Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Морфофункциональная характеристика репаративных процессов в печени при действии магнитного поля

. ,- Л г- г* П "'

ПО

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ МООКОВСКАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

На правах рукописи

САДОВНИКОВА Валерия Валентиновна

УДК 616.36-004-18-003: 612.014.426

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РЕПАРАТИВНЫХ ПРОЦЕССОВ В ПЕЧЕНИ ПРИ ДЕЙСТВИИ МАГНИТНОГО ПОЛЯ

(14.00.23 — гистология, цитология, эмбриология)

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

I

МОСКВА — 1992

Работа выполнена в. Нижегородском медицинском, ннети туте.

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор Б. П. Солопаев. Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Холодов Ю. А. доктор медицинских наук, профессор Афанасьев К>. И. доктор медицинских наук, профессор Чумаков А. А.

Ведущее, учреждение—Российский-; государственный медицинский университет.

Защита диссертации состоится ____ А_

1992 г. в._/_1_часов на заседании специализированного

Ученого Совета № 5 Д.074.О5,О5.при Московской Медицинской Академии (Москва, 119435, Б. Пироговская, 2—6).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московской Медицинской Академии.

Автореферат разослан « »_^ " , 1992 г.

Ученый секретарь специализированного Совета, доктор медицинских наук,

профессор В. А. ВАРШАВСКИЙ

i

: ï

I î

ОЕ&АЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Проблема регуляции и стимуляции восстановительных процессов в патологически измененной печенв существует многие десятилетия и до саг пор остается актуальной в оиологии и медицине. Исторически в генатологии сложилось представление о реларагивной регенерации кas о местном процессе, имевшим характер регеяерацноняой гипертрофии. В многочисленных экспериментах /&.А.Воронцова, 1949; Е.П.Солопаев, 19571980; Л.ДЛиознер, 1959 - 1284; З.А-Рябянина, В.А.Бенш, 1973; В. ф, Сидорова, 1976; В.Я.Еродсюй,И.В.Урываева, 1981; ÎÛWein -bren, 1959; C.fiadal ► F.iajdeîla ,1965; M,Buthei; B.A.iíalt , 1971 ж др./ были изучены элвмвнтаране закономерности этого процесса в норке е патологии - характер пролиферации гепатоци-тов во времени, распределение та в качана послв резекцот органа, процесс шлгшшднзадаи, двуядерностн а др.

При таком подходе к проблеме вякманге исследователей неизбежно концентрировалось на регезерирущем органе, на уровне которого велся поиск факторов, регтянруадюс пролиферацию гепа-тощггов, и стичулнтсров этого процесса. В соответствии с этш бит.и предложены многочисленные гипотезы цусковнх механизмов клеточной пролиферации: гегждашамнческие, гяперфукчБШ сохранившихся клеток, наличие местных рехулируншиг факторов - стимуляторов, квйлонов /Я.А.Алое, 1964; А.С.Л0ХИнов s др., 1976, 1931;А.Балая, Й-Блаяек, 1932; D. А.Романав и др., 1984; Г.Д. Туканшвкля и др., 19S0; Е. Sois , 1964; Б.Fischer, 1965» 1971; VOuHougK 19S5; C.Kadel, G.Boff a, 1975;£.Zivfi« , H-Ejvna, 1989; V-BLaiia,, 1990/. но аи одна нз них не является универсальной- и не обменяет все аспекты репараттаяого процесса, Tas в патологически ЕзшаенноЯ таченл /гепатит, цирроз/, несмотря ва -тбша 'аарввшш н. увеличение функциональной нагрузки гедатоцитов спонтанная регенерация органа слабо внраяэ-

на или отсутствует. Предложение на основании этого методы стю-'ляниш - резекция печени, термокоагуляция ее поверхности, введение ряда веществ далеко не всегда эффективны, не могут использоваться в клинике при наличии противопоказаний к оперативному вмешательству, а применение многих лекарственных препаратов ограничено возможность!) побочных действий.

Зе снижая значимости местиях пусков« факторов пролиферации гепатапиюв, такой подход к проблеме отражает недооценку других регулирующих систем организма, в частности, нервную, характер участия которой в этих процессах все еще остается дискуссионным. Не изучена роль нервной системы в репаративной регенерации патологически измененной печени.

Рассматривая проблему механизмов и стгауляцш' восстановк-

- тельных процессов с неврогеяной позиции, мн прежде всего исходили из полехеная о том, что патология печени, в частности, экспериментальчый гепатит и цирроз, являются системным процессом, и в регуляции репаративных процессов важная роль принадлежит яернной системе.

Одним из компонентов этой системы являются ганглии солнечного склзтения, которые яннервируют и регулируют метай ож-чесхие процзссы в печени /О.С.Меркулова, 1948; Н.В.Кердиварен-ко, 1964; З.Я.Каруцу, 1967; М.Я.Сапожкова, 1970; И.А.Булыгин, В.В.Солтаноз,' 1973; А.И.Амвросьев, 1977; В.М.Схох, А.Я.Ивщ те, 1989/. В связи, с этап, при моделировании патологического и ре-паратквяого процессов в печени нами большое внимание уделялось корреляции структуры печени ж ганглиев солнечного спле-

- тенкя /морфометрия, световая и электронная микроскопия/, сведения о реактивных изменениях которых в литературе отсутству-ат. Для опенки роли ганглиев в репаративных процессах были поставлены серии экспериментов с химической десимпатизацией

гуанетвдином и блокадой <£> и $ -ацреноренепторов.

Другим ватаым аспектом работы, вытекающим из патогенеза экспериментального гепатита и цирроза, как системного процесса, явилась разработка способа стимуляции репаративной регенерации и обратимости патологических изменений воздействием магнитного пода, которое используется в ?ледкцине при лечении ряда заболеваний. Преимуществом этого метода стимуляции перед дру-гют является возможность оказывать воздействие одновременно на печень и нервный ганглий, учитывая высокую чувствительность нервной системы к магнитным полям /й.А.Холодов, 1971, 1932; Н.Я.Артюхина, 1988; Л ..М.Меркулова, 1990; Т.Е.Белоусова,1991 и др./.

Особое значение для процесса стимуляции имеют биотропные параметры импульсного магнитного поля, пре.цде всего частотные, которые яри слабой напряженности тесно связаны с механизмом усвоения его ритма клетками. Известно, что с точки зрения системны?- представлений клетку можно рассматривать как гомеоста-тическув систему, включающую в себя различные контуры регуляции процессами энергетики, трофики, специфических функций и др. /М.Н.Кондрашова и др., 1987; С.Н.Тринченко, С.А.Загускин, 1989; С.Э.Шноль, 1989; Н.В.Авсеенко, и др., 1989; '1.В.Кудряв-цева, 1990 и др./. Деятельность каздого контура управления, а следовательно метаболического процесса, имеет свой биоритм. Важно отметить, что биоритмы под влиянием внешних ритмических воздействий могут в определенно:: диапазоне частот игиеняться-трансс^оршфоваться или усиливаться /В.Я.Бродский, 1973; Г.Н. Крнжаяовсхий, 1973; Д.С.Саркясов и яр., 1975 и др./. Следовательно, при подборе ритма /частоты/ импульсного магнитного поля возможен эффект его усвоения и усиления контурами управления нарушенного при патологии метаболизма, а тем самым дестэ-

билизации слоаашейся патологической системы с последующей нормализацией процессов аизяедеятельности. Поэтому, исходя из наличия низкочастотных метаболических биоритмов в клетках, лама для стимуляции йшго использовано низкочастотное импульсное магнитное поле /НМЛ/ с периодом 1-10 Гц, индукцией 100 мТл. Такая частота ИШ приближается по своей характеристике к импульсной активности симпатического ганглия /предельная частота 15-20 ими/сек., фоновая активность - 2-3,4 шп/сек./.

Таким образом, изучение механизмов регуляции и стимуляции репаративных процессов в патологически измененной печени проводилось в трех направлениях:

1. Системном подходе к оценке экспериментальной модели токсического гепатита и цирроза и механизму регуляции репаратив-ннх процессов.

2. Обосновании метода использования импульсного магнитного поля /в сочетании с резекцией печени я без нее/ в качестве сиэдулеторп рапаратташх процессов.

3. Разработка параметров и режима воздействия импульсного магнитного поля.

Дель забота. Изучений механизмов регуляции и стимуляции репаратявннх пгодессов в нормальной в патологически измененной печени на фоне магнитного воздействия с целью теоретического обоснования нового способа регенерациояной терапии хронических заболеваний печени.

При выполнении работы были поставлены следующие задачи:

1. Разработка метода стимуляции репаративной регенерации патологически измененной печени воздействием ИШ /в сочетании с резекцией печет,ч: и без нее/,

2. Оценка роли Ганглиев солнечного сплетения в патогенезе экспериментальной патологии печени и в механизмах регенерации.

3. Выяснение роли ганглиев солнечного сплетения и бгомемб-ран гепатоцятов в механизмах стимулирующего действия ИМИ на пролЕгферативяые процессы.

4. Определение оптимальных параметров и рекша воздействия ИМИ на репаративяую регенерацию печени.

5. Проведение сравнительной оценки стимулирующего действия импульсного магнитного поля с постоянным /ГШ/.

Научная новизна.

В работе впервые: выдвинута и обоснована концепция системной организации экспериментальной патологии печени /гепатит, цирроз/, а тем саман уточнен патогенез моделируемых заболеваний с учетом неврогенного фактора - симпатического отдела вегетативной нервной системы;

- показан характер стабилизация патологического процесса я формирование нового тканевого гомеостаза при длительном введении СС14;

- продемонстрирована возможность дестабилизации слояивией-ся патологической системы воздействием ИМП /в сочетании с резекцией печени к без нее/;

- установлено участие ганглиев солнечного сплетения в регуляции репарагивных процессов в регенерирующей нормальной я патологически измененной печени;

- выявлен стимулирующий эффект КЩ на пролиферации гепатодятов в зависимости от частот» воздействия магнитного поля;

- показано качественное различие в механизмах регенерации нормальной я патологически измененной печени при действии .импульсного и постоянного магнитных полей; ■

_ определены параметра и режим воздействия ИМП в зависшие-

ти от формы экспериментальной патологии печеяк, результатом

чего явилось теоретическое обоснование нового способа лечеюм

о

- 6 -

больных с хронически гепатитом - а/о 1 1614210.

Практическая значимость -работа. -Подученные данные о патогенезе токсического гепатита и цирроза печени и механизмах стимуляции репараттаных процессов импульсным магнитным полем могут быть использованы в ¿фактической медицине.

Внедрение получении* -результатов. На основе проведенных экспериментальных исследований на предприятии "Орбита" разработан аппарат импульсной магнитотерапии "Ai/MT-Ol", опытные образцы которого прошли клинические испытания в Главном военном клиническом госпитале им.Н.Н.Бурдеяко, первой .градской больнице им.Я.Й.Пирогова, в лаборатории морфологии Всесоюзного научного центра медицинской реабилитации и физической терапии .МЗ СССР с положительными отзывами о достигаемом лечебном эф. фекте.

Решением Госкомитета по новой медтехнике в Управлении по внедрен® новых лекарственных средств и медицинской техники ЬЗ СССР от 1? ноября 1986 года аппарат рекомендован к серайно-. му производству.

Соилестно с предприятием п/я А-3312 и клиницистами разработана инструкция по применению аппарата "AI&TT-Ol", утвержденная начальником Управления 9 ивня 198? года.

Аппарат "АЖТ-ОГ отмечен серебряной медалью ВДЙХ в . 1939 году.

Клгаические испытания предлокзиного нами "Способа лечения больных с хронически гепатитом" проведены на базе ГВКГ им. H.H. Бурденко /акт исгытаний от 17 июня 1983 года/. После курса лечения у всех больных хроническим гепатитом отмечалась нормализация биохимических показателей дале в тех случаях, когда медикаментозная терапия не применялась. Болевой симптом исчезал посла 1-2 процедур зтщльсной магнетотерашш. На основании из-

ложенного предложенный способ лечения хронических гепатитов признан высокоэффективным, недлительным, безвредным, экономичным и молет использоваться в практической медицине.Социально-медицинский эффект от внедрения предложения состоит е сокращении сроков лечения больных в стадии активации процесса на 3-10 дней, а также в быстром снятии болевого симптома. Имеется заключение о новизне и полезности данного способа лечения, утверзденное Всесоюзным центром медицинской реабилитации и физической терапии МЗ СССР от 28 марта 1989 года.

Магнитотерапевтический импульсный аппарат "АИИТ-01" предназначен для лечения больных не только гастроэнтерологическими заболеваниями, а также с заболеваниями периферической нервной системы и опорно-двпгательного аппарата человека /акт испытаний от 26 декабря 1985 года/.

Апробация работы. Основные результаты работы долояенк и обсудцены на заседаниях проблешых комиссий "Морфогенез клетки, тканей и организма в институте морфологии человека А'Ш СССР /1937/, "Магнитобиологня и магниготерапяя в медицине" /1988, 1989/, на пяти ме.-вдународшк симпозиумах и семинарах по магнетизму /София, Плевен, 1989, Талкент, 1989, Прага, 1990, Сочи, 1990/, на конференциях, симпозиумах и съездах Всесоюзного и республиканского значения.

Публикации. По теме диссертация опубликовано 22 работы, . получено 3 авторских свидетельства на изобретения - ЛВ 1015420, 1091214, 1614210, 3 рационализаторских предложения.

На здчиту выносятся следугщгта основные положения: 1. При моделировании токсического гепатита я цирроза установлено участие неврогенного фактора - сишатэтеского отдела автономной нервной системы. Патогенетической основой моделируемых заболеваний является формировании на основе существовали?

струкгтрно-^нщиональног /печень - нервный ганглий/ сэмопод- . держивэгшейся патологической системы и нового тканевого гомео-стаза.

2. В основе механизма' стимуляции репаративяых процессов является дестабилизация сложившейся патологической системы воздействием импульсного магнитного поля в сочетании с предварительной резекцией печени или без нее.'

3. Определенные на модели регенерирующей печени оптимальные параметры и режим воздействия ИШ /частота и длительность импульса, экспозиция/ вызывают синхронизация митотической активности гепатоштов, что свидетельствует о регулирующем действии магнитного поля на репаративный процесс.

Объем и структура диссертаот.

Диссертация содержит разделы: введение, обзор

литературы, методы исследования, результаты полученных наблюдений/ четыре главы/ ', заключение, выводы, указатель литературы к приложение. Работа изложена на 362 страницах, включает £3 таблицы, 144 рисунка, из них 46 графиков, 3 схемы, 4 фотографии аппаратуры, 32 электроннограшн. Указатель литературы состоит из 335 отечественных и 170 работ зарубежных авторов.

МАТЕРИАЛ И МЕГГОДН ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования выполнены на 9£3 белых, беспородных крысах массой 150-130 г. Из них на 293 животных изучали биологическое действие КС и ШШ на модели регенерирующей нормальной печени после частично!! гепатэктомиа.

Воздействие К.Ш создавалось генератором магнитного поля таадкцяеД юо мТл, на поверхности тела частотоЗ 1-10 Гц, дли-тельностьв импульса треугольной <£ор?ды 1,2-3,5 мс..продолжительность?) процедуры 15-30 минут.

Вес ар параметров КШ в аппарате обусловлен теоретически-

. - 9 -

ми рекомендациям!, содержащимися в работах У.Р.Зйдн, 1980; М.А.Шишло и др., 1981; Ю.А.Холодова, 1932, где говорится о существовании в электромагнитной биологии таг; называемого частотного а амплитудного "окна", в которых ffiffl обладает наибольшей биологическое активностью.

Форма, длительность и частота импульса приближены х характеристике нервного импульса, в частности к iTohobo;! активности симпатических ганглиев вегетативной нервной системы, ритм которой является низкочастотным /ВЛ.Скок; .1970; A.A. Ноздрачев.'ШЗ/.

Постоянное) магнитное поле индукцией 100 мТл создавали электромагнитом, сконструировала».) в ЧХ1 радиосвязи.

Были проведены три серии экспериментов, вклзчацидх 16 групп животных /таблица 1/.

В работе использованы следущие методы исследования:

1. Гистологические и нейрогпстологаческие /окраска гематоксилином И эозином, по Нисслю/,

2. Гистохимические /окраска по Шябадаау, по Зян-Г,гзону, по Фелъгену, тетразолкевач реакция/, •

3. Методы морфометрического анализа с помочыо сеток,

4. Цитофотоматритескяе,

5. Олекгрофизиологические /меибраннкЗ потенциал, постоянна«! времени мембраны гепатоцитов/,

6. Электронная микроскопия с морфометриеЗ оргзнелл,

7. Биохимические методы.

Пролифератквнуп активность гепатонитов оценивали но величине митотического индекса в промяллях. Для изучения низма действия ШП на пролиферативкке процесса в печезк йылг поставлены эксперименты с выключением вегетативных ¡гжульсот-

Таблица I

характеристика провдашх опытов и экжтаипмьшх воздвЛстМ

Серии экспериментов Группы животных Количество животных

Г о о 3

I - на модели регаларируюпой нормальной печени 293 животных 1 - Определение параметров и режима воздействия ИМП на пролифе- рацию гепатоцитов - внбор частота импульса, количества процедур. времени их проведения после резекции печени, экспозиция 2 - Влияние ИМП на пролиферацию гепатоцитов в условиях химичес- кой десимпатнзации хуаяетидином 3 - Влияние 1Ш на пролифэрацсп гопатоцитов в условиях блокада «¿-и ^ -адрэяорецептороп 4 - Гистологическое я морфометркчоское изучение структуры ганг- лиев солнечного сплетения через 2, 14, 30 суток после резекции печени 5 - Влияние ШЛИ на регенерацию нормальной пачаяи 6 - Рэгэяарация печени при углеводной нагрузке 7 - Определение мембранного потенциала и постоянной времени 114 19 46 27 70 <1

2 - на модели экспериментального токсического гепатита 394 животных 8 - Изучение стоуктурн печени и ганглиев солнечного сплетения в процессе сведения Сс1д в течение 'грех и пяти месяцев . 9 - Влияние ИМП «а пролиферацию гепатоцитов через 24, 28, 32, 36 48, 72 часа после резекции печени и а условиях блокадн «■£ и -адоояорецепторов 10 - Влияние ИШ на репаративные процессы в печени и ганглиях и обратимость патологических изменений - 2,14,30 сутки 11 - Оценка функционального состояния плазмолеммы гепатоцитов при действии ИШ: мембранный потенциал и постоянная времени постоянная времени в условиях углеводной нагрузки, АТ*>-аза, продукты пёроксидации: МЯА, ДК 40 105 23 191 14 21

Продолжение таблицы I

3 - на модели экспериментального цг.рроэа печени

/276 животных/

12 - Изучение структуры пачеии и ганглиев солнечного 35

сплетения пороз 5 месяцев после прекращения введения СсЬ.

13 - Влияние №.21 и ПМП на п по лифе рации гэпатоцитсв через 50

28,48,72 часа после резекции печени

14 - Влияние K.EI и ГП.'Л ка сепаративные процесс« в печени

и обратимость патологических изменений чороз 30 и 60 148 суток

15 - Изучение действия ИМП и ШП на резорбцию соедините ль-

ном ткани

16 - Влияние К.21 на глияогвнсинтетичвскуа функции почени 43

- 12 - . - • , . ; солнечного, сплетения путем частичной десимпатизации гуанети-дином в дозе 50 мг/нг массы внутримышечно в течение 14 дней й последующей резекцией печени и воздействием ИМП. У каждого животного подсчитывала . количество сохранившихся нейронов на тест-плодади квадрата измерительной сетки и одновременно кзу-

чади митотическув активность гепатсцитов регенерирующей печеЯ

¿f-

В другом эксперименте влияние МП ■ на пролиферацию гепатй ц7лов изучали в условиях блокады адренорецепторов соответств! щими йарглакологическими препаратами: анаприлином /блокаторЫ <Ь -ааренорецепторов/ и фентоламином /блокатором «¿-адрепорй цепторов/ в дозе 20 мг/кг массы животного в количестве 8 инъ<5 ций ежедневно 2 раза в день.

Восстановительные процессы в патологически, измененной печени изучали на моделях экспериментального токсического гепатита и цирроза, создаваемых поднояянм введением 70? раствора четнреххлористого углерода в растительном масле в дозе 0,3 мл 4 раза в неделю, в -течение трех и пяти месяцев. После прекращения инъеихий все экспериментальные няватние били разделены на следующие труппы: 1 - ичтактные,

2-е исходной патологией /гепатит или цирроз/.

3 - кивоткш, подвергавшиеся резекдаи левой боковой доли печени - оперированннй контроль,

4 - £угвотн№ , подвергавшиеся воздействию ИГЛП после отмени CCI. /10 процедур ежедневно по 15 минут/,

Б - животные, подвергавзиеся воздействию ИШ /или ПМП/ после резекции печени /10 процедур на курс лечения/. Повторный куро чагкптотеразт проводили через месяц после первого, в - жпвсткке с экспериментальной патологией печени, подвергав-* глася латчротомки - гепатитный и циррозный контроль.

Количественное показатели репаративннх процессов в печени к ганглиях солнечного сплетения оценивали методами мотфо-•-•етрического анализа, основанного на принципах стереологш /А.А.Глаголгв, 1941; С.¿.Салтыков, 1976/. Измерения проводили с поточо-п чорТ-очетрически сеток, преллохеннкх С.Е.Стейачо-гл~г. /1972, 1Г-74, 1981/, с использованием методических реко?тен-лггжЯ по ттопгтоствеччой морфологии биоптатов органов пищеварения /;'..."'.Сололаева с соавт. ,1932/. Подсчктьйали количество кор-малыня и дистрофических гепатоцнтов к нейроцитов, суммарный и средний объем ядер я .«цршек, позволяющий судить об их гипертрофии.

'Злияние КЗ на глккогенсинтетяческую функции геп- тоцктов патологически измененной печени изучали в условиях функционально? нагрузки. Перед забоем после 24 часового голодания в низка» полую вену вводили 4С$ раствор глюкозн из расчета 2,0 мл/ яг массы животного. Продолжительность углеводной нагрузки составляла 30 минут /подобрана экспериментальным путем/. Содар-хание гликогена определял:* методом морфометрического анализа интенсивности гистохимической реакции /ИГХР/, а такке пигофо-тометрически по средней оптической плотности препарата на световом сканирующем микроскопическом комплексе "Про: " ояектроника-В" в ВДЙ эпидемиологии и микробиологии.

Активность АТФ-ази выявляли свинцовта методом в модификации ЗЛойда /1Р79/. Величину АТФ-азн определяла визуально, проводя ранжировку ИПР с последуипгм мор^ометрнчесиш исследованием с помогцью окулярной сетки.

Содержание ¿НК определи.*- цигофогомегрячэским кетодэк в мазках, окрашенных по Фельгеяу, вря длине волнн 546 н.ч на "микрофотометре МЦФУ в Институте морфологии человека АН СССР.

' Мякрозлектродная техника для исследования иембракного го-

теядкала /Ш1/ г постоянной времени / включала б себя стеклянный кикроэлектрод с диаметром вархузки мензе 1 мк, масляный" ?якро^аяшулятор сильфоняого типа, катодный повтори-тэль, дшухлучевог осциллограф с усилителем постоянного тока г неточная прямоугольных импульсов.

Зля оценки функционального состояния мембраны гепатопдтов патологически измененной печени у яизотанх, подвергавшихся ' воздействии ИМП, найладаяи динамику в условиях углеводной нагрузки.

Материал для алеетронномгофоскопичесяяг исследований фиксировала и окрашивали общепринятый методом. Срезы толщиной 450 нм изготйвлгаали на ультрамикротоме КБ-800, просматривали б электронный шпероскод М-125 при увеличении 9-20 тысяч. Количественное исследоваите ертанелл гепатшитов' проводили методом мо14сметрического анализа по Вбйбелю /1369/ в модификация С.Е. Стзфанова /1574/. Измерения проводили при увеличении негативов 30 тнеяч по заданной степени достоверности /Р 0,05/ с помощью таблиц Р.£.Стреляова /1566/.

Об энергетическом статусе гепатоцитов судили по содерза-шго в тхеяз печени аденклозых к гуаниловых нуклеотидов микра-хроматотрафцческлм методом Д.И.Иванова, 1.Я.Рубель, 1369/. 2яергопот«ЕЦиал вичислялк по формуле: х^^ТО^+^ЖЯФ--У ровекь ззрагасного окисления липидоб /ПОЛ/ определяли по содержании малок ад ого диалвдегида А«Щ/ и диеновкх конъягатов /Ж/ по методу й.Д.Стальяой /1977/.

Изменение белкового спектра сыворотки крови изучали мето-, дом электрофореза на бумаге Л-Е.Гурвич, 1964/. Вычисляли аль-бумкно-ютбулиЕОвнЗ коэффициент /к/1/. Материалом исследования остаточного азота и мочевины бнла енворотка кровз киеоткых с аккдаок печени. /Е.5.Берхзга, Ю.Й.Йванов, 1972/.

- 15 -

Б крови исследовали ссяержакяе гемоглобина л его дериватов - глет-, карбоксн-. сульфгемоглойкЕа, глккозн. Осмжгческую резистентность эритроцитов определяли по степени гемолиза зрит-рог~?ов в заоуфер-эявнх растворах /гипотонических.-'' хлорида натрия в модификации 1Л1.йдельсона/19?4/.

О состоянии углеводного обмена судили но активности ЦТ, определяемой методом Г.А.' Кочетова /1971/, а также до содержанию пирузата и лактата в сыворотке крови.

Биохимические и электронноуякроекогыческие исследования . б иди проведены в Ш-СГе НП®. Цитофотоиетрические показатели получены совместно со ст. научн. сотр. Института морфология человека АН СССР к.м.н. А.Я.Свщевкм и асс. каф. биологии КГШ к.б.к. Н. Л. Ивановой. Консультации по нейрогистологии осуществлялись проф.каф. гистология НШИ А.Г.Гретеном. Э^ектрофизаологические исследования выполняли совместно с асс.каф. физики НП® А.П.;'лгтанншсовш.

Оценки средних арифметических к достоверности различий средних методом непрямых разностей проведены с использованием формулы Петерса /Е.В.МопдвЕичуте—Эрипгене, 1964/. Доверительный интервал колебания средней аряф,гетЕЧ&ско& золичинк прт Р=0,05 определяли до формуле и таблицам Р.Б.Страггксва /1966/,

РЕЗУЛЬТАТА ШЖШВАННЯ К ЮГ ОВЗЩЗШ

Для изучения репаративнсй регенерации как системного процесса использовали модель регенерирутаей нормальной и патологически измененной- печени после частичной гепетэктомш*. при воздействии ИШ во взаимосвязи с динамикой структурных изменений ганглиев солнечного сплетения.

Оценивая реакция гачглиав солнечного сплетения в процессе регенерации нормальной печени после резекции чада. органа, е.:е-

дует отметить наиболее выраженные изменения нейронов на вторив сутки после операции /Ь.В.Садовникова, 1990/. Уменьшается количество нейронов, резко внратана гипертрофия ядер, средний объем которых возрос по сравнению с интактными животкши в два раза и составил 0,79 ± 0,15 усл.ед. /до операции 0,38 + 0,01/. Более чем в два раза увеличился процена ядер с несколькими ядрыакама-41,5Б £ 4,45? /до операции - 14,9 + 2,02/, а также число дв>я-дерных нейронов - 4,97 £ 0,45?, в то время как у ингактнкх . крыс они встречается лишь в 0,81 ± 0,20?.

Глкбхи хроматофильного вещества нейронов интенсивно окра-иены, что свидетельствует о повышении активности синтетических процессов в ганглиях. Однако, для 20* клеток характерны явления центрального хрома', злиза - реактивная йаза аксональной реакции в ответ на повреждение отростков при резекции печена. Известно, что травма печени в эксперименте /разрезы, слепые и сквозные отверстия/ вызывают в течение первой декады дегенеративные , а затем регенерационнш- изменения ее нервных элементов с посдадутеда разрастанием сохранившихся нервных волокон. При удалении части или целой доли печени происходит компенсаторное разрастание рврвных элементов в оставпихся гипертрофированных долях /ВЛ.Егдупу. 1957/.

Пэчекь нормальных животных отвечает значительным повышением проликергтгтаой активности гепатоцитов в отвел на резекция части органа с максимальным подъемом числа митозов на 1-2 сутки после частичной гепатэктомии.Восстановление исходного веса нормальной регенерирующей печени наблюдается к 14-21 дню после операции, В структурном отношении отмечается некоторая гипертрофия печеночных клеток, обусловленная повышением плоодности ядер гепзтопитов на 14-30 сутки после резекции /В.ф.Сидорова, 156Э; З.А.Рябинина, З.А.Еенш, 1573. и др./.

Реакция нейронов на 14 сутки после резекции печени менее выражена по сравнении с предыдущим сроком: уменьшилась гипертрофия ядер, число двуядеряых клеток, почти б два раза меньше количество ядер с дауна ядрышками. 7 большинства нейронов -увеличение глкбок хрокатойильного вещества, что свидетельствует о репараткзноЗ <?азз аксональяой реакции. Зстречазтся лишь единичные клетки с интенсивно и дяпйузно окрашеннш базотиль-EKJ ядром, а к концу месяца после резекции печени структура гакглпез солнечного сплетения полностьз нормализуется.

Тзкгм образом, при моделировании регенерациоякого процесса на нормальной печени в каждом из анализируемте элементов структурно-функциональной системы /печень - симпатический ганглий/ развивается реактивные изменения в гиде гипертрофии ядер, деления клеток, увеличения числа ядрьшек, двуядерности, аксо-нальной реакции.

Полученные дачные и дачные литературы /В.Я.Карупу, 1967; E.H.Мелькая, 1570; Й.А.Вулыгин, В.Б.Солтачов, 1973; А.П.Лмз-росьев, 1977 и др./ свидетельствуют о наличии прямнх и обратных связей ганглден солнечного сплетения с печенью. При резекции печени поврелшзэтея ее нервный аппарат, в результате чего происходит его перестройка., сопровоетаащаяся регеяерациеЗ нервных волокон и их окончаний, а такке появлением нейронов о аксо-нальной реакцией и активизацией обменных процессов в ганглиях солнечного сплетения.

Для ранения вопроса о роли неврогеявого Фактора в патогенезе я репаративннх процессах ори токсическом гепатите а циррозе печени проведено морфологическое изучение структуры ганглиев солнечного сплетения в процесса воспроизведения экспериментальной патологии : печени воздействием СС14, а также дача сравнительная оценка обратимости патологических изменений в

печени и ганглиях у киботнш: с токсическим гепатитом после мзпятотератга, после резекции аачони и при сочетании резекции с последующий воздействием ИМЯ.

Введение яивстннм CCI,,.оказывает токсическое действие не только аа гепатоциты, но и на нервные клетки, в частности симпатического ганглия. В печени при этом развивается дистрофические процессы б виде белковой и жировой дистрофии, очаговых некрозов, увеличении числа патологически измененных клеток /А.1,Ъ%/, их гибели, диффузной инфильтрации стромы органа ируглоклеточными элементами. При продолжавшемся введении СС14 /пять месяцев/ избыточное разрастание соединительной ткани приводит к развитию езрроза.

Проявлением гьтоксиксшш в ганглиях солнечного сплетения можно считать изменение хроматофкльного вещества,выражашеася в равясмэраом распределении и слабом окрашивании его элементов в цнтсолазме большинства нейронов, что связано с обеднением метек рибояуклеопрстездаш. Число пшшоморфных клеток и с лиэирущишед ядрами - клеток "теней" - составляет около 205».

. Выпадание нейронов у хивотакх с токсическим гепатитом наблюдали в 23,55?, с циррозом - в 34,реакция стромы проявляется в виде гиперплазии глиалдап. элементов и обильной круглокпеточ-ной инфильтрации, В скнаигсах уменьшено количество синалтичес-клх пузырьков, ве выражены активкве зоны, Митохондрии находятся в различном функциональном состоянии.

Наряду с дзетрухтизннш процессами, в ответ на интоксиха-ци» в печена ж ганглиях развиваются,компенсаторные реакции в виде гшертрофш ядер гэдатоцитов и нейронов, увеличении числа двуяцернкх вейроцитов з количества ядрылек в них. Средний объем ядер геаатодатоз составил С,48^0,03 усл.ед. /у иктахт-ннх - 0,27iP,0^, ядршгех - 0,21+0,21 уел.ед. /у иатактнах-0,17/.

- 19 -

Средний объем ядер нейронов возрос с 0,33+ 0,01 до 0,55+ 0,05 усл.ед.. В цитоплазме оставшихся иейроноБ глнбкя хромато-фильного вещества интенсивно окрааены, возрастает число ядер, содержащих два и более ядрышек - 24,4*2,35 /у кнтактша 14,9* 2,01'. #

Таким образом, внра.т.енные морфологические изменения б структуре ганглиев солнечного сплетения лги ввздаяии СС1^ /нападение нейронов, нарушение связей с центральной нервной системой, дисрофэтестае явления/ свидетельствует об участии вегетативной нервно? системы в патогенезе хронического гепатита и цирроза и формировании на основе суиестьования структурно цяональной /печень-ганглий/ патологической системы, обладание« другими параметрами и свойствами. Прг этом нервное звене данной систему изменяет свою адаптивную и трофическую функция, а следовательно регуляторный характер. По деянш рдаа авторов Н.Х.Григоровская, 1953; Л.Й.Плетанова, 1956 и др./ при гепатите и циррозе печени в нервном аппарате ее возникав? глубозгае дистрофические изменения, соцровождашиеся распадом части нервных волокон и их окончаний и характеризующиеся отсутствием спонтанной регенерации.

Поскольку такая система структурно фиксирует новое /патологическое/ состояние, сна становится.достаточно устойчивой. .Деятельность ее слабс корректив егся другими системами управления, в частности ЩС /нарушение связей/, и может сохраняться в организме в виде патологического очага длительное время. Отсюда слабая способность' к спонтанной регенерации. Поэтому в основе патогенетической' терапии токсического гепатита и цирроза должны лежать воздействия, нанравленнне на дестабилизации сло-живаейся патологической системы и нормализацию структура составляющих ее элементов - гепатоцигов и нейронов.

- 20 -

Как показали эксперименте, такими дестабилизирующими па-толотачесхуп систему воздействиями являптся:

1, Резевдия.части печени - действие, направленное преимущественно на одно звено патологической системы — на печень,

2. Воздействие магнитным полем - неспецкфический фактор, акти-визирувдиЗ обменнме процессы з клетках /акт ив ария мембранных рецепторов, ферментов/ как в печени, так и е нервной ганглии.

.Важным для сохранения гомеостаза, нарушенного при моделировании патологического процесса введением СС14, является возможность направленного изменения деяте.пькости органа или клетки ь ритме с действием экзогенного, импульсного, ритмического раздражителя.

В связи с теи, что организм представляет собой сложную колебательную систему с широким спектром частот, например, низкочастотные метаболические биоритмы гликолиза - 1-3 шн., АТС-азной активности - 3-5 с., окислительных процессов - 15" с. я др. /С.Э.Шноль, 1S67; М.Н.Кондраисва, Ю.Г.Кашнскгй, 1971; А.С.ЙО-Еикова, 1973; V. Jira el et al., 1975; b.Htss , 1976/, существенное значение в его функцкоякрозании шаят явления синхронизации s резонанса.

Известно, что электромагнитные поля малой напряженности способны тзнзывать значительные биологические эффекты, свидетельствующие о наличии в биологических объектах систем, реагирующих резояаненнм образом /В»М.Аристархов а яр,, 1978; И.В.Торогщев, С.В.Таранов, 19S2; Л.П.Барсукова и др., 1983; А.И.0ихлзрова, Е.П.Коробейникова, 1339; ..Н.Д.Девятков и др.» 1936; Л.А.Пиру- . зяя и др., 1991/.

Экспериментальна показана возможность воздействия ЮТ ин-дукцие! 100 мХл частотой 10 15ц на контуры управления различными звеньями метаболических процессов, имевших колебательный ха-

рактер.

Импульсное магнитное ноле стимулзрувг глихогенсгптетгчес-кую функцию печени - интенсивность гистохимической реакции составляла у животных, подвергавшихся после частичной, гелатэкто-ки.' воздействию магнитного поля, 37,3*0,33 с алла, у контроля /без омагнк'.'ИЕакет/ - 20,3+0,36, у циррозного контроля -10,50,27 оалдов; быстрее восстанавливается белково-сгнтзтцчзспа': функция. Ь сыворотке крови животных с токсическим гепатитов поЕыязется содержание альбуминов, нормальных значенш* достигают показатели белковых фракций, величина А/Г коэффициента. Ото обусловлено активацией окислительных процессов при магнитном воздействии, о чем судили по повышению коэффициентов энергетического обмена - АТФ/АЖ и А7С/АД5.

Многочисленными работами показана синхронизация синтетических процессов гезатоцгтов /синтез белка, £ЕК, актавздия фзр-ментов и т.д./ в соответствии с ритмом действующего раедрата-теля, когда природа внешнего задающего тжтма с определенной кратноегм! соответствует внутреннему ритму организма /В.Я." Бродский, 1373; В.В.Серо4 Й.В.Попоэа, 1973; А.А.Пальпкн игр., 1973; Л. С. Саргассов и др., 1975/.

Изучение мхтотсческой активности гепатоцптов регенерирув-шеЗ нормальной печени при действии И?Ш разной частоты доказало увеличение количества митозов на частотах 5 и 10 Гц. Величина митотяческого индекса через 24 часа после резекции печени и воздействия ИМИ составляла на частоте 1 Гц - 31,07+3,31»., на частоте 5 Гц - 59,50±6,Ю&, на частоте 10 Я* - е2,77«3,15& /у контроля - 21,70+3,10^»/, что может быть обусловлено синхронизацией пролшфегативной активности в регенерирующем органе.

Экспериментально установлено, что воздействие магнитным полем целесообразнее проводить не ранее, чек через 6-3 часов

после резекции печени, что связано, по-видимому, с повшекной чувствительностью клеток регенерирующей печени к стрессоряьм воздействиям в зререшшкативный период мятотического цикла.

Известно, что первые митозк в гепатоцктах появляются через 20 часов после резекции органа, в дальнейшем дина-лика пролифе-ративяой активности имеет волнообраэннЯ характер с максимальным значением датозов на 30, 43 и 72 сутки после операции,т.е. в течение первьк трел дней. В связи с этим для достижения эффекта повышения числа штозов воздействие МП целесообразнее проводить в ранние сроки после частичной гепатэктомки. В наших экспериментах животных подвергали воздействию магнитного пота в течение первых трех суток после резекции печени: в день опзрашш, яа следулдкЁ день и через день. Величина ммотичес-кого индекса гепатошгасв составляла через 24 часа после резекции 62,77+6.16^0, через 48 часов - 55,0±4,ЗС$о, через 72 часа-63,41+6,50^0 /в'контроле соответственно: 21,77+3,07*0, 26,50+ 3,1®5о, 14,?3±1,5С£о/.

Звеличение количества митозов в регенерирующей нормальной печени при магнитно» воздействии в указанные сроки после опера-дик подтверздавт данные литература о наличии нескольких суб-фраюцй проляферируюшга гепатоцктов, фазы кетотаческого цикла которых сдвинуты относительно друг друга /Л.К.Романова, 1984/.

Стимуляция проляферативноД активности гёпатоцитов воздействием !Ш наблюдается и при регенерации патологически измененной печени. Величина штотического индекса гепатоцитов у живет-нюс с токсическик гепатитом г циррозом, подвергавшихся после реэекдии печени окагикчив&чга», в три раза превышала число митозов у контрольных животных. Следует отметить более высокую пролнЗератиэнуя активность гепатоцитов у животных с гепатитом до сравнении с циррозом. Митотический индекс составлял через

23 часов после резекция печени 49,70+5,21^0 /у контроля без омагнкчивания - 16,00+2,50&>/, в дарротически измененной печени - 30,37+1,16>о /з контроле - И,45+0,2С%э/. Через 48 часов после операции уитотэтеская активность у тавотных обеих экспериментальных групп была выражена в меньшей степени: Ж=16,70+ 2,90^0 /з контроле - 10,50+0,50&>/, с циррозом - 16,80+2,70^0 /в контроле - 7,37+1,70&>/.

Более в-покие значения митотического индекса через 23 часов после частичной гепатэктомии и магнитного воздействия указывают на сокращение продолжительности зеего митотического цикла. Это предположение нашло экспериментальное подтверждение при воздействии Ж.Ш на культуру ФЭК /С.В.Таранов, 1973/.

Значительное увеличение числа митозов при действии уСЯ1 связано, по-видимому, че только с синхронизацией пролифератав-ной активности гепатоцнтоз, а такжз с усилением синтеза ДНИ. з регенерирующей печени омагпиченннх животных с токсическим гепатитом. 7?.е через 24 часа после частичной гепатэктомии и магнитного воздействия число митозов составляло 21,35+1,50^, в то время как у больаиыегза животных, не подвергавшихся воздействию ИМИ, жтозов в этот срок не наблюдалось. Через 23 часов, во время пика митозов /МИ=49,70+5,20£о/, з печени омагниченных животных отмечалось псвыпгониэ содержания ДНК - 0,29x0^01 /сравните: через 24 часа величина средней оптической плотности = 0,21+0,01/.

Для решения вопроса о механизмах стимулирующего действия ИМЯ яа пролифераци® гепатоцитов были поставлены опыты с частичной дееимпаткзацией гуанегвдияом, а также с использованием ад-ренергических препаратов - об и Л -адреноблокаторов: фентол-а»лгаа и апапрклина.

Данные литературы о роли медиаторов симпатической нервной

системы в регуляции пролиферативню; процессов противоречивы. Одни авторы считают, что снижение уровня катехаламинок в тканях при хирургической Л'.А.Алов, 155э; М.К.Захаров, 1955; £>. ЬиНсКиХс?, Л.ие^еТа,- 1977/ г химической /К.КНап.ХРвг.-еа, 1973/ десимпатизааии тормозит ьжтотическу» активность, другие /0.Б.Волкова, С.Ь.Тарабркн, 1975, 1578/ сообщают о протиьопо-лихлом эфректс.

Изучение мнтолгческо!; активности гепатоцитов регекариру»-зе£ нормальной печени животных з условиях химической. десимпа-тизадил не вкявгло ст;гдулиружшэго эффекта ffi.il на пролкферациг клегок при почти полно:.; разрушекгк нейрог.оь ганглия солнечного сплетения. Мзтотическяй индекс гепатоцитов составлял всего лкаъ 3,40*1,00£о. Лрп меньшем выпадении нейронов МЛ достигал значительных величин - 20,00+3,35!?о. В условиях полной десимпатизааии мито-гаческая активность гепатопитов отсутствовала. Полученные данные подтворхдазэт роль неврогенного фактора в регуляции дролкферативЕлХ процессов.

Следовательно,в механизмах стимулирующего действия Ю.Я на пролиферацию гепатоцитов существенная роль принадлежит сга-патичесжолчу отделу вегетативной нервной системы - ганглиям солнечного сплетения.

Не менее важная роль в механизмах реализации действия квтехолзиаж® на процесс клеточного деления принадлежит мегй-раннки рецепторам, в частности адренорепевторам.

Б литературе отсутствует единая точка зрения по вопросу о зависимости пролЕферативнкх процессов от состояния адренер-гической иннервации в организме. Многие исследователи на основания изучения роли адреналина и норадреватша в процессе клеточного деления прилик к выводу об их участии в реакции торможения клеточной пролиферации. Однако, имеются сведения, что в

некоторых органах катехслашшы не проявляет ¡шгибяруодего действия на дапотяческую активность Д.А.Андронова, 1984/•

О стимулируюзем действия катехоламиноо на пролифератявнке процессн при репаративной регенерации печени свидетельствует данные П.А.Вундер, В.П.Бундер /1973/ при введении адреналина в . сочетании с геофюшшом. Таким образом, в. разных органах кате-холамины могут тормозить, симулировать елз не оказывать действия на пролиферацию.

Установлено, что возбуждение «¿-адренорецепторсв или блокада ^-адренорецепторов оказывает сткмулирутадее влияние на пролиферацию тепатощиса регенерирующей печени /Т.А.Андроноза 1980-1983/. Даннна о роли различного функционального состоявкя адренорецепторов в регея ерационяон процессе подтверадаю? результаты исследования действия б локаторов, стимуляторов адренорецепторов на пролиферативные процессн в яечеки в условиях хнгягчес-кого канцерогенеза /В.К.Гуркало, Н.А.ЗаЗежпнскаЗ, 1974, 1933/.

Изучение митотической активности гэдагоцитсв регенерирующей нормально® и патолотичаски измененной печени аявотннх, - подвергавшихся после частичной гшгатэктеши воздействию магнитного поля в условиях блокадн адренорецепторов выявило стимулирующее действие • Ш1 на пролиферации тепатодатов при введении -«¿-ад-реноблоютора фентоламина. Величина мнтотаческого индекса гепа-тоцитов нормальной регенерирующей печени составляла €0,00^8,7?Ео, у оперированного контроля - 14,30+0,353ьо. 7 животных с токсическим гепатЕТом штотичеекий индекс, возрос. почти в пять раз по сравнении с жквотныют, не подвергавшимися магнитному воздействии - 43,3^6,3^0, в контроле. - 9,20±1,13&>.

Возможно, Ш1 снимает блокаду адренорецепторов мембраны гепатоцитов, что является пусковым механизмом, ангщзирующш вступление клеток в митоз.

Существует мнение, что регуляция пролиферативных процессов зависит такхе от состояние плазмолеммк клеток, в частности ее заряда, проницаемости и др. /й.К.!£теыки£ и др., 1979;

H.Kalant, 1961; G.Yee Ann, 1972: К.S.Koch. E.Leffert. 1979; SoBsnek Erst , 1980; E.Cajone, G.Gaja, C.V.Serbe! , 19-35/.

Плазмсяеммз хепатоютов является динамично!! структурой, • активно реагирующей на различную функциональную активность клетки и способной изменять адгезивнке свойства под влиянием физических, химических и биологических агентов /В.й.Архипенко, 1974, 1932; A.C.Короленко, 1»А.Чуич, 1974; Б.Б.Садовкикова, 1932; Б.К.Залцмане, 1936; З.С.Горшгейк, 1966; А.С.Логинов и др., 19SS: J.L. Farber, 1980/. Обнаружено, что после частичной гепат-зктомии происходит ослабление межклеточных контактов в регенерирующей лечвни, вызывающее временное нарушение ионного гомео-стаза метки, что приводит к увеличению сдвигов различных физико-химических параметров клетки: увеличивается ионная проницаемость ыелйранн, усиливается поток калия из клеток, меняется редоск- и мембранный потенциал /А.П.Кашулкна и др., 1972; A.C. Ильин, 1978; А. Г. Маленков, Г.А.Чуич,_ 1979; Л.А.Радкезич, 1931; Ю.К.Епздшй ж др., 1989/.

Оценивая функциональное состояние плазмолетялы гепатоцитов патологически измененной печени отмечали нарушение ее проницаемости. о чем судили до снижению ферментативной активности, величины мембранного потенциала и постоянной времени мембраны гепатоцитов: М1=21г60+0,86 к V , С = 0,43+0,03 мс.. Через две недели после магнитотаралш величина Ш увеличилась до 30,80+

I,55 mV/у интакгвых 45,00+1,87 mV/, постоянная времени - до 0,63+0,16 мс. /у интакткых 0,86+0,10 мс./. До-видимому, при действии ИШ в клетка увеличиваются энергетические ресурсы, которые путем активации K-зависимой АГФ-азн повышают мембранный

потенциал.

Гистохимическое определение активности АТФ-азы свидетельствует о повышении активности плазмолемин гепатоцитов патологически измененной печени у животных посла магнитотврашш -2,32x0,50 усл.ед., до лечения - 1,29+0,18 усл.ед..

Пониженное содержание АГ9 в ткани печена /1,16+0,07 ;жМ/г ткани/ при действии ИМИ достигает через два ноделз нормальных величин - 2;Са+0,33 мкМ/г, у контроля - 1,61+0,15 мкМ/г ткани.

Проведенные мтсроэлектродшнв исследования функционального состояния плазмолемин гепатоцитов патологически измененной печени показали «Ьлее высокую активность работы ионного паеоса у животных, подвергагагахся воздействии ЯМЕ. Об этом судили по резкому падению величины постоянной времени мемйрана гапагоцз-тов после углеводной нагрузки - с 0,68+0,16 ,мс. до 0,42+0,05 ко. что свидетельствует о высокой степени сродства молекулы белка к субстрату я приводят к быстрому накопления глюкозы гелатоци-тама. 1. животпых с циррозом печени постоянная, времени в условиях углеводной нагрузки уяеньпшлась незначительно относительно исходной величины - с 0,43±0,03 мс. до 0,33+0,01 мв., возможно, в результате повншенного содержания внеклеточного калия вследствие нарушения проницаемости мембраны дистрофически измененных клеток. •

О нарушении организации мембранных структур гепатоцитов у животных с токсическим гепатитом свидетельствует активация перекисного окисления липидоз: з два раза повышено содержание малонозого дкальдегида и в четыре раза - диеновых конъпгатов. Воздействие ИШ после резекции печени приводит к резкому снижения на вторые сутки, количества диеновнх конъюгатов.

Импульсное магнитное поле, по-видимому, изменяет конфор-мационные свойства белковых молекул, стабилизируя структуру

длазмолемиы гапатоцитов, уменьшая ее проницаемость. По данным ряда авторов, одной из точек приложения магнитных полей являются мембраны клеток и органелл /П.Г.Богач, Т.Л.Давидовская, 1977; л..м.клячкин и др., 1977; С.Н.Иванова, 1977, 1983; М.А. Шеиго, 1973; В.М.Боголобов, 1981; ?.Д.Давадовская, Н.И.Влаоен-ко, 1932; Н.й.Ераваренко и др., 1988/. При действии магнитных полей в мембранах' возникают ориентацлонные явления, играющие важную роль в регуляции биохимических процессов /В.М-Богода-бов, Л.А.Скурихина, 1978; ?.Н.Иавлова и др., 1978; £.К.Ванаг, А.й.Вузнецов, 1936/. К числу таких реакций, чувствительных к магнитному полю, относятся своесднорадикальные реакции охисле-нея лишдов, перекоса электронов в цигохромной цепи и др./В.М. Аристархов, Л.А.Пирузял, 1973/ Не исюшчено взаимодействие ИМП со свободными радикалами ненасыщенных жирных кислот, количество которых при циррозе увеличено, что приводит к восстановлении ионного гомеостаза клетки.

Восстановление кассы регенерирующей печени объясняется не только увеличением количества гепатоцитов на ранних сроках после резекция, но к их гипертрофией. Эти два процесса - гиперплазия и гипертрофия клеток развертываются одновременно и обеспечивают быстрое восстановление утраченной части органа /Д.С. Саркасов, 1987/. Для гипертрофированной клетки, как правило, характерна гипертрофия ядра /Д.С.Сярн2гсов и др., 1975/ и ядрышка /А.А.Дальцын и др., 1978; А.П.Авцнн, В.А.Шахлашв,1979 а др./.

• Проведенный иорфометричаекий анализ размеров ядер гепатоцитов у животных с токсическим гепатитом »выявил увеличение размеров ядер в более ранние сроки у животных» подвергавшихся воэдМссвию ШП. по сравнению о контролем. Одновременно с гипертрофией ядер наблвдалось увеличение количества ядрышкового

вещества, приходящегося на ядро гепатоцита. Средний объем ядрышек у животных, подвергавшихся после частичной гепатэктомяя воздействию ¡КП, возрос в три раза по сравнения с исходным и достиг через 24 часа после резекции печени 0,61+0,01 усл.ед. /до операции - 0,21+0,00/. У животных, не подвергавшихся смаг-начиваиип, средний объем ядрышек возрос в меньшей степени -в два раза с максимальным значением через 36 часов после резекции печени - 0,45+0,03 усл.ед..

Таким образом, иожно считать, что 5MI повышает функциональные возможности печени на рачних этапах регенерации. Несомненно, что активация пролиферация и гипертрофия ядер и ядрышек гепатогатов теснил образом с вяз айн с усилением белково-синте-тической функции печени.

Оценивая реакщш ганглиев солнечного сплетения на 2-е сутки после резекции патологически измененной печени у зшвотных с токсическим гепатитом, следует отметить пониженную реактивность симпатического ганглия в условиях создавшегося гомеостаза по сравнению с регенерирующей нормальней печенью. Менее выражена гипертрофия ядер нейронов - 0,52+0,01. усл.ед. /до резекции 0,43+ 0,16 усл.ед./, двуядерность - 5,50+0,5СЙ /до резекции - 3,17+ 0,15%/, несколько возросло количество ядер с двумя ядрышками -до26,10+2,80^ /до резехциа - 17,00+1,63?/. Несмотря на дистрофические явления в нервных клетках /выпадение нейронов, гипер-хроматоз, центральный хроматолиз/, нисслевскве глыбки и цитоплазма сохранившихся нейронов более интенсивно окрашены, что сви.'детельствует о повышении активности синтетических процессов в неповрежденных нейроцитах ганглия солнечного сплетения.

Сравнительную оценку обратимости патологических изменений в печени и ганглиях у животных с токсическим гепатитом проводили на 14 гс 30 сутки, после прекращения введения СС14 а воздейст-

бия ИМИ /10 процедур/, а такте после резекции печени с последующей магнитотерапией.

Тенденция к нормализации структуры печени через 2 недели после лечения в большей степени наблодалась у животных, подвергавшихся воздействию ИШ как после резекции, так и без оперативного вмешательства. Количество нормальных гепатоцктов достигало у животных обеих эхсперишятальша групп 70,в то время как у животных, не подвергавшихся омашичиванию после частично?, ге-патэктоши /оперированный контроль/ - 62,10x1,74?. Обращает внимание более выраженная гипертрофия ядер гепатэцктов и увеличение числа ядркдек /иногда по 5-5 в одном ядре/ У животных, подвергавшихся только воздействие ISO. Дистрофические изменения е паренхиме выражены незначительно, а повышение содержания ДНК в ядрах гепатоцитов свидетельствует об усилении белкового синтеза у тавотных данной экспериментальной группы.

У изогни, подвергавшихся только резекции печени, через две недели посла операции резко нарушено балочное строение, выражена белковая дистрофия гепатоцитов, значительная гистио-лим-фецитарнак -инфильтрация стремы. Много безъядерных клеток, с ликкотичвкм ядром и зозинофклизй цитоплазмы.

Сманивая реакцию ганглиев солнечного сплетения при регенерации патологически измененной печени у животных разных зкепе-ришнтальнн?. груш, следует отметить наибольшую нормализации структуры ганглиев у ливотных, подвергавшихся воздействию ИШ посла резекции печени ели без опзрапдк, по сравнению с опериро-вакнш контролем.

У гквотнкх с токсически гепатиток через две недели дос-зв шгяитотералшг большинство'нейройэв имеет равномерное распределение • хроматефшгьного вещества „ встречаются единичные гаперхромвыэ нейроны с ликнотечнбм ядром, круглоклвточная ин-

- 31 -

фильтрация строку узла незначительная. Енраяанная гиперплазия элементов гранулярной знлоплазмагнческой сети и наличие митохондрий с просветленным магриисом свидетельствуют об активации обменных процессов. 3 синапсах, четко выражены активные зоны пре- и аостеинеошгсеских мембран, синоптические пузырьки, т.е. восстанавливаются структуры центральных связей.

У животных, подвергавшихся только резекции печени, на 14 сутки после операции в структуре ганглиев солнечного сплетения выражены деструктивные изменения» касающиеся как яейронов-различныэ стадии хроматолиза, так и стрсмн узла - диффузная ин-фитштрация мелкоклегочнымй элементами. Ультраструктура нейроци-тов - разрушение штохондриальннх крист, увеличение количества лизосом, фрагментация элементов гранулярной эндоплазиатстеской сети, уменьшение числа рибосом - подтверждает данные световой микроскопии о дистрофических процессах в ганглиях. Слабая выраженность активных зон и уменьшение еинаптических пузырьков свидетельствуют о нарушении передача порпннх ш.шульсов из ядер спинного мозга. Отчетливо аяигтна сссудистая реакция - явление отека я кайуханиа эндотелия» пролиферация адвентадашшх элементов.

К концу месяца после магнитотерапии у животных о токсическим гепатитом дистрофические изменения в паренхиме печени л ганглиях выражены в меньшей степени по сравнению с оперированными животными. Количество нохмальных гапатоцитов достигло у них 74,50+0,692, у оперированного контроля - о9,40±0,84Х. Значительно увеличено число двуядерных нейронов: после магнитота-рапик - 6,52>0,92£, ара воздействии ЙМП после резекции пвчени-а,67+0,47? /сравните с оперированным контроле» - 2,33+0,62^/. Количество ядер с двумя ядрншхами составляло.соответственно: 20,70+2,22?, 25,67+0,в контроле - .15,73+0,68?.

Таким образом, проведенные исследования вктвили стимулирующее действие Ш-Ш на обратимость патологических изменений в печени животных с токсическим гепатиток, что позволяет рекомендовать импульсную магнитотеравюо в качестве метода лечения хро-, яичвскях заоолеваний ш;чени /без оперативного вмелателъства/, так как повреждение нервного аппарата, имеющее гдасто хтрг резекция печени /В.Я.. Кару пу, 1967/, замедляет течекке репаратявша процессов в результате резкого усиления функциональной нагрузка на повременные гепатоциты а изменения адаптивной Функции нэрвной системы.

Исследования авторов по вейрогеиной регуляция аЗ^етраЪп-ческкх процессов ъ печени при различиях видах нарушения ее иннервации /деабферентацкя, вагото-ия, частичная дзсимпатгзацкя/ показали развитие славного волнообразного неар^тл строфического процесса» приведшего к снижению «функциональные возможностей денервнрованной печени /0.В.Волкова, 1973; Ю.К.Елецкий с соавт., 1379, 1935, 1988; В.М.Востриков, 1930; АЖ Никифоров с соавт., 1986 ш др.Д

Рядом исследователей высказывается предлояожеяяе.что по нервным волокнам переметается субстанция, поступающая в ткани, и оказывающая трофическое влаяяие на их мстаОолг.зк /А.Н.Мезенцев, О.В.Мессинова., 1971; МезгсЬг Алголу , Сох С {тегу А.,1989; МаЬиаа Мс^сшук! е! г 1991; С.Т.бигьтпй^е е* а!., 1991 И др./. '-а вещества, в частности белок и. нейропептшш энкефалины и др./ поставляются в ткань с аксоплазматическим током. Дискутируется вопрос о медиаторах /корадреналин л др./ как о возмогшее нейротрофическиг веществах /Р.Н.Глебов, Г«Н.Крыжаногский, 1973; В-П-Бамбиндра, 1933; ФЛухо, 1990; V. 61«¡-еег ,1971/.

При моделировании цкрроза печени избыточно разросшаяся соединительная тканое лит паренхиму на ложнод ольки, усугубляя

дистрофичеслие изменения в гепатоцитах - баллонная дистрофия, жировая инфштрапда. Более тяжелые повреадения наблюдаются и в ганглиях солнечного сплетения: ядра нейроцитов подвергаются распаду и лизису, выражена гиперплазия глиальннх элементов.

Таким образ от*, в результате изменявшейся реактивности формируется новый тканевой гомеостаз и соответственно патологическая система управления жизнедеятельностью печени. При этом спонтанная регенерация, практически отсутствует. Лоэтому для преодоления устойчивого патологического состояния необходима дестабилизация сложившейся системы управления /регуляции/. Отсюда, для стимуляции восстановительннх процессов, как показали экспериментальные исследования, наиболее эффективным является использование комплексной - сочетаний - терапии, куда входит предварительная резекция, позволяющая первоначально дестабилизировать сложившийся гомеостаз и изменить реактивность системы-вследствие нового повреждения нервных связей, я последующее воздействие ШП, направленный на стимуляции регуляторных механизмов репаративных процессов.

Через иесяц после резекции печени и курса магнитотерапии отмечалась значительная, тенденция к нормализации структуры органа, о чем можно судить по увеличении числа нормальных гепато-цитов - 68,40 + 0,68£ /до операции 48,6 + 0,75^/, Уменьшились дистрофические явления, а также количество соединительной ткани, лишь в отдельных участках встречались ложнодольки.

У животных, подвергавшихся только резекции печени ила только магнитотерапии, нормализация паренхим была выражена в меньшей степени. Количество нормальных гепатоцитов составляло 61,30+ 1.205С и 62,70 ±/ 1,34*.

Через два месяца после комплексного лечения /резекции и 2 курсов магнитотерапии/ у большинства животных структура печонг

полностью нормализовалась - количество нормальных гелатоцитов достигло аз,30 + 0,62? /у интактных 81,00 + 0,33£/, значительно уменьшилось количество соединительной ткани. У животных с резко выраженной исходной патологией через два месяца восстановления не наолюдатось.

В связи с тем, что нейроциты в ганглиях солнечного сплетения, выдавшие в процессе патологии не регенерируют и полной нормализации структуры не происходит, прогноз полного выздоровления после цирроза печени неблагоприятен. Сохранение следов деструкции в нервном ганглии в виде уменьшения числа нейроци-тов при соответствующих условиях мокет проявиться в виде рецидива патологического процесса, поэтому целесообразно повторе- -ние курсов магнитотералик.

У животных, не подвергавшихся после частичной гепатзктожш воздействию ЙШ, резорбция соединительной ткани была выражена в меньшей степени по сравнению с омагниченными животными. Количество соединительной ткани уменьшилось на 10,70 + 0,80?, у омагниченных - на 15,50 + 0,50%. Число нормальных гелатоцитов составило 75,70 + 0,76$, примерно столько же насчитывалось у животных, подвергавшхся только консервативно»^ лечению /два курса магнитотерашш/ - 73,70 + 0,20%.

Таким образом, резекция цирротически измененной печени и магнитотерапйя, применяемые как самостоятельные способы стимуляции репаративных пропессов при данной форме патологии, менее эффективны, чей при их сочетании.

Сравнительная оценка действия постоянного и импульсного магнитных полей на репаративные процесс!* в цирротически измененной печени выявила более высокую пролиферативную активность гепатоцятов у. животных, подвергавшихся воздействию ИМИ. Величина миготкческого ивдекса на 2-е сутки после резекции печени

составляла 19,50 +_ 2,00£о, при действии ПШ - 8,07 + 1,5&>. 3 большей степени била, выражена и гипертрофия 'ядер гепатоцитов по сравнению с животными, омагниченными в ПМП. Результаты изучения процесса резорбции соединительной ткани свидетельствуют о большей интенсивности обратного развития еэ у циррозннг животных» подвергавшихся многократному воздействию ffi.HI. Количество соединительной тканя уменьшилось через два месяца после резекции печени на 15,40 +. 0,50$, т.е. почти в два раза быстрее по сравнению с ШЛЯ - на 8,90 + 0,60?.

Однако изучение действия ШП и ПШ на пролиферацию гепато-цитсв нормальной регенерирующей; печени, где нет патологической систем», но выявило существенного преимущества импульсного магнитного поля перед постоянным. Значительное увеличение числа, митозов яаблвдалось у всех животных, подвергавшихся смагничива-нию после резекции печени: величина Ш составляла при действии ИМ1 - 62,70 + 6,16^о, при действии ПШ - 54,20 + 0,8С$о.

Сравнительная оценка стимулирующего действия ПШ и ИМИ . свидетельствует'о качественном различия механизмов репаратив-ной регенерации нормальной и патологически измененной печеш.

Полученные результаты позволяет рекомендовать использование постоянного магнитного поля в случае травматического повреждения печеп тем или иным способом.

Таким образом, полученные материалы подтверждают высказанное наш предположение о системном характере экспериментального токсического гепатита и цирроза печени я целесообразности комплексного подхода к анализу механизмов регуляции репаратив-ного процесса и методам его стимуляции. Экспериментально показано также наличие качественных различий в механизмах регуляции репаративного процесса нормальной я патологически измененной печени. Регенерация нормальной печени после травмы /резея-

ши/происходит спонтанно. Отсутствуют явления, характерные для стабилизации патологического состояния на основе нового го-меостаза, и глубокие повреждения гепатоцитов на уровне клеточных мегйрак. Отсюда возможность стимуляции пролиферации гепатоцитов дополнительным воздействием, в частности не только ИШ, но и ПЩ.

В условиях патологии /экспериментального гепатита н цирроза/ формируется новый гомеостаз; а следовательно новая матрица управления процессами жизнедеятельности печени. Причем процесс формирования устойчивого патологического состояния связан с изменением /определенной динамикой/ реактивности печени и иняервзч рувдей еэ симпатической нервной системы - ганглиев солнечного сплетения. Ов этом свидетельствует гибель части животных при моделировании патологии, а также данные, .литературы /Ю. К. Елецкий и др., 1984; Т.К.Дубовая и др., 1990/, показавшие, что ва-готсдая, предшествующая введении четыреххлористого углерода и без него, вызывает гиперреакци» печени. Она сопровождается массивным поражением паренхимы, изменением чувствительности к кей-лонам и повышением пролиферативной активности гепатоцитов по сравнении с контролем. • . .

Полученные данные позволяют утверждать, что лечение хронических заболеваний печени должно быть комплексным и направлено не только, на печень, но и ганглии солнечного сплетения, что достигается воздействием магнитного поля, имевшим ряд вагаюс преимуществ по сравнений с другими методами стимуляции восстановительных процессов

1. Нет побочного действия и привыкания,

2. Возможность одновременного воздействия на печень и шшерви-рукщие ее центры, ' ' '.

3. Возможность - локального воздействия яа определенную область

тела, ■

4. Возможность использовать магнитное поле в сочетании о резекцией печени и <3ез нее /резекция в клинике имеет ряд противопоказаний/,

5. Возможность проведения повторных курсов магниготерапии.

■ выводы

1.3а основании системного представления о патогенезе и регуляции репаративных процессов при токсическом гепатите и циррозе экспериментально доказана стимуляция обратимости патологических изменений воздействием импульсного магнитного поля /ИМП/ на печень и ивнервирувдие ее центра — ганглии солнечного сплетения. ' .

• 2. При моделировании токсического гепатита и цирроза установлено участие неврогенного фактора /симпатической'нервной систем«/. Наряду с дистрофическими и деструктивны® процессами э печени, выявлен» реаятивныэ изменения в ганглиях солнечного сплетения, проявляющиеся в.заде хроматолиза и гидерхрсматоза . нервных клеток, элиминации части нейроцитов, гиперплазии гли-альннх. элементов; в синапсах - полиморфизм митохондрий, резкое уменьшение синаптических пузырьков, исчезновение активных зон синаптических мембран. • -

3. Сравнительная оценка магнитотерашга и частичной гепат-эктомии как методов стимуляции обратимости патологических изменений в печени и ганглиях солнечного сплетения у животных о токсическим гепатитом свидетельствует о болев ^высокой эффективности импульсного магнитного поля по сравнению.с резекцией печени:

- после курса магниготерапии /10 процедур/ исчезают дистрофические и деструктивные явления в паренхиме печени и симпатическом ганглии, нормализуется структура органов, увеличивается

3?

количество двуядерных клеток; в синапсах четко выражены зоны активности синаптических мембран и синоптические пузырьки, что свидетельствует о восстановлении нервных связей с вышележащими нервными центрами;

- после частичной гепатэктомки /через две недели/ нормализация структуры печени и ганглиев выражена слабо: резко нарушено балочное строение, белковая дистрофия гепагоцитов, значительная мелкоклеточная инфильтрация стромы. Б ганглиях имеет место явление центрального хроматолиза и лизиса нервных клеток, слабо выражены зоны активности синаптических мембран, уменьшено количество синаптических пузырьков.

4. У животных с экспериментальным циррозом оптимальным является комплексный метод терапии - частичная гепатэктомия и воздействие ИМИ. Ускоряется процесс резорбции избыточно разросшейся соединительной ткани и обратимость дистрофических изменений. У животных, подвергавшихся только магнитотерапии, через месяц резорбция соединительной ткани выражена слабо, однако в клетках отмечается явление функционального напряжения: гипертрофия ядер гепагоцитов, увеличение числа ядрышек, двуядернос-ти, гипертрофия и гиперплазия митохондрий, крист, большое количество глЕКогеновшс розеток.

' . 1 ' 5. В основе стимулирующего действия ИМИ на репаративные

процессы в. патологически измененной печени лежит активация контурами управления метаболических процессов: усиливается глико-генсинтетическая функция гелатоцитов, окислительные процессы /увеличение коэффициентов энергетического обмена АГФ/ДДФ и АТФ/й®/, нормализуются показатели белкового обмена /повышение содержания альбуминов в сыворотке крови, восстановление к/Т коэффициента/; уменьшается интоксикация организма.

6 , Импульсное магнитное поле нормализует проницаемость

плазмолеммк гепвтрцитов патологически измененной печени: повышается ферментативная активность, мембранный потенциал, работа ионного насоса в условиях углеводной нагрузки, снижается реакция перекисного окисления липидов»

7. Однократное воздействие ИМИ в течение первых трех суток после частичной гепатэктомии стимулирует пролиферативную активность гепатоцитов нормальной и патологически измененной печени.

8. В реализации стимулирующего эффекта ИШ на пролифератив-яые процессы в регенерирувдей печени существенная роль принадлежит симпатическому отделу вегетативной нервной системы:

- при химической двсимпатизации гуанетадином стимуляция ми-тотической активности гепатоцитов ШП отсутствует;

- ИШ снимает блокаду «¿-адренорецепторов, вызванную фентол-аглином: величина штотического индекса гепатоцитов возрастает в четыре раза.

9. В связи с необратимостью деструктивных изменений в нервном ганглии /уменьшение числа нейроцитов при отсутствии пролиферации нервных" клеток/ и возможностей рецидивов патологического процесса, целесообразно повторение курсов магнитоте-рашга. ..........-

10. Сравнительная характеристика действия импульсного и постоянного магнитных полей свидетельствует о качественном различии в механизмах стимуляция репаративной регенерации нормальной и патологически измененной печени:

- ИМП обладает более высокой активность» на репаративнне процессы в регенерирувдей после резекции цирротически измененной печени;

- при регенерации нормальной печени существенного преимущества ИМИ на пролиферацию гепатоцитов по сравнению с ПМП не выявлено.

11. На основании экспериментальных исследований разработан новый способ стимуляции репаративных процессов и обратимости патологических изменений импульсным магнитным полем, генерируемым аппаратом "АЖГ-О!", рекомендованным для регенерациояной

г

терапии хронических заболеваний печени.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. На основе экспериментальных исследований разработан на предприятии "Орбита" аппарат импульсной магнитотералии "АШГ-01", рекомендованный решением Госкомитета по новой мед-технике" в Управлении го внедрению новых лекарственных средств

и медицинской техники МЗ 'СССР от 17 ноября 1936 года к серийному производству.

2. Совместно с клиницистами разработана инструкция по применению аппарата "АМКГ-01", утвержденная начальником Управления 9 июня 1937 года.

3. Теоретически обоснован новый способ регекерационной терапии хронических заболеваний печени /а/с 5 1614210/. Аппарат "АМИТ-01" предназначен для лечения больных не только гастроэнтерологическими заболеваниями, а также с заболеваниями периферической нервной системы и опорно-двигательного аппарата /акты испытаний о® 26 декайрй 1985 г. и 17 июня 1983 т./.

4. Предложена установка для локального воздействия на животных импульсным магнитным полем /удост. на рацпредложение * 812 от 24 мая 1982 г./.

5. Разработаны параметры и режим воздействия ИМИ и ШП для стимуляции цроошферативноЗ активности гепатоцитов регенерирующей печени /а/с && 1015420, 1091214/.

чо

СПИСОК РАБОТ, ОПХЕЛИНОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Способ моделирования митотической пролиферации гепатоци-тов. -Авт. свид. № 1015420, 1933 /соавт. Б.П.Солопаев, З.СЛа*' рян, В.Ф.Каленпёв/.

2. Способ стимуляции митотической пролиферации гепатоцитов.-Авт. свил. Л 1091214, 1984 /соавт. Б.Л.Солопаев, Н.Б.Елисеева, И.Й.БадашиаЛ

3. Стимуляция пролиферации гепатоцитов .нормальной и патолога чески измененной печени воздействием достоянного магнитного поля. - Тезисы 7 Всесоюзной конференции по вопросам регенерации

и клеточного деления. Москва, 1985, с. 266-268.

4. Влияние импульсного и постоянного кагаЕТННХ полей на пролиферацию гепатоцитов регенерирующей печени. — В сб. научн.трудов "Регенерация печени. Регенерацзонная терапия болезней печени", Горький, 1985, с. 5-10 /соавт. Е.П.Солопаэз, З.С.Ларин/.

5. Стимуляция регенерации печена. - Тезисы 10 Всесоюзного съезда анатомов, гистологов л эмбриологов. Полтава, 198Б,

с. 320 /соавт. Б.И.Сатспаэв, И.М.Солспаега, А.А.Косцх/.

6. Стимуляция пролиферации гепатоцитов а обратимость патологических изменений при реаар2тивной регенерация печени. - Тез. докл. научной конференции. Тистогепгз,я регенерация". Ленинград, 1985, с.64 /соавт. Б.П.Солопаев, Й.Г4.Солопаова» Х-С.Гра-бовская/. • -

7. Способ моделирования регенерацзоняцх цроцэосов -в печени. 3 сб. научн. труд. "Изобретательство и рационализаторство в медицине. -Москва, в.14, 19В8,. с. 20-21 /еогзт. BJLCoronssa, В.С.Ларцн, В.ФЛСалектьев/.

8. К вопросу о кэхапязмах влияния. гаппгтпж полей па-мэмЗра-ны гепатоцитов патологически измененной печени... - Тез пен докл. обл. конференции хирургов, посвященной 70 годовщине Великой Октябрьской социалистической револвдзи, Тюмень, 1986, с.87-88.

9. Регшерационпая терапия хронических б олззней. печени -резерв борьбы за здоровье человека. - Тезисн докл. 2 Всерос. съезда АГЭ. Лзнинград,. 1988, с. 115 /соавт. Б.П.Солопаев, И.М. Солопаева, Н.А„Бобшгава и др./.

10. Морфологические особенности, регенерация нормальной, и патологически измененной печени при воздействии магнитными полями. - Депонирована в ВИНИТИ Ш СССР, 133437,, 1989.

И. Корфометрическая а .гистохиетческая характеристика гли-

ксгенсинтетической функции печени при действии ЙЖ. -Депонирована в ВИНИТИ МЗ СССР, * 3436, 1989 /соавт. Н.Л.Иванова, Е.В. Силин/.

12. Морфофункциональная характеристика репаративных процессов е печени при действии НМЛ.- Тезисы 1 Республиканск.научн. конференции "Управление морфогенезом тканей, органов в процессе адаптации", Иркутск, 1989, с. 85-86.

13. Экспериментальное изучение действия ИМЯ, создаваемого аппаратом "амит-01", на восстановительные процессы в печени крыс. - Тезисы 1 болгаро-советского симпоз. "Магнитобиология и магншготерапия". София, 1989, с. 139 /соавт. Б.П.Солопаев, В.С.Ларин, Н.Л.Иванова,'.

14. Стимуляция репаративных процессов в печен:: действием ИМИ. - Тез. докл. меядунар. семинара "Методология использования биотропных свойств МП в практике здравоохранения".Ташкент, 1989, с. 62-64 /соавт. Б.П.Солопаев, Н.Л.Иванова/.

15. The Influence of impulse r;gnet field on proliferation of faepatocites of the regenerating lirer. - Abstracts aeoond. interneclone 1 school Electromagnetic fields and oionembranes. Pleven, 1989. P. 138. /B.P.Solopaev/

1Б. Реакция нейронов симпатического ганглия в процессе регенерации нормальной и патологически измененног печени. -В сб. трудов ГМЙ "Восстановительные процессы в нервной системе и их коррекция". Горький, 1990, с. 29-34.

17. Влияние ИГ,HI на репаративние процессы в патологически измененной печени. - В сб. труд. ГШ "Регенерация, адаптация, го-меостаз". Горький, 1990, с. 30-37.

18. Восстановительные процессы в печени при действии.ИМИ. -В сб. научн. трудов "Морфогенез тканей, органов з условиях адаптации". Иркутск, 1990, с. 126-130.

19. Влияние резекции печени, хориогонадотроглча и импульсного магнитного поля на крыс с патологически измененной печеные. - Тез. докл. конференции хирургов "Лиагностлка и лечение заболеваний пепели, поджелудочной железы, селезенки и 12-перст-ной кишке". Тюмеггь, .1990, с. 40-42 /соавт. И.М.Солопаева, К.Н. конторщикова, Н.Л.Иванова, З.Г.Лобко, О.Е.Солопаева/.

20. Влияние ЙГ,Щ на пролиферацию гепатоцитов регенерирующей печени крыс при различном функциональном состоянии адренорецеп-торов'. - Тез. докл. Всесоюзной конференции "Актуальные пробле-

мн применения магнитных и электромагнитных полей в медицине*. Ленинград, 1990, о. 35-36.

21. экспериментальное обоснование применения ИМИ для реге-нерадионной терепил хронических болезней печени. - Тез. докл. Всесоюзной конференции "Актуальные проблемы применения магнитных и электромагнитных полей в медицине". Ленинград, 1990,

с. 39-40 /соавт. Б.П.Солопаев, Н.Л.Иванова/.

22. Chronic Hepatitis Treatment by impulsiv magnetic Field usage Produced by apparatus "AMlf-Ol- 23 General Assembly of the international -Union of Hadio Science /ÜBSL/. Prague, 1990. P.78. /B.P.Solopaev, A.A.UchatoT, V.S.Larin/.

23. Способ лечения больных с хроническим гепатитом. - Авторское свидетельство Я 1614210, 1990 /соавт. В.С.Ларин, В.Ф.Кален-тьев, Б.П.Солопаев, А.И.Ивлев, А.А.Ушаков/.

24. Особенности пролиферативннх процессов в регенерирующей печени крыс при действии ИМИ. - Тезиса докл. Всесоюзного симпозиума с международным участием "'/.агнитобиология и магнитотера-пия в медицине", Сочи, 1991, с. 60-61.

25. Сравнительная характеристика действия магнитных полей ;;а восстановительные процессы у крыс с циррозом печени.. - Тез. докл. Всесоюзного симпозиума с международным участием "Магнн-тобиология л магнитотерапия в медицине". Сочи, 1991, с. 65-66. /соавт. Б.П.Солопаев, Н.Л.Иванова/..