Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Изучение противосудорожного действия в ряду производных фталимидокарбоновых кислот

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕШ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Башкирский государственный мвдицинолий институт

На правах рукописи УДК 615. 213:616 - 009.24

РУДОМЁТОВА Елена В ас иль еш а ЮУЧЕНИЕ ПР0ТИБ0СУД0Р0ЯН0Г0 ДЕЙСТВИЯ

в ряду производных фталимщокарбоновых кислот

14.00.25 - фармакология

Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук

Уфа - 1993

Работа выполнена в Пермском'фармацевтическом институте.

Научный руководитель - доктор биологических наук, профессор

Колла В.З.

Официальные оппоненты - доктор медицинских наук, профессор

Х.М.Насироз - доктор мед.:пинских наук, профессор Р.А.Гараев

Ведущая организация - Российский медицинский университет

Защита диссертации состоится "2,Ь " (^¿№с)Р<Х 1993 г. _ часов на заседании специализированного совета К 084.35.

при Башкирском государственном медицинском институте. Адрес: 450000, г.Уфа, центр, ул.Ленина, 3.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Башкирского государственного медицинского инотитута.

Автореферат разослан " £.3. " 3 199 3 г.

Учёный секретарь специализированного совета доктор медицинских наук,

профессор ■ Г.Дчю^туа

.¿НТУДДШХЛ'Ь jJi'UiUiSiii. элнлвпода .идаваитоя одному не-

иболеа распространенных заболеваний цепз^рахьнсЯ нервной системы. Число больных епилепоией на планете составляет не нзнеа 30 миллионов человек ( 0,6 - населения ) |йчрлоя В.А., 1990 jj . Значимость проблемы определяется и потенциально тяжёлыми последствиями, Как при развитии эпилептического етатуов, так и при одиночных припадках магуя наблвдатьоя: серьёзные повреждения и даже смертельный исход ^Неплох A.M., 1965J . Припад-и опасны и для окружающих людей из-за возможности возникновения у больных сумеречного состояния и неконтролируемых поступков, а при некоторых профессиях - а связи с особенностями выполняемо? работы ( водители транспорта, авиадиспетчеры, хирурги и т.д.)« Всё это свидетельствует о том, что опияепоич представляет собой не только медицин-скуй, но и важнув ооциально-окономичеокую проблему.

Лекарственная терапия, являющаяся основный компонентом в кем-. плекснсм лечении, предусматривает комбинированное применение одного или нескольких антиэпияептических средств о препаратами патогенетического вспомогательного действия ^¿зруцккй Г Л.,1988, Карлов В.А,, 1990, Эди КД», Твйрор Дж.Хн 1983 | . Противосудорожные препараты назначав1? в большинства случаев заболевания опилеп-сией» Приннмевт щ без перврыэа в течение нескольких лег, а иногда и всей жишш (больного, что является основной причиной побочных аффектов | Б ада ляп Л ,0» и др.,1990, Вайнтруб М 1982,, Hehlers У. et в1» ( 1575 | , Открьтцм остаётся волроа о меянкакентозно-разнс-гзнтных формах епияепош), Когда вффэкт отсутствует при применении предельно-допустимых доз ентиконвульсайтов. Всё это делает окту-гзльно$. проблему осзд&иш| новый противоопчлап?ичеоких средств.

БольаиЯатЕо традиционных прстивосудорожних средств являются ¿интетичодкиыи прагтрзташь не kusbwmk аналогов среди изйеатншг природных совдинвний, И пока ащё но раскрыта все фактор», когорна

могли бы служить основой для конструирования и создания необходимых медицине противоэпилептичвоких лекарств» но утратил своего значения скрининг химичеоких соединений ^ГлушковР «Г,, Мавковский МД.Д9901 . Проявление протквооудорожной екгивнос-ти сроди продуктов химического синтеза « пй столь редкое событие |лавроцкая 3.$«Д985|. Имотся оедвлъныз роботы* свидетельствующие о целесообрваиооти поиска Нротилосудорохных првпоретоп оради производных <р«и!имида[лидрвйчикои>Я.С. н др», 1960,ОвсЬ1«н*с] н. и др;» 197,6 ,Коп*го р.ирЬап а1епеу п* и др. 19?? | « Вти сведения послужили1 основанием; длт изучения вновь овнтезированных прсшакшАМых флиимиячкврбоновых- кислот«

Нлотоащйя работа щиаошевв Х'вштмфсмш о пленой научное исследовательских работ Педмояого фадоцеятчеохого института» в ранках проблем« № Р# 15 £1 кйпврсимвнтвяьнвя фармакология". Номер госудеро»«ииов рет«отрвШ111-(1Г^9 Л0 18868

ЦВДЬ И ВШЧЯ НССЩОВАШ, Цель исследования - «оиок соединения» овлаяомцм протмвосудорожиш действием среди вновь синтезированных производных фтал'имадокврбоновых киодот« выявление перспективных и их дальней«« изучение. Для реяения двн-ной цвли бмяй поотавлаяи слэдусцве вадечя.'

1. Провести еериникг амидов фтолимедокербоновых кислот на наличие среди них соединений, обладаащих противосудорокной ектив-ностьв. Определить их оструй токсичность*

2, Отобрать м изученных веядствнаиболее активнее по противооу-дорожному действий и но имен ее токсичное соединение для более

.глубокого, изучения. 3; Изучить эффективность овиого-активного соединения при раз* личных видах судорог с целью" установления его возможного механизма действия«

- з -

Оценить выраженность против с о уд op own о го о'йекта выделенного соединения и провезти сревнеиив со стандартным. "препаратами. 5, Изучить психотропную и другие виды биологической активности наиболов эффективного соединения.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые изучона противо^удорожная активность 8 новых производных фталимидоуксуоноЯ, фталииидопрппановой и фталимвдобутановой кислот, сроди которых установлени соединения, облед&шцие антиконвульсивными свойствами. Наибольшую активность проявил морфолвд фталимвдоуксуочой кислоты, изучение про-гивосудорожного и npothioipflhophoro двйстрия которого показало эго оффективность в отношении различных экспериментальны" моде-юй. судорог и тремора. Корфолуд првктичеоки не оказывает онот-зорного действия в терапевтических дозах, обладает транквилизи-русщей активностью, низкой токсичностью и большей бвэопасноотыо, <ен известные противооудоронныв препараты.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕЩОСТЬ РАБОТЫ, Обнаружение противооудорожнор, 1ктивности в ряду исодедованних амвдов ^талимидокарбсновых кко-ют подтверждает выводы раноа проведенных на кафедре скрининго-1ых исследований и стимулирует дальнейший синтез и поиск вощеотв i данным видом активности ореди производных втого ряда. Малая •оксичность, виракенное при различных миделях судорог противосу-орожное действие, психотропный ьффвкт и значительно 5(3льшая 1ЙД по сравнению о известными антиконвульсантами позволяют ре-омендовать морфолид.для углублённого изучения о целью прадотав-ения в Фармакологический KoKlitai Ш Р$ в качества противосудо-окнйго препарата,

АПРОБАЦИЯ PAE0TU. О сновки в результаты работы долоаоны на аучной конференции 'Поиск биологически скгивних вечадтв к про-немн лекарственного обеспечения" (г. Уфа, Г99Г г.)> научно-

- ч -

практической конференции " Синтез и использование биологически ективных соединении" (гЛен?а, 1992 г.)» научно-практической конференции ирофессорско-проподвватв.Локого ооотввв Иврмокого фармацевтичеокоЛ института (1993 г.).

ПУБЛИКАЦИЙ. По фрагментам диооертации опубликовано а печати Ч роботы.

ПОйОЖБйШ» ваносиш НА ЗАЩИТУ: 1« В ряду амидов фталимлдокарбоновых кислот установлено наличие оовдшаний с противооудорожной активноотью и низкой тохскч-ноотыв.

-. 2, Норфолид фталимидоукоузной кислоты проявляет протнвооудор охнув активность по тестам максимального електровока, коразоло- • вому, бнкукулиновому, отрихниновону, тиосеыикарбозидному , камфарному, а также обладает противотрвморнии действием на моделях никотийового, ареколинового и треморинового тремора. 3. Морфолид обладав« транквилизирующим дейотвиеи. 4* МорфолнД безопаснее фенобарбитала, бензонаХа, дифвнина, гек-оамидина, кврбаыв8емша, ввльгфоата нвтрия и хлоракони, так как имеет большую уодовнув иироту фармакологического дейотвш» ОБЬШ И (ЛРШУРА ДИССЕРТАЦИЙ» Диссертационная работе ьооТо! ит из пммп,. обзорй днтвратури, описания ««риалов и методов исследования ( результатов собственных , ехолерииентои, обсуждения, выводов, практических рекомондвций к библиографии» Работа изложена на 12Устраницах наашмпионого текста , ¿одержи* 2$ таблиц, 6 рисушсоа»' 162 библиографических источника, и? «»торых 119 отечественных иЧЗ иностранных.

** •" ,%' ?

г- ¥

СОД ЕРЗАНИЕ РАБОТЫ

, КАТЕР КАЛ и К МЕТОДЫ ЯОСЛВДОЗАШ. Экслеракенте проведаны па 1509 болах беспородных мышах и 91 с'елоа крысе. Количзство ки-вотаах по бидьм акоперимента представлено в г Члице I,

Объектами исследования служили' 9 производпих йтзлимвдскар-боновых зиолот, синтезирсаавдыа на кафедр® гакеиколог'ачэской хи-мин Пермского фврмацевгачеокого института (твбл.2у.

Таблица I.

Распределение животных па видам инслэрямента.

Модель исследования Вид Число. Обидев Ввд

животах апжотаэхг члкло активности а группа животных_

2

.1

%

I „ 0о1рая токсичность шеи 2, 'Вращающийся - " -

N

стернень 3» Тест максимального

влектроыока Ц, Коразоловый тест

5. Стрихнинный теоу

6. Бикукулкновый тест

7. Тиссемккарбозидный

8. Камфарный тает

9. АрекопкнЬвый тезт

10. Никотиношй тесу

11. Трекориновый тест

12. Толерантность к пр от ив о с уд ор ежн о му

' дойстйип

ч „

II „ -

" -

и

и —

II

б Г74 токсичность 6 Ш нейротоксичность

б 260 протквозудерожная

£ 233

6 72

б 114

6 126

б 50

6 45

6 51 £ * 39

1С 40

противстроиорнзя

прогивосуд сродная

№

Таблица I (продолжение)

К, Тест "бокового м.чшн полоиония"-

Гексеиэловый наркоз * " -15 . Бербитал-натриевый - " -нарлсз

16. Измерение ректальной врибн

температуры И. Тест "открытого поля" ИЫШИ

18. Апомрфинсэпя стер со- крь-оы типия

19 , Катапепсия крысы '

£0. Теет пэведекчооао.то шши отчаяния плЕзагщей мшаи

21. "Конфликтная опту а- кризы1 ция"

22. Методика агрэоскЕ- " икши ноети при електро-болбвон раздражении

23. Тем вирзби-гки узлов- крысы ной реакций тасоизно-

гс избэгания

24. "Горячая-пластинка" ' мыаи

25. "Уксусные корчи" - " -

5

6

ГО 15

5. б

42 снотворная

потенцирование 18 действия наркозных

сродста 20 гипотеркичесхая

60 двигательная и ориэитьроаочная 6 психотролная

35 нейролептическая 12 антидзпресоантная

10 30 транктализирувяая

20 20 онтиагрессивяая

10 20 психотропная

15 30 анальгвтическая 10 . 20 - " ~

Итого:

мыши крысы

15(39 91

В качество препаратов сравнения использова-лн широко пркненяе-ша в медицинской практике протлвосудороьнше средства - фенобарби-•ал, дифанин, вальпроат натрия, карйаиаэвпин и другие.

Острую, токсичность амидов фталимидокарбоновга кислот определя-;и при однократном внутрибрюшинном введении о наблюдением за живот-¡ими в течение I суток и вычисляли -P^q . О'крининговую оценку проти-юсудороиной активности проводили по двум тестам: коразоловону 100 иг/кг, Енутрцбрв;.инно) и тосту максимального электрошока ТМЗь!) |?аевскпй К.С., I96lj . Соединения вводили л дозе 300 мг/кг 1нутрибрюашнн0 и при наличии аффекта раасчи-тывалн ЕД50 по экспресс-¡етоду |$румин Г.Т., 199о| , а таио условную широту фьрмакологичес-;ого действия (И$Д).

При отсутствии у соединения эффекта его считали неактивным, ритериеы противосудорожного действия. исилсдуимих веществ являлось странениа тош iscicoii фазы судорошого прииьдка. Тестеров- ihb по кЗШ проводили через 10, 20 ншут, 1,2 иЗ часа, чтэ позволило опре-;елить пик ирот,шосудорожно1 о действия и его длительность.

Для оценки противосудорожного действия морфолида, показавшего ысокую активность и большую безопасность в скриниигових изсладоза-иях, кспользованы также различные но механизму действия судорожные генты! бккукуЛин (б мг/кг; в/бр)} тиосемикарбозид (20 мг/кг, п/к), трихнин (I,£ иг/кг, в/бр ), камфара С от 300 до 3000 мг/кг п/к).

¡lpcTi3üTpc).,op¡i06 действие изучено на моделях ареколинового 20 мг/кг, в/бр), никотинового ( 8 мг/кГ! п/к)} треморинового (12 г/кг, 1у"бр.) гиперкинезов. Критерием "звциты" считали отсутствие реморз или 'единкчныа слабые Ездрагивания,

Острая токсичность морф^чада определена на белых кылах при аблюдении за животными в течение 10 суток [лырьнн ГЛ . , 1959J . О снотворном эффекте судили по способности морфодвдь выгьша-гь

боковое положение белых мы.швВ ^Вихляов Ю.Й., Клыгуль Т.А., 1970^.

Корфолид вводили шутрпбршинно или перорально в дозах, вызывавших оа 0 до 1СЭ?« ефуекто. Рассчитаны ЕД^,. ЛД^д, ТД50 ГДэд

г т '

по методу Дитчфилъда и Уилкоксона | Белонькчй МЛ., 1963 ¡.

. 1

Толерантность к противосудорижному действию морфслкда определяли по ТМЭЙ в течении 20 дней. Белим мышам ежедневно внутрь вводили морфолвд в дозе 250 иг/кг (ЕДэд по ТЮШ), тестировали каж-

дый пятый, день

Германе С.К., 1976].

Влияние морфолкда на двигательную активность и ориентировочный рефпекс оценивали по методике "открытого поля" [ Boisaer i.k.

1 ' и др.,1964|. О сиоообности изучаемого соединения потенцировать

действие наркозных средств судили по удлинении: гаке опалового ( 70 'иг/кг, в/бр ) и барбитал-н атриев ого (170 мг/кг в/ор ) наркоза ^ Баргтейд Б Л. ,1966] .Ректальную темперстуру теле белых крыс из-мдряли при помощи электрохзрмометра. Аполорфиковую стереотипию вызывали внутркбрвшиннчм введением апоморолша (8 мг/кг) |^Ваке А.С., 1982 1 , учитывая её длительность. При определении- каталептогенных свойств шрфолида за критерий принимали сохранение пилотными в течение 2-х кинут одной из характерных nos, рекомендованных К.CJЛ1 о—

Г -]

еаоккм j^I976 r.j . Об антвдепрессивной активности судили по методике поведенчэскога отчаяния плавящих кьшой [р у соков 5.С., Ввльдмон АЛ., 19йз]. Методике 'Конфликтной ситуации" [клчгуль Т.А., Кри-вопалоаВ.А., 1$бб| , лозноляещад судить о транквилизирующем действии препаратов, проведана!» сравнении с карбамазепином - проти-восудорокным препаратом,, обладавшим анксиолитической активностью. Антиагрзссивнсэ действие иэулали по тесту электроболевой стимуляции пары мкшей ^Зайдлер Я .И,,. i9601 . Условную реакцию пассивного избегания (УКШ вырабатывали-по-методике Б.КДюбииовв £ 19651. Морфолод-вводили во второй день тестирования. В контрольных опытах

каяотнча получаля крохиальнув слизь■»

При изучении психотропного действия норфолид вводили пар-орально в виде взьеаи в 2% крахмальной слизи за ГО икнут до тестирования а дозах от I/IDO до LJZ W¡5q в зависимости от требований натодик и поставленных задач.

Анальгетичиская ективность морфолвда изу^на по методикам термического - "горячая пластинка" J^Edäi и.в. .Veimach В., 1953J и химического - "уксусные корчи" j^Goliier н. и др.,1968 1 раздражения. lio тесту "горячая пластинка" тестирование проводили через 0,5; I ; 2 ; 3 и 4 часа. Ort активности судили по степени увеличения. времени оборонительного рефлекса. Внутрибрсыинное введение 3% уксусной кислоты из расчета ICQ иг/кг кессы зивотнэзт приводит к развитию "корчей", количество которых подсчитывали в течение 20 минут после введения раствора. Критерием оценки являлось угнетение уксусных корчей. Для сравнения взят анальгин, который вводили в эквитоксической дозе.

Результаты обработаны статистически. Различие считали достоверным при Р-С-0,05. Среднио данные оценивали с помощью критерия Стьидента [Беленький К J1963] .

При сравнительной характеристике за относительный показатель принята соотношение ЛД^ (НДсф) фенобарбитала к ЛД^ (ЕД^) сравниваемого препарата.

РЕЗУЛЬТАТЫ КССЛЩОЩШ К ИХ ОЕШДЕНЕЕ Скрмикговые каоледовс/иия производных фталнмцдокарбоновых явились продолжением поиска Средств о противосудорожной активности J5 -данном ряду соединенй';, проводимом но кафедре <|армаке-логип Пермского фармацевтического института. Результаты исследований представлены в таблица ?.

Таблица 2

Острая, токсичность, противссудорожная активность, условная широта фармакологического'дзйсеткя (УШФД) амадоа фтаяимидокарбоновах кислот и фенобарбитала при внутрибршинном введении белым муйаи

m

соеди-! нений !

*50

в мху кг

а

50

з мг/кг

тш шж/ед50

иш

; тмэш

• Коразоло-

!. выи тест

L ВШ ТОСТ

71 • 1605

1910

1877 IS06 1657 1726 1676 1807

. --CV-Ç-UO1

О

-СИ - § —-

CtUs Û

-çu-ç-fO

ClHi с

-ÇH-2-HU-CUrO éiUs S -CUr(iUrC-NU-CUj

о

-СЯгСиг|-М(еЛк

4«rcurç-0» 0

-(CH^J-KU-CUi-O

- С - 0 - CHj b

¿енобарбитал

, Ю94 ,

( S65-I323 )

, i?-40 .

С 960-I5Q0 )

лооо

IHOO ( 900-1500 )

(1470-2250 )

' 1200 ( 900-1500 )

", ao'oo

С 1580-2420 )

■ ' 1050 , (790-1310 )

620 ( 490-750 )

' 123 "

С 94-1611 )

42 70

( 33-51 ) С 55-35 )

75 95

(60-SI ) <75-115 )

X9I ' 251 ( 143-238 ) (198-305)

. 372 ч ' 372 , ( 294-450) (294-450)

158 109

С 125-19:0 (86-132 )

' 172 ' • 372 ( B6-I87) (294-450)

не актинон I3Î ■ (104-159 )

не активен , 372

(294-450)

404 372

( 319-489) (294-450)

, 16. 23

( I3-IS ). ( 20-26 )

26,1 16,5

>5,3

3,2 11,8 7,0

1,5 7,7

15,5 13,1

>4,0

3,2 IÎ.X 3,2 15,3 2,8 1.7

5,4

0

1

I

- Ti -

Boo изучению -оолдвленид имеют кизкуи токсичность и относятся к классу ".грактачбоии яз-юксичнио" веществе Езмеров i!.í.,1977 крона соединения 1607 , которое является "^аяотокскчным" веществом. üohhuíI рад производных менее токсичен, чек фенобарбитал в 5,0-16,2

раза.

В основном всо соединения обладаьт противосудоросшш-i действием, 1ю Ti.'oili только два соединения - 2726 и Ití78 в скрининговой дозе (300 иг/кг) но заакцевт «¡.во-гних от судорог' и гибели, остальные лроявили активность в различной степени. Наибольвий противосудорон-•шй аффект ооединеняй 71, 185? , 19ГО развивеется через 10 минут, у [606 и 1807 - через 50 минут, у соединений 1805 и 1877 - через 2 jaca после внутргбрюшииного введения. Все кссладсвйшшэ вещества збладают аитикоразодовш-i дейстзиеи, что указывает на роз.»оглув пон-(отропиуь- активность в этом ряду аоедкнши». аврецкаа 2 .5 . ,1985 1алвнков.а С.А., I966J.

Наиболее активными оказалссь соединения 71, 1605, 1606. Кх '¡SíЛ в 2-4 раза превышает значение УЖ!д фенобарбитала по оеоим теслам. Высокое значение УЖД ¡,о корезоловому тесту имеет также ооепи-изниа 1726.

Учитывая зависимость биологической активности от 'химического ¡троения, устан-св.ченную ранее {"Подушкина ПЛ., 1980j и результаты обствешшх ©кспервиеглов, можно предисл стаять что увеличение рассто-ния между Ф?'а;ап!идцой я карбамидиой группировками в молекула с I ,о 3 атомиг углерода ведёт к ентачни» í-ротквосудерокнсй активности; оедпнение 71 активнее-1605, 1857, а 1726 теряет протиеосудсроянуэ ктивиость-пв ТМЗИ. Во-вадр-jx, введение арильяого (бен сильного) райка ла ведет к резкому снигенка (1877.) яла утере (Г578) протизосу-орожной активности. В-третьих, зам' ш атэми ьодорода .ча атильный адикая -'во втором положен!;:: ¿та.и.мкдо-уиеуоной кислоты яе прчвеят

к усилении прстивосудорокного действия: 71 активнее 1910.

Твккн образом, получению даннь'э сввдзтельстБуит о том, что новый ряд производных (ЬтелимидокврбоноБых кислот обладает противо-судорокной активностью и низкой токгдаИистъ» и представляет интерес для дальнейшего синтеза и покогз- б'кзгагачееки активных соединений. Из всех обследованных производных фтьлимидокарбокогнх кислот наиболее активным :v мелотокскчным проявило себя соединенна 71 - корфодчд фтмжедоуксусиой Кислоты (морфолид). Это побудило нас провэсти'болаэ-детальное исследования отого соединения.

Изучение' бйогсогичзоаой:активности норфолидв1

Острая токсичность. Токсическое' действие препарата. определено в различных дозах при различных путях вводенич. Jüí^q корфолида при вяутрибршш;шом введьнин составила IZ50 (646 г 1564 ) мг/кг, что совпадает с установленной ЛДдд при скрининговых исследованиях (при Р-0,05).

При вводеник внутрь средняя дози, вызывающая табель 50$ животных в 2 Л разе больше и составляет ¿600 (2170 * 3612) мг/кг. Согласно ГОСТу СССР I2.I.C07-7G, пй степени опасности морфолад при введении в желудок относится к 3 классу - "умеренно опасные вещества". А по токсичности при введении чорез рот - к 4 классу - "малотоксичные вещестэв" ^Саноцкий Й.В., Улоновэ КЛ.,1975] . Отрав пени проявляется з виде-угаетодия,-вялости, бокоього положения. С увеличением дозы эти явления становятся более аврааенныни.

При сравнения ыорфочидо с протнвосудирожными препаратами (ом. табл.3) оказалось, что он обладает самой низкой токсичнсстьо. При внутрибрюшинном. введении он в 1,8-9,4 pasa, о при пгроральном -в 2,6-16,3 pasa кенее токсичен., чем препараты сравнения;

Таблица 3

Острая токсичность морфолэда и препаратов сравнения*

в нг/кг

Название Внутркбраякнно Внутрь

препарата Абсолютов значение Относительный показатель Абсолютное зкэчениэ 0 ТН 013 итог ь-иЬй показатель

Фенобарбитал 123 ( 94+161 ) 1,00 172 ( 154+192 ) 1,00

Вензонал 340 ( ££64401 ) 0,36 ( 304+351' )• 0,51

Гекоемвдин 340 , 0,36 ( 268+401) 470 (420+526 ) 6,37

Дифенин 250 (177 +353 ) 0,49 £64'• ( 247 +326 0,61

Вальпроат натрия 603 ( №9*756 ) 0,20 944' (830+1074 ) 0

Карбамазепин 187 0,66 ( 177+223 )2 550 ('44С+Ш г 0,31

Хлоракон 650 ( 566^722 ) 0,19 1С00 ( Е93+1Г20 ) 0,17

йорйолвд 1150 ОДГ (' 8^6-8-1564 ) 260С ( 2X70+3612 ) 0, Об

Примечание: I - по данным Даниловой В .К., 198''} г.; 2 - пс данным Кектаровоп Т.А., 1993 г.; 3 -• по данным ньп?1г.1 р. и др,,1.983 г.

Нейротоксяческэя доза (ТД5д) при виутрибрвгаинном эзедя;ш на пике лроттаосудоиожюго действия ( 10 юшут; составила 112 (81+15ь) ыУкг, а при введении внутрь ка пике действия (30 мит-ут) - 330 (236+462) кг/кг.

•Поотавооудор<жная активность, дательное •,изучение .норфодида

по ТМЕШ показало, что как при знутрмбршиннон, так и при перораль-

uou введ он ¡я он со особен защищать животных от тонических судорог

и гибели. С увеличилием дозы оффект нарастает. Наксииальннй проф

тавосудорокный аффект при внутрибрюишнсм введении проявляется через И минут и длится 1-2 часа. ;1ерорадьно пик действия составляем 50 кккут, продолжительность действия - Зчссь. знутрибрвшшно .равняется ( '35+59 ) кг/кг, внутрь - 112 С 8S+ 143 ) нг/кг.

Лротизосудоройный оффекг по коразоловому тесту также являете« дозозааисишк. При вкутрибрвшинном введении средняя доза, защищавшая 50? животных от тонических судорог на пике действия составила 75 ( 54+104 ) мг/кг, парорально - 132 (89+192) мг/кг. ЕДд0 защищавшая хияотиах от гнбзли-в опыте при внутрибрюшиннок введении равняется S5 ( 79+115 ) мг/кг, при введении в у.елудок 185 (131+ 261) »-.г/кг.

Сравнение морфоледа с ирогиво судорога ими препаратами (сы.тгдб^ 4 ) показало, чт« ао ТМЭШ гри внутрибрюшинном введении.он в б раз активнее вальароатв натрия,' в 2 раза - 'гексамвдина и.хяор&кона. Значения Eí^q корфолада и бендонаяа совпадают. При'введении EHyrpi он текно в б раз провооходит вэльпроат натрия, в 2 раза-хлоракон, с гэксамвдшом различие КД50 не .достоъерно. Однако исследуемое со' единение уступает фенобарбиталу, дЦенину,' карбамаавпииу.

ilo коразоловояу тесту мор,-олад я 2 раза аффективнее чей валь-проат натрия и хлоракон, близок по активности к гексамвдину и уступает остальным пре;тратам сравнения.

Условная широта фармакологических) действия морфоякда и препаратов сравнения как TwSiii, так и по корнзоловому ииаат

большое значение ( си. табл. 4 ), превосходящее примерно в 2-II i

раз данный поквзвтоль известных гротивосудоронних средств. Это

4. М^аПЧЧ

Ярзгм ¿осу дорожная активность, 7Ш5Д морфслида, и препаратов сравнения при Енутрибрюалкнои и пероральнок введении белым мышам

. .Название Знутрибршинно Внутрь

ДД^О в мг/кг УВД ЕД^ в мг/кг У1ЙФД

ШЯ КоразолоеиЯ тмэш КТ ТМЭ13 | Коразолоаый тмэш! КТ

препарата • Абсолютное Отно- Абсолютное Отко- Абсолютное 0тно4 Абсолютное Отно- |

зкаченчо 2 ит. значений сит. значение сит. значение сит. 1 . .......I

пск!^ >1 показ пока4. показ

Фенобарбитал

Еэнэонал

Га*се,мидкк

, 16 % 1.00 (13+19)

, 44 ' 0,36 (39+51)

л О.Ю (79+ЮЗ)1

, 23 ч ' (20*26)

38 (33+44)

(53+84)1

1,00

5,4 36 * 1,00 , 35 1,00 4,8 4,3 (31+42) (29.-Й2)2

°'61 7'? 9'° (47^2)2 °>67 (56+73)^' °'53 б'3 5'2 °'33 ^ ЛЯ °'ЭЗ СЮЙ39) °'г9 4'3 3'3 Г

Дифенин (12+19) 1,07 на а«тин«н - 16,7 , 20 ■ (43+75) 0,55 но актнаен - 4,7 -

З&льпроат натрия , 272 (247+338) 0,06 , 143 ' (104+197) 0,16 2.2 4,3 665 % (605+716) 0,05 ,388 „ 0,09 (349+439) '1.4 2,4

Корбанззепин (11*17) 1,14 . 22 45+30) 1,05 13,4 3,5 ' ■40 ? (33+43) 0,90 ив активен - 13,8

Хдоракок . (75+11,3) 0,17 , 143 (110+179) 0,16» 6,9 4,6 230 (203+256) 0,17 , 326 * 0,11-(265+372) 4,4 3.1

Мэрфолид , ^ V ■ (35+59) 0,35 ей») 0,31 25,6 15,3 , П2 , (03+143) 0,32 , 132 " 0,27 («9*192) 25,С 21,2

Поикзчаиио: I - по данник Далилоооа З.К,, 1256;

Псповси К.А,, 1966; 4 .. по данных КТ - иораиолочий

2 - по данная Нек'сароваи I.А., 1993; 3 - по дикнии КчргвтЬвгв н.о. , 1560.

свидетельствует о больней безопасности,

Морфолид способен залипать животных от развития судорог, зазванных бикукулмнон и тас-сеиикарбозидом. ЕД^у по Сикукулиновсму тесту составила внутрибрвшинно 33 (26+40) мг/кг, внутрь - 115 (97157* мг/кг. 7ШФД соответственно равняется 34,9 и 24,3. По тиосеми боаидноку тесту 'ЕД^, завдщавдая 505» иивотных от тонической зкс-тензи", внутрибрютимо составила 58 (44-77) мг/кг, перорально -322 (203+497) мг/кг. Условная широта соответственно - 19,8 и 8,7.

Морфодид проявил активность по стрихпинкому тесту. ЕДкд при внутрибршшнном введении составила 47 ч31+73) мг/к.г, парорально -100 (79*121) мг/кг. УШФД также имеет больяоо значение 24,5 и 28,С соответственно.

Влияние норфолида на ¡тоническую фазу судорожного припадка-в проведенных исследованиях проявилось нечетко. Для того, чтобы убедиться н действии препарата на такие судороги, била проведена серия опытов, результаты которой представлены на рис. I.

а ы V, и

Ы00

л ао §

и 60

А о

* 40 «5

^ 20

£1200

3 юос я

в ЕО'у

60С

40С

гоа

. Рис.1 Влияние морфолвда на клоническиэ судороги

ц ~ пс коразоловому тесг': I - ЕД^ коразола, 2 - Щзд коразо;

на фоне морфолида.( 150 мг/кг вн/трнбркгшшо); ' б - по "амфарному тес ту: I - ЕД^ камфары, 2 - камфары ш

фоне марфолида (250 мг/кг персральг.о); я -различие достоверно при р»0,05

о

Сначала определяли " Лс^ судорожного агента (коразол,камфара), вызывавши клонические судороги у 50$ л?иабтиых. Потом эта доза опря-

аелялась на фоне предварительно ввэдёнИ'бГо морфолида. В обоих сяу-

чаях вторая доза достоверно отличалась от' предыдущей. Сл<?.довател*~

ю,норфолид оказывает влияние на клоничёо.".ие судороги. .

Таким образом, по всем приведенный'тзетам морфолид проявил

1ротивооудорожный эффект. Наиболее алт'иЬнЫй' он акезелся по теоту

¡аксимального электрошока, стрихниннону и'бйхукулиновому, причём

!олее выраженным действием он обладает в отрешении тонических с/-

¡орог.

Противотреморное действие. Морфолид зацапает животных ог рзз-ития тремора, вызванного ареколкном, никотином, тремориком, чго видетельствует о его центральных холииолитических свойствах. Ра-ультаты опытов представлены в табл. 5, Из таблицы .следует, что орфолид только по ареколинорому тесту уступает фенобарбиталу. В стальных случаях оч либо превосходит препараты оравненил, либо начения Ж^ достоверно не различимы. И по противотрэморнкм тес-ад норфолид обладает наивысшим значением. УМД: 8,1; 20,2; 15,1. Развитие привыкания к протизосудорокному лойствио морфелида. Испытание морфолида на протяжении 20-ти дней а доз^ 230 иг/кг знутрь) показало на 15-й день тестировзнчя снижение его адтивнос-5 на 10^. На 20-й день - противосудорожная активность упрла на >.«орантность к протизосудорожному действии фенобарбитала камина«? »эвиватьоя спустя 5 дней после начала вводечид. К 15 Дне протмао-

г

•дорожный эффект по ТМЭЕ сохраняется у 50^ мвотнкх} Трагубов А.Л.,

'90].

Психотропная активность. По тесту "бокового положения" ^аосчи-.на ГДс^) - гипнотическая доза, вызывающая потери способность к по-всоачиванив на лапы у '50,1 жчвотннх. Внутрябрвиинно он-а состави.«?.

-Табл-ць 5

Противояракорная екта*новтк> условна* внроя* фармакологического действия (У1Щ) ыорфоявда и препаратов орагичнья при внутрибрвииином вбоасннч белым мылхи

Название арвпарать

Ареколйнозай тает

ЗДсд » »¿г/кг | ШД ,

Щ^Щз

Абаолстиов знбчокао

окт!

ПОКА«.

НйкО»иноиь'Р 'тест_

%0 в мг/кТГ УВД

Абоолвтноо гиачзнип

ОтнеЧ Дс^/ЕДгл окт, м

покь»,

Тремориновь'К тест

ЕДсЛ !■ кг/кг

Аборлвтнея акичонив

Отсо оит, поган,

УВД

$вноб&рбн*ая

Дифенин

Хдоракон

Морфалид

71; 1,00 1,7 (54*94)

, 160 0,44 1,6 (118+216)

, 225 0,31 2,9

(190+266) . •

142 .0,50 8,1 (125+162)

70 1,00 (56*08) '

' 250ч 0,28 (133*407)

160 0,39 (133+243)

57 1,23 (42+76)

1,8

1.0

3,6 20,2

е&з> 1,0° м

' Г06 0,54 6-.0 (67+134)

76 0,76 15,1 (52*Ш)

345 (2544-469) мг/кг, внутрь - 1100 (833+1452) мг/кг. Боли отношо-ние r&cß/EA^Q принять за показатель специфичности противосудорсжнй-го действия, то морфолид оказывается э 3,5 раза более специфичен по противосудорожному действию, чеч фенобарбитал.'

Морфолид в дозах 260 мг/кг (I/IO Jlí5Q) и 70 mit/кг (I/4Ü ЛЛ^) увеличивает длительность гексеналового и барбитал-натриевого наркоза. Наиболее сильно- морфолид потенцирует дойстэио барбитал-на-трия. В связи с тем, что пролонгирование гексекадоЕОГо наркоза может быть результатом не только нейротропного эффекта морфолида, но и его влияния на метаболизм геясенала, продление бокового положения животных в опытах с барбитал-натрием, который не подвергается метаболизму в печени и выводится из организма в неизменённом виде [Варгтейл Б.А., 1968],позволяет считать, что йотанцирувдай аффект мо'рфолида в отношении медикаментозного наркоза, в основном, обусловлен действием1 препарата на центральнуо нервную систему.

В дозе 260 иг/кг (1/10 ДДзд) морфолид проявляэт некоторое ги-потермическов действия, понижая рехтальнув температуру, тела белых крыс на 1,31° через I чао после введения внутрь.

' о

По методике "открытого поля" малые дозы морфолида - 112 кг/кг (1/25 Д/Цд) не ваттах изменений двигательной активности и ориентировочного рефлекса, а большие - 560 .кг/хг (1/5 ЛД^) сникают ех в 2-3 раза.

О противотрэвожном действии морфолидз з конфликтной ситуации судили по увеличению э 2,6 pasa числа наказуемых взятий воды, что достоверна отличается от контроля. Результаты норфолида, введенного а дозч 140 мг/кг сопоставимы с результатами противосудорояного препарата карбэм«*епииа, обладавшего транквилизируетшш действием и введенного в зквитоксической доза 1/20 ЛДсд=27,5 мг/гг. Антиаграсзив-нив свойства изучаемого соединения (21Ю мг/кг -"Í/Í0 ЛДгд) при ол^п« троболевой стимуляции парк кшаей оценивали по увеличение л 2 рг>яя

напряжения элктротока,рри которой проявляется реакция агрессии,« предотвращению драки, у 10% пер животных.

Кроне атого установлено, что морфолид нз вызывает каталепсии, на изменяет длительность и характер апоморфиной стереотипии, не вдияе* н^ поведение плавающих мышей по г.сту "отчаяния" и не оказывав? влияния на выработанный УРПИ.

Подобней споктр гсихотропной активное?*; характерен для еоеди-' нений, обладающих транквилизирующими свойствами.

Анальгетическая ахтивность морфодида изучалась^ в дояе 112 нг/кг (1/25 Hjbft) пврорально. Результаты исследовании ко ve с ту "горячая пластинка" покагали, что чувствительность белых мышей на термический раздражитель под влиянием морфрлпда на пике обезболивающего действия (30 минут) снизилась в 2,2 раза. Определена ЕДзд. вцаыва-ватя снижение времени оборонительного рефлекса нз 50^ и более, которая составила 96 (72-120) иг/кг, Что сопоставимо с ЕДэд анальгина по этой методике 93 (62+139) цг/кг [сигидин Я.А,у др., 1988]

В ответ на введение химического раздражителя (ЗА' уксусная кислота) морфолид на ЦЪ% i сравнении о контролем снижаег количество "корчей." и у 20¡S кивотнц* предотвращает проявление болевой'реакции. ЕД30 по зкопреов-мстоду-|фрумин r,T,,I99lJ составила 134 (IOO-I68) мг/кг, что также сопоставимо с ванными анальгина.

Таким образом, наличие обезболивающего действия морфолид* цо -^етодикч "горячая пластинка", которая позволяет уловит* как аналитические, так и седатилше свойства препарата (Рьезский К.С., I969J, а также анальгезия по тосту "укоусиыа корчи", которая свидетельству»? об антиксцнцептивкой активности препарата, позволяют предположить, что кроме противосудорожногр и транквилизирующего действия, морфолид обладает анольгеткческим действием. ;

При обсуждении результатов исследования необходимо отметить,

го активиооть морфолида по коразоловоиу. бякукулиноноку^ ткосаии-фбозидноц/ тестам свидетельствует о его ГАИК - позитивной действии ксентьев С,Б, и др.,1990, ПозДеев З.К.,198^. Активизация ГАШи )гических процессов лежит не только в основе противосудорсшно^о, > и психотропного действия морфолида £в.Ковтомки,£988 J . Вго хо-шолитическая активность в отношении центральных холинорерктивних ;руктур, вероятно, может бить опосредована также ГАКК-ергическоЙ (диациёй путём лресинаптйческого ториожакия холннергических негро-ю [раевский К.С., Георгиев В.П.,1966 Это коррелирует с протя-1Трзвожнии, седативным и анмьгетичесхям эффектами препарата« Ви~ Исая эффективность морфолида в отнолении стряхнинавих судорог петляет предположить наличие й хехаяизме протавосудорохного дейст-я тормозное влияние на гляцйкергйчебм* рецепторы £ Сергеев П.В., мановский Н.Л.,1987^.

Эксперименты по изучения тератогеннвго, еийриотоисяческсго я таганного действия, проведенные в лаборатории Пермского гссудзр-взнйого.унй&^тшйьказёл*, что иорфаляд на окладам цутагешшка оПствани, тератогенная и эибриотохсичесвая вктевяос»ь вмражеян або. Норфолйд рекомендовав авторамп ясследовашШ для*хляваческих питаии», очитая беременность арогявслоказаяяеи я его пряяэвев».

швода:

Из 9 обследованиях производных фтаигхядокарбонових излет 7 сое« дикений показали протязосудорожнув активность по тесту изксяжаль-ного олектроиока, все соединения обладает аитморазоловкм действием и низкой токсичностю.

* ' ' -

Доказан широкий спектр противосудорогеого действия морфолньа фта-лимидоукоуоной киолоти (мерфоляд) пс электрзаосовону, г.оразолово-му, стрйхниниоиу, бикукулкновоху, тяоееинкарбо»идноку и камфарному тестам.

- се. -

3. Иорфолвд обладает иыражэшшм противотреморним действием на к® деляк зреколинового, никотинового и треморинсвого гиперкинеза

4. По силе прщивосудорокного действия морфолид активное С или н уступает) гехсамвдина, аальпроега натрия., хлоракона.

5.«Морфолид менее токсичен, чем фенобарбитал, бензонал, гекоами-дин, дифенин, вальпроат натрия, карбамааепин, хлоракон н боле безопасен, так как имеет большее значение условной широты фар каколегического действия по везн тестам.

'6. Морфолид практически не оказывает снотворного аффекта в терапевтических дозах и обладает психотропным - траш:вилизируыщи> действием,

7. Однин из механизмов противооудерожното и психотропного действия норфолида является его влияние на ГАМК-ергические структ) ры.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Полученные результаты подтвердили важность дальнейшего синтеза и поиска соединений с противроудорожной активностью в ряд; производных фтолимидокарбонозых кислот.

2. После ?авериения доклинических испытаний рекомендовать морфо-ЛИД фталимидоукоуоной кислоты (морфолид) для углубленного на: челия о цельо представления в Фармакологический Комитет Н2 Р сийокой Федерации ь качестве протизоэпилвптичаскога препарат

ОПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОЗШШ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИЙ -I, Рудомётова Е.В/ Проти^отреморный оффец? морфодида при раалич кых нодедчх тремора // Тез. докл. научи, конф. "Поиск биол.е тивиух вещеотв и проблемы декароув. обеспечения",-г Уфа, 1991 с,|2б-129. .. . .

2,судоцётова Е.В., ;$олла В.Э, Противосудорожная активность мор фелидр при различных моделях экспериментальных судорог // Те дом* научи, конф. "Попек биол. активных веществ н проблемы

[вкарвтв. обеспечения",-^*, 1991.« С.129-132. Р/домётовл В.В., З&явоов В,В., Нефедова В. С. Синтез к противен судорожна* а*тйвйоо*ь ёйвдой ьзг- (фтвАймИдо) ыкилкёрбоновкх кивДот // Тб».Дбкд.науЧн.к6й4< "БиЬл. вктйвйи» ооед.* о имея я иополкзование".- Пан)а, 1992.- С.62-61.

Рудомйтова Е.В„ Психотропное действие протмвооудорожнвго прела*

морфоляда П Тез.дэкл» 49-й нйучя, првктяч.мнфЛрофео-сорсм-препод. состав».- Пермь, 1093.- С. 120*121.

печать 16,11.93, ¿к, 238 края 80 экз. втазтринт ЗУИШ