Автореферат и диссертация по медицине (14.00.01) на тему:Клинико-экспериментальные аспекты разработки и применения контактных спермицидов (клинико-экспериментальное исследование)

$.7, ^2 91

' МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ Харьковский государственный медицинский институт

На правах рукописи КОСГГЕВА Людмила Николаевна

ЮШИКО-ЭКСПЕРИИЕНТАЛЬНЫЕ АСПЕКТЫ РАЗРАБОТКИ И ПРИМЕНЕНИЯ КОНТАКТНЫХ ОЕРШЩОВ (Клиюско-экспериментальное исследование)

14.00.01 - Акусерство и гинекология 14.00.25 - Фармакология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора иедицинских наук

Харьков - 1992

Работа выполнена на кафедре акушерства и гинекологии Харьковского государственного медицинского института, в лаборатории возрастной фармакология и токсиколога Всесоюзного научно-исследовательского института хиши к технологии лекарственных средств и в иммунологической лаборатории Областной станция переливания крови.

Научные консультанты: академик АН УССР, доктор медицинских наук, профессор В.И.1^>кяешо; доктор медицинских наук, профессор Г.В.Ободевцева

Официальные оппонента: чл.-кор. АН АШ СССР, доктор медицин еккх наук, профессор И.А.Мануилова; доктор медицинских наук, профессор В.В.Щербакова;

чл.-кор. АН УССР, доктор ыедкцкнекнх наук, профессор С.М.Дроговоз.

Ведущая организация - Киевский ордена Трудового Красного Знамена НИИ педиатрии, акушерства и гинекологии т. Героя Советского Союза П.И.Буйко.

Задати состоится "_" __1992 г. в час.

на заседании специализированного совета Д 088.23.02 яря Харьков»« государственной иадицкнекоы институте по адресу: 310022, г. Харьков, пр. Лендов, 4.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Харьковског< государственного медицинского института.

Автореферат разослан " [_" Gf&Ctf-fi 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета

каед. мед. наук, доцент В.В.Кислица

. I

I 3

'1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

сертамид/

уальность теми. Вагная роль в современной контрацепции принадлежит фармакологическим средствам, составляп-шш основу медикаментозного способа предохранения от беременности.

К основным препаратам, применяемым в настоящее время, относят препараты обаего (главным образом - гормонального) и местного (в основном - спермицидаого) действия.

Первая группа, обладая высокой активностью, вместе с тем вызывает разнообразные, иногда тяжелые побочные явления и часто имеет противопоказания. ь

Особую значимость приобретает применение препаратов местного действия в послеродовом периоде у женвин, которым противопоказаны гормональные и внутриматочные контрацептивы, а также у кенаин, редко или нерегулярно живущих половой жизньв. Многие из спермя-цидных средств предохраняет от заболеваний, передасзихся половым путем. В последнее время появились сообщения о том, что некоторые из них могут предупреждать возможность развития венерических болезней, СЩДа. В связи с этим поиски новых препаратов спермкцид-ного действия являются актуальными в настоязее время.

В отечественной номенклатуре фармацевтических препаратов имеется всего три спермицида: Контрацептан-Т (вагинальные суппозитории), таблетки Трацептин и Граиицндииовая паста, содержапие далеко небезопасные средства (хинозол, бсрнуп кислоту), которые при относительно невысокой спершщидной активности вызывают ряд серьезных побочных эффектов. Скуден ассортимент лекарственных форм, в которых удобно применять местные контрацептивы.

За рубедом эта группа спермицидных средств значительно богаче и по действувдим веиествам и по лекарственным формам, таким как быстрорастворимые таблетки, иарики, геле, кремы, мззи, аэрозоли вводимые с помоаыэ кприцев, тюбиков, губок, тампонов и др.

Такое состояние этого важного раздела отечественной медицины, а также социально-экономическая значимость проблемы послузнлн основанием для проведения поиска противозачаточных средств местного действия.

Разрабатывая это важное направление, мы считали целесообразна предложить удобные лекарственные формы из лекарственных ве-зеств, сочетающих сг.ермицидное действие с другими вагкыми видами фариакотерапевтическсй активности по отношение к воспалительным заболеваниям слизистой сболсчки влагалияа, вызвашем инфекцией,

поскольку воспаление влагалища является одним из наиболее распространенных заболевания женской половой системы.

В связи с тем, что возбудителях:« кольпита негонококяовой этиологии является: влагалищная трихомонада, грибы рода кандида, коринебактерии, гемофильная вагинальная палочка, гарднелла, хла-мидии, вирус генитального герпеса и др., а также различные неспецифические патогенные бактерии (эпидермальныЯ стафилококк, энтерококк, негомолитический стрептококк, клостридии, клебснелла,вульгарный протей, скнегнойная палочка), было обращено внимание в первую очередь на препараты, обладавшие антидаразитарной, противогрибковой и противовирусной активность«), как синтетического, так и растительного происхождения.

Данные литературы свидетельствует о той, что большинство из них оказывает антноксидантное действие, которое изменяет обмен липидов, уменьшая количество перекисных соединений к свободных радикалов, что и приводит к повреждение микроорганизмов,вирусов и грибов. Известно, что спермицидные препараты аналогичным образом повреждает мембраны спермиев.

Из синтетических соединений для исследования нами подобраны применявшиеся ранее препараты, которые способны оказывать противо-трихомонадное, бактериостатическое к фунгицкдное действие.

К ним отнесли нитазол, катамин и декаметокскн (нитазол как противотрихомонадное средство, катамин - антисептическое средство, декаметокскн - антимикробное, антибактериальное и противогрибковое средство). Использовали их стандартные концентрации. Борная кислота к хинозол применены как препараты сравнения.

Из растительных препаратов отобраны вещества, обладающие противовоспалительным и антибактериальным действием: эфирные масла лаванды и сосны, терпеноиды солодки (глкцирам), суммарный л олифе-нольный препарат из соплодий ольхи,находящиеся в стадии изучения.

Работа выполнена в соответствии с общесоюзным научным планом Научного Совета по акушерству и гинекологии АМН СССР, является фрагментом комплексной темы НИР Харьковского медицинского института (шифр 0.69.06, * гос. регистрации 01860021100).

Цель и задачи исследования .Целью настоящей работы явилось изучение закономерностей в изменениях со стороны женской половой системы и спермы под влиянием различных контактных спермицидов, разработка предложений к создание новых противозачаточных средств, обладавших в отличие от существующих

бояьзеЗ эффэгтавносгьэ, иенизш раздрагакзш действием,положительным влияние!! на обычцуп флору и слизистуэ оболочку влагалшад.

Dpa выполкекга работы б на поставлены сяедуюгиэ задача:

1. Изучить вяшнко указанных виз веггзств на иорфо-физяоло-гечзсеоэ состояние спершгев.

2. ¡Ьучзть вгкяззге нитаэола, зпнозола, Езтакзна, декакеток-спиа в гавЕВДозого шсда ты вктро на ультраетрукгуру сяеретев ча-

■ яовека.

■ 3. Ессхздозать гас влг-саа'ца вкчунологичесвде свойства церЕз-safibHofl слиза у eshseh с кориальккц игнструальшз цикдоа. '

4. Нзучзть вхпспга гшозода, нятазола и дегакэтсгсккз пя snpyc С2ВДа.

5. Отобрать по тестги выявленного спецкфячесЕога дейстгяя, уокскчносга л по адекпатноЗ пряазнзнио лекарственной форкы нако'о-лео порспзЕТНвнкэ весоства для дальнейшего углубленного доклзаи-ЧОСЯОГО НССЛеДОВЕКХЯ.

6. Цроззста Езученке контрацептивного действия на-тазола а яававдозого из ела а влияние их на репродужтяЕкуз функция у гэсвот-нкг.,

3. &учзкзе вдштня 2,5 2 суспеязяя гштззола я лавандового tiacsa su длительность бзрегйзкома кркс я постяатальное рагвзотэ пергого вохогеиля роздекяас sssorníc.

9. Прозости гсслэдозанля по нзучензэ а^тагешого дгйстзяя нятазола я ладггндовэм шела.

. 10. Прогзста Bziscrcacsya впробацгэ нптззэга. •

Н а у ч н а я н о з з з я а . Епервкэ обоснована а зхспорк-аентаяьяо доказана целесообразность яоасга ксяиятншс спер1Кцздов а лекзретвежйзг фора костных вон^ргцептквоз, прказяяеггых в ззвясн-иостн от сблего статуса, состояния слпзлстоЗ оболочка a f.sopa вла-гаджгз. Dpa этом рззвз?о подогениа о кзобходжостя прщггкекня контактных контрацептивов, обладсеттг протгвогаадточнькя а определегг-шаа «рааавтнчесЕЕкя свсйствгкз, что содействует резекет проблема профилактика'. некеланной барекенноета -в накоторкг габояевакзЗ.перэ-дапзпеся полови путем.

Впервые, изучено контрацептапгоэ дейстсгга нзтазола.катакзя отечественного врбзззодства, ааваедогого »зела, декагзгоасяна, а тааае получены сравнатеяышэ данные об их сперкгцвдаай автагиостз п нгхакязке двйстваа сперккцпдкьЕ вегастз.

ПрсЕедекагэ.псслздованяя а-вксперн^зятальккэ работы возвоггла

установить повреждающее действие декаизтоксина, нитазола ихинозо-ла на вирус СГВДз.

Изучено влияние контактных сперашцидов и рорыональкых контрацептивов на величину рН эндоцервикальной слизи..

Впервые получены сведения о величине окислятельно-восстановя-тельного потенциала (0ВП> шейки като л различные фазы кенструаль-ного цикла, а также вря применений различных катодов Еонтрацепция.

На основании данных литературы и собственных исследований разработана классификация противозачаточных средств местного действия.

Практическая значимость работы. Полученные новые данные о спериицвдкой активности препаратов»применявшихся ранее как противотрихомояадные, бактериостатические в фунгицидние средства, ршаиряат перечень попзаний к юс првыенеииэ и позволяют дифференцированно назначать их жензэшам с кольпитами различной этиологии.

Полученные данные научно обосновывают применение наиболее активных спермицидных веществ в медицинской практике в предложить практические реком ндчцин для разработки новых местных контрацептивных средств.

Использование новых противозачаточных препаратов будет способствовать снижению числа абортов я уменьвешеэ количества листков нетрудоспособности, связанных с производством искусственных абортов, а также послеабортишн ослозшеюизя, что в конечной счете будет благоприятно влиять на организм катерн. Пркыенетае новых контрацептивов имеет значение для планирования семьи, что включает в себя и безопасное материнство н наличие только геланных детей, в. сохранение здоровья в благосостояния семьи. Получено разресение к кедицякскому применению суппозиториев и аэрозоля нитазола с противозачаточной целью.

Ожидаемый экономический эффект от применения препарата Нита-зол на Украине, как противозачаточного средства составит 330,3 тыс. руб. в год.

Апробация работы. Основные полоаения работы докладывались на Всесоюзной конференции "Оценка фармакологической активности химических соединений: принципы и подходы"; на областной юбилейной конференции, посвященной 70-летию основания Харьковского НИИ эндокринологии и химии гормонов; на У1 Республиканском съезде фармакологов Украины; на И Украинском съезде анатомов и

О

гистологов, экбриологов а топографоанатонов; на научно-практической конференции, посвященной современным методам лабораторной диагностики вирусных я бактериальных инфекций, включая СШЩ.

Основные положения, выносимые на зениту.

1. Среда препаратов растительного и синтетического происхождения выявлены слермкцидные вещества, которые помимо терапевтического оказывает и контрацептивное действие.

2. Изучены некоторые аспекты механизма действия различных спермйцядегах препаратов.

3. Обнаружено повреядагаее действие на вирус СПИДа хкнозола, кктаэоса я декаметохсяна.

4. В объеме требований х домяиячесхочу язучеш® препаратов Приведены доказательства отсутствия отдаленных последствий - мутагенного, тератогенного я эхбряотовсяческого действия при применения кятаэола и лавандового масла, а также отсутствия отрицательного влияния на длительность беременности крыс в постнатальное развитее первого поколения рождегсшх тавотных я репродуктивную функцвю крыс.

5. Нктазол в двух исследосанкюс лекарственных форхзх явился клинически эффехтавнъи противозачаточны» средством.

6. Сцеяаньыборновыхобъекто« для кзстных контрацептявови рекомендация по дальнейэеку размтив направления по соэданяа эффективных местных контрацептивов ■ новых лекарственных формах: аэрозоле я суппозиториях, свкдетельствугакх о приемлемости препарата в качестве местного контрацептива.

Б у б я я к а ц я я результатов яеследо-е а и I I. Основное содержанке диссертации отражено в 25 работах, а т.ч. одном авторском свидетельстве.

Объем я структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 255 стр. мавянопясного текста. Состсит из введеияя, обзора литературы, 7 глав собственных исследований, заключения, практических рекомендаций, выводов я двух приложений. Работа иллюстрирована 52 рисунками я 48 таблицами.

Список литературы включает 332 источника, а т.ч. 192 иностранных. / •' .

а

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Матеркалы и методы исследования

На основании анализа имевоихся в литературе сведений о фармакологических свойствах некоторых синтетических и растительных веаеств и руководствуясь главной концепцией работы - изыскать активные местные противозачаточные средства, сочетэтаие спермицид-ное действие с противовоспалительным и антибактериальным эффектом, - в качестве объектов исследования были отобраны синтетические производные тиазола (нитазол), четвертичнв аммониевые соединения (декаметоксин); вещества, содержащие терпеноида (глицирам.живица, эфирное масло лаванды и полифенолы - сухой суммарные экстрам соплодий ольхи. В качестве препаратов сравнения использованы приме-т няадийся в отечественной медицине спермицидный препарат хинозол и аналог зарубежного спермицидного средства, синтезированный в СССР катамин (бензалконий хлорид).

Для реализации цели и решения поставленных в работе задач исследования были шоведены следущие исследования:

1. Изучение в эксперименте влияния контактных спермкгидов -нитазола, его растворимой соли К-нитазола, масла лавандового,ка-тамина, декяметоксина на показатели спермограммы, ультраструктуру спермиев, иммунологические свойства цервикальной слизи с целы выбора наиболее активных.

2. Изучение противозачаточной эффективности и отдаленных последствий применения двух отобранных контактных спермицидов -нитазола и лавандового масла.

3. Изучение изменений ультраструктуры лимфоцитов крови виру-соносителей СПИД при взаимодействии нн витро с фармакологическими средствами контрацептивного действия..

4. Клиническое изучение нитазола в двух лекарственных формах: аэрозоле и суппозиториях в качестве контрацептивного средства у женщин.

Спермицидное действие исследовали на эякуляте человека с использованием различных методов исследования: морфологических, иммунологических, биохимически, физиологических, электронно-микроскопических.

В качестве контроля использовали нативную сперму, разбав-Лбннуь Iг Г сбалансированным солевым буфер м - средой 199. Для исследования были подобранъ- применявшиеся в медицине препараты,кото-

рва способны оказывать протаготряхсястадяоо, бакториостатпчесаоз а фуктгцадясе дзйстгяэ.

Иорфозогтгсszs ясогадогалая проводила под кикросаопси Вползи с осветатзлзм 0Я-22-ЗШ оря уваютггпш х125, х2С0, х400. Количество cnepïzes в I ся поясяятдазла s гакгре Горяэва.

Ifei тзунологичзсЕкх Есслгдозакиях яспользоездн реаедкэ им-кобилягырш спгрзеэ Р.йэо.теЕ.'З { я. В. Scbill, в. Frits, 1976), реягцрэ гагрозгхэтпетдка СзйЗзргз ( s. Prieberg- , 1974).

Еаоясочзсœe мтодц гссхздо2а!ия вггзчзля о себл опрэдехе-hss в ъяяуяптз Срузтсгы (З.З.Взсяльэга, В.З.Шабзлэ!, J934) я об-пгвП ахтгеноета-догздрегенаэ ( G. David, P. CzyglUt , 1977).

йзззолегтезеггэ теста осаоЕигзтась m еярздглегггя времзкя перегзЕашм сперйнез (В.К.Ечговзкоэ, 1962; С.П.Сердвя, 1977) а катода контакта спзр^н с царезгадьиой сяазьо (В.П.Грегнко и ссззт., IS33).

Проведано ззуззпаэ згзетяя спзрггэддюд средств на ультраструктуру спзртааз и еятагезкого детер'-гаанта вирус СПИД с поаозьэ электронной шкрсскопкя (В.Я.Карулу, I9S4) я ход галун офзр:!ентко-ro oiacaaa (ОА) пря юетвленяа ентатсл s вирусу СШЩ и на cajsy структуру п^уноглобуазоэ (Г.Зрзкзль, IS37).

Hsirî рззрзботаа бзшгш ецеякэ погрездзяевго действия кз уяьтраструзтуру enspussa азуп?:пяя соггтрЕдгэтазоа {табл. I).

яжфо4этоэ проводили из езяозяой грогз (В.Н.Ззргц-сая, 1ШЗ). Конгргцептагаса дзЕстзвк*. изучалось ira аэрозоля гята-• зола я яагаэдовзго кгы», о?дггзк:!Ш яоезэдетаяа - из сусяеязза кятгзога п цодь^га с^зряез гледз .таггагг*. О кает оадмшасг послэдстгкЗ судам по результатам взучекза кйрзотокскчгского,!^-тагеиного дейеггая, а так» элясаз кз рейродуктзк^р йузгцяз.

Эзсяерякэнталыа» псслздосзнгя Ерозедегэ ка рззлкгсзых объектах (дрозефяяы, гага, гр^-сн, кроляхя).

Г^за азучскха кеятрацептиЕЯоге дайствзя аэрозоля пятазогз я лавандового ¡¿зела всей секхгн крис. ояытааг rрупп в стадий гетруез йнтравагииальло сэодяхя всследуекке препарата кз проткзаккз трех дней с последугяеЯ дзспадатачасовей подездгой сзнск s саедан в соотносят« 4-6 s I. Авалогкчнь-з подсадки прободала на протязенки 5 астральных дакяоа - аезго цггть раз кз.кзздув catsy (И.Й.Ёазрадге, 1974).

йсследовгваэ отделепшге последствий врояодгля соггзено кэто-дячэскяи рейсяандецака Сзржсо^тета 13 СССР (1931, 1965).

Таблица I

Балльная оценка изменений ультраструктуры спермкев человека в эксперименте

Элементы и уль- Б а л л ы

траструктура спер-миев человека I 2 3 4 5

Чехлик и цитолем- Локальное от- Истончение,раз-

ма головки

Ядро, ядра

хроматин

слоение чехлиха, рыхление, рагво-цитолеммз интакт-локнение чехлика, ная цитолемма кнтакт-

ная

Появление мелких Деформация ядра, вакуолей в ядре появление «едких и крупных вакуолей в ядре

Вздутие и локаль. ное повреждение чехлика¡локальный разрыв цито-лемны

Повреждение ядерной оболочки .участки разрыхлений зсроиа-

-Отслоение и сетчатый распад чехлика; разрывы цито-леммы

Отек ядра и полное разрыхление хроматина

Полное разрушение чехлика, лизис ци-толеммы

Волокнистая

деструкция

ядра

Промежуточная часть и ее цитоплазма

Умеренное набухание цитоплазмы;- ц:.ТОЛемма ингактная

Умеренный отек, деформация про- ультраструктур, межуточной части; локальное пов-складчатость ремдение цито-цитолеммы леммы

Отек и набухание Вакуолизация Зернистый рас-------- ультраструктур,пад ультраст-

разрь-вы ци?о- руктур, лизис леммы цитолеммы

китохондрин про- Просветление межуточной части ыатрикса орга-нелл

ЦикротрубочковыЯ компонент промежуточной части

Микротрубочковый компонент и циркулярные волокна хвостовой части

Пятнистое просветление

Пятнистое просветление

Умеренное наб; кие органелл мантация крист

Частичная фрагментация

Частичная фрагментация

а- Набухание в ча-аг-стичнал вакуолизация органе-л, фрагментация крист

Частичная фрагментация и локальный лизис

Частичная фрагментация и локальная деструкция

Полная вакуолизация ор-ганелл,деструкция крист

йрагмонтация и частичная деструкция

Фрагментация и деструкция

Разрушение митохондрий с образованием хлопьевидных масс

Полное разрушение И ЛИЗИС

Полное разрушение и лизис, волокнистая трансформация

Ifen исследования хромосошьае аберраций в клетках костного нозга ымгей кетафззкыэ пластинка готовили по методике И.В.Саксц-кого, В.Н.Фокенко (1979), кодифицированной Г.Н.Золотаревой и соавт. (1978). В основе дашого гкзтода яехнт регистрация видимых хроаосоц э постного ыозга еыпзй на стадии метафазы (?ord,

19о6).

Уч&т дсккнактких летальных нутаций проводили по стандартней методике, изяазезикой з кзтодичеезих рекомендациях по проверке мутагектгг свойств у иоэь-х лекарственных препаратов (1931).

Классификации изиекекяй в закладках костей, кзблпдэешд в окрашенная препаратах, прозодчлп с неподьзованаеи даипгт Л.М.Коткна, B.C.Pemnu (IS73), Н.М.Сгюльнпкоэой и соавт.(1932), Saiaau et-al. (1932).

При анализе получение данных йсчодьзоеяли дополнительный контроль - "обобщенная" - данные, полученные' на :штактгагх гквот-ных, использозавжхся в качестве контрольных э предадуиюс исследованиях.

При изучении влияния 2,5 % суспензии нитазола и лазандозого мзела на постнатальяое развитие пераого поколения рожденное гизог-кых, у всея крыс исследовали основные показатели развития: кассу тела (в дикяхэше), сроки открытия глаз, уяей, появление шерстного покрова, прорезывайте резцов, опускание семенников, открытке рла-галкза, а та ко регистрировала пол и Ео«гчестго родявзяхея к £ы-хивдкх крысят кзадоЯ группы (И.П.Западная и соавт., 1983).

Исследование ШС красят первого поколения проводили по веге-татнягья реакцягга (Д.А.Кулагин, В.К.Федоров, I9G9; uomaa et т., 1974).

Выбор доз для проаедеяия исследования по изучении мутзгекной и экбряотоксическоЯ активности препаратов проводили согласно соот-ветствуэгйя методическим рекомендациям (1281, 1936), исходя из данных острой токсичности.

Б опытах по асследозашш влияния. 2,5 % суспензии нитагола к лавандового »гасла- на постнзтальное развитие крысят первого поколения препараты вводили сайкам интравагинально в высвей дозе.

Всего в опытах было использовано i960 крыс, 35 кьяеЯ, ПО кроликов.

Б каждой серии епытоз подученные результаты сравнивали с кнтзкттз контролем. При изучении контрацептивного действия вводили .исполнительный контроль - основу аэрозоля.

Полнота исследования действия разных препаратов по описанным выше методикам зависела от особенностей физических свойств препаратов к степени их изучения по данным литературы.

Вое полученные цифровые данные обрабап зали статистически, используя метод Стьюдента (Н.Н.БеденькиЙ, 1963), метод непараыет-рической статистики - У -критерий Вилкоксона-Манка-Уитни (Е.В.1>блер, А.А.Генкин, 1973).

Во всех случаях различия считались достоверною при Р 0,05.

Данные об использовании лабораторных екеотшх представлены в табл. 2.

Окислительно-восстановительный потекдаал шейки иажя у ген-вин измеряли по методике Ы.Е.РайскхшоК, (1970), рН зндоцервикальной слизи и вагинального содержимого определяй! с псиосья универсального ионокера ЭВ-74 (И.Я.Скуя, 1371).

Проведенными нами исследований! установлено, что сперысаг-глстинируюзих, спермок1£.;обилкзирукз:зс ангиспергадькюс скглтел с помоаья ихтиологических тастоз в отавной сперас выявлено по было.

После исследования катизной сперги в каздыЗ из зякулятов прибавляли изучавшиеся препараты: 0,02, 0,1 % раствор дгкаьиток-сина, 0,5 % раствор катамина, 2 % растгор китазола и зфкрнэе масло лаванды. Концентрации были оптимальный« для ингибировадоя под- . вижных спермиеь.

Объемное соотношение спермы к нееяедуеаа зшачисюас веесстз составляло 1:1.

Стандартным препаратом являлся 0,5 % раствор хккооола обычно применяемый с противозачаточной цельв.

Исследования действия этих препаратов проводились в момент их добавления и через 20, 30, 40, 60 секунд; 5, 10, 15, 20, 60 минут, а также спустя 2 часа.

При прибавлении к 0,5 мл нативной спермы 0,5 мл водного раствора хиноэола и смешивании методом взбалтывания, рН емгеи составил 6,40+0,13, подвижных, активно-подвижных и живых спермиев не было, о чем свидетельствовало, в частности, время их переживания, которое равнялось 0,48+0,03 мин.

В случае прибавления к Нативной сперме 0,02 % раствора дека-метоксина установлена нулевая величина показателей, характеризующих оплодотворяхщуи способность по сравнению с исходными показателями, что связано с потерей сперыиями жизнеспособности, рН составил 6,55+0,17. Время переживания в среде 0,56+0,02 мин.

Таблица г

Некоторые данныэ об использованных оксперикентадышз: гавотних

» Ш1 Тест Препарат Вид ¡елзотиых Количество кивотнкх Касса ки-вотных Л киля

; 2 3 4 5 6 7

I. контрацептивное действие Нитазол Лавандовое касдо Крисы кролика крысы срол;ш1 60 56 00 54 0,19-0,20 2,5-4,0 0,19-0,20 2,5-4,0 Вистар Шиншилла ' Вистар Шинаилла

2. Цугагеккое действие:

2.1 . Доминантные детальные мутации в зародыаевых клетках Нитазол Лавандовое касло ИнтактныЯ контроль крысы крысы крыс 330 330 330 0,16-0,18 0,16-0,18 0,16-0,18 Вистар Вистар Вистар

2.2. Хромосомные аберрации в ыле+кгх костного мозга Нитазол Лавандовое из ело ИнтактныЙ контроль иызи (ШВИ ивой 15 15 5 0,022-0,025 0,022-0,025 0,022-0,025 С 57 ВТ/6 С 57 В1/6 С 57 В1/6

2.3. Рецессивные летальные мутации Нитазол * Лавандовое.наело дрозофила дроздофила • - 11-5 { Ваас ) Б-32 Ц-5 ( Ввоо ) Б-32

I 2

3

4

3. Эмбриотоксическое Нитазол крысы действие Лавандовое масло крысы Интактный

контроль 1фЫСЫ

4. Исследование влиянич на 1-е поколение

Нитазол

Лавандовое тело

Интактный контроль

крысы (самки) крысята крысы (.сайт) крысята крысы (самки) крысята

Репродуктивная функция

Нитазол крысы

Лавандовое масло крысы Интактный

контроль крысы

Итого

Продолжение табл. 2

5 б_7

100 0,1(М>,20 Вистар

100 0,18-0,20 Вистар

20 0,18-0,20 Вистар

15 0,18-0,20 Вистар 159

15 0,18-0,20 Вистар 151

15 0,18-0,20 -V Вистар 153

30 0,18-0,20 Вистар

30 0,18-0,20 Вистар

30 0,18-0,20 Вистар

2113

В то ге время при энвялибрацил 0,5 ыл спермы с 0,5 ыл раствора 0,1 % декзкэтокскна время переживания спермиев составляло 0,27+0,01. Они погибали за время эквилибрации с раствором. Следовательно, 0,1 % раствор декаметоксгаш вызывает почти мгновенную гибель cnepiv.es.

Влияние 2 % рзстЕСра нитазола, по данным сперыограммы, было следугаии: врем переживания сперетев составляло 0,47+0,02; рН оставался в пределах исходного показателя - 7,53+0,08, жгие клетки отсутствовали.

В случае прибавления гС.нетивной спер::е 0,5 % раствора катами-на отмечено существенное, гигибирование окислительных процессов, характеризующих аизнеспособность спермиев: зремя пэрехивакня спермиев составляло 0,35+0,23 дан. Спермин логийги почти ¡егиовенно. рН снеси сперкпев и препарата оставался практически неизиенелньа! по сравнения с нсходнки показателем эякулята: 7,23+0,03. Это свидетельствует о тоа, что катамин в отличие от хкнозола и декаиеток-сина не влияет на рН среды эякулята человека.

Иод действием лавандового масла на эякулят, спержи также претерпевали кзмгнэипя. Ереия перевивания спергаев по сравнения с нормой сократилось до 3,24+3,49. рН составил 6,21+0,10, редукции кетиленового синего нз происходило.

Сри постановка тестов контакта с цервккзльноЯ слизь» зо псех случаях при прибавлении изучавшихся пезеств были получены отрицательные результаты (сперся но гтрог.'ияагя в цервккальяув слазь).

Как видно из получегешх нам» ляпнкс, наиболее сильгаа сперии-цидика дейртзяеа обладал 0,1 % декакетсксзя, прп экзихпбр&цки с нативноЯ сперйоЯ вргяя переетваикя спермиев составило 0,27+0,01 кан. Остальные препарата такге вызывала гкбезь сперва в за период до I мин, за исключением завзндозого гпсга, аналспгтаоэ действие которого проявлялось через 3,24+3,49 ейзд. Как известно, в случае норао-спермин время переглза'нзл спзркгев т витро пропорционально времени редукции «зтлленозоЯ синя. Эта зависимость свидетельствует о высоком уровне окислительно-восстановительных реакций, следовательно, о нормальной функций китохондрий.

Как ку установили, в случае прибавления спергащидных средств каблодалось достоверное снижение времени перезнваяия сперцяеа ин витро в сравнении с нораоелер^ей и отсутствие редукции вэтяленового синего. Это свидетельствует о прекращения ферментативной деятельности клетки, и в частности о орехразекки анаэробного гликсязза в

слермиях человека при воздействии спермицидных веиеств. По-видимому, подавление ферментативной активности клетки, которая катализирует перенос электронов и протонов от субстрата на специфический акцептор и привело к прекраяешш гликолиза, ч, следовательно, и к иммобилизации спермиев, к резкому сникенню их жизнеспособности.

При этом, живых клеток не было отпечено, и редукция котилено-вого синего не осуществлялась.

Несмотря на *о, что под действием лавандового масла время переживания спермиев было больше 1 ши я составило 3,24+3,49 юш, при постановке тестов контакта спер-ш с цервакалькой слизьв отрицательные результаты были получены во всех случаях, что свидетельствует о возможности использования лавандового касла в качество контрацептивного средства.

Сдвкг рН в кислую сторону был выражен при добавлении растворов хююзола, досанетокскиа в лавандового ъасла, что таюе способствует, под действием указании: препаратов, обездвиживание сгер-киев.

При прибавлении катамина и на та зола данные показатель существенно не изменялся. Следовательно, в зтюс случаях механизм деКст- . вия катамина к иитазола отличен от предыдущее препаратов.

Ори прибавлении всех средств изменения времени редукции метиле-нового синего не происходило.

Процент подвижных, активно-подвижных и гшвых сперниев после добавления изучавшихся препаратов не кассировался нз-за короткого времени переживания клеток в среде, которое в основном, за исключением включения в нее лавандового масла, составило до I мин.

Таким образом, проведенные тесты указывает на полное прекращение движений сперниев и отсутствие проникновения спермиев. в цервн-. кальную слизь.

Количество фруктозы, содержащейся в сперме, является показателем, позволяющим судить об источнике знергии для движения сперниев и характере андрогенной функции яичек.

После эквилибрации сперниев в среде сперннцлдаых средств содержание фруктозы оставалось на том же уровне, что и до эквилибрации. Это свидетельствует о прекрааении энергетического метаболизма в клетках. Прибавление сперющидов приводит к полному прекращению фруктолиза, а следовательно, и к гибели сперниев. Проведенное нами экспериментальное исследование по определений жизнеспособности сперииев дало возможность установить, что под влиянием испытанных

спершаддгад вегзстз спергзш терстт оплодотворявдуп способность. Вреая переживания ах в среде со спер1ацидтзга средстзаки было нулевым.

В результате анализа полученных данных установлено, что дека-кетохсгн, кзтаккн, нитазол, хинозол и гфирное лавандовое масло обладает спермщцднш действием. Но наиболее эффектианъигя из них оказался 0,1 % раствор де к' чет оке ям, исходя из времени перегива-кмя спергдгв, которое составило 0,27+0,01 им. В убыззпзеи порядке следовала растворы: 0,5 % катааина, 2 % нзтазола, 0,5 % хино-зела, 0,02 % деаакггогепиз я еффное лавандовое кзело.

Учзясая результаты вызеспасанных исследования, кы провели нзучетз ультраструхтуры спср^яеа при эквияябрации кх в растворах спер^щадгая: ерсдстз, а такта со средой 199.

Результаты прозедешягг ¡за исследований позволили установить, что улътрзструхтура спер^зз эякулята человека претерпевает зна-чят2яыс.'з кг^пегпш з процессе 40 секундной эквилибрация с анали-зируегзгя препаратами, ебяадгежки спериицвдньа действием,согласно суягствугган требования!, предьявяяекуа к соврекенкпм контрацептивам.

Результаты элезтрскзо-еткросгопйчесюсс а морфоматричесЕЖ пссгедосагаЯ пеззолзл еьякггь опредзлиппя отгячгя в кзха:изаэ спер.'г^гдг-гого действия изучешглс леязретвенкж средств.

Установлено, что кзпбельгз* погрегдапгм действаеа на аппарат перегягенйя сперк::ев челезега сказызаэт дсксиэтогсгл: (18,5 балла) и клтазол.(23,4 балла). Огазалось, что эта контрацептивы вызывает кзобратпиыз поврегдеши китохокдриалыгаг структур прекз-зуточноЯ части, цктолегзои гавротрубочгового компонента прОкзяу-точиой а хвостовой частей сперкиев.

Известно, что генетическая наследственная шфоршщкя локализовала в хрекаткне ядра, которое расположено в головке сларкизз. Последняя надеято згзяеяа от воздействий неблагоприятных фзк.ороз среды специализированной структур0" - чехликом.

Диглиз морфологических данных показал, что китазол (6,6 балла) и ххнодоя (4,7 балла) обладопт выраженный поврездаютм действием прешуаествекно на генетический аппарат сперкиев. Эти препараты вызызавт разрыхление хроцатана, рзэругение а отслоеняе чегдика, позреаденяе ядерной оболочки.

"Точкой" пряясггния катамииа. являэтея прекцупествегшо орга-недзы ггроаззуточной части свершав. При эквялибрацка кзтампиа с

эякулятом спермиев, в последних определяется отек, набухание к вакуолизация митохондрий,выявляются локальные разрывы цитолеммы.

Сперикциднш свойства' лавандового масла проявляются в сояв- .-. леник умеренных изменений уЯьтрасгруктуры всех компонентов и органе лл спермиев эякулята; локальное отслоение и разрыхление чехли-ка, деформация ядра, умеренное набухание митохондрий, частичная фрагментация микротрубочкового аппарата.

Следовательно, предложенная наш балльная оценка поврезадающего действия изученных контрацептивов позволяет:

выявлять "точки" приложения - ультраструктуры спсрмкав,преимущественно подвергающиеся деструкции под воздействием ксследуе-мых препаратов; . •

проводить дифференциальный отбор лекарственных средств в зависимости ст специфики их воздействия на ^децхализированные структуры спермиев;

отбирать среди множества лекарственных препаратов те,которые обладают наибольшим сперкицидным действие» и ншшеньшш побочные эффектом.

Приведенные цифровые данные в виде балльной оценки свидетельствуют о том, что лавандовое масло, катадея, хянозоя, ни та зол, декаметоксин в неодинаковой степени извзнявт ультраструктуру раз- . л/чных морфологических образований спермиев человека. Это,вероятно, связано с тем, что механизм действия изучавшихся раетвороэ на сперши различен. Повреядавдее действие среда 199 можно,

прежде всего, связать с осмотическим аффектом, ь действии хи-нозола ведущим фактором явилось изменение митохондрий в промежуточной части клеток, в действии катамина - деструкция цитолеммы, акросомы и промежуточной части спермиев, в действии лавандового масла - их агрегация, изменение состояния цитолеммы и мембранных структур промежуточной части, влияние нитазола проявлялось в изменениях структуры микротрубочковых комплексов, а дека мс токсина - в необратимых изменениях промежуточной и хвостовой части спермиев.

В зависимости от суммарной балльной оценки степени деструкции различных частей спермиев человека, исследованные препараты можно расположить в следующей убывающей последовательности: декаыетоксин> нитазол7хинозол> катаиину лавандовое масло.

Следует отметить, что основной "точкой" приложения препаратов спергицидного действия являете;; аппарат переметения спермиев -промежуточная и хвостовая их части. В соответствии с этим исследо-

ванные нами препараты располагается в следующем порядке: дека-аетоксин> нитазол> катамин> хиноэол> лавандовое масло.

Исходя из результатов проведенных исследования, можно заключить, что наибольшей спермицидной активностью обладают декаметок-син и нитазол.

На основании проведенных исследований установлено, что в механизме противозачаточного действия изученных препаратов основную роль играют несколько факторов: обездвижиЕание сперыиев за счет повреждения различимте ультраструктур и сдвига рЧ з кислую сторону, а такте снигение проницаемости иеечной слизи. Следует отметить, что сдвиг рН нешблюдали при применении катамина и нитазола.

Несмотря на то, что механизм действия исследованных веиеств различен, все они соответствуют требованиям, предъявляешь к современный контрацептивам местного действия:.в течение 40 с происходят необратимые изменения в спермиях, что приводит их к полной иммобилизации, a шеечну» часть слизи - к полной непроницаемости.

Как показали исследования, при применении ниталола в качестве противозачаточного средства, у крыс беременность не.наступала в 92 % (24 из 26).

При применении лавандового масла беременность у крыс не наступала а 76,9 % (20 из 26).

Из 20 кроликов после спаривания беременность не наступала я 100 % пра предварительном применении аэрозоля нитазола и в 90 % - лавандового масла.

Б контрольной группе все самки забеременели (Р с 0,05).

Следовательно, препарат нитазол помимо его основного проти-вотрихомонадного действия оказывает выраженное противозачаточное действи . Аналогичное противозачаточное действие оказывает и лавандовое масло.

Помимо противозачаточного действия ннтравагинальные контрацептивы не долззны оказывать отдаленных последствий в результате ах применения.

Дяя изучения отдаленных последствий из синтетических препаратов избран нитазол - как препарат, yse применявпийся в гинекологии в яачр-тве противотрихомонадного средства, а из растительных веяеетв - лавандовое масло, обладяшее антимикробным я противовоспалительным действием.

Было проведено изучение специфических видов токсичности 2,5 % суспензии нитазола и лавандового масла, которое включало

выявление мутагенного, эмбриолетального действия, а также влияние указанных препаратов на длительность беременности крыс, постна-'.альное развитие первого поколения розданных животных и их репродуктивную функцию.

Подученные данные свидетельству!!? о том, что 2,5 % суспензия нитазола и лавандовое ta ело не влияэтт на уровень спонтанна рецессивных летальных цутаций у дрозофил, летальных доканантных цутецпй в половых клетках крыс, хромосомных аберраций в клетках соматической ткани (костного мозга) дошей.

У беременных животных, получавших 2,5 % суспензию нитазола я лавандовое масло, в сравнении с параллельны» (интакташ) контролем, отсутствовало значимое различие в количестве желтых тел s янчншшх, количестве плодов, погибших яйцеклеток, массе плаценты, общей эмбриональной смертности, пред- и поеткидаштадисниой гибели плодов.

У эмбрионов, полученных от крыс, которым интравагиналшо вводили 2,5 Î суспензию нитазола и лавандовое масло в разные сраки беременности, не выявлено аномалий в развитии внутренних органов . и скелетной системы.

Не выявлено изменений в индексе плодовитости И беременности крыс по сравнению с интактнкм контролем. Введение во влагаливе 2,5 % суспензии нитазола и лавандового масла не оказывает отрицательного влияния на общее состояние, течение и длительность боре-менностя крыс,oie влияет на численность розденных животных в по- . мете, на показатели их развития, не вызывает внекнах аномалий и не оказывает отрицательного влияния на ЦНС и массу роадеитк 'юн вотных в динамике.

Таким образом, приведенные вызе результаты позволяют сделать вывод о том, что 2,5 % суспензия нитаьола и лавандовое вдело не обладают мутагенным и змбриотохсическим действием и не влияют на репродуктивную функцию.

Сравнительный анализ лимфоцитов (ЛИМФ) периферической кроен людей в норме и вирусоносителей СЩД позволил выявить наличие существенных структурных изменений в 1Ш1/ крова вирусоносителей. Установлено, что в популяции Шй> вирусоносителей СПДД часто определяются поврежденные и разрушенные белые клетки крови. Kss оказалось, в процессе "созрсьания* висусолодсбных час'иц (ЕПЧ), находящихся в цитоплазме ДИМ», наблюдается направленное их repstie-иенке из околоядерной зоны в сторону плазмалеммы клеток.При .этом

увеличиваются размеры ВПЧ, возрастает плотность их сердцевины и дифференцируется оболочка. Высказано предположение, что зрелые ВПЧ проникают во внеклеточное пространство (в плазму крови) путем экзоцктоза, а также через разрушенную плазмалемму поврежденных ШФ.

Как оказалось, хиноэол вызывает развитие умеренных дистрофических изменений и локальные повреждения ультраструктуры ЛИМФ вирусоносителей СПИД. Существенные изменения наблюдаются в хроматине ядра клетки. Однако ВПЧ, расположенные в цитоплазме ЛШФ,не претерпевают при этом видимых изменений. Вполне вероятно, что при взаимодействии с хинозолом возникавшие повреждения ультраструктуры ЛШФ разрушают внутриклеточный "конвейер" биосинтеза .сборки и созревание БИЧ.

Установлено, что нктазол при взаимодействии с ЛИМФ периферической крови вирусоносителей СПИД оказывает выраженное повреждающее действие на митохондрии и другие компоненты белок синтезирующего аппарата клеток. Анализ серии электронно-микроскопических снимков позволяет заключить, что нитазол способствует активации первичных лизосом ЛЩФ. Последние проявляют при этом "фагоцитарную" способность и поглодают некоторые ВПЧ. Под действием гидролитических и других литических ферментоБ происходит разрыхление и повреждение 'ультраструктуры ВПЧ.

Оказалось, что наибольшим повреждавшим действием ьа ЛИМФ крови вирусоносителей СГВД и ВПЧ оказывает декаметоксин. Выявлено, что б суспензии ЛЖФ при взаимодействии.с декаметоксином,определяются многочисленные вакуолизированные и частично разрушенные клетки. Поэтому часто ВПЧ расположены вне цитоплазмы ЛИМФ. Установлено, что декакетокснк оказывает непосредственное воздействие на ВПЧ, вызывает разрушение их оболочки.

Как показано выше, изученные лекарственные средства в качестве контрацептивов местного действия вызывают существенные изменения и повреядеиия ультраструктуры спермиев человека. В условиях инкубации с ЛИМФ внрусоноснтелей СПИД декуметоксин, нитазол и хи-нозол оказывают поврекдаюзее действие на ВОТ. В зависимости от степени повреждения ВИЧ изученное контрацептива располагаются и следующей последовательности: декаметокс..'н> китааол-> хинозол.

При изучении течения иммуис--ферментного анализа к реакции Нпнчини а условиях воздействия исследованных лекарстве-нншс веществ на соответствующие системы, участвующие в реакциях, установлен .,

что декаметоксик, хинозол, нитазол и катанин не вызывают изменения антигенных детерминант вируса ВИЧ и наличие препаратов в крови инфицировакшдс ВИЧ не окажет влияния на результаты диагностики инфицкрованносги ВИЧ методами, определякаими наличие антигенов

ВИЧ под воздействием лекарственна веаеств.

Исследованкке легсарствент;е вещества воздействуют на специфические антитела к ВШ, вследствие чего снижается количество антител, прореагировавших с частицами ВИЧ.

При проведении ис ледовзний с помошью реакции Канчими-выявлено, что к воздействию издавшихся лекарстьенных веществ чувствительны, ь основном, иммуноглобулины А и Ь!.

Таким образом, наличие декаыетоксина, хинозода и кятамина в крови инфицированных ВКЧ, может в определенной мере повлиять на течение И4>А, поэтом-/ его следует проводить'не ранее, чем через 6-8 часов после применения указанных спермициднкх препаратов.

Несмотря на то, что по спермицидной активности на первое место виходит декаиетохскн, мк для клинического применения-в пер-Еую очередь остановили свой виСср на нптазоле, эффективность ко-тирого ь эксперименте иг. науного слабее, но зато он имеет две адекватные применении лекарстаеннье формы - пенный аэрозоль и вагинальные суппозитории, что соответствует'международным требованиям . к барьерным контрацептивам и спермицидзк.

Материалы на нитазол, полученные- нами, были направлены в ФаркакологическиЯ комитет КЗ СССР и решением от 25 апреля 1990 г. (протокол Ъ 8) он бьл разреиен для клкничоского изучения.

Клиническое изучение суппозиториев к аэрозоля нитазола проводилось ь сравнении с суппозиториями лютенурина и внутриматочной и гормональной контрацепцией на 160 здоровых жендкнах детородного возраста в течение'б месяцев. С учетом гинекологических заболеваний, индивидуальных особенностей хеншин и противопоказаний к тому или иноку методу контрацепции жекзинам по совету врача был сделан выбор противозачаточного средства.

Бнутриматочные контрацептивы добровольно выбрали жензиж/, которьс были гинекологически здеровъ; и имели 1-11 степень чистоты влагалидной флоры.

Гормональные кентрпц^птив^ применяли пациента, когорт были противопоказаны БИС из-:« хронического аднекоита или миом».- катки.'. В случае миомы покаэаш; герк'.-нальни' препарата с противозачаточной и лечебной целью.

Сг.еруицидные препарата назначались яеютнам со специфическими и неспецифическими кольпитами после проведенной терапии, а такие больным с зндоцервнцитаии, и в перерыве в применении гормональной и внутриматочной контрацепции.

Основными критериями оценки влияния различных контрацептивов на функциональное состояние яичников явились показатели базальной температуры тела, симптома "зрачка", балльной оценки цервиклльной пхалы, определения типа мазков при хольпоцитологическом исследовании, характеристики менструального цикла, определения окислительно-восстановительного потенциала шейки матки и оценки рК цервикальной слизи в различные фазы менструального цикла.

Проведенными исследованиями установлена, что характер менструального цикла не изменялся в случае применения спермициднкх препаратов. Длительность цикла незначительно уменьшалась при применении гормональных препаратов.

При использовании ШС в течение первых шести месяцев нередко наблюдалась гиперменорея и полименорея.

Базальная температура свидетельствовала о нормальном двухфазном цикле у всех обследованных, кроме аенсин, использовавших гормональные противозачаточные средства - у них она носила моно-фазиыЯ, гилертермический характер, свидетельствовавши об анову-ляторном цикле.

По дсаша кольпоцитологии, овуляция диагностирована у всех обследованных, за исключением тех, которые применяли гормональные контрацептивы.

. Балльная оценка растяжения церсикальной слизи на Q-9 день равнялась б-Ю баллам, на 13-14 - II-I5 баллам, на 17-18 - 6-7 баллам а на 22-23 день - 0-5 баллам у всех обследованных неняин, кроме зекяин, получавших овидон. У них балльная оценка цервикальной слизи на 8-9, 13-14, 17-18, 22-23 дни циклоп в среднем равнялась 7-Ю баллам.

Симптом зрачка в период овуляции возрастал и соответствовал 3 баллам (+++) у всех яенаин, а у тех, которые принимали овидон, в вьаеуказанные дни менструального цикла характеризовался 2 баллам (++).

Таким образом, полученные данные свидетельствует о том, что эстроген - прогзстиновые препараты могут изменять половой цикл, овуляцию и репродуктивную функцию.

Из всех изучавшихся контрацептивов только спермяцидные пре-

параты не влияет на половой цикл и овуляцию.

Данные функционального состояния яичников коррелируют с величиной окислительно-восстановительного потенциала вейки матки и рН иеечной слизи при различных методах контрацепции. Эти показатели возрастают в период овуляции у всех обследованных хенашн, за исключением тех, которые с противозачаточной целью применяли овидон. В этом случае при отсутствии овуляции показатели ОШ и рЫ шеечной слизи практически не изменялись в течение менструального цикла.

Полученные данные свидетельствуют о том. что при применении различных контрацептивов состояние влагалищной флоры было различным. Беем хетинам до использования противозачаточных средств, у которых были выявлены специфические или неспецифические кольпиту или В-1У степень чистоты влагалищной флоры ранее безрезультатно было проведено противовоспалительное лечение. После применения внутриматочных хонтрацептивов только у двух женщин был выявлен трихомонадный, у одной - дрожжевой кольпит, Щ степень чистоты влагалищной флоры была обнаружена у 12 хеняин. Из числа хекшхн, исподьзовазших гормональные контрацептивы после их применения у 6 бьг выявлен дрожжевой кольпит, Ш степень чистоты влегализшой флоры г у 15 же каин из 20.

Из пациенток, пользовавшиеся спершщидааага препаратами во всех группах, за исключением двух сашин, применявших лвтенурин г определялась П степень чистоты влагаливной флоры. У жегепкн, у которых до использования аэрозоля и суппозиториев нитазола был трихомонадный кольпит, после этого проявлений заболеваний в течение вести месяцев не выявлено.

При применении различных видов контрацепции встречались осложнения, характерные для каждого метода. При использовании внутри маточных контрацептивов сравнительно часто наблюдались менэррагки и экспульсия ВИС; товнота и головные боли - у женоин, использовавших гормональные контрацептивы. Проявления местно-раздражакае-го действия выявлены у четырех обследованных женяин, применявших слермицидные препараты (аэрозоль и суппозитории нитазола). 100 % эффективность из изучавшихся нами методов контрацепции была установлена у женяин, исаользоваввкх овидон, аэрозоль нитазола и суппозитории нитазола, 96,77 % эффективность - у жент:'н с ШС и 73,34 * - у женшин, применявших лютенурин.

Известно, что противозачаточное средство считается хороаиа.

если при его применении вероятность забеременеть не превышает 6 %, контрацептивная эффективность ке ниже 85 %.

Таким образом, полненные нами данные в отноиении эффективности различных методов контрацепции свидетельствуют об их хорошем противозачаточном действии, за исключением лютенурина, так как наблюдавшиеся нами аенашиы были, как отмечалось,. в возрасте от 19 до 44 лет в простои в обпей сложности имели 3,4,5 беременностей, что свидетельствует о том, что они отличались нормальной генеративной функцией и могли забеременеть без применения контрацептивов. Однако нет идеального противозачаточного средства, которое шшю было назначать всем женщинам без опасения причинить зред здоровью катери и здоровью потомства. Поэтому назначение контрацептивных средств должно прозодитьея с учетом возраста, индивидуальных особенностей, общественных, психологических факторов,строго придерживаться показаний и противопоказаний.

С целью предохранения от беременности суппозиторий нитазола вводится во влагалигае не менее, чем за 10 н'.'.н до полового снояе-ння. Аэрозоль нитазола вводят непосредственно перед коитусом с подовью насадки, распыление длится в течение секунды.

Получешше каст данные свидетельствуют, что нитазол, применяемый янтравагш.'зльно, ног.ет применяться для предотвращения ряда заболеваний, передаваемых половым путем, а также в определенной пера обеспечивает зсзкту ст синдрома кмкунсдефицчтз. Он может предотвратить развитие инфекционных заболеваний половых путей и воспалительных заболеваний органов малого таза. Счасываотий эффект иокет облегчить некоторым парам совершение коитуса.

Нами доказано, что нитазод не увеличивает риск развития врожденных дгфектоа и из оказывает вредного влияния на здоровье потомства.

Таким образом, аэрозоль и суппозитории нитазола представляют собой весьма эффективные, безвредные, удобные для применения и не требующие особых условий для хранения вагинпльиые противозачаточные средства, которыми мояно широко пользоваться с целью предохранения от беременности.

Применение нитазола противопоказано при индивидуальн й непереносимости.

Результаты клинических наблюдений по определению пр из-за -чаточного действия нитазола представлены в пид'г отчета в Фармакологический комитет ИЗ СССР.

Суиествуют 9 лекарственных форм спермицидов: гели, пасты, пены (аэрозоли), растворимые суппозитории, пенящиеся таблетки, растворимая пленка, вещество, употребляемой для смазка презерватива, гуоки.

Б настоящее время отсутствует классификация современных про-тивозачаточнъос средств местного действия по механизму действия. Ькесте с тс.<, имевшиеся данные литературы свидетельствуют о различных точках приложения указанных средств.

Принципиально важ..км следует признать выделение местных контрацептивов как самостоятельной группы противозачаточных средств с различными особенностями механизма действия.

В механизме контрацептивного действия противозачаточных инт-равагинагьных средств различают два фактора: повреждение или разрушение спермиев (т.е. оказание слериицздкого эффекта) и прекра-сение движения спермиев к яйцеклетке.

Иногда механизм действия препарата обусловлен сочетанием двух факторов или преобладанием одного из них.

Известий препарат хинозол повреждает мембраны спермиев и помимо этого изменяет рН влагалищной среды б кислую сторону, сникает проницаемость хеечной слизи, что приводит к замедленно, а затем и прекращению движения спермиев к яйцеклетке.

Диалогичным образом действует декаметоксии, хотя по сравнению с хинозолом оказывает более выраженную деструкцию различных частей спермиев. Поэтому время перекивания сперкиев меньше, чей под влиянием хинозола.

Катамин повреждает ультраструктуру спермиев, сникает проницаемость шеечной слизи, практически не изменяет рН влагалкшоЯ среды.

Нитазол обладает сходным механизмом действия с катамкноы и к тому же усиливает образование свободно-радикальных продуктов в спермиях.

Лавандовое масло оказывает агглютинируюаее действие,снижает" проницаемость неечной слизи и повреждает мембраны спермиев.

-Сомбкнировакным механизмом действия обладают такте зарубежные препараты Оензалкония хлорид, ОРг-13904, являгаиеся ингибиторами проте» наз, в т.ч. к ахрозина, способствуюяие снижзнк» .проницаемости ве<-чной слизи, а ОРг-13904 - агглютинирует спермии.

Ьлтрофенол, натриЯ-нофткл-фосфлт и препараты ртути яьлястся антвосесдителями спермы.

СаяртовыЯ экстракт АеЫга1а ЗЫпез1з увеличивает холнче-стзо гядрогсильных групп и содержание сахара в спермиях.

Борная, уксусная и лимонная кислоты изменяют рН влагал1язной среды о ¡свслув сторону.

На основании проведенных нала исследований, наиболее зффек-таваьга явдязтся средства с сочетанию« механизмом действия.

На основании теоретических и собственных исследований предлагается одкн из вариантов классификации контрацептивных веществ в гавксккостя от ггехзнизиа действия и с учетом их влияния на влага-лкпнуп фаору (таблица 3).

Таблица 3

Кгасофкация противозачаточных средств местного действия

Наименование группы

Примеры известных соединений

I. Спергзсциды

1.1. Поэревддазие мембршы спермиев

1.2. Усиливавшие образование свободно-радикальных продуктов в спермзях

1.3. Анти^бводитела (снизившие обводнение спермы)

1.4. Ингибиторы протеиназ, в т.ч. акрозина

1.5. Угелачмвавзие количество гид-роксняьных групп и содержание сахара в спермиях

2. Прекраоавдие дзигенхе спермиеа к яйцеклетке

2.1. Агглатм;ирувкие спермин

2.2. Сниаавзие проницаемость шеечной слизи

2.3. Изменявшие рН влагалищной среды в кислуп сторону

Бензалкония хлорид

Ноноксинол-9

Катаиин

Декаметоксин

штазод

Хинозол

Лавандовое масло

йитазол

Нитрофенола натрий-нафт.чл-

фосфат

Ртуть

Арил-4-гуанидин-бензоат 0РР-13904

Еенэалконий хлорид

Спиртовый экстракт ДеЫгг1а ОЫпев1в

Масло лавандовое 0РР-13204

ОРР-13904

Бензалкония хлорид

Нитазол

Хинозол

Катамин

Декаметоксин

Лавандовое масло

Хинозол Декаметоксин Борная кислота Уксусная кислота Лимонная кислота

Как известно, классификация подводят оаределегашй итог в аксперикентально-шшннч&ских исследованиях, позволяв? дифференцирование применять отдельные препараты с учэгом состоя1пхя слизистой и флоры влагалита.

Развигая выбранное к представленное в работе направлен*;2, перспективно создание композиций из перечисленных групп ееаесте, для достижения сочзтанного воздейстекя на ейзнедеятельяоеть спер-мае в. Б первую очередь, по результатам настоящего иссхадоаазс&я представляется целесообразной разработка декарстшиак фора кз основе декакетоксина.

Заслуживает внимания лавандовое шел о, но в этой случае необходим подбор ингредиентов, который уменьшил или' маскфогаг бы запах,

ВЫВОДЫ

1. Приведены исследования по созданию еффектишах кгепак контрацептивных средств на основе синтетических и растительных веиеств, сочетавакх противозачаточное действие с противовоспалительными и антибактериальными свойствам. Сформулированы празу;пь выбора, обоснована схема доклинического ксследовання кесткьк кс:и рацептивных средств.

2. В эксперименте в опытах ин вктро установлено, что из исследованных синтетических и растительных веществ раствори дскл-метоксхна, нигдзола и лавандовое масло приводят в 100 % гибели спермиев при нормоспермии. По спермицидной активности декаштог-син и нктазол превосходят препараты сравнения: отечественный -хинозол и аналог зарубежного бензалкония хлорида - ката«гш.

3. В механизме спермицидного действия исследованных сгзестэ играют роль три фактора: обездвиживание спершсв, позрездезше их ультраструктуры, сдвиг рН эякулята в кислую сторону.

4. Наряду со спермицидной активностью декаметоксин.нитазол п хинозол оказывают повреядаюоее действие на вирус СПИДз ш! ситро.

5. Установлено, что декаиетоксин, нитазол, хииозол и катамии не вызывают изменения антигенных детераинат вирмснов ВИЧ, что имеет значение для обеспечения эффективности диагностики.инфекциа ВИЧ методами, в основе которых лежит определение различил антигенов ВИЧ. Выявлено, что указанные лекарственные ec^ecTss оказывают певреждаюыэе воздействие на иммуноглобулины А и 11, что следует . учитывать при оценке результатов два гностических методов, основан

них на обнаружении специфических антител к ВИЧ, и, возможно, на течение инфекционного процесса.

6. По совокупности полученных в работе результатов экспериментального исследования с учетом известных фармакологических свойств - противовоспалительного и антибактериального - для клинического исследования перспективны из синтетических веществ - де-камётоксин и нитаэод, из растительных - лавандовое масло.

7. Установлено, что нитазол и лавандс.зое масло не угнетают репродуктивную функции животных, не вызывают отдаленных последствий у потомства, не мутагенны.

8. В связи с тем, что из трех наиболее активных веяеств только для нитазола разработана адекватная условиям применения лекарственная форма - пенный аэрозоль и вагинальные суппозитории - они были предложены для клинической апробации, и получили разрешение на клиническое исследование от Фармакологического комитета 113 СССР (протокол Я 8 от 24 апреля 1990 г.) в качестве противозачаточных средств.

9. Клинические исследования показали, что аэрозоль и суппозитории нитазола проявили себя как эффективные, безвредные,удобные для применения вагинальные противозачаточные средства, которые надежно предохраняют от беременности.

10. Собственные исследования и анализ имеющейся литературы позволили предложить классификацию местных контрацептивных средств.

11. Разработанное направление имеет в создании местных контрацептивов перспективу развития по расширению набора активных спермицидных средств и по созданию новых разнообразных лекарственных фор1 (растворимых таблеток, губок, желе и др.) на основе исследованных в работе веществ - декаметоксина и лавандового масла.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

I. В практическое здравоохранение рекомендуется внедрение контрацептивных препаратов местного действия - суппозиториев и аэрозоля нитазола.

Нрепар^а могут применяться у жениии со специфическими и неспецифическими кольпитами после проведенной терапии, у больных ондоцервицитами, в перерыве при использовании гормональной и внутриматочной контрацепции, а также при противопоказаниях к этим

О

противозачаточным средствам.

С целы; предохранения от беременности суппозиторий нитазола вводится не. менее, чем за 10 минут до полового сношения. Аэрозоль нитазола вводят непосредственно перед коитусом с помощью насадки, распыление длится в течение секунды.

2. В связи с наиболее выраженным спермицидным действием де-каметоксина по сравнение с другими изучавшимися препаратами и наибольшим повреждающим действием на лимфоциты крови внрусоноси-телей СПИД ин витро представляется целесообразной разработка лекарственных форм на его основе, в виде гелей, паст, аэрозолей, растворимых суппозиториев, пенящихся таблеток, губок как с целью профилактики нежелательной беременности, так и некоторых заболеваний, передающихся половым путем.

3. В качестве противозачаточного средства растительного происхождения перспективно применение эфирного масла лаванды в форме аэрозоля или пенящихся таблеток, однако с учетом того, что в данном случае необходим подбор ингредиентов, которые уменьшили или ликвидировали бы запах.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕПЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. A.c. I703II7 СССР, НКИ 4 61 К 35/78. Средство для подавления двигательной активности спермиев / В.И.Грищенхо, Г.В.Оболенце-ва, Л.Н.Койева и др. (СССР).- 2 с.

2. Ёатаманвк H.H., ХадкаЯ Я.И., Коптева l.li. Комплексний метод лХхування трихомонозу з м1сцевкм аастосуванням аерозолю н1та-золу // Дед1атр1я, акушерство I г1неколог1я.- 1990,- * 3.-

С. Ь4-55.

3. ГНездилова А.И., Ибрагимова Б.Ф., Коптева Л.Н. Изучение биологической активности аэрозоля "Ливман" и компонентов его состав-ляюоих // Ш съезд фармацевтоь ТССР: Тез. докл. -Ашхабад, 1989.-С. 179.

4. Гормональная регуляция в норме и при патологи»: влияние хино-зола на ультраструкт;.ру спермиев аякулята человека /Л.Н.Коптева, И.П.Дзюба, О.А.Воскресенская к Др."// Материалы обл.сбил, науч.конф., посеял. 70-летию создания Харьк. НИИ эндокринологи* к химии гормонов.- Харьков, 1989.- С. 86.

5. Грлаенхо В.И., Загоруйко Г.Е., Коптева Л.Н. Особенности уль-траструхтуры лимфоцитов крови вирусоносителей СПИДа // Новые методы диагностика СОВД, других вирусных и бактериальных инфекций в практике инфекционной и противоэпидемической службы: Тез.peca. конф. - Алушта, 1990.- С. 36-37.

6. Гриаенко В.И., Оболенцева Г.В., Коптева Л.Н. Контактные спер-мяцвды-в современной контрацепции / Харьк. мед. кн-т - Харьков, 1991. - 35 с. - Деп. з ВНИИИИ 22.10.91, J? 21838.

7. К вопросу о гогцожкоц эмбриотоксическоа действии нитазола / Л.Н.Коптева, Г.В.Оболенцева, Л.В.Ткалич, Ю.Б.Ларьяновская // СценЕа фармакологической активности химических соединений: Оркнцнпы а подг.оды: Всесосз. науч. ионф.: Тез. докл. - II.,

1989,- С. 234.

8. К вопросу о мутагенном действии лавандового масла / Г.В.Оболенцева» Л.Н.Коптева, И.П.Дзоба, О.А.Воскресенская /7 Сменка фармакологической активности химических соединений: Принципы и подходы: Есесовз. науч. конф.: Тез. докл.- П., IS89.-C.234.

9. Коптева Д.Н., Загоруйко Г.Е. Влияние каташша на ультраструк-■гуру спер.-аев эякулята человека // Фармакология: Состояние и пзрсгектазы исследозаннй: У1 съезд фармакологов УССР: Тез. докл. - Харьков, IS90.- С. 153-154.

10. Коптева Л.Н. Влияние лавандового масла на репродуктивную функция крыс // Вопросы репродуктологан: Сб. науч. тр. / Харьк. мэд. кн-т.- Харьков, 1990.- С. 54-65.

11. Коптева 1.Н. Влияние нитазола на потомство в постнатадьном периоде аизни / Харьк. мед. ин-т.- Харьков, 1990.- 7 е.- Деп. в ВИНИТИ 20.09.90, if I007-B-90.

12. Коптева Л.Н. Влияние нитазола на репродуктивную функции в эксперименте / Харьк. мед. ин-т.- Харьков, 1990.- 4 е.- Деп. в ВИНИТИ 20.09.90, 9 IC06-B-S0.

13. Коптева Л.Н. Влияние нитазола на состояние внутренних органов к скелетной системы зародыш крыс / Харьк. мед. ин-т.-

3 1338-Ук. 90.

14. Коптева Д.Н. Влияние эфирного масла лаванды на потомство в постнатальноа периоде жизни / Харьк. мед. ин-т.- Харьков,

1990.- 7 Деп. в ВИНИТИ 20.09.90, £ I005-B-90.

15. Коптева Д.М. Зм1на зм1сту фруктози в еякулят1 лодини при зплив1 сперм1цидних препарат1в / Пед1атр1я, акушерство I г1неколог1я.- 1990,- 0 2.- С. 53-54.

з О

16. Коптева Л.H. Исследование возможного мутагенного действия нитазола / Харьк. мед. кн-т.- Харьков, 1990.- 9 с.~ Деп. в ВИНИГИ 20.09.90, g I008-B-90.

17. Коптева Л.Н. Исследование возмонного эмбриотоксического действия масла лавандового / Харьк. кед. ин-т.- Харьков, I9SD.-10 е.- Деп. в ВИНИТИ 20.02.90, JP 100-В-90.

18. Коптеэа Л.Н., Оболенцева Г.В. К вопросу о возможном эмбрио-токсическоц действии лавандового масла // Актуальные вопросы клинической фармакологии: Тез, докл. ХУ ког:ф. по клик. фармакологии с кеадукародньм участием.- Волгоград, 1990.-

С. 64-65.

19. Коптева Л.Н. К вопросу о мутагенном действии нитазола // Актуальный вопросы морфолога!: Тез. дом. Щ съезда анатоиоз, гистологов, эмбриологов и топографоанатомов УССР.- Черновцы, 1990.- С. 154-155.

20. Коптева Л.Н. О возможном проявлении отдаленных последствий применения нитазола / Харьк. мед. га-т.- Харьков, 1990.33 е.- Деп. в ВИНИТИ 12.03.90, & I375-B-90.

21. Коптева Л.Н. Поиск контактных спермицидов // Акушерство и гинекология.- 1992.- Р I.- С. 11-12.

22. Щцович Р.Ы., Вагамашж H.H., Коптева I.Ii. Вллнв горцональиих I вцутр1каточнкх контрацептав1в на вэлктану окесио-вХдновного потенц1алу шЕки хатки I pH ендоцерз1кального слизу // ПедХатр1я,дакушерство I г1неколог1я.-198Э,- Р.4.- С. 57-Ю.

23. фаркаколог1чн1 засоби, застосовуван1 для контрацепцП / Л.М.Коптева, Р.М.Н1цович, H.H.Ватажник // Под1атр1я,акушерство I г1неколог1я.- IS39.- S 2.- С. 47-50.

24. Хаджай f..И., Коптева Л.Н., ЗагоруСко Г.Е. Влияние лавандового масла кз ультраструктуру спермиев эякулята челоезка // Респ. науч. Ескф., приуроч. s 70-летка Харьк. фаркац. пн-та "Реализация научных достижений в практической фармации".-Харьков, 1991.- С. 249-250.

25. Хаджай Я.И., КоптвЕа Л.Н., Загоруйко Г.Е. Вакяше нитазола на ультраструктуру лимфоцитов периферической кроза больных СПИД/, Состояние н перспективы создания новых готовых лекарственных средств к фктохкмхиескях препаратов: Тез. докл. науч.-техн. *онф. - Харьков, 1990.- С.. 255.