Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Механизмы коррекции нарушений липидного обмена компонентами семян Medicago Sativa и длинноцепочечными жирными кислотами

i (

На правах рукописи

Березовикова Ирина Павловна

МЕХАНИЗМЫ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА КОМПОНЕНТАМИ СЕМЯН MEDICAGO SATIVA И ДЛИННОЦЕПОЧЕЧНЫМИ ЖИРНЫМИ КИСЛОТАМИ

14.00.16 - патологическая физиология 03.00.04 - биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

НОВОСИБИРСК 2003

На правах р\ кончен

Березовикова Ирина Павловна

МЕХАНИЗМЫ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА КОМПОНЕНТАМИ СЕМЯН MEDICAGO SATIVA И ДЛИННОЦЕПОЧЕЧНЫМИ ЖИРНЫМИ КИСЛОТАМИ

14.00.16 - патологическая физиология 03.00.04-биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Новосибирск 2003 \ ¿CSh

\ _

Рабата выполнена в Государственном учреждении Научно-исследовательский институт терапии Сибирского отделения Российской академик медицинских наук (г Новосибирск)

Научные консультанты: доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

доктор биологических наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор

Ведущая организация:

Симонова Галина Ильинична Куликов Вячеслав Юрьевич

Селятицкая Вера Георгиевна

Мошкии Михаил Павлович Шарапов Виктор Иванович

Государственное учреждение Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (г. Красноярск)

Защита состоится Дд ЛС^аЛпЛ-' 2003 г. в часов на заседании диссертационного совета Д 001.648.01 в Государственном учреждении Научный центр клинической и экспериментальной медицины Сибирского отделения Российской академии медицинских наук по адресу: ул. Академика Тимакова, 2, г. Новосибирск, 6301) 7, тел/факс 8(3832) 33-64-56

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН

Автореферат разослан ^

члцуло 2003 г.

пи.

Ученый секретарь диссертационного совета, д.б.н. МЛ, С.Н.Кутина

к"

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Нарушения липидного обмена занимают ведущее место в генезе сердечно-сосудистых заболеваний у жителей большинства экономически развитых стран (Доклад ВОЗ, №57, 1994, NCEP Expert Panel, 2002). Важнейшим компонентом в коррекции нарушений липидного обмена является диета. Диетическое вмешательство нацелено на уменьшение концентраций общего холестерина сыворотки крови и холестерина липопротеннов низкой плотности. Специалистами рекомендована пошаговая диетотерапия (диеты Al и А2), последовательно ограничивающая поступление общего жира, насыщенных жирных кислот и холестерина в рационе. В контролируемых исследованиях показано, что применение диеты Al сопровождается снижением концентраций общего холестерина и холестерина липопротеинов низкой плотности лишь на 7-9% (NCEP Expert Partei, 1993, 2002), поэтому актуальной является проблема повышения липидкорригирующего эффекта диет.

В последние годы опубликованы результаты исследований, согласно которым эффективность диеты А1 может быть повышена добавлением к ней различных пишевых компонентов: соевого белка, пищевых волокон, полиненасыщенных жирных кислот семейства «й-3 и других веществ (Anderson J.W., 1995; Anthony MS. et al.,1997; Wilson T.A. et al., 1998). Источниками этих веществ являются в первую очередь бобовые культуры - семена сои и гуара (Су-amo psi s Tetrágono I obus).

Механизм липидкорригирующего действия семян зернобобовых связывают с содержащимися в них вязкими ферментируемыми пищевыми волокнами, обладающими гельформирующими свойствами (Anderson JAV, et al., 1990, 1995, 1999; Glore S.R. et al., 1994). Попадая в просвет тонкого кишечника, они снижают долю абсорбции нутриентов, в частности, пищевого холестерина. Вязкий полисахарид гуара - галактоманнан, образуя при контакте с водой высоковязкие гели, способствует еннженню концентрации холестерина крови (Todd P.A., et al., 1990). Помимо гуара, галактоманнан обнаружен и в некоторых других бобовых культурах (Anderson Е., 1949). Семена Medicago Sativa содержат галактоманнан с уникальным соотношением галактозы и маннозы (Hirst E.L.etaK, 1947,Степаненко Б.П., 1978),

Гиполнпидемические свойства сырых семян Medicago Sativa показаны в -ряде исследований (Malinow M.R. et al., 1977, 1980, 1984, Molgaard J. et al., 1987). Поскольку, как и в других бобовых культурах, в них содержатся антипитательные вещества, то требуется предварительная обработка - автоклав и ро ванне (Bell Е.А, et al., 1960). В связи с этим, остается открытым вопрос о сохранности липидкорригирующих компонентов семян iCledicago Sativa и их свойствах.

Воздействие семян Medicago Sativa на метаболизм холестерина может проявляться в снижении абсорбции желчных кислот. Пишевые волокна, связывая желчные кислоты, увеличивают их экскрецию с калом; для' поддержания необходимого пула желчных кислот, увеличивается их синтез из холестерина,

i «

что при вол ит к снижению его содержания в желчи. Одновременно происходит повышение холато-холестери нового коэффициента. Таким образом, одним из ведущих звеньев в механизме л и гшд корригирующего действия семян Medicago Sativa могут быть их сороционные свойства. До настоящего времени они остаются неизученными, поэтому представляется важным исследовать сорбиион-ные свойства семян Medicago Sativa по отношению к солям холевых кислот, влияние их потребления на концентрацию холестерина желчи и холато-холестернновый коэффициент.

Регулирующая роль в ослаблении синтеза холестерина в печени отводится коротко-цепочечным летучим жирным кислотам - продуктам ферментации компонентов пищевых волокон: некрахмальных вязких полисахаридов и резистентного крахмала (Anderson J.W., 1995, 1999, Topping D.L., 2001). Резистентный крахмал образуется в семенах бобовых, независимо от способа их термообработки (Vecna Д. ct а)„ Cheung P.C. et a)., J998), однако, количество образующегося при термообработке семян Medicago Sativa резистентного крахмала, неизвестно. В связи со сказанным, для установления механизма липидкорриги-рующего действия семян Medicago Sativa, является актуальной задача определения в них не только общего содержания пищевых волокон, но н резистентного крахмала.

Липопротеины низкой плотности в первую очередь из всех классов ли-попротеинов подвергаются окислительной модификации (Климов А.Н., 1995; NCEP Expert Panel, 2002), которая, согласно современным представлениям, играет ведущую роль в атерогенезе (Berliner J.A. et al., 1995; Jialat I. et al., 1992). В семенах Medicago Sativa содержатся витами н ы-анти о кси да нты: токоферол и каротиноиды (Зелепухина В.Ф., 1977), которые могут препятствовать окислительной модификации липопротеннов низкой плотности. Неизвестно, что происходит С антиоксидантами семян Medicago Sativa в процессе термообработки, В этой связи представляет интерес изучение устойчивости липопротеннов низкой плотности к окислению при использовании в качестве антиоксиданта тер-мообработанных семян Medicago Sativa.

Дислипидемии часто выявляются у лиц с гипертензией и избыточной массой тела (ВОЗ, 1990). Одним из способов коррекции как артериального давления! так и гиперлипндемий является снижение массы тела (Hovell М.Е., 1982, MacMahon S.W. et al., 1985, N1H, 1998, Flynn M.M. et al,, 1999, NCEP Expert Panel, 2002), Гипотензивный эффект оказывает и включение в диету жиров морских рыб - источников со-З поли не насыщенных жирных кислот (Harris W,S. et al., 1990, Appel L.J. et al., 1993, Morris M.C, et al., 1993, Титов ВН., 1999). Однако их прием сопровождается преимущественно снижением концентрации триглииеридов сыворотки крови, а содержание холестерина лнпопротеинов низкой плотности повышается (Harris W.S., 1995, Nestel P.J., 2000). Сочетанное влияние на липидный обмен редуцированной по калорийности и содержанию жиров диеты, обогащенной ш-З полине насыщенны ми жирными кислотами остается неизученным.

Цель работы: Изучить роль компонентов семян Mcdicago Sativa и длин-ноцепочечных жирных кислот в коррекции нарушений липидного обмена у лице гилерхолестеринемией.

Задачи исследования:

1. Изучить состояние липидного обмена у пациентов с птерхолестсри-ьемией при использовании диеты AI 2500 ккал (NCEP, 1993), усиленной семенами Mcdicago Sativa.

2. Разработать гипокалорнйную диету с включением длин но цепочечных полиненасыщенных жирных кислот семейства ы-3 и изучить состояние липидного обмена у пациентов с гнперхолестеринемией на фоне се применения.

3. Изучить состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестерн-нсмией на фоне применения диеты Al 2500 ккал (NCEP, 1993), усиленной w-3 длииноцепочечными полиненасыщенными жирными кислотами,

4. В семенах Medicago Sativa определить компоненты, обладающие ли-пидкорр и тирующим действием,

5. Изучить аитиоксидантные, сорбциоиные и реологические свойства семян Medicago Sativa и их вязкого полисахарида ir» vitro.

Диссертация выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГУ НИН терапии СО РАМН, тема "Изучить механизмы энтеросорбции и разработать новые способы коррекции нарушений липидного обмена", номер государственной регистрации № 019.40001993. В 19911995 гг, работа была поддержана rpatrroM Научного совета по Государственной научно-технической программе России "Национальные приоритеты в медицине и здравоохранении", направление "Атеросклероз", №127.

Научная новизна. Впервые показано, что при использовании семян Medicago Sativa у пациентов с гнперхолестеринемией липидкоррнгирующий эффект достигается за счет снижения абсорбции холестерина в кишечнике, усиления элиминации желчных кислот и синтеза холестерина в печени. Этот эффект более выражен, чем при традиционной диетотерапии. Показано, что замедление абсорбции холестерина связано с гельформирующими свойствами вязкого полисахарида Medicago Saliva, а элиминация желчных кислот - с их сорбционными свойствами семян.

Показана способность семян Medicago Sativa снижать окисляемость ли-попротенков низкой плотное™ in vitro за счет содержания жирорастворимых антиоксидантов (токоферола и каротиноидое) и лигнина.

Впервые показано, что в составе пищевых волокон термообработанных семян Medicago Sativa повышается содержание резистентного крахмала, биологические эффекты которого связывают с образованием летучих жирных кислот и блокированием синтеза холестерина.

Впервые показано, что у пациентов с гиперхолестеринемией снижение концентраций общего холестерина и холестерина липопротеинов низкой плотности, без изменения содержания холестерина высокой плотности, достигается в результате применения ги по калорий ной диеты 1800 ккал с включением

длннноцелочечных полиненасышенных жирных кислот семейства ы-3, В отличие от диеты Al, эти эффекты проявляются через один месяц диетотерапии.

Практическая значимость. Усиление эффективности ги по калорий ной диеты Al 1800 ккал введением ш-3 ПНЖК жиров морских рыб позволяют рекомендовать ее для профилактики и коррекции факторов риска сердечнососудистых заболеваний: избыточной массы тела и ожирения, артериальной гнпертензии и нарушений липидного обмена, в частности, высокой концентрации холестерина липопротеиьов низкой плотности. Диета, обогащенная ы-3 ПНЖК жиров морских рыб рекомендована для использования в лечебном питании в санаторно-курортных учреждениях (Организация лечебного питания в санаторно-курортных учреждениях. Методическое пособие. Утв, Управлением социальной зашиты Администрации Новосибирской области. - Новосибирск, 2002).

Полученные результаты свидетельствуют, что холестер и понижающий эффект диет, усиленных семенами Medicago Sativa и длинноцепочечными жирными кислотами, достигается в более короткие сроки, по сравнению с диетой А1 и позволяют рекомендовать такие диеты для немедикаментозной коррекции нарушений липидного обмена у пациентов с ги п ерхо лестер и нем ией. Разработанный способ выделения вязкого полисахарида из семян Medicago Sativa может быть использован для получения камеди. Сведения о повышении эффективности диетотерапии у пациентов с нарушениями липидного обмена используются в образовательном процессе студентов Новосибирской государственной медицинской академии.

Положения, выносимые на защиту:

t. Липидкорригирующий эффект диеты Al 2500 ккал повышается при дополнении ее семенами Medicago Sativa. Jl и п и дк op р и ги ру щее действие диеты А) 2500 ккал, модифицированной семенами Medicago Sativa, связано со способностью пищевых волокон семян повышать вязкость содержимого желудочно-кишечного тракта, снижать реабсорбцию желчных кислот и синтез холестерина в печени у пациентов с гиперхолестеринемией.

2. Семена Medicago Sativa обладают анитиоксидантнымн свойствами, которые проявляются в снижении окисляемости липопротеинов низкой плотности in vitro, за счет содержащихся в семенах жирорастворимых антиоксидантов и лигнина,

3. Замена w-6 пол и ненасыщенных жирных кислот на длинноцепочечные полиненасышенные жирные кислоты семейства ш-З в ги по калорий ной диете 1800 ккал у пациентов с гиперхолестеринемией приводит к достоверному снижению концентрации общего холестерина, холестерина липопротеинов низкой плотности, без снижения содержания холестерина высокой плотности сыворотки крови.

Апробаиня работы. Материалы диссертации докладывались на научно-практической конференции "Новые методы диагностики и лечения заболеваний, медицинская техника" (Новосибирск, 1993), 5-й научно-праетической конференции "Актуальные вопросы современной медицины" (Новосибирск,

1995), II Российском национ&чьном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва. 1995), научной конференции "Питание в профилактике заболевании населения Севера" (Красноярск, t995), Международном симпозиуме "Полиненасыщенные жирные кислоты ю-б и со-З семейств: мелико-биологические, биохимические и биотехнологические аспекты" (Владивосток, 1995), Международной конференции "Intemaiional perspectives of the North Karelia project. 15 years of International Visitors Programs" (Финляндия, Йоенсу, 1995), Сибирской кардиологической конференции "Диагностика, лечение и профилактика сердечнососудистых заболеваний" (Новосибирск, 1996), Втором международном симпозиуме "Питание и здоровье: биологически активные добавки к пище" (Москва, 19%), III между народном симпозиуме "Питание и здоровье. Биологически активные добавки к пище в лечении и профилактике наиболее распространенных заболеваний" (Тюмень, 1997), Международной конференции "Вторичная профилактика ИБС: достижения и перспективы" (Тюмень, 1997), V Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1998), IV Международном симпозиуме "БАД: XXI век" (Санкт-Петербург, 2000), V Международном симпозиуме "Биологически активные добавки к пище и проблемы здоровья семьи" (Красноярск, 2001), VI Международном симпозиуме "БАД к пище и проблемы оптимизации питания" (Сочи, 2002).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 47 работ, в том числе получено 2 патента Российской Федерации на изобретение:

1. Способ получения холестеринснижаюших веществ: Патент РФ №2052960 / Ю.П.Никитин, И.П. Березовикова,- опубл.27.01.96 - Изобретения,-1996.-ЖЗ.

2. Способ немедикаментозной коррекции факторов риска ишемической болезни сердца: Патент РФ№ 2164409 / Ю.П. Никитин, И.П. Березовикова, Г.В ,Сп и р и до н она.- опубл. 27.03.01,- Изобретения,- 2001,-№9.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 260 страницах машинописного текста. Состоит из введения, литературного обзора, материалов и методов исследования, четырех глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов. Диссертация иллюстрирована 35 таблицами и 30 рисунками. В списке литературы приведены 95 отечественных и 355 иностранных источников.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование механизмов коррекции нарушений липидного обмена компонентами семян Medicago Sativa и длинноцепочечных жирных кислот проводилось в три этапа.

На первом этапе исследовался химический состав семян Medicago Sativa, проводилась оценка изменений нутриентов, обладающих гиполипиде-мическими свойствами, при их термообработке.

На втором этапе проводилась сравнительная оценка основных свойств семяи Medicago Sativa, которыми можно объяснить ее лнпидкорригирующиее

действие: сорбционных, антиоксидантных, реологических, в молельных системах in vitro.

На третьем этапе изучалось состояние липидиого обмена у пациентов с гилерхолестеркнемией на фоне применения диет А) 250О ккал (NCEP, 1993) и диет 1800 ккал с различными липидкорригирующими компонентами.

Для характеристики химического состава семян Medicago Sativa определяли: содержание сухих веществ - методом высушивания до постоянной массы при ]05°С (Ермаков А.Н,, 1987); общий азот (N) определяли методом Къельда-ля (ИСО, 1971). Количество белка рассчитывали по содержанию общего азота умножением на пересчетный коэффициент 6.25 (N х 6,25) (Покровский A.A., 1976); аминокислотный состав белков, состав углеводов - методом ВЖЭХ на хроматографе "Милихром" (Россия); триптофан - колориметрическим методом, после щелочного гидролиза (Ермаков А.Н., 1972); оценку качества белка проводили методом аминокислотного скора (ВОЗ, 1973). Общие лип иды определяли no Folch J.et al. (1957); спектр жирных кислот - методом газожидкостной хроматографии на газовом хроматографе 5890А фирмы "Хъюлетг-Паккард" (Япония).

Исследование перевариваемых углеводов: моно- и дисахарнды определяли методом Бертрана (Бурштейн А.И., 1963); крахмал - методом кислотного гидролиза (Ермаков А.И., 1987). Энергетическую ценность оценивали расчетным путем с использованием калорических коэффициентов 4,0 - для белков, 9,0 - для жиров и 4,0 - для углеводов (Покровский A.A., 1976).

Суммарное содержание пищевых волокон и их состав - гравиметрическим методом по Gocring H.K.,Van Soest P.J, (1970). Содержание резистентного крахмала оценивали ферментативным фае и метрическим методом по Engl у st H.N. et al. (1992). Общее количество золы определяли гравиметрически, с озо-лением вещества при 400-450°С (Бурштейн А.И., 1963). Суммарное содержание сапонинов - по Ермакову А.И. (1987); медикагеновую кислоту (агликон) методом ВЭЖХ на хроматографе "Милихром" (Россия). Содержание L-канаваннна определяли качественной реакцией, основанной на специфической цветной реакции аминокислоты L-канаванина с три натриевой солью пентациан аммония железа (Naj[Fe(CNbNH3J) поВе!1Е.А.(1960),

Анализ содержания витаминов - антиоксидантов (токоферолов) проводили с использованием обращенно-фазной распределительной хроматографии на микроколоночном хроматографе "Милихром 1-А" (Россия) (Микичур Н.И., Сафронов И Д., 1988), каротиноидов - экстракцией ацетоном с последующим колориметр« рованием (Ермаков А.И. и др„ 1972).

Изучение сорбционных свойств проводили в модельных опытах с хола-том натрия. Определение концентрации холата натрия производили по реакции Петтенкоффера, фотометр и рование при 580 нм.

Антиоксидантные свойства сырья и препаратов изучали, используя метод определения резистентности ЛНП к окислению in vitro (Рагино Ю.И., Душкин М.И., 1998) (отв. исп. - д.м.н. Рагино Ю.И.). Реологические свойства растворов вязких п ол и сахар и до в в концентрациях 0,5% и I% исследовали с

помощью капиллярного вискозиметра типа ВПЖ-1; определяли кинематическую вязкость при температуре 22 ± 3°С.

Оценка эффективности гиполипидемической диеты, усиленной термоооработанными семенами Medicago Sativa.

Для оценки эффективности гиполипидемической диеты Al, а также диеты, дополненной термообработанными семенами Medicago Sativa , проведено клиническое открытое, контролируемое, рандомизированное (простая рандомизация с использованием строк случайных чисел) исследование обшей продолжительностью 8 недель. Исследование проводилось в 1995-1997г г на базе 2-го терапевтического отделения клиники ГУ НИИ терапии СО РАМН (зав. отделением и ответственный исполнитель клинической апробации Словикова И.Б.). В исследовании приняло участие 50 пациентов - добровольцев, мужчин и женщин в возрасте 30-59 лет. Критерием отбора служила гиперхолестерине-мия: концентрация ОХС в сыворотке крови 200 - 300 мг/дл (NCEP, 1993). Противопоказаниями для участия в исследовании являлись: вторичная гиперлипи-демия (сахарный диабет, заболевания щитовидной и поджелудочной желез, неф рота ческий синдром), активные заболевания печени, хроническая почечная недостаточность, подагра, инфаркт миокарда или оперативное вмешательство на сердце за предыдущие 6 месяцев, хронический алкоголизм, острые заболевания и/или состояния (инфекции, травмы, обострения хронических заболеваний), прием гнполилидемнческих препаратов в течение 2-х месяцев до начала исследования, непереносимость бобовых. Все пациенты были рандом изирова-ны на 2 группы, не отличающиеся между собой по исходным клинико-биохимическим показателям (табл.1).

Обследуемые групп получали гиполипидемическую диету A) (NCEP, 1993) с содержанием общего жира не более 30%, насыщенных жирных кислот (НЖК) не выше 10% калорийности рациона, общего холестерина - до 300 мг/сутки. Энергоценность 2200-2500 ккал. Группа 1 (Днета Al+Medicago Sativa) получала дополнительно к диете семена Medicago Sativa термостатированные измельченные 15 г/сутки (3 раза в день по 5 г). Участник« группы 2 (Диета Al) получали только базовую диету Al. Общая продолжительность наблюдения составила 8 недель, в том числе 3 недели - в условиях стационара и 5 недель - амбулаторий. Через 2 недели амбулаторного наблюдения пациенты приглашались для осмотра с целью контроля соблюдения диеты и переносимости растительной добавки к диетам. Оценка диеты проводилась методом 24-часового суточного воспроизведения за три дня (Мартинчик А,Н„ и др., 1996).

Оценку антропометрических показателей производили стандартным» методами, в 1-й, 21-й и 56-й дни исследования. Индекс массы тела оценивали по формуле: ИМТ = масса тела (кг) /рост ( м2). Избыточная масса тела и ожирение принимались при значениях индекса> 25кг/мг (NIH, 1998).

Взятие крови осуществляли натощак с 07 до 08 часов, в 1-й, 21-й и 56-й дни исследования. Концентрации ОХС, ХС ЛВП, ТГ в сыворотке крови определяли ферментативным методом с использованием наборов фирмы "Biocon" (Германия) на анализаторе FP 901.

Таблица I

К л и н и ко-б и о хи м и чес кая характеристика исследуемых групп (гиполмпидемические диеты с растительными компонентами, М±т)

Диета А 1 Диета А1

Показатели + Мс&саёо ЭэНуа

п=25 п=25

Средний возраст, лет 48,8+ 1,6 47,4 ± 1,5

Мужчины,% 52 52

Женщины, % 48 48

САД, мм рт ст ! 38,6 ± 2,9 140,2 ±3,0

ДАД, мм рт ст 91,1 ± 2,1 90,2 ±2,1

Рост, м 1,69 ±0,02 1,71 ±0,02

Масса тела, кг 78,5 ± 2,3 81,8 + 3,4

НМТ, кг/м~ 27,4 ±0,5 27,9 ± 0,7

Глюкоза, ммоль/л 5,1 ±0,2 5,0 ±0,1

Мочевая кислота, ммоль/л 0,33 ±0,01 0,33 ±0,01

ОХС, мг/дл 250,4 ± 3,6 244,4 ± 4,7

ХС-ЛНП, мг/дл 166,5 ± 4,7 163,4 ± 4,9

ХС-ЛВП, мг/дл 54,2 ± 3,6 51,5 ± 2,5

Триглицериды, мг/дл 161,5 ±13,4 153,5 ± 10,0

Коэффициент атерогенностн 4,1 ±0,4 4,0 ±0,3

(ОХС-ХС ЛВП1/ХС лвп 1,9 ±0,1

Холестерин пузырной желчи, г/л 2,0 ±0,1 1,0 ±0,1

Холестерин печеночной желчи, г/л X олато-холестер и но вы й 1,0 ±0,1 14,8 ± 1,0

12,6 ±0,7

Коэффициент

Примечание: различий в показателях между группами нет, р>0,05, I -критерий Стьюдента

Холестерин липопротеинов низкой плотности (ХС ЛНП) рассчитывали по формуле РНес1с\\'а1(1 W. (1972), коэффициент атерогенностн по формуле Климова А.Н. (1995). В 1 -й и 56-й дни исследования проводили ми ну тированное дуоденальное зондирование (МДЗ). Содержание холестерина и литогенные свойства желчи определяли, исследуя пузырную (IV фаза МДЗ) и печеночную желчь (V фаза МДЗ). Концентрацию холестерина в желчи определяли методом Златки-Зака в модификации Мирошниченко В.П. (1983); холато- холестериновый коэффициент - по отношению общего количества желчных кислот к общему холестерину. Концентрацию глюкозы определяли в сыворотке крови ор-то-толу ид иловым методом (Тиц Н.У., 1986). Все биохимические исследования сыворотки крови и желчи проводились в лаборатории биохимических исследований ГУ НИИ терапии СО РАМН (отв. исп, н.с. Иванова М.В.).

Для проведения исследований было изготовлено 3 опытных партии тер-мообработайны\ измельченных семян Medicago Sativa Оценка каждой партии по санитарно-химическим показателям и микробиологическим показателям безопасности производилась в соответствии с "Мсдико-биологическими требованиями и санитарными нормами качества продовольственного сырья в пищевых продуктах" №5061-89 и СанПиН 2,3.2560-96 "Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов". Все пациенты были ознакомлены с целями исследования и подписывали информированное согласие на участие в нем.

Опенка лнпидкорригируюшего действия диет, усиленных ПНЖК семейства to-3.

Оценка липидкорригирующих свойств диет, усиленных ПНЖК семейства üj-3, изучалась на базе клиники НИИ терапии СО РАМН (главный врач и ответственный исполнительФлейшман Г.В.), в 1994-98гг. Продолжительность диетотерапии - 4 недели. Были использованы диеты АI 2500 ккал (NCEP, 1993) с включением различных доз ш-3 ПНЖК в составе капсул жира лососевых ("Омега-3", Nutra Source, США), а также оригинальные гипокалорийные диеты 1800 ккал с включением ПНЖК семейства ia-3 и без них. В исследование включено 49 добровольцев в возрасте 30-59 лет. Критерием отбора являлась артериальная гипертеизия (диастолическое давление 90-105 мм рт ст; ВОЗ, 1993). Все испытуемые были разделены на 4 группы, не различающиеся по исходным клинико-биохимическим показателям (табл.2).

Таблица 2

Исходные клинико-биохимические показатели в исследуемых группах (М± т)

Показатели Диета 1 Диета 2 Диета 3 Диета 4

Численность 15 12 15 7

Возраст, лет 42¿± 2,0 43,7± 2,3 44,5± 2,6 55,9± 2,4

Рост, см 1,74± 1,3 1,74+ 2,3 1,74+ 1,9 1,68+4,4

Масса тела, кг 95,0+4,1 94,0± 5,9 87,6+ 3,2 81,1+3,6

ИМТ, кг/м1 31,2± 1,2 30,7+ 1,3 2S,8± 1,1 28,7+ 1,1

САД, мм рт ст 150,3± 2,3 155,7± 8,1 148,6± 2,7 153,9± 3,1

ДАД, мм рт ст 97,7± 1,1 101,513,6 96,8± 1,1 92,9± 4,8

ОХС, мг/дл 255,7± 14,9 229,б± 10,1 227,0±9,2 226,3± 15,7

ХС ЛНП, мг/дл 178,0± 12,6 150,2± 9,2 133,6+ 11,0 141,3± 14,4

ХСЛВП, мг/дл 46,9+ 4,0 5t,3± 3,2 55,4± 3,8 58,4± 5,1

ТГ, мг/дл 143,7+ 19,7 140,3± 13,8 190,4± 39,2 133,0± 22,8

Примечание: различий в показателях между группами нет, р>0,05, LSD-критерий

Пациентам группы I (Диета J) назначалась оригинальная гипокалорий-наяднетаА! - 1800 ккал, разработанная автором, в которую ежедневно включалось 4,4г ПНЖК ùt-З {в т.ч. 3,6 г ЭПК и ДГК} в виде 75г рыбных консервов "Сельдь иваси натуральная" (Россия). Второй группе (Диета 2) предлагалась вышеуказанная диета, не содержащая е>-3 ПНЖК. Пациенты третьей группы (Днета 3) в период исследования получали гиполпандемическую диету Al 2500 хкал и !2 капсул жира лососевых "Омега-3" (Nuira Source), что соответствовало 3,6г ЭПК и ДГК. Пациенты четвертой группы (Диета 4) получали диету At 2500 ккал и 3 капсулы "Омега-3" (0,9г ЭПК и ДГК). Все пациенты в дополнение к а и ere получали а-токоферол а ацетат 200мг/день, Пациенты не принимали липидснижаюших и гипотензивных препаратов, были ознакомлены с целями исследования и подписывали информированное согласие на участие в нем.

Взятие крови для анализов осуществляли натощак с 07 до 08 часов, в I -Й и 28-й дни курса диетотерапии. Спектр жирных кислот определяли на газовом хроматографе 5890А фирмы "Хьюлетт-Паккард" (отв.исп. д,х.н,А.И.Резвухин).

Статистический анализ. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета программ SPSS 9.0-11.5 и "Statistics 6.0". Применялись параметрические (критерий Стъюдеита, простой н парный) и непараметрические тесты (Уилкоксона, Мани-Уитни), однофакторный дисперсионный анализ (ANO VA, Крускал-Уэллис), множественное сравнение средних (LSD-критерий), корреляционный анализ (Спирмена и Пирсона), унивариантный анализ GLM. Значения р<0,05 считали достоверными.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Оценка лнпидкоррнгнруюши* компонентов семян Medic a go Sativa Medí cago sativa Изучение химического состава натнвных семян Medí cago Sativa показало, что большая часть сухих веществ представлена углеводами, как усвояемыми - Î 1,8±2,1%, так и неусвояемыми (пищевыми волокнами) - 33,8±0,8%, Отмечено высокое содержание белка - 36,7+1,2% нз сухое вещество. Концентрация липидов сравнительно невысока- 12,5+0,5%. Энергетическая ценность семян составила 284,212,9 ккал /ШОг. Как и все бобовые культуры, белки семян Medicago Sativa характеризуются высоким содержанием лизина и низкой концентрацией серусодержаших аминокислот. Для семян Medtcago Sativa характерна высокая концентрация аминокислот, обладающих гиполнпидем ическ им и свойствами: глицина(3520 ± 10!,(5 мг%), аргинина (3861+222,1 мг%) и аспара-гиновой кислоты (1980 ± 103,3 мг%), 8 масле семян содержится а-линоленовая кислота семейства ш-3 в концентрации 27,9 ± 2,0%

В общем количестве пищевых волокон содержится 35,6 % re ми целлюлоз, 8,9% - резистентного крахмала, 38,5% - целлюлозы. Заслуживают внимания данные о количестве лигнина, содержание которого составило 17% от обшей

суммы пищевых волокон, или 30% суммы кислотко-детергентных волокон, что значительно выше, чем в семенах других бобовых культур (табл.З). Эти результаты представляются очень важными в связи с тем, что лигнин является одним из главных компонентов пищевых волокон, с которым связывают сорбцию желчных кислот. Кроме того, они обладают антиоксидантными свойствами (Lu F.J. et at,, 1998). Гемниеллюлозы семян Medicago Sativa, как it в других бобовых культурах, являются основным компонентом вязких полисахаридов, формирующих вязкие гели и играющих важную роль в снижении концентраций липидов и глюкозы сыворотки крови. Концентрация сапонинов в семенах Medicago Sativa составила 0,25+0.01%. В сапонинах семян обнаружено 9,6% агликонов, в составе которых присутствует медикагеновая кислота - 0,0012% от массы.

Таким образом, в семенах Medicago Sativa сорта "Сибирская" были определены следующие липидкорригирующие компоненты: пищевые волокна, а-линоленовая кислота, аргинин, глицин, ас п ара ги ко вал кислота, сапонины. В семенах Medicago Sativa, как и в других семенах бобовых культур содержатся антипитательные вещества, В данном объекте они представлены аргинино-подобной аминокислотой - L-канаванином (Bell Е.А., 1960), Поэтому при их переработке для пищевых целей необходимо использовать методы, способствующие удалению этого компонента. Надежными способами освобождения от L-канаваннна, являются проращивание семян или их авто «лавирование <ВЫ1 Е.А., 1960, Malinow M,R. et al.,1984). Поэтому нами для обработки семян Medicago Sativa была принята схема, апробированная шведскими исследователями (Molgaard J. et al., 1987), Схема обработки семян включала в себя следующие этапы: автоклав и рован не (1 атм, 120°С, 3 часа), сушку с вентиляцией (70°С, 1 час), измельчение и последующее гостнрование(177°С, ¡Омик).

Известно, что величина частиц вещества во многом определяет его физиологическое действие. Особенно это относится к эффектам пищевых волокон: влагоудерживающей способности, их ферментированию микроорганизмами толстого кишечника, сорбционным свойствам. Степень измельчения влияет и на гипохолестеринемический эффект семян Medicago Sativa (Malinow M.R. et a!., 1980), Поэтому в отличие от схемы, предложенной Molgaard J. et al„ нами был получен тон кои змельче иной продукт (размер частиц 50-100 мкм), для чего были использованы современные вихревые технологии. Термообработка семян способствовала удалению антипитательного вещества L-канаванина, о чем свидетельствовала отрицательная качественная реакция.

Термообработка не изменяла концентраций большинства активных компонентов семян Medicago Sativa (ПНЖК, белков, аминокислот). Основные изменения выявлены в количестве и составе пищевых волокон: их содержание возросло до 42,2±0,9%. Разные компоненты пищевых волокон отличаются по физико-химическим и физиологическим свойствам, поэтому очень важными являются результаты определения отдельных составляющих пищевых волокон семян (табл.З).

Таблица 3

Пищевые волокна семян Med i cago Sativa (г/100 г. M+m)

Пищевые волокна CeMeHaMedícago Sativa Семена Medicago Sativa

нативные тер м ооб работай н ые

Ней трал ьн о-детер ге нтн ы е

(общие ПВ) 31.2 ± 0.8 42.2 ± 0.9*

Резистентный крахмал 2,8 ±0,3 14.7± 0,6*

К и сл отн о-детер гентн ые, 17.310.5 16.4 ± 0.6

всего

в т.ч. целлюлоза 12,0 ±0.2 11.3 ±0.3

лигнин 5,3+0,5 5.1 ±0,2

Примечание: * - p<0.05, парный тест Уилкоксона

Кислотно-детергенгная фракция волокон, представленная целлюлозой и лигнином пе изменялась. Увеличение на 35% обшего количества пищевых волокон произошло за счет образования резистентного крахмала, физиологические свойства которого подобны эффектам растворимых пишевых волокон: ферментирование в толстой кишке с образованием летучих короткоцепочеч-ных жирных кислот, и, воздействие, таким образом, на метаболизм липидов посредством блокирования еннтеза холестерина в печени (Veena A. et а).,1995, Jenkins D.J.A. et al., 1998).

Поскольку гиполипанемические эффекты бобовых растений в большой степени связаны с наличием в них гельформирукнцнх полисахаридов, была решена задача выделения их из семян Med i cago Sativa. Сравнительная характеристика химического состава полученного нами полисахарида "Альфагам" и очищенной камедн бобов гуара - Туарем" (Орион, Финляндия), который используется для коррекции гиперлкпидемий, приведена в табл.4.

Таблица 4

Химический состав вязких полисахаридов семян Medicago Sativa и Гуарема

(%, М± ш)

Сухие вещества Белок Липи-ды Углеводы (по разности) Зола Углерод Водород

Гуарем 86,9±0,01 3,81 0,0 83,1 0,0 39,03 6,87

±0,05 ±0,04 ±0,07

Альфа- 89,8 ±0,08 10,9 0,3 79,2 1,67 44,82 6,47

гам ±0,06 ±0,03 ±0,49 ±3,8* ±0,12*

Примечание: * р<0,05, тест Уилкоксона

Содержание галактоманнана в полученном нами полисахариде составило 78,3±0,3% (в Гуареме - 82,5±0,6%). Соотношение галактозы и маннозы в Аль-фагаме составило 4:1, а в Гуареме 1,25:1. Отмечено, что различные соотношения галактозы и маннозы в галактоманнанах семян бобовых обуславливают их различные вязкостные свойства (Sprenger М., 1990). Представлялось важным сравнить эти свойства у полученного нами полисахарида "Альфагам" со свойствами Туарема", т.к. одним из вероятных механизмов гипохолестеринемиче-ского действия гельформирующих волокон является снижение абсорбции холестерина в тонком кишечнике за счет повышения вязкости. На рис.1 и 2 представлены результаты изучения реологических свойств вязкого полисахарида, выделенного из семян Med i cago Sativa в сравнении с гуаровой камедью "Гуа-рем" и семенами подорожника, которые, как и гуаровая камедь, снижают концентрации ОХС н ХС ЛНП, без изменения концентраций ТГ и ХС ЛВГТ (Anderson J.W. et al., 2000).

Таким образом, изучение свойств камеди семян Medicago Sativa показало, что ее вязкостные свойства сопоставимы с гуаровой камедью и выше, чем у известного коммерческого липидснижающего препарата пищевых волокон -семян подорожника. Поэтому одним из вероятных механизмов гипохолестери-немического действия семян Medicago Sativa является абсорбции холестерина в тонком кишечнике вследствие образования вязких гелей,

3 г *

5 2.7 ;

« 2,1 -- Т

£ 1,8 - >

ос J t

а 1.5 - \ <

и * 4

$ 1,2 - t-

Л 1 ^ *

5 0,6 - --Альфагам - - - - Гуарем

| 0,3

0 -------1----. . .-------i I .1. J... --.

0.5 1 2 3 4 8 12 24 25

Время экспозиции, час

Рис.1. Кинематическая вязкость 0,5%-х водных растворов вязкого полисахарида семян Medicago Sativa - Альфагам и Гуарема, 25°С

Примечание: * - р<0.05, тест Манн-Уитни

¡ 8 }--Апьфагам---Подорожник

7 О ' О

«6

О 4 I *

í t t * ^

É 3 Г * ^ - . „ 2 * -г ^ , - ---

JE - »■— ■ т — -

| -*

О ■ >

0,5 1 2 3 4 8 12 24 25

Время экспозиции, час

Рис,2, Кинематическая вязкость 1,0%-х водных растворов вязкого полисахарида семян Medicago Sativa и подорожника, 25°С Примечание: * - р<0.05, тест Манн-Унтни

Сорбционные свойства семян Medicago Sativa Medicago Sativa

Энтеро сорбция, как один из методов коррекции нарушений липидного обмена, привлекает внимание специалистов своей физиологичностью и меньшим проявлениям побочных эффектов. Одним из возможных механизмов ги похолестеринемического действия органических сорбентов - стеринов, сапонинов, пищевых волокон, является их возможность связывать метаболиты холестерина - желчные кислоты, снижать реабсорбцию и повышать фекальную экскрецию последних, прерывая, энтерогепатический цикл их обмена. Как было показано выше, в семенах Medicago Sativa присутствуют потенциальные сорбенты стеролов и желчных кислот. Эффективность связывания холата натрия семенами Medicago Sativa нативными измельченными, термообработан-ными измельченными, изолированным вязким полисахаридом изучена в сравнении с известными секвестрантами желчных кислот • холести рам ином, вазо-заном, пектином, а также коммерческими препаратами очищенных растворимых волокон - "Гуаремом" и "Прополом". Кроме того, для исследования были использованы семена Medicago Sativa после удаления из них сапонинов (рис.3).

Вачотдн

А 105,7

ХоЛОС jiy^jMHH ■,

А

в Пектин а 68

Medicago Sativa*

В 63,6

Пропол £

9,1

. TvapíM

• 9,4

АлыЬага.м £

мкц 52,3 £

Подорожник

32,6 i

Medie agí) Sativa*'

59,4

g 56,5 Medicago Sativa В

Колестид

49,7 C

Рис.3, Сорбция холата натрия различными препаратами относительно холестирамина (%). Примечание: * - Семена Medicago Sativa после удаления сапонинов, ** - семена Medicago Sativa термообработанные; буквами обозначены меж-гру 11 новые различия, р<0,05, LSD-тест.

Наиболее эффективными из изученных сорбентов оказались холестира-мин и вазозан (холестирамин, обогащенный пектином). В одинаковой степени связывали соль желчной кислоты семена Medicago Sativa нативные и термообработанные, семена Medicago Sativa без сапонинов и пектин яблочный (рисЗ). Связывающая способность семян Medicago Sativa и пектина была в 1,3 раза выше, чем у коммерческого секвестранта желчных кислот "Колестида". В табл.5 приведены результаты количественной оценки сорбции соли холевой кислоты различными препаратами, при различных условиях сорбции.

Проведенные исследования показали высокую сорбиионную способность семян Medicago Sativa, как нативных, так и термообработанных. Полученные результаты показывают, что воздействие семян Medicago Sativa на метаболизм холестерина при добавлении к г и пол и п идем и ч ее ко и диете может проявляться повышением выведения желчных кислот н синтеза их из холестерина, и как следствие, снижением концентрации холестерина в желчи и крови.

Таблица 5

_Сорбция холата натрия различными препаратами (%. М±т)_

Масса продукта, необ-

Образец препарата Сорбция холата, мг/г ходимого для сорбиии __I г холата, г_

100 мг сорбента, 0.4 мг/мл халата натрия в буферном растворе, рН=8,1=37 С, ___I час, 5 мл фосфатного буфера_

Вазозан 17,1 ± 0,5 a 59,4 ± 1,9"

Холестирамин 16,2 ± 0,4a 62,1 ± 1,5"

Пектин яблочный 11,0± 0,2В 923 ± 2,0е

Семена Medicago Sativa 10,3± 0,5в 98,5 ± 4,4е

термообработаные 9,6+ 0,3В

Семена Medicago Sativa 105,1 ± 3,5е

нативные

Колестид 8,0 ± 0,4е 130,3 ± 6,9Ь

мкц 2,0 ± 0,2° 554,4 ± 59,0*

100 мг сорбента, 0.4 мг/мл холата натрия в буферном растворе, рН=8, t=37wC,

I час, 10 мл фосфатного буфера

Холестирамин 29,0 ± 0,7' 34,7 ± 0,8"

Пектин яблочный 22,9 ± 1,1й 45,4 ± 2,бг

Семена 9,4 ± 0,4Г 106,5 ± 4,1й

подорожника

Альф агам 2,8 ± 0,3° 369,0 ±36,5"

Ту арем 3,1 ± 0,3° 390,7 ±66,Г

Про пол 2,6 ± 0,3° 404,6 ± 37,5"

Примечание: разными буквами обозначены достоверные межгрупповые различия, p<0,05,LSD-TecT.

Антиоксндантные свойства семян Medícago Sativa Medí cago Sativa Учитывая важность процессов окисления липопротеинов низкой плотности (ЛНП) в развитии атеросклероза, была проведена оценка антиоксидантных свойств нативных и термообработанных семян Medícago Sativa in vitro.

В табл.6 представлены результаты изучения антиоксидантов семян Medicago Sativa, Несмотря на многоступенчатый процесс их обработки, изменений в концентрации витамин о в-антиоксидантов не произошло. Содержание токоферолов в семенах Medicago Sativa (нативных и термообработанных) составило в среднем 37±1,4% от рекомендуемой дозы потребления, а каротинои-дов (в пересчете на ретиноловый эквивалент) - 200±10,б %.

Инкубация ЛНП с ионами меди (контроль) повысила окисленность ЛНП до 76,5 ± 0,01 нмоль/мг белка ЛНП. Добавление в среду инкубации растительных препаратов - нативных или термообработанных семян Medicago Sativa, приводило к достоверному снижению окисленности ЛНП уже в минимальной концентрации - 0,1 мг/дл. В этой концентрации снижение было одинаковым

для веек препаратов — 7,1% по отношению к инкубированным без антиокси-дантов ЛНП (табл.7, рис.4).

Таблица 6

Антиоксидантные компоненты семян Medicago Sativa (М± m>

Антноксидант Семена Medicago Sativa нативные Семена Medicago Sativa термообрабо-тайные Р*

Токоферол, мгЛООгУо 3,54 ± 0,24 3,84 ±0,14 >0,05

Каротинокды (РЭ), 1,82 ±0,07 2,18 ±0,13 >0,05

мг/100г

Сумма витаминов АО 5,36 ±0,31 6,02 ± 0,26 >0,05

Лигнин, г/1 ООг 5,3 ±0,5 5,1 ±0,2 >0,05

Примечание: * - парный тест Уилкоксона

Повышение концентрации препаратов от 0,1 до 10 мг/мл приводило к дальнейшему снижению окисленности ЛНП. Антиоксидантные свойства на-тивных и термообработанных семян не различались и зависели от их дозы в среде инкубации (рис,4).

во -

^ so •

<45

40 --.-.-.---.-^-.

О 0.1 0,2 0,5 1 i i 5 10

Концентрация препарата, urlun — Medicago Satw а нативные — с- ■ Семена Msdcago Satva т/а

Рис.4. Антноксидантная активность семян Medicago Sativa Примечание: * - р<0,05, тест Уилкоксона относительно ЛНП, инкубированных с ионами меди без антиоксиданта

Таблица 7

Влияние антиоксидантов на окисляемость ЛНП в среде инкубации с ионами ___меди (М±га)_

Препарат Антиоксидант (АО) Концентрация АО, мг/мл Окисляемость ЛНП, нмоль/мг белка ЛНП

Неинкубированные ЛНП нет - 13,2+0,2

Инкубированные ЛНП (контроль) нет - 76,5 ±0,01 *

Инкубированные ЛНП БГТ 0,02 14,9±0,2*

Инкубированные ЛНП БГТ 0.04 14,0+0,2*

Примечание: *- р<0,05, тест Уилкоксона, относительно неинкубирован-

Результаты согласуются с данными о содержании аитиоксидантов в исходном сырье и те р м ооб работай н ы х семенах Medicago Sativa (табл. 6).

Таким образом, можно сделать вывод о том, что семена Medicago Sativa могут оказывать разностороннее влияние на липиды крови: снижать концентрацию общего холестерина, липопротеинов низкой плотности; препятствовать окислительной модификации липопротеинов низкой плотности. Проведенная работа послужила основанием для включения термообработапных семян Medicago Sativa в рацион питания пациентов с гиперхолестеринсмией.

Состояние лннидного обмена у пациентов с гнп ерх ол ест е р и н е мне й при использовании диеты Al (2500 ккал), усиленной семенами Medicago Sativa

Средняя энергетическая ценность рационов в обеих группах составляла 24461108 ккал. Помимо рекомендованного снижения количества общего жира до 30% калорийности рациона, насыщенных жирных кислот <10% и холестерина <300 мг/сутки, диета характеризовались высоким содержанием пищевых волокон - 29,6±2,3 г/день. Добавление термообработакных семян Medicago Sativa вносило в рацион дополнительно 6,3±0,1 г пищевых волокон.

Снижение концентрации ОХС сыворотки крови наблюдалось в обеих группах уже к третьей неделе (рис.5). В последующий период диетотерапии в группе "Диета Al+Mcdicago Sativa" отмечено снижение концентрации ОХС еше на 6%, в то время как в группе "Диета Al" концентрация холестерина после 21-го дня не изменялась (рнс,4).

Таким образом, по завершении всего периода диетотерапии во всех группах было получено значимое снижение концентрации холестерина сыворотки крови на 13,0±1,2% и 5,9±0,9%, соответственно, в группе I и группе 2. На фоне диетотерапии концентрация ХС ЛНП во всех группах через 3 недели изменялась в равной степени (рис.4). Эффект, достигнутый в группе "Диета Al" к 21 дню, в дальнейшем не изменялся и составил 6,7±2,5%. В группе, ис-

пользовавшей семена Medicago Sativa, снижение концентрации ХС ЛНП наблюдалось в течение всего Й-недельного периода диетотерапии и достигало 17,0+3,1%. Помимо этого, в группе, сочетавшей диету Al с семенами Medicago Sativa, отмечено уменьшение концентрации ТГ на 16,6±2,8% <р<0,05>. Важно отметить, что концентрация ХС ЛВП не изменялась ни в одной из групп пациентов, Установлено, что степень изменения концентраций холестерина зависела от исходной величины (г=0,77, и г=0,75, р<0,05, для групп 1 и 2, соответственно).

Коэффициент атерогенности уменьшался на протяжении всего периода исследования во всех группах, однако, значимым изменение оказалось только при использовании диеты Al+Medicago Sativa к 56-му дню диетотерапии. В этой группе значения коэффициента стали равными 3,2+ 0,3.

Таким образом, диеты снижали концентрации ОХС и ХС ЛНП сыворотки крови у пациентов с гнперхолестерннемией, Однако, усиление листы Al термообработанными семенами Medicago Sativa сопровождалось дополнительным снижением концентраций ОХС, ХС ЛНП. Кроме того, усиление диеты Al семенами Medicago Sativa сопровождалось уменьшением концентрации триг-лицеридов сыворотки крови и коэффициента атерогенности.

Влияние óuem на концентрацию lunuóoe желчи Наряду со снижением концентраций общего холестерина и ХС ЛНП при использовании семян Medicago Sativa у пациентов гиперхолестеринемией, нами отмечены изменения концентраций холестерина пузырной и печеночной желчи, а также хaiато-холестеринового коэффициента, что подтверждает один из возможных механизмов гипохолестеринемического действия семян Medicago Sativa: увеличение пула желчных кислот за счет их синтеза из холестерина, вследствие выведения секвестрантами желчных кислот.

У пациентов, дополнявших диету А1 приемом семян Medicago Sativa, наблюдалось снижение концентраций пузырной и печеночной желчи, на 25,! ±2,9% и 35,б±4,0%, соответственно. Одновременно с этим холато-холестериновый коэффициент увеличился на 26,8±5,4%. Этот эффект связан с представленными выше сорбционными свойствами и свидетельствует о повышении синтеза желчных кислот из эндогенного холестерина (рис.2, табл.З). У пациентов, использовавших в качестве средства коррекции гиперхолестери-немни только диету, значимых изменений этих показателей отмечено не было.

Влияние диет на другие метаболические показатели Помимо воздействия на липидный обмен, отмечено влияние диеты АI, а также диет, усиленных растительными компонентами, на углеводный обмен. Исходная концентрация глюкозы во всех группах не превышала рекомендуемые физиологические величины и составляла в среднем 5,1+0,1 ммоль/л. Сочетание диеты Ale семенами Medicago Sativa сопровождалось снижением концентрации глюкозы уже через 3 недели диетотерапии.

Д 260

s 250 V

Й 240 О

S 230 3

э 220

| 210

« 200

0 21 56

Дни исследования

1 [ S0

I 170

5 160 ;

э

Л &

140 г

S 130

2! 56

Дни исследования

SJ М

61 '

5

i 59 -

с 57 -

и

ч о 55 -

X к 53 -

а

3 51 -

fi

Я С 49 -

5 47

М

45

21 56

Дни исследования

5 170

160 -

С

Í-

Я 150 -

Я

1 140 Г

X

g 130

2

120 -

21

56

Дин исследования Диета АНMedicado Sativa — - - Диета А]

Рис.5 Изменение концентрации липидов сыворотки крови при использовании диет А1 2500 ккал у пациентов с гиперхо лестсринемней. Примечание: *-р<0,05,меритерий, относительно исходных значений

В последующие 5 недель в этой группе отмечалось дальнейшее ее уменьшение: до 4,1±0,1 ммоль/л в группе 1 и 4.6±0,1 ммоль/л в группе 2. Гипогликемия ни в одной из обследованных групп не развивалась. Употребление семян бобовых часто сопровождается повышением концентрации мочевой кислоты. В нашем исследовании этот эффект не наблюдался.

Для выявления механизмов липидкорригирующего действия диет был проведен корреляционный анализ. Изучение причинно-следственных отношений влияния различных диет на состояние липидного обмена показало, что в группе 1 установлены корреляции между изменениями концентраций ОХС, ХС ЛНП и ХС пузырной и печеночной желчи и холато-холестер и нового коэффициента (табл.8).

Таблица 8

Связи между изменениями липидных показателен крови и желчи Показатели ДХХК ДХС пузырной ДХС печеночной ________' ________желчи желчи

ДОХС ......-0,47 0,56 0,46

ДХС ЛНП -0,48 0,55 0,43

Примечание: корреляции Пирсона, р<0,05

На основании полученных результатов и литературных сведений нами была разработана схема возможного механизма липидкорригирующего действия семян Medicago Sativa в сочетании с диетой А1 (рис.6).

Состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестерин ем ией при использовании диет, усиленных длинно цепочечными ПНЖК жиров

морских рыб

Известно, что введение длинноцепочечных «-3 ПНЖК в диету пациентов с гиперхолестеринемией сопровождается повышением концентраций ОХС и ХС ЛНП, независимо от дозы (Radack K,L. et al., 1990; Harris W.S., 1996. 1997; Kris-Etherton P.M. et a!., 2002). На рис.8 представлены результаты диетического вмешательства у пациентов 4-х групп с разной энергоиенностью рациона и дозой <а-3 ПНЖК, на состояние липидного обмена. Диета значимо влияла на изменение концентрации ОХС (Н=20,5, р<0,001) а ХС ЛНП крови (H= 18,6, р<0,001.

Только ги по калорийная диета в сочетании с ш-З ПНЖК способствовала снижению коэффициентов атерогенности (ХС ЛНП/ХС ЛВП и (ОХС-ХС ЛВП)/ХС ЛВП) до 3,0± 0,3 и 3,5± 0,4, соответственно.

На фоне диетотерапии изменился спектр жирных кислот сыворотки крови пациентов. Концентрация эйкозапентаеновой кислоты повышалась во всех группах, сочетавших диету с приемом ш-З ПНЖК. Следует отметить, что эти изменения определяла исходная концентрация ЭПК (Н=12,2; р<0,05) и было более выраженным при ее меньшем исходном уровне (табл.9). Содержание докозагексаеновой кислоты увеличивалось в группе "Диета Г' и "Диета 4". Это представляется важным, так как в литературе последних лет показано, что ДГ'К

Рис. 6. Возможный механизм дипидкорркгируюшсго действия семян люцерны

в сочетании с диетой А1

Таблица 9

Спектр жирных кислот сыворотки крови при использовании различных диет {% от общего содержания. М± т)

Жирные кислоты

ТШТ С 16:1 С ¡6:0 С18;3 С 18:2 018:1 С 18:0 С20:4 С20:3 С20:2

С20:0 Арахиновая 020:5 Эй коза ле; [таено вал 0.!9± 0,07 С22:5 Докозапентаеновая С22:6 Докозагексае новая

Мири становая

Пальм итоле иновая

! Тальм ити новая

а-Л ш голе но вал

Линолевая

Олеиновая

Стеариновая

Арах и зоновая

Л иго МО-у-линоленовая

Диета 2__

До После

4,18*0,64 4,06± 0,73 4,33±ШГ 5,39* 0,82 5,Ш 1,1 4,96* 0,68

___Ди£та 3____

'До После" курса

ТЖ"

Диета 4____

Цо ' "После са курса

ОТ*

С22:2 С22г1

23,2± 2,18 0,5* 0,24

!9,54± 1,95

24,56* 1.84

0.3± 0,27 0,75± 0,29 17,6*1,68

19,07* 1,09 19,42* 1,57

7,19* 0,9» 8,79* 0,6

17,0* и4

15.72* 1,51 17,45* 7,1? 10,83* 0,79

6,51± 0,55 6,92± 0,98 5,16* 0,6

2,47* 0,42 2,34± 0,38 ! ,79* 0,46

1,08*0,26 1,03*0,19 0,74 ±0,! 6

1,47± 0,33 1,3!± 0,19 1,24* 0,29

1,96* 0,17*0,09 0^7*

1,56*0,29 0,66* 0,15

0,97* 0,3 2,97± 0,34 5,2* 0,56* 2,15*0,46 0,5* 0,24 0,10*0,04

Эруковая

0,2* 0,14

1,19*0,38 1,! 3*0,27 0,35*0,16

А04± 0,64 5,72* (,93 23,08* 2,42 0,55* 0,2 19,14* 0,94 20,88* 1,58 9,5* 0,73 4,67* 0,31 1,80* 0,28 0,93* 0,1В 0,77* 0,19* 0,2б± 0,07 0,61± 0,13 2,72* 0,46 0,33 ±

0,да* 0,62* 0,16

3* 0,45 ¡.74* 0,28 ¡б,.1!* 1.36 ¡,36* 0,27 15,04* 1,21 21,53*

1,9 4,5 8± 0,24 4,99* 0.65 1,95* 0,39 0,82* 0,13 1,18* 0,09 0,84* 0, Л 1,09* 0,16 2,48* 0,26 0,32± 0,08 0,17* 0,03

Примечание: *- р<0.05, парный тест Уилкоксона, относительно исходною уровня

0,42* 7,33* 1,4*

22,64* 1.06*

1,25*0,16

17,89* 0,73* 21,83* 0,76* 5,91± 0,40* 3,31* 0.37* 0,97± 0,17* 0,61* 0,09* 1,04* 0,15

1,66* 0,21*

0,14*

2,6* 0,27

0,36* 0,03* 0,27* 0,05*

17 0,22 5,74* 2,81 20,71* 2,64 0,44* 0,10 21,0* 1,28 26,79* 1,87 8,2± 0,97

4.48* 0,55 1,35* 0,35 0,42* 0,14 0,87± 0,25 0^4* 0,11 0,81* 0.19 1,39* 0,3

0,35* 0,05 0.38* 0.!5

0,09* 4.47* 0,5! 23,87* 0,63 0.84* 0,14 ! 7,92± 0.33 23,88* 0,75 9,02* 0.16 3,96* 0,32* 0,78* 0,04 0,45* 0.05 0,43* 0,04 2,62* 0,5* 1,77* 0,18* 3,84* 0,41* 0,61* 0,1* 0,61* 0,12*

и ЭПК по-разному влияют на метаболизм ЛВП и ЛИП (Grimsgaard S, et а!., 1997, Mori Т.А, et а!., 2000). Следует отметить, что снижение как систолического, так и диастолического артериальиого давления происходило во всех группах до оптимальных уровней АД, согласно классификации ВОЗ/МО А Г (1999). Величина систолического артериального давления не зависела от вида применяемой диеты (табл.(О).

Таблица 10

Изменение антропометрических показателей и артериального давления

_в результате диетотерапии (М + т)_

Показатели После курса диетотерапии и Эффект диеты

Диета Диета Диета Диета Н р ~

1 2 3 4 (3.N-49)

ДМасса тела. -4,8+ 0,5* -4,8+ -4,5± 23,5 <0.001

кг , ДИМТ, кг/м 0,5* 05* 0,7*

-l,6± 0,2* -1,6± -0,5± -0,7 ± 21,5 <0,001

0,2* 0,2* 0,2*

ДСАД, мм рт -30,7± -32,6± -22,6± -23.9+ 7,1 >0,05

CT 3,1* 3,5* 3,1* 4,6*

ДДАД, мм рт -19,0± . -22,2± -11,9+ -6,8+ 3,2 17,4 <0,001

ст 2,2* 2,5* 2.2*

Примечание: * - р<0,05, парный тест Уилкоксона, относительно исходного уровня

На фоне диетотерапии происходило снижение соотношения «б/шЗ ПНЖК. Во всех группах, дополнявших диету приемом <д-3 ПНЖК в различных видах (рыба или капсулы рыбьего жира), этот коэффициент изменялся от типичных для западных популяций до характерного для популяций коренных жителей прибрежных северных регионов Гренландии, Чукотки, Канады (Dyer-berg J., 1989; Nikitin Yu.P. et al., 1991; Rode A. et al., 1995) (рис.7).

M 12 10

g a

CD

с e

Диета 1

Диета 2 Диета 3 Диега 4 □ 0 дней ■ 28 дней

Рис.7. Изменение соотношения соб/и>3 ПНЖК сыворотки крови у пациентов с ишерхо лестери нем не й при использовании различных диет Примечание: * - р<0,05, парный тест Уилкоксона

Диета 1 Диета 2 Диета 3 Диета 4

с х

¥

Ер

т

ВС

Диета 1 Диета 2 Диета 3 Диета 4

Диета 1 Диета 2 Диета 3 Диета 4

Я

£ ь

Щ-

аЬ

С

и*

Диета 1 Диета 2 Диета 3 Диета 4

Рис.8. Изменение концентрации лилидов сыворотки крови при использовании диет с (о-З ПНЖК. Примечание; строчными буквами обозначены межгрупповые различия. р<0,05, тест Манн-Уитни

Следует отметить, что не только вид диеты влиял на изменение ОХС и ХС ЛНП. но и снижение потребление жира по сравнению с типичной диетой Анализ рационов питания показал, что у всея пациентов изменился характер питания, в соответствии с требованиями липидкорригируюшей диеты. Из всех диетических факторов на состояние липидного обмена повлияло уменьшение содержания жира в рационе с 39±0,5% на 9,1 ±0,6% (F4 2,2, р<0,05 и F=7,l, р<0,05, соответственно, для ОХС и ХС ЛНП).

Таким образом, в результате диетического вмешательства было уставлено, что наиболее эффективной по влиянию на концентрацию липидов сыворотки крови оказалась г и по калорийная диета с включением со~3 Г1НЖК (3,6г ЭПК и ДГК): отмечено снижение концентраций ОХС на 23,9±2,6% и ХС ЛНП на 29,7±4,6%. Гипокалорийная диета без ПНЖК ш-3 снижала содержание ОХС менее эффективно: на 11,1 ±3,4 (Н-3.8, р<0,05). Использование капсулирован-ных препаратов Омега-3 (3,6 и 0,9г ЭПК и ДГК) в сочетании с диетой AI 2500 ккал не влияло на состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестери-немией. Ни в одной из исследуемых групп не было получено характерного для использования ПНЖК ы-З снижения концентрации ТГ. Это связано с исходно нормальным содержанием ТГ в крови у пациентов (табл.2).

Для выявления механизма липидкорригирующего действия гипокало-рийных диет был проведен у ни вариантный GLM-анализ. Для снижения концентрации общего холестерина сыворотки крови значимыми факторами оказались: повышение содержания ПНЖК (F=S,4, p=0,0f), уменьшение концентрации ©-б ПНЖК (F=7,l, р=0,02), снижение массы тела (F=5,7, р=0,03). Главным фактором, влияющим на уменьшение концентрации холестерина липо-протеинов низкой плотности оказалось повышение содержания суммарного количества ПНЖК (F=5,5, р=0,03).

Полученные результаты аналнза согласуются с литературными данными и позволяют представить механизм гипо холестерин ем ич ее ко го действия этих диет следующим образом: за счет редукции общего жира в рационе, сокращается поступление в организм насыщенных жирных кислот и пищевого холестерина. В результате этого повышается активность рецепторов ЛНП, Повышение потребления ПНЖК, взамен НЖК диеты, способствует снижению продукции апоВ - липопротеинов (Stone N.J., et al., 1996). Вследствие этого наблюдается снижение концентрации липопротеинов низкой плотности в крови. Применение гипо калорий ной диеты сопровождается снижением массы тела и подавлением синтеза эндогенного холестерина (Buono M.D., 1999). Кроме того, длин-ноцепочечные ПНЖК семейства <й-3 также подавляют синтез холестерина и могут снижать абсорбцию холестерина (Neste! F\J. et al., 1990).

ВЫВОДЫ

t. Повышение липидкорригирующего эффекта диеты Al 2500 ккал за счет ее модификации семенами Medicago Sativa связано со снижением абсорбции холестерина в кишечнике, повышением элиминации желчных кислот и снижением синтеза холестерина в печени у пациентов с гиперхолестеринеми-

ей, Этот эффект проявляется в дополнительном снижении концентрации общего холестерина, триглицеридов крови, без изменения содержания ли по протеинов высокой плотности.

2. Гиполипидемический эффект диеты AI 2500 ккал, модифицированной семенами Medí cago Sativa, обусловлен содержанием в них комплекса лип ид-корригирующих веществ - полиненасыщенных жирных кислот, аминокислот, сапонинов, пищевых волокон, содержащих резистентный крахмал, и их способностью к сорбции желчных кислот и образованию вязких гелей.

3. Термообработанные измельченные семена Medicago Sativa за счет содержания в них жирорастворимых антиоксидантов (а-токоферола и каротн-ноидов) и лигнина обладают способностью к дозозавнсимому снижению Cu-индуцированной окисляемости липопротеииов низкой плотности сыворотки крови человека m vitro.

4. Применение ги по калорий ной диеты 1800 ккал пациентами с гиперхолестеринемией приводит к выраженному снижению концентрации общего холестерина и холестерина липопротеинов низкой плотности сыворотки крови, без изменения содержания холестерина липопротеинов высокой плотности через четыре недели диетотерапии, по сравнению с диетой Al.

5. Применение пациентами с гнперхолестеринемией ги по калорий ной диеты, ь которой <а-6 пол и ненасыщенные жирные кислоты заменены на длин-ноцепочечные пол и не насыщенные жирные кислоты семейства о>-3, усиливает снижение концентрации общего холестерина сыворотки крови и уменьшает соотношение холестерина атерогенных форм липопротеинов к неатерогенным, без изменения содержания холестерина высокой плотности.

6. Применение пациентами с гиперхолестеринемией изокалорийной диеты АI 2500 ккал, модифицированной длинноцепочечными ПНЖК семейства со-3 в низких и средних дозах, в течение четырех недель, не влияет на состояние липидного обмена, но снижает артериальное давление у пациентов с ги-пертензией.

7. Выраженное снижение концентрации холестерина липопротеинов низкой плотности у пациентов с гиперхолестеринемией достигается за восемь недель применения изокалорийной диеты А1 2500 ккал, модифицированной семенами Medicago Sativa, или за четырехнедельный курс гипокал ори иной диеты 1800 ккал, модифицированных длинноцепочечными полиненасышенными жирными кислотами семейства ш-3.

8. Нарушения липидного обмена сопровождаются формированием устойчивой патологической функциональной системы, которая выводится из равновесного состояния пшолипидемической диетотерапией. Модификация диет биологически активными компонентами позволяет направленно корригировать лнпидный обмен.

9. Список работ, опубликованных по теме диссертации

I. Березовикова Н.П., Никитин Ю.П., Симонова Г.И., Парух И.Г. Семена Medicago Sativa как источник холестеринснижающих средств // Новые методы

диагностики и лечения заболеваний, медицинская техника: Тез, докл. Научно - практ, конф.- Новосибирск, 1993.- С. 12,

2. Березовиков а И.П.. Ялрышникова Е.К., Симонова Г.И. и др.Новые направления в профилактике и лечении нарушений липидного обмена и ожирения Í! Актуальные вопросы профилактики неинфекционных заболеваний: Тез, научно-практ. конф. с международным участием, 14-16 дек. 1993г., том 2.-М., 1993.-С.304,

3. Эфендиева Д Б., Мамлеева Ф.Р., Березовикова И.П., Рывик Р., Сигнов-ская Э. Сравнительная характеристика питания различных популяций, обследованных по программе ВОЗ "Моника" // Бюллетень Сибирского отделения российской академии медицинских наук.- 1993.-№3,-С,30-37.

4. Березовикова И,П„ Парух И.Г. Сырьевая база Сибири как основа изменения питания населения // Актуальные вопросы современной медицины: Тез. докл. юбилейной пятой научно-практической конференции, том 2.- Новосибирск, 1995,- С.330-331.

5. Березовикова И,П„ Парух И.Г,, Шалаурова И.Ю., Иванова MB., Рез-вухин А.И. Семена Medicago Saliva как источник фармакологически активных вешеств //11 Российский национальный конгресс "Человек и лекарство"; Тез. докл.- М, 1995- С.392.

6. Никитин Ю.П., Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Шалаурова И.Ю., Резвухин А.И., Казакова Г.Г., Парух И.Г. Влияние ю-3 жирных кислот в сочетании с гнпокалорийной диетой на липиды крови и артериальное давление// П Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл.-М, 1995- С.395.

7. Березовикова Н.П., Парух И.Г. Семена Medicago Sativa в качестве биологически активных добавок для профилактики и коррекции лнпшшых нарушений //Новые биологически активные добавки (нутрицевтикн) в лечении и профилактике наиболее распространенных заболеваний: Мат. ыежд. симп. -Тюмень, 1995,- С.130-133.

8. Березовикова И.П., Бобарева Л.Я., Парух И.Г. и др. Перспективы использования семян Medicago Sativa в питании // Питание в профилактике заболеваний населения Севера: Мат. научной конф,- Красноярск, 1995.- С.б-7.

9. Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Парух И.Г., Резвухин А.И., Шалаурова И.Ю. Диета с включением ш-З жирных кислот для немедикаментозной коррекции артериальной шпертензии Н Питание в профилактике заболеваний населения Севера: Маг. научной конф.- Красноярск, 1995.- С.51-52.

10.Nikitin Yu., Spiridonova G„ Ber его vi ko va I,, Parukh ]„ Rezvukhin A., Shalaurova 1. The influence of hypocaloric diet riched with N-3 and N-6 fatty acids on some clinical-biochemical indices // Полиненасыщенные жирные кислоты N-6 и N-3 семейств: Медико-биологические, биохимические и биотехнологические аспекты: Тез. докл. симпозиума.- Владивосток, 1995- С.76.

11 .Mamleeva F., Simonova G., Bere¿ovikova I. Nutrition of Novosibirsk adult population and approaches to improved diet (epidemiological data) // International

perspectives of the Noitli Karelia project. 15 years of International Visitors Programs,- Yoensuu, North Karelia, Finland, 15-16 December, 1995,- P.20.

12.Березовикова И.П., Словикова И.Б,, Спиридонова Г,В. Биологически активные добавки как средства коррекции липидных нарушений //Питание и здоровье: биологически активные добавки к пище: Тез, второго международного симпозиума.- Москва, 22-27 апреля 1996.- С.11-12.

П.Никитин Ю.П., Близневская Е.В., Слепченко Н.В., Березовикова И.П., Спиридонова Г.В. Выявление и коррекция дислиполротеидемий на базе городского лниидного центра.// Ill Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез докл. - Москва, 16-20 апреля 1996.-С.174.

14.Словикова И.Б., Березовикова И.П. Растительные знтеросорбенты в профилактике сердечно-сосудистых заболеваний У/Сибирская кардиологическая конференция. Диагностика, лечение и профилактика сердечно-сосудистых заболеваний. Новосибирск, 25-26 сентября 1996г.: Тезисы докладов,- Новосибирск, 1996.- С.197-198.

15.Никитин Ю.П, Березовикова И.П. Способ получения холестеринсни-жающих веществ: Патент РФ №2052960.- опубл.27,01.96//Изобретения,- 1996.-

16.Березовикова И.П., Эфенднева Д.Б„ Мамлеева Ф.Р., Парух И.Г., Сухинина С.Ю., Бобарева Д.Я. Политика в области питания в регионах Сибири и Крайнего Севера как фактор профилактики сердечно-сосудистых заболеваний //Сибирская кардиологическая конференция. Диагностика, лечение и профилактика сердечно-сосудистых заболеваний. Новосибирск, 25-26 сентября 1996г: Тез. докл..- Новосибирск, 1996.- С.16-18.

17.Использование традиционных продуктов питания народов Севера в дошкольных и школьных учреждениях (Реальность. Проблемы. Рекомендации) /Коллективная монография под. ред. В.Т.Манчука, - Красноярск (в соавт.), 1996г.- 380 с.

18.Резвухин А .И., Березовикова И.П., Шалаурова И.Ю., Никитин Ю.П. Жирно кислотный состав масла семян Medicago Sativa //Химия природных соединений, 1995.- №4.- C.6I8.

19.Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Резвухин А.И., Парлюк Ю.Б. Омега-3 в комплексной терапии основных не инфекционных заболеваний //Актуальные вопросы современной медицины: Тез. докл. седьмой научно-практ. конф. врачей, 21 -22 мая 1997г., т.2. -Новосибирск, 1997.- С. 12-13.

20.Словикова И.Б., Березовикова И.П. Результаты клинической апробации препаратов пищевых волокон из Medicago Sativa // Актуальные вопросы современной медицины: Тез. докл. седьмой научно-практ. конф. врачей, 21 - 22 мая 1997г:, т.2.-Новосибирск, 1997.- С.9-10.

21 .Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Резвухин А.И., Парлюк Ю.Б. Омега-3 в комплексной терапии основных неинфекиионных заболеваний //IV российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл.- М., 8-12 апр,- 1997г.- С.543.

22. Березовикова И.П., Словикова И.Б., Иванова М.В, Роль питания во вторичной профилактике ИБС // Вторичная профилактика ИБС: достижения и перспективы, 19-20 нояб. 1997г. Тюмень: Тез. межд. конф. - Тюмень, 1997 - С,-30-32.

23.Спиридонова Г.В., Березовикова ИГ)., Резвухин А.И, Омега-3 ПНЖК в терапии ИБС // Вторичная профилактика ИБС: достижения и перспективы, 19-20 нояб, 1997г. Тюмень: Тез. межл, конф, - Тюмень, 1997,-С,55-56.

24. Березовиков а И.П., Словикова И.Б,, Иванова М.В. Растительные энте-росорбенты холестерина /' Природные минералы на службе человека (минеральная среда и жизнь): Тез. международной научно-практ. конф. 23-24 окт. 1997г. - Новосибирск, 1997,- С.23-25.

25.Березовикова И.П., Спиридонова Г.В., Словикова И.Б., Филатова Н.В,. Иванова М.В, Биологически активные добавки к пише в коррекции факторов риска хронических заболеваний // 111 международный симпозиум "Питание и здоровье. Биологически активные добавки к пище в лечении и профилактике наиболее распространенных заболеваний". 25-26 ноября 1997г: Тез докл. - Тюмень, 1997,-С,- 77-78.

26.Березовикова ПИ. Место биологически активных добавок к пише в современном питании // Сборник материалов Международной выставки "Здоровье шахтера-97. Медицина катастроф". 25-28 нояб. 1997г.- Кемерово, 1997.-С.- 45-47.

27.Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Никитин Ю.П. Омега-3 ПНЖК в коррекции "мягких" форм артериальной гнпертензии //Артериальные гнпер-тензии: патогенез, патогенетическая терапия, поражение органов. Международный симпозиум 15-17 дек 1997г: Тез. докл.- М, 1997.- С.73.

28 .Мат! ее va F., Efendieva D., Berezovikova I., Bra gin a O, Et al. Nutrition of Novosibirsk adult population: 10-year trends and approaches to improved diet (epidemiological data)// Asian-Pacific congress on vascular disease prevention, 11-15 March 1996.- Singapore, Abstr. No.347.

29.Березовикова И.П., Словикова И,Б., Никитин Ю.П., Мамлеева Ф.Р. Использование природного растительного сырья Сибири для создания биологически активных добавок к пище // V Росс.нац.конгресс "Человек и лекарство": Тез.докл,- Москва, 1998. - С.348.

30.Никитин Ю.П., Спиридонова Г.В., Березовикова ИЛ„ Резвухин А.И., Шалаурова И,Ю„ Парух И.Г. Оценка возможности использования гипокало-рийной диеты обогащенной и-3 полиненасыщенными жирными кислотами для немедикаментозной коррекции мягкой артериальной гипертензии // Новые биомеднцннские технологии с использованием биологически активных добавок: Сборник материалов Российской, науч. конф,- Владивосток, 1998.- С.106-112.

31.Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Никитин Ю.П. Изменения ли-пидного спектра сыворотки крови под влиянием ги по калорийной диеты с ш-З ПНЖК // V Росс.нац.конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл.- Москва, 1998,-С.409.

32.Спиридонова Г.В.. Березовикова И.П., Никитин Ю.П., Иванова М.В., Резвухин Л.И. Влияние гипокадорийной диеты с добавкой w-З полиненасыщенных жирных кислот на липидный профиль сыворотки крови у пациентов с мягкой артериальной гипертензией // Новые биомедицинские технологии с использованием биологически активных добавок: Сборник материалов Российской научной конф.-Владивосток, i998,- С112-115.

33. Березовикова И.П., Мам леев а Ф.Р, Современное питание: роль биологически активных добавок к пище //Фармацевтическое дело.- 1998,- №12,-С.103-104.

34. Денисова Д.В„ Беретовикова И.П., Никитин Ю.П. Основные факторы риска развития атеросклероза и фактическое питание у детей Крайнего Севера // Профилактика заболеваний и укрепление здоровья.- 1999. - №3,- С. 19-20,2931.

35.Березовикова И.I),.Спиридонова Г.В, Словикова И.Б. н др. Возможности использования новых направлений диетокоррекиии в реабилитации пациентов с различной хронической неинфекционной патологией // Мат. конф. -Белокуриха, 1999,- С,57-59.

36.Березовикова И.П., Словикова И.Б., Спиридонова Г.В. Повышение эффективности липидкорригирующей диетотерапии с помощью биологически активных добавок к пише // БАД: XXI век: Тез. докл. IV Международного симпозиума - Слб, 2000. - С.26-27.

37.Григорьева И.Н., Мамлеева Ф.Р., Брагина О.М., Березовикова И.П., Малютнна С.К. Потребление пищевых волокон у женщин с желчнокаменной болезнью // Сибирский журнал гастроэнтерологии и гепатопогии.- 2000.- №1011 -С,140-141.

38.Григорьева И.Н., Мамлеева Ф.Р., Братина О.М„ Березовикова И.П. Общий жир в питании женщин с желчнокаменной болезнью // Сибирский журнал гастроэнтерологии и гепатологии,- 2000.- Хэ10-11 - С. 141-142.

39.Никитин Ю.П,, Березовикова И.П„Спирндонова Г.В. Способ немедикаментозной коррекции факторов риска ишемической болезни сердца: Патент РФ№ 2164409,- опубл. 27.03.01 //Изобретения,-2001,-№9.

40.Березовикова И.П., Словикова И.Б, Биологически активные добавки из семян Medieago Sativa и их гиполипидемические свойства И Биологически активные добавки к пише и проблемы здоровья семьи: тез. V Международного симпозиума. - Красноярск, 2001. -С.29-30.

41.ФлеЙшман Г.В., Березовикова И.П. Длинноцепочечные полиненасыщенные жирные кислоты семейства ю-3: их эффекты на концентрацию холестерина в крови и артериальное давление // Биологически активные добавки к пище и проблемы здоровья семьи: Тез. V Международного симпозиума. -Красноярск, 2001.- С.269.

42.Berezovikova К, Mamleeva F. Traditional foods in the diet of ChukotVa natives // Circumpolar health. - 2001. - V.60.-P.138-142.

43.ФлеЙшман Г.В., березовикова И.П., Резвухнн А.И. Гипокалорийная диета и ы-3 ПНЖК: оценка эффективности сочетанного действия на артери-

альное давление и липиды крови у пациентов с "мягкой™ артериальной гипер-тензией // Актуальные проблемы заболеваний терапевтического профиля в Сибири: Труды юбилейной научной сессии НИИ терапии СО РАМН. - Новосибирск, 2001.-С.242-247.

44,Березовикова И.П., Словикова И.Б., Иванова М.В., Щербакова Л.В. Бобовые растения в коррекции лнпндных нарушений: семена Medicago Sativa И Актуальные проблемы заболеваний терапевтического профиля в Сибири: Труды юбилейной научной сессии НИИ терапии СО РАМН. - Новосибирск, 2001,-С.24 8-255.

45, Влощи некий П.Е., Березовиков а И.П., Рыбакова Т.VI.Питание современного человека и способы его коррекции// Новые химические системы и процессы в медицине : Сборник материалов Международной конференции.-Новосибирск, 2002.- С.51 -56.

46,Березовикова И.П. Новая биологически активная добавка - источник пищевых волокон П БАД к пище и проблемы оптимизации питания: Тез. VI Международного симпозиума,- Сочи, 2002. - С. 155.

47.3юбина Л.Ю, Нестеров В.И., Новоселова Т.Н., Березовикова И.П. и др. Организация лечебного питания в санаторно-курортных учреждениях / Методическое пособие. Утв. Управлением социальной зашиты Администрации Новосибирской области,- Новосибирск.- 2002. - 84с.

Принятые сокращения:

АО- антиоксидант

БГТ- бутирил-гидрокситолуол

ГПБ - гепато-биллиарная система

ДАД- диастол и ческое артериальное давление

ДГК- докозагексаеновая кислота

ИМТ- индекс массы тела

МНЖК- мононенасыщенные жирные кислоты

НЖК- насыщенные жирные кислоты

НЭХС- неэстерифицированный холестерин

ОХС- общий холестерин

ПНЖК- поли не насыщенные жирные кислоты

САД- систолическое артериальное давление

ТГ- триглицериды

ХС ЛВП- холестерин липопротеидов высокой плотности ХС ЛНП- холестерин липопротеидов низкой плотности

ХХК- холато-холестериновый коэффициент

ЭПК- эй коза пентае новая кислота

Соискатель:

И. П .Березо в и кова

Лицензия ИД № 01102 от 01.03. 2000

Подписано в печать ! 3.11.2003. Формат 60x84/16. Бумага офсетная.

_Тираж ЮОэкз-Печ.л. 2,5. Уч.-издл. 2,32. Заказ № 1297._

Типография Сибирского университета потребительской кооперации. 630087, Новосибирск, пр.К.Маркса,2б.

Актуальность проблемы. Нарушения липидного обмена занимают ведущее место в генезе сердечно-сосудистых заболеваний у жителей большинства экономически развитых стран (Доклад ВОЗ, №57, 1994, NCEP Expert Panel, 2002). Важнейшим компонентом в коррекции нарушений липидного обмена является диета. Диетическое вмешательство нацелено на уменьшение концентраций общего холестерина сыворотки крови и холестерина липопротеинов низкой плотности. Специалистами рекомендована пошаговая диетотерапия (диеты А1 и А2), последовательно ограничивающая поступление общего жира, насыщенных жирных кислот и холестерина в рационе. В контролируемых исследованиях показано, что применение диеты А1 сопровождается снижением концентраций общего холестерина и холестерина липопротеинов низкой плотности лишь на 7-9% (NCEP Expert Panel, 1993, 2002), поэтому актуальной является проблема повышения липидкорригирующего эффекта диет.

В последние годы опубликованы результаты исследований, согласно которым эффективность диеты А1 может быть повышена добавлением к ней различных пищевых компонентов: соевого белка, пищевых волокон, полиненасыщенных жирных кислот семейства со-3 и других нутриентов (Anderson J.W., 1995; Anthony M.S. et al.,1997; Wilson T.A. et al., 1998). Источниками этих веществ являются в первую очередь бобовые культуры - семена сои и гуара (Cyamopsis Tetragonolobus).

Механизм липидкорригирующего действия семян зернобобовых связывают с содержащимися в них вязкими ферментируемыми пищевыми волокнами, обладающими гельформирующими свойствами

Anderson J.W. et al., 1990, 1995, 1999; Glore S.R. et al., 1994). Попадая в просвет тонкого кишечника, они снижают долю абсорбции нутриентов, в частности, пищевого холестерина. Вязкий полисахарид гуара - галактоманнан, образуя при контакте с водой высоковязкие гели, способствует снижению концентрации холестерина крови (Todd Р.А., et al., 1990). Помимо гуара, галактоманнан обнаружен и в некоторых других бобовых культурах (Anderson Б., 1949). Семена Medicago Sativa содержат галактоманнан с уникальным соотношением галактозы и маннозы (Hirst E.L. et al., 1947, Степаненко Б.П., 1978).

Гиполипидемические свойства сырых семян Medicago Sativa показаны в ряде исследований (Malinow M.R. et al., 1977, 1980, 1984, Molgaard J. et al., 1987). Поскольку, как и в других бобовых культурах, в них содержатся антипитательные вещества, то требуется предварительная обработка - автоклавирование (Bell Е.А. et al., 1960). В связи с этим, остается открытым вопрос о сохранности липидкорригирующих компонентов семян Medicago Sativa и их свойствах.

Воздействие семян Medicago Sativa на метаболизм холестерина может проявляться в снижении абсорбции желчных кислот. Пищевые волокна, связывая желчные кислоты, увеличивают их экскрецию с калом; для поддержания необходимого пула желчных кислот, увеличивается их синтез из холестерина, что приводит к снижению его содержания в желчи. Одновременно происходит повышение холато-холестеринового коэффициента. Таким образом, одним из ведущих звеньев в механизме липидкорригирующего действия семян Medicago Sativa могут быть их сорбционные свойства. До настоящего времени они остаются неизученными, поэтому представляется важным исследовать сорбционные свойства семян Medicago Sativa по отношению к солям холевых кислот, влияние их потребления на концентрацию холестерина желчи и холато-холестериновый коэффициент.

Регулирующая роль в ослаблении синтеза холестерина в печени отводится коротко-цепочечным летучим жирным кислотам - продуктам ферментации компонентов пищевых волокон: некрахмальных вязких полисахаридов и резистентного крахмала (Anderson J.W., 1995, 1999, Topping D.L., 2001). Резистентный крахмал образуется в семенах бобовых, независимо от способа их термообработки (Veena A. et al., Cheung Р.С. et al., 1998), однако, количество образующегося при термообработке семян Medicago Sativa резистентного крахмала, неизвестно. В связи со сказанным, для установления механизма липидкорригирующего действия семян Medicago Sativa, является актуальной задача определения в них не только общего содержания пищевых волокон, но и резистентного крахмала.

Липопротеины низкой плотности в первую очередь из всех классов липопротеинов подвергаются окислительной модификации (Климов А.Н., 1995; NCEP Expert Panel, 2002), которая, согласно современным представлениям, играет ведущую роль в атерогенезе (Berliner J.A. et al., 1995; Jialal I. et al., 1992). В семенах Medicago Sativa содержатся витамины-антиоксиданты: токоферол и каротиноиды (Зелепухина В.Ф., 1977), которые могут препятствовать окислительной модификации липопротеинов низкой плотности. Неизвестно, что происходит с антиоксидантами семян Medicago Sativa в процессе термообработки. В этой связи представляется интересным изучение устойчивости липопротеинов низкой плотности к окислению при использовании в качестве антиоксиданта термообработанных семян Medicago Sativa.

Дислипидемии часто выявляются у лиц с гипертензией и избыточной массой тела (ВОЗ, 1990). Одним из способов коррекции как артериального давления, так и гиперлипидемий является снижение массы тела (Hovell М.Е., 1982, MacMahon S.W. et al., 1985, NIH, 1998, Flynn M.M. et al., 1999, NCEP Expert Panel, 2002). Включение в диету жиров морских рыб - источников со-3 полиненасыщенных жирных кислот, также оказывает гипотензивный эффект (Harris W.S. et al., 1990, Appel L.J. et al., 1993, Morris M.C. et al., 1993, Титов B.H., 1999). Однако их прием сопровождается преимущественно снижением концентрации триглицеридов сыворотки крови, а содержание холестерина липопротеинов низкой плотности повышается (Harris W.S., 1995, Nestel P.J., 2000). Сочетанное влияние на липидный обмен редуцированной по калорийности и содержанию жиров диеты, обогащенной со-3 полиненасыщенными жирными кислотами остается неизученным.

Цель работы: Изучить роль компонентов семян Medicago Sativa и длинноцепочечных жирных кислот в коррекции нарушений липидного обмена у лиц с гиперхолестеринемией.

Задачи исследования:

1. Изучить состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестеринемией при использовании диеты А1 2500 ккал (NCEP, 1993), усиленной семенами Medicago Sativa.

2. Разработать гипокалорийную диету с включением длинноцепочечных полиненасыщенных жирных кислот семейства со-3 и изучить состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестеринемией на фоне ее применения.

3. Изучить состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестеринемией на фоне применения диеты А1 2500 ккал

NCEP, 1993), усиленной co-3 длинноцепочечными полиненасыщенными жирными кислотами.

4. В семенах Medicago Sativa определить компоненты, обладающие липидкорригирующим действием.

5. Изучить антиоксидантные, сорбционные и реологические свойства семян Medicago Sativa и их вязкого полисахарида in vitro.

Диссертация выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГУ НИМ терапии СО РАМН, тема "Изучить механизмы энтеросорбции и разработать новые способы коррекции нарушений липидного обмена", номер государственной регистрации № 019.40001993. В 1991-1995 гг. работа была поддержана грантом Научного совета по Государственной научно-технической программе России "Национальные приоритеты в медицине и здравоохранении", направление "Атеросклероз", №127.

Научная новизна. Впервые показано, что при использовании семян Medicago Sativa у пациентов с гиперхолестеринемией липидкорригирующий эффект достигается за счет снижения абсорбции холестерина в кишечнике, усиления элиминации желчных кислот и синтеза холестерина в печени. Этот эффект более выражен, чем при традиционной диетотерапии. Показано, что замедление абсорбции холестерина связано с гельформирующими свойствами вязкого полисахарида семян Medicago Sativa, а элиминация желчных кислот - с их сорбционными свойствами.

Показана способность семян Medicago Sativa снижать окисляемость липопротеинов низкой плотности in vitro за счет содержихся жирорастворимых антиоксидантов (токоферола и каротиноидов) и лигнина.

Впервые показано, что в составе пищевых волокон термообработанных семян Medicago Sativa повышается содержание резистентного крахмала, биологические эффекты которого связывают с образованием летучих жирных кислот и блокированием синтеза холестерина.

Впервые показано, что у пациентов с гиперхолестеринемией снижение концентраций общего холестерина и холестерина липопротеинов низкой плотности, без изменения содержания холестерина высокой плотности достигается в результате применения гипокалорийной диеты 1800 ккал с включением длинноцепочечных полиненасыщенных жирных кислот семейства со-3. В отличие от диеты А1, эти эффекты проявляются через один месяц диетотерапии.

Практическая значимость. Усиление эффективности гипокалорийной диеты А1 1800 ккал введением ы-3 ПНЖК жиров морских рыб позволяют рекомендовать ее для профилактики и коррекции факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний: избыточной массы тела и ожирения, артериальной гипертензии и нарушений липидного обмена, в частности, высокой концентрации холестерина липопротеинов низкой плотности. Диета, обогащенная со-3 ПНЖК жиров морских рыб рекомендована для использования в лечебном питании в санаторно-курортных учреждениях (Организация лечебного питания в санаторно-курортных учреждениях. Методическое пособие. Утв. Управлением социальной защиты Администрации Новосибирской области. - Новосибирск, 2002).

Полученные результаты свидетельствуют, что холестеринснижающий эффект диет, усиленных семенами Medicago Sativa и длинноцепочечными жирными кислотами, достигается в более короткие сроки, по сравнению с диетой А1 и позволяют рекомендовать такие диеты для немедикаментозной коррекции нарушений липидного обмена у пациентов с гиперхолестеринемией. Разработанный способ выделения вязкого полисахарида из семян Medicago Sativa может быть использован для получения камеди. Сведения о повышении эффективности диетотерапии у пациентов с нарушениями липидного обмена используются в образовательном процессе студентов Новосибирской государственной медицинской академии.

Положения, выносимые на защиту:

1. Липидкорригирующий эффект диеты А1 2500 ккал повышается при дополнении ее семенами Medicago Sativa. В основе липидкорригирущего действия диеты А1 2500 ккал, модифицированной семенами Medicago Sativa у пациентов с гиперхолестеринемией лежит способность пищевых волокон семян повышать вязкость содержимого желудочно-кишечного тракта, снижать реабсорбцию желчных кислот и синтез холестерина в печени.

2. Семена Medicago Sativa обладают анитиоксидантными свойствами, проявляющимися в снижении окисляемости липопротеинов низкой плотности in vitro, за счет содержащихся в семенах жирорастворимых антиоксидантов и лигнина.

3. Замена со-6 полиненасыщенных жирных кислот на длинно-цепочечные полиненасыщенные жирные кислоты семейства со-З в гипокалорийной диете 1800 ккал у пациентов с гиперхолестеринемией приводит к достоверному снижению концентрации общего холестерина, холестерина липопротеинов низкой плотности, без снижения содержания холестерина высокой плотности сыворотки крови.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на научно-практической конференции "Новые методы диагностики и лечения заболеваний, медицинская техника" (Новосибирск, 1993), 5-й научно-практической конференции "Актуальные вопросы современной медицины" (Новосибирск, 1995), II Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1995), научной конференции "Питание в профилактике заболеваний населения Севера" (Красноярск, 1995), Международном симпозиуме "Полиненасыщенные жирные кислоты ю-6 и (о-З семейств: медико-биологические, биохимические и биотехнологические аспекты" (Владивосток, 1995), Международной конференции "International perspectives of the North Karelia project. 15 years of International Visitors Programs" (Финляндия, Йоенсу, 1995), Сибирской кардиологической конференции "Диагностика, лечение и профилактика сердечно-сосудистых заболеваний" (Новосибирск, 1996), Втором международном симпозиуме "Питание и здоровье: биологически активные добавки к пище" (Москва, 1996), III международном симпозиуме "Питание и здоровье. Биологически активные добавки к пище в лечении и профилактике наиболее распространенных заболеваний" (Тюмень, 1997), Международной конференции "Вторичная профилактика ИБС: достижения и перспективы" (Тюмень, 1997), V Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1998), IV Международном симпозиуме "БАД: XXI век" (Санкт-Петербург, 2000), V Международном симпозиуме "Биологически активные добавки к пище и проблемы здоровья семьи" (Красноярск, 2001), VI Международном симпозиуме "БАД к пище и проблемы оптимизации питания" (Сочи, 2002).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 47 работ, в том числе получено 2 патента Российской Федерации на изобретение:

1. Способ получения холестеринснижающих веществ: Патент РФ №2052960/ Ю.П.Никитин, И.П. Березовикова. - опубл.27.01.96 -Изобретения.- 1996.-№.3.

2. Способ немедикаментозной коррекции факторов риска ишемической болезни сердца: Патент РФ№ 2164409/ Ю.П. Никитин, И.П. Березовикова, Г.В.Спиридонова.- опубл. 27.03.01.- Изобретения.-2001.-№9.

выводы

1. Повышение липидкорригирующего эффекта диеты А1 2500 ккал за счет ее модификации семенами Medicago Sativa связано со снижением абсорбции холестерина в кишечнике, повышением элиминации желчных кислот и снижением синтеза холестерина в печени у пациентов с гиперхолестеринемией. Этот эффект проявляется в дополнительном снижении концентрации общего холестерина, триглицеридов крови, без изменения содержания липопротеинов высокой плотности.

2. Гиполипидемический эффект диеты А1 2500 ккал, модифицированной семенами Medicago Sativa, обусловлен содержанием в них комплекса липидкорригирующих веществ -полиненасыщенных жирных кислот, аминокислот, сапонинов, пищевых волокон, содержащих резистентный крахмал, и их способностью к сорбции желчных кислот и образованию вязких гелей.

3. Термообработанные измельченные семена Medicago Sativa за счет содержания в них жирорастворимых антиоксидантов (а-токоферола и каротиноидов) и лигнина обладают способностью к дозозависимому снижению Cu-индуцированной окисляемости липопротеинов низкой плотности сыворотки крови человека in vitro.

4. Применение гипокалорийной диеты 1800 ккал пациентами с гиперхолестеринемией приводит к выраженному снижению концентрации общего холестерина и холестерина липопротеинов низкой плотности сыворотки крови, без изменения содержания холестерина липопротеинов высокой плотности через четыре недели диетотерапии, по сравнению с диетой А1.

5. Применение пациентами с гиперхолестеринемией гипокалорийной диеты, в которой со-6 полиненасыщенные жирные кислоты заменены на длинноцепочечные полиненасыщенные жирные кислоты семейства со-3, усиливает снижение концентрации общего холестерина сыворотки крови и уменьшает соотношение холестерина атерогенных форм липопротеинов к неатерогенным, без изменения содержания холестерина высокой плотности.

6. Применение пациентами с гиперхолестеринемией изокалорийной диеты А1 2500 ккал, модифицированной длинноцепочечными ПНЖК семейства со-3 в низких и средних дозах, в течение четырех недель, не влияет на состояние липидного обмена, но снижает артериальное давление у пациентов с гипертензией.

7. Выраженное снижение концентрации холестерина липопротеинов низкой плотности у пациентов с гиперхолестеринемией достигается за восемь недель применения изокалорийной диеты А1 2500 ккал, модифицированной семенами Medicago Sativa, или за четырехнедельный курс гипокалорийной диеты 1800 ккал, модифицированных длинноцепочечными полиненасыщенными жирными кислотами семейства со-3.

8. Нарушения липидного обмена сопровождаются формированием устойчивой патологической функциональной системы, которая выводится из равновесного состояния гиполипидемической диетотерапией. Модификация диет биологически активными компонентами позволяет направленно корригировать липидный обмен.