеклеточном пространстве в 1,6-2,0 раза (рис 1)

0,005 „ I 0,004

I 2

I « 0,003

= 5

g | 0,002

о Б

* g 0,001

о

без АТФ MgS04 глюкоза KCl модификаторов

ЕЗ Концентрация в клетках крови □ Концентрация в супернатанте

Рис 1 Концентрация цефотаксима в клеточной массе и супернатанте при разных условиях инкубации

В работе приведены данные исследования зависимости распределения цефотаксима между средой инкубации и фракцией форменных элементов крови при изменении инкубационной среды

Оказалось, что при условиях инкубации клеточной взвеси с антибиотиком в присутствии 1%-ного раствора АТФ, 25%-ного раствора \lgS04 и 10%-ного раствора глюкозы концентрация цефотаксима остается выше в супернатанте, чем в клеточной массе, в 1,8-2,0 раза, в 1,7-2,0 раза и в 1,7-2,1 раза соответственно

При внесении в инкубационную систему 5%-ного раствора КС1 концентрация цефотаксима в клетках крови становится выше, чем в супернатанте, в 0,8-0,9 раза

Таким образом, комплексирование цефотаксима с компонентами мембраны форменных элементов крови и его проникновение внутрь клеток не зависят от присутствия в среде АТФ, глюкозы и ионов М§++

Добавление раствора КС1 в среду инкубации улучшает проникновение цефотаксима внутрь клеток крови При этом оптимальная концентрация КС 1 в клеточной взвеси составляет 0,25 мг/мл

Ионы К+ снижают устойчивость мембран клеток Возможно, при снижении устойчивости в мембране образуются каналы, через которые цефотаксим может проникать внутрь клеток

Кроме того, К+, нарушая стабильность мембраны, способствует образованию пор в ней, и, следовательно, улучшает проникновение антибиотика внутрь клетки

С другой стороны, инкубация К+ с антибиотиками и взвесью форменных элементов крови может влиять на степень ионизации цефотаксима, а также на заряд мембраны В этих условиях, по-видимому, улучшается связывание антибиотиков с компонентами мембран клеток в основном за счет электростатических взаимодействий

В ходе эксперимента выявлено, что исходный объем венозной крови для проведения направленного транспорта 1,0 г цефотаксима составляет 30 мл при условии присутствия в среде инкубации 5%-ного раствора КС1 в концентрации 0,25 мг/мл

Полученные данные были применены далее в лечении моделированного пиелонефрита у собак

Динамика клинико-лабораторных показателей В ходе эксперимента было выявлено, что с первых по третьи сутки эксперимента (развитие острого пиелонефрита) симптоматика в обеих группах животных достоверно не различалась Наиболее тяжелое состояние животных было отмечено на третьи сутки эксперимента

В ходе эксперимента было выявлено, что гипертермия, тахикардия и тахипноэ наблюдались до конца эксперимента в контрольной группе и до седьмых суток включительно в опытной группе

В контрольной группе снижение аппетита и массы тела выявлялись до восьмого дня эксперимента включительно

В опытной группе уже к седьмым суткам у всех собак восстановился аппетит, снижения массы тела зафиксировано не было

В контрольной группе аналогичные данные получены на девятые сутки эксперимента

На рис 2 отражены сроки нормализации исследуемых параметров в контрольной и опытной группах

Гипертермия

Снижение аппетита

• Контрольная группа -А- Опытная группа

Рис 2 Сроки нормализации исследуемых параметров в контрольной и опытной группах

Таким образом, при проведении антибактериальной терапии методом направленного транспорта состояние экспериментальных животных нормализуется быстрее, чем при введении антибиотика традиционным внутривенным путем

Всем экспериментальным животным производился общий анализ крови перед началом эксперимента (исходный уровень), на третьи, шестые и девятые сутки эксперимента

При изучении показателей периферической крови собак на третьи сутки эксперимента в обеих группах было отмечено повышение процентного содержания палочкоядерных и ссгментоядерных нейтрофилов, моноцитов, снижение процентного содержания лимфоцитов при повышенном уровне лейкоцитов и ускорение СОЭ по сравнению данными забора крови перед началом эксперимента

Полученные данные отражают наличие воспалительного процесса у

собак

В контрольной группе на третьи сутки лейкоцита периферической крови составили 24,3±1,02х109/л (исходный уровень - 14,2±0,53х109/л), лимфоциты - 10,2±0,42% (исходный уровень - 25,2±1,22%), СОЭ -32,8±1,54мм/ч (исходный уровень - 6,4±0,18мм/ч) Повысилось процентное

содержание палочкоядерных нейтрофилов до 11,3±0,37% (исходный уровень

- 2,1 ±0,07%), сегментоядерных нейтрофилов - до 89,3±3,6% (исходный уровень - 67,8±2,91), эозинофилов - до 7,1±0,31% (исходный уровень -5,7±0,15%) и моноцитов - до 12,9 ±0,47% (исходный уровень - 6,9 ±0,25%)

В опытной группе на третьи сутки лейкоциты периферической крови составили 24,5±1,03 х 109/л (исходный уровень - 14,4±0,54* 10 /л), лимфоциты

- 11,1±0,44% (исходный уровень - 24,9±1,20%), СОЭ - 30,5±1,51 мм/ч (исходный уровень - 6,4±0,18мм/ч) Повысилось процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов до 11,6±0,39% (исходный уровень -2,3±0,08%), сегментоядерных нейтрофилов - до 91,2±3,8% (исходный уровень - 70,1±2,95), эозинофилов - до 7,0±0,30% (исходный уровень -5,9±0,16%) и моноцитов - до 12,3±0,44% (исходный уровень - 6,8±0,25%)

В контрольной группе к шестым суткам эксперимента на фоне проводимой антибактериальной терапии и устранении обструкции мочевых путей в анализах периферической крови оставался достоверно повышенный лейкоцитоз по сравнению исходными данными - 19,1±0,82><109/л, (исходный уровень - 14,2±0,53х109/л), повышение процентного содержания палочкоядерных нейтрофилов - 6,2±0,18% (исходный уровень - 2,1±0,07%), сегментоядерных нейтрофилов - 80,3±3,4% (исходный уровень - 67,8±2,91), эозинофилов - 6,7±0,24% (исходный уровень - 5,7±0,15%) и моноцитов -11,2±0,44% (исходный уровень - 6,9 ±0,25%), повышение процентного содержания лимфоцитов - 15,1±0,64% (исходный уровень - 25,2±1,22%) и ускорение СОЭ - 31,8±1,53 мм/ч (исходный уровень - 6,4+0,18 мм/ч)

Целью лечения является не изменение величин параметров, а их нормализация, то есть приближение к нормативным значениям (исходному уровню здорового животного) На шестые сутки эксперимента в контрольной группе показатели не вошли в диапазон исходного уровня (рис 3)

Лейкоциты

Рис 3 Динамика показателей периферической крови в контрольной группе животных

В опытной группе на шестые сутки эксперимента была отмечена нормализация большинства показателей периферической крови Количество лейкоцитов составило 15,4±0,67 (исходный уровень - 14,4*0,54*10%), лимфоцитов - 23±0,98% (исходный уровень - 24,9±1,20%), СОЭ - 15,3±0,6 мм/ч (исходный уровень - 6,4±0,18мм/ч) Процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов составило 2,4±0,05% (исходный уровень -2,3±0,08%), сегментоядерных нейтрофилов - 71,2±3,01% (исходный уровень - 70,1±2,95), эозинофилов - 6,2 ±0,18% (исходный уровень - 5,9±0,16%) и моноцитов - 7,1 ±0,31% (исходный уровень - 6,8±0,25%)

В опытной группе животных на шестые сутки эксперимента была отмечена нормализация 6 из 7 показателей периферической крови (рис 4)

Лейкоциты

Рис 4 Динамика показателей периферической крови в опытной группе животных

В контрольной группе при лабораторном исследовании показателей периферической крови на девятые сутки наблюдалась нормализация большинства показателей Лейкоциты составили 16,1±0,72х109/л (исходный уровень - 14,2±0,53х109/л), лимфоциты - 24,9±0,98% (исходный уровень -25,2±1,22%), СОЭ - 14,8±0,56мм/ч (исходный уровень - 6,4±0,18мм/ч), палочкоядерныс нейтрофилы - 3,2±0,09% (исходный уровень - 2,1±0,07%), сегментоядерные нейтрофилы - 76,3 ±3,2% (исходный уровень - 67,8±2,91), эозинофилы - 6,1±0,17% (исходный уровень - 5,7±0,15%), моноциты -7,4±0,35% (исходный уровень - 6,9 ±0,25%)

В опытной группе на девятые сутки эксперимента было отмечено дальнейшее снижение СОЭ, остальные показатели периферической крови нормализовались уже на 6-е сутки эксперимента Количество лейкоцитов составило 14,4±0,54 (исходный уровень - 14,4±0,54><109/л), лимфоцитов -26,1±1,12% (исходный уровень - 24,9+1,20%), СОЭ - 6,9±0,25мм/ч (исходный уровень - 6,4±0,18мм/ч) Процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов составило 2,1±0,07% (исходный уровень -

2,3—0,08%), сегментоядерных нейтрофилов - 65,2±2,96% (исходный уровень

- 70,1±2,95), эозинофилов - 5,5±0,15% (исходный уровень - 5,9±0,16%); моноцитов - 7,0±0,21% (исходный уровень - 6,8±0,25%)

Таким образом, при проведении антибактериальной терапии методом направленного транспорта, показатели периферической крови нормализуются быстрее, чем при введении антибиотиков традиционным внутривенным путем

Морфологическое обоснование применения метода направленного транспорта антибиотиков

При изучении полученных морфологических данных из разных контрольной и опытной групп был выявлен ряд морфологических особенностей

В препаратах почек собак на 3-й сутки эксперимента в обеих группах исследования отмечаются следующие изменения Морфологические изменения в корковом слое - эпителий проксимальных канальцев в состоянии гиалиново-капельной дистрофии В просвете некоторых канальцев

- белковые цилиндры Выраженное полнокровие сосудов Интерстиций с отеком Патологические изменения в мозговом слое — эпителий дистальных канальцев с явлениями выраженной гидропической дистрофии, в просвете встречаются белковые цилиндры. Наблюдаются многочисленные очаговые некрозы Местами канальцы разрушены, на их месте очаговые скопления лейкоцитов - микроабсцессы Отек и лейкоцитарная инфильтрация интерстиция, полнокровие сосудов, очаговые кровоизлияния

На 6-е сутки эксперимента в препаратах из контрольной группы животных выявлены следующие изменения В корковом слое почки наблюдалась гидропическая дистрофия эпителия клубочков В капиллярах клубочков - стаз эритроцитов Эпителий проксимальных канальцев - в состоянии гиалиново-капельной и гидропической дистрофии, в просвете канальцев - белковые массы В мозговом слое наблюдалась выраженная гидропическая дистрофия эпителия дистальных канальцев, в просвете некоторых - белковые цилиндры Интерстиций с явлениями отека, полнокровия сосудов, очаговыми кровоизлияниями Встречаются очаговые инфильтраты из лимфоцитов, плазмоцитов Количество нейтрофилов уменьшено, лейкоцитарные инфильтраты небольшие, встречаются редко

На 9-е сутки в контрольной группе преобладают пролиферативные изменения В корковом слое отмечалось полнокровие капилляров клубочков Проксимальные канальцы - с явлениями гиалиново-капельной дистрофии, в просвете некоторых канальцев — белковые массы В интерстиции встречаются участки периваскулярного фиброза В мозговом слое -уплощение эпителия дистальных канальцев В интерстиции - множественные прослойки соединительной ткани, очаговые инфильтраты из лимфоцитов гистиоцитов и плазмоцитов

В опытной группе течение воспалительного процесса изменяется

Так, на 6-е сутки морфологические изменения соответствуют фазе пролиферации воспалительного процесса В корковом слое - гиалиново-капельная дистрофия проксимальных канальцев, полнокровие сосудов Очаги периваскулярного фиброза - в интерстиции Эпителий дистальных канальцез уплощен В интерстиции - очаговые инфильтраты из лимфоцитов и плазмоцитов, очаговый фиброз

На 9-е сутки в опытной группе патологические изменения минимальны Сохраняется очаговая гиалиново-капельная дистрофия проксимальных канальцев Дистальные канальцы обычного

гистологического строения, просвет некоторых из них заполнен массами белка. В интерстиции - полнокровие и очаги фиброза Редко встречаются мелкие очаги лимфоцитарной инфильтрации

Таким образом, полученные морфологические данные свидетельствуют об ускорении темпов воспалительного процесса в опытной группе по сравнению с контрольной

Определение концентрации цефотаксима в плазме крови

Цефотаксим обладает слабой (менее чем в 2% случаев) нефротоксичностью, однако риск поражения почек может усилиться при совместном применении с аминогликозидами, амфотерицином В и при наличии фонового почечного заболевания, а также в связи с использованием таких петлевых диуретиков, как фуросемид и этакриновая кислота Если доза цефалоспоринов подобрана в соответствии с почечной функцией и при этом не используются другие нефротоксические средства, то риск ренальных повреждений цефалоспоринами минимален

Нередко в клинической реальности оказывается, что многие больные, которым показано лечение цефалоспоринами, уже имеют скомпрометированную функцию почек, вследствие возраста или заболевания почек, или требуют лечения другими лекарствами, которые тоже могут обладать нефротоксическим эффектом

Для максимального уменьшения риска нефротоксичности и повышения эффективности цефалоспориновых антибиотиков необходимо создать постоянную концентрацию в плазме крови без существенных пиков

В ходе экспериментального исследования было доказано, что цефотаксим проникает внутрь клеток крови или связывается с компонентами мембран этих клеток Для успешного проведения антибактериальной терапии пиелонефрита путем направленного транспорта необходимы не только высокая концентрация антибиотика внутри клеток крови или связывание с компонентами их мембраны, но и высвобождение данного антибиотика в очаге воспаления

С этой целью проведено исследование концентрации цефотаксима в плазме крови и почечной ткани животных с моделированным гнойным пиелонефритом При этом доза введенного цефотаксима составила 50 мг на 1кг массы экспериментального животного

Были исследованы образцы венозной крови собак через 5 минут, 1 и 6 часов после введения цефотаксима (табл 1)

Таблица 1

Концентрация цефотаксима в плазме крови экспериментальных животных через разные промежутки времени (М ±йп)_

Время, через которое производился забор венозной крови Концентрация цефотаксима в плазме крови, мг/мл

Контрольная группа (внутривенное введение) Опытная группа (введение цефотаксима методом направленного транспорта)

5 минут 352±9,4 143±4,2*

1 час 158±5,6 104±3,1*

6 часов 25±1,1 87±2,8*

* - различия статистически значимы при р<0,05

В результате эксперимента оказалось, что через 5 минут в плазме крови животных контрольной группы резко возрастает его концентрация, образуя пик Уже через час после введения концентрация цефотаксима падает до 158±5,6 мг/мл (в 2,2 раза), через 6 часов в плазме крови концентрация уменьшается до 25±1,1 мг/мл (в 14 раз) В опытной группе концентрация цефотаксима в плазме крови через 5 минут составляет 143±4,2 мг/мл, через 1 час снижается до 104±3,1 мг/мл (в 1,4 раза), через 6 часов концентрация в плазме крови уменьшается до 87±2,8 мг/мл (в 1,6 раза) (рис 5)

-♦—Контрольная группа (традиционное внутривенное введение) -А— Опытная группа (введение методом направленного транспорта)

Рис 5 Изменение концентрации цефотаксима в плазме крови при традиционном внутривенном введении и введении методом направленного транспорта

При введении методом направленного транспорта концентрация цефотаксима в плазме крови более постоянна, не образует резких пиков, что доказывает постепенное высвобождение антибиотика из форменных элементов крови

Таким образом, концентрация цефотаксима в плазме крови более постоянна, не образует резких пиков при введении методом направленного транспорта, что доказывает постепенное высвобождение антибиотика из эритроцита

Определение концентрации цефотаксима в ткани почки

Для успеха проводимой антибактериальной терапии направленным транспортом антибиотик должен не только проникать в клетки крови или связываться с компонентами мембран этих клеток Необходимы также высвобождение антибиотика из кровяных клеток и создание высоких концентраций в очаге воспаления.

При воспалении в ткани всегда повышается осмотическое давление, возникает ацидоз, увеличивается содержание воды Кроме того, при воспалении нарушается местное крово- и лимфообращение, прежде всего, микроциркуляция

При этом возникает спазм артериол, который носит рефлекторный характер и быстро проходит

Вслед за этим возникает артериальная гиперемия Расширение приводящих сосудов возникает в результате паралича вазоконстрикторов, сдвига рН среды в сторону ацидоза, понижения эластичности окружающей сосуды соединительной ткани.

Вследствие нарушения тканевого окисления и накопления в тканях недоокисленных продуктов развивается ацидоз

Сначала он компенсируется буферными механизмами, а затем становится декомпенсированным, в результате чего рН экссудата снижается Концентрация ионов водорода тем выше, чем интенсивнее выражено воспаление.

Исходя из вышесказанного, в случае гнойного пиелонефрита рН почечной ткани, вовлеченной в патологический процесс, будет сдвинуто в сторону ацидоза

Если в ходе патологического процесса изменяется кислотность плазмы, то одновременно изменяются и соотношение ионизированной и неионизированной форм молекул, циркулирующих в крови, и, следовательно, характер их распределения в организме.

По-видимому, при ацидозе происходит изменение заряда на поверхности мембраны форменных элементов крови, что приводит к десорбции антибиотика с поверхности мембраны и появлению его в ткани почек

Для подтверждения вышесказанного нами проведено исследование концентрации цефотаксима в ткани почек собак с острым гнойным пиелонефритом при традиционном внутривенном введении и применении методики направленного транспорта

В ткани почек животных концентрация цефотаксима на б-е и 9-е сутки эксперимента в контрольной группе составила 8,6±0,39 мкг/г и 9,2±0,43 мкг/г соответственно, в опытной группе - 21,5±0,98 мкг/г и 25,7±1,07 мкг/г (рис 6)

Из полученных данных следует, что при традиционном внутривенном введении цефотаксима повысить его концентрацию в ткани почки возможно только при увеличении дозы вводимого препарата

При введении цефотаксима методом направленного транспорта повышается его концентрация в ткани почки без увеличения дозы вводимого препарата

&

5 £

я Я

о

6 сутки

9 сутки

В Контрольная группа] □ Опытная группа |

Рис 6 Концентрация цефотаксима в ткани почек в контрольной и опытной группах

Таким образом, при направленном транспорте цефотаксим проникает в клетки крови или связывается с компонентами мембран этих клеток

После этого антибиотик постепенно высвобождается из кровяных клеток и создает высокие концентрации в очаге воспаления, что повышает эффективность проводимой антибактериальной терапии при остром гнойном пиелонефрите

выводы

1 Добавление раствора калия хлорида в концентрации 0,25 мг/мл в среду инкубации улучшает комплексирование цефотаксима с компонентами мембраны форменных элементов крови и проникновение антибиотика внутрь клетки

2. Для проведения направленного транспорта цефотаксима оптимальный объем крови, необходимый для связывания 1,0г антибиотика, составляет 30 мл при условии наличия в среде инкубации раствора калия хлорида

3 Через 5 минут после традиционного внутривенного введения цефотаксима в плазме крови резко возрастает его концентрация, образуя пик При введении методом направленного транспорта концентрация цефотаксима в плазме крови более постоянна, не образует резких пиков, что доказывает постепенное высвобождение антибиотика из форменных элементов крови

4 Проведение антибактериальной терапии методом направленного транспорта способствует повышению концентрации цефотаксима в почечной ткани в сравнении с введением антибиотика традиционными внутривенными инъекциями

5 Проведение антибактериальной терапии методом направленного транспорта в лечении острого гнойного пиелонефрита способствует более ранней нормализации показателей периферической крови и состояния экспериментальных животных, ускорению темпов воспалительного процесса

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1 Для введения 1,0г цефотаксима методом направленного транспорта необходима инкубация 30 мл венозной крови с антибиотиком в присутствии калия хлорида в концентрации 0,25 мг/мл

2 С целью повышения эффективноста антибактериальной терапии в комплексном лечении острого гнойного пиелонефрита целесообразно введение антибиотиков методом направленного транспорта

3 Проведение антибактериальной терапии методом направленного транспорта рекомендуется применять в периоперационном периоде с целью повышения эффективности традиционных методов комплексного лечения острого гнойного пиелонефрита

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1 Аносова, Ю А Выбор метода направленного транспорта антибиотиков в лечении острого гнойного пиелонефрита,

осложненного уросепсисом /В В Кузьменко, О В Золотухин, 10 А Аносова// Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья - 2008 - №34 - С 90-93

2 Аносова, Ю А Состояние иммунной системы у больных, оперированных по поводу деструктивного пиелонефрита 10 В Золотухин, А И Авдеев, Ю А Аносова// Современное состояние и перспективы развития медицины Сборник научных статей - Воронеж, 2006 -С 216-218

3 Аносова, Ю А Исследование распределения цефотаксима между клетками крови и супернатантом для проведения направленного транспорта 10 В Золотухин, Ю А Аносова, Ю И Аносов// Материалы III Всероссийской конференции молодых ученых -2009 -Т2 - С205-210

4 Аносова, Ю А Антибактериальная терапия методом направленного транспорта антибиотиков в лечении моделированного острого гнойного пиелонефрита у животных /В В Кузьменко, О В Золотухин, Ю А Аносова// Фундаментальные исследования в уронефрологии Материалы Российской научной конференции с международным участием - Воронеж, 2009 - С 242-243

5 Аносова, Ю А Направленный транспорт антибиотиков в лечении моделированного острого гнойного пиелонефрита /В В Кузьменко, О В Золотухин, Ю А АносоваН Актуальные проблемы урологии и андрологии, стандартизация подходов Материалы научно-практической межрегиональной конференции - Воронеж, 2009 -С 52-55

6 Аносова, Ю А Морфологическое обоснование применения метода направленного транспорта антибиотиков при остром гнойном пиелонефрите в эксперименте на животных /В В Кузьменко, О В Золотухин, Ю А Аносова// Актуальные проблемы урологии и андрологии, стандартизация подходов Материалы научно-практической межрегиональной конференции - Воронеж, 2009 -С 55-57

7 Аносова, Ю А. Антибактериальная терапия моделированного острого гнойного пиелонефрита у экспериментальных животных /В В Кузьменко, О В Золотухин, Ю А Аносова// Вестник Воронежского государственного университета Серия Химия Биология Фармация -2009 -№1 -С53-57

8 Экстракорпоральное насыщение форменных элементов крови антибиотиками для направленного транспорта /В В Кузьменко, О В Золотухин, В Н Золотухина, Ю А Аносова// Вестник Воронежского государственного университета. Серия Химия Биология Фармация -2009 -№1 -С 62-66

9 Аносова, Ю А Метод направленного транспорта антибиотиков в лечении острого гнойного пиелонефрита у экспериментальных

животных /В В Кузьменко, О В Золотухин, Ю А Аносова// Уральский медицинский журнал -2009 -№8 -С 103-105

Изобретения:

Пат 2329054 РФ, МПК А61К 33/14, А61К 35/14, А61М 1/38, А61Р 43/00, А61К 31/542 Способ насыщения форменных элементов крови антибиотиками / Кузьменко В В , Золотухин О В , Соколенко Ю А, Пивоварова Ю Ю, заявитель и патентообладатель ГОУВПО «Воронежская государственная медицинская академия им Н.Н Бурденко Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» - № 2006141945, Заявл 27 11 06, Опубл 20 07 08

Подписано в печать 16 12 2009г Формат 60x84 1/16 Бумага офсетная Гарнитура Tunes New Roman Печать RISO Объем 1,0 печ л Тираж 100 Заказ №3300

Отпечатано с готового оригинала-макета в типографии Воронежский ЦНТИ -филиал ФГУ «Объединение «Росинформресурс» Минэнерго России 394730, г Воронеж, пр Революции, 30

За последнее десятилетие отмечается увеличение частоты встречаемости больных с гнойно-воспалительными поражениями почек (Лопаткин Н.А., Деревянно И.И., Нефедова JI.A., 2000). Пиелонефрит является самым частым заболеванием почек и одной из распространенных болезней инфекционного генеза (Кошелев П.И. и соавт., 1995; Борисов И.А., 1997).

С хирургической точки зрения наибольший интерес представляют гнойно-деструктивные формы острого пиелонефрита, возникающие, как правило, на фоне обструкции (Лоран О.Б. и соавт., 1998). В то же время, широкое применение антибактериальных препаратов при деструктивных формах пиелонефрита часто мало меняет характер течения заболевания и его исход (Шабад А.Л. и соавт., 1998).

Неэффективность антибактериальной терапии пиелонефрита (даже при восстановленном пассаже мочи) объясняется вирулентностью микрофлоры, иммунологическими реакциями в очаге воспаления и в макроорганизме, общим состоянием последнего (Шабад А.Л. и соавт., 1998), а также развитием полиантибиотикорезистентности, наличием L-форм бактерий или реинфекцией новым возбудителем (Борисов И.А., 1997). В результате нарушений в системе гомеостаза снижается возможность доставки препарата в очаг воспаления и достижения необходимой концентрации в нём (Лохвицкий С.В., 1999).

Антибиотикотерапия становится эффективной при условии создания высоких, длительно сохраняющихся концентраций лекарственного вещества в очаге микробного воспаления (Борисов И.А., 1997).

Одним из возможных решений является поиск и изучение новых перспективных методов лечения, каким и является методика направленного транспорта антибиотиков (Ержанов О.Н., Швецов Д.А., Даниярова Б.А., 1996), что по эффективности и минимальной токсичности можно сравнить с точечным бомбовым ударом» (Карпушина И.А., Стеблева Т.Ф., Ельсиновский В.И., 2001). Направленный транспорт лекарственных средств в зону патологического процесса позволяет, наряду с созданием в ней высокой концентрации вводимого препарата, максимально снизить нежелательные реакции организма на медикаментозное воздействие, снизить терапевтическую дозу препарата и кратность введения (Луценко В.А., 2008).

Существует несколько методик экстракорпорального насыщения форменных элементов крови антибиотиками. Их можно разделить на две группы: объем забираемой крови составляет 280 мл и более (Ержанов О.Н., Швецов Д.А., Даниярова Б.А., 1996; Костюченко А.Л., Вельских А.Н., Тулупов А.Н., 2000; Карпушина И.А. и соавт., 2003; Абу Айда А.Ш., Горелов С.И., Каган О.Ф., 2006; Луценко В.А. и соавт., 2008; Сагитова Д.С., Мухиддинов Н.Д., Веселов Ю.Е., 2008). К сожалению, при остром гнойном пиелонефрите забор такого большого объема крови может утяжелить состояние больного.

Во вторую группу входят методы, где используются так называемые малые объемы крови - 20 мл (Швецов Д.А., 1996; Абу Айда А.Ш., 2008). Во всех описанных методиках для повышения концентрации антибиотиков в форменных элементах крови необходимо использование специальной аппаратуры. В изученной научной литературе нет четкого обоснования выбора необходимого объема форменных элементов крови для насыщения антибиотиками. Всё выше сказанное позволяет считать тему данной работы актуальной.

Цель исследования

Целью настоящего исследования явилось повышение эффективности лечения острого гнойного пиелонефрита путем применения метода направленного транспорта антибиотиков в эксперименте на животных.

Задачи исследования

1. Изучить возможность повышения концентрации антибиотиков в форменных элементах крови путем изменения инкубационной среды.

2. In vitro определить и обосновать объем крови, необходимый для связывания разовой дозы антибиотика.

3. Изучить кривые концентраций цефотаксима в плазме крови при традиционном внутривенном введении и введении антибиотика методом направленного транспорта.

4. Изучить влияние введения цефотаксима методом направленного транспорта на концентрацию антибиотика в ткани почки.

5. Изучить влияние введения цефотаксима методом направленного транспорта на эффективность антибактериальной терапии у животных с острым гнойным пиелонефритом.

Научная новизна

Установлено оптимальное соотношение объема форменных элементов крови и антибиотика для проведения направленного транспорта.

Изучена динамика концентрации цефотаксима в форменных элементах крови при изменении условий инкубационной среды, что позволило повысить содержание антибиотика внутри клеток крови.

Изучено влияние метода введения антибиотика на его концентрацию в плазме крови и ткани почки при моделированном остром пиелонефрите.

Дана оценка эффективности антибактериальной терапии острого пиелонефрита у экспериментальных животных при введении цефотаксима методом направленного транспорта.

Практическая значимость исследования

Проведенные исследования влияния калия хлорида на проникновение цефотаксима внутрь клеток крови позволили определить оптимальные условия для инкубации клеточной взвеси с антибиотиком.

Проведение антибактериальной терапии методом направленного транспорта позволит в значительной степени улучшить результаты лечения острого гнойного пиелонефрита.

Реализация результатов работы

Результаты работы внедрены в работу экспериментальной лаборатории ГУЗ «Воронежская областная клиническая больница №1». Материалы диссертации используются в учебном процессе на кафедре урологии государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Основные положения, выносимые на защиту

1. При инкубации клеточной взвеси с антибиотиком наличие в инкубационной среде раствора калия хлорида способствует повышению концентрации антибиотика внутри клеток крови.

2. Для проведения направленного транспорта цефотаксима объем крови, необходимый для связывания 1,0г антибиотика, составляет 30 мл при условии наличия в среде инкубации раствора калия хлорида в концентрации 0,25 мг/мл.

3. Применение метода направленного транспорта антибиотиков позволяет повысить эффективность комплексной терапии острого гнойного пиелонефрита, что выражается в более ранних сроках нормализации показателей периферической крови, состояния экспериментальных животных и ускорению темпов воспалительного процесса.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 136 страницах компьютерного текста, содержит 15 таблиц, 29 рисунков, состоит из введения, обзора литературы,

ВЫВОДЫ

1. Добавление раствора калия хлорида в концентрации 0,25 мг/мл в среду инкубации улучшает комплексирование цефотаксима с компонентами мембраны форменных элементов крови и проникновение антибиотика внутрь клетки.

2. Для проведения направленного транспорта цефотаксима оптимальный объем крови, необходимый для связывания 1,0г антибиотика составляет 30 мл при условии наличия в среде инкубации раствора калия хлорида.

3. Через 5 минут после традиционного внутривенного введения цефотаксима в плазме крови резко возрастает его концентрация, образуя пик. При введении методом направленного транспорта концентрация цефотаксима в плазме крови более постоянна, не образует резких пиков, что доказывает постепенное высвобождение антибиотика из форменных элементов крови.

4. Проведение антибактериальной терапии методом направленного транспорта способствует повышению концентрации цефотаксима в почечной ткани в сравнении с введением антибиотика традиционными внутривенными инъекциями.

5. Проведение антибактериальной терапии методом направленного транспорта в лечении острого гнойного пиелонефрита способствует более ранней нормализации показателей периферической крови и состояния экспериментальных животных, ускорению темпов воспалительного процесса.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для введения 1,0г цефотаксима методом направленного транспорта необходима инкубация 30 мл венозной крови с антибиотиком в присутствии калия хлорида в концентрации 0,25 мг/мл.

2. С целью повышения эффективности антибактериальной терапии в комплексном лечении острого гнойного пиелонефрита целесообразно введение антибиотиков методом направленного транспорта.

3. Проведение антибактериальной терапии методом направленного транспорта рекомендуется применять в периоперационном периоде с целью повышения эффективности традиционных методов комплексного лечения острого гнойного пиелонефрита.