Ксеновакцинация в профилактике метастазирования кожной и увеальной меланомы

Баранникова, Татьяна Викторовна

Диссертации по медицине → Онкология

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.12) на тему:Ксеновакцинация в профилактике метастазирования кожной и увеальной меланомы

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Баранникова, Татьяна Викторовна Москва 2011 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.01.12

Автореферат диссертации по медицине на тему Ксеновакцинация в профилактике метастазирования кожной и увеальной меланомы

На правах рукописи

005002369

БАРАННИКОВА Татьяна Викторовна

Ксеновакцинация в профилактике метастазирования кожной и увеальной меланомы

(14.01.12- онкология)

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 7 ноя 2011

Москва -2011г.

005002369

Работа выполнена в «Московский научно-исследовательский институт медицинской экологии» Департаменат здравоохранения г. Москвы (директор - член-корр. РАМН, доктор биологических наук, профессор С.Е.Северин) и ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрвсоцразвития России

(директор - член-корр. РАМН, профессор A.B. Солодкий) Научный руководитель:

доктор медицинских наук Кешелава Виктор Владимирович

Научный консультант:

член-корр. РАМН, доктор химических

наук, профессор Северин Сергей Евгеньевич

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор Боженко Владимир Константинович

доктор биологических наук,

профессор Глухов Александр Иванович

Ведущая организация: ФГБУ « Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П.А.Герцена» Минздравсоцразвития России

Защита диссертации состоится «28 » ноября 2011. в 13.00 часов на заседании диссертационного совета Д.208.081.01 при ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздравсоцразвития России по адресу: 117997, г. Москва, ул. Профсоюзная ,86

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБУ « Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздравсоцразвития России

Автореферат разослан «_» октября 2011 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор

З.С.Цаллагова

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы.

Меланома кожи (МК) является одним из самых агрессивных

онкологических заболеваний с неблагоприятным прогнозом (Вагнер Р.И. и соавт ,1996). Ежегодно на каждые 6000 новых регистрируемых случаев меланомы приходится более 2000 летальных исходов (Давыдов М.И., Аксель Е.М., 2009).

У каждого третьего больного, впервые обратившегося к врачу, уже имеются клинические признаки метастатического поражения регионарных лимфатических узлов. Средняя продолжительность жизни после появления отдаленных метастазов колеблется от 6 до 9 месяцев при 5 летней выживаемости менее 5% (Lotze М.Т. et al 1996).

Многочисленные исследования меланомной группы ВОЗ не выявили улучшения во времени до прогрессирования заболевания у больных, получавших адьювантную химиотерапию. Результаты исследований свидетельствуют о неэффективности как длительного лечения малыми дозами интерферона, так и короткого лечения высокими дозами этого препарата (Tilgrn W.1995; Brega Massone Р. et al 2000).

При планировании лечебной тактики у больных кожной меланомой важно учитывать, что «скрытая диссеминация» может иметь место при любой стадии заболевания. Следовательно радикальность вмешательства, особенно у больных с опухолями II - III стадии, весьма условна, причем не столько в хирургическом сколько в биологическом отношении из-за возможного наличия субклинических метастазов.

Увеальная меланома (УМ) - первичная злокачественная опухоль - по частоте занимает первое место среди внутриглазных новообразований (Kirkwood J.M. 1998). Заболеваемость увеальной меланомой, согласно ежегодной обращаемости в различных регионах России, колеблется от 6,23 до 12 человек на 1 млн. взрослого населения. Смертность от

метастазирования после энуклеации достигает 50-76% в течение первых 5 лет.

До настоящего времени не существует общепринятой методики адьювантной терапии УМ и МК, характеризующихся высоким риском развития метастазов у хирургически излеченных больных. Увеличение частоты заболеваемости, а так же отсутствие эффективной профилактики химио-и иммунотерапии делает актуальным поиск новых подходов в адьювантом лечении. Принципиально новым решением этой проблемы, по мнению многих авторов, может стать вакцинация, основанная на ксеногенной трансплантации, т.е. пересадке опухолевых клеток животного человеку (Барышников А.Ю.2004; Моисеенко В.М. и соавт. 2004; Nestle F.O. et al 2003).

Все это определило необходимость поиска новых подходов в лечении этого заболевания и выполнения данного исследования.

Цель исследования:

Изучить эффективность ксеновакцинации как метода профилактики развития метастазов у больных кожной и увеальной меланомами после хирургического лечения в группах высокого риска развития рецидива заболевания.

Задачи исследования.

1. Разработать оптимальную методику ксеновакцинации как компонента комбинированного лечения после хирургического этапа и показания к её проведению.

2. Оценить эффективность ксеновакцинации в сочетании с хирургическим этапом лечения в профилактике метастазирования кожных и увеальных меланом в отдаленные сроки.

3. Изучить характер и особенности влияния ксеновакцинации на иммунный статус пациентов.

4. Исследовать профиль токсичности кссновакцииации в сочетании с хирургическим этапом лечения и ее влияние на качество жизни больных.

Научная новизна.

Впервые доказана обоснованность ксеновакцинации после проведенного хирургического лечения для профилактики метастазирования увеалыюй меланомы. Показано, что ксеновакцинация увеличивает безрецидивный период и продолжительность жизни, а также улучшает качество жизни больных увеальной меланомой. Установлены статистически достоверные прямые корреляционные связи между повышением уровня иммунитета и эффективностью лечения. Изучен профиль токсичности ксеновакцинации, используемой с целью профилактики метастазов у больных кожной и увеалыюй меланомами.

Практическая значимость результатов исследования.

Разработана методика профилактической ксеновакцинации больных увеальной и кожной меланомой. Обоснована необходимость ксеновакцинации с целью повышения противоопухолевого иммунитета после хирургического лечения, что играет важную роль в профилактике метастазирования при увеалыюй меланоме у больных групп высокого риска развития метастазов.

Внедрение результатов исследования. Предложенная методика внедрена в клиническую практику в городском офтальмоонкологическом центре ОКБ департамента здравоохранения Москвы, Российском научном центре Рентгенорадиологии Минздравсоцразвития России.

Основные положения выносимые на защиту. 1. Ксеновакцинация не позднее 4 месяцев после хирургического лечения (энуклеация) больных с УМ способствует повышению иммунитета, что подтверждено иммунологическими исследованиями, а

также приводит к увеличению безрецидивного периода и продолжительности жизни.

2. Введение полиакриламидного геля в период образования капсулы не вызывает токсических реакций. Введение клеток меланомы В16 в гель за образовавшуюся капсулу сопровождается токсическими реакциями 1-2ст, но не требует специального лечения и не влияет на качество жизни пациентов.

Апробация материалов диссертации.

Материалы диссертации представлены на Российской научно-практической конференции Челябинск, 2009г.; Первой международной конференции, Киев, май 2009г.; Шестом международном симпозиуме противоопухолевых вакцин, Нью-Йорк, октябрь 2008г.

Апробация диссертации состоялась 26 октября 2010г. на зеседании ученого совета ГУЗ «Московского Научно - Исследовательского Института Медицинской Экологии» Департамента здравоохранения г. Москвы.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работы, из них три в ведущих научных журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 116 страницах машинописи и состоит из введения, четырех глав, заключения, выводов, практических рекомендаций. Библиографический указатель включает 190 ссылок (в том числе 69 отечественных и 121 зарубежных публикаций). Диссертация иллюстрирована 20 таблицами, 49 рисунками, графиками и описаниями клинических наблюдений.

Содержание работы. Материалы и методы

В исследование включено 75 больных (35 больных увеальной меланомой и 40 больных кожной меланомой), прооперированных в период с 2004 по

2007г. и получивших в послеоперационном периоде ксеновакцинацию. Контрольную группу составили 143 больных. Пациентам из группы исторического контроля проведено только хирургическое лечение в период с 2002 по 2007г.г.

Работа была проведена в рамках протокола №1 Министерства Здравоохранения Российской Федерации Комитета по новой медицинской технике от 22 января 2004г. и выполнялась: в ФГУ Российском научном центре Рентгенорадиологии Минздравасоцразвития России, городском Офтальмоонкологическом центре ОКБ Департамента здравоохранения Москвы, Московском Научно-Исслсдовательском Институте Медицинской Экологии Департамента здравоохранения Москвы.

Все больные были разделены на группы: Группа А1 - больные после энуклеации по поводу увеальной меланомы, стадии Т2^Н0М0 (35 больных); В1 - больные после радикального хирургического лечения меланомы кожи, стадии Тг-дМоМо (40 больных). Сравнение проводилось с группами исторического контроля, куда вошли больные увеальной меланомы, группа А2 - 53 пациента и больные меланомой кожи, группа В2 - 90 больных. Распределение больных по группам представлено в таблице 1

Таблица 1

Распределение больных по группам н локализации заболевания

Увеальная меланома А1-группа с ксеновакцинацией 35 пациентов

А2-группа контроля без ксеновакцинации 53 пациента

Кожная меланома В1-группа с ксеновакцинацией 40 больных

В2-группа контроля без ксеновакцинации 90 больных

Кроме хирургического другое лечение этим больным не проводилось. Распределение больных по стадиям заболевания представлено в таблицах 2,3

Таблица 2

Распределение больных по стадии в группе увеальной меланомой с ксеновакцинацией ( группа А1). _

Стадия Увеальная меланома

N = 35 %

T2N0M0 8 22,86

T3N0M0 23 65,72

T4N0M0 4 11,42

Таблица 3

Распределение больных по стадии в группе кожной меланомой с ксеновакцинацией (группа В1).

Стадия Кожная меланома

N = 40 %

T2bN0Mo 2 5

T3aN0M0 6 15

T3bN0Mo 3 7,5

T4aN0M0 8 20

T4bN0Mo 9 22,5

Tla4aN,aM0 7 17,5

Ксеновакцинацию проводили после тщательного клинического обследования пациентов с целью исключения гематогенного метастазирования. Всем больным выполнялась рентгенография органов грудной клетки, УЗИ органов брюшной полости и периферических лимфатических узлов, при необходимости РКТ или МРТ органов грудной клетки и брюшной полости. Лабораторное обследование включало клиническое, биохимическое исследование крови, анализ крови на опухолеассоциированный маркер S-100 А1И, определение иммунного

статуса по периферической крови (ТА, ИФ HJ14, CD). Все исследования проводились за 1 месяц до ксеновакцинации.

В качестве ксеногенных вакцин для человека использовалась сингенная для мышей линия С57В1аск/6, злокачественная меланома В-16. Известно, что у человека клетки мышиных опухолей, в том числе и меланомы, уничтожаются в месте введения за 15 минут из-за врожденного иммунитета к специфическим полисахаридным антигенам грызунов, присущему всем приматам (Rollings S.A. et al 1996). Поэтому трансплантация ксеногенной опухоли проводилась в предварительно созданую соединительнотканную капсулу (Zybin D.V. et al 2006). Соединительнотканная капсула образовалась после подкожного введения биосовмсстимого инертного полиакриламиднго геля (ПААГ) и предохраняла трансплантированные клетки от быстрой элиминации.

Ксеновакцинация индуцировала появление в вакцинированном организме цитотоксических в отношении В-16 спленоцитов, цитотаксическая активнось (ЦТА) которых сохранялась в течение всех сроков наблюдения (до 12 недель). Полученные эксперементальные данные свидетельствовали о том, что ксеновакцинация, проведенная в профилактическом режиме у животных с меланомой В-16, снижает частоту метастазирования в легкие до 40% и степень метастатического поражения легочной ткани (Москалева Е.Ю. и соавт. 2000; Чиссов В.И. и соавт 2004).

Для ксеногенной вакцинации мы использовали трансплантируемую -меланому В-16, представляющую собой перевиваемую культуру меланомы мышей В-16 (ПКММ В-16), полученную в лаборатории экспериментальной диагностики опухолей РОНЦ АМН РФ производства ЗАО « Русские биотехнологии». Вакцина предоставлялась во флаконах по 1 мл, со стерильно приготовленной взвесью живых опухолевых клеток меланомы В-16 в концентрации 50 млн. клеток в 1 мл среды.

Для создания подкожной соединительнотканной капсулы, использован полиакриламидный гель (ПААГ) производства ООО «Витагель», представляет собой сшитый трехмерный сополимер акриламида и бисакриламида, содержащий 96-97% Н20 и 3-4% сополимера. Внешне гель выглядит как прозрачное, бесцветное, однородное, студенистое вещество. Препарат выпускается в одноразовых стерильных шприцах по 5 мл для однократного применения в индивидуальных пакетах.

Ксеновакцинацию проводили не позднее, чем через 4 месяца после оперативного вмешательства по следедующей методике: пациенту медленно подкожно (в лопаточную область спины или наружную поверхность плеча/голени или переднюю поверхность брюшной стенки) вводили 5 мл ПААГ. На 21-40 день после его введения под контролем ультразвука за соединительнотканную капсулу шприцом, с обычной скоростью для внутримышечных инъекций, вводили ПКММ В-16 в объеме 2 мл. Перед началом лечения и каждые последующие 3 месяца в течение первого года, потом каждые 6 месяцев в течение 3 лет и каждые 12 месяцев в течение всего последующего наблюдения после введения вакцины проводилось контрольное обследование, включающее: ультразвуковое обследование, клинический, биохимический анализы крови. Каждые 3 месяца в течение 1 года определяли уровень маркера 5-100 А1В, цитотоксическую активность лимфоцитов; каждые 6 месяцев проводили рентгенографию или компьютерное обследование; 1 раз в год сканирование костей. За весь период наблюдения больные не получали другого вида лечения.

Сроки наблюдения с момента начала вакцинации составили от 12 до 64 месяца (в среднем 49.7 месяцев).

Эффективность лечения оценивали по следующим критериям:

отсутствие признаков прогрессирования по результатам обследования;

- отсутствие повышения уровня маркера Б-ЮО А1В.

- анализ крови на иммунный статус (ТА, ИФ ИЛ4, CD) Показателе,м эффективности иммунотерапевтического воздействия на организм являлось образование особого пула имуннокомпетентных клеток, относящихся к цитотоксическим Т-лимфоцитам (фенотип CD3+CD8+). Данный фенотип клеток появляется в сыворотке пациента только при воздействии специфического антигена. Повышение уровня CD8+ Т-лимфоцитов после введения вакцины свидетельствует о формировании специфического противоопухолевого иммунитета.

Статистическая обработка

С учетом малых групп наблюдения была выбрана наиболее подходящая программа статистической обработки с помощью компьютерной программы «Statistica для Windows» (версия v.6.0) и SPSS. Выбор метода анализа определяли после сравнения формы распределения каждого показателя с нормальным распределением (критерий согласия Колмогорова- Смирнова) и с учетом числа наблюдений. Полученные данные представляли в виде М ±т, где М - выборочное среднее, т- стандартная ошибка среднего.

Сравнение средних значений показателей между группами проводили параметрическим дисперсным анализом и непараметрическим вариантом дисперсного анализа (Kruskal- Wallis), а также непараметрическими критериями (Mann- Whitney, медианный тест). Рассчитывали точное значение уровня значимости с учетом множественности сравнений. Достоверность различий частот в изучаемых признаках оценивалась с помощью критерия у? , для малых выборок рассчитывался непараметрический точный критерий Фишера.

Меру линейной связи оценивали с помощью коэффициента корреляции Пирсона, коэффициента корреляции рангов Спсрман (Sperman). Различия считались достоверными при р<0,05 (95% уровень значимости). При

множественных сравнениях расчет уровня значимости проводился с учетом поправки Бонферрони.

Анализ кривых выживаемости проводился методом Kaplan- Mayer, сравнения кривых выживаемости проводились методом Log-Rank с учетом поправки Бонферрони для множественных сравнений. Также рассчитывали таблицы дожития с вычислением функции рисков. Многофакторный анализ влияния признаков на безрецидивную и общую выживаемость проводился с использованием модели Сох hazard proportional regression (регрессия Коха).

При выборе статистических процедур учитывались методологические требования Международного конгресса по гармонизации GCP «Статистические принципы для клинических исследований».

Результаты исследований и их обсуждение

Анализ результатов исследования показал, что прогрессирование заболевания наблюдалось у 8 (22,9%) больных увеальной меланомой -группа AI (метастазы в печень): у 5(14.3%)спустя 14-18 месяцев после энуклеации и начала ксеновакцинации и у 3(8.6%) больных спустя 48,49 и 52 месяца.

Остальные 27 (77,1%) пациентов группы AI находились в процессе динамического наблюдения (максимальный срок наблюдения 64 месяца, при медиане наблюдения 49,7 месяца) с мониторингом основных жизненных параметров. Они сохраняли активность, работоспособность и вели обычный образ жизни.

При статистическом анализе результатов лечения пациентов группы AI, у которых были диагностированы метастазы УМ в течение первых 1.5 лет после начала лечения, было определено прогностически значимое изменение уровня CD3+CD8+ Т-лимфоцитов. У всех 5 пациентов был слабый иммунный ответ через 1 месяц после ксеновакцинации CD3+CD8+ Т-лимфоцитов менее 43% (р= 0,0001), мы приняли этот показатель за

пороговый в оценке эффективности иммуннологического ответа, считая уровень ниже < 43% низким иммунным ответом.

На рисунке 1 представлены сроки безрецидивной выживаемости у больных увеальной меланомой в группе А1 с прогностическим уровнем СБ выше или ниже 43% через 1 месяц после ксеновакцинации. На графике видно, что у пациентов с низким иммунным ответом (т.е.< 43%) чаще, чем у пацентов с хорошим иммунным ответом (т.е. > 43%), развивлись метастазы.

Больные увеальной меланомой (Kaplan-Meier) о есть мтс мет мтс

105% р-100% < 95% L-90% 85% 80% 75% 70%

65% -

5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60

— СОчерез 1 месяц <43%

- - CD через 1 месяц от 43% и более сроки наблюдения, мес.

Рис.1 . Повышение уровня CD у больных УМ через 1 месяц после ксеновакцинации при прогрессирповании заболевания.

Нами оценена безрецидивная выживаемость в обеих группах больных увеальной меланомой (общая выживаемость не определена в группе больных с ксеновакцинацией, т.к. более 50% пациентов в этой группе живы) р=0,007 Log-rank.

Результаты представлены рисунке 2 .

Больные увеальной меланомой (Kaplan-Meier) о есть мтс нет мтс

100% j-90% -

п-

S 70% -£ j к |

5 60% -

§ 50% о.

6 40%

30% 1—

О 12 24

--группа с вакцинациеи

5 48 60 72 --- группа контроля сроки до прогрессирования, мес.

Рис. 2. Безрецидивная выживаемость больных УМ в группе с ксеновакцинацией Al и в группе контроля А2.

Как видно из этого рисунка в группе больных УМ с ксеновакцинацией ( группа А1) - медиана безрецидивной выживаемости не достигнута ( более 50% больных без прогрессирования заболевания), р=0,007 Log-rank. Безрецидивная выживаемость составила:

1 год 97,112,8%; 2 года 85,7±5,9%; 3 года 85,7+5,9%; 4 года 77,1+7,3%. В группе больных УМ без ксеновакцинации (группа А2) - 53 больных УМ (группа контроля) медиана безрецидивной выживаемости 45,8 мес. (менее 4 лет)

1 год 94,3±3,2%; 2 года 79,2±5,6%; 3 года 56,8+7,0%; 4 года 43,6+8,0%; 5 лет 43,6+8,0%.

При дальнейшем наблюдении за больными УМ в течение последующих 3 лет определено, что выживаемость в группе с ксеновакцинацией (А1) не изменилась. Метастазы развились у 22,9% больных с низким (CD < 43%) иммунологическим ответом на проводимое лечение. При высоком (CD>43%) иммунном ответе метастазы не развивались.

На рисунке 3 представлен временной график риска развития метастазов у больных увеальной меланомой в группе А1 (с ксеновакцинацией). Как видно

максимально высокий риск развития метастазов был зарегистрирован в сроки от 1 года до 3 лет наблюдения.

Еальььюуееапьнсм мепгномой 0,012 |--------------------- ------------------------

о.ою;

г о,осе [■ •

6 : 1 2

1 0.0Э5 -

| 0,001

0,002 -!

0,000 1200 24,00 36,СО 48, СО 6000

с рек инабл к» ешя, м ее.

Рис. 3. Метастазироване в группе больных УМ (группа А1 с ксеновакцинацией).

При сопоставлении безрецидивной выживаемости по отдельным факторам было отмечено:

- эффект ксеновакцинации не зависел от стадии процесса, -эффективность ксеновакцинации в группе мужчин: 3-х летняя

безрецидивная выживаемость у них составила 75+12,5% в группе ксеновакцинации и 63,3±10,3% в группе контроля (р=0,6 недостоверно).

- в группе женщин 3-х летняя безрецидивная выживаемость у 23 женщин 91,3±5,9% в группе ксеновакцинации и у 31 женщины 51.9±9,4% в группе контроля (р=0,002). Как видно различия в 2-х группах достоверны.

отмечался слабая эффективность ксеновакцинации при постэкваториальной локализации опухоли (р=0,2), у 24 больных 3-х летняя безрецидивная выживаемость составила 79,2+8,3% и у 35 больных в группе контроля 58,9+8,5%. объяснения данной особенности пока найти не удалось, возможно это связано с иммунологической особенностью глазного яблока .

Из 40 пациентов с МК с ксеновакцинацией (группа В1) прогрессирование заболевания отмечено у 28 (70,0%) больных (метастазы в печень, легкие, головной мозг, кости) в сроки от 13 до 43 месяцев от начала вакцинации. В настоящее время под наблюдением остаются 12 (30,0%) пациентов без признаков заболевания группы В1 (сроки наблюдения от 22 до 59 месяцев) при медиане наблюдения 49,7 месяца.

На представленном рисунке 4 во временном графике показана

безрецидивная выживаемость в обеих группах больных кожной меланомой.

Больные меланомой кожи (Kaplan-Meier) о прогрессирование есть + прогрессирования нет

100% г

90%

" Н 40%

5 Ф

ф е- зо%

я о

| с 20%

I 10%

"Ж

щ.

л ю0. ........ 1..........1.....

' О

метод с вакцинацией группа контроля

24 36 48 60 72 84 сроки наблюдения, мес.

Рис. 4.Безрецидивная выживаемость больнх МК в группе с ксеновакцинацией В1 и в группе контроля В2.

Как видно, обе группы не имеют различий по времени до прогрессирования. Медиана срока жизни до прогрессирования у больных меланомой кожи группы В1, получавших ксеновакцинацию - 29.4 месяца Общая выживаемость: 1 год 95,0% ± 3,4%; 2 года 72,0% ± 7.2%; 3 года 14,4% ± 6,6 %; 4 года 1.6 % ± 3,5%.

У больных меланомой кожи В2, не получавших ксеновакцинацию, медиана срока до прогрессирования составила 28,1 месяца.

Общая выживаемость составила 1 год 95,6% ± 2,2%; 2 года 64,5% ±5,1%; 3 года 30,7% ± 5,0%; 4 года 1,9% + 4,8%.

При изучении связи изменения иммунного статуса с отдаленными результатами у больных МК группы В1 было отмечено, что при слабом иммунном ответе через 1 мес. (при статистическом анализе повышение уровня СБЗ+С08+ через 1 месяц менее чем на 43%) отдаленные результаты были хуже - у 19 больных 2-хлетняя безрецидивная выживаемость составила 57,0+11,5%. Ни один из этих пациентов не пережил 3 лет.

При показателях СЭЗ+С08+ через 1 месяц 43% и более у 21 больного МК группы В1 2-х летняя безрецидивная выживаемость составила 85,4±7,8%, 3-х летняя 37,1+12,8%.

На рисунке 5 графически представлена безрецидивная выживаемость у больных кожной меланомой группы В1 с прогностическим уровнем СОЗ+СБ8+ выше или ниже 43% спустя месяц после ксеновакцинации

(Кар[ап-Ме*ег) о есть мтс нет мтс

1 .о о—, О : ...... ;

■ «-г,

.......Г.......т.........."о °......

.....?........] *■ - в : -

! I

-------•.......I........Г "" : ; I

о.з ! ! ! ■ -

0,2 [.....г-......Г......

о.о о

!....."

-0,1 ---'-'----'--1-'-'-'-

О 5 10 15 20 25 ЗО 35 40 45 50

Рис. 5. Зависимости повышения уровня СБ через I месяц после ксеновакцинации на прогрессирование заболеванияу больных МК группы ВI.

Как видно, показатели безрецидивной выживаемости у больных меланомой кожи с ксеновакцинацией (группа В1) в зависимости от степени

выраженности иммунного ответа через 1 месяц были несколько выше, чем в группе больных меланомой кожи без ксеновакцинации ( группа В2 -контроля) на 2 году на 21%, на 3 году на 7%, а медиана безрецидивной выживаемости была больше на 6 месяцев ( различия недостоверны, р=0,1). Данные результаты свидетельствуют об эффективности метода для определенной категории больных МК, но требуется дальнейшее уточнение критериев эффективности и выработки более четких показаний к терапии.

Сравнительный анализ результатов исследования показал, что в обеих группах больных, которым проведена вакцинация (группы А1 и В1), отдаленные результаты лечения зависели от степени выраженности иммунного ответа на проводимое лечение.

После подкожного введения инертного геля ни у одного больного не наблюдалось каких-либо побочных эффектов. У всех пациентов были отмечены слабовыраженные аллергические реакции на введение препарата ПКММ В-16 в виде гиперемии и зуда кожи в области введения препарата с умеренной болезненностью мягких тканей 1-2 ст. Аллергическая реакция типа кожных высыпаний папулезного характера с зудом отмечена у 50 больных (66,7%). Кожные проявления исчезали самостоятельно в течение 7 суток без использования антигистаминных препаратов.

У 29 (38,6%) больных в течение первых суток после введения вакцины имело место однократное кратковременное повышение температуры тела до 38 С.

При исследовании гематологических показателей крови изменений не зарегистрировано, также не выявлено реакции со стороны лимфатических узлов (увеличение, припухлость или болезненность). Описанные выше реакции на введение вакцииы не влияли на привычный образ жизни. Таким образом, физикальные, инструментальные и лабораторные исследования свидетельствовали об отсутствии токсических реакций при использовании вакцинотерапии, последняя хорошо переносились больными и

сопровождались иммунологическим ответом различной степени выраженности у всех 75 больных, что подтверждено показателями периферической крови.

У 30 больных увеапьной меланомой получена выраженная стимуляция специфического иммунного ответа, показателем которого является повышение уровня СВЗ+СБ8+ Т-лимфоцитов.

Таким образом, ксеновакцинация, как метод профилактики метастазов показала низкую эффективность метода при кожной меланоме, в то время как у пациентов увеальной меланомой отмечено улучшение безрецидивной и общей выживаемости. Учитывая хорошую переносимость, низкий токсический профиль, повышение иммунологических показателей крови, увеличение безрецидивной выживаемости ксеновакцинацию можно рекомендовать для профилактики метастазов увеальной меланомы. Метод открывает новые возможности лечения меланомы этой локализации и может быть рекомендован для клинического использования.

Выводы

1. Использование живой ксеногенной вакцины в профилактике метастазов увеальной и кожной меланомы безопасно. За период наблюдения (64 месяца) каких- либо осложнений, связанных с ксеновакцинацией, не выявлено, что свидетельствует о хорошей переносимости метода.

2.Использование живой ксеногенной вакцины в профилактике метастазов увеальной меланомы увеличивает безрецидивную выживаемость по сравнению с контрольной группой с 43,6% до 77,1%, при медиане наблюдения 49,7 месяцев.

ксеновакцинации и группе контроля составила 9,5% и 10,1% соответственно, при медиане наблюдения 49,7 месяцев.

4. Ксеновакцинация сопровождается иммунологическим ответом, что подтверждено иммунологическими исследованиями крови (повышение уровня С03+С08+Т-лимфоцитов).

5.Токсических реакций на введение полиакриаамиднго геля и в период формирования капсулы в течение 21-40 дней не зарегистрировано. Введение клеток меланомы В16 в гель за образовавшуюся капсулу в сроки до 7 дней сопровождается токсическими реакциями 1-2 степени и не требует специального лечения.

Практические рекомендации

1. Ксеновакцинацию рекомендуется начинать больным с увеальной меланомой стадии Т2-Т4ЫоМо не позднее 4 месяцев после операции.

2. Методика ксеновакцинации: через 1-2 месяца после проведения хирургического лечения пациенту подкожно вводят 5 мл полиакриламидного геля. Через 21-40 дней за соединительнотканную капсулу, образовавшуюся вокруг предварительно введенного полиакриламидного геля, под контролем ультразвука вводят перевивную культуру меланомы мышей В-16 в объеме 2 мл.

3. Контроль за эффективностью лечения осуществляется путем оценки иммунологического статуса до и после ксеновакцинации через 1 месяц и 1 год.

4. Динамическое обследование рекомендуется проводить в соответствии с общепринятыми стандартами каждые 3 месяца в течение 1-1,5 лет, далее каждые полгода.

Список опубликованных работ.

1. Бровкина А.Ф., Кешелава В.В., Сологуб В.К., Коромыслова И.К., Северин С.Е., Баранникова Т.В. Живая ксеногенная вакцина в профилактике метастазов увеальной меланомы. // Вестник офтальмологии Т.125.-2009.-№5,- С.46-49

2. Сологуб В., Коромыслова И., Кешелава В., Бровкина А., Баранникова Т., Северин С. Ксеногенная вакцинация живыми опухолевыми клетками мыши для предотвращения метастазирования после хирургического лечения увеальной меланомы. // 6 International Cancer Vaccine Symposium New York , USA. October 28-30,2008.-P 29.

3. Бровкина А.Ф., Кешелава В.В., Баранникова T.B.

Живая клеточная вакцина в профилактике метастазов кожной и увеальной меланомы. // Материалы Российской научно-практической конференции « Реформа онкологической службы Уральского федерального округа и идеология развития позитронной эмиссионной томографии в регионах ». Челябинск, 2009,- С.41-42

4. Сологуб В., Коромыслова Т., Кешелава В., Бровкина А., Баранникова Т.,Северин С. Вакцинация живыми опухолевыми клетками мыши с целью профилактики развития метастазирования после хирургического лечения увеальной меланомы. // Материалы Первой Международная Конференция «Противоопухолевая иммунотерапия и иммуномониторинг». Киев, Украина. Май

18-21,2009.-С 37.

5. Бровкина А.Ф., Кешелава В.В., Северин С.Е., Сологуб В.К., Коромыслова И.К., Баранникова Т.В. Ксеновакцинация в профилактике метастазов увеальной меланомы.//Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии.- 2011,- №11 (http://vestnik.rncrr.ru/vestnik/vl l/papers/brovk_vl 1 .htm)

6. Баранникова Т.В. Кожная и увеальная меланома: методы лечения и профилактики развития метастазов (обзор литературы).//Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии.- 2011.- №11 (http://vestnik.mcrr .ru/vestnik/v 1 l/barannikova_v 11 .htm)

Сокращения

УМ- увеальная меланома МК-меланома кожи

ПКММ В-16 - перевиваемая культура меланомы мышей

ПАЛГ- полиакриламидный гель

ЦТ А- цитотаксическая активность

ИФ- интерфероны

ИЛ4- интерлейкины 4

ТА- Т-лимфоциты активированные

CD- скопление по дифференцировке Т-лимфоцитов

РКТ- рентгенокомпютерная томография

МРТ- магнитнорезонансная томография

Подписано в печать:

24.10.2011

Заказ № 6129 Тираж -100 экз. Печать трафаретная. Типография «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 115230, Москва, Варшавское ш., 36 (499) 788-78-56 www.autoreferat.ru

Оглавление диссертации Баранникова, Татьяна Викторовна :: 2011 :: Москва

Список сокращений.стр.

Введение.стр.

Глава 1. Кожная и увеальная меланома, лечение и профилактика (обзор литературы)

1.1 Меланома кожи (МК) .стр.

1.2 Увеальная меланома (УМ) .стр.

1.3 Возможности профилактики метастазов меланомы.стр.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1 Общая характеристика больных/ клинического материала.стр.

2.2 Общая характеристика методов исследования пациентов.стр.

2.3 Используемые в работе материалы.стр.

2.4 Критерии отбора больных. стр.

2.5 Методика ксеновакцинации больных МК и УМ группы высокого риска метастазирования после хирургического этапа лечения.стр.

2.6 Методы обработки и анализа полученных результатов исследования и лечения (статистическая обработка данных/результатов) .стр.

Глава 3. Результаты применения метода ксеновакцинации у больных кожной и увеальной меланомой.

3.1 Оценка результатов профилактической вакцинации у больных кожной и увеальной меланомой.стр.

3.2 Оценка иммунологического статуса в процессе вакцинации.стр.

3.3 Оценка эффективности вакцинации у больных кожной и увеальной меланомой в отдаленные сроки после лечения.стр.

Глава 4. Токсические проявления возникшие на фоне ксеновакцинации у больных кожной и увеальной меланомой 4.1 Побочные эффекты связанные с применением ксеновакцинации и способы лечения реакций гиперчувствительности.стр.

Введение диссертации по теме "Онкология", Баранникова, Татьяна Викторовна, автореферат

Опухоли кожи составляют 25 % от всех злокачественных новообразований, причем удельный вес меланомы примерно до 3%, со среднегодовым приростом 5% (США- 4%; Россия 3,9%) [34].

Меланома кожи является одним из самых агрессивных онкологических заболеваний с неблагоприятным прогнозом [28].

Ежегодно на каждые 6000 новых регистрируемых случаев меланомы приходится более 2000 летальных исходов.

Меланома кожи в начальной стадии может быть излечена хирургическим методом. У 45,6 % больных меланомой кожи I стадии к началу лечения уже имеют место клинически не определяемые транзитные и/или регионарные, и/или отдаленные метастазы. Радикальность хирургического лечения больных II- III стадии условна в виду высокого риска развития метастазов, манифестация которых происходит в среднем через 6-18 месяцев после операции путем гематогенного и/или лимфогенного метастазирования. С момента установления диагноза в течение двух - трех лет погибают 50-80% больных [77,80,82,95,100,104*153]. Возникновение метастазов максимально уменьшается после 7-летнего срока наблюдения [79].

Средняя продолжительность жизни после появления отдаленных метастазов колеблется от 6 до 9 месяцев при 5 летней выживаемости менее 5% [132]. С помощью лекарственных методов удается добиться стойких полных ремиссий, продолжительность которых, лишь в 1,4 — 3 % случаев превышает 5-летний рубеж [72,73].

Увеальная меланома — первичная злокачественная опухоль - по частоте занимает первое место среди внутриглазных новообразований. Заболеваемость увеальной меланомой по ежегодной обращаемости в различных регионах России колеблется от 6,23 до 12 человек на 1 млн. популяции в год [33, 22,25, 12, 27]. В Москве, где функционирует городской офтальмоонкологический центр, этот показатель достигает 12 случаев на 1 млн. популяции. Она характеризуется агрессивным теченим с плохим прогнозом. Процент метастазирования высок, как без лечения, так и после энуклеации [2,3,17, 25, 30,40, 135, 146]. Длительное время считалось что энуклеация при увеальной меланоме является единственным методом лечения, однако мнение было опровергнуто в конце 20 века [188, 189] и было доказано что хирургическое лечение не предупреждает гематогенного метастазирования, смертность от которого составляет 50-76% в течении первых пяти лет после удаления пораженного меланомой глаза [188].На частоту метастазирования оказывает влияние целый комплекс факторов, среди которых большую роль играют размеры опухоли, её локализация, гистологический тип опухоли. Вместе с тем следует учитывать, что и небольшие по своему размеру меланомы хориоидеи с элевацией до 1 мм склонны к метастазированию с частотой до 15 % [2, 188].

В настоящее время в литературе имеются противоречивые данные тактике лечения кожных и увеальных меланом, о целесообразности в применении химиотерапии и иммунотерапии, лучевой терапии с адыовантной целью. Так же нет единого мнения и об использовании биотерапии с целью профилактики развития метастазов.

В литературе опубликовано значительное количество работ по изучению эффективности ксеновакцинации с целью профилактики развития метастазов у больных кожной и увеальной меланомой, в которых представлены лишь единичные наблюдения без анализа данных и обобщения результатов.

Цель исследования.

Задачи исследования.

1. Разработать оптимальную методику ксеновакцинации как компонент комбинированного лечения после хирургического этапа и показания к её проведению.

3. Изучить характер и особенности влияния ксеновакцинации на иммунный статус пациентов.

4. Исследовать профиль токсичности ксеновакцинации в сочетании с хирургическим этапом лечения и ее влияние на качество жизни больных.

Научная новизна полученных результатов.

Впервые доказана обоснованность включения ксеновакцинации после проведенного хирургического лечения для профилактики метастазирования увеальной меланомы. Показано, что ксеновакцинация увеличивает безрецидивный период и продолжительность жизни, а также улучшает качество жизни у больных увеальной меланомой. Установлены статистически достоверные прямые корреляционные связи между повышением уровня иммунитета и эффективностью лечения. Изучен профиль токсичности ксеновакцинации используемой с целью профилактики метастазов у больных кожной и увеальной меланомой.

Практическая значимость полученных результатов.

Разработана методика профилактической ксеновакцинации больных увеальной и кожной меланомой. Обоснована необходимость ксеновакцинации с целью повышения противоопухолевого иммунитета после хирургического лечения, что играет важную роль в профилактике метастазирования при увеальной меланоме у больных групп высокого риска развития метастазов.

Предложенная методика внедрена в клиническую практику в Российском научном центре Рентгенорадиологии, городском офтальмоонкологическом центре ОКБ департамента здравоохранения Москвы.

Внедрение основных результатов в практику.

Предложенная методика внедрена в клиническую практику в городском офтальмоонкологическом центре ОКБ департамента здравоохранения Москвы, Российском научном центре Рентгенорадиологии Минздравсоцразвития России.

Основные положения выносимые на защиту.

1. Ксеновакцинация не позднее 4 месяцев после хирургического лечения (энуклеации) больных с УМ способствует повышению иммунитета, что подтверждено иммунологическими исследованиями, а также приводит к увеличению безрецидивного периода и продолжительности жизни.

2. Введение полиакриламидного геля и в период образования капсулы не вызывает токсических реакций. Введение клеток меланомы В16 в гель за образовавшуюся капсулу сопровождается токсическими реакциями 1-2 ст, но не требует специального лечения и не влияет на качество жизни пациентов.

Апробация материалов диссертации.

Матеиалы диссертации предствлены на Российской научно-практической конференции Челябинск, 2009г.; Первой международной конференции, Киев, май 2009г.; Шестом международном симпозиуме противоопухолевых вакцин, Нью-Йорк. Октябрь 2008г.

Апробация диссертации состоялась 26 октября 2010г. на зеседании ученого совета ГУЗ «Московского научно-исследовательского института медицинской экологии» Департамента здравоохранения г. Москвы.

Заключение диссертационного исследования на тему "Ксеновакцинация в профилактике метастазирования кожной и увеальной меланомы"

Выводы

1 .Использование живой ксеногенной вакцины в профилактике метастазов увеальной и кожной меланомы безопасно. За период наблюдения (64 месяца) каких- либо осложнений, связанных с ксеновакцинацией не было выявлено, что свидетельствуют о хорошей переносимости метода.

3. Метод ксеновакцинации для профилактики метастазов кожной меланомы не выявил преимущества данной технологии в сравнении с общепринятыми методами лечения. Безрецидивная выживаемость в группе ксеновакцинации и группе контроля составила 9,5% и 10,1% соответственно, при медиане наблюдения 49,7 месяцев.

4.Ксеновакцинация сопровождается иммунологическим ответом, что подтверждено иммунологическими исследованиями крови (повышение уровня СБЗ+СВ8+ Т-лимфоцитов).

5. Токсических реакций на введение полиакриаамиднго геля и в период формирования капсулы в течение 21-40 дней не зарегистрировано. Введение клеток меланомы В16 в гель за образовавшуюся капсулу в сроки до 7 дней сопровождалось токсическими реакциями 1-2 степени и не требовало специального лечения.

Практические рекомендации

1. Ксеновакцинацию рекомендуется начинать больным с увеальной меланомой стадии Т2-Т4МоМо не позднее 4 месяцев после операции.

4. Динамическое обследование рекомендуется проводить в соответствии с общепринятыми стандартами, каждые 3 месяца в течение 1-1,5 лет, далее каждые полгода.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Баранникова, Татьяна Викторовна

1. Аббасов А.Т. Первичная свободная кожная пластика в процессе комбинированного радиохирургического лечения злокачественных меланом кожи. Хирургия. М., 1967. №5. - С. 104-106.

2. Абрамов В.Г. Выживаемость больных после энуклиации по поводу меланомы хориоидеи . Опухоли и опухолеподобные заболевания органа зрения М.- 1990.-С.5-7.

3. Анисимов В.В., Вагнер Р.И., Брчук A.C. Меланома кожи: (эпидемиология, этиология, патогенез, профилактика): ч.1. — СПб., 1995. — С. 151.

4. Анисимов В.В. Меланома кожи перспективы улучшения диагностики и лечения. Дис. доктора мед. наук, СПб., 2000. - С. 107.

5. Баженова А.П., Паплиян Н.П., Романова O.A., О некоторых принципах и итогах лечения меланом кожи. Хирургия. М., 1978.- №11. — С. 118-122.

6. Баласанян В.О. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук « Сочетанная лучевая терапия увеальных меланом» Москва 2005.

7. Барчук A.C., Анисимов В.В. Методики дооперационной диагностики степени распространения меланомы кожи. Пособие для врачей . — СПб., 1998. -С.14.

8. Барчук A.C. Хирургическое лечение меланомы кожи. Практическая онкология. 2001. - №4 (8). - С. 30-36.

9. Безруков A.B. Отдельные результаты лечения увеальных меланом. Опухоли и опухолеподобные заболевания органа зрения. — Москва, 1990.- С. 8-9.

10. Березкин Д.П., Айрапетян М.Х. Барсегян B.C. Прогностические факторы, наиболее влияющие на выживаемость больных меланомой кожи. Клиника и лечение меланом кожи: Тезисы Всесоюзного симпозиума. JL, 1990.-С. 7-9.

11. Бровкина А.Ф. Современные аспекты лечения увеальных меланом. Вестник офтальмологии- 1999. -115. №3- С. 3-6.

12. Бровкина А.Ф., Зиангирова Г.Г., Комаров В.А. О криодеструкции меланомы хориоидеи. Вестник офтальмологии. — 1977.- №12. — С. 61-63.

13. Бровкина А.Ф. О показаниях к энуклеации и органосохранному лечению при опухолях сосудистой оболочки. Тезисы докладов VII Республиканской конференции Лит. ССР « Актуальные вопросы офтальмологии » Каунас. — 1980,- С. 52- 54.

14. Бровкина А.Ф., Костина В.А. Основы клинической диагностики опухолей хориоидеи. Офтальмоонкология: Научный обзор —М., 1981.- С. 24-25.

15. Бровкина А.Ф., Зарубей Г.Д., Каплина A.B. и др. О причинах энуклиации после комбинированного лечения меланом хориоидеи. Вестник офтальмологии.- 1982. №3. - С. 48-51.

16. Бровкина А.Ф., Лохманов В.П. О некоторых особенностях техники энуклиации глаза при меланомах хориоидеи. Вестник офтальмологии- 1983.-№2. -С. 7-9.

17. Бровкина А.Ф., Лохманов В.П. О некоторых особенностях техники энуклиации глаза при меланомах хориоидеи. Вестник офтальмологии. — 1986.-№3.-С. 30-33.

18. Бровкина А.Ф., Зарубей Г.Д. Об эффективности брахитерапии при увеальных меланомах. Офтальмологический журнал- 1993.- №1- С.1-4.

19. Бровкина А.Ф. Актуальные вопросы офтальмологии. Вестник офальмологии. 1997г. - №1. - С. 5-7.

20. Бровкина А.Ф., Вальский В.В., Зарубей Г.Д. Метастатическое поражение печени у больных увеальной меланомой. Вестник офтальмологии.- 1998. -114. № 1 С. 21-23.

21. Бровкина А.Ф., Кешелава В.В. Сочетанная лучевая терапия увеальных меланом. Вестник офтальмологии — 1997. №2.- С.10-12.

22. Бровкина А.Ф., Кешелава В.В. Результаты сочетанной лучевой терапии хориоидальных меланом// Вестник офтальмологии — 2001. №3 — С.3-5.

23. Бровкина А.Ф., Кешелава В.В., Жильцова М.Г. Морфологические обоснования целесообразности сочетания лучевой терапии при увеальных меланомах . Опухоли и опухолеподобные заболевания органа зрения — 1998. С.84-85.

24. Бровкина А.Ф. Руководство для врачей// Офтальмоонкология. Под редакцией Бровкиной А.Ф. Москва, Медицина, 2002. С. 255-268.

25. Бровкина А.Ф., Вальский В.В., Гусев Г.Г. и др. Риск метастазирования хориоидальных меланом после брахитерапии. Вестн. Офтальмол. — 2003.-№2. С. 26-28.

26. Бровкина А.Ф. Органосохранное лечение внутриглазных опухолей (тенденции развития). Вестник офтальмол.- 2004.- № 1.- С. 22-25.

27. Вагнер Р.И., Анисимов В.В., Барчук A.C. Меланома кожи. Часть 2. Диагностика, клиника, прогноз заболевания. СПб., Наука, 1996;С.- 274).

28. Вит В.В. Особенности происхождения пигментных новообразований увеального тракта. Офтальмологический журнал — 1986.- №7.- С. 402-406.

29. Волков В.В. О показаниях к энуклиации в лечении больных с внутриглазной меланомой. // Вестник офтальмологии- 1985.- №2. -С.3-6.

30. Гершанович M.JL, Филов В.Ф., Акимов М.А., Акимов A.A. Введение в фармакотерапию злокачественных опухолей . СПб., 1999.— С. 152.

31. Гольдман Э.М. Инфракрасная спектроскопия в прогнозе злокачественной увеальной меланомы . Актуальные вопросы сосудистой патологии органа зрения. Алма- Ата 1987.- С. 118-119.

32. Давыдов М.И, Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СИГ в 2005г. Вестник РОНЦ им. H.H. Блохина № 3 том 20. Приложение 1, 2007.

33. Давыдов М.И, Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2007г. Вестник РОНЦ им. H.H. Блохина №3 том 20 приложение 1, 2009г.

34. Дарьялова C.JL, Бойко A.B., Черниченко A.B. Наш взгляд на комбинированное лечение злокачественных опухолей. Российский онкологический журнал.- 1998.- №3. С.76-79.

35. Демидов JI.B., Харкевич Г.Ю., Халястов И.Н. и др. Эффективность профилактической химиотерапии у больных меланомой кожи с хирургически J злеченными метастазами в регионарные лимфоузлы. Сб. «Новое в онкологии». -2001,- Вып.5. С.116-121.

36. Иолев Э.Н., Фрадкина H.A. Анализ злокачественных опухолей глазного яблока. Опухоли и опухолеподобные заболевания органа зрения 1998. - С. 28-31.

37. Казимироова Е.Г., Гришина Е.Е. Ранняя диагностика метастатической увеальной меланомы: современные возможности и перспективы развития ( обзор литературы). Современная онкология.- 2008. Том 10 №1.

38. Костюкова Т.Д., Переслегин И.А., Саркисян Ю.Х. Лучевая терапия в офтальмологии. Клиническая радиология. Москва: Медицина , 1973. С. 286- 440.

39. Котелянский Э.О. Об исходе и прогнозе при внутриглазных опухолях. // Тезисы докладов 5 съезда офтальмологов. — М., 1979. — С. 184-186.

40. Кудрявцев Д.В., Мардынский Ю.С., Кудрявцева Г.Т. , Неборак Ю.Т. Индексы Clark и Breslow как факторы прогноза при комплексной терапиимеланомы кожи. VII Российский онкологический конгресс. 26-27 ноября 2003.-Москва.-С. 229.

41. Кудрявцева Г.Т., Кудрявцев Д.В., Мардынский Ю.С. Риск развития регионарных и отдаленных метастазов меланомы кожи в зависимости от степени инвазии по Clark. VII российский онкологический конгресс. 26-27 ноября 2003. Москва. - С.231.

42. Лариощенко Т.Г. Меланома кожи (обзор). Тезисы конференции МНИОИ им. П.А. Герцена. М., 1972. - С. 50-55.

43. Малишевская Н.П., Берзин С.А., Чайковский Г.Н., Подкин Ю.С. Эпидемиологическое и клиническое значение предопухолевого фона в развитии злокачественных новообразований кожи. Рос. Журнал кожных и венерических болезней. 1998. - №1. — С. 18-22.

44. Мальковская Е.Е. Информационная ценность клинических признаков и факторы риска меланом хориоидеи. Автореферат диссертации к.м.н.-Москва,- 1987.- С. 144-145.

45. Мерабишвили В.М., Чепик О.Ф. Анализ выживаемости и погодичной летальности больных злокачественной меланомой кожи на популяционном уровне. Вопросы онкологии. 2006. - Т.52 (4). — С. 385-391.

46. Мордовцева В. К вопросу о диагностике меланомы кожи. Лечащий врач. 1999.-№5.-с.10-11.

47. Нивинская М.М. Клиника и лечение меланом / М.М. Нивинская. — М., Медицина, 1970.-С.183.

48. Пачес А.И., Бровкина А.Ф., Зиангирова Г.Г. Клиническая онкология органа зрения. Москва.- 1980.- С. 324.

49. Петухов В.Н., Фишер М.Е. Лимфографическая семиотика метастатического поражения лимфатических узлов у больных меланомой кожи. Актуальные проблемы онкологии и медицинской радиологии. — Мн.: НИИОМР им. H.H. Александрова, 1981.-Вып. 10.-С. 26-27.

50. Плетнев С.Д., Островцев Л.Д., Карпенко О.М., Королева Л.А. Злокачественные опухоли кожи. Комбинированное и комплексное лечение больных со злокачественными опухолями. Под ред. В.И. Чиссова. — М.: Медицина, 1989.-С. 526-547.

51. Раков А.И., Трапезников H.H., Лариохценко Т.Г. О деятельности международной группы по клиническому изучению меланомы. Новости онкологии. 1967. — С. 61-64.

52. Рыбакова М.Л., Кораблев Г.А. Фоторегистрация опухолей хориоидеи и ее роль в уточненной диагнотсике. Сборник научных трудов Международного симпозиума « Диагностика и лечение внутриглазных опухолей». Москва.- 1986.-С.16-18.

53. Рыбакова М.Л., Мальковская Е.Е. Клинико- ангиографическая характеристика меланом хориоидеи и ее значение в планировании органосохранного лечения. Офталмологический журнал,- 1986г.- №7.- С. 408-412.

54. Рыбакова М.Л. Клинико- ангио- морфологические параллели истинных границ опухоли хориоидеи. Диссертация к.м.н.- Москва.- 1987.

55. Сигал М.З., Абдуллин A.C. Радикальное иссечение единым блоком меланобластомы кожи. Вопросы онкологии. — 1966. №10. — с. 35-39.

56. Соловьев В.И., Зуй B.C. Опыт лечения меланомы кожи. Актуальные вопросы онкологии: материалы междунар. симп., Санкт-Петербург, 14-17 мая, 1996г.-СПб., 1996. С. 240-241.

57. Терентьева Jl.С., Вит В.В., Шамбра В.В. и др. Эффективность органосохранного лечения увеальных меланом. Тезисы научно-практической конференции с международным участием « Опухоли и опухолеподобные заболевания органа зрения ». Москва 1998.- С. - 123125.

58. Фишкин Ю.Г. Возможности ультразвукового контроля за положением офтальмоаппликатора при лечении внутриглазных опухолей. Опухоли и опухолеподобные заболевания органа зрения. Москва- 1998.- С.- 67-69.

59. Фрадкин С.З., Жаврид Э.Ф., Шитиков Б.Д. и др. Комплексная диагностика меланома кожи. Здравоохранение Белоруссии. — 1993. № 10. — с. 58- 59.

60. Цанев П.Е. Роль лизосомальных и мембранносвязанных катепсинов и коллагенез в процессе инвазии меланомы . Москва.- 1991.

61. Чиссов В.И., Сергеева Н.С., Северин С.Е. и др. Разработка метода противоопухолевой вакцинации мышей в предварительно инкапсулированный полиакриламидный гель на модели мышиной меланомы В-16. Молекул, мед. 2004,- №2. - С. 24-28.

62. Чупров И.Н. Свободные клетки стромы в меланоцитарных опухолях кожи. -СПб., 1996.

63. Шанин А.П. Пигментные опухоли кожи. — Л., 1959. — с.258.

64. Шанин А.П. Опухоли кожи, их происхождение, клиника и лечение. — Л., 1967.-с. 68.

65. Шепкалова В.М., Хорасанян- Таде A.A., Дислер О.Н. Внутриглазные опухоли . Атлас.- Москва.- Медицина, 1965.- С. 6-86.

66. Albert D.M., Searl S.S., Forget B.M. et al. Uveal findings in patient with cutaneus melanoma. Am. J. Ophthalmol. -1983- V.93, N 4-474-479.

67. Assessment of metastatic disease status at death in 435 patients with large choroidal melanoma in the Collaborative Ocular Melanoma Study: COMS Report № 18. Arch, of Ophthal.- 2001. Vol. 119, №6.- P.670-676.

68. Atkins M.B. Interleukin- 2 in metastatic melanoma: establishing a role// Cancer J. Sei. Amer- 1997,- Vol. 3 (suppl. 1).- P. 7-8.

69. Atkins M.B., Lotze M.T., Dutcher J.P. et al. High-dose recombinant interleukin-2 therapy for patients with metastatic melanoma: Analysis of 270 patients treated between 1985 and 1993. J. Clin. Oncol.- 1999.- Vol. 17.- P. 21052116.

70. Augsburger J.J., Schroeder R.P., Territo C., Gamel J.W., Shields J.A. Clinical parameters predictive of enlargement of melanocytic choroidal lesions. Br. J. Ophthalmol.- 1989.- V.73.- P.911-7.

71. Avery R.B.,Mehta M.P., Auchter R.M., et al. Intraocular melanoma.// In: De Vita VT Jr, Hellman S., Rosenberg S.A, eds.: Cancer: Principles and Practice of Oncology. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott Wilkins.- 2005.- P. 1800- 1824.

72. Bakalian S. ., Marshall JC., Logan P., Faingold D., Maloney S., Di Cesare S., Martins C., Femandes B., Burnier MN Jr., Molecular pathways mediating liver metastasis in patients with uveal melanoma. Clin Cancer Res.- 2008 Feb, 15;14(4).-P 956-6.

73. Balch C.M. Cutaneous melanoma: prognosis and treatment results worldwide. Semin. Surg. Oncol.- 1992.- Vol.8.- P. 400-414.

74. Balch C.M.,Buzaid, Soong S.J. et al.Final version of the American Joint on Cancer staging system for cutaneous melanoma. J. Clin. Oncol. — 2001. — Aug. 15. -Vol.19 (16)/- P.3635-48.

75. Balch C.M., Reintgen D.S., Kirwood J.M. Cutaneous melanoma in De Vita VT Jr. / S. Hellman, S.A. Rosenberg (eds). Cancer Pinciplts and Practice of Oncology (ed. 5). Philadelphia PA, Lippincott- Raven. - 1997. - pp. 1947-1994.

76. Balch C.M., Soong S.J., Bartolucci A.A. et al. Efficacy of an selective regional lymph node dissection of 1-4 mm thick melanomas fir patients 60 yeas of age and younger. Ann Surg. 1996. - 224. - p. - 255-266.

77. Balch C.M., Soong S.J., Murad T.M. et al. A multifactorial analysis of melanoma: III. Prognostic factors in melanoma patients with lymph node metastases (stage II). Ann. Surg. 1981. - Vol. 193. -P: 377-388.

78. Barr Ch. C., Sipperley I., Nicholson Don H. Arch. Ophthalmol. 1978 -Vol. 96- P. 1580- 1591.

79. Barth A., Morton D.L. The role of adjuvant therapy in melanoma management. Cancer (Philad.).- 1995.- Vol. 75,- P. 726-734.

80. Bechrakis N., Bornfeld N., Zoller I., Foerster M. Iodine- 125 brachytherapy and trans sclera tumor resection in large uveal melanomas. Ophthalmol.- 2001 .Vol. 98, №8.- P. 736- 742.

81. Beran T.M., Ferro F., Gatlino G., et al. Reactions to and desire for prognostic testing in choroidal melanoma patients. J Genet Couns.- 2009.- V. 18.- №3.1. P.265-274.

82. Blumenthal E.Z., Pe,er J., Multifocal choroidal malignant melanoma: at least 3 melanomas in one eye. Arch. Ophthalmol. 1999. - Vol. 117, № 2. - P. 255258.

83. Bottomley A., Coens C., Sucin S. et al. Adjuvant Therapy With Pegylated Interferon Alfa-2b Versus Observation in Resected Stady III Melanoma: A Phase III Randomized Controlled Trial of Health- Related Quality of Life and

84. Symptoms by the European Organisation for Research and Treatment of Cancer Melanoma Group. J. Clin Oncol. Jun 2009. Vol 27,- P.2916-2923.

85. Brega Massone P., Ferro F., Gatlino G., et al. Malignant melanoma metastatic to the lung: results of 60 resected patients. 10th International Congress on Anti- Cancer Treatment. 2000.- P.256.

86. Breslow A. Thicness, cross-sectional areas and depth of invasion in the prognosis of cutaneous melanoma. Ann. Surg. 1970 - V. 182. - P. 902-908.

87. Brossart P., Wirths S., Stuhler G., et al. Induction of cytotoxic T-lymphocyte responses in vivo after vaccinations with peptide-pulsed dendritic cells. Blood- 2000.- Vol.96.- P. 3102.

88. Brovkina A.F., Keschelava V.V. New Technique of the treatment of uveal melanoma. Intern. Sympos. On Ocular Tumors. — Isfael Jerusalim. — 1997 — P.26

89. Buzaid A.C., Anderson C.M., Ali Osman F. et al. Biochemotherapy in the treatment of advanced melanoma: Clinical results and potential mechanisms of anticancer activity. Prog Anticancer Chemotherapy. -1997. — P. 68-87.

90. Buzaid A.C., Ross M.I., Balch C.M. et al. Critical analysis of the current American Joint Committee on Cancer staging system for cutaneous melanoma and proposal of a new staging system . J. Clin. Oncol. 1997. - Vol. 15. - P. 10391051.

91. Carli P.,et al. Campagna per la diagnosis precode del melanoma. Quanto e efficace lazione di «filtro» del medico di famiglia? G. Ital. Dermatol. Venereal. -1998.-Vol. 133,-№6.-P. 405-410.

92. Cascinelli N., Belli F., Santinami M. Instituto Nazionale per lo Studio e la Cura dei Tumori. Milan (Italy). Cutaneous melanoma. The role of interferons. D.Basle (Switzerlend): F. Hoffmann La Roche Ltd. - 1998. - №5. - P. 67.

93. Chang A., Redman B., Whitfield J., et al. A phase I trial of tumor lysate-pulsed dendritic cells in the treatment of advanced cancer. Clin. Cancer. Res.-2002.- Vol. 8.-P. 1021.

94. Chowdhury S. New approaches to the systemic treatment of melanoma / S. Chowdhury, M.M. Vaughan, M.E. Gore // Cancer Treatment Rev.- 1999. Vol. 25. — P.-259-270.

95. Clark W.H., Elder D.E., Guerry D. et al. Model predicting survival in stage I melanoma based on tumor progression. J. Nat. Cancer Inst. 1989.- Vol. 81.- P. 1893-1904.

96. Clark W.H., Goldman L.I., Mastrangelo M.J. Human malignant melanoma. New York eic.; Grune and Stratton, 1979.- P. 509.

97. Clark W.H., From L., Bernardino T.A. et al. The histogenesis and biologic behavior of primary human malignant melanoma of the skin. Cancer Res — 1969. -Vol. 29.-P. 705-726.

98. Cocconi G., Bella M., Calabresi F. et al. Treatment of metastatic malignant melanoma with dacarbazine plus tamoxifen. New Engl. J.Med.- 1992. — Vol.327.-P. 516-523.

99. Coit D., Rogatko A., Brennan M. F. Prognostic factors in patients with melanoma metastatic to axillary or inguinal lymph nodes. A multivariate analysis. Ann.Surg.- 1991.-Vol. 214.-P. 627-636.

100. Cosimi A.B., Sober A.J., Mihn M.C., Fitzpatrick T.B. Conservative surgical management of superficially invasive cutaneous melanoma. Cancer — 1984. -Vol.53.-P. 1256-1259.

101. Development of Metastatic Disease After Enrollment in the COMS Trials for Treatment of Choroidal Melanoma. Collaborative Ocular Melanoma Study Group Report № 26 Arch Ophthalmol. . December 2005. Vol. 123 № 12.- P 16391643.

102. Donnelly J., Liu M., Ulmer J. Antigen presentation and DNA vaccines. Am. J. Respir. Crit. Care Med.- 2000. Vol. 162.- P. 190.

103. Dummer R., Gore M.E., Hancock B.W. et al. A multicenter phase II clinical trial using dacarbazine and continuous infusion interleukin b2 for metastatic melanoma : clinical data and immunomonitoring. Cancer (Philad.).-1995.-Vol.75.-P. 1038-1044.

104. Egan K.M., Seddon J.M., Glynn R.J., Gfaugudas E.S., Aebert D.M. Epidemiologic aspects of uveal melanoma. Surv. Ophthalmol.- 1988.- Vol. 88- P. 372- 376.

105. EganK.M., Ryan L.M., Gragoudas T.S. Survival implications of enucleation after definitive radiotherapy for choroidal melanoma: an example of regression on timedependent covariates. Arch. Ophthalmol.- 1998. — Vol.116. — P 366-370.

106. Egger E., Schalenbourg A., Zografos L. et al. Maximizing local tumor control and survival after proton beam radiotherapy of uveal melanoma. Int. J. Rad. Biol. Phys.- 2000.- Vol. 51, №1.- P. 138-147. ,

107. Eggermont A.M. et al. Adjuvant therapy with pegylated interferon alfa-2b versus observation alone in resected stade III melanoma: final results of EORTC 18991, a randomized phase III trial. Lancet 2008. Vol. 372.- PI 17-126.

108. Finger P.T., Kurli M., Shulman J.P. Treatment of small choroidal melanoma. The Internet Journal of Ophthalmology and Visual Science.- 2007.- V.5.- №1.

109. Fitzpatrick M., Augsburger J., Koreishi F., Eage R. Complete ring melanoma of the choroids. Retina.- 1996.- Vol. 16, № 3.- P. 228-231.

110. Friendell H.L., Thomas C.I., Krohmer J.S. An evolution if the clinical use of a strontium- 90 beta- ray applicator with a review of the underlying principles. Am. J. Ophthalmol. 1954,- Vol.71, №1. - P. 25-39.

111. Gibbs P., Anderson C., Pearlman N. et al. A phase II study of neoadjuvant biochemotherapy for stage III melanoma. Cancer. — 2002, Jan 15- Vol.94(2).-P.470-6.

112. Glumac N., Snoj M., Hocevar M., Novakovic S. Prognostic significance of tyrosinase m RNA detected by nested RT-PCR in patients with malignant melanoma. Neoplasma. 2006. - Vol.53 (1). - P.9-14.

113. Hammer H., Olah I., Toth-Molnar E. Dispastic nevi area risk factor for uveal melanoma. Europ.J. Ophthal.- 1996.- vol.6, № 4.- P. 472-474.

114. Hansson J., Ringborg U., Lagerlof B. et al. Adjuvant chemotherapy of malignant melanoma. A pilot study. Amer. J. Clin. Oncol.- 1985. Vol.8. - P.47.

115. Hirabayashi Y., Hamaoka A., Matsumoto M. et al. Syngeneic monoclonal antibody against melanoma antigen with interspecies cross-reactivity recognized Gm3, a prominent ganglioside of B-16 melanoma. J. Biol. Chem.- 1985,-Vol.206.-P. 13328-13333.

116. Hoick D., Dutton J., Pendergast S.,Klintworsth G. Double choroids malignant melanoma man eye with apparent clinical regression. Surv. Ophthalmol. 1998. -Vol. 42., №5.-P. 441-448.

117. Keshelava V. Cancer: new aspects of diagnostics and treatment. Journal of the Balkan Union of Oncology.- 1996. Vol.1, - P. 141.

118. Kirkwood J.M. Systemic adjuvant treatment of high-risk melanoma: the role of Interferon alfa-2b and other immunotherapies. Europ. J. of Cancer. -1998. —Vol. 34.-P. 12-17.

119. Kirkwood J.M., Ibrahim J.G., Sondak V.K. et al. High and low dose interferon alfab2b in high risk melanoma: first analysis of intergroup trial E1690/S9111/C9190. J. Clin. Oncology.- 2000,- Vol.18.- P.2444-2459.

120. Kreissing J., Rose D., Simadler E. lod -125 — Brachytherapy des malignen Aderhaut melanoma. Klin. Mnbl. Augenheilk. 1996. - Vol. 209, № 1. - P. 7-12.

121. Kujala E., Makitie T., Kivela T. Very long-term prognosis of patients with malignant uveal melanoma. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.- 2003. Vol. 44, №11.-P.4651-4691.

122. Lipton A., Harvey H.A., Balch C.M. et al. Corynobacterium parvum versus bacilli Calmette- Guerin adjuvant immunotherapy of stage II malignant melanoma. J. Clin. Oncol. 1992, Feb. - Vol. 10(2).- P. 345-346.

123. Livingston P.O., Ritter G. et al. Characterization of IgG and IgM antibodies induced in melanoma patients by immunization with purified GM2 ganglioside. Cancer Res. 1989.- 49. - P. 7045-7050.

124. Lotze M.T., Kirkwood J.M. Current Cancer Therapeutics; 2-nd Edit. — C.Livingstone.- 1996.-P. 178-184.

125. MacKie R.M. Incidence, risk factors and prevention of melanoma. European Journal of Cancer. 1998. -V. 34,- P. 53-56.

126. Mauschot W.A., Von Peperzeel H.A. Choroidal melanoma: Enucleation or observation? A new approach. Arch. Ophthalmol. 1980 - Vol. 98 - P. 71 - 72.

127. Mauschot WA, Von Peperzeel HA: Choroidal melanoma: Enucleation or observation ? A new approach. Arch.Ophtalmol. 1980- Vol. 98- P.71-72.

128. McLean J., Foster W.D., Zimmerman I.E. Choroidal melanoma correspondences. Arch. Ophthalmol. 1980.- Vol. 98.- P. 1298- 1301.

129. Midena E., Belvis V., Tos A.P. et al. Isolated brain metastasis of malignant choroidal melanoma 27 years after enucleaton. Arch. Ophthalmol. 1999. - Vol. 117.-P. 1553- 1556.

130. Munzenrider J.E. Uveal melanomas. Conservation treatment. Hematol Oncol Clin North Am.-2001.- V.15(2).- P.389-402.

131. Mustafa A.S., Gogal T. BCG induced CD4+ cytotoxic T cells from BC G vaccinated healthy subjects: Relation between cytotoxicity and suppression Tn vitro. Clin. Exp. Immunol. 1987. - Vol. 65,- P. 255.

132. Nathan F.E., Mastrangelo M.J. Systemic therapy in melanoma. Semiri Surg. Oncol. 1998.-Vol. 14.-P. 319.

133. Nordlund J.J., Kirhudod J., Forget B.M. et al. Demographic study of clinically atypical nevi in patients with melanoma and companion subjects. CancerRes., 1985,-Vol. 45, №4.-P. 1855-1961.

134. Odashiro D.N., Odashiro A.N., Pereira P.R., Godeiro K., Antecka E., e^l: al. Expression of EpCAM in uveal melanoma. Cancer Cell Int. 2006 Nov 24; CE> z2.6.

135. Pack G.T. The pigment mole and malignant melanoma. Cancer. — 19(5:12* — Vol. 12.-P. 11-12.

136. Packard R.B. Pattern of mortality in coroidal malignant melanoma. Bi-J. Ophthalmol.- 1980,- 64(8): 565-575.

137. Pehambetger H., Soyer Y.P., Steiner A. et al Adjuvant interferon alfa!b2atreatment in resected primary stage II cutaneous melanoma. J. Clin. OncoL 1998. Vol.16.- P. 1425-1429.

138. Peter I Mezzacasa A., LeDonne P. et al. Comparative analysis of immunocritical melanoma markers in the mouse melanoma cell lines B-16, IE<L1735 and S91-M3. Melanoma Res.- 2001. Vol. 11, N1,- P.21-30.

139. Portoukalian J.,Carrel S., Dore J., et al. Humoral immune response in. diseasr-free advanced melanoma patients after vaccination with melanoma-associated gangliosides. EORTC Cooperative Melanoma Group Int. J. Cancer/1991. -Vol.49. -P.893.

140. Raivio I. Uveal melanoma in Finland. Acta ophthalmol (Kbh.). — 1977-suppl. 133.- 64p.

141. Ravindranath M., Hsueh E., Verma M., et al. Serum total gangliosid^ level correlates with clinical course in melanoma patients after immunotherapy wi-di therapeutic cancer vaccine. J. Immunother.- 2003. — Vol.26. — P.277.

142. Reddy S., Kurli M., Tena L., Finger P.T. Whole body PET/CT imaging: Detection of Choroidal Melanoma. Br. J Opthtalmol 2005,- V.89.- №10.- P. 12651269.

143. Rivers J.K. Melanoma. Lancet. 1996. - Vol. 347.- P.803-807.

144. Robertson D. Changing concepts in the management of choroidal melanoma. Am J Ophthalmol.- 2003- V.-136.- №1.- P. 161-70.

145. Rollings S. A., Birks C.W., Setter E. et al. Retroviral vector producer cell killing in human serum is mediated by natural antibodies and complement: strategies for evading the humoral immune response. Hum. Gen. Ther. — 1996.-Vol. 52, N7.- P. 619-626.

146. Rosenberg S.A. Development of cancer immunotherapies based on identification of the genes encoding cancer regression antigens. J. Natl. Cancer Inst. 1996.-Vol.88.-P. 1635-44.

147. Rubino J.T., Nellore R., Parmar B. Dynamic compatibility testing of DMP 840, an experimental antitumor agrnt. PDA. J. of Pharmacrutical Science and Technology. 1997. - Vol.57, №3,- P. 130-136.

148. Ruiz R., El-Harazi S., Kellaway I. Bilateral malignant melanoma of the choroids in the USA. Ophthalmologica.- 1998. Vol. 212, № 3.- P. 206-207.

149. Salmi R., Hoisti P. Effects of Roentgen irradiation on human melanoma metastases in the skin. Acta radiol. 2 Sec. Therapy, Physics.- 1987.- Vol.26.- P. 3740.

150. Schaft N., Dorrie J., Thumann P., et al. Generation of an optimized polyvalent monocyte-derived dendritic cell vaccine by transfecting defined RNAs after rather than before maturation. J. Immunol.- 2005. — Vol.174.- 3087.

151. Schuler G., Schuler- Thurner B., Steinman R. The use of dendritic cells in cancer immunotherapy. Curr. Opin. Immunol.- 2003. — Vol. 15. — P. 138.

152. Seregard S. Long-term survival after ruthenium plaque radiotherapiy for uveal melanoma. A meta-analysis of studies including 1066 patients // Acta ophthalmol.Scand.-1999.- V.77.-P.414-417.

153. Seregard S., Landau I. Transpupillary thermotherapy as an adjunct to plaque radiotherapy for choroidal melanoma // Acta ophthalmol. Scand.- 2001.- Vol.79, №1.- P. 19-22.

154. Shedlock D., Weiner D. DNA vaccination: antigen presentation and the induction of immunity. J. Leukoc.Biol.- 2000.- Vol. 68. P. 793.

155. Shields C.L., Shields J.A., Cater J. Et al. Transpupillary thermotherapy for choroidal melanoma. Ophthalmology.- 1998,- Vol. 105, №6. -P.581-590.

156. Shields C.L., Shields J.A., De Potter P. et al. Diffuse choroidal melanoma. Arch. Ophthalmol.- 1996.- Vol. 114.- P. 956-963.

157. Shri Hari S. Osteopontin Expression and Serum Levels in Metastatic Uveal Melanoma A Pilot Study. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2006 March; 47(3): 802806.

158. Singh A., Shields J., Shields C. Choroidal melanoma metastatic to the contralateral choroids. Amer. J. Opntnal. 2001. - Vol. 132, № 6. - P. 941- 943.

159. Singh A.D. Uveal melanoma: epidemiologic aspects/ Singh A.D., Bergman L., Seregard S.// Ophthalmol Clin North Am. 2005 Mar; 18(1): 75-84.

160. Spitler L.E. A randomized trial of levamisole versus placebo as adjuvant therapy in malignant melanoma. J. Clin. Oncol. 1991. - Vol.9. - P. 736-740.

161. Spitler L.E. Adjuvant therapy of melanoma. Oncology ( Williston Park). — 2002, Jan 16.-P.7-9.

162. Starzycka M., Romanowska Dixon B., Slomska J. Transpupillary thermotherapy combined with 106 — Ru as a method of managing choroidal melanoma. Klin. Oczna. - 2000. - Vol. 102, № 4. - P. 249- 252.

163. Stevens G., Carthy M. et al. Locally advanced melanoma: results of postoperative hypofractioneited radiation therapy. Cancer. — 2000. Vol. 1(88)-P.94.

164. Sylven B. Malignant melanoma of the skin. Report of 341 cases treated during the years 1929-1943. Acta Rediol. 1949.- Vol. 32, №1. -P.33-59.

165. The Collaborative Ocular Melanoma Stady Group. Mortality in patients with small choroidal melanoma. Arch Ophthalmol.- 1997. -V. 115(7): 886-93.

166. The COMS Outcomes for Medium-Sized Choroidal Melanoma. Fifteen Years of Work. Arch Ophthalmol. 2001 Vol. 119 №. 7, July.

167. Toes R., Blom R., Offringa R., et al. Functional deletion of tumor-specific cytotoxic T lymphocytes induced by peptide immunization can lead to the inability to reject tumors. J.Immunol.- 1996.- Vol.156. P.3911.

168. Toes R., Offringa R., Blom R., et al. Peptide vaccination can lead to enhanced tumor growth through specific T-cell tolerance induction. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1996. - Vol. 93.- P. 7855.

169. Toes R., van der Voort E., Schoenberger S., et al. Enhancement of tumor outgrowth through CTL tolerization after peptide vaccination is avoided by peptide presentation on dendritic cells. J. Immunol.- 1998.- Vol.160. P.4449.

170. Verma S. Systematic review of systemic adjuvant therapy for patients at high risk for recurrent melanoma / S. Verna, I. Quirt, D. McCready et al. // Cancer. — 2006, Apr 1. — Vol. 106(7).-P. 1431-1442.

171. Veronesi U., Cascinelli N. Narrow excision (1-cm margin): A Safe Procedure for thin cutaneus melanoma. Arch. Of Surg. 1991. - Vol. 126. - P. 438-441.

172. Vollmers H., Birchmeier W. Monoclonal antibodies that prevent adhesion of B-16 melanoma cells and reduce metastasis in mice: cross-reaction with human tumor cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1983.- Vol. 80. P. 6863-6867.

173. Wang F., Bade E., Kuniyoshi C., et al. Phase I trial of a MART-1 peptide vaccine with incomplete Freund's adjuvant for resected high-risk melanoma. Clin.Cancer Res.- 1999.- Vol. 5.-P.2756.

174. White V.A., Chambers J.D., Courtright P.D., et al. Correlation of cytogenetic abnormalities with the outcome of patients with uveal melanoma. Cancer.-1998.- V.83.- №2,- P.345-9.

175. Wiggins C.L., Berwick M., Bishop J.A. Malignant melanoma in pregnancy. Obstet Gynecol Clin North Am. 2005, Dec. - V. 32 (4). - P. 559-68.

176. Zimmerman L., McLean J., Fester W. Does enucleation of the eye containing a manant melanoma prevent or accelerate the dissemination of tumor cell ? Br. J. Ophthalmol 1978.- V62.- N6.- P.420-425.

177. Zimmerman L.E., McLean I.W. Metastatic disease from untreated uveal melanomas. Am. J. Ophthalmol. 1979 - Vol. 88 (3 PT1) - P. 524- 534.

178. Zybin D.V., Kotelevits A.G., Sologub V.K. et al. Patent N 6.972.194. Use of polyacrialamide gel for forming of connective tissue capsule in a mammal for cultivation of xenogenic and allogenic cells. — Washington, 2006.