Автореферат и диссертация по медицине (14.00.05) на тему:Морфо-функциональные характеристики эритроцитов периферической крови при вибрационной болезни

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ МЕДИЦИНЫ ТРУДА

РГ Б ОД

1 7 ОКТ

На правах рукоиаса

АЛЕКСЕЕВА Галина Анагольевна

МОКМ-ФУЕКШЮНАЛЬНаЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

ЭРИТРОдИТСВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПРИ БИ5РАДЙ0Ш0Й БОЛЕЗНИ

14.00.05 - внугренние болезни

АВТОРЕФЕРАТ диссергации на соискание ученой степени кандядага медицинских наук

Москва 1996

Работа выполнена в Московском областном научно-исследовательском клиническом институте (МОНИКИ) им .Ы.Ф .Владимирского и Гематологическом научном ценгре РАМН.

Научные руководители: докгор медицинских наук докгор медицинских наук

Официальные оппоненты: докгор медицинских наук, профессор кандидат медицинских наук, доцент

П.НЛюбченко В.М.Погорелов

Л.А.Тарасова Ю.П.Евлашко

Ведущее учреждение - Московский научно-исследовагельский институт гигиены яы.Ф.Ф.Эрисмана.

Защита диссертации состоится "_" _ 1996 г.

на заседании диссертационного совета Д.001.12.01 при научно-исследовательском институте медицины груда РАМН до адресу: ±05275, Москва, др.Буденного, 31.

С диссертацией мсшю ознакомиться в библиотеке института.

1996 г. А.И.Халепо

Автореферат разослан .

Ученый секретарь диссертационного совета

докгор медицинских наук

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБШЫ: Вибпационнал болезнь (ВБ) является одним из самых распространенных профессиональных заболеваний. При данном оолезни патологические процессы затрагивают б основном нервную, сосудистую я костно-мышечную системы (Е.Ц.Андреева--Галапина , 1956; Н.Н.Шагалов, 3.Г.Артамонова, 1938). Состоянию вышеназванных систем посвящено множество исследованиГ: как у нас в стране, так и за рубежом (М.Н.Рыжкова, В.Г.Артамонова, 1933; Т.Ф.Миронова, 1937\ <и£61994;

л др.). Основным проявлением ВБ многие исследователи считают синдром Рейно или "болезнь белых пальцев" (Л.А.Тарасова с соавг., 1983; Стыи^-Меа, , 1986; [и^г-н^и, е£ аМ- , 1994). Существующая в нашей стране классификация в качестве ведущего критерия использует интенсивность побеления пальцев для определения стадия ББ. Патогенетическую основу этого синдрома составляют вазомоторные расстройства, преимущественно в системе микроциркуляции в тканях конечностей (Д.К.Абрамович-Поляков с соавг., 1974 и др.). Сравнительно недавно появились сообщения о гипоксическом синдроме, особенно выраженном при умеренно-выраженной форме заболевания. По мнению Т.В.Бологновой с соавг. (1938), Т.М.Сухаревской (1994) , И.Е.Рудаковой (1996) нарушение микроциркуляции при ВБ обусловлено не только поражением микрососудов, но и изменением реологических свойств крови с развитием при выраженных формах заболевания синдрома капилляро-трофической недостаточности. Однако роль эригроцдгов в патогенезе данных изменений изучена недостаточно. Такие характеристики эритроцитов как их размеры, деформируемость мембран почти не освещены в литературе. Известно, что эти параметры являются важнейшими характеристиками эригроцигов, с ними связано нормальное функционирование этих клеток, в том числе прохождение через капилляры, участие в обменных процессах, в первую очередь в обмене кислорода. Отдель-

ные сообщения указываюг лишь на их заинтересовенность, но не дают окончательного огвега. Недостаточная эффективность лечения ББ .заставляет искать новые методы терапии с тем, чтобы оказать влияние на гемореологию. Приведенные данные свидетельствуют об актуальности изучения морфологических и функциональных свойств эритроцитов у больных ВБ.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ - изучение комплекса морр-функциональных характеристик эритроцитов периферической крови у больных с ВБ от воздействия локальной вибрации для уточнения некоторых патогенетических механизмов ВБ и разработки рекомендаций по дополнительным методам лечения.

Задачи:

1. Дать клиническое обоснование вклада нарушений гемодинамики в патогенез вибрационной болезни.

2. Для определения значения реологических нарушений в ге-незе ишемии пальцев рук при вибрационной болезни:

а) определить соотношение различных форм эритроцитов в периферической крови больных вибрационной болезнью;

б) провести анализ деформируемости эритроцитов при вибрационной болезни для характеристики состояния их мембран;

в) разработать алгоритм компьютерной морфометрии и выявить комбинацию параметров, информативных для изучения размеров эритроцитов и провести это исследование у больных вибрационной болезнью.

3. Апробировать выбранные параметры эритроцитов для оценки эффективности общепринятых методов терапии и гипербарической окигенации при вибрационной болезни.

НАУЧНУЮ НОВИЗНУ исследования составляет выявление новых механизмов, составляющих'патогенез ангиодисгонического и ангио-

спастического синдромов лри вибрационной болезни, а именно изменение гемореолохми за счет отклонений морфо-функционалышх характеристик эритроцитов периферической крови. Впервые, о использованием современного метода компьютерной морфометрии показано, что лри вибрационной болезни увеличены все размеры эритроцитов: периметр, диаметр, площадь поперечного сечения, объем, высота, площадь поверхности. Эти данные подтверждаются изучением деформируемости эритроцитов фильрационным методом, при котором.также выявлено увеличение объема эритроцитов и тенденция к снижению юс деформируемости и повышению жесткости мембран. Обнаружено увеличение измененных форм эритроцитов - стомагоцитов, эхиноцитов, дегенеративных форм. Наличие более крупных эритроцитов с жесткой мембраной затрудняет прохождение этих клеток через капилляры и газообмен с тканями и усиливает млкроциркулягорные нарушения. Выявленные изменения морфо-^ункциональных свойств эритроцитов отличаются устойчивостью к традиционной терапии вибрационной болезни, что поднимает вопрос о разработке новых методов лечения вибрационного ангиодисгонического синдрома.

Таким образом, в число механизмов, обуславливающих развитие ангиодисгонического синдрома при вибрационной болезни входят нарушения гемореологии за счет увеличения размеров эритроцитов и повышения жесткости их мембран. По-видимому, правильнее говорить не о микроциркуляторной, а о микрогемоциркуляторной патологии, лежащей в основе вибрационной болезни.

Практическая значимость: Расширены представления о сущности вибрационной болезни от воздействия локальной вибрации у рабочих. Показано, что ишемические изменения в кистях рук обусловлены нарушениями тонуса в резисгявных сосудах и микроцирку-лягорпом русле в сочетании с нарушениями гемореологии за счет увеличения размеров эритроцигов, снижения их деформируемости,

повышения жесткости их мембран. Изменения морфо-функциональных

СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ ОТЛНЧаЮГОЛ СТЯбИЛЫЮСП.ю к 1фо»одимо"1 традиционной терапии, что ставит вопрос о включении в лечение средств, влияющих на метаболизм эритроцитов. Исследование морфологии эритроцитов рекомендуется проводить у болышх вибрационной болезнью в случаях отсутствия эффекта ог проводимо;'; терапии и при быстром прогрессировала заболевания, чтойи расширить круг лечебных мероприятий.

Паяокения, выносимые на защиту:

1. В нарушения макроциркуляиии при вибрационной болезни значительный вклад вносят измежзния морфо-функционалышх свойств эритроцитов. Увеличение их размеров, повышение жесткости мембран, изменение формы клеток снижают способность эритроцитов проходить через капилляры и затрудняют передачу кислорода.

2. Изменения морфо-функциональных свойств эритроцитов отличаются стойкостью, сохраняются после проведения больным традиционной терапии, что является основанием для включения в лечебный комплекс средств, влияющих на метаболизм мембран эритроцитов.

Публикация и апробация: По материалам диссертации опубликовано 9 научных работ. Основные полоаения работы доложены на УП научно-практической конференции молодых ученых и врачей Московской области (Москва, 1992), на заседании московского областного общества терапевтов (Москва, 1994), на УШ научно-практической конференции молодых ученых и врачей Московской области (Москва, 1995), на У съезде специалистов по лабораторной диагностике (Москва, 1995).

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДКССЕРТАЩЙ.

Работа аосгоиг из введения, обзора литературы, 3 глав собственных данных обсуждения результатов, выводов.

Диссертация изложена на_машинописных страницах, иллю-

стрирована _ таблицами и_рисунками. Библиографический

укпппгпль пключмвг____работ оточостпошшх и _ иностранных авторов.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССВДОВАНИЯ.

В клинических условиях было обследовано 85 рабочих-мужчин, имеющих контакт с вибрацией. Наибольшее число обследованных составили обрубщики литья (37, 43,5% от общего числа обследованных), затем - слесари-еборщяки машиностроительных заводов (33 человека - 38,33%) и шлифовщики (15 человек - 17,64%). Большинство обследованных - 71 человек больных работали на''Коломенском тепловозостроительном заводе, Дубненском машиностроительном заводе, Каширском заводе "Центролиг". Это свидетельствует об однородности обследованных больных по социально-экономическим, экологическим, поведенческим и другим факторам. Почти половина обрубщиков были в возрасте до 40 лег, в других профессиях большинство составляли лица в возрасте 40-50 лет и старше. Стаж работы в контакте с локальной вибрацией у 685? обрубщиков составлял от I до 10 лег, у 32% от 10 до 20 лег. Среди слесарей-сборщиков, клепальщиков и шлифовщиков не было ни одного больного вибрационной болезнью со стажем работы до 5 лег; у 32% слесарей-сборщиков и клепальщиков стаж работы в контакте с вибрацией колебался от 10 до 20 лет, у большинства шлифовщиков (53,3%) -от 20 до 30 лег. Таким образом, вибрационная болезнь развивалась у более молодых обрубщиков при сравнительно небольшом стаже.

Ведущими профессиональными факторами являлись локальная вибрация и шум. Уровень среднечасгогной вибрации превышал ЩУ у обрубщиков на 6-8 дБ, высокочаотной у клепальщиков на 4-6 дБ.

Диагноз вибрационной болезни устанавливали с использованием общепринятых методов: осмотр невропатолога, кожная'элекгрогермо-метрил с определением времени восстановления кожной температуры

после охлаждения (хододовая проба), определение вибрационной чувствительности, гелевизионная капилляроскопия складки ногтевого ложа 3-4 пальцев обеих кистей, реовазография верхних конечностей, алекгромиография мышц-сгибателей и разгибателей кистей, рентгенография кистей.

Для оценки морфологических типов эритроцитов проводили свегооптическую микроскопию после фиксации эритроцитов 2,5£ глюгаровым альдегидом (В.А.Одинокова с соавг. 1984).

Деформируемость эритроцитов изучали фильрационным методом в модификации ИЛЛисовской (1994).

Готовили суспензию эритроцитов из венозной крови (5 мл) обследованных, взятой на гемоконсерванге Глюгицир (I мл). Эритроциты дважды отмывали физиологическим раствором, удаляя нацо-садочную жидкость и верхний слой осажденных клеток. Третий раз эритроциты отмывала забуференным раствором следующего состава: ¿/аС1-145 Ш, КС 1-5 ыМ, НЕРЕХ- 5 ыМ, альбумин сывороточный -5 мг/мл, глюкоза - I мг/мл, рН - 7,4; осмогичносгь - 310 моем. Затем клетки ресуспендировали в этом же растворе (НЕРЕ4- буфере) , получая исходную суспензию с гемагокригом 50-70$. Исходная суспензия в течение всего времени определения (2-4 часа) находилась при комнатной температуре. Рабочую суспензию с гемагокригом 2% готовили непосредственно перед измерением, разбавляя исходную суспензию изотоническим БЕРЕЗ- буфером или приготовленной на его основе средой с заданной осмогичносгью. Ресуспещщ-рующие среды с заданной осмогичносгью получали, добавляя к изотоническому БЕРЕЗ- буферу воду или 10% раствор аС1.

Данные о деформируемости эритроцитов получали посредством измерения начальной скорости протекания суспензии клеток через ядерные мембранные фильтры под действием силы тяжести. Для этого использовали прибор ВДА-01, представляющий собой модификацию

гемореомегра Хансса. В отличие от гемореомегра в приборе ЩА-01 в качестве датчика уровня жидкости используется съемная система из грех электродов. Время вытекания 250 мкл жидкости автоматически регистрируется на цифровом табло с точностью до 0,1 с. Для каждого индивидуального фильтра определяли время протекания 250 шел ресуспендирующего буфера (ТЬ) и вычисляли величину деформируемости эритроцитов (Ф ):<£> = ТЬ (2&)ДТз-ТЬ), где время протекания буфера; ф- время протекания суспензии эритроцитов; кЬ- гемагокриг.

В работе использовали фильтры с диаметром 13 мкм с диаметром пор 3 мкм и толщиной 9 мкм. Измерения производили при комнатной температуре.

Определение размеров эритроцитов проводили методом компьютерной морфомегрии. Использовали компьютерную систему "МОР-сЬюрЛа*^ " фирмы (Австрия). Данный анализатор изобра-

жения состоит из следующих основных компонентов: микроскоп, телевизионная камера, измерительное табло, вычислительная машина, клавиатура, монитор. Исследовали неокрашенные мазки периферической крови. В каждом препарате анализировали 100 клеток, вычисляли среднюю величину и стандартную ошибку для каждого параметра у каждого обследуемого.

При измерении клетки ее изображение обводится с помощью светового пера на мониторе компьютера в интерактивном режиме измерительной программы. В состав основных измеряемых параметров входили: площадь поперечного сечения в мкм^), периметр (р, в мкм), максимальный диаметр клетки [сС, в мкм); фактор формы ( в условных единицах). Фактор формы вычисляли -по формуле: /= р/^ .

Производные параметры вычисляли по методу, предложенному АДЛидевским в 1958 г. по следующим формулам: Площадь поверхно-

сти эритроцита (ро</): poiT = 1.946<t, (мкм2). Толщина эритроцита {h> ): h"= ¿¿/.4, (мкм). Объем эритроцита (У): У = 0.15c¿, (mkjÍ3

Вязкость крови и плазмы определяли с помощью вискозиметра новой конструкции АКР-2 при скоростях сдвига для крови 200,100 и 20_1сек, для плазмы 20~*сек.

Для исследования брали, венозную кровь на антикоагулянте цитрат натрия.

Образцы крови в объеме 0,8 мл заливались в пластмассовую измерительную ячейку, термостагировались в течение 5 минут в тер мосгаге анализатора, после чего в ячейку, заполненную кровью осторожно опускался сухой металлический цилиндр. Критерием правильного заполнения измерительной камеры являлась способность металлического цилиндра плавать в образце.

Измерение вязкости крови начиналось с области высоких скоростей- 200, затем 100, 20-1/сек. Общее время измерения при всех скоростях сдвига не превышало 10 минут. При измерении снятие информации о величине вязкости происходило при стабильных цифрах вязкости.

В контрольной группе величина вязкости крови при скорости сдвига 20 I/сек колебалась от 5,5 спз (сангипуаз) до 7,7 спз, при сдвиге Ю0~*сек - 4,1-6,2, при сдвиге 200 1/сек 3,6 - до 5,8 спз.

Для определения вязкости плазмы. Стабилизированная ангикоа-гулянтом кровь центрифугировалась при 3000 об/мин 15 мин, после чего отделялась плазма. Измерение вязкости плазмы проводилось аналогично измерению вязкости крови, но измерение проводилось при скорости сдвига 100 1/сек.

Величина вязкости плазмы в контрольной группе при скорости сдвига 100 1/сек колебалась от 1,3 до 1,6 спз.

Индекс агрегации эритроцитов определялся расчетным путем.

Измерялась вязкость крови при скоростях сдвига 20 и 100 1/сек. Разделив величину вязкости крови, измеренной при 20 1/сек на величину вязкости крови, измеренной при 100 1/сек получали индекс агрегации эритроцитов.

В контрольной группе величина индекса агрегации эритроцитов не превышает 1,5 усл.ед.

Индекс деформируемости эритроцитов определялся также расчетным путем. Для этого определяли вязкость крови при скорости сдвига 100 и 200 1/сек, затем разделив величину вязкости крови, измеренной при 100 1/сек на величину вязкости, измеренной при 200 1/сек получали индекс деформируемости эритроцитов. В контрольной группе величина индекса равна 1,3 усл.ед.

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

Жалобы на боли в руках предъявляли 82,15? от общего числа обследованных, приступы побеления пальцев рук - 63,64$, гипергидроз кистей - 73,2$ больных.

Наибольший процент обследованных (таблица I) составили больные умеренно выраженной формой ВБ - 62,355?, затем с начальной формой - 27,06$, с остаточными явлениями - 10,6$. Наиболее часто встречался синдром вегетативно-сенсорной полинейропатии рук с ангиодистоническим и миодистрофическим компонентами, особенно у больных с умеренно выраженной формой заболевания.

При проведении холодовой пробы удлинение времени восстановления кожной температуры свыше 20 мин наблюдалось у 61,17$ больных. Ангиоспазм с побелением пальцев рук при холодовой пробе наблюдался у больных с умеренно выраженной формой ВБ (у 22,64$).

По данным телевизионной капилляроскопии у большинстве обследованных (98,4$) выявлялись нарушения капиллярного кровообращения, преимущественно в виде спастического и спасгико-агони-

Таблица I

Распределение больных по стенсни выраженности н клиническим синдромам.

№ п1п Название синдрома Формы ВБ Всего

Начальные ' проявления Умерснно-вьграженные проявления Остаточные явления

абсолютн ое число % абсолютное число % абсолютное число % абсолютное число %

1. Вегетатнвно-сенсорная полине^ропатня рук (ВСП) 8 34,8 2 3,8 " ~ 10 11,8

2. Периферический ангнодистошгаескнй синдром 4 17,5 2 3,8 6 7,05

3. ' ВСП с штгоспастическнм компонентом 8 34,8 22 41,5 4 44,4 34 40

4. ВСП с анпюДйЗГОШЧааШ! и мнодистрофнческим компонентами 3 13,04 23 43,3 2 22,2 28 32,9

5. ВСП с мнодистрофнческим и костноди строфическим компонентами 4 7,55 4 4,7

6. Вегетомиофасцит с ангиоспастнческпм компонентом 3 33,3 3 3,53

Всего 23 27 53 62,35 9 10,6 85 100

веского состояния капилляров ногтевого ложа, замедления скорости кровотока, снижения числа "активных" капилляров.

Отмечались изменения в косгно-сусгавном аппарате, которые являлись результатом физиологической перестройки костной ткани в ответ на повышенную функциональную нагрузку: кистевидные просветления в мелких костях кисти, остеопороз (74%); уплотнение кортикального слоя (155?); деформации дистальных фаланг (8,3%). Сопутствующей профессиональной патологией у 36 больных ВБ был двухсторонний кохлеарный неврит со снижением слуха различной степени выраженности.

Для характеристики изменений сенсомогорной системы применяли элекгромиографию (cf.IT) с использованием игольчатых электродов, что является оптимальным способом регистрации потенциалов двигательных единиц (1ЩЕ), гак как перемещение электродов в различные точки мышцы позволяет получить информацию о состоянии большого числа двигательных единиц в мышце. ЗДГ была выполнена у 27 больных ВБ - у 10 обрубщиков и 17 клепальщиков, из них у 15 была умеренно выраженная стадия заболевания, у 12 начальная. У всех болышх основным проявлением заболевания был синдром вегетативно-сенсорной полинейропагии рук, при этом у 16 он сочетался с ангиоспазмаш пальцев рук, у 9 - с мподистрофическими изменениями в предплечьях.

При ЭМГ в покое у 15 обследованных в мышцах рук наблюдалась денервационная активность в виде потенциалов фибрилляций и положительных острых волн, у 10 человек в покое регистрировали потенциал действия (1ЩЕ). При максимальном произвольном напряжении мышц у всех обследованных регистрировалась насыщенная интерференционная сМГ, средняя амплитуда которой находилась в пределах нормы (1000-6000 мкВ, М=3040 мкВ).

При слабом произвольном напряжении мышц у 22 человек средняя длительность ЦПЕ находилась в пределах от 93% до 120% по

сравнению с нормой, принятой за 100%, у 5 человек средняя длительность ГДЕ была увеличена больше, чем па 20% (121-149% по срг внению с нормой). В этой, наиболее многочисленной группе обследованных, со средней длительностью ВДЕ от 93% до 120%, гистограмма распределения ЩЕ по длительности была растянута в обе стороны от границ нормы больше чем на +30 (-60%+173%).

У второй группы, с увеличением средней длительности больше 20% (121%-14У%) гистограмма распределения ЩЕ (рис.1) по длительности была сдвинута вправо, т.е. ь сторону более длительных

ИДЕ (;-24%-+147%). Количество коротких ОДЕ уменьшалось, преобла-

■- •-■• ' в. диссертации

дали длинные ВДЕ. Эти данные представлены на рисунках I и 2. Этс

свидетельствовало о вовлечении в патологический процесс не только периферических нервов, но и догонейронов спинного мозга. Последнее подтверждается еще. и тем, что у обследованных были зарегистрированы ВДЕ синхронные в различных отведениях, что является одним из признаков поражения мотонейронов спинного мозга.

Количество полифазных ВДЕ у всех обследованных было увеличено и составляло 13-57% (при норме 4-5%). У 10 человек наблюдалось ВДЕ большей амплитуды (4000-6000 мкВ, при норме 800 мкВ).

Приведенные данные свидетельствовали о развитии денерва-ционно-реинервационного процесса в мышцах рук у всех обследованных больных с ВБ, независимо от стадии заболевания, однако стади этого процесса различны - от Ш А до 1У, что зависит по-видимому от интенсивности действующей вибрации, времени ее воздействия, стадии ВБ и от восприимчивости организма к воздействию вибрации.

По данным ЭКГ у больных с ВБ диффузные метаболические изменения в миокарде желудочков наблвдались в 61,5% случаев.

При проведении теграполярной грудной реографии и электрокардиографического обследования был выявлен гиперкинетический тип гемодинамики у 75% больных, в основном за счет увеличения

Деформируемость (усл. (д.)

Рис.1 Кривые зависимостей показателей деформируемости эритроцитов от осмолярности среды а контроле и у больных вибрационной болезнью.

— контроль —х—х больные вибрационной болезнью

ударного объема, а также тенденции к снижению периферического сосудистого сопротивления.

Таким образом, у большинства обследованных больных ББ чаще всего, встречались синдромы вегегагивно-сенсарной полинейро-пагии и ангиодистонический.

Количество эритроцитов и уровень белка в сыворотке крови у больных вибрационной болезнью не выходили за пределы общепринятых норм. Как показали наши исследования, у больных ВБ увеличено количество измененных форм эритроцитов - до 15л при норме 3%: больше всего было обрагимоизмененных форм-сгоматоцигов (13,4^-2,58$), эхиноцигов, обладающих жесткой мембраной (4,8^1,88$) дегенеративных форм эритроцитов (2,37^0,6$).

При исследовании показателя деформируемости эритроцитов периферической крови методом фильтров был выявлен сдвиг фильтрационной кривой вправо (рис.1). Практически отсутствие фильтрации эритроцитов наблвдалось при 240 моем, тогда как в контрольной группе фильтруемоегь приближалась к нулю при осмодярносги 225 моем, что свидетельствовало об исходном увеличении объема эритроцитов больных ВБ.

Как видно из таблицы 2, фильгруемоегь эритроцитов у больных вибрационной болезнью.при всех осмолярностях суспензий была ниже, чем в контрольной группе, а при осмолярносги 280 и 260 моем разница была статистически достоверной.

При сравнении деформируемости в контрольной группе с этим показателем у больных ВБ видно, что деформируемость у последних несколько ниже. У лиц контрольной группы прекращение фильтрации эритроцитов наблвдалось при осмолярносги 225 моем,' достигало максимума при осмолярносги 300 моем, составляя 2,9-0,1 усл.ед. У больных ВБ прекращение фильтрации эритроцитов наблюдалось при 240 моем, достигало максимума при 300, составляя 2,68^0,14 усл.ед

Таблица 2

Деформируемость мембран эритроцитов по данным фильрационного метода

Осмолярность буфера Фильтруемоеть эритроцитов (усл.ед.)

(моем) Больные ВБ (п=27) ... 1 ¡Контроль (п=18) |

300 2,68 * 0,14 2,9 * 0,1

280 1,61 г 0,15 х) 2,01 г 0,08

260 0,66 т 0,06 х) 1,25 ± 0,06

240 0,02 0,25 - 0,12

225 0 0,02

Примечание:

х) - данные значения достоверно отличаются от контрольной группы.

При меньших значениях осмолярносги - 230 и 260 моем эги различия были статистически достоверными.

Эги данные свидетельствуют о том, что у больных 35 уже в изотоническом растворе эритроциты увеличены в объеме и деформируемость их проявляет тенденцию к снижению, что может указывать на повышение жесткости их мембран.

.Показатели вязкости крови больных ВБ представлены в таблице 3. Из таблицы видно, что вязкость венозной крови при всех скоростях сдвига находилась в пределах нормы, но при индивидуальном анализе отмечалась некоторая тенденция к ее снижению. Снижение вязкости ниже 3,6 сПз при сдвиге 200_*сек. наблюдалось у II человек из 41 (26,3%),'при сдвиге ЮО^сек - у 13 (31,7%), при сдвиге 20~*сек. - у 23 (54,8%). Повышение вязкости более 5,8 СПЗ при сдвиге 200~^сек. не наблюдалось ни у одного больного, при ЮО'^сек. выше 6,2 у одного больного (6,4 СПЗ), при сдвиге 20~^сек. выше 7,7 СПЗ у 3 (7,1%). Вязкость плазмы по средним данным была несколько снижена - 1,27 при норме 1,3-1,6. Тенденция к снижению вязкости крови подтверждается результатами исследования индекса агрегации эритроцитов: у больных по средним данным он был ниже нижней границы нормы, а при индивидуальном анализе ниже 1,4 ед. наблюдался у 34 (80,9%). Повышение индекса агрегации выше 1,5 ед. было выявлено у 2 человек (4,76%).

Индекс деформабельносги эритроцитов по средним данным у больных ВБ был снижен (1,09^0,007 ед.), а при индивидуальном анализе был ниже 1,2 у 40 больных (95,2%). Это свидетельствует об изменении мембран эритроцитов у больных ВБ, что согласуется с данными, полученным при изучении деформируемости методом фильтров.

Таблица 3

Вязкость крови и плазмы у больных вибрационной болезнью (в сангинуазах)

Показатели вязкости Больные вибрационной болезнью MÍ (п * ад) Контрольная группа

Вязкость венозной крови при сдвигах:

200-1сек.. 4,01 - 0,06 3,6 - 5,8

100-1сек. 4,34 Í 0,11 4,1 - 6,2

20_1сек. 5,62 - 0,22 5,5 - 7,7

Вязкость плазмы при сдвиге 100-1сек. 1,27 * 0,012 1,3 - 1,6

Индекс агрегаций, усл.ед. 1,3 :0,075 1,4 - 1,5

Индекс деформабельности, усл.ед. 1,09 * 0,07 1,2 - 1,3

Результаты изучения морфометрических показателей эритроцитов у (Зольных вибрационной болезнью представлены в таблице 4. Как видно из габлицы, все морфометрические показатели были достоверно, выше у больных с ББ по сравнению с контролем, причем наибольшими были различия у таких показателей как диаметр, площадь поверхности и объем клетки. Для этих параметров были построены гистограммы (рис.2-4). На рис.2 видно, что у больных ВБ более 30% клеток имеют диаметр более 7,5 ыкм и лежат в пределах до 8,9 мкм; тогда как в контрольной группе более 80« эритроцитов имеют диаметр менее 7,8 мкм и максимальное значение диаметра не превышает 8,55 мкм.

Из рис.3 видно, что площадь поверхности эритроцитов при ВБ также имеет более высокие значения, т.е. "сдвинута вправо" по сравнению с контролем. Так наибольшая частота значений площади поверхности эритроцитов приходилась на значения 121-139

9 '9

мкм , тогда как в контрольной группе это были 106- 122 мкм

соответственно. Та же самая тенденция представлена на рис.4. В контроле и у больных ВБ наибольшая частота значений объема эритроцитов находилась в пределах 61 - 87 ъиоР• Однако, у больных ВБ наблвдалось появление эритроцитов объемом от 87 до 109 мкМ^, а также, в меньшей степени - клетки еще большего объема от 109 до 130 мю<Р. Увеличение всех параметров эритроцитов наблвдалось у 64Й больных. При анализе показателей в зависимости от степени выраженности вибрационной болезни установлены более выраженные изменения диаметров эритроцитов у больных с умеренно выраженной формой заболевания: чаще встречались диаметры от 7,8 мкм до 8,2 мкм, по сравнению с больными с начальной стадией ВБ, при которой с одинаковой частотой встречаются диаметры с размерами от 7,4 до 8,2 мкм. У больных с остаточными явлениями закономерных изменений не выявлено.

Таблица 4

Морфометрическне показатели эритроцитов у больных вибрационной болезнью и в контроле.

Nn/n Морфометрические показатели • Больные вибрационной болезнью,(п=85) М±ш Контроль м. ^ iv«

1. Площадь поперечного сечения (мкм2) 48.43±0.55* 45.2±0.94

2. Периметр (мкм) 25.43±0.15* 24.3±0.35

3. Диаметр (мкм) 7.87±0.04* 7.58±0.07

4. Фактор формы (отн.ед.) З.б±4.5 3.58±2.27

5. Площадь поверхности (мкм2) 125.78±0.95 11б.7±1.б1

6. Высота (мкм) 2.12±0.03* 1.91+0.02

7. Объем (мкм3) 82.79±1.24* б9.б±1.27

♦•данные значения достоверно отличаются от контрольной группы

Частота 1%) 9.9

6.3

и

8.9 -

J___

6.5

7.5

8.5

Диаметр и 5 эритроцитов (ыкы

Рис - 2

Гистограмма распределения эритроцитов периферической крови по диаметру клетки в контроле и у больных вибрационной болезнью

•ота

М

Й.4

М

Контроль

(п=аО)

Больные вибрационной

болезнью (п=65)

>8 IIS 138 150 1 75 Площадь

поверхности

Рис. 3 эритроцитов

(мкм)

1истограмма рапределения эритроцитов периферической крови по площади поверхности в контроле и у больных

вибрациониой болезнью.

Частота—

{%) 0.« ь

В.4 -

6.?

Контроль (п=<>0)

КШШ^ Больные

вибрационной болезнью (п.-бЬ)

й 89

1»

11? ' 146

Объем эритроцитов (мйм)

Гистограмма распределения эритроцитов периферической крови по объему в контроле и у больных вибрационной болезнью.

По-видимому, эти изменения эригроцигов, обусловленные состоянием их мембран, являются неспецифическими. В литературе юследних лег появились сообщения об увеличении размеров эригроцигов у ликвидаторов последствий аварии на Ч^ЭС, перенесших зоэдейсгвие небольших доз ионизирующего излучения и стресса [П.Н Любченко с соавг., 1990), при контакте рабочих с органи-1ескимй растворителями (Л.А.Шпагина, 1994), а также при некоторых соматических заболеваниях - гипертонической болезни, атеросклерозе (Е.Г.Тужилова, 1995). Учитывая имеющиеся в литературе данные, в том числе экспериментальные, можно предполагать,что 5 основе изменений мембран эригроцигов при вибрационной болез-ш лежат нарушения перекисного окисления липидов, содержания холестерина и его фракций, активности сульфгидрильных групп и фугие метаболические отклонения.

После проведенной традиционной терапии, включающей витамину дизаггрегангы(курантил), миотрооные препараты (галидор), шзер, массаж, существенных изменений в динамике исследуемых юказателей не обнаружено. Это может свидетельствовать о сгой-юсти обнаруженных изменений морфо-функциональных характеристик фигроцигов периферической крови у больных ВБ. Вместе с тем, фи лечении больных методом гипербарической оксигенации было вы-гвлено снижение числа сгоматоцигов с 13,4^2,58%до 10,2-2,3%, ю после 10 сеансов их число не достигло нормы (10,5^0,07%).

Таким образом, результаты наших исследований свидегельсг-1уют об изменениях морфо-функциональных характеристик эригро-[игов периферической крови у больных вибрационной болезнью.

Выявлено увеличение размеров эригроцигов, снижение дефор-шруемосги их мембран, увеличение количества нетипичных форм фитроцигов - стоматоцигов, эхиноцитов, дегенеративных эриг-оцигов. Эти изменения ухудшают прохождение крови через капил-лры и могут усиливать микроциркулягорные и ишемические нару-

шения в тканях, прежде всего пальцев рук. Резистентность изменений эритроцитов к традиционной тораши указывает на необходимость включена дополнительных методов лечения ангиодистоличе-ского синдрома с направленным воздействием на клеточные мембра:

Проведенные исследования позволили сделать следующие выводы.

ВЫВОДЫ:

1. У больных начальной и умеренно выраженной формами вибр ционной болезнью изменения гемодинамики наблюдались на всех уровнях - от микроциркуляторного русла пальцев рук до системного. Наиболее часто встречались спастическое и спастико-агониче-ское состояние капилляров у 72,3^ обследованных больных; изменения регионарных артерий мышечного типа, также с наклонностью к спазму отмечались у 52,9л, изменение центральной гемодинамики по гиперкинетическому типу - у 75$ обследованных.

2. В патогенез микроциркулягорных и гемореалогических нар^ шений при вибрационной болезни определенный вклад вносят выявленные изменения формы и размеров эритроцитов, а также свойств их мембран. У больных увеличено количество обратимо-измененных клеток -сгомагоцигов (13,4^-2,58$), эритроцитов с жесткой мембраной - эхиноцитов (4,8*1,88$), дегенеративных форм эритроцитов (2,37^0,6$).

3-У 64$ обследованных выявлено увеличение размеров эритроцитов. Разработанный алгоритм компьютерной морфометрии эритроцит* показал, что комбинация параметров: диаметр, площадь поверхнос: объем клетки, высота краевой зоны и фактор формы является инфо] мативной для объективного определения доли морфологически измененных, со сниженной способностью к деформации эритроцитов.

4. Кривая деформируемости эритроцитов по данным фильтрационш го метода сдвинута вправо по сравнений с контролем, что подгве]

ет большие размеры эритроцитов у больных вибрационной болезнью укп:шпп<«т н'\ снижонио доформируемосги их мембран. Фильтрация игроцигов была снижена при всех значениях осмолярносги буфера, при более низких (280, 260 моем) разница с контролем была сга-сгически достоверной. Прекращение фильтрации у больных наблю-лось при осмолярносги буфера 240 моем, б контроле при 225.

5. Выявленные изменения морфологических и функциональных ойсгв эритроцитов, снижающих их способность адаптироваться к овогоку, были более выражены у больных при умеренно выраженной рме вибрационной болезни по сравнений с начальной; при.остато-ых явлениях закономерных изменений не установлено.

6. Вязкость крови в наших исследованиях не была достоверно менона, отмечалась тенденция к ее снижению, вязкоегь плазмы

ла снижена. Эги изменения можно рассматривать как своеобразную аптацию для облегчения кровотока в системе микроциркуляции.

V. Выявленные изменения размеров и формы эритроцитов были гойчивы к традиционной терапии вибрационной болезни. При ис-льзовании оксигенобарогерапии выявлено снижение количества ■омагоцигов, остальные показатели остались без изменения.

Полученные данные свидетельствуют о необходимости апроба-и новых методов лечения вибрационной болезни, в частности ис-льзоващя средств, влияющих на метаболизм мембран (АТФ, рибо-;ин, солкосерил и др.).

список

опубликованных работ по теме диссертации Алексеевой Г.А.

1. "Методика психофизиологического обследования промышленных рабочих с помощью прибора "Ритмотест"". Тезисы докладов VII научно-практической конференции молодых ученых и врачей Московской области. "Повышение эффективности использования науки в практическом здравоохранении". М., 1991, с. 5-6. (в соавт.)

2. Электрофизиологические изменения нервно-мышечного аппарата при вибрационной болезни. Сборник: "Актуальные вопросы профзаболевании. Клиника, диагностика, лечение. М., 1995, с. 101-103. (в соавт.)

3. "Условия труда и результаты обследования рабочих производства линолеума". Медицина труда и промышленная экология, 1993, № 1, с. 37-39. (в соавт.)

4. "Методика исследования центральной нервной системы рабочих промышленных предприятий с помощью психофизиологических приборов "Ритмотест", "Бинатест", "Мнемотест"". Информационное письмо для цеховых терапевтов и невропатологов Московской области. М., 1992, 14 с. (в соавт.)

5. " Состояние эритроцитов периферической крови при вибрационной болезни". Медицина труда и промышленная экология, 1995, №5. с. 27-30. (в соавт.)

6. "Морфометрические показатели эритроцитов периферической крови у больных вибрационной болезнью". Медицина труда и промышленная экология, 1995, №10, с. 41-42. (в соавт.)

7. "Деформируемость эритроцитов при вибрационной болезни". Тезисы докладов V съезда специалистов по лабораторной диагностике. М., 1995, Часть 1, с. 6. (в соавт.)

8. "Морфометрические и цитофотометрические параметры эритроцитов после длительных космических полетов". Тезисы докладов V съезда специалистов по лабораторной диагностике. М., 1995, Часть 1, с. 209. (в соавт.)

9. "Опыт оценки реологических показателей крови у больных вибрационной болезнью с помощью прибора АКР-2." Тезисы докладов VIII научно-практической конференции молодых ученых и врачей Московской области "Актуальные вопросы клинической медицины". М., 1995, с. 153-154. (в соавт.)

список

опубликованных работ по теме диссертации Алексеевой Г.А.

1. "Методика психофизиологического обследования промышлен-ых рабочих с помощью прибора "Ригмотест"". Тезисы докладов

II научно-практической конференции молодых ученых и врачей Мос-овской области. "Повышение эффективности использования науки практическом здравоохранении". М., 1991, с.5-6 (в соавт.).

2. Элекгрофизиологические изменения нервно-мышечного аппа-ата при вибрационной болезни. Сборник: "Актуальные вопросы рофзаболеваний. Клиника, диагностика, лечение". М., 1995, .101-103 (в соавт.).

3. "Условия груда и результаты обследования рабочих произ-одсгва линолеума"; Медицина груда и промышленная экология, 993, л* I, с.37-39 (в соавт.).

"Методика исследования центральной нервной системы ра-очих промышленных предприятий с помощью психофизиологических риборов "Ригмотест", "Бинагест", "Мнемогест"". Информационное исьмо для цеховых терапевтов и невропатологов Московской обла-ги. М., 1992, 14 с. (б соавт.).

5. "Состояние эригроцигов периферической крови при вибра-ионной болезни". Медицина груда и промышленная экология, 1995, ! 5, с.27-30 (в соавт.).

6. "Морфомегрические показатели эригроцигов периферичес-ой крови у больных вибрационной болезнью". Медицина труда и ромншленная экология, 1995, й 10, с.41-42 (в соавг.).

7. 'Деформируемость эригроцигов при вибрационной болезни", езисы докладов У съезда специалистов по лабораторной диагно-гике. М., 1995, Часть 1, с.6 (в соавт.).

8. 'Уорфомегрические и цигофотомегрические параметры эритроцитов после длительных космических пшютов". Тезисы докладов У съезда специалистов по лабораторной диагностике. М., 1995, Часть I, с.209 (в соавг.).

9. "Опыт оценки реологических показателе!; крови у больных вибрационной болезнью с помощью прибора АКР-2". Тезисы докладов УШ научно-практической конференции молодых ученых и врачей '..¡ооновской области "Актуальные вопросы клинической медицины", г.'., 1995, с.153-154 (в соавг.).