Автореферат и диссертация по медицине (14.00.02) на тему:Лимфатические узлы и лимфа в норме и при наследственном несахарном диабете в условиях фармако- и фитокоррекции (анатомо-экспериментальное исследование)

На правах рукописи

ТЫЩЕНКО Ольга Геннадьевна

ЛИМФАТИЧЕСКИЕ УЗЛЫ И ЛИМФА В НОРМЕ И ПРИ НАСЛЕДСТВЕННОМ НЕСАХАРНОМ ДИАБЕТЕ В УСЛОВИЯХ ФАРМАКО- И ФИТОКОРРЕКЦИИ (анатомо-экспериментальное исследование)

14.00.02. - анатомия человека

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Новосибирск 2005

Работа выполнена в лаборатории общей патологии и физиологии лимфатической системы НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН (г. Новосибирск).

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Асташов

Вадим Васильевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук Ларионов

Петр Михайлович кандидат медицинских наук Овсянко

Елена Владимировна

Ведущая организация:

Алтайский государственный медицинский университет (г. Барнаул)

Защита состоится «_»_2005 года в_часов

на заседании диссертационного совета Д 208.062.05 при Новосибирской государственной медицинской академии МЗ РФ (630091, Новосибирск, Красный проспект, 52).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирской государственной медицинской академии (630091, Новосибирск, Красный проспект, 52)

Автореферат разослан «_»_2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук, профессор А. В. Волков

(ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования.

Недостаточность синтеза или секреции вазопрессина является причиной снижения концентрационной функции почек, что проявляется полиурией и полидипсией. Гипоталамический несахарный диабет-аутосомно-доминантный вялотекущий нейрогипофизарный диабет - наследственное заболевание, которое характеризуется прогрессирующей дегенерацией гигантоклеточных нейронов гипоталамуса. Развитие его связано с мутацией в гене нейрофизина II (Gagliardi Р.С., et. al., 1997; Si-Hoe S.L., et. al., 1997), нарушением синтеза, транспортировки и высвобождения вазопрессина (Кочергина И.И. и др, 1999; Потемкин В.В., 1999). Прием большого количества жидкости является компенсаторной реакцией для предотвращения дегидратации и гиперосмолярности в организме. Представления об иммунорегулирующей функции вазопрессина в значительной мере основаны на экспрессии мембранных гормональных рецепторов VI типа (Elands J. et al., 1990; CarrD.J., 1992; PereiraA. etal., 2003) и эктопическом синтезе гормона в иммунокомпетентных клетках (Robert F. et al., 1991; Chowdrey H.S. et al., 1994; Matsumoto Y. et al., 2002)

Важной задачей современной медицинской науки является изучение водно-электролитного баланса, водного гомеостаза Особый интерес представляют собой линии экспериментальных животных с врожденной патологией водно-электролитного обмена, что позволяет изучить морфологические основы развития патологического процесса и наметить пути коррегирующих воздействий. С 1979 года сток крыс аутбредной линии Браттлеборо, с фенотипическим проявлением гена di (несахарный диабет), поддерживается в виварии Института I Отологии и генетики СО РАН. У гомозигот di/di нарушен синтез антидиуретического гормона, и в гипоталамусе, нейрогипофизе, кровеносном русле, в отличие от нормальных крыс, гормон не определяется. Фенотипически несахарный диабет у особей генотипа di/di проявляется в постоянном мочеизнурении и потреблении большого количества воды, достигающего в сутки 20-125% от веса тела (Saul G.B., Garrity Е.В. et al., 1968).

Актуальным представляется проведение исследования структурно-функциональной организации лимфатических узлов при данной патологии, поскольку они выполняют важнейшие дренажно-детоксикационную и иммуннопоэтичес-кую функции в организме, обеспечивая поддержание водного и иммунного гомеостаза. Исследование передних средостенных, почечных и подколенных лимфатических узлов, позволит выявить характерные особенности висцеральных и соматических лимфатических узлов в зависимости от их структурной организации и анатомической локализации.

Вопрос об использовании фитопрепаратов, содержащих растения с антиок-сидантным, сорбционным и гастропротективным действием, являясь высоко витаминизированным продуктом, имеющем в своем составе микроэлементы (железо, марганец, хром, алюминий, медь, цинк) (БАД к пище «Гармония Вита Г») в условиях наследственной эндокринопатии (несахарный диабет) в литературе не освещался Здоровый организм y^g^ffifr ¿Q ¡Offifl^M Oft ст ко й саморегули-

I MffiJMOYEKA i

Г ¿-г

'«I I и 411» «

рующейся системой гомеостаза, в которой немаловажную роль играют химические элементы (Москалев Ю.И., 1985; Подколзин A.A., 1995;Минделл Э, 1997; Кудрин A.B. с соавт., 2000). Концентрация микроэлементов в организме во многом зависит не только от поступления их в организм по пищевой цепи, но и от особенностей жизнедеятельности организма Врожденный дефект водно-электролитного гомеостаза изменяет соотношение минеральных солей в крови и лимфе, а возросший в последние годы интерес к микроэлементам и состояниям, сопряженным с их дефицитом или избытком, сделал исследования в этой области актуальными (Кудрин А.В и др , 2000; Гельфонд Н Е. и др., 2005)

Отсутствие научных данных об особенностях структурных преобразованиях в средостенных, почечных и подколенных лимфатических узлах при рассматриваемой эндокринопатии в условиях дегидратации организма, при фармако- и фитокоррекции явилось основанием для выполнения исследования и обусловливает актуальность работы с научной и практической точек зрения.

Цель исследования.

Выявить особенности структурной организации висцеральных (передний средостенный и почечный) и соматических (подколенный) лимфатических узлов, центральной лимфы крыс линии Браттлеборо с фенотипическим проявлением гена di (несахарный диабет) в условиях фармако- и фитокоррекции.

Задачи исследования.

1 Изучить морфофункциональное состояние передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс линии Браттлеборо с фенотипическим проявлением гена di (несахарный диабет).

2. Выявить особенности организации передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс линии Браттлеборо (наследственный несахарный диабет) в условиях дегидратации организма.

3 Исследовать морфофункциональное состояние передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс с наследственным несахарным диабетом (Браттлеборо) в условиях фармакокор-рекции антидиуретическим гормоном (АДГ) «Адиуретин».

4 Исследовать морфофункциональное состояние передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс с наследственным несахарным диабетом (Браттлеборо) в условиях сочетанного использования фармако- (АДГ «Адиуретин») и фитокоррекции (БАД к пище) «Гармония Вита Г».

Научная новизна исследования

В работе впервые дана характеристика особенностей структурной организации передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс линии Браттлеборо (наследственный несахарный диабет).

Впервые получены данные о структурной организации передних средостенных, почечных и подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы, микроэлементном составе центральной лимфы в условиях ограничения потребления воды животными с наследственным несахарным диабетом Показано, что дегидратация организма пру цдс^дедвоццо^ несахарном диабете вызывает сни-

' ' • -mU«"«.) |

•1 ц*. ,к 4

«Г tf

жение транспортной функции лимфатических узлов, изменение микроэлементного состава в лимфе и крови. В условиях дегидратации в лимфатических узлах происходят разнонаправленные структурные преобразования (зональность, клеточный состав), которые зависят от их анатомического расположения и степени участия в лимфатическом дренаже Впервые показано, что применение антидиуретического гормона «Адиуретин» крысам с наследственным несахарным диабетом (Браттлеборо) оказывает влияние на структуру лимфатических узлов, приводит к значительному снижению концентрации основных микроэлементов в сыворотке крови и возрастанию в лимфе.

Впервые проведено структурное исследование передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы, а также проанализировано содержание основных микроэлементов в лимфе при сочетан-ной коррекции антидиуретическим гормоном (АДГ) «Адиуретин» и фитопрепаратом (БАД к пище) «Гармония Вита Г» при наследственном несахарном диабете.

Практическая значимость

Сведения о структурно-функциональной организации лимфатических узлов, клеточном составе центральной лимфы в условиях ограничения потребления воды (дегидратация организма) при наследственном несахарном диабете расширяют представление о морфо- и патогенезе этого заболевания.

Полученные данные о строении передних средостенных, почечных и подколенных лимфатических узлов, клеточном составе и содержании микроэлементов в лимфе при наследственном несахарном диабете в условиях введения антидиуретического гормона дают представления об особенностях иммунной и транспортной функций лимфатических узлов и микроэлементного гомеостаза организма при проведении заместительной терапии

Сочетаннос применение «Адиуретина» и БАД к пище «Гармония Вита Г» при наследственном несахарном диабете способствует восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в различных группах лимфатических узлов и микроэлементного статуса центральной лимфы, что позволяет рекомендовать фитокоррекцию (БАД к пище «Гармония Вита Г») в качестве вспомогательного диетического фона в комплексе лечебных мероприятий при наследственном несахарном диабете.

Положения, выносимые на защиту:

]. При наследственном несахарном диабете характер структурной организации лимфатических узлов свидетельствует об усилении их дренажно-детоксика-ционной функции и зависит от их анатомической локализации' в подколенных (соматических) лимфатических узлах изменяется тип функциональной специализации, в средостенных и почечных (висцеральных) структура мозгового и коркового вещества и их клеточный состав

2. Ограничение приема жидкости при наследственном несахарном диабете вызывает нарушение элементного статуса центральной лимфы и приводит к структурным преобразованиям в лимфатических узлах (структурно-функциональная организация, клеточный состав), зависящим от их анатомической локализации

3 Введение антидиуретического гормона при наследственном несахарном диабете приводит к увеличению размеров коркового вещества лимфатических узлов, площади вторичных лимфоидных узелков, числа незрелых лимфоидных клеток в них, независимо от анатомической локализации лимфатического региона.

4. Сочетанное применение антидиуретического гормона и БАД к пище «Гармония Вита Г» при наследственном несахарном диабете способствует активации барьерно-детоксикационной и лимфопоэтической функции подколенных, средостенных и почечных лимфатических узлов (увеличение площади коркового вещества, герминативных центров, лимфобластов, макрофагов) и восстановлению микроэлементного статуса (кальций, железо, цинк) центральной лимфы, в сравнении с монокоррекцией

Апробация результатов исследования.

Основные результаты исследования доложены и обсуждены на научной конференции «Проблемы лимфологии и интерстициального массопереноса», Новосибирск. 2004; научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной курортологии, восстановительной медицины и реабилитации», Пятигорск, 2005; II съезде лимфологов России, Санкт-Петербург, 2005; Internationaler Kongress Fachmesse, Hannover, 2005.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 8 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 148 страницах машинописного текста, содержит 37 рисунка, 12 таблиц, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований с подглавами, обсуждения, выводов, списка литературы, содержащего 173 отечественных и иностранных источников. Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования.

Для исследования в качестве экспериментальных животных были выбраны крысы-самцы линии Браттлеборо (с исходной массой тела 180-220 г), с феноти-пическим проявлением гена di страдающих несахарным диабетом и утративших способность к синтезу вазопрессина и линии Вистар с массой тела 220-260 г. Работа выполнена на 100 животных Их разделили наследующие группы' 1 и2-интактные животные линии Вистар и Браттлеборо (суточное потребление воды интакными крысами Браттлеборо в среднем 150 мл воды с сутки); 3 - экспериментальная группа с ограничением потребления воды крысами линии Браттлеборо Дегидратация организма экспериментальных животных создавалась путем ограничения потребления воды (100 мл в сутки) в течение 2 месяцев; 4 -экспериментальная группа (крысы линии Браттлеборо) с введением (в течение 30 дней, суточная доза 0,011 мкг) антидиуретического гормона (АДГ) «Адиуре-тин» На фоне введения фармпрепарата животные снизили потребление воды, в среднем, до 40 мл в сутки; 5 - экспериментальная группа с сочетанной коррекцией' крысам линии Браттлеборо вводили внутрибрюшинно (в течение 30 дней, суточная доза 0,011 мкг) АДГ «Адиуретин». В течение двух последних недель

применения фармпрепарата, производилось ежедневное добавление в стандартный рацион вивария БЛД к пище «Гармония Вита Г».

В качестве объектов морфофункциональных исследований были выбраны подколенный, передний средостенный и почечный лимфатический узлы, капсула почки крыс, центральная лимфа, периферическая кровь. Используя принцип морфометрии, в лимфатических узлах подсчитывали площадь всего среза и площади отдельных структур: капсулы, краевого синуса, первичных и вторичных лимфоидных узелков, коркового плата, паракортикальной зоны, мозговых тяжей и мозговых синусов. Рассчитывали корково-мозговой индекс лимфатических узлов, по которому ориентировались при определении типа лимфатического узла (Ю. И. Бородин, 1967). Выделение структурных компонентов и дифферен-цировку клеточных форм в лимфатических узлах, и лимфе производили с учетом Международной гистологической номенклатуры (под ред. Ю. И. Афанасьева, 1987). У интактных крыс линии В истар и Браттлеборо с помощью окулярной линейки вычисляли диаметры различных звеньев микрососудистого русла- терминальных артериол, прекапилляров, капилляров, посткапилляров и венул Диф-ференцировку различных отделов микрососудистого русла проводили согласно В.В. Куприянову (1969). Методом точечного счета (Гуцол А А , 1988) при помощи окулярной морфометрической сетки (на 196 тестовых точек) определяли объемную плотность капиллярной сети.

На базе сертифицированной аналитической лаборатории Новосибирского института неорганической хймии СО РАН методом атомно-эмиссионной спектрометрии с дуговым возбуждением спектров (ДПТ АЭС) проводился количественный элементный анализ в пробах центральной лимфы, периферической крови по 7 элементам (Са, Си, Fe, Mg, Р, Pb, Zn) для интактных крыс Вистар, интактных крыс Браттлеборо, экспериментальной группы с ограничением по-требтения воды, и групп животных с лечением антидиуретическим гормоном и коррекцией БАД к пище «Гармония Вита Г».

Статистическая и математическая обработка данных проводилась с помощью методов вариационной статистики. Вероятность различий между группами данных считалась достоверной при значениях Р^0,05. Компьютерная обработка данных проводились в среде Windows (Microsoft Excel)

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Структурно-функциональное исследование подколенного, переднего средо-стенного, почечного лимфатических узлов, лимфы и микроциркуляторного русла капсулы почки интактных крыс Вистар и Браттлеборо (с наследственым несахарным диабетом).

Было проведено сравнительное морфометрическое исследование подколенных лимфатических узлов крыс линии Вистар и крыс Браттлеборо. У крыс Вистар структурно-функциональная специализация подколенных лимфатических узлов соответствует промежуточному типу (к/м индекс - 1,3). У крыс линии Браттлеборо площадь мозгового вещества преобладает над корковым Тип лимфатического узла фрагментированный (корково-мозговой индекс - 0,7) Транспортная функция лимфатического узла повышена (значительно увеличены раз-

меры мозговых (на 37,6%) и краевого синусов (в 3,5 раза)) По сравнению с крысами Вистар, в подколенных лимфатических узлах площадь вторичных лим-фоидных узелков значительно (на 69,5%) уменьшена (за счет, как герминативных центров, так и мантийной зоны), на фоне увеличения площади мозговых тяжей. Площадь Т— зависимой зоны соответствует значениям у крыс Вистар. И. И. Хе-гай с соавт. (2003) в своей работе отмечают, что у крыс линии Браттлеборо с дефектом синтеза вазопрессина на фоне жесткого несахарного диабета в ходе онтогенеза развиваются существенные морфофункциональные отклонения в системе иммунитета. Авторами было обнаружено устойчивое снижение количества лимфоцитов и увеличение числа нейтрофилов в крови, подавление активности макрофагов, более ранняя инволюция тимуса и селезенки, снижение ан-тителообразования, что свидетельствует об ослаблении механизмов общей ре-зестентности организма. Наше исследование цитоархитектоники подколенных лимфатических узлов выявило у крыс Браттлеборо, по сравнению с крысами линии Вистар, снижение количества малых лимфоцитов (на фоне увеличения -незрелых форм клеток) в герминативных центрах при увеличении их численности (на фоне снижения зрелых и незрелых плазматических клеток) в мозговых тяжах, что может свидетельствовать об активации иммунологических реакций по гуморальному типу. В работах Л Е Этингена, Л И Исмаиловой(1982), Ю. И. Бородина с соавт. (1985) показано, что численность незрелых плазмоцитов имеет прямую связь с интенсивностью гуморальных иммунологических реакций в лимфатическом узле Во всех структурно-функциональных зонах подколенных лимфатических узлов крыс Браттлеборо, по сравнению с Вистар, увеличено количество макрофагов.

Было проведено исследование передних средостенных (висцеральные) лимфатических узлов крыс-самцов популяции Вистар и Браттлеборо. В работе В.В.А-сташова (1992) и нашими исследованиями показано, что по своей структурно-функциональной специализации передние средостенные лимфатические узлы у крыс Вистар относятся к компактному типу. При этом у крыс с наследственным несахарным диабетом (Браттлеборо) структурно-функциональная специализация передних средостенных лимфатических узлов находятся на границе между промежуточным и фрагментированным типами (корково-мозговой индекс 1,0) Как и в подколенных лимфатических узлах, по сравнению с крысами Вистар, транспорт лимфы через лимфатический узел усилен (увеличены размеры мозговых синусов), площадь мозговых тяжей увеличена. В отличие от крыс Вистар, в передних средостенных лимфатических узлах отмечается уменьшение площади тимусзависимой зоны Исследование цитоархитектоники лимфатических узлов показало, что у крыс Браттлеборо, по сравнению с Вистар, уменьшается количество незрелых форм клеток лимфоидного ряда. При этом в мозговых тяжах усилена митотическая активность клеток, возрастает число зрелых плазматических клеток в мозговом веществе, что может свидетельствовать об активации иммунологических реакций по гуморальному типу.

Почечные лимфатические узлы интактной группы крыс с несахарным диабетом (Браттлеборо) по своей структурно-функциональной специализации, в отличие от интактных крыс Вистар (корково-мозговой индекс 1,57), относятся к

промежуточному типу (корково-мозговой индекс 1,3) У крыс с несахарным диабетом, по сравнению с Вистар, площадь вторичных лимфоидных узелков снижена как за счет герминативных центров (на 59,8%), так и мантийной зоны (на 78,5%). В отличие от подколенных и средостенных лимфатических узлов в почечных узлах отмечается активация клеточного звена иммунитета (увеличены размеры паракортикальной зоны) Как и в подколенных и средостенных лимфатических узлах, по сравнению с крысами Вистар, площадь мозговых тяжей увеличена. В отличие от указанных выше лимфатических узлов транспорт лимфы через почечные лимфатические узлы, в сравнении с крысами Вистар, не усилен Исследование цитоархитектоники почечных лимфатических узлов ин-тактной группы крыс Браттлеборо, в сравнении с крысами Вистар, показало активацию процессов бласттрансформации в герминативных центрах и мозговых тяжах (увеличено количество малых лимфоцитов и зрелых плазматических клеток) В тимусзависимой зоне почечных лимфатических узлов крыс Браттлеборо, по сравнению с Вистар, отмечается значительное (на 98%) увеличение числа средних лимфоцитов, на фоне уменьшения - малых.

В картине клеточного состава центральной лимфы крыс Браттлеборо отмечается увеличение количества больших лимфоцитов (на 22,4%) при уменьшении макрофагов (на 32,1%), по сравнению с Вистар.

Стабильность химического состава организма является одним из важнейших и обязательных условий его нормального функционирования. Нарушения в состоянии здоровья сопровождаются отклонениями в содержании химических элементов в системе кровь-ткань-лимфа Наиболее часто анализу подвергают сыворотку крови, данные, касающиеся макроэлементного состава лимфы крайне скудны, а по микроэлементам отсутствуют. Проведенное исследование концентрации микроэлементов в сыворотке крови выявило в 3-5 раз превышение содержания Са, Си, и Р у крыс Браттлеборо, по сравнению с крысами Вистар. Для железа было отмечено незначительное снижение концентрации, что, по-видимому, связано с высоким содержанием кальция в сыворотке крови, который является антагонистом железа и тормозит абсорбцию последнего в желудочно-кишечном тракте Кальций является наиболее распространенным минеральным элементом, который содержится в организме человека. Считается, что не более 10-15% ионов кальция, необходимых для начала сокращения кардио-миоцитов, поступает из внеклеточного пространства; большая часть кальция высвобождается из цистерн саркоплазматического ретикулума (Белоусов Ю.Б и др , 1993). По-видимому, и снижение концентрации магния и фосфора в центральной лимфе связано со значительным увеличением концентрации кальция в сыворотке крови. Так как известно, что магний и фосфор являются антагонистами кальция (Горшков А И., Липатова О В., 1987)

Как известно, кровеносное русло артериального звена состоит из крупных и мелких артерий, тонкие артерии переходят в артериолы, от артериол отходят терминальные артериолы Они содержат в своей стенке один слой спирально расположенных гладкомышечных клеток Сравнительное исследование пленчатых препаратов капсулы почки интактных крыс Вистар и Браттлеборо выявило, что в капсулах почек обеих групп животных терминальные артериолы проходят

относительно ровно, без резких изгибов и петлеобразных образований. Их средние диаметры у крыс Вистар и Браттлеборо соизмеримы. От терминальных ар-териол отделяются прекапилляры Средний диаметр последних у крыс Браттлеборо на 25,3% меньше, чем у крыс Вистар. Прекапилляры в свою очередь дихотомически или трихотомически делятся на капилляры, которые далее разделяются на новые капилляры и могут соединяться, образуя капиллярную сеть. Средний диаметр капилляров у крыс Браттлеборо на 27,6% меньше, чем у крыс Вистар. В результате слияния капилляров образуются посткапилляры, являющиеся корнями венозной системы Средние диаметры посткапилляров у крыс Вистар и Браттлеборо соизмеримы Посткапилляры собираются в венулы, для которых в экспериментальной группе с несахарным диабетом характерно не только возрастание калибра, но и утолщение стенки за счет соединительно-тканных элементов (средний диаметр венул у крыс Браттлеборо на 14,6% больше, чем у крыс Вистар) Часто артериолы и венулы идут параллельно и образуют артериоло-венулярные пары. Артериоло-венулярный коэффициент у крыс Браттлеборо свидетельствует о преобладании венозного оттока в системе микроциркуляции. Наряду с основным транс капиллярным кровотоком существует юкстакапил-лярный (внекапиллярный) кровоток, осуществляемый при помощи непосредственных переходов артериол в венулы - артериоло-венулярных анастомозов, которые особенно хорошо развиты у крыс Браттлеборо. Плотность микроцир-куляторного русла капсулы почки у крыс Браттлеборо значительно выше, чем у Вистар.

Структурно-функциональное исследование подколенного, переднего средо-стенного и почечного лимфатических узлов, лимфы крыс с наследственым несахарным диабетом (Браттлеборо) в условиях дегидратации организма.

В условиях ограничения потребления воды у крыс с несахарным диабетом, по сравнению с интактными крысами этой же линии, тип структурно-функциональной специализации подколенных лимфатических узлов изменяется с фраг-ментированного типа (к/м индекс - 0,7) на промежуточный (к/м индекс -1,16). Уменьшается площадь мозговых и краевого синусов. По сравнению с интактной группой крыс Браттлеборо, отмечается значительное увеличение площади Т- и уменьшение В-зоны (уменьшены площади герминативных центров вторичных лимфоидных узелков и мозговых тяжей), что может свидетельствовать об активации клеточного и угнетении гуморального звеньев иммунитета. Анализ цитоар-хитектоники подколенных лимфатических узлов у крыс в условиях ограничения потребления воды в герминативных центрах выявил снижение активности процессов пролиферации (уменьшается число лимфобластов и средних лимфоцитов), по сравнению с интактной группой, на фоне увеличения числа малых лимфоцитов. В целом, цитоархитектоника паракортикальной зоны и мозговых тяжей не имеет каких-либо выраженных отличий от интактной группы.

В условиях ограничения приема жидкости у крыс с несахарным диабетом тип структурно-функциональной специализации передних средостенных лимфатических узлов изменяется с промежуточного типа (интактные крысы Браттлеборо, к/м индекс - 1,0) на фрагментированный (к/м индекс - 0,88) Площади мозговых и краевого синусов уменьшены по сравнению с интактной группой Браттле-

боро, но при этом по сравнению с крысами Вистар транспорт лимфы через лимфатические узлы остается повышенным. Потеря воды, ограничение в се восполнении, по-видимому, является причиной снижения транспортной функции лимфатических узлов. Значительно увеличиваются размеры В- зависимой зоны (преимущественно за счет мозговых тяжей) При этом площадь вторичных лимфоидных узелков снижена за счет, как центров размножения, так и мантийной зоны. Толщина капсулы уменьшена. В отличие от подколенных лимфатических узлов в цитоархитектонике структурно-функциональных зон средостен-ных лимфатических узлов выявлено значительное увеличение числа незрелых и уменьшение зрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов по сравнению с интактной группой крыс Браттлеборо. Отмечается макрофагальная реакция.

В условиях ограничения приема жидкости у крыс с несахарным диабетом тип структурно-функциональной специализации почечных лимфатических узлов изменяется с промежуточного типа (интактные крысы Браттлеборо, к/м индекс - 1,32) на фрагментированный (к/м индекс - 0,92). Уменьшение площади коркового вещества происходит за счет паракортикальной зоны, вторичных лимфоидных узелков и коркового плато. Площадь В-зависимой зоны значительно увеличивается (на 87,8%) по сравнению с интактными крысами Браттлеборо Увеличение площади В- зависимой зоны происходит как за счет мозговых тяжей (площадь увеличивается в 2,1 раза), гак и первичных лимфоидных узелков (площадь увеличивается в 2,8 раза). Площадь вторичных лимфоидных узелков значительно снижена по сравнению с интактной группой. Транспорт лимфы через лимфатический узел значительно снижен (уменьшена площадь мозговых синусов на 73,5%). Толщина капсулы уменьшена. В цитоархитектонике герминативных центров вторичных лимфоидных узелков почечных лимфатических узлов крыс в условиях ограничения потребления воды выявлено снижение активности пролиферации (уменьшается число незрелых форм клеток лимфоидного ряда), на фоне значительного увеличения числа малых лимфоцитов, по сравнению с интактными крысами Браттлеборо. Отмечается плазматизация мозгового вещества (значительно увеличивается количество незрелых и зрелых плазматических клеток в мозговых тяжах и синусах). Следует отметить, что плазмоцитарная реакция в почечных лимфатических узлах достаточно ярко выражена, что, в совокупности со значительным увеличением площади мозговых тяжей, указывает на значительную активацию В-зависимых иммунологических реакций в организме (ДолговаМ.А , НадъярнаяТ.Н., 1990, МорозоваЕ.В., 1998). Сохраняется митоти-ческая активность клеток. В паракортикальной зоне отмечается увеличение численности лимфобластов. Изменение картины клеточного состава центральной лимфы, по сравнению с интактными крысами Браттлеборо, может являться отражением изменения в цитоархитектонике подколенных и почечных лимфатических узлов- увеличение числа зрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов, что, вероятно, отражает миграцию клеточных элементов, связанную с повышением их функциональной активности.

Исследование содержания химических элементов у крыс в лимфе и крови у крыс линии Браттлеборо в условиях ограничения потребления воды выявило со-

хранение повышенных показателей Са, Си, Р и как и у интактной группы, по сравнению с крысами Вистар По-видимому, дегидратация организма, вызванная ограничением потребления воды животными, приводит к значительному относительному увеличению содержания рассматриваемых микроэлементов в центральной лимфе' Са увеличивается в 6,7 раза; Мщ - 4,4 раза; Р - в 3,6 раза; Си и Ъл, соответственно, на 89% и 91%. Вероятно, что снижение количества интерстици-альной жидкости, приводящее к увеличению концентрации микроэлементного состава в лимфе, вызвано механизмами, направленными на поддержание объема циркулирующей крови и минутного объема сердечного выброса

Структурно-функциональное исследование подколенного, переднего средо-стенного и почечного лимфатических узлов, лимфы крыс Браттлеборо при введении антидиуретического гормона «Адиуретин».

Основным в терапии гипоталамического несахарного диабета является прием антидиуретического гормона адиуретин (активное вещество - десмопрес-син) Препарат адиуретин содержит десмопрессин - синтетический аналог натурального гормона задней доли гипофиза (высушенной задней доли гипофиза свиньи или быка) (ЬаИ^еп 8. Е1 а1,1998). По сравнению с вазопрессином десмопрессин обладает менее выраженным действием на гладкие мышцы сосудов и внутренних органов при более выраженной антидиуретической активности (Крылов ЮФ„ 2000).

В условиях применения антидиуретического гормона у крыс с несахарным диабетом тип структурно-функциональной специализации подколенных лимфатических узлов, как и у интактных крыс Браттлеборо соответствует фрагмен-тированному типу (к/м индекс - 0,63) Отмечается усиление прямого пути транспорта лимфы через лимфатические узлы (значительно возрастает площадь краевого синуса) Уменьшение площади Т— зависимой зоны и увеличение - вторичных лимфоидиых узелков (за счет мантийной зоны), по сравнению с интакт-ными крысами Браттлеборо, может свидетельствовать о угнетении клеточного и активации гуморального звеньев иммунитета Исследование цитоархитекто-ники структурно-функциональных зон подколенных лимфатических узлов выявило усиление процессов бласттрансформации (уличение числа малых лимфоцитов), на фоне снижения числа незрелых форм клеток лимфоидного ряда, в герминативных центрах и увеличение незрелых форм клеток плазматического ряда в мозговых тяжах. Увеличивается количество ретикулярных клеток.

В условиях применения антидиуретического гормона у крыс с несахарным диабетом тип структурно-функциональной специализации передних средостен-ных лимфатических узлов, как и у интактных крыс Браттлеборо соответствует промежуточному типу (к/м индекс - 1,0) Значительное расширение краевого синуса (на 66,5%), на фоне уменьшения площади мозговых синусов может свидетельствовать об усилении прямого пути транспорта лимфы через лимфатические узлы. Увеличение площади вторичных лимфоидных узелков (за счет центров размножения), по сравнению с интактными крысами Браттлеборо, может свидетельствовать об активации гуморального звена иммунитета (Петров РВ , 1989) Площадь коркового плато значительно увеличивается Исследование цитоархитектоники структурно-функциональных зон передних средостенных лимфатических узлов

выявило усиление процессов пролиферации (уличение числа незрелых форм клеток лимфоидного ряда, на фоне снижения числа зрель)х) в герминативных центрах и увеличение незрелых форм клеток плазматического ряда в мозговых тяжах. При этом, по сравнению с крысами Вистар, в структурных компонентах, как подколенных, так и средостенных лимфатйческих узлов отмечается увеличение числа незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов.

В условиях применения антидиуретического гормона у крыс с несахарным диабетом тип структурно-функциональной специализации почечных лимфатических узлов, как и у интактных крыс Браттлеборо соответствует промежуточному типу (к/м индекс -1,13) Как и в средостенных лимфатических узлах, краевой синус расширен, а площадь мозговых синусов уменьшена Активируется гуморальное звено иммунитета' отмечается увеличение (на 39,2%) площади мозговых тяжей и вторичных лимфоидных узелков (на 29,1%). Исследование цитоархитектоники структурно-функциональных зон почечных лимфатических узлов выявило увеличение числа незрелых форм клеток лимфоидного ряда, на фоне снижения числа малых лимфоцитов, в герминативных центрах. Также в центрах размножения отмечается макрофагальная реакция. В мозговых тяжах уменьшается число незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического ряда и возрастает - зрелых плазматических клеток. В мозговых синусах наблюдается увеличение числа малых лимфоцитов, что, вероятно, связано с миграцией этих клеток из лимфатического узла и, по-видимому, подтверждается увеличением числа малых лимфоцитов в центральной лимфе (Петров Р.В. с соавт., 1976)

Исследование содержания основных микроэлементов в лимфе и крови выявило: уменьшение элементов в крови (Си-на 35,7%, - на 69,3%) и возрастание в лимфе (Са - в 4,3 раза, Р - в 2,3 раза, - в 4,5 раза) по сравнению с интактными животными (крысы Браттлеборо).

Структурно-функциональное исследование подколенного, переднего средо-стенного и почечного лимфатических узлов, лимфы крыс Браттлеборо в условиях сочетанного применения антидиуретического гормона и фитопрепарата БАД к пище «Гармония Вита Г».

В настоящее время в медицине большое значение придается поиску натуральных средств, преимущественно растительного происхождения, с высокой биологической эффективностью и низкой токсичностью, являющихся общеукрепляющими средствами «фоновой» терапии при дисфункциях пищеварительной системы и ориентированных не на болезнь, а на профилактику ее возможных причин.

При сочетанном применении антидиуретического гормона «Адиуретин» и фитопрепарата (БАД к пище «Добрыня») корково-мозговой индекс подколенных лимфатических узлов - 1,0. Площадь коркового вещества увеличивается, а мозгового - уменьшается, по сравнению с значениями у интактных крыс Браттлеборо. Значительное увеличение площади вторичных лимфоидных узелков (на 82,5%) может свидетельствовать об активации гуморального звена иммунитета. Причем гиперплазия вторичных лимфоидных узелков имеет более выраженный характер, чем в группе, где применялся только антидиуретический гормон. Увеличение площади вторичных лимфоидных узелков происходит как за

счет герминативных центров, так и мачтийной зоны (в 2,4 раза). Транспорт лимфы через лимфатический узел усилен, в сравнении с крысами линии Вистар, но не имеет отличий от интактной группы крыс линии Браттлеборо Плошади ти-мусзависимой зоны, мозговых и краевого синусов, коркового плато не имеют достоверных отличий от интактной группы крыс с несахарным диабетом По сравнению с экспериментальной группой с монокоррекцией в цитоархитекто-нике структурно-функциональных зон подколенных лимфатических узлов выявлено увеличение числа незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов и зрелых - плазматического ряда. Цитоархитектоника структурно-функциональных зон подколенных лимфатических узлов приближается по своим значениям к показателям крыс линии Вистар Отмечается макрофагальная реакция В условиях сочетанного применения антидиуретического гормона и фитопрепарата тип структурно-функциональной специализации передних средос-тенных лимфатических узлов у крыс с месахарным диабетом изменяется с промежуточного типа (интактные крысы Браттлеборо) на фрагментированпый (к/м индекс -0,7) Транспорт лимфы через лимфатический узел усилен, в сравнении с монокоррекцией, но не имеет отличий от интактной группы крыс с несахарным диабетом Увеличение площадей вторичных лимфоидных узелков (за счет центров размножения), мозговых тяжей и уменьшение - паракортикальной зоны, по сравнению с интактными крысами Браттлеборо, может свидетельствовать об активации гуморального и угнетении клеточного звеньев иммунитета. В цито-архитектонике структурных компонентов средостенных лимфатических узлов выявлено увеличение числа незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов и уменьшение зрелых по сравнению с интактными крысами Браттлеборо Отмечается активация митотической активности клеток и макрофагальная реакция Уменьшение количества зрелых плазматических клеток в мозговых тяжах по-витичому, может быть также связано с миграцией клеток внутри лимфатического узла: увеличивается число зрелых плазматических клеток в мозговых синусах Отмечается усиление макрофагалыюй активности

В условиях сочетанного применения антидиуретического гормона и фитопрепарата у крыс с несахарным диабетом тип структурно-функциональной специализации почечных лимфатических узлов изменяется с промежуточного типа (интактные крысы Браттлеборо) на компактный тип (к/м индекс -1,72). Площадь мозгового вещества уменьшается. Как и в экспериментальной группе с монокоррекцией в лимфатических узлах преобладает прямой путь транспорта лимфы (краевой синус расширен, площадь мозговых синусов уменьшена) Относительная тошадь вторичных лимфоидных узелков уменьшена по сравнению с интактными крысами Браттлеборо. Площади коркового плато, тимусзависимой зоны и мозговых тяжей достоверных отличий от интактных крыс Браттлеборо При этом площади мозговых тяжей и вторичных лимфоидных узелков уменьшены по сравнению с группой, где применялся только антидиуретический гормон Исследование цитоархитектоники структурно-функциональных зон почечных лимфатических узлов выявило увеличение числа зрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов Отмечается увеличение численности малых лимфоцитов в структурных компонентах лимфатических узлов, по сравнению с мо-

нокоррекцией Лейкоцитарная формула центральной лимфы приближается к показателям интактной группы крыс Браттлеборо.

При применении фармпрепарата «Адиуретин» в сочетании с БАД к пище «Гармония Вита Г» (источника минеральных соединений в биодоступной форме) содержание основных элементов в сыворотке крови увеличивается, а центральной лимфе уменьшается, по сравнению с монокоррекцией, и приближается к показателям интактных крыс Браттлеборо, что может свидетельствовать о нормализации микроэлементного баланса между лимфой и кровью

Таким образом, сочетанное применение фармако- и фитопрепарата у крыс с наследственным несахарным диабетом вызывает активацию иммунологических реакций гуморального типа, способствует нормализации микроэлементного баланса между лимфой и кровью, восстанавливает клеточный состав центральной лимфы.

ВЫВОДЫ

1) Выявлено, что при наследственном несахарном диабете морфофункцио-нальная организация лимфатических узлов свидетельствует об усилении их дре-нажно-детоксикационной функции, степень выраженности которой зависит от анатомической локализации лимфатического региона (висцеральный и соматический):

- в средостенных лимфатических узлах мозговое вещество преобладает над корковым за счет уменьшения площади паракортикальной зоны и увеличения площади мозговых синусов, в которых увеличено количество зрелых плазматических клеток;

- в почечных лимфатических узлах выявлено увеличение площади мозговых тяжей, числа малых лимфоцитов и зрелых плазматических клеток;

- структурная организация подколенных лимфатических узлов соответствует фрагментированному типу, в тяжах и синусах мозгового вещества увеличено количество макрофагов и зрелых плазматических клеток

2) Выявлено, что в условиях ограничения потребления воды при наследственном несахарном диабете в лимфатических узлах происходят структурные преобразования, являющиеся результатом изменения водного баланса и развития эн-дотоксикоза, степень выраженности которых зависит от анатомического расположения дренируемого лимфатического региона:

- в подколенных лимфатических узлах выявлено увеличение размеров пара-кортикальной зоны и изменение типа функциональной специализации (промежуточный), свидетельствующие о снижении их транспортной функции;

- в почечных и средостенных лимфатических узлах изменяется цитоархитек-тоника мозгового вещества увеличено число зрелых и незрелых плазматических клеток, макрофагов.

3) Показано, что в условиях введения антидиуретического гормона (АДГ) при наследственном несахарном диабете структурные преобразования в лимфатических узлах различных лимфатических регионов носят компенсаторно-восстановительный характер и свидетельствуют об усилении лимфопоэза и снижении их транспортной функции:

- в почечных и средостенных лимфатических узлах выявлено увеличение площади вторичных лимфоидных узелков, мозговых тяжей, числа незрелых форм лимфоидных клеток и уменьшение площади мозговых синусов;

- в подколенных лимфатических узлах выявлено изменение функциональной специализации лимфатических узлов (промежуточный тип) и увеличение относительной площади вторничных лимфоидных узелков.

4) Выявлено, что при наследственном несахарном диабете пероралыюе введение БАД к пище «Гармония Вита Г», при применении АДГ, способствует понижению эндогенной интоксикации организма, стимулируя лимфопоэтичес-кую и барьерно-детоксикационную функции лимфатических узлов по сравнению с монокоррекцией АДГ, что выражается в характерных особенностях их структурно-функциональной организации:

- в средостенных лимфатических узлах по сравнению с монокоррекцией отмечено увеличение площади герминативных центров вторичных лимфоидных узелков, числа лимфобластов и средних лимфоцитов в них;

- в почечных лимфатических узлах выявлено увеличение числа макрофагов и малых лимфоцитов в паракортикальной зоне, уменьшение площади мозгового вещества в сравнении с монокоррекцией;

- в подколенных лимфатических узлах в сравнении с монокоррекцией увеличивается плошадь коркового Вещества (увеличение площади вторичных лимфоидных узелков)

5) При наследственном Несахарном диабете, в сравнении с интактными животными, выявлены характерные особенности клеточного состава центральной лимфы и элементного статуса крови и лимфы в центральной лимфе увеличено количество больших лимфоцитов и уменьшено число макрофагов, понижено содержание магния, кальция, повышено - фосфора; в крови увеличено содержание кальция, магния, фосфора и меди. Дегидратация при наследственном несахарном диабете приводит к увеличению содержания в центральной лимфе кальция (в 6,7 раза), магния (в 4,4 раза), фосфора (в 3,6 раза), меди (на 89%) и цинка (на 91 %), что является следствием развития эндотоксикоза при нарушении водного баланса

6) Выявлено, что в условиях фармакокоррекции (АДГ) наследственного несахарного диабета увеличение количества малых лимфоцитов в центральной лимфе происходит параллельно с увеличением содержания в ней кальция, фосфора и магния по сравнению с группой без коррекции. Дополнительное, к введению АДГ, применение БАД к пище «Гармония Вита Г» при наследственном несахарном диабете способствует восстановлению элементного статуса (содержание кальция, железа и цинка) центральной лимфы по сравнению с монокоррекцией.

Внедрение результатов в практику

Способ применения биологически активной добавки (БАД к пище) «Гармония Вита Г» в качестве вспомогательного средства внедрен в комплекс лечебно-реабилитационных мероприятий терапевтических отделений санатория «Барнаульский» у пациентов, страдающих несахарным диабетом и заболеваниями органов пищеварения (656047, гБарнаул, санаторий «Барнаульский», ул Парковая 21-а); Результаты анализа структурно-функциональной организации висцераль-

ных и соматических узлов при наследственном несахарном диабете (крысы линии Браттлеборо с дефектом гена di) внедрены в практику научно-исследовательской работы лаборатории функциональной анатомии лимфатической системы ГУ НИИКиЭЛ СО РАМН г. Новосибирска (630117, г. Новосибирск, ул. Академика Тимакова,2); данные о структурно-функциональной организации висцеральных и соматических лимфатических узлов, гемодинамике в капсуле почки при наследственной эндокринопатии (несахарный диабет) и в условиях заместительной гормональной терапии внедрены в лекционный курс и практические занятия кафедры фундаментальной медицины по курсу патологическая анатомия НГУ г. Новосибирск (630090, г. Новосибирск, ул. Пирогова, д 2).

Список печатных научных работ Тыщенко О.Г., опубликованных по теме диссертации:

1. Использование новых немедикаментозных методов в лечении диабета / Тыщенко О.Г, Асташов В.В //Проблемылимфологиииинтерстициальногомассо-переноса: Мат.научной конференции,-Новосибирск.-2004.-Том 2. С. 129-130.

2. Исследование микроциркуляторного русла капсулы почки у крыс Rattus Norvegicus с фенотипическим проявлением гена DI (несахарный диабет) / Тыщенко О.Г., Асташов В.В , Ищенко И.Ю. // Проблемы лимфологии и интерстициального массопереноса: Мат.научной конференции - Новосибирск. - 2004. - Том 2. -С.131-133

3 Микроциркуляторное русло капсулы почки и цитологический состав центральной лимфы у крыс rattus norvegicus /Тыщенко О.Г, Асташов В.В. // Бюллетень Сибирского отделения РАМН. - 2005. - №1. - С.79 - 81.

4. Исследование минерального состава центральной лимфы и периферической крови при несахарном диабете в условиях дегидратации, медикаментозной терапии и фитосорбционной коррекции / Тыщенко О.Г., Гельфонд Н .Е, Шуваева OB.// Тез докл. исообщ II съезда л имфологов России, Санкт-Петербург-2005-С 83-84.

5. Висцеральные и соматические лимфатические узлы при наследственном несахарном диабете в условиях дегидратации / Тыщенко О.Г., Асташов В.В., Казаков О В. //Тез. докл. и сообщ. II съездалимфологов России, Санкт-Петербург. 2005.-С. 309-310.

6. Лимфатические узлы при наследственном несахарном диабете в условиях медикаментозной терапии / Тыщенко О.Г., Асташов В.В., Казаков О.В // Тез. докл и сообщ. II съездалимфологов России, Санкт-Петербург-2005- С. 310-312

7. Лимфатические узлы при наследственном несахарном диабете в условиях * медикаментозной терапии и фитосорбционной коррекции / Тыщенко О Г, Асташов В.В., Казаков О В.//Актуальные вопросы современной курортологии, восстановительной медицины и реабилитации: Материалы научно-практической конференции - Пятигорск - 2005 - С. 48-49.

8. Phytosorbtional correction in rats with experimental diabetes insipidus in condition of medicamentous therapy /GelfondN.E., Tyshenko O.G., Astashov V V.// Euromedica: Internationaler Kongress Fachmesse.-Hannover-2005 P. 40-41.

Фомат 60 84'/lf Тираж 100 Уел печ л 1,0 Заказ X» 71

Отпечатано в типографии ООО «Итдательский дом «Манускрипт» 630117, т Новосибирск, ул Зеленая Горка, 1, тел /факс (383) 333-49-12 e-mail manuscnpf&ionlme nsk su

(

» 1611í

РНБ Русский фонд

2006-4 14998

Актуальность проблемы.

Недостаточность синтеза или секреции вазопрессина является причиной снижения концентрационной функции почек, что проявляется полиурией и полидипсией. Гипоталамический несахарный диабет — аутосомно-доминантный вялотекущий нейрогипофизарный диабет - наследственное заболевание, которое характеризуется прогрессирующей дегенерацией гигантоклеточных нейронов гипоталамуса. Развитие его связано с мутацией в гене нейрофизина II (Gagliardi Р.С., et. al., 1997; Si-Hoe S.L., et. al., 1997), нарушением синтеза, транспортировки и высвобождения вазопрессина (Кочергина И.И. и др., 1999; Потемкин В.В., 1999). Прием большого количества жидкости является компенсаторной реакцией для предотвращения дегидратации и гиперосмолярности в организме. Представления об иммунорегулирующей функции вазопрессина в значительной мере основаны на экспрессии мембранных гормональных рецепторов VI типа (Elands J. et al., 1990; Carr D.J., 1992; Pereira A. et al., 2003) и эктопическом синтезе гормона в иммунокомпетентных клетках (Robert F. et al., 1991; Chowdrey H.S. et al., 1994; Matsumoto Y. et al., 2002)

Важной задачей современной медицинской науки является изучение водно-электролитного баланса, водного гомеостаза. Особый интерес представляют собой линии экспериментальных животных с врожденной патологией водно-электролитного обмена, что позволяет изучить морфологические основы развития патологического процесса и наметить пути коррегирующих воздействий. С 1979 года сток крыс аутбредной линии Браттлеборо, с фенотипическим проявлением гена di (несахарный диабет), поддерживается в виварии Института Цитологии и генетики СО РАН. У гомозигот di/di нарушен синтез антидиуретического гормона, и в гипоталамусе, нейрогипофизе, кровеносном русле, в отличие от нормальных крыс, гормон не определяется. Фенотипически несахарный диабет у особей генотипа di/di проявляется в постоянном мочеизнурении и потреблении большого количества воды, достигающего в сутки 20-125% от веса тела (Saul G.B., Garrity Е.В. et al., 1968).

Актуальным представляется проведение исследования структурно-функциональной организации лимфатических узлов при данной патологии, поскольку они выполняют важнейшие дренажно-детоксикационную и иммуннопоэтическую функции в организме, обеспечивая поддержание водного и иммунного гомеостаза. Исследование передних средостенных, почечных и подколенных лимфатических узлов, позволит выявить характерные особенности висцеральных и соматических лимфатических узлов в зависимости от их структурной организации и анатомической локализации.

Вопрос об использовании фитопрепаратов, содержащих растения с антиоксидантным, сорбционным и гастропротективным действием, являясь высоко витаминизированным продуктом, имеющем в своем составе микроэлементы (железо, марганец, хром, алюминий, медь, цинк) (БАД к пище "Гармония Вита Г") в условиях наследственной эндокринопатии (несахарный диабет) в литературе не освещался. Здоровый организм обладает достаточно четкой саморегулирующейся системой гомеостаза, в которой немаловажную роль играют химические элементы (Москалев Ю.И., 1985; Подколзин А.А., 1995; Минделл Э, 1997; Кудрин А.В. с соавт., 2000). Концентрация микроэлементов в организме во многом зависит не только от поступления их в организм по пищевой цепи, но и от особенностей жизнедеятельности организма. Врожденный дефект водно-электролитного гомеостаза изменяет соотношение минеральных солей в крови и лимфе, а возросший в последние годы интерес к микроэлементам и состояниям, сопряженным с их дефицитом или избытком, сделал исследования в этой области актуальными (Кудрин А.В. и др., 2000; Гельфонд Н.Е. и др., 2005).

Отсутствие научных данных об особенностях структурных преобразованиях в средостенных, почечных и подколенных лимфатических узлах при рассматриваемой эндокринопатии в условиях дегидратации организма, при фармако- и фитокоррекции явилось ' основанием для выполнения исследования и обусловливает актуальность работы с научной и практической точек зрения.

Цель исследования.

Выявить особенности структурной организации висцеральных (передний средостенный и почечный) и соматических (подколенный) лимфатических узлов, центральной лимфы крыс линии Браттлеборо с фенотипическим проявлением гена di (несахарный диабет) в условиях фармако- и фитокоррекции.

Задачи исследования.

1. Изучить морфофункциональное состояние передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс линии Браттлеборо с фенотипическим проявлением гена di (несахарный диабет).

2: Выявить особенности организации передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс линии Браттлеборо (наследственный несахарный диабет) в условиях дегидратации организма.

3. Исследовать морфофункциональное состояние передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс с наследственным несахарным диабетом (Браттлеборо) в условиях фармакокоррекции антидиуретическим гормоном (АДГ) "Адиу ретин".

4. Исследовать морфофункциональное состояние передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс с наследственным несахарным диабетом (Браттлеборо) в условиях сочетанного использования фармако- (АДГ "Адиуретин") и фитокоррекции (БАД к пище) "Гармония Вита Г".

Научная новизна исследования

В работе впервые дана характеристика особенностей структурной организации передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы крыс линии Браттлеборо (наследственный несахарный диабет).

Впервые получены данные о структурной организации передних средостенных, почечных и подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы, микроэлементном составе центральной лимфы в условиях ограничения потребления воды животными с наследственным несахарным диабетом. Показано, что дегидратация организма при наследственном несахарном диабете вызывает снижение транспортной функции лимфатических узлов, изменение микроэлементного состава в лимфе и крови. В условиях дегидратации в лимфатических узлах происходят разнонаправленные структурные преобразования (зональность, клеточный состав), которые зависят от их анатомического расположения и степени участия в лимфатическом дренаже. Впервые показано, что применение антидиуретического гормона "Адиуретин" крысам с наследственным несахарным диабетом (Браттлеборо) оказывает влияние на структуру лимфатических узлов, приводит к значительному снижению концентрации основных микроэлементов в сыворотке крови и возрастанию в лимфе.

Впервые проведено структурное исследование передних средостенных, почечных, подколенных лимфатических узлов и центральной лимфы, а также проанализировано содержание основных микроэлементов в лимфе при сочетанной коррекции антидиуретическим гормоном (АДГ) "Адиуретин" и фитопрепаратом (БАД к пище) "Гармония Вита Г" при наследственном несахарном диабете.

Практическая значимость

Сведения о структурно-функциональной организации лимфатических узлов, клеточном составе центральной лимфы в условиях ограничения потребления воды (дегидратация организма) при наследственном несахарном диабете расширяют представление о морфо- и патогенезе этого заболевания.

Полученные данные о строении передних средостенных, почечных и подколенных лимфатических узлов, клеточном составе и содержании микроэлементов в лимфе при наследственном несахарном диабете в условиях введения антидиуретического гормона дают представления об особенностях иммунной и транспортной функций лимфатических узлов и микроэлементного гомеостаза организма при проведении заместительной терапии.

Сочетанное применение «Адиуретина» и БАД к пище "Гармония Вита Г" при наследственном несахарном диабете способствует восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в различных группах лимфатических узлов и микроэлементного статуса центральной лимфы, что позволяет рекомендовать фитокоррекцию (БАД к пище "Гармония Вита Г") в качестве вспомогательного диетического фона в комплексе лечебных мероприятий при наследственном несахарном диабете.

Положения, выносимые на защиту:

1. При наследственном несахарном диабете характер структурной организации лимфатических узлов свидетельствует об усилении их дренажно-детоксикационной функции и зависит от их анатомической локализации: в подколенных (соматических) лимфатических узлах изменяется тип функциональной специализации, в средостенных и почечных (висцеральных) структура мозгового и коркового вещества и их клеточный состав.

2. Ограничение приема жидкости при наследственном несахарном диабете вызывает нарушение элементного статуса центральной лимфы и приводит к структурным преобразованиям в лимфатических узлах (структурно-функциональная организация, клеточный состав), зависящим от их анатомической локализации.

3. Введение антидиуретического гормона при наследственном несахарном диабете приводит к увеличению размеров коркового вещества лимфатических узлов, площади вторичных лимфоидных узелков, числа незрелых лимфоидных клеток в них, независимо от анатомической локализации лимфатического региона.

4. Сочетанное применение антидиуретического гормона и БАД к пище "Гармония Вита Г" при наследственном несахарном диабете способствует активации барьерно-детоксикационной и лимфопоэтической функции подколенных, средостенных и почечных лимфатических узлов (увеличение площади коркового вещества, герминативных центров, лимфобластов, макрофагов) и восстановлению микроэлементного статуса (кальций, железо, цинк) центральной лимфы, в сравнении с монокоррекцией.

ВЫВОДЫ

1) Выявлено, что при наследственном несахарном диабете морфофункциональная организация лимфатических узлов свидетельствует об усилении их дренажно-детоксикационной функции, степень выраженности которой зависит от анатомической локализации лимфатического региона (висцеральный и соматический):

- в средостенных лимфатических узлах мозговое вещество преобладает над корковым за счет уменьшения площади паракортикальной зоны и увеличения площади мозговых синусов, в которых увеличено количество зрелых плазматических клеток;

- в почечных лимфатических узлах выявлено увеличение площади мозговых тяжей, числа малых лимфоцитов и зрелых плазматических клеток;

- структурная организация подколенных лимфатических узлов соответствует фрагментированному типу, в тяжах и синусах мозгового вещества увеличено количество макрофагов и зрелых плазматических клеток.

2) Выявлено, что в условиях ограничения потребления воды при наследственном несахарном диабете в лимфатических узлах происходят структурные преобразования, являющиеся результатом изменения водного баланса и развития эндотоксикоза, степень выраженности которых зависит от анатомического расположения дренируемого лимфатического региона:

- в подколенных лимфатических узлах выявлено увеличение размеров паракортикальной зоны и изменение типа функциональной специализации (промежуточный), свидетельствующие о снижении их транспортной функции;

- в почечных и средостенных лимфатических узлах изменяется цитоархитектоника мозгового вещества - увеличено число зрелых и незрелых плазматических клеток, макрофагов.

3) Показано, что в условиях введения антидиуретического гормона (АДГ) при наследственном несахарном диабете структурные преобразования в лимфатических узлах различных лимфатических регионов носят компенсаторно-восстановительный характер и свидетельствуют об усилении лимфопоэза и снижении их транспортной функции:

- в почечных и средостенных лимфатических узлах выявлено увеличение площади вторичных лимфоидных узелков, мозговых тяжей, числа незрелых форм лимфоидных клеток и уменьшение площади мозговых синусов;

- в подколенных лимфатических узлах выявлено изменение функциональной специализации лимфатических узлов (промежуточный тип) и увеличение относительной площади вторничных лимфоидных узелков.

4) Выявлено, что при наследственном несахарном диабете пероральное введение БАД к пище «Гармония Вита Г», при применении АДГ, способствует понижению эндогенной интоксикации организма, стимулируя лимфопоэтическую и барьерно-детоксикационную функции лимфатических узлов по сравнению с монокоррекцией АДГ, что выражается в характерных особенностях их структурно-функциональной организации:

- в средостенных лимфатических узлах по сравнению с монокоррекцией отмечено увеличение площади герминативных центров вторичных лимфоидных узелков, числа лимфобластов и средних лимфоцитов в них;

- в почечных лимфатических узлах выявлено увеличение числа макрофагов и малых лимфоцитов в паракортикальной зоне, уменьшение площади мозгового вещества в сравнении с монокоррекцией;

- в подколенных лимфатических узлах в сравнении с монокоррекцией увеличивается площадь коркового вещества (увеличение площади вторичных лимфоидных узелков).

5) При наследственном несахарном диабете, в сравнении с интактными животными, выявлены характерные особенности клеточного состава центральной лимфы и элементного статуса крови и лимфы: в центральной лимфе увеличено количество больших лимфоцитов и уменьшено число макрофагов, понижено содержание магния, кальция, повышено — фосфора; в крови увеличено содержание кальция, магния, фосфора и меди. Дегидратация при наследственном несахарном диабете приводит к увеличению содержания в центральной лимфе кальция (в 6,7 раза), магния (в 4,4 раза), фосфора (в 3,6 раза), меди (на 89%) и цинка (на 91%), что является следствием развития эндотоксикоза при нарушении водного баланса.

6) Выявлено, что в условиях фармакокоррекции (АДГ) наследственного несахарного диабета увеличение количества малых лимфоцитов в центральной лимфе происходит параллельно с увеличением содержания в ней кальция, фосфора и магния, по сравнению с группой без коррекции. Дополнительное, к введению АДГ, применение БАД к пище «Гармония Вита Г» при наследственном несахарном диабете способствует восстановлению элементного статуса (содержание кальция, железа и цинка) центральной лимфы по сравнению с монокоррекцией.

133